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A.

DESDE LUMINOL HISTORIA

BLUESTAR

FORENSE:

UNA

BREVE

Los primeros experimentos realizados con vistas a la utilizacin de luminol como una herramienta en las ciencias forenses se llevaron a cabo en 1937 por Specht, quien lo probado en una variedad de bases como el csped, ladrillos o piedras manchadas de sangre. En 1939, Proesher y Moody probado composicin Specht en animales y sangre humana. En 1951, Grodsky propuso una mezcla de polvos compuestos de luminol, carbonato de sodio, y perborato de sodio mezclado con agua destilada. Esto posteriormente se convirti en la frmula que se usa ms comnmente por los investigadores de hoy en da para detectar rastros de sangre en la escena de un crimen. Sin embargo, el uso de carbonato de sodio produce una reaccin lenta en el proceso de oxidacin de la hemoglobina. Por lo tanto, no es muy luminoso y de breve duracin solamente. Por otra parte, una vez que los agentes reactivos se disuelven en el agua, la vida de la solucin obtenida es muy corto. Esta frmula es muy inestable y es txica, debido a la presencia de perborato de sodio. En 1966, Weber propuso una composicin formada por luminol, hidrxido de sodio o hidrxido de potasio, el perxido de hidrgeno diluido en agua destilada. La solucin as obtenida debe mantenerse en un lugar fresco y protegido de la luz directa. Su vida es breve. La reaccin luminosa obtenida por esta composicin se pueden fotografiar en la oscuridad total, o filmado con una cmara de visin nocturna. En 2000, Jean-Marc Lefebvre-Despeaux, presidente de BLUESTAR, acusado de Loic Blum, Ph.D., profesor de bioqumica en la Universidad Claude Bernard-Lyon y director del laboratorio de ingeniera enzimtica y biomolecular (EMB2-UMR 5013 CNRS -UCBL) para encontrar una nueva frmula que se luminol basado y eliminar a todos los numerosos inconvenientes. Como resultado, Blum descubri esta nueva frmula que se llam posteriormente BLUESTAR FORENSE. B. LA QUMICA DE BLUESTAR FORENSE

Una nueva frmula basada en luminol, BLUESTAR FORENSE es un agente de la visualizacin de la sangre, sobre la base de luminol, una molcula que es bien conocida entre los criminalistas forenses. La constitucin de BLUESTAR FORENSE ha hecho posible eliminar elementos inconvenientes asociados con otros agentes reactivo luminol basado. 1. Cmo reacciona el luminol? Luminol (3-Aminophthalhydrazide) fue sintetizado por primera vez en 1853. Su propiedad de producir una reaccin quimioluminiscente en la solucin de base en la presencia de un agente oxidante en contacto con la sangre se observ por primera vez por Albrecht en 1928. Los componentes principales capaces de catalizar esta reaccin para emitir la luz son los hemo metales de transicin y peroxidasa. Hemo es una estructura bioqumica que forma parte integrante de la peroxidasa. Esta estructura est igualmente presente en la hemoglobina. De esta manera, la presencia de la hemoglobina - por lo tanto de sangre - pueden ser revelados mediante el aprovechamiento de la capacidad del grupo hemo de catalizar la propiedad quimio-luminiscente de luminol. En otras palabras, una mezcla de luminol + agente oxidante + agente alcalino, cuando se pone en contacto con la sangre, que emiten luz.

C. EXCELENTE RENDIMIENTO

1. La sensibilidad extrema de BLUESTAR FORENSE permite que el ojo humano para detectar manchas de sangre hasta 1:10.000 diluciones, como restos diminutos o gotas que se han lavado, con o sin detergente. 2. BLUESTAR FORENSE tiene una luminiscencia fuerte y duradera que no requiere la oscuridad total para ser visible. Imgenes de buena calidad se puede obtener con una cmara normal y el cine. 3. Con un poco de prctica, BLUESTAR FORENSE hace imposible confundirse entre la sangre y los falsos positivos ya que la luminosidad cambia de color, intensidad y duracin. 4. BLUESTAR FORENSE no altera el ADN y permite tanto la tipificacin de ADN y posterior tipificacin ABO. 5. BLUESTAR FORENSIC trabaja tan bien en sangre fresca como en manchas de sangre muy viejo o alterado, puro o diluido. D. SENSIBILIDAD EXTREMA BLUESTAR FORENSE es ms sensible que otras pruebas de campo de presuncin de sangre. Manchas de sangre tratadas con BLUESTAR FORENSE pueden ser visibles hasta 1:10.000 diluciones. Manchas invisibles reaccionar inmediatamente ante el reactivo BLUESTAR FORENSE la sangre, provocando una luminiscencia intensa de color azul (430 nm de longitud de onda) visibles a simple vista en la oscuridad. Su sensibilidad es tal que la sangre se evidencia en la cantidad ms pequea que el mnimo requerido para realizar ADN escribiendo.

