Signal Transduction Section 

of Cell Biology

Signaling by G Proteins:
–– Heterotrimeric G Proteins
–– Ras Super­family Small GTPases

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company

Cell­to­cell communication by extracellular 
signaling usually involves six steps

❚ (1) synthesis of the signaling molecule by the signaling cell
❚ (2) release of the signaling molecule by the signaling cell
❚ (3) transport of the signal to the target cell
❚ (4) detection of the signal by a specific receptor protein
❚ (5) a change in cellular metabolism, function, or development 
triggered by the receptor­signal complex
❚ (6) removal of the signal, which usually terminates the 
cellular response

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Signaling molecules operate over various 
distances in animals

Receptor proteins exhibit ligand­binding and effector specificity
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Hormones can be classed based on their 
solubility and receptor location

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Cell­surface receptors belong to four 
major classes

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Cell­surface receptors belong to four 
major classes

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Signaling by Heterotrimeric G Proteins

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 History of Transmembrane Signaling

❚ (1) Earl W. Sutherland’s Second Messenger Hypothesis
❚ (2) Fischer and Kreb’s Reversible Protein Phosphorylation 
as a Biological Regulatory Mechanism
❚ (3) Martin Rodbell’s Transducer Model
❚ (4) Alfred G. Gilman’s Discovery of G Proteins

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Earl W. Sutherland’s 
Second Messenger Hypothesis
Varied 
Stimuli
5’­AMP

Endocrine
    gland Adenyl           cAMP or Y
 cyclase  (second messenger(s))
     or 
      X
      Hormone
Enzymes, permeability, etc. ...
(first messenger)

Physiological responses
           including
Inactivated hormone
Steroids, Thyroid hormones, etc.
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Fischer and Krebs’ 
Reversible Protein Phosphorylation
Adrenaline

Receptor
cyclase

      ATP cAMP

PKA
Nonactivated  Activated 
Phosphorylase  Phosphorylase 
kinase kinase

Phosphorylase b Phosphorylase a
     (inactive)         (active)

Glycogen + Pi Glucose­1­P
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Rodbell’s 
Transducer Model

GTP Mg 2+
ATP
Hormone

Discriminator Transducer Amplifier

cAMP
GDP

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Gilman’s Purification of G Proteins
And G Protein Cycle

GDP
GTP

Gα­GDP.βγ Gα­GTP + βγ

Gα­GDP Effectors
RGS
βγ Effectors
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Pi
 G protein­coupled receptors

❚ Many different mammalian cell­surface receptors are 
coupled to a trimeric signal­transducing G protein
❚ Ligand binding activates the receptor, which activates the G 
protein, which activates an effector enzyme to generate an 
intracellular second messenger
❚ All G protein­coupled receptors (GPCRs) contain 7 
membrane­spanning regions with their N­terminus on the 
exoplasmic face and C­terminus on the cytosolic face
❚ GPCRs are involved in a range of signaling pathways, 
including light detection, odorant detection, and detection of 
certain hormones and neurotransmitters
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
G protein­coupled receptors

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 G Protein­coupled Receptors
Group I olfactory R, adenosine R, cannabinoid R, ......
Group II serotonin R, adrenergic R, dopamine R,
histamine R, muscarinic R, ......
Group III rhodopsins, endothelin R, thyrotropin
Family A releasing hormone R, ......
Group IV bradykinin R, ......
Group V angiotensin R, chemokine R, thrombin R, ......
Group VI melatonin R, ......
Group I calcitonin R, ......
Group II parathyroid hormone/parathyroid­related­peptide R
Family B Group III glucagon R, growth hormone releasing
hormone R, pituitary adenylyl cyclase
GPCR activating peptide R, ......
Group IV latrotoxin R, ......
Group I metabotropic glutamate R, ......
Family C Group II calcium R,  ......
Group III GABA­B R,  ......
Family D STE2 R,  ......
Family E STE3 R,  ......
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Family F cAMP R,  ......
Structure of GPCR and G Protein

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Structure of GPCR and G Protein

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Demonstration of functional domains in G 
protein­coupled receptors

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Heterotrimeric G Proteins

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 G Protein α Subunits
αs αs
α olf
α i1
α i3
α i2
α oA
α oB
αi
α t1
α t2
αg
αz
αq
α 11
α 14 αq
α 15
α 16
α 12
α 12
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
α 13
60 80 100
% amino acid identity
Gs:   linking β­adrenergic receptors and 
adenylyl cyclase 

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Some bacterial toxins irreversibly modify G 
proteins

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
The structure of adenylyl cyclase

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
The structure of Gsα∙GTP complexed with two 
fragments from the adenylyl cyclase catalytic domain

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Kinase cascades permit multienzyme 
regulation and amplify hormone signals

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Cellular responses to cAMP vary among 
different cell types

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Gt (Transducin):  Visual Transduction
Light

Receptor αt β Cyclic nucleotide­
γ
(rhodopsin) G protein gated cation
(transducin) channel

cGMP phosphodiesterase Membrane
hyperpolarization

cGMP              5'­GMP

Lower cGMP Sense of light

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Visual Transduction

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Gi:  Inhibiting Certain Isotypes of Adenylyl 
Cyclases

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Gq:  Stimulating Phospholipase C β

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Hormone­induced release of Ca2+ from the ER 
is mediated by IP3

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
IP3­induced Ca2+ increases are used to trigger 
various responses in different cells

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
The effects of many hormones are 
mediated by second messengers

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 Effector Enzymes Interacting Proteins

αs Adenylyl cyclases Calnuc, Tubulin

αolf Src tyrosine kinase
αi1 Adenylyl cyclases (I, V, VI) Rap1GAPII, Calnuc, Tubulin,
αi3 Pcp2, LGN, GRIN1, Eya2
αi2 Src tyrosine kinase
αoA Adenylyl cyclases (I) Rap1GAPII, Tubulin, Pcp2,
αoB ? LGN, GRIN1
αt1 cGMP-specific
αt2 phosphodiesterase
αg
αz Adenylyl cyclases (I, V, VI) Rap1GAP, GRIN1, Eya2
?
αq Phospholipase C-β (β1≥β3>β2)
α11 Tubulin
α14 Btk tyrosine kinase
α15 Phospholipase C-β (β1≥β3>β2)
α16 ?
α12 Btk tyrosine kinase Gap1 rasGAP
?
Cadherin
α13 Btk tyrosine kinase p115 RhoGEF/Lsc
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
60 80 100 ? Cadherin
Gβγ:  Regulation of certain effectors by Gβγ and 
various Gα ∙GTP complexes contributes to 
integration of cellular metabolism

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
Direct effectors of Gβγ

Enzymes
Adenylyl cyclases
Phospholipase C­β
PI3Kγ
     
     
GRK   
     
    
Btk 
     
 
Ion channels
    
 
  K+  (GIRK)
   Ca2+ (N, P/Q)
Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
 From plasma membrane to nucleus

❚ Many cellular responses induced by water­soluble 
hormones, growth factors, and neurotransmitters result from 
their effects on gene expression
❚ Such pathways usually involve activation of protein kinases 
that directly or indirectly phosphorylate specific transcription 
factors

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company
CREB links cAMP signals to transcription

Copyright (c) by W. H. Freeman and Company