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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
BIOMETRIA HEMATICA
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
LA BIOMETRIA ES UNA PRUEBA DE LABORATORIO QUE EXAMINA DE FORMA INTEGRAL LAS SERIES
ROJA: los eritrocitos y su contenido de Hb BLANCA: los leucocitos PLAQUETARIA: Plaquetas
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
CUANTITATIVOS O NUMERICOS
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Medida de magnitudes
n de hemates, leucocitos,...
cantidad de Hb
ndices eritrocitarios
de la serie roja
de los leucocitos
de las plaquetas
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Datos numricos
N de eritrocitos
Hemoglobina Hematocrito
EXAMEN MORFOLOGICO
VCM-HCM-CHCM
RDW-HDW Reticulocitos
Leucocitos
Frmula Leucocitos Plaquetas
INTERPRETACION
Subp. Linfocitarias
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
VALIDACION TECNICA
Una vez obtenidos los datos de los contadores celulares y examinadas las extensiones, debemos actuar como sigue:
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Escalonamiento de las alertas despus de la validacin tcnica
VALORES DE ALARMA: Obligan a repetir las pruebas para su verificacin tcnica antes de la validacin final VALORES CRITICOS: Tras cumplir los requisitos anteriores, se deben de comunicar los resultados directamente al hematlogo o al mdico clnico responsable del paciente
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
PLAQUETAS NEUTROFILO
NEUTROFILO
ERITROCITOS
EXAMEN MORFOLOGICO: ES CONVENIENTE ADQUIRIR LA COSTUMBRE DE REVISAR LOS ERITROCITOS Y LAS PLAQUETAS DE FORMA SIMULTANEA A LA REALIZACION DE LA FORMULA LEUCOCITARIA 10
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NEUTROFILO LINFOCITO
SP NORMAL
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Slo se deben emplear portaobjetos limpios y desengrasados Hay que evitar tocar con los dedos la zona en que se va a imprimir la extensin de sangre Por lo general los portas nuevos no presentan un grado idneo de limpieza Es muy til la ebullicin previa en un agente tensioactivo, y un enjuague con abundante agua destilada
No es recomendable el reciclaje de portaobjetos usados
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CABEZA
COLA
CUERPO
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La extensin de la gota de sangre no debe tocar los bordes del portaobjeto, y debe quedar bien centrada en el mismo
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La zona donde se realiza el estudio morfolgico debe evitar las aglomeraciones celulares del centro de la extensin, y las reas finales de la cola donde slo quedan clulas grandes
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LA DESCRIPCION MORFOLOGICA
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Con una extensin tcnicamente correcta puede plantearse la necesidad de DESCRIBIR determinadas clulas que se prestan a duda en su identificacin. qu datos debemos recabar?
como los hemos de expresar?
PALUDISMO (VIVAX)
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Vamos a recordar la DESCRIPCION DE UNA CELULA, y a definir algunos de sus aspectos, cmo: Caractersticas del NUCLEO Caractersticas del CITOPLASMA
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COLORACION CELULAR Cromatina nuclear: debe su color violeta oscuro al Azul de Metileno (AM) y sus derivados que tien el ADN, y el rojo a la eosina que se fija a las nucleoprotenas Basofilia citoplasmtica: el ARNm y ARNr tienen gran afinidad por el AM Eosinofilia (acidofilia) citoplasmtica: se origina por la presencia de protenas con predominio de aminocidos con carga bsica (por ej. IgA)
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COLORACION CELULAR
Grnulos azurfilos (linfocitos, neutrfilos inmaduros, etc): adquieren su color rojo del Azur B derivado del AM (basofilia)
Grnulos neutrfilos: toman el tono oscuro del AM y cierto tinte violeta de la eosina
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COLORACION CELULAR Grnulos del basfilo: su alto contenido en heparina (muy cida) atrae intensamente al AM (muy alcalino) Vacuolas: suelen estar vacas (los alcoholes de la fijacin disuelven las grasas) o pueden mostrar imgenes de fagocitosis
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7-8 m
12-14 m
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RELACION NUCLEO/CITOPLASMA
Describe la proporcin entre el espacio que ocupa el ncleo y la extensin del citoplasma visible
50% citoplasma BLASTO Relacin N/C elevada = 1:1 50% ncleo
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CARACTERISTICAS DEL NUCLEO
Forma: regular/irregular, redondeada, con o sin hendiduras, reniforme, grado de lobulacin, ...