Sangre en diluciones de 1 a 1:1.000 (a la luz del da) y despus de rociar Bluestar (fotos tomadas en la oscuridad)

BLUESTAR FORENSE permite la deteccin de huellas invisibles o microscpicas de gotas de sangre, sobre todo contra un fondo oscuro. La visualizacin de las manchas no depende del tamao de las manchas de sangre, slo de la presencia real de la sangre. Gotas de sangre

BLUESTAR FORENSE produce una luminosidad ms intensa y duradera que no necesita de la oscuridad total para ser visible. BLUESTAR FORENSE se puede rociar varias veces en la misma zona, por lo que la observacin y la foto o la pelcula ms fcil de tomar. Fotografas probatorio se puede tomar con una cmara normal y el cine, por lo tanto la supresin de la necesidad de equipo sofisticado. Cmo tomar fotografas de reacciones de BLUESTAR FORENSE Lo que los franceses de la Gendarmera Nacional del Instituto de Investigacin Penal (IRCGN) dice al respecto: Esta nueva solucin de BLUESTAR ofrece numerosas ventajas sobre una solucin clsica de luminol. La intensidad de la luminiscencia es ms alta, que dura ms tiempo, y no requiere la oscuridad total para ser visible. Adems, este producto qumico es ms estable en el tiempo, y todava se pueden utilizar varios das despus de preparacin. Probatorio fotografa La luminiscencia que se produce al aplicar BLUESTAR FORENSE reactivo sangre dura varios minutos y BLUESTAR FORENSE se puede

rociar varias veces en la misma zona, por lo que la observacin y toma de fotografas ms fcil. Fotografas probatorio se puede tomar con una cmara normal y el cine, por lo tanto la supresin de la necesidad de equipo sofisticado. Configuracin de la cmara Indicativo 24 mm de la lente Pelcula de 400 ISO Cmara en un trpode Apertura de diafragma 2.8 La exposicin de 30 aos Procedimiento Todo lo que se necesita es un cuarto oscuro con luz difusa. La luz natural difusa se prefiere a la luz artificial que da imgenes de color amarillento o verdoso. Un flash detrs del fotgrafo debe evitarse ya que la oscuridad total es difcil de obtener y es peligroso para el tcnico para moverse. El tcnico debe ajustar la cmara en un trpode de preferencia antes de tratar el rea afectada a fin de evitar rociar.

Un nuevo reactivo DE ALTO RENDIMIENTO Y PROCEDIMIENTO PARA LA DETECCIN LATENTE mancha de sangre BASADOS EN QUIMIOLUMINISCENCIA luminol. BlueStar es una mancha de sangre el reactivo quimioluminiscente como resultado de nuestra investigacin. Combina la facilidad de uso con riesgos mnimos de salud y no tiene efectos nocivos para la determinacin del perfil de ADN. INTRODUCCIN Manchas de sangre se pueden encontrar en cualquier lugar de un crimen violento se ha producido. los patrones de manchas de sangre en el piso (de una herida que gotea, por ejemplo) o salpicada en las paredes se pueden interpretar de opinin para la reconstruccin de la escena del crimen. anlisis de la prueba de ADN puede establecer el perfil gentico (s) del participante (s) en un crimen violento. En consecuencia, manchas de sangre se encuentran entre la evidencia ms de uso til para el tribunal. Este hecho se est convirtiendo en conocida, como criminales ya menudo intento de limpiar la escena del crimen. Una amplia variedad de productos qumicos pueden ser utilizados como pruebas presuntivas para detectar evidencia de estas limpiezas. mtodos de deteccin de sangre estn basados en la deteccin de hemoglobina y sus derivados (prueba de catalizador) o en la deteccin de protenas y aminocidos (no covalente a las protenas). Sin embargo, el uso de algunas sustancias qumicas pueden tener efectos adversos en la posterior tipificacin de ADN Short Tandem Repeat (STR) y tambin se ha demostrado que los riesgos potenciales para la salud. Por ejemplo, la bencidina y orto tolidina-tienen un potencial cancergeno (1-2) y verde leucomalaquita no permite la tipificacin de ADN (3). Luminol (5-amino-2 ,3-dihydrophthalazine-1 ,4-diona) se ha convertido en la prueba ms popular de pre-presuntivo de sangre en la investigacin de la escena del crimen (4-6). La quimioluminiscencia propie-dades del luminol se inform por primera vez en 1928 por Alberto (7). En medio acuoso, un sistema de oxidacin-cin y un catalizador de oxidacin se requiere, adems de las condiciones alcalinas. cationes de metales de transicin, ya sea libre o complejos con ligandos orgnicos o inorgnicos, catalizan la oxidacin de luminol quimioluminiscencia. Esta es la razn por las protenas que contienen hemo y hemoglobina son

