Universidad Nacional

“José Faustino Sánchez Carrión”

Escuela de Postgrado

Ecología y Gestión Ambiental

Manejo y tratamiento de desechos

TRATAMIENTO BIOLÓGICO DE RELAVES AURÍFEROS QUE CONTIENE

CIANURO EN FUNCIÓN DE SU pH Y CONCENTRACIÓN DE ASPERGILLUS

SP.

Docente: Mg. Contreras Liza, Sergio.

AUTOR: Abarca Rodríguez, Joaquín José

 HUACHO - PERÚ

2011

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp.
 RESUMEN

En la lixiviación se utiliza el cianuro sustancia química elegida

para la recuperación de oro. El cianuro es uno de los pocos reactivos
químicos que disuelven el oro en agua. Es una sustancia química
industrial común que se consigue fácilmente a un precio
razonablemente bajo. Por razones técnicas y económicas, el cianuro es
la sustancia química elegida para la recuperación del oro del mineral. El
cianuro ha sido utilizado en la extracción de metales desde 1887 y
actualmente se le utiliza y maneja en forma segura en la recuperación
de oro en todo el mundo. Las operaciones mineras para la extracción
de oro utilizan soluciones muy diluidas de cianuro de sodio, típicamente
entre 0.01% y 0.05% de cianuro (100 a 500 partes por millón).

El producto de la lixiviación se obtiene solución rica está a su vez

alimenta a planta para su recuperación ya sea por el proceso de
adsorción con carbón activado, o por el método de cementación con
zinc, pero el relave queda en las canchas de lixiviación conteniendo
cianuro de sodio que debe ser tratada para no contaminar el medio
ambiente.

La degradación del cianuro ha tomado un papel muy importante

en los últimos años, debido a que la solución pobre que sale de los
procesos de recuperación y los relaves siguen conteniendo grandes
cantidades de cianuro, por lo que existen algunos tratamientos de
destrucción de cianuro (procesos naturales químicos y biológicos) o
bien el reciclado de este.

Dentro de su tratamiento biológico existen biodegradación

aeróbico y anaeróbico, siendo la primera la más eficiente su

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Aspergillus sp.
tratamiento contemplando en ello los microorganismos como las
bacterias, hongos y levaduras. Para lo cual se describirá el tratamiento
por hongos y específicamente aspergillus sp.

Siendo uno de los hongos que desintegran cianuro los enlaces de

cianuro en su estado libre y complejos, para ello se describe el cultivo a
partir de minerales nativas que contiene este tipo de hongos, su
aislamiento y su adaptación al medio donde contiene cianuro en fusión
de su pH y concentración de aspergillus sp.

Llegando a resultado que el aspergillus es una hongo que destruye

los enlaces de cianuro, esto a su vez cuando la concentración es
constante a menor pH existe mayor destrucción, si el pH es constante a
mayor concentración de esporas aumenta la destrucción del cianuro.

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Aspergillus sp.
 ÍNDICE
Resumen 2

Índice. 3

Introducción. 6

I. FUNDAMENTO TEÓRICO.
I.1.Lixiviación.
8
I.1.1. Métodos de Lixiviación.
I.1.2. Lixiviación de oro y Plata. 8
I.2.Cianuro.
9
I.2.1. Enlace del Cianuro.
I.2.2. Clasificación del cianuro. 10
I.2.3. Química del Cianuro Libre.
11
I.2.4. Complejos Cianurados.
I.2.5. Complejos Débiles y Fuertes del Cianuro. 12

I.2.6. Mecanismo de la Oxidación del Cianuro.

12
I.2.7. Degradación del Cianato.
I.3.Tratamiento del Cianuro. 13

I.3.1. Degradación Natural. 14

I.3.2. Degradación Química.
I.3.2.1.Oxidación por Peróxido de Hidrógeno. 15

I.3.2.2.Conversión a Ferrocianuro. 17
I.3.2.3.Oxidación con Ácido peroximonosulfúrico.
18
I.3.2.4.Clorinación Alcalina.
I.3.3. Adsorción con Carbón Activado. 18
I.3.4. Biodegradación.
18
I.3.5. Clases de Biodegración.
I.3.5.1.Aerobia. 18
I.3.5.2.Anaerobia.
19
I.4.Microorganismos.

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Aspergillus sp.
I.4.1. Tipo de Microorganismo. 20
I.4.2. Hongos.
21
I.4.3. Clases de Hongos.
I.4.4. Los Hongos Aspergillus. 22
I.4.5. Estudio Científico de Crecimiento Microbiano.
23
I.4.6. Curva de Crecimiento Microbiano.
II. MATERIALES Y MÉTODOS. 24
II.1.Materiales.
24
II.1.1. Caracterización de la Muestra.
II.1.2. Medio y Reactivos. 25

II.1.3. Biorreactores.
25
II.2.Métodos.
II.2.1. Equipo Experimental. 25

II.2.2. Procedimiento Experimental. 26

II.2.2.1.Aislamiento y adaptación de los Hongos.
II.2.2.2.Fase de Adaptación de los Hongos a Incremento de pH. 26

II.2.2.3.Fase de Adaptación de los Hongos al Incremento de la 27

Concentración de Cianuro.
27
II.2.2.4.Pruebas preliminares.
II.3.Biodegradación del Cianuro. 27
II.3.1. Preparación del Inóculo.
II.3.2. Inoculación y Preparación del Medio Kelly Ms9b-CN.
II.3.3. Diseño Experimental. 29
II.3.4. Procedimiento de Datos.
29
III. RESULTADOS.
IV. DISCUSIÓN. 29
V. CONCLUSIÓN.
30
VI. RECOMENDACIÓN.
31
Bibliografía.
31

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 31

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40

41

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Aspergillus sp.
 INTRODUCCION

A la preservación del ambiente no se le ha dado la Importancia

que merece pese a existir leyes de regulación al respeto. Tanto es así,
que se he llegado a niveles de contaminación tan altos que, en los ríos
y lagunas, ubicados cerca alas centros mineros, han desaparecido
muchas especies de la flora y fauna nativa.

En los relaves de la industria minera, especialmente de la minería

aurífera se encuentra cianuro de sodio, el que, aún en concentraciones
muy bajas, afecta a la salud de los organismos vivos. EI cianuro se
introduce en el plasma. Se combina fuertemente con el hierro, el cobre
y el azufre, que son componentes, esenciales de muchas enzimas y
proteínas importantes en los procesos vitales. EI principal compuesta
afectado es el citocromo oxidasa, una enzima contenida en las células
del cuerpo y que es esencial para la utilización del oxigeno. Su
inactividad conduce a la asfixia celular y a la muerte de los tejidos.
Como el sistema nervioso central de los animales superiores tiene la
máxima necesidad de oxigeno, es el más gravemente afectado y su
inutilización da lugar a la suspensión de todas las funciones vitales y a
la muerte del organismo. Los microorganismos tolerantes al cianuro
adaptan su crecimiento en su presencia o bien formando oxidasas
alternativas que no son citocromos, o bien utilizando otras enzimas
adaptableso constitutivas para su degradación y destoxificación. Este
efecto explica el éxito del tratamiento microbiológico del cianuro.

Para disolver el oro presente en el mineral, se usa soluciones

diluidas de cianuro de sodio, según la ecuación de Elsner.

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Aspergillus sp.
 Formándose un fuerte complejo entre el cianuro y el oro. A pesar
de la relativa especificidad de la relación oro - cianuro, hay otros
metales y componentes inorgánicos que reaccionan a la vez con el
cianuro y en cierta medida, can hidróxido que debe estar presente para
mantener el cianuro en forma iónica. Las reacciones can metales para
dar diversos complejos son de gran importancia.

