Memorias II Congreso 2010

MEMORIAS DEL CONGRESO
ISBN: 978-607-9144-00-5
SOLABIAA
Sociedad Latinoamericana de Biotecnologa Ambiental y Algal
http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/
II Congreso Latinoamericano de Biotecnologa Ambiental y Algal

5 al 9 de Diciembre de 2010 Cancn, Mxico
MEMORIAS
Organizado por:
CENTRO DE INVESTIGACIN Y ASISTENCIA EN TECNOLOGA Y DISEO DEL ESTADO DE JALISCO, A.C. (CIATEJ) BIOTECNOLOGA INDUSTRIAL INSTITUTO DE ECOLOGA, A.C. (INECOL) GRUPO DE BIOTECNOLOGA AMBIENTAL
En colaboracin con:
INTERNATIONAL SOCIETY OF ENVIRONMENTAL BIOTECHNOLOGY (ISEB) INTERNATIONAL SOCIETY FOR APPLIED PHYCOLOGY (ISAP)
Curso pre-congreso patrocinado por:

CONSEJO NACIONAL DE CIENCIA Y TECNOLOGA (CONACYT)- RED DE FUENTES DE ENERGA
Editores:
- GEORGINA C. SANDOVAL FABIN - EUGENIA J. OLGUN PALACIOS - GLORIA SNCHEZ GALVN
II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 1
SOLABIAA
II Congreso Latinoamericano de Biotecnologa Ambiental y Algal

5 al 9 de Diciembre de 2010, Cancn, Mxico
MEMORIAS Editores:
Georgina C. Sandoval F. Eugenia J. Olgun Palacios Gloria Snchez Galvn
Diseo de portada y logotipo: Guillermo Ramrez Melndez Primera seccin: Ricardo Erik Gonzlez Portela y Karla L. Tapia Fierro Correccin de formato: Xochitl del Roco Niehus Charles
D.R. 2010 por SOLABIAA Publicado por: Sociedad Latinoamericana de Biotecnologa Ambiental y Algal A.C. http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa
La informacin de los resmenes y trabajos in extenso es responsabilidad de sus autores. Derechos reservados. Prohibida la reproduccin total o parcial de este libro, en cualquier forma o medio sin permiso escrito de los Editores.
Impreso en Mxico
ISBN: 978-607-9144-00-5
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COMIT ORGANIZADOR
CIATEJ:
Dra. Georgina C. Sandoval Fabin M.C. Ivanna Yvonne Rivera Espinosa Ing. Xochitl del Roco Niehus Charles Dr. Oscar Aguilar Jurez Dr. Jos de Anda Snchez Lic. Catalina Meza Lic. Citlalli Alzaga Snchez Lic. Josefina Islas Villanueva Lic. Velia Ayala Lic. Suzana Galvn Lic. Georgina Yeh Barajas Lic. Carlos Barragn Martnez Lic. Guadalupe Bugarn
INECOL:
Dra. Eugenia J. Olgun (Presidente de la International Society Of Environmental Biotechnology, ISEB) Dra. Gloria Snchez-Galvn I. Q. Ricardo E. Gonzlez Portela M. en C. Karla L. Tapia Fierro
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COMIT CIENTFICO
Gabriel Acin Fernndez (UDA, Espaa) Oscar Aguilar Jurez (CIATEJ, Mxico) Katiushka Arvalo (UANL, Mxico) Bertha Olivia Arredondo (CIBNOR, Mxico) Daniel Arrieta (ENCB-IPN, Mxico) Alicia Baldessari (UBA, Argentina) ngela de Sisto (IDEA, Venezuela) Elisa Esposito (UEFS, Brasil) Jorge Luis Folch (UAEM, Mxico) Miguel Freites (IDEA, Venezuela) Flix Gutirrez Corona (UdGto, Mxico) Elizabeth Hernndez (INECOL, Mxico) Adriana Matiz (UPJ, Colombia) Ever Morales (UdZ, Venezuela) Marcia Morales (UAMC, Mxico) Hugo Moreira Soares (UFSC, Brasil) Leopoldo Naranjo (IDEA, Venezuela) Luddy Nieto (Ecopetrol, Colombia) Irmene Ortiz (UAMC, Mxico) Ana Mara Otero (USC, Espaa) Beatriz Perna (IDEA, Venezuela) Sergio Revah (UAMI, Mxico) Mnica Rodrguez (UAMI, Mxico) Diego Rojas (IDEA, Venezuela) Margarita Salazar (UAMI, Mxico) Gloria Snchez (INECOL, Mxico) Luca Sena (IDEA, Venezuela) Eduardo Torres (BUAP, Mxico)
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CONTENIDO
PRLOGO ......................................................................................................................................... 6 ORGANIZADORES............................................................................................................................. 8 RESUMEN DEL PROGRAMA............................................................................................................. 9 CURSO PRECONGRESO ................................................................................................................ 10 PLENARIAS Y CONFERENCIAS INVITADAS .................................................................................. 17 MESAS REDONDAS ........................................................................................................................ 29 Mesa Redonda - Agua ................................................................................................................... 30 Mesa Redonda - Bioprocesos Ms Limpios y Sustentabilidad ........................................................ 32 Mesa Redonda - Biocombustibles.................................................................................................. 33 RESMENES ................................................................................................................................... 34 Biotecnologa Ambiental ................................................................................................................ 34 Comunicaciones Orales ............................................................................................................. 34 Carteles ..................................................................................................................................... 63 Biotecnologa Algal ...................................................................................................................... 148 Comunicaciones Orales ........................................................................................................... 148 Carteles ................................................................................................................................... 169 Bioprocesos ms limpios y Desarrollo sustentable ....................................................................... 208 Comunicaciones Orales ........................................................................................................... 208 Carteles ................................................................................................................................... 227 TRABAJOS IN EXTENSO ............................................................................................................... 254 NDICE DE AUTORES.................................................................................................................... 434 ASISTENTES AL CONGRESO ....................................................................................................... 448 INSTITUCIONES PARTICIPANTES................................................................................................ 466
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PRLOGO
La Sociedad Latinoamericana de Biotecnologa Ambiental y Algal (SOLABIAA), el Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco, A.C. (CIATEJ), el Instituto de Ecologa, A.C. (INECOL) y la Sociedad Internacional de Biotecnologa Ambiental (ISEB), se dieron a la tarea de organizar el II Congreso de SOLABIAA, con sede en la Ciudad de Cancn, Mxico, cuyas Memorias se presentan en este libro. Es importante destacar que SOLABIAA es muy joven, ya que se cre el 6 de Octubre del 2008, durante la celebracin del I Congreso Latinoamericano de Biotecnologa Ambiental, el II Congreso Latinoamericano de Biotecnologa Algal y el V Symposium Internacional de Bioprocesos ms Limpios y Desarrollo Sustentable que se llevaron a cabo en la Ciudad de Xalapa, Veracruz, Mxico. Por lo anterior, se considera que la respuesta de la comunidad latinoamericana ha sido muy nutrida ya que se recibieron 233 trabajos. La calidad de los trabajos recibidos tanto en formato de presentacin oral (50%) como de presentacin cartel (50%), seala que la regin Latinoamericana se encuentra en franca consolidacin en los tres mbitos en los que se aceptaron trabajos. En el rea de Biotecnologa Ambiental, se recibieron 121 trabajos (52%), en el de Biotecnologa Algal, 66 trabajos (28%) y en el de Bioprocesos ms Limpios, 46 trabajos (20%). En el Simposium Internacional de Biotecnologa (IBS2010), celebrado en Septiembre de este ao en Rimini, Italia, la Sociedad Internacional de Biotecnologa Ambiental fue invitada a ser co-organizadora de las sesiones de esta rea. Fue evidente que este campo fue el que recibi ms trabajos en relacin a todas las reas de la Biotecnologa, indicando que a nivel mundial, se estn desarrollando numerosos e importantes esfuerzos para contribuir a la problemtica global. Por otro lado, es estimulante que en este II Congreso de la SOLABIAA, tanto el rea de Biotecnologa Ambiental como el de Bioprocesos ms limpios, crecieron en relacin al nmero de trabajos recibidos en los Congresos del 2008, antes referidos. Para los miembros del Comit Organizador, es muy satisfactorio el haber ofrecido un foro en la regin Latinoamericana que permiti a todos aquellos investigadores y estudiantes que no pudieron viajar a Europa para asistir al IBS2010, intercambiar
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conocimientos y compartir sus experiencias pertinentes a las problemticas muy peculiares de nuestros pases en vas de desarrollo. Asimismo, agradece el esfuerzo realizado por algunos prestigiados investigadores quienes participaron como conferencistas invitados y han contribuido a enriquecer an ms el ambiente acadmico del Congreso. Finalmente, el Comit Organizador agradece el patrocinio del CONACYT a travs de la Red de Fuentes de Energa, mediante el cual fue posible ofrecer el Curso Precongreso Produccin de biodiesel a partir de microalgas con la participacin de reconocidos investigadores en este campo emergente y de altsima novedad. Dicho curso despert gran inters en la comunidad por lo que se cont con un alto nmero de asistentes.
Dra. Georgina C. Sandoval F.
Dra. Eugenia J. Olgun
Dra. Gloria Snchez-Galvn. Editores
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ORGANIZADORES
En colaboracin con:
International Society for Applied Phycology
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RESUMEN DEL PROGRAMA
HORA/DIA 8:30-9:00 9:00-9:30 9:30-10:00 10:00-10:40 10:40-11:00 11:00-11:30 11:30-12:00 12:00-12:30 12:30-13:00 13:00-14:30 14:30-15:00 15:00-15:30 15:30-16:00 16:00-16:30 16:30-17:00 17:00-17:30 17:30-18:00 18:00-18:30 18:30-19:00 19:00-22:00
DOMINGO 5
LUNES 6 REGISTRO SESIONES PARALELAS RECESO JOAN GARCIA GEORGINA SANDOVAL KATIUSHKA AREVALO COMIDA
MARTES 7 REGISTRO SESIONES PARALELAS RECESO RAFAEL VAZQUEZ GABRIEL ACIEN LEOPOLDO NARANJO COMIDA MESA 1 - AGUA, Preside: Ral Muoz RECESO CARTELES 1
MIRCOLES 8
JUEVES 9
VIERNES 10
SESIONES PARALELAS RECESO EUGENIA J. OLGUN ALICIA BALDESSARI COMIDA MESA 2 BIOPROCESOS, Preside: Eduardo Torres RECESO CARTELES 2
MESA 3 BIOCOMBUSTIBLES, Preside: Oscar Monroy RECESO HUGO SOARES PREMIACIN Y CLAUSURA PASEO OPCIONAL A TULUM O CHICHEN-ITZA
REGISTRO
INAUGURACIN AMI BEN AMOTZ
SESIONES PARALELAS
RECESO ASAMBLEA SOLABIAA
COCTEL DE BIENVENIDA
CENA DE CLAUSURA SALONES: TEATRO: Inauguracin, Plenarias, Conferencias invitadas , Mesas Redondas y Clausura DELPHUS, OLYMPUS Y ACROPOLIS 3: ESPARTA: Asamblea SOLABIAA y Sesiones paralelas Carteles COCTEL: Terraza de la alberca de adultos CENA: Saln por definir
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CURSO PRECONGRESO
BIODIESEL A PARTIR DE MICROALGAS Produccin de biodiesel a partir de microalgas: cules son los retos a vencer? Eugenia J. Olgun INECOL (Mxico) Metodologa para el aislamiento y seleccin de cepas Mnica Cristina Rodrguez Palacio Univ. Autnoma Metropolitana (Mxico) Biorreactores para el cultivo de microalgas Gabriel Acin Fernndez Universidad de Almera (Espaa) Bio-engineering aspects of microalgal cultivation for Bio-fuels Ami Ben-Amotz The National Institute of Oceanography (Israel) Mtodos de cosecha de microalgas Mara Concepcin Lora Vilchis CIBNOR (Mxico) Transformacin del aceite de microalgas a Biodiesel Georgina C. Sandoval F. CIATEJ (Mxico)
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CR-BD-1 PRODUCCIN DE BIODIESEL A PARTIR DE MICROALGAS: CULES SON LOS RETOS A VENCER? Eugenia J. Olgun Instituto de Ecologa (INECOL), Xalapa, Veracruz, Mxico Antigua Carretera a Coatepec # 351, El Haya. Xalapa, Veracruz, 91070, Mxico. eugenia.olguin@inecol.edu.mx La produccin de bioenergticos es una de las prioridades del siglo XXI que se visualiza cmo una de las respuestas tecnolgicas ms importantes para enfrentar y mitigar el cambio climtico. El biodiesel destaca como uno de los bioenergticos con mayor potencial y en especial el biodiesel de tercera generacin a partir de microalgas debido a sus mltiples ventajas en comparacin con el que se produce a partir de plantas. Entre dichas ventajas destacan las siguientes: a) Slo este bioenergtico tiene una verdadera huella ecolgica pequea, dado que requiere una superficie de 1-2 rdenes menores en comparacin a los cultivos convencionales o los rboles; b) pueden ser cultivadas en agua de mar, en agua salobre o en aguas residuales; c) Por cada 100 ton de microalgas producidas, se consumen 183 ton de CO2; d) Su rendimiento de aceite es de 10 a 20 veces mayor que el derivado del aceite de palma y de 100 a 200 veces mayor que el derivado del aceite de soya; e) no se produce CO2 durante el ciclo de vida de produccin y el valor de este parmetro para microalgas (-183 kgCO2/MJ) es de los pocos negativos entre los diversos bioenergticos. A pesar de las ventajas antes enunciadas, el costo de produccin de este tipo de biodiesel an no es competitivo con los actuales costos del barril de petrleo. Cientos de empresas y grupos de investigacin estn redoblando esfuerzos para vencer los principales retos para lograr dicha competitividad. Entre ellos destacan los siguientes: a) seleccionar las cepas que se adapten mejor al entorno seleccionado para produccin a gran escala, b) definir estrategias de cultivo que permitan un balance entre las condiciones de estrs fisiolgico en las que se logre una buena productividad de lpidos y las condiciones en las que se logre buena productividad de biomasa, c) lograr el uso de aguas residuales para una mxima produccin de biomasa y de lpidos, d) seleccionar el tipo de reactor ms adecuado para mxima produccin de biomasa al mnimo costo, e) lograr una cosecha al mnimo costo y f) lograr una extraccin de lpidos y su conversin a biodiesel, mediante estrategias de mnimo costo. El utilizar aguas residuales domsticas o de otro origen para cultivar a las microalgas oleaginosas en lagunas abiertas para lograr abatir los costos de produccin al mximo, es una opcin muy atractiva. Sin embargo, existen numerosos aspectos que an requieren intensa investigacin y desarrollo tales como: a) investigacin del efecto de los nutrientes presentes en el agua residual sobre la produccin de lpidos, b) maximizacin de la penetracin de la luz, mediante combinaciones de altura de la lmina y densidad celular, c) induccin de predominancia de ciertas especies oleaginosas, d) control de contaminantes, e) aumento de productividad mediante uso eficiente de gases residuales ricos en CO2, f) induccin de auto-floculacin. Se concluye que deben fortalecerse los grupos de investigacin con enfoques multi-disciplinarios para lograr responder a corto, mediano y largo plazo a los retos antes mencionados.
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CR-BD-2 METODOLOGA PARA EL AISLAMIENTO Y SELECCIN DE CEPAS Mnica Cristina Rodrguez Palacio Universidad Autnoma Metropolitana, Mxico mony@xanum.uam.mx Para aislar del medio natural microalgas y lograr establecer cultivos, lo primero que debemos considerar son sus requerimientos fisicoqumicos bsicos para garantizar su supervivencia, as por ejemplo, nuestra especie de inters es una diatomea, debemos elaborar un medio de cultivo que contenga una fuente de slice, si queremos cultivar euglenas uno que contenga una fuente de amonio, etc. Los medios de cultivo pueden ser artificiales, naturales; slidos o lquidos; convencionales, alternativos y enriquecimientos. Las tcnicas de aislamiento son claves para conseguir nuestra especie de inters, algunas son selectivas como la de aislamiento con micropipetas y capilares, y otras como rayado en estras con agar y diluciones seriadas, nos servirn cuando se dificulte el aislamiento individual, por la calidad de la muestra. Para el aislamiento se recomienda utilizar placas de microtitulacion de 96 pozos, de fondo plano, con una capacidad por pozo de 200 l, y una vez se inicien las divisiones celulares, esta biomasa inicial se ir escalando a microplacas de mayor volumen por pozo, hasta resembrar en tubos de 10 ml de capacidad. Es importante conservar la cepa en condiciones ideales ya que el colapso causara no solo la prdida de la misma, sino una prdida de resultados sobre las investigaciones que se estn realizando. Una vez establecidos los cultivos, se deben realizar pruebas a pequea y mediana escala para seleccionar la cepa adecuada, ya que aun siendo del mismo gnero se pueden presentar diferencias en crecimiento, cambios morfolgicos y composicin celular, por lo que se hacen necesarios mtodos adecuados de clasificacin y seleccin. La seleccin debe ir encaminada a obtener productos de valor agregado y altas tasas de produccin de biomasa algal en cultivos masivos. Los principales criterios que se deben analizar para este fin son: respuesta a cambios de temperatura, a la fotoinhibicin, cambios en las concentraciones de O2 y CO2, la sensibilidad al stress osmtico. Se deben tambin realizar anlisis bromatolgicos en fase exponencial y en fase estacionaria para garantizar no solo la adaptacin de la cepa sino la calidad de la misma. Aunque existen muchos ceparios a nivel mundial donde podemos comprar cepas, es importante trabajar a gran escala con microalgas que hayan sido aisladas de la zona de estudio, porque estn adaptadas a las condiciones ambientales propias del lugar, lo que en principio facilitara su cultivo y desarrollo y adems evitamos la introduccin de especies exticas que puedan desplazar a las nativas lo que podra ocasionar daos ecolgicos.
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CR-BD-3
BIORREACTORES PARA EL CULTIVO DE MICROALGAS

F.Gabriel Acin Fernndez Dpto. Ingeniera Qumica, Universidad de Almera, Espaa facien@ual.es Las microalgas son microorganismos con un elevado inters en diversas reas entre la que cabe destacar la produccin de-novo de cidos grasos poliinsaturados omega-3 de cadena larga, carotenoides como la astaxantina, lutena o b-caroteno, diversas ficobiliprotenas, hexopolisacridos sulfurados y otros productos de aplicacin diettica, farmacolgica y clnica, para el tratamiento de diversas enfermedades. Tambin ha despertado reciente inters por sus mltiples aplicaciones medioambientales como la fijacin de CO2 o su aplicacin a la retirada de contaminantes (biorremediacin) en suelos, humedales y otros espacios naturales. Recientemente se ha propuesto la obtencin de biocombustibles a partir de microalgas como una alternativa al uso de combustibles fsiles. Las microalgas son microorganismos fotosintticos en su inmensa mayora, por lo que crecen obteniendo su energa metablica de la luz y utilizando como sustratos agua y CO2 para la generacin de su biomasa, a la vez que desprenden oxgeno. Son muchos, por tanto, los factores que diferencian el cultivo de microalgas del de otros microorganismos, y lo que justifica la necesidad de disear y construir reactores diferentes de los empleados para la produccin de otros microorganismos. Adicionalmente, cabe resaltar que los ltimos avances en el cultivo de microalgas se han conseguido en su mayora con el uso de reactores cerrados que permiten cultivar las cepas de mayor valor aadido. En este sentido, el diseo de fotobiorreactores cerrados es un aspecto clave en la biotecnologa de microalgas as como el control de los factores ambientales que promueven el crecimiento ptimo de las microalgas y la acumulacin de los productos de inters. El presente curso recoge el estudio de los factores que influyen el crecimiento microalgal (nutrientes, temperatura, pH, luz, CO2, O2, estrs mecnico, etc.) y aborda los fundamentos del diseo y anlisis de los diversos sistemas de cultivo a partir de stos. Se hace especial nfasis en el diseo de fotobiorreactores cerrados por su inters en la produccin de microalgas productoras de sustancias de alto valor aadido. Estos objetivos se concretan en los siguientes epgrafes: (i) Influencia de los factores ambientales en el crecimiento de biomasa y en la generacin de producto, (ii) Modelos cinticos y crecimiento limitado por luz, (iii) Intercambio de gases y modelos de distribucin de luz, (iv) estrs celular y fluidodinmica en fotobiorreactores, (v) diseo integrado de fotobiorreactores y operacin de los mismos.
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CR-BD-4 BIO-ENGINEERING ASPECTS OF MICROALGAL CULTIVATION FOR BIO-FUELS Ben-Amotz Ami The National Institute of Oceanography Nature Beta Technologies Ltd & Seambiotic Ltd, Israel ami@benamotz.com When grown rapidly, microalgae can fix solar energy in the chemical bonds of their cells with an efficiency approaching 3 percent of the energy in the visible portion of the solar spectrum. This efficiency is year round about 10 times as great as that attainable by the major plant crops such as corn, rice, sugar cane and wheat. Cultivation methods for microalgae in open ponds have been developed to a point where media specification and unit designs are fairly standard, but there remain many technical, engineering and economic questions that stay between the desired productivity and the present available data to produce algal bio-fuels. In this presentation we will deal with a few basic practical design requirements for open ponds to produce freshwater and marine microalgae at max. We will cover the significant progress in algal biomass production since the first large scale engineering design and trial of open raceways by Prof. W. J. Oswald and associates in the USA, the Dunaliella project 1983. The original layout system design of open raceways passed significant technological changes over the last 25 years which make it attractive today for feasible algal bio-energy production. The major issues which will be reviewed and discussed within the frame of algal cultivation design in open system are: area layout, pond size and design, ground infrastructure, depth, pond lining and liners, paddle wheels, flow velocity and turbulence, head loss and depth, carbonation and pH control, system control and accessories. Our aim is to focus on the major technological requirements to reach the target of over 3 percent photosynthetic efficiency in open ponds as equivalent to yearly average productivity of over 25grams algae/m2/day (222 pounds algae/acre/day).
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CR-BD-5 MTODOS DE COSECHA DE MICROALGAS Mara Concepcin Lora Vilchis Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Mxico cony04@cibnor.mx Como en cualquier sistema de produccin de microorganismos, la separacin de las clulas suspendidas, del medio de cultivo, debe ser parte del proceso de produccin. Una separacin eficiente es probablemente uno de los factores ms importantes para que la produccin de biomasa microalgal sea econmicamente viable considerando que el costo puede ser del 20-30% del total. El pequeo tamao de las microalgas (5-50 m), la carga negativa, en algunos casos la movilidad, la densidad similar al medio que las contiene; son factores que favorecen suspensiones celulares estables pero que representan una dificultad en la separacin y recuperacin de la biomasa. Cuando se piensa en cosechar las microalgas, es fundamental considerar la baja densidad de biomasa en los cultivos (0.02-0.06%) para optar por las metodologas para concentrar la biomasa hasta nivel de pasta (5-25%) en uno o varios pasos secuenciales; lo que puede influir en gran medida en la composicin bioqumica y en los procesos sub-siguientes como secado o extraccin de los compuestos finales que se desean obtener. El curso se iniciar con el estudio de las caractersticas de las microalgas que les permiten permanecer en suspensin en forma estable, a continuacin, los mtodos de cosecha, sealando los fundamentos de cada uno. Tres categoras metodolgicas sern revisadas, las que se basan en la gravedad especfica como sedimentacin, flotacin y centrifugacin, la filtracin mediante membranas, tamices y el empleo de flujo tangencial, la floculacin por los diferentes mtodos autofloculacin, qumicos, elctricos y la biofloculacin. Los mtodos de preservacin de la biomasa obtenida y la fase de secado se revisarn al final junto con una discusin de las alternativas tecnolgicas y de los retos que an quedan por resolver. Programa: 1.- Microalgas en su medio ambiente, carcter coloidal y estabilidad de la suspensin celular. 2.- Mtodos de concentracin: Centrifugacin Sedimentacin. Flotacin. Filtracin. Sistemas de filtracin. Autofloculacin. Floculacin qumica. Electro-floculacin. Biofloculacin. 3.- Mtodos de preservacin de la biomasa 4.- Secado
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CR-BD-6 TRANSFORMACIN DEL ACEITE DE MICROALGAS A BIODIESEL Georgina Sandoval Unidad de Biotecnologa Industrial. Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco (CIATEJ), Av. Normalistas 800, 44270 Guadalajara, Jal. Mxico Despus de ver en el curso algunos aspectos sobre el aislamiento, cultivo y cosecha de microalgas, en esta parte se abordarn algunas cuestiones bsicas sobre la qumica de aceites y de su transformacin a biodiesel, en particular las reacciones de esterificacin, interesterificacin y transesterificacin. Posteriormente se presentarn las tecnologas establecidas y emergentes para la transformacin del aceite a biodiesel: Catlisis alcalina Catlisis cida Catlisis enzimtica Catlisis heterognea Ultrasonido Solventes supercrticos
Se revisarn las ventajas y desventajas de estas tecnologas y finalmente algunos aspectos sobre la normatividad vigente para el biodiesel. Algunas lecturas tiles sobre el tema de transformacin de son las siguientes: Meher, L. C., D. V. Sagar, Naik SN. (2006). "Technical aspects of biodiesel production by transesterification - a review ". Renewable & Sustainable Energy Reviews 10: 248-268. Sandoval, G., J. S. Condoret, Monsan P, Marty A. (2002). "Esterification by immobilized lipase in solvent-free media: Kinetic and thermodynamic arguments". Biotechnology and Bioengineering. 78: 313-320. van Thuijl, E., Roos, C.J, Beurskens, L.W.M (2003). An overview of biofuel technologies, markets and policies in Europe. Energy research Centre of the Netherlands (ECN) Policy Studies. ECN-C--03-008. Amsterdam The Netherlands. Vasudevan, P.T., Briggs, M. Biodiesel production current state of the art and challenges (2008). J Ind Microbiol Biotechnol, 35:421430.
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PLENARIAS Y CONFERENCIAS INVITADAS

Production of marine microalgae on carbon dioxide emitted by electric power plants, refineries and chemical industries for cost effective bio-fuels Ami Ben-Amotz The National Institute of Oceanography (Israel) Wastewater treatment with constructed wetlands: from lab to full-scale Joan Garca Technical University of Catalonia (Spain) Sntesis enzimtica de biopolmeros: procesos limpios y amigables con el ambiente Georgina Sandoval Unidad de Biotecnologa Industrial, CIATEJ (Mxico) Bioprospeccin en Biotecnologa Ambiental en Mxico Katiushka Arvalo Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL (Mxico) Transformacin enzimtica de disruptores endcrinos Rafael Vazquez-Duhalt Instituto de Biotecnologa, UNAM (Mxico) Aplicacin de la biotecnologa para el incremento de las capacidades productivas de la industria petrolera y el saneamiento de pasivos ambientales asociados Leopoldo Naranjo Briceo Direccin de rea de Energa y Ambiente, Fundacin Instituto de Estudios Avanzados, IDEA (Venezuela) Desarrollo de procesos de produccin de biocombustibles utilizando microalgas F.G. Acin Fernndez, J.M. Fernndez Sevilla, E. Molina Grima Dpto. Ingeniera Qumica, Universidad de Almera (Espaa) Microalgas y plantas cmo podemos utilizarlas para mitigar el cambio climtico? Eugenia J. Olgun INECOL (Mxico) Biocatalsis: herramienta til en procesos limpios para la sntesis de productos de alto valor agregado Alicia Baldessari Universidad de Buenos Aires (Argentina) Kinetic evaluation of nutrients degradation by a mixed culture of microorganisms in salty environment Hugo M. Soares Federal University of Santa Catarina (Brazil)
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LC-BL-1 PRODUCTION OF MARINE MICROALGAE ON CARBON DIOXIDE EMITTED BY ELECTRIC POWER PLANTS, REFINERIES AND CHEMICAL INDUSTRIES FOR COST EFFECTIVE BIO-FUELS Ben-Amotz Ami The National Institute of Oceanography Nature Beta Technologies Ltd & Seambiotic Ltd, Israel ami@benamotz.com Marine microalgae of the genus Dunaliella were considered for glycerol-biofuel production in the early seventies. The decline in oil price early in the eighties shifted the applied phycological activity to high value products like beta-carotene, astaxanthin, feed and food. The recent global demand for alternative fuels and the successive problem of global warming introduced massive attempts to produce algal biofuel at lower production feasible cost. One of the most interesting lines of search focuses on electric power plants, refineries and chemical industries which discharge flue gas containing CO2 the most important nutrient for algae production. New technology uses environment friendly scrubbing of coal burning flue gas to reduce SO2 while keeping the level of CO2 in the stack gas at above 13%. The flue gas passes through a wet scrubbing process of calcium carbonate to absorb toxic SO2 from above 600 to below 60 ppm while releasing flue gas with special composition of CO2, NOx, metals and moist at low pH. This scrubbing technology opened the way to cultivate mass quantities of marine unicellular algae by using fossil oil burning flue gas and cooling turbine sea water. Seambiotic Ltd., an Israeli company in collaboration with the Israeli Electric Corporation and research institutes established pilot plant algal production facility of 1,000m2 pond area in close vicinity to the power plant smokestack to test the biology, physiology, productivity and feasibility of marine microalgal mass cultivation on the power plant wastes, flue gas and turbine cooling sea water. Continuous cultivation over the last 4 years yielded intensive production of a few algae species of the classes Chlorophyceae, Eustigmatophyceae and Bacillariophyceae all containing high lipids content. The results were above expectation in terms of defined algal selection and by higher algal growth rate and biomass on coal burning flue gas compared to pure CO2. The yearly average productivity reached the level of 25 grams dry algal biomass per m2 per day which represents 3% photosynthetic efficiency. The algae were harvested and the conversion of the biomass to bio-diesel and bio-ethanol was tested in collaboration with other professional authorities. High yields of bio-diesel and bio-ethanol were noted on pilot plant studies. The phycological results and the positive economic evaluation led to the construction of new large scale industrial plant in China for cultivation of marine unicellular algae on wastes of electric power plant as a feasible source for feed, food and bio-fuels, most attractive and cost competitive to terrestrial higher plants like sugar cane and corn.
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LC-BA-2 WASTEWATER TREATMENT WITH CONSTRUCTED WETLANDS: FROM LAB TO FULL-SCALE Joan Garca Hydraulics, Maritime and Environmental Engineering Department Technical University of Catalonia c/ Jordi Girona 1-3, Mdul D-1, 08034 Barcelona, Spain joan.garcia@upc.edu Constructed wetlands (CW) are extensive systems used nowadays for the treatment of a great variety of wastewaters. Sanitation of small rural communities is probably the most well-known application. CW are characterized by their simplicity in operation, low or zero energy consumption, low waste production, low environmental impact and good integration in the landscape. These systems require great surface area in comparison to conventional wastewater treatments and therefore their application depends on land availability. Constructed wetlands can be used to restore ecosystems improving at the same time water quality. Also they can be used for the treatment of different types of sludges, and in particular those produced in conventional wastewater treatment plants. This presentation describes the most common types of constructed wetlands, their differences, their applications, all by means case studies. The main design factors such as hydraulic and organic loads, type of granular medium, aspect ratio of the wetlands, water depth and type of macrophytes will be also reviewed. Special importance will be given to clogging of subsurface-flow systems, which is the major operation and maintenance issue and ultimately limits the lifetime of the system. In relation with clogging, other technical properties such as inlet distributors, type of operation and applied loads will be discussed. The main contaminant removal processes will be presented in relation with the key role of redox conditions. Main biological processes linked to organic matter transformation will be described by means of the recent development made in wetland modelling, which is a powerful tool for understanding multiple interactions occurring in the wetlands. Environmental effects of CW will be shown by means the life cycle assessment of wetlands used for the treatment of sludges. Finally, some key references will be recommended and research needs will be described.
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LC-BP-3 SNTESIS ENZIMTICA DE BIOPOLMEROS: PROCESOS LIMPIOS Y AMIGABLES CON EL AMBIENTE Georgina Sandoval Unidad de Biotecnologa Industrial. Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco (CIATEJ), Av. Normalistas 800, 44270 Guadalajara, Jal. Mxico georgina@confluencia.net La bio-sntesis in vitro de polmeros catalizada por enzimas tiene diversas ventajas entre las que se encuentran un mejor control de la estructura y grado de polimerizacin, as como grandes ventajas desde el punto de vista ecolgico, al evitarse el uso de solvents txicos y requerir menor energa [1]. Las lipasas son actualmente las enzimas ms utilizadas en sntesis orgnica y dado que actan naturalmente sobre el enlace ster, han sido utilizadas con xito en la sntesis de diversas clases de polisteres. En esta presentacin explicamos como las herramientas de modelos termodinmicos [2-3], inmovilizacin y evolucin molecular de lipasas [4], pueden utilizarse para optimizar la sntesis de nanopartculas dendrticas polimricas derivadas de dicidos y policaprolactona [5]. Estos biopolmeros son biodegradables y bioabsorbibles, por lo que tienen aplicaciones como nano[6-7] y en biomaterials para implantes [8], entre otras. vehculos de medicamentos y genes
[1] [2]
Gross R.A., Ganesh M., Lu W. Trends in Biotechnol. 28, 435 (2010) Sandoval G., Condoret J.S., Marty A. AIChE J. 47,718 (2001). [3] Sandoval G., Condoret J.S., Monsan P, Marty A.. Biotech Bioeng. 78,313 (2002). [4] Cancino M, Bauchart P., Sandoval G., Nicaud J. M., Andre I., Dossat V., Marty A.. Tetrahedron: Asym. 19, 1608 (2008). [5] Sandoval G., Rivera I., Barrera-Rivera K., Martinez-Richa A. Macromol. Symposia 289,135 (2010). [6] Helms B., Meijer E.W. Science. 313(5789),929 (2006). [7] Paleos C.M., Tsiourvas D., Sideratou Z. Molec. Pharmaceutics. 4,169 (2007). [8] Albertsson, A. C.,Srivastava, R. K. Adv. Drug Deliv. Rev., 60, 1077 (2008).
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LC-BA-5 TRANSFORMACIN ENZIMTICA DE DISRUPTORES ENDCRINOS Rafael Vazquez-Duhalt Instituto de Biotecnologa UNAM vazqduh@ibt.unam.mx En el 2002 la Organizacin Mundial de la Salud defini a los DE como sustancias exgenas o una mezcla de ellas que alteran las funciones del sistema endcrino y consecuentemente causan efectos adversos en la salud en un organismo intacto o su progenie o poblaciones. La lista de DE es muy larga y diversa; por ejemplo, la Unin Europea public una lista que incluye 553 sustancias sintticas y 9 naturales (1), y cada ao se aaden nuevos compuestos. Los disruptores endcrinos ambientales exgenos pueden ser clasificados en dos grandes categoras: 1) productos naturales de plantas o de origen fngico, y 2) compuestos sintticos de origen humano, siendo stos los ms abundantes. En su mayora los DE ejercen un efecto estrognico ya que se asemejan estructuralmente al 17-estradiol, el estrgeno natural ms potente presente en los organismos (2). Los estrgenos exgenos ms potentes usualmente incluyen un grupo fenlico y un sustituyente hidrofbico de ms de 4 carbonos en posicin para con respecto al grupo fenlico (3). Los alquilfenol polietoxilatos son comnmente usados como surfactantes no inicos. En las plantas de tratamiento de aguas pueden sufrir degradacin parcial y dar lugar a compuestos como el nonilfenol y el octilfenol. Por su potencia, concentraciones de 1 g l-1 presentan un peligro significativo para las especies (4). El bisfenol-A es usado como intermediario en la produccin de resinas policarbonadas y epxicas. La concentracin media de BPA est tpicamente por debajo de 1.5 g l-1 aunque se han llegado a medir concentraciones locales de 25-146 g l-1 en aguas residuales (4). El triclosn es un antimictico de amplio espectro utilizado en productos de cuidado personal como desodorantes, jabones y dentrficos (5). Se ha observado que este compuesto es capaz de ejercer efectos tanto estrognicos como andrognicos en peces a concentraciones desde 20 g ml-1 (6). Los ftalatos son ampliamente usados en la manufactura de plsticos. Entre ellos, el butil bencil ftalato, dibutil ftalato y di(2-etil-hexil)ftalato son los que presentan mayor actividad estrognica. Los bifenilos polibromados se utilizan como retardantes de flama. Son compuestos de alta hidrofobicidad que afectan la funcin de la tiroides. Su potencia y concentraciones en el ambiente no son muy conocidas an, pero su carcter hidrofbico hace que persistan en el sedimento (4). Los fitoesteroles son compuestos provenientes de plantas productoras de pulpa de papel y se liberan durante los procesos de blanqueo. El principal compuesto presente en las aguas residuales de los extractos de la pulpa es el -sitoesterol, un esterol lipoflico. Se ha visto que en peces, el sitoesterol incrementa la concentracin de vitelogenina en plasma, reduce los niveles de esteroides sexuales y colesterol, e interfiere con la capacidad biosinttica de esteroides en las gnadas (7). Hay hormonas de uso farmacutico que se encuentran en aguas residuales en bajas concentraciones, pero que tienen una gran afinidad por los receptores del 17 b-estradiol. Dado que estos compuestos son administrados en altas concentraciones, los animales excretan gran parte en orina y heces que finalmente son desechadas como parte de las aguas residuales de granjas (8). En este trabajo se explora la capacidad de las lacasas en la transformacin de los disruptores endcrinos con el fin de reducir o eliminar su impacto ambiental. Se presentan datos cinticos y la naturaleza qumica de los productos de la biotransformacin.
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1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
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Matthiessen P 2003 Historical perspective on endocrine disruption in wildlife. Pure & Applied Chemistry 75:2197-2206 Celik L, Lund JDD, Schiott B 2007 Conformational dynamics of the estrogen receptor a: molecular dynamics simulations of the influence of binding site structure on protein dynamics. Biochemistry 46:1743-1758 Vazquez-Duhalt R, Marquez-Rocha F, Ponce E, Licea AF, Viana MT 2006 Nonylphenol, an integrated vision of a pollutant. Applied Ecology and Environmental Research 4:1-25 Johnson A. JM 2003 Endocrine active industrial chemicals: Release and occurrence in the environment. Pure & Applied Chemistry 75:1895-1904 Hundt K, Martin D, Hammer E, Jonas U, Kindermann MK, Schauer F 2000 Transformation of triclosan by Trametes versicolor and Pycnoporus cinnabarinus. Appl Environ Microbiol 66:4157-4160 Ishibashi H, Matsumura N, Hirano M, Matsuoka M, Shiratsuchi H, Ishibashi Y, Takao Y, Arizono K 2004 Effects of triclosan on the early life stages and reproduction of medaka Oryzias latipes and induction of hepatic vitellogenin. Aquatic Toxicology 67:167-179 Christianson-Heiska I, Smeds P, Granholm N, Bergelin E, Isomaa B 2007 Endocrine modulating actions of a phytosterol mixture and its oxidation products in zebrafish (Danio rerio). Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology 145:518527 Schiavone A, Tarantola M, Perona G, Pagliasso S, Badino P, Odore R, Cuniberti B, Lussiana C 2004 Effect of dietary clenbuterol and cimaterol on muscle composition, -adrenergic and androgen receptor concentrations in broiler chickens. Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition 88:94-100
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LC-BL-6 DESARROLLO DE PROCESOS DE PRODUCCIN DE BIOCOMBUSTIBLES UTILIZANDO MICROALGAS F.G. Acin Fernndez*, J.M. Fernndez Sevilla, E. Molina Grima Dpto. Ingeniera Qumica, Universidad de Almera Caada san Urbano S/N, 04120 Almera, Espaa *facien@ual.es El actual consumo de combustibles fsiles resulta insostenible a largo plazo debido al agotamiento de las reservas. Adems est provocando serios problemas debido al cambio climtico derivado de la movilizacin del dixido de carbono acumulado en dicho combustibles, a la atmsfera, mediante su combustin. La alternativa a este problema pasa por una disminucin en el consumo de energa, as como por la sustitucin de las actuales fuentes fsiles de energa por energas renovables. Entre las diferentes energas renovables existentes, la biomasa es una de las ms interesantes ya que es una fuente de energa almacenable y disponible a demanda. De estas, la biomasa rica en carbohidratos y/o lpidos es especialmente valiosa por la posibilidad de obtener a partir de la misma biocombustibles como el bioetanol y/o el biodiesel, utilizables por la actual flota de vehculos de transporte. Dentro de las biomasas propuestas como fuente de biocombustibles se enmarcan los microorganismos fotosintticos, microalgas y cianobacterias principalmente. La ventaja de este tipo de microorganismos frente a otros cultivos energticos como la soja, colza, palma, etc., es que no constituyen una fuente de alimentos, enmarcndose en lo que se denomina biocombustibles de segunda generacin. Adems, las microalgas y cianobacterias presentan ventajas frente a estos cultivos como el que no requieren suelo frtil para su desarrollo, as como pueden utilizar agua de mar y/o aguas procedentes de otros usos (urbanos o industriales) contribuyendo as a su depuracin, y consumen grandes cantidades de dixido de carbono por lo que tambin permiten depurar gases industriales. Todo ello hace de la produccin de biocombustibles a partir de microalgas y cianobacterias una alternativa altamente sostenible, por lo que en los ltimos aos grandes expectativas se han despertado a este respecto. A pesar de estas premisas, la produccin de biocombustibles a partir de microalgas y cianobacterias es hoy da slo una hiptesis cientfica y tcnica apenas soportada por algunos ejemplos de demostracin a escala piloto. La mayor parte de las experiencias actuales se derivan de plantas de produccin de pequea escala que en los ltimos aos han producido biomasa de microalgas para aplicaciones de valor como alimentacin animal-humana y productos nutracuticos. La produccin de biocombustibles a partir de estas experiencias es inviable por dificultades de coste y escala, siendo necesario desarrollar una reingeniera de todo el proceso, desde la clula a la obtencin del biocombustible. Las expectativas para alcanzar este objetivo son buenas ya que actualmente numerosos equipos multidisciplinares financiados por organismos pblicos y privados estn trabajando simultneamente en este tema, lo que sin duda favorecer el desarrollo de la biotecnologa en general y la de microalgas en particular como fuente de riqueza y progreso.
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LC-BA-7 APLICACIN DE LA BIOTECNOLOGA PARA EL INCREMENTO DE LAS CAPACIDADES PRODUCTIVAS DE LA INDUSTRIA PETROLERA Y EL SANEAMIENTO DE PASIVOS AMBIENTALES ASOCIADOS Leopoldo Naranjo Briceo Direccin de rea de Energa y Ambiente, Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA) C/ Hoyo de la Puerta-Baruta, Sartenejas, Caracas 1080, Venezuela. Tel. +58-212-9035094; Fax: +58-212-9035093 lnaranjo@idea.gob.ve En Venezuela, la Faja Petrolfera del Orinoco (FPO) constituye la mayor reserva probada de crudo pesado y extrapesado del mundo con ms de 580 miles de millones de barriles distribuidos en un rea 2 de 55,314 Km . Dichas reservas representan ms del doble de las que posee Arabia Saudita. Desde la nacionalizacin de la FPO y la empresa petrolera venezolana (PDVSA), se han creado nuevas asociaciones estratgicas con socios procedentes de 27 pases y se han establecido, al menos, diez empresas mixtas para la explotacin y refinacin de las reservas de petrleo de la FPO. La produccin estimada de estas asociaciones ser de aproximadamente 2 millones de barriles diarios para el ao 2016. A pesar de las enormes reservas, los crudos de la FPO poseen un bajo valor comercial ya que son ricos en heterotomos (S, N y O) y metales pesados como el nquel y el vanadio. As mismo, contienen altas concentraciones de asfaltenos y resinas, fracciones de mayor polaridad y peso molecular que constituyen el petrleo y responsables de la alta viscosidad de los mismos. Estas propiedades originan severos problemas operacionales durante los procesos de extraccin, transportacin y refinacin, generando mayores requerimientos energticos, la disminucin en la eficiencia de procesos y en un menor beneficio econmico. Desde el punto de vista ambiental, la expansin de los proyectos en la FPO generar grandes cantidades de desechos de perforacin (ripios impregnados con crudo y fluidos de perforacin) que se deben manejar y disponer adecuadamente. Adems, la existencia de ms de 12.000 fosas de hidrocarburos en el oriente y occidente del Pas ha trado como consecuencia la contaminacin de suelos y recursos acuferos. Por otro lado, las instalaciones de las operadoras petroleras enfrentan un grave y progresivo problema de corrosin inducida por microorganismos, lo cual pone en riesgo la integridad de sus trabajadores, el ambiente y el proceso productivo de la industria. La biotecnologa se ha consolidado en los ltimos aos como el conjunto de tecnologas encaminadas a la produccin de bienes y servicios mediante la utilizacin de sistemas biolgicos o sus productos. El uso complementario de la biotecnologa moderna en la industria petrolera proporciona nuevas herramientas para contribuir a garantizar o incrementar sus capacidades productivas, as como mitigar el impacto ambiental generado por la misma. En vas de garantizar el desarrollo sustentable de la nacin, la integracin de los organismos regionales y de los diversos pases que conforman las alianzas estratgicas con la industria energtica nacional, la Direccin de Energa y Ambiente del IDEA ha emprendido acciones dirigidas a desarrollar conocimientos y biotecnologas innovadoras y complementarias que permitirn: i) mejorar el factor de recobro de crudo en yacimientos; ii) dar valor agregado y un mayor valor comercial a los
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crudos no convencionales de la FPO; iii) remediar los pasivos ambientales asociados a la industria petrolera; iv) contribuir con la disminucin de los costos operativos asegurando el funcionamiento continuo de los procesos en toda la cadena de valor y; v) la produccin de hidrocarburos verdes, biocombustibles y bioderivados de usos mltiples para la industria petrolera. La ponencia se centrar en los avances recientes de estas interesantes lneas de investigacin, y su impacto sobre las capacidades operativas y productivas de la industria petrolera y la conservacin del medio ambiente.
Palabras clave: Biotecnologa, Petrleo, Ambiente, Faja del Orinoco
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LC-BA-8 MICROALGAS Y PLANTAS CMO PODEMOS UTILIZARLAS PARA MITIGAR EL CAMBIO CLIMTICO? Eugenia J. Olgun Instituto de Ecologa, Xalapa, Veracruz, Mxico Antigua Carretera a Coatepec # 351, El Haya. Xalapa, Veracruz, 91070, Mxico eugenia.olguin@inecol.edu.mx El cambio climtico es un acontecimiento global cuyas consecuencias ambientales, econmicas y sociales ya son de gran magnitud. Uno de los factores que contribuyen de manera ms importante a este fenmeno es la acumulacin de Gases Efecto Invernadero (GEI) como el CO2 proveniente de la combustin de combustibles fsiles. En consideracin a lo anterior, el desarrollo de biocombustibles renovables y carbono neutrales, representa una de las alternativas ms importantes para mitigar el cambio climtico. En este trabajo, se revisan algunos aspectos crticos en la investigacin y desarrollo de dos biocombustibles, el biodiesel a partir de microalgas y la produccin sustentable de bioetanol carburante mediante el uso de plantas para el tratamiento de vinazas. En el primer caso, se discuten los principales retos que requieren respuestas creativas de investigacin y desarrollo: seleccin de las especies ms adecuadas; induccin de las condiciones de cultivo para lograr mxima productividad de biomasa y de lpidos, seleccin de los reactores ms apropiados, optimizacin de la cosecha de biomasa y de la extraccin de lpidos y produccin de compuestos de valor agregado a partir de la biomasa residual. Se destaca la importancia de las Evaluaciones del Ciclo de Vida y de los escenarios realistas de productividad en las consideraciones de la viabilidad econmica del proceso, as como la importancia del uso de aguas residuales. En el caso de la produccin sustentable de bioetanol, se discute el uso de plantas tropicales (Pontederia sagittata) en humedales construidos de flujo subsuperficial (HCFSSP) para tratar vinazas. Estas ltimas son aguas residuales generadas durante la destilacin del etanol, que contienen una alta concentracin de materia orgnica y compuestos txicos y recalcitrantes (fenoles y melanoidinas). Se presentan resultados de la evaluacin de HCFSSP para el tratamiento de vinazas diluidas en diversas condiciones y pocas del ao, as como la diversidad microbiana de las biopelculas fotoautrotficas en dos tipos de substratos, concluyendo que el uso de estas fitotecnologas permite remover altos porcentajes de materia orgnica, nutrientes y sulfatos, logrando niveles permisibles de descarga o permitiendo re-utilizar estas aguas residuales de las alcoholeras en una prctica segura de ferti-riego.
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LC-BP-9 BIOCATALSIS: HERRAMIENTA TIL EN PROCESOS LIMPIOS PARA LA SNTESIS DE PRODUCTOS DE ALTO VALOR AGREGADO Alicia Baldessari Laboratorio de Biocatlisis. Dpto. de Qumica Orgnica y UMYMFOR Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires Ciudad Universitaria, Pabelln 2 Piso 3. (C1428EGA) Buenos Aires, Argentina alib@qo.fcen.uba.ar A pesar del alto grado de desarrollo alcanzado en la obtencin de productos industriales de alto valor agregado, todava persisten algunos problemas vinculados al cuidado del medio ambiente. Estos procesos se llevan a cabo en condiciones drsticas de reaccin que involucran un considerable gasto de energa. Adems, la naturaleza agresiva de muchos reactivos empleados complica los procesos de tratamientos de efluentes. Actualmente resulta importante administrar los recursos renovables en forma racional, especialmente eliminando el uso y generacin de sustancias peligrosas y desarrollando caminos productivos ms cortos con mejores rendimientos y ahorro de energa y materias primas, conocidos como procesos limpios. La Biocatlisis se presenta como una herramienta til para generar estos procesos. El uso de enzimas aisladas o formando parte de microorganismos como biocatalizadores contribuye en todo este campo, ya sea diseando nuevos procesos u ofreciendo soluciones alternativas para mejorar los ya aplicados. Algunas enzimas como las lipasas pueden ser utilizadas en reacciones de sntesis, en sentido inverso al de la hidrlisis que efectan en el ambiente celular. De esta manera tienen aplicacin en variados procesos en la industria alimenticia, farmacoqumica, cosmtica, etc. Nuestro grupo de investigacin ha aplicado la metodologa enzimtica utilizando lipasas de manera exitosa en varios tipos de reacciones que produjeron una variedad de productos con aplicacin prctica para la industria. Se han obtenido derivados acilados de variados productos naturales como sesqui- y diterpenos, esteroides y vitamina B6 que mostraron actividad como antivirales, hormonas, neuro- y glucocorticoides, integrantes de formulaciones cosmticas y aditivos alimentarios. La estrategia biocatltica con lipasas se aplic en la sntesis limpia de medicamentos comerciales como un compuesto contra la hipertrofia prosttica benigna y un bactericida de amplio espectro. Las lipasas tambin resultaron apropiadas como catalizadores en la sntesis de monmeros acrlicos y polmeros: polisteres, poliacrilamidas y polimidoaminas, tiles como biomateriales en liberacin controlada de medicamentos e ingeniera de tejidos. Otra estrategia biocataltica que conduce a procesos limpios constituye la aplicacin de clulas enteras de microorganismos como fuente de enzimas. Dentro de este campo se han estudiado reacciones de reduccin de variados compuestos dicarbonlicos catalizadas por hongos y levaduras obtenindose hidroxisteres, hidroxicetonas y dioles con elevada estereoselectividad trabajando en medio acuoso y orgnico, con clulas en crecimiento y reposo, en cultivos frescos, esporas y diferentes mtodos de conservacin de los microorganismos. Los microorganismos permitieron realizar este tipo de reacciones evitando el uso de agentes oxidantes y reductores txicos y de difcil tratamiento para su disposicin como residuos.
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LC-BA-10 KINETIC EVALUATION OF NUTRIENTS DEGRADATION BY A MIXED CULTURE OF MICROORGANISMS IN SALTY ENVIRONMENT Hugo M. Soares Federal University of Santa Catarina, Brazil soares@enq.ufsc.br Many natural processes deal with multi nutrients availability inducing mixed culture of microorganisms to be able to grow in these systems. Thermodynamics indicates priorities on which nutrient would be used one after another establishing microbial population predominance. The understanding of how these systems respond to microbial growth stimulation is important to manage these processes. Bioremediation of oil spiels and complex wastewater treatment are good example of these systems. Salty environments are not very well studied because it is toxic to many microorganisms and its specific application. Offshore petroleum exploration is increasing very fast supporting the needs to study these systems. This work aimed to optimize the microbial enhanced oil recovery process (MEOR). The laboratory procedure was developed to preserve the major microbial diversity found in a produced water of a Brazilian offshore oilfield, in order to characterize some of the possible microbial activities in this environment. One sample from produced water was used to inoculate a 20 L fed batch reactor, fed daily with synthetic seawater amended with nitrate and acetate. Several kinetic assays were performed in anaerobiosis, at 40C, using 30 mL sacrifice flasks, in order to evaluate the activity of the reactor enriched culture. Tests were conducted with different substrates to stimulate heterotrophic denitrification, autotrophic denitrification, sulfate reduction and metanogenesis. Results indicate that after 260 days of reactor operation, all the microbial groups tested were very active, performing their metabolic niches, consuming electrons donors and acceptors at correlations close to theoretical stoichiometric values. Many metabolic activities investigated were able to occur in the same reactor.
Key words: Petroleum microbiology, produced water, microbial kinetics: metanogenesis, sulfate reduction and denitrification
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MESAS REDONDAS
AGUA: Potencial y limitaciones de la biotecnologa algal en la depuracin de aguas residuales Ral Muoz Universidad de Valladolid (Espaa)
BIOPROCESOS MS LIMPIOS Y SUSTENTABILIDAD: Bioprocesos ms limpios y sustentabilidad Eduardo Torres Ramrez Universidad Autnoma de Puebla, Centro de Qumica, ICUAP (Mxico)
BIOCOMBUSTIBLES: La digestin anaerobia en el tratamiento simultneo de residuos municipales O. Monroy Biotechnology Department, Universidad Autnoma Metropolitana (Mxico)
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Mesa Redonda - Agua

MR-BA-1 POTENCIAL Y LIMITACIONES DE LA BIOTECNOLOGA ALGAL EN LA DEPURACIN DE AGUAS RESIDUALES Ral Muoz Dpto. Ingeniera Qumica y Tecnologa del Medio Ambiente. Universidad de Valladolid C/ Dr. Mergelina s/n, 47011, Valladolid, Espaa mutoraul@gmail.com Palabras clave: Aguas residuales, eficiencia energtica, eliminacin de nutrientes, huella de agua, simbiosis microalga-bacteria Su metabolismo autotrfico unido a un eficaz funcionamiento simbitico con bacterias hetertrofas y nitrificantes, confiere a microalgas y cianobacterias un valioso potencial en biotecnologa ambiental que va desde la eliminacin de materia orgnica, nutrientes y metales pesados de aguas residuales, a la captura de CO2 y produccin de bioenerga. A da de hoy, estos ltimos (captura de CO2 y produccin de energa) resultan econmicamente prohibitivos sino se encuentran acoplados a un proceso de depuracin de aguas residuales que suministre agua y nutrientes a muy bajo coste (Muoz y Guieysse, 2006). A pesar de sus mayores eficiencias fotosintticas (producciones de biomasa demostradas de 1-1.5 kg m-3d-1 asociadas a requerimientos de nitrgeno y fsforo de 68 y 8.5 g m-3d-1, respectivamente), el alto coste de los fotobiorreactores cerrados ( 100 m2 vs 10 m2 para lagunajes de alta carga, HRAP) unido a su rpido ensuciamiento por biofouling hacen que la depuracin fotosinttica de aguas residuales solo se pueda llevar a cabo a da de hoy en fotobiorreactores abiertos (generalmente HRAPs). Estos sistemas, con producciones medias anuales demostradas de 20 g m-2d-1 (correspondientes a eficiencias fotosintticas del 2-3 %), presentan potenciales de oxigenacin de 100 g O2 m-3 d-1, eliminaciones de N y P de 4.5 g N m-3 d-1 y 0.6 g N m-3 d-1, respectivamente, y unos costes energticos en aireacin muy inferiores a los necesarios en lodos activos (0.01-0.03 KWh m-3 tratado vs 0.09 kwh m-3 tratado). Una correcta eliminacin de materia orgnica en HRAPs requerira una operacin a 6 das de tiempo hidrulico de residencia mientras que la eliminacin de nutrientes elevara este tiempo de residencia a 9 das (considerando un -1 -1 -1 agua residual domstica con 400 mg DQO l , 40 mg N l y 5 mg P l ). El empleo de HRAPs contribuira adems a mejorar enormemente la eficiencia energtica de las actuales Estaciones Depuradoras de Aguas Residuales (EDARs) mediante la disminucin de los requerimientos energticos en oxigenacin (0.21 wh g DQO-1 en configuraciones desnitrificacionnitrificacin frente a 0.075 wh g DQO-1 en HRAPs) y el aumento de la produccin de energa en la digestin anaerobia de la biomasa algal generada (a consecuencia de una mayor generacin de biomasa). As, el dficit energtico de EDARs basadas en difusin de oxgeno en los tanques de -1 aeracin disminuira de 0.18 wh g DQO a -0.17 wh/g DQO en plantas basadas en HRAPs (Figura 1).
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a
100
Primario
33 70
Secundario
10
Conversin 45% SV
25
27
Digestion Anaerobia
b
100
Primario
32
70
Secundario
10
42
Conversin 35% SV Digestion anaerobia
81
69
Figura 1. Balances de Demanda Qumica de Oxgeno a una EDAR basada en aeracin por difusin (a) y en HRAPs (b).
La implementacin de estrategias de pre-tratamiento con el fin de aumentar la biodegradabilidad de la biomasa algal generada de 35 al 55 % (como en lodos secundarios de depuradora) reducira este dficit energtico a -0.43 wh g DQO-1 (Sialve y col. 2009). Como principales contrapartidas una EDAR basada en HRAP presenta unos elevados usos de terreno (p.e, 400 hectreas seran necesarias 3 -1 para tratar 130.000 m d de una agua residual con la composicin arriba descrita) y una mayor generacin de lodos residuales (115 % o 61 % mayores sin o con pretratamiento, respectivamente). Por otro lado, la elevada huella hidralica de estos sistemas aparece tambin como una de sus principales desventajas, especialmente en zonas con un alto estrs hidrulico. A modo de ejemplo, un 11 % del agua residual arriba mencionada se perdera por evaporacin durante su tratamiento en HRAPs, mientras que este valor puede ascender al 21 % para aguas residuales de alta carga (considerando velocidades de viento de 1 m s-1, temperaturas del aire de 15 C e irradiaciones -2 medias de 230 w m ) (Bechet y col. 2009) Agradecimientos El Ministerio de Ciencia e Innovacin Espaol a travs del contrato RYC-2007-01667 y la Agencia Espaola de Cooperacin para el Desarrollo a travs del proyecto A/023287/09 son cordialmente agradecidos por su apoyo a este trabajo. Bibliografa
Bechet Q, Shilton A, Guieysse B (2009) The water footprint of algae biofuels. Proceedings of the IWA-Water & Industry 2009, Palmerston North, New Zealand Muoz R, Guieysse B (2006) Algal-bacterial processes for the treatment of hazardous contaminants: a review. Water Research. 40: 2799-2815. Sialve B, Bernet N, Bernard O (2009) Anaerobic digestion of microalgae as a necessary step to make microalgal biodiesel sustainable Biotechnology Advances. 27, 409-416.
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Mesa Redonda - Bioprocesos Ms Limpios y Sustentabilidad

MR-BP-2 BIOPROCESOS MS LIMPIOS Y SUSTENTABILIDAD Dr. Eduardo Torres Ramrez Universidad Autnoma de Puebla, Centro de Qumica-ICUAP eduardo.torres@icbuap.buap.mx Los bioprocesos limpios estn llamados a sustituir a los procesos qumicos por sus caractersticas, eficiencias y condiciones de reaccin, as como los subproductos de desecho generados, los cuales son generalmente biodegradables o no txicos al ambiente. Por ejemplo, la transformacin de hidrocarburos saturados a alcoholes es posible llevarla a cabo a condiciones ambiente mediante el sistema con citocromo P450, mientras que su contraparte qumica necesita de la activacin del alcano a alqueno, en un proceso a elevadas temperaturas y presiones. Por otro lado, los bioprocesos aplicados a la industria del petrleo han mostrado un potencial importante de impacto en la condiciones de refinacin. La remocin selectiva de compuestos organoazufrados de un diesel mediante una oxidacin biocataltica a 25 C acoplada a una destilacin permite alcanzar niveles de azufre 80% menos que el slo proceso de destilacin. El proceso convencional de desulfurizacin es llevada actualmente en condiciones de alta presin y temperatura. Dentro de los bioprocesos limpios tambin pueden considerarse aquellos donde se aprovechan residuos o desechos biolgicos u orgnicos para generar compuestos de valor comercial siempre y cuando el proceso se lleve a cabo en condiciones amigables al ambiente. Para ilustrar este punto se puede mencionar la generacin de biopolmeros a partir de bioxdo de carbono o la produccin de biocombustibles a partir de desechos agrcolas. En esta mesa se profundizar a mayor detalle los ejemplos mencionados aqu mediante la participacin de especialistas en el rea de bioprocesos y sustentabilidad.
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Mesa Redonda - Biocombustibles

