UNIVERSIDAD DE CUENCA FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS ESCUELA DE MEDICINA

INFORME DE LABORATORIO DE INMUNOLOGA

TCNICAS SIMPLES DE REACCIN ANTGENOANTICUERPO

PROFESOR Dr. Jos Roldan

INTEGRANTES Xavier Berrezueta La Cristina Cajamarca Johanna Guzmn Priscila Hernandez Irma Muoz GRUPO 2A

21/06/2011

TCNICAS DE REACCIN ANTGENOANTICUERPO.

OBJETIVOS: Explicar mediante representacin esquemtica e imgenes las diferentes Tcnicas simples de reaccin antgeno-anticuerpo. MARCO TERICO:
CLASIFICACIN:

REACCIONES DE PRECIPITACIN: Detectan anticuerpos: Ig G. Las reacciones de precipitacin, consisten en la formacin de un compuesto no soluble, llamado precipitado, producido mezclar dos disoluciones diferentes. al

a) Precipitacin en fase lquida: Precipitados o flculos.

b) Precipitacin en fase slida:

-Inmunodifusin simple

A la derecha se demuestra la difusin del anticuerpo (Ac) en diferentes direcciones en el Agar que contiene Antgeno (Ag). A la izquierda la concentracin de anticuerpo est representada por el tamao del halo.

-Inmunodifusin doble: Permite establecer la identidad de las reacciones serolgicas a travs de la formacin de complejos inmunes antgeno-anticuerpo, visualizados por lneas de precipitacin. Adems permite de forma semicuantitativa establecer la cantidad de Ag o Ac a estudiar en las placas de agar.

Representacin de identidad antgeno-anticuerpo, de izquierda a derecha, Patrn de Identidad, Identidad Parcial y No identidad.

REACCIONES DE AGLUTINACION: Detectan anticuerpos: Ig M. Las reacciones de aglutinacin se pueden clasificar como directas e indirectas (pasivas). En la tcnica directa, una clula o antgeno particulado insoluble, se aglutina directo por el anticuerpo. La aglutinacin pasiva se refiere a la aglutinacin de clulas recubiertas de antgeno, o partculas inertes que son acarreadores pasivos de antgenos que, de otra manera, seran solubles.

Aglutinacin directa:

Tipificacin Rh. Anticuerpo monoclonal anti-D + Sangre de Paciente

Aglutinacin Rh positivo

No aglutinacin Rh negativo

Protena D

Anti-D Aglutinain Interpretacin: Eritrocito: presencia de antgeno (protena D)= Rh + Ausencia de antgeno = Rh -

Aglutinacin directa en Dx. de Embarazo: se basa en la reaccin de aglutinacin antgeno/anticuerpo. Consiste en poner en contacto la orina de una mujer y un suero antigonadotrfico, que se suele obtener de un animal que ha sido inmunizado contra las gonadotropinas humanas

Interpretacin: Aglutinacin: presencia de HCG No aglutina: no hay HCG Embarazo Positivo Embarazo negativo.

Aglutinacin Indirecta: Mediante soportes. Ya que el anticuerpo IgM es unas 750 veces ms eficaz que el IgG para la aglutinacin, la presencia de grandes cantidades de IgM puede influir en los resultados de la prueba

Diagnstico de Embarazo. Objetivos: Determinacin de niveles de Gonadotropina corinica humana (HCG) en suero u orina, como modelo de identificacin de embarazo. La actividad HCG puede determinarse mediante Inmunoanlisis: fijacin del complemento, inmunoanlisis de partculas de solucin coloidal, inhibicin de la hemaglutinacin, inhibicin de la aglutinacin con ltex, aglutinacin directa y enzimoinmunoanlisis. Los cuatro ltimos mecanismos representan las pruebas de embarazo de utilizacin frecuente HCG: 12 mU/mL (2 primeros das), 1200-6000 (3 das), 6000 mU/mL (4 da) Tcnica:

Lectura: Anillo intensamente marcado (donut) en la parte superior del tubo (aglutinacin) prueba negativa. Importante: El anticuerpo anti-HCG neutralizar a la HCG (orina). Interpretacin: negativo. Aglutinacin: ausencia de HCG embarazo

No aglutina: presencia de HCG Factor Reumatoide.

embarazo positivo.