Como resultado de la cianuración, de la degradación natural o del

tratamiento de agua residual, se forma una diversidad de compuestos
relacionados con el cianuro, entre los que figuran el tiocianato,
ferrocianuros, sulfocianuros el cianato y el amoniaco. Estos compuestos
son importantes, tanto desde el punto de vista toxicológico como de
tratamiento. Cada vez más pruebas de laboratorio y de campo indican
que estos compuestos, deben tomarse en consideración durante el
diseño de instalaciones en el tratamiento de agua residual si se quiere
que sean eficaces y tengan buen rendimiento.

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Aspergillus sp.
I. FUNDAMENTO TEÓRICO.

1.1. LIXIVIACION.[2]

Es la disolución selectiva de los metales, presentes en las especies

mineralógicas de cualquier naturaleza, desde los sólidos que los
contienen, mediante una solución disolvente acuoso.

1.1.1.METODOS DE LIXIVIACION.

Los principales métodos de lixiviación usados en la actualidad se

pueden clasificar de la forma que sigue:

a. Lixiviación In-Situ: Consiste en la aplicación de soluciones

directamente sobre el mineral que está ubicado en el lugar del
yacimiento, sin someterlo a labores de extracción minera alguna.

b. Lixiviación en Botaderos: Consiste en el tratamiento de minerales

de muy bajas leyes, normalmente debajo de la ley de corte
económica para la planta principal-conocidos como “estéril
mineralizado”. En los yacimientos más antiguos, este material
muchas veces se acumuló sin prestar atención a su tratamiento
posterior, normalmente en cañones o quebradas cercanas a las
minas. Alcanzando alturas de 100 metros o más y el sustrato basal
no siempre es el adecuado para recoger soluciones, sin embargo
estas continúan aplicándose en la parte superior y colectándose en
una laguna de intersección en la roca impermeable más próxima.

c. Lixiviación en Pilas (Pad): A diferencia de los botaderos, en este

caso el mineral tiene una mayor ley y, por lo tanto, económicamente

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Aspergillus sp. 0
 paga por un tratamiento más complejo a través de una planta de
chancado. Las pilas se cargan habitualmente entre 3 y 10 metros,
sobre un sustrato impermeable, normalmente protegido con una
membrana de plástico del tipo polietileno de alta, baja o muy baja
densidad o cloruro de polivinilo, que puede tener desde 0,1 a 1,5
mm de espesor según las exigencias de cada aplicación.

d. Lixiviación en Bateas Inundadas: Conocido como sistema de

lixiviación por percolación, consiste en una estructura con forma de
paralelepípedo de hormigón, protegido interiormente con asfalto
antiácido o resina epóxica, provisto de un fondo falso de madera y
una tela filtrante, que se llena hasta arriba de mineral y que se
inundan con las soluciones de lixiviación.

e. Lixiviación por Agitación: Para ello se requiere que el mineral

este finamente molido, por esto se aplica solamente a minerales
frescos de leyes altas, que por su mayor valor contenido justifican
una molienda húmeda, a cambio de una mayor recuperación y de un
menor tiempo de proceso.

1.1.1. LIXIVIACION DEL ORO Y LA PLATA [9]

Los cianuros de potasio, sodio y calcio, en medio alcalino,

disuelven el oro formando complejos de cianuro. Sin embargo,
industrialmente se prefiere usar el cianuro de sodio (NaCN) por su
mayor contenido de CN-activo por unidad de peso: 53%, versus 40% en
el caso del KCN, lo que influye en los precios de comercialización y
transporte. El cianuro de calcio, Ca(CN)2,no es tan utilizado, a pesar de
presentar un buen porcentaje de ion CN-activo: 56,5% dado que suele
comercializarse con un mayor contenido de impurezas que en los otros
dos casos.

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 La reacción de disolución que tiene lugar durante la lixiviación de
estos elementos con soluciones de NaCN, son de tipo electroquímico.
La reacción global del oro es:

4Au+(ac) + 8CN-(ac) + O2(g)  4Au(CN)-2(ac) + 4OH-(ac)

La reacción de disolución de oro por el cianuro sugerida por L.

Elsner (1 846) es la siguiente:

4Au(s) + 8NaCN(ac) +2H2O(l)+O2(s)4Na[Au(CN) 2] (ac)+ 4NaOH(ac)

La disolución de oro por el cianuro según G. Bodlander (1 896)

sugirió que ocurre en un proceso de dos pasos en el que se forma
peróxido de hidrógeno como compuesto intermedio:

2Au(s)+ 4NaCN(ac)+2H2O(l)+O2(g)2Na[Au(CN) 2] (ac)+ 2NaOH(ac)+ H2O2(ac)

2Au(s) + 4NaCN(ac)+ H2O2(ac) 2Na[Au(CN) 2] (ac)+ 2NaOH(ac)

1.2. CIANURO[8].

Cianuro es un término general que se aplica a un grupo de

sustancias químicas que contienen carbono y nitrógeno. Los
compuestos de cianuro contienen sustancias químicas (antropogénicas)
que se encuentran presentes en la naturaleza o que han sido
producidas por el hombre. Existen más de 2.000 fuentes naturales de
cianuro, entre ellas, distintas especies de artrópodos, insectos,
bacterias, algas, hongos y plantas superiores.

Las principales formas de cianuro producidas por el hombre son el

cianuro de hidrógeno gaseoso y el cianuro sólido de sodio y de potasio.
Debido a sus propiedades únicas, el cianuro se utiliza en la fabricación

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de partes metálicas y en numerosos productos orgánicos comunes
como los plásticos, las telas sintéticas, los fertilizantes, los herbicidas,
los tintes y los productos farmacéuticos. Existe una justificable
preocupación pública por el uso del cianuro en ambientes industriales.

El cianuro es una sustancia tóxica que puede ser letal si se la

ingiere o se la inhala en cantidades suficientes. Al iguana que miles de
otras sustancias químicas que se utilizan en nuestros procesos
industriales modernos; el conocimiento, los procedimientos adecuados
de manipulación y una actitud responsable son fundamentales para el
uso seguro y beneficioso del cianuro.

La minería es una actividad industrial que utiliza una cantidad

significativa de cianuro, aproximadamente un 20% de la producción
total. Desde 1887, las soluciones de cianuro se han utilizado
principalmente para extraer oro y plata de material mineral, que de
otro modo no podrían extraerse eficazmente. Además, el cianuro se
utiliza en concentraciones bajas como un reactivo de flotación para
ayudar a recuperar metales base como el plomo, el cobre y el zinc.

1.2.1. ENLACE DEL CIANURO [3].

La compleja naturaleza del comportamiento de los cianuros puede

explicarse al menos en parte, por el enlace del radical cianuro.

La gran diversidad y compleja naturaleza de los diferentes

compuestos cianurados se puede explicar en función de las
características químicas del grupo ciano (-C≡N). El anión cianuro,
formado por un átomo de carbono y uno de nitrógeno, presenta un
enlace σ, dos enlaces π y dos orbitales antienlazantes desocupados. Los
dos primeros orbitales de su estructura se llenan con el número
máximo de electrones, mientras que los otros orbitales están vacíos.

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Debido a que los orbitales σ y π (1+2) están llenos con electrones, el
cianuro se comporta como un halógeno. Sin embargo, su
comportamiento pseudohalógeno no puede explicar la formación de
complejos cianurados con los metales de la serie de transición como Fe,
Co, Ni, Cu y Zn. Los orbitales antienlazantes desocupados del ión
cianuro pueden formar orbitales híbridos con los orbitales “d” (parcial o
totalmente llenos) de los metales de transición. La contribución de un
par de electrones (bien del ión cianuro al metal o viceversa) se conoce
como “enlace recíproco”, y explica la estabilidad de los complejos
cianurados con metales. Por otra parte, el ión cianuro tiene también un
triple enlace que puede romperse fácilmente, siendo el responsable de
su elevada reactividad.

