Sie sind auf Seite 1von 5

DETERMINACIÓN DE COMPONENTES VOLÁTILES MAYORITARIOS EN BEBIDAS ALCOHÓLICAS Y AGUARDIENTES POR CROMATOGRAFÍA DE GASES EN COLUMNAS CAPILARES.

Autores: MC. Luisa Vega Bolaños Lic. José Antonio Arias Verdes Téc. Ramón Sersa Espinosa Ing. Roberto Rivero Pérez

RESUMEN

La determinación de componentes mayoritarios en las bebidas alcohólicas y aguardientes resulta de gran importancia para controlar la calidad de las mismas, garantizando que se cumplan las especificaciones de calidad de estos productos tanto para el consumo nacional como para la exportación. Se estandarizó el método de cromatografía de gases establecido en la NC 508:2007, utilizando una columna capilar de BP 20 de 30 metros de largo por 0.25 µm de espesor de película y 0.25 de diámetro interno. Se establecieron los tiempos de retención relativos para el acetaldehído, metanol, 1- propanol, 2-metil 1- propanol y para la suma del 2-metil 1- butanol y 3- metil 1- butanol. Las curvas de calibración de cada componente presentaron coeficientes de correlación lineal superiores a 0.99. Se establecieron los parámetros de integración y se utilizó el método del estándar interno para la cuantificación. La repetibilidad y la reproducibilidad fueron menores de 5 y 8% respectivamente.

INTRODUCCIÓN

Los componentes volátiles de las bebidas alcohólicas consisten en una amplia gama de compuestos que incluyen ácidos, alcoholes, aldehídos, y otras trazas de compuestos aromáticos. Estos compuestos se pueden generar en diferentes etapas de la elaboración de las bebidas alcohólicas, pero el grupo más voluminoso de compuestos volátiles se produce durante la etapa de la fermentación alcohólica (ésteres, alcoholes, aldehídos, ácidos, compuestos de azufre, etc). De estos compuestos, los alcoholes y los ésteres son los más importantes cuantitativamente (1,2,3) . Los alcoholes superiores tienen sobre el organismo un efecto narcótico muy

superior al del alcohol etílico. En los destilados se encuentran en proporciones muy bajas, por lo que fisiológicamente su efecto es moderado. Se forman algunos durante la fermentación alcohólica y otros como el 2-butanol se forma durante la conservación, por lo que es un elemento que distingue los

aguardientes de orujo de los de vinos

La formación del propanol es más compleja porque está ligada al metabolismo de las levaduras y así su concentración está correlacionada negativamente con las del ácido sulfhídrico 6) . A veces también puede formarse a partir del metabolismo de los azúcares. El butano proviene esencialmente de vías secundarias del metabolismo de los aminoácidos. En general, los factores que favorecen el crecimiento celular de las levaduras estimulan la producción de alcoholes superiores

(4,5) .

El contenido de alcoholes superiores es un condicionante de la calidad de las bebidas alcohólicas y depende de las técnicas de elaboración empleadas. La Cromatografía de Gases (GC) es una herramienta poderosa para el análisis de componentes volátiles mayoritarios. En general, se requiere una mínima preparación de la muestra y un tiempo corto para la obtención de resultados de alta confiabilidad (8,9) . El objetivo de este trabajo fue estandarizar la metodología para determinar los componentes volátiles mayoritarios en bebidas alcohólicas destiladas, aguardientes y alcohol etílico por cromatografía de gases.

MATERIALES Y METODOS

Para implementar el método se verificó la linealidad del detector de Ionización de Llama (FID) con respecto a la concentración de los diferentes alcoholes, se construyó una curva de calibración con 6 puntos por triplicado de la siguiente manera:

Las soluciones se prepararon a 20° C y se almacenaron a una temperatura menor de 5 °C y las pesadas se registraron con una precisión del orden de los 0.1 mg. La solución de la mezcla patrón se preparó pesando de forma individual los siguientes estándares en un frasco volumétrico de 100 mL conteniendo aproximadamente 60 mL de solución de etanol al 40 % v/v y completando hasta el aforo.

 

Volumen

Componente

(mL)

Metanol

0.25

1- propanol

0.75

2- metil -1-propanol

1.25

2- metil -1- butanol

0.90

3- metil -1- butanol

2.80

Acetaldehído

0.50

Para la preparación de las soluciones de la curva de calibración se pipetearon separadamente 0.5; 1.0; 1.5; 2.0; 4.0 y 6 mL de la solución de mezcla patrón en volumétricos de 100 mL conteniendo aproximadamente 50 mL de solución de etanol al 40 % v/v y se llevó al aforo. Las concentraciones en g/100 L se muestran en la siguiente tabla.

Componente

1

2

3

4

5

6

(0.5 mL)

(1 mL)

(1.5 mL)

(2 mL)

(4 mL)

(6 mL)