capaces de catalizar la quimioluminiscencia del luminol en presencia de un oxidante. Para establecer un ensayo de trabajo, la eleccin de los reactivos (oxidantes y alcalinos um medicina) y las condiciones de reaccin (pH y las concentraciones de reactivo) debe ser cuidadosamente considerado. Existen dos formulaciones, Luminol he descrito por Grodsky (8) y Luminol II descrito por Weber (9). Estudios previos han demostrado que esta prueba no molestar a anlisis de ADN (10-12), pero su uso se mantuvo difcil debido a la corta duracin de la quimioluminiscencia (1314). El objetivo del presente estudio fue desarrollar una nueva formulacin de Luminol, BlueStar , que sera fcil de usar en la escena del crimen o en un laboratorio y permitira a una emisin de quimioluminiscencia ms brillante y ms duradera, sin efectos perjudiciales para Anlisis de ADN, ni ningn peligro para el investigador de la escena del crimen. La primera parte del estudio tiene como objetivo optimizar las concentraciones de los distintos componentes. La segunda parte del estudio se centr en el rendimiento del reactivo de sangre nueva formulacin. MATERIAL Y MTODOS: Los reactivos Luminol y el perxido de hidrgeno fueron suministrados por SigmaAldrich (Lyon, Francia). El carbonato de potasio, carbonato de sodio, hidrxido de potasio, hidrxido sdico y perborato de sodio fueron adquiridos de Prolabo (Fontenay-sous-Bois, Francia). Las soluciones acuosas se prepararon con agua destilada desmineralizada. Instrumentacin y procedimiento para la medicin de quimioluminiscencia Luz de las medidas para la optimizacin de las condiciones de reaccin Los ensayos se llevaron a cabo mediante la adicin de 90 L de reactivos adecuados (oxidante, base y luminol) en las concentraciones adecuadas para 10L de sangre en los pocillos de placas de 96 pocillos de Nunc (comprado de Fisher Bioblock Cientfico, Illkirch, Francia). La luz de inten-sidad, expresada en unidades arbitrarias, se midi utilizando un luminmetro lector de placas (Luminoscope de Labsystems). Luz mediciones utilizando kits comerciales mancha de sangre de deteccin quimioluminiscente

Micro-gotas (0,3 mL) de sangre sin diluir o diluido se depositaron en blanco la pared de azulejos y se seca a temperatura ambiente. Para cada juego, las soluciones de quimioluminiscencia fueron preparados segn lo recomendado por el proveedor. Las soluciones se roca desde una distancia de 50 cm en la pared de azulejos, que fueron inmediatamente introducidos en un cargo de refrigeracin de alta sensibilidad (CCD) sistema de medicin de la luz (Intelligent oscuro Caja II, Fuji Film). En las imgenes obtenidas, intensidad de la luz se cuantific en unidades arbitrarias con un programa de pelcula Fuji de anlisis de imagen (Image calibre 3.12). Rendimiento de la Bluestar kit de deteccin de manchas de sangre y la comparacin con la solucin de luminol comer-cial Para estimar la sensibilidad de la Bluestar quimioluminiscente mancha de sangre detec-cin del kit, diluciones diferentes, que van 01:05-un y diez 000, de la sangre en solucin isotnica Se prepararon. Posteriormente, un 0,3 l de sangre diluida se depositaron en blanco la pared de azulejos y se seca a temperatura ambiente. Despus de rociar la solucin Bluestar y la solucin comercial luminol en las manchas de sangre, la intensidad de la luz se midi. Estos azulejos se han introducido en el dispositivo de carga acoplada (CCD), sistema de medicin de la luz y la emisin de luz se control durante 10 minutos. Instrumentacin y procedimiento para la prueba de ADN Extraccin de ADN y cuantificacin Todas las extracciones de ADN se realizaron con el mtodo de extraccin orgnica (proteinasa K con un disolvente orgnico). Todas las muestras de ADN extradas fueron quantitfied por slot blot anlisis-sis (15) utilizando el kit de Quantiblot (Applied Biosystems, una divisin de Perkin Elmer, Branchburg, NJ). STR amplificacin y tipificacin de ADN cadena de la polimerasa (PCR), amplificacin del DNA de la plantilla ha realizado mediante el Perkin Elmer GeneAmp 9700 del sistema (Applied Biosystems, una divisin de Perkin Elmer, Branchburg, NJ). Aproximadamente 0,5 ng de DNA fue amplificado utilizando AmpFlSTR SGM Plus de amplificacin de PCR kit (Applied Biosystems). Esta