Densidad de la cromatina: laxa, ligeramente condensada, densa, en rueda de carro,... Presencia de nuclolos y su nmero
MONOCITO: ncleo reniforme
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Una cromatina laxa nos indica que la clula es joven El hallazgo de nuclolos apunta an mayor inmadurez
La observacin tiene inters cuando se comprueba repetidamente (>3-5 %) Cromatina laxa + nuclolos + relacin N/C 1:1 viene a ser sinnimo de blastos malignos
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CARACTERISTICAS DEL CITOPLASMA
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Una gran basofilia en el citoplasma nos indica que es una clula con gran actividad de fabricacin de protenas
Cuando se observan fagocitos con vacuolas o huecos por desgranulacin es probable que exista una estimulacin de origen sptico
BASOFILIA DIFUSA EN EL CITOPLASMA DE UN LINFOCITO ACTIVADO 27
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CARACTERISTICAS DE LA GRANULACION
Grosor
Distribucin
Dispersa.... ej. granulocitos Irregular.... ej. linfocitos Color Acidfila/Basfila (azurfila)/Mixta 28
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Con los datos morfolgicos expresados debemos de catalogar bsicamente: La serie roja
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7-8 m
7-8 m
BASOFILO NORMAL
Dimetro 15-17 m
Ncleo parcialmente cubierto por la granulacin basfila Citoplasma rosado
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7-8 m
7-8 m
NEUTROFILO HIPERSEGMENTADO (anormal) Dimetro 20-21 m Exceso de lobulacin Cromatina densa Grnulos finos y escasos
EOSINOFILO (anormal)
Ncleo lobulado, cromatina condensada Parcialmente desgranulado (no vacuolado) Bordes netos Tamao unas 15 a 16 m Relacin N/C 1:3
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7-8 m
7-8 m
CEL. PLASMATICA
Tamao 17-18 micras
LINFOCITO NORMAL
Dimetro 11 a 12 m
Ncleo ovalado
Cromatina finamente densa
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7-8 m
MONOCITOS Ncleos irregulares Cromatina densa Citoplasma vacuolado Bordes irregulares No basofilia Relacin N/C 3:4
LINFOCITO (HCL) Dimetro 14-16 m Ncleo hendido Cromatina fina Sin basofilia Bordes deshilachados Relacin N/C 2:3
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7-8 m
7-8 m
Citoplasma amplio
Basofilia difusa moderada
Bordes netos
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7-8 m 7-8 m
Dimetro 7 m
Cromatina densa
Citoplasma no visible
Relacin N/C 1:1
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7-8 m 7-8 m
LINFOCITO NORMAL Dimetro 14-15 m Ncleo redondeado excntrico Cromatina densa Sin basofilia Escasos grnulos Relacin N/C 2:3
Dimetro 9 m
Ncleo hendido
Cromatina densa
Citoplasma no visible
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MONOCITO
Ncleo arrionado
SEGMENTADO NEUTROF.