MR-BA-3 LA DIGESTIN ANAEROBIA EN EL TRATAMIENTO SIMULTNEO DE RESIDUOS MUNICIPALES F. Ramrez-Vives, A. de Jess-Rojas, R. Cruz Huizache, R. I. Rodrguez-Pimentel y O. Monroy Biotechnology Department, Universidad Autnoma Metropolitana Av. San Rafael Atlixco 186, Col. Vicentina, 09340 Iztapalapa, D.F, Mxico Tel. (52 55) 58044723 monroy@xanum.uam.mx Para recuperar nutrientes y energa de la materia orgnica presente en las aguas residuales y en la basura la digestin anaerobia presenta ventajas tecnolgicas que obligan a su tratamiento simultneo en plantas descentralizadas. As, la fraccin orgnica de los residuos slidos urbanos (FORSU) se puede hidrolizar y fermentar en reactores de lecho escurrido (RLE) usando agua residual que disuelva la materia orgnica hasta agotar la fraccin degradable. El producto de la lixiviacin puede alimentarse a un reactor de lecho expandido de lodos anaerobios (EGSB) que trata el agua residual proveniente de la misma comunidad que gener la basura orgnica. Los lodos generados de este tratamiento pueden agregarse a la basura para ser digeridos junto con ella. Con esto se cierra un crculo que minimiza los residuos generados y concentra el biogs para ser ms fcilmente aprovechado. La digestin anaerobia de la FORSU se estudi en un sistema de dos fases. En la primera, la hidrlisis y acidognesis se llev a cabo en un RLE intermitente. A cargas orgnicas de 135 g ST/L y tiempos de reaccin de 30 das, se obtiene una reduccin de slidos de 45% y 85% de eliminacin de materia orgnica. Los lixiviados producidos que contenan hasta 120 g DQO/L se diluan con agua residual y se alimentaban a un reactor EGSB con cargas desde 13 a 25 g/Ld con eficiencias de eliminacin de DQO de 90% y tiempos de residencia entre 24 y 4 horas. Estos resultados muestran que separando los componentes ms fcilmente hidrolizables y fermentables de la basura con una lixiviacin inducida con agua residual se puede tratar la basura en tiempos de residencia de 30 das ofreciendo una salida al problema de disposicin de residuos y tratamiento de basuras que padecen los habitantes de las ciudades, al minimizar las reas destinadas al tratamiento y los costos.
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OR-BA-1 CARACTERIZACIN BIOQUMICA Y MOLECULAR DE BACTERIAS PLANCTNICAS ASOCIADAS A SISTEMAS DE DISTRIBUCIN DE NAFTA Y SU IMPLICACIN EN PROCESOS DE BIOCORROSIN EN INSTALACIONES PETROLERAS De Sisto A.1, Naranjo Briceo L.1, Inojosa Y.1, Rojas Tortolero D.1, Sena L.1, Gonzlez M.1, Freites M.1, Perna B.1, Garca D.1, Zoilabet Duque2 Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela. http://www.idea.gob.ve 2 Fundacin Instituto Zuliano de Investigaciones Tecnolgicas (INZIT). Unidad de Investigacin en Biodeterioro Industrial, Estado Zulia, Venezuela adesisto@idea.gob.ve La industria petrolera utiliza la nafta como diluente del crudo pesado y extrapesado para reducir su viscosidad, hacerlos ms fluidos y mejorar su transporte a travs de los oleoductos. Frecuentemente, los sistemas de distribucin de nafta y de crudo diluido (DCO) enfrentan problemticas generadas por los microorganismos (hongos y bacterias). Adems de la biodegradacin de la nafta y consecuente riesgo en la disminucin de la eficiencia del proceso productivo, se han reportado deterioros de las lneas de produccin caracterizada por daos corrosivos locales, los cuales van aunados a la presencia de agua en el sistema y a la interrelacin de consorcios microbianos promotores de la biocorrosin. Es conocido que las fugas de nafta en las tuberas se presentan frecuentemente y se clasifican como crticas, generando daos al ambiente, prdida de la produccin, incremento de los costos operativos y riesgo laboral. Dada la importancia del problema, la finalidad del presente trabajo fue aislar y caracterizar morfolgica, bioqumica y molecularmente microorganismos cultivables asociados a los sistemas de almacenamiento (tanques) y de distribucin (tuberas) de nafta de una operadora petrolera en Venezuela. Se aislaron 87 bacterias aerbicas cultivables en medio de cultivo hetertrofo (LB) provenientes de cuatro (4) puntos diferentes dentro del sistema de distribucin de nafta. Se detect la presencia de bacterias anaerbicas del grupo reductor de sulfato (SRB) asociado a la biocorrosin en un sitio de alta criticidad. Las descripciones morfolgicas preliminares indican una alta prevalencia de bacterias gram positivas del tipo cocos con relacin a las gran negativas del tipo coco y coco-bacilos. La determinacin de la huella gentica o DNA Fingerprinting permiti discriminar genotpicamente las bacterias aisladas y agruparlas en 26 grupos bacterianos. Los resultados morfolgicos y moleculares fueron correspondidos encontrndose un predominio del gnero Staphylococcus, seguido de Acinetobacter, Bacillus, Proteus, Buttiauxella y, Ignatzschineria. Se destaca el aislamiento de hongos filamentosos y levaduriformes cultivables pertenecientes a las especies: Sporidesmium tengii, Cladosporium cladosporioides, Rhodotorula mucilaginosa y Wickerhamia sp. Los ensayos preliminares de agresividad indican la potencialidad corrosiva de algunas cepas arobicas aisladas, especialmente del gnero Staphylococcus. Se concluye que en el sistema estudiado existe una alta diversidad bacteriana con predominancia de las especies aerbicas gram positivas del tipo cocos, las cuales han sido previamente reportadas en la literatura como asociadas a procesos de biocorrosin, siendo Staphylococcus la bacteria que present mayor tendencia corrosiva.
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OR-BA-2 APLICACIN DE XRF EN LA MEDICIN DE ARSNICO Y FSFORO EN Azolla filiculoides Snchez Viveros Gabriela1, Ruvalcaba Sil Jos Luis2, Alarcn Alejandro3, Ferrera Cerrato Ronald3
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Facultad de Agronomia. Universidad Tecnologica de Tantoyuca. Desviacin Lindero Tametate s/n. CP 92100. Colonia La morita. Tantoyuca Ver, Mxico. 2 Instituto de Fsica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Apartado Postal 20-364, 01000 Mxico, DF, Mxico. 3 rea de Microbiologa, Postgrado de Edafologa, Colegio de Postgraduados Campus Montecillo, Carretera Mxico-Texcoco km 36.5. Montecillo, Texcoco, Estado de Mxico gabrielauv@gmail.com
Se determin la capacidad de acumulacin de arsenato y su influencia en el contenido de otros elementos en Azolla filiculoides mediante la tcnica de fluorescencia de rayos X (XRF). Azolla filiculoides (2 g) se expuso a concentraciones crecientes de As (0, 5, 10, 20 y 30 g mL-1). Despus de 96 h las frondas se llevaron a peso constante para calcular el porcentaje de inhibicin/estimulacin de crecimiento y analizarlos mediante XRF. Los resultados se analizaron mediante SAS versin 8.0 y la prueba de comparacin de medias y correlacin de Pearson. La estimulacin mxima del crecimiento -1 -1 fue 47% ante 10 g As mL ; mientras que con 5 y 20 g As mL el estimulo del crecimiento fue de -1 25% y 27%, respectivamente. En contraste, a 30 g de As mL el crecimiento fue inhibido en 65 % con respecto al control (0 g As mL-1). La mayor acumulacin del metaloide en las frondas de Azolla ocurri en 20 y 30 g As mL-1. La concentracin de P en 0 g As mL-1 fue 9.6 veces menor que en 5 g As mL-1, y 16 veces menor que en 10, 20 y 30 g de As mL-1. El anlisis de correlacin de Pearson (r2=0.80125) revel que la relacin As:P ante 5 g As mL-1 fue de 1.2:1, y ante 10 g mL-1 fue de 1.8:1; est relacin increment en 20 y 30 g mL-1 a 2.8:1 y 2.5:1, respectivamente. La tcnica de XRF, adems de cuantificar As y P, tambin detect S, Cl, K, Ca, Mn, Fe, Ni, Cu y Zn. Las concentraciones de S, K, Zn, Mn y Fe disminuyen significativamente al incrementar el contenido de As. El mayor contenido de K se obtuvo ante 5 g As mL-1, sin embargo, ante 20 y 30 g mL-1 decrece significativamente. El contenido de Ca se reduce significativamente ante 20 y 30 g mL-1 respecto al control. El contenido de Cl y Cu no se afect en ninguna de las concentraciones de As. CONCLUSIONES. Concentraciones bajas de As estimularon el crecimiento de A. filiculoides denotando su tolerancia a este metaloide. La fluorescencia de rayos X es una tcnica muy verstil, multielemental, rpida y no destructiva para el anlisis de materiales biolgicos. El incremento en la concentracin de As produce la disminucin de la concentracin de S, K, Mn, Fe y Zn en el helecho.
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OR-BA-3 ARRANQUE Y ESTABILIZACIN DE UN REACTOR ANAERBICO DE LECHO FLUIDIZADO INVERSO PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES URBANAS Garca-Rodrguez G.1, Rustrin E.2, Houbron E.2 Instituto Tecnolgico de Minatitln. Blv. Institutos Tecnolgicos s/n. Col. Buenavista Norte. C.P. 96848. Minatitln, Ver., Mxico. 2 Facultad de Ciencias Qumicas, Universidad Veracruzana. Prol. de Oriente 6, No. 1009, C.P. 94340. Orizaba, Ver., Mxico. gabygarcia_r@hotmail.com Las aguas residuales urbanas (ARU) se distinguen por bajas concentraciones de Demanda Qumica de Oxgeno (DQO), altas fracciones de slidos suspendidos, temperaturas relativamente bajas y fuertes fluctuaciones en tasas de carga orgnica e hidrulica (van Lier et al., 2001). Estas caractersticas complejas tienen un impacto negativo sobre el tratamiento anaerbico y/o costos. Un reactor de lecho fluidizado inverso (RLFI) presenta varias ventajas, ofreciendo alta concentracin de biomasa sobre minsculas partculas de soporte inerte, biopelculas compactas y actividades microbianas ms altas (Nicolella et al. 2000), pudindose tratar grandes volmenes de soluciones acuosas. El objetivo de esta investigacin fue arrancar un RLFI anaerbico para el tratamiento de ARU (concentracin promedio de DQOsoluble: 250 mg/l). El medio de soporte es Extendosphere (15% del volumen til del reactor). La velocidad descensional aplicada es de 2-6 m/h. La fase de arranque se inici en batch a una CVA de 0.3, una velocidad descensional de 2.2 m/h y una expansin relativa de 0.35; despus de esta fase, se oper en continuo a una CVA de 0.3-0.5 g DQO/l d, hasta alcanzar 4 g DQO/l d. Los parmetros monitoreados, tanto en modo batch como continuo, fueron DQO Soluble, pH y produccin de biogs y metano. Durante la etapa en batch se obtuvieron eficiencias de remocin de DQO cercanas al 70%. En la operacin en continuo la eficiencia de remocin vari del 20 al 70% a una CVA de 0.3-0.5 g DQO/l d. Despus de superar problemticas de operacin por altas fluctuaciones en carga orgnica, inici la estabilizacin a los 269 das de operacin a una CVA de 2 g DQO/ l d, con un tiempo de residencia hidrulica (TRH) de 2.95 horas, y eficiencias de remocin de DQOsoluble de 15-44%, marcando la pauta para elevar la carga al reactor. A una CVA de 4 g DQO/ l d se logr el estado estacionario, obtenindose eficiencias de remocin de 50-60%, con 1.5 horas de TRH, estabilizndose la produccin de biogs y metano. Respecto a la colonizacin de Extendosphere, se observ una coexistencia de biomasa suspendida y biomasa fija a TRH mayores y el lavado de cultivo suspendido a tiempos ms cortos. Altas fluctuaciones en carga orgnica de las ARU entorpecieron el proceso de estabilizacin del reactor, sumndose el efecto del contenido menor de sustrato rpidamente biodegradable de la fraccin soluble. Esto origina que a cargas mayores mejore la eficiencia del tratamiento, logrndose tratar en tiempos muy cortos las ARU.
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OR-BA-4 Pistia stratiotes: BIOADSORBENTE DE PETRLEO CRUDO Snchez Galvn Gloria, Mercado Francisco J., Olgun Eugenia J. Red de Manejo Biotecnolgico de Recursos. Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz, 91070 Mxico. gloria.sanchez@inecol.edu.mx El objetivo de este trabajo fue evaluar la adsorcin de petrleo crudo en biomasa de Pistia stratiotes. Las frondas y las races de la planta fueron secadas a 60 Las frondas fueron molidas (1-3 mm) y C. las races se usaron sin moler. Se determin la hidrofobicidad de ambas biomasas a travs de su atraccin hacia una fase polar (agua) y otra no polar (hexano). Se utiliz petrleo crudo tipo Maya, el cual se diluy con una solucin salina (25 g NaCl/L) obteniendo diferentes concentraciones (Co): 979.16 9.82, 1,958.338.01, 3,935.1840.09, 7,604.16 307.96 y 15,694.44 196.41 mg petrleo crudo/L). Las unidades experimentales fueron matraces que contenan 100 ml de la solucin de petrleo, los cuales se agitaron a 150 rpm. Se probaron dos cantidades de biomasa (0.5 y 1g) y diferente tiempo de contacto (TC) (30, 60 y 90 min). Se evalu el porcentaje de eliminacin del petrleo del medio y la capacidad de adsorcin de la biomasa (q). El equilibrio de adsorcin del petrleo a la biomasa se evalu a travs de las isotermas de Langmuir y Freundlich. Los resultados mostraron que las frondas son ms hidrofbicas que las races (71.380.62 y 0.520.017%, respectivamente) (p<0.05). Los porcentajes de eliminacin de petrleo fueron altos desde los primeros 30 min a la Co ms alta, 93.730.96% y 87.422.21% para frondas y raz, respectivamente. Se encontr una correlacin altamente positiva entre la Co y la adsorcin de petrleo en ambas biomasas (r=1.0 y 0.989, para frondas y raz, respectivamente). La cantidad de biomasa afect la eficiencia de la adsorcin ya que la q calculada con 0.5 g fue el doble de aquella obtenida con 1 g (p<0.05). Los valores encontrados fueron 2,904.296.47 y 1,478.890.61 mg petrleo/g bs para las frondas, mientras para la raz fueron 2,683.9021.89 y 1,393.924.71 mg petrleo/g bs para la Co ms alta a un TC de 30 min. Tambin se observ que el TC tuvo efecto sobre la q de las frondas, ya que sta increment conforme aument el TC, hasta los 90 minutos (p<0.05). En el caso de la raz, no se observaron diferencias significativas entre 30 y 60 minutos. El equilibrio de adsorcin se explic por el modelo de Langmuir (r=0.975) para la raz y por el de Freundlich para las frondas (r=0.986). Se concluy que la biomasa no viable de P. stratiotes tiene una gran capacidad para adsorber petrleo crudo de soluciones salinas.
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OR-BA-5 ACTIVIDAD MICROBIANA DURANTE LA APLICACIN DE DIFERENTES TRATAMIENTOS DE BIORREMEDIACIN EN SUELO CONTAMINADO CON PETRLEO CRUDO OLMECA Daz Ramrez Ildefonso J., Priego Rangel Samantha, Torres Colorado Jess, Aguirre Marn Diana Ivet, Escalante Espinosa Erika Universidad Jurez Autnoma de Tabasco. Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas. Cuerpo Acadmico de Evaluacin y Tecnologa Ambiental. Lab. de Bioprocesos. Edif. H. Carr. Villahermosa-Crdenas Km 0.5, Villahermosa, Tabasco, Mxico. C.P. 86039. ildefonso.diaz@dacbiol.ujat.mx En la actualidad el auge petrolero causa un impacto ambiental, econmico y social al encontrarse frecuentemente algunos hidrocarburos como contaminantes, afectando las propiedades fisicoqumicas del suelo y los ecosistemas, lo que en muchos casos representa un riesgo potencial a la salud humana. Por tal razn, existe la necesidad de mejorar las alternativas tecnolgicas para el tratamiento biolgico del suelo, como el uso de microorganismos degradadores (bacterias y hongos) previamente aislados de los sitios contaminados, aplicndolos como parte de los tratamientos de restauracin. En el presente trabajo se compararon diferentes determinaciones de la actividad microbiana, (actividades enzimticas, nmero de degradadores y parmetros cinticos), como una alternativa para la valoracin del potencial de biodegradacin (B%) de hidrocarburos totales de petrleo (HTP) por poblaciones exgenas y nativas durante diferentes condiciones biorremediacin. Se realizaron ensayos de biodegradacin en suelo inoculado (SI) y no inoculado (SNI) a escala laboratorio (200 400g) en presencia de diferentes concentraciones de hidrocarburos (10 30g HTP/Kg de suelo) y bagazo de caa (2%). Como inculo se utiliz un co-cultivo (CC, bacterias-hongos) compuesto por microorganismos degradadores de hidrocarburos, comprndose su eficiencia respecto a los microorganismos nativos, en presencia y ausencia de nutrientes (C/N 6 7). Durante los experimentos se determin el contenido de HTP (mtodo Soxhlet) y el nmero de degradadores de hidrocarburos (NMP). As mismo, se determinaron las actividades de la enzima lipasa (LSA; mg pNP/ g suelo seco*min) y deshidrogenasa (DHS; g INF/g suelo seco*h). Adicionalmente, se calcul la B%, la tasa de consumo global (TCG; mg/kg*d); as como la vida media. En general, se registraron valores ms elevados de actividad microbiana degradadora en presencia del inculo (B%56%; TCG142.6 mg de HTP/Kg*d); la vida media fue de alrededor de 65 das (SI) mientras que para el SNI fue de 80 a 103 das. Los valores de actividad de las enzimas LSA y DHS se incrementaron proporcionalmente respecto a la concentracin de los HTP. La actividad mxima de la lipasa se registr en presencia del inculo (CC) y en el suelo con 30 g/Kg de HTP. Con valores de 5,940 g de pNP/g de suelo y 4,360 g de pNP/g, para el SI y el SNI, respectivamente. Los ensayos desarrollados pueden ser usados como indicadores tiles para valorar la actividad biodegradadora en condiciones de laboratorio y campo, as como el potencial de bioaugmentacin con inculos estandarizados, como parte de estrategias de biorremediacin y diagnstico ambiental. Palabras claves: Lipasa, deshidrogenasa, Co-cultivo, Biodegradacin, Petrleo crudo.
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OR-BA-7 BIODEGRADACION DE ACRILAMIDA Y POLIACRILAMIDA EN BIOSLIDOS Y SUELO Becerril Moctezuma Javier1, Olascoaga Guerrero Lizzeth1, Gutirrez Castillo Mara Eugenia2, Franco Hernndez Marina Olivia1
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Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa (UPIBI-IPN), Av. Acueducto S/N Col. La Laguna Ticomn, Mx. DF CP 07340. Tel 57296000 Ext. 56325 2 Centro de Investigacin en Medio Ambiente y Desarrollo IPN. mfrancoh@ipn.mx
La poliacrilamida se emplea para estabilizar bioslidos de aguas residuales industriales, stos se degradan lentamente generando acrilamida y cido cianhdrico, causando cncer y lesiones del sistema nervioso. En Lerma estado de Mxico se generan 600 toneladas de bioslidos por semana por planta, stos se incineran generando un problema atmosfrico. El objetivo del trabajo fue tratar el bioslido para generar un biofertilizante libre de poliacrilamida y acrilamida. Los bioslidos se recolectaron en Reciclagua, Lerma Edo. de Mxico y se caracterizaron fisicoqumica y microbiolgicamente. Se prepararon 8 pilas con 20 Kg de bioslidos para precomposteo con diferentes tratamientos: Control (L = lombriz): Bioslido + L; Bioslido + Estircol +L (BEL); Bioslido + Estircol + 25% Materia Orgnica +L (BEL 25%); Bioslido + Estircol + 50% Materia Orgnica + L (BEL 50%); Bioslido + Estircol + 75% Materia Orgnica + L (BEL 75%); Bioslido + 25% Materia Orgnica + L (BL 25%); Bioslido + 50% Materia Orgnica + L (BL 50%); Bioslido + 75% Materia Orgnica + L (BL 75%). Los anlisis fisicoqumicos fueron de acuerdo a la NOM 0211. Los tratamientos se incubaron 48 das en condiciones ambientales y 80% de humedad. La acrilamida se separ en columna con Slica gel y se identific por RMN, se cuantific por HPLC, con metanol como disolvente. La cantidad de acrilamida en bioslido fue de 1635 mg/kg, En los tratamientos BEL, resultando mejor el BEL 50%, hubo un aumento en la concentracin de acrilamida, casi 3 veces mayor a la encontrada en el bioslido antes de ser tratado, por lo que el proceso result eficiente para la degradacin de poliacrilamida. Por otra parte la concentracin de acrilamida para los tratamientos BL, fue parecida a la encontrada en el bioslido sin tratamiento. En los tratamientos en los que se hizo adicin de residuos de fruta tampoco hubo degradacin significativa debido a que lombrices y microorganismos prefirieron los monosacridos y polisacridos. En los tratamientos que contenan estircol, posiblemente existi una competencia por nutrientes entre microorganismos y las lombrices, por lo cual existi una mayor degradacin del polmero. Los microorganismos nitrificantes no se ven inhibidos por el contenido de poliacrilamida o acrilamida, debido al aumento paulatino de nitratos en cada tratamiento, en suelo, se obtuvo hasta 8 mg NO3 /kg y con adicin de bioslido hasta 40 mg NO3 /Kg, al final 60 mg NO3 /Kg. La concentracin de acrilamida en suelo disminuy hasta 45% con adicin de vermicomposta.
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OR-BA-8 BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS EN LA ZONA COSTERA DE PUNTA MAJAGUA. CIENFUEGOS. CUBA Bermdez Acosta Jelvys, Reinol Poma Jos, Rodrguez Castro David J. Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos (CEAC) jelvys@gestion.ceac.cu El propsito del trabajo fue eliminar por mtodos biocorrectivos, 479m3 de residuos petrolizados, contenidos en cuatro tanques de almacenamiento de FUEL OIL y derramados en la zona costera de Punta Majagua, pennsula localizada en la porcin Centro Norte de la Baha de Cienfuegos; en el marco del desarrollo del Proyecto de Rehabilitacin Ambiental Integral de esta pennsula. Se determin el volumen de hidrocarburos vertidos en la zona y el volumen contenido en los tanques de almacenamiento, los cuales se dispusieron previa mezcla en proporcin 3/1 con tierra frtil, en una parcela de biorremediacin de 115m X 75m, construida en el rea de anlisis despus de haber sido analizados los resultados de los estudios de suelo correspondientes. Se aplicaron 54,5 m3 de BIOILFC, un cultivo mixto de bacterias de alto espectro de degradacin de hidrocarburos, producidos in situ en un fermentador industrial de 12000 m3 logrndose concentraciones de 7*108 cel/ml. Se realiz un muestreo inicial en la parcela de biorremediacin, registrndose valores superiores a 82360 mg/kg de hidrocarburos totales del petrleo (HTP), y otro a los 45 das, donde se lograron por cientos de remocin de 84,8 % de HTP con concentraciones por debajo de las establecidas por la resolucin 08/99 del Instituto Nacional del Petrleo de la Repblica de Cuba (CUPET), as como altos porcientos de remocin de Saturados, Aromticos, Resinas y Asfaltenos (SARA), demostrando la eficiencia de esta tcnica en la biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos.
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OR-BA-9 ELIMINACIN DE METALES. NITRATOS Y FOSFATOS DE AGUAS RESIDUALES CON M. piperita Y H. annuus Y EL EFECTO DE TRES SOPORTES Angulo Riba Alan de Jess1, Altamirano Segovia Norma Eleana1, Torres Caldern Jess2, Franco Hernndez Marina Olivia1
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Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa, Instituto Politcnico Nacional (UPIBI-IPN). Escuela Sup. de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas, Instituto Politcnico Nacional (ESIQIE). Av. Acueducto S/N Col. La Laguna Ticomn, Mx. DF CP 07340. Tel 57296000 Ext. 56325 mfrancoh@ipn.mx
Existen pocos procesos que usen especies vegetales para tratar aguas residuales contaminadas con metales. En este proyecto se plantea la fitoremediacin con Mentha piperita y Helianthus annuus, para eliminar compuestos inorgnicos de aguas residuales. Se utiliz agua potable como control y agua residual industrial de la planta de tratamiento AISJISU. Se realiz la caracterizacin fisicoqumica, y microbiolgica del agua residual, metales como cobre (Cu), fierro (Fe) y potasio (K) se determinaron por absorcin atmica. La especie vegetal utilizada fue Mentha piperita y Helianthus annus, y tres soportes (tezontle negro, TZN; tezontle rojo, TZR y arcilla, AR). Se hicieron 30 repeticiones por cada planta y por soporte. Se recircul agua potable, y en otro lote se us agua residual. Se desarroll un sistema de recirculacin y aireacin semi continua de agua potable (AP) y agua residual (AR), con intervalos de 24 h y 11 L/min. Al inicio y final del experimento se tomaron muestras de agua, evaluando metales, DBO, DQO, Salmonella, nitratos y fosfatos. En plantas se evalu altura, humedad y nmero de hojas. Las muestras se secaron y se molieron y se realizaron digestiones cidas con HNO3, H2SO4 y H2O2 en proporcin 2:3:1, se determinaron metales por absorcin atmica, nitrgeno total y fsforo soluble. En el agua residual se encontr mas de 1000 UFC Salmonella sp/mL y 1010 UFC Coliformes totales /mL; 88.3mg DBO/L y 800 mg DQO/L, obteniendo una remocin de 40%. No se detect Cu, pero K en AR fue de 5.58 ppm y en AP de 3.22 ppm. La concentracin de Fe en AR encontrada fue 0.15 ppm, disminuyendo a 0.1 ppm al final del tratamiento. A pesar de las altas concentraciones de Fe en los soportes Ar, TZN, TZR, (866 ppm, 192 ppm y 150 ppm) no se solubiliz en el agua. La concentracin de Cu en los soportes fue de 3.7 ppm en promedio y K no fue detectado. En general la remocin de compuestos en funcin de DQO, alcanz un 50% del valor usual. La remocin de potasio fue 45% y en fierro fue 10%. El crecimiento de M. piperita fue 12.76 cm en TZR y AR, con respecto a los otros soportes (9 -10 cm). Para H. annuus con AR el crecimiento fue 45 cm y en AP de 35 cm en promedio. La absorcin de nitrgeno fue mayor en H. annuus con 850 mgN/Kg en flor, y 80 mg N/kg para tallos de menta
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OR-BA-10 LOOSENINA, UNA NUEVA PROTENA FNGICA CON ACTIVIDAD TIPO EXPANSINA CON POTENCIAL PARA EL TRATAMIENTO DE MATERIAL LIGNOCELULSICO CON MIRAS A LA OBTENCIN DE BIOCOMBUSTIBLES Quiroz Castaeda Rosa Estela1,2, Martnez Anaya Claudia2, Cuervo Soto Laura1, Folch Mallol Jorge1
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Laboratorio de Biologa Molecular de Hongos, Centro de Investigacin en Biotecnologa, Universidad Autnoma del Estado de Morelos. Avenida Universidad 1001 Col. Chamilpa, Cuernavaca 62209, Morelos, Mxico. 2 Instituto de Biotecnologa. Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Avenida Universidad 2001 Col. Chamilpa, Cuernavaca 62209, Morelos, Mxico jordifo@gmail.com
Las expansinas son protenas de plantas cuyo papel es remodelar la pared celular a travs de modificar la estructura cristalina de la celulosa para permitir la expansin de la clula durante el crecimiento. La modificacin en la estructura de la pared celular se lleva a cabo por un mecanismo no hidroltico y se propone que es a travs de la ruptura o re-organizacin de los puentes de hidrgeno entre las fibras de celulosa. En nuestro laboratorio identificamos un gen del hongo basidiomiceto Bjerkandera adusta con similitud a las expansinas vegetales al que llamamos loosenina. Este gen fue clonado y expresado exitosamente en Saccharomyces cerevisiae, a diferencia de las expansinas vegetales que no se han logrado expresar en sistemas heterlogos. La protena expresada en levadura mostr actividad tipo expansina sobre fibras de algodn (celulosa cristalina). Adems, el pretratamiento de fibras de algodn con esta protena permiti la liberacin de azcares reductores al aadirse despus una endoglucanasa comercial (la loosenina per se no presenta actividad hidroltica). As mismo, el tratamiento de fibras de Agave tequilana con la loosenina permiti eficazmente la obtencin de azcares reductores al tratarse despus con un cctel enzimtico comercial que por si solo presenta una eficiencia muy baja en la liberacin de azcares a partir de las fibras de agave. Estudios de espectrofotometra de infrarrojo mostraron que la loosenina altera la estructura cristalina de la celulosa. Los resultados obtenidos auguran un gran potencial de esta protena para hacer ms eficiente el proceso de sacarificacin enzimtica con miras a la produccin de bioetanol a partir de residuos lignocelulsicos.
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OR-BA-11 COMPARATIVE ANALYSIS OF TWO SIDEROPHORES RHIZOBACTERIA PRODUCERS ISOLATED FROM HEAVY METAL CONTAMINATED SOIL AND THEIR EFFECT ON Lens esculenta GROWTH AND TOLERANCE TO ARSENIC AND LEAD Ruz Flores A.N.2, Ramrez Melo M.2, Vsquez Murrieta M.S.1, Rodriguez Tovar A.1, Montes Villafn S.2, Franco Hernndez M.O.3, Rodrguez Dorantes A.2 Departamento de Microbiologa, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico Nacional, Prol. Carpio y Plan de Ayala s/n, 11340, Mxico, D.F., Mxico 2 Departamento de Botnica, Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas, Instituto Politcnico Nacional, Prol. Carpio y Plan de Ayala s/n, 11340, Mxico, D.F., Mxico 3 Departamento de Qumica, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa, Instituto Politcnico Nacional, Mxico rodorantes@yahoo.com.mx Due to the sensitivity and the sequestration ability of the microbial communities to heavy metals, recently the application of plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) for the bioremediation of this kind of contaminants has been done. This study compared the relationships between two rhizobacteria isolated from two plant species collected from contaminated soil with heavy metals by their siderophores production and the growth response and tolerance to arsenic and lead of Lens esculenta inoculated with these rhizobacteria. The rhizobacteria isolated Pseudomonas sp. Sp7d and Pseudomonas sp. Sp7e, were analyzed by their production of siderophores evaluated with LB-CAS medium, measured the halo produced around the colonies. Twenty seeds of L. esculenta were surface-sterilized and placed in Petri dishes with filter paper, with either sterile distilled water or inoculated with bacterial suspension of the two rhizobacteria separately, and another treatments supplemented with the appropriated As (Na2HAsO47H2O) and lead (Pb(C2H302)23H2O): 0.05, 0.5 and 1 mM, the control experiments were considerate without the addition of the metal. All the experiments were performed by triplicate and maintained at 30 in a growth chamber in dark for 4 C days. The root length of L. esculenta plants were measured and obtained the tolerance index (TI). These two rhizobacteria were classified as high siderophores producers and the results of TI for L. esculenta, obtained for arsenic and lead for both rhizobacteria strains, showed that the development of plants inoculated with the rhizobacteria Pseudomonas sp.Sp7d strain favored the radical growth of. L. esculenta plants with lead and Pseudomonas sp. Sp7e strain did it with arsenic. Both strains keep the safe development of this species in the presence of metal at higher concentrations, compared with the growth plants without contaminants and bacteria alone.
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OR-BA-12 DECOLORACIN DE AGUAS RESIDUALES TEXTILES CON HONGOS LIGNINOLTICOS INMOVILIZADOS UTILIZANDO UN REACTOR DE LECHO FIJO Osorio Echavarria Juliana, Quintero Daz Juan Carlos juliana.osorio.echavarria@gmail.com Los hongos de pudricin blanca de la madera han mostrado gran potencial para ser utilizados en procesos de biorremediacin de aguas y suelos contaminados con compuestos recalcitrantes y generalmente txicos; esta propiedad se debe principalmente al sistema enzimtico oxidativo extracelular que emplean naturalmente para la degradacin de la lignina de la madera. En este trabajo, el hongo Anthracophyllum discolor se emple con el fin de evaluar y desarrollar una tecnologa continua utilizando un biorreactor de lecho de fijo de 0.25 L para tratar efluentes contaminantes provenientes de industrias textileras. Como experimentos previos para determinar la capacidad del hongo para tratar efluentes textiles, se realiz el tratamiento de matrices de aguas sintticas, que consisten en la mezcla de cuatro colorantes industriales Turquesa Erionyl, Rojo Erionyl, Rojo Cibacron y Azul Terasil suplementadas con sales utilizadas en los procesos de teido, en donde se obtuvo como resultado porcentajes de decoloracin de hasta el 90% en cultivos en lote (matraz de laboratorio) con clulas libres. Con efluentes industriales textiles los resultados mostraron que se obtienen porcentajes de degradacin del 68% en condiciones estriles con biomasa libre y 70% en condiciones no estriles con hongo inmovilizado en espuma de poliuretano, en cultivos en lote. En la decoloracin del efluente textil en modo continuo con alimentacin pulsante y pulsos de aire, se obtuvo una decoloracin del 70%. El anlisis por cromatografa liquida (HPLC) revel que aunque los efluentes industriales no son totalmente decolorados, los colorantes individuales presentes en el agua residual son eliminados.
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OR-BA-13 EFECTO DEL AGUA RESIDUAL INDUSTRIAL DE REFINERA EN EL CRECIMIENTO Y PRODUCCIN DE LPIDOS DE Scenedesmus acutus Nieto L., Nio J., Pimienta A. Laboratorio de Biotecnologa - Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A. Luddy.Nieto@ecopetrol.com.co En el Laboratorio de Biotecnologa del Instituto Colombiano del Petrleo (ICP) se estudi el comportamiento cintico de la microalga nativa Scenedesmus acutus C47 aislada de ambientes eutroficados colombianos utilizando agua de la Planta de Tratamiento de Aguas Residuales de la 3 Refinera de Barrancabermeja (PTAR-GRB) al 10% en reactor tipo piscina con 2.2 m , aireacin constante, iluminacin natural durante 12 das de cultivo empleando como control medio Bristol sin adicin de agua PTAR-GRB. Este estudio evalu el agua residual como fuente de nutrientes para el crecimiento y produccin de lpidos a partir de la microalga. La caracterizacin fisicoqumica del agua de PTAR-GRB mostr que nutricionalmente es muy similar a los medios de cultivo sintticos, posibilitndola para producir biomasa algal con relaciones N:P aproximadas de 1800:1. Adicionalmente, en caso de escalarse a nivel industrial, el CO2 requerido para el crecimiento se suministrara a partir de corrientes gaseosas de refinera para la depuracin del agua mediante tratamiento biolgico terciario en un proceso carbono-cero. Se utiliz agua PTAR por su alta carga orgnica y disponibilidad y se obtuvieron productividades de 0.25 g.L-1d-1 de biomasa con 24% de lpidos. Otros estudios similares, como Voltolina et al., 2005 y Nuez et al., 2001, se obtuvieron productividades de 0.03 g.L-1d-1 con agua residual al 30% en cultivo semicontinuo y 0.15 g.L-1d-1, respectivamente. Realizado el anlisis composicional del agua post-cultivo, se determin el consumo total del nitrgeno, fosforo y fenol y la reduccin del 54-83% de los metales presentes. Estos resultados demuestran la factibilidad del crecimiento de biomasa algal y acumulacin de lpidos con el agua de PTAR-GRB lo que hace promisoria su utilizacin como materia prima alterna para biocombustibles y como sistema para depurar contaminantes en agua residual industrial, a partir de microalgas.
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OR-BA-14 PRODUCCION DE UN RAMNOLIPIDO POR Pseudomonas aeruginosa Y SU APLICACION EN EL LAVADO Y BIODEGRADACION DE HTP PRESENTES EN SUELOS CONTAMINADOS Torres Bustillos Luis G.1, Gonzlez Roberto2, Avendao Juan Ramon3, Gracida Jorge4 UPIBI-IPN Posgrado Bioprocesos. UPIBI-IPN 3 ESIQIE-IPN 4 Universidad Politecnica de Pachuca LTorresB@ipn.mx
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La contaminacin del suelo por hidrocarburos del petrleo es un problema ampliamente estudiado, dentro de las tecnologas disponibles para la remediacin destaca el uso de la biorremediacin como alternativa limpia y amigable al medio ambiente. Los tensoactivos de origen biolgico son una opcin realista y prometedora, sin embargo su proceso de produccin es en la actualidad una limitante, en el presente estudio se realizaron experimentos investigando la posibilidad de producir ramnolipidos por Pseudomonas aeruginosa ATCC9027 usando desechos agroinduatriales. Posteriormente los ramnolipidos producidos fueron usados en un proceso de biodegradacin asistida, en la que velocidades de degradacin alcanzaron valores de hasta 163.7 mg de TPH /da. El ramnolipido de tipo C producido con P. aeruginosa ATCC9027 usando suero lcteo como fuente de carbono, el porcentaje de remocin alcanzado es de 74.5% a 38 durante 8 semanas. C Lavados de suelos contaminados con 31, 902 mg de TPH /kg de suelo se realizaron usando gomas naturales, tensoactivos de origen qumico y ramnolipidos. Una clase de ramnolipidos producidos a partir de suelo lcteo como fuente de carbono alcanzo porcentajes de remocin de hasta 63% en un solo lavado. Se demostr la utilidad y capacidad de ramnolipidos en los procesos de remediacin de suelos contaminado con TPH.
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OR-BA-15 RESIDUOS AGROINDUSTRIALES COMO FUENTE DE MICROORGANISMOS DEGRADADORES DE HIDROCARBUROS Cruz Coln Mara del Roco1, Cuevas Diaz Mara del Carmen2, Gonzlez Santos Judith2, Ramos Morales Rafael2, Moreno Quiroz Roberto2, Castaeda Briones Mara Teresa1
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Universidad Autnoma Metropolitana, Campus Azcapotzalco. 2 Universidad Veracruzana, Campus Coatzacoalcos. ccmr@correo.azc.uam.mx
Los residuos agroindustriales impactan negativamente al ambiente, porque contaminan el suelo y producen olores molestos. Por lo que uno de los retos que afrontan las industrias es el cmo reutilizar sus desechos. Dos de las actividades industriales ms contaminantes son las de las Industrias Petroqumica y Azucarera. Por su particular infraestructura, la industria petrolera presenta riesgos inherentes a fugas de petrleo, diesel, gasolina y aguas aceitosas, as como su infiltracin durante el periodo de lluvias. Por otro lado, una de las ventajas de los desechos del sector azucarero es su naturaleza orgnica, su biodegradabilidad y su potencialidad de reutilizacin. En este trabajo, se manejaron bagazo y chachaza, residuos del Ingenio Azucarero Cuatotolapan en el Estado de Veracruz y suelo contaminado con hidrocarburos de la regin de Nuevo Teapa, para utilizarlos como fuente de bacterias y hongos, los cuales se utilizarn en procesos de biodegradacin de residuos petroleros. Para la obtencin de microorganismos, se utiliz el mtodo de cultivo por enriquecimiento, que consisti en colocar por duplicado, 3.0 g de suelo o residuo agroindustrial en un medio salino con extracto de levadura, y obtener por medio de agitacin y de transferencias sucesivas a medio fresco, una suspensin la cual fue inoculada por el mtodo de vaciado en placa con el mismo medio salino pero adicionado con agar al 1.5 % (w/v). Las colonias obtenidas, fueron sembradas en agar nutritivo para su aislamiento e identificacin. Se obtuvieron 9 colonias de bacterias, de las cuales 5 fueron a partir del suelo contaminado con hidrocarburos, 1 a partir del bagazo de caa y 3 colonias se obtuvieron de la cachaza. En cuanto a los hongos, se obtuvieron 3 colonias a partir del bagazo y de las muestras de suelo solo se obtuvo una cepa. El proceso de identificacin para las bacterias, comenz con las pruebas de Tincin de Gram, Oxidasa y produccin de Indol, para poder aplicar los kyts comerciales de identificacin microbiana (Becton Dickinson & Co.). Para la identificacin los hongos, se utiliz la tcnica del micro cultivo. Las colonias bacterianas correspondieron a los gneros Pseudomonas, Aeromonas, Acitenobacter y Rhodobacter. En cuanto a la identificacin de los hongos, se tuvieron los siguientes resultados: Piptocephalis lepidula, Fusarium sp, Botrytis cinrea y Paecilomyces fumosoroseus. La siguiente etapa de nuestra investigacin, consistir en aplicar el consorcio microbiano en el proceso de composteo para eliminar hidrocarburos en suelos.
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OR-BA-16 TRATAMIENTO DE VINAZA PROVENIENTE DE LA PRODUCCIN DE ETANOL EN UN REACTOR DE LECHO FLUIDIZADO INVERSO Sandoval Rojas M. E.1, Houbron E.2, Rustran E.2 Universidad Veracruzana. Facultad de Ciencias Qumicas. Prolongacin de oriente 6, No. 1009. C.P. 94340, Orizaba, Veracruz, Mxico. 2 Universidad Politcnica de Madrid. Calle Profesor Aranguren s/n Ciudad Universitaria. C.P. 28040 Madrid, Espaa. marsanrojas@hotmail.com Las vinazas son aguas residuales generadas en la produccin de etanol, tienen un pH cido (3-4) y una elevada DQO. El tratamiento anaerobio ofrece significativas ventajas para el tratamiento de efluentes altamente cargados (Houbron y col., 2003). Los sistemas anaerobios de tratamiento de aguas residuales industriales incluyen tecnologas con biopelculas, tales como los Reactores de Lecho Fluidizado Inverso (RLFI). Estos reactores tienen como principales ventajas, un bajo requerimiento de energa y que no necesitan un sedimentador. Sin embargo, como en todos los reactores de lecho fijo, el arranque de un RLFI representa la fase ms larga y difcil de controlar hasta lograr su estabilizacin. El monitoreo del metano proporciona informacin dinmica acerca de los diferentes pasos de colonizacin y fijacin de la biomasa durante el arranque (Michaud, 2005). El presente trabajo, describe el arranque y estabilizacin de un RLFI, empleando extendospher como soporte y tratando vinazas provenientes de la produccin de etanol. El dispositivo experimental, consisti en una columna de vidrio con una altura de 55 cm, un dimetro interno de 7 cm y un volumen til de 1.7 L. Como material de soporte se emple extendosphere, Una vez inoculado el reactor, se oper en batch, bajo una concentracin de 0.5gDQO/L durante 51 das. La operacin en continuo se inici con una carga de 0.5 gDQO/Lr.d, con posteriores incrementos a 1, 3, 6 y 10 gDQO/Lr.d. Para las cargas de 0.5 y 1.0 gDQO/Lr.d, se emple vinaza diluida y para las cargas de 3.0 y 6.0 gDQO/Lr.d vinaza cruda con concentraciones desde 73.0 hasta 200.0 gDQO/L y por consiguiente variaciones de TRH desde 24 hasta 40 das. El seguimiento de la colonizacin del soporte se realiz con observaciones al microscopio y se midi la cantidad de slidos voltiles adheridos (SVA) al soporte. Durante la operacin en batch, se alcanz una eficiencia de 88%. Para las cargas de 0.5 y 1.0 gDQO/Lr.d se alcanzaron eficiencias de 80% y 75 % para 3 y 6 gDQO/Lr.d. La generacin de biogs inici hasta los 110 das de operacin del reactor (carga de 0.5 gDQO/Lr.d), alcanzando una estabilidad en el rendimiento de desde 0.25 a 0.4 LCH4/gDQOr para las diferentes cargas de operacin. Durante la operacin del rector con una carga de 10 gDQO/Lr.d, ste present inestabilidad y disminucin del rendimiento metano. Para las cargas de 3 y 6 gDQO/Lr.d la cantidad de SVA alcanz un valor promedio de 0.25 gSVA/g soporte.
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OR-BA-17 ISOLATION OF FUNGI ACTIVELY GROWING IN SOILS AFTER BACTERIAL BIOREMEDIATION OF OILY SLUDGES, AND THEIR ROLE ON THE REMOVAL OF RECALCITRANT FRACTIONS IN MICROCOSMS ASSAYS Vasco Mara F.1, Cepero Mara C.1, Restrepo Silvia1, Vives Florez Martha J.2 Universidad de Los Andes, Carrera 1E No. 18A-10, Departamento de Ciencias Biolgicas, Laboratorio de Micologa y Fitopatologa (LAMFU), Bogot, Colombia 2 Universidad de Los Andes, Carrera 1E No. 18A-10, Departamento de Ciencias Biolgicas, Centro de Investigaciones Microbiolgicas (CIMIC), Bogot, Colombia mvives@uniandes.edu.co Bacterial bioremediation of complex mixtures of contaminants like petroleum is generally limited to the aliphatic and non-condensed aromatic fractions. Recent researchs on soil and water bioremediation has focused on fungi because of their ability to produce unspecific enzymes able to act upon a variety of complex and recalcitrant toxic compounds. In this study, the diversity of viable filamentous fungi was explored in soils previously subjected to bioremediation with bacterial consortia from three petroleum exploitation fields. Diversity was estimated using both morphological traits and ITS rDNA sequencing. We recovered a high diversity of morphotypes from each field;a high proportion of the fungal species detected have not been previously reported as involved in degradation of aliphatic and aromatic hydrocarbons. Among the previously reported fungi there are species of Aspergillus, Paecilomyces and Penicillium. In order to build preliminary evidence of the isolates as potential bioremediation agents,their laccase and peroxidase activities were measured in vitro.Peroxidase activity was a general trend in these fungi.These enzymes are involved in heavy poly-aromatic hydrocarbon degradation, which were abundant in the sampled soils. Therefore, we propose adaptation of these fungi to the residual PAH after bacterial action. Bioaugmentation of the fungal isolates in microcosms contaminated with oily sludge resulted in higher removal of the asphaltenic fraction compared to no bioaugmented microcosms. Our method of isolation allowed us to screen for viable propagules inside a contaminated environment, a strategy that proves to be efficient for environmental prospection.
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OR-BA-18 DEGRADACIN DE COMPUESTOS NITROAROMTICOS POR Rhodobacter: PURIFICACIN DE LA NITRORREDUCTASA NPRB Rodolfo Gmez Cruz1, Eva Prez Reinado2, Mara Dolores Roldn Ruiz2, Conrado Moreno Vivin2, Francisco Castillo Rodrguez2
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Universidad Jurez Autnoma de Tabasco, Mxico 2 Universidad de Crdoba, Espaa rgomezcruz@hotmail.com
Las nitrorreductasas (NR) han levantado un enorme inters biotecnolgico no slo por su uso potencial en biorremediacin y biocatlisis, sino tambin por su papel central en la mediacin de la toxicidad, mutagenicidad y carcinognesis de muchos compuestos nitroderivados y por su capacidad de activacin de varios profrmacos utilizados en las terapias antitumorales dirigidas como las tcnicas ADEPT, GDEPT y VDEPT. Las NR son un grupo de enzimas ampliamente distribuidas en bacterias, archaea y algunos organismos eucariotas. Son flavoprotenas dependientes de NAD(P)H, que es utilizado como donador fisiolgico de electrones para la reduccin tanto de quinonas y flavinas como del grupo nitro presente en una gran variedad de compuestos xenobiticos. As, se han descrito dos tipos de nitrorreductasas segn su respuesta al oxgeno. Aunque las bacterias pueden poseer nitrorreductasas de ambos tipos, las ms estudiadas son las de tipo I, insensibles a oxgeno, que catalizan la reduccin de una gran variedad de compuestos nitroaromticos mediante la adicin pares de electrones formando intermediarios nitroso (NO) e hidroxilamino (NHOH) y, finalmente, el producto aminoderivado ( NH2). Rhodobacter capsulatus B10 es la nica bacteria fotosinttica en la que se han identificado al menos dos genes que codifican posibles nitrorreductasas de tipo I. Uno de ellos, denominado nprA, codifica un polipptido de 210 residuos de aminocidos (unos 25 kDa), que constituye la principal nitrorreductasa dependiente de NADPH de R. capsulatus. En este trabajo se ha hiperexpresado y purificado la NR que probablemente codifica el otro gen de Rhodobacter capsulatus B10, denominado nprB y se ha caracterizado bioqumicamente. NprB es una nitrorreductasa constitutiva homodimrica de aproximadamente 50 kDa que utiliza una variedad de compuestos nitroaromticos y nitroheterocclicos, especialmente cido pcrico (2,4,6trinitrofenol), 2,4,6trinitrotolueno y nitrofurantona. La actividad nitrorreductasa de la protena NprB purificada como protena recombinante con una cola de polihistidinas muestra una temperatura y un pH ptimos de 33 C y 7,0, respectivamente. Adems, utiliza NADH como donador preferente de electrones, posee FMN como cofactor y se inhibe por dicumarol y capsaicina. Aunque la protena NprB de R. capsulatus posee cierta actividad dihidropterina reductasa, su actividad reductora de quinonas es ms elevada, por lo que su posible funcin fisiolgica podra ser la de actuar como NAD(P)Hquinona oxidorreductasa. El profrmaco CB1954 utilizado en tcnicas de terapia antitumoral no es activado eficazmente por la protena NprB de R. capsulatus.
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OR-BA-19 CULTIVO MIXTO DE MICROALGAS PRODUCTORAS DE EXOENZIMAS PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES DE UNA PLANTA EXTRACTORA DE ACEITE DE PALMA Sandra Rodrguez Puerta1, Alexandra Vera1, Carmen Crdenas2, Roberta Mora1, Ever Morales1
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Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. 2 Centro de Investigacin del Agua, Facultad de Ingeniera, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. saju284@gmail.com
La capacidad de los microorganismos fotosintticos productores de exoenzimas, puede ser utilizada para mejorar la eficiencia de remocin de materia orgnica, nutrientes y otros componentes de las aguas residuales. Se reporta el uso de un cultivo mixto de Chlorella, Chlorococcum, Chlamydomonas, Oocystis, Scenedesmus y Geitlerinema, productoras de amilasa, lipasa, proteasa, fosfatasa, celulasa y ureasa, para analizar la remocin de DQO, nitrgeno, fsforo y grasas del agua residual de una Planta extractora de aceite de palma (Elaeis guineensis). Las microalgas y cianobacterias fueron aisladas del mismo residual de aceite de palma y luego mezcladas para conformar el cultivo mixto. Los experimentos fueron realizados con los siguientes medios: agua residual (AR), agua residual enriquecida con fertilizante (ARN); agua residual + fertilizante + mezcla orgnica (ARNO) y agua residual + mezcla orgnica (ARO); en relacin a controles no inoculados con microalgas: mezcla orgnica (almidn-urea-lecitina) + fertilizante (NO), agua destilada + fertilizante (C) y agua residual no inoculada con microalgas (C-AR). El crecimiento microalgal fue seguido hasta 20 das de iniciado el bioensayo y las variables fisicoqumicas, poblacin bacteriana y exoenzimas analizadas al inicio y final del experimento. La remocin de DQO ms elevada se registr en AR y control (AR) con 98,14 y 98,39% respectivamente (p>0,05). Para el fsforo, se alcanzaron las mejores eficiencias en ARNO (p>0,05), ARO y ARN con 74,80%; 67,78% y 56,62%, respectivamente, comparada con los controles (C-AR) y autotrfico. Las grasas y aceites, tambin fueron removidas en mayor medida en ARNO con un 99,13% (p<0,05), en relacin a la ms baja eficiencia producida en los controles (C-AR) y AR (p<0,05). La presencia de exoenzimas fue demostrada en todos los cultivos con agua residual. En cambio, el control (C-AR) dio negativo para lipasa y ureasa y el control autotrfico para -glicosidasa. A pesar que, el mayor crecimiento microalgal se observ en el control autotrfico, con 28,993,23x106 cel.mL-1 (p>0,05), hubo tambin incremento de densidad celular en los cultivos mixotrficos en el siguiente orden: NO> ARO> AR > ARN> ARNO. Mientras que, el predomino por microalga en dichos cultivos fue: Chlorella> Chlamydomonas> Scenedesmus> Chlorococcum> Oocystis> Geitlerinema. Por otra parte, el crecimiento bacteriano increment con la adicin de nutrientes y la edad del cultivo, 5 hasta alcanzar un mximo de 25,0UFC/mLx10 en ARN. Los resultados sugieren que, el consorcio microalga-cianobacteria-bacteria; adems de la accin de sus exoenzimas puede conformar un sistema catalizador de la biodegradacin de residuales enriquecidos con almidones, protenas y grasas. Palabras Clave: agua residual aceite palma, microalgas, bacterias, remocin.
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OR-BA-20 BIOSORCIN DE METALES PESADOS POR Spirulina sp INMOVILIZADA EN ALGINATO DE CALCIO Garza Gonzlez Ma. Teresa1, Almaguer Cant Vernica2, Lian Montes Adriana3, Saenz Tavera Isabel del Carmen3 Lab. de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL L1, Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL 3 Lab. de Instrumentacin Analtica, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL veroalcan@yahoo.com.mx
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El uso de microorganismos acuticos para la remocin de metales en ltimas dcadas ha tomado gran importancia, puesto que este tipo de biomateriales son fciles de obtener y pueden incluso aclimatarse a ecosistemas muy extremos desarrollando mecanismos de defensa que les confieren propiedades de remocin de metales o degradacin de compuestos orgnicos txicos. Tal es el caso del microorganismo que se presenta en este estudio; Spirulina sp., la cual fue aislada de un efluente contaminado con metales pesados. En el presente estudio se analizo la capacidad de remocin de Cd(II), Pb(II), Ni(II), y Cu(II) utilizando el alga Spirulina sp. inmovilizada en alginato de calcio, en un sistema por lotes. El estudio de la capacidad de sorcin de los metales por Spirulina sp. inmovilizada con respecto al tiempo se realiz a partir de disoluciones de cada metal de 100 mg/L a pH inicial 4, 5 y 6, con agitacin continua. El porcentaje mximo de remocin para Cd(II) y Pb(II) se obtuvo a pH 6 con un 61.1% y un 97.7% respectivamente, mientras que para Ni(II) y Cu(II) el mximo de remocin fue a pH 5 con un 78.2% y un 98.4% respectivamente. Bajo estas condiciones el proceso de bioadsorcin se ajust a una ecuacin de pseudo-segundo orden. En tanto que las isotermas experimentales de adsorcin de cada metal se ajustaron al modelo de Langmuir con el cual se calcul la capacidad mxima de adsorcin y la constante de sorcin, obteniendo los siguientes resultados: 156.0mg/g y 0.066L/mg para Cd(II), 294.1mg/g y 0.014L/mg para Pb(II), 103.1mg/g y 0.007L/mg para Ni(II), 111.1mg/g y 0.011L/mg para Cu(II). Con estos resultados se sentaron las bases para la aplicacin del sistema en columna operado por lotes para la remocin de metales en una muestra de aguas residuales industriales y se obtuvieron los siguientes porcentajes de remocin; 65.8% de Cu(II), 61.5% de Pb(II), 30.3% de Ni(II), 11.6 de Zn(II) y 8.8% de Cd(II), este comportamiento se debe a la competencia inica que existe durante el proceso de sorcin y puede ser explicado en trminos de electronegatividad de cada metal. Esta investigacin proyecta al alga Spirulina sp. inmovilizada como material biosorbente factible para su uso en la recuperacin de metales pesados de efluentes contaminados que puede ser operado en un reactor en columna empacada.
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OR-BA-21 REMOCIN DE HIDROCARBUROS TOTALES DEL PETRLEO Y DE HIDROCARBUROS POLIAROMTICOS EN SEDIMENTOS DE MANGLAR CON Avicennia germinans: EFECTOS DE BIOESTIMULACIN Y BIOAUMENTACIN Navarro-Lamarque Claudia L.1, Navarro Enrique 2, Snchez-Galvn Gloria1, Cuervo Flor de Mara3, Angeles Guillermo1 y Olgun Eugenia J.1
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Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351. C.P. 91070. El Haya,Xalapa, Veracruz, Mxico. 2 Instituto Tecnolgico de Izucar de Matamoros, Puebla, Mxico. 3 Universidad Autnoma Metropolitana Iztapalapa, Mxico. eugenia.olguin@inecol.edu.mx
Los manglares son ecosistemas muy importantes tanto ecolgica como econmicamente. En las ltimas dcadas, la contaminacin por hidrocarburos, entre otros factores, ha contribuido a su destruccin. La biorremediacin es una de las tecnologas emergentes y pertinentes para promover los procesos naturales de remocin de contaminantes, por medio de microorganismos que degradan diversos contaminantes hasta compuestos no txicos. Existen dos estrategias de biorremediacin: la bioestimulacin (adicin de nutrientes) y la bioaumentacin (adicin de microorganismos). El objetivo general del trabajo fue evaluar el efecto de la bioestimulacin mediante la adicin de efluentes anaerobios de vinazas (E.A.V) y de adicin de fertilizantes inorgnicos, as como el efecto de bioaumentacin mediante la adicin de cianobacterias rizosfricas aisladas de neumatforos de Avicennia germinans, sobre la remocin de hidrocarburos poli-aromticos (HPAs) y de hidrocarburos totales del petrleo (HTPs) presentes en sedimentos de manglar sembrados con A. germinans, a nivel de microcosmos. El diseo experimental incluy dos etapas. Durante la primera, se compararon dos concentraciones (Cc1 y Cc2) de E.A.V. Durante la segunda etapa, se evalu tanto la adicin de fertilizantes inorgnicos (NH4NO3 y K2HPO4), como la adicin de cianobacterias rizosfricas, en la remocin de HTPs. Adems, durante las dos etapas experimentales, se evalu el efecto de los HTPs y HPAs sobre el crecimiento de A. germinans y sus efectos sobre la conductividad hidrulica de A. germinans. A los 35 das, el tratamiento T10, el cual solo contena sedimento contaminado sin plantas, fue el que mostr mayor remocin de HTPs (71.4214.35%). La adicin de E.A.V. en la concentracin menor probada (Cc2) fue de 66.771.3%. Respecto a la remocin de HPAs, el mayor porcentaje (88.203.38) observado despus de 35 das, fue en el T6, el cual no recibi E.A.V. La adicin de nutrientes se realiz en el da 110 durante la segunda etapa y no se observ algn efecto estimulante sobre la remocin de hidrocarburos. Al final del experimento (210 das), el tratamiento en el que se observ una mayor remocin de HTPs (77.50%), fue el que recibi la concentracin baja (C2) de E.A.V. en la etapa uno y cianobacterias rizosfricas en la etapa dos. El T10 mostr una muy alta remocin de HPAs (99.060.86%). Sin embargo, no hubo diferencias significativas entre todos los tratamientos, ni a los 35 das y tampoco a los 210 das (P<0.05). El crecimiento de A. germinans no se vio afectado por la presencia de los hidrocarburos. Respecto a la conductividad hidrulica de A. germinans, no se observaron diferencias significativas entre los tratamientos con o sin hidrocarburos. En conclusin, la remocin de HTPs y de HPAs fue muy efectiva despus de 35 das posiblemente debido a la atenuacin natural y parece que los efectos de los bioestimulacin y de la bioaumentacin fueron secundarios.
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OR-BA-22 CARACTERIZACIN DE LOS LODOS RESIDUALES DE DOS REACTORES ANAEROBIOS DE FLUJO ASCENDENTE Escalante Estrada Violeta Erndira Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua. Paseo Cuauhnhuac 8532 Col. Progreso. Jiutepec, Morelos. 62550, Mxico. Tel. y Fax (777) 3 29-36-22 vescalan@tlaloc.imta.mx Dos reactores anaerobios de flujo ascendente (RAFA) tratan las aguas residuales de una poblacin menor a 25 000 habitantes. De la evaluacin realizada en 2008, se encontr que las aguas residuales fueron de concentracin media, con excepcin de las grasas y aceites y del nitrgeno total que resultaron ser de concentracin alta, presentando una eficiencia de remocin del 50% en DQO. Los lodos residuales de los RAFAs son purgados en poca de estiaje y su tratamiento consiste en su deshidratacin en tres lechos de secado. En este trabajo se presentan los resultados de la caracterizacin de los lodos residuales de los dos RAFAs antes de su deshidratacin, las muestras fueron simples y los parmetros determinados fueron: Temperatura, pH, cidos Voltiles, Alcalinidad Total, DQO, Sulfuros, Fsforo Total, Nitrgeno Total, Slidos en todas sus formas, Metales Pesados, Coliformes Fecales y Huevos de Helminto. Se tomaron muestras a diferentes alturas del manto de lodos. Se realizaron pruebas de velocidad de sedimentacin del lodo. Se determin la relacin alfa para cada muestra y la relacin C/N/P. El lodo del reactor uno present una temperatura de 20.53 y C pH de 5.87, para el reactor dos la temperatura fue de 19.20 y pH de 6.71. Tanto el lodo del reactor C uno como el del dos presentaron una coloracin negra con un IVL de 23 mL/g para el primero y de 15 mL/g para el segundo, ste ltimo reuniendo las caractersticas de un lodo tipo granular. La concentracin de cidos voltiles fue mayor que la recomendada, lo que se puede reflejar en una concentracin baja de metano en el biogs producido. El lodo aunque present una alcalinidad menor al rango recomendado para el control del proceso (1500 a 5000 mg/L), obtuvo una relacin alfa dentro del valor de adecuado para la estabilidad del proceso. Con respecto al contenido de metales pesados estos fueron menores que los indicados para un lodo digerido (con excepcin del Zinc). El gnero de huevos de helminto que ms frecuente se present fue Hymenolepis diminuta. El lodo de los dos reactores present caractersticas de un lodo digerido que requiere de estabilizacin para la remocin de coliformes fecales. Se recomienda un tratamiento adicional despus de su deshidratacin. El nivel de lodos en el reactor dos fue 95 cm. De las pruebas de velocidad de sedimentacin se estima que la concentracin de lodo adecuada para operar los RAFAs es del 20%.
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OR-BA-23 POTENCIAL DE LA PROTENA CAPAS DE AISLAMIENTOS COLOMBIANOS DE Bacillus sphaericus EN BIORREMEDIACIN DE METALES PESADOS Lozano Lucia, Bojaca Vivian, Dussn Garzn Jenny Universidad de los Andes jdussan@uniandes.edu.co La capa S es una estructura paracristalina presente en la superficie de las clulas de eubacterias y Archaea, se ha asociado con intercambio de molculas con el ambiente, adhesin celular, reconocimiento superficial, factores de virulencia, lugar de anclaje de enzimas, unin de metales pesados y actividad larvicida). Se han reportado aislamientos de B. sphaericus sensu lato (Bs) con potencial en procesos de biorremediacin, como en la reduccin de cromato, bioabsorcin de cromo, cobre plomo, hierro y cobalto de clulas muertas de Bs inmovilizadas. Se trabaj con 52 cepas de Bacillus sphaericus del cepario del Centro de Investigaciones Microbiolgicas-CIMIC, todos presentaron 1 2 protenas con peso molecular igual o mayor a 95 KDa correspondientes por secuencia de protenas a capa-S posteriormente se realiz una preseleccin de tolerancia a metales pesados por Replica plating, seleccionando 37 cepas para determinar la concentracin mnima inhibitoria Finalmente cada bacteria fue incubada con 1000 ppm de cromo (VI) a 30oC con agitacin por 2 y 5,5 horas, se calcul la cantidad de metal unida por la concentracin residual en la solucin con difenil carbazida, como control se utiliz el medio de sales sin cromo. Adicionalmente se fijaron las clulas de los cultivos con y sin el metal pesado con glutaraldehido al 2,5% para su observacin en el microscopio electrnico de barrido y para la determinacin del cromo unido por EDX. La unin a cromo se determino en la cepa altamente tolerante a metales pesados, OT4b.31 y con la mxima concentracin de cromo hexavalente a la que creci, 1000 ppm de Cr (VI). A las dos horas de incubacin de la cepa OT4b.31 con 1000 ppm de cromo se obtuvo un 6,08% de adsorcin y un 0,02% de sobrevivencia, al microscopio electrnico la superficie de las clulas es irregular (a diferencia del control sin cromo) y la determinacin con EDX se observa el pico del cromo con un porcentaje del 0,43% de los elementos presentes en la muestra. La determinacin se realizo posteriormente empleando clulas muertas, que mostraron una alta unin al cromo. Estos resultados sugieren el potencial de los aislamientos de Bacillus sphaericus en bioadsorcin de metales tipo cromo presente en lodos aceitosos y aguas de procesos de la industria petrolera , texti y de curtiembresl.
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OR-BA-24 APLICACIN DEL ENSAYO COMETA EN LA ASIGNACIN DE DAO GENMICO POR BENZO(A)PIRENO EN Dunaliella tertilecta Lpez Montoya Cynthia, Guerra Rivas Graciela, Cordero Esquivel Beatriz, Paniagua Chvez Carmen G. cynthiacf@hotmail.com El impacto de los hidrocarburos policclicos aromticos (HPA) radica en sus propiedades genotxicas, o capacidad de dao sobre material gentico. Uno de los HPAs ms txicos es el benzo(a)pireno, carcinognico para una variedad de especies. Debido a la creciente contaminacin por HPAs generada por la combustin incompleta de hidrocarburos del petrleo, se ha impulsado la utilizacin de sistemas biolgicos para limpieza ambiental o como indicadores de contaminantes. El fitoplancton es promisorio como indicador de alerta temprana debido a su sensibilidad a xenobiticos. Dunaliella es un gnero fitoplanctnico con gran resistencia a ambientes salinos, bajos en nutrientes y pH extremos, superviviente en ambientes contaminados, por lo que Dunaliella sp. ha sido ampliamente usada en toxicologa, aunque no existe evidencia de dao subletal. El ensayo cometa (EC) es un mtodo frecuentemente utilizado para evaluar impacto al ADN, debido a su rapidez y sensibilidad para detectar cambios moleculares, pero no se tiene suficiente informacin sobre la aplicacin del EC en microalgas marinas. El objetivo de este trabajo es el de validar la aplicacin del EC en la determinacin de dao genmico por benzo[a]pireno sobre Dunaliella tertiolecta con el propsito de aportar un mtodo til en la evaluacin de efectos subletales. Se realiz el anlisis de ADN de clulas expuestas al B[a]P, con variaciones en tiempo de exposicin, concentracin del genotxico y densidad celular. La microalga fue sometida a un gradiente de concentraciones de B[a]P a cuatro tiempos de incubacin para determinar la concentracin letal media (CL50). El dao genmico fue evaluado aplicando EC, usando como base el trabajo de Erbes et al. (1997), pero modificando las concentraciones de los componentes del buffer de lisis, la preparacin de laminillas, el tiempo de incubacin de lisis de ADN y el corrimiento de electroforesis. Se logr la fragmentacin del ADN a 9 h de exposicin al B(a)P, la visualizacin ptima de la muestra se realiz preparando una doble capa de agarosa al 0.5 %; la composicin ms efectiva del buffer fue con SDS y Tritn X100, ambos al 1.7%; el mejor tiempo de lisis fue de 2 h a 4 0C y el tiempo ptimo de corrimiento de la electroforesis fue de 20 min.
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OR-BA-25 ESTUDIO DE LA METANOGNESIS Y CINTICA DE DEGRADACIN ANAEROBIA DE LA MATERIA ORGNICA PRESENTE EN EL AGUA RESIDUAL DE RASTRO Padilla Gasca Edith, Lpez Lpez Alberto Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco, A. C. Av. Normalistas 800, Colinas de la Normal, CP 44270, Tel. (33) 3345-5200x1650. Guadalajara, Jalisco, Mxico alopez103@yahoo.com En esta investigacin se evalu la eficiencia de un proceso anaerobio por lote para tratar agua residual de rastro municipal, con el objetivo de evaluar la etapa metanognica y obtener los parmetros cinticos asociados al proceso de degradacin anaerobia de la materia orgnica. El monitoreo de los parmetros operacionales DQO, alcalinidad, pH, CH4 y AGVs, permitieron conducir con xito la etapa metanognica del proceso anaerobio. La cintica de degradacin de materia orgnica se evalu empleando el modelo de primer orden y el de Lineweaver-Burke, observndose que los datos experimentales tienen un mayor grado de ajuste al modelo de Lineweaver-Burke. Dicho modelo permiti una mejor interpretacin de los datos experimentales, los cuales facilitaron identificar que el factor limitante de la cintica de degradacin es el sustrato presente en el agua residual. La eficiencia de degradacin de este proceso anaerobio fue mayor al 75%, mostrando la elevada biodegradabilidad de la materia orgnica presente en el agua residual. La gran actividad metanognica del proceso anaerobio se reflejo en una alta tasa especfica de produccin de metano de 450 ml de CH4/gr de DQO removido. Este estudio demostr la factibilidad de tratar efluentes de rastro utilizando un proceso anaerobio en un solo paso, logrando remociones elevadas de materia orgnica y la oportunidad de aprovechar el CH4 como una fuente alterna de energa. Palabras clave: Agua residual, actividad metanognica, metano, modelo cintico de primer orden, rastro.
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OR-BA-26 ESTRUCTURA COMUNITARIA DEL FITOPLANCTON EN LA ZONA MARINO COSTERA, ADYACENTE A LA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS SERVIDAS DE PUNTA DE PIEDRAS (ISLA DE MARGARITA, VENEZUELA) Carrin Gregori1, Gmez Fermn Egle2, Reyes Milln Nayelka1, Serrano Rosangel1
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Departamento de Acuacultura, Escuela De Ciencias Aplicadas Del Mar, Ncleo Nueva Esparta, Universidad De Oriente 2 rea de Ecologa Y Ambiente, Instituto De Investigaciones Cientficas, Ncleo Nueva Esparta, Universidad De Oriente egleegomez@yahoo.com
En este trabajo se evala la estructura comunitaria del fitoplancton y la calidad del agua, de la zona marino-costera adyacente a la planta de tratamiento de aguas servidas de Punta de Piedras, Isla de Margarita Venezuela, de acuerdo a sus caractersticas hidrofsicas hidroqumicas, y bacteriolgicas. Se establecieron 8 estaciones a lo largo de la zona costera y en ellas se tomaron muestras, desde febrero hasta agosto 2008. In situ se midieron temperatura, oxgeno disuelto, pH, salinidad y TDS. Tambin se tomaron superficialmente muestras de agua, para nutrientes (amonio, nitrato, nitrito y fosfato), clorofila-a, feopigmentos, coliformes totales, fecales y enterococos. El anlisis cualitativo y cuantitativo del fitoplancton se realiz mediante el mtodo de Utermlh. El fitoplancton estuvo representado por diatomeas (68%), dinoflagelados (26%), cianobacterias (5%) y representantes de otros taxas (4%). La abundancia total del fitoplancton fue de 234.473 12.0.310 cel.ml-1, la diversidad especfica de 2,02 1,37 bit.ind-1, el ndice de riqueza de 3,87 1,31y la equitatividad de 0,42 0,28. Las especies fitoplanctnicas dominantes fueron Anabaenopsis circularis, Guinardia striata, Pseudonitzshia delicatissima y Spirulina platensis. La clorofila a registr concentraciones de 3,38 17,45 mg.m-3, y los feopigmentos de 5,14 61,81 mg.m-3. El anlisis de correspondencia cannica (ACC), entre las especies fitoplanctnicas y los parmetros hidrobiolgicos indic una correlacin de 96,38%. Adems hubo correlacin positiva entre la abundancia fitoplanctnica con la clorofila a y los coliformes totales, y tambin indic una relacin directa entre este grupo bacteriano y la diversidad. El Anlisis de Correspondencia Cannica (ACC), entre las especies fitoplanctnicas permanentes y las variables hidrobiolgicas mostr correlacin de 77,53%, indicando que los coliformes fecales fueron los que ms condicionaron la permanencia de las especies de fitoplancton, en la zona de estudio. Las bacterias forman parte de procesos que incluyen la descomposicin de residuos complejos de plantas y animales, y la liberacin de carbono, nitrgeno, fsforo y otros elementos esenciales en forma disponible; manteniendo los nutrientes en circulacin y permitiendo as la continuidad de los seres vivos. Por tanto, se puede deducir que las coliformes fecales fueron las encargadas de liberar al medio, en forma metabolizable por los organismos fitoplanctnicos, los elementos requeridos para realizar sus procesos vitales y puesto que este grupo de bacterias se especializa en degradar materia orgnica de origen fecal puede inferirse que los compuestos que ellas estn degradando provienen de la planta de tratamiento.
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OR-BA-27 TRATAMIENTO DE VINAZAS DILUIDAS EN HUMEDALES CONSTRUIDOS CON P. sagittata: COMPARACIN DE DOS SOPORTES Hernndez Vctor Javier, Gonzlez Portela Ricardo E., Aguilar Ma. Guadalupe, Rodrguez Jos L. Pablo, Snchez Galvn Gloria, Olgun Eugenia J. Red de Manejo Biotecnolgico de Recursos. Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz 91070 Mxico. eugenia.olguin@inecol.edu.mx Estudios previos de nuestro grupo de investigacin mostraron que un sistema de humedales construidos (HC) de flujo subsuperficial plantados con Pontederia sagittata y con grava volcnica como soporte fue muy eficiente para el tratamiento de vinazas diluidas 1:100. La materia orgnica y nutrientes (N-NH4, N-NO3 y S-SO4) fueron removidos exitosamente, excepto los fosfatos y el potasio. El objetivo del presente trabajo fue evaluar el funcionamiento de dicho sistema utilizando vinazas ms concentradas y dos tipos de soporte. Se utilizaron vinazas diluidas 1:50 y grava volcnica (G.V.) y material cermico (M.C.) (partculas de barro cocido). Los HC tenan un rea de 0.9m2 y 145L de volumen til, con un flujo subsuperficial de 20 mL/min, lo que represent un tiempo de retencin hidrulico de 5 das. Se emplearon 2 rplicas para cada tratamiento, adems de controles sin planta. La vinaza diluida tena una DQO y DBO5 iniciales de 1990 y 972 mg/L, respectivamente; las concentraciones iniciales de sulfatos y potasio fueron 199 y 383 mg/L, respectivamente. Los HC se mantuvieron en condiciones de invernadero durante el verano en Xalapa. Ver. Los resultados mostraron que en un periodo de 60 das, la materia orgnica (DQO y DBO5) fue removida en 931.3 y 922.4% respectivamente, con ambos tipos de soporte (en los controles sin planta, la remocin lleg hasta el 88%). El nitrgeno amoniacal fue removido en un 47%2.3 por los HC con G.V. y en 55%3.6 en los HC con M.C. La remocin de nitratos en los HC con M.C. fueron significativamente mayores a los encontrados con la G.V. (622.8% y 551.1) (p<0.05). Los sulfatos disminuyeron considerablemente en todos los tratamientos (hasta un 96%, al da 40) excepto en el control con M.C. (p<0.05). Los fosfatos fueron removidos en la misma proporcin en ambos tratamientos (801.0 y 792.1 %) pero no en los controles (p<0.05). El potasio no fue removido en los HC con grava (ni en los controles sin planta), pero s en los HC con M.C. al da 20 (911.3%), aunque posteriormente dicha remocin disminuy. Se concluy que este sistema es muy eficiente para remover materia orgnica en aguas residuales con altas concentraciones y tambin para remover fosfatos al usar M.C. Se demostr que el sistema con P. sagittata y los microorganismos asociados a la rizsfera es resistente a los compuestos txicos presentes en la vinaza, especialmente en el sistema con grava.
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OR-BA-28 CONSORCIO BACTERIA-MICROALGA AUTCTONO PARA LA BIORREMEDIACIN DE UN EFLUENTE PETROLERO Daz Borrego Laugeny1, Vera Alexandra1, Marn Julio2, Aiello Mazzarri Cateryna3, Morales Ever1 Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos. Facultad de Ciencias. 2 Departamento de Ingeniera Sanitaria 3 Departamento de Ingeniera Bioqumica Facultad de Ingeniera. Universidad del Zulia. MaracaiboVenezuela. evermster@gmail.com El objetivo del trabajo consisti en evaluar el uso de un consorcio de bacterias-microalgas para la remocin de hidrocarburos de un efluente procedente de una fosa petrolera venezolana; conformado por las bacterias (5%): Yersinia sp., Pantoea agglomerans, Actinobacillus sp., y Sphingobacterium thalpophilum y las microalgas (5%): Chlorococcum sp. y Coenochloris sp., aisladas del mismo residual petrolero. El bioensayo se inici con un inoculo de 1x108 cel.mL-1 y 2,5x106 cel.mL-1 de cada bacteria y microalga, respectivamente. Los cultivos con 1L del efluente y por triplicado en frascos de 5 L se mantuvieron en aireacin constante, a 30 C y fotoperodo 12:12h durante 32 das. Se emple un control: Agua petrolizada (AP) sin fertilizante, y cuatro tratamientos: Agua petrolizada + (fertilizante: NPK) 1 mL.L-1 (AP1), Agua petrolizada+NPK 3 mL.L-1 (AP3), Agua petrolizada+ Inculo (10%)+ NPK, 1 mL.L-1 (API1) y Agua petrolizada + Inculo (10%) NPK, 3 mL.L-1 (API3). El contenido de hidrocarburos (TPH) se determin al inicio y al final del ensayo. La densidad celular, peso seco y pigmentos de microalgas, as como la poblacin bacteriana se monitorearon peridicamente. El crecimiento de microalgas se estimul mediante la adicin de fertilizante al efluente, registrndose los mayores valores en API1, AP1 y AP3 con 34,40,28x106, 29, 90,10x106 y 27,20,32x106; respectivamente. Mientras que, el menor valor, de 1,080,13x106 cel.mL-1 se encontr con el efluente no inoculado y sin fertilizante (AP). El peso seco microalgal tambin fue el ms bajo en AP (p<0,05) con 0,150,03 g.mL-1 y el ms elevado en API1 con 0,560,08 g.mL-1. De igual manera, hubo diferencias significativas en el contenido de pigmentos entre el control AP y los tratamientos (p<0,05). En relacin a TPH inicial de 800 mg/L, se evidenci remocin en todos los tratamientos y con diferencias significativas respecto al control (p<0,05). La mayor degradacin se obtuvo en el efluente inoculado y fertilizado. En API1 y API3 hubo una reduccin del 77,340,92% y 76,950,93%, respectivamente, seguidos por los cultivos fertilizados (AP1 con 60,160,77% y AP3 con 55,916,48%) y el control (AP con el 14,391,96%). La poblacin bacteriana vari en todos los cultivos, sin embargo en AP; con un inculo inicial de 6,5x104 UFC/mL se alcanz un mximo de 6,0x108 UFC/mL en su fase logartmica. Se evidencia que los cultivos fertilizados e inoculados produjeron el mayor crecimiento microalgal incrementando as, el porcentaje de degradacin de hidrocarburos. Los resultados sugieren que el consorcio microalga-bacteria utilizado demostr eficiencia en la biotratabilidad del efluente. Palabras clave: Consorcio bacteria-microalga, biorremediacin, efluente petrolero, Venezuela.
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OR-BA-29 CARACTERIZACIN MORFOLGICA, FISIOLGICA Y MOLECULAR DE MUTANTES DE Arabidopsis thaliana HIPOSENSIBLES A ARSNICO Villanueva Flores Francisca1, Snchez Caldern Lenin2, Herrera Estrella Luis Rafael1
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CINVESTAV-Guanajuato Universisdad Autnoma de Zacatecas villanueva_francis@hotmail.com
La contaminacin por arsnico (As) constituye un grave problema de salud pblica en Mxico y el mundo. La toxicidad de ste elemento se atribuye a la similitud qumica del arseniato (AsO4)3- con el fosfato (PO4)3-, ste acta como un anlogo desplazando al fosfato en los diversos procesos metablicos esenciales. En las plantas, la carencia de fosforo induce la expresin de genes que codifican para transportadores de fosfato (PHT) de alta afinidad los cuales son los responsables de tomar activamente el fosforo soluble presente en la rizsfera. En suelos contaminados, los arseniatos compiten con los fosfatos por entrar a las clulas radicales va PHT de alta afinidad. Como en la mayora de los ecosistemas del mundo, la gran parte de los fosfatos presentes en el suelo no se encuentran disponibles para ser tomados por las plantas, en los sistemas radicales de las mismas hay una gran cantidad de PHT de alta afinidad para favorecer la toma del fosfato, pero adems sto las hace ms susceptibles a la contaminacin por arsnico. Lo anterior tiene como consecuencia la afeccin no slo del rendimiento agrcola, sino en la propia salud del consumidor. Ya que el As es capaz de bioacumularse y ser fcilmente incorporado a la cadena trfica. En el hombre induce cncer, diabetes, afecciones cardiovasculares, hipertensin, abortos espontneos y queratosis. En nuestro grupo de trabajo estamos interesados en estudiar mecanismos moleculares que subyacen a la respuesta a As y cmo la disponibilidad de fosfato modifica dicha respuesta. El conocer los genes involucrados en dicha respuesta y su regulacin ser de gran importancia para el diseo de estrategias biotecnolgicas como el desarrollo de nuevos biosensores, biorremediacin y la contribucin a salvaguardar la salud de los consumidores. Para lo anterior analizamos los cambios de desarrollo postembrionario y de sobrevivencia en respuesta a diferentes concentraciones de arseniato y fosfato usando a Arabidopsis Col0 como organismo modelo. Con base en los resultados obtenidos, diseamos un sistema de escrutinio para buscar mutantes que fueran hiposensibles o hipersensibles a arseniato. De un total de 35000 semillas se seleccionaron 8 mutantes hiposensibles. De un anlisis detallado de desarrollo postembrionario y de sobrevivencia, se seleccionaron tres mutantes de tipo insercional, cuyo fenotipo es muy contrastante respecto al silvestre. Actualmente trabajamos con la caracterizacin detallada a nivel morfolgico, fisiolgico y molecular de la respuesta que las mutantes presentan ante la presencia de As, as como en la identificacin de los genes afectados.
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Biotecnologa Ambiental
Carteles
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CT-BA-1 CINTICA DE REMOCIN BIOLGICA DE NITRATOS EN REACTORES BATCH SECUENCIADOS DE VOLMENES DIFERENCIADOS DE CARGA PESADA Mendoza Ortega Adriana Lizeth, Luvano Martnez Jos Salvador Escuela de Ciencias Biolgicas de la Universidad Autnoma de Coahuila. Carretera Torren-Matamoros Km 7.5 Ciudad Universitaria. Torren, Coahuila Mxico cobalto_88@hotmail.com La presencia de compuestos nitrogenados en aguas residuales y aguas provenientes de procesos de refinacin y recuperacin de metales, es la principal causa del desarrollo de bio-procesos que permitan llevar a cabo la remocin de este tipo de compuestos. El desarrollo de bio-procesos para la remocin de compuestos nitrogenados es de suma importancia para la competitiva industria de refinacin de metales, hablando en trminos de procesos y factores econmicos como los son la utilizacin de bajas cantidades de energa en procesos altamente intensivos, el uso eficiente de los recursos naturales con que se cuenta sin olvidarnos de la reduccin de descargas de aguas contaminadas hacia el medio ambiente. Se trabajo con la remocin biolgica de nitratos a partir de la recuperacin de metales pesados desde aguas residuales sin diluir la concentracin original de sal. La concentracin de nitratos en la solucin original es de 120 gr / L de NaNo3 o 87.4 gr/L solo de nitrato. El mtodo ms utilizado para llevar a cabo la remocin es el de dilucin, sin embargo en este trabajo se utiliza el concepto de carga pesada (sin dilucin de las aguas residuales) en donde la concentracin de entrada es 87,4 gr / L de NO3 y la concentracin de salida es de 28,5 gr /L con un tiempo de residencia de 14 das lo que significa que se lleva a cabo una eliminacin del 67,39% de NO3 equivalente a 58,9 gr / L de este es decir 10,7 veces ms alto que en el mtodo de dilucin.
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CT-BA-2 BIODEGRADABILIDAD ANAEROBIA DE LODOS FISICOQUMICOS PROVENIENTES DE UN PROCESO DE ELIMINACIN DE COLOR DE UN AGUA TEXTIL Delgado Villegas Ana Laura, Cuevas Rodrguez Germn, Arroyo Figueroa Gabriela, Bernal Martnez Arod arodiberna@quijote.ugto.mx El agua residual textil, debido a la significativa cantidad de slidos suspendidos y turbiedad que presentan, requieren de un tratamiento previo, las plantas biolgicas convencionales, construidas para el tratamiento de efluentes de estas industrias, presentan problemas en la remocin de color, por lo que se precisa de tratamientos no convencionales como; el tratamiento fisicoqumico o procesos de oxidacin avanzada, en los primeros se emplean reactivos qumicos llamados coagulantes, que sirven para remover las impurezas y generan residuos (lodos), o efluentes probablemente con cierta toxicidad para el ambiente. Estos efluentes y lodos, precisan una etapa de pulimento para disminuir aun ms la DQO y no slo remover el color, en el caso de los efluentes, y en el caso de los lodos, se requiere disminuir su volumen, y aumentar su biodegradabilidad para ser considerados como bioslidos y no generar residuos peligrosos. El objetivo de este trabajo fue evaluar la biodegradabilidad de los lodos, con el fin de determinar la biodegradabilidad por medio de un proceso anaerobio, el cual permitir obtener dos beneficios, la generacin de biogs y la disminucin en la cantidad de lodos. Para cumplir con el objetivo de este trabajo, la estrategia experimental fue dividida en tres etapas, la primera consiste en la produccin y caracterizacin de los lodos, la segunda fue la realizacin de las pruebas de biodegradabilidad anaerobias, y la tercera etapa ser la evaluacin de la factibilidad de proceso. Entre los principales resultados, las pruebas de biodegradabilidad, con tres diferentes concentraciones de DQO de lodos fisicoqumicos, muestran un 50, 60 y 90 % de eliminacin de DQOt a 0.5, 1 y 1.5 g DQO/L. No se mostr inhibicin de la digestin anaerobia en las pruebas. Los slidos suspendidos voltiles, se eliminan en un 50 porciento, sin que el pH se vea modificado. En conclusin, los lodos fisicoqumicos textiles, son factibles de ser tratados va digestin anaerobia.
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CT-BA-3 COTRATAMIENTO OZONACIN-DIGESTIN ANAEROBIA-AEROBIA PARA EL TRATAMIENTO DE UN EFLUENTE TEXTIL Martnez Mnica J, Cuevas Rodrguez Germn, Monje Ramrez Ignacio, Arroyo Figueroa Gabriela, Bernal Martnez Arod arodiberna@quijote.ugto.mx Las plantas para tratamiento de aguas residuales convencionales, tienen una baja eficiencia de eliminacin de estos colorantes ya que estos son resistentes a la degradacin (Shaul et al., 1985; Paga et al., 1994; Ganesh et al., 1994). Por lo que, el sector textil precisa de tratamientos primarios, secundarios y avanzados. El agua residual textil es notoriamente conocida por tener un fuerte color, grandes cantidades de slidos suspendidos, pH con fluctuaciones, alta temperatura y alta concentracin de demanda qumica de oxgeno (DQO) (Kim et al., 2002). El tratamiento de estos efluentes por mtodos clsicos (lodos activados, coagulacin-floculacin, etc) son cada vez menos eficientes para lograr la calidad de agua con fines de reuso. Los procesos de oxidacin avanzada son aquellos procesos que implican la formacin de radicales (OH) de elevado potencial de oxidacin (2.8 voltios). Constituyen posiblemente, en un futuro prximo uno de lo recursos tecnolgicos ms utilizado en el tratamiento de aguas contaminadas con productos orgnicos de vertidos industriales (industrias qumicas, agroqumicos, textiles, de pintura, etc.), urbanos o simplemente aguas superficiales o subterrneas contaminadas. La ozonacin es un proceso de oxidacin avanzada que permite la eliminacin de color, turbiedad y de la demanda qumica de oxgeno. Es un proceso ampliamente utilizado en pases desarrollados para potabilizacin y para el tratamiento de aguas residuales (Langlais et al., 1995). En Mxico, este proceso comienza a tener una amplia aceptacin debido a que las fuentes de abastecimiento de agua potable estn cada vez ms contaminadas (Ramrez et al., 2008). El objetivo del presente estudio fue evaluar un proceso de cotratamiento de ozonacin-digestin anaerobia para la eliminacin de color de un efluente textil (grana carmn). Para el cumplimiento del objetivo, fueron realizadas pruebas de ozonacin para determinar la dosis ptima de eliminacin de color, fue determinada una dosis de 80 mg/L, sta dosis fue disminuida y se agreg al tren de tratamiento una fase de digestin anaerobia. Los lodos fueron previamente adaptados al efluente de ozoancin y fueron evaluadas en pruebas de biodegradabilidad en batch. El proceso combinado no inhibe al proceso de digestin anaerobia, el color fue eliminado en un 92%, al igual que la DQO, 90%. Por otro lado, fue evaluada la biodegradabilidad aerobia, en la cual fueron alcanzadas eliminaciones del 90% tanto de color como DQO. Evaluando ambos procesos se concluye que stos efluentes pueden ser tratados por procesos combinados y sobre todo con digestin anaerobia, ya que ofrece una alternativa de generacin de biogs.
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CT-BA-4 DETERMINACIN DE AZUCARES TOTALES Y MONOSACRIDOS PROVENIENTES DE LOS RSU Basalda Acosta Ruth Corina, Serafn Muoz Alma Hortensia, Cano Canchola Carmen, lvarez Vargas Aurelio, Ramrez Ramirez Natividad cori_quim@hotmail.com;sermuah@yahoo.com La acumulacin de Residuos Slidos Urbanos (RSU) generados principalmente como consecuencia de las transformaciones sociales, econmicas y tecnolgicas ofrece una amenaza al ambiente y una oportunidad biotecnolgica al aprovechar los componentes que conforman dichos RSU principalmente la fraccin orgnica. En este trabajo se expone una alternativa de manejo de los Residuos Slidos Urbanos. Inicialmente las muestras se recolectaron de mercados pblicos de la ciudad de Guanajuato, posteriormente se homogenizaron para seguir con el ensayo en donde se realiz un estudio comparativo de 3 diferentes hidrlisis: Hidrlisis cida con H2SO4 0.5% y 0.75%; Hidrlisis enzimtica con enzima celulasa de Trichoderma resei e Hidrlisis enzimtica con extracto enzimtico de Aspergillus flavus. Los RSU seleccionados fueron: Cscara de mango (Mangifera indica); Cscara de pltano (Musa paradisiaca); Cscara de papaya (Carica papaya); Cscara de meln (Cucumis melo); Bagazo de zanahoria (Daucus carota); Cscara de naranja (Citrus aurantium) y Mezcla de cscaras. Despus de las hidrlisis se realiz la determinacin de azucares totales de cada una de las muestras por el mtodo de Dubois a una =495nm. Finalmente se llev a cabo la identificacin y determinacin de la cantidad de monosacridos presentes en cada una de las muestras obtenidas por cromatografa de gases (GCFID). En base a los resultados preliminares el mtodo ms adecuado para llevar a cabo la hidrlisis de los RSU es la hidrlisis enzimtica con celulasa de Trichoderma resei, obtenindose un rango de hidrlisis del 15 40%, por lo que es el mtodo ms eficiente para la obtencin de azcares totales y monosacridos, que servirn en trabajos que estn involucrados en el proceso de fermentacin y por consiguiente la produccin de bioetanol.
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CT-BA-5 EFECTO DE LA EXPOSICIN A HPAS SOBRE EL SISTEMA ENZIMTICO DE DEGRADACIN DE LIGNINA DE Pycnoporus sanguineus IDEA Y VARIACIONES EN LA FITOTOXICIDAD GENERADA Perna B., Rojas-Tortolero D., Naranjo-Briceo L. Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela. http://www.idea.gob.ve bpernia@idea.gob.ve Los hidrocarburos policclicos aromticos (HPAs) son componentes del petrleo que pueden ser oxidados por enzimas del Sistema Enzimtico de Degradacin de Lignina (SEDL) presente en hongos ligninolticos. A fin de determinar el efecto de los HPAs sobre el SEDL de P. sanguineus IDEA y la posible fitotoxicidad generada por los HPAs biotratados, a cultivos del hongo de 7 das de crecimiento, se aadieron 5 ppm de naftaleno, fenantreno o pireno, se tomaron muestras cada 24 h durante 5 das y se determin: i) la actividad enzimtica especfica lignina peroxidasa (LiPp), manganeso peroxidasa (MnPp) y lacasa (LACp) del SEDL, ii) el patrn proteico en geles SDS-PAGE y la actividad de las distintas isoenzimas lacasa mediante zimograma en presencia de ABTS y, iii) las variaciones en la fitotoxicidad de los HPAs biotratados, utilizando la planta bioindicadora Lactuca sativa. Los resultados obtenidos mostraron que, a pesar de no haber actividad ligPp ni MnPp, se observ una induccin fuerte de la actividad LACp a partir de las 24 horas en presencia de todos los HPAs estudiados, hasta alcanzar a los 5 das una actividad de 16816, 8825 y 12515 U/mgP, en naftaleno, fenantreno y pireno, respectivamente, con relacin al control (408 U/mgP). Los geles SDSPAGE y los zimogramas mostraron la presencia de tres isoenzimas lacasa de peso molecular 56, 57 y 65 kDa, con una induccin mayoritaria de la lacasa de 65 kDa en presencia de naftaleno y pireno. Los resultados de las pruebas de fitotoxicidad mostraron que, en ausencia del hongo, el naftaleno y el pireno fueron txicos para las plantas. Luego del biotratamiento, se observ un incremento de la toxicidad en naftaleno y el fenantreno, con una reduccin del crecimiento radical y de la germinacin, lo cual sugiere la generacin de compuestos ms txicos que el compuesto original. Por el contrario, en el caso del pireno, se obtuvo una disminucin de la fitotoxicidad ya que se observ un estimulo en el crecimiento de las radculas en un 16%, lo que sugiere la generacin de compuestos menos txicos que el original. Se concluye que: i) en el SEDL de P. sanguineus IDEA slo se induce la actividad LACp en presencia de los HPAs estudiados, ii) la isoenzima lacasa de 65 kDa se induce fuertemente en presencia de naftaleno y pireno, lo cual indica su posible relacin con la oxidacin de dichos HPAS y, iii) las variaciones en la toxicidad sugieren la biotransformacin de los HPAs.
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CT-BA-6 EFECTO DE LA EMULSIFICACIN DE ASFALTENOS PROVENIENTES DE DISTINTOS CRUDOS EXTRAPESADOS VENEZOLANOS SOBRE LA TOXICIDAD DE LA PLANTA BIOINDICADORA Lactuca sativa Perna B., Freites M., Rojas-Tortolero D., Naranjo-Briceo L. Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela. http://www.idea.gob.ve bpernia@idea.gob.ve Los crudos pesados y extrapesados (CEP) de la Faja Petrolfera del Orinoco (FPO) se caracterizan por tener altos niveles de viscosidad, ser ricos en azufre, metales pesados y por tener altas concentraciones de resinas y asfaltenos. Debido a ello, la tasa de biodegradacin de dichos hidrocarburos no convencionales en el medio se ve seriamente limitada por su alta hidrofobicidad y baja solubilidad en agua, por lo que requieren de su solubilizacin antes de ser degradados por los microorganismos. A fin de promover la disminucin de la tensin interfacial y una mayor susceptibilidad de los contaminantes a ser biodegradados, se ha propuesto el uso de microorganismos hidrocarburoclsticos capaces de producir agentes tensoactivos y/o el uso de surfactantes (qumicos o biosintticos) para incrementar la biodisponibilidad del crudo en suelos contaminados. Sin embargo, no se ha considerado el posible efecto que esto pueda generar sobre la biota. A fin de estudiar el posible efecto txico de los asfaltenos al ser emulsionados con un surfactante comercial sobre la planta bioindicadora Lactuca sativa, se aisl la fraccin de asfaltenos de tres (3) CEP venezolanos distintos (Boscn API=10, Carabobo API=8,5, Junn API=8,5), se emulsionaron a una concentracin de 1% en agua con el surfactante acetona-tween 80, y se estudi su efecto sobre: i) la germinacin y, ii) el crecimiento de las plntulas (hipoctilo y radcula). Los resultados obtenidos mostraron que el surfactante solo no fue txico para la planta. As mismo, los asfaltenos en agua (no emulsionados), sin importar su origen, tampoco generaron fitotoxicidad, probablemente debido a su baja solubilidad. No se observaron cambios en los porcentajes de germinacin para ninguno de los tratamientos. Sin embargo, los asfaltenos emulsionados provenientes de los crudos Carabobo y Boscn si mostraron fitotoxicidad. Con los asfaltenos emulsionados del crudo Carabobo se observ una reduccin de 16% de la longitud de los hipoctilos y, en el caso del crudo Boscn, se observ una reduccin de 17% en las races y de 14% en los hipoctilos (con relacin a los controles). Estos resultados permiten concluir que los asfaltenos del crudo Carabobo y Boscn, al ser emulsionados, incrementan su fitotoxicidad, lo cual no ocurre con los asfaltenos emulsificados provenientes del crudo Junn. El empleo de agentes tensoactivos en procesos de biorremediacin de suelos contaminados con crudos Carabobo o Boscn debe estudiarse con mayor profundidad, sin embargo, podra considerase su uso para promover la biorremediacin de suelos contaminados con crudo Junn en la FPO.
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CT-BA-7 CARACTERIZACIN FUNCIONAL DEL HONGO Pycnoporus sanguineus IDEA Y SU POTENCIAL COMO BIOCATALIZADOR PARA EL SANEAMIENTO DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS Perna B.1, Gonzlez M.1, Salas M.2, Malaver N.2, Sena L.1, Naranjo-Briceo L.1
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Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela. http://www.idea.gob.ve. 2 Instituto de Zoologa y Ecologa Tropical (IZET), Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela (UCV), Caracas, Venezuela. bpernia@idea.gob.ve
Pycnoporus sanguineus IDEA es un hongo del Phylum Basidiomycota aislado del Lago de Asfalto de Guanoco, (Edo. Sucre, Venezuela) que tiene un alto potencial de ser empleado como biocatalizador en procesos de biorremediacin. A fin de caracterizarlo se determin, en primer lugar, su crecimiento ptimo sobre diferentes: i) temperaturas (25, 37, 50 y 70C), ii) pH (4, 6, 8 y 10) y, iii) niveles de salinidad (125, 250, 500, 1000 y 2000 mM de NaCl). Adems, se estudi su potencial para degradar distintos sustratos tales como: glucosa, almidn, pectina, quitina, urea, celulosa, lignina, inositol, fosfatos, nitritos, gelatina, peptona, hidrocarburos policclicos aromticos (HPAs, 200 ppm, dibenzotiofeno, fenantreno, naftaleno y pireno) y crudo extrapesado (CEP, 1%). En segundo lugar, una vez confirmada su capacidad especfica de degradacin de hidrocarburos, se determin su tolerancia para crecer en distintas concentraciones de naftaleno, fenantreno y pireno (2.5, 25, 50, 100, 200, 400, 800 y 1600 ppm) y CEP (1000, 5000, 10000, 20000 y 50000 ppm). Finalmente, se procedi a estudiar la capacidad del hongo de producir surfactantes y su actividad lipoltica. Los resultados obtenidos mostraron que las condiciones ptimas de crecimiento fueron: 25-37C, pH 6 (aunque present un amplio rango de crecimiento de pH 4 a pH 10) y, 125 mM de NaCl con tolerancia hasta 500 mM. Adems, fue capaz de degradar todos los sustratos utilizados, menos fosfatos y dibenzotiofeno. Con relacin a las pruebas de tolerancia, el hongo mostr inhibicin del crecimiento en CEP a partir de 20000 ppm, en naftaleno a partir de 400 ppm y en fenantreno de 25 ppm, en comparacin al control. Mientras, en pireno mostr una alta tolerancia, hasta 1600 ppm sin ver afectado su crecimiento. Por otro lado, los resultados de degradacin de acetato y la actividad hemoltica en agar sangre, sugiere la capacidad del hongo de producir compuestos tensoactivos y, la actividad lipoltica utilizando Tween 80, sugiere su potencial como degradador de aceites y grasas. Se concluye que P. sanguineus IDEA es un hongo: i) capaz de degradar lignina, lo que sugiere la presencia de enzimas ligninolticas asociadas tamben a la degradacin de HPAs; ii) capaz de crecer utilizando HPAs y CEP como nica fuente de carbono; iii) que tiene tolerancia a altas concentraciones de pireno y CEP, iv) productor de biosurfactantes y degradador de aceites y grasas; lo que nos permite proponer su uso potencial como biocatalizador para el saneamiento de suelos contaminados con hidrocarburos.
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CT-BA-8 BIORREMEDIACIN DEL TAMIZAJE DE PALMA AFRICANA EMPLEADO COMO FILTRO PARA LA REMOCIN DE HIDROCARBUROS DE AGUAS DE PRODUCCIN DEL CPF-1 RUBIALES, META, COLOMBIA Clivio Camila, Dussn Garzn Jenny CIMIC-Universidad de los Andes jdussan@uniandes.edu.co En un campo de explotacin petrolera en el departamento del Meta, Colombia; se emplea un tamiz fabricado con el cuzco de la palma africana como biofiltro para remover hidrocarburos pesados de las agua asociadas al proceso de explotacin. Se realizo un proceso inicial de biorremediacin mediante Landfarming del filtro, para lo cual se recuperaron de este mismo tamiz 10 morfotipos mediante un proceso de seleccin por replica plating con crudo, gasolina corriente, ACPM, fenol, tolueno y xileno en un periodo de cinco semanas. Los morfotipos se identificaron por secuenciacin y anlisis bioinformtico de la regin V3-V5 del gen 16S RNA ribosomal los cuales correspondieron a los gneros: Bacillus, Azospirillum, Flexibacter Cohnella, Chryseobacterium, Pseudomonas, Cupriavidus y Ralstonia. Con las bacterias identificadas se procedi a realizar los montajes del landfarming en canastas que contenan de 800 gr del filtro de palma, se realizaron dos tratamientos: con inoculo del pool y sin inoculo; cada tratamiento se evalu por triplicado. Se realizaron tres recuentos de la poblacin bacteriana a los 7 das, 15 das y 45 das y se determino el porcentaje de degradacin cuantificando los hidrocarburos totales de petrleo (TPHs) iniciales y finales por medio cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama (GC-FID). La concentracin inicial de TPHs en la muestra de palma fue de 9299,1 ppm; 45 das despus se cuantifico la concentracin de hidrocarburos y se encontraron valores de 6799,3 y 4046,4 ppm para las muestras sin inoculo y con inoculo respectivamente. Estos valores corresponden a una reduccin del contaminante en un 26.9 % para las muestras sin el pool y 56,5 % para las muestras inoculadas con las cepas seleccionadas. Estos resultados sugieren que las cepas seleccionadas y empleadas para la biorremediacin del filtro de palma juegan un papel importante y son eficientes en la degradacin hidrocarburos del petrleo al encontrarse una gran disminucin de la concentracin en un corto periodo de tiempo, a su vez se debe tener en cuenta que as como disminuyo la concentracin de contaminantes se demostr que al final del procedimiento la fraccin de compuestos que inicialmente correspondan a asfalticos de alto peso molecular se degradaron a compuestos alifticos los cuales son ms fciles de tratar y menos dainos para el ambiente.
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CT-BA-9 ESTUDO CINTICO DA DESNITRIFICAO AUTOTRFICA COM TIOSSULFATO COMO DOADOR DE ELTRONS. AVALIAO ESTEQUIOMTRICA Michels Camila, Moreira Soares Hugo, Schmidell Netto Willibaldo Departamento de Engenharia Qumica e de Alimentos - Universidade Federal de Santa Catarina camilamichels@yahoo.com.br A atividade humana capaz de gerar impactos ao ambiente em que vivemos. Algumas indstrias geram efluentes ricos em compostos nitrogenados nocivos a sade do homem e natureza. Processos convencionais para a remoo desse nutriente atravs da nitrificao e desnitrificao esto bem fundamentados. Porm, para a desnitrificao heterotrfica (convencional) muitas vezes necessrio a adio de carbono orgnico, o que pode elevar o custo do processo. Frente a isso, esto sendo pesquisadas novas fontes doadoras de eltrons para a desnitrificao autotrfica. Compostos sulfurosos como sulfetos e tiossulfatos podem exercer esta funo. Existem, na literatura, diferentes propostas para a reao que descreve a reduo do nitrato a nitrognio gasoso, utilizando tiossulfato como doador de eltrons. Uma, chamada aqui de A, uma reao terica, que considera o crescimento celular, a outra, B, no o considera. Elas prope relaes estequiomtricas S/N distintas, a primeira sugere 3,86 gS-S2O3-2/gN-NO3 e a segunda 2,86g S-S2O3-2/gN-NO3. Esse trabalho tem como objetivo verificar qual dessas reaes melhor representa o processo de desnitrificao autotrfica via tiossulfato. Para isso foram realizados dois testes cinticos, A com 130 mgN-NO3 e 500 mg S-S2O3-2 e B com 179 mgN-NO3 e 500 mg S-S2O3-. Os experimentos foram efetuados em frascos de sacrifcio (30 ml), inoculados com 1 g SSV/L, com lodo proveniente de um reator SBR, com processo de nitrificao e desnitrificao autotrfica j estabelecidos, a temperatura foi mantida em 301 e agitao de 250 rpm. As velocidades de consumo de nitrato e de produo de sulfato foram, C respectivamente, 12,357 mg N-NO3-/l.h e 37,558 mg S-SO4-2/l.h para A e 10,377 mg N-NO3-/l.h e 35,076 S-SO4-2/l.h para B. O fator de converso YN/S foi 0,32 em A e 0,30 em B. Esses valores so prximos ao valor terico calculado para a reao que no considera o crescimento celular, 0,35 gN/S. Isso indica que o crescimento celular muito pequeno neste processo e que nenhuma das reaes propostas na literatura representa o que realmente acontece no processo.
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CT-BA-10 UTILIZACIN DE UN HONGO MICORRIZICO ARBUSCULAR PARA FINES DE FITORREMEDIACIN DE PLOMO Alvarado Lpez Carlos J., Villegas Moreno Hctor J., Dasgupta-Schubert Nabanita Lab. de Fitoremediacin, Instituto de Investigaciones Qumico Biolgicas, Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, Edificio A-1 Cd. Universitaria, Morelia Mich., Mex. C.P. 58060. Tel. (443) 326 57 88 Ext. 128. charliealvarado@gmail.com Entre los metales pesados, el plomo (Pb) es un contaminante potencial y real en algunos lugares en el mundo ya que se acumula con facilidad en suelos y sedimentos. Su presencia en el medio ambiente se debe principalmente a las actividades antropognicas. La fitorremediacin es una tecnologa alternativa de bajo costo y ambientalmente sostenible, consiste en la utilizacin de plantas para descontaminar el ambiente. Los hongos micorrizicos arbusculares (HMA) ofrecen un atractivo sistema para ayudar en la fitorremediacin debido que durante la interaccin simbitica, la red de hifas extiende el sistema radical de las plantas y con esto aumentar el potencial para tomar Pb en mayores volmenes de suelo. La inoculacin de la planta Tagetes erecta con el HMA Glomus intrarradices, para la fitorremediacin de Pb, se utiliza un compuesto de plomo altamente insoluble Pb3O4 para simular la forma en la cual se encuentra el Pb en los suelos contaminados, adems de que es un compuesto muy utilizado en la industria metal mecnica por sus cualidades anticorrosivas. Despus de nueve semanas de crecimiento, todos los tratamientos mostraron resistencia al estrs por Pb, lo cual nos indica una buena tolerancia de la planta T. erecta a concentraciones elevadas (1000 ppm). As como tambin del HMA G. intrarradices, ya que a pesar de que la presencia del Pb, su porcentaje de colonizacin es bueno. Las plantas micorrizadas presentan una mayor concentracin de Pb en las races comparadas con las no micorrizadas, esto debido posiblemente a que las micorrizas aumentan su rea superficial y facilitan la captura de los cationes metlicos. Las plantas de T. erecta mostraron valores muy bajos de factor de translocacin (TF) lo que quiere decir que el Pb se queda mayormente en las races. Las plantas micorrizadas presentan mayores valores de concentracin de Pb en la planta y de factor de bioconcentracin lo cual nos lleva a concluir que es un tratamiento bastante eficaz con fines de fitorremediacin.
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CT-BA-11 CAPACIDAD DE FITORREMEDIACIN DE Myriophyllum aquaticum DE AGUAS RESIDUALES INDUSTRIALES PRETRATADAS CON ELECTROCOAGULACIN Roa-Morales Gabriela1, Cano-Rodrguez Claudia T.2, Amaya-Chvez Araceli2, ValdsArias Ricardo A.2, Barrera-Daz Carlos E.1 Centro de Investigacin en Qumica Sustentable (CIQS) UAEM-UNAM. Km145 Carretera TolucaAtlacomulco, Campus San Cayetano. 2 Universidad Autnoma del Estado de Mxico. Facultad de Qumica. Paseo Coln interseccin Paseo Tollocan S/N. C.P. 50120, Toluca, Estado de Mxico, Mxico. Tel.: + (52)-(722)-2173890; FAX: + (52)(722)-2175109. canorodriguezclaudia@yahoo.com.mx Las aguas residuales (ARs) son producidas en grandes cantidades todos los das, por lo que su reutilizacin se ha convertido en una prioridad. Por esta razn son necesarias tecnologas de accesibilidad econmica y fcil realizacin. (Roa-Morales et al., 2006). Algunas tcnicas innovadoras han empleando procesos acoplados o hbridos donde el agua residual (AR) con alta carga de contaminantes se procesa en dos etapas. En la primera se realiza una descomposicin inicial de compuestos con alto peso molecular empleando mtodos fisicoqumicos; posteriormente el agua resultante, es tratada utilizando algn mtodo biolgico. (Ibney-Hai et al., 2007). El propsito de este trabajo fue determinar la eficiencia del tratamiento acoplado de electrocoagulacin y fitorremediacin con Myriophyllum aquaticum Vell. (Verdc) para la disminucin de DQO (Demanda Qumica de Oxgeno), color y turbidez de ARs industriales, as como estudiar el efecto del AR en las plantas a travs de biomarcadores y de la actividad de enzimas antioxidantes. Para la realizacin del trabajo se colectaron plantas y se mantuvieron en condiciones de laboratorio. Las muestras de agua fueron colectadas de una planta de tratamiento de aguas residuales. Se emple un reactor electroqumico en batch para tratar el (AR), posteriormente se pas a sistemas de fitorremediacin, cada uno con seis plantas (peso promedio de 36 1 g) y con diferentes concentraciones de AR tratada electroqumicamente. Se evalu el ndice de crecimiento (IC) (peso y longitud), contenido de clorofila, superoxido dismutasa (SOD) (EC 1.15.1.1), Glutation S-transferasa y lipoperoxidacin de las plantas. Los datos fueron analizados con anlisis de varianza (ANOVA). Los resultados indican una disminucin de la DQO del 95%, color 90% y turbidez 90% en el AR empleando ambos tratamientos. En las plantas se obtuvo un IC (longitud) de 0.0001 0.008, sin diferencias significativas (P = 0,706); en algunos sistemas se observ una disminucin del IC (peso), con una diferencia significativa de (P = 0,045). La relacin de clorofila a/b es de 3.2 3.5, que indica que la capacidad fotosinttica no se afect. Los niveles de SOD, lipoperoxidacin y GST, no aumentaron, concluyendo que no hubo diferencias significativas respecto a los controles, lo que indica que la exposicin al AR no causo estrs en las plantas.
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CT-BA-12 FITOREMEDIACIN EN UN SISTEMA CERRADO DE ACUICULTURA, APLICADO EN UNA CANTERA REMANENTE DE LA ACTIVIDAD MINERA. Saubidet Alejandro, Prsico Mara Marta Universidad Tecnolgica Nacional. Av. Buque Pesquero Dorrego esq. Av. de los Pescadores, Puerto de Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina asaubidet@mdp.utn.edu.ar En la Provincia de Buenos Aires, Argentina, existe un nmero significativo de canteras de explotacin de piedras cuarcticas, las cuales al ser cerradas quedan inundadas y se transforman en un pasivo ambiental, cuya rehabilitacin puede generar beneficios en trminos ambientales y econmicos. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un sistema de recirculacin del agua a travs de un humedal natural a modo de Wetland, con el fin de de producir la degradacin natural de los compuestos nitrogenados originados por la alimentacin artificial suministrada a los peces. Los estudios se realizaron en la cantera de Paso de Piedra pertenciente a la Empresa Canteras Yarav S.A. ubicada en la Ciudad de Mar del Plata (Prov. de Bs.As.) entre el 15 de febrero de 2008 y el 27 de abril de 2010. Esta cantera se encuentra cerrada e inundada permanentemente. Se compone de un rea profunda vaso principal, donde se ubicaron las estructuras contenedoras de los peces y un rea de aguas someras o humedal, donde se realiz el tratamiento de agua. En el presente trabajo el trmino humedal no se utiliza a nivel ecolgico, sino desde el punto de vista de la ingeniera ambiental. Al no existir un flujo natural de agua entre las reas mencionadas, se implement un sistema de recirculacin de agua mediante bombeo desde el vaso principal hacia el humedal (FLS, free water surface wetlands). Previamente al inicio de las actividades de cultivo, se determin el estado trfico del ambiente mediante el ndice de Carlson y se realiz la caracterizacin fsico-qumica y microbiolgica del agua, como lnea de base del ecosistema. Las macrofitas acuticas identificadas en el humedal, responsables de la fitoremediacin fueron: Typha domingensis (totora), Cortaderia selloana (cola de zorro, cortadera), Scirpus sp (junco), Lemna minuscula (lenteja de agua), Myriophyllum quitense (gambarusa) y Ludwigia peploides (falsa verdolaga). Tambin se reconoci a la briofita Ricciocarpus natans. Los cultivos se realizaron en jaulas flotantes para un mejor control del crecimiento y suministro del alimento. El engorde de los peces (tilapias en primavera-verano y truchas en otoo-invierno) se complet con velocidades de crecimiento adecuadas y buenas tasas de conversin alimenticia. Se concluy que a travs de este sistema de fitoremediacin, es posible contrarrestar la descarga de fsforo y nitrgeno al ambiente, originados por las heces de los organismos acuticos y la descomposicin del alimento no ingerido.
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CT-BA-13 EVALUACIN FISIOLGICA DEL ESTRS POR COBRE EN EL PROTISTA Cervantes Garca David1, Gonzlez-Mendoza Daniel1, Zamora-Bustillos Roberto2 Instituto de ciencias Agricolas de la Universidad Autonoma de Baja California, Carretera a Delta s/n, Cdigo Postal 21705, Ejido Nuevo Len, Baja California, Mxico. 2 Instituto Tecnolgico de Conkal, Km 16.3, Antigua Carretera Mrida-Motul, Conkal,Yucatn, Mxico, C. P. 97345. daniasaf@gmail.com The objective of this study was to evaluate the toxic effect of Cu2+ in the physiological development of E gracilis. The results showed that E. gracilis had an effect on the dose dependent growth to the concentration of metal. The exposure of E. gracilis metal at doses of 0.8 and 1.6 mM of Cu2+ showed a significant negative effect on the stability of DNA and photosynthetic pigments involved in capturing light in the antenna complex after 144 h of exposure to the metal. Key words: Euglena gracilis, copper, photosynthetic pigments.
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CT-BA-14 DEGRADACIN FNGICA DEL COLORANTE NARANJA CIDO 24 Dvila-Solano Valeria1, Moeller-Chvez Gabriela2
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Universidad Politcnica del Estado de Morelos. 2 Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua. vdavila@upemor.edu.mx
Los colorantes en los cuerpos de agua, absorben y reflejan la luz solar, pueden interferir en la fotosntesis y en equilibrio ecolgico del sistema acutico, por la disminucin de oxigeno disuelto, lo cual interfiere en la autopurificacin de los cuerpos de agua contaminados. Los colorantes azo son caracterizados por estar unidos mediante enlaces azo (-N=N-) en asociacin con un ncleo aromtico o heterocclico. La mayora de los colorantes de tipo azo no poseen normalmente ningn efecto citotxico, mutagnico, o carcinognico; pero las aminas producidas por el rompimiento de enlace probablemente si produzcan estas afectaciones. Por lo cual es conveniente dar alternativas de solucin mediante diferentes tecnologas al problema de la descarga de efluentes con un alto grado de color y o toxicidad. La literatura reporta diferentes tecnologas para la remocin del color, entre los que se puede mencionar los mtodos qumicos, fsicos y los biolgicos, sin embargo estos ltimos no estn ampliamente estudiados. [1, 2, 3] El propsito de este trabajo fue desarrollar un procedimiento a nivel laboratorio para la degradacin del colorante azo, por medio de un proceso biolgico de tipo fngico.
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CT-BA-15 PROGRAMA AMBIENTAL PARA LA SUSTENTABILIDAD DE LA UNIVERSIDAD POLITCNICA DEL ESTADO DE MORELOS Dvila-Solano Valeria, Molina-Solano Lucila, Snchez-Garca Alma, Segura-Salazar Juan, BuitrnMorales Pablo Universidad Politcnica del Estado de Morelos. vdavila@upemor.edu.mx El aumento acelerado de la poblacin, las ciudades y el sector industrial, as como la necesidad de satisfacer la demanda de ms de 6600 millones de personas, han trado como consecuencia la contaminacin ambiental, el cambio climtico, el adelgazamiento de la capa de ozono, la deforestacin, la extincin de especies, etc. Esto hace necesario realizar acciones que contribuyan con soluciones y fomenten una cultura ambiental. En paralelo la Ley General del Equilibrio Ecolgico y Proteccin al Ambiente establece que las organizaciones tienen oportunidades para desarrollar procesos voluntarios de autorregulacin ambiental, mejorar su desempeo respetando la legislacin vigente y comprometerse a cumplir mayores niveles, metas o beneficios en materia de proteccin ambiental. Por tal motivo, la Universidad Politcnica del Estado de Morelos (UPEMOR) tiene como una de sus prioridades fomentar una cultura ambiental en la comunidad universitaria as como disear proyectos sustentables que tengan un impacto positivo en la poblacin en general; por lo que se implement en octubre del 2007 el PROGRAMA AMBIENTAL y que tiene como objetivo: El establecimiento de lineamientos en materia ambiental y la implementacin de acciones para mejorar el ambiente de acuerdo a la legislacin vigente con un impacto inmediato en la comunidad universitaria y en las instalaciones de la Universidad, as como un impacto a mediano plazo en la comunidad aledaa, el impulso para proyectos relacionados con el ambiente de los estudiantes y de las instituciones y organizaciones que lo soliciten.
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CT-BA-16 AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS DEGRADADORES DE HIDROCARBUROS AROMTICOS A PARTIR DE SUELO RIZOSFERICO CONTAMINADO CON PETROLEO Y ASOCIADO A Cyperus sp. Ortega-Gonzlez Diana-Katherine, Dondiego-Rodrguez Liliana, Reynoso-Cereceda Greta, Hernndez-Olicn Aura, Hernndez-Rodrguez Csar, Jan-Roblero Janet Laboratorio de Microbiologa General. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas (IPN). Prol. de Carpio y Plan de Ayala s/n. 11340. Mxico, D.F. Mxico. kathe08066@hotmail.com La contaminacin por hidrocarburos en suelos, como resultado de fugas o descargas accidentales de petrleo, conduce a daos a nivel del subsuelo y de los mantos freticos generando un fuerte problema ambiental debido a su toxicidad hacia la vida terrestre. En la mayora de los casos, el saneamiento de los suelos es complejo debido a que los contaminantes se presentan en forma de mezclas. La fitorremediacin es una alternativa para disminuir la toxicidad de los contaminantes de los suelos, que utiliza plantas pioneras o introducidas y los microorganismos asociados con sus races. En este proceso, el rea de influencia de la raz o rizosfera tiene un efecto significativo en los procesos de fitorremediacin, estimulando a las poblaciones microbianas asociadas a sus races. Mientras que, los microorganismos rizosfricos tienen un papel destacado en los procesos de fitorremediacin, ya que tienen la capacidad de modificar la biodisponibilidad de los hidrocarburos del petrleo y de participar de manera importante en la adaptacin de las plantas. En este trabajo, se aislaron bacterias que degradan hidrocarburos aromticos a travs de cultivos de enriquecimiento, de suelo rizosfrico asociado a Cyperus sp., una planta que completa su ciclo de vida y que crece en suelos contaminados en Poza Rica, Veracruz. Se realizaron transferencias sucesivas en medio mineral adicionado con petrleo refinado al 1% y se analiz la estabilidad de la comunidad bacteriana a lo largo de las transferencias mediante PCR-DGGE de la regin V6-V8 del gen 16S rRNA. A partir de la 4 transferencia se aislaron microorganismos degradadores de hidrocarburos que fueron identificados por la secuenciacin de sus genes 16S rRNA. Se obtuvieron 22 bacterias que se agruparon dentro de los gneros: Serratia sp., Ralstonia insidiosa, Caulobacter sp., Cellulomonas sp., Pseudomonas aeruginosa, Bulkholderia brasilensis, entre otras. Adems, se realizaron pruebas de crecimiento empleando benceno, tolueno y xileno, como nica fuente de carbono. As, la mayora de los microorganismos aislados crecieron en benceno y tolueno, y en menor proporcin en xileno. Tambin se disearon iniciadores especficos para amplificar la subunidad de enzimas tipo oxigenasas: benceno 1, 2 dioxigenasa, tolueno dioxigenasa, naftaleno monooxigenasa, xileno monooxigenasa y bifenil 2,3-dioxigenasa. Se detectaron genes relacionados con las enzimas benceno 1,2 dioxigensa, y bifenil 2,3 dioxigenasa pertenecientes a los gneros Ralstonia insidiosa y Burkholderia brasilensis, respectivamente. Este estudio demostr que existen bacterias cultivables asociadas a la rizosfera de Cyperus sp. que tienen capacidad para degradar hidrocarburos aromticos del petrleo.
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CT-BA-17 CONDICIONES DE PRODUCCIN Y ESTABILIDAD TRMICA DE CELULASAS OBTENIDAS A PARTIR DE Aspergillus fumigatus Y Trichoderma reesei Torres Velzquez Diana Sofa, Lpez Miranda Javier, Rutiaga Quiones Olga Miriam, Soto Cruz Nicols Oscar Departamento de Qumica y Bioqumica del Instituto Tecnolgico de Durango dsofiatorresv@hotmail.com Las celulasas hidrolizan celulosa, componente mayoritario de las paredes celulares vegetales, dando lugar a azcares que pueden ser aprovechados en la produccin de sustancias de inters, como el bioetanol. El incremento en su demanda y las limitaciones para su aprovechamiento a gran escala, traen consigo la necesidad de buscar microorganismos que produzcan mejores celulasas que los usados actualmente, dentro de los que Trichoderma reesei, es el principal. El inters por enzimas termoestables se fundamenta en que es posible su uso en mayor variedad de procesos durante ms tiempo, lo que disminuira los costos. stas son producidas por microorganismos termfilos como Aspergillus fumigatus, para el que existe la necesidad de determinar las condiciones ptimas de produccin de enzimas, y de determinar su potencial para sustituir a microorganismos mesfilos. El objetivo del estudio es evaluar la actividad enzimtica y estabilidad trmica de celulasas producidas sobre paja de frijol por dos cepas nativas del Estado de Durango: Aspergillus fumigatus y Trichoderma reesei. Para ello, se determinaron las mejores condiciones de produccin de cada microorganismo al cultivarlos a 3 temperaturas y 3 valores de pH por 9 das, mediante Fermentacin en Medio Slido. Tras determinar la actividad enzimtica de los extractos por la Tcnica de Papel Filtro, se obtuvieron los valores de 6.5 de pH, 30 y 3 das para A. fumigatus, y de 4.5 de pH, 40 y 6 das para T. C C reesei, los valores de actividad mxima fueron 0.33 y 0.25UPF/mL respectivamente. Los mejores extractos se analizaron con respecto a su termoestabilidad (a 30, 40, 50, 60 y 70 durante 5, 15, 30, C 60 y 120min), mostrndose mayor permanencia e incluso aumento de la actividad inicial durante los ensayos para A. fumigatus en comparacin con T. reesei cuya actividad disminuy rpidamente a 60 C. Se realiz adems una concentracin parcial mediante precipitacin con acetona y cuantificacin de protenas, observndose un aumento de hasta 124% en la actividad de los concentrados de T. reesei, y de 43% para A. fumigatus an cuando el contenido de protena fue superior en los extractos obtenidos con sta cepa. Se concluy que, la cepa evaluada de A. fumigatus posee un potencial importante para la produccin de enzimas termoestables, tiles sobre todo en procesos de hidrlisis llevados a cabo a altas temperaturas.
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CT-BA-18 COMPARACIN DEL EFECTO DE LA CONCENTRACIN DE UNA MEZCLA DE PAHs SOBRE LA MORFOLOGA Y EL CRECIMIENTO DE UNA CEPA DE Aspergillus niger MODIFICADA GENTICAMENTE Y SU CEPA PARENTAL Corts-Espinosa Diana V., Snchez No, Absaln ngel Centro de Investigacin de Biotecnologa Avanzada, Instituto Politcnico Nacional, Carretera Estatal Santa Ins tecuexcomac-tepetitla K.M. 1.5, Tepetitla, Tlaxcala. 90700. dcortes@ipn.mx Los hidrocarburos aromticos polinucleares (PAHs por sus siglas en ingles) son compuestos xenobiticos. El impacto ambiental de este tipo de compuestos, principalmente en suelos y sedimentos se debe a que son altamente recalcitrantes y han sido catalogados como carcinognicos y genotxicos. Los hongos de pudricin blanca tienen la capacidad de degradar PAHs. Phanerochaete chrysosporium ha sido ampliamente estudiado por contar con un eficiente sistema enzimtico producir peroxidasas (manganeso peroxidasa, MnP y lignina peroxidasa, LiP) que oxidan xenobiticos pero debido a que coloniza la madera en descomposicin y no el suelo es difcil su aplicacin en sistemas de biorremediacin. Los hongos no ligninolticos pueden degradar a travs de citocromo P-450 monooxigenasa, pero en las primeras etapas de oxidacin, se obtienen intermediarios como los dihidrodioles, los cuales son ms txicos que el compuesto original, ya que estos intermediarios se unen a molculas de ADN desencadenando cncer. Aspergillus niger es un hongos no ligninoltico del suelo y buen hospedero para la expresin heterloga de peroxidasas. En nuestro laboratorio se aisl un hongo que fue identificado A. niger SCB2. Esta cepa fue transformada para expresar heterlogamente un gen que codifica (mnp1) para la MnP de P. chrysosporium, la cual aument su eficiencia de degradacin de PAHs en comparacin con la cepa parental, la produccin de MnP por la cepa, le ha conferido caractersticas diferentes que la cepa parental ante la presencia de PAHs. Por lo que objetivo de este trabajo es comparar el efecto de las diferentes concentraciones de una mezcla de PAHs sobre la morfologa y crecimiento entre la cepa transformante y su cepa parental. Para ello se inocularon 5 l de una suspensin de esporas de 1x107 esp/mL en el centro de la placa con medio Cove ms agar noble, las cuales contena en la superficie diferentes concentraciones (200, 400, 600, 800 y 1000 ppm) de una mezcla de PAHs formada por Phe, pireno (Py) y Benzo(a)pireno (BaP). Se prepararon controles sin PAHs y cada ensayo se realizo por triplicado. Todas las placas se incubaron a 30C durante 8 das. Se realizaron las conservaciones microscpicas y se midi el crecimiento radial cada 24h para calcular la velocidad de crecimiento radial (VR). La VR para ambas cepas fue diferente en cada concentracin con respecto a su respectivo control, ya que conforme aument la concentracin hubo una disminucin del crecimiento radial. A partir de 600 ppm la cepa silvestre tiene un marcado efecto txico, ya que la VR es muy lenta y adems pierde totalmente la capacidad de esporulacin, quedando nicamente en forma de micelio muy algodonoso con pigmentacin amarilla. La cepa transformante presenta VR lenta pero es capaz de esporular hasta en 1000 ppm de PAHs. La expresin heterloga del gen mnp1 ha conferido mayor capacidad para tolerar altas concentraciones de PAHs porque la cepa produce extracelularmente a la MnP que est oxidando a los PAHs presentes en las placas
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CT-BA-19 BIOENSAYOS CON Eisenia foetida EN SUELO INTEMPERIZADO ALTAMENTE CONTAMINADO CON HIDROCARBUROS Hernndez-Hernndez Nelson, Escalante-Espinosa Erika Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas - Universidad Jurez Autnoma de Tabasco erika.escalante@dacbiol.ujat.mx Dentro de la valoracin de la contaminacin del suelo, el uso de lombrices de tierra, como indicadores biolgicos, se ha empleado como complemento de los anlisis qumicos. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la biodisponibilidad de los hidrocarburos (HTP) en suelo sobre la sobreviviencia y crecimiento de Eisenia foetida con la finalidad de sugerir puntos finales de remediacin basados tambin en pruebas de toxicidad aguda. El suelo fue recolectado de un sitio altamente contaminado, con una historia de contaminacin de ms de diez aos, en La Venta, Tabasco. Se realiz un bioensayo, durante 28 das, en el suelo intemperizado contaminado (0 a 17 500 mg de HTP kg -1 de suelo seco) y en el suelo recin contaminado (0 a 40 000 mg de HTP kg -1 de suelo seco) con los hidrocarburos previamente extrados mediante el equipo Soxhlet, siendo la misma composicin de los HTP. Adicionalmente, se realiz una prueba a 40 000 mg de HTP kg -1 de suelo intemperizado. Tambin se determin la conductividad elctrica (CE) de cada una de las concentraciones. Para el suelo intemperizado, en la prueba con 40 000 mg de HTP kg -1 se present mortalidad del 100%. En el bioensayo, la mortalidad fue slo del 12% en la mayor concentracin de HTP; en el caso del crecimiento de las lombrices (peso) se obtuvo una disminucin del 60% con respecto al suelo control. Para el suelo recin contaminado, la mortalidad fue del 8% en la concentracin de 40 000 mg de HTP kg -1 y la disminucin en peso del 50%, independientemente de la concentracin de HTP. Los valores de la CE oscilaron entre 7 y 12 para el suelo intemperizado. Considerando que el suelo intemperizado puede contener una alta concentracin de sales debido a tratamientos previos, posiblemente esta sea la causa de la disminucin en el crecimiento de las lombrices a una concentracin menor en el suelo intemperizado con respecto al suelo recin contaminado. Se concluye que, en este trabajo, la biodisponibilidad y concentracin de los hidrocarburos no fueron factores determinantes en la toxicidad hacia Eisenia foetida comparado con la presencia de una alta concentracin de sales; se considera importante el anlisis de otras caractersticas fisicoqumicas del suelo para establecer un protocolo que valore de manera global los suelos contaminados con hidrocarburos y de esta manera proponer puntos finales de remediacin basados tambin en pruebas ecotoxicolgicas.
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CT-BA-20 DECOLORACIN DE COLORANTES SINTTICOS POR UN HONGO BASIDIOMICETO SILVESTRE INMOVILIZADO EN PECTINA Fernando Hernndez-Tern, Indira Muoz Montelongo, Guadalupe Rojas-Verde, Ma. Magdalena Iracheta-Cardenas, Katiushka Arvalo Nio Instituto de Biotecnologa. Facultad de Ciencias Biolgicas, Universidad Autnoma de Nuevo Len. Av. Manuel L. Barragn y Pedro de Alba. San Nicols de los Garza, N. L. Fax. (81) 8376-2813. teranfernando@hotmail.com Introduccin. Los colorantes sintticos son importantes contaminantes qumicos de los efluentes de la industria textil, representando un problema para el medio ambiente. La naturaleza fsico-qumica de estos efluentes tiene un alto impacto en los ecosistemas acuticos causado por su turbidez, adems de la formacin de especies qumicas altamente txicas. Se han estudiado diversas especies de hongos basidiomicetos, de los gneros Trametes y Pleorotus principalmente, por su capacidad para biodegradar colorantes sintticos. El objetivo del presente trabajo fue estudiar la capacidad de decoloracin de un hongo basidiomiceto silvestre para biodegradar colorantes sintticos bajo condiciones de inmovilizacin en redes polimricas de pectina-quitosano. Metodologa. El hongo (M12), aislado de una localidad boscosa del Estado de Nuevo Len, fue seleccionado por sus caractersticas morfolgicas. La biomasa se obtuvo a partir de cultivo sumergido conteniendo glucosa, extracto de levadura y sales minerales. El micelio se cosech en la fase exponencial de crecimiento y se homogeneiz por licuefaccin. La inmovilizacin del micelio se realiz mediante gelificacin ionotrpica, del homogeneizado micelar, en una solucin de pectinato de sodio con una solucin y quitosano, despus de establecer las mejores condiciones de entrecruzante de CaCl2 inmovilizacin. El hongo inmovilizado se incub independientemente con los colorantes sintticos rojo de Ponceau, azul de metilo, ndigo carmn, anaranjado de metilo y azul brillante reactivo R (RBBR) a 200 ppm, en medio lquido, 37 y 150 rpm. Los niveles de decoloracin se determinaron por C espectrofotometra cada 24 horas. Se incluyeron como controles el hongo inmovilizado en alginato y el micelio libre. Resultados. El hongo inmovilizado en pectina present decoloracin efectiva sobre los cinco colorantes ensayados, alcanzando ndices de decoloracin para el rojo de Ponceau, azul de metilo, ndigo carmn, anaranjado de metilo y RBBR del 95.25%, 99.22%, 100%, 90.33% y 99.47%, respectivamente. Por otro lado, los ndices de decoloracin alcanzados por el hongo inmovilizado en alginato fueron de 88.80%, 94.35%, 68.48%, 76.99% y 96.88%. En la mayora de los casos la decoloracin se alcanz por arriba del 90% despus de 96 horas de incubacin. La decoloracin por el hongo libre, en todos los casos, fue muy similar a los niveles obtenidos por el hongo inmovilizado. Conclusiones. La inmovilizacin del hongo en pectina present mayores niveles de decoloracin que los observados con la inmovilizacin en alginato, soporte comnmente utilizado. La decoloracin de colorantes sintticos mediante el uso de hongos basidiomicetos inmovilizados en pectina-quitosano son una alternativa potencial para el tratamiento de efluentes de la industria textil.
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CT-BA-21 TRATAMIENTO BIOLGICO-ELECTROQUMICO DE EFLUENTES DE UNA INDUSTRIA CURTIDORA Pacheco-Gonzlez Daniel, Trejo-Vela No, Pineda Flores Gabriel, Monterrubio Badillo Ma. Del Carmen Centro Mexicano para la Produccin ms Limpia-IPN. gpineda@ipn.mx Las aguas residuales de la industria de la curtidura se caracterizan por presentar un potencial contaminante alto, debido a que contienen materia orgnica y metales pesados disueltos. Para lograr la remocin de estas sustancias, es necesario aplicar procesos de tratamiento especficos para los contaminantes presentes. El objetivo principal del trabajo est enfocado en aplicar un sistema de tratamiento biolgico-electroqumico a escala de laboratorio, a un efluente de una industria curtidora, para reducir la concentracin de materia orgnica y cromo hexavalente presentes. Se obtuvo una muestra de agua residual de una empresa curtidora, localizada en el estado de Guerrero Mxico, siguiendo mtodos normalizados. Para el tratamiento biolgico se utilizaron reactores de 1.5 litros, cada reactor contena 800 ml de la muestra de agua residual por tratar ms 200 ml de lodos activados como fuente de inculo. Se trabajo con un gasto volumtrico de aire de 1 L/min y a temperatura ambiente. Para evaluar la remocin del contenido de materia orgnica se determin la Demanda Qumica de Oxgeno (DQO) por el mtodo colorimtrico de reflujo cerrado, desde el tiempo inicial del funcionamiento de los reactores y cada tercer da, durante 12 das. El tratamiento electroqumico se aplic al efluente tratado biolgicamente, utilizando dos celdas, una vidrio pyrex de 78.5 ml con tapa desmontable, y una de tefln de 125 ml, ambas con orificios para la colocacin de tres electrodos (de trabajo, de referencia y contraelectrodo). Los depsitos electroqumicos de cromo se obtuvieron aplicando las tcnicas de voltametra cclica, voltametra lineal y crono-potenciometra. Se realiz la caracterizacin morfolgica y microestructural del cromo depositado por difraccin de rayos X y microcopia electrnica de barrido. Al aplicar el tratamiento biolgico se obtuvo una remocin de la materia orgnica del 94.15% y con el tratamiento electroqumico se logr la deposicin de cromo hexavalente sobre placas de acero inoxidable, el cual fue caracterizado por las tcnicas aplicadas.
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CT-BA-22 EVALUACIN DE LA BIOFILTRACIN COMO ALTERNATIVA PARA EL TRATAMIENTO DE LAS AGUAS RESIDUALES DE LOS RASTROS DEL SECTOR RURAL Cuevas Rodrguez Germn1, Gonzlez Miranda Ulises1, Garzn Zuiga Marco Antonio2
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Divisin de Ingenierias, Departmento de Ingenieria Civil, Universidad de Guanajuato , Av. Juarez No.77, Guanajuato, Gto., Mxico. Tel. +52(473)1020100 ext. 2292 2 Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua. Paseo Cuauhnahuac, 8532. Jiutepec, Mor., 65250, Mxico. Tel. 52 (777) 329 36 00 ext. 430 y 894. german28@quijote.ugto.mx
La biofiltracin es una tecnologa que se acopla muy bien para llevar a cabo tratamiento de aguas residuales municipales ya groindustriales generadas en comunidades rurales, debido a sus bajos costos de operacin y mantenimiento. Actualmente esta tecnologa se ha estado aplicando en Mxico para el tratamiento de aguas residuales domsticas y agroindustriales aplicando materiales orgnicos regionales, obteniendose buenos resultados. Por lo que se ha pensado que la aplicacin de esta biotecnologa para el tratamiento de las aguas residuales agroindustriales podra ser una solucin para la disminucin de los impactos ambientales generados por la descarga de este tipo de efluentes a los cuerpos de agua. El objetivo de esta investigacin fue evaluar el tratamiento de las aguas residuales en un sistema de biofiltros rellenos con materiales regionales. La investigacin se llev a cabo a nivel laboratorio en dos biofiltros (anaerobio/aerobio) con capacidad de 8 L cada uno. El efluente utilizado utilizado fue agua residual fresca pretratada generada en un matadero municipal del Estado de Guanajuato. El sistema se oper durante 146 das. Durante este tiempo se evaluaron los parmetros fisicoqumicos de DQO, SST, pH, conductividad, nitrogeno total, entre otros. Los resultados obtenidos hasta la fecha muestran porcentaje de remocin de la DQO, total y soluble, por encima del 70% y 60% del total de slidos en suspensin. Lo cual da una idea del potencial de aplicacin de esta tecnologa de bajo costo para la solucin de esta problemtica ambiental.
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CT-BA-23 EVALUACIN DEL IMPACTO DE BIOPELCULAS EN LA ESTABILIDAD DE LOS CIDOS HALOACTICOS EN SISTEMAS DE DISTRIBUCIN DE AGUA POTABLE: ESTUDIO DE CINTICA DE BIODEGRADACIN AEROBIA Y DE DIVERSIDAD DE BACTERIAS Y GENES INVOLUCRADOS. PROPUESTA METODOLGICA 1 1 1 1 Prez Hoyos Alma , Viancha Linares Valerie , Lemus Prez Mildred , Martnez Leon Juliana , 2 1 Restrepo Silvia , Rodrguez Susa Manuel
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Centro de Investigaciones en Ingeniera Ambiental, departamento de Ingeniera Civil y Ambiental. Universidad de los Andes. Bogot, Colombia. 2 Laboratorio de Micologa y Fitopatologa (LAMFU).Universidad de los Andes. Bogot, Colombia. alm-pere@uniandes.edu.co
Los cidos Haloacticos [AHA] son subproductos de la desinfeccin [SPD] del agua, detectados en redes de distribucin de agua potable. Su gran inters se debe al potencial riesgo en salud pblica, por su posible asociacin con el cncer y problemas reproductivos. Investigaciones que se han enfocado en la evaluacin de la estabilidad de los SPD en sistemas de distribucin de agua potable, evidencian que las concentraciones de AHA son menores en las extremidades de la red, donde los niveles de cloro residual disminuyen y la presencia de microorganismos es mayor. Estas condiciones generaron la hiptesis sobre la posible biodegradacin aerobia o anaerobia de los AHA en sistemas de distribucin de agua potable. La mayora de los microorganismos aerobios degradadores, han sido aislados principalmente en cultivos dependientes. A partir de stos, se han encontrado bacterias que utilizan ciertos AHA y que involucran genes codificadores de enzimas dehalogenasas halocidas, que catalizan diferentes reacciones hidrolticas con estereoespecificidad sobre los cidos halocarboxlicos. El posible impacto de los microorganismos aerobios presentes en biopelculas, en la estabilidad de los AHA presentes en sistemas de distribucin de agua potable, se estudiar con muestras de biopelcula de tubera, que se enriquecern con cido monocloroactico [MCAA], dicloroactico [DCAA] y tricloroactico [TCAA] como nica fuente de carbono y energa. Los beakers se incubarn en un shaker a 20 por 20 das, y se monitorear la concentracin de AHA [cromatografa de gases], pH, C iones cloruro [cromatografa inica] y oxgeno disuelto. Se evaluar la cintica de biodegradacin aerobia a diferentes tiempos de incubacin y concentraciones de AHA. Se espera confirmar y determinar tasas de consumo, donde el MCAA y el DCAA sean los compuestos ms susceptibles a la degradacin por microorganismos aerobios. Paralelamente, se establecer una coleccin de cepas degradadoras, caracterizadas por amplificacin y secuenciacin del gen 16s rDNA y genes dehalogenasas (deh I, y dehII). A partir del DNA metagenmico extrado, de los cultivos de enriquecimiento, se caracterizar la diversidad microbiana degradadora por pirosecuenciacin de las regiones hipervariables V5 y V6 del gen 16s. Se estudiar la diversidad de genes dehI y dehI a partir de clonacin y secuenciacin de las dos familias de genes dehalogenasas, con el fin de determinar la diversidad de microorganismos y de genes deh, de la coleccin de cepas y del DNA metagenmico. Se espera establecer un impacto positivo de la biopelcula en sistemas de distribucin de agua potable por su papel biodegradativo de AHA.
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CT-BA-24 EVALUACIN DE LA BIOFILTRACIN SOBRE CAMA ORGNICA COMO ALTERNATIVA PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES MUNICIPALES EN COMUNIDADES RURALES Cuevas Rodrguez Germn1, Colmenero Romero Edna Berenice1, Garzn Zuiga Marco Antonio2, Bernal Martnez Arod1, Silva Muoz Sergio Antonio1
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Divisin de Ingenieras. Departamento de Ingenieria Civil y Ambiental; Universidad de Guanajuato. Av. Juarez No.77, Guanajuato, Gto., Mxico. Tel. +52(473)1020100 ext. 2292. 2 Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua. Paseo Cuauhnahuac, 8532. Jiutepec, Mor., 65250, Mxico. Tel. 52 (777) 329 36 00 ext. 430 y 894. german28@quijote.ugto.mx
El estado de Guanajuato presenta actualmente graves problemas en sus cuerpos de agua superficiales debido a la gran cantidad de efluentes de aguas residuales que se descargas sin tratamiento. Siendo el sector rural uno de los principales aportadores, debido a que no se tiene recursos econmicos para llevara a cabo su tratamiento. Por lo que es necesario el desarrollo de tecnologa de bajo costo. Entre estas se encuentra la biofiltracin sobre carga orgnica, la cual tiene como lmitante de operacin la carga orgnica aplicada. Es por esta razn que el objetivo de este trabajo fue evaluar el funcionamiento de un biofiltro relleno con material orgnico regional y alimentado con agua residual municipal. La evaluacin se llev a nivel laboratorio en un biofiltro relleno con un material orgnico de la regin de Guanajuato. Los resultados obtenidos durante 210 das de operacin muestr altas remociones de DQO, DBO y SST, as como una mnimo desgaste del medio de soporte. Se pudo concluir que el biofiltracin es una alternativa econmica y tecnicamente viable para la depuracin de aguas residuales domsticas generadas en pequeas comunidades.
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CT-BA-25 CONCENTRACIONES DE ELEMENTOS DE LANTANIDOS EN ESPECIES DE ALGAS DE LA BAHA DE LA PAZ, EN BAJA CALIFORNIA SUR., MXICO Snchez-Rodrguez I., Shumilin E., Sapozhnikov D., Rodrguez C. A.P. Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas (CICIMAR-IPN), Av.. IPN s / n Col. Playa Palo de Santa Rita, Baja California Sur, Mxico. V.I. Vernasdki Instituto de Geoqumica y Qumica Analtica de la Academia de Ciencias de Rusia, Mosc, Rusia. isrnacho@hotmail.com Las concentraciones de elementos de lantanidos tierras raras (REE) se determinaron en 12 especies de algas marinas que fueron recolectados en localidades de la baha y la laguna de La Paz. Las macroalgas, una vez completamente seca, fue molida, tamizada y se analizaron mediante el mtodo de activacin neutrnica instrumental (INAA). Los datos muestran la variacin en la concentracin de la REE en funcin de especie de algas y la ubicacin de muestreo. La mayor concentracin de la (30 mg g-1), Ce (57 mg g-1), Pr (6 mg g-1), Nd (22 mg g-1), Sm (5 mg g-1), Eu (0,9 mg g-1), Di-s (6 mg g-1), Tb (0,9 mg g-1), Dy (5 mg g-1), Ho (1 mg g-1), Er (3 mg g- 1), Tm (0,5 mg g-1), Yb (2,6 mg g-1) y Lu (0,5 mg g-1) fue encontrado en la especie Ulva intestinalis que se hayan cobrado en la parte oeste de la baha. Esto probablemente puede atribuirse a una mayor disponibilidad de estos elementos en las aguas de la zona, como resultado de las actividades locales de fsforo de la extraccin. Las variaciones en las concentraciones de estos elementos en las algas pueden estar relacionadas con la influencia de factores locales, como ocurren naturalmente mayores cantidades de algunos elementos en los sedimentos de ciertas partes de la baha.
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CT-BA-26 BIOELIMINACIN DE ATRAZINA EN SUELO ARENOSO Y SENSIBILIDAD DE Mentha piperita Gutirrez Castillo Mara Eugenia1, Gmez Gmez Yolanda2, Franco Hernndez Marina Olivia2
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Centro de Investigacin en Medio Ambiente y Desarrollo IPN Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa. Av. Acueducto S/N Col. La Laguna Ticomn, Mx. DF CP 07340. Tel 57296000 Ext. 56325 mofrancoh@hotmail.com
El objetivo del trabajo fue mejorar la remocin de atrazina en suelos agrcolas, mediante la adicin de vermicomposta de desechos orgnicos y lombrices en dos etapas y analizar el efecto en plantas de M. piperita.Se utiliz un suelo de cultivo de granos bsicos de Jilotepec, Edo. de Mxico, caracterizndose fisicoqumicamente (NOM 021). La vermicomposta se realiz con residuos de verdura, estircol y paja en proporcin 3.5:1:0.1 y 20 % en peso de lombrices. El suelo se contamin con 65 mg atrazina por cada 100 g, formando pilas de suelo con vermicomposta e incubacin por 28 das. Se hizo una segunda adicin de vermicomposta incubando 28 das ms. Los tratamientos fueron suelo control (S), suelo con vermicomposta (SV) 50-50 y suelo con vermicomposta 50:50 y 10% de lombrices (SLV). Los tratamientos se mantuvieron aereados, con 80% de humedad y temperatura ambiente. Se tomaron muestras a los 0, 28 y 56 das, analizando carbono orgnico (C), nitratos (NO31 ), amonio (NH4+) y atrazina. 270 plantas de menta fueron crecidas en suelo con bioslido y con composta con adicin de atrazina, se evalu crecimiento, y clorofila comparando con los controles. El suelo present un pH cido (4.5) y una textura franco arcillo arenosa con 68% arena, 29% arcilla y 10% limo, capacidad de retencin de agua 110% y conductividad de 6.5 dScm-1. La concentracin de nitrgeno amoniacal fue 27 mg N-NH4+/Kg; para nitratos de 25 mgN-NO3-1/Kg. En la vermicomposta fueron 15 mg N-NH4+/Kg y 450 mgN-NO3-1/Kg. El suelo present 3x106 unidades formadoras de colonia de hongos (UFC)/g, 100 veces ms que la vermicomposta. La concentracin bacteriana fue 10000 veces mayor con 34 x 108 (UFC)/g. En la vermicomposta de bioslidos con residuos de frutas, la concentracin de nutrientes fue 606 mg N-NH4+/Kg, 162.68 mg/Kg de fsforo soluble, de nitratos 7 mgN-NO3-1/Kg. Con la adicin de vermicomposta el pH del suelo se increment a 9 y despus de 46 das permaneci en 8. La atrazina no inhibe la nitrificacin en suelo, ni la actividad microbiana. La mayor degradacin de atrazina se obtuvo en los primeros 28 das de tratamiento con un 30% de transformacin en SLV con 1.38 ug atrazina/da. Con la segunda adicin de vermicomposta la transformacin de atrazina alcanz un 70%. El crecimiento de plantas de menta contaminadas y sin contaminar fue de 45 cm y 75 cm, y el nmero de ramas fue 10 y 22 en suelo con bioslido.
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CT-BA-27 EVALUACIN DE LA REMOCIN DE ZINC EN BARRERAS PERMEABLES REACTIVAS CON BACTERIAS REDUCTORAS DE SULFATO Diaz I.1,3, Urrutia H.1, Schwarz A.2 Laboratorio de Biopelculas y Microbiologa Ambiental. Centro de Biotecnologa. Universidad de Concepcin. 2 Laboratorio de Ingeniera Hidrulica y Ambiental. Facultad de Ingeniera. Universidad de Concepcin. 3 Escuela de Ingeniera Civil en Biotecnologa. Facultada de Ingeniera y Tecnologa. Universidad San Sebastin. isabel.diaz.b@gmail.com En las dos ltimas dcadas ha habido una conciencia pblica creciente del peligro potencial para el medio ambiente por parte de las actividades mineras, en particular las aguas cidas de mina, generadas en las etapas de procesamiento. Estas aguas presentan una composicin con cantidades variables de iones metlicos (Fe, Zn, Al, Cd, Cu, Pb), una elevada acidez y un contenido alto en sulfatos .El remedio y prevencin de estas aguas acidas se puede llevar a cabo mediante las barreras permeables reactivas (BPR) las que en comparacin a los mtodos tradicionales suelen ser baratas y es una alternativa efectiva. El uso de sistemas tratamiento que involucren la actividad de microorganismos reductores de sulfato es una buena alternativa de trabajo. Estos organismos bajo condiciones anaerobias reducen sulfato y usan compuestos orgnicos como fuente de carbono, generando sulfuros (H2S) y iones bicarbonato (HCO3-). El H2S generado reacciona con muchos metales para eliminarlos de la disolucin como sulfuros metlicos, que son altamente insolubles. Esta secuencia de reacciones da como resultado una disminucin de las concentraciones de metales y de sulfatos, as como un incremento de la alcalinidad y del pH. En esta investigacin, utilizando un reactor con rellenos compost y lodo, los cuales fueron alimentado con agua de vertiente modificada con zinc (mgr/l) . Al tratamiento del afluente se realizo el seguimiento de las concentraciones de 5000mgr/l de Sulfato y 135mgr/l de zinc del afluente. Los resultados qumicos indicaron que los reactores en presencia de los distintas mezclas hubo remocin del metal pesado en el efluente, disminuciones de de sulfatos y un incremento del pH. Este trabajo se realiz con recursos del proyecto FONDECYT 11070112.
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CT-BA-28 EFECTO DEL 2-CLOROFENOL SOBRE LA NITRITO OXIDACIN Prez J.E.1, Texier A.C.1, Buitrn G.2, Gmez J.1, Cuervo-Lpez F.M.1 Departamento de Biotecnologa, Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa. CP 09340 Iztapalapa D.F, Mxico. Fax- (52)558046407. 2 Laboratorio de bioprocesos avanzados de tratamiento de aguas Instituto de Ingeniera, Unidad Acadmica Juriquilla, Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Blvd. Juriquilla 3001, Quertaro 76230, Mxico jemalfaro@gmail.com Se evalu en cultivos en lote, el efecto de diferentes concentraciones iniciales de 2-clorofenol (1-5 mg C-2CP/l) sobre la nitrificacin, especficamente sobre la nitrito oxidacin, en comparacin con un control sin presencia de 2-CP. Se observ que cuando el consorcio nitrificante estuvo en contacto con 5 mg C-2CP, la eficiencia de consumo de nitrito disminuy significativamente en comparacin con el control utilizado. Asimismo, la velocidad de consumo de nitrito se vio disminuida, por lo que el 2-CP tuvo un efecto inhibitorio sobre el proceso nitrito oxidante. El consumo de C-2CP fue de 100%, independientemente de la concentracin, requirindose de una fase de retardo para su consumo. Se detect adems la formacin de un intermediario que an no se ha identificado. Palabras clave: Nitrito oxidacin; 2-clorofenol; nitrificacin; inhibicin.
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CT-BA-29 ELIMINACIN DE METALES, NITRATOS Y FOSFATOS DE AGUAS RESIDUALES CON M. piperita Y H. annuus Y EL EFECTO DE TRES SOPORTES Angulo Riba Alan de Jess1, Altamirano Segovia Norma Eleana1, Torres Caldern Jess2, Franco Hernndez Marina Olivia1
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Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa, Instituto Politcnico Nacional (UPIBI-IPN). Av. Acueducto S/N Col. La Laguna Ticomn, Mx. DF CP 07340. Tel 57296000 Ext. 56325 2 Escuela Sup. de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas, Instituto Politcnico Nacional (ESIQIE). mfrancoh@ipn.mx
Existen pocos procesos que usen especies vegetales para tratar aguas residuales. En este proyecto se plantea la fitoremediacin con Mentha piperita y Helianthus annuus, para eliminar compuestos inorgnicos de aguas residuales. Se utiliz agua potable como control y agua residual industrial de la planta de tratamiento AISJISU. Se realiz la caracterizacin fisicoqumica, y microbiolgica del agua residual, metales como cobre (Cu), fierro (Fe) y potasio (K) se determinaron por absorcin atmica. La especie vegetal utilizada fue Mentha piperita y Helianthus annus, y tres soportes (tezontle negro, TZN; tezontle rojo, TZR y arcilla, AR). Se hicieron 30 repeticiones por cada planta y por soporte. Se recircul agua potable, y en otro lote se us agua residual. Se desarroll un sistema de recirculacin y aireacin semi continua de agua potable (AP) y agua residual (AR), con intervalos de 24 h y 11 L/min. Al inicio y final del experimento se tomaron muestras de agua, evaluando metales, DBO, DQO, Salmonella, nitratos y fosfatos. En plantas se evalu altura, humedad y nmero de hojas. Las muestras se secaron y se molieron y se realizaron digestiones cidas con HNO3, H2SO4 y H2O2 en proporcin 2:3:1, se determinaron metales por absorcin atmica, nitrgeno total y fsforo soluble. En el agua residual se encontr mas de 1000 UFC Salmonella sp/mL y 1010 UFC Coliformes totales /mL; 88.3mg DBO/L y 800 mg DQO/L, obteniendo una remocin de 40%. No se detect Cu, pero K en AR fue de 5.58 ppm y en AP de 3.22 ppm. La concentracin de Fe en AR encontrada fue 0.15 ppm, disminuyendo a 0.1 ppm al final del tratamiento. A pesar de las altas concentraciones de Fe en los soportes Ar, TZN, TZR, (866 ppm, 192 ppm y 150 ppm) no se solubiliz en el agua. La concentracin de Cu en los soportes fue de 3.7 ppm en promedio y K no fue detectado. En general la remocin de compuestos en funcin de DQO, alcanz un 50% del valor usual. La remocin de potasio fue 45% y en fierro fue 10%. El crecimiento de M. piperita fue 12.76 cm en TZR y AR, con respecto a los otros soportes (9 -10 cm). Para H. annuus con AR el crecimiento fue 45 cm y en AP de 35 cm en promedio. La absorcin de nitrgeno fue mayor en H. annuus con 850 mgN/Kg en flor, y 80 mg N/kg para tallos de menta.
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CT-BA-30 UTILIZACION DE LODOS ANAEROBIOS PARA LA PRODUCCIN DE BIOGAS A PARTIR DE LIXIVIADOS DE DESECHOS MUNICIPALES EN HIDALGO Medina Moreno S.A.1, Cruz Lopez I.S.2, Meraz Rodriguez M.A.3, Monroy O.3, Jimenez Gonzalez A.2 UPP UPFIM UAM-I ajimenez@upfim.edu.mx En el presente trabajo se evalu el uso de lodos anaerobios, para la produccin de biogs a partir de lixiviados provenientes de desechos orgnicos generados en el mercado Municipal de Tepatepec, Hidalgo. Como una primera etapa, los lixiviados fueron generados a partir desechos orgnicos. Para este propsito, se instalo un depsito de desechos orgnicos de 200 L, el cual fue operado por lote alimentado en periodos de 5 das con cargas de 60 kg. La produccin diaria de lixiviados fue cuantificada. Adems, los lixiviados fueron caracterizados en los siguientes parmetros: demanda qumica de oxgeno (DQO), pH, conductividad elctrica, slidos sedimentables (SSd) y slidos suspendidos totales (SST). La productividad de lixiviados fue de 8.86 mL/kg da. Los resultados en la caracterizacin fsicoqumica fueron: materia orgnica (DQO) 35.8 15.1 g/L, pH de 3.92 0.4, SSd de 0.66 mL/L y SST de 30.7 4.8 g/L. En la segunda etapa, se llevaron a cabo ensayos por lote, para determinar la capacidad de biodegradabilidad y la produccin de biogs de los lodos anaerobios, en base a la carga de materia orgnica oxidable (DQO). Las unidades experimentales, fueron botellas serolgicas de 60 mL, con un volumen de trabajo de 40 mL y una concentracin de lodos anaerobios de 25 g/L de SSV. Los lodos provinieron de la planta de tratamientos de aguas residuales de la UAM-Iztapalapa. Las pruebas se realizaron por duplicado a diferentes cargas de los lixiviados (35, 17.5, 11.5, 8.5 y 0 gDQO/L), empleando como testigo la dextrosa (1.5 g/L). En la Tabla 1, se presentan la eficiencia de eliminacin de materia orgnica, se observa que el valor ms alto fue para la concentracin ms baja ensayada (8.5 gDQO/L). Ensayos Eficiencia eliminacin (gDQO/L) DQO (%) 8.5 75 11.5 60 17.5 48 35 49 Posteriormente la eficiencia fue de 60, 48 y 49 % para las concentraciones mayores (ver Tabla 1). Existe una correlacin directamente proporcional de la concentracin de materia orgnica con la produccin volumtrica de biogs, valores altos de este parmetro es un factor inicial de viabilidad para emplearlos en la produccin de biogs. Palabras clave: Digestin anaerobia, lixiviados, biogs, desechos orgnicos
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CT-BA-31 LA REHABILITACIN AMBIENTAL DE UN REA COSTERA PETROLIZADA DESDE LA PERSPECTIVA DEL MANEJO INTEGRADO DE CUENCAS Y REAS COSTERAS EN CIENFUEGOS, CUBA Poma Rodrguez Jos Reinol, Castellanos Gonzlez Mara Elena, Len Prez ngel Ral, Daz Aguilar Dora Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos. Calle 17 S/N, esquina 46, Reina, Cienfuegos, Cuba. reinol@gestion.ceac.cu La necesidad de mitigar los impactos generados por la contaminacin ambiental en ecosistemas terrestres y marinos por residuales petrolizados, se constituy en la fundamentacin principal para la ejecucin del Proyecto de Rehabilitacin Ambiental Integral en Punta Majagua en Reina, rea costera del territorio de Cienfuegos, Cuba, identificada con esta problemtica. El objetivo del presente trabajo es valorar las contribuciones del enfoque de Manejo Integrado de Cuencas y reas Costeras (MICAC) en el xito del proceso de rehabilitacin ambiental de esta rea. Para lograr eliminar 479 m3 del contaminante en tierra, se aplicaron tcnicas de biorremediacin al suelo contaminado, se eliminaron 600 m3 de residuos slidos y posteriormente se procedi a una reforestacin del rea, todo lo cual fue posible por la integracin desde el inicio del proyecto de los actores sociales claves, entre ellos la comunidad, como expresin de la dimensin participativa que caracteriza a este enfoque. Se realiz un proceso educativo ambiental no formal en la prctica para involucrar conscientemente durante todo el proyecto a los miembros de la comunidad, lo cual gener una metodologa de participacin y lecciones aprendidas. Es de destacar que la perspectiva integral de este enfoque de MICAC garantiza las bases y gua los procesos de cambios sostenibles, por lo que esta experiencia puede ser extendida a otras reas con similar situacin por su carcter adaptativo al contexto de aplicacin.
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CT-BA-32 CINTICA DE REMOCIN BIOLGICA DE NITRATOS EN REACTORES BATCH SECUENCIADOS MANEJANDO DILUCIN DE CONTAMINANTES Luvano Martnez Jos Salvador, Burgos Crdova David Aarn Escuela de Ciencias Biolgicas de la Universidad Autnoma de Coahuila. Carretera Torren-Matamoros Km 7.5 Ciudad Universitaria. Torren, Coahuila Mxico salvadorluevanomtz_1@yahoo.com El desarrollo de bio-procesos para la remocin de compuestos nitrogenados desde aguas residuales y recuperacin de metales es de suma importancia en la competitiva industria de refinacin de metales, en trminos de procesos y factores econmicos tales como el uso eficiente de los recursos naturales, baja energa en procesos intensivos y un mnimo de descarga de agua contaminada de los procesos al medio ambiente. Fue estudiada la remocin biolgica de nitrgeno a partir de la recuperacin de metales pesados desde aguas residuales que contienen altas concentraciones de sales inorgnicas tales como nitratos. En este trabajo la concentracin del influente fue de 5,500 mg/L y la concentracin del efluente de 320 mg/L de nitrato de sodio, la degradacin es de 94.1818% en un reactor secuencial batch con un tiempo de residencia de 5 das. El comportamiento cintico es similar al consumo de BOD.
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CT-BA-33 TECNOLOGA DE BIOFILTRACIN PARA EL TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES USANDO RESIDUOS FORESTALES DE PINO COMO BIOMASA Rodrguez R. J.1, Valdez Z. D. S.1, Lucho C. R.1, Garzn Z. M. A.2, Escalante E. V.2, Valle C. S.1, De la Pea A. L. A.1
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Departamento de Ingeniera de Ingeniera Qumica y Bioqumica, Instituto Tecnolgico de Durango, Mxico. 2 Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua, Paseo Cuahunahuac 8532, Col. Progreso C.P.62500, Jiutepec, Morelos. mdjrr1958@gmail.com
La biofiltracin sobre materiales orgnicos como el pasto, paja, madera y turba, es una tecnologa usada para el tratamiento de aguas residuales y ha sido aplicada con xito en algunos pases. sta se ha aplicado en Mxico por el Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua (IMTA) en conjunto con el Centro de Investigaciones Industriales de Quebec (CRIQ). Durango, ocupa el primer lugar en existencias maderables en Mxico y su produccin se basa en la explotacin del genero Pinus [3]. Esta investigacin tiene como objetivo emplear los residuos de la industria forestal como material empaque en biofiltros y evaluar su eficiencia en el tratamiento del agua residual procedente de las descargas de la cafetera del Instituto Tecnolgico de Durango. El sistema experimental est compuesto de una fosa sptica (pretratamiento) de 6L, para remover slidos sedimentables y grasas y aceites, un tratamiento biolgico, compuesto de una columna de acrlico de 9.5 cm. de dimetro interno y 60 cm. de altura con un volumen de 4 L, la cual fue empacada con astilla de madera de pino de tamao 1/2" y 3/4". Se analizaron las caractersticas de la biomasa, dando como resultados, 9.88% de ceniza, 9.80% de humedad, 89.99% de materia seca, 36.39% de lignina, 89.99 de celulosa, 1.29 de celulosa y 9.14 de celulosa. En el arranque de la operacin del biofiltro, se determinaron la porosidad, la humedad del material filtrante y el tiempo de retencin hidrulico [1]. Los resultados obtenidos fueron: 90.46 % de humedad, 72.76 % de porosidad y un volumen de espacios huecos de 2.91 L. El biofiltro opera a una carga orgnica de 0.08 kg DQO/m2d, y a un caudal de 1.5 L/d. El biofiltro ha estado operando por aproximadamente 180 das, y en base a los resultados, al tiempo de 60 das, se observ una reduccin en los slidos, indicando una estabilizacin del proceso. El proceso se oper a temperaturas ambientales, y el pH se mantuvo en un rango de 6 a 8. Se han obtenido remociones de grasas, DBO y DQO de un 31%, 25%, y un 11%, respectivamente. Se presentaron cambios en la biomasa por el crecimiento microbiano y la variacin de los slidos en el efluente es debido a la lixiviacin de la biomasa.
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CT-BA-34 EFECTO DE DMP Y pH SOBRE LA ACTIVIDAD DE LACASA DE Pleurotus ostreatus EN FERMENTACIN SUMERGIDA Grandes-Blanco Israel, Alarcn Len Jheni, Daz Godnez Rubn, Daz Godnez Gerardo, Ortiz Gutirrez Felipe, Castillo Hernndez Dalia, Bibbins Martnez Martha amado_isra@hotmail.com INTRODUCCIN. Trabajos anteriores indican que Pleurotus ostreatus produce diferentes isoformas de lacasas bajo diferentes condiciones de cultivo. En este trabajo se analiza la influencia del pH y el DMP (2,6-dimetoxifenol) en el medio de cultivo sobre la actividad de lacasas en fermentacin sumergida. MATERIALES Y MTODOS. Se realizaron tres fermentaciones sumergidas de P. ostreatus ATCC 32783, en 50 ml de medio de cultivo estndar a un pH inicial de 6.5 (sin DMP), 6.5 (con DMP) y 4.5 (sin DMP). Se mantuvieron en agitacin a 120 rpm a 25 22 dias. Las fermentaciones se C, muestrearon por triplicado cada 24 horas y se realizaron las determinaciones de Biomasa, azucares reductores, protena soluble, actividad enzimtica y zimografa. RESULTADOS. La velocidad de crecimiento especfica mxima fueron: =0.014 (pH 6.5 con DMP), =0.015 (pH 6.5 sin DMP) y =0.012 (pH 4.5 sin DMP). La Biomasa mxima en estas condiciones de crecimiento fueron: 7.9 g/l (pH6.5 con DMP), 6.6 g/l (pH 6.5 sin DMP) y 6.5 g/l (pH 4.5 sin DMP). Se observ una diferencia significativa en la actividad mxima de lacasas: 13.23 U/l (pH 6.5 con DMP), 36.4 U/l (pH 6.5 sin DMP) y 15.9 U/l (pH 4.5 sin DMP). La actividad mxima de lacasas en los tres casos se observ en la fase estacionaria. CONCLUSIN. La disminucin del pH y el DMP en el medio de cultivo influyen negativamente en los parmetros cinticos de las fermentaciones
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CT-BA-35 REMOCIN DE CROMO (VI) EN SOLUCIN ACUOSA POR LA BIOMASA DE CSCARA DE CAMARN Crdenas Juan F.1, Hernndez Arvizu Nathalie1, Martnez prez Rigoberto1, Martnez Jurwez Victor Manuel2, Acosta Rodrguez Ismael1
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Lab. Micologa Experimental. CIEP. Facultad de Ciencias Qumicas. UASLP. Av. Dr. Manuel Nava No. 6. Zona Universitaria. C.P. 78320. San Luis Potos, S.L.P. iacosta@uaslp.mx 2 rea Acadmica de medicina Veterinaria y Zootecnia. Instituto de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autonma del Estado de Hidalgo. iacosta@uaslp.mx
Estudiar la Bioadsorcin de Cromo (VI) por la biomasa de cscara de camarn, determinando la concentracin de Cr (VI) en solucin por el mtodo colorimtrico de la difenilcarbazida. Se encontr que la mayor bioadsorcin ocurre a las 24 horas, a un pH de 1, a 28 con una remocin total del C metal del 90%, con respecto a la temperatura, la ms alta remocin se observ a 60C, pues a las 4 horas se remueve el 100% de Cr (VI) en solucin. A bajas concentraciones del metal (50 y 100 mg/L), la biomasa estudiada, mostr las mejores respuestas de remocin, adsorbiendo el 100% a las 2 y 4 horas, respectivamente, mientras que a 500 mg/L del metal se remueve el 100% de Cr (VI) alas 10 horas. Tambin se observ que al aumentar la cantidad de biomasa, se incrementa la remocin de Cr (VI) en solucin, ya que 3 g de biomasa remueven 50 mg/l del metal a los 10 minutos de incubacin. Si se utilizan 5 y 10 g de biomasa, la cantidad de Cr (VI) removido aumenta considerablemente, pues a los 60 y 30 minutos se elimina 1 g/L del metal en solucin. La presencia de otros metales, no interfiere con la remocin de cromo VI en solucin. La biomasa analizada remueve eficientemente Cr (VI) en solucin, por lo que su aplicacin presenta un gran potencial para la purificacin de stas, puesto que la biomasa es natural, fcil de obtener en grandes cantidades, su manejo es sencillo, es econmica y se aprovecha material que se considera de desecho.
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CT-BA-36 REMOCIN DE CROMO VI EN SOLUCIN POR LA CSCARA DE LIMN (Citrus limonium) Bautista Mata Diana Carina1, Crdenas Gonzlez Juan F.1, Sandoval Ibarra Patricia1, Martnez Jurez Victor Manuel2, Acosta Rodrguez Ismael1
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Laboratorio de Micologia Experimental. CIEP. Facultad de Ciencias Qumicas. UASLP rea Acadmica de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Instituto de Cienicas Agropecuarias. Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo. iacosta@uaslp.mx
Estudiar la remocin de Cromo (VI) y su reduccin a Cromo (III) por la biomasa de la cscara de limn (Citrus limonium), determinando la concentracin del Cr (VI) en solucin, por el mtodo de la Difenilcarbazida,Cromo (III) por Cromazurol S y Cromo total por Espectrofotometra de Absorcin Atmica, Se encontr que la mayor bioadsorcin ocurre a los 100 minutos, a un pH de 1, a 28 con C una remocin total del metal (50 mg/L). La ms alta remocin se observ a 60C, pues a los 11 minutos, el metal (50 mg/L) se adsorbe completamente. A las concentraciones de Cr (VI) analizadas, la cscara de limn, mostr muy buenas respuestas de remocin, adsorbiendo totalmente 500 mg/L de Cr (VI) a los 30 minutos y 3.5 horas, a 60 y 28 respectivamente. Adems, la presencia de C C, otros metales en la solucin no interfiere con la remocin del Cr (VI), a mayor concentracin de biomasa, es mayor la remocin. Despus de 1h de incubacin, la biomasa estudiada reduce 1.0 g de Cr (VI) con la produccin simultnea de Cr (III), y remueve muy eficientemente 300 mg/g de tierra contaminada con el mismo metal, (92.65 % de remocin en 6 das con 5 g de biomasa). Finalmente, se puede desorber el metal con diferentes soluciones hasta en un 70%. En conclusin, la biomasa analizada remueve y reduce muy eficientemente el Cr (VI) en solucin por lo que puede utilizarse para eliminarlo de aguas residuales industriales. Adems, la biomasa utilizada es natural, fcil de obtener en grandes cantidades, su manejo es sencillo, es econmica y se aprovecha material que se considera de desecho.
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CT-BA-37 REMOVAL OF HEAVY METALS BY NATURAL POLYMERS: PECTIN Arvalo-Nio K., Salazar-Gonzlez H. I., Rojas-Verde G., Flores Gonzlez S., Sols-Rojas C. Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas. Pedro de Alba Esq. Manuel L. Barragn S/N. Cd. Universitaria. San Nicols de los Garza, N. L. C. P. 66451. karevalo01@hotmail.com The removal of toxic metals from industrial effluents, mainly those originating from the textile industry, is an important challenge for reducing one of the main causes of ground and water contamination. Several methods for the removal of these toxic agents exist, such as the use of metal-reducing microorganisms, synthetic polymers, and, in the last few years, the use of biopolymers. The purpose of 2+ 2+ 2+ the present study was to evaluate a natural polymer in the removal of heavy metals, Pb , Cd , Zn , by dissolution. The removal was evaluated through the use of pectin, a natural anionic polyelectrolyte, under different parameters: pH and reaction time, as well as the concentration. The determination of the metals was conducted by atomic absorption spectrophotometry. The obtained results indicated that pectin presented a greater ability for removal of lead and cadmium, both at pH 8. The conducted studies by Salazar, show that at alkaline pH values the metals in dissolution precipitate, similar to that found in the present study. It was determined that the best reaction time was at 15 min. since at 7.5 the removal was minimal, while at 30 and 60 min. no significant difference was presented with respect to 15 min. On the other hand, in the temperature parameter no difference on the removal of the different metals was observed. The concentration was another factor that did not affect the removal. A time of 15 min., at 35 C. was selected. The pectin exhibited an affinity for the different metals in the following order: Pb2+, Cd2+, Zn2+. It is concluded that the pH displays an important role for the removal of Pb2+, Cd2+, Zn2+. The pectin behaved better with all three metals at lower pH values. The reaction time of 15 min., between pectin and the metal, is sufficient for a good removal. Finally, the effect of the temperature and the concentration of the metal were not significant for the pectin removal capability.
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CT-BA-38 AUMENTO EN LA ACTIVIDAD DE LACASA MEDIANTE LA ADICIN DE DIVERSOS COMPUESTOS EN Trametes sp. RVAN12 Rojas Verde Guadalupe, Garza Garca Andrs Adrian, Sols Rojas Carlos, Flores Gonzlez Mara del Socorro, Arvalo Nio Katiushka Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL. Pedro de Alba S/N, Ciudad Universitaria C.P. 66451. San Nicols de los Garza, N. L. Tel.: 81-83294000 Ext. 7302. karevalo01@hotmail.com La produccin de lacasa por los hongos de pudricin blanca, es dependiente de las condiciones de cultivo. Este tipo de enzimas son capaces de decolorar efluentes textiles, eliminar otros compuestos txicos en dichos efluentes, adems de emplearse en el tratamiento de la pulpa de papel, entre otros. Buscar incrementar la actividad de esta enzima es motivo de diversas investigaciones. La produccin de la lacasa puede incrementarse mediante la adicin de diversos compuestos tales como cobre, alcohol veratrilo, 2,5-xilidina, etanol, etc. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del sulfato de cobre, alcohol veratrilo y 2,5-xilidina, cada uno de ellos a diferentes concentraciones, en la actividad enzimtica de lacasa en una cepa nativa de Trametes sp. La actividad se determin utilizando el cido 2,2azino-bis-(3-etilenbenztiazolin sulfnico) (ABTS) como substrato a 405 nm. Los resultados obtenidos mostraron que de las cuatro concentraciones empleadas de cobre (0.1, 0.25, 0.5 y 1 mM), la mejor fue a 1 mM con una actividad de 36,853 U/L (2.4 veces ms con respecto al control). Para el alcohol veratrilo, con concentraciones de 0.05, 1.0, 2.5 y 5.0 mM, nuevamente la mejor fue 1 mM, con 24,743 U/L (1.6 veces superior al control). En cuanto a la 2,5-xilidina (0.5, 1.0, 2.5 y 5.0 mM), la mayor actividad enzimtica fue de 24,473 U/L (1.6 veces ms que el control). El resto de los tratamientos fueron similares o incluso inferiores a los obtenidos en el control (15,549 U/L). En base a estos resultados, se escogi la concentracin que present mayor actividad enzimtica (1mM), para los tres inductores y se estudio el efecto de la mezcla de estos compuestos en la actividad de lacasa. El cobre-alcohol veratrilo, as como 2,5-xilidina-alcohol veratrilo, mostraron menor actividad enzimtica que la observada de forma independiente para cada uno de ellos. Sin embargo, la combinacin cobre2,5-xilidina se present un incremento de 3 veces la actividad de lacasa respecto al cobre y 3.2 veces respecto al control. Finalmente, la mejor combinacin fue cobre-alcohol veratrilo-2,5-xilidina con una actividad de 85,300 U/L (2.3 veces ms con respecto al medio con cobre y 5.5 con respecto al control). En conclusin, la cepa de Trametes sp. RVAN12, present un incremento de la actividad de lacasa en presencia de sulfato de cobre, alcohol veratrilo y 2,5-xilidina; sin embargo, este fue mayor cuando estos se encontraron en combinacin.
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CT-BA-39 MICROENSAYO PARA LA SELECCIN DE HONGOS PRODUCTORES DE ENZIMAS DEGRADADORAS DE COLORANTES Iracheta Crdenas Mara Magdalena, Rojas Verde Guadalupe, Arvalo Nio Katiushka Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL. Pedro de Alba Esq. Manuel L. Barragn S/N. Cd. Universitaria. Tel.: 81-83294000 Ext. 6440 karevalo01@hotmail.com La seleccin de cepas de hongos productores de enzimas de importancia industrial entre ellas las oxido-reductasas, cuales presentan potencial para degradar contaminantes ambientales como colorantes, ha sido motivo de diversos estudios. stos comnmente implican ensayos largos y volmenes de trabajo grandes, de tal forma que el anlisis de un gran nmero de cepas, bajo diferentes condiciones de cultivo, por su actividad oxidante, puede consumir largos perodos de tiempo. Existe inters para utilizar microensayos basados en placas de microtitulacin con el objetivo de facilitar la seleccin de hongos con actividad sobre diversos substratos solubles al registrar la densidad ptica a diversas longitudes de onda, as como la actividad de decoloracin sobre diversos colorantes. El objetivo del presente trabajo fue evaluar simultneamente diferentes condiciones como el pH, temperatura, concentracin y tipo de colorante as como tiempo de decoloracin al implementar un microensayo. En una placa de microtitulacin de 96 pozos de fondo plano, se depositaron 10 L de sobrenadante (SN) de 12 cepas, 190 L de una solucin de los siguientes colorantes: Azul Reactivo Brillante de Remazol (RBBR), ndigo Carmn (IC) y Azul de Bromofenol (BB), respectivamente. Se probaron 12 extractos de igual nmero de cepas, cuatro valores de pH (3, 5, 7 y 9), por triplicado. Se utiliz una placa para cada una de las siguientes temperaturas: 45, 55 y 65 Los resultados C. obtenidos indicaron que de las 12 cepas, cinco no mostraron actividad alguna en las diferentes condiciones evaluadas. Las 7 restantes mostraron valores de pH ptimos de 3 a 7 y temperaturas de 35 a 65 con una decoloracin del 20 al 100% en los cuatro colorantes evaluados. En base a estos C, resultados se determin que con el microensayo se puede evaluar de forma rpida y sencilla diversas condiciones de temperatura y pH, lo que repercute en ahorro de tiempo y consumibles.
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CT-BA-40 REDUCCIN DE LA TOXICIDAD DE EFLUENTES DE VERDE DE MALAQUITA MEDIANTE UN CULTIVO MIXTO DE Trametes versicolor Y Pleurotus ostreatus INMOVILIZADO EN AGAVE TEQUILANA WEBER VAR. AZUL. Castillo-Carvajal L.C.1, Pedroza-Rodrguez A.M.2, Hernndez -De Jess M.L.4, Cristiani-Urbina E.3, Barragn-Huerta B.E.1 Departamento de Ingeniera en Sistemas Ambientales. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas. Instituto Politcnico Nacional. Mxico DF, Mxico. 2 Grupo de Biotecnologa Ambiental e Industrial. Pontificia Universidad Javeriana. Bogot, Colombia. 3 Departamento de Ingeniera Bioqumica. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas. Instituto Politcnico Nacional. Mxico DF, Mxico. 4 Departamento de Fisiologa y Farmacia. Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas. Instituto Politcnico Nacional. Mxico DF. Mxico. gordiscas@yahoo.com Trametes versicolor y Pleurotus ostreatus inmovilizados en fibra de agave fueron utilizados para evaluar la eficiencia de degradacin del verde de malaquita. Se realizaron dos ensayos, uno inmovilizando sobre el soporte en medio lquido y el otro inmovilizando en medio slido, en este caso el soporte se encontraba previamente saturado con el colorante. Se utiliz una columna de burbujeo para evaluar la eficiencia del proceso de degradacin colocando el cultivo mixto inmovilizado en contacto con el colorante durante 3 ciclos de operacin, cada ciclo fue de 3 das, al final de cada ciclo se retiraba por completo el medio con el colorante y se adicionaba medio nuevo con la concentracin inicial de colorante, en el caso del soporte que fue inmovilizado en medio lquido la concentracin de colorante utilizada fue de 200 ppm en el ciclo 1 con el fin de saturar el soporte, en el ciclo 2 la concentracin se disminuy a 50 ppm; cuando la biomasa se inmoviliz en slido, el soporte se encontraba saturado por lo que desde el ciclo 1 la concentracin usada fue de 50 ppm. En todos los casos se evalu el porcentaje de decoloracin, la produccin de enzima lacasa y la toxicidad con Artemia salina para cada ciclo. Los mejores resultados obtenidos en cuanto a porcentaje de decoloracin y produccin de enzima lacasa se obtuvieron en el tratamiento en el que el soporte se encontraba previamente saturado, alcanzando un porcentaje de decoloracin superior al 90% y ms de 100 U/L de lacasa, ste tratamiento se seleccion para realizar las pruebas de toxicidad con Artemia salina. Se observ una disminucin de la toxicidad inicial del colorante en el ciclo 1 determinndose una CL50 de 1,70 x 1036 mg/L, comparada con una CL50 del colorante inicial de 3,39 mg/L. Las muestras obtenidas de este tratamiento se analizaron para determinar los posibles intermediarios de la degradacin fngica del verde de malaquita.
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CT-BA-41 EFECTO DE LA SOBREEXPRESIN DE UNA PROTENA TIPO EXPANSINA DE Bjerkandera adusta EN Trichoderma atroviride Y SU INTERACCIN CON JITOMATE Cuervo Soto Laura Ins, Folch Mallol Jorge Lus Facultad de Ciencias - Universidad Autnoma del estado de Morelos. Av. Universidad No. 1001 colonia chamilpa CP 62209 Cuernavaca Morelos Mxico. laurys65@gmail.com Las enfermedades en las plantas generan cuantiosas prdidas econmicas en la agricultura. stas son producidas por diferentes organismos entre los que se destacan hongos ascomicetos, deuteromicetos y basidiomicetos. El control de estas enfermedades se lleva a cabo desde hace dcadas con el uso de compuestos qumicos, pero el abuso de stos ha favorecido el desarrollo de patgenos resistentes a los fungicidas. En contraste, el uso de microorganismos que antagonizan los patgenos en plantas, pueden tener un efecto similar de supresin de la enfermedad. Los hongos del gnero Trichoderma son bien conocidos como agentes de biocontrol, debido principalmente a su actividad de micoparasitismo contra patgenos de plantas que se transmiten por el suelo. Adems del control directo sobre fitopatgenos, la interaccin de Trichoderma spp. con la planta induce la respuesta del sistema de defensa y promueve el mejoramiento en el desarrollo de la raz, lo cual est directamente relacionado con el incremento en la produccin y biomasa. Se ha visto que un grupo de protenas son importantes para el crecimiento de la clula vegetal y dentro de stas las expansinas inducen rpidamente la extensin de la pared celular. Estudios de la interaccin planta-hongo han demostrado que algunos hongos como T. asperellum expresan una protena tipo expansina denominada swollenina, la cual aumenta la habilidad de colonizacin de la raz y estimulan el sistema de defensa como se observ en plantas de pepino (Brotman et al, 2008). En el laboratorio de Biologa Molecular de Hongos (CEIB-UAEM), se realiz un anlisis de secuencias de una genoteca de cDNA del hongo Bjerkandera adusta crecido en presencia de petrleo crudo maya y se identific una secuencia codificante para una protena tipo expansina. La expresin de esta protena en levadura permiti evaluar su actividad y pudo observarse cambios locales en la estructura de fibras de algodn (celulosa cristalina),que se apreciaron como regiones relajadas o de hinchamiento. Hipteis: La cepa de Trichoderma atroviride que sobreexpresa la protena tipo expansina de Bjerkandera adusta ser ms eficiente en la colonizacin de plantas de jitomate que la cepa silvestre, promoviendo el crecimiento y disminuyendo el ndice de infeccin en esta planta por patgenos como Botrytis cinerea y Pseudomona syringae. Objetivo: Sobreexpresar el gen de la protena tipo expansina de B. adusta en Trichoderma atroviride y evaluar su efecto sobre la induccin de crecimiento, sistema de defensa y productividad en la interaccin con plantas de jitomate.
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CT-BA-42 PROGRAMA PILOTO DE BIORREMEDIACION DE SUELOS POR ESTABILIZACIN QUMICABIOLOGICA Montes Garcia Luis Alfonso, Romellon Cerino Mario Jose, Romellon Cerino Julio Cesar, Soto Sierra Juan, Ramn Garca Elizabeth Instituto Tecnologico De Villahermosa. Carretera Villahermosa_Frontera km 3.5 Cd. Industrial. Villahermosa, Tabasco C.P. 86010. mjrcerino@hotmail.com De las empresas autorizadas para remediar suelos en Mxico, ms de la mitad emplean mtodos biolgicos, siendo los ms utilizados el composteo y la biolabranza. Para la remediacin de los suelos en el Estado de Tabasco se est trabajando a travs de microorganismos como son las bacterias anti petrleo, las cuales su funcin primordial es la de degradar los hidrocarburos y convertirlos en cidos grasos para autoconsumo. Por lo anterior, para la realizacin de este proyecto se emplearon las excretas de ganado porcino, equino y vacuno seleccionado, porque son parte de la ganadera tradicional del Estado. Por lo cual se realizo un estudio comparativo de la estabilizacin qumica-biolgica para conocer el porcentaje de mitigacin en suelos contaminados con Hidrocarburos. Se limpio una extensin de terreno de 12.5 m2, y se construyeron 3 pilas de las siguientes medidas: 1.5 m de ancho y 3 m de largo, despus se recubrieron con una membrana de nylon de 14.5 m2 para cubrir cada una de las pilas y as evitar la lixiviacin. La muestra de suelo se obtuvo de un rea de almacenamiento de recortes de perforacin base aceite ubicado en la ranchera Oxiacaque del municipio de Cunduacan, Tabasco. Se procedi a colocar 60 kilogramos de suelo contaminado por hidrocarburos y 30 kilogramos de excretas (vacuno, equino y porcino) en cada una de las unidades experimentales. Despus se adiciono 15 kilogramos de cal hidratada a cada una de estas para estabilizar la concentracin de hidrocarburos; posteriormente se le adicion la tierra contaminada y las excretas, y se tuvo en constante movimiento para que el suelo, las excretas y la cal hidratada se volvieran una mezcla uniforme y finalmente las bacterias llevaran a cabo el proceso de degradacin. Los indicadores biolgicos utilizados fueron plantas de pltano y naranja en las 3 pilas, el crecimiento de las plantas en la pila con excreta de ganado vacuno fue de un 10% en el primer mes, el crecimiento de las plantas en la pila con excreta de ganado equino fue de un 0.5%, la planta de platano en la pila con excreta de ganado porcino se muri y la de naranja creci solo un 0.2%. Por lo cual se puede reaprovechar todos los residuos de las excretas de los animales locales para hacer este tipo de tratamiento de suelo y seria menos costosos que los importados del extranjero.
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CT-BA-43 ESTADO ACTUAL DE LA PRODUCCIN DE BIODIESEL POR TRANSESTERIFICACIN ENZIMTICA Toscano P. Lydia, Montero A. Gisela, Stoytcheva Margarita Instituto de Ingeniera. Universidad Autnoma de Baja California Mexicali, Mxico. lydiatos@gmail.com La produccin enzimtica del biodiesel se ha venido investigando intensivamente, pero su actual aplicacin a escala industrial es muy limitada si se compara con otros mtodos. La presente investigacin describe el estado del arte de las investigaciones en esta rea y hace un anlisis de los principales obstculos en la aplicacin del uso de enzimas en la produccin comercial del biodiesel. Se han mejorado los resultados con respecto al incremento de rendimiento, menores tiempos de reaccin y mejor estabilidad para la catlisis enzimtica, sin embargo los altos costos de las enzimas hacen que estas sean poco atractivas para su uso industrial en la produccin del biodiesel. Diferentes tcnicas enzimticas actuales son descritas, discutiendo los aspectos crticos tales como limitaciones en la transferencia de masa, uso de solventes y actividad del agua. Los resultados de estudios publicados acerca de la productividad enzimtica son presentados y comparados con el uso de catalizadores qumicos. Palabras Clave: biodiesel; enzima; lipasa; transesterificacin; productividad.
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CT-BA-44 DETERMINACION DE SUBPRODUCTOS DE LA BIOTRANSFORMACION DEL FENANTRENO POR Mucor rouxii IM80 Rodrguez Casasola Ma. Teresa, Ros Leal Elvira, Cruz Mondragn Carlos, Esparza Garca Fernando J. Departamento de Biotecnologa y Bioingeniera, CINVESTAV-IPN. Av. Instituto Politcnico Nacional # 2508, CP. 07600 Mxico D.F. Tel. 57473800 Ext. 4330. famagallon@yahoo.com.mx En la degradacin microbiana de hidrocarburos poliaromticos que es catalizada por oxigenasas, se incluyen adems cadenas de transferencia de electrones, eliminacin de hidrgenos e insercin de funciones oxigenadas (lo cual puede inducir a la apertura de los anillos aromticos). El objetivo del presente trabajo es demostrar la capacidad del hongo Mucor rouxii IM80 para biotransformar a la molcula del fenantreno. En matraces erlenmeyer con medio YPG se inocularon esporas de Mucor rouxii IM-80 incubndose por 24 h a 30 C y 150 RPM. Pasadas las 24 h de incubacin se adicion fenantreno disuelto en metanol HPLC a una concentracin 50 ppm, se incub 72 y 96 h. Al trmino de esta incubacin se separ el micelio por filtracin, se efectu la extraccin del hidrocarburo en el micelio y en el caldo de cultivo con 50 ml de cloroformo. Los extractos obtenidos del caldo de cultivo se concentraron a sequedad y se aforaron a 3 ml con metanol HPLC. El extracto se analiz por TLC en placa de gel de slice 60 F254 utilizando como fase mvil acetonitrilo y en HPLC con detector UVDAD a 254nm en una columna Hypersil Green PAH de 250x4.6mm fase mvil acetonitrilo-agua 60:40. Se separaron tres compuestos que fueron excretados al medio de cultivo durante la incubacin detectndose productos de la transformacin del fenantreno al hacer el anlisis cromatogrfico por TLC y HPLC, los espectros de los productos tanto en el UV como en las placas presentan diferencias con relacin al espectro del fenantreno comprobando que el hongo Mucor rouxii IM80 es capaz de biotransformar al fenantreno en las condiciones utilizadas.
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CT-BA-45 COMPARACION DEL CRECIMIENTO DE Salix babylonica EN SUELOS CONTAMINADOS CON DIFERENTES CONCENTRACIONES DE ACEITE AUTOMOTRIZ USADO Marin Ponce Ana Karen, Ramirez De La Cruz Ana Karina, Romellon Cerino Mario Jose, Martinez Nues Cinthia Lizeth, Solis Vazquez Gabriela, Peralta Ramon Maria De Jesus, Reyes Caceres Hiram Instituto Tecnologico De Villahermosa. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 anita1004_chapis@hotmail.com La contaminacin de los suelos por aceite automotriz es algo muy comn en las ciudades, sobre todo en las de provincia. El Salix Babylonica es un rbol muy comn en Tabasco al cual se le puede dar un uso mejor que solo como lea, pero tratamos de conocer cul es la concentracin de aceite automotriz que puede soportar. En cubetas de 19 litros de capacidad se preparo tierra negra con aceite automotriz usado a diferentes porcentajes, los cuales fueron 5, 10, 15 y 20 respectivamente. Este suelo contaminado se dejo reposar durante 24 horas y se les sembr un rbol de Salix babylonica a cada cubeta, el tamao de los rboles fueron los siguientes: 1.03 m, 0.79 m, 1.01 m, 1.34 m. Durante los primeros 7 das todos los arboles se empezaron a marchitar, cambio la coloracin del tallo y perdieron grosor. Pasado los primeros 15 das las arboles de Salix Babylonica empezaron a recuperarse y a tener hojas nuevas, hasta la fecha se ven en buen estado, aunque el tamao vario al siguiente: 0.60 m, 0.20 m, 0.24 m y 0.17 m, ms sin embargo la adaptacin al suelo contaminado hasta un 20% en peso fraccin hmeda es evidente. Los arboles de Salix Babylonica pueden usarse para fitoremiacin satisfactoriamente en suelos contaminados con aceite automotriz pero habr que hacer ms pruebas para arboles de mayor edad y tamao.
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CT-BA-46 PRESENCIA DE Vibrio parahaemolyticus (TDH+ Y TRH+) EN Crassostrea virginica DEL SISTEMA LAGUNAR DE PUEBLO VIEJO, VERACRUZ, MXICO Mnguez-Rodrguez M. M., Castaeda-Chvez M. R., Hernndez-Zrate G., Lango-Reynoso F. Instituto Tecnolgico de Boca del Ro. Departamento de Posgrado e Investigacin. Km. 12 Carretera Veracruz-Crdoba. C. P. 94290. Boca del Ro, Veracruz. Mxico. Telfono: +52 (229) 986 01 89 ext. 141. Fax: +52 (229) 986 18 94 castanedaitboca@yahoo.com.mx El deterioro de la calidad del agua en ambientes costeros es cada vez ms evidente. Uno de los ecosistemas de mayor vulnerabilidad a la contaminacin antropognica son las lagunas costeras, que paradjicamente se ubican como uno de los sistemas marinos de mayor importancia ecolgica, adems de constituir reservorios naturales relevantes en la produccin de productos pesqueros. No obstante, la descarga de contaminantes en estos cuerpos de agua, origina cambios en su composicin fisicoqumica, condicin que favorecen la proliferacin de microorganismos patgenos, y que son responsables de causar enfermedades en seres humanos. En ambientes costeros, los moluscos bivalvos funcionan como vehculos en la transmisin de infecciones gastrointestinales, por su condicin de organismos filtradores capaces de acumular una gran cantidad de bacterias del ambiente, incluyendo patgenos potenciales. Vibrio parahaemolyticus es sealado como uno de los principales agentes etiolgicos causantes de gastroenteritis por el consumo de moluscos crudos o parcialmente cocidos. El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de V. parahaemolyticus total (tlh+) y potencialmente patognico (tdh+ y/o trh+) en Crassostrea virginica del Sistema lagunar de Pueblo Viejo. Durante el periodo de febrero a agosto de 2009 (temporada de nortes, estiaje y lluvias), se colectaron un total de 45 muestras (n=30), provenientes de los cinco bancos de mayor produccin de ostin en la laguna. Las muestras fueron procesadas utilizando la tcnica de Nmero Ms Probable y la Reaccin en Cadena de la Polimerasa (NMP-PCR). V. parahaemolyticus total (tlh+) fue encontrado en el 100% de las muestras analizadas, durante las tres temporadas (nortes, estiaje y lluvias). Las densidades ms altas de V. parahaemolyticus (tlh+) en ostin, se presentaron durante la poca de nortes (>16000 NMP/g). Por su parte, V. parahaemolyticus (tdh+) y V. parahaemolyticus (trh+) potencialmente patgenos, fueron encontrados en mayor abundancia durante la temporada de estiaje (23.69%) y la poca de nortes (24.44%), respectivamente. La presencia de V. parahaemolyticus (tdh+ y trh+) fue baja en las tres pocas de estudio, siendo la poca de nortes la que present la mayor abundancia (8.14%). Un incremento en V. parahaemolyticus (tdh+ y trh+), fue observado en las zonas cercanas a fuentes de contaminacin y de impacto antropognico. El saneamiento de esta laguna costera y la rpida deteccin de cepas pandmicas de V. parahaemolyticus ayudarn a incrementar la seguridad alimenticia y a mitigar el impacto econmico, social y ambiental de la regin. Palabras clave: lagunas costeras, V. parahaemolyticus patognico, NMP-PCR, genes tlh, tdh y trh.
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CT-BA-47 BIORREMEDIACIN-FITORREMEDIACIN DE AGUAS DE PROCESO ASOCIADAS A LA EXPLOTACIN PETROLERA EN COLOMBIA Dussn Garzn Jenny, Escobar Maria Camila Centro de Investigaciones Microbiolgicas-CIMIC-Universidad de los Andes jdussan@uniandes.edu.co En un campo de explotacin petrolera de la regin suroriental de Colombia ,se estableci un proceso de biorremediacin-fitorremediacin a las aguas asociadas al proceso de explotacin.. De estas aguas despus de la quinta semana de presin por replica plating con hexano, fenol, tolueno, xileno, diesel o gasolina JP, 9 morfotipos se identificaron por secuenciacin y anlisis bioinformtico de la regin V3V5 del gen 16S RNA ribosomal los cuales correspondieron a los generos : Mitsuaria , Ralstonia , Pseudomonas, Rhizobium , Caulobacter , Sphingomonas Posteriormente se realizaron pruebas de germinacin de semillas de arroz utilizando agua contaminada y agua control.y se trasplantaron a los montajes con los diferentes tratamientos. El montaje consista en un semillero (con 25 pozos y con dos plntulas en cada uno) sumergido en un recipiente con 4 litros de agua contaminada o control. Se realizaron cuatro montajes asi: 1) Agua contamina, 2) Agua contamina ms bacterias seleccionadas, 3) Agua control y 4) Agua control ms bacteria seleccionadas. Cada tratamiento tubo 4 replicas y estas fueron situadas en el invernadero aleatoriamente. Se analiz la variabilidad de los ndices de diversidad microbiolgica del suelo, determinada a los 10, 30 y 50 das despus de siembra; el peso seco y porcentaje de clorofila en los das 20 y 50 .El anlisis del porcentaje de degradacin se realiz determinando los hidrocarburos totales de petrleo (TPHs) iniciales y finales, por cromatografa de gases con detector de ionizacin de llama (GC-FID). Se encontr un efecto del agua en la germinacin de las semillas de arroz. En agua control la germinacin fue del 91%, mientras que en el agua contaminada germinaron el 59% de las semillas. Los ndices de diversidad (Simpson y Shannon-Wiener) mostraron una mayor diferencia en los montajes de estudio que en los controles. En peso seco y porcentaje de clorofila, a los 20 das no presentaron diferencias entre los tratamientos, pero a los 50 das hubo diferencias significativas. ( Kruskal-Wallis All-Pairwise Comparisons Test (=0.05)) Entonces en el tratamiento de agua control ms bacteria se obtuvo los mayores ndices de diversidad microbiana, el mayor ndice de peso seco y porcentaje de clorofila. Por lo tanto estos datos sugieren el papel de los microrganismos adicionados como promotores de crecimiento y degradadores de hidrocarburos del petrleo dado que se determin una disminucin en los TPHs del agua contaminada en los tratamientos con plantas y con plantas ms bacterias.
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CT-BA-48 CARACTERIZACIN MORFOLGICA Y MOLECULAR Y DE SUS RELACIONES CON LAS COMUNIDADES BACTERIANAS DE UN HONGO AISLADO DE PETRLEO Orozo Maria Camila, Vives Martha mc.orozco162@uniandes.edu.co Los problemas de contaminacin generados por el incremento del uso de combustibles fsiles como fuente de energa fomentan el estudio de nuevos sistemas de descontaminacin que puedan mitigar los problemas generados por esta prctica. Uno de los adelantos de la ciencia que se muestra como una solucin es la biorremediacin usando microorganismos que de manera eficiente y econmica trabajan en la descontaminacin de suelos, aguas y aire. El hongo HDO1 quien crece espontneamente en ensayos realizados por la Universidad de los Andes desde muestras de petrleo de pozos colombianos fue aislado e identificado a travs caractersticas macroscpicas y microscpicas y de la amplificacin de ITS4 e ITS5 como Scedosporium angiospermum. En la evaluacin hecha para establecer las bases del estudio de la inclusin de hongos en consorcio junto a bacterias para biorremediacin fueron cultivados en medio mnimo de sales el hongo Scedosporium angiospermum y un consorcio bacteriano formado por dos diferentes cepas de Pseudomonas aeruginosa. Como resultados de escaneos de las muestras en microscopia electrnica de barrido fue observado adems de una estrecha relacin fsica entre las comunidades bacterianas con las hifas de Scedosporium angiospermum, un deterioro de las hifas del hongo en presencia de las bacterias, sugiriendo algn tipo de efecto de las comunidades bacterianas sobre la viabilidad del hongo.
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CT-BA-49 DETECCIN DE ADN DE Brucella UTILIZANDO UN BIOSENSOR COMPUESTO DE UN BIOCONJUGADO PEROXIDASA-ADN De los Santos Snchez Mara Leticia, Torres Ramrez Eduardo, Prez Avils Ricardo, Cedillo Ramrez Lilia, Castaeda Roldn Elsa Iracena. Posgrado en Ciencias Ambientales, Instituto de Ciencias. Benemrita Universidad Autnoma de Puebla. Laboratorio de Patogenicidad Microbiana, Edificio 103-J, Ciudad Universitaria, Col. San Manuel, C.P. 72570 Puebla, Puebla, Mxico. Tel. 01 (222) 229-55-00 Ext. 2538. ing_biot_lety_santos@hotmail.com El gnero Brucella es un patgeno importante de mamferos y humanos que pertenece a la familia de los Brucellaceae dentro del orden Rhizobiales de las Alfaproteobacterias. Recientemente, se han reportado especies aisladas de mamferos marinos y del suelo, en este ltimo constituye un reservorio temporal. Se requieren dosis infecciosas bajas (10 a 100 bacterias), la transmisin del microorganismo es a travs de aerosoles, y es el agente causal de una enfermedad con un tratamiento difcil an con los antibiticos, por lo que se requiere de mtodos diagnsticos innovadores como detectar el ADN del microorganismo de muestras de reas endmicas de brucelosis mediante catlisis enzimtica utilizando un bioconjugado peroxidasa-ADN, lo es el objetivo principal de este trabajo. Metodologa: El ADN de Brucella se extrajo de un cultivo puro por lisis alcalina y se purific el ADN obtenido usando el High Pure PCR templete preparation Kit. Se disearon oligonucletidos especficos del gnero, usando a la secuencia IS711 nicas en Brucella mediante el gene-bank (NCBI: NC_007618). Se sintetiz un bioconjugado de enzima y ADN con el propsito de desarrollar un Biosensor para detectar ADN microbiano, en particular de Brucella spp. Para desarrollar el bioconjugado se modific qumicamente a la enzima citocromo c con un oligonucletido diseado para reconocer una secuencia especfica del ADN de Brucella. La unin enzima y ADN se realiz utilizando un espaciador para unir a travs de los grupos aminos de la enzima, y el amino del oligo sintetizado. De esta manera es tericamente posible detectar ADN de Brucella a travs de la interaccin ADN-ADN y por posterior catlisis enzimtica del citocromo c. Como sustrato de la reaccin enzimtica se utiliz el Dibenzotiofeno (DBT) cuya oxidacin en presencia de perxido de hidrgeno se monitoreo por fluorescencia. Los resultados preliminares indicaron que es posible detectar concentraciones de enzima tan bajas como 31 nM. Dado que la concentracin de enzima es directamente proporcional a la concentracin de ADN, porque est unida covalentemente a ella, fue entonces posible detectar el ADN de Brucella presente a las mismas concentraciones.
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CT-BA-50 CARACTERIZACIN DE UNA LACASA DE Pycnoporus sanguineus RVAN5 Iracheta Crdenas Mara Magdalena, Galn Wong Luis, Rojas Verde Guadalupe, Arvalo Nio Katiushka. Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL. Pedro de Alba Esq. Manuel L. Barragn S/N. Cd. Universitaria. Tel.: 81-83294000 Ext. 6440. karevalo01@hotmail.com Los hongos de pudricin blanca son un grupo importante de microorganismos productores de enzimas lignoliticas no especificas; entre stas, la lacasa ha sido estudiada por su potencial para degradar una variedad de contaminantes ambientales, especficamente colorantes. Pycnoporus sanguineus es una especie dentro de los basidiomicetos que ha sido estudiada por la produccin de lacasas y su posible aplicacin en la remocin de algunos colorantes y otros contaminantes, sin embargo la mayora de los reportes indican que el peso molecular de las lacasas producidas por esta especie se encuentra en el rango de 58-68 kDa. El objetivo de este trabajo fue la caracterizacin de una lacasa producida por la cepa nativa Pycnoporus sanguineus RVAN5. El microorganismo se propag en medio a base de salvado de trigo en fermentacin sumergida a 150 rpm y 30 durante 10 das. El micelio fue C separado por filtracin y el sobrenadante obtenido (SN) se almacen a -20 Para la caracterizacin C. de las enzimas se utilizaron 10 L de SN, se determin el pH (3, 5, 7 y 9) y temperatura (25, 35, 45, 55 y 65 de mxima actividad sobre el sustrato 2,2-azino bis (3-etilbenzotiazolin-6-sulfonato de sodio) C) (ABTS) y los colorantes Azul Reactivo Brillante de Remazol (RBBR), Indigo Carmn (IC), Azul de Bromofenol (BB) y Verde Brillante (BG). La masa molecular se calcul en SDS-PAGE y la actividad de decoloracin se observ mediante zimogramas as como en microplaca. Se encontr que a pH 5, el SN mantiene el 100% de actividad sobre ABTS cuando se incub previamente a 35, 45 y 55 A 65 C. su actividad decreci en un 90% despus de 6 horas. Por otro lado, a temperatura ambiente (25C 30 mantuvo el 100% de actividad por 40 das. Con RBBR se obtuvo el 92-95% de decoloracin en C) 5 h a 45, 55 y 65 Mediante el anlisis en electroforesis se visualizaron dos enzimas, de 37 y 59 C. kDa, que oxidan ABTS y DMP. Los zimogramas demostraron que solamente la enzima de 37 kDa degrad eficientemente los colorantes RBBR, IC, BB y BG. Finalmente, las enzimas producidas por P. sanguineus RVAN5 contenidas en 10 L (0.03U), degradaron eficientemente RBBR 0.025% en 4 h.
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CT-BA-51 GERMINACIN DEL GIRASOL SILVESTRE (Helianthus annuus L.) EN PRESENCIA DE DIFERENTES CONCENTRACIN DE METALES Y METALOIDES Gutirrez Espinoza L.R.1, Melgoza Castillo A1., Alarcn Herrera M.T.2, Ortega Gutirrez J.A.1, Prado Tarango D. E.1, Cedillo Alcantar M. E.1
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Fac. De Zootecnia y Ecologa, UACH Centro de Investigacin en Materiales Avanzados, CIMAV teresa.alarcon@cimav.edu.mx
La fitorremediacin es una prctica que se vuelve da a da cada vez ms importante para reducir los contaminantes del suelo y agua. Las plantas nativas tienen potencial para ser usadas en las prcticas de fitorremediacin y dentro de estas esta el girasol (Helianthus annuus L). Sin embargo, la mayora de los estudios de esta especie se han centrado en plantas adultas y no en semillas. El objetivo de este estudio fue evaluar si las semillas de girasol son capaces de germinar a altos niveles de concentracin de metales. Los niveles de tratamiento fueron soluciones acuosas a 0, 25, 50, 100, 200, y 400 mg/L de Cd (NO2)3y Pb (NO2)3; 0, 12.5, 25, 50, 100 y 200 mg/L de Cr (NO2)3, y 0, 50, 100, 200, 400, y 600 mg/L de Ni (NO2)3. Para cada tratamiento, se colocaron 50 semillas por recipiente con cuatro repeticiones para cada una. El sustrato utilizado fue, algodn y papel filtro regado con una solucin conteniendo los diferentes tratamientos. No se observaron diferencias significativas (P <0,05) como resultado de los tratamientos. La germinacin fue baja (media ponderada de 19.18%1.8) incluso para el control; Ello debido a que las semillas nativas son muy difciles de propagar. Si bien los resultados no demuestran que la semilla absorbe los metales, la semilla germino en todos los niveles de tratamiento utilizados. Estos resultados son importantes ya que muestran que esta especie pudiera ser sembrada directamente en reas contaminadas y con ello llevar a cabo la fitoremediacion de de sitios contaminados. Key words: Sunflower, Helianthus annuus, phytoremediation.
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CT-BA-52 AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIN DE UN CONSORCIO MICROBIANO DEGRADADOR DE HIDROCARBUROS Martn Lpez Mariana, Rojas Herrera Rafael, Escalante Rndiz Diana, Acereto Escoffi Pablo, Mukul Snchez Ismael de Jesus Facultad de Ingeniera Qumica - Universidad Autnoma de Yucatn mlopezmariana@gmail.com Los consorcios microbianos en presencia de contaminantes derivados del petrleo, desarrollan un sistema de adaptacin para estos ambientes extremos, en donde las relaciones de simbiosis y las condiciones naturales representan un ambiente ideal para que estos microorganismos utilicen los hidrocarburos como fuente de carbono. Por lo tanto, es indispensable caracterizar y conocer la composicin del consorcio durante el proceso de biorremediacin combinando los mtodos independientes de cultivo y los tradicionales, adems de determinar la capacidad degradativa de estos. En este trabajo se estabiliz un consorcio microbiano autctono proveniente de suelos contaminados con hidrocarburos. Se observ la morfologa celular mediante el microscopio de fluorescencia y la microscopa electrnica de barrido. Tambin se compar el crecimiento con 4 diferentes concentraciones volumtricas de inoculo (1, 3, 5 y 7%) utilizando petrleo crudo como fuente de carbono a una concentracin de 0.5 % e incubando durante 10 das en un medio de cultivo estndar. De esta manera se obtuvieron 4 curvas de crecimiento, mediante estos resultados se estableci que la variacin de inoculo no representa diferencia significativa en el crecimiento microbiano medido por la turbidez. A partir de este tratamiento se realiz una segunda cintica de crecimiento y simultneamente una cintica de degradacin cualitativa de hidrocarburos mediante cromatografa de gases, extendiendo el tiempo de incubacin a un mes con las concentraciones mnimas de inoculo. Para poder estudiar la composicin de la poblacin microbiana se extrajo el ADN metagenmico del consorcio estabilizado. Dado a que hay sustancias inhibidoras y a la dificultad que se presenta para poder llevar a cabo las copias de los fragmentos de ADN obtenidos, se optimizaron los componentes de la reaccin en cadena de la polimerasa variando las concentraciones de MgCl2 y de albumina srica bovina (BSA), utilizando iniciadores universales de bacteria, y se determinaron las concentraciones ptimas de 5mM y 0.0% respectivamente. Estos productos se utilizaron para conocer la composicin de la poblacin microbiana mediante la construccin de una biblioteca genmica.
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CT-BA-53 BIOADSORCIN DEL CAF DIRECTO 2, POR MASA CELULAR DEL Trametes versicolor Cano Hernndez Maribel1, Sols Oba Ada2, Loera Corral Octavio3, Solis Myrna4
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Instituto Tecnolgico del Altiplano de Tlaxcala. Universidad Autonoma Metropolitana-Unidad Xochimilco. 3 Universidad Autonoma Metropolitana-Unidad Iztapalapa. 4 Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada-IPN. maribel_cano@hotmail.com
La contaminacin en aguas residuales provenientes de la industria textil y del proceso de sntesis de colorantes provoca un deterioro en el medio ambiente. El caf directo 2 es un colorante utilizado en la industria textil y esta prohibido por la EPA, por considerarse cancergeno; sin embargo en Mxico y otros pases se contina empleando. El objetivo de este trabajo fue determinar la cintica de decoloracin por bioadsorcin del caf directo 2 utilizando la masa celular (pellet) del Trametes versicolor (Tv1), cultivado en medio lquido con agitacin orbital (30 rpm). Se utiliz una cepa pura de Trametes versicolor (8273) preservada en placa; se inocularon 30 matraces de 100 mL con 20 mL de medio lquido formulado con extracto de paja (100 g/L) enriquecido con extracto de malta (20 g/L), stos se incubaron a 30 Posteriormente se separ la masa celular del medio lquido y se moli en C. una licuadora estril. Se dividi en tres porciones de: 48.4 g, 44.8 g y 45.6 g. La primera fraccin se esteriliz con la finalidad de inactivar al Tv1 (control), las dos siguientes se utilizaron para realizar pruebas de bioadsorcin. A las 3 fracciones se les adicionaron 400 mL de una solucin de caf directo 2 esterilizado con 500 ppm, proveniente de una empresa de Tepetitla, Tlaxcala. Por otro lado a 200 mL del medio lquido residual de crecimiento del cultivo se le adicionaron 200 mL de la solucin del colorante pero con una concentracin de 1000 ppm. Se prepar un blanco con 35 mL de medio lquido y 35 mL de agua esterilizada, para ser utilizado como blanco en la determinacin espectrofotomtrica. El control, los tratamientos y una muestra de solucin del colorante se incubaron a 30 en forma C, esttica. Se tomaron muestras diariamente durante 35 das y se ley el cambio de absorbancia en un espectrofotmetro UV-Vis HP 5680. La cintica observada fue de primer orden para las primeras 60 -1. horas de reaccin, con una constante cintica de k = 2.3 x10-3 h La masa celular adsorbi un mximo de 36 % de colorante a los 24 das de contacto con el colorante, incrementndose en un 45 % a los 35 das, donde se pudo observar un posible efecto enzimtico, despus de haber alcanzado la saturacin de la masa celular con el colorante. Con el medio lquido tambin se pudo observar decoloracin del caf directo debido a enzimas extracelulares.
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CT-BA-54 SUELOS CONTAMINADOS CON ACEITE AUTOMOTRIZ QUEMADO LAVADOS CON JABON DE USO DOMESTICO Marin Ponce Ana Karen, Reyes Caceres Hiram, Romellon Cerino Mario Jose, Solis Vazquez Gabriela, Peralta Ramon Maria De Jesus, Martinez Nuez Cinthia Lizeth, Ramirez De La Cruz Ana Karina Instituto Tecnologico De Villahermosa. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 anita1004_chapis@hotmail.com El uso de surfactantes industriales para la remocin de contaminantes en el suelo es una tcnica muy comn y efectiva para el tratamiento de suelos contaminados por hidrocarburos. Aunque se existen surfactantes de uso domestico que pueden presentar las mismas eficiencias de remocin de contaminantes, pero aun no est comprobado de forma efectiva. El objetivo de este proyecto es comprobar la remocin de un hidrocarburo fraccin pesada usando jabones de uso domestico que contengan surfactantes. Se usaron 50 kilogramos de suelos contaminados con aceite automotriz quemado y jabn de uso domestico, el suelo contaminado se mezclo con l jabn, despus se lavo con agua limpia y se enjuago varias veces. Se tomaron 3 muestras de suelo contaminado para analizar antes del inicio de la tcnica y conocer la concentracin inicial de contaminante la cual fue: muestra 1.-137015.92 ppm, muestra 2.-131832.20 ppm y muestra 3.-131832.20 ppm. Despus del primer lavado se analizo el suelo contaminado para conocer la concentracin de contaminante en otras 3 muestras que se enviaron a anlisis y los resultados fueron: muestra 1.- 101691.73 ppm, muestra 2.-93199.43ppm, y muestra 3.- 94110.43 ppm. Los resultados del primer y segundo anlisis muestra una disminucin de ms de 35 000 ppm de Hidrocarburos Totales de Petrleo (HTPs). Esto nos indica de forma preliminar que el jabn de uso domestico es ptimo para recuperar suelos contaminados con Hidrocarburos Totales de Petrleo. Aunque el agua residual obtenida del lavado de los suelos tendr que drsele un tratamiento posterior.
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CT-BA-55 BIOTRATAMIENTO PARA SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS A TRAVS DE HIDROCARBUROCLSTICOS Penicillium Islandicum Romelln Cerino Julio Cesar, Tosca Castillo Armando, Romelln Cerino Mario Jos, Soto Sierra Juan Instituto Tecnolgico de Villahermosa Instituto Tecnolgico Superior de Macuspana mjrcerino@hotmail.com A consecuencia de hechos que han ocurrido en nuestro planeta, el hombre est tomando conciencia que es l quien est sobreexplotando y contaminando los recursos naturales, ocasionando la deforestacin, desertizacin, la prdida de mantos friticos, de especies animales y vegetales y de la biodiversidad en s, todo esto ha generado un cambio de actitud del hombre hacia la naturaleza. Ante este cambio el hombre de las grandes ciudades, que vive diariamente el trnsito vehicular, la tensin cotidiana generada por las presiones por obtener xito en su labor y la remuneracin econmica por ello, para satisfacer sus necesidades, encuentra en el contacto con la naturaleza, el complemento necesario y vital para no sentirse alienado por el ambiente artificial en el que vive y satisfacer sus necesidades de autorrealizacin. El turismo ha estado ligado a este proceso y cambio de tendencia, en donde el turista est a la bsqueda de experiencias nicas, acorde a sus nuevos gustos, necesidades y preferencias, como lo es el tener experiencias con las comunidades receptoras, el interrelacionarse con la naturaleza, realizar actividades que le impliquen reto fsico, bsqueda de emociones significativas, el mantenerse en forma, cuidar su salud y realizar actividades al aire libre. La razn fundamental por la que los turistas realizan un viaje es la de conocer el ambiente de un lugar, as como las costumbres, la cultura y la religin de sus habitantes. El ambientalismo es ahora una fuerza internacional y nacional muy importante con el surgimiento del movimiento ecolgico por lo que la proteccin ambiental ha sido aceptada por la industria turstica. El modelo aplicado est enfocado al Desarrollo Sustentable en el Parque Estatal Agua Blanca, porque la finalidad es generar actividades recreativas en armona con la naturaleza y cuidando puedan ser disfrutadas por las generaciones futuras, adems de que el Desarrollo Sustentable se presenta como una alternativa para buscar el progreso, con base en el aprovechamiento racional de los recursos naturales y humanos, con el fin de satisfacer las necesidades del presente, sin comprometer la posibilidad de las generaciones futuras de satisfacer sus propias necesidades de alimentacin, vivienda, vestido, educacin y salud entre otros. El 97 % de los encuestados se demostr a favor de la observacin de flora y la fauna, as como tambin de talleres de educacin ambiental, caminatas, espeleismo y senderismo interpretativo.
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CT-BA-56 LA HIGUERILLA (Ricinnus comunis) CULTIVO ALTERNATIVO PARA LA PRODUCCIN DE ACEITE PARA BIODIESEL Estrada Carrillo Marisa1, Romero Torres Fernando2, Vergara Galicia Jorge1, Ayala Vzquez Claudia1, Garibay Benitez Guillermo1
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Universidad Politcnica del Estado de Morelos. Secretara de Desarrollo Agropecuario del Estado de Morelos. mecarrillo@upemor.edu.mx
Los cultivos energticos son para el estado de Morelos una alternativa, ya que generalmente son plantas de crecimiento rpido destinadas nicamente a la obtencin de energa o como materia prima para la obtencin de otras sustancias combustibles. El desarrollo de estos cultivos energticos requiere ir acompaado del desarrollo paralelo de la correspondiente industria de transformacin de la biomasa en combustible. Con la finalidad de que la produccin y la transformacin estn estrechamente relacionadas, tanto desde el punto de vista tcnico, econmico y geogrfico. En el presente estudio se propone a la higuerilla (Ricinnus comunis) planta oleaginosa silvestre ubicada en el estado de Morelos, como cultivo alternativo para la produccin de aceite para produccin de biodiesel.
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CT-BA-57 REMOCIN DE METALES DE EFLUENTES DE LAGUNAS DE ESTABILIZACIN A TRAVS DE HUMEDALES CONSTRUIDOS Nez Marisel1, Crdenas Carmen2, Guinand Carol2, Trujillo Alberto2, Vera Alexandra3, Morales Ever4 Programa de Ingeniera y Tecnologa, Universidad Nacional Experimental Rafael Mara Baralt, Ciudad Ojeda, Zulia, Venezuela 2 Centro de Investigacin del Agua, Facultad de Ingeniera, Universidad del Zulia, Maracaibo, Venezuela 3 Facultad de Agronoma, Universidad del Zulia, Maracaibo, Venezuela. 4 Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia, Maracaibo, Zulia, Venezuela marisel2506@gmail.com La Universidad del Zulia (LUZ), ha realizado distintas investigaciones para encontrar mtodos para mejorar la calidad del efluente de las lagunas de estabilizacin y de esta forma ser descargado en los cuerpos receptores o para reutilizarlos con fines agrcolas. Entre los tratamientos para mejorar este efluente se encuentran los sistemas con plantas acuticas, y entre stos los humedales construidos. Las aguas residuales se caracterizan por la presencia de trazas de metales pesados. Su presencia es de importancia desde el punto de vista agronmico y clnico, no solo por su fototoxicidad, sino por su capacidad de acumularse en el suelo y de entrar en la cadena alimenticia a travs de su captacin por parte de los cultivos. En este trabajo se determinaron las concentraciones de Al, Cu, Fe, Mn, Ni y Zn en el agua tratada en un sistema con Typha dominguensis y otro con la planta flotante Lemna sp, para determinar la capacidad de ambos sistemas en la depuracin de aguas contaminadas por estos metales. El sistema evaluado est ubicado en el Centro de Investigacin del Agua de LUZ, Maracaibo, Venezuela, donde funciona un sistema de lagunas de estabilizacin para tratamiento de aguas residuales, del cual se tomaron los efluentes para ser tratados. El sistema experimental estuvo constituido por una celda sembrada con Typha dominguensis, considerada un humedal construido (HC) y otra con presencia de Lemna sp, considerada como un sistema con plantas flotantes (SPF). El funcionamiento se verific a travs del anlisis de las muestras de agua residual de entrada al sistema (efluente de las lagunas), y a la salida de HC y SPF. Se determinaron las concentraciones de los metales mencionados a travs de un espectrofotmetro de absorcin atmica, y el potencial de hidrgeno (pH). El contenido de metales en las aguas de entrada fue bajo, consecuencia de ser las mismas un efluente altamente tratado, lo cual dificulta la remocin de los distintos parmetros indicadores de contaminacin. En el caso de Al y Ni, no fueron detectados, posiblemente debido a que su concentracin estaba por debajo del lmite de deteccin. Del resto de los metales solo hubo remocin para los casos del cobre y zinc, tanto en HC como en SPF, no existiendo diferencia significativa entre las medias. Para evidenciar mejor la eficiencia de los humedales en la remocin de metales, se recomienda utilizar efluentes poco tratados que contengan altas concentraciones de metales para hacer la remocin ms significativa.
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CT-BA-58 ESPECIES DE ALUMINIO PRESENTES EN LOS LODOS DE POTABILIZACIN EN CONDICIONES DE ACIDEZ Panizza de Len Amalia1, Bernal Gonzlez Marisela1, Rogelio Carrillo Gonzlez2, Vaca Mier Mabel3, Durn de Baza Carmen1 Departamento de Ingeniera Qumica, Facultad de Qumica, UNAM 2 Colegio de Postgraduados en Ciencias Agrcolas, Mxico 3 Departamento de Energa, Universidad Autnoma Metropolitana, UAM amalia.panizza@gmail.com Antecedentes: Aproximadamente 89.2% de la poblacin de Mxico posee acceso al agua potable. En algunos de los procesos de potabilizacin se utilizan sales de aluminio para eliminar contaminantes del agua, dejando como residuos 338.6 L.s-1 de lodos con concentraciones de aluminio de 4.0-11.0% base seca. A la fecha no se tiene suficiente informacin de los procesos que ocurren en esos residuos y sus implicaciones ambientales.Los lodos representan aproximadamente 70% del total de residuos slidos generados por las plantas de tratamiento. Conocer las especies de aluminio presente en los lodos permitira estimar los efectos de este residuo sobre el ambiente. Objetivos: El objetivo de esta investigacin fue determinar las especies de aluminio presentes en los lodos provenientes del uso de sulfato de aluminio en el proceso de potabilizacin del agua, a dos valores de pH (6.8 a 3.0). Metodologa: Se tomaron submuestras de lodos (20 g) y 1000 mL de agua desionizada para formar suspenciones homogneas. Se modific el valor de pH desde 6.8 (original) hasta 3.0, con cido ntrico. Cada vez que el pH se modificaba se extraan 10 mL de muestra y se le determinaron los siguientes parmetros: aluminio disuelto y total, potencial red-ox, conductividad elctrica, salinidad, slidos disueltos, metales disueltos, temperatura, y pH. Finalmente los datos obtenidos se introdujeron en el programa PHREEQC Interactive 2.15.0 y se procesaron para calcular las especies qumicas de Al. Resultados: Se pudo observar que no son detectadas concentraciones de aluminio en las muestras cuando el valor de pH es 6.8 y 6.0. Sin embargo, cuando el valor de pH es de 5.0, se reportaron las siguientes especies de aluminio: Al+3, AlOH+2, AlSO4+, Al(OH)2+ representando aproximadamente el 35.9, 26.4, 21.8 y 15.5% del aluminio total, respectivamente. Para valores de pH=4.0 se determin 76.4% de Al+3 y 15.8% de AlSO4+. Finalmente para pH=3.0, las especies qumicas son: Al+3, AlSO4- y +2 AlOH , con 93.48, 5.94 y 0.56% respectivamente. Conclusin: En valores de pH=6.8 a 6.0 el aluminio presente en los lodos no se encuentra en solucin, a medida que se presentan condiciones de acidez comienzan a aparecer especies de aluminio en solucin (Al+3, AlOH+2, AlSO4+, Al(OH)2+) que podran representar un problema toxicolgico. Se recomienda evitar que estos lodos se depositen en un lugar donde pudieran ser acidificados (por la lluvia o por otras condiciones de intemperie).
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CT-BA-59 EXPRESIN DE GENES ASOCIADOS CON PATOGENICIDAD EN LA BACTERIA Pseudomonas aeruginosa DURANTE PROCESOS DE BIORREMEDIACIN DE HIDROCARBUROS DEL PETRLEO Lara Ana Catalina, Vives Florez Martha J. Centro de Investigaciones Microbiologicas - CIMIC Universidad de los Andes, Bogota, Colombia mvives@uniandes.edu.co Pseudomonas aeruginosa es una bacteria que frecuentemente aparece naturalmente en los consorcios de degradacion de compuestos hidrocarburos. La utilizacin de P. aeruginosa en el tratamiento y recuperacin de ambientes contaminados se realiza principalmente por bioaumentacin de las poblaciones existentes en el sitio. Esta bioaumentacin y el hecho de que P. aeruginosa sea un patgeno oportunista despierta preocupacion por el peligro de aumentar microorganismos que podran potencialmente convertirse en focos de infeccin. El conocimiento de los genes que se expresan durante el proceso de bioremediacin de petroleo contribuira a la comprension del papel ecologico de P. aeruginosa en procesos ambientales poco dilucidados, ademas de dar luces sobre las adaptaciones de esta bacteria para sobrevivir en ambientes diversos a pesar de poseer un genoma muy conservado. En un estudio previo, estandarizamos un protocolo para la extraccin de RNA de bacterias creciendo en presencia de petrleo. Con este protocolo, se prob la expresin de 19 genes asociados a virulencia en P. aeruginosa usando RT-PCR; los resultados mostraron la expresin de 17 de estos genes en el cultivo con petrleo. Este resultado indica que la expresin de los genes de patogenicidad no es reprimida por la presencia del petrleo e indica que las poblaciones bacterianas biaumentadas durante procesos de biorremediacin deben ser cuidadosamente monitoreadas, ya que pueden representar un riesgo para personas o vida silvestre que entre en contacto con las zonas en tratamiento. En el momento realizamos pruebas de qPCR para medir cuantitativamente la expresin de genes de virulencia en presencia de petrleo y comenzar a dilucidar el uso que le dan las bacterias en estos ambientes a determinantes de virulencia que siempre se consideraron dedicados al desarrollo de infecciones.
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CT-BA-60 TRATAMIENTO DE SUELOS CONTAMINADOS POR HTPs POR COMPOSTEO Y AIREACION FORZADA Contreras Prez Mayra Genezareth, Cortaza Hernandez Banihadid, Romellon Cerino Mario Jose, De La Cruz Sanchez Maria Del Rosario, Galvan Castillo Luis Gerardo Instituto Tecnolgico de Villahermosa. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 mayrita09@live.com.mx La bsqueda de tecnologas amigables con el medio ambiente entre las que se usan para la remediacin o recuperacin de los suelos contaminados nos ha llevado a hacer trenes de tecnologas que nos dan una mejor eficiencia y que remedian los suelos en menor tiempo y con menos generacin de residuos. Este proyecto busca encontrar un mtodo econmico y efectivo para la remediacin de suelos contaminados por Hidrocarburos Totales de Petrleo. Se utilizo suelo contaminado por aceite automotriz quemado a este se le homogeneiz con los siguientes materiales: residuos orgnicos frescos, residuos orgnicos en estado de putrefaccin y 5 kilogramos de azcar. Despus de homogeneizado con todo lo anterior mencionado se procedi a instalar una lnea de mangueras dentro del suelo contaminado, dicha manguera fue agujereada y conectada a una bomba convencional de pecera que suministra aire durante las 24 horas del da mientras dure el proyecto. La concentracin inicial de Hidrocarburo Fraccin Pesada (HFP) fue de 106, 742.94 ppm y la concentracin de HFP despus de 5 semanas de tratamiento fue de 109, 856.51 ppm. Hubo un incremento de ms de 3, 000 ppm de HFP. Esto debido quizs a la generacin de hidrocarburos orgnicos provenientes de la descomposicin de los residuos orgnicos utilizados como abono. En el siguiente anlisis se podr comprobar esta teora.
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CT-BA-61 EFECTO DE LA NATURALEZA DE MATRICES SLIDAS EN LA RESPIRACIN DE Pseudomonas aeruginosa DURANTE LA DEGRADACIN EN SISTEMAS DE PARTICIN LQUIDA DE HIDROCARBUROS POLIAROMTICOS INTEMPERIZADOS Jimnez Gonzlez Anglica2, Cruz Gamez Celia1, Snchez Martnez Diana Rocio1, Lucho Constantino Carlos Alexander1, Medina Moreno Sergio Alejandro1
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Universidad Politcnica de Pachuca, Zempoala, Hidalgo. Universidad Politcnica Francisco I. Madero, Tepatepec Hidalgo, C.P. 42660 samm6706@yahoo.com.mx
El estudio de la biodegradacin bacteriana de Hidrocarburos Poliaromticos (HPAs) intemperizados en matrices slidas inmersas en sistemas de particin de fase lquida (SPFL), puede servir de plataforma para el mejoramiento de las tecnologas de bioremediacin de suelos contaminados durante largos periodos de tiempo con este tipo de hidrocarburos. El objetivo del presente trabajo, fue evaluar el efecto de la naturaleza de tres matrices slidas (arcilla, slice y almina) intemperizadas con HPAs en la respiracin aerobia y crecimiento de Pseudomonas aeruginosa durante la degradacin de estos hidrocarburos en SPFL con aceite de silicn como fase lquida no acuosa. La metodologa, se baso en cinticas de crecimiento de biomasa acopladas a tcnicas respiromtricas. La biomasa fue determinada mediante densidad ptica (D.O.) y cuenta viable (UFCs) por el mtodo del nmero ms probable. Como tcnica respiromtrica, se emplearon respirmetros manomtricos, en la cual se determino el consumo de oxgeno en el espacio de cabeza mediante la cada de presin. En todas las unidades experimentales tanto de las cinticas como de los respirmetros, se adiciono cada una de las matrices intemperizadas con naftaleno o fenantreno en un 30% p/v y aceite de silicn al 5% v/v. Todas las unidades experimentales se inocularon con 0.5% v/v de una suspensin de P. aeruginosa ATCC 9027 con una D.O. de 0.3. Todas las unidades se mantuvieron a 30 y 200 r.p.m. Los datos C de respiracin fueron corregidos para respiracin endgena, al utilizar un blanco con todos los componentes excepto las matrices. En todos los ensayos, al compararse con el realizado sin matriz, se observa que la intemperizacin produce una disminucin tanto en la capacidad de remocin de los HPAs como en la respiracin de P.aeruginosa. Aunque el aceite de silicn opera como un vectorextractor, el efecto de la matriz probablemente conduzca a una fuerte disminucin de la biodisponibilidad de los HPAs. Debido a que los datos experimentales fueron corregidos mediante la respiracin endgena, puede asumirse que el consumo de oxgeno y crecimiento de biomasa observados en todos los ensayos son debidos a la biodegradacin de los HPAs al ser utilizados por P. aeruginosa como nica fuente de carbono y energa. Un factor asociado directamente al efecto en la biodisponibilidad de los HAPs es la afinidad de adsorcin de cada matriz por estos compuestos, la cual es un reflejo del nivel de interaccin a nivel molecular entre los HAPs y los sitios activos a nivel superficial de cada matriz. As, aunque se establezca un tri-equilibrio de reparto de cada HPA entre la matriz-silicn-medio, muy probablemente, entre mayor sea la afinidad menor ser la biodisponibilidad y por lo tanto la biodegradacin, reflejndose en disminuciones de las tasas de crecimiento y respiracin. En base a esta inferencia, a partir de las pendientes de las cinticas de crecimiento y consumo de oxgeno en las primeras horas de cada ensayo, se observo que para el fenantreno, el efecto en la disminucin de la biodegradacin es mayor para almina, seguido de la arcilla y finalmente el slice, mientras que para el naftaleno, este efecto en la disminucin es mayor para el slice, seguido de la arcilla y finalmente la almina. En conclusin, aunque el aceite de silicn en los sistemas con matrices intemperizadas puede funcionar tanto como un agente extractor y depsito de los HPAs,el grado de intemperizacin asociado directamente a la afinidad de cada matriz por cada HPA es un factor que debe ser considerado en el diseo de los SPFL, ya que posee un efecto directo sobre la biodisponibilidad, disminuyendo la eficiencia de biodegradacin.
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CT-BA-62 CARACTERIZACIN DE LA COMUNIDAD MICROBIANA DE SUELOS IMPACTADOS POR LA ACTIVIDAD PETROLERA Y SU POTENCIAL PARA LA RECUPERACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS Salas M.1, Malaver N.2, Dezzeo N.3, Rodrguez M.2
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Escuela de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela (UCV), Caracas, Venezuela. 2 Instituto de Zoologa y Ecologa Tropical (IZET), Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela (UCV), Caracas, Venezuela. 3 Centro de Ecologa, Instituto Venezolano de Investigaciones Cientficas (IVIC), Caracas, Venezuela milasalas87@gmail.com
En Venezuela existen unas 12.000 fosas petroleras, donde se han almacenado por dcadas desechos de las actividades de explotacin y produccin de hidrocarburos. El presente estudio se realiz en la fosa Bared-9, ubicada geogrficamente a una latitud 8 5546,2 N y longitud 64 744,8 W (coordenadas UTM 948033 N 379742 E), en el Distrito San Tom, Estado Anzotegui -Venezuela. Considerando el papel que juegan los microorganismos en el ciclaje de nutrientes y su potencial para ser utilizados en recuperacin de reas impactadas por la actividad petrolera, se caracteriz la comunidad microbiana (bacteriana y fngica) en el rea de influencia de esta fosa. Para la toma de muestras se levantaron transectas en 3 puntos diferentes alrededor de la fosa y en cada una de estas se ubicaron 3 parcelas de dimensiones: 10 m x 5 m. que representaban reas con diferente grado de impacto (desde el borde hasta reas alejadas de la fosa), de cada parcela se tomaron 4 submuestras de suelo, con las cuales se form una muestra compuesta. Los anlisis microbiolgicos incluyeron: aislamiento de cepas bacterianas y fngicas cultivables, caracterizacin macro, micromorfolgica y bioqumica. En las tres parcelas estudiadas predominaron bacterias Gram positivas y en las poblaciones fngicas fueron las levaduras las que se expresaron en mayor proporcin, en el caso de los hongos filamentosos solo se aislaron en las segundas y terceras parcelas. Las comunidades microbianas no mostraron diferencias en su estructura funcional a lo largo del gradiente estudiado, revelando un gran porcentaje de cepas con actividad degradativa frente a sustratos simples (glucosa y lactosa) y complejos, como: celulosa, lignina, pectina, quitina, baja capacidad para desdoblar urea y gran actividad lipoltica, infiriendo la capacidad de estas comunidades microbianas para degradar productos derivados del petrleo, utilizndolos como fuente de carbono y energa. Con los resultados del espectro bioqumico y aplicando anlisis multivariado de clster se determin la estructura funcional de la comunidad microbiana, permitiendo evidenciar que las poblaciones fngicas eran ms diversas funcionalmente que las poblaciones bacterianas. En los anlisis de clster que integraban ambas poblaciones se formaron Grupos de Identidad Funcional (GIF), infiriendo que en la degradacin de diferentes sustratos participan ambas poblaciones de microorganismos, lo cual evidencia que cepas taxonmicamente diferentes, presentan equivalencias funcionales en el ecosistema. El espectro bioqumico mostrado por las comunidades microbianas revela un gran potencial para ser utilizadas en procesos de biorremediacin. Palabras claves: Fosa Bared-9, Hongos, Bacterias, comunidad microbiana, caracterizacin bioqumica, caracterizacin funcional.
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CT-BA-63 TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES, POR EL MTODO DE ELECTROCOAGULACIN, DE AGUAS GENERADAS EN EL PROCESO DEL RECICLADO DE EMBALAJES Zenteno U. S. , Daz M., Escandn J. A., Ramos H. J., Prez S., Chanona J., Gamboa M. mgamboa68@hotmail.com La electrocoagulacin es un proceso de tratamiento de agua a base de electricidad para eliminar contaminantes en el agua residual en matrices de materia en suspensin, disuelta o emulsificada. Se enfoca mayoritariamente a los tipos de agua industrial. Un ejemplo de tal desecho lquido, podra ser los residuos contenidos en envases transportadores de alimentos. Un estudio de caso es el tratamiento del agua residual proveniente de empresas recicladoras de envases tetra pack. La forma de operar de este proceso es el paso de corriente elctrica al agua residual que proporciona la fuerza electromotriz que provoca las reacciones qumicas que desestabilizan las formas en que los contaminantes se pudieran encontrar. Los desechos lquidos tpicos a tratar por este mtodo son los de galvanoplastia, electro-plateado metlico, fbricas de envasados, industria del papel (desperdicios de molinos de papel), peleteras, molinos de acero, efluentes con contenido de cromo, plomo o mercurio y efluentes con contenido de aceites como los generados por talleres de maquinaria, refineras, talleres de reparacin de autos, transporte, almacenamiento y distribucin de aceites, efluentes de la industria alimentaria, lavanderas e industria textil, y finalmente ha sido utilizada en la remocin de los contaminantes en agua potable y residual domstica. El proyecto experimental consta de 3 fases: a) establecer el estado del arte del proceso de electrocoagulacin, b) caracterizacin de los parmetros de influentes y efluentes tratados como el pH, DQO, DBO, slidos suspendido en todas sus formas, turbidez, grasas y aceites y conductividad elctrica. Asimismo, se observo el grado de estabilizacin por la medida de coliformes totales por el mtodo del numero mas probable (NMP), c) realizar ensayos en base a los diferentes tiempos de clarificacin debido alas distintas intensidad de corriente fijadas para tal efecto. Finalmente, se evaluaron los porcentajes de eficiencia en el proceso en general en base a la caracterizacin previamente hecha.
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CT-BA-64 SELEO DE BACTRIAS OXIDADORAS DE AMNIO ATRAVS DE SISTEMA CONTNUO COM ELEVADAS VAZES DE ALIMENTAO (WASH OUT) Gabiatti Naiana Cristine, Moreira Soares Hugo, Schmidell Willibaldo Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos - Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC). Laboratrio de Tratamento Biolgico de Efluentes (LTBR) -Campus Universitrio, C.P. 476 - CEP 88040-900 - Florianpolis-SC Telefone: (48) 3721 9448 naianagabiatti@yahoo.com.br Os processos de remoo de nitrognio de guas residurias via nitrito tm encontrado maiores aplicaes tendo em vista a reduo da demanda de carbono e do suprimento de oxignio. Um dos fatores limitantes deste tipo de processo a remoo ou inibio das Bactrias Oxidadoras de Nitrito (BON) enquanto as Bactrias Oxidadoras de Amnia (BOA) permanecem em plena atividade. O objetivo deste trabalho foi propor uma forma de seleo dos microrganismos de interesse partindo de uma biomassa heterognea e, a partir disso, verificar o comportamento desta biomassa na remoo de altas concentraes de nitrognio amoniacal (N-NH4) comparativamente a um inculo obtido diretamente do lodo original. Aps ser coletado na Estao de Tratamento de Esgotos (ETE) do municpio de Florianpolis-SC, parte do lodo passou por um processo contnuo de lavagem da biomassa (wash out) partindo de um volume de reao de 3L e utilizando-se meio sinttico contendo, aproximadamente, 500 mg N-NH4+. L-1. A vazo especfica de alimentao (D) aplicada foi de 0,0395 h-1, este valor superior s velocidades especficas de crescimento encontradas na literatura para os microrganismos citados. Um segundo reator foi inoculado com a biomassa de igual procedncia e preenchido gradualmente com o mesmo meio sinttico at completar os 3L e atingir uma concentrao celular prxima de 1g SST. L-1 (mesma do final do primeiro processo). Encerrada esta primeira etapa, foram realizadas cinticas de consumo de amnio em ambos os reatores, operados como SBR (Sequencing Batch Reactor) e mantendo a mesma temperatura, agitao e aerao iniciais de 35 C, 400 rpm e 1vvm, respectivamente. O ensaio conduzido aps a lavagem da biomassa apresentou porcentagens de remoo de N-NH4 de at 30%, enquanto em algumas cinticas a partir do lodo original no foi verificada qualquer remoo. As velocidades especficas de consumo de amnio e formao de nitrito apresentaram valores crescentes medida que mais ensaios eram realizados, sendo sempre superiores os encontrados na biomassa lavada em relao aos demais. O mesmo aconteceu para a velocidade especfica de consumo de oxignio. Alm disso, as anlises microbiolgicas mostraram diferenas entre as populaes, principalmente no que se refere presena das BOA, confirmando a capacidade de seleo do processo de lavagem da biomassa assim como o aumento da eficincia desta no reator.
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CT-BA-65 EVALUACIN DE LA TOLERANCIA DE Aspergillus terreus A UNA MEZCLA DE PAHs Anaisell Reyes Cesar, Absaln ngel, Corts-Espinosa Diana V. CIBA-IPN Tlaxcala. Carretera estatal Tepetitla de Lardizabal- Santa Justina Ecatepec Km 1.5 CP 90700, Tepetitla de Lardizabal, Tlaxcala, Mxico Tel: +52 (55)57296000 Ext. 87805 dcortes@ipn.mx Los hidrocarburos aromticos policclicos (PAHs) son contaminantes ambientales que surgen principalmente de procesos industriales relacionados con el petrleo. Algunos PAHs y/o sus metabolitos son carcinognicos por lo que se ha puesto especial atencin en su disposicin. Los sistemas de biodegradacin de PAHs envuelven el uso de hongos los cuales pueden oxidar estos compuestos hasta mineralizarlos. Actualmente los hongos aislados directamente de suelos contaminados son estudiados para usarlos como sistemas de bioaumentacin y de esta forma evitar el desplazamiento que sufren los hongos ligninolticos cuando son aplicados en la biorremediacin de suelos reales contaminados. El objetivo de este trabajo fue someter una cepa de Aspergillus terreus aislada de un suelo altamente contaminado con hidrocarburos a una prueba de tolerancia de una mezcla de PAHs compuesta de fenantreno (Phe) and pireno (Pi). La prueba de tolerancia se llevo a cabo en cultivo superficial en placas de Petri de 8 cm de dimetro con medio mnimo (MM) sobre el cual se adicion 2 mL de mezcla de PAHs en solucin acetnica. Las concentraciones usadas en este experimento fueron 200, 400, 600, 800 y 1000 ppm de PAHs. La acetona se evaporo bajo condiciones de esterilidad. Una vez evaporada, la placa fue inoculada en el centro con 5 L de una solucin de 1 x 107 esporas. Las placas se incubaron a 30 por 15 das para C medir el crecimiento radial cada 24 hrs. Tambin se realizaron observaciones sobre la morfologa. Se usaron como controles placas sin contaminar pero inoculadas. Aspergillus terreus mostr una buena tolerancia, la cual se reflejo en la velocidad de crecimiento radial de 0.28 cm dia-1 a una concentracin de 1000 ppm de PAHs. Adems mostr la conservacin de sus caractersticas morfolgicas de control, principalmente la esporulacin y la densidad miceliar. Es posible que la morfologa de la pared celular de Aspergillus terreus coadyuve a la alta tolerancia que esta cepa presenta ante la mezcla de Phe y Pi. Otra posibilidad es que la cepa secrete enzimas que tienen la capacidad de oxidar el anillo aromtico de este tipo de compuestos de tal forma que el microorganismo este obligado a utilizarlo como fuente de carbono pues fue inoculado en un medio mnimo. En conclusin, la cepa de Aspergillus terreus aislada tiene grandes posibilidades de utilizarse en la biorremediacin de suelos altamente contaminados por su tolerancia.
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CT-BA-66 DISEO Y ESCALAMIENTOS DE PROCESOS DE BIORREMEDIACIN DE SUELOS PETROLIZADOS, UTILIZANDO TCNICAS DE LABOREO EN LECHOS, COMPOSTAJE Y BIOPILAS, EN EL CANTON LA JOYA DE LOS SACHAS EN LA PROVINCIA FCO. DE ORELLANA, ECUADOR Erazo Roberto, Bravo Vernica, Serrano Pablo, Chvez Carlos, Veloz Nancy Centro de Servicios Tcnicos y Transferencia Tecnolgica Ambiental (CESTTA), de la Escuela Superior Politcnica del Chimborazo; Riobamba, Ecuador ncveloz@yahoo.es En el cantn La Joya de los Sachas, en la provincia Francisco de Orellana; el equipo tcnico del CESTTA realiza varios tratamientos en suelos contaminados por el derrame de crudo del pozo Sacha 161, perteneciente a la Compaa Estatal de Petrleos (Petroecuador). Anlisis realizados en muestras de suelos durante la caracterizacin inicial evidenciaron concentraciones de Hidrocarburos Totales de Petrleos entre 30000 mg/Kg y 105000 mg/Kg, hasta una profundidad de infiltracin de cinco metros. Las tcnicas de tratamientos biolgicos utilizadas en los procesos de remediacin han sido landfarming, composting y biopilas, las cuales han sido aplicadas despus de varias pruebas piloto de escalamiento y desarrollo de inculos bacterianos nativos obtenidos del propio material contaminado. Adicionalmente, se han realizado tratamientos en los cuales se han utilizado independientemente y en combinacin bioestimulacin y bioaumentacin. Se estudiaron los rendimientos de cada una de las tcnicas utilizadas tomando en cuenta los parmetros: tiempos, tasas de degradacin, utilizacin de recursos y generacin de impactos ambientales, con la finalidad de optimizar la productividad de los procesos estudiados. De esta manera se han encontrado resultados similares en tasas de degradacin entre 46%/mes y 53%/mes, mientras que la disposicin de recursos, tiempo e impactos ambientales varan significativamente entre tcnicas y tratamientos, reflejando tambin porcentajes de degradacin final entre 74% y 97%. De esta manera se lleg a seleccionar solo cuatro tratamientos de todos estudiados para poder ser aplicados en las condiciones propias de la zona de operaciones, del contaminante y del material contaminado. Palabras clave: Suelo petrolizado, inculo, tasa de degradacin, bioestimulacin, bioaumentacin
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CT-BA-67 EVALUACIN DE DIFERENTES RESIDUOS AGROINDUSTRIALES PARA SU USO COMO SOPORTE EN EL CRECIMIENTO DE A. niger PARA SU APLICACIN EN SISTEMAS DE BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON FENANTRENO Snchez No, Absaln ngel, Corts Espinosa Diana V. Centro de Investigacin de Biotecnologa Avanzada, Instituto Politcnico Nacional, Carretera Estatal Santa Ins tecuexcomac-tepetitla K.M. 1.5, Tepetitla, Tlaxcala. 90700. nsanchezg@ipn.mx La contaminacin por hidrocarburos aromticos policclicos (PAHs) existe por combustiones incompletas, derrames de petrleo, etc. Los PAHs son txicos, mutagnicos y carcinognicos, El fenantreno (Phe) es uno de ello y por sus caractersticas hidrofbicas se encuentra como contaminante en suelos y sedimentos. La biodegradacin de estos compuestos es a travs de sistemas enzimticos producidos por algunos microorganismos como los hongos y bacterias. Para los sistemas de biorremediacin de suelos por bioaumentacin, la preparacin del inculo en cultivo slido es un factor muy importante, ya que de este depende la aceleracin del proceso y las altas tasas de degradacin de PAHs, por lo que es importante determinar las condiciones de crecimiento del o los microorganismos que se desean bioaumentar. Los residuos agroindustriales han sido utilizados como soporte para el crecimiento de los microorganismos y como fuente de carbono alterna, adems sirven como texturizante en el sistema de biorremediacin, ya que confieren porosidad al suelo para facilitar la transferencia de oxgeno que requieren los microorganismos para realizar sus actividades metablicas. En nuestro laboratorio contamos con una cepa aislada e identificada como Aspergillus niger SCB2 que tiene la capacidad de crecer y degradar PAHs a altas concentraciones. Por lo que el objetivo de este trabajo es seleccionar un residuo agroindustrial para el crecimiento de A. niger SCB2 para su aplicacin en la biorremediacin de suelos contaminados con Phe. Se tritur y tamiz (malla 20), bagacillo de caa, paja de trigo y rastrojo de maz. Se colocaron en viales serolgicos el suelo y el bagacillo con una relacin 95:5 y una humedad del 30% ajustada con medio COVE 3x. Los viales se inocularon con 1x108 esporas del hongo y se dej incubando durante 3 das a 30 para su crecimiento, se realizaron observaciones al microscopio, despus se le adicion C el suelo previamente esterilizado y contaminado con 400 ppm de Phe, se incubaron 11 das a 30 C aireando cada 24 h para remover el CO2 producido por la actividad metablica del hongo. Al da 11 los viales fueron sacrificados para extraer el Phe por soxleth y la cuantificacin de Phe en HPLC. Los porcentajes de degradacin que se obtuvieron para cada tratamiento fueros: 54, 47 y 40% siendo mayor en bagacillo de caa seguido de paja de trigo y por ultimo en rastrojo de maz. Se observ que crecimiento del hongo fue significativamente diferente en cada uno de los residuos y que el crecimiento del hongo no es directamente proporcional a la degradacin del Phe, ya que el mayor crecimiento se obtuvo en rastrojo de maz, sin embargo la degradacin fue menor. El bagacillo de caa o la paja de trigo son buenas opciones para crecer a A. niger en forma masiva al hongo y pueda ser bioaumentado para acelerar el proceso de degradacin.
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CT-BA-68 METAL TOLERANCE AND REMOVAL POTENTIAL OF FUNGI ISOLTED FROM HYDROCARBONMETAL POLLUTED SOIL Rojas Avelizapa N.G., Hernandez Gama R., Ruiz Leal N. Centro de Investigacion en Ciencia Aplicada y Tecnologia Avanzada del Instituto Politecnico Nacional. Cerro Blanco 141 Colonia Colinas del Cimatario CP 76090 Queretaro Mxico. nrojasa@ipn.mx In Mxico, the chemical industry generates a great amount of metal containing wastes which represents a serious environmental concern. Thus, alternative methods for their disposal, treatment or valorization are needed. Additionally, it is well known that polluted environments represent an important source of interesting microorganisms. The aim of the present study was to obtain and identify microorganisms able to tolerate metals such as Ni, V and Mo at high concentrations, to potentially propose them for the treatment of metal containing wastes. Firstly, enrichment cultures were prepared from hydrocarbon metal polluted soil from San Nicolas Queretaro using the target metals as stress factor at 50 ppm for Ni and 100 ppm for V and Mo. Results showed that only one microorganism was able to grow in each enrichment culture. Then, three microorganisms were isolated, two fungi one from Ni added media, other fungi from V added media and a bacteria from Mo added media. Minimun inhibitory concentration for Ni and V were determined for fungi which corresponded to 60 and 8000 ppm for Ni and V respectively. Fungi able to tolerate Ni was related to Aspergillus terreous and Aspergillus alabamensis and the fungi able to tolerate V was related to a strain coded as STRKI. The findings indicated promising results for the application of these fungi as alternative methods of nickel and vanadium containing wastes.
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CT-BA-69 PROPIEDADES DESCONTAMINANTES Y ANTIOXIDANTES DE DIVERSOS GNEROS DE MICROALGAS Cruz Lpez Oscar Noe, Lpez Chuken Ulrico, Garza Gonzlez Ma. Teresa, Esquivel Ferrio Patricia, Balderas Rentera Isaas ibalderas@hotmail.com La contaminacin producida por metales pesados en aguas de desecho tiene un alto potencial de riesgo debido a que stos penetran con facilidad en la cadena trfica acumulndose como compuestos organometlicos. Por otro lado, la industria fotogrfica, mdica y minera entre otras, genera cada ao una gran cantidad de residuos en los procesos que realizan, entre los que se cuentan metales pesados; algunos de los cuales son considerados de alto impacto econmico como la plata, el cobre, oro, etc. En el presente proyecto, se aplicaron diversas tecnologas para aprovechar el uso de biomasa microbiana proveniente de microalgas de diversos gneros para probar sus propiedades como agente removedor de metales pesados, recuperador de metales preciosos, y agente antioxidante. Los mtodos utilizados consistieron en la recuperacin de la biomasa por filtracin a vaco y su posterior secado para homogenizarla. Se utilizaron 10 mg de Biomasa para cada bioensayo de remocin que consisti en poner en contacto la misma con 10 ml de las soluciones de plata cadmio o plomo a diferentes concentraciones y pH durante 24 horas a temperatura constante de 25 y agitacin de 250 rpm. Al final del ensayo se filtraron las muestras con membranas de C nitrocelulosa de 0.45 m y se analizaron por Espectroscopia de Absorcin Atmica para determinar la concentracin de metal removido. Para la recuperacin de la plata se llev a cabo una digestin cida con HNO3 al 3% durante 2 horas con agitacin constante de 250 rpm a temperatura ambiente. En el caso de los ensayos de actividad antioxidante se sigui el mtodo descrito por Brand-Williams y colaboradores. Para las pruebas de remocin de Plomo y Cadmio, las cepas demostraron hasta un 75% de remocin en 2 h de contacto, trabajando con condiciones de 250 rpm y a una temperatura de 30 En el ensayo de recuperacin de plata, la biomasa de las algas permiti una eficiente remocin C. de plata en las tres concentraciones del metal, as como en los 3 diferentes pH utilizados. As mismo, el proceso de recuperacin permiti obtener hasta un 35% de la plata adsorbida por la biomasa en experimentos ejecutados a diversas concentraciones de plata desde 10 hasta 160 ppm. Dos gneros de algas presentaron adems una eficiente actividad antioxidantes de acuerdo al ensayo con el DPPH.
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CT-BA-70 ESTRATEGIAS PARA EL MANEJO INTEGRAL DE RESIDUOS SLIDOS ORGNICOS EN EL MUNICIPIO DE PUEBLA Ramrez Castillo Mara Leticia1, Cuautle Tecanhuey Gerardo1, Torres Aguilar Rosendo1, Prez Hidalgo Luis Felipe1, Murillo Murillo Misael2 Universidad Politcnica de Puebla, Tercer carril del Ejido "Serrano" S/N, San Mateo Cuanal Municipio Juan C. Bonilla, Puebla CP 72640. 2 Instituto Tecnolgico de Puebla, Departamento de Postgrado, Avenida Tecnolgico, Col. Maravillas, Puebla CP 72202, Puebla. letyram@unam.mx La generacin de residuos representa una gran problemtica ambiental en todo el mundo, es por eso que a travs del tiempo se han ido creando diversos mtodos de tratamiento y/o disposicin final. Actualmente, los ms empleados a nivel mundial son, por orden de aparicin, los rellenos sanitarios, la incineracin, el reciclaje y el composteo. Los rellenos sanitarios son la forma ms utilizada para disponer la basura en nuestro pas, por lo que existen millones de toneladas de basura confinadas bajo el subsuelo nacional que, en menor o mayor grado, estn emitiendo gases a la atmosfera y lixiviados hacia el subsuelo; lo anterior representa riesgos potenciales que van desde incendios hasta contaminacin de los acuferos. De acuerdo al Programa Institucional 2005-2011 de la SEMARNAT del Estado de Puebla, hasta 2004, en Puebla (con una poblacin de 5.5 millones de habitantes) se generaban un promedio de residuos slidos de 4670 ton/da. En el Estado existen 15 rellenos sanitarios (planendose la construccin de otros 7), que slo atienden al 62% de la poblacin, confinando slo el 55% de los residuos generados, sin tener un control sobre el porcentaje restante. Asimismo, del total de 217 municipios, slo 55 depositan en rellenos. Los datos anteriores nos muestran la necesidad de un verdadero programa de gestin de basura en el Estado para evitar la construccin de ms rellenos y aumentar la vida til de los existentes, pudindose aprovechar los residuos orgnicos e inorgnicos. Este trabajo presenta la integracin de las estrategias de composteo y digestin anaerobia para el manejo de los residuos slidos orgnicos, los cuales representan el 50% de los residuos slidos totales. Se disearon y construyeron prototipos de composteo con aireacin forzada y lombricomposteo de 1 tonelada, as como un digestor anaerobio de 900 litros, los cuales se encuentran actualmente en proceso de evaluacin. Los prototipos cuentan con sistemas de monitoreo ya que el estudio sistemtico y detallado de estos procesos y su posible acoplamiento en casos especficos disminuir el empirismo con el que se han manejado. El conocimiento generado constituir una base para la gestin integral de los residuos slidos orgnicos de nuestro pas.
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CT-BA-71 REMOCIN DE PLOMO Y CADMIO DE SOLUCIONES ACUOSAS POR BIOSORCIN EN ASERRN DE PINO Corts Martnez Ral1, Hidalgo Vzquez Aura Roxana2, Martnez Flores Hctor Eduardo1, Corts Penagos Consuelo de Jess1 Facultad de Qumico Farmacobiologa. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Tzintzuntzan 173 Col. Matamoros, Morelia, Michoacn, Mxico. 2 Instituto de Investigaciones Qumico Biolgicas. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Edif. B1, CU, Morelia, Michoacn, Mxico. raulcortesmtz@gmail.com La contaminacin del agua por metales pesados como el cadmio y plomo, entre otros, es uno de los problemas ambientales ms severos, debido a que stos provienen de los desechos acuticos de varios sectores industriales. Dichos metales se acumulan en los organismos vivos causndoles enfermedades y desrdenes en su funcionamiento, e incluso pueden llegar a introducirse en la cadena trfica. Por ello, es importante desarrollar e implementar tecnologas de tratamiento que sean eficientes y econmicamente factibles para su remocin de las aguas de desecho. El proceso de biosorcin, utilizando biosorbentes de bajo costo a partir de desechos agroindustriales puede ser efectivo para combatir este problema. El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad de retencin de metales pesados de residuos provenientes del aprovechamiento de la madera, aserrn de pino, habilitndolo como biosorbente en operaciones de adsorcin para el tratamiento de aguas con altos contenidos de metales. Para llevar a cabo lo anterior, se colect el aserrn de pino y se someti a un pretratamiento para eliminar impurezas; posteriormente, se seleccion un tamao de partcula apropiado (1mm) para la realizacin de los experimentos de adsorcin. Las pruebas de adsorcin se realizaron mediante experimentos de contacto tipo lote con soluciones de cadmio y plomo y muestras de dicho biosorbente, agitando a 120 rpm a diferentes tiempos de contacto y concentraciones de la solucin, para as obtener los datos de cintica y equilibrio (isotermas) de biosorcin en cada uno de los sistemas metal-biosorbente en particular. Las soluciones sobrenadantes se analizaron para cada uno de los metales por espectrofotometra de absorcin atmica. Cabe mencionar, que estos experimentos se realizaron a diferentes temperaturas de la solucin acuosa para determinar el efecto de este parmetro en la biosorcin. En cada una de las cinticas de biosorcin se observ que la cintica es muy rpida, ya que ms del 80% de la adsorcin se lleva a cabo en los primeros 5 minutos de contacto, y se alcanza el equilibrio en aproximadamente 10 min. Asimismo, se observ una mayor afinidad por el Pb en comparacin con Cd en las isotermas de biosorcin. Se puede concluir que los residuos del procesamiento de la madera (aserrn de pino) tiene el potencial para ser utilizados de manera altamente eficiente como adsorbentes en procesos de tratamiento por biosorcin de metales pesados de aguas contaminadas.
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CT-BA-72 ANALISIS DEL SAUCE LLORON EN SUELO CONTAMINADO CON DIESEL Bayona Tosca Ricardo, Gorgorita Soberano Johana del Carmen, Romellon Cerino Mario Jos, Guzman Lopez Isela Magali, Hernndez Hernndez Mercedes, Mendoza de la Cruz Manuel, Perez Barahona Diana Arlyne Instituto Tecnologico de Villahermosa. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 chicapoderosa_a@hotmail.com Es conocida la capacidad del Sauce llorn de sobrevivir en suelos contaminados con hidrocarburos e incluso se pueden usar como barrera protectora por su capacidad de recircular agua y transpirarla por los poros de sus hojas; capacidad que se aprovecha para tratar suelos contaminados por hidrocarburos. El propsito de este proyecto es observar en que porcentaje de suelo contaminado por diesel es capaz de sobrevivir el Sauce llorn. Se prepararon cubetas con suelo contaminado con diesel al 25%, 30%, 35% y 40%; adems de una cubeta testigo. A cada cubeta se le sembr un rbol de Sauce llorn, los cuales se procuraron fuesen del mismo tamao. El Sauce llorn con 25% de diesel se puso triste durante los primero das y sus hojas se tornaron amarillas, los dems Sauces se empezaron a marchitar de forma completa. El Sauce llorn de la cubeta testigo es el primero que empez a retoar con sus hojas nuevas. Pasado los primeros 10 das de iniciado el proyecto los Sauces llorn en suelo contaminado con 25%, 30% y 35% presentaron signos de hojas nuevas (retoos), el Sauce llorn en la cubeta con 40% empez a retoar a pasados los 25 das. Se observa un crecimiento lento en todos los Sauces llorn sembrados en suelo contaminado con el diesel pero hasta ahora han logrado sobrevivir los arboles y su talle no ha disminuido, estos tienen una altura promedio de un metro. El Sauce llorn aun joven puede usarse para la fitoremediacin.
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CT-BA-73 BIODEGRADACIN DE BPCS ALTAMENTE CLORADOS Y SUS DERIVADOS (NH2)X-BPCS UTILIZANDO CONSORCIOS MICROBIANOS AISLADOS DE MATRICES AMBIENTALES Robles Martnez Hctor Alfredo1, Nevarez Morillon Guadalupe Virginia2, Cuevas Rodrguez Germn3
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Unidad Acadmica de Ingeniera 1, Universidad Autnoma de Zacatecas. Facultad de Ciencias Qumicas, Universidad Autnoma de Chihuahua. 3 Facultad de Ingeniera Civil, Universidad de Guanajuato. ianwsz@gmail.com
Este trabajo de investigacin se enfoca principalmente en la eliminacin de residuos industriales peligrosos con altos contenidos de bifenilos policlorados (BPCs). Para ello, se implement un procedimiento mediante el cual aceites dielctricos con BPCs y triclorobencenos (TCBs) fueron aminados. Esta modificacin permiti su biodegradacin promovida por microorganismos aislados de matrices ambientales. La aminacin de estos aceites dielctricos se llevo a cabo con un tratamiento qumico consistente en una induccin de grupos nitro a las molculas presentes en los aceites mediante la tcnica de mezcla cida propuesta en Gorbunova et al., (2001) y una posterior reduccin del grupo nitro al grupo amino utilizando el mtodo de reduccin de Bellamy F.D., Ou K., (1984). Con los aceites dielctricos industriales y sus derivados aminados, utilizando una tcnica de enriquecimiento selectivo, fueron aislados de suelos contaminados con aceites y aguas residuales consorcios microbianos capaces de tolerar y/o degradar a esos compuestos. Estos aceites dielctricos industriales y sus productos aminacin fueron tratados con los microorganismos aislados de matrices ambientales en ensayos de degradacin biolgicos. Estas pruebas revelaron que el aceite dielctrico industrial altamente clorado no es degradado por influencia de microorganismos, en tanto que los productos de su aminacin se degradaron por influencia microbiana en porcentajes mayores al 54 %.
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CT-BA-74 INFLUENCIA DEL NITRGENO SOBRE LA MIGRACIN DE ATRAZINA EN SUELO Guilln Garcs Rosa Anglica1, Hansen Anne M.2, Van Afferden Manfred2
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Universidad Politcnica del Estado de Morelos Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua Boulevard Cuauhnhuac #566, Col. Lomas del Texcal, Jiutepec, Morelos. CP 62550 / Tels/fax (777) 229 35 33 aguillen@upemor.edu.mx
La atrazina es un herbicida ampliamente usado para eliminar hierba de hoja ancha en cultivos de maz, sorgo, caa de azcar, frijol, soya, pia, pltano, entre otros. Debido a sus caractersticas fisicoqumicas, movilidad y persistencia en el ambiente, a nivel mundial se ha considerado un contaminante orgnico persistente, prohibiendo y restringiendo su uso en pases de la Unin Europea, Canad y Estados Unidos. Sin embargo, en pases de Asia, frica y Latinoamrica, el uso de atrazina no est restringido ni prohibido. Se ha determinado que la atrazina es fuente de nitrgeno para los microorganismos, por lo que la presencia de fertilizantes nitrogenados en el suelo, inhibe la mineralizacin de este herbicida, proceso importante en la disipacin y migracin de este herbicida en el ambiente. Hasta este momento, slo se ha determinado que la inhibicin del proceso de biodegradacin de atrazina se debe a la presencia de fuentes de nitrgeno alterna, sin tener en cuenta el grado de concentracin de nitrgeno. Por tanto, el presente trabajo, tiene como objetivo principal evaluar la influencia de diferentes concentraciones de nitrgeno, incluyendo las similares e inferiores a -1 la recomendacin de aplicacin en campo que van desde 120 a 250 kg de N ha , sobre la migracin de atrazina en suelos de zonas tropicales de Mxico.
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CT-BA-75 CINTICA DE BIOSORCIN DE FLUORUROS CON RESIDUOS DE GUAYABA (Psidium guajava) Y TAMARINDO (Tamarindus indica) EN SOLUCIONES ACUOSAS Alfaro Cuevas Villanueva Ruth1, Valencia Leal Selene Anaid1, Orantes valos Julio Csar1, Corts Martnez Ral3
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Instituto de Investigaciones Qumico Biolgicas. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Edif. B1, CU, Morelia, Michoacn, Mxico. 2 Facultad de Ingeniera Civil. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Edif. C, CU, Morelia, Michoacn, Mxico. 3 Facultad de Qumico Farmacobiologa. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Tzintzuntzan 173 Col. Matamoros, Morelia, Michoacn, Mxico. racv11@gmail.com
El agua es uno de los compuestos esenciales para la subsistencia de todas las formas de vida; sin embargo, su disponibilidad para el consumo humano es limitada. Aunado a ello, la calidad con que stas son suministradas a la poblacin, son un factor de riesgo para la salud. Particularmente, la contaminacin por fluoruros (F-) disueltos en agua subterrnea destinada al consumo humano es un problema epidmico en el mundo, ya que varios pases han reportado la severidad de la ingestin de agua con fluoruros, entre ellos Mxico. La normatividad nacional e internacional recomiendan una concentracin mxima para los fluoruros en agua potable de 1.5 mg/L, aunque el actualmente se est considerando reducir an ms este lmite por sus efectos nocivos. Por ello, es importante desarrollar e implementar tecnologas de tratamiento que sean eficientes y econmicamente factibles para su remocin de las aguas. El proceso de biosorcin utilizando biosorbentes de bajo costo a partir de desechos agroindustriales puede ser efectivo para combatir este problema. El objetivo de este trabajo fue evaluar la cintica de remocin de fluoruros de soluciones acuosas con residuos provenientes de productos agrcolas, con el propsito de habilitar dichos residuos como biosorbentes en operaciones de adsorcin para el tratamiento de aguas con concentraciones elevadas de fluoruros. Para llevar a cabo lo anterior, se colectaron semillas de guayaba y cscaras de tamarindo provenientes de una industria productora de dulces a base de pulpas de frutas y se sometieron a un pretratamiento para eliminar impurezas; posteriormente, se seleccion un tamao de partcula apropiado (1mm aprox.) para la realizacin de los experimentos de cintica de adsorcin. Estas pruebas se realizaron mediante experimentos de contacto tipo lote con soluciones de fluoruros a 5 mg/L y muestras de cada biosorbente, agitando a 60 y 100 rpm y a diferentes tiempos de contacto, para as obtener los datos de cintica de biosorcin en cada uno de los sistemas en estudio. Las soluciones sobrenadantes se analizaron por el mtodo potenciomtrico para fluoruros. Los resultados mostraron que la cintica es rpida, ya que casi el 80% de la adsorcin se lleva a cabo en los primeros 25 minutos de contacto, y se alcanza el equilibrio aproximadamente a los 60 min. Asimismo, se observ una mayor afinidad de los residuos de tamarindo por los fluoruros comparando con las semillas de guayaba. Los datos experimentales fueron ajustados a diferentes modelos empricos de cintica reportados en la literatura, indicando que la cintica de biosorcin de fluoruros en estos materiales puede ser descrita por el modelo de pseudo segundo orden, indicando tambin que el posible mecanismo de retencin de fluoruros es la quimisorcin.
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CT-BA-76 AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE CEPAS FNGICAS DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS Anaisell Reyes Cesar, Absaln ngel, Corts-Espinosa Diana V. CIBA-IPN Tlaxcala. Carretera estatal Tepetitla de Lardizabal- Santa Justina Ecatepec Km 1.5 CP 90700, Tepetitla de Lardizabal, Tlaxcala, Mxico Tel: +52 (55)57296000 Ext. 87805 dcortes@ipn.mx Los hidrocarburos aromticos policiclicos (PAHs) son compuestos formados por dos o ms anillos bencnicos, son producidos por fuentes naturales pero principalmente por actividades antropognicas relacionadas a la extraccin, la transformacin y transporte del petrleo. El impacto ambiental de este tipo de compuestos, principalmente en suelos y sedimentos se debe a que son altamente recalcitrantes, poseen un alto potencial de bioacumulacin por su baja solubilidad y han sido catalogados como carcinognicos y genotxicos. La biorremediacin es una tecnologa que se ha desarrollado para la recuperacin de sitios contaminados a travs de sistemas enzimticos producidos por microorganismos, tales como bacteria, hongos y actinomicetos. Para acelerar los procesos de biorremediacin se usa la bioumentacin que consiste en agregar al sistema de remediacin, microorganismos seleccionados por su capacidad de degradar compuestos txicos, estos son previamente acondicionados para asegurar su permanencia dentro del sistema de remediacin sin ser desplazados por los microorganismos autctonos del suelo. Por sus caractersticas de producir enzimas extracelulares en cultivo slido, los hongos se han considerado como una alternativa para ser aplicados como aceleradores de procesos de biorremediacin de suelos. Los hongos de pudricin blanca producen sistemas enzimticos que tienen la caracterstica de oxidar una gran gama de compuestos armaticos tales como los PAHs, pero debido a que su hbitat natural es la madera en descomposicin son inhibidos en suelo por la microflora autctona. Por lo que es importante contar con hongos aislados de suelos contaminados que tengan la capacidad de crecer y degradar altas concentraciones de compuestos txicos tales como los PAHs para que sirvan como aceleradores. Por lo que el objetivo de este trabajo consiste en aislar e identificar cepas fngicas de suelos contaminados con petrleo crudo para su aplicacin en sistemas de biorremediacin de suelos. El muestreo se llevo a cabo a diferentes profundidades de suelo en medio YPG y Czapek ambos con una concentracin de 100 g/mL de ampicilina. El aislamiento primario se realizo en medio mnimo y YMG con petrleo crudo para seleccionar a los hongos. La purificacin de las cepas se llevo a cabo en PDA y EMA. Para la identificacin de las cepas aisladas se realizaron microcultivos y por la tcnica de ITS, para lo cual se hizo extraccin de DNA de cada cepa y con cebadores especficos se amplificaron por PCR los fragmentos correspondientes a una regin conservada 18s. Se aislaron 37 cepas fngicas cuyo microcultivo indico la presencia en su mayora del gnero Aspergillus, Neurospora y Penicillium para complementar la identificacin el alineamiento de las secuencias ITS obtenidas sirvieron para identificar las cepas hasta su especie, siendo algunas: Aspergillus terreus, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus, Talaromyces spectabilis y Scedosporium apiospermum entre otras.
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CT-BA-77 EVALUACIN DE LA CAPACIDAD REMOCIN DE CROMO (VI) EN CULTIVOS EN LOTE POR BIOPELICULAS BACTERIANAS EN TEZONTLE Concha Guerrero S. I., Pin Castillo H. A., Martnez Palacios C. E., Gutirrez Corona J. F., Reyna Lpez G. E. Divisin de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Biologa, Universidad de Guanajuato. Apartado Postal 187, Guanajuato, Gto., C.P. 36000, Mxico. Telfono: (473)7320006 Ext. 8177, Fax: (473) 7320006 Ext.8153, reinalg@quijote.ugto.mx En Guanajuato existen varias industrias que generan desechos con elevados contenidos de cromatos, como la del cromado y la del curtido; en estos sitios existen comunidades microbianas que han desarrollado capacidades extraordinarias para permanecer en estos ambientes, las que podran usarse para establecer un sistema de limpieza de los desechos. Se ha descrito que la formacin de biopelculas confiere una mayor resistencia a los microorganismos cuando son expuestos a contaminantes [1]. Las biopelculas son comunidades celulares de microorganismos, embebidas en una matriz polisacrida altamente hidratada, adherida sobre superficies biolgicas o inertes y comunicadas con el exterior mediante canales de agua. [2] En el grupo de trabajo contamos con varias cepas bacterianas, resistentes a Cr(VI), y con capacidad para formar biopelculas. Conocemos que en una de estas cepas la resistencia a Cr(VI) es mayor cuando forma biopelculas que cuando se encuentra como clulas planctnicas. Por ello hemos realizado experimentos para determinar la capacidad de esta cepa para remocin de Cr(VI) en cultivos en lote, la viabilidad celular despus de ser expuestas a diferentes concentraciones del contaminante, adems de determinar si el proceso por el cual reduce cromo lo hace por transformacin o por adsorcin. Mostraremos tambin los resultados de un diseo experimental con el uso de tezontle recubierto con las biopelculas para el tratamiento de efluentes contaminados con cromatos. Presentaremos los datos que confirman que la bacteria con la que trabajamos pertenece al gnero Pseudomonas, puede resistir hasta 300 ppm de Cr(VI) cuando se encuentra como biopelcula y reduce 100 ppm en 36 h. [1]. Donlan R.M. y Costerton J.W. 2002. Biofilms survival mechanisms of clinically relevant microorganisms. Clin. Microbiol. Rev. 15:167-193. [2]. Pin-Castillo H. Tesis doctoral en proceso.
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CT-BA-79 EFECTO DE LA CONCENTRACIN DE TWEEN 80 SOBRE LA BIODEGRADACIN DE HIDROCARBUROS DE PETRLEO PRESENTES EN UN SUELO MINERO CONTAMINADO Cisneros de la Cueva Sergio1, Lpez Miranda Javier1,2, Medrano Roldn Hiram1, Soto Cruz Nicols Oscar1, Sols Soto Aquiles1 1 Instituto Tecnolgico de Durango. Blvd. Felipe Pescador 1630 Ote. COL. Nueva Vizcaya. Cp 34080, 2 Durango, Dgo. jlopez@Itdposgrado-bioquimica.com.mx efs_76@yahoo.com.mx Efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de hidrocarburos de petrleo presentes en un suelo minero contaminado INTRODUCCIN Entre los procesos de biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos de petrleo se encuentra la bioestimulacin de la microflora autctona nativa asistida por surfactantes( Prince, 2002). Los surfactantes se utilizan para incrementar la solubilidad de los contaminantes orgnicos hidrofbicos como hidrocarburos de petrleo (HTPs). El Tween 80 posee una baja CMC (concentracin micelar critica) lo que permite la formacin de micelas a bajas concentraciones de surfactante, el cual puede ser absorbido por el suelo y degradado por los microorganismos mejorando as la degradacin de los hidrocarburos (Ghosh 1997).El presente estudio tiene por objetivo determinar el efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de hidrocarburos de petrleo presentes en un suelo minero contaminado MATERIALES Y MTODOS Se utilizo un suelo minero contaminado con 33616,17 ppm de hidrocarburos de petrleo, proveniente de la unidad minera San Antonio ubicada en Tayoltita Municipio de San Dimas en Durango. el cual fue colocado en columnas de 50 cm de altura y 14 cm de diametro en donde se determino el efecto del Tween 80 probando diferentes concentraciones 2%,1.5%,1%, 0.5% y 0. Para cada tratamiento se mantuvieron las siguientes condiciones de proceso: pH = 7, incorporacin de aire al medio (1vvm ) ,agregar Hexadecano al 1% manteniendo estas condiciones por un periodo de 60 das. Los datos obtenidos se analizaron por el procedimiento de ANDEVA con el software statitica versin 6.0. RESULTADOS Se alcanz un porcentaje de remocin de hidrocarburos de 32%, este fue para el tratamiento que tenia una concentracin de Tween 80 de 0,5% as como tambin se observo que el tratamiento al cual no se aadi Tween 80 tambin presento un buen porcentaje de remocin de hidrocarburos siendo este de 26.5%.De acuerdo a los resultados anteriores, la eficiencia Tween 80 es mayor a bajas concentraciones que a altas concentraciones esto se debe a que el Tween 80 por tratarse de un surfactante, altas concentraciones puede daar las paredes celulares de microorganismos (Ghosh 1997). CONCLUSIONES La adicin de Tween 80 en bajas concentraciones aumenta la solubilidad de los hidrocarburos en la fase lquida y la adhesin de las bacterias a la superficie hidrofbica del suelo. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 1. Prince Roger C. 2002. Encyclopedia of Environmental Microbiology. 2. Ghosh, M. M. 1997 .Kinetic considerations in surfactant-enhanced bioavailability of soil-bound PAH. 2:575-580.
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CT-BA-80 EVALUACIN DE LA TOXICIDAD DE RIPIOS DE PERFORACIN CON LA MICROALGA MARINA Chaetoceros sp (BACILLAROPHYCEAE) Hernndez Vanesa, Pereira Carlos, Pea Carolina PDVSA Intevep, Los Teques, estado Miranda, Venezuela Gerencia Funcional de Ambiente e Higiene Ocupacional hernandezve@pdvsa.com Las actividades petroleras en reas costa afuera generan gran cantidad de ripios de perforacin, los cuales podran ser liberados al ambiente de forma accidental, ocasionando impactos negativos sobre los organismos marinos. Uno de estos impactos lo produce la fraccin soluble de los fluidos y ripios de perforacin, cuando son preparados con base en agua de mar. Para evaluar este efecto, se seleccion a una especie de Chaetoceros sp, tpica de los ecosistemas marinos de Venezuela, en los cuales se realizan actualmente operaciones de exploracin y produccin de hidrocarburos y gas. En este trabajo, se seleccionaron ripios de perforacin provenientes de diferentes estratos o formaciones geolgicas de dos pozos ubicados en la costa oriental del estado Sucre. Fue evaluada la fraccin soluble de los ripios (WSF, por sus siglas en ingls), preparada segn lo establecido en el Cdigo Federal de Regulaciones de Estados Unidos de Norteamrica (Seccin 40, Parte 435), mediante el mtodo descrito en la norma ISO 10253. La sensibilidad de la microalga frente a cromo VI fue evaluada y comparada con presentada por la especie Skeletonema costatum en las mismas condiciones de experimentacin. Como resultado, se obtiene que las fracciones solubles de todos los ripios evaluados presentan ausencia de toxicidad (Grado 0 en la escala de toxicidad del GESAMP para el ambiente marino) con esta especie (EC50 > 1000 mg/L) y por lo tanto se predice un bajo riesgo ambiental para los organismos de la columna de agua de estos ecosistemas. Palabras Clave: Chaetoceros sp., fluidos de perforacin, toxicidad, costa afuera
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CT-BA-81 ALGAS VS BACTERIAS GENTICAMENTE MODIFICADAS EN LA REMOCIN DE Pb Y Cd Almaguer Cant Veronica1, Morales Ramos Lilia H.1, Arevalo Nio Katiushka1, Garza Gonzlez Ma.Teresa2 L1,Intituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL, Ave. Barragn s/n, Cd. Universitaria, C.P. 66451 San Nicols de los Garza, N.L., Mxico. 2 Laboratorio de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL, Ave. Pedro de Alba s/n, Cd. Universitaria, C.P. 66451 San Nicols de los Garza, N.L., Mxico veroalcan@yahoo.com.mx La contaminacin causada por metales pesados es uno de los problemas ambientales ms severos por lo que es necesario encontrar una solucin a este importante problema. El presente trabajo est basado en las nuevas tecnologas de fcil implementacin y adaptacin para la recuperacin de metales en solucin, el cual compara dos sistemas diferentes para la remocin de Pb(II) y Cd(II) uno de ellos utilizando biomasa del alga Chlorella sp inmovilizada en alginato de calcio y el otro la biomasa de la bacteria E. coli modificada genticamente con el gen de la metallotionena I de ratn (pMt-Thio) tambin inmovilizada en alginato de calcio para aumentar la capacidad de remocin trabajando por lotes. Las cinticas de remocin, la capacidad de sorcin y porcentajes de remocin fueron determinados. La influencia de la concentracin del metal fue analizada en trminos de los modelos matemticos descritos por Langmuir y Freundlich. La capacidad de sorcin aumento conforme se aumento la concentracin del metal en solucin. Para las solucin que contiene 300 mg/L de metal, se observa que la capacidad de sorcin fue 94.9411.094 mgCd/gChlorella., 24.0762.292 mgCd/gpMtThio y 239.172.478 mgPb/gChlorella, 37.9524.245 mgPb/gpMt-Thio. Se encontr que el modelo de Langmuir es el que mejor ajusta a los datos experimentales. Las constantes de Langmuir para Chlorella sp. fueron qmax=285.72(mgPb/g), b=0.0276(l/mgPb), qmax=103.65(mgCd/g) y b=0.0005(l/mgCd) mientras que para pMt-Thio fueron qmax=28.141(mgPb/g), b=0.113(l/mgPb), qmax=24.272(mgCd/g) y b =0.019(l/mgCd). La biomasa del Alga muestra tener mayor capacidad de sorcin que la biomasa bacteriana a pesar de la modificacin gentica. Este estudio demuestra que la biomasa del alga Chlorella sp alcanza eficiencias mayores al 90% en la remocin de Pb(II) y mayores al 75% en Cd(II) comparada con el nuevo sistema de ingeniera gentica basado en la exaltacin de la capacidad de remocin de E. coli, por lo que la biomasa del alga Chlorella sp. puede ser considerada como un biomaterial efectivo para la recuperacin de metales en solucin.
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CT-BA-82 ALGAS INMOVILIZADAS UTILIZADAS COMO BIOSORBENTES DE METALES PESADOS Almaguer Cant Vernica1, Garza Gonzlez Ma. Teresa2, Saenz Tavera Isabel del Carmen3, Lian Montes Adriana3 Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL. Laboratorio de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL. 3 Laboratorio de Anlisis Instrumental, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL. veroalcan@yahoo.com.mx
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La mayor parte del desarrollo industrial en el norte del pas tiene que ver con actividades de la industria metal-mecnica en las cuales el uso de aleaciones metlicas son materia prima de dichas actividades. Este tipo de actividad demanda un uso excesivo de metales pesados en todos sus procesos, por lo que la recuperacin de metales de sus aguas de desecho ha abierto un amplio panorama de estudio para las tecnologas ms amigables con el ambiente, tal es el caso de la biosorcin de metales utilizando biomateriales que tengan la capacidad de atrapar los iones metlicos de soluciones acuosas. En este mbito las algas, al ser microorganismos acuticos, ofrecen una potencial contribucin a la remocin de metales en solucin. En este estudio se presenta un anlisis comparativo del uso de dos diferentes algas, Chlorella sp. y Spirulina sp., ambas fueron aisladas de efluentes contaminados, para la biosorcin de plomo (II) y cadmio (II). El sistema de sorcin que se trabajo para ambas fue inmovilizando su biomasa en alginato de calcio al 3 % y se realizaron cinticas de adsorcin en sistema por lotes donde las condiciones de operacin fueron pH ligeramente cido (56) y temperatura de 25 Adems se realizaron las isotermas de adsorcin variando la concentracin C. inicial de 0 a 500 mg/L de cada metal. Los resultados obtenidos en la cintica de adsorcin ajustan a una cintica de segundo orden lo cual comprueba el fenmeno de transferencia de masa. Mientras que las isotermas de adsorcin ajustan al modelo matemtico descrito por Langmuir que se fundamenta en una adsorcin formando una monocapa. Los valores de capacidad de adsorcin mxima para Chlorella sp. en la sorcin de cadmio fue de 103.65 mg/g y para plomo fue de 285.72 mg/g, mientras que para Spirulina sp. en la sorcin de cadmio fue de 156 .25 mg/g y para plomo fue de 294.18 mg/g. A partir de estos resultados se puede corroborar que las algas son un sistema potencial y de bajo costo para su aplicacin en la remocin y recuperacin de metales pesados.
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CT-BA-83 FORMACIN, IDENTIFICACIN Y DESARROLLO DE UN CONSORCIO BACTERIANO PARA DEGRADACIN DE HIDROCARBUROS EN SUELOS CONTAMINADOS POR EL DERRAME DE LA LNEA DE FLUJO DEL POZO SACHA 161 EN EL CANTN JOYA DE LOS SACHAS Erazo Roberto, Bravo Vernica, Serrano Pablo, Chvez Carlos, Veloz Nancy Centro de Servicios Tcnicos y Transferencia Tecnolgica Ambiental (CESTTA), de la Escuela Superior Politcnica del Chimborazo; Riobamba, Ecuador. celeste_veronica@hotmail.com Para realizar la remediacin del suelo petrolizado del pozo Sacha 161 en el cantn La Joya de los Sachas, en la Proviencia de Orellana, se opt por aplicar la tcnica de bioaumentacin en tratamientos de suelos desarrollando un consorcio bacteriano especfico para este sector. Muestras de suelo para anlisis microbiolgico, fueron tomadas del sitio afectado, las cuales fueron procesadas realizando siembras sucesivas en medios de cultivo hasta lograr el aislamiento de 30 cepas bacterianas, las que fueron sometidas a pruebas especficas para determinar sus caractersticas tiles para ser utilizadas en procesos de biorremediacin en suelos. La primera prueba aplicada fue la determinacin de actividad emulsificante donde nueve cepas bacterianas que dieron resultados positivos. La segunda prueba aplicada fue la determinacin de la actividad degradativa, donde ocho cepas dieron resultados positivos. Las cepas con resultados positivos en las dos pruebas anteriores fueron sometidas a un ensayo de antagonismo para determinar su crecimiento en armona o la existencia de alguna cepa inhibidora del crecimiento del resto. Como resultado de este anlisis, se obtuvieron tres cepas antagnicas que fueron descartadas pese a poseer caractersticas adecuadas para degradar hidrocarburos. Finalmente se realizaron pruebas de identificacin a las seis cepas que cumplieron con todas las caractersticas requeridas para formar un consorcio bacteriano. Los parmetros estudiados para lograr la identificacin fueron: motilidad, reaccin indol, licuefaccin de la gelatina, citrato, voges proskauer, rojo de metilo, catalasa, rea, oxidacin y fermentacin de la glucosa. Esto permiti determinar que las cepas bacterianas seleccionadas eran en su totalidad del gnero Bacillus y de las especies: circulans, subtilis, maceran y brevis. Las cepas bacterias descritas son propias de la ecologa de la zona donde se obtuvieron las muestras y adicionalmente no representan riesgos significativos para la salud de personas, animales o plantas pudindose inocular el consorcio bacteriano en el suelo contaminado de Sacha 161. Una vez obtenido el consorcio bacteriano se desarroll un proceso de fermentacin para obtener un inculo degradador para ser aplicado en los procesos de biorremediacin a gran escala. Se realizaron recuentos peridicos durante el proceso de masificacin del consorcio bacteriano donde se determinaron poblacines de 15*109 UFC/mL despus de 13 horas de fermentacin. Una vez aplicado el inculo en los tratamientos a escala productiva, pruebas de campo determinaron una poblacin bacteriana de 6*107 UFC/g. Las tasa de degradacin de hidrocarburos calculadas en los tratamientos estuvieron entre 46%/mes y 53%/mes y la degradacin total entre 74% y 97%.
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CT-BA-84 CINTICA DE LA BIODEGRADACIN DE PLAGUICIDAS DEL TIPO PIRETROIDE MEDIANTE BACTERIAS PSICRFILAS Perea Vlez Yazmin Stefani, Salvador Jaime Antonio, Silveti Loeza ngel, Martnez Gmez Miriam Araceli, Mendoza Hernndez Jos Carlos Benemrita Universidad Autnoma de Puebla jcharlymh@yahoo.com El estudio de la biodegradacin de los plaguicidas que es un proceso natural, cuya estrategia es la degradacin de un producto qumico o xenobitico por un organismo para su propia supervivencia, es de gran inters actualmente. La mayor parte de estos microorganismos trabajan en el ambiente natural pero algunas modificaciones en las condiciones ambientales, sustratos o variabilidad gentica pueden ayudar a que los microorganismos degraden de manera ms eficaz el plaguicida en un tiempo menor. Las bacterias de Pseudomonas sp. , Burkhordelia sp., Acinetobacter sp., se propagaron en caldo Luria Bertani por 24 h a una temperatura de 20 C. El crecimiento bacteriano de cada cepa se ajust con buffer de fosfatos para obtener una densidad ptica de 0.2 de Absorbancia a 600 nm equivalente 6 aproximadamente a 110 clulas/ml. Para la degradacin de plaguicidas con clulas planctnicas se colocan aproximadamente 2x106 bacterias/ml por cada 8 mL de medio mineral conteniendo 50 ppm de plaguicida (permetrina o cipermetrina) incubndolas a 20 Despus de la inoculacin se realizaron C. mediciones cada 5 das para realizar la cintica de biodegradacin de los plaguicidas, centrifugando la muestra a 13000 rpm durante 15 minutos para realizar la lectura espectrofotomtrica del sobrenadante mediante espectrofotometra UV/vis a 219.1nm para la cipermetrina, y a 220.5nm para la permetrina. Se realiz una cintica de crecimiento a partir de la biomasa mediante espectrofotometra UV/Vis a 600nm. As mismo se realiz un anlisis del sobrenadante mediante espectrofotometra de IR. Los resultados indican que en un periodo de 20 das la biodegradacin del plaguicida permetrina fue del 95% para las cepas de Burkhordelia sp., y del 90% para Pseudomonas sp., y Acinetobacter sp., mientras que para el plaguicida cipermetrina la biodegradacin que mostraron las cepas de Burkhordelia sp., fue del 90%, y para las cepas de Pseudomonas sp., y Acinetobacter sp. fue el 85%. Para ambos plaguicidas las cepas presentaron un aumento en el crecimiento, indicando que son capaces de usar a los plaguicidas de tipo piretroide (permetrina y cipermetrina) como nica fuente de carbono a temperatura ambiente, en cortos periodos de tiempo. Lo anterior nos sugiere que estas cepas pueden ser usadas en procesos de biorremediacin de aguas contaminadas con estos tipos de plaguicidas, sin invertir en fuentes de energa adicionales para realizar este proceso.
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CT-BA-85 REMEDIACION DE SUELOS CONTAMINADOS CON ACEITE AUTOMOTRIZ POR INYECCION DE VAPOR Y COMPOSTEO Rodriguez Garcia Angel, Tebar Hernandez Eduardo David, Romellon Cerino Mario Jose, Medina Cano Julian Aihezer, Sanchez Salazar Hugo Enrique, Mayo De La Cruz Francisco Instituto Tecnologico de Villahermosa. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 anita1004_chapis@hotmail.com Los talleres mecnicos establecidos en los municipios de nuestro pas no cuentan con un adecuado tratamiento o disposicin final del aceite automotriz usado que se recupera en el mantenimiento que se les da a los automviles. Debido a esto se estn contaminando cuerpos de agua y suelos a lo largo del pas. La bsqueda de tecnologas baratas, amigables con el ambiente y de fcil acceso nos llevo a la realizacin de este proyecto. El objetivo general es desarrollar una tcnica de remediacin similar en efectividad a las utilizadas con equipos sofisticados. Para el desarrollo de este proyecto se emplearon 50 kilogramos de tierra negra con cascarilla de cacao y 10 litros de aceite automotriz recin vaciados del cambio de aceite de un automvil de un taller mecnico. Se mezclo la tierra negra con el aceite automotriz usado y se dejo reposar por 48 horas, se envi la muestra de suelo a analizar a un laboratorio para conocer la concentracin de hidrocarburo. Durante 15 das consecutivos se le inyecto vapor de agua por una hora al suelo contaminado, aproximadamente fueron 2 litros por da. Las siguientes 5 semanas solo se aireaba de forma manual por una hora para que la cascarilla de cacao se degradara de manera natural por accin de los microorganismos. La concentracin inicial de hidrocarburo fraccin pesada fue de 43130.38 ppm resultado obtenido segn el procedimiento de la EPA-1684A-1996/EPA 90718-1996, despus de 5 semanas de tratamiento la concentracin de hidrocarburo fraccin pesada es de 40670.87 ppm, lo cual nos indica una disminucin de 2459.51 ppm de contaminante. Estos resultados proyectan una remediacin total del suelo en aproximadamente 24 meses para cumplir con lo que establece la NOM-138-SEMARNAT/SS-2003, a un costo mnimo de tratamiento. La inyeccin de vapor a ayudado a que se separe parte del aceite automotriz usado del suelo y que las bacterias puedan metabolizarlo.
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Biotecnologa Algal
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OR-BL-1 CULTIVO DE MICROALGAS OBTENIDAS DE CUATRO CINEGAS COAHUILA, EN FOTOBIORREACTORES Toledo Cervantes Alma Lilia1, Morales Ibarria Marcia2, Revah Moiseev Sergio2 Departamento de Biotecnologa, Universidad Autnoma Metropolitana UAM-I Departamento de procesos y tecnologa, Universidad Autnoma Metropolitana UAM-C. Universidad Autnoma Metropolitana UAM-I. Av. San Rafael Atlixco N 186, Col. Vicentina, C.P. 09340, Mxico DF, Tel. 01(55)58046556 almatolecerv@hotmail.com almatolecerv@hotmail.com
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El objetivo general de esta investigacin fue caracterizar el crecimiento y la fijacin de CO2 en un fotobiorreactor de una comunidad de microalgas provenientes de Cuatro Cinegas, Coahuila. El fotobiorreactor utilizado fue una columna de burbujas que se ubic dentro de una cmara de fotoregulacin. El volumen de operacin fue de 2.5 L de medio BG11 que se inocul con 20% v/v de una solucin concentrada del cultivo. Se probaron flujos de la mezcla CO2-Aire de 0.8 y 0.4 vvm, a concentraciones del 5 y 10 % de CO2 v/v. Las intensidades de luz ensayadas fueron 54.7, 94.4 y 134 mol m-2 s-1. La comunidad inicial compuesta por microalgas de las divisiones Chlorophyta y Cyanobacteria se transform en un cultivo de predominancia Chlorophyta. Se identific morfolgicamente a la microalga ms abundante, la cual result pertenecer a la divisin: Chlorophyta, orden: Chlorococcales, familia: Coccomyxaceae, gnero: Ourococcus Grobety. Se obtuvieron concentraciones de biomasa de 6 g L-1 registrada cuando las condiciones fueron 134 mol m-2s-1, flujo de 0.4 vvm y CO2 al 5%v/v. La mxima CE registrada fue 51.2 g L-1 d-1, a un flujo de 0.8 vvm, CO2 al 10%v/v y 94.4 mol m-2s-1. Las tasas de fijacin de CO2 (PCO2) y la productividad mxima (Pmax) obtenidas en este estudio, con Ourococcus sp. fueron PCO2 de 0.92 y 0.517 g L-1 d-1, respectivamente, estos valores son mayores que los obtenidos por algunas especies de microalgas utilizadas en la remocin de CO2. Debido a que no se logr cerrar el balance de carbono es necesario continuar con las investigaciones, sin embargo algunos estudios han mostrado que solo una pequea fraccin (~3%) del carbono capturado en los fotobiorreactores se recupera como biomasa, indicando la existencia de otras rutas de conversin de CO2 (Jacob-Lopes et al., 2009). Se realizaron extracciones de aceites en la biomasa obtenida y se determin que las microalgas contienen entre 20-30% de aceites en relacin a su peso seco, lo cual concuerda con lo reportado para otra especie de Ourococcus (27%) (Shifrin y Chisholm, 1981), por lo tanto se cree que puede tener potencial biotecnolgico para la obtencin de aceites. Jacob-Lopes E., Gimenes SC., Queiroz MI., Teixeira FT. 2009. Biotransformations of carbon dioxide in photobioreactors. New Biotechnology. 25:(1) s279. doi:10.1016/j.nbt.2009.06.631 Shifrin NS., Chisholm SW. 1981. Phytoplankton lipids: interspecific differences and effects of nitrate, silicate and light-dark cycles. J Phycol. 17:374-384.
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OR-BL-2 FISIOLOGA FOTOSINTTICA DE LA MICROALGA Dunaliella tertiolecta EXPUESTA AL HIDROCARBURO BENZO[A]PIRENO Velazquez Pech Luz Maria1, Guerra Rivas Graciela2, Cordero Esquivel Beatriz1, Garcia Mendoza Ernesto1
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CICESE (Centro de Investigacin Cientifica y de Educacin Superior de Ensenada). 2 Facultad de Ciencias Marinas-UABC (Universidad Autonoma de Baja California). radianthus@hotmail.com
El benzo [a] pireno es un hidrocarburo policclico aromtico (HPA) considerado como la novena sustancia ms txica debido a sus propiedades mutagnicas y carcinognicas; proviene de la combustin incompleta de la materia orgnica como resultado de la modificacin qumica de compuestos aromticos a altas temperaturas. Aunque se tiene informacin de las rutas de biodegradacin de una gran variedad de compuestos txicos, existe muy poca evidencia de los efectos que los HPA tienen sobre especies de fitoplancton marino. En este trabajo se evalu la eficiencia fotosinttica (Fv/Fm) de la microalga Dunaliella tertiolecta, durante su exposicin a diferentes concentraciones (3.0, 6.0, 9.0, 12.0 y 15.0 g/ml) de benzo [a] pireno y posteriormente, durante un periodo de recuperacin despus de haber removido el hidrocarburo. Se analiz la viabilidad y el contenido de clorofila a de la microalga despus de su exposicin a las diferentes concentraciones del HPA. Los resultados obtenidos indicaron diferencias significativas (P<0.01) de la eficiencia fotosinttica (Fv/Fm) de D. tertiolecta en los diferentes tratamientos (concentraciones y tiempos de exposicin al benzo[a]pireno). En los tratamientos control (microalga y microalga+acetonitrilo), se tuvieron intervalos de Fv/Fm entre 0.76 a 0.77, los tratamientos que marcaron las diferencias fueron aquellos con las concentraciones del HPA de 6 a 15 gml-1 a las 1.30 h de exposicin, con valores entre 0.745 a 0.756. En los ensayos de recuperacin, los tratamientos control (microalga y microalga+acetonitrilo) presentaron valores entre 0.721 a 0.812; todos los tratamientos con las diferentes concentraciones del HPA inician con valores entre 0.721 y 0.733, y alcanzan valores hasta de 0.824 de Fv/Fm (con 6,0 gml-1, a las 4 h de recuperacin). Se present una relacin inversamente proporcional del contenido de clorofila a con respecto a la concentracin del benzo[a]pireno.
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OR-BL-3 EVALUACIN DE LA BIOMASA DEL ALGA Chlorella sp. COMO BIOSORBENTE DE COLORANTES Garza Gonzlez Ma. Teresa1, Ordaz Alemn Roberto Carlos1, Martnez Tristn Alejandra1, Senz Tavera Isabel del Carmen2, Soto Regalado Eduardo3, Cerino Crdova Felipe de Jess Laboratorio de Biotecnologa, FCQ-UANL Laboratorio de Anlisis Instrumental, FCQ-UANL 3 Laboratorio de Ingeniera Qumica, Facultad de Ciencias Qumicas Universidad Autnoma de Nuevo Len. Ciudad Universitaria, San Nicols de los Garza, Nuevo Len. CP 66400, Mxico. tgarza@fcq.uanl.mx
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En el presente trabajo se estudi la biomasa de Chlorella sp. como material biosorbente del colorante azul de metileno a partir de disoluciones acuosas sintticas. Se determinaron las mejores condiciones de remocin de azul de metileno mediante un diseo de experimentos factorial variando tres parmetros (concentracin de biomasa, temperatura y pH) en tres niveles. La cintica de remocin se ajust a una reaccin de pseudosegundo orden. La capacidad mxima de remocin result ser de 2000 mg/g y la eficiencia de la recuperacin del colorante fue de 88%.
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OR-BL-4 EFECTOS COMBINADOS DE LA IRRADIANCIA, TEMPERATURA Y CONCENTRACIN DE NUTRIENTES SOBRE EL CRECIMIENTO, CONTENIDO DE LPIDOS Y PROTENAS DE DOS CEPAS DE Rhodomonas salina (WISLOUCH) HILL & WETHERBEE (1989) (Cryptophyta) Guevara Miguel1,2, Gmez Patricia I.1, Arredondo Vega Bertha O.3 Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas, Departamento de Botnica, Universidad de Concepcin, Casilla 160-C, Concepcin, Chile. 2 Instituto Oceanogrfico de Venezuela, Departamento de Biologa Pesquera, Universidad de Oriente. 6101. Venezuela. 3 Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste, S. C. (CIBNOR), Mxico miguevara2003@yahoo.es Esta investigacin evalu los efectos combinados de la irradiancia, temperatura y concentracin de nutrientes sobre el crecimiento y el contenido de lpidos y protenas de dos cepas de la criptofita Rhodomonas salina. Las microalgas se cultivaron de modo discontinuo durante 20 das, en medio f/2 a 33 de salinidad. Se utiliz un diseo factorial 25 con las siguientes variables: concentracin de nitrato [0,441 mM (N1) y 3,529 mM (N2)], concentracin de fosfato [0,018 mM (P1) y 0,144 mM (P2)], temperatura [19 y 29 irradiancia [100 mmol m-2 s-1 (baja irradiancia, BI) y 200 mmol m-2s-1 C C], (alta irradiancia, AI)] y las cepas de microalgas (CS-174 y CS-24). Los recuentos de clulas se realizaron cada 24 horas y los datos se utilizaron para la determinacin de los parmetros de crecimiento. Las protenas, lpidos totales y cidos grasos se analizaron durante la fase de crecimiento exponencial. Las cepas mostraron diferentes respuestas en la densidad celular mxima y en la acumulacin de lpidos totales y perfil de cidos grasos, cuando se sometieron a las mismas condiciones de cultivo. Sin embargo, para ambas cepas, los principales factores que influyeron en el crecimiento fueron las concentraciones de nitratos y fosfatos y la irradiancia. La tasa mxima de crecimiento especfico (K = 0,6 div das-1) se obtuvo con la condicin de N2-P2-AI. La densidad celular mxima mostr diferencias significativas entre los tratamientos (P <0,05), excepto entre las dos temperaturas. La cepa CS-174 cultivada bajo la condicin de N2-P2-AI mostr la mayor produccin de biomasa (4,5 x 106 clulas ml-1). El contenido de protenas en ambas cepas fue influenciado slo por las concentraciones de nitrato y fosfato, obtenindose los valores ms altos (aproximadamente 53%) en los cultivos con altas concentraciones de nitratos y fosfatos. Todos los tratamientos ensayados ejercieron influencia en el contenido de lpidos y cidos grasos de las cepas (P <0,05). El mayor porcentaje de lpidos (25,4%) y de los principales PUFAs (ARA, el 3,5%; la EPA, el 13,2% y el DHA, el 6,5%) se observaron en la cepa CS-174 cultivada en la condicin N1-P2-AI-19, siendo sta, la cepa de Rhodomonas salina ms adecuada para ser usada en la industria de la acuicultura.
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OR-BL-5 TRABAJOS CON CIANOBACTERIAS DE HOJAS DE Polylepis pauta DEL PRAMO DE PAPALLACTA, ECUADOR, A NIVEL DE LABORATORIO Espndola Andrs1, Moreno Mauricio1, Cruz Alejandra1, Naranjo Blanca, Koch Alma2 Ciencias de la Vida 1,2 CEINCI ESPE, Quito, Ecuador. molinadenisse_19@hotmail.com 1. REMOCIN DE ARSNICO. En el Ecuador, las aguas de acuferos o ros contaminadas con arsnico (sobre 10 g/L, norma ecuatoriana y OMS), proveen de agua potable a sectores urbanos. Se propone una alternativa para remover el arsnico mediante la utilizacin de un consorcio y una cepa axnica de cianobacterias a nivel de laboratorio, con el objetivo futuro de un biofiltro casero. Se aplic un arreglo con tres factores en un DCA, con tres tres pretratamientos a la biomasa: 92 autoclavado y ninguno. Se encontr que C, el consorcio autoclavado present 61.1% de remocin a partir de 100 g/L de arsnico y el Qmx ms elevado, 171.59 gAs/gCianobacteria adsorbidos. La prueba de toxicidad aguda con Daphnia pulex dio negativo. 2. REDUCCIN DE NITRGENO, FSFORO Y DQO. Se evalu la eficiencia de reduccin de nitrgeno amoniacal, fsforo total y demanda qumica de oxgeno (DQO), en agua residual sinttica y semi-sinttica utilizando una cepa de Nostoc sp. y un consorcio microbiano, inmovilizados en perlas de alginato de calcio. Tras 21 das, para el agua residual semi-sinttica, el cultivo inmovilizado present la mayor eficiencia de reduccin de nitrgeno y fsforo, 99%, mientras que para el agua residual sinttica no. La mayor reduccin de fsforo, 96%, fue observada en el cultivo inmovilizado del consorcio microbiano. Transcurridos 18 das, se observ en ambos cultivos, la reduccin de DQO, 72%, en el agua residual semi-sinttica y del 88% en agua residual sinttica. Las pruebas de toxicidad en Daphnia pulex fueron negativas. 3. USO FERTILIZANTE A NIVEL DE INVERNADERO, EN FRJOL Phaseolus vulgaris. Las cianobacterias fueron aplicadas al sustrato y a las hojas de plantas de frjol en macetas para aprovechar la fijacin de nitrgeno y la fuente de carbono. Se us semilla certificada, variedad INIAP418 JE-MA. Se aplic un DBCA tres factorial, ms tres adicionales. Las cianobacterias sobrevivieron dos semanas despus de su aplicacin. Fue mejor aplicar 40mL de cianobacterias que 20mL, de 7 x 7 10 cel/mL. Las cianobacterias promovieron mayor crecimiento de las plntulas de frjol, comparndolas con los tratamientos adicionales (agua destilada, fertilizante qumico, microorganismos), con mayor altura (40/26 cm en promedio) y rea foliar (31/19 cm en promedio), durante tres meses. El costo de los reactivos para la produccin de cianobacterias fue cinco veces menor que los del fertilizante qumico.
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OR-BL-6 CONSERVACIN EX SITU DE MICROALGAS Y SUS APLICACIONES POTENCIALES PARA LA BIOTECNOLOGA EN COSTA RICA Villalobos Narcy, Scholz Carola, Salazar Carlos Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Escuela de Ciencias Biolgicas, Universidad Nacional de Costa Rica. nvillalo@una.ac.cr Cuando se habla de microalgas, se hace mencin a microorganismos muy diversos que necesitan de compuestos como el CO2, agua y energa lumnica para realizar sus procesos metablicos. En este grupo se suele incluir a organismos como cianobacterias y algas verdes. Otro grupo importante a incluir dentro de las microalgas, son las diatomeas, las cuales han sido estudiadas en Costa Rica sobre todo como bioindicadores de contaminacin en cuerpos de agua dulce, influenciados por aguas de uso domstico. La conservacin de colecciones de microalgas, representa hoy en da un recurso muy importante, sobre todo a nivel biotecnolgico. En Costa Rica, se est iniciando una lnea de investigacin bien clara en lo referente a la biotecnologa de microalgas, la cual se ver enriquecida por este tipo de actividad. Investigacin con impacto en el ambiente y en la industria, son las que marcan el camino a seguir en esta rea. La Coleccin de Cultivos de Microalgas de la Escuela de Ciencias Biolgicas de la Universidad Nacional fue fundada en el ao 1986, sin embargo se cuenta con cultivos aislados desde 1981. En su mayora las microalgas provienen de suelos tanto vrgenes como agrcolas y cuerpos de agua dulce de todo el pas. Las tcnicas de aislamiento empleadas han sido variadas, pero todas han llevado al establecimiento de monocultivos identificados a nivel de gnero y algunas a nivel de especie. Entre algunos grupos representados estn las algas verdes en mayor proporcin, las cianobacterias y muy pocas microalgas amarillo-verdosas. Esta coleccin, a la fecha nica en nuestro pas, ha sido la base para diversos proyectos de investigacin as como a cursos tales como Biologa General, Botnica General, Biologa Comparada y otros. En estos momentos se cuenta con un proyecto en donde se estn aislando microalgas a partir de estanques de tilapia, con el fin de ampliar la coleccin y de su posterior aplicacin en biotecnologa ambiental. Debido a la importancia de esta actividad, en un futuro se pretende tambin iniciar con la caracterizacin en cuanto a su crecimiento en el laboratorio y a nivel molecular de las especies ms importantes a nivel biotecnolgico. Palabras clave: microalgas, coleccin, biotecnologa
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OR-BL-7 BIOFILTRACIN DE MICROALGAS CON ROTFEROS Moreno N.1, Guzmn A.1, Pimienta A.1, Velsquez. G. A., Torres Munar A.2
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Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A., Colombia Centro de Investigaciones Marinas del Golfo de Morrosquillo, Corporacin Instituto Morrosquillo, Colombia alexander.guzman@ecopetrol.com.co
En sistemas de aguas naturales se encuentra como parte del zooplancton el phyllum Rotifera que incluye gran variedad de invertebrados microscpicos (140 a 200 m), los cuales tienen la habilidad de ingerir microalgas cuyo tamao oscile entre 1 y 30 m, a velocidades muy altas (hasta 115.000 clulas/da), debido a que su metabolismo y tasa de reproduccin es tambin muy alta. Este proceso de biofiltracin, haciendo alusin al mecanismo de alimentacin de los rotferos por filtracin a travs de su aparato bucal, hace que el valor nutricional de los rotferos (p.e., contenido de lpidos) refleje la composicin de las algas que consumen o encapsulen, ya que contienen enzimas dentro su aparato digestivo que ayudan a una rpida digestin de las algas acumuladas en su interior. En comparacin con las microalgas, la separacin del medio de cultivo por filtracin, debido a su mayor tamao y la extraccin de sus componentes lipdicos por poseer estructuras lbiles al esfuerzo mecnico o la accin qumica, se facilitan en los rotferos, adems que se producen y cosechan masivamente con facilidad. Las anteriores razones sugieren que se podra utilizar estos organismos como medio para capturar los componentes lipdicos de las microalgas cultivadas en estanques a gran escala y facilitar los procesos de cosecha y extraccin de lpidos, con miras a hacer viable la tecnologa de produccin de biocombustibles a partir de algas. En un estudio de cultivo de rotferos de la familia Brachionoidea, aislada de una muestra de agua de mar recolectada en la baha de Cispat, municipio de San Antero (Crdoba) en Colombia, se encontr que el contenido de lpidos en la biomasa de rotferos alimentados con Nannocloropsis sp fue de 11.2% p/p, en base seca, similar al contenido de lpidos del alga con la cual se aliment y su velocidad de crecimiento indic que se duplicaba la poblacin de rotferos diariamente. Palabras claves: Rotferos, Acumulacin de lpidos, Biofiltracin, microalgas
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OR-BL-8 DETERMINACIN INDIRECTA DE CARBOHIDRATOS, LPIDOS Y PROTENAS EN BIOMASA DE MICROALGAS POR MIR-ATR Moreno N., Guzmn A., Pimienta A. Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A., Colombia alexander.guzman@ecopetrol.com.co Se aplic una combinacin de espectroscopa infrarrojo por transformada de furrier (FTIR) y anlisis estadstico multivariable (Quimiometra) como herramienta de deteccin y determinacin cuantitativa de Carbohidratos, Lpidos y Protenas en muestras de biomasa algal provenientes de cepas de agua dulce y agua de mar, cosechada con o sin adicin de sustancias coagulantes y floculantes. Para la calibracin y obtencin de los modelos matemticos que transforman los datos espectroscpicos en valores de carbohidratos, lpidos y protenas se utilizaron 30 muestras de distintas especies de 3 microalgas nativas cultivadas en estanques de 1 m . Las muestras utilizadas para la calibracin fueron previamente secadas y caracterizadas en cuanto a contenido de carbohidratos y lpidos por mtodos hmedos estandarizados en el Laboratorio de Biotecnologa del Instituto Colombiano del Petrleo (Dubois y Bastianoni) y protenas (Kjeldahl). Las muestras de biomasa seca tamizadas con malla de 100 m fueron escaneadas por triplicado en el rango espectral de Infrarrojo Medio (648 4000 cm-1) utilizando espectroscopa de Reflectancia Total Atenuada (MIR-ATR). Con base en los espectros en la regin MIR se desarrollaron los modelos matemticos para Carbohidratos (R2=0.9866, R2ajustado por g.l=0.9724, Error estndar =1.379), lpidos (R2 = 0.9991, R2ajustado por g.l = 0.9963, Error estndar = 0.371) y protenas (R2 = 0.9934, R2ajustado por g.l = 0.9863, Error estndar = 1.575) utilizando regresin lineal mltiple. Los modelos desarrollados fueron utilizados para predecir la concentracin de estos compuestos en 8 muestras nuevas de microalgas. La concentracin de carbohidratos en las nuevas muestras (%p/p) vari entre 2.6 y 42.8%, la de lpidos entre 2.2 y 30.2% y la de protenas (%p/p) entre 11.4 y 52.8%, y no se presentaron diferencias estadsticamente significativas (p<0.05) entre los valores determinados por los mtodos hmedos y los predichos a partir de los espectros MIR-ATR. Las desviaciones estndar de la mayora de valores predichos para contenido de carbohidratos fueron inferiores al 9%, para protenas inferiores al 3%, y para lpidos inferiores al 2%. Estos resultados indican que la espectoscopa MIR-ATR es una herramienta poderosa para predecir en forma rpida y precisa la composicin de cepas de microalgas. Es adems un mtodo analtico no destructivo que requiere poca muestra. Palabras claves: MIR-ATR, microalgas, caracterizacin, lpidos
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OR-BL-9 CULTIVO DE CIANOBACTERIAS FIJADORAS DE NITRGENO COMO FUENTE POTENCIAL DE ALIMENTO Rosales Loaiza Nstor1, Bermdez Jos1, Jonte Lorena2, Vera Fidel1, Morales Ever1
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Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela 2 Divisin de Estudios Bsicos y Generales, Facultad de Ciencias de la Educacin, Universidad Jos Antonio Pez. Valencia, Venezuela nestoralgae@gmail.com
La concentracin de nitrato en el medio de cultivo, constituye un parmetro esencial a considerar en los bioprocesos con cepas de cianobacterias seleccionadas para la produccin de protenas, pigmentos, carbohidratos y lpidos con fines agroalimentario. En tal sentido, se compar el crecimiento y composicin bioqumica de las cepas Nostoc LAUN0015, Nostoc UAM206, Anabaena sp.1 y Anabaena sp.2 a 0, 4,25; 8,5 y 17 mM NaNO3 en medio BG11. Los cultivos en condiciones adecuadas de iluminacin, agitacin, pH y temperatura fueron mantenidos durante 30 das a un volumen de 300 mL. En peso seco, Anabaena sp.2, obtuvo el mayor valor con 2,60 0,19 mg mL-1 a 8,5 mM NaNO3. Para clorofila, ficocianina y ficoeritrina los mximos se alcanzaron a 17 mM NO3Na, en Anabaena sp.1, con 18,68 0,95; 105,99 6,92 y 51,61 3,59 g.mL-1 respectivamente. Se destaca que Nostoc LAUN0015 y Nostoc UAM206 produjeron los valores significativos de 644,86 19,77 y 411,00 55,99 g mL-1 en protenas y de 895,12 6,74 y 892,43 24,59 g mL-1 en carbohidratos, en ausencia de nitrgeno. A pesar de que Anabaena sp 1 y Anabaena sp 2, presentaron los mximos a 17 mM NaNO3 con 896,05 32,03 y 877,54 59,73 g mL-1 respectivamente. Por su parte, la acumulacin de lpidos se increment sin nitrgeno, para todas las cepas, con 29,17 2,30; 21,11 1,19; 17,46 1,34 y 17,30 1,54 g mL-1 para Anabaena sp.1, sp.2, Nostoc LAUN0015 y Nostoc UAM206. El estudio comparativo indica que la cepa ms eficiente para la produccin de protenas, carbohidratos y medianamente para lpidos, en condiciones diazotrficas correspondi a Nostoc LAUN0015, e inclusive en condiciones de suficiencia en nitrgeno. En cambio, las cepas de Anabaena sp 1 y sp 2, requieren de elevadas concentraciones de nitrgeno para alcanzar los mayores valores de clorofila, ficocianina, ficoeritrina, respecto a las cepas de Nostoc. Se demuestra la dependencia de nitrgeno para la produccin de los pigmentos y la suficiencia de nitrgeno para la sntesis de carbohidratos y lpidos. Mientras que, en las dos cepas de Nostoc, el contenido de protenas alcanz valores significativos, a pesar de la diazotrofa. Se concluye que Nostoc LAUN0015 puede ser cultivada bajo una deficiencia de nitrgeno y Anabaena sp 1, con suficiencia para aplicacin de bioprocesos relacionados con el escalado de los cultivos para la produccin masiva de biomasa con buen perfil bromatolgico.
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OR-BL-10 DESARROLLO DE UNA PLANTA PILOTO EXPERIMENTAL DE PRODUCCIN DE Chlorella vulgaris EN ESTANQUES TIPO RACEWAY Y REACTORES DE COLUMNA EN LOTE Vzquez Perales Ricardo1, Prez Garca Ral Octavio1, Rodrguez Palacio Mnica Cristina2, Arredondo Vega Bertha Olivia3, Zambrano Gmez Diana Carolina3
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Universidad Iberoamericana Puebla, Programa Interdisciplinario del Medio Ambiente. Boulevard del nio poblano No. 2901 Unidad Territorial Atlixcayotl C.P. 72430. Puebla, Puebla. 2 Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa (UAM-I): Laboratorio de Ficologa Aplicada, Departamento de Hidrobiologa. Apartado Postal 55-535. C. P. 09340, Mxico, D. F. 3 Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas, Carretera a San Juan de la Costa, El Comitn, La Paz, Baja California Sur. ricardo.vazquez.perales@iberopuebla.edu.mx
Aunque las aplicaciones comerciales de las microalgas toman cada vez mayor auge a nivel mundial por el potencial de las microalgas para producir y acumular diferentes compuestos de alto valor agregado, en Mxico es necesario iniciar la produccin semi-comercial para evaluar la viabilidad tecno-econmica en base a la calidad de la biomasa producida en diferentes sistemas de cultivo y escalas. Este proyecto registra la experiencia y presenta los resultados preliminares de la construccin y puesta en operacin de una planta piloto experimental de produccin de biomasa microalgal, ubicada en la Universidad Iberoamericana Puebla. Los sistemas de produccin de biomasa en la planta piloto consisten de raceways de 300L y 3000L, y reactores de columna de 300L, cada sistema en cuatro rplicas, instalados bajo un invernadero que permite la entrada de la luz al 85% para operar los cultivos con la luz natural y el clima propio de la temporada y la regin. Los cultivos son aireados y mezclados en los raceways por propelas rotativas que permiten que el medio de cultivo se desplace a una velocidad aproximada de 30 cm/s, mientras que en los reactores en columnas por medio de inyeccin de aire. El cultivo de C. vulgaris parti de un inculo de 250 mL escalndose hasta llegar a 15L, los cuales se utilizaron como inculo de los raceways y de los reactores en columna. El medio de cultivo empleado fue preparado a partir del fertilizante agrcola Bayfoland Forte. Durante el desarrollo de los cultivos se registraron las siguientes variables: clulas/mL, biomasa (peso seco/L), pH, salinidad, temperatura y oxgeno disuelto. Al final del ciclo de cultivo se cosech la biomasa y se determin su composicin proximal (protenas, carbohidratos y lpidos). Con estos datos se estim el valor comercial de la biomasa de C. vulgaris producida en la planta piloto. Se propone realizar un estudio tecno-econmico de la produccin de la biomasa de C. vulgaris considerando una proyeccin de los costos e ingresos a mayor escalamiento.
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OR-BL-11 EFECTO DE LA APLICACIN DE SOLUCIONES DE Chlorella vulgaris Y Scenedesmus obliquus SOBRE EL CONTENIDO DE COMPUESTOS FUNCIONALES EN GERMINADOS DE BRCOLI (Brassica oleracea Var. Itlica) Chacn Lee Tebbie Lin, Gonzlez Mario Gloria E. tebbiechle@unisabana.edu.co Existe evidencia que vincula factores genticos, ambientales y la calidad de los nutrientes a los que tienen acceso las plantas durante su crecimiento, con la posibilidad de producir un efecto de promocin en el contenido de compuestos fitoqumicos funcionales en dichas plantas. Las microalgas se han evaluado por su capacidad promotora de crecimiento en diversos cultivos demostrndose que el contenido nutricional de estas microalgas, as como la presencia de sustancias promotoras de crecimiento, brindan la capacidad de mejorar la resistencia de los cultivos, a incrementar la productividad y la calidad de los frutos, pero casi no se encontraron referencias a su efecto sobre la cantidad de funcionales en las plantas, por lo tanto, se plante la evaluacin del efecto del uso de tratamientos microalgas como fuente nutritiva, sobre el contenido de compuestos fitoqumicos funcionales en germinados de brcoli, por sus potencialidad como alimento funcional novedoso. Se utilizaron 10 soluciones de tratamiento preparados a partir de los cultivos de las microalgas -1 Chlorella vulgaris y Scenedesmus obliquus. Se emplearon soluciones con concentraciones de 1g. L y -1 2g.L de clulas liofilizadas de cada microalga en agua y en el sobrenadante del medio de cultivo gastado, as como sobrenadantes sin clulas, como control se utiliz agua destilada estril y un fertilizante comercial. En total se aplicaron 10 tratamientos de microalgas a semillas de brcoli para evaluar el contenido de los compuestos funcionales -caroteno, cido ascrbico, sulforafane y actividad antioxidante en los germinados obtenidos a los 7 y 14 das de cultivo. Se encontr que en los germinados de 7 das, se observaron incrementos en la capacidad antioxidante por DPPH y el contenido de -caroteno de los germinados obtenidos con algunos de los tratamientos de Chlorella y de Scenedesmus. En el contenido de cido ascrbico, se encontraron en algunos tratamientos con diferencias mayores del 37% para los germinados de 7 das, y superiores al 100% en los de 14 das. Respecto al contenido de sulforafane, uno de los tratamientos present un incremento en la concentracin de sulforafane de un 100% frente a la de la encontrada en los germinados cultivados como control. Estos resultados indican la potencialidad de algunas soluciones de microalgas con buen perfil para emplearse como soluciones nutritivas promotoras de crecimiento y del contenido de sustancias fitoqumicas en los germinados de brcoli.
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OR-BL-12 EVALUACIN DEL RENDIMIENTO DE PRODUCCIN DE ACEITE EN CUATRO MICROALGAS NATIVAS DE LAS PROVINCIAS ECUATORIANAS DE ORELLANA, ESMERALDAS, IMBABURA Y PICHINCHA EN DIFERENTES CONDICIONES DE ILUMINANCIA Y DE MEDIO DE CULTIVO, A NIVEL DE LABORATORIO Portilla Andrs, Naranjo Blanca, Koch Alma Lab. Microbiologa Ambiental, Escuela Politcnica del Ejrcito, Sangolqu-Ecuador aaportillag@gmail.com Se aislaron e identificaron microalgas nativas de los gneros Chlorella sp (Prov. de Orellana), Nannochloropsis sp. (Prov. de Esmeraldas), Botryococcus sp. (Prov. de Pichincha), y Synechocystis sp. (Prov. de Imbabura), con el fin de evaluar el rendimiento en la produccin de aceite. Se ensayaron cinco medios de cultivo: medio N o comn de laboratorio, medio AV, obtenido de una vertiente natural -1 del Bosque Pasochoa, medio AVC compuesto por agua de vertiente complementado con 0,5 mL.L -1 de fertilizante agrcola comercial Nitrofoska foliar 10-4-7, medio FA compuesto por 1ml.L de Nitrofoska y medio FAC fertilizante agrcola complementado con 1 mL.L-1 de solucin de micronutrientes. Adems se prob iluminancias de 2000, 6000 y 10000 lux. Se evalu la densidad celular mxima, tasa de crecimiento, produccin de biomasa y produccin de aceite. Los mejores resultados para Chlorella sp., Nannochloropsis sp. y Botryococcus sp. se obtuvieron en el medio FA a 10000 lux destacando la produccin de aceite de 0.162 g.L-1 (11,97% P/P), 0.187 g.L-1 (16,92% P/P) y 0.126 g.L-1 (15,14% P/P) respectivamente; mientras que para Synechocystis sp. se dio en medio N a 6000 lux consiguindose una produccin de aceite de 0.031 g.L-1 (6.03% P/P) observndose adems fotoinhibicin a 10000 lux. De esta manera se logr identificar que la mejor microalga para los fines de este estudio fue Nannochloropsis sp., gracias a su mayor produccin de aceite y tasa de crecimiento, que permite una productividad terica de biomasa y aceite de 0.22 g.L-1.d-1 y 0,037 g.L-1.d-1 respectivamente, sin embargo es necesario analizar otros factores que afecten a la produccin de aceite para incrementar esta productividad.
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OR-BL-13 EMPLEO DE EXTRACCIN ASISTIDA CON MICROONDA (MAE) PARA LA DETERMINACIN DEL PERFIL DE CIDOS GRASOS EN ORGANISMOS MARINOS Batista A.1, Vetter W.2, Luckas B.3 Universidad Autonoma de Chiriqu, Centro de Investigaciones de Productos Naturales y Biotecnologa (CIPNABIOT), 0427 David, Panam University of Hohenheim, Institute of Food Chemistry, 70593 Stuttgart, Germany Friedrich Schiller Universitaet Jena, Institute of Nutritional Sciences, 07745 Jena, Germany aribat20@hotmail.com La determinacin del perfil de cidos grasos en organismos marinos es de suma importancia, debido a que tienen gran relevancia, a nivel, bioqumico y nutricional; hoy da, los aceites obtenibles de estos organismos constituyen una energa alternativa. En este estudio hacemos uso de la extraccin asistida por microonda para lograr obtener la fraccin lipdica. Las muestras de estudio fueron peces (Clupea harengus) y algas: Spirulina spp., Cochlodynium polykrikoides, se procedi a realizar una extraccin, para lo cual se emple como agente extractante una mezcla de acetato de etilo/ciclohexano (1:1,v/v), luego se procedi a realizar las esterificaciones correspondientes, stas fueron ms sencillas para la muestra de pez, donde se emple como agente metilante el TMSH; en el caso de las microalgas aqu reportadas se tuvo que realizar una esterificacin con BF3/MeOH y purificacin para algas no tan pigmentadas. Los steres metlicos fueron inyectados en un GC/FID y eluidos en una columna Stabilwax. La elusin fue comparada con respecto al tiempo de retencin de los correspondientes estndares. El perfil de cidos grasos es variable en cuanto a la cantidad y al tipo de cido graso presente, en peces es ms extenso, los ms sobresalientes fueron (el C16:0> C18:1 n-9, C14:0> C22:6 n-3> C20:5 n-3), en Spirulina los ms abundantes fueron (el C16:0> C10:0> C18:2 n-6, C14:0> C18:3 n-6). Para el caso de la alga C. polykrikoides se identificaron 19 cidos grasos C16:0> C18:1> C20:1 n-9. Esta tcnica es muy rpida, emplea disolventes que no son problemticos para el ambiente, garantiza resultados confiables, reproducibles y puede ser aplicable a diversas matrices de anlisis.
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OR-BL-14 ESTANDARIZACIN DE MTODOS PARA IDENTIFICACIN GENTICA DE MICROALGAS (Chlorophyceae, Bacillariophyceae) Zafra G., Pimienta A., Nieto L. Laboratorio de Biotecnologa - Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A. Astrid.Pimienta@ecopetrol.com.co En la actualidad, las tcnicas de biologa molecular permiten la identificacin de gran cantidad de microorganismos con una especificidad cercana al 100% mediante el anlisis de regiones genmicas informativas, tiles por la presencia de rasgos genticos caractersticos para un determinado gnero o especie. Aunque el gen utilizado ms comnmente es el SSU 18s rRNA nuclear, podran ser necesarios anlisis de genes de ms rpida evolucin (mitocondriales o del cloroplasto) para resolver mejor las filogenias a nivel de especies, especialmente en microalgas. El objetivo del trabajo fue estandarizar una metodologa de identificacin gentica de microalgas de las clases Chlorophyceae y Bacillariophyceae hasta el nivel taxonmico de especie. La estandarizacin incluy diferentes ensayos de PCR para la amplificacin de regiones gnicas nucleares, mitocondriales o del cloroplasto a partir de cultivos unialgales no axnicos de Chlorella sp. Scenedesmus sp. y Nitzschia sp., aisladas de ambientes acuticos colombianos por el Laboratorio de Biotecnologa del Instituto Colombiano del Petrleo (ICP). Los fragmentos amplificados por PCR fueron purificados y secuenciados. Se realiz un anlisis de homologa por BLAST con el fin de identificar las secuencias con mayor nivel de identidad gentica con las previamente publicadas en GenBank. Como resultado se estandarizaron tres ensayos para la amplificacin del gen SSU 18s rRNA nuclear; uno para el SSU 18s rRNA del cloroplasto y dos para el gen coxI mitocondrial. No fue posible obtener amplificacin a partir de los genes rbcL del cloroplasto y LSU 28S rDNA nuclear. De los ensayos estandarizados, tres presentaron amplificacin a partir del DNA algal sin interferencia del DNA bacteriano y dos presentaron amplificacin especifica del fragmento deseado con algn grado de interferencia con DNA contaminante. El anlisis por BLAST permiti identificar hasta el nivel de especie las cepas como Chlorella vulgaris, Scenedesmus obliquus y Nitzschia palea, con porcentajes de identidad de entre 98 y 99% al compararlas con diferentes secuencias de referencia. Con base en los resultados, se eligi el gen SSU 18s rRNA del cloroplasto como el mejor blanco gnico para la identificacin de microalgas de la clase Chlorophyceae y el SSU 18s rRNA nuclear para la identificacin de microalgas de la clase Bacillariophyceae. En conclusin, fue posible estandarizar una metodologa altamente especfica de identificacin gentica de microalgas nativas, capaz de discriminar diferentes cepas de microalgas hasta el nivel taxonmico de especie, aun cuando el material de partida sea un cultivo no axnico. Palabras claves: Scenedesmus acutus, aguas residuales, lpidos, caracterizacin gentica
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OR-BL-15 ESTANDARIZACIN DE METODOLOGAS PARA CARACTERIZACIN COMPOSICIONAL DE MICROALGAS Ariza C., Nieto L., Pimienta A. Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A., Colombia Astrid.Pimienta@ecopetrol.com.co Mundialmente se consumen cuatro barriles de petrleo por cada barril producido, agotndolo como fuente de energa. El desarrollo de nuevas tecnologas como la obtencin de biodiesel a partir de aceite de microalgas y la utilizacin de la biomasa residual (carbohidratos) para produccin de bioetanol, son algunas alternativas para la crisis energtica. Considerando que la composicin porcentual de la biomasa algal es fundamental para valorarla como materia prima, se estandarizaron tcnicas espectrofotomtricas para cuantificacin de lpidos, protenas y carbohidratos de microalgas nativas aisladas de ambientes dulceacucolas por el Laboratorio de Biotecnologa del Instituto Colombiano del Petrleo ICP. Para la cuantificacin de lpidos se implement un mtodo modificado basado en Bastianoni mediante la extraccin con mezcla de cloroformo/metanol; para la cuantificacin de protenas se adapt la tcnica de Lowry a partir de biomasa algal secada y liofilizada y para la cuantificacin de carbohidratos se utiliz la tcnica del fenol/cido sulfrico modificado. Las metodologas estandarizadas fueron empleadas en la caracterizacin de 33 cepas aisladas por el Laboratorio de Biotecnologa del Instituto Colombiano del Petrleo ICP - ECOPETROL, obtenidas en cultivos de 8L con medio Bristol, temperatura de 252 aireacin permanente de 1 vvm y luz C, constante entre 2000 y 4000 lux durante 10 das. Los resultados mostraron un aumento de biomasa entre 1,3 a 280,5 veces el peso inicial siendo las mejores, Chlamydomonas sp y Spirulina sp, (213,75 y 280,5 veces, respectivamente). Los porcentajes de lpidos variaron entre el 10 y el 33,86% y Monoraphidium sp, Selenastrum sp y Chlorella sp reportaron 33.86%, 29.32% y 29.28%, respectivamente. El contenido de carbohidratos oscil entre el 3,01 y el 29,91%, en que Scenedesmus sp y Chlorella sp acumularon 29.91% y 28.18%, respectivamente. El contenido proteico oscil entre el 12 y el 36.57%, en tres cepas de Scenedesmus sp que acumularon 36.57%, 29.71% y 29.21%, respectivamente. El rendimiento en peso seco celular de lpidos, carbohidratos y protenas vari entre 0.58 y 31.11 g Lpidos/g biomasa, 0.53 y 29.93 g carbohidratos/g biomasa y 0.78 y 37.97 g protenas/g biomasa, respectivamente, destacndose dos cepas de Chlamydomonas sp y Spirulina sp. Este trabajo es preliminar para evaluar el potencial de cepas de microalgas colombianas en la produccin de biocombustibles (Biodiesel y Bioetanol). Palabras claves: microalgas, caracterizacin composicional, lpidos
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OR-BL-16 Arthrospira platensis VS Arthrospira maxima: COMPARACIN NUTRICIONAL DIRIGIDA AL DESARROLLO DE SUPLEMENTOS ALIMENTICIOS Parra Jos1, Rojas Diego5, Torres Alexia1, Arredondo Bertha2, Espinoza Claudio3, Casquete Gustavo3, Torres Rubn4,6, Sena Lucia5, Naranjo Leopoldo5
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Universidad Simn Bolvar, Departamento de Procesos Biolgicos y Bioqumicos Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste, Programa de Ecologa Pesquera 3 Instituto Nacional de Nutricin, Divisin de Investigacin de Alimentos 4 Universidad Central de Venezuela, Instituto de Zoologa Tropical 5 Fundacin Instituto de Estudios Avanzados, Centro de Biotecnologa 6 Asociacin Civil Gente de Ciencias. drojas70@gmail.com
Las microalgas del gnero Arthrospira han sido reconocidas como fuentes naturales de protenas, as como cidos grasos esenciales, carbohidratos, vitaminas, minerales y pigmentos. Sus dos especies ms conocidas, A. maxima y A. platensis, se emplean como alimento. La primera desde tiempos precolombinos por los aztecas en Amrica y la segunda desde tiempos inmemoriales hasta la actualidad por los kanembu en frica. Ambas especies poseen propiedades correctoras de infecciones virales, crecimientos tumorales y la anemia por deficiencia de hierro. Este trabajo expone el anlisis proximal, composicin mineral, fibra diettica, perfil de cidos grasos y perfil de aminocidos de A. platensis y A. maxima (cultivadas a cielo abierto), con la finalidad de determinar cul de las dos sera la ptima para ser cultivada con fines nutricionales. Se obtuvieron los resultados siguientes (A. platensis - A. maxima): protenas (55,81%-63,89%), cenizas (10,02%-9,06%), hierro (117,7 mg-217,024mg), fibra (13,47%-8,84%), digestibilidad in vitro (94,60%-96,42%). Asimismo, se obtuvo el perfil de cidos grasos y de aminocidos de ambas especies. Los resultados muestran que ambas especies poseen interesantes valores de digestibilidad, minerales, hierro, fibra, cidos grasos, y aminocidos. Por tanto, podra considerarse su incorporacin como suplemento en una gran variedad de productos alimenticios para humanos y animales. No obstante, dependiendo del uso final, pudiese convenir una mezcla de ambas especies en lugar de su consumo por separado.
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OR-BL-17 USO POTENCIAL DE Arthrospira Y Macrobranchium amazonicum EN DIETAS PARA EL CEBA DE CACHAMA BLANCA, Piaractus brachypomus Parra Jos1, Rojas Diego2, Torres Alexia1, Poleo Germn3
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Universidad Simn Bolvar, Departamento de Procesos Biolgicos y Bioqumicos Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela 3 Estacin de Piscicultura, Universidad Centrooccidental Lisandro Alvarado drojas70@gmail.com
Las microalgas, por sus propiedades nutricionales parecen ser potencialmente valiosas para cumplir con los requerimientos de los peces. Las microalgas del gnero Arthrospira y sus dos especies ms importantes Arthrospira maxima y Arthrospira platensis, presentan protenas de alta calidad, con alta asimilacin y hierro fcilmente absorbible. En Venezuela, hay pocos estudios referentes estas microalgas, por lo cual el objetivo de este trabajo fue caracterizar bioqumica y nutricionalmente a estas especies y utilizar la mejor como alimento concentrado para el engorde de Cachama blanca, (Piractus brachypomus). En la caracterizacin de las Arthrospira se determin que tiene un alto nivel de protenas, con la mayora de aminocidos esenciales y un elevado contenido de minerales como el hierro. Se realiz entonces un ensayo de ceba de Cachama blanca, en donde se probaron dos formulaciones de alimento concentrado, el primero con A. maxima como nica fuente de protena y hasta un 28 % de protena y 8 % de grasa (Alimento 1 A1,) y el segundo con A. platensis suplementado al 50 % de la protena con harina de Camarn (Macrobranchium amazonicum) hasta completar los mismos niveles de grasa y protena antes descritos (Alimento 2 A2). Ambos alimentos se compararon contra un alimento comercial denominado Puripargo (PP). El contenido de protena y hierro total (al final del ensayo, 6 meses) en Cachamas alimentadas con A1 comparados con las alimentadas con PP, en condiciones de humedad semejantes (4,73 - 4,72) g/100 g, fue de (42,60 - 45,65) g/100 g y (6,25 - 4,60) g/100 g respectivamente. Al comparar A2 con PP en condiciones de humedad semejantes (5,01 - 5,26) g/100 g, se observ que el contenido de protenas fue de (43,80 - 45,84) g/100 g y hierro (5,99 - 4,46) g/100 g respectivamente. Al comparar A2 con PP temporalmente (variables: longitud y peso, medidas mensualmente durante 6 meses), se pudo ver que en primer y segundo muestreo son semejantes para ambos tratamientos, sin embargo, a partir del tercer muestreo se puede observar una diferencia que se acenta cada vez ms hasta el sexto muestreo. Para ambos ensayos e determin que los peces tuvieron un buen desarrollo en peso y longitud, tanto con A1 como con A2, pero no lo suficiente para equipararse con PP. Esto ltimo posiblemente debido a limitaciones aminoacdicas, siendo la ms probable la de lisina.
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OR-BL-18 MICROALGAS OLEAGINOSAS NATIVAS DEL SUDESTE DE BUENOS AIRES: EFECTO DE BIOINOCULANTES NITROGENADOS SOBRE EL CRECIMIENTO Y LA ACUMULACIN DE LPIDOS Do Nascimento M., Ortiz Mrquez J.C.F., Snchez Rizza L., Curatti L. Centro de Investigaciones Biolgicas, FIBA, Mar del Plata, Argentina y Centro de Estudios de Biodiversidad y Biotecnologa (CEBB-MdP), CONICET, Argentina lcuratti@fiba.org.ar El uso de biomasa algal para la produccin de biocombustibles es una de las estrategias ms prometedoras en los campos de las energas renobables y la biotecnologa ambiental y algal. Con propsito tecnolgicos y de preservacin de recursos naturales, en 2009 iniciamos la confeccin de un banco de cepas de microalgas nativas del sudeste de la provincia de Buenos Aires, Argentina. Las muestras ambientales correspondieron principalmente a los alrededores de la ciudad de Mar del Plata. A la fecha se mantienen ms de veinte cepas en cultivo monoalga, varias de ellas en forma axnica. En forma preliminar se identificaron microscpicamente la mayora de las cepas, encontrndose especimenes de los gneros Chlorella spp., Scenedesmus spp., Desmodesmus spp., Chlamydomonas spp. Ankistrodesmus spp. Haematococcus spp, Pseudokirchneriella spp. entre otras microalgas eucariticas y varias cepas de cianobacterias. Se realiz un escrutinio preliminar de la capacidad de acumulacin de lpidos neutros reactivos frente al colorante Rojo de Nilo y se preseleccionaron unas diez cepas con las mayores capacidades de acumulacin de estos compuestos cuando fueron cultivadas en un rgimen de nitrgeno (amonio) limitante. Varias de estas cepas superan el 30 % de lpidos en base al peso seco. Por amplificacin por PCR del ITS del rADN de las cepas, secuenciacin y anlisis filogentico se logr confirmar la identificacin de alguna de las cepas como S. obliquus. Por otro lado, el anlisis de esta regin del ADN puso en evidencia la posibilidad de haber aislado cepas de Chlorophytas cuyas secuencias del ITS no se encuentran presentes en las bases de datos pblicas. Una de estas cepas (C1D) present un patrn caracterstico de acumulacin de lpidos neutros cuando se cultiv en presencia de amonio limitante. Otro de los aspectos de nuestro inters en relacin al cultivo de microalgas es la posibilidad de desarrollar inoculantes microbianos para disminuir los costos de produccin de la biomasa algal. De esta manera, se evalu el efecto del cocultivo de esta microalga con la bacteria diazotrfica y promotora del crecimiento de plantas Azotobacter vinelandii y una cepa mutante derivada con mayor capacidad de excrecin de amonio. Se observ que la adicin de la bacteria, especialmente la cepa mutante, mimetiza la adicin de amonio sobre el crecimiento y la acumulacin de lpidos neutros de C1D. Estos estudios son fundacionales para la investigacin y desarrollo del uso de biomasa de microalgas para la produccin de biocombustibles en nuestra regin. Financiado por ANPCyT N 01717
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OR-BL-19 APLICACIN DE UN DISEO FACTORIAL PARA EL ESTUDIO DE VARIABLES AMBIENTALES EN CULTIVOS DISCONTINUOS DE LA CIANOBACTERIA Phormidium sp. Jonte Lorena, Mora Roberta, Rosales Loaiza Nstor, Rodrguez Sandra, Morales Ever Divisin de Estudios Bsicos y Generales, Facultad de Ciencias de la Educacin, Universidad Jos Antonio Pez. Valencia, Venezuela Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. lorenajonte@gmail.com La respuesta de las cianobacterias ante cambios de salinidad, irradiancia y nutrientes puede ser evaluada en condiciones de laboratorio y de forma integrada a travs de diseos factoriales que permitan de forma rpida y eficiente, determinar las condiciones ptimas para la produccin de biomasa enriquecida con metabolitos de inters econmico. Se reporta el efecto combinado de la salinidad, irradiancia y concentracin de nitrato sobre el crecimiento y composicin bioqumica de la cianobacteria Phormidium sp. Para ello, se aplic un diseo factorial 33, de tres niveles y tres tratamientos, correspondientes a la salinidad (0, 35, 70); nitrato (2, 4 y 8mM) e irradiancia (78, 156 y 234 mol q m-2 s-1) para un total de 27 bioensayos. Se realizaron tres series de bioensayos por separado y correspondiente a cada salinidad. Los cultivos discontinuos por triplicado se realizaron a un volumen de 200 ml, con aireacin constante, fotoperodo 12:12 h, a 293C, pH 7,5-9,3 y el crecimiento seguido mediante peso seco durante 20 das. Phormidium sp. logr obtener los valores mximos de peso seco, clorofila a y carotenoides (p<0,05) a 35 /8mM NaNO3/238 mol q m-2 s-1, con 3,98 0,33 mg mL-1, 20,37 0,98 y 6,09 0,36 g mL-1, respectivamente. La mayor produccin de ficocianina se alcanz a 35 /8mM/156 mol q m-2 s-1 y 35 /8mM NaNO3/78 mol q m-2 s-1 con 153,45 16,63 y 148, 52 10,25 g mL-1, respectivamente, sin diferencias significativas (p<0,05), pero si con el resto de los tratamientos (p<0,05). El contenido de protenas increment a las combinaciones de 35 /8mM/238 mol q m-2 s-1; 35 /8mM/156 mol q m-2 s-1 y 70 /8mM/156 mol q m-2 s-1 con 695,82 19,65; 693,20 16,99 y 606,21 14,72 g mL-1, respectivamente. En cambio, la produccin de carbohidratos estuvo influenciada por la irradiancia y mientras que, el aumento de EPS fue producto de la interaccin a alta irradiancia (238 mol q m-2 s-1), media y alta salinidad (35 y 70) y moderada y suficiencia en nitrato (4 y 8 mM). Los lpidos fueron modulados por la salinidad, con la optima produccin de 45,97 1,89 g mL-1 a /8mM/156 mol q m-2 s-1. Estos resultados demuestran que el diseo factorial seleccionado con tres variables (nitrato-irradiancia-salinidad), constituye una herramienta til en bioprocesos para modular la produccin de ficocianina, protenas, exopolisacridos y clorofila de esta cepa de Phormidium sp. de inters econmico.
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OR-BL-20 ESTUDIO DEL EFECTO DE TRES VARIABLES DE OPERACIN SOBRE LA PRODUCCIN DE BIOMASA MICROALGAL EN UN FOTOBIOREACTOR TUBULAR Pea Saavedra Jim, Pardo Benito Mauricio, De Zan Arturo gloria.gonzalez@unisabana.edu.co Para lograr el aumento de la productividad de biomasa microalgal con fines alimentarios, energticos y agronmicos, es necesario realizar estudios de factibilidad tcnica y econmica de dicha produccin. Por lo tanto es importante contar con sistemas productivos a escala piloto con altos rendimientos que permitan determinar parmetros de operacin, y con ellos conocer los de escalamiento. En el desarrollo de este proyecto se evaluaron diferentes condiciones hidrodinmicas de flujo, de temperatura, y de concentracin de CO2 de la mezcla gaseosa, con la finalidad de comparar y determinar mejoras en las condiciones de operacin del fotobioreactor tubular de la Universidad de la Sabana (UNISABANA 1 WPA) sobre la productividad de biomasa de la microalga Chlorella vulgaris. El estudio se realiz sobre la base de un diseo experimental factorial 23, donde los niveles mximos y mnimos utilizados para las variables en estudio fueron: X1 = 20C y 35C para la temperatura, X2 = 4% y 15% de la concentracin de CO2 en la mezcla gaseosa que es inyectada al equipo, y por ltimo X3 = 0,1L.s-1 y 0,21L.s-1 de caudal que circula por la zona tubular. Las variables de respuesta obtenidas fueron: Y1 = peso seco [g.L-1] y Y2 = concentracin celular [clulas.mL-3]. La escogencia de los niveles de trabajo se realiz sobre la base de pruebas experimentales previas que sirvieron de patrn, en las que se utilizaron las condiciones con que se opera el equipo desde su construccin y posterior puesta en marcha (1%CO2, 28C, 0,1L.s-1). De sta etapa preliminar se obtuvieron curvas de crecimiento de la microalga Chlorella vulgaris, y se ajustaron mediante el modelo predictivo de Baranyi. La produccin alcanzada promedio fue de 0,435 g.L-1, para una concentracin celular final de 9,25x106 celulas.mL-1. Las condiciones de operacin del equipo UNISABANA 1 WPA que favorecen una mayor productividad de Chlorella vulgaris son: Temperatura = 20 Concentracin de CO2 = 4% y Caudal = 0.10 L.s-1, C, produciendo los valores ms altos de peso seco (0,625 g.L-1), de concentracin celular (9,85x106 celulas.mL-1). Como resultado del proyecto, se obtienen condiciones adecuadas de operacin que generan una alta productividad de biomasa de la especie de microalga Chlorella vulgaris. De igual manera, se obtiene la caracterizacin de la operacin bajo diferentes condiciones de flujo, de temperatura y concentracin de CO2 en la mezcla gaseosa que se introduce al equipo.
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Biotecnologa Algal
Carteles
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CT-BL-1 MACROALGA Ulva clathrata COMO ALIMENTO COMPLEMENTARIO PARA CAMARN BLANCO Litopenaeus vannamei Pena-Rodriguez Alberto1, Leon Armando2, Ricque-Marie Denis1, Moll Benjamin2, CruzSuarez L. Elizabeth1
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Programa Maricultura, Universidad Autnoma de Nuevo Len, Cd. Universitaria F-56, San Nicols de los Garza, Nuevo Len, CP 66450, Mxico. 2 Aonori Aquafarms, Inc. 2015 Klee Place, Davis, CA 95618, USA. apr_22@hotmail.com
El alimento balanceado para la engorda de camarn puede significar hasta un 60% del costo total de produccin, por ello es necesario buscar nuevas estrategias para disminuir estos costos y aumentar la rentabilidad del cultivo. En el presente trabajo se explora la utilizacin de la macroalga verde Ulva clathrata cultivada en granjas, como alimento complementario al alimento balanceado comnmente utilizado en las granjas de camarn. Se realiz un bioensayo de 28 das en condiciones controladas de laboratorio, donde camarones juveniles Litopenaeus vannamei (1.20.1 g) fueron distribuidos en 4 bloques de 3 acuarios de 120 L a una densidad de 8 camarones por acuario. Un primer grupo de camarones fue alimentado a saciedad con una dieta comercial (30% protena cruda) tomando esto como 100% racin (C100); el segundo y tercer grupo de camarones fueron alimentados con alga fresca a saciedad ms 75% (UC75) y 50% (UC50) de la racin de dieta comercial utilizada en el al tratamiento C100. No se presentaron diferencias significativas en el consumo de la macroalga entre los tratamientos con Ulva sp. (p=0.251). Los camarones bajo el tratamiento UC75 tuvieron un crecimiento significativamente mayor (p=0.005) con respecto a los otros dos tratamientos. Considerando solamente el consumo de la dieta comercial, la tasa de conversin alimenticia se mejor significativamente (p=0.006) en los camarones que consumieron Ulva sp. El uso de U. clathrata fresca representa una alternativa viable como alimento complementario para camarn, mejorando la tasa de crecimiento y la utilizacin del alimento balanceado.
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CT-BL-2 EFECTO DE LA INTENSIDAD LUMINOSA EN LA DENSIDAD Y EL TAMAO CELULAR DE Neochloris oleoabundans Loera-Quezada Maribel M., Olgun Eugenia J. Red de Manejo Biotecnolgico de recursos. Instituto de Ecologa, A.C. km 2.5 carretera antigua a Coatepec No. 351 Congregacin el Haya. Xalapa, Veracruz 91070 Mxico. eugenia.olguin@inecol.edu.mx Los biocombustibles a partir de microalgas son una fuente alternativa de energa, particularmente de biodiesel. Neochloris oleoabundans es una fuente promisoria debido a su alto contenido de lpidos celulares, al perfil de sus cidos grasos y al ndice de yodo, entre otras especificaciones para la produccin de biodiesel. Una de las mayores dificultades en la mayora de los cultivos algales, es establecer las condiciones de cultivo adecuadas para que se logre una buena productividad de biomasa manteniendo al mximo posible la productividad de lpidos. Con este fin, se evalu el efecto de tres intensidades luminosas (50, 94 y 136 mol m-2 s-1) en la densidad celular de N. oleoabundans. La microalga fue cultivada durante 15 das en matraces Erlenmeyer de 250 mL, con un volumen de trabajo de 100 mL en medio Bold modificado, temperatura de 35 y un fotoperiodo de 12 h. La C concentracin inicial fue de 100,000 cl mL-1. Se observ que la mayor densidad celular (414,105 cl mL-1) se obtuvo a 136 mol m-2 s-1, mientras que con las intensidades de 50 y 94 mol m-2 s-1 se obtuvieron densidades celulares muy bajas (181,250 y 109,330 cl mL-1, respectivamente), despus de 15 das. La tasa especfica de crecimiento durante la fase exponencial de los cultivos a 136 mol m-2 s-1 fue de 1.304 da-1, mientras que para los cultivos en intensidad baja y media fue de 0.980 y 0.255 da-1, respectivamente. Cabe sealar que la mayor tasa especfica de crecimiento en el caso de los cultivos sometidos la intensidad media se alcanz a los 8 das de incubacin, mientras que en la intensidad baja y alta al primer da de incubacin. Con respecto al tamao celular se observ que bajo la mayor intensidad luminosa, el tamao celular fue menor, con un promedio de 5.25 ( 1.26) m, mientras que en las intensidades baja y media el tamao celular fue muy similar (10.92 1.38 y 11.88 1.12 m, respectivamente). Bajo estas condiciones experimentales, se observ que la mayor intensidad luminosa probada tuvo un efecto positivo en la densidad celular de N. oleoabundans, pero el tamao celular disminuy, mientras que con una intensidad luminosa menor a 100 mol m-2 s-1, no se obtuvieron densidades celulares altas, pero se favoreci el aumento del tamao celular.
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CT-BL-3 PRODUCCIN DE BIOMASA DE Spirulina subsalsa EN DIFERENTES VOLMENES DE CULTIVO Bermdez Jos1, Gmez Liliana1, Rosales Nestor1, Rodrguez Mnica2, Morales Ever1
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Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela. 2 Laboratorio de Ficologa Aplicada, Universidad Autnoma Metropolitana- Iztapalapa, D.F, Mxico. evermster@gmail.com
La produccin de complementos alimenticios constituye una prioridad para incrementar la diversidad agroalimentaria de nuestros pases. Las cianobacterias del gnero Spirulina representan una alternativa para desarrollar tecnologas de cultivos que contribuyan a favorecer su calidad nutricional para alimentacin animal y humana. Se reporta la produccin de biomasa, contenido de pigmentos y poblacin bacteriana asociada de Spirulina subsalsa cultivada a 2, 15, 40 y 200L. Para ello, se establecieron tres series de experimentos segn el volumen de cultivo. La primera (2 y 15L) mantenidos en condiciones de laboratorio durante 35 das, con fotoperiodo de 12:12h, a 283 y C aireacin constante. En la segunda serie se utilizaron cultivos de 40L, bajo dos condiciones ambientales: en un espacio semi-cerrado con fotoperiodo de 12:12h, a 263 y aireacin constante; C y en un espacio abierto con iluminacin natural, agitacin manual y a 283C. En estos cultivos se realizaron cosechas parciales de 10 litros cada 15 das. La tercera serie conformada por unidades cilndricas y con volmenes de cultivo de 200L, a cielo abierto, agitacin mediante recirculacin y durante 35 das. Los mayores valores de clorofila, carotenoides, ficocianina y aloficocianina se obtuvieron en las unidades de cultivos de 2 y 15L, con 12.22, 3.32, 88.21 y 5.7 g/ml, respectivamente. Mientras que, se obtuvo una biomasa seca en los cultivos a 2, 15 y 40 litros de 2.53, 2.5-3 y 0.8-1.5 gr/L, respectivamente. Los cultivos escalados hasta 15L no registraron presencia bacteriana a 35 das, pH 10.4 y a una salinidad de 35UPS. En cambio, cultivos de 2 litros a un pH entre 10.3-10.7 y a 25UPS solo produjeron una poblacin de aerobios mesfilos entre 40 y 1.4x103 ufc/ml. Los cultivos de 40 litros presentaron valores entre 1.0 y 1.6x103 ufc/ml. El incremento de la salinidad tambin produjo un descenso de la poblacin bacteriana hasta 70UPS, a pH 8.8. La productividad de los cultivos de 200L a cielo abierto fue afectada por la temperatura y por el sistema de agitacin. Por otra parte, el uso de fertilizantes agrcolas y de otros compuestos de grado tcnico ha contribuido a la reduccin de los costos de produccin. Los resultados sugieren que, las etapas de preparacin del inoculo y medio de cultivo, escalado, colecta, filtracin y secado aplicados a este proceso, permiten una cosecha permanente de Spirulina subsalsa con alta eficiencia y control de la flora bacteriana asociada, pH, salinidad y calidad nutricional de la biomasa. Palabras claves: biomasa, bioprocesos, escalamiento, Spirulina subsalsa.
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CT-BL-4 EFICIENCIA DEL USO DE COAGULANTE NATURAL Y COMERCIAL PARA LA RECUPERACIN DE BIOMASA DE Chlorella, Senedesmus, Shlorococcum Y Spirulina subsalsa EN CULTIVOS DISCONTINUOS Ventura Jorfran1, Vera Alexandra2, Andrade Charity1, Crdenas Carmen3, Luzardo Milangel4, Morales Ever1
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Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Facultad de Ciencias, Universidad del Zulia. 2 Departamento de Qumica. Facultad de Agronoma, Universidad del Zulia. 3 Centro de Investigacin del Agua. Facultad de Ingeniera, Universidad del Zulia. 4 Laboratorio de Petroqumica y Surfactantes, Facultad de Ciencias, Universidad del Zulia. evermster@gmail.com
Entre los bioprocesos destinados a la recuperacin de biomasa de cultivos de microalgas se han utilizados los agentes floculantes comerciales y mtodos de centrifugacin, sedimentacin natural y filtracin. Sin embargo, a grandes volmenes de cultivo, es necesario continuar analizando agentes alternativos a fin de incrementar la eficiencia en cuanto a la recuperacin de la biomasa. Se reporta el uso de quitosano producido a partir de desechos de camarones como coagulante en la recuperacin de biomasa microalgal y comparado con el sulfato de aluminio y las tcnicas de sedimentacin natural, centrifugacin y filtracin. Para ello, se realizaron cultivos discontinuos cepas de Chlorella, Scenedesmus, Chlorococcum y Spirulina subsalsa en volmenes de 15L en condiciones de laboratorio. La calidad del quitosano obtenido fue evaluada mediante espectroscopia IR. Se aplic la prueba de jarra a un litro de cultivo, para determinar la dosis ptima del floculante en recuperar la mayor cantidad de biomasa, adems de utilizar las medidas de remocin de color, turbidez y densidad celular. Para la prueba de sedimentacin natural se les retir la aireacin y al trmino de 8 das fue determinada la densidad celular en el sobrenadante. En la prueba de centrifugacin y filtracin se utiliz 50ml de cada cultivo por triplicado, midiendo luego para ambos casos, la densidad celular, color y turbidez al cultivo inicial, al sobrenadante y al filtrado. En dichas pruebas se utiliz el quitosano y el sulfato de aluminio a 5 y 10 mg/L. Con quitosano se produjo una recuperacin del 99.34%, 98.99% y 95% para Chlorococcum, Chlorella y Scenedesmus, respectivamente. Mientras que, con sulfato de aluminio se obtuvo un 86.78%, 85.10% y 22.71% para Chlorococcum, Scenedesmus y Chlorella, respectivamente. En cambio, ni el quitosano, ni el sulfato de aluminio, ejercieron efecto significativo en la recuperacin de Spirulina; ya que con la prueba de jarra se obtuvo una sedimentacin del 82.93% y 46.43% para cada control. Por sedimentacin natural, se recupero biomasa de Scenedesmus, Chlorococcum, Chlorella y Spirulina en un 100%, 92.21 %, 89.29% y 11.11%. Por otra parte, la centrifugacin y filtracin reportaron valores de recuperacin para Scenedesmus de 99.54% y 99.89%; para Chlorella de 99.17% y 99.95% para Chlorococcum de 99.02% y 99.82% y para Spirulina de 43.55% y 95.16, respectivamente. Los resultados obtenidos demuestran la factibilidad del uso de quitosano como agente coagulante eficiente, en la recuperacin de biomasa de Chlorococcum, Chlorella y Scenedesmus a partir de volmenes superiores a 5L. Palabras claves: quitosano, coagulante, recuperacin biomasa, microalgas.
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CT-BL-5 EVALUACIN DEL CRECIMIENTO DE Nannochloropsis sp. EN CUATRO SALINIDADES DIFERENTES Gmez-Ramrez Alejandro, Reyes-Fernndez Zehila, Gmez-Uc Edith, Vzquez-Prez Ros Universidad Autnoma del Carmen painkiller_360@hotmail.com Las especies del gnero Nannochloropsis perteneciente a la clase Eustigmatophycea son ampliamente utilizadas en la acuicultura por ser un excelente alimento, ya que poseen un tamao adecuado, una alta digestibilidad, un elevado porcentaje de cidos grasos poliinsaturados y una gran fuente de pigmentos. La salinidad es un factor fsico-qumico de gran importancia en el cultivo de microalgas, ya que las sales inorgnicas disueltas en los ambientes marinos, como de agua dulce pueden afectar potencialmente el crecimiento del fitoplancton como una funcin de su actividad osmtica. En el presente trabajo se estudio la influencia que ejerce la salinidad sobre el crecimiento celular de la microalga Nannochloropsis sp.. Las salinidades utilizadas fueron 10, 20, 30 y 40 ups, los cultivos se realizaron bajo condiciones de laboratorio, a una iluminacin aproximadamente de 2000 lux y una temperatura de 241 durante todo el perodo experimental. Se determinaron los valores C medios de la concentracin de microalgas presentes en los tratamientos diariamente, se establecieron los lmites de confianza con un nivel de significacin del 95% y se realizaron las curvas de crecimiento correspondiente a cada cultivo. Los tratamientos que mostraron mejor comportamiento fueron 20, 30 y 40 ups. El anlisis estadstico indico que no presentan diferencia significativa (P>0.05), aunque se pudo notar un mayor crecimiento a 30 ups con 87.62 x 106 ( 4.41x 106) cel/ml.
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CT-BL-6 PRODUCCIN DE EXTRACTOS LQUIDOS DE ALGAS COMO ESTIMULANTES DEL CRECIMIENTO VEGETAL Hernndez-Carmona G.1, Briceo-Domnguez D.1, Rodrguez-Montesinos Y.E.1, Arvizu-Higuera D.L.1, Murillo Alvarez I.J.1, Larrinaga-Mayoral J.A.2
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Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas. Ap. Postal 592. La Paz, Baja California Sur 23070. Centro de investigaciones Biolgicas del Noroeste. Apdo. Postal 128, La Paz, Baja California Sur 23090 gcarmona2007@gmail.com
Los extractos de algas marinas se han empleado como estimulantes del crecimiento vegetal desde los aos 50s. Estos productos mejoran las plantas y su rendimiento, debido a la presencia de auxinas y citocininas que regulan el crecimiento. No se ha publicado informacin cientfica del proceso de produccin de los extractos, solo se describen los efectos del producto sobre plantas modelo. Se desarroll un proceso para obtener un extracto de Macrocystis pyrifera que consiste en: hidratacin, extraccin alcalina, centrifugacin y neutralizacin. Se variaron las condiciones de extraccin alcalina usando pH 9 y 10 combinando temperaturas de 40, 60 y 80C. Se midi la viscosidad de proceso, viscosidad final (22 y polisacridos precipitables. Se observaron diferencias significativas en la C) viscosidad del proceso entre la extraccin a pH 9 y10. Los mayores valores se obtuvieron a pH 10 en las 3 temperaturas evaluadas. En la extraccin a pH 10, se obtuvo mayor viscosidad de proceso cuando se realiz a 80 Se evaluaron los extractos aplicndolos en plantas de tomate por aspersin C. foliar en concentracin al 0.1, 0.5 y 1%. En la etapa vegetativa, se observaron diferencias significativas en la altura de las plantas, nmero de flores e incremento en el rea foliar, cuando se aplic el extracto obtenido a pH10 y 80C al 0.1%. En el experimento con plantas productivas se observ un incremento del rendimiento total despus de dos meses de cultivo en 7 cosechas, mayor peso y firmeza de fruto 15 das despus de cosechados.
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CT-BL-7 CARACTERIZACIN DE LA PRODUCCIN DE LPIDOS EN EL CULTIVO DE DOS MICROALGAS VERDES: Chlamydomonas reinhardtii Y Chlorella saccharophila Contreras Pool Patricia Y., Lpez Adrin Silvia J., Barahona Prez Luis F., Herrera Valencia Virginia A. Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn (CICY), Unidad de Biotecnologa. Calle 43 No.130 Col. Chuburn de Hidalgo, CP. 97200, Mrida, Yucatn, Mxico. pati_contreraspool@hotmail.com La utilizacin de aceites de cultivos oleaginosos como materia prima para la produccin de biodiesel requiere de grandes extensiones de tierra para su cultivo, grandes cantidades de agua para riego y est sujeta a las condiciones climticas y riesgos de pestes y enfermedades, lo que puede poner en riesgo su produccin. Las microalgas se perfilan como la mejor alternativa para obtener materia prima para biodiesel, ya que su productividad en teora superara la del mejor cultivo agrcola evitando competir con la produccin de alimentos. Este trabajo tiene como objetivo caracterizar la produccin de lpidos relacionada con el estrs por pH, por disminucin de la fuente de N2, y estrs osmtico, en el cultivo de dos especies de microalgas de agua dulce Chlamydomonas reinhardtii y Chlorella saccharophila. C. reinhardtii fue proporcionada por la Dra. Elizabeth H. Harris (Chlamydomas Center, USA); C. saccharophila se aisl de un cuerpo de agua de la ciudad de Mrida, Yucatn, y se realiz un experimento donde se seleccion al medio TAP como el ms adecuado para su cultivo. Posteriormente se obtuvieron las curvas de crecimiento para cada microalga, para determinar el da de mayor acumulacin de biomasa. A continuacin se realizaron experimentos donde se evalu el perfil y la acumulacin de lpidos bajo condiciones de cultivo con: pH alcalino, baja concentracin de N2 y estrs osmtico por NaCl. Como resultado, se obtuvo que los cultivos de C. reinhardtii y C. saccharophila presentaron una disminucin en cuanto al nmero de clulas presentes en condiciones de estrs por pH y baja concentracin de N2, y por tanto una menor cantidad de lpidos totales, lo cual podra deberse a una inhibicin de la divisin celular, debida a la baja concentracin de N2, o porque se ha observado que el estrs por pH alcalino inhibe el ciclo de divisin celular antes de la liberacin de la autoespora. Aunque la cantidad de lpidos totales fue menor, stos resultaron contener ms triglicridos en ambas microalgas con el tratamiento de baja concentracin de N2, a diferencia de los tratamientos por pH alcalino donde por el contrario hubo un decremento y en el tratamiento por NaCl donde no se observaron diferencias con respecto al control.
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CT-BL-8 CARACTERIZACIN DE LA EXPRESIN DE GENES DEL CLOROPLASTO DE LA MICROALGA VERDE Chlamydomonas reinhardtii CON POTENCIAL DE SER INDUCIBLES Casais Molina Melissa L., Herrera Valencia Virginia A. Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn (CICY), Unidad de Biotecnologa. Calle 43 No. 130 Col. Chuburn de Hidalgo, C.P. 97200, Mrida, Yucatn, Mxico. Fax: (52) 999 9813900. meles85@hotmail.com Chlamydomonas reinhardtii es considerada un sistema modelo en estudios fisiolgicos y moleculares, los genomas de su ncleo y cloroplasto se encuentran completamente secuenciados, y su cultivo es altamente viable para la expresin de protenas recombinantes (PRs) de inters biotecnolgico (por ejemplo vacunas). Sin embargo, para esta aplicacin es necesario contar con una alta expresin gnica, regulada por el promotor. Un promotor inducible en C. reinhardtii permitira el control de la expresin de un gen recombinante ante la presencia de un inductor, despus de alcanzar una alta densidad celular, y posiblemente una mayor acumulacin proteica sin interferir con el metabolismo celular. En la regin promotora de genes nucleares de C. reinhardtii se han identificado elementos cis asociados a la respuesta a inductores. En el cloroplasto se ha demostrado la presencia de genes con potencial de ser inducidos, pero hasta el momento no se ha caracterizado algn promotor inducible en este organelo. As mismo, el estudio de la expresin de genes del cloroplasto con elementos reguladores cis asociados a la induccin gnica, puede servir de punto de partida para el estudio y seleccin de promotores con potencial de ser inducibles en sistemas recombinantes. Por tanto, este trabajo tiene como objetivo el anlisis de la expresin de genes del cloroplasto de la microalga verde C. reinhardtii para identificar su potencial como promotores inducibles. Inicialmente se realiz un anlisis in silico a las secuencias del promotor ms la regin 5 no traducible (P+5UTR) de doce genes del cloroplasto de C. reinhardtii utilizando el programa PLACE. De este anlisis se seleccionaron los genes psbC, psbD, rpl16, atpA, chlL, chlN y tufA ya que sus regiones P+5UTR presentaron elementos cis con posible respuesta a inductores de la expresin gnica. Se estn realizando experimentos de RT-PCR semicuantitativa bajo diferentes tratamientos con los posibles inductores para analizar la expresin de estos genes y as determinar si alguno de ellos es inducible y si existe una relacin con los elementos cis presentes. Esta sera la primera vez que se caracterice la regin promotora de algn gen del cloroplasto con potencial de ser inducible.
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CT-BL-9 CULTIVO EXPERIMENTAL DEL ALGA Ulva spp. UNA OPCIN PARA LA NUTRICIN DE CAMARN EN LA PAZ, CALIFORNIA SUR, MXICO Snchez Rodrguez I., Casas Valdez M., Snchez A. Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas IPN. Av. Instituto Politcnico Nacional s / n, Col. Playa Palo de Santa Rita La Paz, Baja California Sur isrnacho@hotmail.com Debido a la alta densidad de crecimiento del alga verde, Ulva sp. (Enteromorpha sp), ha sido necesario su uso para el consumo humano, animales, y especficamente en las dietas de las postlarvas de camarn siguen siendo susceptibles a los cultivos. Esta alga tiene una gran demanda del mercado mundial para el alto contenido de protena (25 a 40%), minerales, calcio, fsforo, cidos grasos 3 y 6 . El cultivo de inculo Ulva sp usando sustrato artificial (de tejas de arcilla-) en 4 acuarios con luz indirecta y aireacin constante, permite controlar su crecimiento, as como la salinidad, pH, el oxgeno del medio ambiente y la temperatura del agua y los nutrientes. Despus de 3 semanas, una docena de camarn blanco de menores fueron colocados en un acuario. Esta especie de algas fueron seleccionados para el cultivo en el laboratorio segn los siguientes criterios. (1) Alto valor nutricional de los carbohidratos, lpidos y protenas para una correcta alimentacin post-larvas de camarn, (2) La formacin de algas es controlado y simple en ambiente controlado (acuario), (3) fcil de digerir por el post-larvas de camarn, y (4) Los nutrientes necesitan un medio para animarlos. Los resultados de las variables ambientales fueron la temperatura ambiental entre 22 C - 30 C, temperatura del agua haba intervalo entre 21 a 26 la salinidad entre 35 a 44 ppm, la C C, concentracin de oxgeno del 79% al 96%, el pH se mantuvo estable con 8,2 a 8,4. Las concentraciones de nutrientes fue de 68 M de nitratos y 0,64 M para los fosfatos. El crecimiento de Ulva sp fue de 0,1 a 2 cm de cada semana. El tracto digestivo en camarn blanco presenta un color verdoso debido a los alimentos consumidos, en este caso Ulva sp.
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CT-BL-10 EXPRESION DE GENES IMPLICADOS EN LA VIA METABOLICA DE SINTESIS DEL -CAROTENO EN LA MICROALGA Dunaliella salina (Chlorophyceae - volvocales) Galarza Tipn Janeth Isabel Universidad de Guayaquil, Programa de Biotecnologa janethgalarza@yahoo.com Una cepa del gnero Dunaliella aislada desde lagunas salinas de la Pennsula de Santa Elena, Ecuador fue identificada como Dunaliella salina en base a la secuencia de su gen ADNr 18S previamente amplificado por Nested-PCR con un par de iniciadores conservados en el gnero Dunalliela (MA1-F/MA3-R) y un par de iniciadores especficos de D. salina (DSs-F/MA3-R). Pruebas de PCR fueron desarrolladas para amplificar especficamente los genes del fitoeno sintasa (psy) y del fitoeno desaturasa (pds), utilizando respectivamente juegos de iniciadores PSY-F1/PSY-R1 y PDS-F2/PDS-R1. Los mismos juegos de iniciadores fueron despus utilizados para desarrollar pruebas de RT-PCR, y detectar la presencia de ARNm especficos de estos dos genes involucrados en la biosntesis del caroteno, considerando varias condiciones de cultivo de la microalga (salinidad: 0,6M, 1M, 2M; luminosidad constante o reducida; medio de cultivo enriquecido o empobrecido) La expresin del gen fitoeno desaturasa (pds) fue evaluada mediante la tcnica RT-PCR semicuantitativa, lo que condujo a determinar las primeras condiciones de cultivo de la cepa de D. salina para la biosntesis de -caroteno Palabras Claves.- Dunaliella salina, -caroteno, fitoeno sintasa, fitoeno desaturasa, ambientes hipersalinos, carotenogenesis. Financiamiento: Concepto Azul S.A. Ecuador.
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CT-BL-11 EVALUACIN DEL CRECIMIENTO DE Chlorella vulgaris A NIVEL DE ESCALAMIENTO PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA Armendriz Galvn Jess Fidel, Posadas Beltrn Adriana, Amezcua Allieri Miriam Adela Instituto Mexicano del Petrleo. Eje Central Lzaro Crdenas Norte 152. Col. San Bartolo Atepehuacn, C.P. 07730 Mxico, DF, Mxico. jagalvan@imp.mx A nivel mundial existe actualmente una crisis energtica de hidrocarburos fsiles, lo que hace ver a la energa renovable prometedora en el futuro. Se buscan combustibles generados a partir de biomasa de microorganismos (microalgas, levaduras, hongos y bacterias), que producen una gran cantidad de cidos grasos, los cuales pueden ser usados como una fuente potencial para la produccin de biodiesel. Las investigaciones sobre el cultivo de microalgas revisten gran importancia dada su amplia aplicacin biotecnolgica y comercial, utilizando cultivos discontinuos por su relativo fcil manejo, para determinar la cintica de crecimiento y sus parmetros crticos. El objetivo principal del presente trabajo fue evaluar la cintica de crecimiento de la microalga Chlorella vulgaris a nivel de escalamiento y bajo condiciones de laboratorio, iniciando desde la purificacin de la cepa, crecimiento en tubo de ensayo, matraz Erlenmeyer de 100, 500 y 1000 mL (escala intermedia), hasta la produccin masiva en un garrafn de vidrio de 20 litros de capacidad (carboy-escala masiva) para la produccin de biomasa. La microalga fue cultivada en Medio Basal de Bold (MBB) bajo condiciones auttrofas.
-1 Los cultivos se iniciaron con una densidad celular de 5,00 X 104 cel mL (escala intermedia) y de 1,00 -1 X 105 cel mL (escala masiva). El crecimiento de C. vulgaris present una tendencia similar de crecimiento tanto en la escala intermedia como en la masiva (carboy), presentando las fases caractersticas de un cultivo discontinuo. En la escala intermedia, se present una fase de latencia que culmin el da 1 con una densidad celular de 7,19 X 104 cel mL-1; la fase exponencial o logartmica dur 12 das con una densidad de 2,34 X 107 cel mL-1 y la fase estacionaria se present despus de los 14 -18 das con una densidad celular de 2,32 X 107 cel mL-1. Para la escala masiva, la fase de latencia culmin el da 4 con una densidad de 1,16 X 105 cel mL-1; la fase logartmica dur 21 das con una densidad de 7,83 X 106 cel mL-1. Finalmente la fase estacionaria se present despus de los 25 das. La produccin de biomasa seca promedio obtenida en la escala intermedia fue de 0,53 g/L y 7,90 g/L en escala masiva (valor estimado). Se concluye que las condiciones de propagacin son ptimas para obtener una cantidad de biomasa autotrfica adecuada para la obtencin de biodiesel.
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CT-BL-12 EXPLORACIN DE LA FORMA DE INCLUSIN DE LA MACROALGA Ulva clathrata EN ALIMENTO PARA CAMARN Pena-Rodriguez Alberto1, Leon Armando2, Ricque-Marie Denis1, Moll Benjamin2, Cruz-Suarez L. Elizabeth1
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Programa Maricultura, Universidad Autnoma de Nuevo Len, Cd. Universitaria F-56, San Nicols de los Garza, Nuevo Len, CP 66450, Mxico. 2 Aonori Aquafarms, Inc. 2015 Klee Place, Davis, CA 95618, USA. apr_22@hotmail.com
Se han utilizado una gran variedad de harinas de algas como aditivos en alimentos para camarn. Los procesos de manufactura de los alimentos pueden modificar o destruir compuestos activos o nutrientes especficos presentes en las algas. El objetivo del presente trabajo es determinar el efecto del procesado del alimento sobre el potencial de Ulva clathrata para mejorar el crecimiento en el camarn blanco (Litopenaeus vannamei). Una muestra del alga U. clathrata fresca fue proporcionada por la empresa Aonori Aquafarms. Se explor tres diferentes condiciones a 2% de inclusin de alga en el alimento: una primera muestra de alga fue secada a 65C/8 h para despus ser molida y adicionada durante la mezcla de los ingredientes de la dieta (D1); una segunda muestra de alga fresca fue licuada y agregada a la mezcla de ingredientes previo a la peletizacin del alimento (D2); Una tercera muestra de alga fresca fue licuada y utilizada para recubrir los pellets secos de alimento terminado (D3); Una ltima dieta se prepar sin inclusin de alga para fungir como control (DC). Se realiz un bioensayo de alimentacin de 4 semanas para determinar el efecto de las dietas sobre el rendimiento de camarones juveniles de L. vannamei (0.520.01g). Se utilizaron 4 replicas (acuarios de 60 L) por tratamiento con una densidad de 10 camarones por acuario, alimentados con 2 raciones diarias de alimento (09:00 y 16:00h). En las dietas a las cuales se les agreg el alga antes del proceso de peletizado (D1 y D2) se observ un aumento significativo en la capacidad de retencin de agua y una disminucin significativa en la perdida de materia seca (p<0.05). Los camarones alimentados con la dieta recubierta con alga (D3) presentaron un aumento significativo en el crecimiento comparados con los dems tratamientos (p<0.05). Los resultados observados indican que la macroalga U. clathrata mejora la estabilidad del alimento balanceado cuando se adiciona antes del peletizado, y que aparentemente el alga puede contener compuestos termolbiles que potencian el crecimiento del camarn L. vannamei.
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CT-BL-13 CARBON DIOXIDE MITIGATION BY MICROALGA IN A VERTICAL TUBULAR REACTOR WITH RECYCLING OF THE CULTURE MEDIUM Greque de Morais Michele, Vieira Costa Jorge Alberto Laboratory of Biochemical Engineering, College of Chemistry and Food Engineering, Federal University of Rio Grande (FURG), P. O. Box 474 Rio Grande-RS, 96201900, Brazil. Tel: +55-53-3233 8653; Fax: +55-53-3233 8676 jorge@pq.cnpq.br The increase in industrialization and urban population has led to a biggest demand by society for energy, which has increased the emission of atmospheric pollutants (CO2, SOx, NOx and other gases). Microalgae use photosynthesis as their principal metabolic mechanism to obtain organic carbon from the inorganic carbon contained in CO2, using solar energy. The photobioreactors configuration is one of the most important factors in controlling the biomass yield from photosynthetic cultures. The use of a vertical tubular photobioreactor increases the time the gas remains in the medium, the area of contact between the light and culture, the photosynthetic rate, and consequently the CO2 use efficiency. With microalgae cultures, recycling the medium allows the microalgae to use the nutrients until they are exhausted, with less exposure to the environment to the residues after biomass harvesting. This study aimed to assess the most suitable biomass concentration in which to cultivate the microalgae Spirulina sp., grown in a vertical tubular photobioreactor, with biomass removal and recycling of the medium in order to obtain maximum CO2 mitigation. When the microalga Spirulina sp. LEB 18 was cultivated in a vertical tubular photobioreactor with removal of cells and recycling of the medium kept at cellular concentration of 600 mg L-1, maximum CO2 mitigation was reached. Under these conditions the values obtained were 85.9 6.0 mg L-1 day-1 of biomass productivity and 186.8 73.1 mg L-1 day-1 of CO2 fixation. Therefore, combining the cultivation of microalgae and fixation of CO2 and recycling of the medium leads to a reduction of the problems caused by the emission of this gas and of the expenses with culture medium.
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CT-BL-14 TOXICIDAD DE LOS BIOCIDAS BIO1056 Y TK2459 SOBRE EL CRECIMIENTO DE Scenedesmus sp EN CULTIVOS DE LABORATORIO Meja Leyda1, Morales Ever2, Rincn Jos1 Laboratorio de Contaminacin Acutica. Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. Venezuela. 2 Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos. Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. Venezuela. jerincon04@gmail.com Con el objeto de conocer los lmites toxicolgicos de diferentes agentes biocidas sobre los organismos fitoplantnicos en el Lago de Maracaibo, se determin la concentracin inhibitoria (EC50) de los biocidas BIO1056 y TK2439 sobre el crecimiento de la microalga Scenedesmus sp bajo condiciones de laboratorio y utilizando protocolos estndares. Se utilizaron cultivos con crecimiento en fase logartmica de los cuales se tom una concentracin celular final aproximada de 1,5 x 106 clulas/ml en 100ml de cultivo a ensayar. Cada prueba estuvo compuesta por una batera de 24 frascos de vidrio de 300 ml de capacidad en las cuales fueron ensayadas, por triplicado, diluciones iguales a: 0,5; 1,0; 5,0; 10,0; 20,0; 30,0; y 40,0 ppm de cada biocida, ms un control. Una vez sembrados, los envases fueron colocados frente a lmparas fluorescentes con un regulador del fotoperodo 12:12h. El cuarto de cultivo present una temperatura promedio de 24 1C. Se realizaron contajes cada 24 horas de submuestras de cada rplica, en cada ensayo, utilizando un hemocitmetro. Los datos obtenidos en los bioensayos fueron ajustados mediante Regresin No Lineal, utilizando una curva sigmoidal de Dosis-Respuesta (pendiente variable). En los ensayos con la microalga Scenedesmus sp la EC50 promedio para Bio 1056 fue de 16,65 ppm y para TK 2439 result una EC50 de 31,63 ppm. De acuerdo a estos resultados el Biocida BIO1056 result con un mayor efecto inhibitorio sobre el crecimiento de Scenedesmus sp bajo condiciones de laboratorio. Durante los ensayos se observ que el biocida TK 2439 disminuye significativamente su efecto txico a partir de las 48 horas de cultivo, lo que explicara los resultados obtenidos.
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CT-BL-15 PRODUCCIN DE BIOMASA Y BIOHIDRGENO DE MICROALGAS EN REACTORES AL AIRE LIBRE Escalante Ricardo, Kauil Gener, Martn del Campo Julia S., Patio Rodrigo Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados - Unidad Mrida Departamento de Fsica Aplicada jsanchezm@mda.cinvestav.mx La especie Chlamydomonas reinhardtii es un modelo para el estudio del metabolismo de las microalgas, incluyendo la fotosntesis as como su genoma, que han sido ampliamente estudiados. Tambin han llamado la atencin por sucapacidad de producir gas hidrgeno por medio de la biofotlisis del agua. En efecto, la biofotlisis es un proceso en el cual est involucrada la fotosntesis y que, acoplado a la actividad de la enzima hidrogenasa en condiciones anaerobias limitadas en azufre, concluye en la produccin de hidrgeno. Con la finalidad de proponer una metodologa para la produccin de este gas por C. reinhardtii en Yucatn, se ha estudiado su crecimiento en biorreactores que utilizan la radiacin solar como fuente luminosa. En este trabajo, se reporta la utilizacin de reactores planos tipo panel y de reactores tubulares verticales para evaluar el crecimiento de los cultivos algales. La cintica de crecimiento y los rendimientos son analizados en funcin de factores como el medio de cultivo utilizado, la forma y volumen de los reactores, as como de las pocas estacionales. El usos de sondas automticas de medicin permite un monitoreo continuo que ayuda a la caracterizacin del crecimiento microbiano, adicional a la toma diaria de muestras para su anlisis extemporneo. Aunado al estudio de produccin de biomasa, se estudian las condiciones para la produccin de biohidrgeno por estas mismas algas en condiciones controladas de laboratorio, con el fin de proponer un biorreactor al aire libre que opere con radiacin solar como fuente luminosa. Las microalgas producidas son filtradas y enjuagadas antes de ser resuspendidas en un medio de cultivo en el que las sales de sulfato han sido reemplazadas por los cloruros correspondientes. El cultivo es colocado entonces en un biorreactor cerrado para inducir la anaerobiosis y se estudia el efecto de factores como la concentracin de biomasa suspendida o el rgimen de iluminacin en la produccin de hidrgeno. La produccin del gas se sigue a travs de una celda de combustible cuyo voltaje es medido en tiempo real a travs de una interfaz conectada a una computadora para la adquisicin automtica de datos. Los resultados de la produccin de biomasa y biohidrgeno en reactores al aire libre, permitirn evaluar un sistema integral a escala piloto.
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CT-BL-16 EFECTO TOXICO DEL DICROMATO DE POTASIO SOBRE EL CRECIMIENTO DE LAS MICROALGAS Scenedesmus sp Y Chlorella sp EN CULTIVOS DE LABORATORIO Meja Leyda1, Morales Ever2, Rincn Jos1 Laboratorio de Contaminacin Acutica. Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. Venezuela. 2 Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos. Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Zulia. Venezuela. leydamejia06@gmail.com Se determin la concentracin inhibitoria (EC50) del Dicromato de Potasio sobre el crecimiento de las microalgas Scenedesmus sp y Chlorella sp bajo condiciones de laboratorio y utilizando protocolos estndares. Se utilizaron cultivos con crecimiento en fase logartmica de los cuales se tom una concentracin celular final aproximada de 1,5 x 106 clulas/ml en 100ml de cultivo a ensayar. Cada prueba estuvo compuesta por una batera de 24 frascos de vidrio de 300 ml de capacidad en las cuales fueron ensayadas, por triplicado, diluciones iguales a: 0,5; 1,0; 5,0; 10,0; 20,0; 30,0; y 40,0 ppm de la solucin de Dicromato, ms un control. Una vez sembrados, los envases fueron colocados frente a lmparas fluorescentes con un regulador del fotoperodo 12:12h. La temperatura promedio del agua de los cultivos estuvo alrededor de 24 1C. Se realizaron contajes cada 24 horas de submuestras de cada rplica, en cada ensayo, utilizando un hemocitmetro. Los datos obtenidos en los bioensayos fueron ajustados mediante Regresin No Lineal, utilizando una curva sigmoidal de Dosis-Respuesta (pendiente variable). Los ensayos con cromo hexavalente al que fueron expuestas las microalgas arroj resultados similares. En Chlorella sp la EC50 fue igual a 7,337 ppm (R2= 0,9784) mientras que en Scenedesmus sp la EC50 result en 7,332 ppm (R2 = 0,9403). Los resultados de toxicidad del cromo hexavalente obtenidos para ambas especies se encuentra dentro de los rangos reportados en la literatura para otras especies de microalgas.
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CT-BL-17 INDUCCIN DE FLOCULACIN DE Isochrysis galbana MEDIANTE HIDRXIDO DE SODIO Y EFECTO DEL CAMPO MAGNTICO, COMO POSIBLES ALTERNATIVAS PARA LA COSECHA DE MICROAGLAS Aldana-Avils Cynthia Elizabeth, Greene-Yee Adriana, Puente-Carren Eleonora, LoraVilchis Mara Concepcin Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste, S. C. CIBNOR, Laboratorio de microalgas, Mar Bermejo 195, Col. Palo de Sta. Rita, La Paz, B.C.S. Mxico, 23090. cony04@cibnor.mx La cosecha de la biomasa microalgal es uno de los cuellos de botella en la obtencin de los productos microalgales y una cosecha eficiente puede ser determinante en la economa del proceso ya que el costo calculado puede ir del 20 al 30 porciento del total. La centrifugacin que es uno de las mtodos de cosecha ms empleados implica un alto costo por lo que cualquier proceso que permita disminuir el volumen a centrifugar puede redundar en descenos del costo de produccin. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la adicin de diferentes concentraciones de hidrxido de sodio como inductor de floculacin en la microalga Isochrysis galbana, mediante el grado de floculacin, la eficiencia de la floculacin y el da celular. Isochrysis galbana es una microalga comunmente empleada en acuicultura de especies marinas, fue cultivada en agua de mar enriquecida con medio f/2, iluminacin natural, en dos condiciones, con y sin ajuste de pH (7.5-8) por adicin de CO2. Los experimentos de floculacin se realizaron en tubos de ensayo de 10, 50 y 100 ml y la altura del flculo formado fue monitoreada durante 120 min; la densidad celular en el sobrenadante y el porcentaje de mortalidad en el flculo fueron determinadas al final. El efecto del campo magntico sobre la compactacin del flculo tambin fue evaluado. El grado de floculacin o sedimentacin se determin por la pendiente de la altura del flculo en funcin del tiempo; la eficiencia de floculacin se determin por la diferencia entre la concentracin inicial y la del sobrenadante a los 60 y 120 min expresada en porciento del valor inicial; el dao celular fue evaluado como porcentaje de las clulas muertas en el flculo teidas con azul de Evans. Los resultados indican que las concentraciones de 0.2 - 4 mg/ml produjeron floculacin de 0 a 75 mm/h durante la primera hora, con eficiencias de 9-100%. El efecto del campo magntico sobre la formacin del flculo solo fue evidente a partir de adiciones de 0.4 mg/ml de lcali. La mortalidad celular en el flculo fue de 0-7% en todos los casos. Estos resultados indican que el uso adecuado de estos lcalis puede resultar en un beneficio para la economa de produccin ya que ambos son de bajo costo y podran ser una alternativa previa a la obtencin de biomasa microalgal. Palabras clave: Floculacin, Isochrysis galbana, sedimentacin, compactacin, microalgas.
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CT-BL-18 EFECTO DEL CHOQUE OSMTICO EN LA PRODUCCIN DE AZCARES FERMENTABLES POR ALGAS Fernndez Linares Luis, Bremauntz Michavila Pilar, Torres Bustillos Luis, Garibay Orijel Claudio, Caizares Villanueva Rosa Olivia Depto. de Bioprocesos, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa UPIBI-IPN. Mxico D.F. Departamento de Biotecnologa y Bioingeniera, CINVESTAV. Mxico D.F lfernandezl@ipn.mx En la actualidad el 80 % de la energa proviene de combustibles fsiles, los cuales adems de ser limitados implican inconvenientes ecolgicos importantes, hacindolos no sustentables. El biodiesel y el bioetanol pueden ser combustibles sustentables; el reto ms importante es obtenerlos a partir de productos baratos, renovables y que no compitan con la alimentacin humana y terrenos de cultivo. El bioetanol se produce a partir de la fermentacin de azcares provenientes de material vegetal principalmente de Caa y de Maz; una propuesta interesante es emplear microalgas, la cuales como producto de la fotosntesis producen azcares; dicha produccin puede ser incrementada a travs de mecanismos de osmorregulacin, como respuesta al choque osmtico. El objetivo de este trabajo es la obtencin de azcares a partir de microalgas aisladas de medios naturales, que pueda ser la materia prima para la fermentacin alcohlica. Se presentan los mtodos de aislamiento, e empleando diferentes medios de cultivo para cada tipo de alga, dependiendo de su hbitat original la produccin de biomasa y azcares y el efecto del choque osmtico es esos parmetros. Se aislaron 12 cepas que presentaron crecimientos hasta 2.6 g/L de biomasa peso seco (PS) y produccin de azcares intra y extracelulares. Chlorococcales Cystecocus,, Chlorococcales Scenedesmus, Chroococales Synechocistis X8, son las tres cepas con mayor formacin de biomasa (entre 2.1 y 2.6 g/L). La cepa identificada como Chlorella spp. present la mejor produccin de azcares (23.6 mg de azcares totales/ g de biomasa PS) y una biomasa de 1.36 g/L. Al someterla a choque osmtico a 0.4 NaCl por 24 horas, la produccin de azcares aument 18 veces, alcanzando 421 mg azcares/ g biomasa PS. Las cepas aisladas presentan un potencial para la producir azcares fermentables para produccin de bioetanol de una forma sustentable.
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CT-BL-19 EFECTO DE LA AIREACIN Y LA IRRADIACIN SOBRE UN CONSORCIO DE CIANOBACTERIAS FIJADORAS DE NITROGENO Ramrez Lpez Citlally, Trujillo Tapia Ma. Nieves Universidad del Mar, campus Puerto ngel nieves@angel.umar.mx Las Cianobacterias Fijadoras de Nitrgeno (CFN) proveen de muchos beneficios al hombre, desde la produccin de alimento, sustancias qumicas de elevado valor comercial, hasta el tratamiento de agua residual mejoramiento de suelos y uso potencial como biofertilizante. En el presente estudio se evalu el efecto de la variacin del flujo de aire y la irradiacin sobre un consorcio de cianobacterias fijadoras de nitrgeno cultivado en un sistema de produccin semicontinuo en fotobiorreactores de columna -1 burbujeada modificados. Se probaron tres flujos de aire (2, 3 y 4 Lmin ) y dos irradiaciones (5350 100 Lux y 6200 100 Lux), en fotobiorreactores de 1L, con un fotoperiodo de 12h luz/ 12h oscuridad a una temperatura de 22 2 Los testigos para las irradiaciones fueron en cultivo discontinuo y con C. una aireacin de 1L min-1; ambos tratamientos se realizaron por triplicado. Los parmetros evaluados fueron: pH, densidad ptica, peso seco de biomasa, cuantificacin de clorofila a, amonio y protena. Los flujos elevados de aire permitieron que el gnero Fischerella predominara totalmente sobre el gnero Anabaena. Las cianobacterias de los testigos y de los tratamientos crecieron favorablemente y entre estos, los resultados de densidad ptica, peso seco de biomasa, clorofila a, protena y pH fueron similares hasta que alcanzaron la fase estacionaria a los 13 y 16 das, respectivamente, despus de haber iniciado la cintica. Despus del da 23, los tratamientos donde se obtuvo un mayor crecimiento y produccin de protena fueron en el de 6200 Lux y un flujo de 2L min-1, mientras que, en el flujo de 3L min-1 se obtuvo la mxima produccin de clorofila a (13.6 mgL-1). Por lo que respecta a la liberacin de amonio, ste present marcadas diferencias entre testigos y tratamientos despus del noveno da de crecimiento; de manera global, los testigos y los cultivos de mayor irradiacin y mximo flujo de aire liberaron mayor cantidad de amonio. El presente estudio permiti conocer la capacidad del gnero Fischerella para adaptarse a distintas condiciones de cultivo, en especial, a elevados flujos de aire. Las modificaciones hechas a los fotobiorreactores favorecieron el crecimiento del cultivo sin aglomerados celulares; por otro lado, la variacin de las aireacin, irradiacin y sistema de cultivo afectaron la morfologa y fisiologa de las cianobacterias, en especial las ramificaciones de los filamentos y la liberacin de amonio.
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CT-BL-20 BARROS CLOACALES COMO FUENTE DE NUTRIENTES PARA EL CULTIVO MASIVO DE Nannochloropsis oculata (Droop) Hibberd Prsico M. M.1, Beligni V.1,2, Bambill G.1, Lucero M.1, Saubidet A.1
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Universidad Tecnolgica Nacional (UTN), Sede Mar del Plata, Argentina Consejo Nacional de Investigaciones Cientficas y Tcnicas (CONICET), Argentina mpersico@mdp.utn.edu.ar
Los barros cloacales pueden ser utilizados como una fuente alternativa de nutrientes para el cultivo masivo de microalgas marinas, lo cual incide directamente en la disminucin de los costos de produccin a gran escala, y constituye una forma de reutilizar los desechos slidos cloacales. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de una solucin preparada con barros cloacales primarios (SBC) de la Planta de Pretratamiento de la ciudad de Mar del Plata, Argentina, sobre el crecimiento de la microalga marina Nannochloropsis oculata, seleccionada candidata para la produccin de biodiesel por su alto contenido en lpidos y por su gran capacidad de adaptacin a las condiciones climticas locales. Esta especie fue cultivada en un invernadero con luz natural, en tanques de 200 litros de capacidad, con agua marina proveniente del sistema de refrigeracin de una central termoelctrica muy prxima. La SBC utilizada en las experiencias posee concentraciones de nitrgeno y fsforo similares a los medios de cultivo enriquecidos utilizados tradicionalmente. El crecimiento de esta especie con SBC fue similar o superior al del tratamiento utilizado como control, dependiendo de los parmetros ambientales, como temperatura y luz. Tambin se realizaron anlisis bioqumicos en ambos tratamientos: clorofila-a, contenido de aceites y perfiles de cidos grasos. Los resultados obtenidos sugieren que la solucin de barros cloacales puede ser utilizada como fuente de nutrientes para la produccin de biomasa microalgal, reduciendo as los costos operativos del cultivo masivo y permitiendo un manejo sustentable del medio ambiente.
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CT-BL-21 ESTUDIO DE LA RESPUESTA INMUNE CELULAR PRODUCIDA POR EXTRACTOS DE ALGAS ROJAS (Rhodophyta) Y CAFS (Phaeophyceae) EN RATONES BALB/C Lopez Mayra, Abdala Roberto, Lopez Felix, Re Denise, Licea Alexei mayralopez1502@hotmail.com Los polisacridos aislados de fuentes botnicas (hongos, algas, lquenes y plantas superiores) han atrado gran atencin en el campo biomdico debido a su amplio espectro de propiedades teraputicas y por su toxicidad relativamente baja. Algunos polisacridos procedentes de algas, como la Periandra mediterrnea, Endarachne binghamiae, Derbesia marina, Hydropuntia cornea y Halopithys incurva entre otros, han mostrado tener algun tipo de actividad inmunoestimulante, ya sea por aumento en la proliferacin de clulas inmunolgicas o por el aumento de la produccin de citocinas. Macrocystis pyrifera es un alga parda que habita en la costa del pacifico de Baja California y que actualmente es aprovechada para la obtencin de alginatos. Gracilaria cornea es un alga roja que est ampliamente distribuida en mares templados y tropicales que posee un alto contenido en sustancias de inters comercial. Se contaba previamente con extractos de M. pyrifera y de G. cornea para estudiar; tambin se prob un extracto de polisacridos cidos obtenido por precipitacin selectiva. En este estudio se determin si alguno de los polisacridos obtenidos a partir de estas especies, tienen efectos inmunoestimulantes o inmunosupresores en la respuesta inmune celular de ratones Balb/c. Se realizaron estudios in vitro para estudiar la funcin de los extractos A y B de M. pyrifera como adyuvante, midiendo con un ensayo de viabilidad celular la proliferacin de linfocitos T, B y macrfagos contenidos en ndulos poplteos de ratones que fueron previamente inmunizados con la protena recombinante ESAT-6. Tambin se analiz la toxicidad de los extractos en macrfagos de ratn (RAW 264.7) con el ensayo colorimtrico MTT, la produccin de IL-6, TNF- y oxido ntrico. El contenido de carbohidratos totales fue estudiado en la harina de M. pyrifera. Todos los polisacridos utilizados en este estudio se analizaron por espectrofotometra de infrarrojo.
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CT-BL-22 SYNTHESIS OF BIOPOLYMERS TO Synechococcus MICROALGA Vaz Bruna da Silva , Ferreira Mauren de Chiaro , Costa Jorge Alberto Vieira2, Morais Michele Greque2 Federal University of Pampa, 96412-420, Bag, RS, Brasil. Fax: +55 53 3242-9931 R:26. Federal University of Rio Grande, Laboratory of Biochemical Engineering, College of Chemistry and Food Engineering, P.O.Box 474, 96201-900, Rio Grande, RS, Brazil. Fax: +55 53 3233 8745. michele.morais@pq.cnpq.br Microalgae are photosynthetic organisms with relatively simple requirements for growth compared to other biomass sources. The composition and rates of photosynthesis and growth of these microorganisms are highly dependent on culture conditions, so that the manipulation of these can result in a marked production of metabolites of interest. The polyhydroxyalkanoates (PHAs) are biopolymers that are produced and accumulated by microorganisms as energy reserves, and they can be synthesized by microalgae. Among the PHAs, poly(3-hydroxybutyrate) (PHB) has attracted scientific, technological and industrial interest in different countries due to the fact that it is thermoplastic, biodegradable and biocompatible with cells and tissues. When attacked by microorganisms (fungi, bacteria and enzymes), PHB completely degrades in 90 days. This study aims to extract PHB from Synechococcus microalga cultived in different types of carbon source. The Synechococcus microalga from stock cultures kept in our laboratory. We used for the cultivation modified Zarrouk medium (without carbon source and nitrate reduced in 10%). In duplicate -1 experiments the carbon source studied were sodium bicarbonate (8.4; 16.8 e 25.2 gL ) and sodium -1 acetate (0.2; 0.4 e 0.6 gL ). The cultivation during 15 days, and were maintained to 23-28 C. The photoperiod was 12 h light/dark and illumination 4700 lux. The cellular concentration and pH were determined each 24 hours to optic density and pHmeter, respectively. At the end experiments we realized the diferential digestion to extract the biopolymers. The maximum cellular concentration were 4.13 gL-1 and 3.49 gL-1 in the sodium bicarbonate and sodium acetate cultivation, respectively. The maximum especific growth rate of 0.38 d-1 in the experiment with 16.8 gL-1 of sodium bicarbonate and 0.23 d-1 with 0.2 gL-1 of sodium acetate. The maximum productivity were 1.70 and 0.67% of biopolymer obtained with 25.2 gL-1 of bicarbonate and 0.4 gL-1 of sodium acetate, respectively.
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CT-BL-23 VELOCIDAD DE FIJACIN DE CO2 POR Nannochloropsis oculata EN FOTOBIORREACTOR A ALTAS CONCENTRACIONES DE CO2 Araya Blanca, Valenzuela Nicols, Undurraga Daniel, Daz Alvaro, Poirrier Paola Pontificia Universidad Catlica de Valparaso alvaro.diaz@ucv.cl En procesos productivos que emiten gases de efecto invernadero (CO2, SOx y NOx), el cultivo de microorganismos fotosintticos como las microalgas resulta de gran utilidad para la captura y mitigacin del CO2 de la atmsfera. Se sabe que adems de mitigar el CO2, la fijacin de CO2 puede ser utilizada como una estrategia para la produccin de biomasa con potencial energtico y la eventual generacin de subproductos. Para obtener una captura de CO2 eficiente, se hace necesario evaluar la capacidad de fijacin de CO2 de diferentes microalgas que toleren altos contenidos de CO2. El objetivo de este trabajo fue determinar la velocidad de fijacin de CO2 (RCO2) de la microalga Nannochloropsis oculata cultivada en un fotobiorreactor usando altos niveles de CO2 en la alimentacin y diferentes concentraciones de nitrato en el medio de cultivo. Los cultivos de N. oculata se realizaron en un fotobiorreactor airlift (5 L) a una intensidad de luz de 3 klux. El medio de cultivo fue compuesto de agua de mar, solucin con macro y micro nutrientes y diferentes concentraciones de nitrato (0,2; 0,4 y 1,4 g/L). La aireacin del cultivo fue con aire enriquecido con CO2 (2; 8,5 y 15%) en la alimentacin con velocidades superficiales para el riser y downcomer de 0,051 y 0,0042 m/s, respectivamente. Las principales evidencias indican que en cultivos realizados con 0,2 g/L de nitrato, un incremento del porcentaje de CO2 desde 2 a 8,5% no afect la mxima concentracin de biomasa obtenida, alcanzndose en ambas condiciones 1,0 g/L. Este hecho se opone a lo reportado previamente para cultivos de N. oculata, lo cual puede ser explicado por que en nuestros experimentos la microalga fue previamente adaptada. En cuanto a la RCO2, al aumentar el contenido de CO2 desde 2 a 8,5%, se observ una leve disminucin en la RCO2, desde 160 a 150 mgCO2/L d. En cultivos realizados con 8,5% de CO2 y a la ms alta concentracin de nitrato estudiada (1,4 g/L), la RCO2 se increment a 240 mgCO2/L d, lo cual concuerda con que un incremento del NO3- aumenta la afinidad por carbono inorgnico. Este valor de RCO2 (240 mgCO2/L d) es similar al reportado para otras microalgas. Los resultados de este trabajo muestran el potencial de N. oculata para ser usada en el proceso de captura de CO2 y su posibilidad de implementar este cultivo a escala real con corrientes gaseosas con alto contenido de CO2.
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CT-BL-24 CULTIVOS EXPERIMENTALES DE LA CIANOBACTERIA Spirulina subsalsa UTILIZANDO COMO MEDIO DE CULTIVO FERTILIZANTES AGRCOLAS Rodrguez-Palacio Mnica Cristina1, Lozano-Ramrez Cruz1, lvarez-Hernndez Sergio1, Alva Medina Erick Octavio1, Arredondo Vega Bertha Olivia2, Prez Garca Octavio3, Vzquez Perales Ricardo3 Laboratorio de Ficologa Aplicada, Departamento de Hidrobiologa, Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa. Apartado Postal 55-535. C. P. 09340, Mxico, D. F. Tel: 58044739* fax: 58044737 2 Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Mar Bermejo 195, Colonia Playa Palo de Santa Rita, La Paz, Baja California Sur, C.P. C.P. 23090. 3 Universidad Iberoamericana Puebla, Programa Interdisciplinario del Medio Ambiente. Boulevard del nio poblano No. 2901 Unidad Territorial Atlixcayotl C.P. 72430. Puebla, Puebla. mony@xanum.uam.mx En la actualidad, la investigacin aplicada sobre los procesos de fotosntesis de microalgas tiene especial relevancia porque las microalgas tienen alto potencial para la produccin de alimentos altamente nutritivos, substancias qumicas de uso farmacutico, pigmentos y aceite para la fabricacin de biodiesel sin competir por el uso del suelo con la produccin de alimentos. En Mxico se utiliz alga Spirulina (Arthrospira sp.) como alimento desde la poca de los aztecas, y hace apenas unas dcadas era uno de los principales productores a nivel mundial, actualmente se importa dicho alimento. La importancia de la Spirulina radica en la riqueza de nutrientes que contiene, entre sus cualidades destacan las propiedades para incrementar los niveles de energa, mejorar el apetito, la produccin de ficocianina y -caroteno los cuales son buenos antioxidantes. En el presente trabajo se probaron diferentes medios de cultivo a base de fertilizantes orgnicos Triple 17 y Bayfoland forte en tres concentraciones diferentes y con el medio de cultivo convencional f/2 testigo. Se midi la tasa de crecimiento celular por recuento celular y peso seco, as como la calidad de la biomasa mediante la cuantificacin de su composicin proximal. Este experimento se enmarc dentro del proyecto interinstitucional de la Universidad Iberoamericana de Puebla en colaboracin con la Universidad Autnoma Metropolitana Iztapalapa y el Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), intitulado: Produccin de microalgas para la obtencin de aceites para combustibles alternativos y biomasa alimenticia.
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CT-BL-25 CULTIVOS DE MICROALGAS, PROVENIENTES DE LA LAGUNA DE CATEMACO, VERACRUZ Rodrguez-Palacio Mnica Cristina1, Germn Vega-Jurez1, Mara Lilian Acosta Martnez1, Beatriz Trejo Lpez1, Cruz Lozano-Ramrez1, Sergio lvarez-Hernndez1, Fayco Amateco2, Gloria Garduo Solrzano2 Laboratorio de Ficologa Aplicada, Departamento de Hidrobiologa, Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa. Apartado Postal 55-535. C. P. 09340, Mxico, D. F. Tel: 58044739* fax: 58044737. 2 Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM. Herbario IZTA. Av. de los Barrios No. 1, Los Reyes Iztacala. Tlalnepantla, Edo. de Mxico. C.P. 54090 Tel/Fax: 5623-1378. mony@xanum.uam.mx Las microalgas tienen gran importancia econmica y ecolgica, en Mxico, hace algunos aos, los cultivos se enfocaron nicamente en produccin de biomasa algal para alimento de peces en acuacultura, hoy da se piensa en ellas como una solucin a los problemas de escases de alimentos, por sus altos contenidos protenico e incluso como solucin a la cada vez ms cara y agotada fuente de combustibles fsiles. Adems que su estudio contribuye a determinar su utilizacin como bioindicadores de calidad de aguas y procesos de eutroficacin del ecosistema. En el laboratorio de Ficologa Aplicada de la UAM-Iztapalapa, en colaboracin con investigadores de la FES Iztacala han establecido cultivos de microalgas provenientes de la laguna de Catemaco, Veracruz. El estudio de la composicin fitoplantnica de esta laguna se viene realizando por parte de la FES Iztacala desde hace varios aos y con los cultivos establecidos se realizarn trabajos de biologa molecular que apoyen los trabajos de florstica y adems estos cultivos servirn para la bsqueda de sustancias de uso industrial, alimenticio y farmacolgico. Se lograron establecer 18 cepas de microalgas, donde destacan: Pseudoanabaena, Pediastrum, Scenedesmus quadricauda, S. dimorphus, Coelastrum microporum, Ankistrodesmus, Monoraphidium, Staurastrum gracile, Chlamydomonas, y la comnmente utilizada en acuicultura Chlorella vulgaris. Los cultivos se establecieron utilizando las tcnicas de aislamiento con micropipetas, diluciones seriadas y rayado en agar. Estos cultivos son: no axnicos, semicontinuos y se mantienen con ciclo de luz oscuridad de 12:12, a 20 + 1 de temperatura y con irradiacin de 166.8 mmol m-2 s-1. C C Medios de cultivo Bayfoland y F/2. El establecimiento de esta coleccin de cultivos, entre la UAM-I y la FES Iztacala abre un importante campo de colaboracin entre las instituciones.
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CT-BL-26 PRUEBAS DE TOXICIDAD DE DINOFLAGELADOS MARINOS EN CONDICIONES DE CULTIVO Rodrguez-Palacio Mnica Cristina, Lozano-Ramrez Cruz, lvarez-Hernndez Sergio, Flores Meja Miguel Angel, Lpez Meja Violeta Gabriela, Trejo Lpez Beatriz, Vega Jurez Germn, Acosta Martnez Mara Lilian Laboratorio de Ficologa Aplicada, Departamento de Hidrobiologa, Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa. Apartado Postal 55-535. C. P. 09340, Mxico, D. F. fax: 58044737. mony@xanum.uam.mx En los ltimos aos se han identificado 200 especies fitoplanctnicas nocivas de un total de aproximadamente 4000 descritas; de las especies nocivas, la mayora son dinoflagelados y en menor proporcin rafidofceas, primnesiofitas y diatomeas. Los pases tropicales como Mxico, se ven comnmente afectados por las proliferaciones algales que producen estos organismos, las cuales pueden ser txicas y bioacumularse en organismos lo cual afecta al hombre de muchas maneras. Entre las especies que se conoce su toxicidad podemos citar los dinoflagelados desnudos, Gymnodinium catenatum y Karenia brevis, y dinoflagelados tecados Pyrodinium bahamense y Alexandrium catenella. Sin embargo muchas otras especies son potencialmente txicas y necesitan estudiarse para corroborar dicha toxicidad, como las de los gneros Amphidinium, Heterocapsa, Karlodinium y Prorocentrum. En este trabajo utilizamos cultivos de dinoflagelados marinos, para la realizacin de bioensayos utilizando como organismos de prueba Artemia salina y Guppy Poecillia reticulata. Los cultivos se cosecharon en fase exponencial, se liofilizaron para la disrupcin celular y se extrajeron con una solucin de Butanol: Metanol: agua. Se dej evaporar los extractos y una vez secos, se resuspendieron con solucin salina al 9%. Los bioensayos se realizaron por triplicado y con un testigo. Los extractos se clasificaron con base en el comportamiento que presentaron los organismos control, las artemias y los peces en: Txicos (T) Moderadamente txicos (MT) y No txicos (). Existe mucho por investigar an sobre aislamiento y determinacin de las molculas txicas, as como la aplicacin de estas molculas dentro de las diversas reas de la ciencia. Los bioensayos con Artemia salina y con peces de ornato, pueden ser menos agresivos e igual de eficientes de los tradicionales bioensayos de ratn. El saber cuales especies de microalgas son potencialmente txicas, con un mtodo adecuado, nos puede ayudar a tomar medidas de control y aplicacin de vedas eficientes para evitar intoxicaciones en humanos.
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CT-BL-27 ANLISIS COMPARATIVO PROXIMAL DE CIANOBACTERIAS FILAMENTOSAS DE INTERS ECONMICO, CULTIVADAS BAJO RGIMEN DISCONTINUO Rosales Loaiza Nstor1, Bermdez Jos Luis1, Jonte Lorena2, Morales Ever1
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Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela 2 Divisin de Estudios Bsicos y Generales, Facultad de Ciencias de la Educacin, Universidad Jos Antonio Pez. Valencia, Venezuela nestoralgae@gmail.com
Diversas cianobacterias filamentosas presentan inters agroalimentario y su calidad nutricional est influenciada por el efecto de los parmetros de cultivo. Se reporta el anlisis comparativo proximal (g/100g) de Nostoc LAUN0015, Nostoc UAM206, Anabaena sp.1 y Anabaena sp.2 cultivadas en medio BG11 (0 UPS; 1,5 g L-1 NaNO3) y de Spirulina subsalsa en medio Zarrouk (35 UPS; 2,5 g L-1 NaNO3) y Jordan (20 UPS; 2,5 g L-1 NaNO3). Se realizaron cultivos de 15 L en condiciones de laboratorio para Nostoc, Anabaena y S. subsalsa. Adems, cultivos escalados de S. subsalsa hasta 40 L en medio Jordan, a cielo abierto y en ambiente semi-cerrado. Todos los cultivos fueron cosechados en fase estacionaria y la biomasa filtrada y secada para el anlisis proximal mediante mtodos COVENIN y AOAC. La productividad de las cepas de Anabaena y Nostoc fue de 1,5 y 1,0 g L-1, respectivamente. Mientras que Spirulina produjo 0,7; 2,8; 1,2 y 1,0 g L-1 en cultivos de laboratorio con medio Zarrouk, medio Jordan, semi-cerrado y a cielo abierto, respectivamente. El contenido de cenizas fue mayor en Spirulina con 35% y con medio Jordan alcanz un mximo de 49,8%. En cambio, con Anabaena y Nostoc fue de 10 y 20%, respectivamente. La protena cruda en Nostoc vari entre 25 y 29% y en Anabaena entre 31 y 40%. Para Spirulina con Jordan alcanz 19,96, 20,08 y 30,61% en laboratorio, a cielo abierto y ambiente semi-cerrado, respectivamente. Pero, con Zarrouk aument a 31,40%. El contenido de lpidos fue bajo en todas las cianobacterias. En S. subsalsa en laboratorio produjo un 0,80%, pero increment a 2,12% a cielo abierto. El extracto libre de nitrgeno, fue mayor en Nostoc LAUN y en Anabaena sp.1 y sp.2, con valores cercanos al 50%. En Spirulina, disminuy al aumentar la exposicin al ambiente externo con valores de 44, 30 y 25% en condicin de laboratorio, semi-cerrado y cielo abierto, respectivamente. Finalmente, la fraccin de nutrientes digeribles fue elevada para Nostoc y Anabaena, con valores mayores al 60 y 70%, respectivamente. En Spirulina vari desde 40%, a cielo abierto hasta 73% en condiciones de laboratorio (Zarrouk). Todas las cepas evaluadas presentaron un perfil proximal comparable a otras microalgas y fuentes convencionales alimenticias. Nostoc LAUN, Anabaena sp.1 y S. subsalsa reflejaron los porcentajes de protenas, nutrientes digeribles totales y carbohidratos ms elevados y la variabilidad de estos es dependiente de las condiciones de cultivo.
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CT-BL-28 ACTIVIDAD ANTIVIRAL Y NIVEL DE ACCIN DE POLISACRIDOS SULFATADOS PROVENIENTES DE ALGAS CONTRA EL VIRUS DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE (NDV) Elizondo-Gonzlez Regina1, vila-Herrera Karen1 , Pea-Rodrguez Alberto1, Cruz-Suarez Elizabeth2, Rique-Marie Denis2, Rodriguez-Padilla Cristina1, Trejo-Avila Laura1
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Laboratorio de Inmunologa y Virologa Programa de Maricultura. Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad Autnoma de Nuevo Len. San Nicols de los Garza, Nuevo Len. Mxico. Tel. 83 29 41 10 ext. 6423. reginaeg@hotmail.com
Introduccin. El desarrollo de nuevos frmacos antivirales se ha enfocado en buscar compuestos con elevada eficacia antiviral a dosis no citotxicas. Se ha demostrado que varios polisacridos sulfatados (PS) provenientes de algas poseen actividad antiviral contra virus envueltos de importancia en salud humana y veterinaria. En nuestro estudio utilizamos como modelo a NDV debido a que adems de causar severas prdidas econmicas en la industria avcola tiene caractersticas comunes con otros paramixovirus de importancia en salud como sarampin, parainfluenza y respiratorio sincicial, as como con otros virus envueltos como el virus de la Influenza. Objetivo: Evaluar la actividad antiviral y nivel de accin "in vitro" de PS extrados de las algas Cladosiphon okamuranus, Macrocystis pyrifera y Ulva calthrata contra NDV. Material y Mtodos. Previo al estudio de actividad antiviral se evalu la citotoxicidad de los PS mediante el mtodo colorimtrico MTT en clulas VERO y cultivo primario de fibroblastos de embrin de pollo (CPFEP). Su actividad antiviral y nivel de accin se determin en la lnea celular VERO por medio de la inhibicin de sincicios. Resultados. El PS proveniente de C. okamuranus (fucoidan) mostr una concentracin citotxica al 50% (CC50) en la lnea celular VERO >1500 g/mL y de 973.25 g/mL en CPFEP. El extracto de PS de U. calthrata, mostr menor toxicidad que el PS de C. okamuranus en CPFEP (CC50>1500 g/ml) y la toxicidad del extracto de M. pyrifera fue mucho mayor (CC50 4.46 g/mL). Se observ una inhibicin del efecto citoptico del virus en clulas VERO infectadas con NDV (103DICT50) a una concentracin inhibitoria al 50% (IC50) de <0.1 g/mL y al 100 % con 10 g/ml de fucoidan de C okamuranus. El efecto antiviral se observ agregando el compuesto antes de la infeccin o hasta 20 minutos despus de haber infectado el cultivo. La inhibicin de la fusin ocurri por efecto directo sobre la protena de F de NDV. Conclusiones. Los PS extrados de C. okamuranus y U. calthrata mostraron una potente actividad antiviral a dosis no txicas para las clulas, previenen la infeccin viral de clulas blanco e inhiben la protena de fusin del virus, por lo que su empleo sera una alternativa potencial para la prevencin y control de NDV y constituyen posibles candidatos antivirales contra otras enfermedades virales de importancia en salud.
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CT-BL-29 CARACTERIZACIN DE SECUENCIAS REGULADORAS DE LA EXPRESIN GNICA EN EL CLOROPLASTO DE LA MICROALGA VERDE Chlamydomonas reinhardtii, Y SU USO EN VECTORES DE EXPRESIN DE PROTENAS RECOMBINANTES Rivera Sols Rodrigo A., Peraza Echeverra Santy, Herrera Valencia Virginia A. Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn (CICY), Unidad de Biotecnologa, Calle 43 No. 130, Col. Chuburn de Hidalgo, C.P. 97200, Mrida, Yucatn, Mxico. Fax: (52) 999 981 39 00. risol@cicy.mx Chlamydomonas reinhardtii es una microalga verde con gran potencial como biorreactor de protenas recombinantes (PRs), ya que presenta caractersticas ventajosas con respecto a otros sistemas (bacterias, levaduras, etc.), por ejemplo: su cultivo fcil y econmico, su rpida multiplicacin, la optimizacin de su transformacin tanto a nivel nuclear como de cloroplasto, y adems los genomas de ncleo y cloroplasto han sido secuenciados en su totalidad. En el cloroplasto de C. reinhardtii se ha logrado la produccin de PRs funcionales empleando regiones reguladoras endgenas (Promotor+5UTR y 3UTR) de este organelo alcanzando hasta un 5% de PR soluble total. A pesar de que se ha observado que algunos de sus genes aumentan su expresin bajo ciertas condiciones de cultivo, an no se han caracterizado promotores inducibles en este organelo. El gen chlB del cloroplasto de C. reinhardtii, se encuentra dentro del grupo de genes con el potencial de ser inducido bajo ciertas condiciones de cultivo, El objetivo de este trabajo es caracterizar las secuencias reguladoras del gen chlB, para usarlas en un vector de expresin de alto rendimiento para la produccin de PRs en esta microalga. Se analiz in silico la regin Promotor+5UTR del gen chlB con el programa PLACE web signal scan y se identificaron tres posibles condiciones de induccin (NiCl2, cido Saliclico y NaCl); adems, en base a la literatura, se seleccionaron tratamientos de privacin de P y condiciones fotoautotrficas. Se est realizando el anlisis de la expresin del gen nativo chlB bajo las condiciones de cultivo mencionadas anteriormente mediante RT-PCR semicuantitativo. Por otro lado, las regiones reguladoras Promotor+5UTR y 3UTR del gen chlB fueron clonadas, secuenciadas y usadas para ensamblar la construccin de expresin con el gen reportero luxCt. Esta construccin se us para transformar por biobalstica el cloroplasto de una cepa silvestre de C. reinhardtii. Las clulas recuperadas tras el bombardeo estn siendo analizadas mediante PCR para verificar la integracin correcta del transgen, as como la homoplasmia de la lnea transformada. Para cuantificar la expresin del gen reportero, se emplear como primera aproximacin la RT-PCR semicuantitativa y posteriormente PCR en tiempo real.
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CT-BL-30 CONSTRUCTION OF A CHLOROPLAST TRANSFORMATION VECTOR FOR THE PRODUCTION OF ANTIHYPERTENSIVE PEPTIDES IN Chlamydomonas reinhardtii Soria-Guerra Ruth Elena, Govea-Alonso Dania, Ibaez-Salazar Alejandro, Rosales-Mendoza Sergio Facultad de Ciencias Qumicas, Universidad Autnoma de San Luis Potos, Av. Dr. Manuel Nava 6, SLP, 78210, Mxico rosales.s@fcq.uaslp.mx Hypertension produces pathophysiological changes that results in the mortality associated with the disease. Food protein-derived antihypertensive peptides (AHP) has demonstrate significant antihypertensive effects, safety, mild effects on humans, and potential use as health foods and pharmaceutical preparations, therefore they are consider a promising approach for novel physiologically functional foods for preventing hypertension as well as for therapeutic purposes. C. reinhardtii has been used as biofactory for recombinant proteins because offers the potential to produce high yields of recombinant proteins at low costs and can be easily grown under complete containment, reducing any risk of undesired gene flow. Specially, chloroplast transformation not only minimizes the insertion of unnecessary DNA that accompanies transformation of the nuclear genome, but also allows precise targeting of inserted genes, thereby also avoiding the uncontrollable, unpredictable rearrangements and deletions of transgene DNA. In this work, previously described AHPs were selected based on their antihypertensive activity and bioavalability. A synthetic gene (APR) carrying tandem repeats of AHPs was designed including restriction sites for gastrointestinal proteases as spacers, thus facilitating the delivery of the bioactive peptides. The APR gene was commercially synthesized after sequence optimization according C. reinhardtii preferred codons. First step on expression vector construction involved the construction of a cassette expression flanked by homologous recombination regions. The light-indepedent protochlorophyllide reductase coding region (gene chlL) within the inverted repeat region was chosen as homologous recombination target. The chIL region was isolated by PCR from total DNA of C. reinhardtii. The resulting fragment was cloned into plasmid PCR-topo-Blunt. The endogenous promoter psbA and terminator rbcL3 were cloned in the middle of the chIL homologous recombination region. The bacterial gene aphA-6 which encodes an aminoglycoside phosphotransferase was included as selectable marker downstream of the promoter. The APR gene was subcloned upstream the selection marker to yield a bicistron. Future work will assess the expression of the APR in C. reinhardtii. This work may provide a new strategy to produce large quantities of antihypertensive peptides.
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CT-BL-31 ESTUDIO PRELIMINAR DEL CRECIMIENTO DE Nannochloropsis sp. AISLADA EN LA LAGUNA DE TERMINOS, CAMPECHE, EN CONDICIONES DE LABORATORIO Uc-Gmez Edith O., Vzquez-Perez Rosa N., Reyes-Fernndez Zehila E. edith_ug@hotmail.com Dada la importancia actual sobre los cultivos algales para su aplicacin no solo como alimento vivo en el rea acucola, sino tambin con un elevado potencial para el rea biotecnolgica, farmacutica u obtencin de pigmentos; es necesario estudiar a la especie, para conocer no solo su composicin bioqumica sino su rapidez en el crecimiento poblacional; ya que uno de los factores primordiales son la tasa de crecimiento y su alta productividad. Sin embargo, es importante mencionar, que en la regin no se cuenta con un cepario establecido y las especies utilizadas, generalmente son adquiridas de colecciones establecidas, las cuales requieren de ciertas condiciones controladas; lo que conlleva a un incremento en los costos de produccin no solo por la adquisicin sino tambin en su mantenimiento y produccin. Por tanto, surge la necesidad de estudiar a las especies propias de la regin, lo que no solamente genera una reduccin de costos en cuanto a su mantenimiento sino que podemos contar con una especie adaptada a los factores fsico-qumicos de nuestra zona. El presente trabajo se realiz con la Nannochloropsis sp., cepa aislada en la Laguna de Trminos, Campeche y conservada en el Laboratorio de la DES-DACNAT en la Universidad Autnoma del Carmen. El objetivo principal de esta investigacin, fue el estudio del crecimiento celular de Nannochloropsis sp. durante 24 hrs. El bioensayo fue realizado en matraces de 250 mL por cuadruplicado bajo condiciones controladas de laboratorio. Los cultivos crecieron en medio f/2 (Guillard) comercial, a una salinidad de 30 , a una temperatura que oscilaba entre los 23 25 C, aireacin continua y uniforme e iluminacin directa con lmparas de luz blanca. El resultado obtenido demostr que la microalga Nannochloropsis sp. aislada en la Laguna de Trminos present duplicacin celular a las 12 horas de haberse inoculado. De tal forma, podemos sugerir el cultivo para uso como alimento vivo en la Acucultura ya que es una especie de rpido crecimiento celular y de acuerdo a la literatura consultada tambin cubre los requerimientos nutricionales esenciales para los organismos que se cultivan con fines comerciales, tales como peces, moluscos y crustceos en sus fases larvales.
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CT-BL-32 CARACTERIZACION FISICOQUIMICA Y BIOQUIMICA DE CEPAS DE MICROALGAS AISLADAS DE LA LAGUNA DE TERMINOS, CAMPECHE. MXICO Reyes Fernandez Zehila Elvira, Uc Gomez Edith, Vazquez Perez Rosa Nallely, Gomez Ramirez Alejandro De J. Universidad Autnoma del Carmen. Des: Ciencias Naturales-Campus III. Calle 56 No. 4 Esq Av. Concordia Col. Benito Juarez. C.P. 24180 Cd. Del Carmen, Campeche. Mxico. TEL. 938-38-11018 EXT 1801 y 1802 zreyes@pampano.unacar.mx Se presentan resultados preliminares de las especies de microalgas aisladas de la Laguna de Trminos, Campeche. Mxico. sobre su caracterizacin fisicoqumica y bioqumica evaluada en los experimentos o cultivos para determinar sus lmites de tolerancia de los factores como la salinidad. pH, iluminacin, temperatura, variacin de la concentracin de nutrientes del medio de cultivo Guillard F/2, calculo de la tasa de crecimiento y divisin celular, determinacin de pigmentos y biomasa, niveles de carbohidratos, lpidos y protenas en las diferentes fases de crecimiento y por ultimo su identificacin taxonmica, con el propsito principal de aplicacin de la biomasa en la alimentacin de organismos acuticos de inters comercial y su potencial en otras aplicaciones biotecnolgicas como la produccin de biocombustibles.
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CT-BL-33 ACUMULACIN DE LPIDOS EN LA MICROALGA Scenedesmus quadricauda CULTIVADA EN UN SISTEMA ESTATICO EN DOS CONCENTRACIONES DE NITRGENO Arredondo-Vega Bertha O.1, Virgen Flix Marte1, Rodrguez Palacio Mnica Cristina2, Romero Dimas Nancy Paola3, Putzu Torres Ana Paola4, Vzquez Perales Ricardo5 Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Km 1 a San Juan de la Costa, El Comitn. La Paz, Baja California Sur. 2 Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa (UAM-I), Laboratorio de Ficologa Aplicada, Dpto. Hidrobiologa. Apdo. 55-535, Mxico, D. F. 3 Instituto Tecnolgico de Culiacn, Sinaloa. 4 Facultad de Qumica, Universidad de Santiago de Quertaro, Quertaro. 5 Universidad Iberoamericana Puebla. Programa Interdisciplinario del Medio Ambiente. Blvd. del Nio Poblano 2901 Unidad Territorial Atlixcayotl, Puebla. kitty04@cibnor.mx El objetivo de este trabajo fue el de cultivar a la microalga dulceacucola Scenedesmus quadricauda en un sistema esttico o batch con un medio de cultivo no convencional a base del fertilizante agrcola Bayfoland forte (BF) y con el medio de Guillard y Ryther (f/2) en dos concentraciones de nitrgeno: 882 M (control) y 441 M (estrs por deficiencia). El cultivo se realiz en condiciones controladas de laboratorio: temperatura, fotoperodo, intensidad luminosa, CO2 y pH. Se determin la curva de crecimiento. A los cuatro (T4) y cinco das (T5) de cultivo, la biomasa se cosech por centrifugacin y se liofiliz. Todos los experimentos se hicieron por triplicado. A partir de la biomasa liofilizada se cuantific la concentracin de protenas, carbohidratos y lpidos. La concentracin de lpidos vari con el tiempo y la concentracin de nitrgeno en ambos medios de cultivo. En cuanto a los lpidos, el efecto ms notable se obtuvo en T4: 24.96 % (control f/2) vs. 34.02 % (estrs deficiencia de nitrgeno f/2); 18.20 % (control BF) vs. 28.68 % (estrs deficiencia de nitrgeno BF). Aunque el estrs por deficiencia de nitrgeno en el medio f/2 en T4 dio un porcentaje mayor de lpidos que con respecto al BF, se puede observar que en el BF con estrs de nitrgeno, provoc un incremento de 1.57 veces, mientras que en el f/2 result ser de 1.36 veces. De lo anterior, se sugiere la opcin del uso del BF para cultivos a mayor escala, por ser de bajo costo comparado con el medio f/2, dado el inters en el cultivo de microalgas y los productos de alto valor agregado que se pueden obtener, ya sea como alimento o como fuente de aceites que pueden ser utilizados como nutracuticos o para la fabricacin de biocombustibles.
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CT-BL-34 PRODUCCIN DE LPIDOS A PARTIR DE LA DIATOMEA Thalassiosira subtilis CULTIVADA EN UN SISTEMA ESTATICO Y CON EL FERTILIZANTE AGRCOLA BAYFOLAND FORTE Y EL MEDIO CONVENCIONAL F/2 Arredondo-Vega Bertha O.1, Virgen Flix Marte1, Uc-Gmez Edith O.2, Vzquez-Prez Nallely2
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Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Carretera a San Juan de la Costa, El Comitn. La Paz, Baja California Sur. 2 Universidad Autnoma del Carmen, Ciudad del Carmen, Campeche. kitty04@cibnor.mx
El objetivo de este trabajo fue el determinar el efecto del estrs por deficiencia de nitrgeno en la produccin de lpidos de la diatomea Thalassiosira subtilis aislada de la baha de La Paz. La diatomea se cultiv en un sistema esttico batch con un medio de cultivo no convencional a base del fertilizante agrcola Bayfoland forte (BF) y con el medio de Guillard y Ryther (f/2) en dos concentraciones de nitrgeno: 882 M (control) y 441 M (estrs por deficiencia). El cultivo se realiz en condiciones controladas de laboratorio: temperatura, fotoperodo, intensidad luminosa, CO2 y pH. En ambos medios se determin la curva de crecimiento. A los tres (T3) y cuatro (T4) das de cultivo, la biomasa se cosech por centrifugacin y se liofiliz. A partir de la biomasa liofilizada se determin la composicin proximal haciendo nfasis en la produccin de lpidos totales. Todos los experimentos se hicieron por triplicado. La concentracin de lpidos vari con el tiempo y la concentracin de nitrgeno en ambos medios de cultivo. En cuanto a los lpidos, el efecto ms notable se obtuvo a T3 en ambos medios: 12.61 % (control f/2) vs. 21.72 % (estrs deficiencia de nitrgeno f/2); 10.31 % (control BF) vs. 22.95 % (estrs deficiencia de nitrgeno BF). A T3 con el BF en estrs de deficiencia de nitrgeno se obtuvo el mayor porcentaje de lpidos con un incremento de 2.22 veces con respecto al cultivo control de BF. De lo resultados obtenidos, se sugiere el uso de BF para cultivos a mayor escala por ser de bajo costo comparado con el medio f/2, dado el inters en el cultivo de microalgas y los productos de alto valor agregado que se pueden obtener, ya sea como alimento o como fuente de aceites que pueden ser utilizados como nutracuticos o para la fabricacin de biocombustibles.
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CT-BL-35 CARACTERIZACIN DE NUEVE CEPAS DE Arthrospira PARA SU CULTIVO EN CONDICIONES EXTERIORES EN YUCATN Ojeda Camara Sheila, Freile-Pelegrn Yolanda, Robledo Daniel Departamento de Recursos del Mar, Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados del Instituto Politcnico Nacional Unidad Mrida robledo@mda.cinvestav.mx En este trabajo se evaluaron el crecimiento y la composicin pigmentaria de nueve cepas de Arthrospira para desarrollar su cultivo masivo al aire libre, usando agua de mar y fertilizantes agrcolas como fuente de nutrientes. En laboratorio se evalu su crecimiento a diferentes salinidades (10, 15, 20 y 25 psu), las cepas ms resistentes se cultivaron al aire libre en raceways de 4 metros cuadrados durante cinco meses (MX=Arthrospira maxima, SUB=Arthrospira subsalsa, LONAR=Arthrospira platensis, IPPAS =Arthrospira fusiformis) a una salinidad de 20 pps. Los mejores crecimientos (0.827 d-1), densidad celular (1.141), contenido de clorofila a (8.04 1.59 microg mL-1)y pigmentos (0.754 0.12 mgmL-1) se encontraron en la cepa Arhtrospira platensis (LONAR).
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CT-BL-36 PRODUCCIN DE Tetraselmis chuii EN TRES MEDIO DE CULTIVO S Velsquez Yakeln C.1, Gmez Fermn Egle2, Garca Julimar1, Mata Ernesto3
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Departamento de Acuacultura, E. C. A. M. U. D.O.Boca de Ro, Venezuela. rea de Ecologia y Ambiente, Instituto de Investigaciones Cientficas, Ncleo Nueva Esparta,U. D. O. Boca de Ro, Venezuela. 3 rea de Acuacultura, Instituto de Investigaciones Cientficas, Ncleo Nueva Esparta,U. D. O. Boca de Ro, Venezuela. egleegomez@yahoo.com
Tetraselmis chuii es una especie muy utilizada en acuacultura como alimento vivo durante las fases iniciales del ciclo de vida de muchos organismos acuticos, por tal razn en el presente trabajo se evala el comportamiento de esta especie producida en tres diferentes medios de cultivo: el medio convencional Guillard, y dos medios no convencionales (un fertilizante foliar marca comercial Nitrofoska y un fertilizante agrcola formulado en los laboratorios de la Fundacin la Salle de la Isla de Margarita). Las condiciones en el laboratorio fueron temperatura 25 C, pH de 7,5 a 8, iluminacin de 25000 lux y fotoperiodo de 12 horas luz y 12 horas oscuridad. El crecimiento se determin mediante conteo directo empleando las cmaras de Neubauer y un microscopio. Se cuantificaron espectrofotomtricamente carbohidratos, lpidos y protenas totales. Las posibles diferencias en el crecimiento y las concentraciones de las macromolculas (carbohidratos, lpidos y protenas totales) en los tres medios de cultivo se determinaron mediante un anlisis de varianza de factores mltiples. La mayor tasa de crecimiento exponencial (K) se obtuvo al emplear el fertilizante foliar (K=1,05 div/da;) y el tiempo generacional (Td Td= 0,948 da). La densidad celular fue significativamente diferente en los 3 medios de cultivo (p < 0,05; F= 7,22) al igual que en los das (p< 0,05; F= 8,09). Las densidades celulares fueron mayores en Guillard y en el fertilizante foliar obtenidas durante los ltimos das de cultivo. Las concentraciones de carbohidratos totales fueron estadsticamente diferentes durante los das de cultivo y en los medios (p< 0,05; F= 8,09), obtenindose la mxima concentracin -1 de 246,247 g ml en el medo Guillard. Los lpidos presentaron concentraciones mximas de 366,845 g ml-1 al cultivrsele con el fertilizante foliar. Las concentraciones de esta macro molcula fueron diferentes en los tres medios (p<0,05; F= 25,78) al igual que durante los das. La mxima cantidad de lpidos se observ en el cultivo con el fertilizante foliar alcanzado el da 10. Las concentraciones de protenas totales fueron estadsticamente similares en los tres medios de cultivo y solamente variaron en los das obtenindose el valor mximo de 75 g ml-1, en Guillard durante el da 12. Estos resultados indican que Tetraselmis chuii puede producirse empleando medios de cultivo no convencionales ya que su crecimiento y composicin bioqumica se mantienen.
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CT-BL-37 MACROALGAS EN CANALES DE MANGLAR Y ZONA MARITIMA ADYACENTES DE LA RESERVA DE LA BIOSFERA DE LOS PETENES Gonzlez Duran E.1, Cinco Castro S.1, Tzel Padilla R.2, Marroquin Morales O.1, Gonzlez Durn L.3, Arceo Gmez M.1, Arceo Dzib C.1, Lopez Cobos J.1
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Facultad de Ciencias Qumico Bilogicas, Universidad Autonoma de Campeche. 2 Sistemas Productivos y Gestin Ambiental A.C. 3 Instituto de Ecologa A.C., Xalapa Veracruz. enriqduran@hotmail.com
La modificacin del rgimen de inundacin y la existencia de afloramientos de aguas subterrneas en la costa, modifican permanentemente los patrones de distribucin, abundancia y diversidad de macrfitas. Este estudio compara la composicin especfica, abundancia y diversidad de macroalgas de 22 sitios con 17 especies de macroalgas. El mayor nmero de especies se encontr en la zona marina de Yucumbalan (11). El mayor nmero de especies en canal ocurri en Hondo (7). La mayor densidad marina y de canal, ocurri en Moa y Onoluk (36.79 g m-2 y 15.95 g m-2, respectivamente). El 82.03 % de la colecta de Moa estuvo conformada por Udotea dixonii y el 99.59 % de Onoluk correspondi a Caulerpa vickersiae. Todas las especies de canal ocurrieron en determinado momento en mar, las especies de la zona marina: Caulerpa lanuginosa, Udotea dixonii, Acetabularia schenckii, Acetabularia crenulata y Dyctiota cervicornis no se presentaron en canal. Los valores de diversidad de mar fueron Xcuch (H 2.186, J 0.535), Yucumbalan (H1.978, J0.483), Moa (H1.095, J0.267), 30.20 (H0.978, J0.239), Hondo (H0.784, J0.191), Balantauche (H0.512, J0.125) y Uauyux (H0.287 y J0.007). En el mismo orden la diversidad de canal fue Xcuch (H0.358, J0.087), Hondo (H 2.324, J0.568) y Uauyux (H0.788, J0.192). Sitios marinos con registros de diversidad (Yucumbalan, Moa, 30.20, Balantauche) no obtuvieron datos en canal, en tanto que sitios de canal con registros de diversidad como Xchom (H0.808, J0.197), Baku (H 0.811, J 0.198) y Onuluk (H 0.038 y J 0.009) no tuvieron datos en mar. Diferencias en densidad en agua marina y de canal, podran asociarse con la ausencia de macroalgas. En canal, en el sitio 30.20, la racin USP Zo / Zmax es 0.897; en tanto que en Mar, en el sitio Onoluk USP Zo / Zmax es 1.156. Estos valores podran estar relacionados con la geomorfologa de la cuneta del canal, con la presencia de afloramientos de agua subterrnea en mar y con la habilidad de las especies para resistir los cambios de salinidad.
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CT-BL-38 CAPACIDAD DE ADSORCIN DE PB POR UNA CIANOBACTERIA RIZOSFRICA DEL MANGLE NEGRO (Avicennia germinans) Angeles-Torres Roxana, Snchez-Galvn Gloria, Olgun Eugenia J. Red de Manejo Biotecnolgico de Recursos. Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz, 91070 Mxico. eugenia.olguin@inecol.edu.mx Los manglares son ecosistemas muy vulnerables a los impactos por derrames de petrleo y efluentes contaminantes en general. Su capacidad de resistencia a contaminantes y de resiliencia depende de la capacidad tanto de los mangles como de sus comunidades microbianas asociadas a sus races. El objetivo de este trabajo, fue evaluar la capacidad de adsorcin de Pb por parte de una cepa de cianobacteria filamentosa (cepa D), aislada de los pneumatforos de A. germinans. Se cultiv en matraces y en reactores agitados (peceras con burbujeo) para producir suficiente biomasa y para caracterizar su cintica de crecimiento en base a peso seco. Se encontr que en matraces de 250 ml conteniendo 100 ml de medio ASN III modificado y expuestos a una intensidad luminosa de 215 mol C, m-2 s-1 y a una temperatura de 25 2 mostr dos fases de crecimiento exponencial. La primera fue de 0.08 d-1 del da 0 al da 6 y la segunda fue de 0.20 d-1 del da 6 al 8. Se realiz una caracterizacin fisico-qumica de la biomasa seca y se encontr una superficie especfica muy alta de 45,579.86 m2/g seco de biomasa, una acidez total de 11 mMolH+1/g biomasa, una acidez carboxlica de 0.2 mMolH+1/g biomasa y una acidez hidroxi-fenlica de 10.8 mMolH+1/g biomasa. Con el objeto de evaluar su capacidad de remocin de plomo, la cepa D se expuso a diferentes concentraciones de este metal y a diferentes tiempos de contacto. Se encontr que el porcentaje de remocin a un tiempo de contacto de 10 minutos, mostr un efecto de campana, observndose un mximo de remocin a una concentracin de 34.4 mg Pb+2/L. A este tiempo de contacto, se encontr que la capacidad de adsorcin de Pb+2 (q) fue de 40.0 mgPb+2/g seco de biomasa. Se calcul la mxima capacidad de adsorcin (qmax) utilizando dos modelos: el de Langmuir y el de Freundlich. Se determin que qmax tuvo un valor de 142.860.00 para el primer modelo y de 1.280.004 para el segundo. Estos datos confirman que esta cianobacteria rizosfrica tiene una gran capacidad de adsorcin de Pb+2 y que puede contribuir a que los mangles negros acten como una barrera para la resistencia a contaminacin por metales y a la resilencia del ecosistema.
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Bioprocesos ms limpios y Desarrollo sustentable