1.2.2. CLASIFICACIÓN DEL CIANURO.[4, 8]

Una gran variedad de compuestos de cianuro y sus derivados

están presentes en los relaves y solución pobre (barren) o efluentes
residuales que salen de las plantas extractivas de oro/plata y de los
laboratorios metalúrgicos de investigación, ellos pueden ser clasificados
en tres grandes grupos:

✔ Cianuro libre
✔ Complejos de cianuro
✔ Complejos débiles y fuertes del cianuro

Juntos los tres compuestos de cianuro constituyen el “cianuro

total”, al conocer la química de estos tres tipos de cianuro se puede
comprender su comportamiento respecto de la seguridad y el
ambiente.

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1.1.1.QUÍMICA DEL CIANURO LIBRE.

Cianuro libre es el término utilizado para describir tanto el ion de

cianuro (CN) que se disuelve en el agua del proceso como cualquier
cianuro de hidrógeno (HCN) que se forma en la solución. Las briquetas
sólidas de cianuro de sodio se disuelven en el agua para formar el ion
de sodio y el anión de cianuro (CN). El anión de cianuro se combina
luego con el ion de hidrógeno para formar HCN molecular. La
concentración del ion de hidrógeno en el agua del proceso se expresa
mediante el conocido parámetro pH.

CN- + H2O HCN + OH-

Figura 1-1. Relación entre HCN y CN con el pH.

Desde el punto de vista práctico, económico o de seguridad, el pH

de la disolución debe ser superior a 11 para limitar o prevenir la
formación y la pérdida de HCN desde los sistemas acuosos.

1.1.2.COMPLEJOS CIANURADOS.

Aunque las soluciones que contienen cianuro se utilizan en la

minería porque reaccionan con el oro, también reaccionan con otros

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Aspergillus sp. 5
metales, el mineral aurífero casi siempre contiene otros metales, entre
ellos hierro, cobre, zinc, níquel y plata, así como otros elementos como
el arsénico en la mayoría de los cuerpo mineralizados, las
concentraciones de otros metales típicos son mayores que la
concentración de oro en varios órdenes de magnitud.

Cuando un cianuro alcalino metálico se disuelve en agua, en vez

de desprender el ión cianuro (CN-) el metal de transición y el cianuro
permanecen combinados como un anión radical complejo.

K3Fe(CN)63K+ + Fe(CN)63-

La estabilidad del anión complejo cianurado metálico depende del

catión metal que forma parte de él, pH y del potencial redox del medio
en que se encuentra.

Cuadro Nº 1-1: Disolución de Metales por el cianuro.

CONCENTRACIÓN
Elementos
(mg/lt)
Cianuro total 50-2000
Arsénico 0-115
Cobre 0.1-300
Hierro 0.1-100
Plomo 0-0.1
Molibdeno 0-4.7
Níquel 0 .3-35
Zinc 13-740

Hay 28 elementos capaces de formar complejos con el cianuro,

siendo 72 los complejos cianurados metálicos posibles. La toxicidad de
los cianuros complejos de metales se debe generalmente a la
disolución del complejo con formación de cianuros libre.

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Aspergillus sp. 6
1.1.3.COMPLEJOS DÉBILES Y FUERTES DEL CIANURO.

Convencionalmente, los químicos en cianuro distinguen entre los

complejos “débiles” y “fuertes” de cianuro, los complejos débiles de
cianuro, con frecuencia denominados cianuros “disociables en ácido
débiles” o cianuro DAD (WAD), pueden disociarse en solución y producir
concentraciones ambientales significativas de cianuro libre, los
complejos débiles incluyen complejos de cianuro de cadmio, cobre,
níquel, plata y zinc, el grado al cual se disocian estos complejos
depende en gran medida de pH de la solución.

Cuadro Nº 1-2: Comportamiento del Cianuro.

Los complejos se enumeran en el orden de aumento relativo de

estabilidad, a medida que se forman los complejos-cianuro se hacen
más estables que el cianuro libre, sin embargo, si el cianuro total son

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Aspergillus sp. 7
los residuos finales, este tratamiento se convierte en un problema serio
y costoso debido a la estabilidad extrema de los complejos fuertes.

1.1.4. MECANISMO DE LA OXIDACION DEL CIANURO.

El mecanismo de detoxificación de cianuro como es aplicado en

plantas de cianuración puede ser comparado a la oxidación natural de
cianuro en suelos para producir cianato:
2CN- + O2 2CNO-

Sin embargo, esta oxidación es sólo uno de una serie de reacciones,

el cual finalmente puede convertir el cianuro a dióxido de carbono y
nitrógeno, según lo mostrado a continuación.

Figura 1-2. Mecanismo de Oxidación del Cianuro.

Como resultado de la complejidad de la reacción en cadena, se

explicarán principalmente el mecanismo de la oxidación de cianuro a
cianato. La posterior oxidación para la producir nitrógeno y dióxido de
carbono únicamente se puede lograr con ciertos oxidantes o en un
tratamiento biológico.

La oxidación de cianuro y por lo tanto, la formación de cianato es la

reacción termodinámicamente favorecida como lo muestra el

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Aspergillus sp. 8
correspondiente diagrama Potencial versus pH mostrado en la figura 1-
3 El cual ilustra que el cianato es la especie predominante dentro del
dominio de estabilidad del agua. Sin embargo, contrariamente a las
expectativas termodinámicas, la reacción avanza muy lentamente en la
dirección de la formación de cianato como resultado de un
impedimento cinético.

Fig. Nº1-3: Diagrama de potencial – pH del sistema CN- - OCN—H2O a 25°C

1.1.5.DEGRADACION DE CIANATO

Después de una detoxificación satisfactoria, el cianuro es oxidado a

cianato. Sin embargo, el cianato no es el producto final de la
detoxificación de cianuro. El cianato reacciona también por oxidación
directa con el oxidante usado en la cianuración o por hidrólisis
intermedia.

Algunos de los oxidantes usados en la detoxificación de cianuro,

como los hipocloritos u ozono son aptos para oxidar el cianato a
nitrógeno y dióxido de carbono.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 1

Aspergillus sp. 9
 2OCN- (ac) + 3OCl- (ac)+ H2O(l)N2(g)+ 2CO2(g)+ 3Cl-+2OH-(ac)

La dependencia del pH en la oxidación de cianato es inversa para la

detoxificación con ozono. Un incremento del pH favorece la oxidación
de cianato y acelera la reacción.

2OCN-(ac) + 3O3(g) + 2OH-(ac) N2(g) + 2CO32-(ac) + 3O2(g)+

H2O(l)

El cianato está sujeto a una posterior hidrólisis. El pH de la solución tiene una

ligera influencia en el desarrollo de la reacción. El mecanismo de las reacciones de la
hidrólisis en medio acido y alcalino.

Fig. Nº1.4: Mecanismo de la hidrólisis del cianato en medio acido y alcalino.

1.2. TRATAMIENTO DEL CIANURO3.

Se emplean cuatro formas generales de tratamiento de la solución

de cianuro:
✔ Degradación natural.
✔ Oxidación química.
✔ Precipitación.
✔ Biodegradación.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 0
1.1.1.DEGRADACIÓN NATURAL.