Ncleo una estenosis
Cromatina condensada
Granulacin evidente
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
SIEMPRE QUE SE REALIZA UN EXAMEN AL MICROSCOPIO CONVIENE EMPLEAR UNA PLANIFICACION SISTEMATICA
1 Revisin general con objetivo 10x: micro agregados 2 Examen de hemates y leucocitos con objetivo 10x 3 Evaluacin de los leucocitos con 100x: ideal para la frmula leucocitaria
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
BASOFILO
Debe quedar claro que cuando se examina una extensin al microscopio, no solamente se observan y recuentan los leucocitos, sino que se debe atender a los aspectos cualitativos y cuantitativos de los eritrocitos y de las plaquetas
HIPOCROMIA
ANEMIA FERROPENICA 39
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ASPECTOS GENERALES
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ERITROCITOS ANORMALES
La revisin con el microscopio pretende comprobar si existen alteraciones morfolgicas que nos orienten sobre posibles patologas de la ERITROPOYESIS
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
El principal trastorno de la S. Roja es la ANEMIA, que normalmente se tipifica bajo los siguientes aspectos:
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
La ANEMIA se define como una disminucin de la cifra de hemoglobina en referencia a los valores considerados normales para una determinada poblacin:
grupo racial grupos por edades
localizacin geogrfica
otros factores
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
VALOR DE ALARMA
Se considera como tal el hallazgo inicial de una cifra de Hemoglobina igual o inferior a 8 g/dl Sin embargo este dato est siempre matizado por el VOLUMEN (VCM)y por el CONTENIDO DE Hb (HCM)de los eritrocitos Las manifestaciones clnicas de estas anemias pueden ser muy distintas, variando la tolerancia en los enfermos
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
Eritrocitos (millones)
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
El VOLUMEN DE LOS ERITROCITOS (VCM) permite distinguir entre anemias Microcticas Normocticas Macrocticas
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
Sin embargo esta distincin NO se puede realizar con el examen morfolgico; en todo caso podremos diferenciar:
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
ANISOCITOSIS
En la imagen podemos observar como todos los hemates son redondeados, aunque algunos son mayores, y aparece uno grande en el centro (flecha)
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA POIQUILOCITOSIS
Algunos eritrocitos son redondeados, mientras que otros tienen los bordes dentados o son espiculados
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LA SERIE ROJA
La intensidad de la coloracin al microscopio se suelen correlacionar bien con las cifras de HCM aportadas por los auto analizadores
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
Podremos observar individuos en los que se combinan hemates con distinta coloracin: ANISOCROMIA: diferente intensidad POLICROMASIA: diferente color
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA Hipocromia: HCM <27 picogramos
Hb (g/dl)x10
HCM = picogramos Eritrocitos (millones)
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
Anemia ferropnica transfundida: ANISOCROMIA 54 Eritrocitos normales (rojo) junto a hipocrmicos (verde)
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
LINFOCITO
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
Cuando vemos a los hemates apilados en forma de pila de monedas (FENMENO DE ROULEAUX) debemos saber que se han producido alteraciones fisicoqumicas en los productos del plasma sanguneo
Esto ocurre frecuentemente en las infecciones, pero tambin en los trastornos metablicos (ej. diabetes) o neoplsicos (ej. Mieloma Mltiple)
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LA SERIE ROJA
El examen cuidadoso con el objetivo de x100 permite visualizar inclusiones intra eritrocitarias como
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LA SERIE ROJA
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LA SERIE ROJA
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LA SERIE ROJA
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
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E. ORTOCROMATICOS
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EXAMEN DE LA SERIE ROJA
ERITROBLASTOS
LINFOCITO
Resto celular
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
La demanda clnica ms comn sobre los leucocitos es la FORMULA o recuento diferencial de 100 elementos, de los que se deducen unas cifras absolutas.
Los AUTO ANALIZADORES actuales ofrecen una alta fiabilidad, pero fallan al cuantificar la presencia de formas jvenes, de eritroblastos, de linfocitos estimulados, de monocitos o de blastos malignos.