cooperacin kit-amplifica repite diez cortos dem tostado (STR): D16S539 D3S1358, vWA, D2S1338, D8S1179, D21S11, D18S51, D19S433, THO1, FGA, adems de amelogenina. Anlisis de ADN se realiz por capilaridad elec-trophoresis en el ABI PrismTM Genetic Analyzer (Applied Biosystems) de acuerdo con las recomendaciones del fabricante. El sistema fue prerun de aproximadamente 180 segundos (15 000V, 0,1 mA, 4,5 W, 60 C) antes de la inyeccin de la muestra. El sistema se permite la ejecucin de unos 1500 segundos (15 000 V, 0,1 mA, 4,5 W, 60 C). tamaos de alelos se analizarse en tiempo real utilizando el mtodo locales del Sur por GeneScan Versin Software de Anlisis de 3.7 (Applied Biosystems). Qumica Eleccin del agente oxidante Para la deteccin de manchas de sangre, perborato y el perxido de hidrgeno son los oxidantes ms utilizados. Sin embargo, debido a la inestabilidad de las soluciones de perborato, las mediciones con este oxidante no son reproducibles. En consecuencia, todos los experimentos se realizaron con perxido de hidrgeno como agente oxidante. Eleccin de la solucin alcalina y el pH La mxima intensidad de luz se puede obtener en un rango de valores de pH entre 10,5 a 13, en funcin tanto en el catalizador y el reactivo oxidante utilizado (16). Tales condiciones alcalinas fuertes se pueden obtener con carbonato, en forma de sodio o sal de potasio, o una base fuerte como el hidrxido de sodio o hidrxido de potasio. Sin embargo, para permitir la prueba de ADN sobre manchas de sangre detectados con un mtodo de quimioluminiscencia, el pH de la solucin de rociado debe estar alrededor de 11.5. Con el fin de evitar problemas que podran ocurrir con un pH excesivamente alto, un valor de 11 fue elegido y diferentes soluciones alcalinas fueron preparados con un pH cercano a este valor especificado. El valor de pH exacto se midi en las soluciones finales reaccionar con perxido de hidrgeno y luminol, adems del compuesto alcalino-line. Las diferentes soluciones que se roca en idnticas manchas de sangre seca y los resultados se compararon mediante la medicin de la intensidad de luz mxima. Optimizacin del luminol y las concentraciones de perxido de hidrgeno

Para determinar las concentraciones ptimas del luminol y el perxido de hidrgeno en solucin que contiene 25 mM de NaOH y diferentes concentraciones de luminol (1-10 mM) y el perxido de hidro-generacin (5-100 mM) se prepar. Procedimientos de la prueba de ADN BlueStar Preparacin BlueStar comprimidos (todos los kit comprimido) se diluyeron en mL de agua desionizada 125. La mezcla se roca con un atomizador a una distancia de unos 50 cm. Se incluyeron dos controles para comprobar la preparacin de cada uno: un control positivo (una pieza de material con tres depsitos de sangre en las relaciones de dilucin de 1:10, 1:100, 1:1000) y un control negativo (una pieza de material sin sangre u otros productos biolgicos). Micro volmenes genotipificacin de muestreo, deteccin con BlueStar y

Minuto volmenes de sangre fueron tomadas con una punta de la pipeta por la accin capilar. Esta tcnica se utiliz en los casos A, B, C: A y B: dos ensayos idnticos, que constaba de tres depsitos de sangre, realizada con el fin de asegurar la repetibilidad del proceso. C: Seis depsitos de sangre. Cinco otros volmenes de sangre fueron probados (0,1 l, 0,5 l, 1 l, 2,5 ly 5 l) con el fin de estimar la influencia de la cantidad de sangre en la prueba de ADN (Tabla 2 y las Figuras 3 y 4) Falso positivo en la prueba Seis diferentes pruebas de sangre y diferentes relaciones de cloro (Tabla 3) se repitieron tres veces. Estos 18 puntos fueron extrados y analizados por anlisis de ADN. Pruebas en diferentes tipos de materiales de apoyo diversos materiales de apoyo fueron probados: los absorbentes (papel tapiz, diversos tipos de papel, lana, pao para el revestimiento, hoja, varias maderas, moqueta, cartones diferentes), no absorbentes (corcho, tubo, diferentes tipos de plstico, botellas de vidrio, varios plantas, hojas

