DETERMINACIÓN DE DO, DBO Y DQO

Resumen

La demanda química de oxígeno (DQO) determina la cantidad de oxígeno requerido para oxidar la
materia orgánica en una muestra de agua residual. Se determina mediante la oxidación por reflujo
en solución ácida (H2SO4) con un exceso de K2Cr2O7 en presencia AgSO4 y de HgSO4 adicionado
para remover la interferencia de los cloruros. Después de la digestión, el remanente de K 2Cr2O7 sin
reducir se titula con sulfato ferroso de amonio; se usa como indicador el complejo ferroso de
ortofenantrolina (ferroina).

La Demanda Biológica de Oxígeno (DBO) es una medida de oxígeno que usan los
microorganismos para descomponer el agua. El nivel de DBO se determina comparando el nivel de
OD de una muestra de agua tomada inmediatamente con el nivel de OD de una muestra de agua
que ha sido incubada durante 5 días. La diferencia entre los dos niveles de OD representa la
cantidad de oxígeno requerido para la descomposición de cualquier material orgánico en la
muestra y es una buena aproximación del nivel de la DBO.

Palabras clave: Oxígeno disuelto, demanda química, demanda biológica, oxidación, digestión,
indicador, materia orgánica, interferencia, titulación, catalizador, incubar.

Abstract

The chemical demand of oxygen (DQO) determines the amount of required oxygen to oxidize the
organic matter in a waste water sample. It is determined by means of the oxidation by ebb tide in
acid solution (H2SO4) with an excess of K2Cr2O7 in AgSO4 presence and added HgSO4 to
remove the interference of chlorides. After the digestion, the surplus of K2Cr2O7 without reducing is
calld with ferrous ammonium sulphate; the ferrous complex of ortofenantrolina is used like indicator
(ferroina).

The Biological Demand of Oxígeno (DBO) is an oxygen measurement that uses the
microorganisms to disturb the water. The DBO level is determined comparing the level of OD of a
water sample taken immediately with the OD level of a water sample that has been incubated
during 5 days. The difference enters OD levels both represents the amount of oxygen required for
the decomposition of any organic material in the sample and is a good approach of the level of the
DBO.