La degradación natural en las pozas de tratamiento se lleva a

cabo debido a la interacción de varios procesos como la volatilización,
hidrólisis, foto degradación, disociación, oxidación química y
bacteriológica, y precipitación. La degradación natural puede verse
influenciada por variables como: las especies de cianuro en la solución
y sus respectivas concentraciones, temperatura, pH, aeración, rayos de
sol, presencia de bacterias, tamaño de poza, profundidad y turbulencia.
Los mecanismos principales que controlan la degradación natural del
cianuro son la volatilización del HCN y la disociación de los complejos
metálicos cianurados, siendo esta última, la etapa controlante del
proceso.

1.1.2.DEGRADACIÓN QUÍMICA.

1.1.2.1. OXIDACIÓN POR PERÓXIDO DE HIDROGENO.

Se han desarrollado dos procesos los cuales utilizan el peróxido

de hidrógeno para la destrucción oxidante del cianuro libre y los
complejos del cianuro. El primer proceso conocido como proceso
Kastone fue originalmente propuesto por la Dupont, 1 974 y por Mathre
y Devries, 1 981. Este proceso utiliza una solución de peróxido de
hidrógeno al 41% con unos pocos mg/L de formaldehido y cobre. El
segundo proceso desarrollado por DegusaCorporation, empleando una
solución de peróxido de hidrógeno y sulfato de cobre a varias
concentraciones, aunque es recomendable no emplear las sales de
cobre, debido a la presencia de este metal dentro de los minerales
tratados. La reacción fundamental del segundo proceso es:

CN-(ac)+ H2O2(ac) CNO-(ac) + H2O(l)

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 CN (−ac ) + H 2O2( ac ) + Cu( s ) → CNO(−ac) + 4 H 2 O( l )

[ M (CN ) 4 ] −2 ( ac) + 4H 2O2( ac) + 2OH − ( ac) → M (OH ) 2( s ) + 4CNO(−ac) + 4 H 2O(l )

2Cu(+ac2 ) + [ Fe(CN ) 6 ] → Cu 2 [ Fe(CN ) 6 ]

−4
( ac ) s

CN (−ac ) + 2 H 2O( l ) → CO3−(2ac ) + NH 4+( ac )

1.1.2.2. CONVERSIÓN A FERROCIANURO.

La adición de excesos de sulfato ferroso a las soluciones

cianuradas ajustadas entre pH 7,5 y 10,5 convierte la mayor parte del
cianuro en ferrocianuro. Este es uno de los métodos más antiguos de
disposición de cianuro. El método trabaja mejor para soluciones de 10 a
100 ppm de HCN, y requiere grandes excesos de sulfato ferroso (16
moles por mol de cianuro para soluciones cuprocianuradas). Se puede
alcanzar reducciones en las concentraciones de cianuro de 88 a 96%.
Las sales de ferrocianuro formado son muy estables y precipitan
rápidamente, pero a pesar de ser considerados no tóxicos, estos se
fotodegradan liberando HCN.

Con el uso de sulfato ferroso, realmente no se destruye al cianuro.

Este solamente cambia el cianuro libre hacia una forma más estable,
como ferrocianuro el cual puede formar precipitados altemente
insolubles con metales pesados.

NaCN + FeSO4Na4Fe(CN)6 + Na2SO4

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Aspergillus sp. 2
 El ataque directo del ión ferroso sobre el cianuro, involucra un
consumo del ión ferroso sobre el calcio presente en el efluente (pH 10)
antes de neutralizar al cianuro de sodio:

Ca(OH)2 + FeSO4 Fe(OH)2 + CaSO4

4Fe(OH)2+ 2H2O+ O2 4Fe(OH)3

4Fe(OH)2 + CN-+ O2 Fe(CN)64-+ 2OH-

1.1.2.3. OXIDACIÓN CON ACIDO PEROXIMONOSULFÚRICO.

El peróxido de ácido sulfúrico (H2SO5) es conocido como ácido de

Caro pues lleva el nombre de su inventor Heinrich Caro (1 834 – 1 910),
quien fue el primero que lo preparó en 1 898.

El ácido de Caro es un conocido agente degradador de cianuro

muy utilizado para el tratamiento de efluentes proveniente de los
procesos de cianuración en la minería del oro y de la plata. Este es
fabricado como producto de la reacción exotérmica entre el H2SO4y el
H2O2, de la cual, resulta una solución clara e incolora de una sola
consistencia cuyas propiedades físicas se presentan en la tabla 2.5.
Debido a su inestabilidad, el ácido de Caro es generado en el mismo
punto de uso bajo la siguiente reacción:

H 2 SO4 ( ac ) + H 2O2 ( ac ) ⇔ H 2 SO5( ac ) + H 2O( l )

El ácido de Caro degrada fácilmente los CNWAD y los cianuros libres

que provienen de los relaves de las plantas en los procesos de extracción
de la minería de oro debido a que estos se disocian fácilmente a pH = 9,
este pH resulta porque la adición del ácido de Caro a los relaves disminuye

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Aspergillus sp. 3
el pH de los valores normales de estos que están entre 10,5 y 11,5 debido
a la cantidad de álcali utilizado en el proceso de cianuración.

1.1.2.4.PROCESO INCO – SO2.

La toxicidad de los cianuros solubles sobre las especies vivas es

bien conocida, en consecuencia se hace relevante para la protección
del medio ambiente el tratamiento adecuado de los efluentes de la
industria minera. Las consideraciones a este aspecto permiten
entender los problemas técnicos que surgen para poder controlar la
emisión de cianuro al ambiente por la industria minera.

Rápidamente se difundió la destrucción de cianuros mediante la

aplicación del proceso INCO (SO2/aire) introducido en 1 994 después de
que INCO adquirió la patente canadiense original. El proceso se mostró
sensible a diversos parámetros como: el pH, la concentración de ion
cianuro, la dosificación de SO2, la concentración de los metales Cu y Fe
en solución, la presencia de otros aniones como SCN- y S2O3=, la
viscosidad y la transferencia de oxígeno. Debe reconocerse en este
proceso lo inconveniente que resulta la presencia del SO2, respecto a
su: generación, almacenamiento, manipulación y agresividad química
que impacta a la salud de los trabajadores y al medio ambiente en
general, particularmente en el caso de eventuales derrames o fugas
durante el proceso.

Oxidación:NaCN(ac) + SO2(ac) + O2(ac) + H2O(L)NaCNO(ac) + H2SO4(ac)

Me (CN)42- + 4SO2(ac) + 4O2(ac) + 4H2O(L)4CNO-(ac)+ 4H2SO4 + Me2+

Donde: Me = Au, Ag, Zn, Cu, Fe, Ni, Cd, etc.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 4
1.1.2.5.CLORINACIÓN ALCALINA.

La clorinación alcalina es un proceso químico que consiste en la

oxidación y destrucción del cianuro libre y los complejos de cianuro
débiles bajo condiciones alcalinas (pH: 10,5 – 11,5). El cloro se
suministra en forma líquida o gaseosa o bien, como hipoclorito de sodio
en forma sólida. Las formas sólidas se preparan en soluciones
concentradas previamente antes de usarse en el proceso de oxidación.
El cloro o el hipoclorito pueden también generarse in situ
electrolíticamente.