(muertos), papel de esmeril, un pedazo de metal con pintura acrlica, cinceles de metal oxidado, tierra batida), y loza porosa (terracota cermica, concha de azcar,). Cada material de apoyo se divide en tres reas. En dos de las reas, una mancha de sangre (20 mL) fue depositado, mientras que la tercera rea permaneci vaca. Dos pruebas idnticas, que constaba de tres depsitos de sangre se utiliza para permitir la recreacin de los procedimientos de prueba. BlueStar se difundi luego sobre las tres reas, el tercero que acta como un control negativo. RESULTADOS Qumica Eleccin de la solucin alcalina y el pH Como se muestra en la Tabla 1, la intensidad de la luz se mide en la presencia de 25 mM de NaOH fue mayor que en la presencia de otros compuestos alcalinos. Ms precisamente, la intensidad de la luz emitida de acuerdo a la naturaleza del compuesto alcalino en el orden: NaOH KOH>> Na2CO3> K2CO3. Estos resultados coinciden con otras mediciones realizadas en diferentes valores de pH y para diferentes valores de las concentraciones de reactivos otros.

Como cuestin de hecho, a un valor pH dado y lo que las condiciones de reaccin, a la luz intensidad medida en la presencia de sodio o hidrxido de potasio fue mayor que en la presencia de carbonato de sodio o de potasio. Por otra parte, los iones de sodio, ya sea con soluciones de hidrxido o de carbonato de soluciones, parece producir una mayor intensidad de la luz emi-sin de los iones de potasio en las soluciones correspondientes (Tabla 1). Optimizacin del luminol y las concentraciones de perxido de hidrgeno Los resultados seleccionados (Fig. 1-2) muestran que las condiciones ptimas de luz de medicin se obtuvieron con una concentracin de perxido de hidrgeno de 50 mM y una concentracin de luminol-cin de 10 milmetros. Sin embargo, para este ltimo compuesto, un aumento al doble de la concentracin de luminol, a partir de 5 milmetros a 10 milmetros producido un aumento de la intensidad de luz de slo 8%. Por consiguiente, una concentracin 5 mM luminol fue elegido. Por ltimo las condiciones ptimas de reaccin determinada para la deteccin de manchas de sangre eran un 25 mM de solucin de NaOH contiene luminol 5 mM y 50 mM de perxido de hidrgeno. Con las condiciones alcalinas elegido (pH = 11), la preferible concentraciones finales reactivo son: Luminol: 5 mM, NaOH: 25 mm, el H2O2: 50 milmetros (17). microvolmenes deteccin con BlueStar y genotipificacin En todas estas pruebas, las manchas de sangre se visualiza claramente en la escena del crimen con BlueStar y las muestras pueden tomarse de las manchas de sangre detectadas. Adems, parece tambin posible utilizar BlueStar en el laboratorio para detectar micro-manchas de sangre en diferentes tipos de objetos. Figuras 3 y 4 muestran la intensidad media de fluorescencia en funcin de las 10 repeticiones cortas en tndem (STR) y amelogenina en presencia de diferentes volmenes de sangre. El xito de la deteccin de STR se obtuvo manchas de sangre sobre la determinacin del genotipo con diferentes cantidades de sangre (casos A, B y C y con diferentes volmenes: l 0,1, 0,5 l, 1 l, 2,5 ly l 5). Esto permiti la

deteccin de la prueba de ADN, de 10 de STR y amelogenina con intensidades satisfaccin historia (Fig. 5).

Antecedentes En 1928, un qumico llamado Albrecht descubierto una sustancia qumica que, cuando se coloca en una solucin alcalina con perxido de hidrgeno y un catalizador, que emiten una luz azul intenso, sin calor expulsado. Este producto qumico fue un precursor de la moderna luminol. En 1937, un cientfico llamado Specht Albrecht utilizar qumicos para probar una variedad de artculos manchados de sangre. En 1951, Grodsky utilizan qumicos Albrecht con carbonato de sodio, perborato de sodio y agua destilada para detectar trazas de sangre. frmula Grodsky fue encontrado a ser inestables, con la adicin de perborato de sodio. Una mejora en la frmula Grodsky fue hecha por Weber (1966), quien reemplaz al perborato de sodio con perxido de hidrgeno [1]. frmula de Weber est en uso por los departamentos de polica en la actualidad. Luminol es el ms comnmente por el carbonato de sodio con el hidrgeno 1 Bluestar Forensic es un producto de la Repblica de China de Importacin del Grupo, 16 Avenue de la Costa, BP 246, Monte Carlo, Mnaco 98 005. Diario de identificacin forense 708/56 (5), 2006 perxido, 3 Aminophthalhydrazide, y agua destilada. En 2000, el Dr. Loic Blum (Universidad de Claude Bernard-Lyon) ide una nueva frmula basada en el luminol, que ms tarde fue nombrado Bluestar forense [1]. Aunque Bluestar Forensic es luminol basado, es una frmula patentada y no est disponible para su publicacin [2]. la accin de Luminol (quimioluminiscencia) no debe confundirse con fluorescencia. Quimioluminiscencia requiere de un catalizador. En el caso del luminol, esto puede ser el hierro de la hemoglobina. Luminol para su uso en el trabajo policial se compran generalmente prefabricados y se mezcla con carbonato de sodio y perxido de hidrgeno. Una desventaja de luminol es que puede producir falsos positivos cuando se utiliza en oxidantes fuertes, algunos iones metlicos, y peroxidasas. Esto significa que la luminiscencia, aunque menos pronunciado, se puede ver al luminol se roca sobre el cobre (o cualquier otra aleacin), blanqueadores y rbano [3]. Para superar esta limitacin y para ayudar a reducir la interferencia de cloro en el luminol, lo mejor es permitir que las manchas de sangre se seque completamente (dando tiempo cloro para descomponer) [3]. Bluestar Forense fue producida originalmente para los cazadores. El agente de la sangre que revela se utiliza para ayudar a localizar a los animales heridos. El forense Bluestar utilizados para los cazadores tiene un pH de 12,6 y por lo tanto no es apto para el procesamiento de ADN