Key words: Dissolved oxygen, chemical demand, biological demand, oxidation, digestion, indicator,
organic matter, interference, degree, catalyst, to incubate.
2 Determinación de OD, DBO y DQO
INTRODUCCIÓN1
1. OXÍGENO DISUELTO, OD
La determinación de OD es muy importante
en ingeniería ambiental, por ser el factor que
determina la existencia de condiciones
aeróbicas o anaeróbicas en un medio
particular. La determinación de OD sirve
como base para cuantificar DBO, aerobicidad
de los procesos de tratamiento, tanto de
aireación en los procesos de tratamiento
aeróbico y grado de polución de ríos. El OD
se presenta en cantidades variables y bajas
en el agua; su contenido depende de la
concentración y estabilidad del material
orgánico presente y es, por ello, un factor
muy importante en la auto purificación de los
ríos. Los valores de OD en aguas son bajas y
disminuyen con la temperatura. El oxígeno
libre en solución, especialmente, cuando está
acompañado de CO2 es un agente de
corrosión importante del hiero y el acero.
2. DEMANDA BIOQUÍMICA DE
OXÍGENO, DBO
Uno de los ensayos más importantes para
determinar la concentración de la materia
orgánica de aguas y aguas residuales en el
ensayo de DBO a cinco días. Especialmente
la DBO es una medida de la cantidad de
oxígeno utilizado por los microorganismos en
la estabilización de la materia orgánica
biodegradable, bajo condiciones aeróbicas,
en un período de 5 días y a 20ºC.
En aguas residuales domésticas, el valor de
la DBO a 5 días representa en promedio un
65 a 70% del total de la materia orgánica
oxidable. La DBO, como todo ensayo
biológico, requiere cuidado especial en su
realización, así como conocimiento d las
características esenciales que deben
cumplirse, con el fin de obtener valores
representativos confiables. El ensayo supone
la mediad de la cantidad de oxígeno
consumido por organismos vivos en la
utilización de la materia orgánica presente en
un residuo; por lo tanto es necesario
garantizar que durante todo el período del
1
ROMERO, Jairo Alberto, Acuiquímica. Escuela
Colombiana de Ingenieria. Bogotá, Colombia, 1996.
Páginas 106-119.-
2
ensayo exista suficiente OD para ser utilizado
por los organismos. Además, debe
garantizarse que se suministren las
condiciones adecuadas para el desarrollo y
trabajo de los microorganismos, así que se
debe proporcionar los nutrientes necesarios
para el desarrollo bacterial tales como N y P
y eliminar cualquier sustancia tóxica en la
muestra. Es también necesario que exista
una muestra de organismos suficiente en
cantidad y en variedad de especies,
comúnmente llamada “simiente”, durante la
realización del ensayo.
Si no están adaptadas al sustrato particular
existente en la botella de DBO, las bacterias
morirán o disminuirán en número hasta que
logren adaptarse; es importante, por lo tanto ,
obtener suficientes aclimatadas para
conseguir valores verdaderos de la
concentración orgánica.
La temperatura escogida para determinar el
valor de DBO es de 20ºC y se debe mantener
constante durante el tiempo del ensayo, la
velocidad de las reacciones durante el
ensayo se verá afectada si se modifica la
temperatura; por consiguiente los resultados
obtenidos no serían los correspondientes al
procedimiento estándar y, en consecuencia,
no serían comparables.
3. DEMANDA QUÍMICA DE OXÍGENO,
DQO
La demanda química de oxígeno es un
parámetro analítico de polución que mide el
material orgánico contenido en una muestra
líquida mediante oxidación química. La
determinación de DQO es una medida de la
cantidad de oxígeno consumido por la
porción de materia orgánica existente en la
muestra y oxidable por un agente químico
oxidante fuerte. Específicamente representa
el contenido orgánico total de la muestra,
oxidable por dicromato en solución ácida. El
ensayo tiene la ventaja de ser más rígido que
el DBO y no está sujeto a tantas variables
como las que pueden presentarse en el
ensayo biológico. Todos los compuestos
orgánicos, con unas pocas excepciones,
pueden ser oxidados a CO2 y agua mediante
la acción de agentes oxidantes fuertes, en
condiciones ácidas.
3 Determinación de OD, DBO y DQO

Limitaciones e interferencias2: d) Las especies inorgánicas reducidas,

tales como iones ferroso, sulfuro,
a) Los compuestos alifáticos volátiles manganoso, etc., se oxidan
de cadena lineal no se oxidan en cuantitativamente bajo las
cantidad apreciable, en parte debido condiciones de la prueba; para
a que están presentes en la fase de concentraciones altas de estas
vapor y no entran en contacto con el especies, se pueden hacer las
líquido oxidante; tales compuestos se correcciones al valor de DQO
oxidan más efectivamente cuando se obtenido, según los cálculos
agrega Ag2SO4 como catalizador. Sin estequiométricos en caso de conocer
embargo, éste reacciona con los su concentración inicial.
iones cloruro, bromuro y yoduro
produciendo precipitados que son
oxidados parcialmente. MÉTODO EXPERIMENTAL

b) Las dificultades causadas por la  DQO

presencia de los haluros pueden
superarse en buena parte, aunque
no completamente, por
acomplejamiento antes del proceso
de reflujo con sulfato de mercurio
(HgSO4), que forma el haluro 5 ml de muestra
mercúrico correspondiente, muy 0.1 g HgSO4
Perlas de vidrio
poco soluble en medio acuoso. Si 0.5 ml reactivoH2SO4
bien se especifica 1 g de HgSO 4 para (H2SO4 - AgSO4)
50 mL de muestra, se puede usar Agitar
una menor cantidad cuando la
concentración de cloruro sea menor Dejar enfriar
de 2 000 mg/L, mientras se 5 ml K2Cr2O7
mantenga una relación HgSO4:Cl– de 0.0417M
10:1. La técnica no se debe usar
Mezclar
para muestras que contengan más 6 ml H2SO4
de 2 000 mg de Cl–/L; existen otros
procedimientos diseñados para Agitar
determinar la DQO en aguas salinas. cuidadosamente