Objetivos: El motivo principal para investigar el Factor Reumatoide (FR) es la sospecha de Artritis Reumatoide presente en 75% de pacientes Tcnica: El FR son inmunoglobulinas (Ig M, Ig G, Ig A) producidas de forma aberrante por los Linfocitos B sinoviales, que ejercen su patogenicidad a travs de la unin a la fraccin Fc de la Ig G con la formacin de inmunocomplejos, produciendo la activacin del sistema de complemento, liberacin de citoquinas y respuesta inflamatoria.

a) Prueba de Fijacin en ltex. Ig G*= Ig G + partculas de ltex:

Interpretacin: Fijacin en ltex

Factor Reumatoide positivo.

Formacin de complejo inmune (Ig G + FR). No fijacin en ltex Factor Reumatoide negativo

 Reaccin de Weil-Flix: Prueba de reaccin cruzada entre antgenos de Proteus vulgaris (OX 2, OX19 y OX K) y anticuerpos producidos contra las Rickettsias en la enfermedad del tifus. Hemaglutinacin indirecta:

Interpretacin: Aglutinacin paciente. No aglutinacin el tifus.

no hay anticuerpos en suero de Presencia de anticuerpo contra

Fijacin de Complemento: el complemento posee la capacidad de unirse a los complejos antgeno anticuerpo (fijacin). Esta capacidad es aprovechada en la prueba de fijacin del complemento. Metodolgicamente, la prueba se desarrolla en dos fases, una primera que es una reaccin antgeno anticuerpo en un medio lquido y una segunda consistente en la adicin de complemento, una hemolisina dependiente de complemento y eritrocitos. Si se ha producido reaccin antgeno-anticuerpo, es decir, si el suero analizado contena anticuerpos frente al antgeno, el complemento queda fijado y no puede activar la hemlisis de los glbulos rojos.

RFC + RFC -

 Prueba De Asto O Reaccin De Hemoaglutinacin: Detecta infeccin por estreptococos, usualmente de garganta o piel Estas pruebas se basan en la capacidad de algunos patgenos (p.ej. el virus de la influenza) para causar la aglutinacin de los eritrocitos. Pueden utilizarse para detectar el patgeno (pruebas de hemaglutinacin) Las pruebas de hemaglutinacin se utilizan con patgenos que poseen esta capacidad, generalmente virus. El ejemplo ms clsico es el diagnstico de la influenza. En esta prueba, se prepara una serie de mezclas de estreptolisina. Luego las mezclas se ponen frente a una suspensin de glbulos rojos. El tubo con la menor cantidad de antiestreptolisina inmune que neutraliza exactamente la cantidad estndar de estreptolisina. Lo mejor es llevar a cabo dos pruebas con una semana de intervalo para ver si el ttulo est aumentando o disminuyendo: una determinacin nica generalmente tiene un valor ms limitado.

Interpretacin: Aglutina No Aglutina CONCLUSIN:

Negativo Positivo

Las reacciones antgeno anticuerpo presente en la respuesta inmunitaria permite identificar diferentes patologas de ah la importancia de las tcnicas e interpretaciones de las reacciones antgeno-anticuerpo para el diagnostico de las diferentes patologas as como su prevencin.

BIBLIOGRFICA: 1. STITES D. et al. Inmunologa Bsica y Clnica. 7ma Edicin. Editorial El Manual Moderno. Mxico D.F. 1993. Pg. 244-246. 280-283 2. MORRISON K. et al. Laboratorio clnico y pruebas de diagnstico. 1ra Edicin. Editorial El Manual Moderno, S.A. Mxico D.F. 1998. Pg. 181182. 387. 405-407. 3. ROJAS W. Inmunologa. Editorial Corporacin para investigaciones biolgicas. 13ra Edicin. Medelln Colombia. 2001. Pg. 218