de la sangre. Repblica de China de Importacin Grupo hizo Bluestar Forense de trabajo de la polica para tener un pH de 11,5. Debido a que el pH ajustado, Bluestar Forensic es propicio para el ADN de STR [2]. Desde hace tiempo se sabe que el luminol no afecta al proceso de PCR o STR [4, 5, 6]. Bluestar Forense no muestra la degradacin del ADN, y anlisis de ADN con xito se ha logrado hasta treinta das despus de la aplicacin de Bluestar forense [1]. Sin embargo, para este experimento se hizo hincapi en la facilidad de uso del producto qumico y no su capacidad de ADN tipo, por lo tanto, una mezcla de sangre humana y equina se us y no fue escrito. A los efectos de este experimento, la vida til, el uso despus de la preparacin, y el ADN no se estudiaron. Mtodos y Materiales Pruebas de Materiales Seis pares de ensayo de materiales se realizaron tres meses antes de los exmenes reales. Los cuatro primeros conjuntos de superficies de prueba (de madera de arce, la alfombra olefina, baldosas de vinilo y cermica) fueron de configuracin de la misma manera. Diario de identificacin forense 56 (5), 2006 \ 709 Una pipeta de plstico se utiliza para poner las manchas de sangre impacto en cuatro muestras de cada superficie de ensayo. La sangre se dej secar durante 12 das. La sangre se retir luego de dos muestras de cada superficie de prueba con una esponja de celulosa que se haba empapado en agua del grifo. La sangre de las superficies de prueba otros dos se eliminan con una esponja de celulosa que se haba empapado en agua del grifo contiene cloro, en lo sucesivo como el cloro. Las muestras se agruparon para proporcionar dos muestras de cada superficie (un lavado con agua y un lavado con leja) para cada tratamiento a probar (luminol y Forense Bluestar). La superficie quinto fue un nuevo azul de algodn 100% camiseta. Un shoeprint en la sangre fue puesta en la frente y el dorso de la camiseta. Las manchas se deja secar durante 12 das. La camiseta fue lavada y luego usando detergente de lavandera Purex en un ambiente clido / lavado en fro durante 30 minutos. La cada camiseta seca durante 60 minutos. Un lado de la camiseta iba a ser tratados con luminol y el otro iba a ser tratados con Bluestar Forense. La superficie final fue un nuevo azul oscuro CoolMax (polister) camisa. Un shoeprint en la sangre fue puesta en la frente y el dorso de la