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS Una vez que se dispone de la frmula leucocitaria en cifras absolutas, se procede al examen microscpico
En general, no es conveniente emitir ningn juicio diagnstico al examinar una extensin sin disponer de los datos de LA BIOMETRIA y sin referencias clnicas
N. SEGMENTADOS NORMALES 69
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
NEUTROFILIA NEUTROPENIA DESVIAC. IZQU. LINFOCITOSIS MONOCITOSIS FORMAS ATIPICAS F. ACTIVADAS BLASTOS + ERITROBLASTOS + Valorar serie roja y plaquetas
LINFOCITO MADURO NEUTROFILO SEGMENTADO
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
NEUTROFILO SEGMENTADO
LINFOCITO MONOCITO
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
NEUTROFILO HIPERSEGMENTADO
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
MONOCITOS ACTIVADOS
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
ERITROCITO > HCM ERITROCITOS NORMALES
NEUTROFILO DESGRANULADO
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EXAMEN DE LOS LEUCOCITOS
UNA LINFOCITOSIS COMO LA MOSTRADA EN LA IMAGEN TIENE UN SIGNIFICADO TOTALMENTE DISTINTO SI SE TRATA DE UN NIO O DE UN ANCIANO
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ASPECTOS GENERALES
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
Se debe emplear una sistemtica para evaluar las plaquetas en LA BIOMETRIA. La CANTIDAD expresada en el contador celular y su VPM Si procede, se deben cuantificar al microscopio
Con el objetivo de x10 se revisa rpidamente la extensin para descartar micro-agregados MORFOLOGIA: LA distribucin y contenido granular ha de ser ms o menos homognea Se determina si el TAMAO es regular o existen formas gigantes
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EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
VALORES DE ALARMA:
Hay que revisar morfolgicamente las extensiones de TODOS aquellos pacientes que posean menos de 100x109/L plaquetas en los recuentos (verificados en los auto analizadores)
Las mismas medidas se recomiendan cuando el recuento es superior a 600x109/L
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
Cuanto se constata por primera vez una PLAQUETOPENIA, es necesario complementar su estudio con unas pruebas bsicas de coagulacin: TP y TTPa, para comprobar si la citopenia es aislada o se encuentra en el contexto de un trastorno ms amplio de la Hemostasia Si adems la citopenia es marcada (<50x...) puede ser conveniente realizar un tiempo de hemorragia
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
Cuando los recuentos automticos muestran una plaquetopenia severa, y sin embargo se observan MICROAGREGADOS (como el de la imagen) se puede afirmar que la cifra real es superior a 100.000/mm3 (>100x109/L)
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
En caso de que encontremos una trombocitosis >600x109/L debemos tomar las siguientes medidas
Verificar el resultado en el contador celular y luego en el microscopio. Diluir con fisiolgico la muestra de sangre al o al y pasarla nuevamente por el auto analizador
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
Anemia ferropnica
Pacientes con hemorragias Sujetos en postoperatorio de esplenectoma
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EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
Paciente con hemorragia: se observan plaquetas grandes Macroplaquetas (MEGATROMBOCITOS) en las extensiones celulares. En el centro hay una con aspecto de PSEUDONUCLEO
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EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
MONOCITO
En situaciones de estrs orgnico como las infecciones o las hemorragias pueden hallarse PLAQUETAS GRANDES
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EXAMEN DE LAS PLAQUETAS
HIALOMERO GRANULOMERO
PLAQUETA DISMORFICA
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DESCRIPCIONES MORFOLOGICAS
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1 Tamao (dimetro) aproximado en micras (m) 2 Forma del ncleo: redondeado, reniforme, lobulado,... 3 Densidad de la cromatina: laxa, condensada,... 4 Presencia o no de nuclolos 5 Amplitud del citoplasma y coloracin; bordes 6 Contenido: grnulos, vacuolas,... 7 Relacin ncleo/citoplasma [N/C]
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Fig. 1 Banda
Fig. 2 Monocito
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Fig. 3 Eosinfilo
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Fig. 6 Blasto
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Fig. 7 Plaqueta
Fig. 8 Linfocito
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Fig. 9 Eritroblasto
Fig. 10 Linfocito
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Fig. 12 N. Pelger
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Fig. 13 Plasmocito
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Fig. 17 Monocito
Fig. 18 Banda
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LA BIOMETRIA AL MICROSCOPIO
Fig. 19 Prolinfocito
Fig. 20 Granulocito
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