c) El nitrito (NO2–) tiene una DQO de 1,1 Reflujo 1 Hora

mg de O2/mg de NO2–-N, y como las

concentraciones de NO2– en aguas Enfriar

rara vez son mayores de 1 o 2 mg

NO2–-N/L, esta interferencia es Diluir la muestra a 20 ml

considerada insignificante y
Enfriar
usualmente se ignora. Para evitar
una interferencia significante debida
Valorar con FAS
al NO2–, agregar 10 mg de ácido 0.25 M
sulfámico por cada mg de NO2–-N
Diagrama 1. Protocolo determinación de DQO.
presente en el volumen de muestra
usado; agregar la misma cantidad de
ácido sulfámico al blanco de agua Indicador: Rojo  Verde3
destilada.

3
Debido al alto contenido de materia orgánica presente
2
http://www.drcalderonlabs.com/Metodos/Analisis_De_A en la muestra se utilizaron 10 ml de K2Cr2O7 como
guas/Determinacion_de_DQO.htm exceso de oxidante.

3
4 Determinación de OD, DBO y DQO

 DBO

Con muestras cuya DBO no exceda de 7

mg/L se puede determinar el valor de DBO Materiales
directamente de la siguiente manera:
 3 Frascos de vidrio
a) Se llenan dos o más botellas de DBO  1 Bureta
con muestra previamente aireada  1 Balón de reflujo
para obtener un valor de OD cercano  1 Columna de reflujo
al valor de saturación.  3 Erlenmeyer
b) Se determina en por lo menos una  Papel vinipel
botella la cantidad de OD inicial. Las  1 Soporte Universal
demás botellas se incuban durante 5  1 Trípode o anillo
días a 20ºC.  1 Placa de calentamiento
c) Después de los 5 días de determina  1 Mechero
la cantidad de oxígeno remanente o  1 Espátula
oxigeno disuelto final.  3 Pipeta de (1 ml – 5 ml – 10 ml)
d) Se calcula la DBO de la muestra por  1 Churrusco
diferencia entre el valor de OD inicial
y el valor del OD final. Reactivos

 H2SO4
 OD (Winkler)  HgSO4
 k2Cr2O7
 Reactivo de H2SO4
 Yoduro de Acida
 MnSO4
 Almidón
 Na2SO3
Muestra

2 ml MnSO4 2M Equipos
2 ml Álcali
(Yoduro de acida)
 1 Equipo de reflujo
Tapar

Agitar
RESULTADO Y DISCUSIÓN

La muestra analizada es muestreada en una

Precipitado
industria de cosméticos, esta agua es
2 ml H2SO4
proveniente de los desechos de la misma, y
es un agua previamente sometida a
Tapar
tratamiento.
Agitar
 DQO
Dejar reposar 5`
Observaciones
Tomar alícuota 5ml
Los 5 ml de muestra más el sulfato de
2 ml almidón
mercurio (HgSO4, sólido de color blanco) y el
Titular con Na2SO3
reactivo de ácido sulfúrico (H2SO4, HgSO4),
0.025 N provocaron una reacción muy exotérmica. Se
agito durante cinco minutos
Diagrama 2. Protocolo determinación de DBO.
aproximadamente y se dejo enfriar. Se le
Indicador: Azul  Incoloro agregaron pedazos de porcelana para
controlar la posterior ebullición.

