CULTIVO IN VITRO Y ESTABLECMIENTO DE YEMAS DE ROSA (rosa spp) .

Alulema, Valeria; Peralta Gabriela. Entregado el 21 de Diciembre del 2010.

Escuela Politécnica del Ejército.

Ingeniería en Biotecnología.

Resumen.

En el presente trabajo se realizó el cultivo in vitro de yemas de rosa (Rosa spp) para el posterior estudio
de el cultivo de las mismas. El método in vitro utilizado durante este trabajo se ha desarrollado a partir de
explantes de tallo de aproximadamente dos centímetros de longitud con yema, desinfectados con
detergente, solución de hipoclorito de sodio y alcohol para que posteriormente sean cultivados en un
medio MS enriquecido con BAP y AIA.
La diferenciación final del explante se logró llegando a producir indicios de brotes en los explantes
sembrados en la mayoría de casos sin contaminación.

Palabras clave: yemas, AIA, BAP, rosa.

hojas inmaduras o primordios foliares. La yema

Introducción.
Los rosales (Rosa spp.) son un tipo de arbustos
espinosos, llenos de flores. Son los
representantes más importantes de la familia de
las rosáceas (Linares, 2004)..
Existen aproximadamente 100 especies de
rosales silvestres, provenientes de áreas
templadas del Hemisferio Norte. Gran parte de
las especies de rosa se cultivan para ser
ornamentales por su llamativa flor: la rosa; pero
también para la extracción de aceite esencial,
usos gastronómicos y medicinales (Linares,
2004)..
Actualmente, las variedades comerciales de rosa
son híbridos de especies de rosa desaparecidas,
existe una enorme variedad de cultivares de
rosas y cada año aparecen nuevos (Linares,
2004).
Las especies progenitoras mayormente
implicadas en los cultivares son: R. moschata,
R. gallica, R. damascena, R. wichuraiana, R.
californica y R. rugosa. Los nuevos productores
de rosas han mejorado el tamaño y variado los
colores, obteniendo flores grandes y atrayentes
con distintos niveles de aroma (Valle, 2008)..
Las estructuras encargadas del crecimiento del
tallo son las yemas, que también producen hojas
y ramificaciones. La yema es el extremo joven
de un vástago y del meristema apical, lleva
situada en el extremo del eje es la yema
terminal. Las que se encuentran en la unión de
las hojas con el tallo son las yemas axilares
(Valle, 2008).
El explante más usado para los procesos de
propagación in vitro son las yemas vegetativas
de las plantas (Castillo, 2004).
La propagación de yemas es el método más
empleado a nivel comercial, éstas presentan
mayor longitud y más tejido nodal en la base,
disminuyendo así las pérdidas debidas a
enfermedades. Para el injerto de yema el patrón
más común es Rosa manetti y, ocasionalmente
R. odorata. En Nueva Zelanda se emplea R.
multiflora inermis y en zonas más frías como
Holanda, R. canina (Aguilera, 2004).
El objetivo de este trabajo, fue el
establecimiento de yemas en un medio MS
enriquecido con AIA y BAP.
Materiales y Métodos.
RECOLECCIÓN DEL MATERIAL
VEGETAL.
Se tomaron muestras de rosa aparentemente
sanas; a partir de la planta entera se procedió a
cortar las ramas en el laboratorio.
 [CULTIVO IN VITRO Y ESTABLECMIENTO DE
YEMAS DE ROSA (rosa spp) .] 21 de Diciembre del 2010
PREPARACIÓN DE LA SALA DE
SIEMBRA.
Se desinfectó el piso de la sala de siembra
utilizando desinfectante kalipto, se limpiaron las
cámaras de flujo laminar con papel toalla estéril
y alcohol al 90%. Se introdujo en la cámara
todo el material a utilizar en la siembra
(mecheros de alcohol, juego de pinzas y bisturí,
papel toalla estéril, plástico adherente, ligas,
botellas de agua estéril, vasos de precipitación
vacíos, alcohol y sablón), se encendió la luz UV
durante 15 minutos y finalmente se encendió el
flujo de las cámaras luego de apagar el UV.
DESINFECCIÓN.
Se cortaron entre los nudos de la rama de rosa
de manera que en cada corte se obtuvo una
yema.
Se lavaron las yemas en agua corriente s para
eliminar las impurezas más grandes. Se lavaron
la yemas en una solución al 2% de detergente
más tres gotas de tween en agitación durante 20
minutos.
Se enjuagaron las yemas dos veces con agua
destilada y una vez con agua estéril. Se
sumergieron las muestras en una solución de
cloro al 2,5 % con tres gotas de tween 20
durante 10 minutos en agitación.
Se lleva a la cámara y se coloca en una solución
de alcohola al 90% durante 10 segundos.
Finalmente se extrajo el explante de la solución
de alcoho y se enjuagó con agua estéril, se dejo
el explante en agua estéril.
SIEMBRA.
Se sacó el explante del agua estéril. Utilizando
las técnicas asépticas se realizaron dos cortes
transversales utilizando las pinzas y el bisturí,
uno al principio y otro al final del explante de
manera que se eliminen las partes quemadas por
el cloro.
Se sembró el explante en un frasco con medio
MS enriquecido con BAP y AIA de manera que
las yemas en cada explante sembrado queden
orientadas hacia la boca del frasco; se flameó la
boca del frasco y se selló el mismo con plástico
adherente y una liga. Se sembraron 2 frascos, 2
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explantes por frasco; se rotularon los frascos y
se incubaron en condiciones de oscuridad, se
observaron los resultados después de 7 y 14
días.
Resultados y Discusión.
Conclusiones.
Se obtuvo el desarrollo de las yemas a partir de
los explantes sembrados.
Se evidencia contaminación fúngica,lo tanto los
explantes que la presentan deben ser
descartados, debido a que no se puede eliminar
este tipo de contaminante.
Las yemas son una especie de tejido
meristemático, por lo que el porcentaje de
posible contaminación debido al explante
disminuye.
Es importante colocar las yemas en el medio en
el sentido correcto debido a que este puede ser u
factor que influye en el tiempo de desarrollo del
brote.
Bibliografía.
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En línea.
(http://beta1.indap.cl/Docs/Documento
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 Castillo, A. Propagación de plantas por
cultivo in vitro: una biotecnología que
nos acompaña hace mucho tiempo. En
línea
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 Linares, H. 2204. MANUAL DEL
PARTICIPANTE EL CULTIVO DEL
ROSAL. En línea
(http://www.sra.gob.mx/internet/infor
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 [CULTIVO IN VITRO Y ESTABLECMIENTO DE
YEMAS DE ROSA (rosa spp) .] 21 de Diciembre del 2010

as/manuales/Cultivo_rosal.pdf).
Consultado el 07 de junio de 2010.

 Valle, M. Mascorro, J. Gil, I., Iturriaga,

G. (2008). Regeneración Directa In
vitro de Crisantemo, Dendranthema X
grandiflorum Kitan, a Partir de
Segmentos de Tallo. Universidad y
Ciencia.

Anexos.

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