camiseta. Las manchas se deja secar durante 8 minutos y luego la camisa se coloc bajo el agua fra del grifo. La camisa se dej secar durante 12 das. La camiseta fue lavada y luego usando detergente de lavandera Purex en un ambiente clido / lavado en fro durante 30 minutos. La camisa era secadora por 60 minutos. Un lado de la camiseta iba a ser tratados con luminol y el otro iba a ser tratados con Bluestar Forense. Como muestra de control, dos lminas de vinilo fueron manchadas con agua con leja. Preparacin qumica El luminol se prepar de acuerdo a la Delincuencia del Departamento de Polica de Scottsdale protocolo de laboratorio. Diez gramos de carbonato de sodio y 0,2 g de luminol premezclado se mezclaron con 180 mL de agua destilada en un vaso de 1000 ml, y luego de 3 ml de perxido de hidrgeno 180% aadi. Despus de la mano de mezcla, la solucin se coloc en una botella de spray. El forense Bluestar se prepar de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Dos Bluestar tabletas Forense (uno beige y una tableta blanca) fueron sacados de sus bolsas selladas Diario de identificacin forense 710/56 (5), 2006 y se han aadido a ml de agua destilada en una botella de spray 175. La botella del aerosol fue cerrada y la boquilla del rociador se abri a la ventilacin. La solucin se agit suavemente meciendo la botella durante unos 5 minutos hasta que la disolucin se seal. La aplicacin del luminol y Forense Bluestar era el mismo. El contenido de las botellas de aerosol se pulveriza en un movimiento de barrido en cada muestra de ensayo a una distancia de 15 a 18 centmetros del objeto. Fotografa Los resultados fueron fotografiados usando las tcnicas estndar de la fotografa fluorescentes [7, 8]. Todas las fotografas fueron tomadas con una cmara Fuji S3 Pro Digital, con un rango de sensibilidad ISO de 400. exposiciones de prueba fueron tomadas antes del experimento para establecer la configuracin ptima de la exposicin. El experimento se llev a cabo en un entorno de laboratorio con luces tenues durante las pruebas Bluestar Forense y un tono ms oscuro (aproximadamente una diferencia de parada) el medio ambiente para el luminol. La apertura se fij en f/6.7 para todas las fotografas. Las fotografas tiempo de exposicin vari ligeramente con el tratamiento inicial de las seis superficies de prueba (madera, alfombras, baldosas de vinilo, baldosas de cermica, camiseta, hoja de plstico) (es

decir, 3 segundos para que el forense Bluestar y 4 segundos para el luminol) . El tiempo de exposicin de las superficies durante el segundo tratamiento fue el mismo para el forense Bluestar y el luminol (es decir, 4 segundos). Las fotografas tiempo de exposicin para el tratamiento inicial en la camisa CoolMax se extendi a 8 segundos para que el forense Bluestar y 30 segundos para que el luminol. Las exposiciones se realizaron durante el segundo tratamiento. Diario de identificacin forense 56 (5), 2006 \ 711 Resultados y Discusin Los resultados de estos experimentos se muestran en la Tabla 2 y las Figuras 1 - 12. En todos los casos, Bluestar Forense super luminol. La alfombra mostr los mejores resultados tanto para los reactivos, lo ms probable debido a que la alfombra haba manchas de sangre de la mejor visual antes de la tincin. Las baldosas de vinilo y el azulejo de cermica tambin mostraron fuertes reacciones. La diferencia ms obvia entre los reactivos en estas superficies es la fuerza de la quimioluminiscencia en el aerosol de la segunda Forense Bluestar. La mayora de las reacciones se llev a cabo en las zonas donde se haba limpiado la sangre con agua solamente. Al parecer, la leja elimina cualquier rastro de la sangre de la mayora de las superficies. Fue sorprendente observar que, adems de la alfombra, sin falsos positivos se observaron entre los reactivos y el cloro. Ambos reactivos se sabe que reaccionan con los materiales en leja. La nica reaccin a las zonas limpiadas con leja era la alfombra, sin embargo, no hay diferencia en el color o la intensidad se pudo determinar entre el agua y las zonas de leja. Esto puede deberse a que el cloro no llegar a algunas de las manchas de sangre ms integrados en los hilos de la alfombra. Por lo tanto, en este experimento no fue posible estudiar propuestas Bluestar Forensic luminiscencia ligera intensidad con falsos positivos. El lavado y secado de algodn 100% camiseta azul no parece interferir con la intensidad de la luminiscencia de luminol o Forense Bluestar. La camisa azul oscuro CoolMax no mostr ninguna reaccin a cualquiera de los reactivos. Esto fue probablemente debido a que la sangre haba sido lavado con agua del grifo antes y despus de la aplicacin lavar a continuacin. ventaja Bluestar Forensic ms de luminol fue ms evidente en la capacidad de ver su reaccin, sin necesidad de completa oscuridad. A pesar de la reactividad de luminol podra tener la misma intensidad que cuando est en completa oscuridad, en condiciones de poca luz, el luminol se mensurable menos intenso. Bluestar Forensic es mucho ms

brillante que el luminol en condiciones de iluminacin. En la escena del crimen donde se establece la oscuridad completa no es posible, Bluestar Forense tiene la ventaja.