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OR-BP-1 OBTENCIN Y EVALUACIN DE UN NUTRIMENTO VEGETAL GENERADO A PARTIR DE RESIDUOS DE CRISANTEMO (Dendranthema grandiflora) MEDIANTE EL USO DE MICROORGANISMOS CELULOLITICOS NATIVOS Buitrago Johanna, Tenjo Dolly, Rodrguez Mara Ximena, Gmez Luis David, Quevedo Balkys, Matiz Adriana Facultad de Ciencias, Departamento de Microbiologa - Pontificia Universidad Javeriana, Cra. 7 No. 40 83, Bogot, Colombia Tel: 3208320 ext: 4020, 4030. amatiz@javeriana.edu.co La acumulacin de residuos slidos principalmente generados por el desarrollo de la floricultura que es aproximadamente el 90% de estos, ofrece una amenaza al ambiente pero al mismo tiempo una alternativa de uso biotecnolgico segn el manejo y disposicin, al aprovechar los tres componentes que conforman los residuos vegetales: celulosa, hemicelulosa y lignina, como fuente de carbono para los microorganismos que poseen el complejo enzimtico para metabolizar estos polmeros y liberar azcares simples, que pueden quedar a disposicin de otros microorganismos fermentativos. Por esta razn, es posible encontrar alternativas de aprovechamiento de estos residuos en procesos de compostaje, reincorporndolos al proceso productivo como fuente de nutrientes o en procesos de produccin de etanol. De esta manera en este trabajo se plantea una alternativa de manejo de residuos vegetales de Crisantemo (Dendranthema grandiflora), al realizar la conversin de este material celulsico a azcares fermentables por pretratamiento biolgico con un consorcio celuloltico en cultivo discontinuo, y de esta manera obtener un sustrato fermentable (SF) rico en nutrientes y azcares reductores que permitan el crecimiento de Saccharomyces cerevisiae y la produccin de etanol. Se evaluaron varias variables para obtener el mejor sustrato fermentable con el consorcio celuloltico: la concentracin del residuo vegetal al 5% (p/v), 10% (p/v) y 12% (p/v), pretratamientos qumicos y suplemento con extracto de levadura y peptona. Se determin que la actividad enzimtica fue mejor en la fermentacin con el residuo al 10% sin tratamiento y sin suplemento al obtenerse un SF con 2.5 g/L de azcares reductores. El SF obtenido demostr ser un medio nutritivo y econmico al tener fuente de carbono, nitrgeno, sales y elementos traza, que favorece la produccin de biomasa de Saccharomyces cerevisiae, presentando el mismo rendimiento (Yx/s) al compararlo con la fermentacin control de 2g/L de glucosa en caldo YGC. El SF permiti la obtencin de 3.5 g/L de etanol, luego de la fermentacin con Saccharomyces cerevisiae mayor que la obtenida en el control de 2 g/L de glucosa 2.8 g/L. Palabras claves: Consorcio celuloltico, crisantemo, etanol, residuos vegetales, Saccharomyces cerevisiae
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OR-BP-2 EVALUACIN DEL EXTRACTO DE ALGA MARINA (Macrocystis piryfera) COMO FUENTE DE CARBONO Y/O NITROGENO PARA LA PRODUCCIN DE METABOLITOS SECUNDARIOS POR Penicillium purpurogenum Y Penicillum pinophilum EN FERMENTACION SUMERGIDA Ramos Ponce L.M.1, Montaez J.C.2, Lara Cisneros G.2, Contreras Esquivel J.C.3, 5, Hernndez Carmona G.4, Garza Garca Y.1 Departamento de Biotecnologa. Universidad Autnoma de Coahuila. Facultad de Ciencias Qumicas. Blvd. V. Carranza s/n. Col. Repblica Oriente, CP 25280, Saltillo, Coahuila. 2 Departamento de Ingeniera Quimca. Universidad Autnoma de Coahuila. Facultad de Ciencias Qumicas. Blvd. V. Carranza s/n. Col. Repblica Oriente Saltillo, CP 25280, Coahuila. 3 Departamento de Investigacin en Alimentos. Facultad de Ciencias Qumicas. Blvd. V. Carranza s/n. Col. Repblica Oriente Saltillo, CP 25280, Coahuila. 4 Centro interdisciplinario de Ciencias Marinas. Apartado Postal 592. La Paz, Baja California Sur, 23000 Mxico. 5 Coyotefoods Biopolymer and Biotechnology Co. SRLMi. Simn Bolivar CP 25000, Zona Centro, Saltillo, Coahuila. luz.ramos@uadec.edu.mx En la pennsula de Baja California se localiza una de las regiones ms ricas en recursos algales de Mxico. Estos recursos son destinados al procesamiento de diversos productos agroindustriales y alimenticios, como la produccin de alginato, carragenina etc. Los extractos generados en el procesamiento de estas algas marinas son fuente de manitol, el cual puede ser aprovechado como fuente de carbono para la produccin de metabolitos por microorganismos en bioprocesos slidos lquidos. El objetivo del presente estudio fue evaluar el contenido de manitol presente en extractos de algas marina (Macrocystis piryfera) y su aplicacin en la produccin de metabolitos secundarios por hongos filamentosos del gnero Penicillium. Se estudio el efecto del tamao de partcula (150, 180 y 600 m), tiempo de extraccin (2, 4 y 6 hr) y relacin de slido: lquido (1:15, 1:25, y 1:35 p/v) sobre el proceso de liberacin de manitol. Una vez seleccionadas las mejores condiciones de extraccin de manitol, este extracto fue enriquecido con diferentes fuentes comerciales de carbono (glucosa, sacarosa, manitol y almidn soluble (10%p/v)) a un pH de 5 e inoculado con 1108 esporas de Penicillium purpurogenum Penicillium pinophilum. Estos fueron mantenidos por 10 das a 200 rpm y una temperatura de 27C. Posteriormente se evalu el crecimiento y produccin de pigmentos de estos microorganismos sobre los medios de cultivo descritos anteriormente. Los resultados obtenidos mostraron que si hay efecto significativo de los factores evalados en el rendimiento de extraccin de manitol, siendo el tratamiento 2 (300 m/4 hr/1:25 (p/v)) el que mostr mejores rendimientos con 0.23 mg de manitol/ gr de extracto de alga marina. Por otro lado, se observ que las cepas de Penicillium purpurogenum y Penicillium pinophilum tuvieron la capacidad de crecer en todos los medios descritos anteriormente. Con respecto a la produccin de pigmentos, se observ que la cepa de Penicillium purpurogenum produjo pigmentos en mayor proporcin en 3 de los 4 medios analizados, mientras que para la cepa de Penicillium pinophilum la produccin de pigmentos fue baja. Deacuerdo a los barridos de exploracin de los pigmentos obtenidos, las mximas absorbancias se encontraron a una longitud de onda entre los 400-600 nm, obtenindose dos seales significativas de 425 y 505 nm. Finalmente, de acuerdo a los resultados obtenidos se puede concluir que el extracto de alga marina enriquecida con fuentes de carbono comerciales son un medio alternativo para la produccin de pigmentos por Penicillium purpurogenum en fermentacin sumergida.
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OR-BP-3 EVALUACIN DE LAS VARIACIONES EN LA FITOTOXICIDAD DE UN SUELO IMPACTADO CON HIDROCARBUROS POSTERIOR A SU TRATAMIENTO CON UNA NUEVA TECNOLOGA DE SANEAMIENTO Freites M., Perna B., Rojas Tortolero D., Naranjo Briceo L. Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela. http://www.idea.gob.ve mfreites@idea.gob.ve En la actualidad el estado Venezolano ejecuta El Proyecto Magna Reserva de la Faja Petrolfera del Orinoco (FPO), el yacimiento de crudos pesados y extrapesados ms grande del mundo. La explotacin masiva de la FPO generar una gran cantidad de suelos impactados por hidrocarburos que deben ser manejados y dispuestos de manera apropiada. En este sentido, el objetivo principal de esta investigacin fue estudiar el efecto de la aplicacin de una nueva tecnologa para el tratamiento de suelos contaminados con hidrocarburos sobre la fitotoxicidad del suelo tratado, utilizando la especie bioindicadora Lactuca sativa (segn la metodologa USEPA). El suelo contaminado en estudio fue tomado de la fosa de hidrocarburos Bare-9 ubicada al sur del Estado Monagas, Venezuela. Los resultados obtenidos mostraron una drstica reduccin del Total Petroleum Hydrocarbon (TPH) de la muestra original (TPH: 17,15% en peso) luego de someter el suelo a tratamiento (TPH: 2,13%), equivalente a un 88% de remocin del contaminante. Las pruebas de toxicidad revelaron una reduccin del 10% de la germinacin en el suelo contaminado, mientras que en el suelo tratado no se apreciaron diferencias significativas con relacin al control. En el suelo contaminado se observ una inhibicin en el crecimiento de las radculas y los hipoctilos de 31 y 43%, respectivamente, mientras que en el suelo tratado la reduccin fue de 16 y 21%. Con respecto al ndice de toxicidad, se evidenci una reduccin del 50% en el suelo tratado en comparacin con el suelo contaminado. Se concluye que el tratamiento redujo significativamente la fitotoxicidad de los suelos contaminados provenientes de la fosa petrolfera en estudio.
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OR-BP-4 ANLISIS DE CICLO DE VIDA "DE LA CUNA A LA CUNA" APLICADO A SISTEMAS DE PRODUCCIN DE BIODIESEL Acevedo Pabn Paola A.1, Kafarov Viatcheslav 1, Mannan S.2
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Department of Chemical Engineering, Industrial University of Santander, Bucaramanga, Colombia. Artie McFerrin Department of Chemical Engineering, Texas A&M University System, College Station (TX), USA paolaacevedo@gmail.com
En las ltimas dcadas, el inters en el uso del biodiesel como una alternativa al petrodiesel se ha incrementado debido a que se asume que el biodiesel es ms amigable con el ambiente. Sin embargo, en aos recientes, se ha puesto en tela de juicio el carcter bio de stos combustibles. Muchos Anlisis de Ciclo de Vida han sido realizados para evaluar el impacto ambiental de la produccin de biodiesels provenientes de diversas materias primas, pero desafortunadamente los resultados reportados no son unnimes, razn por la cual la controversia frente a ellos es mayor cada vez. Entre las razones por las cuales los anlisis realizados reportan resultados diferentes se encuentran: las evaluaciones no contemplan las mismas etapas del ciclo de vida del producto, los escenarios son muy diferentes y, en algunas ocasiones los evaluadores no son imparciales. Con el objeto de realizar anlisis que permitan comparar diferentes escenarios de la manera ms imparcial posible se propone el uso del Anlisis de Ciclo de Vida de la cuna a la cuna. En el presente trabajo se describe este mtodo de evaluacin que incluye dentro de los balances las emisiones capturadas por los cultivos gracias a los ciclos biogeoqumicos, adems de su aplicacin a un escenario colombiano.
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OR-BP-5 USO DE ADITIVOS QUMICOS PARA MODIFICAR LAS PROPIEDADES MECNICAS DE BIOPOLMEROS DE EXOESQUELETOS DE CAMARN Brcenas Ochoa Evelyn Mariana1, Arias Torres scar1, Mendoza Mrquez Ana Mara1, Flores Ortega Ronny A.2, Garca Gmez Rolando Salvador3, Durn de Baza Carmen3 Facultad de Qumica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico Facultad de Ciencias Qumicas, Universidad Central del Ecuador. 3 Departamento de Ingeniera Qumica, Facultad de Qumica, Universidad Nacional Autnoma de Mxico rolandoga2000_a@yahoo.com
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La cabeza, cola y caparazn (exoesqueleto) del camarn son catalogados como desperdicios. Estos residuos pueden procesarse para la obtencin de quitina y quitosana tiles para las plantas procesadoras de alimentos y las farmacuticas, entre otras. En esta investigacin se plante la obtencin de quitina mediante qumica verde (en vez de las tradicionales las cuales emplean para su extraccin HCl y NaOH), con la finalidad de desarrollar espumas biodegradables que, con la adicin de algn agente aditivo, tengan propiedades de dureza adecuadas para ser empleadas como recipientes para la industria de alimentos. Muestras de residuos de camarn fueron lavadas. Los exoesqueletos fueron separados y licuados con agua para obtener una pasta homognea de la que la fase slida fue secada a 60C y remolida para tener una harina de exoesqueleto parcialmente desproteinizado (EPD). De esta harina se realiz la extraccin de quitina utilizando el disolvente MAC141 , por sus siglas en espaol Metanol, Agua y Cloruro de calcio en relacin molar 1:4:1, dejando la mezcla formada durante 48 h a 25C. La quitina en disolucin, QUIMAC, se agit para formar una espuma de quitina que fue colocada en una cmara de humificacin durante 48 h. Las esponjas formadas fueron secadas y acondicionadas con tres diferentes agentes plastificantes en disolucin acuosa (polietilenglicol acuoso al 10%, sorbitol acuoso al 70%, propilenglicol acuoso a una concentracin desconocida) con el objetivo de modificar sus propiedades mecnicas y hacerlas semejantes a un material sinttico comercial usado como control (poliestireno espumado). Se probaron las probetas de esponjas, determinando con un equipo Instron Modelo 5500R, a una velocidad de cruceta de 1mm/min y una distancia inicial de 30mm, bajo condiciones ambientales de 50% humedad y de 22.7C (73 comparndose con una probeta con poliestireno como referencia: F), pruebas de Tensin en la carga mxima (MPa), tensin en el punto de ruptura (MPa), mdulo de Young (MPa), porcentaje de deformacin y porcentaje de tenacidad y lmite elstico fueron realizadas. Realizando el anlisis estadstico con el paquete Statgraphics 5.1 plus se encontr que a diferencia de los resultados obtenidos con el polietilenglicol y el propilenglicol, el sorbitol acuoso al 70% dio resultados que no eran significativamente diferentes (p<0.05) al control de espuma de poliestireno mientras que para la prueba de tenacidad fue significativamente diferente, concluyndose que el aditivo de sorbitol acuoso al 70% result ser el mejor aditivo para obtener probetas similares al poliestireno espumado usado como control. Reconocimientos Los autores agradecen al Dr. Ricardo Vera, al Ing. Ernesto Snchez Coln y al Ing. Adrin Palma, del Instituto de Investigaciones en Materiales de la UNAM, por el apoyo recibido durante la realizacin de las pruebas mecnicas y el anlisis de los datos obtenidos.
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OR-BP-6 EVALUACION DE LOS IMPACTOS AMBIENTALES EN LA PRODUCCION DE BIODIESEL DE PALMA AFRICANA MEDIANTE ANALISIS DE CICLO DE VIDA Martnez D., Jaimes W., Acevedo P., Kafarov V. Centro de Investigacin para el Desarrollo Sostenible en la Industria y Energa (CIDES) Universidad Industrial de Santander, Carrera 27 calle 9, Bucaramanga, Colombia vkafarov@gmail.com La seguridad energtica, el progreso econmico y la prevencin del calentamiento global son objetivos contrapuestos de la actual economa mundial, la cual se basa fuertemente en el consumo masivo de combustibles fsiles. Por este motivo, se requieren fuentes de energa alternativas para sostener el desarrollo a corto y largo plazo, apareciendo los biocombustibles como una posible solucin, aspecto que ha generado posiciones contradictorias en los ltimos aos por el impacto real de esta fuente de energa en el medio ambiente. En este artculo se aplica la metodologa del Anlisis de Ciclo de Vida (ACV) a un proceso de produccin de Biodiesel siguiendo los lineamientos de la normas ISO 1404014044 de 2006. La metodologa fue desarrollada con el enfoque de la cuna a la cuna. Se cuantificaron las cargas ambientales en cada uno de los procesos involucrados: adecuacin del terreno y cultivo, extraccin del aceite, esterificacin, distribucin y uso del combustible. Como resultado de la investigacin se pudo obtener el perfil ambiental del sistema, mostrado a travs de seis categoras de impacto: cambio climtico, acidificacin, eutrofizacin, oxidantes fotoqumicos, efectos respiratorios y energa no renovable. El proceso de produccin de biodiesel fue simulado con Aspen Hysys 2006.5, usando catlisis heterognea cida y etanol. El estudio se llev a cabo en Sabana de Torres (Santander). Este trabajo es financiado por el Departamento Administrativo de Ciencia, tecnologa e Innovacin (COLCIENCIAS), a travs de los proyectos CT 475-2007 y CT 272-2008.
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OR-BP-7 EVALUACIN EXERGTICA DE LA PRODUCCIN DE BIODIESEL DE PALMA VA CATLISIS HETEROGNEA Jaimes Wilmer A., Acevedo Paola A., Kafarov Viatcheslav vkafarov@gmail.com La necesidad actual de nuevas fuentes de energa y adicionalmente que sean amigables con el ambiente han venido implementando en los ltimos aos los llamados biocombustibles y especialmente aquellos provenientes de cultivos oleaginosos, como la soya, el maz, colza, higuerilla, coco, palma, entre otros, este ltimo en especial por sus altos rendimientos por hectrea (5900 l/ha), variedad de usos a los coproductos, viabilidad econmica entre otros, son los que dan al biodiesel de palma una gran ventaja. En este trabajo, el proceso de produccin de Biodiesel incluy tres etapas: 1. Un pretratamiento que consiste en la hidrlisis de los triglicridos del aceite de palma, 2. La esterificacin de los cidos grasos usando catlisis heterognea acida, 3. La etapa de separacin y purificacin. El anlisis realizado se llevo a cabo mediante la metodologa propuesta por Dincer y Rocen, adems de otros autores que han realizado trabajos en este campo, donde al aplicar los conceptos de primera y segunda ley de la termodinmica es posible determinar la calidad de la energa usada y aquella que la cual pudiera ser til. Mediante las eficiencias energticas y exergticas aplicadas a cada uno de las etapas del proceso se encontr que las mayores perdidas exergticos estn en el sistema de separacin y purificacin adems de la ausencia de integracin energticas. Adicionalmente la metodologa desarrollada puede ser usada como herramienta para lograr procesos ms eficientes y ambientalmente sostenibles. Tambin como un instrumento de comparacin con otros procesos de produccin de biodiesel y de fuentes diferentes. Palabras Claves: Anlisis Exergtico, Biodiesel, Desarrollo Sostenible Este trabajo esta soportado en el programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnologa para el Desarrollo (CYTED) proyectos 306RTO279 Nuevas Tecnologas para la Produccin de Biocombustibles, y el Departamento Administrativo de Ciencia, Tecnologa e Innovacin (COLCIENCIAS) cdigos CT 475-2007 y CT 272-2008.
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OR-BP-8 DIATOMEAS: UNA ALTERNATIVA PARA BIOTRATAMIENTO DE AGUAS CON ALTO CONTENIDO EN SILICIO Y CAPTURA DE CO2 1 2 1 Garca Covarrubias Rubio Yadiralia , Castillo Zaragoza Sergio , Lpez Valdivieso Alejandro , 1 Meza J.Viridiana
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Geomicrobiologa, Instituto de Metalurgia, Universidad Autnoma de San Lus Potos. 2 Central Termoelctrica de Villa de Reyes, SLP, UASLP. jvgm@uaslp.mx
Las Bacillariophyceae diatomeas, poseen alto contenido de slice (SiO2) en su pared celular; ste, representa ms del 50% de su peso seco. Se propone tratar agua residual rica en SiO2 aprovechando la capacidad de diatomeas de incorporar SiO2. El agua que abastece a la Central Termoelctrica de Villa de Reyes (CTVR), SLP, tiene concentraciones de 50 a 200 mg SiO2/L y tiende a concentrarse en los ciclos de reuso en las torres y sistemas de enfriamiento de la CTVR. El SiO2 es indeseable en sta y otras industrias debido a que se forman incrustaciones de silicato de Ca y Mg en las tuberas y equipos. Se aislaron diatomeas de las torres de enfriamiento de la CTVR, se document su biodiversidad y se cultivaron en medio especfico para producir biomasa para los experimentos de absorcin de Si, probando 40, 100 y 300 mg Si/L en forma de Na2SiO3; se determin Si reactivo y particulado a las 24, 48, 72, 96 y 120 h para definir la absorcin/clulas/tiempo. Experimento similar se realiz bombeando CO2. Se identificaron las diatomeas oligotermfilas (hasta 47 Nitzschia sp., C) Pinnularia latarea var. thermophila, Luticula goeppertiana, Gomphonema parvulum, Amphora ovalis, Luticula goeppertiana Nitzschia hantzchiana; 9 especies de los gneros. Amphora, Cymbella, Nitzschia, Surirella; especies oligotermfilas se desarrollaron ptimamente en medios con hasta 200 mg Si/L, obtenindose elevada produccin de biomasa. Sin embargo, a la menor concentracin de Si ensayada (40 mg Si/L) disminuy el 100% de Si soluble en 120 h; en los sistemas ms saturados, 100 y 300 mg Si/L, la absorcin fue ms lenta; en todos los ensayos, la biomasa aument; en ausencia de diatomeas, el Si precipit formando esferas micromtricas de SiO y redes de NaSiO.
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OR-BP-9 BIOPROCESOS EN LA INDUSTRIA PETROLERA Aburto Jorge Instituto Mexicano del Petrleo jaburto@imp.mx En este trabajo se provee de una visin general de la situacin actual de la biotecnologa y su posible impacto futuro en la industria petrolera. Este importante sector industrial en Mxico enfrenta retos importantes como la disminucin de las reservas probadas de petrleo, la fluctuacin de los precios internacionales, el incremento de las demanda de petrolferos, y regulaciones ambientales cada vez ms rigurosas. Estos retos persistirn y se acentuarn en los prximos aos. Si bien la biotecnologa ha impactado diversos sectores industriales, aun queda por probar su importancia en la resolucin de problemas de la industria petrolera. As, se describen las principales lneas de investigacin que presentan retos y oportunidades de la biotecnologa de impactar en la industria petrolera.
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OR-BP-10 PRODUCTOS BIOTECNOLGICOS A PARTIR DE GASES DE INVERNADERO Morales Marcia, Zniga Cristal, Revah Sergio mmorales@correo.cua.uam.mx Las emisiones de gases que contribuyen al calentamiento global son un grave problema para la humanidad y los ecosistemas debido a las implicaciones del cambio climtico. Durante las ltimas dcadas, el crecimiento demogrfico y el desarrollo industrial han dado lugar a la acumulacin de gases como el CO2, CH4 y N2O que contribuyen al efecto de invernadero. Actualmente existe la tendencia a producir compuestos por va biotecnolgica a partir de residuos, productos de desecho o contaminantes, no solo porque el costo del sustrato es nulo sino porque a la par se elimina el problema de contaminacin, haciendo que los procesos donde se generan sean ms limpios contribuyendo a la sustentabilidad. Recientemente ha habido un auge en cuanto a la obtencin de productos que usan como materias primas a gases de efecto invernadero, principalmente el CO2. El cual es utilizado por organismos fotosintticos (microalgas o cianobacterias) para generar lpidos y carbohidratos que son transformados posteriormente en biocombustibles (biodiesel y bioetanol). Sin embargo, se ha puesto poca atencin en otros gases de efecto invernadero, como el metano cuyo potencial de calentamiento global, que es 21-25 veces mayor que el CO2. Se ha estimado que es posible reducir el efecto del metano sobre el calentamiento global si nuevas tecnologas se aplican para la coleccin/remocin del metano generado ya sea mediante algn mtodo qumico o biolgico. Las tecnologas biolgicas hacen uso de bacterias metantrofas que adems de usar al metano como fuente de carbono y energa han atrado considerable inters, por sus aplicaciones potenciales para: la produccin de protena celular simple, polmeros exocelulares, sntesis orgnica y la degradacin de hidrocarburos alifticos clorados. Dentro de los subproductos generados a partir de metano est el PHB (Poli-hidroxibutirato), el cual es un polmero biodegradable con caractersticas semejantes al polipropileno. Durante esta investigacin se obtuvo una cepa metanotrfica capaz de acumular PHB a partir de concentraciones de metano al 1% en aire, la cantidad de PHB acumulado estuvo alrededor de 34% p p-1 para el experimento en un biorreactor con biomasa suspendida bajo condiciones de limitacin de nitrgeno. La tasa especfica de degradacin de metano fue de 30 mg gX-1 h-1. Estos resultados son comparables y en algunos casos, superiores a los reportados en la literatura. La cepa fue identificada como Methylobacterium organophilum.
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OR-BP-11 FERMENTACIN EN SUSTRATO SLIDO DE BAGAZO ALGAL PARA LA PRODUCCIN CIDOS GRASOS Avendao Morales B.1, Hernndez Martnez R.1, Garca Mendoza E.1, Daz Jimnez L.2, Rodrguez Varela J.2, Valdez Vazquez I.1
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CICESE Unidad Ensenada CINVESTAV Unidad Saltillo, Mxico. valdez_idania@yahoo.com
El Biodiesel es un biocombustible con ventajas ambientales que puede ser generado a partir de lpidos producidos por diversos microorganismos, denominados oleaginosos por su capacidad de acumular triglicridos de forma intracelular con valores mayores al 20% de su peso total. La produccin de lpidos microbianos es un proceso sustentable, ya que pueden obtenerse a partir de la fermentacin en sustrato slido (FSS) de diversos residuos slidos orgnicos. En el estado de Baja California una de las empresas con mayor importancia econmica es la de extraccin de hidrosolubles que genera grandes cantidades de bagazo del alga roja Gelidium robustum, el cul puede ser utilizado como sustrato para la produccin de lpidos mediante hongos filamentosos oleaginosos. El objetivo del trabajo fue determinar la influencia de diversas condiciones ambientales y nutricionales sobre la produccin de lpidos a partir de la FSS de bagazo algal con hongos filamentosos oleaginosos.Para ello, fueron aislados hongos filamentosos a partir de sedimentos y lodos marinos y de una fermentacin espontnea del alga Macrosistys sp. De los hongos aislados, fueron seleccionados aquellos con capacidad de acumular lpidos de forma intracelular bajo condiciones de estrs nutricional (Burdon, 1946). Posteriormente, se determinaron las condiciones ptimas de temperatura y pH para el crecimiento fngico, as como su identificacin a nivel molecular (Capa y Cocconcelli, 2001). Finalmente, se mont un ensayo de FSS en matraces de 250 mL con 5 g de bagazo algal estril, inoculados con 133 mg de micelio proveniente de un pre-cultivo (medio PDC, 7 das a 21 C). En este ensayo se evalu el efecto de la relacin C/N, % de humedad, aeracin y temperatura a dos niveles sobre la produccin de lpidos (mg lpidos/mg bagazo) (Bligh y Dyer, 1959; Kavadia et al., 2001). Se aislaron un total de 17 hongos filamentosos, de los cuales slo 5 presentaron acumulaciones lipdicas. Los mayores productores de lpidos fueron identificados como Penicillium chrysogenum y P. citreonigrum. ste ltimo fue seleccionado para los ensayos de FSS por presentar una mayor colonizacin sobre el bagazo algal. Hasta el momento se ha identificado las variables que influyen sobre la produccin de lpidos a partir de la FSS de bagazo de Gelidium robustum.
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OR-BP-12 HERRAMIENTAS DE ECOLOGA INDUSTRIAL PARA EVALUAR LA SUSTENTABILIDAD DE SITIOS DE DISPOSICIN FINAL DE RSU: EMISIONES DE GEI E INDICADORES DE DESARROLLO SUSTENTABLE Cardozo Lelis, Arce Jenni, Cervantes Gemma Grupo de Investigacin en Ecologa Industrial, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa, Instituto Politcnico Nacional, Av. Acueducto s/n, Barrio La Laguna Ticomn, 07340 Mxico DF gemma.cervantes@gmail.com La Ecologa Industrial (EI) es una temtica cuyo objetivo es crear sistemas industriales que operen en forma similar a los ecosistemas naturales mediante la interaccin de las industrias, la sociedad y la naturaleza para cerrar el flujo de materia, optimizar el uso de energa e incrementar la eficiencia de los procesos (Cervantes, G., 2007. Ecologa Industrial. Barcelona: Fundaci Pi i Sunyer). La EI promueve el desarrollo sustentable a nivel local, regional y global en los sistemas industriales. Para lograrlo, contempla la aplicacin de distintos criterios de desarrollo sustentable y se apoya en herramientas y metodologas como: Diagramas de Flujo, Anlisis econmico Ambiental, Mercado de residuos o subproductos, Anlisis de ciclo de vida, Ecodiseo, Produccin ms limpia, Ecoeficiencia, Simbiosis Industrial, Indicadores de desarrollo sustentable, Clculo de emisiones de Gases Efecto Invernadero (GEI). En este trabajo se expone la utilizacin de las herramientas de EI: Diagramas de Flujo, Clculo de Indicadores de Desarrollo Sustentable y Clculo de emisiones de GEI como opciones para evaluar el nivel de aplicacin de los criterios de Ecologa Industrial y la tendencia al desarrollo sustentable de un sitio de disposicin final de residuos slidos urbanos (RSU). Con ello se pretende contribuir a cuantificar y medir la sustentabilidad en sistemas de ecologa industrial, en la lnea de lo que est desarrollando el Grupo de Investigacin en Ecologa Industrial (GIEI) de la UPIBI (Grupo de Investigacin en Ecologa Industrial-UPIBI, www.giei.org consultada 10 junio 2010-). La investigacin se desarroll en un relleno sanitario de Jalisco, el cual tiene sistemas de captacin y medicin de biogs y que actualmente est instalando sistemas para el aprovechamiento energtico del biogs capturado. Tambin se obtuvieron datos de un tiradero, para poder comparar sus datos con los del relleno. Se elabor un sistema de indicadores de desarrollo sustentable compuesto por 101 indicadores (54 ambientales, 25 econmicos y 22 sociales) que responden a 6 objetivos ambientales, 3 sociales y 4 econmicos. Se calcularon las emisiones de GEI segn la metodologa IPCC (IPCC 2009, 2006 IPCC Guidelines for National Greenhouse Gas Inventories, Hayama: IGES) y se compararon con los valores de biogs medidos in situ por el propio relleno. Para evaluar la evolucin de la sustentabilidad se compararon tres escenarios: el del tiradero, el del relleno sanitario y del relleno sanitario con captacin de biogs. Se reportan los resultados de la comparacin de los indicadores de desarrollo sustentable y las emisiones de GEI en los tres escenarios.
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OR-BP-13 CONTAMINACIN DEL AGUA CON NITRATOS Y NITRITOS Y SU IMPACTO EN LA SALUD PBLICA EN ZONAS DE INFLUENCIA DEL MDULO DE RIEGO (I-1) LA ANTIGUA, VER Galaviz Villa Itzel1, Landeros Snchez Cesreo1, Castaeda Chvez Ma del Refugio2, Martnez Dvila Juan P1., Prez Vzquez Arturo1, Nikolskii Gavrilov Iourii3 Colegio de Postgraduados, Campus Veracruz Apartado postal 421, Tel: 01 (229) 2010770. Veracruz,Ver. Mxico 2 Instituto Tecnolgico de Boca del Ro. Divisin de Estudios de Posgrado e Investigacin Km.12 Carretera Veracruz-Crdoba. C.P. 94290 Tel: 01 (229) 9860189 Ext. 113. Boca del Ro, Ver. Mxico 3 Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo. Km. 36.5 Carretera Mxico-Texcoco Montecillo, Mpio. Texcoco Edo. de Mxico, Mxico C.P. 56230 Tel: 01 (55) 58045900 itzelgalaviz@gmail.com Actualmente, los sistemas agrcolas reflejan un incremento en la intensidad de explotacin de los recursos hdricos y de los suelos, lo cual ha provocado problemas de erosin y un mayor deterioro de la calidad del agua subterrnea. La contaminacin de las aguas emerge como una consecuencia de los asentamientos humanos y de las actividades rurales, agrcolas, silvcolas e industriales en una regin. Se ha observado que al incrementarse el uso de fertilizantes nitrogenados tambin se produce un mayor impacto contaminante en las aguas. Como parte de los compromisos firmados por Mxico durante la Cumbre de la Tierra, se adopt la Agenda 21, documento normativo con la perspectiva de alcanzar un desarrollo sustentable en los mbitos social, econmico y ecolgico. El cual reconoce que el uso intensivo de los fertilizantes est relacionado con la eutroficacin de los cuerpos de agua, la acidificacin del suelo y la contaminacin del agua con nitratos. Sin embargo, se han encontrado nitratos y nitritos disueltos en agua subterrnea, destinada al consumo humano, que ocasionan efectos negativos en la salud, tales como; la produccin de nitrosaminas (causa del cncer) y la disminucin de la capacidad de transporte de oxgeno por la sangre, conocida como sndrome del bebe azul. El presente estudio determina la relacin entre la concentracin de nitratos y nitritos disueltos en el agua de consumo humano, derivados del manejo inadecuado de fertilizantes nitrogenados en caa de azcar, y los casos de cncer en la poblacin de influencia de las zonas caeras del Mdulo de Riego I-1. El estudio se realiz rodeando un rea aproximada de 1,000 ha. Se us la tcnica de encuesta y se elabor un cuestionario que fue aplicado a una muestra 130 de productores y habitantes. Fueron identificadas toda clase de fuentes de abastecimiento de agua para consumo humano. Se realiz un muestreo por poca, de marzo a septiembre de 2009. A cada muestra de agua se le determin de acuerdo a las normas oficiales mexicanas la concentracin de nitratos y nitritos. Los anlisis de las muestras colectadas mostraron concentraciones mximas de nitratos de 2.9, 7.7, 7.5 mg/L, en aguas superficiales, subterrneas y purificadas, respectivamente; y una concentracin no detectable de nitritos. Fueron identificados 36 casos de cncer de esfago y estmago en la superficie del Mdulo de Riego (I-1), que se encuentran distribuidos en los municipios de: La Antigua, Manlio Fabio Altamirano, Paso de Ovejas, Puente Nacional y rsulo Galvn.
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OR-BP-14 PRODUCCIN DE BIODIESEL DE SEGUNDA GENERACIN EN UN SISTEMA CONTINUO Rivera Ivanna, Sandoval Georgina Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco (CIATEJ). Av. Normalistas 800, 44270 Guadalajara, Jal. Mxico ivannaiq@yahoo.com.mx La produccin de biodiesel es una de las alternativas ms prometedoras al uso de combustibles derivados del petrleo, en este caso al diesel fsil. El uso de este biocombustible permite la disminucin de una gran parte de las emisiones contaminantes producidas con el diesel fsil. Como alternativa a las materias primas convencionales (aceites refinados) se pueden utilizar residuos grasos para la sntesis de biodiesel. Sin embargo, el uso de residuos grasos en la sntesis de biodiesel en una catlisis bsica presenta muchos problemas por la presencia de cidos grasos libres y humedad, por lo que la catlisis enzimtica es una buena opcin en este caso, ya que la reaccin de sntesis no se ve afectada por estos compuestos. Para lograr bajar los costos de produccin, tambin es importante el tipo de sistema empleado para llevar a cabo la sntesis. En este caso, el uso de un reactor continuo permite la obtencin de producto de forma constante, con una mnima cantidad de catalizador, el cual debe estar inmovilizado para poder utilizarse en un sistema continuo. En este contexto, en este trabajo se propone el uso de residuos grasos animales y vegetales como materia prima para la produccin de biodiesel, con la finalidad de obtener un producto de buena calidad a un precio competitivo y atractivo para el mercado. De igual forma, se propone el empleo de enzimas inmovilizadas para llevar a cabo el proceso de transformacin de grasa a biodiesel en un sistema continuo, con la finalidad de contar con un proceso ecolgico y que permita la reutilizacin del catalizador.
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OR-BP-15 OBTENCIN DE BIODIESEL DE CULTIVOS DE MICROALGAS CON AMBIENTES SATURADOS EN CO2 1 1 1 Mendoza Prez Jorge Alberto , Rodrguez Nava Celestino Odn , Fregoso Aguilar Tomas Alejandro , 2 2 3 3 Flores Valle Sergio Odn , Rios Berny Omar , Herrera Bucio Rafael , Torres Martn Jos Eduardo
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ENCB-IPN. ESIQIE-IPN. UMICH-MORELIA. jorgemendozaperez@yahoo.com
El cultivo de microalgas y la obtencin de aceite presentan muchas ventajas con respecto a los cultivos de oleaginosas. Por un lado presentan una tasa de crecimiento mucho mayor y por otra lado la produccin de aceite por rea est estimada entre 4.6 y 18.4 L/m2, esto es de 7 a 30 veces mayor que los cultivos de plantas oleosas. El porcentaje de cidos grasos en algas y cianobacterias vara segn la especie, aunque hay especies cuyos cidos grasos representan 40% de su peso seco. Estos son los trigliceridos que luego son convertidos en biodiesel y para lograr su obtencin se buscan microalgas con un alto contenido de ellos y que sean fcilmente cultivables, ya sea en ambientes dulceacucolas o salinos. La acumulacin de lpidos en algas se produce durante periodos de stress ambiental, como el crecimiento en medios con bajas condiciones de nutrientes. Para inducir el stress en los cultivos algunas de las estrategias son disminuir la racin de compuestos nitrogenados o inducir variaciones en la temperatura y el pH, entre otras. Sin embargo, se ha observado produccin de triglicridos en fotobiorreactores donde se varan las concentraciones de CO2. Para este proyecto se pusieron en operacin fotobiorreactores de microalgas dulceacucolas y algas verdes de las especies Chlorella vulgaris y Chlorella pyrenoidosa. Estos reactores se someten a cargas variadas de CO2, por diferentes periodos de tiempo y de exposicin lumnica. Despus se filtran las algas y se rompe su pared celular con pectinasa y sonicacin, el remanente se filtra o centrifuga y se seca. La extraccin de lpidos de este material se realiza con Sohxlet. En RMN-1H se observa la presencia de triglicridos y se calcula su abundancia mediante la intensidad de las seales integradas. Obtenido el aceite, se realiza la transesterificacin, utilizando por cada gramo del aceite de alga, 2.5 ml de metanol y 0.042 g de NaOH. El exceso de metanol se recupera por rotaevaporacin, el crudo de reaccin se lava y separa con hexano y se vuelve a rotaevaporar para obtener el biocombustible. Nuevamente con RMN-1H se confirma la transesterificacin con la desaparicin del multiplete del protn metlico de la fraccin glicrica y la aparicin del singulete del metilo del ster. En la obtencin de triglicridos de alga los rendimientos mximos son del 30-32% en mezcla y de la reaccin el rendimiento mximo ha sido del 60% pero con un nivel de conversin del 98%.
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OR-BP-16 UNA PROPUESTA DE ANLISIS SISTMICO Y TRANSDISCIPLINARIO PARA EL DESARROLLO DE UNA TECNOLOGA CON POTENCIAL DE SUSTENTABILIDAD. CASO BIOENERGA MICROALGAL Torres-Alruiz M.D., Rojas D., Sena DAnna L., Naranjo-Briceo L. Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Direccin de Energa y Ambiente, Caracas, Venezuela, http://idea.gob.ve/ mtorres@idea.gob.ve Es reconocido que cualquier esfuerzo por mitigar el calentamiento del sistema climtico depende de complejas interacciones entre factores socio-econmicos, polticos, ambientales y de innovacin cientfico-tcnica. Esto es particularmente evidente en el desarrollo de Tecnologas con Potencial de Sustentabilidad (TPS) que aspiren transformar el sistema energtico disminuyendo emisiones de gases de efecto invernadero al ambiente, tal como lo es la Bioenerga Microalgal (BM). Para que una TPS pueda llegar a ser una Tecnologa Sustentable, adicionalmente es necesario que: (i) satisfaga necesidades humanas sin agotar recursos naturales y sin exceder la capacidad de recobro ecolgico, (ii) cierre el ciclo de los materiales con una incrementada eficiencia energtica y (iii) promueva cierto grado de bienestar social y econmico general. En vista del previsible crecimiento econmico y mejora en el acceso a los servicios energticos de la poblacin en la regin, comprender el rol de las TPS y las consecuencias de su implementacin es, por tanto, una tarea relevante y urgente. En la caracterizacin del problema y de su posible evolucin, es importante examinar todos los factores involucrados, an cuando algunos no sean cuantificables o sus lmites resulten de difcil deteccin. Esto permite obtener una visin de conjunto y considerar aspectos que, de no ser tomados en cuenta durante las primeras fases de la investigacin, difcilmente podran ser incorporados posteriormente. No obstante, este enfoque impone restricciones metodolgicas y demanda generar conocimiento transdisciplinario que permita avanzar en la comprensin de estos problemas. En este contexto, resulta til emplear aproximaciones nveles de modelaje, que integren modelos cualitativos, semi-cuantitativos o hbridos, como los que aqu se presentan. En este trabajo se exploran, a travs de un ejercicio de anlisis sistmico y transdisciplinario algunas implicaciones del desarrollo de la BM. Para ello se revisan, entre otros aspectos, el carcter de Sistema Complejo que poseen los Socio-Ecosistemas, unidad descriptiva y de anlisis sobre la cual operaran diferentes procesos. El modelo conceptual que se representa por medio de una Red Ecsfera-Antropsfera centrada en el desarrollo de la BM, permite caracterizar componentes, relaciones directas e indirectas y el contexto de su desarrollo. Adems, este modelo facilita la evaluacin de ciertas propiedades del patrn de relaciones encontrado y evidencia algunos principios de organizacin y posibles procesos asociados. Se discuten los resultados y potencialidades de este anlisis.
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OR-BP-17 AISLAMIENTO Y CARACTERIZACIN DE BACTERIAS RUMINALES PARA LA BIOCONVERSIN DE RESIDUOS CTRICOS EN BIOETANOL Snchez Contreras Angeles, Ramrez C. Laura, Evangelista M. Zahaed, Rodriguez Buenfil Ingrid msanchez@ciatej.net.mx La celulosa presente en los restos vegetales, subproductos agrcolas e industriales, es un sustrato valioso para la produccin de bioetanol. Sin embargo, la conversin del material celulsico es costosa debido a la baja eficiencia de transformacin de este polisacrido a residuos ms sencillos para ser utilizados eficientemente en la produccin del bioetanol. La bsqueda de nuevas fuentes para la obtencin de microorganismos capaces de utilizar eficientemente la celulosa es prioritaria; de este modo, la hidrlisis enzimtica y la fermentacin de la celulosa para la obtencin de etanol se convertiran en una actividad econmicamente viable y con alta rentabilidad. El lquido ruminal constituye una fuente potencial de microorganismos celulolticos y lignolticos. En este trabajo se aislaron 24 microorganismos celulolticos procedentes de rumiantes de raza cebuina, utilizando medios de cultivo especficos. La seleccin de estos microorganismos se realizo determinando su actividad -1,4-endoglucanasa, -1,4-exoglucanasa, -1,4-glucosidasa y -1,4-endo-xilanasa. Los microorganismos aislados se han caracterizado por pruebas microbiologicas tradicionales, se han observado por microscopia electrnica de barrido para detectar su capacidad de formacin de complejos enzimticos tipo celulosoma y finalmente se realizar la caracterizacin molecular basada en la secuenciacin de los genes ribosmales 16S. Hasta el momento, se han obtenido 18 bacterias microaerofilicas de las cuales 8 son capaces de degradar indistintamente celobiosa, xilano y pectina, cuatro hongos celuloliticos y xilanoliticos. As como, dos levaduras que degradan eficientemente los residuos de naranja funcionando como agentes transformadores de la celulosa y pectina, de modo que estos residuos ms simples, pueden ser aprovechados eficientemente en la produccin de etanol.
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OR-BP-18 PRODUCCIN DE CIDOS GRASOS BACTERIANOS A PARTIR DE AGUAS RESIDUALES Martnez Barragn M.P.1, Lizarraga Marcial L.1, Gunter Kretschmar T.1, Carlos Hernndez S.2, Valdez-Vazquez I.1
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CICESE Ensenada, Baja California CINVESTAV Unidad Saltillo, Mxico. valdez_idania@yahoo.com
Actualmente, ha surgido un gran inters en buscar fuentes de cidos grasos (lpidos) que sean viables para su transformacin en biodiesel; uno de los biocombustibles ms aptos para sustituir al combustible de origen fsil por sus beneficios ambientales. Entre las posibles fuentes de cidos grasos se encuentran aquellos producidos por microorganismos oleaginosos (bacterias, microalgas, levaduras y hongos), que presentan las siguientes ventajas: utilizacin de diversos residuos como materia prima, manejo de espacios reducidos para su crecimiento, no hay influencia de fenmenos climticos y finalmente no presentan competencia con la produccin de alimentos. Entre los microorganismos oleaginosos, las bacterias son el grupo menos estudiado, donde gneros de Acinetobacter, Mycobacterium, Streptomyces y Pseudomonas se han reportado como acumuladores de cidos grasos (20 - 80% de su peso seco), bajo ciertas condiciones ambientales y nutricionales. Este trabajo tuvo como objetivo aislar nuevas especies de bacterias oleaginosas de la regin de Baja California, analizando el efecto de la temperatura, fuente de nitrgeno y relacin de C/N sobre la produccin de cidos grasos a partir de aguas residuales. Para ello, se aislaron bacterias a partir de sedimentos marinos, agua de mar superficial de Ensenada y de aguas residuales. Las cepas aisladas fueron sometidas a ensayos con agua residual sinttica bajo condiciones nitrgeno limitante, seleccionado aquellas con capacidad de acumular lpidos (Bligh y Dyer, 1969). Las cepas oleaginosas seleccionadas fueron caracterizadas bioqumica- y molecularmente (Rivas et al., 2004). Posteriormente, se realiz un ensayo de produccin de lpidos a partir de agua residual tratada y suplementada (ARTS) con una fuente de carbono y nitrgeno. Se tomaron 500 mL de ARTS y se inocul al 20% con un pre-cultivo (24h, 35 250 rpm). Se estudiaron las variables de fuente de N, C, relacin C/N y temperatura a 2 niveles mediante un diseo factorial completo con dos repeticiones. Se determin pH, biomasa seca y produccin de lpidos (Patnayak y Sree, 2005). Hasta el momento, se ha logrado aislar un total de 62 cepas, donde 12 cepas presentaron acumulaciones intracelulares lipdicas. Con base a la caracterizacin bioqumica y los ensayos de produccin de lpidos se seleccionaron dos cepas identificadas como Acinetobacter sp. y Xanthobacter sp. El tiempo observado en el cual se present la mayor acumulacin de lpidos fue entre las 18 a 24 horas de cultivo en ARTS. Se ha determinado la influencia de las variables estudiadas sobre la produccin de lpidos y se han determinado el tipo de cidos grasos generados.
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Bioprocesos ms limpios y Desarrollo Sustentable