Metanol

0,976

1,952

2,928

3,904

5,856

7,808

1-propanol

3,112

6,224

9,336

12,448

18,672

24,896

2-metil-1-propanol

5,406

10,812

16,218

21,624

32,436

43,248

Alcohol isoamílico*

15.948

31,897

47,845

63,794

127,588

191,382

Acetaldehído

2,606

5,212

7,818

10,424

15,636

20,848

Se utilizó el método del Estándar Interno para la cuantificación de la concentración de cada componente y se preparó pesando 20 gramos de 1-Butanol para bebidas destiladas y alcohol etílico en un frasco volumétrico de 100 mL conteniendo aproximadamente 50 mL de solución de etanol al 40 % v/v, y se completo hasta el aforo, y para el aguardiente se pesaron 40 g del estándar interno y se procedió de la misma forma. Se utilizó un cromatógrafo de gases Shimadzu 2014 equipado con detector de ionización de llama y una columna capilar BP20 de 30 metros de largo, 0.25 µm de espesor de película y 0.25 mm de diámetro interno, la inyección se realizó en modo Split con una relación de 25:1 y una temperatura del inyector de 220 ºC, el programa de temperatura de la columna contó de una isoterma a 45 ºC durante 8 minutos y una rampa de 20 ºC/min hasta 150 ºC. A continuación se inicia otra rampa de 70 ºC/min hasta 220 ºC para eluir otros compuestos presentes en la muestra. El detector se mantiene a 300ºC durante todo el análisis. Para la identificación de los diferentes componentes se utilizó el tiempo de retención relativo al 1- butanol con un ancho de ventana ±3 segundos. Para el estudio de la proximidad de concordancia entre los resultados de mediciones sucesivas del mismo mensurando bajo las mismas condiciones de medición se inyectó una muestra de Tequila 10 veces y para el estudio de la reproducibilidad se procedió de la misma forma, pero en días sucesivos (10) . La adquisición de datos e integración de los picos se realizó utilizando el Software GC Solution y una interfase RS-232C para la comunicación con la estación cromatográfica. Para la evaluación estadística de los resultados de la repetibilidad y reproducibilidad se uso el programa Startgraph.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

En la figura se muestra un cromatógrama de la mezcla de alcoholes utilizada para evaluar la resolución y los tiempos de retención de cada uno de los componentes. Utilizando una columna de 60 m de largo y helio o hidrógeno como gas portador es posible separar los isómeros 2- metil 1- Butanol y 3- Metil 1- Butanol (11) .

hidrógeno como gas portador es posible separar los isómeros 2- met il 1- Butanol y 3-

Como se observa a continuación todas las curvas de calibración mostraron coeficientes de correlación lineal superiores a 0.99.

coeficientes de correlación li neal superiores a 0.99. El cromatógrama siguiente corresponde a la muestra de
coeficientes de correlación li neal superiores a 0.99. El cromatógrama siguiente corresponde a la muestra de
coeficientes de correlación li neal superiores a 0.99. El cromatógrama siguiente corresponde a la muestra de
coeficientes de correlación li neal superiores a 0.99. El cromatógrama siguiente corresponde a la muestra de
coeficientes de correlación li neal superiores a 0.99. El cromatógrama siguiente corresponde a la muestra de

El cromatógrama siguiente corresponde a la muestra de Tequila usada para el estudio de la repetibilidad y la tabla 1 muestra los resultados del estudio para los diferentes alcoholes en las 10 muestras evaluadas.

para los diferentes alcoholes en las 10 muestras evaluadas. Tabla 1. Resultado de la repetibilidad. Componente

Tabla 1. Resultado de la repetibilidad.

Componente

Área promedio

CV

(%)

Acetaldehído

1553,36

4.92

Metanol

16111,73

4,25

1-Propanol

6501,09

4,78

2-Metil-1-Propanol

5875,64

4,36

Mezcla de Isómeros

16680,55

4,48

Tabla 1. Resultado de la reproducibilidad.

Componente

Área promedio

CV

(%)

Acetaldehído

1571,45

7,93

Metanol

16002,64

7,03

1-Propanol

6901,09

6,65

2-Metil-1-Propanol

6084,73

7,36

Mezcla de Isómeros

16771,45

7,13

CONCLUSIONES

La metodología implementada es rápida, eficaz, confiable y puede ser aplicada para la determinación de compuestos volátiles de bebidas alcohólicas, aguardientes y alcohol etílico.

El uso del 1- Butanol como estándar interno y referencia para los tiempos de retención resultó adecuado.

BIBLIOGRAFIA

1. Eyda Otero et al. Calidad de varios rones cubanos. Rev. Cub. Alim. Y Nutr. 2001; 15(2):96100.

2. Instituto de Nutrición e Higiene de los Alimentos (INHA). 2005. Control sanitario de las aguas y bebidas (en línea). Consultado el 18 de marzo 2010. disponible en http://www.inha.sld.cu/vicedirecciones/aguasybebidas.htmPrado-

3. Ramírez, R.; Victor, Gonzáles-Álvarez, V.; Pelayo-Ortiz, C.; Casillas, N.; Estarrón, M.; Gómez-Hernández, E., 2005, Volatyl compounds during thermal process. International Journal of Food Science & Technology, Vo. 40, No 7, pp. 701-708(8).

4. Antonio, Luis, Miguel. 2003. Vinos y Enologias (en línea). Disponible en:

http://www.apoloybaco.com/Aguardientes.htm

5. Minakata, E.P.; Hernández, G.L.; Barba de la Rosa, A.; León Rodríguez, A., 2006, Characterization of volatile compounds of mezcal, an ethnic alcoholic beverage obtained from Agave salmiana. Journal Agriculture Food Chemistry, 54, 1337-1341.

6. Giudici, P. Zambonelli, C. Kunkee, RE.1993. Am. J. Enol. Vitic., 44, 17-2.

7. Henschke, PA., Jiranek, V. 1992. Wine, Microbiology and Biotechnology Harwood Academic Publishers. Sydney.

8. NC 508: 2007. Bebidas alcohólicas—Determinación de componentes volátiles mayoritarios en bebidas alcohólicas destiladas, aguardientes y alcohol etílico por cromatografía gas líquido.

9. Vallejo, C. y González, C., 1999, Identificación de los compuestos volátiles del tequila. Bebidas mexicanas, 8(4), 1-17.

10. NC TS: 2004 Guía para la validación de métodos de ensayo químicos para alimentos.

11. Supelco Chromatography 2001. Aplications Alcohols.