LABORATORIO N 17

FROTE PERIFRICO
Dra. Sylvia del Carmen Gonzlez Ortiz

INTRODUCCIN El Frote Perifrico, es un mtodo de laboratorio que se utiliza para el estudio de las caractersticas citolgicas de las clulas de la sangre. Se define como FROTE, FROTIS o EXTENDIDO, a la preparacin microscpica delgada y transparente, extendida entre dos cristales, obtenida de un lquido espeso o tejido semilquido o pastoso (sangre, secreciones, exudados, etc.) La preparacin y tincin de un Extendido o Frote de sangre o mdula sea, es una tcnica fundamental en hematologa. Debe exigirse una excelente calidad ya que de los datos que se obtengan de este estudio, depender la conducta a seguir con un determinado paciente. No pueden aceptarse resultados mediocres. Los frotis pueden hacerse de dos formas: a) sobre Porta-objetos y b) sobre Cubre-objetos (ver figuras 1 y 2). La tcnica se facilita ms utilizando cubre-objetos. No obstante, se prefieren los porta-objetos por las siguientes razones: 1. Son fciles de manipular. 2. Se rompen menos. 3. Se pueden rotular fcilmente. 4. No requieren montaje y pueden archivarse de inmediato. Cualquiera de los tipos de laminilla que se utilice, debe estar perfectamente limpia, sin grasa y seca. Despus de realizado el extendido se deja secar al aire. El tiempo y la forma de hacerlo, depender de la tincin a utilizar. El primero en realizar coloraciones de frotis sanguneos fue Paul Ehrlich, con colorantes simples como la anilina. Posteriormente fue utilizando mezclas de colorantes cidos-bsicos y luego lleg a su famoso colorante tri-cido. Jenner tambin aport un colorante que lleva su nombre. Romanowsky ensay otras combinaciones de colorantes, de los cuales modernamente se han hecho modificaciones como la coloracin de Wright y la de Leishman que son semejantes, en principio, al mtodo de Romanowsky. Tambin se han hecho combinaciones de stas. Actualmente son muy utilizadas la coloracin de Wright, Giemsa, Leishman y otras. La coloracin que estudiaremos hoy es la de Wright. GUIA DE ESTUDIO: 1. Cul es la clula sangunea ms numerosa en un frote perifrico normal? 2. Cuando se estudia un frote perifrico, qu caractersticas citolgicas deben observarse en un eritrocito? 3. Defina qu es un Reticulocito y cmo se interpreta cuando aparece en un frote perifrico. 4. Cules son las caractersticas morfolgicas del ncleo de un Neutrfilo maduro? 5. Cmo se denominan las formas inmaduras del Neutrfilo, y cmo se interpretan en clnica?

6. Describa brevemente las caractersticas citolgicas de un Linfocito observado en un frote. 7. Explique a qu se le denomina Serie Granuloctica. 8. A partir de qu clula se origina el Monocito? 9. Cules son las caractersticas distintivas de un Eosinfilo y un Basfilo con la tincin de Wright? 10. Cite los nombres de las tinciones ms utilizadas en el estudio de frotis de sangre. 11. Ponga el nombre de las estructuras que se le indican en el esquema.

Fig. 1. Tcnica para la preparacin de frotis en portaobjetos.

Fig. 2. Mtodo para preparar frotis de sangre en cubre-objetos.

Cuadro sanguneo normal.

Realice su dibujo en el siguiente espacio:

HOJA DE DESCRIPCIN

DESCRIPCIN DEL EXAMEN DE SANGRE PERIFRICA. (FROTE PERIFRICO)

Dr. Orlando Rodas Pernillo.

El examen del extendido de sangre es una parte importante de la evaluacin hematolgica. La tincin que se observa es la de Wright, la cual es una solucin de eosina y una mezcla compleja de tiaminas, que incluyen el azul de metileno, azur B y otros derivados. Las clulas observadas en el frote perifrico y sus caractersticas se mencionan a continuacin. 1. LEUCOCITOS a) Leucocitos granulosos i. Neutrfilo ii. Eosinfilo iii. Basfilo. b) Leucocitos no granulosos i. Linfocitos ii. Monolitos. -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1. LEUCOCITOS A ) Leucocitos Granulosos (Polimorfonucleares) i. NEUTROFILOS: 1. Son clulas que tienen un dimetro medio de 12 micrmetros . 2. El ncleo es lobulado, se tie intensamente, es irregular y muchas veces asume formas comparables a letras como E, Z y S. Los lbulos son segmentos de material nuclear conectados por delicados filamentos de cromatina., a) Neutrfilo Segmentado: Tiene por lo menos dos de sus lbulos separados por el fila mento de cromatina. b) Neutrfilo en Banda: Tiene una banda de material nuclear ms gruesa que un filamento de cromatina, que conecta los lbulos y presenta un ncleo en forma de U, de espesor uniforme. 3. El citoplasma en s mismo es incoloro, est totalmente lleno de grnulos de 0.2 a 0.3 micrmetros, que adoptan un color entre marrn y rosado con la tincin de Wright. Aproximadamente las dos terceras partes de stos son grnulos especficos y una tercera parte son grnulos azurfilos. ii. EOSINFILOS. 1. Tienen un dimetro medio de 13 micrmetros

2. Su citoplasma contiene grnulos de mayores tamaos

que los del Neutrfilo, grandes, redondos, que se tien de color rojo brillante. 3. El ncleo tiene dos segmentos conectados, rara vez son ms de tres. iii. BASFILOS. 1. Miden de 10 a 12 micrmetros de dimetro. 2. El ncleo ocupa la mitad de la clula, son forma segmentada o irregular. 3. El ncleo es plido y suele estar oculto por grnulos grandes, oscuros de color azul, que se encuentran en el citoplasma. B ) Leucocitos no granulosos (Mononucleares) i. LINFOCITOS: 1. Son clulas mononucleadas que carecen de grnulos citoplasmticos especficos. 2. Son las clulas ms pequeas midiendo entre 6 a 10 micrmetros. 3. Presentan un ncleo nico, redondo, bien definido, pu diendo tener indentaciones. Contiene grumos de cromatina, teidos de color oscuro. En la periferia del ncleo la cromatina se condensa. 4. El citoplasma se tie de color azul, exceptuando una zona perinuclear clara. ii. MONOCITOS: 1. Es la clula de mayor tamao en la sangre normal, midiendo entre 14 a 20 micrmetros. 2. Contiene un nico ncleo parcialmente lobulado y fuertemente indentado o en forma de herradura o reniforme. 3. El citoplasma es abundante, de color azul grisceo y presenta un aspecto de vidrio esmerilado. 2. ERITROCITOS: 1. Son clulas anucleadas, tienen forma de disco bicncavo con un dimetro de 7.2 micrmetros y un grosor de 2.1 mi crmetros cerca de su borde. 2. Por su alta concentracin de hemoglobina se tien de rojo. 3. Son las clulas ms abundantes en el frote perifrico.