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CT-BP-1 EVALUACIN GENOTXICA IN VIVO DE LA DESCARGA ACUIFERA DE LOS ROS ATOYAC Y SALADO DEL REA CONURBADA DE LA CIUDAD DE OAXACA MEDIANTE EL ENSAYO COMETA Castellanos M. Antonio, Prez C. H. Jaime, Garca A. O. Merced, Reyes V. Damaris, Snchez H. G. Rub, Tern T. S Esbeidy Facultad de Ciencias Qumicas. Universidad Autnoma "Benito Jurez" de Oaxaca Av. Universidad S/N. Ex-Hda. de 5 seores. C.P. 68120 Oaxaca, Oax. Mxico antoniocastellanos@hotmail.com En los Ros Atoyac y Salado son vertidas las aguas residuales de la Ciudad de Oaxaca y el rea conurbada, ambos se encuentran altamente contaminados. Aunque se han construido plantas de tratamiento de aguas residuales, esto no es suficiente y el problema persiste. El ensayo de electroforesis en clulas individuales (ensayo cometa) es una tcnica verstil para evaluar la genotoxicidad.Inicialmente habamos realizado un estudio genotxico in vitro del agua de stos ros en diferentes puntos de la Ciudad, encontrando un dao del agua sobre el DNA de linfocitos humanos. En este trabajo presentamos resultados de la evaluacin in vivo, para ello, utilizamos ratas de la cepa wistar a las cuales se les suministr por 14 meses el agua contaminada. Encontramos dao en los linfocitos de rata en todos los puntos evaluados los cuales variaron de un nivel del 1 al 2.
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CT-BP-2 DIATOMEAS DEL LITORAL DE LA PRESA DEL LLANO, VILLA DEL CARBN, ESTADO DE MXICO Cuna-Prez Estela1, Barrientos-Miranda Ana Laura2, Martnez-Ruiz Denise2
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U.I.I.C.S.E, F.E.S. Iztacala, U.N.AM. 2 F.E.S. Iztacala, U.N.AM. estela_cuna@hotmail.com
Las diatomeas son microalgas que, por su abundancia y distribucin, estn siendo utilizadas en diversos campos de la ciencia. Tanto las especies fsiles como las actuales presentan un creciente marco de aplicacin, desde estudios de paleolimnologa hasta la exploracin de pozos de petrleo e incluso, para investigaciones forenses. Pero el mayor nfasis es en su uso para el anlisis de problemas ecolgicos como el cambio climtico, acidificacin y eutroficacin de los diversos cuerpos de agua continentales. Sin embargo, an con su creciente desarrollo, el conocimiento de las especies de diatomeas presentes en los cuerpos de agua dulce en Mxico es escaso; por lo que el objetivo del presente trabajo es contribuir al conocimiento de las especies de diatomeas presentes en la Presa del Llano, Villa del Carbn; la cual se encuentra en la zona Central del pas y es una fuente de agua para diferentes actividades antropocntricas. Para ello y como parte de un proyecto de investigacin a largo plazo, se realiz un primer muestreo en abril del presente ao. En cuatro puntos de la zona litoral del lago se filtraron 20 L de agua con una malla de 20 m de apertura, mismos que se concentraron a 100 mL y se fijaron con formol, a concentracin final del 4%. Tambin se determinaron algunos parmetros fisicoqumicos del agua in situ. Las diatomeas fueron limpiadas y montadas en Nafrax para su identificacin. Se determinaron 43 taxa, siendo Achnantidium minutissimum, Asterionella formosa, Aulacoseira granulata, Cocconeis placentula, Epithemia achnata, Fragilaria capucina, Gomphonema acuminatum, Navicula cryptotenella y Planothidium lanceolatum, las ms representativas. De acuerdo a los taxa encontrados, el cuerpo de agua se considera oligotrfico, bien oxigenado y de neutro a ligeramente cido; lo que concuerda con los valores obtenidos en el anlisis fisicoqumico.
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CT-BP-3 DIAGNSTICO DE LA CALIDAD DEL AGUA EN LA SUBCUENCA DE RIO SORDO EN XALAPA, VERACRUZ Y ESTRATEGIAS DE DESARROLLO URBANO SUSTENTABLE PARA SU RESCATE Olgun Eugenia J.1, Gonzlez Erik1, Owen Toms2, Zamora Jorge1, Hernndez Elizabeth1, Snchez Gloria1, Valdespino Carolina3, Nicomedes Melgarejo3
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Instituto de Ecologa, A.C. Carretera Antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz C.P. 91070 Mxico. 2 Global Water Watch, Mxico. 3 Colegio de Arquitectos, Estado de Veracruz. eugenia.olguin@inecol.edu.mx
El rescate de los ros urbanos y suburbanos contaminados por ciudades medias debe ser una prioridad dentro de los Programas de Desarrollo Urbano Sustentable. El objetivo del presente estudio fue el realizar un diagnstico de la calidad del agua en la Subcuenca del Ro Sordo, incluyendo el Arroyo Papas y el Ro Carneros que son sus dos principales afluentes, en la zona conurbada de la ciudad de Xalapa, Veracruz. Este diagnstico es la primera etapa de un proyecto interdisciplinario y multi-institucional, que abordar la problemtica desde distintas perspectivas (biotecnolgica, arquitectnica y ecolgica), con el fin de implementar una serie de acciones para el rescate de esta subcuenca en el mediano plazo. Se reuni informacin sobre la hidrologa de Xalapa, se delimit la cuenca completa mediante imgenes con la herramienta Google Earth y se realizaron recorridos para determinar sitios de monitoreo. Se evalu la calidad fisicoqumica y bacteriolgica del agua en 8 estaciones durante el mes de Junio de 2010, antes de la temporada de lluvias. Se encontr que la DBO5 (348-466 mg/L), DQO (225-434 mg/L), N-NH4+ (4.02-31.09 mg/L), N-NO3- (2.50-10,50 mg/L), P-PO4-3 (4.86-14.27 mg/L), SO4-2 (32.30-71.20 mg/L), OD (1.24-2.55 mg/L), SST (3.30-5.00 mg/L), y coliformes totales (456,995-712,540 UFC), alcanzaron valores tpicos de las aguas residuales domsticas en los sitios de monitoreo ubicados en el Arroyo Papas y en el Ro Carneros. En el caso del Ro Sordo, se encontr que los mencionados parmetros alcanzaron niveles mucho menores en las dos estaciones de monitoreo ubicadas antes de su entronque con el Ro Carneros. Los valores encontrados fueron: DBO5 (46-134 mg/L), DQO (35-90 mg/L), N-NH4+ (0.05-0.07 mg/L), N-NO3(1.80-1.90 mg/L),, P-PO4-3 (0.98-1.46 mg/L), SO4-2 (2.50-3.40 mg/L), OD (6.10-6.41 mg/L), SST (1.01.5 mg/L), y coliformes totales (9,833-11,833 UFC),En relacin a este diagnstico preliminar se concluy que una de las principales gestiones ante las autoridades, ser solicitar que se realicen las obras necesarias para evitar las descargas puntuales de aguas negras en el Ro Carneros y que ste no desemboque en el Ro Sordo. Entre las estrategias que se planean implementar para el rescate de esta Subcuenca del Ro Sordo, destacan la rehabilitacin del humedal de Molinos de San Roque, y la implementacin de humedales construidos para el tratamiento de aguas residuales, los cuales funcionarn como mdulos demostrativos. As mismo, se pretende el rescate de las zonas riparias y esquemas de pago por servicios hidrolgicos que podrn ayudar a rescatar estos ros y convertirlos en un valor agregado para la ciudad. Tambin, se realizarn estudios sobre diversidad y funcionalidad de la fauna anfibia como indicadores ecolgicos de contaminacin. Esta primera etapa del proyecto, servir para disear las estrategias que se recomendarn a las autoridades competentes y para gestionar financiamiento para una etapa posterior de 3 aos.
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CT-BP-4 FITOPLANCTON POTENCIALMENTE TXICAS Y/O NOCIVO EN DOS SITIOS EN LA BAHA DE SAN FRANCISCO DE CAMPECHE, MXICO Y SU RELACIN CON LAS VARIABLES FSICAS Y QUMICAS Guzmn Noz Yolanda Alicia1, Poot Delgado Carlos Antonio2, Rosales Raya Martha Laura1, Garca Cristiano Alicia1, Manzanero Rodriguez Eduardo1, Maldonado Montiel Teresita1, 1 1 Valle Canul Arturo , Castro Angulo Claudeth
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Universidad Autnoma de Campeche, Facultad de Ciencias Quimico-Biolgicas 2 Centro de Estudios Tecnolgicos del Mar 02. Campeche koala.yoal@gmail.com
Objetivo. Comparar especies de fitoplancton potencialmente txicas y/o nocivas de dos sitios en la baha de San Francisco de Campeche, Mxico y su relacin con las variables fsicas y qumicas. Dado que la baha de Campeche, ha sido pobremente estudiada, se requiere generar informacin bsica sobre la comunidad fitoplanctnica particularmente las que favorecen la presencia de especies txicas o nocivas. Para tal fin, se monitorearon mensualmente, dos estaciones (S1 y S2) de enero a noviembre de 2008. Se midi temperatura del agua, salinidad, pH y oxgeno disuelto, as como la determinacin de los nutrientes inorgnicos disueltos, slidos suspendidos totales los cuales se tomaron in situ, con un equipo de anlisis multiparamtrico HYDROLAB DS-5, para la determinacin de densidad de clulas de fitoplancton se tomaron muestras de agua mediante una manguera graduada de volumen conocido y de manera adicional, se realizaron arrastres circulares con una red cnica con luz de malla de 35 m. La cuantificacin de las clulas de fitoplancton, se llev a cabo de acuerdo con el mtodo de Utermhl (Hasle, 1978) en una cmara de sedimentacin de 10 cm3 por un espacio de 24 horas. Para examinar las variables fsico-qumicas que pudieron explicar los patrones de las especies potencialmente txicas y/o nocivas, se us el anlisis de correspondencia mltiple no lineal, incluyendo las ocho variables fsico-qumicas y los taxa. La baha se caracteriz por presentar una columna de agua homognea, con marcadas diferencias estacionales de temperatura y salinidad. Tanto el pH como el oxgeno disuelto sugieren una mayor dominancia de la actividad fotosinttica. La variabilidad de los slidos suspendidos totales se relacion con las escorrentas durante la temporada de lluvias y el comportamiento de los vientos para esta regin. No se encontraron diferencias entre S1 y S2 en cuanto a las concentraciones de nutrientes y fitoplancton. Las mayores abundancias en S1, estuvieron representadas por Chaetoceros sp, Lyngbya sp. (Slo durante un mes) en S2, Chaetoceros sp, Pyrodinium bahamense. Asimismo, en esta estacin se encontr un incremento en la abundancia y nmeros de taxa potencialmente txicos o nocivos. Siendo el ms representativo en abundancia y en presencia Pyrodininium bahamense var bahamense. Palabras clave: Algas txicas y/o nociva, dinoflagelados, proliferaciones
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CT-BP-5 NUEVAS APLICACIONES DE LA LIPASA DE LATEX DE PAPAYA Rivera I.1,2, Sandoval G.2, Duquesne S.1, Mateos J.C.2, Marty A.1
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Instituto Nacional de Ciencias Aplicadas de Toulouse (INSAT). Francia. Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco (CIATEJ). Mxico ivannaiq@yahoo.com.mx
El ltex de papaya es un fluido de apariencia lechosa que contiene aproximadamente un 15% de slidos, 85% de agua y cuya composicin exacta no ha sido descrita en su totalidad La fraccin insoluble en agua del ltex, permanece prcticamente sin dilucidar y corresponde al 25% de la materia seca total del ltex. Mientras la fraccin soluble contiene un 10% de carbohidratos, igual porcentaje en sales, 5% de lpidos, 30% de biomleculas representativas como la glutatin y cistenaproteinasas y 10% de otras protenas. Dentro de las protenas de la fraccin soluble se encuentran la papana la caricaina y la quimopapana, Dentro del ltex ha sido reportada una enzima hidroltica muy interesante por su capacidad de llevar a cabo reacciones de sntesis muy particulares, esta enzima es conocida como la lipasa de Carica papaya. Las lipasas (triacilglicerol ster hidrolasas E.C. 3.1.1.3), son definidas como enzimas lipolticas capaces de catalizar la hidrlisis o formacin de lpidos. Se trata de un grupo de enzimas con gran versatilidad y unas de las ms usadas a nivel industrial (Svendsen, 2000); como en la farmacutica, la industria alimenticia, la produccin de biocarburantes y la bioremediacin. Su uso presenta como principales ventajas; la disminucin de la energa consumida en el proceso, trabajando a temperaturas prximas a la temperatura ambiente y la disminucin de los precios de la purificacin, gracias a la alta selectividad de las enzimas. Especficamente la lipasa de Carica papaya ha demostrado ser eficaz en diferentes reacciones de sntesis, como la produccin de lpidos de alto valor y la resolucin de diferentes enantimeros como la esterificacin de cidos clorofenil propinicos (Cheng and Tsai 2004). En este trabajo el objetivo es valorizar el ltex de papaya recolectado de frutos de plantas enfermas con el virus de la mancha anular, permitiendo de esta manera el aprovechamiento de estos frutos que son considerados como desecho; en diferentes reacciones tpicamente catalizada por lipasas como son la resolucin de esteres de cidos aril propinicos, la hidrlisis de steres de aceite de pescado (DHA/EPA) y la produccin de polmeros de -caprolactona. Bibliografa. Cheng Y.C. and Tsai S.W. Enantioselective esterification of (RS)-2-(4-chlorophenoxy)propionic acid via Carica papaya lipase in organic solvents. (2004).Tetrahedron-Asymmetry. 15 (18), 2917-2920. Svendsen., A. (2000). Review lipase protein engineering. Biochemica et Biophysica Ata. 1543: 223238.
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CT-BP-6 CONTAMINACIN DE EFLUENTES POR DESECHOS DE LA INDUSTRIA TEXTIL, ASPECTOS TECNOLGICOS, ECONMICOS Y UN POSIBLE TRATAMIENTO BIOTECNOLGICO Gil Estrada Jos Luis1, Sols Oba Aida2, Sols Oba Myrna3, Prez Mndez Herminia I2 Departamento de Produccin Econmica, Universidad Autnoma Metropolitana-Xochimilco. Departamento de Sistemas Biolgicos, Universidad Autnoma Metropolitana-Xochimilco. 3 Centro de Investigaciones en Biotecnologa Aplicada, Instituto Politcnico Nacional. Mxico. atzinncole@yahoo.com
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Se llev a cabo un estudio para determinar el impacto ambiental y econmico, de las descargas de las lavanderas de la industria textil a efluentes del Estado de Tlaxcala, as mismo se propone un estudio sobre la viabilidad de tratar dichos efluentes por mtodos biotecnolgicos. En el municipio de Tepetitla de Lardizbal (Tlaxcala), en la comunidad de San Mateo Ayecac, se encuentran ubicadas 25 pequeas y medianas empresas (PyME) de la industria textil, dedicadas principalmente al lavado y acabado de prendas de mezclilla. Sus instalaciones en algunos casos, son adaptadas para dicha actividad, pero en otros casos se encuentran en instalaciones improvisadas, algunas otras se ubican en espacios ex-profeso en casas habitacin. Lo que se observa en este tipo de lavanderas industriales textiles, es una falta de estructura organizacional, principalmente en las reas de produccin, as como una falta de capacitacin de los operarios en el dominio de los diferentes procesos de lavado y desteido de las prendas, lo que les impide avanzar en el la acumulacin de sus capacidades tecnolgicas dentro de las plantas. De acuerdo a lo observado en diferentes lavanderas industriales, existen indicios de que la acumulacin de capacidades tecnolgicas en las empresas se puede considerar desde la perspectiva de la funcin tcnica de inversin as como de la funcin tcnica de proceso como capacidades de produccin bsicas-bsicas. As mismo se observa una gran competencia por una mayor participacin en el mercado sustentada en el precio. Por parte de las autoridades correspondientes, se observa una falta de incentivos, as como una falta de presin hacia los propietarios de las lavanderas para realizar inversiones en el tratamiento de los efluentes. Tambin se aprecia que existe poca sensibilidad e inters en las externalidades negativas causadas por los efluentes de las lavanderas, generando un alto nivel de contaminacin por los colorantes involucrados en los proceso, as como por los diversos productos qumicos utilizados, que son desechados ya sea al drenaje municipal o a los ros cercanos. El invertir en procesos de pre tratamiento de las descargas de agua contaminada, como producto de los procesos productivos, se convierte en una desventaja competitiva para aquellas empresas que lo llevan a cabo, debido al incremento de los costos de produccin, lo que pudiera sacar a las empresas del mercado. Actualmente en la zona de San Mateo Ayecac, un grupo multidisciplinario de investigadores pertenecientes a la Universidad Autnoma Metropolitana y al Centro de Investigaciones en Biotecnologa Aplicada del IPN, en Tlaxcala, llevan a cabo un proyecto biotecnolgico de remediacin, con la finalidad de tener una mayor presencia en la comunidad de propietarios, con la finalidad de ayudar a aquellos propietarios que estn dispuestos a cooperar y avanzar en la organizacin de sus procesos, incrementando la productividad, disminuyendo los costos y adoptando una cultura de ecoinnovacin. Como parte de este proyecto multidisciplinario, adems del estudio econmico mencionado, se estn implementado tecnologas para tratar el ndigo, principal colorante que desechan estas lavanderas. Hasta el momento se han tenido resultados exitosos de decoloracin de ndigo carmn utilizando extractos de chcharo, cebolla, chayote, pepino y poro, la ventaja de estos materiales es que son de bajo costo y de fcil acceso, adems de que son biocatalizadores que no son contaminantes por si mismos. Por lo que se podra explorar la posibilidad de tratar las aguas residuales contaminadas con ndigo utilizando los vegetales mencionados.
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CT-BP-7 OBTENCIN DE TOCOFEROLES A PARTIR DE LODOS RESIDUALES DEL PROCESO DE ELABORACIN DE ACEITE DE MAZ Sols Pacheco Josu Raymundo, Cedeo Garca Neira Noem, Villanueva Tiburcio Juan Edson, Aguilar Uscanga Blanca Rosa josuesolisp@gmail.com El maz es un grano que tiene diversos usos nutricionales e industriales. Este grano es una importante fuente de materia prima para producir almidn y derivados, como edulcorantes, aceite y alcohol. Es rico en vitaminas liposolubles como la vitamina E o tocoferol y son una fuente de fitoestrgenos, lignanos, saponinas, cido ftico, taninos, esteroles, flavonoides entre otros compuestos bioactivos. Publicaciones recientes muestran estudios sobre el contenido de compuestos fenlicos en cascarilla seca, cascarilla hmeda, gluten y germen, subproductos de desecho de la elaboracin del aceite de maz, sugieren que estos subproductos son una excelente fuente de agentes antioxidantes para la industria alimentaria. Las empresas productoras de aceite comestible de maz desechan diariamente en promedio una tonelada y media de residuos en forma de cascarilla, germen y destilados (lodos). El germen y la cascarilla se aprovechan para la preparacin de pastura para ganado. Mientras que los destilados o lodos, no tienen ninguna aplicacin y son un problema para las industrias aceiteras. El objetivo de nuestro trabajo fue analizar el contenido de cidos grasos y poder antioxidante de los tocoferoles contenidos en los destilados del aceite de maz, as como estandarizar un mtodo de extraccin y purificacin de tocoferoles. El material graso se obtuvo mediante el uso de un extractor Soxhlet utilizando los solventes metanol y/o hexano como solvente responsable del arrastre. Se midi la cantidad de cidos grasos inciales presentes de los lodos disuelto en solvente orgnico a travs de una titulacin de KOH al 0.5N usando fenolftalena como indicador. Y posteriormente se realiz una saponificacin en las muestra para eliminar los cidos grasos, obteniendo aproximadamente 30% de cidos grasos de la extraccin. El material no saponificable se le determin su actividad antioxidante con el radical DPPH, presentando un 95% de inhibicin. Se prepar lodo disuelto en metanol y/o hexano sin darle el tratamiento de saponificacin, este se pas por una columna Microsorb-MV C18 para la separacin de los tocoferoles en un HPLC (VARIAN) usando como eluente acetonitrilo:metanol (75:25), flujo de 1mL/min, temperatura de 37C y detector UV a 295. Se detect -tocoferol, tocoferol y -tocoferol, obteniendo concentraciones de 171.4, 2641.8 y 465.3 g/mL respectivamente. Concluimos que los lodos residuales son una fuente importante de tocoferoles que pueden ser usados en la industria de los alimentos y farmacia.
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CT-BP-8 DESARROLLO SUSTENTABLE DE LAS CASCADAS DE AGUA BLANCA EN MACUSPANA, TABASCO, MXICO. APLICANDO EL MODELO LES BELLEVILLE" Romellon Cerino Julio Cesar, Romellon Cerino Mario Jose, Soto Sierra Juan, Tosca Castillo Armando, Morales Romero Eleazar Instituto Tecnologico De Villahermosa. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 mjrcerino@hotmail.com Las cascadas de agua blanca o parque estatal agua blanca posee un rea de 2 025 hectreas, las cuales no han sido aprovechadas en su totalidad, ya que solo 30 hectreas aproximadamente se emplean para el ecoturismo, actualmente solo se estn usando las reas de cascadas, la gruta y el manantial; desaprovechando la zona selvtica que an conserva el parque como una zona prcticamente virgen. El objetivo de este proyecto fue diagnosticar que las Cascadas de agua blanca tienen potencialidades ecotursticas, de trabajo y de inversin. El turismo sostenible reporta beneficios econmicos al mismo tiempo que mantiene la diversidad y calidad ecolgica. Se utilizo la investigacin exploratoria para conocer todo el lugar o las zonas ms atractivas. Se aplicaron cuestionarios o encuestas a las personas que asisten al parque estatal de agua blanca, as como a los residentes de la zona. El modelo aplicado fue enfocado al desarrollo sustentable de esta zona, ya que el ambientalismo es una fuerza internacional y nacional del movimiento ecolgico de la industria turstica en la actualidad. El 97 % de los encuestados se demostr a favor de la observacin de flora y la fauna, as como tambin de talleres de educacin ambiental, caminatas, espeleismo y senderismo interpretativo. Se pudo verificar que la falta de inters de los administradores as como de las autoridades es por la cual no se dan a conocer todas las caractersticas del lugar.
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CT-BP-9 HIDRLISIS DE ESTERES ETLICOS DE ACEITES DE PESCADO Y PRODUCCIN DE CONCENTRADOS DE OMEGA-3 UTILIZANDO LIPASAS DE Candida rugosa Casas Godoy Leticia1,2, Piamtongkam Rungtiwa1,3, Duquesne Sophie1, Sandoval Georgina2, Chulalaksananukul Warawut4, Marty Alain1 Universit de Toulouse ; UMR5504, UMR792, Laboratoire Ingnierie des Systmes Biologiques et des Procds, CNRS, INRA, INSA, F-31077 Toulouse, France. 2 CIATEJ, Av. Normalistas 800, 44270 Guadajalara, Jal. Mxico. 3 Biotechnology Program, Faculty of Science, Chulalongkorn University, 254 Phyathai Road, Patumwan, Bangkok, 10330, Thailand. 4 Department of Botany, Faculty of Science, Chulalongkorn University, 254 Phyathai Road, Patumwan, Bangkok, 10330, Thailand. casasgod@insa-toulouse.fr Los cidos grasos poliinsaturados (PUFA) de la familia Omega-3 son esenciales para una sana nutricin. Los Omega-3, como el cido cis-4, 7, 10, 13, 16, 19-docosahexaenoico (DHA) y el cido cis5, 8, 11, 14, 17-eicosapentaenoico (EPA) proporcionan una gran variedad de beneficios a la salud, sin embargo su consumo es bajo en la mayora de las dietas. Los Omega-3 tienen un rol crucial en el desarrollo y crecimiento normal y reducen los factores de riesgo de enfermedades como artritis, cncer y enfermedades cardiacas. Todo esto ha incrementado el inters de diversos sectores de la industria para producir concentrados de Omega-3 a partir desechos y de aceites de pescado. Existen distintos mtodos para producir concentrados de Omega-3 sin embargo son las reacciones enzimticas las de mayor inters. La reaccin de hidrlisis enzimtica presenta ventajas con respecto a la hidrlisis qumica, como que se puede llevar a cabo en condiciones de temperatura y pH amigables, evita la oxidacin de los enlaces cis de los PUFA y es una reaccin altamente especifica. La mezcla enzimtica secretada por Candida rugosa ha sido utilizada para la produccin de concentrados de DHA y EPA. Sin embargo no se ha logrado determinar la especificidad de cada una de las enzimas por separado. El objetivo de ste estudio es producir concentrados de ster etlico de DHA (EE-DHA) y ster etlico de EPA (EE-EPA) a partir de una mezcla de steres etlicos de aceite de pescado (EEAP). Utilizando las enzimas Lip1, Lip3 y Lip4 de Candida rugosa se realiz una hidrlisis de los EEAP para lograr purificar los Omega-3 de inters. Los genes sintticos que codifican para Lip1, Lip3 y Lip4 fueron expresados y secretados en Yarrowia lipolytica. Utilizando stas tres enzimas de Candida rugosa se logr analizar la especificidad de las tres lipasas hacia los EEAP. Posteriormente se procedi a realizar reacciones de hidrlisis consecutivas con el fin de incrementar la concentracin de EE-DHA y EE-EPA. La reaccin de hidrlisis gener una mezcla con una pureza de ms del 60% en EE-DHA a partir de una concentracin inicial del 26% con una recuperacin mayor al 90% con cualquiera de las tres enzimas utilizadas. Igualmente se logr incrementar la concentracin de EE-EPA de un 5.7% hasta un 10.7% utilizando Lip3. Cada una de las lipasas presento una especificidad distinta hacia los EEAP especialmente con respecto al EE-EPA ya que Lip4 hidroliz hasta un 60% de la concentracin inicial.
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CT-BP-10 CARACTERIZACIN FISICOQUMICA DE CUERPOS DE AGUA DULCE COMO FUENTES POTENCIALES PARA LA OBTENCIN DE BIODIESEL EN EL ESTADO DE GUANAJUATO, MXICO Castro Barrita Leticia1, Snchez Snchez Claudia K.1, Gonzlez Castaeda Jaquelina1, Olalde Portugal Victor2
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Universidad de Guanajuato, Divisin de Ciencias de La Vida, Campus Irapuato-Salamanca 2 CINVESTAV, IPN Unidad Irapuato letcasbar@yahoo.com.mx
En la actualidad se considera a la bioenerga como una alternativa ya que puede sustituir a los combustibles fsiles. A partir de microorganismos fotosintticos, pueden obtenerse biocombustibles, por ejemplo el biodiesel, los cuales pueden ser aislados a partir de cuerpos de agua dulce como son los ros, lagos y lagunas, entre otros. El objetivo del presente trabajo fue, caracterizar fisicoqumicamente diferentes cuerpos de agua dulce, as como, realizar el aislamiento de bacterias fotosintticas para comparar las poblaciones bacterianas y evaluarlas como fuente potencial de produccin de biocombustibles. Los cuerpos de agua dulce analizados fueron: el Ro Laja ubicado en la comunidad de Valtierrilla (RL), la Laguna de Tres Villas ubicada en Cuermaro, Gto. (LV), la Presa de la Pursima en Irapuato, Gto. (PP), un Estanque acucola de la comunidad de la Angostura en Yuriria, Gto. (EA) y un Manantial en Santiago de Capitiro, Jaral del Progreso, Gto. (MSC). Para la caracterizacin se tomaron muestras de cada uno de los cuerpos de agua y se midi, conductividad elctrica, pH, temperatura, slidos disueltos totales, slidos suspendidos, slidos sedimentables, DBO5, DQO, porcentaje de materia orgnica, fsforo total , todas ellas basadas en las NOM-001SEMARNAT-1996, NMX-AA-008-SCFI-2000, NMX-AA-004, NMX-AA-006, NMX-AA-028 y la NMX-AA030, NMX-AA-12, NMX-AA-029-SCFI-2001, NMX-AA-034-SCF1-2001, tambin, se realiz el aislamiento de bacterias fotosintticas de los cuerpos de agua antes mencionados. Los resultados mostraron que, la Laguna de Tres Villas fue la que tuvo los parmetros fisicoqumicos ms altos rebasando los lmites mximos permitidos en las Normas antes mencionadas, en cambio el Manantial fue el cuerpo de agua que present los parmetros fisicoqumicos ms bajos, sin embargo, tambin rebasan las Normas Mexicanas. La morfologa colonial de las UFC de bacterias fotosintticas aisladas, de los cuerpos de agua dulce en estudio, fueron similares y mostraron pigmentaciones blanca, azul, roja, amarilla y caf, por lo que respecta a la morfologa microscpica se observaron cocos y bacilos Gram positivos, sin embargo, tambin se observaron varios consorcios de microalgasbacterias y bacterias Gram positivas-bacterias Gram negativas. De los resultados obtenidos se concluye que los cuerpos de agua tienen diferente composicin, sin embargo las UFC aisladas de los cuerpos de agua fueron muy similares. Palabras clave: Cuerpos de agua dulce, Caractersticas fisicoqumicas, bacterias fotosintticas, biodiesel
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CT-BP-11 DESCRIPCIN FENOLGICA Y CARACTERIZACIN FSICA Y QUMICA DE JATROPHA CURCAS L. DE DIFERENTES ORGENES CULTIVADAS EN SINALOA Sosa Segura Maria de la Paz, Angulo Escalante Miguel Angel, Heredia Jos Basilio, Valdez Torres Jos Benigno, Osuna Enciso Tomas, Salazar Villa Edith, Prez Rubio Vernica, Vlez de la Rocha Rosabel marypazs@ciad.edu.mx INTRODUCCIN La contaminacin ambiental y la disminucin de las reservas de petrleo han llevado a la bsqueda de fuentes sustentables de energa. La semilla de Jatropha curcas L. es una fuente promisoria para la produccin de biocombustibles, ya que contiene aceite (42-60%) con caractersticas idneas para la elaboracin de biodiesel y la biomasa residual es til en la alimentacin de animales por su contenido de protena (60%); sin embargo, la produccin de semilla, el contenido de aceite, protena y steres de forbol (compuesto txico) estn regidos genticamente y por las condiciones ambientales. En Mxico, existen germoplasmas silvestres no-txicos de J. curcas pero se desconoce su adaptabilidad en otros ambientes y cmo influyen estas condiciones en la produccin y composicin de la semilla. El objetivo de este trabajo fue describir el desarrollo fenolgico y rendimiento de J. curcas de diferentes orgenes cultivadas en Culiacn, as como evaluar las caractersticas de las semillas obtenidas. METODOLOGA Se evaluaron 6 germoplasmas de J. curcas de diferentes orgenes: Sinaloa, Morelos, Puebla y Papantla, Ver. (no-txicas); India (txica), e Isla, Ver. (grado de toxicidad no determinado). La descripcin fenolgica se realiz durante 9 meses en una parcela experimental. Para ello, se monitore el crecimiento (altura y dimetro basal), ndice de ramificaciones, floracin y fructificacin (periodo y nmero de inflorescencias y/o racimos por planta). Se recolectaron los frutos maduros y se cuantificaron las semillas para obtener el rendimiento. Se determin el peso y tamao (longitud y dimetro) de las semillas y se cuantific el contenido de protena y lpidos (AOAC, 1998) y steres de forbol (Makkar et al., 2007) en el germen. RESULTADOS Y DISCUSIN Las plantas de Isla, Veracruz alcanzaron mayor altura (116.4cm), y las de Sinaloa mayor dimetro (48mm). Los germoplasmas de Puebla, Morelos y Sinaloa presentaron ms inflorescencias, flores femeninas y por lo tanto mayor ndice frutal y rendimiento de semillas. En la caracterizacin fsica, los valores fueron similares en los 6 germoplasmas (18.5+0.42mm de longitud y 10.32+0.88mm de dimetro). El contenido de aceite (54-60%) y protena (24-26%) fue mayor en los germoplasmas de Puebla, Morelos y Sinaloa. CONCLUSIONES Las etapas fenolgicas de los seis germoplasmas fueron similares. Los germoplasmas de India e Isla, Veracruz son txicos y poco productivos, mientras que Morelos, Puebla y Sinaloa fueron ms productivos, no-txicos y presentaron mayor contenido de aceite y protena, por lo que son germoplasmas promisorios para la produccin de biodiesel, glicerina y complemento protenico.
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CT-BP-12 INDICADORES DE TOLERANCIA AL CADMIO EN PLANTAS DE Wedelia tilobata (L.) HITCHC. (asteraceae) Perna Beatriz1, Kazandjan Aniuska2, Castrillo Marisol2
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Unidad de Energa y Ambiente, Fundacin Instituto de Estudios Avanzados (IDEA), Venezuela 2 Departamento de Biologa de Organismos. Universidad Simn Bolvar (USB), Venezuela. Apdo. Postal 89000. Caracas 1080A . Venezuela bpernia@idea.gob.ve
El Cd es un metal txico que genera efectos adversos sobre la salud de los seres humanos, animales y plantas. El objetivo del presente trabajo fue estudiar indicadores de tolerancia en plantas de Wedelia trilobata expuestas a varias concentraciones de Cd (0, 0.5, 5, 25 y 50 M) por 96 horas. Para ello, se estudi las respuestas de biomasa seca (BS), rea foliar (AF) y relacin vstago/raz (R V/R), peso especfico foliar (PEF) (BS/AF), contenido de agua (CA), azcares solubles, protenas totales, clorofilas, carotenoides, prolina, fenoles y se detect la presencia de fitoquelatinas (FQ), GSH y cistena. Se realizaron estudios a nivel anatmico de las races y hojas. No se observaron cambios en el crecimiento de los tallos y hojas, ni en los contenidos de agua, protenas, azcares y fenoles. Se obtuvo reduccin en el contenido de prolina a 25 y 50 M de Cd, en la biomasa de las races y en el contenido de clorofilas y carotenoides a 25 M de Cd. Observaciones en la anatoma foliar, evidenciaron un incremento en la densidad estomtica, en el tamao de las clulas del parnquima en empalizada y esponjoso y en el nmero de cloroplastos por clula a 50 M de Cd. En races se observ un incremento en el rea ocupada por los haces vasculares y en el nmero de vasos del xilema. Finalmente, se observ un incremento en el contenido de cistena y GSH y la aparicin de 6 fitoquelatinas a 50 M. De acuerdo a los valores de CA foliar pareciera que el incremento del rea ocupada por los haces vasculares y el nmero de vasos del xilema en la raz, pudiera contrarrestar en las plantas de W. trifoliata, el reportado dficit hdrico inducido por el Cd. La produccin de especies reactivas de oxgeno (ROS) probablemente no es suficiente para inducir un incremento en el contenido de fenoles ni de prolina, pero s lo es para disminuir el contenido de clorofila. Podemos concluir que los cambios observados en el sistema vascular de la raz inducen a un incremento en el flujo de agua al vstago lo que constituye una indicacin de tolerancia al cadmio, as como la aparicin de fitoquelatinas. Por lo que se sugiere su uso para el saneamiento de suelos contaminados con este metal.
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CT-BP-13 ACEITE DE COCINA DE DESECHO UNA ALTERNATIVA PARA LA OBTENCIN DEL BIODISEL EN EL ISTMO DE TEHUANTEPEC Lezama Rodrguez Ma. Isabel, Garca Prez Gregorio, Hernndez Ventura Jess, Morales Anzures Fernando, Melo Banda Jos Aarn, Salinas Pastora, Loyo. Felipe de Jess H. i.lezama@hotmail.com Los aceites vegetales de desecho de cocina, contaminan los mantos acuferos e incluso el mar, en el presente estudio se utiliza este desecho como materia prima para la reaccin de transesterificacin, los productos de reaccin se analizan mediante cromatografa de gases, entre los productos obtenidos se encuentra el biodiesel y a diferencia de los combustibles fsiles ste no emite gases contaminantes a la atmsfera contribuyendo as al medio ambiente; disminuyendo los efectos de invernadero y por ende minimizar el calentamiento global, adems de que actualmente en nuestro pas se requiere el uso de nuevas alternativas de energa ya que nuestros recursos energticos disminuyen cada da. La utilizacin de aceites vegetales usados en reacciones de transesterificacin con un alcohol ligero ayuda a estimar las condiciones ms adecuadas para llevar a cabo dicha reaccin y por ende para la produccin de biodiesel y glicerina; siendo el biodiesel el producto ms selectivo en la reaccin; por otro lado se sabe que las materias primas convencionales para el estudio de la reaccin de transesterificacin son las semillas de girasol, colza y frutos oleginosos (palma), soja, encarecen el costo final del biodiesel por lo que la presente propuesta se usa como materia prima el aceite de cocina de residual; cido sulfrico como catalizador para la esterificacin y para la transesterificacin del glicrido el KOH con metanol ; como la temperatura de sntesis depende del tipo de aceite; para esta investigacin se llevarn a cabo las reacciones de transesterificacin a 32, 45, 60C. La relacin molar Metanol/Glicrido es 4:1y 6:1, las concentraciones del acido sulfrico a utilizar durante la reaccin de esterificacin son 1 y 2 M, las concentraciones del catalizador bsico KOH son 1 y 2% peso, los tiempos de reaccin a estudiar son 0.5 y 1 hora. La primera parte de la investigacin comprende desde la recoleccin de aceites de cocina usados o desecho de establecimientos de comida rpida, expendios de bocaditos fritos, polleras, restaurantes y casas particulares del Istmo de Tehuantepec, posteriormente se procedi a la separacin e identificacin y clasificacin de 4 muestras de aceite de cocina de desecho de acuerdo a su color y una muestra ms que corresponde al aceite de cocina sin freir para tener la referencia o el blanco, considerando un total de 5 muestras, el contenido de humedad determinado, oscila en el rango entre 0.02, 0.03 y 0.08 %, mientras que el aceite de cocina sin freir tiene un valor del 0.06 %, se encontraron valores de acidez en el rango de 4.7, 6.7 y 14.6 meq de KOH por g de muestra, mientras que el aceite sin freir present un valor de 6.3 meq de KOH por g de muestra. De acuerdo a estos anlisis las muestras recolectadas de aceite puede ser empleada como materia prima para la obtencin del biodisel por su bajo contenido de humedad y su ndice de acidez. Como una segunda parte de la investigacin se realizarn reacciones de transesterificacin del aceite de desecho con metanol en fase homogna con metanol en medio bsico. Por lo que se identificarn las condiciones apropiadas de sntesis como se describe en el primer parrfo de este escrito que permitir que dichas condiciones hagan viable, tcnica, econmica, social y ambientalmente la produccin de biodisel a pequea y mediana escala en el Istmo de Tehuantepec, contribuyendo as a disminuir los contaminantes de los mantos acuiferos, obteniendo una alternativa en la generacin de energa y una fuente de empleo en el Istmo de Tehuantepec.
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CT-BP-14 CARACTERIZACIN Y TRATAMIENTO DE LOS EFLUENTES PROVENIENTES DE LA ETAPA DE LA DESLIGNIFICACIN DE LOS RSA, DENTRO DEL ESQUEMA DE BIOREFINERA Meja Lpez Adn, Serafin Muoz Alma Hortensia, Hernndez Escoto Hctor, Cano Canchola Carmen, Horta Rangel Francisco Antonio, Ramrez Ramrez Natividad, Nava Montes de Oca Jos Luis. sermuah@yahoo.com Mxico, al igual que varios pases, debe afrontar y solucionar las difciles problemticas ambientales. La generacin de residuos slidos, el deterioro de calidad del aire, la contaminacin del agua por consecuencia de las mltiples actividades humanas han generando graves problemas ambientales que actualmente constituyen un gran reto a resolver. Dentro de este marco, el tratamiento de residuos slidos agrcolas (RSA) ha constituido un gran desafo por solucionar. En el estado de Guanajuato, se estima que anualmente se producen 849 mil toneladas de RSA, de los cuales ms del 30 por ciento se queman de forma intencional. Una de las alternativas sustentables para atender el tratamiento de los RSA de la regin est enfocado al estudio del esquema de la implementacin de una biorefinera con procesos biotecnolgicos en donde la finalidad principal es evaluar la serie de productos generados a partir de los diferentes procesos involucrados. El tratamiento de los RSA (en particular los esquilmos) presenta tres etapas principales: 1. Deslignificacin por el mtodo oxidativo con perxido de hidrgeno, en el cual se tiene estudios avanzados de optimizacin, 2. Sacarificacin, que es la produccin de los monosacridos libres mediante hidrlisis enzimtica, 3.Fermentacin, para lo cual se tendr que probar distintas cepas silvestres y mutantes bajo diferentes condiciones para la obtencin de etanol y productos derivados de la fermentacin. Bajo este contexto, en cada etapa se tiene contemplado el estudio del tratamiento de los efluentes. El presente trabajo est enfocado al estudio de la caracterizacin y tratamiento de los efluentes generados del proceso de deslignificacin. Se llevo a cabo el anlisis de la calidad del agua residual obtenida en base a cada uno de los parmetros regulados por la NOM-001-SEMARNAT-1996. Dentro de los resultados obtenidos, se obtuvieron altos valores de DQO y DBO con respecto a la norma. Se cuantifico e identifico aldehdos y cidos carboxlicos presentes por HPLC. El promedio de las concentraciones de aldehdos presentes fue de 59.83 + 1.44 g/ml, en cuanto a los cidos carbxilicos el valor promedio cuantificado fue 72.86 g/ml +1.93 en base al contenido total. Por lo que se defini el estudio de tratamiento biolgico para el efluente proveniente de la deslignificacin.
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CT-BP-15 PRODUCCIN SOSTENIBLE DE BIOHIDRGENO A PARTIR DE MICROALGAS Martn del Campo Julia S.1, Robledo Daniel2, Patio Rodrigo1
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Departamento de Fsica Aplicada. Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados - Unidad Mrida 2 Departamento de Recursos del Mar. Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados - Unidad Mrida rtarkus@mda.cinvestav.mx
El hidrgeno se ha propuesto como un combustible de gran potencial en el futuro por no generar gases de efecto invernadero durante su combustin. Si se extrae este gas hidrgeno del agua, se tiene una fuente infinita del biocombustible, pues el agua es regenerada en un ciclo despus de la combustin. Sin embargo, la produccin masiva de hidrgeno presenta an grandes retos de sostenibilidad: de la produccin comercial actual, ms del 90% de hidrgeno se obtiene de combustibles, principalmente los de origen fsil, y mediante procesos que utilizan grandes cantidades de energa. Slo una pequea porcin del hidrgeno producido comercialmente utiliza un proceso renovable con agua como materia prima y radiacin solar como fuente energtica. En este trabajo se propone la produccin de biohidrgeno a partir de microalgas de la especie Chlamydomonas reinhardtii como un proceso alternativo que busca la sostenibilidad. El proceso se plantea en dos etapas: una primera en la que se produce biomasa y otra posterior que induce la sntesis de biohidrgeno en condiciones anxicas. En ambas etapas se propone el empleo de biorreactores que utilizan la radiacin solar como fuente luminosa. Entre las ventajas del proceso se tiene que la produccin de biomasa implica la captacin del gas dixido de carbono del aire como parte del proceso fotosinttico. Se conoce que el cambio climtico de nuestros das es consecuencia precisamente de un aumento de CO2 en la atmsfera, por causa del modelo energtico explotado masivamente durante el siglo XX a partir de combustibles fsiles. Otras ventajas del cultivo de microalgas son (i) que no compite con los procesos de produccin de alimentos ni con las tierras de cultivo, (ii) que el agua utilizada puede ser reciclada en el proceso, (iii) que los nutrientes requeridos se reducen a algunas sales inorgnicas en pequeas concentraciones y (iv) que se utiliza luz solar como fuente renovable de energa. En cuanto a la produccin de hidrgeno, se tiene la ventaja de que se utiliza agua como fuente de materia prima y que las algas al final del proceso se pueden usar como abono o alimento para animales. Tambin se consideran otros factores que aumentan la sostenibilidad del proceso: el aprovechamiento de los recursos energticos de la regin (energa solar y elica) y su aplicacin en comunidades rurales como una fuente autogeneradora de la propia energa de consumo y como una actividad econmica alternativa.
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CT-BP-16 RECUPERACIN DE LA PRODUCCIN DE SAL MEDIANTE EL MANEJO BIOLGICO DE UNA SALINA Loza Sandra, Snchez Magaly, Carmenate Mayeln, Garca Ileana, Esponda Santa, Csar Mara Eugenia Instituto de Oceanologa, Ministerio de Ciencia, Tecnologa y Medio Ambiente, Ave. 1ra No. 18406, Reparto Flores, Ciudad de La Habana. Cuba. CP. 11 600. sandra@oceano.inf.cu En Cuba la industria salinera ocupa un lugar importante en la alimentacin humana, animal y como abastecedora de materia prima para la industria qumica. La salina Bidos, nica de su tipo existente en la regin centro - occidental del pas, es responsable de producir 30 000 ton anuales. Esta salina histricamente ha mantenido un sistema biolgico equilibrado, con condiciones estables de produccin y sin problemas de eutrofizacin que provocan enfermedad de las salmueras. En el ao 2004 se comenz a apreciar problemas de eutrofizacin por lo que se realiz un estudio con el objetivo de evaluar las caractersticas qumicas y de la comunidad de microalgas para garantizar la regularidad de las condiciones biolgicas y operacionales y evitar los procesos de eutrofizacin. La toma de muestras se realiz en la toma de agua y en las reas donde precipitan las diferentes sales (9 0 B - Fe2O3); 13 B - CaCO3 ; 22 B - CaSO4 y 26 B - NaCl). El inadecuado manejo tecnolgico favoreci la produccin incontrolada de especies de Cianobacterias productoras de muclagos y la ocurrencia de los fenmenos de eutrofizacin. Se observ un cambio en la composicin de la comunidad fitoplanctnica en la toma de agua con un predominio de Cianobacterias sobre las Diatomeas, lo cual atenta contra el adecuado funcionamiento del flujo tecnolgico. Las concentraciones de microalgas resultaron hasta 10 veces superiores a las reportadas para aos anteriores con un incremento de la carga orgnica del ecosistema. Los incrementos significativos de la densidad ( B) en las primeras lagunas sugieren un aumento del tiempo de residencia de las aguas por la reduccin del flujo tecnolgico. El conjunto de recomendaciones prcticas emitidas de manejo biolgico y tecnolgico permitieron recuperar las condiciones favorables para que la comunidad biolgica acte a favor de la produccin de sal. Palabras claves: Cianobacterias, Salina, Eutrofizacin
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CT-BP-17 REMOCION DE CR(III) Y CR(VI) POR ZEA MAYS EN UN SISTEMA DE RIZOFILTRACION: EFECTOS EN EL CONTENIDO NUTRICIONAL Galvn de la Garza A.1, Gaytn-Eskildsen J.Y.1, Mndez-Hernndez M.A.1, Peredo-Guerrero M.C.1, Saavedra-Villarreal N.1, Hinojosa-Reyes L.2, Guzmn-Mar J.L.2 y Lpez-Chuken U.J.3 Departamento de Microbiologa, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL. Departamento de Qumica Analtica Ambiental, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL. 3 Departamento de Ciencias Ambientales, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL. Mxico. ulrico.lopezch@uanl.com
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El cromo (Cr) es uno de los metales que producen los efectos ms severos en los ecosistemas. Estudios recientes han sugerido que el estatus nutricional puede modificar la acumulacin de metales contaminantes. Debido a esto, el objetivo del presente estudio fue investigar la acumulacin de cromo por maz y su contenido de nutrientes en el tejido vegetal (Ca, K, Mg) bajo condiciones de cultivo en un medio nutritivo completo y otro deficiente en micronutrientes. Se llev a cabo un experimento hidropnico con Zea mays var. Asgrow bajo condiciones controladas durante 5 das. Se evalu la composicin del medio nutritivo (M: macronutrientes y C: completo), el efecto del Cr(III) y Cr(VI) y su concentracin (3 y 10 mg/L). Se tomaron muestras de 10 mL de solucin a las 0, 3, 24 ,48 y 96 horas del inicio del experimento. Las races de las plantas fueron desorbidas antes y despus de la aplicacin de los tratamientos. El Cr, Ca, K y Mg se determinaron por Espectroscopia de Absorcin Atmica. Los resultados del experimento indicaron que la deficiencia de micronutrientes en la solucin caus una disminucin de la biomasa de Zea mays var. Asgrow independientemente de la concentracin y tipo de Cr en la solucin. La acumulacin de Cr (III) por Zea mays result mayor comparado con el Cr (VI). Se observ una mayor acumulacin de Cr cuando las plantas de maz fueron expuestas a condiciones nutritivas completas (macro y micronutrientes). El contenido de Ca y K en las plantas de maz fue mayor en los tratamientos expuestos a Cr (III), en el caso del Mg no se observ diferencia significativa entre los tratamientos. La concentracin y cantidad de Cr total fue mucho mayor en las races que en los tallos, sugiriendo una baja translocacin del metal. Sin embargo las altas concentraciones acumuladas indican un buen potencial de esta variedad en estudios de rizofiltracin.
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CT-BP-18 ESTUDIO MEDIANTE ENV-SEM Y ANALISIS DE IMAGENES DE LAS VACUOLAS DE LIPIDOS EN MICROALGAS CULTIVADAS EN AMBIENTES RICOS EN CO2 1 1 1 2 Garibay Febles Vicente , Zapata Peasco Icoquih , Terres Eduardo , Mendoza Perez Jorge , 2 2 3 Chanona Perez Jose Jorge , Rodriguez Nava Celestino Odin , Herrera Bucio Rafael
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IMP ENCB-IPN UMICH-Morelia vgaribay@imp.mx
El porcentaje de cidos grasos en algas y cianobacterias vara segn la especie, aunque hay especies cuyos cidos grasos representan 40% de su peso seco. Estos lipidos que luego son convertidos en biodiesel se conocen como trigliceridos y para lograr su obtencin se buscan microalgas de ambientes dulceacucolas o salinos con un alto contenido de ellos o en las que se estimule fcilmente su produccin y almacenamiento en vacuolas. La acumulacin de lpidos en algas se produce durante periodos de stress ambiental, como el crecimiento en medios con bajas condiciones de nutrientes. Se ha observado la produccin de triglicridos en microalgas cultivadas en fotobiorreactores donde se varan las concentraciones de CO2. Para este proyecto se pusieron en operacin fotobiorreactores de microalgas dulceacucolas y algas verdes de las especies Chlorella vulgaris y Chlorella pyrenoidosa. Estos reactores se someten a cargas variadas de CO2, por diferentes periodos de tiempo y de exposicin lumnica. Las algas se filtran y son llevadas a un microscopio electrnico de barrido ambiental (ENV-SEM) en donde pueden ser observadas aun hmedas y donde se busca la presencia de vacuolas con aceite, las cuales tienen enorme parecido a las que se observan en semillas de plantas oleaginosas. El tamao de las vacuolas (rea), su morfologa y su distribucin se determina para cada especie de microalga. Estos parmetros se estudian mediante el mtodo de anlisis de imgenes (AI) y tambin se correlacionan con los rendimientos del aceite obtenido y el porcentaje de triglicridos que presenta en mezcla.
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CT-BP-19 ANALISIS BACTERIOLGICO DEL LAGO DE XOCHIMILCO Arcos Ramos Ral, Gonzalez Sanchez Juan Carlos, Lopez Valentn Maria del Rosario, Serrato Gallardo Sarahi Areli, Salgado Estrada Berenice biolrar@terra.com.mx En la regin sureste del Distrito Federal, se encuentra el Lago de Xochimilco, zona sujeta a Conservacin Ecolgica (segn decreto con fecha de 7 de mayo de 1992), constituye una de las reas naturales protegidas de mayor importancia en el DF, tanto por ser la ms extensa en cuanto a superficie, como por el inmenso valor ambiental que tiene para la ciudad. Tal valor, fue reconocido en 1987 por la UNESCO quien declar a Xochimilco, como Patrimonio de la Humanidad. La problemtica que amenaza a Xochimilco es: El acelerado proceso de invasin de asentamientos irregulares, las descargas de drenajes domsticos en los canales, y las descargas de aguas residuales mal tratadas. El objetivo e importancia de este trabajo implic el conteo de las bacterias hetertrofas a travs de unidades formadoras de colonias utilizando el mtodo de placa difusa, as como la cuantificacin de las bacterias del grupo coliformes en la columna de agua y el sedimento, en tres diferentes zonas (Cuemanco, Texhuilo y Asuncin) . Estas zonas se establecieron considerando el tipo de vertimiento de agua residual. Adems se determinaron la Temperatura, Transparencia, pH, Conductividad Elctrica, demanda Bioqumica de Oxgeno Demanda Qumica de Oxgeno y Oxgeno disuelto. Se consider la metodologa establecida por APHA-1996. Los resultados nos indican que las estaciones monitoreadas presentan elevadas concentraciones de diversas comunidades bacterianas hetertrofas, sin embargo su distribucin est directamente relacionada con la materia orgnica a nivel temporal y estacional, resultando ser texhuilo y asuncin las estaciones con la mayor cantidad de unidades formadoras de colonias, en relacin con la bacterias coliformes se establece que las clulas contabilizadas por cada 100 ml. presentan los siguientes promedios. Coliformes Totales en Sedimento. 85,906; Coliformes Fecales en Sedimento: 21500; En agua los promedios fueron los siguientes. Coliformes Totales: 59561; Coliformes Fecales; 45033. Podemos concluir que, segn los resultados obtenidos, el lago de Xochimilco es hipereutrfico, lo cual favorece el desarrollo de microorganismos, como lo son las bacterias hetertrofas y coliformes.
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CT-BP-20 ANLISIS DE LA COMPOSICIN DE LOS POLISACRIDOS CONTENIDOS EN LA PARED CELULAR DE LEVADURAS TEQUILERAS Y APLICACIN BIOTECNOLGICA Aguilar Uscanga Blanca Rosa, Sols Pacheco Josu Raymundo, Garca Rodrguez Mara Isabel, Martnez Rivera Silvia, Reyes Blanco Mara Teresa agublanca@gmail.com La pared celular de las levaduras Saccharomyces cerevisiae, es una fuente rica en polisacridos constituida principalmente por 58% en b-glucanos, 40% en manoprotenas y 2% de quitina. Estudios realizados demuestran que lo b-glucanos y manoprotenas estimulan el sistema inmunolgico, tienen actividad antitumoral y poseen actividad antibacterial. La quitina es empleada para prevenir la arterosclerosis, modera la hipertensin, fortalece el sistema inmunolgico, baja los niveles de los lpidos y colesterol previniendo de enfermedades cardiovasculares. Algunos pases usan estos polisacridos para la formulacin de medicamentos, alimentos funcionales y elaboracin de cosmticos. Mientras que en Mxico, algunas farmacuticas importan estos productos a un costo elevado y son pocos los investigadores que conocen su aplicacin y los beneficios que pueden aportar a la salud. Por otro lado en Jalisco, siendo el productor principal de tequila, desecha como vinazas a las levaduras, contaminando fuertemente al medio ambiente. Esto preocupa a la industria tequilera y no sabe cmo y qu hacer con las vinazas? antes de verterlas al drenaje para disminuir el problema ambiental. Por este motivo y conociendo el beneficio que aportan a la salud los b-glucanos, manoprotenas y quitina, obtenidos a partir de la pared celular de la Saccharomyces cerevisiae, la cual es un desecho potencial para la industria tequilera, el objetivo de nuestro trabajo fue caracterizar la composicin de los polisacridos de la pared celular de diferentes cepas de levadura tequileras, para conocer la constitucin en b-glucanos, manoprotenas y quitin, tanto en fase exponencial como en fase estacionaria. Adems poder obtener un producto de alto valor agregado para la farmacutica, ayudando a su vez a combatir el problema de contaminacin. Hemos analizado la composicin en polisacridos de la pared celular de tres cepas tequileras denominadas: CT15, CT25, CT35 y una levadura de panificacin comercial (L013). Encontramos diferencias significativas, en fase exponencial y estacionaria, respecto a la composicin de b-glucanos, mananos y quitina. Observando una concentracin de quitina de 72 g/mg de clula, en la cepa CT15 en fase estacionaria y 30 g/mg en CT35 en fase exponencial. Los resultados de la resistencia al rompimiento celular por la accin de la b-glucanasa, nos muestran que la cepa con el mximo grado de lisis (MLR), fue la CT15 en fase exponencial (0.085x10-2 MIN -1) y la CT25 (0.407 x10-2 MIN -1) en fase estacionaria. Suponemos que esta resistencia se debe, a la relacin constitucional de los polisacridos en la pared celular.
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CT-BP-21 DETERMINACIN Y CUANTIFICACIN DE ARSNICO TOTAL Y DE ARSNICO ORGNICO, COMO ARSENOBETAINA, EN MUSCULOS DE TRUCHAS ARCO IRIS (Oncorhynchus mykiss) CULTIVADAS EN AGUAS DE LA LAGUNA DE PAPALLACTA Cumbal Luis1, Chvez Carlos2, Aguirre Vladimir1
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Centro de Investigaciones Cientficas de la Escuela Politcnica del Ejrcito, Quito, Ecuador. Centro de Servicios Ambientales y Transferencia Tecnolgica Ambiental de la Escuela Politcnica Superior Politcnica del Chimborazo; Riobamba, Ecuador. carluchoec@yahoo.com
En las aguas del ro Tambo, afluente principal de la laguna de Papallacta, se han detectado concentraciones elevadas de arsnico entre 8 y 450 g/L, con una concentracin media de 150 g/L. Esta fuente de agua a pesar de contener arsnico ha sido utilizada por los moradores de la zona para la actividad acucola, lo cual ha sido criticado por agrupaciones ciudadanas y turistas. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar la cantidad de arsnico ingerida por los peces y cuantificar el porcentaje de arsnico inorgnico que se transforma en arsenobetana. Para el efecto, se implant un cultivo de truchas arco iris (Oncorhynchus mykiss), con estas aguas durante un tiempo de dos meses, partiendo de animales jvenes. Utilizando dos tcnicas diferentes se analiz arsnico total y arsenobetaina en los animales cultivados. Los resultados de estos anlisis indican que la concentraciones de arsnico total son alrededor de 5 mg/Kg, de los cuales aproximadamente un 76 % es arsnico orgnico cmo arsenobetaina. De igual manera se analizaron los balanceados utilizados para la alimentacin de los peces y se determin que son una fuente importante de ingesta de arsnico. A pesar de que los peces en el cultivo estuvieron expuestos a arsnico inorgnico en el agua y en su alimentacin, el compuesto arsenical que se acumul en los msculos de los peces fue mayoritariamente arsenobetana, compuesto que es catalogado como no txico para el ser humano. Basados en los resultados obtenidos en la presente investigacin, se puede sugerir que animales de cultivos con similares caractersticas a las de este trabajo, pueden ser considerados como apto para el consumo humano sin que sobrepasen los lmites de ingesta de arsnico tolerables, recomendados por la Organizacin Mundial de la Salud.
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CT-BP-22 CARACTERIZACIN FISICA Y PRESENCIA DE ALGAS FOTOSINTTICAS EN DOS LAGUNAS, UNA GRANJA ACUCOLA Y UN MANATIAL DEL ESTADO DE GUANAJUATO Snchez Snchez Claudia K., Castro Barrita Leticia, Gonzlez Castaeda Jaquelina, Fras Hernndez Juan T. javier_alex3@hotmail.com En pocas recientes se ha observado la eutrofizacin de los cuerpos de agua naturales como son los lagos, lagunas, ros, manantiales, entre otros, esto se debe a las descargas que llegan a los mismos, ya sea que provengan de la actividad industrial, urbana o agropecuaria. El objetivo de este trabajo fue caracterizar fsicamente y determinar la presencia de algas fotosintticas de cuerpos de agua dulce del estado de Guanajuato. La metodologa consisti en tomar muestras de los diferentes cuerpos de agua dulce en el mes de marzo de 2010; la Laguna de Tres Villas, Cuermaro, Gto., Laguna de Yuriria y una Granja Acucola, en la Comunidad de la Angostura, Yuriria, Gto. y un manantial de la Comunidad de Santiago de Capitiro, Jaral del Progreso, Gto. Se midieron parmetros fsicos como el pH, temperatura, conductividad y slidos disueltos totales, adems de aislar algas fotosintticas. La Laguna de Tres Villas mostr la temperatura ms alta, (25.6 el pH ms alcalino fue el del estanque C), acucola (8,3), la conductividad elctrica fue ocho veces mayor en la Laguna de Tres Villas (23833 S/cm) en comparacin con el manantial (3200 S/cm), la tendencia fue similar para los mismos cuerpos de agua, con respecto a los slidos disueltos totales (1232mg/L y 160 mg/L, respectivamente), mostrando diferencia estadstica significativa todas las muestras con respecto a las caractersticas fsicas. Se lograron aislar cinco colonias morfolgicamente diferentes de algas fotosintticas y dos consorcios de algas-algas. De los resultados obtenidos se concluye que la Laguna de Tres Villas, puede ser el cuerpo de agua con mayor eutrofizacin, ya que muestra los valores ms altos de caractersticas fsicas as como tambin la presencia de algas fotosintticas.
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CT-BP-23 ACUTE TOXICITY OF COLISTIN (POLYMYXIN E) ON AMMONIA-OXIDIZING MICROORGANISMS OF A SBR OPERATED UNDER NITRITATION CONDITION Bressan Clo Rodrigo1, Kunz Airton2, Soares Hugo Moreira1
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Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina - Brasil 2 Embrapa CNPSA - Centro Nacional de Pesquisa de Sunos e Aves - Brasil cleorb@gmail.com
Viability of wastewater recycle in swine production, essentially to cleaning purposes, have been proposed as a possibility do reduce water demand and, consequently, wastewater generation in swine production systems. However, this practice represents a potential way of pathogens dispersion and a selective pressure to antibiotic resistance development if the water recycle process is badly handled. Beyond the possibility of pathogens recycle, other probable consequence of water recycle in swine production is the increase in recalcitrant compounds concentration at the final effluent and, consequently, in the recycled water. In this way, monitoring of pathogens and recalcitrant bioactive compounds in recycled water, as well as knowledge of its effects on biological treatment systems is a matter of great relevance to ensure de biosecurity and sustainability of water recycle process. Many antibiotics largely used in swine production systems are excreted in urine or eliminated by feces, some of these are persistent to biological treatment process commonly employed in swine production, possibly increasing its concentration in final effluent due to a recycling practice. Additionally, this increase in antibiotic concentration in effluent could negatively affect the biological process in slurry treatment systems, affecting the quality of final effluent and, consequently, recycled water. In anaerobic processes, aiming to methane production, this increase of antiobiotic concentration in slurry influent can lead to a reduction of methane production due to its potential negative effects upon microbial methanogenic consorptium. Colistin (Polimixyn E) used in this work is a peptidic antibiotic largely used in swine production, with both therapeutic and/or growth promoter use. In this work we evaluated acute effects of colistin on biological autotrophic ammonia oxidation, a fundamental initial stage on biological treatment process aiming to nitrogen removal. A mixed culture of ammonia-oxidizing microorganisms, grown in stable feeding condition, was obtained from a bench scale SBR operating under partial -1 nitrification autotrophic condition and at a high loading rate (400 mg N-NH3.(l.d) ). Batch cultures -1 were carried out with colistin concentration ranging from 0.1 to 100 mg.L . After one hour of incubation, nitrite accumulation rate was used as an indicative of ammonia oxidation activity. Results showed that colistin have a moderate inhibitory effect on biological ammonia oxidation, presenting MIC50 and MIC90 of 10.9 and 71.7 mg. L-1 colistin, respectively. These results represent an acute toxicity and additional chronic toxicity information is necessary to better understand the possible impact of this antibiotic on nitritation process.
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CT-BP-24 DISEO DE UN PROCEDIMIENTO PARA EL ESTUDIO Y CONTROL DE FACTORES DE RIESGOS LABORALES, EN PROCESOS DE REHABILITACIN DE SUELOS CONTAMINADOS POR HIDROCARBUROS, UTILIZANDO TCNICAS BIOCORRECTIVAS Castro Rodrguez David Javier1, Barrera Garca Anbal2, Bermdez Acosta Jelvys1, Poma Rodrguez Jos Reinol1
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Centro de Estudios Ambientales. Cienfuegos. Universidad carlos R Rodrguez. Facultad de Ciencias Empresariales. Cienfuegos. teresa.rodriguez@gal.sld.cu
La biorremedacin es una alternativa sustentable para contrarrestar la contaminacin por hidrocarburos. Crear procedimientos encaminados a la prevencin de riesgos laborales en el escenario de trabajo, permite constituir procesos adecuados de tratamiento y disposicin de residuos peligrosos. Se realiz un estudio descriptivo de corte transversal, en la zona costera de Punta Majagua, Cienfuegos, Cuba. El objetivo fundamental fue establecer un procedimiento metodolgico para el estudio y el control de factores de riesgos laborales, en procesos de rehabilitacin de suelos contaminados por hidrocarburos, empleando prcticas de biorremediacin. Se construye desde la fusin de tcnicas y herramientas de Ingeniera Industrial para la gestin de procesos y riesgos laborales, adems de otros recursos de recopilacin de informacin que enriquecen la validez de la investigacin. Quedaron diagnosticados los fallos potenciales del sistema. Se identificaron y evaluaron los factores de riesgos laborales en cada etapa del proceso efectundose soluciones particulares para los ponderados de manera crtica. Se propusieron medidas preventivas en funcin de la eliminacin y mitigacin de peligros existentes, as como un conjunto de indicadores que al ser calculados permiten controlar las acciones relacionadas con la seguridad y salud en el proceso. Se clasific el estado de satisfaccin laboral de los trabajadores, para la mejora futura y lograr estndares deseados de trabajo seguro, contribuyendo a producciones ms limpias. Concluyndose que el procedimiento diseado constituye un instrumento de utilidad metodolgica y prctica en este tipo de proceso. Puede ser replicado en otras instituciones que desarrollen esta actividad. Palabras claves: Biorremedacin, Factores de riesgos laborales, Gestin de procesos, Contaminacin de suelos por hidrocarburos, Rehabilitacin ambiental.
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CT-BP-25 RIQUEZA ESPECFICA DE DIATOMEAS DE XOCHIMILCO, CD. DE MXICO Pavn-Meza E. Luca1, Ramrez-Prez Teresa1, Hernndez-Lpez Rafael Evenezer2
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Lab. de Mtodologa Cientfica IV, F.E.S.I., U.N.A.M. Facultad de Estudios Superiores Iztacala, U.N.A.M. luciapav@hotmail.com
Xochimilco es un lago endorrico, localizado en el Valle de Mxico y formado por un laberinto de canales debido a las chinampas, que son su caracterstica. Por su ubicacin e importancia histrica, en 1987 fue nombrado como Patrimonio Cultural de la Humanidad por la UNESCO. Pero, debido a la presin que ejerce la urbanizacin en los alrededores del Lago y por la sobreexplotacin del manto fretico, el Lago es rellenado con agua proveniente de una planta de tratamiento; por lo que las condiciones naturales de ste han sido modificadas. A pesar de que se han realizado diversos estudios para conocer el efecto de stas alteraciones en el ecosistema; los trabajos sobre la comunidad fitoplantnica presente en el cuerpo de agua, son escasos. Dada la creciente importancia de las diatomeas como indicadoras de la calidad del agua; el presente estudio tiene la finalidad de contribuir al conocimiento de las especies de diatomeas presentes en la zona lacustre de Xochimilco. Para ello, en abril del presente ao, de los canales 27, Zanjas y Entronque se filtraron 80 L de agua en cada uno; para lo cual se utiliz una red de fitoplancton con 20 m de apertura malla, cada muestra se concentr a 200 mL y se fij con formol, a concentracin final del 4%. Tambin se determinaron algunos parmetros fisicoqumicos importantes, como temperatura, pH, oxgeno disuelto, alcalinidad y dureza del agua, adems del contenido de nitrgeno y fsforo. Se realiz la limpieza de las diatomeas y se montaron en Nafrax para su identificacin. Se determinaron 35 taxa, de las cuales Staurosirella pinnata, Aulacoseira granulata var. angustissima, Aulacoseira granulata var. granulata, Cocconeis placentula, Cyclotella meneghiniana, Staurosira construens, Fragilaria capucina, Nitzschia amphibia, Amphora veneta y Cymbella mexicana fueron las ms representativas. De acuerdo con las diatomeas encontradas y las caractersticas fisicoqumicas del agua, se considera un sistema mesotrfico, de neutro a alcalino, bien oxigenado.
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TRABAJOS IN EXTENSO
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TRABAJOS IN EXTENSO
AGUA Bressan et al. p. 255 Serafn et al. p. 259 ALGAL Armendriz et al. p. 262 Gmez et al. p. 266 Herrera et al. p. 269 Prsico et al. p. 272 AMBIENTAL Alfaro et al. p. 276 Arvalo (1) et al. p. 279 Arvalo (2) et al. p. 283 Bernal et al. p. 287 Crdenas et al. p. 290 Cisneros et al. p. 295 Corts et al. p. 300 Gabiatti et al. p. 304 Guilln et al. p. 308 Magalln et al. p. 310 Mendoza et al. p. 313 Michels et al. p. 317 Osorio et al. p. 321 Revah et al. p. 327 Rojas et al. p. 331 Salas et al. p. 335 Serafn et al. p. 339 Torres et al. p. 343 BIOCOMBUSTIBLES Acevedo (1) et al. p. 347 Acevedo (2) et al. p. 352 Avendao et al. p. 356 Gonzlez et al. p. 360 Matiz et al. p. 365 Patio et al. p. 370 BIOPROCESOS Patio et al. p. 375 BIORREMEDIACIN ngeles et al. p. 380 Bermdez et al. p. 386 Daz et al. p. 390 Navarro et al. p. 394 Salas et al. p. 400 Snchez et al. p. 404 Trevio et al. p. 407 MICROBIOLOGA Salgado et al. p. 412 SUSTENTABILIDAD Cervantes et al. p. 417 Gonzlez et al. p. 422 Poma et al. p. 426 Romelln et al. p. 431
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ACUTE TOXICITY OF COLISTIN (POLYMYXIN E) ON AMMONIA-OXIDIZING MICROORGANISMS OF A SBR OPERATED UNDER NITRITATION CONDITION
Cleo Rodrigo Bressan 1*, Airton Kunz 2, Hugo Moreira Soares 1
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Dep. de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos - Universidade Federal de Santa Catarina Brasil
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Embrapa CNPSA Brasil * cleorb@gmail.com
Palabras clave: toxicidade, antibiticos, nitrificao Introduo Atualmente, a atividade agropecuria vem apresentando uma tendncia mundial de aumento na escala de produo, concentrando a criao em grandes propriedades altamente tecnificadas com vistas reduo de custos. O modelo de produo industrial de sunos adotado no Brasil tem seguido esta mesma tendncia, concentrando cada vez mais a produo em grandes unidades produtoras, o que torna ainda mais emergencial o desenvolvimento de tecnologias adequadas para o tratamento dos resduos gerados e para a racionalizao do uso dos recursos hdricos disponveis. Projees realizadas pelo Ministrio da Agricultura e Pecuria MAPA prevem para a prxima dcada um aumento de aproximadamente 50% na produo de carnes no pas (frango de corte, bovinos e sunos), sendo que para a produo de sunos, especificamente, esperase um aumento na produo de aproximadamente 37%. No Brasil a maior parte dos efluentes gerados pela suinocultura tem como destino final o reuso agrcola como fertilizante, com ou sem tratamento prvio. Nutrientes, patgenos, metais, frmacos e outros contaminantes provenientes da lixiviao e/ou percolao destes compostos em solos adubados inadequadamente com dejetos chegam aos corpos hdricos superficiais e subterrneos das regies produtoras resultando na contaminao destes ambientes [1-2]. A grande quantidade de nutrientes presentes nestes dejetos, muitas vezes em concentraes desproporcionais para uma fertilizao eficiente, implica na disponibilizao de extensas reas agrcolas para disposio destes resduos e no balanceamento prvio dos nutrientes para melhor aproveitamento pelas plantas e reduo da lixiviao dos nutrientes. No entanto, freqentemente a rea de lavoura disponvel nas regies produtoras insuficiente e a aplicao excessiva de dejetos nestas reas resulta na contaminao dos recursos hdricos locais. Outro fator agravante refere-se ao fato de que os projetos de reuso na agricultura freqentemente baseiam-se somente nas quantidades de N, P e K para determinar os volumes aplicados, desconsiderando a quantidade aplicada de contaminantes como frmacos, patgenos e metais. Visando a racionalizao no consumo de gua e a reduo na gerao de efluentes, uma das alternativas que est sendo avaliada na suinocultura a possibilidade de reciclo de parte do efluente tratado, o qual seria utilizado essencialmente para operaes de limpeza das instalaes [3]. Neste contexto, a presena de patgenos e compostos bioativos, como antibiticos, de grande relevncia do ponto de vista da biossegurana no processo produtivo. No entanto, apesar de atraente do ponto de vista ambiental, esta alternativa pode representar se mal conduzida um risco potencial em relao disseminao de patgenos e ao desenvolvimento de resistncias a antibiticos. O potencial reciclo de microrganismos resistentes para o sistema produtivo ou a liberao destas mesmas cepas para o meio ambiente um aspecto de enorme relevncia para permitir a implementao da prtica do reuso do efluente com segurana. O desenvolvimento destas cepas resistentes poderia ainda, em teoria, permitir a transferncia horizontal de genes determinantes de resistncia para outros patgenos animais e/ou humanos presentes nestes ambientes. Outra provvel consequncia da implementao do reciclo da gua seria um aumento na concentrao de compostos recalcitrantes no efluente final e, conseqentemente, na gua a ser reciclada. Muitos antibiticos amplamente empregados na suinocultura apresentam remoo limitada nos sistemas de tratamento comumente
II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010
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utilizados e teriam, em funo do reciclo do efluente, sua concentrao possivelmente aumentada no efluente final. Estes antimicrobianos chegam aos corpos hdricos geralmente sob sua forma ativa, sendo ainda relativamente desconhecido o real impacto de sua presena no meio ambiente. Somando-se a isso, o reciclo de efluentes com antibiticos poderia favorecer ainda mais o desenvolvimento de microrganismos resistentes nas granjas, uma vez que estaria permitindo o contato crnico destes microrganismos com doses menos letais do antibitico. Paralelamente, um aumento na concentrao de antibiticos no efluente final em funo de um reciclo poderia tambm afetar negativamente o desempenho das unidades de tratamento biolgico, influenciando na qualidade final do efluente e, conseqentemente, na qualidade da gua para reciclo. Busca-se nesse trabalho, atravs da determinao da toxicidade do sulfato de colistina sobre a microbiota oxidadora de amnia a gerao de informaes que possam contribuir para o desenvolvimento de critrios e mtodos para a implementao de um reuso seguro dos efluentes da suinocultura. A utilizao bactrias oxidadoras de amnia, como organismo indicador para avaliao da toxicidade fundamenta-se no apenas na sua importncia nos processos de remoo de nitrognio empregados nas estaes de tratamento biolgico, mas tambm no fato de estarem estas bactrias entre as mais sensveis a uma grande diversidade de agentes xenobiticos [4]. Adicionalmente, o conhecimento da toxicidade sobre o grupo das nitrificantes de grande relevncia uma vez que em sistemas aerbios so estas bactrias as principais responsveis pela oxidao dos compostos xenobiticos, dentre eles diversos antibiticos [5]. O antibitico sulfato de colistina (polimixina E) foi escolhido para este trabalho por ser um antimicrobiano amplamente utilizado na suinocultura como promotor de crescimento e, em alguns casos, tambm como agente teraputico. Metodologia Produo de bactrias oxidadoras de amnia (BOA) para os testes de toxicidade Para a produo de biomassa para os testes de toxicidade foi construdo um reator do tipo batelada sequencial (SBR - Sequencing Batch Reactor) com volume til de 5L. A agitao do reator foi obtida utilizando-se agitador de ps velocidade
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de 100 rpm. No houve controle da temperatura e a aerao foi realizada com uso de bomba compressora de ar conectada a uma pedra difusora. Foram utilizadas bombas peristlticas para enchimento do reator e descarte do efluente e o funcionamento dos equipamentos (bomba de alimentao, bomba de descarte, agitador e aerador) foi automatizado atravs do uso de um controlador lgico programvel (CLP). Todos os cultivos com bactrias oxidadoras de amnia foram realizados com meio mineral modificado de Tanaka et al. (1981) [6] (Tabela 1). A principal modificao do meio refere-se ao aumento na concentrao de macro-nutrientes para compensar o emprego de concentraes de amnia mais elevadas, e utilizao de alcalinidade em quantidade estequiomtrica para oxidao de toda a amnia (meio originalmente descrito possua apenas 50% da alcalinidade necessria, sendo o restante fornecida durante o processo atravs de um sistema de controle de pH). No foi utilizado efluente real da suinocultura por no haver disponibilidade de dejeto livre de antibitico nos sistemas de produo disponveis.
Tabela 1: Composio do meio de cultura mineral adaptado de Tanaka (1981) [6]. A composio da soluo de micronutrientes descrita pelo autor no foi alterada. Nutrientes g/L NH4Cl 1,9107 (NH4)2SO4 2,3589 KH2PO4 0,25 MgSO4 0,123 FeSO4 0,008 CaCl 0,008 NaHCO3 11,9616 Soluo de micronutrientes 0,15 mL
Como inculo para o reator SBR foi utilizada biomassa proveniente de um reator tipo air-lift operado em condio de nitritao parcial e com meio de cultura conforme descrito por Vanotti (2000) [7] (tambm modificado a partir de Tanaka et al. (1981)[6]). Este reator, por sua vez, havia sido inoculado com lodo ativado da estao de tratamento de dejetos de sunos da Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Centro Nacional de Pesquisa de Sunos e Aves (Embrapa CNPSA). Utilizou-se como estratgia operacional para inibio da atividade das bactrias oxidadoras de nitrito o uso de aerao intermitente, com 15 minutos de aerao para cada 45 minutos no aerados. Alm disso, uma vez que no havia desnitrificao
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significativa no reator, a inibio das oxidadoras de nitrito foi auxiliada ainda pelos elevados nveis de nitrito presentes constantemente no reator (aproximadamente 900-1000 mg/L NO2--N). O pH foi controlado pela adio de alcalinidade sob a forma de bicarbonado de sdio em quantidade estequiomtrica para oxidao da amnia. Toxicidade aguda sobre as BOA Para a determinao da toxicidade aguda sobre as BOA foi elaborado um sistema de experimentao em agitador orbital utilizando-se frascos com volume til de 250 mL e como inculo biomassa proveniente do reator SBR descrito anteriormente na concentrao final de 0,5 g/L SSV. Utilizou-se o mesmo meio de cultura utilizado para alimentao do SBR, porm com concentrao de amnia reduzida para 200 mg/L NH3-N uma vez que estes eram os valores mdios encontrados no reator SBR durante a sua operao e aos quais as clulas encontravam-se adaptadas. A alcalinidade tambm foi reduzida proporcionalmente no meio. Antes da adio do antibitico o experimento foi rodado por 1 hora para confirmar a igualdade de condies entre os diferentes frascos, sendo aps este perodo adicionado o antibitico aos frascos. Foi igualmente desconsiderada para o clculo da CI50 (concentrao necessria para reduzir em 50% a atividade celular) a primeira hora aps a adio do antibitico por no ser imediata a sua ao e, portanto, ainda no refletir o grau real de inibio ocasionada pela adio do antibitico durante estes primeiros minutos. Assim, as velocidades de produo de nitrito e nitrato consideradas foram aquelas obtidas a partir da segunda hora aps incio do experimento (1 hora aps adio do antibitico). Optou-se pelo monitoramento da velocidade de formao de nitrito e nitrato como parmetro indicativo da atividade celular, sendo que a concentrao de amnia como parmetro foi desprezada em funo do fato de no ser a sua remoo devida somente ao das BOA, mas tambm devida volatilizao durante a agitao. Caracteristicamente, os antibiticos apresentam uma faixa de concentrao inibitria onde o grau de inibio linearmente correlacionado com o logaritmo da concentrao do antimicrobiano. Considerando isso, os valores de concentrao de antimicrobianos escolhidos para utilizao neste -1 -0,5 0 0,5 1 1,5 2 trabalho foram: 10 , 10 , 10 , 10 , 10 , 10 e 10 mg/L.
Determinaes fsico-qumicas Os compostos nitrogenados amnia, nitrito e nitrato foram determinados por colorimetria. Para a determinao da amnia utilizou-se o mtodo de Nessler de acordo com VOGEL (1981) [8]. Para o nitrato utilizou-se o mtodo do cido saliclico [9] e para o nitrito utilizou-se kits Hach (Nitriver 2). A determinao de slidos suspensos totais (SST), slidos suspensos fixos (SSF) e slidos suspensos volteis (SSV) realizada conforme procedimentos descritos pelo Standard Methods for the examination of water and wastewater [10]. Resultados e Discusso Estabelecimento do reator SBR para produo de bactrias oxidadoras de amnia (BOA) A estratgia de aerao intermitente demonstrou-se efetiva para manuteno da nitrificao parcial e, consequentemente, obteno de uma flora predominantemente composta por oxidadoras de amnia. Porm, para maior estabilidade do reator, foram necessrios ajustes na aerao e, eventualmente, pequenas retiradas de biomassa. Um fator determinante para alcanar a estabilidade na resposta do sistema foi o estabelecimento da capacidade de transferncia de oxignio como fator limitante da velocidade mxima de oxidao de amnia, limitando assim as variaes causadas na velocidade do processo em funo do crescimento celular, permitindo uma operao mais estvel do reator. Operado desta maneira, os nveis de converso de nitrito a nitrato se mantiveram durante todo o perodo na ordem de 2% apenas, com converso de amnia a nitrito mantida em torno dos 80-90% (Figura 1).
Figura 1: Concentrao das formas nitrogenadas presentes no meio de cultura e no efluente do reator nitritante (SBR).
Toxicidade aguda do antibitico sulfato de colistina (polimixina E) sobre as BOA
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Apesar de reduzida, observou-se inibio mesmo para as menores concentraes testadas de colistina. A Figura 2 apresenta o acmulo de nitrito observado nos diferentes frascos em funo da concentrao da colistina. No foi observada produo de nitrato durante o perodo avaliado.
Porm o fato de ter sido observada inibio mesmo em valores muito reduzidos indicativo de que exposies mais prolongadas ao antibitico podem levar conseqncias mais severas sobre a atividade nitrificante. Assim, trabalhos vm sendo atualmente desenvolvidos com o objetivo de avaliar a toxicidade crnica do antibitico sobre a microbiota nitrificante. Agradecimientos: CNPq Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnologico Bibliografa:
Figura 2: Acmulo de nitrito observado durante os testes de toxicidade aguda em funo da concentrao de colistina utilizada.
Para determinao da CI50 foi ajustado uma equao de segundo grau (R2=0,9936) sobre os dados (Figura 3), a partir da qual se encontrou um valor para a CI50 de 12 mg/L de colistina. No entanto, no se obteve uma reta na faixa inibitria como era esperado, isso pode ser ocasionado pelo fato de tratar-se de uma cultura mista onde as espcies apresentam diferentes graus de sensibilidade colistina.
Figura 3: Correlao entre o grau de inibio observado e a concentrao de colistina (polimixina E).
Concluses. Os valores encontrados para CI50 indicam que a toxicidade aguda ocasionada pela colistina sobre a oxidao da amnia no um fator preocupante na produo de sunos, visto que estes valores estariam bem acima dos valores esperados nos efluentes em funo do seu uso como promotor de crescimento.
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CARACTERIZACIN Y TRATAMIENTO DE LOS EFLUENTES PROVENIENTES DE LA ETAPA DE DESLIGNIFICACCIN DE LOS RESIDUOS SLIDOS AGRCOLAS, DENTRO DEL ESQUEMA DE BIOREFINERIA
Meja Lpez A., Serafin Muoz A.H.*, Alvarez Vargas A., Ramirez Ramirez N.,Horta Rangel F. A.
Universidad de Guanajuato, Campus Guanajuato, Divisin de Ingenieras, Departamento de Ing. Civil, Ing. Ambiental, Jurez No. 77, zona centro, C.P. 36000, sermuah@quijote.ugto.mx Palabras clave: Deslignificacin, Aguas Residuales, Pleurotus Ostreatus Introduccin. Mxico, al igual que varios pases, debe afrontar y solucionar las difciles problemticas ambientales como la generacin de residuos slidos, el deterioro de calidad del aire, la contaminacin del agua, por consecuencia de las mltiples actividades humanas se han generando graves problemas ambientales que actualmente constituyen un gran reto a resolver. Dentro de este marco, el tratamiento de residuos slidos agrcolas (RSA) ha constituido un gran desafo por solucionar. En el estado de Guanajuato es habitual que los RSA sean manejados de manera inadecuada, siendo la quema de estos una de las acciones a tomar por parte de los productores, propiciando el incremento de los contaminantes en la atmosfera en la zona. Una de las alternativas sustentables para atender el tratamiento de los RSA de la regin est enfocada al estudio del esquema de la implementacin de una biorefinera con procesos biotecnolgicos en donde la finalidad principal es evaluar la serie de productos generados a partir de los diferentes procesos involucrados. El tratamiento de los RSA (en particular los esquilmos) presenta tres etapas principales: 1. Deslignificacin por el mtodo oxidativo con perxido de hidrgeno, en el cual se tiene estudios avanzados de optimizacin, 2. Sacarificacin, que es la produccin de los monosacridos libres mediante hidrlisis enzimtica, 3.Fermentacin, para lo cual se tendr que probar distintas cepas silvestres y mutantes bajo diferentes condiciones para la obtencin de etanol y productos derivados de la fermentacin. Bajo este contexto, en cada etapa se tiene contemplado el estudio del tratamiento de los efluentes [1-3]. El presente trabajo est enfocado al estudio de la caracterizacin y tratamiento de los efluentes generados del proceso de deslignificacin. El proyecto de investigacin est constituido por tres etapas, la primera corresponde a la caracterizacin de los efluentes como un agua residual, segn la NOM-001-SEMARNAT-1996; la segunda est enfocada a la implementacin de un tratamiento biolgico con el Hongo Pleurotus ostreatus [4-8] y la tercer etapa acata a una segunda caracterizacin segn la norma ambiental antes citada para contrastar el grado de contaminacin de los efluentes despus del tratamiento biolgico. Varias especies de Pleurotus han sido investigadas por su capacidad de degradar residuos agroindustriales debido a su sistema enzimtico ligninoltico, ya que posee una amplia respuesta para degradar varios tipos de substratos. La utilizacin de P. ssp en el tratamiento de efluentes provenientes de los procesos de deslignificacin de los RSA pudiera ser una alternativa ptima para disminuir el efecto contaminante de los residuales [4-6]. Metodologa. En la primera etapa del proyecto los efluentes (licores) provenientes de la etapa de deslignificacin fueron considerados como un agua residual industrial para poder utilizar como referencia la NOM-001SEMARNAT-1996, que establece los lmites mximos permisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales en aguas y bienes nacionales y de esta manera analizar el grado de contaminacin del efluente. Los parmetros que se midieron fueron los siguientes: [2], Temperatura, Slidos Sedimentables (SS), Slidos Suspendidos Totales (SST), Demanda Bioqumica de Oxigeno5 (DBO5), Nitrgeno Total (N), Fosforo Total, Demanda Qumica de Oxigeno (DQO) y pH. La segunda etapa del proyecto correspondiente al tratamiento biolgico que consiste en buscar una proporcin adecuada entre licores y Medio de Cultivo (PD) [3], la cual favorezca el crecimiento del Hongo P. ostreatus, con el objeto de observar su comportamiento y su capacidad como agente biodegradante. Se trabajo con 4 muestras de 50ml
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en matraces de 250 ml en las siguientes proporciones Licor: PD, 4:1, 3:2, 2:3, 1:4, con dos controles, uno de PD y otro de licor, tanto el licor como el medio se esterilizaron previamente a 121C durante 15 minutos en autoclave. Cada uno de los matraces se inoculo con 4 cuadritos de micelio del P. ostreatus, de 1cm2 cada uno, se incubaron las muestras durante 7 das a una temperatura de 28C y una agitacin de 140 rpm. [1-3], Despus del periodo de incubacin se separo la biomasa generada de la mezcla licor:PD, por medio de filtracin a travs de papel filtro Whatman No.1, los slidos retenidos, biomasa, fueron pesados en hmedo, liofilizados y posteriormente pesados. Resultados y discusin. Las muestras de los licores obtenidos del proceso de deslignificacin fueron analizados de acuerdo a la normas establecidas NMX-AA-007, NMX-AA-008 NMX-AA-004, NMX-AA-026, NMX-AA-029, NMX-AA030, NMX-AA-028, NMX-AA-034.
Tabla 1. Valores comparativos entre los parmetros de los lmites mximos permisibles por la NOM-001-SEMARNAT1996 con los correspondientes al efluente proveniente del proceso de deslignificacin. Lmites mximo (NOM-001SEMARNAT1996) No aplica 2ml/l 200mg/l 30mg/l 60mg/l No especificado 5-10
concentracin de Nitrgeno y Fsforo. En la tabla 2, podemos observar los resultados preliminares del tratamiento biolgico con el P.ostreatus a diferentes concentraciones. En donde se observa, que la relacin licor : PD, 3:2 y 2:3 corresponden al mejor crecimiento del P.ostreatus, 2.5+0.14 g y 2.1+0.08g
biomasa fresca. Tabla 2. Biomasa obtenida a partir del crecimiento del P. ostreatus en diferentes proporciones de medios de cultivo con el licor del efluente proveniente del proceso de deslignificacin. Muestra 1 2 3 4 Licor Control PD Proporcin Licor : PD 4:1 3:2 2:3 1:4 Biomasa fresca g 1.6+ 0.32 2.5+ 0.14 2.1+ 0.08 1.6+ 0.11 1.1+ 0.24 3.1+ 0.02 Biomasa Liofilizada g 0.14+ 0.16 0.19+ 0.11 0.18+ 0.08 0.14+ 0.05 0.27+ 0.10 0.18+ 0.01
Parmetro
Licor
Temperatura S. sedimentables SST Fsforo Nitrgeno total DQO pH
60C 2ml/l 3059mg/l 700ppm 543.97mg/l 8250mg/l 11
En la figura 1, podemos observar cualitativamente que el P.ostreatus degrada la carga orgnica en el licor proveniente del proceso de deslignificacin figura 1(a-b).Tambin es observable el crecimiento notorio de la biomasa del hongo en la relacin licor:PD, 3:2 a los 7 das de incubacin, figura 1(b). Estos resultados son similares a los obtenidos en investigaciones previas con otros residuales utilizando P. ostreatus [4-6].
En la tabla 1 se pueden observar los valores obtenidos en base a los parmetros establecidos. Se observa claramente que los valores correspondientes a la DQO, Fsforo y Nitrgeno total mostraron concentraciones fuera de los lmites que establece la norma oficial, por lo que se opto por un tratamiento biolgico para la remocin de la materia orgnica presente en los licores, porque ofrece un buen rendimiento y su alta tasa de remocin de contaminantes, para disminuir la carga orgnica, la
(a)
(b)
Figura 1. (a)Licor obtenido del proceso de deslignificacin de los residuos slidos agrcolas, paja de trigo. (b) Biomasa
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obtenida del crecimiento del P. ostreatus en relacin licor: PD, 3:2.
4.
5.
Conclusiones. El haber evaluado el grado de contaminacin en funcin de las normas mexicanas nos indico la gran magnitud del problema que representan los efluentes provenientes del proceso de deslignificacin de paja y la necesidad de tratar los efluentes con el objeto de disminuir sus niveles de contaminacin. Por otro lado, la capacidad de biodegradacin observable del hongo P. Ostreatus para crecer en medios proporcionales con el licor proveniente de la deslignificacin, nos indica sin duda alguna, la factibilidad del tratamiento biolgico con este microorganismo. Como trabajo futuro, es necesario optimizar las estrategias de seleccin en base al estudio de diferentes esquemas experimentales que permitan la alta capacidad de degradacin de los residuales, con la finalidad de lograr la diversificacin del hongo ligninoltico en los estudios desarrollados para la implementacin de tecnologas ms limpias. Agradecimientos. Agradezco en primer lugar a la Dra. Alma Serafin de la UG, por la oportunidad brindada para la realizacin de este trabajo de investigacin, as como su apoyo y comprensin todo el periodo de investigacin. Agradezco a las autoridades de la Divisin de Ingenieras, campus Guanajuato de la UG as como todo el personal de los diferentes laboratorios de la Universidad de Guanajuato, El Dr. Francisco Vdo, Aurelio Alvarez, Ignacio Segoviano, Rubn, por su ayuda y asesoramiento tcnico. Tambin agradezco a mis compaeros y colegas de laboratorio, Miriam, Cori, Peri, Tobas, por el apoyo recibido. Al programa de apoyo Beca-Practica del Gobierno del Estado de Guanajuato. Bibliografa.
1. 2. Vergagni, Gustavo, 2004, La industria del etanol a partir del maz, MAIZAR. Quintero, R, 2000, Avances en la Innovacin en Empresas Mexicanas a travs de Financiamiento Pblico, en La tecnologa y la innovacin como motores del crecimiento en Mxico, Programa CIDECyT, CIDE. Sandoval G., 2009, Capacidades cientficas y tecnolgicas del CIATEJ para bioetanol de 2a y 3a generacin, Avances Cientfico Tecnolgicosen la Produccin de Etanol Celulsico para Mxico.
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3.
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EVALUACIN DEL CRECIMIENTO DE LA MICROALGA Chlorella vulgaris A NIVEL DE ESCALAMIENTO PARA LA PRODUCCIN DE BIOMASA
Armendriz Galvn J. F 1, Posadas Beltrn A 1, Amezcua-Allieri M A1
1
*Instituto Mexicano del Petrleo. Eje Central Lzaro Crdenas Norte 152. Col. San Bartolo Atepehuacn, C.P. 07730 Mxico, DF, jagalvan@imp.mx Palabras clave: Biomasa, Chlorella vulgaris, Microalga, Cultivo de capacidad. En la figura 1, se muestra esquemticamente los resultados obtenidos del escalamiento del crecimiento de la microalga. Obtencin de la cepa. La microalga Chlorella vulgaris se obtuvo a partir de un cultivo autotrfico monoalgal del Laboratorio de corrosin microbiolgica del Instituto Mexicano del Petrleo. Purificacin de la cepa. La cepa de la especie Chlorella vulgaris no estaba totalmente purificada, por lo que se procedi a realizar lo siguiente: Se tomo una pequea fraccin lquida del tubo de ensayo y se inoculo de forma circular en cajas Petri con Medio Basal de Bold con agar (20 g/L) para iniciar su crecimiento en placa [4]. Se proporcion iluminacin continua con lmparas fluorescentes luz de da (aproximadamente 8,500 luxes) a temperatura ambiente (25 2 para iniciar C) su crecimiento multiespecfico (algas y bacterias). Despus de dos semanas (aproximadamente) de crecimiento, se efectu resiembra en aquellas colonias que presentaron coloracin indicativa de crecimiento algal empleando para ello asas microbiolgicas. Este segundo grupo de cajas Petri se someti a las condiciones de iluminacin, temperatura y tiempo de crecimiento antes mencionados. Se realizaron varias resiembras hasta obtener la cepa pura de Chlorella vulgaris. Cultivo en tubo de ensayo. Finalmente de las cajas Petri obtenidas, se observ al microscopio para verificar que el cultivo fuera monoespecfico y se inocul en medio Bold Basal para producir a la especie en un medio lquido (tubo de ensayo) y dar inicio a su produccin masiva a pequea escala. Cultivo esttico en matraz Erlenmeyer de 100 ml. Del crecimiento del tubo de ensayo se tom una alcuota (aproximadamente 1 ml) y se inocul en un matraz Erlenmeyer de 100 ml. Se proporcion iluminacin continua con lmparas fluorescentes luz
Introduccin. A nivel mundial se est presentando una crisis energtica de hidrocarburos fsiles, debido a su utilizacin excesiva, adems de generar una gran contaminacin ambiental debido a las altas emisiones de CO2 residual. En la actualidad los recursos energticos son una gran preocupacin de la sociedad moderna, adems de que se est promoviendo el uso de fuentes alternas de energa. Una opcin es la bioenerga a travs de los biocombustibles (bioetanol y biodiesel), stos generados a partir de biomasa de microorganismos (microalgas, levaduras, hongos y bacterias), que producen una gran cantidad de cidos grasos, los cules pueden ser usados como una fuente potencial de produccin de biodiesel [3]. Las investigaciones sobre el cultivo de microalgas revisten gran importancia dada su amplia aplicacin biotecnolgica y comercial, utilizando cultivos discontinuos por su relativo fcil manejo, para determinar la cintica de crecimiento y los parmetros que influyen en el desarrollo poblacional [6]. Al tomar en consideracin el inters actual en nuestro pas por el desarrollo de nuevas fuentes alternas de energa renovables, el objetivo principal del presente trabajo es evaluar el crecimiento (cintica) de la microalga Chlorella vulgaris a nivel de escalamiento y bajo condiciones de laboratorio, iniciando desde la purificacin de la cepa, crecimiento en tubo de ensayo, matraz Erlenmeyer de 100, 500 y 1000 ml hasta un garrafn de 20 litros de capacidad (carboy) para la produccin masiva de biomasa. Materiales y Mtodos. Escalamiento del cultivo. El escalamiento de la microalga Chlorella vulgaris involucra el cultivo esttico desde tubo de ensayo hasta la produccin masiva (carboy) en un garrafn de vidrio de 20 litros
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de da (aproximadamente 8,500 luxes) a temperatura ambiente (25 2 C) para iniciar su crecimiento masivo. Cultivo esttico en matraz Erlenmeyer de 500 ml. Se tomo una alcuota (aproximadamente 1 ml) del matraz de 100 ml y se inocul en un matraz Erlenmeyer de 500 ml. Se proporcion iluminacin continua con lmparas fluorescentes luz de da (aproximadamente 8,500 luxes) a temperatura ambiente (25 2 C) para iniciar su crecimiento masivo. Cultivo en matraz Erlenmeyer de 1000 ml. Se emplearon tres matraces (sistema 1, 2 y 3) de la misma capacidad e inoculados con la misma concentracin celular, con el fin de obtener biomasa microalgal. Los cultivos se iniciaron con una densidad celular de 5,00 X 104 cel mL-1 en matraces Erlenmeyer de un litro de capacidad, conteniendo cada uno 750 mL de medio de cultivo Basal de Bold (MBB), antes esterilizado en autoclave a 121 15 psi durante 15 C, minutos y bajo condiciones auttrofas, temperatura de 25 a 28 C, aireacin constante, iluminacin continua y fotoperiodo 12:12 (luz-obscuridad) durante 18 das. El tipo de sistema que fue utilizado fue, el semicontinuo con recambios de medio de cultivo y agua destilada estril cada tercer o quinto da del 20 al 30% del volumen. Cultivo en garrafn (carboy) de 20 litros. Se prepararon 16 litros de medio Basal de Bold (MBB) en matraces Kitasato de 3000 ml, se esterilizo en autoclave a 121 15 psi y durante 15 minutos. C, El garrafn de vidrio primeramente fue lavado con jabn, enjuagado con agua de la llave y finalmente con agua destilada. Posteriormente fue esterilizado con luz ultravioleta por dos horas en una campana de flujo laminar. Finalmente, bajo condiciones aspticas y con ayuda de mecheros el garrafn fue llenado con el MBB previamente esterilizado hasta 15 litros de prueba, inmediatamente se coloc el tapn de goma con los tubos (previamente esterilizado). De un cuarto matraz de 1000 ml de capacidad, crecido bajo las mismas condiciones antes mencionadas, se centrifug con el objetivo de concentrar la biomasa producida y utilizarla para inocular el garrafn de vidrio de 20 litros de capacidad (carboy). El cultivo se inoculo con una densidad celular de 1,00 X 105 cel mL-1.
Parmetros fisicoqumicos evaluados. La densidad celular se determino tomando diariamente de los matraces y del garrafn durante el periodo de ensayo, una alcuota (aproximadamente 15 l) de la suspensin de microalgas. Se determino el potencial de hidrgeno (pH), temperatura (C), slidos totales totales (STT) y slidos suspendidos totales, cada tercer da [1]. Equipos empleados. Para la temperatura y el potencial de hidrgeno se emple un potencimetro marca Oakton, modelo TDS 510. Los recuentos se realizaron con una cmara de Neubauer de 0,1 mm de profundidad y un microscopio marca Meiji, modelo 2000. Para la estimacin de la biomasa microalgal se utiliz una mufla marca Blue M. Resultados y Discusin. El crecimiento de Chlorella vulgaris present una tendencia similar en los tres sistemas evaluados, con una fase de latencia que culmin el da 2, seguida de una fase exponencial que dur 14 das para el sistema 1, 13 das para el sistema 2 y 13 das para el sistema 3 respectivamente. Finalmente la microalga present una fase estacionaria en los tres sistemas despus de los das 14 a 18 (Figura 1).
Figura 1. Comportamiento del crecimiento de Chlorella vulgaris para los sistemas evaluados. En la Figura 2, se representa esquemticamente el escalamiento del cultivo de la microalga Chlorella vulgaris.
Existi un aumento en los slidos totales (STT) y slidos suspendidos totales (SST), debido a que a travs del transcurso de los das, hay una mayor
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produccin de biomasa en los sistemas y en el garrafn (Figuras 3 y 4).