4
5 Determinación de OD, DBO y DQO
Una vez frío, al adicionarle el dicromato de
potasio (k2Cr2O7) la mezcla se coloreo.
La posterior adición de ácido sulfúrico
produjo gran liberación de calor y la mezcla
se tornó de color verde.
Se esperaba un color rojo al agregarle el
ácido sulfúrico, lo que indica que no hay
dicromato de potasio en exceso, por lo tanto
se le adicionó a la mezcla 5 ml más de
dicromato de potasio, aún así la mezcla se
torno café, no roja, como se esperaba.
La mezcla se puso en reflujo durante una
hora, el montaje realizado fue el siguiente:
Agua
Muestra
Figura 1. Montaje de reflujo realizado
determinación de DQO.
Pasados los 60 minutos, la muestra se dejo
enfriar a temperatura ambiente.
De acuerdo con el protocolo, la muestra se
debía diluir a 20 ml, en mi caso particular, el
volumen obtenido era superior a 20 ml por el
volumen de dicromato de potasio agregado
de más, por lo tanto, mediante conversiones
se determinó lo siguiente:
5 ml muestra + 0.5 ml HgSO 4 + 5 ml K2Cr2O7
+ 6 ml H2SO4 = 16.5 ml muestra.
Lo que indica que para 16.5 ml de muestra
se requieren 3.5ml de agua. Por lo tanto, al
adicionar los 5 ml de exceso de dicromato de
potasio el volumen final sería de (16.5 ml
muestra + 5 ml K2Cr2O7) 21.5 ml, lo que
indica que para este volumen se requiere 5.8
ml de agua, de acuerdo con la primer
proporción, y el volumen final de la dilución
será entonces de 27.3 ml.
Posteriormente se procedió a tomar alícuotas
de 8 ml, a cada una se le agregó unas gotas
de ferroina, sin cambio de color aparente, la
solución continúo de color pardo.
De acuerdo con las titulaciones la muestra de
agua corresponde a un 1% para la muestra
de dilución directa, sin embargo, por la
excesiva presencia de materia orgánica, se
utilizó un agua de dilución al 5% para la
posterior determinación de DBO.
Para realizar el cálculo, al volumen de FAS
utilizado para la titulación del blanco (mezcla
de todos los reactivos, excepto el agua a
analizar) se le resto el volumen utilizado en la
titulación de la muestra.
Resultados
 Alícuota 8 ml.
Datos
Titulaciones 1 2 3
Volumen FAS gastado muestra 0.4 0.4 ml 0.4 ml
ml
Promedio 0.4 ml
Volumen FAS gastado blanco 0.85ml
para Tabla 1. Reporte de titulaciones para determinación de
DQO.
Cálculos
Volumen FAS = Vol. Blanco – Vol. Muestra
Volumen FAS = 0.45 ml
5
6 Determinación de OD, DBO y DQO
1 eq−FAS 1 eq−g O2
∗(
( ) 1 eq−FAS ) (
∗ colpejo2 de
1L
DQO=0.45ml FAS
0.008
DQO=225 ppm
Discusión
De acuerdo con la teoría, el fundamento del
método para la determinación química de
oxígeno consiste en que la mezcla más las
cantidades conocidas de dicromato de
potasio y ácido sulfúrico es sometida a reflujo
durante dos horas (en mi caso se sometió
sólo a una hora de reflujo); durante este
período la materia orgánica oxidable reduce
una porción de dicromato, mientras que la
parte restante se determina mediante la
titulación con sulfato ferroso amoniacal
(FAS). La cantidad de dicromato reducida es
una medida de la materia orgánica oxidada.
Las reacciones se pueden representar de la
siguiente manera:
Mat. Orgánica + Cr2O7= + H+  2Cr+++ + CO2
+ H2O
El ión dicromato es el agente oxidante
porque en solución ácida consume
electrones y el cromo hexavalente se reduce
a cromo trivalente.
Cr2O7= + 14H+ + 6e  2Cr+++ + 7H2O
Cr6+ + 3e  Cr3+
Después de la digestión de la materia
orgánica con dicromato se determina la
concentración de dicromato residual
mediante sulfato ferroso amoniacal, el cual
suministra los iones ferroso reductores, Fe++.
6Fe++ + Cr2O7= + 14H+ = 6Fe+++ + 2Cr+++ +
7H2O
El ión ferroso divalente es oxidado por el ion
dicromato a hierro férrico trivalente.
El punto final de la titulación, teóricamente se
determina colorimétricamente usando
ferroína como indicador.
6
De acuerdo con la literatura, la ferroína
contienen
32 gO 1.10
1000fenantrolina,
mg 1laL cual forma un
)( )( )
∗ color rojo∗con el ión ferroso. A
4medida
eq O2 que el1 gdicromato,1000 mLnaranja, es
color
reducido a Cr+++, color verde, los iones Fe+
++ forman un complejo con el indicador de
ferroína para producir un color carmelita
rojizo. El vire final debería ser muy claro, de
un color azul verdoso a rojo carmelitoso. En
mi caso, el color desde el inicio fue verde, el
cambio consistió en el cambio de verde
medianamente oscuro a verde oscuro.
Lo anterior ocurre por la excesiva cantidad de
materia orgánica, la cual redujo todo el
dicromato y no quedó parte de este para ser
titulada con FAS, sin embargo, se parte del
supuesto del cambio colorimétrico de un
verde a otro más oscuro para efectuar la
determinación de demanda química de
oxígeno.
Por otro lado, a la muestra y el ácido se le
agregan otros reactivos, para controlar las
interferencias, tales como los cloruros. Los
nitritos y otros iones inorgánicos como hierro
ferroso, manganeso manganoso, sulfitos y
sulfuros, susceptibles de oxidación por
dicromato en las condiciones del ensayo.
En general, en aguas residuales los cloruros
constituyen la interferencia más importante
pues introducen un error por exceso en el
valor de la DQO, el sulfato mercúrico evita la
interferencia causada por los cloruros, pues
en presencia de cloruros forma cloruro de
mercurio (HgCl2) un complejo por reactivo.
 DBO
Observaciones
Para la determinación de DBO5 fue
necesario preparar una muestra para incubar
durante 5 días a partir del agua residual y el
agua de dilución. Fue necesario también
hacer la valoración del blanco después de
incubado, es decir, del agua de dilución, y
por último la valoración de la muestra sin
diluir y sin incubar. Los valores de cada
titulación son presentados a continuación.
El agua de dilución fue preparada a partir de
agua destilada, 1 ml de solución buffer de
7 Determinación de OD, DBO y DQO