El primer paso en la destrucción del cianuro utilizando hipoclorito o

cloro en forma de gas consiste en la oxidación del cianuro para formar
un cloruro de cianógeno intermedio como se puede apreciar en las
siguientes reacciones:

CN- + ClO- + H2O CNCl + 2OH- CNO- + Cl- + H2O

2CNO- + 3ClO- + 2H+ 2CO2 + H2O + 3Cl- + N2
2NaCN + 2Cl2 + 2Ca(OH)2 (pH = 11) 2NaCl + CaCl2 + Ca(CNO)2
+ 2H2O
2NaCN + 5Cl2 + 4Ca(OH)2 2NaCl + 2CO2 + N2 + 4H2O + 4CaCl2

1.1.3. ADSORCIÓN CON CARBÓN ACTIVADO.

El empleo de la adsorción por carbón activado se debe a los

intentos de emplearlo como catalizador de la oxidación del cianuro con
oxígeno. Se observó que el cianuro era en primer lugar adsorbido y
después oxidado catalíticamente. La presencia de iones metálicos,
especialmente cobre, intensificaba la eliminación de cianuro por la
eliminación de cianuro mediante la formación de un complejo de cobre.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 5
 Posteriormente se investigó la eliminación de cianuro utilizando
carbón activado granulado sin oxidación (1 971). Se encontró que para
la eliminación del cianuro era necesaria la adición de cobre o níquel. El
proceso consiste en la adición de iones metálicos, seguida de un
periodo de formación de complejos y de la adsorción de una columna
de carbón activado granulado. El estudio fue muy completo y en él se
investigó la generación y reutilización del carbón activado
conjuntamente con la eliminación del cianuro. La regeneración del
carbón se realizaba mediante un ciclo de lavado ácido, empleando
ácido sulfúrico. Utilizando columnas de adsorción y con un contenido de
cianuro de cobre de 75 mg/L expresado en cianuro en el afluente, se
obtenía en el efluente concentraciones de cianuro de menos de 0,5
mg/L. Sin embargo, el costo inherente a la adquisición del nuevo carbón
y su regeneración, hacia el proceso era inaplicable en la mayor parte de
los casos en que había contenidos elevados de cianuro disociable en
ácido débil.

Por otra parte, el uso de adsorción mediante carbón activado,

puede ser un proceso viable para eliminar contenidos de trazas de
cianuros (<2,0 mg/L) y cobre del agua de decantación después de la
reducción mediante tratamiento o atenuación natural. Puede emplearse
carbón activado nuevo y una vez agotado, reciclarlo en un circuito de
carbón de pulpa. Este procedimiento puede encontrar aplicación en
algún caso específico, cuando deban depurarse caudales pequeños del
agua de proceso excedentes, antes de la descarga. En muchos casos
en que se utiliza carbón activado para recuperar oro residual de
disoluciones de decantación, se ha observado la reducción de los
contenidos de cianuro disociable en ácido débil y de metales.

1.1.4. BIODEGRADACIÓN [6,7].

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 6
 El tratamiento biológico de los residuos de cianuración implica la
oxidación biológica del cianuro libre, los cianuros complejos metálicos,
el tiocianato y los correspondientes productos de su descomposición.

Los procesos biológicos ensayados son: fango activado, filtros

percoladores, contactores biológicos rotatorios, torres de tratamiento
biológico y filtro biológico aireado.

El proceso biológico, comprende dos pasos independientes de

oxidación bacteriana para facilitar la asimilación completa del efluente
metalúrgico. El primer paso consiste en la descomposición de cianuros
y tiocianatos por oxidación y la posterior adsorción o precipitación de
los metales libres en la biopelícula. El primer pasó está representado
por las siguientes ecuaciones:

1
M x CN y ( ac ) + 2 H 2O( l ) + O2 ( g ) → M ( ac ) + −biopelicula + HCO3−( ac ) + NH 3( ac )
2

Donde:
M= (Cu, Fe, Zn, Ni)

5
2 SCN (−ac ) + 2 H 2O(l ) + O2 ( g ) → SO4−(2ac ) + HCO3−( ac ) + NH 4+( ac )
2

El segundo paso de la asimilación convierte el amoniaco en nitrato

mediante nitrificación convencional. La concentración inicial de
amoniaco en el afluente y con el amoniaco producido por
descomposición de cianuro y tiocianato. La nitrificación se desarrolla
mediante las siguientes reacciones:

2 NH 4+( ac ) + 3O2 ( g ) → 2 NO2−( ac ) + 4 H (+ac ) + 2 H 2O( l )

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 7
 2 NO2−( ac ) + O2 ( g ) → 2 NH 3−( ac)

1.1.5. CLASES DE BIODEGRACIÓN.

En la biodegradación existen dos métodos de reducción del

cianuro:

• Aerobia.
• Anaerobia.

1.1.1.1. AEROBIA.

Se da en las partes del terrero que presentan condiciones

aeróbicas, sólo si el mineral está oxidado, en algunos procesos
biológicos se puede consumir ácido cianhídrico y generar cianato de
hidrógeno, aunque éste se hidroliza después en amoníaco y dióxido de
carbono, estos mecanismos de reacción se muestran a continuación.

2HCN+O2enzimas 2HCNO

2HCNO+H2O NH3(g)+CO2(g)

1.1.1.2. ANAEROBIA.

Este tipo de degradación se da en pequeñas porciones del terrero

y, la condición para que se presente es que exista sulfuro de hidrógeno
(HS-) o ácido sulfhídrico(H2S), las especies de azufre presentes
dependen del pH, si el pH es mayor a 7 está presente el HS -, en caso
contrario, si el pH es menor a 7 habrá más ácido sulfhídrico La

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 8
formación de tiocianato de hidrógeno (HCNS) mediante la degradación
anaeróbica se muestra en las siguientes reacciones:

C N- + H2S(acuoso) → HCNS +H+

HCN + H S- → HCNS + H+

Después el HCNS se hidroliza para formar el amoníaco, ácido

sulfhídrico y dióxido de carbono.

En comparación con la biodegradación aerobia del cianuro, la

biodegradación anaerobia es mucho más lenta y las bacterias
anaerobias tienen un umbral de toxicidad del cianuro de solamente 2
mg/Lt en comparación con el de 200mg/lt para las bacterias aerobias;
por lo que se concluye que la biodegradación anaerobia es menos
eficaz que la aerobia.

1.2. MICROORGANISMOS.

Organismos microscópicos, término genérico que se aplica a las

bacterias, los virus, los hongos microscópicos y los parásitos
protozoarios. Que pueden resultar perjudiciales o beneficiosos al
hombre, según el caso.

1.2.1.TIPOS DE MICROORGANISMO.

Dentro de la bioremedicación existen tres formas de degradación:

– Con Bacteriana.
– Con Hongos.
– Levaduras.
– Protozoarios.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 2

Aspergillus sp. 9
1.1.1. HONGOS[5.

Los hongos se conocen como organismos unicelulares y

pluricelulares principalmente con estructuras hifales, los cuales
obtienen sus nutrientes por absorción. Estas definiciones comprenden
los organismos heterogéneos convencionalmente estudiados por
micologistas. La nutrición heterotrófica puede ser lograda por
diferentes estilos de vida saprofítica, parásita o simbiótica.

Hongos filamentosos Hongos

levaduríformes

Fig. Nº 1-5:Tipos de Hongo.

1.1.2. CLASES DE HONGOS.[6]

Dentro de la familia de hongos podemos describir los siguientes:

✔ Neurosporacrassa ✔ Aspergillusniger

✔ Rhizopusarrhizus ✔ Aspergillusansia

✔ Penicillumspinulosum ✔ Aspergillus ochraceus

✔ Penicillumchrysogenum ✔ Aspergillus sp.

✔ Penicillum ✔ Tricodermaharzianum

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 0
1.1.1.LOS HONGOS ASPERGILLUS.

Son microorganismos incapaces de realizar fotosíntesis, debiendo

obtener su energía y las sustancias necesarias para su desarrollo y
multiplicación a partir de la asimilación de compuestos orgánicos
simples o complejos de acuerdo a sus requerimientos nutricionales.