ETAPA Purificacin de la cepa INOCULACIN CRECIMIENTO
El valor inicial promedio de pH en los tres sistemas fue de 6.62 0.0006 unidades, incrementndose durante el transcurso de los das hasta un pH promedio de 8.88 0.02. El pH obtenido durante toda la fase experimental no fue un factor limitante para el crecimiento de la microalga. De acuerdo con los registros de temperatura obtenidos, se detect que sta inicia a 25 C, incrementndose durante el transcurso de los das hasta 27 3 con pequeas variaciones. Esta C variacin, se debi probablemente a la influencia de las oscilaciones de la temperatura ambiental ya que no se cuenta con una temperatura controlada en el laboratorio y sta tambin depende de la poca del ao, no afectando el crecimiento celular de la microalga. En la escala masiva, el cultivo se inici con una densidad celular de 1,00 X 105 cel mL-1, presentando tambin las fases caractersticas de un cultivo discontinuo. Se present una fase de latencia que culmin el da 4 con una densidad de 1,16 X 105 cel mL-1; la fase exponencial o logartmica dur 33 das con una densidad de 1,11 X 107 cel mL-1 y la fase estacionaria se present despus de los 38 das con una densidad celular de 1,09 X 107 cel mL-1 (Figura 5). Estos valores estn ligeramente por arriba de los reportados para C. vulgaris (6 X 106 cel mL-1) para un volumen de 2 L [2-5].
Cultivo en tubo de ensayo Cultivo esttico en matraz Erlenmeyer de 100 ml Cultivo en matraz Erlenmeyer de 500 ml Cultivo en matraz Erlenmeyer de 1000 ml Cultivo en garrafn (carboy) de 20 litros Obtencin de biomasa
Figura 2. Representacin esquemtica del escalamiento del cultivo de Chlorella vulgaris.
Figura 3. Comportamiento de los STT registrados durante toda la fase de evaluacin.
Figura 5. Comportamiento del crecimiento de Chlorella vulgaris en el carboy (escala masiva).
El valor inicial promedio de pH en el carboy fue de 6.60 0.01 unidades, incrementndose durante toda la fase experimental hasta alcanzar un pH 7.32 0.006 unidades.
Figura 4. Comportamiento de SST registrados durante toda la fase de evaluacin.
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El sistema carboy inici con una temperatura inicial de 26 2 mantenindose constante durante toda C, la fase experimental. Con respecto, a la determinacin de los slidos totales (STT) se observ tambin un aumento durante toda la fase experimental, debido a que a travs del transcurso de los das, hay una mayor produccin de biomasa en el carboy (Figura 6).
Conclusiones. Las curvas de crecimiento mostraron en cada uno de los sistemas, las fases caractersticas de un cultivo discontinuo (fase de latencia, exponencial o logartmica y estacionaria). Se concluye de este trabajo que el medio de cultivo Basal de Bold favorece un adecuado crecimiento de la microalga Chlorella vulgaris, dando como resultados tasas diarias de crecimiento homogneas en cada nivel de escalamiento. Se sugiere realizar un anlisis bioqumico, monitoreando durante la cintica, el contenido de protenas, contenido de carbohidratos, contenido de lpidos y determinacin de clorofila. Agradecimientos. Se agradece al Instituto Mexicano del Petrleo, las facilidades otorgadas para el desarrollo del presente trabajo. Bibliografa.
Figura 6. Comportamiento de los STT registrados durante toda la fase experimental.
Despus de que los sistemas (matraces Erlenmeyer de 1000 ml) y el carboy, alcanzaron la fase estacionaria, fueron retirados. La biomasa producida en cada uno de los matraces, se centrifug y la pasta hmeda se transfiri a una cpsula de porcelana, colocndose en una estufa a 50 60C durante aproximadamente 15 horas, luego la pasta seca se macer hasta obtener la biomasa seca y finalmente se peso en una balanza analtica. Con respecto a la produccin de biomasa seca obtenida, se pudo observar que en los tres sistemas la produccin de biomasa es similar (0.37 para el sistema 1, 0,35 para el sistema 2 y de 0,33 g/L para el sistema 3). Obtenindose como valor promedio de biomasa seca de 0.35 0.02 g/L. En el nivel carboy se obtuvo una produccin de biomasa seca de aproximadamente 4,5 g/L. Existe una tendencia similar de la biomasa seca obtenida en otro trabajo, el cual reporto 0.41g/L de biomasa seca con una densidad celular de (6 X 106 cel mL-1) durante la fase de crecimiento (14 das). En este estudio la biomasa fue menor, probablemente debido al mtodo de obtencin y secado de la misma [2].
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EVALUACIN DEL CRECIMIENTO DE Nannochloropsis sp. EN CUATRO SALINIDADES DIFERENTES