fosfato, 1 ml de solución de sulfato de ODI = O.D. inicial de la muestral sin diluir, mg/L
magnesio, 1 ml de solución de cloruro de
calcio y 1 ml de solución de cloruro férrico, y M Na2 SO3∗mL Na 2 SO3∗8∗1000
adicionalmente se inoculo con una mezcla de OD=
98.7 g /mol
aguas residuales, por cada litro de agua de
dilución.

El blanco y las muestras diluidas fueron

0.025 M ∗1.22 ml Na 2 SO 3∗8∗1000
ODT = =2.47
incubados en frascos de ámbar para evitar la 98.7 g/mol
interferencia de la luz a una temperatura de
20ºC. 0.025 M∗0.8 ml Na 2 SO3∗8∗1000
ODF= =1.62
98.7 g/mol
Antes de realizar las titulaciones, es
necesario agregar a las muestras sulfato de
0.025 M∗1.18 ml Na2 SO3∗8∗1000
manganeso (MnSO4) 2M, álcali, agitar, se ODI = =2.39
forma un precipitado, eneste momento se 98.7 g/mol
agrega ácido sulfúrico por las paredes, se
tapa para evitar que entre oxígeno al agua y mg ( 2.47−1.62 ) 25 ml
se agita suavemente, la muestra se dejó DBO= −( 2.47−2.39 )=4.17 ppm
reposar por 5 minutos, se utiliza almidón L 5 ml
como indicador que vira de azul a incoloro y
finalmente se titula con tiosulfato de sodio. Discusión