1.1.2. ESTUDIO CINÉTICO DE CRECIMIENTO MICROBIANO [4].

El crecimiento microbiano modifica la composición del medio en

el cual se desarrolla, implicando la aparición de la biomasa, la
desaparición del sustratos, el consumo de oxigeno y amoniaco, la
aparición de subproductos del metabolismo y el desprendimiento de
energía en forma de calor.

1.1.3. CURVA DE CRECIMIENTO MICROBIANO [4].

Se efectúa para tal fin un cultivo del tipo clásico en el cual,

después de sembrar, se observa el crecimiento hasta el agotamiento de
los nutrientes del medio. EI estudio consiste en seguir, en función del
tiempo (t) la evolución del crecimiento (X), y la concentración celular
(esporas/cm3) o concentración de biomasa microbial (g. de masa
secaIcm3) según el tipo de microorganismos. Durante el crecimiento se
presentan diversas fases como se muestra en la figura 1-6.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 1
 Fig. Nº 1-6: Curva de crecimiento de una población de hongos.

Fase de Latencia a Adaptación "1": Se presentan después de la

siembra del microorganismo en el medio de cultivo. Se trata de un
periodo de adaptación en el curso del cual la célula sintetiza las
enzimas que le son necesarias para metabolizar el sustrato que existe.

Concentr
En el curso de esta fase la reproducción celular es mínima y su
duración varia principalmente según el tamaño del inóculo, la edad de
las células y tipo de sustrato que contiene el medio de cultivo.

Fase de arranque "2"; terminada la fase anterior se asiste al inicio

Celular
del crecimiento propiamente dicho. La concentración celular o
concentración en biomasa X, aumenta lentamente y después mas
rápido. La velocidad de reproducción aumenta dxdt así como la
velocidad específica de crecimiento.

Fase Exponencial de Crecimiento "3": Se inicia cuando la

velocidad de reproducclón celular es mayor que le de muerte, hasta
llegar a un valor máximo. Esta fase logarítmica o exponencial se inicia y
va a durar en tanto que el aumento de la velocidad de reproducción sea
constante.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 2
 Fase de Disminución de Velocidad "4": Se llega a un momento en
que la fase exponencial presenta unpunto de inflexión. Este
corresponde a una disminución en la velocidad de crecimiento
ocasionado por ladesaparición de uno o varios compuestos en el medio
de cultivo necesarios para el crecimiento.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 3
I. MATERIALES Y MÉTODO.

2.1. MATERIALES.

2.1.1.CARACTERÍSTICA DE LA MUESTRA.

Para las pruebas de biodegradación de cianuro se empleo

solución de cianuro proveniente del efluente de la empresa minera
(MARSA) cuya composición es el siguiente:
Cuadro Nº 2-1: Análisis de la Solución Barren.

ppm

pH NaCN As Fe Cu Pb Zn Sb Cd

10. 160 20.16 45.60 75.20 0.25 64.00 0.82 0.05

6

2.1.2.MEDIO Y REACTIVOS.

Para los análisis de cianuro libre.

– Nitrato de plata (AgNO3).

– Ioduro de potasio (KI).

Medio Tuovienen Kelly modificador Ms 9b – CN.

– SO4 (NH4)2 100 ppm

– K2HPO4 3 H2O 40 ppm

– Mg SO4 7H2O 250 ppm

– Dextrosa 3%

– Estreptomicina 500 ppm

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 4
 – NaCN 1000 ppm

Agar papa cianuro:

Agar - agar 1 800 ppm

papa 250 000 ppm

Agua destilada 1 Lt

Dextrosa 40 000 ppm

NACN 500 ppm

NaOH

Estreptomicina 500 ppm

Este medio se usa para la incubación y adaptación de los hongos.

Reactivos de asepsia y esterilización.

○ Alcohol yodado.
○ Solución sulfocrómica.

Reactivos para observaciones microscópicas.

➢ Azul de lactofenol.

2.1.1.BIORREACTORES.

Los biorreactores son equipos diseñados según el tipo de cultivo

al cual se destina, siendo su geometría concebida de forma tal que la
transferencia de oxigeno sea lo más eficaz posible y pudiendo ser

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 5
construidos de vidrio o de metal según su volumen, siendo una
condición fundamental que el biorreactor este cerrado a la posible
entrada de contaminantes, por tanto se debe recurrir a mecanismos y
materiales previamente esterilizados.

Cualquiera que sea el tipo de microorganismos, el biorreactor

debe permitir un contacto tan bueno como sea posible entre las frases
bióticas y abióticas del sistema. En el caso de los organismos
filamentosos agrupados en "pelotas", las transferencias al interior de la
masa del micelio se efectúan muy mal y solo en la periferia de las
pelotas hay una actividad máxima y de esto resulta una
heterogeneidad perjudicial para un buen desarrollo del proceso. Una
característica muy Importante del biorreactor, en el caso de los
procesos aerobios, es su capacidad para transferir a la biomasa
microbiana la cantidad de oxígeno que necesita.

EI oxígeno disuelto recomendado en procesos aerobios oscila

generalmente entre 1 ppm a 2 ppm; si se encuentra por debajo de 1
ppm puede constituirse en un factor limitante para el desarrollo del
microorganismo y si está por encima de 2 ppm implica un gasto
innecesario de energía.

2.2.MÉTODOS.

2.2.1.EQUIPO EXPERIMENTAL.

Consistió de una batería de 18 biorreactores de vidrio, con

capacidad para 500 cm3 cada uno, alimentado por aire a través de un
capilar de 200 mm de longitud sumergido en su Interior y tapados para
evitar la contaminación del contenido.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 6
 EI aire es alimentado por dos minicompresores y es pasado
previamente par filtros de algodón y luego esterilizado haciéndolo
pasar por burbujeo en una solución que contiene cloruro de sodio al 7%
y 500 ppm de estreptomicina.

2.2.2.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.

Constó de cuatro etapas, que se realizaron con Aspergillus sp y se

detallan a continuación.

2.2.2.1.AISLAMIENTO Y ADAPTACIÓN DE LOS HONGOS.

La muestra mineral, a partir de la cual se aislaron los hongos fue

tomada de una veta ubicada en la provincia de Juncán, La Libertad, y
muestra especies como pirita, galena, calcopirita y sales solubles, entre
otros.

El procedimiento para aislar los hongos fue el siguiente:

a. Se molió el mineral a malla -100.

b. Se peso un kilogramo de mineral molido y junto a un litro de agua
destilada estéril se colocó en un biorreactor de agitación mecánica.
Con ácido sulfúrico, se reguló el pH a 2 y luego se adicionó el medio
de cultivo de Tuovienen-Kelly ( Ms9b ), cuya composición es:

– SO4 (NH4)2 100 ppm

– K2HPO4 3 H2O 40 ppm

– Mg SO4 7H2O 250 ppm

– Dextrosa 3%

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 7
a. Se agita el contenido por 10 minutos, con el fin de homogeneizarlo y
diluir las sales del medio de cultivo Ms9b.
b. Se descargó el reactor hacia un filtro a presión, para obtener la
solución clarificada a la que se le adicionó el medio de cultivo Ms9b.
c. Se dio un tiempo de Incubación de 10 días, luego de los cuales
fueron aislados los hongos mediante siembra de 1 cm3 de media de
cultivo Ms9b en placas de petri, a las cuales se les agregó
posteriormente agar papa dextrosa (APD). dándole un tiempo de
Incubación de 7 días, al cabo del cual se resembraron las colonias de
hongos que crecieron, en tubos de ensayo con APD, para obtener un
cultivo puro. A partir de este se procedió a identificar alas hongos
aislados determinándose que pertenecían al genera Aspergillus.