Gmez Ramrez Alejandro1, Reyes-Fernndez Zehila1, Gmez Uc Edith1 y Vzquez Prez Rosa1
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Universidad Autnoma del Carmen. DES Ciencias Naturales. Campus III Ave. 56 No. 4. Esq. Ave. Concordia. Col. Aviacin, CP. 24180 Tel: 9383811018, Ext. 1800 Ciudad del Carmen, Camp. gora8610@gmail.com Palabras claves: Microalgas, salinidad, Nannochloropsis.
Introduccin. Las especies del gnero Nannochloropsis pertenecientes a la clase Eustigmatophycea son ampliamente utilizadas en la acuicultura por ser un excelente alimento, ya que poseen un tamao adecuado, una alta digestibilidad, un elevado porcentaje de cidos grasos poliinsaturados (principalmente el cido eicosapentaenoico) y una gran fuente de pigmentos como la clorofila a, violaxantina, astaxantina, anteroxantina, vaucheriaxantina, zeaxantina, canthaxantina y -caroteno. Comnmente son empleadas como alimento en cultivos de organismos intermediarios (rotferos y artemias) y para crear el efecto green-water en tanques larvarios de peces [1, 2, 3]. Para un ptimo crecimiento de las microalgas se debe considerar la influencia de factores nutricionales y fsico-qumicos. Dentro de los factores nutricionales se encuentran las variaciones en la composicin de los medios de cultivo en cuanto a los macro y micro nutrientes, vitaminas, fuente de carbono, que son utilizados para sintetizar los compuestos orgnicos o como catalizadores [4]. En cuanto a los factores fsico-qumicos se destacan la influencia de la intensidad de luz, temperatura, pH y salinidad [5]. Este ltimo es uno de los factores de gran importancia en el cultivo de las microalgas, ya que las sales inorgnicas disueltas en los ambientes marinos, como de agua dulce pueden afectar potencialmente el crecimiento del fitoplancton como una funcin de su actividad osmtica [6].
El objetivo de este trabajo es evaluar el crecimiento poblacional de la microalga Nannochloropsis sp. en cuatro salinidades diferentes y as establecer la concentracin ptima para su crecimiento. Metodologa. La microalga empleada fue una cepa de Nannochloropsis sp., la cual fue aislada de la Laguna de Trminos, Campeche. Los cultivos se llevaron a cabo en recipientes de plstico de 2.5 litros de capacidad, donde se inocul 1350 ml de medio y 150 ml de inculo con una densidad de 32.25 x 106 ( 3.78 x 106) cel/mL. Se utiliz agua de mar colectada, previamente filtrada y el medio Guillard f/2 comercial (Kent Pro-Culture Professional f/2). Las salinidades evaluadas fueron 10, 20, 30 y 40 ups, se calcularon por medio de la frmula de ajuste de salinidad: a = d (D-B) / A-B b = d (A-D) / A-B En donde: a= Volumen de agua de mar a emplear b= Volumen de agua destilada a usar d= Volumen deseado A= Salinidad mayor B= Salinidad menor D= Salinidad deseada Los experimentos se llevaron a cabo bajo condiciones de laboratorio. Cada tratamiento cont con 4 rplicas para un total de 16
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unidades experimentales, las cuales estuvieron expuestas durante toda la etapa experimental a iluminacin artificial de aproximadamente 2000 lux, a una temperatura de 241 y un flujo aproximado C de .26 L/min de aire. A cada unidad experimental se le realizaron conteos diarios para determinar la concentracin celular que fue expresada en cel/mL durante todo el periodo que dur el experimento. Los conteos se realizaron con la ayuda de un hematocitmetro con rayado de Neubauer de 0.1 mm de profundidad, un microscopio ptico y un contador manual. La densidad de microalgas se calcul de acuerdo a la siguiente frmula: C = [(N / (4 x 10-6)] x dil En donde: C= cl/mL N= Promedio de clulas presentes en los 5 cuadros pequeos del cuadro central 4 x 10-6= Corresponde al volumen de la muestra expresado en cm3 (mL) sobre el rea de los cuadros pequeos la cual equivale a 0.004 mm3 (0.004 L) (0.2 x 0.2 x 0.1) dil= Factor de dilucin Se determinaron valores medios de la concentracin de microalgas presentes en cada unidad experimental diariamente y se establecieron los lmites de confianza con un nivel de significacin del 95% para cada tratamiento. Se aplic un anlisis de varianza de un factor (ANOVA) y una prueba de comparaciones mltiples de TUKEY con un nivel de significacin de =0.05 al da que alcanzaron la mayor densidad poblacional para determinar las diferencias entre los tratamientos. Los anlisis estadsticos fueron realizados con la ayuda de Excel y el paquete estadstico SSPS Statistics (Ver. 18). Resultados y Discusin. Se obtuvo crecimiento en las cuatro
salinidades, en la siguiente figura se observa que el patrn de crecimiento es similar para los tratamientos T2, T3 y T4, iniciando la fase exponencial inmediatamente, logrando sus mximas densidades celulares para el T3 el da 12 con 87.62 x 106 ( 4.41 x 106) cel/mL y para el T2 y T4 el da 13 con 83.62 x 106 ( 4.83 x 106) y 85.06 x 106 ( 4.48 x 106) cel/mL, en contraste con el tratamiento T1 que mostro un comportamiento irregular, logrando su mayor densidad el da 11 con 6 6 36.62 x 10 ( 2.08 x 10 ) cel/mL.
Figura 1. Curva de crecimiento para la microalga Nannochloropsis sp. a cuatro salinidades diferentes. Las barras indican la media LC 95%.
A partir del da 10, los datos de los conteos con las densidades mximas de T2, T3 y T4, fueron sometidos a un anlisis de varianza. Los resultados indican que no presentan diferencias significativas en cuanto al crecimiento de los tres tratamientos (P>0.05; ANOVA). El da 12 fueron comparadas las cuatro salinidades, (P<0.05; ANOVA) la cual nos indic diferencia significativa. Se aplic una prueba de comparaciones mltiples de Tukey (Zar, 1974), la cual indico que el tratamiento T1 es diferente a T2, T3 y T4 (P<0.05), mientras que estos no presentan diferencias entre s (P>0.05). Por lo que se puede establecer un rango ptimo de crecimiento de 20-40 ups. Estos resultados concuerdan con [7], quienes encontraron un rango ptimo de salinidad de 20-40 ups para el crecimiento de Nannochloropsis sp. Se pudo comprobar el crecimiento poblacional de esta especie de
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microalga en todos los tratamientos y esto se debe a que todas las clulas fitoplanctnicas se adaptan fisiolgicamente a la salinidad ajustando su concentracin interna de sales a un nivel un poco superior al de su medio de crecimiento. Esto establece una presin osmtica que favorece el flujo del agua hacia el interior de la clula manteniendo la turgencia de la misma [8]. Conclusiones. De las salinidades evaluadas 20, 30 y 40 ups no presentaron diferencia significativa (P>0.05), por lo que se puede establecer un rango ptimo de crecimiento para el cultivo de Nannochloropsis sp. de 20-40 ups. Agradecimientos. Este trabajo forma parte del proyecto denominado: Caracterizacin de las condiciones fisicoqumicas, bioqumicas e identificacin taxonmica de cepas de microalgas aisladas de la Laguna de Trminos, Campeche, para contribuir a la integracin de un cepario de referencia y sus posibles aplicaciones biotecnolgicas. (DACNE/2009/06) Financiamiento Interno de la Universidad Autnoma del Carmen. Bibliografa.
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CARACTERIZACIN DE LA EXPRESIN DE GENES DEL CLOROPLASTO DE LA MICROALGA VERDE Chlamydomonas reinhardtii CON POTENCIAL DE SER INDUCIBLES.
Melissa L. Casais Molina, Virginia A. Herrera Valencia*.
Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn (CICY), Unidad de Biotecnologa. Calle 43, No. 130, Col. Chuburn de Hidalgo, C.P. 97200, Mrida, Yucatn, Mxico. Tel: (52) 999 942-83-30. *e-mail: vicky@cicy.mx. Palabras clave: C. reinhardtii, cloroplasto, expresin gnica. Introduccin. La microalga verde C. reinhardtii es considerada como un sistema modelo en estudios fisiolgicos y moleculares de organismos fotosintticos, los genomas de su ncleo y cloroplasto se encuentran completamente secuenciados, y su cultivo ha demostrado ser altamente viable para la expresin de protenas recombinantes (PRs) de inters biotecnolgico, como vacunas y anticuerpos. Sin embargo, para esta aplicacin es necesario contar con una alta expresin gnica, y en este sentido un factor muy importante es la regulacin gnica mediada por el promotor. En C. reinhardtii slo algunos promotores han sido utilizados para la produccin de PRs, entre los cuales destacan los promotores de los genes del cloroplasto psbA, atpA, rbcL, en donde se reportaron rendimientos de un 5, 3 y 2% de protena total soluble, respectivamente [1, 2, 3]. As mismo, la evaluacin de otros promotores en esta microalga permitira identificar otras alternativas para lograr un incremento en la expresin gnica. En C. reinhardtii un promotor inducible permitira el control de la expresin de un transgen por medio de la presencia de un inductor, despus de alcanzar una alta densidad celular, y por tanto una mayor acumulacin proteica sin interferir con el metabolismo celular. En la regin promotora de genes nucleares de C. reinhardtii se han identificado elementos cis asociados a la respuesta a inductores [4]. Por su parte, en el cloroplasto se ha sugerido la presencia de genes con potencial de ser inducidos [5], pero hasta el momento no se ha caracterizado algn promotor inducible en este organelo. As mismo, el estudio de la expresin de genes del cloroplasto que presenten elementos reguladores cis asociados a la induccin gnica, puede servir de punto de partida para seleccionar promotores con potencial de ser inducibles en sistemas recombinantes. Por otra parte, en C. reinhardtii se han encontrado dos tipos de promotores: el promotor tpico bacteriano 70, que en bacterias dirige la expresin de genes ribosomales y es un promotor fuerte [6], y los promotores que se caracterizan por la prdida del elemento cis TATAATAT; este tipo de promotor se defini inicialmente para el gen atpB de C. reinhardtii [6], y al parecer es un promotor comn en los genes que codifican protenas que participan en la fotosntesis en el genoma del cloroplasto. En este sentido, el anlisis in silico de promotores de genes del cloroplasto en esta microalga contribuira a la caracterizacin de promotores que an no han sido estudiados, as como al conocimiento de los elementos cis presentes en sus secuencias que posiblemente se encuentren asociados al inicio de la transcripcin gnica. Por todo lo anterior, en este trabajo se propone por una parte, el anlisis in silico de promotores de genes del cloroplasto con el fin de investigar su potencial de ser inducibles, as como evaluar este potencial mediante el anlisis de la expresin de estos genes. Por otra parte, se plantea el anlisis in silico de promotores de genes del cloroplasto que se encuentren parcialmente o no caracterizados, as como la evaluacin de la expresin de los genes, con el fin de contribuir al estudio de promotores que pudieran ser usados en el futuro para la produccin de PRs. Metodologa. Inicialmente se llev a cabo un anlisis in silico a la regin promotor + 5 no traducible (P+5UTR) de genes del cloroplasto de C. reinhardtii utilizando el programa bioinformtico PLACE [7,8], y se seleccionaron aquellos genes que en su regin promotora presentaron un nmero considerable de elementos cis con posible respuesta a inductores de la expresin gnica. Por otra parte, se us el programa bioinformtico PLACE [7,8] en conjunto con el programa BPROM (http://www.softberry.com) para llevar a cabo la caracterizacin de los genes del cloroplasto de C. reinhardtii, y a partir de los resultados obtenidos se seleccionaron aquellos genes que presentaron en su regin P+5UTR elementos cis ubicados, dentro de la secuencia, en regiones similares a los elementos cis de los promotores de los genes de C. reinhardtii parcial o totalmente caracterizados. Se disearon oligonucletidos a partir de la secuencia del genoma del cloroplasto de C.
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reinhardtii tomada del banco de genes del National Center for Biotechnology Information (NCBI), con nmero de acceso BK000554. La extraccin de ADN y ARN se realiz empleando el protocolo modificado de Dellaporta y colaboradores (1983), y el estuche comercial de extraccin de ARN GE Healthcare (Illustra RNAspin Mini RNA Isolation Kit), respectivamente. El anlisis de la expresin de los genes del cloroplasto se est llevando a cabo empleando la tcnica de RT-PCR semicuantitativa. Resultados y discusin. Se llev a cabo un anlisis in silico a la regin P+5UTR de 12 genes del cloroplasto de C. reinhardii, y a partir de los resultados obtenidos se seleccionaron como candidatos aquellos que presentaron un nmero considerable y variado de elementos cis con posible respuesta a inductores de la expresin gnica (tabla 1 y 2). En las tablas 1 y 2 se presenta un resumen de algunos elementos cis que son de inters particular para los objetivos de este estudio. Los elementos cis asociados a la respuesta a citocininas podran estar involucrados en el desarrollo del cloroplasto, y en la formacin y acumulacin de la clorofila como se ha observado previamente en plantas superiores [9]. La presencia de elementos cis asociados a la respuesta a luz, confirma hasta cierto punto, el gran efecto que tiene la luz en la regulacin de la transcripcin gnica en el metabolismo de organismos fotosintticos [10]. Dentro de estos, el elemento cis CURE, observado en la regin P+5UTR (ver tabla 1), es de particular inters debido a que en estudios previos se ha demostrado que su presencia en la regin promotora del gen nuclear cyc6 de esta microalga induce un aumento en la expresin del gen ante la presencia de nquel (Ni) o ausencia de cobre (-Cu) en el medio de cultivo. As mismo, debido a que el ncleo ejerce un gran control sobre la expresin de los genes del cloroplasto, era probable que los elementos cis encontrados estuvieran asociados a la induccin del gen y que respondieran ante el inductor correspondiente, ya que la base de datos empleada en el anlisis bioinformtico est basada en elementos cis nucleares. Por tanto, era de esperarse que los genes psbC, psbD y rpl16 presentaran una induccin similar o parecida; sin embargo, como se puede ver en la figura 1 y 2, al llevar a cabo el anlisis de la expresin de estos genes a las concentraciones de induccin reportadas para el gen nuclear cyc6 (50M y 75M de NiCl2) no se present el aumento esperado en la expresin de los mismos. As mismo, se observ la presencia de lisis celular a la
concentracin de 75M de NiCl2, lo cual, de acuerdo con lo reportado previamente, podra ser un efecto de una alta concentracin de nquel en el medio de cultivo [4].
Tabla 1. Resultados de la bsqueda de elementos cis en genes del cloroplasto y ncleo de C. reinhardtii (PLACE). Elemento cis Promotor + Citocinina Ni, -Cu Luz, AS 5UTR del gen CuRE GT-1 ARR1 POR rpl16 2 0 10 4 psbC 4 0 3 2 psbD 4 1 2 0 *cyc6 1 0 6 3
*Control del experimento.
Figura 1. RT-PCR de rpl16, psbC y psbD del cloroplasto. M=Marcador de peso molecular (1kb), T0= Sin tratamiento, T50= 50M de NiCl2, +RT= ADNc, -RT= Control negativo (sin RT), ADNg= Control positivo.
Figura 2. RT-PCR de rpl16, psbC y psbD del cloroplasto. M=Marcador de peso molecular (1Kb), T0= Sin tratamiento, T75= 75M de NiCl2, +RT= ADNc, -RT= Control negativo (sin RT), ADNg= Control positivo.
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Tabla 2. Resultados de la bsqueda de elementos cis en genes del cloroplasto de C. reinhardtii (PLACE). Elemento cis Promotor + 5UTR del gen Citocinina Auxina, AS Luz, AS AS GT-1 W-box ARR1 POR ASF-1 atpA 3 1 1 2 1 chlL 2 0 1 3 0 chlN 4 0 1 1 0 chlB 1 0 0 2 2
regulan, con el fin de contribuir al estudio de promotores alternativos en la produccin de PRs. Agradecimientos. Al CONACYT por la beca de maestra No. 32475 otorgada a Melissa Casais, al financiamiento del proyecto de ciencia bsica No. 60465. Al CICY por las facilidades otorgadas para la realizacin de este proyecto. A la Q.B.A. Ileana C. Borges Argez por el apoyo tcnico. Bibliografa.
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Otros elementos cis de inters particular observados fueron aquellos asociados a la respuesta a cido saliclico (AS) (tabla 2), los cuales podran estar asociados al incremento en los niveles de los pigmentos y la tasa fotosinttica [11]. En cuanto a esta observacin, ya se estn realizando los experimentos de RT-PCR semicuantitativa para el anlisis de la expresin de los genes atpA, chlL, chlN y chlB en presencia de AS en el medio de cultivo. Por otra parte, se est llevando a cabo la caracterizacin de la regin P+5UTR de los genes de los cuatro complejos fotosintticos, as como de otros genes del cloroplasto, y de acuerdo a los resultados que se obtengan se elegirn los genes que sern empleados para un anlisis posterior de la expresin gnica, y de sta forma comparar la expresin de estos genes con respecto a la expresin de genes cuyos promotores han sido empleados en la sntesis de PRs en esta microalga. Conclusiones. El anlisis de la expresin de los genes psbC, psbD y rpl16 en presencia de NiCl2 en el medio de cultivo no present el aumento esperado en la expresin gnica, lo que sugiere que para los promotores de estos genes del cloroplasto no existe una relacin entre el inductor y los elementos cis identificados como responsivos a este mismo inductor en promotores del ncleo. Sin embargo, todava se est realizando el anlisis de la expresin de los genes atpA, chlL, chlN y chlB en presencia de AS en el medio de cultivo, para determinar si sus promotores responden a esta sustancia como inductor. Por tanto, an queda por determinar si existe o no una relacin entre los elementos cis previamente identificados y la induccin por AS. Por otro lado, est en proceso la caracterizacin in silico de promotores del cloroplasto, as como el anlisis de expresin de los genes que
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BARROS CLOACALES COMO FUENTE DE NUTRIENTES PARA EL CULTIVO MASIVO DE NANNOCHLOROPSIS OCULATA (DROOP) HIBBERD
Prsico, M. M.*, Beligni, V, Bambill, G., Lucero, M., Saubidet, A.
Universidad Tecnolgica Nacional. Calle Buque Pesquero Dorrego 281, Puerto, Mar del Plata, Argentina, 54-223-4802021, mpersico@mdp.utn.edu.ar Palabras clave: microalgas, Nannochloropsis, barros cloacales, biodiesel Introduccin Los medios de cultivo alternativos a los medios qumicos tradicionales desarrollados para el crecimiento masivo de microalgas estn basados en su mayora en subproductos de industrias, en cuya composicin se encuentra una fuente de carbono, nitrgeno, fsforo y microelementos. En la actualidad son utilizadas harinas de pescado, soja, lombriz de tierra, gallinaza, extractos de excretas de vaca y extractos de macroalgas entre otros. Se han probado tratamientos con ensilado biolgico de pescado que han resultado eficaces como medio de cultivo para Nannochloropsis oculata en condiciones de autotrofia y mixotrofia [1]. En el presente trabajo se propone utilizar una solucin de barros cloacales primarios (SBC) para el cultivo masivo en invernadero de Nannochloropsis oculata, como fuente alternativa de carbono, nitrgeno y fsforo, logrando reducir as los costos operativos y con prcticas amigables con el medio ambiente. Esta microalga marina fue seleccionada para este estudio por su alto contenido de lpidos aptos para biodiesel [2] y su buena adaptacin al cultivo exterior [3]. Materiales y Mtodos Los cultivos de N. oculata se realizaron bajo un invernadero destinado al cultivo masivo de microalgas marinas. Este invernadero sencillo, de estructura metlica, parablico, de 2,60 metros de altura de cumbrera, 6 metros de ancho en una sola nave y 12 metros de longitud construido con tubo de acero galvanizado de 1 pulgada de dimetro, posee sistema de ventilacin cenital superior mediante abertura en laterales opuestos. La cobertura es de polietileno transparente de 200 micrones de espesor para techo y laterales; el piso es de cemento alisado (Figura 1). Los recipientes utilizados en las experiencias fueron tanques redondos de PRFV de 300 litros de capacidad y 1 metro de dimetro. Los cultivos se realizaron en volmenes de 200 litros, por duplicado. El agua de mar fue obtenida del sistema de refrigeracin de una Planta termoelctrica cercana. La toma de agua de mar consiste de una Bomba centrfuga de acero inoxidable de 2 HP y una manguera de impulsin de polietileno de 2 pulgada de dimetro por 328 metros de longitud, utilizndose dos tanques de decantacin de 1200 litros de capacidad cada uno.
Figura 1. Invernadero para el cultivo masivo de microalgas marinas de la Universidad Tecnolgica Nacional, Mar del Plata, Argentina
El sistema de tratamiento del agua consta de dos filtros mecnicos de arena de 0,75 2 m de rea filtrante impulsados por una bomba centrfuga de 0,75 HP y filtros de cartucho de polietileno de 25 y 10 micrones. Se cuenta con un Blower Bomba de aire trifsica de 3 HP, de 120 3 m /h de caudal. El agua es reservada en tanques de 2500 litros dentro del invernadero, donde se prepara a la salinidad deseada (28-30 %o para esta especie) y se esteriliza por cloracin a 20ppm.
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Los barros cloacales utilizados en este trabajo para la preparacin del medio de cultivo a testear fueron obtenidos de la Planta de Pretratamiento de Efluentes cloacales de la ciudad de Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina. Los barros primarios se obtienen a travs de la separacin de slidos mediante cribas de 0,5mm y deshidratacin al ser retenidos por compactacin, generando 20-25 toneladas diarias. El tratamiento control (TC), medio de cultivo de origen inorgnico simplificado y probado ya para el cultivo masivo de esta especie consisti en agua de mar enriquecida con nitrato de sodio, urea y fosfato; el aporte de micronutrientes, a partir de la solucin Clewat 32, a una concentracin de 5g.L-1
Tabla 1. Composicin del Tratamiento Control (TC) Componente Nitrato de sodio (g/l) Fosfato de sodio (g/l) Materia orgnica C.O.T. C.S.A. N.T.K. Nitratos( NO3 ) Fsforo total Urea (g/l) Clewat-32 (g/l) Agua dulce (l) % 100 10 79,2 Tratamiento control/litro agua de mar 0,1 0,01 2,0 9,8 12,2 2,3 0,06 0,66 0,015 0,005
gC/Kg 395,8 gC/Kg 71,3 gN/Kg 19,4 gNO3- 0,05 /kg gP/kg 5,10 15 5 1
Tabla 2. Composicin de los barros primarios de Mar del Plata
Los anlisis fsico-qumicos y metodologa utilizada en la caracterizacin de los barros primarios fueron realizados por Peralta et al [4]. La composicin de los principales nutrientes de los barros cloacales primarios se presenta en la Tabla 2. El medio de cultivo a testear, la solucin de barros cloacales (SBC), se prepar con 200 gramos de barros cloacales primarios por litro de agua dulce; se mezcl bien y
se dej reposar por varias horas, para luego ser filtrada varias veces hasta obtener una solucin clara. La misma fue esterilizada en autoclave. Se determin sobre la base de la composicin la dosis de SBC a emplear, segn el medio control. As se enriqueci con 10 ml de SBC el litro de agua de mar para el cultivo de N. oculata. Las experiencias se realizaron en otoo del 2010. Los cultivos fueron de tipo batch, hasta alcanzar la fase de crecimiento estacionaria (a partir del da 12). La luz utilizada fue natural y la temperatura no controlada, impuestas por las condiciones ambientales dentro del invernadero. La aireacin fue constante; la provisin de dixido de carbono se realiz cuando los valores de pH fueron superiores a 9, ya que el rango ptimo de crecimiento se encuentra entre 7-9 [1]. Se registraron la temperatura ambiental, la del invernadero, la de los cultivos, la intensidad luminosa fuera y dentro del invernadero y el pH. Se tomaron muestras el da de cultivo 12, para realizar los anlisis de clorofila-a y perfiles de cidos grasos, en el tratamiento control y en el de barros cloacales. Todos los das se determin la densidad celular (N clulas.ml-1) de cada uno de las rplicas de los tratamientos, utilizando una cmara de Neubauer de 0,1mm de profundidad. La densidad inicial de los cultivos fue cercana a 20 millones de clulas/ml. Esta densidad inicial fue elegida sobre la base de experiencias previas en invernadero con iguales volmenes de cultivo. El conteo se realiz hasta llegar a la fase estacionaria. El da de cultivo 12 se tomaron muestras de los tanques de cultivo de ambos tratamientos. Las clulas fueron cosechadas mediante floculacin con 20 ppm de policloruro de aluminio y centrifugacin a 2000 rpm por 5 minutos. La clorofila-a y los carotenoides fueron extrados en dos volmenes de acetona en hervor durante 15 minutos. El contenido de ambos pigmentos fue determinado mediante espectrofotometra a 665 nm (clorofila-a) y 450 nm (carotenoides) y calculado mediante ecuaciones tomadas de Jeffrey and Humphrey [5]. Los lpidos celulares fueron extrados mediante el mtodo de Bligh and Dyer [6] y cuantificados mediante gravimetra. Para la obtencin de perfiles de cidos grasos, los aceites fueron transesterificados con 10
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moles en exceso de metanol con respecto a la masa de aceite presente, a 70C durante una hora con agitacin enrgica. La fase del aceite con los cidos grasos esterificados fue separada mediante centrifugacin a 2000 rpm durante 5 minutos y analizada mediante cromatografa gaseosa en un cromatgrafo Perkin Elmer Clarus 480. Resultados y discusin En la Figura 2 se muestra el crecimiento de los cultivos de N. oculata promedio en el tratamiento Control (TC) y en el de barros cloacales (TBC). En ambos tratamientos las densidades celulares mximas promedio alcanzadas fueron similares: 91,5 (= 4,95) y y 95,4 (= 6,93) millones de clulas por mililitro, respectivamente.
densidad celular (millones de 120 100 clulas.ml-1) 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 tiempo (das) TC TBC
los cultivos no recibieron un suministro de dixido de carbono de manera continua. Los registros de temperaturas mximas en el exterior y en el invernadero se muestran en la Figura 3. Las mnimas registradas correspondieron a 8,6 C en el exterior y 10,1 C en el invernadero. Las temperaturas de los cultivos estuvieron comprendidas en el intervalo 13,4-21,6 promedio y fueron similares en todas las rplicas. Los valores mximos de intensidad luminosa en el exterior fueron superiores a 50.000 lux y en el invernadero 39.600 lux (da 2). En general todos los das fueron soleados, con mnimos de 12.800 lux en el exterior y 8.600 lux en el invernadero (da 7, lluvioso), como se observa en la Figura 6.
Intensidad solar (lux) 60000 50000 40000 30000 20000 10000 0 1 3 5 7 9 11 tiempo (das) Intensidad luz exterior Intensidad luz invernadero
Figura 6. Intensidad luminosa del ambiente y dentro del invernadero durante la experiencia Tabla 3. Anlisis cuantitativo de pigmentos (clorofila-a y carotenoides) en los tratamientos control (TC) y barros cloacales (TBC) Pigmentos (mg/g peso seco) Carotenoides
Tamb Tinv
Figura 2. Curvas de crecimiento de Nannochloropsis oculata en el tratamiento control (TC) y en la solucin de barros cloacales (TBC).
30 25 Temperatura C 20 15 10 5 0 1 3 5 7 9 11 13 15 tiempo (das)
Clorofila-a 32,19 30,89
Control (TC) Barros (TBC)
13,92 15,1
Figura 3. Temperaturas mximas ambientales y del invernadero durante el tiempo de cultivo
Las regresiones lineales obtenidas de las curvas de crecimiento de ambos tratamientos muestran pendientes similares, siendo para TC 6,0649 millones -1 -1 de clulas ml da y 5,9559 millones de -1 -1 clulas ml da para TBC. Estos valores fueron superiores a los esperados, teniendo en cuenta que en esta experiencia
La concentracin de clorofila-a y carotenoides en ambos tratamientos no muestra diferencias significativas (Tabla 3). Adems, la visualizacin de las clulas bajo microscopio evidenci que ambos tratamientos rinden clulas normales y homogneas en su tamao. Estos resultados nos permiten afirmar que ambos medios de cultivo lograron suministrar condiciones adecuadas para el desarrollo de N. oculata y que la SBC no constituy una fuente de estrs.
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La composicin de cidos grasos fue similar entre los tratamientos TC y TBC (Tabla 4). Slo se observaron diferencias significativas en los porcentajes de los cidos palmitoleico (16:01), esterico (18:0) y oleico (18:01). La composicin de cidos grasos obtenida se encuentra de acuerdo a lo reportado en la literatura para N. oculata; los factores que afectan la acumulacin de lpidos, principalmente TAG, son la temperatura, intensidad luminosa, pH, disponibilidad de nutrientes (particularmente nitrgeno y fsforo) y edad del cultivo [7]. Esto est de acuerdo con anlisis de muestras de cultivos provenientes de otras estaciones del ao, que mostraron cambios en los porcentajes de los distintos cidos grasos similares a los observados en la literatura. Experiencias similares al presente trabajo realizadas en otras estaciones mostraron un crecimiento de N. oculata mayor para TBC que para TC (datos no mostrados). Dado que N. oculata puede crecer en condiciones mixotrficas, estos resultados sugieren que la SBC puede suministrar diferentes formas de carbono orgnico utilizable que aumentan el crecimiento en determinadas condiciones ambientales.
Tabla 4. Composicin de cidos grasos de N. oculata para tratamientos TC y TBC.
Conclusiones Los resultados obtenidos sugieren que la solucin de barros cloacales puede ser utilizada como fuente de nutrientes alternativa para la produccin de biomasa de Nannochloropsis oculata. Se reducen as los costos operativos del cultivo masivo y se realiza un manejo amigable con el medio ambiente. El uso de un invernadero sencillo, temperatura y luz natural permitieron generar condiciones ambientales adecuadas para el crecimiento de esta especie. Se han llevado a cabo similares experiencias en otras pocas del ao en condiciones ambientales diferentes, que sern analizadas en conjunto con los resultados de este trabajo. Agradecimientos Deseamos agradecer a los estudiantes avanzados de la Tecnicatura en Acuicultura y Procesamiento Pesquero de la UTN Mar del Plata Nahuel Zanazzi, Mariano Moris y Enzo Tranier, por su aporte para el desarrollo de este trabajo. Bibliografa
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Acido graso
11:00 12:00 13:00 14:00 14:01 14:04 15:00 16:00 16:01 17:00 17:01 18:00 18:01 18:02 19:01 18:03 20:05 21:01 Otros
Composicin (% del total) Control Barros (TC) (TBC)