Falso positivo en la prueba Bleach da una reaccin positiva con BlueStar . Sin embargo, esta reaccin es visualmente diferentes de la reaccin con una mancha de sangre. Un ojo experto puede ver inmediatamente la diferencia entre una mancha de cloro (aspecto difuso) y una mancha de sangre (manchas claramente definidas). Por otra parte, la leja se diluye la sangre y hace que la deteccin de los eas de los ltimos IER. En 18 casos (Tabla 3) el blanqueo de sangre producidos quimioluminiscencia con BlueStar . En todos los casos, 10 STRs y amelogenina dio un resultado positivo con una intensidad de amelogenina un promedio de 1,980 UA (Fig. 5). La concentracin de cloro no afect anlisis de ADN, y este producto qumico se evita que nei-no BlueStar deteccin ni anlisis de ADN. Pruebas en diferentes tipos de materiales de apoyo

Manchas de sangre se puede detectar con BlueStar en diferentes materiales. Sin embargo, debe prestarse especial atencin a los materiales hidrofbicos porque la fumigacin de BlueStar conduce a la dispersin en la sangre. La competencia del tcnico es un factor crucial para localizar con precisin la mancha de sangre. Comparacin con otra solucin luminol comerciales La intensidad de la luz en t0, es decir, inmediatamente despus de la pulverizacin, fueron 344 600 au con la Bluestar solucin y 143 500 UA con un nivel Grodsky frmula basada comerciales kit. Los resultados (Fig. 6) muestran que despus de 1 minuto, la intensidad de la luz se acerca a 0 con el sistema comercial normal, mientras que con la Bluestar solucin, la intensidad de la luz fue del 83% del valor inicial medido en t0. Por otra parte, despus de 7 minutos con la solucin de BLUESTAR , la luz se midi todava el 10% del valor inicial y despus de 10 minutos, incluso si la lumi-seal de indgenas fue slo el 1% de la inicial, todava era cuantificable (3 100 UA).

Como era de esperar, cuanto menor sea el factor de dilucin, menor ser la intensidad de la luz (Fig. 7). Es notable observar que la sangre muy diluida (1:10 000), la emisin de luz era todava cuantificables (1 730 UA). El funcionamiento del kit de deteccin de manchas de sangre Bluestar BlueStar permite la deteccin de manchas de sangre diluida hasta 1:1000 (sangre diluida en agua estril). Sin embargo, el anlisis de ADN es posible con diluciones de 1:250 a 1:500. En conclu-sin, la informacin facilitada por BlueStar es muy prometedor para la deteccin de manchas de sangre.

Un nuevo producto, Bluestar Forensic1, ya est disponible como un sustituto de luminol. Aunque Bluestar Forensic es luminol y basado en funciones de la misma manera como el luminol, sus propiedades hacen que sea ms conveniente para las investigaciones de la escena del crimen: No requiere de completa oscuridad, se mantiene la quimioluminiscencia mismo despus de cada pulverizacin, se puede utilizar hasta varios das despus de la mezcla, y no requiere un conocimiento de la qumica [1] (Tabla 1). Lo ms importante para los investigadores es que Bluestar Forensic es conveniente preparar. El propsito de este experimento fue determinar si Bluestar Forensic es una mejor opcin que el luminol para su uso en la escena del crimen.

Luminol Bluestar Forense Las necesidades de casi completa oscuridad No necesita ms completa oscuridad La disminucin de la luminiscencia en la segunda aplicacin Mantiene la misma luminosidad durante una segunda aplicacin Laboratorio de preparacin es necesario Fcil de mezclar en el campo No hay tiempo de conservacin despus de la mezcla Puede ser utilizado durante varios das despus de la mezcla No destructivo para ADN No destructivo para ADN Use of Bluestar Forensic in Lieu of Luminol at Crime Scenes

Lisa Dilbeck Scottsdale Police Department Scottsdale, AZ CLASIFICACICN DE LA FUERZA DE REACCIN DE LUMINOL VS BLUE STAR EN DIFERENTES DILUCIONES EN PISO VINILICO 0 1 2 3 quimioluminiscencia quimioluminiscencia quimioluminiscencia quimioluminiscencia no vista dbil moderada fuerte

CONCLUSIN BlueStar esta nueva mezcla de luminol permite la deteccin de sangre oculta en las zonas lavadas. Si el sustrato es poroso y lo utiliza el agente de limpieza, BlueStar da una reaccin positiva, la reaccin se observa, bajo condiciones de poca luz, en la forma de quimioluminiscencia azul corto pero renovable que es ms largo y ms fuerte que el kit Grodsky comercial basado en frmulas. Reacciones positivas falsas pueden ser eliminados despus de un anlisis de ADN se lleva a cabo. Quedan algunas limitaciones debido a la cantidad de sangre y de los umbrales de cada tecnologa-nique. El umbral para la deteccin de ADN es mayor que el umbral de esta nueva formulacin-la. Por lo tanto, una deteccin visual no garantiza un anlisis de ADN exitosa. En conclusin, este reactivo luminol nuevo ha demostrado ser muy eficiente en los mbitos forenses para localizar lavados / diluir manchas de sangre y ahora se utiliza habitualmente en Francia.

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