2.1.1.1.FASE DE ADAPTACIÓN DE LOS HONGOS A

INCREMENTOS DE pH

Aspergillus sp. en etapas sucesivas fue adaptándose a pH cada

vez mayores, para lo cual se les sembró en caldo Ms9b a pH 4
inicialmente y fueron mantenidos durante 10 días a temperatura
ambiente. Luego se resembró en APD a pH 4 Y fueron Incubadas par 5
días a temperatura ambiente.

Se repitió los pasos anteriores para valores de pH 5 , 6 , 7 , 8 , 9 ,

10 , 11 Y 12 con 10 cual se obtuvo un cultivo puro adaptado a pH 12

2.1.1.2.FASE DE ADAPTACIÓN DE LOS HONGOS AL

INCREMENTO DE LA CONCENTRACIÓN DE CIANURO.

Concluida la fase anterior, se procedió. Estimular a Aspergillus sp.

para que desarrollen y consumen cianuro como una de sus fuentes de
carbono y nitrógeno, para lo cual se hizo pequeños incrementos de

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 8
concentración de cianuro, teniendo en cuenta que el metabolismo del
cianuro es inhibido por lapresencia de cianuro.

Se sembró los hongo en caldo Ms9b a pH 9.5, 10,5 y 11.5 con una
concentración de cianuro de 10 ppm permaneciendo por 10 días a
temperatura ambiente y luego fueron resembrados en APD e incubados
por 5 días a temperatura ambiente. Se repitió el procedimiento para
cada valor de pH y para concentraciones de cianuro de 50, 100, 200,
400, 600, 800, 1000, 1500 y 2000 ppm obteniéndose cultivos puros
adaptados a consumir cianuro.

2.1.1.3.PRUEBAS PRELIMINARES.

Teniendo como variable dependiente la biodegradación de

cianuro se realizaron pruebas con el fin de determinar las variables
independientes y niveles más convenientes para la investigación para
lo cual se empleó concentraciones de hongos de:

104 Esporas/d
m3
105 Esporas/d
m3

106 Esporas/d
m3

Las soluciones se fijaron en los niveles de pH:

9.5

10.5

11.5

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 3

Aspergillus sp. 9
 Los resultados de las pruebas preliminares, que permitieran
establecer los niveles de las variables concentración de los hongos y los
valores de pH de la solución, se muestran en la tabla A-1-B del
apéndice, para las pruebas con 10 ppm de cianuro y 104 esporas I dm3.

2.2.BIODEGRADACIÓN DEL CIANURO.

2.2.1.PREPARACIÓN DEL INÓCULO.

Se realizó de la siguiente manera:

✔ Sembrado de hongos adaptados en tubos de ensayo con

medio agar papa cianuro.
✔ Incubación por 7 días a 28 °C.
✔ Suspensión de esporas en solución salina fisiológica esteril
✔ Conteo de concentración de esporas I ml utilizando la cámara
de newbauer.

2.1.1.INOCULACIÓN Y PREPARACIÓN DEL MEDIO

TUOVIENEN KELLY Ms9b-CN.

Se diluyó el inóculo en SSF hasta obtener la concentración de

organismos deseada (10
4
, 105, 106 esporas/d m3), luego se adicionó las sales
del media Tuovienen Kelly Ms9b-CN hasta obtener las siguientes
concentraciones:

– SO4 (NH4)2 100 ppm

– K2HPO4 3 H2O 40 ppm

– Mg SO4 7H2O 250 ppm

– Dextrosa 3%

– Estreptomicina 500 ppm

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 0
 – NaCN 500 ppm

2.1.1.DISEÑO EXPERIMENTAL.

De acuerdo a las variables y sus niveles, con triple repetición el

esquema de experimentos queda de la siguiente manera:

En cada biorreactor se adiciona la solución que contiene el cianuro,

la cantidad calculada de hongos y se mantiene un nivel de pH, luego se
inicia la biodegradación y durante este tiempo se inyecta aire
esterilizado al biorreactor. Cada cierto tiempo se extraen muestras para
analizar por cianuro total, de acuerdo al método del acido pícrico.

EI volumen de cada biorreactor fue de 400 cm 3, y el nivel de pH es

controlado par un pH-metro digital y su regulación se logra can la
adición de soda caustica grado reactivo.

Para cada nivel de las variables y sus combinaciones resulta la

cantidad de 33pruebas, cuyo esquema experimental se muestra en la
tabla NºA-3 del apéndice.

2.1.2.PROCEDIMIENTO DE DATOS

Se obtendrán las correlaciones correspondientes alas efectos de las

variables sobre el porcentaje de destrucción de cianuro y se efectuara
el análisis de varianza para encontrar el grado de significancia de cada
variable en el proceso.

I. RESULTADOS.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 1
 Tabla Nº 3-1. Cianuro total en la solución de 9 días de tratamiento,
ppm.

pH 9.5 10.5 11.5

Concentraci
ón

esporas/cm3 104 105 106 104 105 106 104 105 106

Cianuro 3.21 2.23 1.74 4.19 2.23 2.97 5.2 3.2 2.2
ppm 7 1 3
3.45 2.20 1.90 3.95 2.40 2.75
5.1 3.2 2.2
2.99 2.00 1.80 4.25 2.20 3.01
0 0 0

5.2 3.3 2.1

0 1 5

Promedio 3,22 2,14 1,81 4,13 2,28 2,91 5,19 3,24 2,19

Con lo cual el porcentaje de destrucción de cianuro es el siguiente:

97,9 98,6 98,8 97,4 98,5 98,1 96,7 97,9

% 9 6 7 2 8 8 6 8 98,63

Fig. Nº 3-1: Destrucción de Cianuro a diferentes

concentraciones de cepas pH 9.5 constante.

Fig. Nº 3-2: Destrucción de Cianuro a diferentes

concentraciones de cepas pH 10.5 constante.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 2
 Fig. Nº 3-3: Destrucción de Cianuro a diferentes
concentraciones de cepas pH 11.5 constante.

Fig. Nº 3-4: Destrucción de Cianuro a diferentes

concentraciones de cepas vs pH 9.5, 10.5 y 11.5
constante.

Tabla Nº 3-2. Análisis de varianza para los resultados obtenidos.

Fuente de Grado Suma Cuadro F F0.01

variación de de medio
libertad cuadrad
os

Repetición 2 0.00782 0.003914 0.223 10.9

96 8 3 2

Efectos de:

pH 2 6.06791 3.033959 173.0 10.9

85 25 58 2

Esporas/cm3 2 18.6396 9.319803 531.6 10.9

74 69 04 2

Interacción pH 4 3.79305 0.948264 54.08 9.15

esporas 93 82 9

Error 16 0.28050 0.017531

37 48

Total 26

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 3
Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4
Aspergillus sp. 4
II.DISCUSIÓN

De acuerdo al análisis de varianza, la variable que influye más en la

biodegradación de cianuro es la concentración de esporas, como se muestra en
la tabla 3.2, por su aporte al alto valor de F en la prueba de Snedecor. La
variable pH aunque en menor proporción que la concentración de esporas,
muestra una marcada influencia en el proceso de biodegradación de cianuro.

Con la misma concentración de esporas y variando el pH de mayor a

menor se alcanza cada vez mayor biodegradación de cianuro, lo que puede
explicarse por el acercamiento hacia el rango de pH entre
y 6, 4
optimo parala
viabilidad de los hongos
. A pH menor de 9, la hidrólisis del cianuro y la
generación de acido cianhídrico gas, ocurren en forma natural, por lo que esto
contribuye a menores niveles de cianuro total residual el efluente tratado.