0.25 0.14 0.3 3.04 0.9 1.08 0.35 18.1 12.48 1.3 0.39 6.91 7.36 3.05 0.5 1.03 32.24 5.65 4.93 0.27 0.12 0.33 2.73 0.93 1.13 0.36 18.69 8.69 1.47 0.43 10.86 12.34 2.29 0.38 0.72 28.29 4.55 5.42
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CINTICA DE BIOSORCIN DE FLUORUROS CON RESIDUOS DE GUAYABA (Psidium guajava) Y TAMARINDO (Tamarindus indica) EN SOLUCIONES ACUOSAS
Ruth Alfaro Cuevas Villanueva1*, Selene Anaid Valencia Leal1, Julio Csar Orantes valos2, Ral Corts Martnez3
1
Instituto de Investigaciones Qumico Biolgicas, Facultad de Ingeniera Civil. Facultad de Qumico Farmacobiologa, *Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, Edif. B1, C.U., Morelia, Michoacn, Mxico, +52 (443)3265788 ext. 127, racv11@gmail.com Palabras clave: Biosorcin, Cintica, Fluoruros. llegar a usarse como adsorbente en procesos de remocin de este varios tipos de contaminantes. Dentro de los biosorbentes que se han utilizado para el tratamiento de aguas con altas concentraciones de arsnico y flor se encuentran: el aserrn de pino, lirio acutico, cscaras de naranja, microalgas, semillas de tamarindo, fibra de coco, etc. [4]. El objetivo de este trabajo fue evaluar la cintica de remocin de fluoruros de soluciones acuosas con residuos provenientes de productos agrcolas, con el propsito de habilitar dichos residuos como biosorbentes en operaciones de adsorcin para el tratamiento de aguas con concentraciones elevadas de fluoruros. Metodologa. Para llevar a cabo lo anterior, se colectaron semillas de guayaba y cscaras de tamarindo como residuos provenientes de una industria productora de dulces a base de pulpas de frutas, y se sometieron a un pretratamiento para eliminar impurezas, donde los materiales fueron lavados, secados y tamizados; posteriormente, se seleccion un tamao de partcula apropiado (1mm aprox.) para la realizacin de los experimentos de cintica de sorcin. Adems, estos materiales fueron sometidos a una modificacin con hierro, de acuerdo a un mtodo reportado previamente [5], para determinar el efecto que puede tener la modificacin de su superficie en la velocidad de biosorcin. Para determinar la cintica de biosorcin de fluoruros en residuos de guayaba y tamarindo, se realizaron experimentos de contacto tipo lote con soluciones de fluoruro de sodio (NaF) a 5 mg/L; para lo cual, se tomaron 50 mL de solucin y se agregaron 0.5 g de cada biosorbente, por separado, agitando a dos velocidades diferentes (60 y 100 rpm) para determinar el efecto de este parmetro sobre la cintica de biosorcin. Se tomaron lecturas de fluoruros a diferentes tiempos de contacto hasta que la concentracin no present cambios significativos.
Introduccin. El agua es uno de los compuestos esenciales para la subsistencia de todas las formas de vida; sin embargo, su disponibilidad para el consumo humano es limitada. Aunado a ello, la calidad con que sta es suministrada a la poblacin es un factor de riesgo para la salud. Particularmente, la contaminacin por fluoruros (F-) disueltos en agua subterrnea destinada al consumo humano es un problema epidmico en el mundo, ya que varios pases han reportado la severidad de la ingestin de agua con fluoruros, entre ellos Mxico [1]. La Organizacin Mundial de la Salud (WHO) recomienda una concentracin mxima para los fluoruros, adoptada por la normatividad mexicana, de 1.5 mg/L, aunque el organismo internacional est considerando reducir an ms este lmite, por sus efectos nocivos. Adems, otro factor de riesgo en el consumo de F- son la ingesta y uso de sal fluorada, pastas dentales, algunas bebidas y jugos embotellados y algunas variedades de caf y t [2-3]. El consumo en concentraciones mayores a la norma, causa problemas de fluorosis dental y esqueltica, desarrollando una mayor susceptibilidad a enfermedades renales y cncer, as como afectacin al desarrollo del cerebro humano, reduciendo, entre otros efectos, el coeficiente intelectual (IQ) de nios en edad escolar [1]. Por ello, es importante desarrollar e implementar tecnologas de tratamiento que sean eficientes y econmicamente factibles para su remocin de las aguas. El proceso de biosorcin utilizando materiales de bajo costo obtenidos a partir de desechos agroindustriales puede ser efectivo para combatir este problema. Estos materiales de origen biolgico, llamados biosorbentes, generalmente son biomasas vivas o muertas de microorganismos como bacterias, hongos, algas y levaduras; as como materiales de desecho de productos agrcolas, como cscaras y huesos de frutos que se aprovechan comercialmente y generan una gran cantidad de material que puede
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Este procedimiento se llev a cabo por triplicado para determinar su reproducibilidad. Lo anterior se llev a cabo con el propsito de obtener el tiempo en el cual se alcanza el equilibrio del proceso para ambos biosorbentes. La concentracin de fluoruros removida por los dos tipos de biosorbentes fue calculada a partir de la concentracin inicial de la solucin, utilizando la siguiente ecuacin: . (1) Resultados y discusin. Las figuras 1 y 2 muestran los datos experimentales de cintica de biosorcin de F- en semillas de guayaba y cscaras de tamarindo, respectivamente, a diferentes velocidades de agitacin. Para el caso de las semillas de guayaba (Fig. 1), el tiempo al cual se alcanza el equilibrio de sorcin es de aproximadamente 100 min para 60 rpm de agitacin; sin embargo, se observa que la cintica de biosorcin es ligeramente ms rpida cuando se aumenta la velocidad de agitacin desde 60 hasta 100 rpm; adems, se observa tambin que el porcentaje de remocin de F- aumenta conforme se incrementa la velocidad de agitacin. Esto puede deberse a que una mayor agitacin facilita el contacto apropiado entre los iones F en solucin y los sitios activos de adsorcin en la biomasa y, por lo tanto, se promueve una transferencia efectiva de los iones de adsorbato hacia el adsorbente [6].
45 40 35 - 30 F e d n 25 i c o 20 m e r % 15 10 5 0 0 50 100 Tiempo (min) 150 200
tiempo de contacto. Es decir, se presenta cierto grado de desorcin del adsorbato en este biosorbente. Incluso, para la velocidad de agitacin de 100 rpm, la biosorcin es casi instantnea, pero la desorcin de F- se presenta tambin en los primeros 30 min de contacto. Estos resultados indican que este material puede utilizarse con una buena eficiencia, solamente a velocidades moderadas de agitacin (60 rpm) y nicamente en tiempos de contacto entre 40-60 min.
45 40 35 F e 30 d n i 25 c o m e 20 r e d15 % 10 5 0 0 20 40 60 80 100 120 140 Tiempo (min)
60 rpm 100 rpm
Figura 2. Cintica de biosorcin de fluoruros en cscaras de tamarindo a diferentes velocidades de agitacin.
60 rpm 100 rpm
Figura 1. Cintica de biosorcin de fluoruros en semillas de guayaba a diferentes velocidades de agitacin.
Sin embargo, para el caso de la biosorcin con cscaras de tamarindo (Fig. 2) los resultados no son favorables para la remocin de F-, ya que se observa que el proceso se revierte conforme transcurre el
Los resultados de la cintica de biosorcin en los materiales modificados con hierro se presentan en la figura 3 para las semillas de guayaba y las cscaras de tamarindo. En este caso, las pruebas de biosorcin se realizaron slo para la velocidad de agitacin de 100 rpm. Puede observarse un comportamiento similar respecto a los materiales sin modificar, donde las semillas de guayaba presentan resultados favorables para la biosorcin y desfavorables en el caso de las cscaras de tamarindo. El tiempo al cual se alcanza el equilibrio de biosorcin en las semillas de guayaba es de aproximadamente 30 min, lo cual indica que el proceso es ms rpido en este material modificado. Sin embargo, se puede notar claramente que el porcentaje de remocin en las semillas de guayaba disminuye significativamente, lo cual puede deberse a que los sitios activos para la biosorcin de F- en el biosorbente pueden estar siendo ocupados por los complejos de hierro formados y adsorbidos en la superficie del biosorbente. Esto sugiere que la modificacin con hierro realizada bajo estas condiciones experimentales no mejora la capacidad de biosorcin de F , an cuando se ha reportado que
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los compuestos de hierro tienen gran afinidad por los iones F- en procesos de adsorcin [7]. En la biosorcin con cscaras de tamarindo modificadas con hierro, se presenta una remocin casi instantnea, pero la desorcin de los iones F de este material se presenta tambin de manera rpida (Fig. 3) por lo que no se considera que este material sea favorable para la remocin de fluoruros de soluciones acuosas.
50 45 40
% de remocin de F-
Agradecemos el apoyo financiero brindado por la Coordinacin de la Investigacin Cientfica de la UMSNH, proyecto 26.9-2010; as como la asistencia tcnica de B. VillalobosCastaeda. Bibliografa.
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35 30 25 20 15 10 5 0 0 20 40 Tiempo (min) 60 80 Guayaba Tamarindo
Figura 3. Cintica de biosorcin de fluoruros en semillas de guayaba y cscaras de tamarindo modificadas con hierro.
Se puede considerar que la cintica de biosorcin de fluoruros en solucin acuosa por medio de las semillas de guayaba modificadas y sin modificar es relativamente rpida, ya que se han reportado tiempos de equilibrio ms elevados para distintos materiales adsorbentes los como residuos de xidos de hierro, que presentan un tiempo de equilibrio de 48 h, el hidrxido frrico granular con un tiempo de 24 h, e incluso otros biosorbentes como el lirio acutico (Eichornia crassipes) que presenta un tiempo de equilibrio de 4 h [8-10] Conclusiones. A partir de estos resultados se puede concluir que la cintica de biosorcin en semillas de guayaba modificadas con hierro y sin modificar es relativamente rpida, lo cual puede favorecer su aplicacin como un material biosorbente en la remocin de fluoruros de soluciones acuosas. Sin embargo, las cscaras de tamarindo no son un buen biosorbente para la remocin de estos iones, ya que presentan una desorcin rpida y porcentajes de remocin bajos, an cuando se modific su superficie con hierro. Agradecimientos.
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AUMENTO EN LA ACTIVIDAD DE LACASA MEDIANTE LA ADICIN DE DIVERSOS COMPUESTOS EN Trametes sp. RVAN12
Rojas Verde Ma. Guadalupe1, Garza Garca Andrs Adrin1, Sols Rojas Carlos1, Flores Gonzlez Mara del Socorro 1, Arvalo Nio Katiushka1*
*1
Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL., Pedro de Alba Esq. Manuel L. Barragn, Cd. Universitaria, San Nicols de los Garza, N. L. Tel.: 81-83294000 Ext. 6415 y 7300, e-mail: karevalo01@hotmail.com Palabras clave: Induccin, Lacasa, Trametes sp.
Introduccin. Los basidiomicetos son un grupo muy extenso de microorganismos, dentro de ellos destacan los hongos de pudricin blanca, los cuales son capaces de producir enzimas lignolticas entre ellas la lacasa, lignino peroxidasa y manganeso peroxidasa [1]. De ellas, la que se encuentra presente en la mayora de los hongos es la lacasa Las condiciones de cultivo, temperatura, pH, substrato as como la adicin de compuestos favorecen de forma significativa la produccin de esta enzima. Debido a la alta inespecificidad que presenta la lacasa, lo cual la hace atractiva para diversas aplicaciones en el rea ambiental, es que se continua la bsqueda no solo de hongos sobreproductores si no tambin que respondan de forma positiva a la presencia de compuestos que van desde metales como el cobre y cadmio hasta compuestos armaticos como la xilidina, el alcohol veratrilo, algunos de ellos con estructuras similares a la lignina [2]. Estos compuestos son denominados inductores, aunque el efecto de los mismos puede ser la induccin de la lacasa y/o el incremento en la actividad de la misma. Diversos estudios realizados con especies de Trametes han determinado que estos responden favorablemente al cobre, xilidina, entre otros, sin embargo esta respuesta es dependiente de la cepa en cuestin. Por tal motivo, el objetivo principal del presente trabajo fue determinar el efecto de la presencia de cobre, xilidina y alcohol veratrilo (inductores), a diferentes concentraciones as como la combinacin de los mismos en la actividad enzimtica de lacasa. Metodologa. Qumicos. El ABTS [cido 2,2azino-bi-(3etilenbenztiazolin sulfnico)] fue adquirido en AMRESCO. El resto de los reactivos grado analtico fueron adquiridos en Sigma-Aldrich (St. Louis Missouri).
Aislamiento. El hongo de pudricin blanca para este estudio fue Trametes RVAN12, aislado en Nuevo Len por el Laboratorio 1 del Instituto de Biotecnologa (FCB/UANL). El aislamiento se llevo a cabo cortando un fragmento del cuerpo fructfero y lavado con perxido de hidrgeno al 3% y agua destilada estril. Posterior a ello, se coloc en una placa petri con PDA a 30 C por 7 das. El cultivo se examin diariamente por microscopa para verificar la presencia de fbulas (estructura tpica de la mayora de los basidiomicetos), as como la ausencia de hongos contaminantes y de bacterias. El hongo aislado se resembro de forma rutinaria en PDA, incubado a 30 C por 7 das y almacenado a 4 C para usos posteriores. Inductores. Se utilizaron tres diferentes compuestos. Sulfato de cobre, cuyas concentraciones fueron: 0.1, 0.25, 0.5 y 1.0 mM; Xilidina, 0.5, 1.0, 2.5 y 5.0 mM; Alcohol veratrilo, 0.05, 1.0, 2.5 y 5.0 mM. Se esterilizaron por filtracin utilizando una membrana de nitrocelulosa con un tamao de poro de 45 m. Los inductores a las diferentes concentraciones fueron adicionados a las 24 h de ser inoculados los matraces. Los ensayos se hicieron por triplicado. Produccin de lacasa. Se inocularon con 5 fragmentos de micelio, matraces ErlenMeyer de 250 mL con 150 mL de medio de salvado de trigo, el cual contiene por litro: salvado de trigo, 45 g; Glucosa, 10 g; cloruro de amonio, 2.0 g; fosfato monobsico de potasio, 0.5 g; sulfato de magnesio heptahidratado, 0.5 g; cloruro de calcio, 0.5 g y cloruro de potasio, 0.5 g. El pH se ajusto a 5.0 con HC 1.0 M. El salvado de trigo se adquiri en la central de abastos de Nuevo Len. Determinacin de la actividad enzimtica. El ensayo se llev a cabo por espacio de 20 das. Se tomaron alcuotas de 1.5 mL, se centrifugaron por 20 min a 3500 rpm. La actividad de lacasa en el sobrenadante se determin mediante la oxidacin del ABTS en una mezcla de reaccin que contiene 2 mM de ABTS en
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buffer de acetato de sodio 200 mM a pH 5.0 con 100 L de sobrenadante. La formacin del catin se monitoreo espectrofotomtricamente a 405 nm (405=3.6X104M-1cm-1), en un volumen total de 3 mL. Resultados y discusin. Despus de resiembras peridicas para evitar la contaminacin, se logr obtener un cultivo puro de RVAN12 (Figura 1). Hongo identificado de forma preliminar como Trametes sp. RVAN12.
Con el Alcohol veratrilo tambin se obtuvo un efecto inductor en las cuatro concentraciones empleadas, con un incremento de 1.15 hasta 1.6 veces la actividad de lacasa con respecto al control. A 1.0 mM se alcanz la mayor actividad con 24734.5 U/L (Figura 3).
45000 1 mM 40000
Actividad Enzimtica (U/L)
0.5 mM
0.25 mM
0.1 mM
Control
35000 30000 25000 20000 15000 10000 5000
Figura 1. Micrografa del aislado RVAN12 (100x). Se observa la ausencia de bacterias y hongos contaminantes. (fbulas).
0 0 5 10 Tiempo (Das) 15 20
Diversos reportes, indican que la induccin de la lacasa puede llevarse a cabo utilizando diversos substratos agroindustriales [3]. Estudios previos indican que la harina de soya, el germen y el salvado de trigo presentan un efecto inductor en la sntesis de la lacasa [4,5]. Aunado a ello, el uso de diversos compuestos, tales como el cobre pueden incrementar aun ms esta actividad. Los resultados obtenidos en el presente trabajo, muestran un efecto positivo con el sulfato de cobre en comparacin con el control. El incremento fue de 1.7 hasta 2.2 veces, siendo la mayor actividad a 1 mM con 31,066 U/L (Figura 2). El cmo el cobre incrementa o mejora la actividad de lacasa aun no se ha determinado del todo. Por un lado, se cree que est relacionado con un mecanismo de defensa contra el estrs oxidativo, lo que provoca un incremento en la sntesis de lacasa. Por otro lado, podra presentar un efecto en la sntesis de isoformas lo cual tambin estara relacionado con el incremento en la actividad enzimtica [6]. Estudios realizados han determinado un efecto favorable en la sntesis de la lacasa cuando se utilizan medios limitantes en carbono. Compuestos cuya estructura presente anillos aromticos pueden llegar a incrementar de forma significativa la actividad enzimtica en especies no solo de Trametes [7].
Figura 2. Produccin de lacasa durante 20 das de fermentacin en Salvado de Trigo por RVAN12, con Sulfato de Cobre como inductor.
30000 0.05 mM 25000