El precipitado formado al agregar el álcali y y De acuerdo con la teoría, se considera que el

el sulfato de manganeso es de color café. ensayo de la DBO tiene una exactitud del
5%, y por lo tanto, los valores calculados
Lo anterior corresponde al método de Winkler deberían satisfacer dicha variación.
para determinación de DO y en muestras
incubadas para análisis de DBO. El método se basa en el hecho de que el
oxígeno oxida el ión Mn++ a un estado
Resultados superior de valencia en condiciones
alcalinas, y en que el manganeso en estados
Datos superiores de valencia es capaz de oxidar el
Titulación 1 2 3 ión I- a yodo libre I2 en condiciones ácidas. La
Volumen de Na2SO3 gastado
1.4 1.1 1.0
cantidad de yodo liberado es medida con
muestra sin diluir solución estándar de tiosulfato y es
Promedio 1.18 ml equivalente a la cantidad de oxígeno disuelto
Volumen de Na2SO3 gastado 1.25 1.2 1.2
testigo ml ml ml originalmente presente en la muestra.
Promedio 1.22
Volumen de Na2SO3 gastado 0.9 0.7 Las reacciones involucradas en el proceso
0.8 ml
muestra diluida ml ml pueden representarse en la forma siguiente:
Promedio 0.8 ml
Tabla 2. Reporte de titulaciones para determinación de Si no existe oxígeno,
DBO.

Mn++ + 2OH- = Mn(OH)2↓ (precipitado blanco)

Cálculos
MnSO4 + 2KOH = Mn(OH)2↓ + K2SO4
mg ( ODT −ODF ) Vol . Botella en ml Si existe oxígeno,
DBO= −(ODT −ODI )
L ml de muestra 2MnSO4 + O2 + 4H2O = 2MnO(OH)2↓ +
2H2SO4
Donde:

ODT = O.D. final del testigo, frasco con agua de dilución Mn++ + 2OH- + O = MnO2↓ + H2O (Precipitado
solamente, mg/L carmelita)
ODF = O.D. final de la muestral diluida, mg/L

7
8 Determinación de OD, DBO y DQO

Mn(OH)2 + O = MnO2↓ + H2O (Precipitado

carmelita)

MnO2 + 2I- + 4H+ = Mn++ + I20 + 2H2O

I20 + 2Na2S2O3 = Na2S4O6 + 2NaI

Conclusiones

 Si la muestra se caracteriza por un

predominio de material
químicamente oxidable pero no
oxidable biológicamente, el valor de
la DQO será mayor que el de la
DBO.
 En aguas con materia orgánica en
exceso, los interferentes son más
acentuados.
 En aguas residuales cuyo contenido
de materia orgánica sea muy alto, la
oxidación del dicromato de potasio
será alta, y por lo tanto el exceso de
dicromato será mínimo para la
reducción del mismo y en la titulación
con FAS.
 El valor obtenido en la determinación
de DBO fue muy pequeño, tanto que
esta pudo haber sido calculada de
manera directa por diferencia entre el
valor de OD inicial y el final.

BIBLIOGRAFÍA

ICONTEC. Norma Técnica Colombiana 3629.

Gestión ambiental. Agua. Demanda Química
de Oxígeno. 1994

ROMERO, Jairo Alberto, Acuiquímica.

Escuela Colombiana de Ingenieria. Bogotá,
Colombia, 1996. Páginas 106-119.

En Internet:

 http://www.drcalderonlabs.com/Metod
os/Analisis_De_Aguas/Determinacio
n_de_DQO.htm
 http://www.k12science.org/curriculum
/dipproj2/es/fieldbook/dbo.shtml