Para un mismo valor de pH , a medida que se incrementa la

concentración de esporas aumenta la destrucción del cianuro , tal como se
muestra en la tabla
3.2 que podría explicarse par la presencia cada vez, mayor
de hongos para una misma cantidad de cianuroocasionando una
biodegradación en menor tiempo. Sin embargo, debe tenerse en consideración
que, a medida ques e emplea una mayor concentración Aspergillus,
de se
incrementaran también los costos de operación.

EI alto porcentaje de destrucción de cianuro obtenido (98.87

%)
empleando Aspergillus es comparable al tratamiento con Pseudónimas
sprealizado en la mina Homestake
, así como el empleo de
penicilliumpara
biodegradar el 99
% de cianuro de un efluente de cianuració
n.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 5
III.CONCLUSIONES

– La concentración de esporas es la variable

m ás relevante para la
destrucciónde cianuro.

– Con pH menor se consigue la mayor destrucción del enlace triple del

cianuro, aunque existe el peligro de hidrólisis.

– Los resultados obtenidos son comparableslosa logrados por otros

investigadores
.

– Una evaluaci
ón económica debe ser practicada para decidirtiempo
el y
concentraci
ón de esporas adecuados.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 6
I. RECOMENDACIONES.

– Iniciar estudios paralelos con bacterias

y hongos, para optimizar un
procedim iento para elim inar la contam inación por cianuro. Se debe incentivar
la integración de las especialidades de Microbiología con las ingenierías
y
otras afines, para afrontar problemas de mutua competencia.

– Realizar otros estudios a nivel piloto

, para obtener m uestras de m ayor

tamaño.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 7
 BIBLIOGRAFÍA

1. ACUÑA CARMONA, Adolfo. AGUILERA VIDAL, Rosa del Carmen

(2003). Conceptos Básicos sobre Medio Ambiente y Desarrollo
Sustentable. Ed. Overprint Grupo Impresor SRL. Buenos Aires. p.
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2. Cáceres Arenas, Germán (2007). Hidrometalurgia y
Electrometalurgia. Universidad de Atacama. http://www.ivan.cl.
3. DIAZ INOCENTE Daysi Kelly. CONDORI CCOILLO Ismael Rene (2005).
Proceso de Detoxificación de Soluciones Cianuradas Usando el
Método INCO En Efluentes Mineros. Tesis. UNI.
4. Deacon j. (1990). Introducción a la microbiología Moderna. LIMUSA
S.A. México.
5. ESPINOSA ARMIJOS, Mayra Fernanda. LUDEÑA GONZÁLEZ, Karina
Soledad (2007). “Lixiviación Fúngica de Cobre a Partir de Minerales
del Distrito Minero Portovelo – Zaruma – Minas Nuevas”. Universidad
Técnica Particular de Loja Escuela de Bioquímica y Farmacia.
Ecuador.
6. F.J. Alguacil Y. Merino (1998).Biotratamiento de contaminantes de
origen inorgánico. Consejo Rev. Metal Madrid,.
http://revistademetalurgia.revistas.csic.es.
7. LUQUE ALMAGRO, Víctor Manuel (2005).Metabolismo del cianuro y
del cianato en Pseudomonaspseudoalcaligenes CECT5344
Aplicaciones biotecnológicas. P.26. www.analistaseconomicos.com.
8. Reyes López, Iván (1997). Metalurgia del oro y Medio Ambiente.
Universidad de Trujillo. Facultad de Ingeniería.
9. VARGAS GALLARDO, Juan (1980). Metalurgia del Oro y la Plata. II
edición. Editorial San Marcos Lima Perú.

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4

Aspergillus sp. 8
10.

ANEXO
Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 4
Aspergillus sp. 9
Tabla Nº A-1-A: Porcentaje de degradación de cianuro con 10 ppm de
cianuro en la solución

Concentración de Cianuro: 10 ppm

Días de adaptación : % de degradación
pH 7 14 21 28 35 50 60 75

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 5

Aspergillus sp. 0
 28,1 32,8 41,5 46,8 67,1 77,8 85,8 84,1
9,5 8 0 0 0 0 0 8 0
28,1 34,1 43,8 48,3 63,8 72,5 87,5 88,3
9,5 8 0 8 3 7 0 8 8
10, 28,1 37,5 45,5 52,1 61,2 68,9 77,8 90,2
5 8 3 8 0 4 0 8 3
10, 28,1 35,1 38,8 44,3 58,9 70,2 82,1 91,0
5 8 8 9 5 8 3 5 0
11, 25,3 25,8 37,7 45,0 53,7 67,4 77,8 89,9
5 2 2 8 0 2 8 0 9
11, 25,3 31,3 39,4 50,3 61,2 73,1 85,3 83,2
5 2 0 8 3 4 0 3 7

Figura Nº A-1-A: Porcentaje de degradación de cianuro

con 10 ppm de cianuro en la solución.

Tabla Nº A-1-B: Porcentaje de degradación de cianuro con 10 ppm de

cianuro en la solución

Concentración de Cianuro: 10 ppm

Días de adaptación : % de degradación
pH 7 14 21 28 35 50 60 75
28, 33, 42, 47, 65, 75, 86, 86,
9,5 18 45 69 57 49 15 73 24
10, 28, 36, 42, 48, 60, 69, 80, 90,
5 18 36 24 23 11 57 02 62
11, 25, 28, 38, 47, 57, 70, 81, 86,
5 32 56 63 67 48 29 57 63

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 5

Aspergillus sp. 1
 Figura Nº A-1-B: Porcentaje de degradación de
cianuro con 10 ppm de cianuro en la solución.

Tabla Nº 2-B-A: Porcentaje de degradación de

cianuro con 100 ppm de cianuro en la solución

Concentración de Cianuro: 100 ppm

Días de adaptación : % de degradación
pH 7 14 21 28 35 50 60
43,1 54,5 66,6 73,5 82,1 81,0 88,3
9,5 8 4 7 8 5 9 3
38,4 48,3 58,4 68,7 77,8 88,8 94,8
9,5 3 2 8 8 3 5 7
28,1 50,5 45,8 50,5 63,8 73,4 91,0
10,5 8 5 5 0 7 0 0
30,2 30,2 35,4 40,5 55,4 68,7 88,8
10,5 4 4 0 5 0 8 5
23,9 23,8 30,2 39,4 44,4 80,2 85,3
11,5 5 5 4 3 4 4 3
18,4 28,1 30,2 40,5 48,5 58,3 80,5
11,5 3 8 4 5 0 8 8

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 5

Aspergillus sp. 2
 Figura Nº A-2-A: Porcentaje de degradación de
cianuro con 10 ppm de cianuro en la solución.

Tabla Nº A-2-B: Porcentaje de degradación de cianuro

con 100 ppm de cianuro en la solución

Concentración de Cianuro: 100 ppm

Días de adaptación : % de degradación
pH 7 14 21 28 35 50 60
40,80 62,57 84,9
9,5 5 51,43 5 71,18 79,99 7 91,6
10, 40,39 40,62 45,52 59,63 71,0 89,92
5 29,21 5 5 5 5 9 5
11, 26,01 69,3 82,95
5 21,19 5 30,24 39,99 46,47 1 5

Figura Nº A-2-B: Porcentaje de degradación de cianuro

con 10 ppm de cianuro en la solución.

Tabla Nº A-3: Cuadro de Datos para diseño experimental

pH
9.5 10.5 11.5

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 5

Aspergillus sp. 3
 Tiemp
o Concentración de hongos, esperas/ml
Horas 104 105 106 104 105 106 104 105 106
0
8
16
24
32
40
48
56
64
72
80
88
96
104
112
120
128

Tratamiento Biológico de Relaves Auríferos en función de su pH y Concentración de 5

Aspergillus sp. 4