1.0 mM
2.5 mM
5.0 mM
Control
20000
15000
10000
5000
0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Tiempo (Das)
Figura 3. Produccin de lacasa durante 20 das de fermentacin en Salvado de Trigo por RVAN12, con Alcohol Veratrilo como inductor.
La xilidina al igual que el sulfato de cobre y el alcohol veratrilo, es uno de los compuestos que ms se han llegado a utilizar para incrementar la actividad de la lacasa. Los resultados obtenidos en el presente
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trabajo indican que dos de las cuatro concentraciones utilizadas lograron un incremento de 1.4 a 1.6 veces la actividad de lacasa con respecto al control (Figura 4), para las concentraciones a 5.0 y 1.0 mM, respectivamente. En el caso de 0.5 y 25 mM el efecto fue negativo. Cuando las concentraciones son elevadas se llega a presentar un efecto txico en el microorganismo y ello mismo afecta la sntesis de lacasa [8].
30000 0.5 mM 25000
1.0 mM
2.5 mM
5.0 mM
Control
20000
actividad dada por el control, presentando un efecto cooperativo cuando los tres inductores estuvieron presentes en el sobrenadante (Figura 5). Aun as, como se ha visto en estudios previos [11], cuando el cobre estuvo presente en un medio a base de harina de soya se presenta una cada abrupta de la actividad a las 48 h de alcanzar el mximo, lo anterior puede deberse a la presencia de proteasas las cuales tambin pueden llegar a verse favorecidas por el cobre presente en el medio de cultivo, sin embargo con el fin de determinar dicha aseveracin sern necesarios estudios ms especficos que permitan determinar por qu se presenta esa cada abrupta en la actividad, algo que tambin fue visto cuando estaban los tres inductores presentes en el medio de cultivo.
120000
Alcohol Veratrilo-Cobre Alcohol Veratrilo-Xilidina Cobre-Xilidina Alcohol Veratrilo-Cobre-Xilidina
15000
100000
Control
10000
80000
5000
60000
0 0 2 4 6 8 10 12 Tiempo (Das) 14 16 18 20
40000
20000
Figura 4. Produccin de lacasa durante 20 das de fermentacin en Salvado de Trigo por RVAN12, con Xilidina como inductor.
0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Tiempo (Das)
A ciertas concentraciones de xilidina se puede llegar a presentar un efecto txico, como lo han determinado diversos autores cuando el medio de cultivo empleado es basal. Sin embargo, cuando los medios de cultivo empleados son complejos, este efecto txico tiende a inhibirse. En base a los resultados obtenidos, se seleccionaron aquellas concentraciones en las cuales se obtuvo un incremento en la actividad de lacasa con respecto al control. Las concentraciones seleccionadas fueron a 1.0 mM para los tres inductores. Las mezclas utilizadas de alcohol veratrilo-cobre alcohol veratrilo-xilidina no presentaron un efecto positivo en la sntesis de lacasa. Sin embargo, la mezcla de cobre-xilidina si present un incremento de 3 veces con respecto al control y de dos veces con respecto a cada uno de los inductores por separado (Figuras 3 y 4). Esto ha sido demostrado por otros investigadores [9,10] previamente. Finalmente, la combinacin alcohol veratrilo-cobrexilidina, present un incremento 5.5 veces la
Figura 5. Produccin de lacasa durante 20 das de fermentacin en Salvado de Trigo por RVAN12, con mezcla de inductores.
Conclusiones. A partir de los resultados obtenidos, se puede concluir que la adicin de los diferentes inductores, cobre, alcohol veratrilo y xilidina en los cultivos de Trametes sp. RVAN12 presentaron un incremento substancial en la actividad de lacasa en relacin al cultivo control, dependiendo de la concentracin empleada. Es necesario probar otros compuestos a diferentes concentraciones para incrementar aun mas dicha actividad de lacasa, as mismo y como se ha determinado por estudios previos, emplear tanto el microorganismo como sus sobrenadantes en el tratamiento de diversos efluentes. Optimizar el medio de cultivo, encontrando las concentraciones ptimas de las mezclas y la caracterizacin de la lacasa producida.
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Agradecimientos. Este proyecto fue llevado a cabo gracias al financiamiento otorgado por PAICYT-UANL No.GCN019-09 y como parte del proyecto de Redes PROMEP No. 103.5/09/1306 Bibliografa.
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CARACTERIZACIN DE UNA LACASA DE Pycnoporus Sanguineus RVAN5

Iracheta Crdenas Magdalena1, Rojas Verde Guadalupe1, Arvalo Nio Katiushka*
1
* Instituto de Biotecnologa, Facultad de Ciencias Biolgicas, UANL. Pedro de Alba Esq. Manuel L. Barragn S/N. Ciudad Universitaria Cd. Universitaria, San Nicols de los Garza, N. L. Tel.: 81-83294000 Ext. 6415 y 7300, email: karevalo01@hotmail.com Palabras clave: Pycnoporus sanguineus, Lacasa, decoloracin
Introduccin. Los hongos de pudricin blanca son un grupo importante de microorganismos productores de enzimas lignoliticas, entre ellas la lacasa, enzima oxido reductora. Esta enzima ha sido estudiada por la capacidad que presenta para degradar una variedad de contaminantes ambientales, entre ellos colorantes. La produccin de lacasas inducibles y constitutivas ha sido reportada en una gran variedad de especies de hongos, considerando a los basidiomicetes como el mayor grupo productor, [9]. En Pycnoporus las investigaciones realizadas sobre la produccin de lacasas es limitada [1,11]. Este gnero es de particular inters por su capacidad de producir lacasas como las enzimas lignoliticas predominantes [4]. La lacasa presenta la ventaja de que los grupos fenoles son los sustratos tpicos de este tipo de enzimas, debido a que poseen bajos potenciales redox (0.5 to 1.0 V). Los sustratos comnmente usados para medir actividad de lacasa son: siringaldazina, 2,6-dimetoxifenol, guaiacol as como el ABTS [cido 2,2azino-bis-(3-etilenbenzotiazolin-6sulfnico)]. Otros sustratos usados para evaluar su potencial son los colorantes recalcitrantes tipo azo. [6]. Los colorantes son utilizados por diversas industrias, principalmente la textil, los efluentes derivados de estas industrias son liberados al ambiente lo cual ocasiona un fuerte impacto ya que este tipo de compuestos son altamente txicos, mutagnicos y teratgenicos. Los tratamientos existentes en la actualidad son mtodos costosos lo que limita su uso. Los objetivos principales del presente trabajo fueron caracterizar la lacasa producida por P. sanguineus RVAN5 (peso molecular, temperatura ptima, pH ptimo, estabilidad), utilizando salvado como substrato. Determinar la presencia de isoenzimas y finalmente, determinar la capacidad decolorativa sobre diversos colorantes sintticos, entre ellos
trifenil metano [Azul de Bromofenol (BB), Verde brillante (BG)], indigoide (ndigo carmn) y antraquinona reactivo [Azul Brillante de Remazol Reactivo (RBBR)]. Metodologa. Qumicos. Los colorantes, sales y agar fueron adquiridos en Sigma-Aldrich. El salvado de trigo se obtuvo del mercado de abastos de San Nicols de los Garza, N. L. Microorganismo. El microorganismo fue aislado previamente por el Laboratorio L1 perteneciente al Instituto de Biotecnologa (FCB/UANL), de zonas boscosas del rea de Nuevo Len. Se conserv en agar dextrosa y papa (PDA), a 4 C. Para los diferentes ensayos la cepa se reactivo en el mismo medio y se incub por 5-7 das a 30 C. Condiciones de cultivo y Produccin de enzimas. La fermentacin se llev a cabo en fermentacin sumergida a 150 rpma 30C durante 10 dias, , utilizando salvado de trigo como substrato. Se inocularon con 5 fragmentos de micelio, matraces Erlen Meyer de 250 mL con de salvado de trigo y se le adicion la solucin de sales en una relacin de 1:5. La solucin de sales contiene por litro: cloruro de amonio, 2.0 g; fosfato monobsico de potasio, 0.5 g; sulfato de magnesio heptahidratado, 0.5 g; cloruro de calcio, 0.5 g y cloruro de potasio, 0.5 g. El pH se ajusto a 5.0 con HCl 1.0 M. Determinacin de actividad enzimtica utilizando ABTS: Se utilizaron 100 L de sobrenadante (SN) en buffer de Acetatos pH 3.0, Fosfatos pH 7.0 y Carbonatos a pH 9.0 con ABTS 1 mM. Se incub a 25- 75 y se calcul la densidad ptica a 405nm C para ABTS. Transformacin de colorantes RBBR, IC, BB y BG: En una placa se microtitulacin se depositaron 100 L de colorante (0.025%) y 10 L del extracto enzimtico (0.03 U) y se incubo a 25, 35, 45, 55, 65, 75 se midi densidad ptica a 595 nm. C, Actividad enzimtica mediante zimogramas: Se
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analizaron 10 L (0.03 U) del extracto en SDS-PAGE en condiciones no reductoras a 4 el gel se lavo C, por 3 min con metanol 40% cido actico 10% y se incubo con ABTS (1mM), 2,6-DMP (5mM), RBBR, IC, BB, BG (2%), respectivamente. Resultados y discusin. Determinacin de pH y temperatura ptimos en la oxidacin de ABTS y transformacin de RBBR e IC. Las enzimas producidas por P sanguineus RVAN5, tienen un pH optimo de 3, con ABTS como sustrato (datos no mostrados). En los ensayos de estabilidad a diferentes temperaturas mostro que mantiene un 100% de activad cuando se incubo a 25, 35, 45 C, por 72 h. A 55 pierde el 50% de actividad en 30 h, C mientras que a 65 y 75 su actividad disminuye C drsticamente en 5 y 1.5 h respectivamente (Fig. 1).
90% de decoloracin para RBBR y el 80% para IC en 7 h mientras que a pH 3 para ambos se observa solo el 20 % de decoloracin, el IC muestra este mismo porcentaje a pH 3 aun sin adicin del extracto de P sanguineus RVAN5. Los datos mostrados resultaron del promedio de tres anlisis independientes, donde se obtuvo una desviacin estndar menos a 0.1.Figuras 1, 2 y 3)
Figura 3. Transformacin de RBBR e IC (0.025%) por SN de P. sanguineus
Figura 1. Estabilidad del SN de P. sanguineus RVAN5 incubado a diferentes temperaturas
Cuando se utilizo RBBR (0.025%) se encontr que a pH 5 se obtiene el mayor porcentaje de decoloracin (Figura 2). Se logra un 80-90% de decoloracin a 45, 55 y 65 en 7 horas de incubacin. A 25 a las C C 48 h y 35 en 9 h. C
Figura 2. Transformacin de RBBR (0.025%) por SN de P. sanguineus RVAN5
El efecto del pH sobre la transformacin de RBBR e IC se observa en la Figura 3. A pH 5 y 7 se obtiene el
El pH ptimo para lacasas fngicas se ha reportado de 4.0 7.0, dependiendo del sustrato usado. En general las lacasas son estables de 30 a 50 y C pierden rpidamente actividad a 60 La estabilidad C. con respecto a la temperatura varia considerablemente dependiendo del organismo, la vida media para una tpica lacasa es 1h a 70 y 10 C min a 80 [13]. C P. cinnabarium produce una lacasa estable de 50 C, a 70 permanece activa una hora y a 80 es C C completamente inactivada [4]. A 50 la lacasa de Botrytis cinnerea tiene una vida C media de pocos minutos, de 2 a 3 h en Lentinula edodes, 2 h en Funalia trogii y 70 h en Trametes sp, mientras que en Ganoderma lucidum es inmediatamente inactivada a 60 [5]. C Con enzimas de Daedalea quercina se obtiene 74% de decoloracin de RBBR (0.01%) en 24 h. Trametes sp con 100U se obtiene el 80% de decoloracin de RBBR (0.02%) en 20 min. La estabilidad a diversas condiciones de almacenamiento, es considerada uno de los factores determinantes para la viabilidad tcnica y econmica en la aplicacin de enzimas para la degradacin de contaminantes en basidiomicetes se ha reportado perdida de actividad bajo diversas condiciones de almacenamiento. En Pleurotus ostreatus se ha reportado la prdida del 20 al 70% de actividad decolorante sobre RBBR en extractos de cultivos almacenados en condiciones de refrigeracin y congelamiento [10]. La estabilidad de las enzimas de P. sanguineus, se
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determino usando ABTS, se encontr que mantiene el 100% de actividad independientemente de las condiciones a las que se almaceno.
Figura 4. Estabilidad del sobrenadante de P. sanguineus a diferentes temperaturas
Actividad enzimtica utilizando ABTS, DMP y colorantes mediante zimogramas: P. sanguineus RVAN5 presenta una enzima que oxida en forma inmediata (varios segundos) ABTS y DMP con una masa molecular de 37 kDa, calculada por la migracin relativa usando los marcadores kaleidoscope (Biorad), (Fig 5. ABTS y DMP carril 2), adems presenta una segunda enzima de 59 kDa que solo presenta actividad despus de varias horas de incubacin y solamente despus de que se ha teido el gel con azul de Coomasie R250, se aprecia el mismo efecto para ABTS y DMP. (zimograma R250/ABTS carril 2,3,4 y R250/DMP carril 3,4,5). En cambio cuando se analiza el patrn enzimtico
usando colorantes (RBBR, IC, AB, VB) solo es posible visualizar el efecto decolorante de la enzima de 37 kDa. (carriles 2.) Se utilizo como control una extracto de P. sanguineus previamente caracterizado que presenta tres enzimas con actividad lacasa de 55, 42 y 39 kDa (Fig 5, R carriles 1). Usualmente las lacasas presentan enzimas que contienen 500-600 aminocidos, conformadas en tres dominios, con una masa molecular de 50-70 kDa, pero se han reportado algunas enzimas con actividad lacasa que no corresponden a esta masa molecular. En Cantharellus cibarius, se han encontrado una lacasa tpica de tres dominios de con una masa de 60 -70 kDa, una lacasa de dos dominios de entre 3040 kDa y una tercer lacasa de 46 kDa que por la masa molecular no corresponde a tres o dos dominios aun considerando modificaciones transduccionales tales como glicosilacin, que puedan incrementar el peso molecular [12]. En Tricholoma giganteum se ha aislado una lacasa de 43 kDa y en Pleurotus eryngii una enzima dimerica de 34 kDa. [15]. En P.sanguineus se han descrito lacasas de 58 a 80 kDa (tabla1). En el NCBI (National Center for Biotechnology Information) se pueden encontrar secuencias de lacasas de P. saguineus de 394 aa que corresponden a una masa molecular menor a las lacasas reportadas, sin embargo estas secuencias no citan referencia.
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Figura 5. Perfil enzimtico del SN de P. sanguineus. Electroforesis en poliacrialmida 12% e incubacin con ABTS o DMP (1mM) y azul de coomassie R-250 y con RBBR, IC, BB y BG (1%), actividad con 7 l de SN (P.s ) (0.021 U). M marcadores de peso molecular Kaeidoscope, Biorad. R extracto de actividad conocida como control.
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Tabla 1. Masa molecular de lacasas producidas por Pycnoporus sanguineus kDa 65 58 69, 68 61 68 70 80, 68 59, 62 Referencia [11] [7] [2] [9] [3] [8] [1] [14]
Una lacasa tipo, llamada azul, contiene cuatro tomos de cobre y muestra un pico de absorcin cerca de 600 nm, algunas lacasas no presentan estas caractersticas, por lo que no son consideradasestrictamente lacasas, y se han denominado amarillas o blancas. Sin embargo, considerando el trmino lacasa: como una enzima capaz de oxidar polifenoles, metoxi-fenoles, diaminas aromticas y un rango de otros componentes tipo, pero excluyendo tirosina, entonces lacasas azules, amarillas y blancas pueden ser definidas como verdaderas lacasas. [6] Conclusiones. P. sanguineus RVAN5 produce principalmente una lacasa de 37 kDa en medio a base de salvado de trigo con agitacin. Permanece estable a diversas condiciones de almacenamiento y a temperatura ambiente conserva el 100% de actividad por 40 das. Es capaz de decolorar colorantes sintticos del tipo trifenil metano, antraquinona e indigoide a pH 5 y 65 C Agradecimientos. Al Promep proyecto clave 103.5/09/1306 y al PAICYT-UANL 2009 GCN019-09. Bibliografa.
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Sociedad Latinoamericana de Biotecnologa Ambiental y Algal http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/
BIODEGRADABILIDAD ANAEROBIA DE LODOS FISICOQUIMICOS PROVENIENTES DE UN TRATAMIENTO DE ELIMINACION DEL COLOR DE UN AGUA TEXTIL
Ana Laura Delgado Villegas 1, Germn Cuevas-Rodrguez1, Gabriela Arroyo-Figueroa2, Arod Bernal-Martnez*
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Departamento de Ingeniera Civil-Ambiental, Divisin de Ingenieras. Universidad de Guanajuato. Departamento de Ingeniera Agroindustrial, Divisin de Ingenieras. Universidad de Guanajuato.*Departamento de Ingeniera Civil-Ambiental, Divisin de Ingenieras. Universidad de Guanajuato. Avenida Jurez # 77. Col. Centro. Guanajuato, Gto. 4731020100 Ext. 2292, arodiberna@quijote.ugto.mx.
Palabras clave: biodegradabilidad anaerobia, lodos fisicoqumicos, textiles
Introduccin. Actualmente a escala mundial hay numerosas investigaciones sobre el manejo, tratamiento y disposicin final de lodos, cosa que no sucede en Mxico, donde por lo general este tipo de residuos son dispuestos sin tratamiento a ros, lagos, tiraderos y escasamente a lagunas de desecacin. Los estudios en el tema son muy escasos a pesar de que este tipo de residuos pueden ser potencialmente riesgosos para el ambiente y la salud pblica [1]. En el tratamiento fisicoqumico de aguas residuales, se emplean reactivos qumicos llamados coagulantes, que sirven para remover las impurezas y generan residuos (lodos), o efluentes probablemente con cierta toxicidad para el ambiente y con una alta DQO. Los lodos fisicoqumicos, son lquidos acuosos con un % de slidos de 0.5 a 10 que contienen una matriz inorgnica, lo que los hace poco reactivos, su composicin est en funcin de los coagulantes y ayudantes de la coagulacin, que se usan durante el proceso de coagulacin floculacin. De acuerdo con [1] el lodo de la almina es un fluido voluminoso, de aspecto gelatinoso, compuesto principalmente por agua (ms del 90 %), partculas inorgnicas coloidales, residuos de reactivos qumicos durante el tratamiento. Considerando que los lodos fisicoqumicos contienen un alto contenido de DQO, esta podra ser consumida por va anaerobia, para producir biogs y reducir la cantidad de lodos generados. Los estudios ms cercanos, fueron los que se realizaron [2-4], en el cual fue evaluado un nuevo mtodo a nivel laboratorio para determinar la produccin de biogs de los lodos activados que contienen hierro. Por lo que el objetivo de este trabajo fue evaluar la biodegradabilidad de los lodos fisicoqumicos (LFQ) en condiciones anaerobias, con la finalidad de proponer un tren de tratamiento para la disposicin de estos lodos. Lo cual permitir obtener dos
beneficios, la generacin de biogs y la disminucin en la cantidad de lodos.

Metodologa.
Para evaluar la biodegradabilidad de los lodos fisicoqumicos provenientes de un proceso de decoloracin. El trabajo se dividi en tres etapas: la primera consisti en realizar las pruebas de degradacin anaerobia con un inoculo adaptado a condiciones anaerobias. En primer lugar con clulas sin lavado y por otro lado, con clulas lavadas. Las pruebas fueron realizadas en botellas de penicilina de 120 mL (volumen til de 100 mL) a 35 Para stas pruebas es necesario que el inoculo C. tenga una fuerte actividad, una fuerte adaptabilidad y una baja actividad endgena. El inoculo que fue utilizado fue uno proveniente de un digestor anaerobio aclimatado, con una concentracin de 2500 mg SSV/L. Cada botella fue burbujeada con nitrgeno durante 10 minutos para colocarlos dentro de condiciones anaerobias, despus fueron selladas para no permitir la entrada de aire al sistema. Los parmetros monitoreados durante estas pruebas fueron DQO (total y soluble), y slidos suspendidos voltiles, cada semana. La cantidad de biogs fue monitoreada cada tres das por desplazamiento de lquido. Cada prueba fue realizada por triplicado. Los diferentes tratamientos corresponden a: a) Lodos sin lavado. Para estas pruebas se manejaron tres diferentes concentraciones de lodos fisicoqumicos 0.5, 1 y 2 g DQO/L, con una concentracin de 2000 mg/L de lodo anaerobio con un volumen final de 100 mL. El control, solamente contena el lodo anaerobio.
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b) Lodos con lavado. En tanto para estas pruebas, los lodos fueron lavados, centrifugados a 6000 rpm durante 30 minutos, con la finalidad de separar el material soluble y los lodos fueron re suspendidos en agua destilada. Cabe mencionar que fue necesario ajustar el pH a 7 del LFQ, antes de montar cada prueba. Los parmetros de control fueron: DQO total y soluble, SSV, pH, los cuales fueron determinados de acuerdo a los Mtodos Normalizados [2], generacin de biogs. Resultados y discusin. Para evaluar la biodegradabilidad del lodo fisicoqumico, en primer lugar fue caracterizado. Este lodo posee las siguientes caractersticas: DQOt de 17.2 g/L, una DQOs de 8.4 g/L, SST de 25.3 g/L, SSV=5.4 g/L, son lodos que contiene un 3.1% de ST y 82.3% de SSV y pH= 2.5. En segundo lugar fue evaluada la biodegradabilidad del lodo fisicoqumico (sin lavado). En la Figura 1, se muestra la produccin de biogs durante 27 das, el mayor volumen de biogs fue para el lodo con la concentracin mayor de DQO (2 g/L) y una produccin de 160 mL. Para los lodos con 1 g de DQO/L se generaron 90 mL de biogs y por ltimo, fue el de menor concentracin (0.5 g/L) con slo 40 mL de biogs. Para la prueba control (lodo anaerobio adaptado), slo fueron generados 30 mL de biogs.
0.5 g/L 1g/L 2 g/L
lodos lavados, esto para hacer que el inoculo (lodo proveniente de un proceso anaerobio), tome los nutrientes de los lodos fisicoqumicos, y de esta manera, la biodegradacin sea debida al lodo fisicoqumico y no al inoculo. Con el lodo con el cual se trabaj fue uno proveniente de un nuevo lote, el cual contiene una DQOt= 8.8 g/L, DQOs= 8.4 g/L, 18.2 g/L de SST, 13.5 g/L de SSV. Los lodos contienen un 1.82 % de ST, 74.2% de STV y un pH=2.56. En la figura 2, se presenta el comportamiento de la DQO total, con el lodo fisicoqumico con los lodos lavados (inoculo), en el cual se puede apreciar una disminucin de la DQO total de un 50% en aproximadamente 32 das.
14 12 10 8 6 4 2 0 0 8 16 24
Dias
DQOT (g/L)
32
Figura 2. Comportamiento de la DQO total en las pruebas de biodegradabilidad durante 32 das.
Biogs acumulado mL
200 160 120 80 40 0 0 4 6 11 13 18 20 25 27

Dias
En la figura 3, se observa que la DQO soluble disminuye conforme pasa el tiempo en el proceso anaerobio. Al tiempo cero la DQO soluble fue de 8 g/L despus de 32 das la concentracin de DQO soluble fueron de 1 g/L.
10 8
DQOs g/L
6 4 2 0 0 8 16 24 Dias 32
Figura 1. Biogs producido durante las pruebas de biodegradabilidad (lodo sin lavado).
Como se puede apreciar el proceso de digestin anaerobia, fue realizado. Los porcentajes de eliminacin de DQO total fueron los siguientes: para el lodo fisicoqumico de 0.5 g/L fueron 58.3% de DQOt y para los lodos fisicoqumicos de 2 g/L la eliminacin de DQOt fue de 35.2%. En la segunda etapa fueron realizadas las pruebas, pero con los
Figura 3. Comportamiento de la DQO soluble en las pruebas de biodegradabilidad de lodos fisicoqumicos (lodos lavados), durante 32 das.
En el proceso se logra eliminar tanto la DQO total en un 50 porciento y la DQO soluble en un 90 porciento.
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La digestin anaerobia logra disminuir concentraciones de DQO en las pruebas.
las
Biogs acumulado mL
La figura 4, se muestra el comportamiento de los slidos en las pruebas de biodegradabilidad anaerobia. Al igual que en las figuras anteriores los slidos tienden a disminuir conforme pasa el tiempo. Para los SST se presenta una eliminacin del 56.3 % y en cuanto a los SSV, estos disminuyen en un 56 %.
SST SSV
a que los microorganismos contenidos en el inoculo, tomen el material orgnico de los lodos fisicoqumicos. Lo cual al parecer realizaron los microorganismos, y por ltimo, se logr que ellos disminuyeran las concentraciones de SSV (fase endgena).
25 20 15 10 5 0 0 4 6 11 13 18 20 Das 25
10
Slidos (g/L)
8 6 4 2 0 0 8 16 24 32 Dias
Figura 5. Biogs acumulado en las pruebas de biodegradabilidad de lodos fisicoqumicos (lodos lavados), durante 32 das.
Figura 4. Comportamiento de los slidos en las pruebas de biodegradabilidad anaerobia de lodos fisicoqumicos (lodos lavados), durante 32 das.
En estas pruebas se realiza un buen abatimiento de los SSV, para las pruebas efectuadas en batch. Los parmetros de control fueron efectuados de manera adecuada, el pH final de las pruebas fueron de 7.04 Cabe mencionar que el pH en el sistema no fue controlado. En figura 5, se presenta la produccin de biogs generado durante las pruebas con lodo lavado. El volumen acumulado de biogs fue menor que en las pruebas anteriormente descritas, esto puede ser debido a que en estas pruebas el lodo fue lavado, lo cual asegura el no tener material solubilizado, en estas pruebas hay menor concentracin de material solubilizado. As el lodo anaerobio constituido de microorganismos hidrolticos, tendrn que solubilizar y tomar este material para disminuir las concentraciones contenidas en los lodos fisicoqumicos. De igual manera la produccin de biogs no fue inhibida, el proceso de biodegradacin anaerobia fue llevado con xito durante 32 das. Estas ltimas pruebas fueron mejores que las primeras, ya que al realizarlas con lodos lavados, asegurando o forzando
Conclusiones. A partir de los resultados obtenidos se alcanzan eficiencias, del 50 % de reduccin de la DQOt, un 50 % de SSV, en el proceso de digestin anaerobia de LFQ. La produccin de biogs fue de 100 mL para la primera prueba y 30 mL para la segunda. En la segunda prueba fue generado menos biogs, aunque se logr la estabilizacin del sistema en 27 das. Agradecimientos. A la Direccin de Apoyo a la Investigacin y al Posgrado, por el financiamiento otorgado.
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REMOCIN DE CROMO HEXAVALENTE POR LA CSCARA DE CAMARN (Palaemon serratus)

Juan F. Crdenas Gonzlez 1, Nathalie Hernndez Arvizu1 Rigoberto Martnez Prez1, Vctor Manuel Martnez Jurez 2, Ismael Acosta Rodrguez 1.
Laboratorio de Micologa Experimental. CIEP. Facultad de Ciencias Qumicas. UASLP, 2 Institucin rea Acadmica de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Instituto de Ciencias Agropecuarias. Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo. Av. Dr. Manuel Nava No. 6, Zona Universitaria, 78320 San Luis Potos, S.L.P. (e-mail: iacosta@uaslp.mx) Palabras clave: Cromo (VI), Difenilcarbazida, Remocin, Cscara de limn, Biorremediacin Introduccin. Debido a las actividades industriales, como la produccin de acero, minera, cemento y curtido de pieles, ciertas zonas de la Repblica Mexicana, tienen altos niveles de cromo en suelo y agua [1]. El uso de lodos de aguas negras o de fertilizantes con diferentes concentraciones del catin, en algunas prcticas agronmicas, son otros de los factores contribuyentes a la contaminacin ambiental por el metal. Pese a que este metal es un elemento esencial para hombres y animales, niveles elevados del mismo (15 g en agua de ros y 0.10 mg /L en agua potable) resultan txicos en los seres vivos. Particularmente, el Cr (VI) tiene efectos carcinognicos y mutagnicos en humanos, animales y bacterias [1]. En las aguas residuales, el Cr (VI), se encuentra en solucin como CrO42- [2], puede removrsele por reduccin, por precipitacin qumica, por adsorcin y por intercambio inico [3]. Actualmente, el proceso ms utilizado es la adicin de un agente reductor que convierta el Cr (VI) a Cr (III) y posteriormente se le precipita con soluciones bsicas a Cr(OH)3 [3]. Recientemente, se ha analizado el uso de metodologas alternativas, como la remocin y/o reduccin de Cr (VI) a Cr (III) por bacterias, algas, levaduras y hongos [3]. Por otro lado, tambin se han utilizado materiales de desecho, como residuos industriales agrcolas o urbanos para la eliminacin y/o recuperacin de metales pesados de efluentes industriales contaminados, entre los que se encuentran: residuos de manzana, corteza de rbol, cscara de avellana, cscara de naranja y tamarindo [4] con resultados altamente satisfactorios. Por lo anterior, es de gran inters analizar otros materiales de desecho y por lo tanto econmicos, para tratar de eliminar este metal de aguas y suelos contaminados, as como la biorremediacin de los mismos. Por lo que el objetivo de este trabajo fue estudiar la remocin de Cromo (VI) por la Cscara de Camarn (Palaemon serratus). Metodologa. Se utiliz la biomasa celular de cscara de camarn obtenida de diferentes restaurantes de mariscos de la ciudad de San Luis Potos, S.L.P., Mxico, en el perodo julio-agosto de 2009. sta, se lav con agua tridesionizada durante 72 h, y se calent a ebullicin 60 min., para remover el polvo y los componentes orgnicos adheridos, se volvi a lavar con agua tridesionizada 24 h, se sec (60oC, 24 h) en estufa bacteriolgica, se moli hasta la obtencin de un polvo fino, y se guard hasta su uso, en frascos de vidrio mbar a temperatura ambiente. Soluciones de Cr (VI) Se trabaj con 100 mL de una solucin de 50 mg/L de concentracin de Cr (VI) obtenida por dilucin de una solucin patrn de 71.86 mg/L preparada en agua tridesionizada a partir de K2CrO4. Se ajust el pH de la dilucin a analizar con H2SO4 1 M y/o NaOH 1 M, antes de adicionarla a la biomasa celular. Estudios de bioadsorcin 1 g de biomasa celular se mezcl con 200 mL de una solucin de 50 mg/L de concentracin del metal (pH= 1.0 y 2.0 +/-0.2 y 28oC) y se incubaron con agitacin constante (100 rpm) durante 24 h. A diferentes tiempos se tomaron alcuotas de 5 mL cada una, se centrifugaron a 3000 rpm (5 min), y al sobrenadante respectivo se le determin la concentracin de Cr (VI), utilizando el mtodo colorimtrico de la difenilcarbazida [5]. Ensayos de biorremediacin A matraces Erlenmeyer de 250 mL conteniendo 5 g de la cscara de camarn, se les agreg 20 g de tierra contaminada con aproximadamente 297 mg Cr (VI)/g de tierra, obtenida de una tina de lavado de una cromadora de Celaya, Gto. Mxico, y se les aadi agua tridesionizada a un volumen final de 100 o mL. La mezcla se incub a 28 C con agitacin
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constante (100 rpm), y a diferentes intervalos de tiempo se le determin la concentracin de Cromo (VI) en el sobrenadante. Resultados y discusin. Se analiz el efecto del tiempo y temperatura de incubacin, el pH, la concentracin inicial del metal y de la biomasa, sobre la bioadsorcin de Cr (VI) por la biomasa de cscara de camarn. En relacin con el tiempo de incubacin y el pH inicial, se encontr que la mayor bioadsorcin ocurre a las 24 horas, a un pH de 1, a 28 con una remocin total del metal del C 90% (Figura 1). La velocidad de captura est controlada por la velocidad a la cual el adsorbato es transportado del exterior al interior de las partculas del bioadsorbente [2]. En la literatura 6, se reporta un tiempo de incubacin de 24 h cuando se trabaj con C. neoformans y Helmintosporium sp, y 5 das para A. niger [7], este ltimo con 10 g/L de biomasa. La mayor remocin se evidenci a pH 1.0 +/-0.2, pues a las 24 h se remueve el 90% del metal.
la superficie del adsorbente, impidiendo la bioadsorcin de los iones Cr (VI) cargados negativamente, lo cual disminuye la adsorcin del metal a valores de pH altos. Se ha reportado [15] que si bien el Cr (VI) se consigue eliminar por cepas autctonas de hongos filamentosos, la mayor parte del catin puede ser reducido a Cr (III). Por otra parte, la ms alta remocin se observ a 60 o y 70 C, (Figura 2), pues a las 4 horas se remueve el 100% de Cr (VI) en solucin; resultados que son coincidentes con el 98% de remocin a 58 y 180 C o min., para la semilla de tamarindo [8], y 45 C y 24 h, ocurre la adsorcin del mismo metal para A. niger, [16] y para la remocin de Cadmio (II) con olote de maz (40 y 5 das) [17], pero difieren de los 35oC y 24 h reportados para R. arrhizus [18]. El incremento en la temperatura, aumenta tanto la velocidad, como la capacidad de remocin de Cromo (VI), dejando aun ms expuestos, grupos funcionales encargados de la remocin del metal, tales como: grupos carboxilo, amino, hidroxilo por mencionar algunos, adems de que disminuye el tiempo de contacto requerido para la completa remocin del metal [3].
Figura 1.- Efecto del pH y tiempo de incubacin sobre la bioadsorcin de Cr (VI) en solucin. 50 mg/L/1 g de biomasa, 28 con agitacin constante (100 rpm), pH 1.0, C 2.0, 3.0 y 4.0 (+/- 0.2). % remocin de Cr (VI) a: pH 1.0 , pH 2.0 , pH 3.0 y pH 4.0 .
Al respecto, se ha reportado un pH ptimo de 2.0 para la remocin de Cr (VI) por las semillas de tamarindo [8], la corteza de eucalipto [9]; bagazo y pulpa de caa de azcar [10], fibras de coco [11] y lana [12], y un pH de 3.0 para la cscara de tamarindo tratada con cido oxlico [13]. El Cr (VI) se 222encuentra como HCr04 Cr207 , Cr04 , Cr4013 , 2Cr3010 [14]. Una baja en el pH causa la protonacin de la superficie del adsorbente, lo que induce una fuerte atraccin por los iones Cr (VI) de la solucin cargados negativamente, por lo que la bioadsorcin aumenta al aumentar la acidez de la solucin. Pero, cuando el pH aumenta, se incrementa la concentracin de iones OH-, induciendo cambios en
Figura 2.- Efecto de la temperatura de incubacin sobre la bioadsorcin de Cr (VI) en solucin. 50 mg/L/1 g de biomasa, pH 1.0, con agitacin constante (100 rpm). % de remocin de Cr (VI): 40 , 50 , 60 , 70 . C C C C
Tambin, a bajas concentraciones del metal (100, 200 y 300 mg/L), la biomasa estudiada, mostr las mejores respuestas de remocin, adsorbiendo el 100% a las 4 y 6 horas, respectivamente, mientras que a 500 mg/L del metal se remueve el 100% de Cr (VI) hasta las 10 horas de incubacin (Figura 3). Algunos autores [13, 19, 20], sostienen que la cantidad de metal eliminado por las biomasas de diferentes microorganismos, tales como M. hiemalis, R. nigricans y la cscara de tamarindo tratada con HCl y cido oxlico, respectivamente, aumenta en
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proporcin directa con el incremento de la concentracin del in metlico en solucin. De nuevo se encuentran discrepancias con los resultados de este trabajo, debido a que la biomasa utilizada en el estudio mostr la mayor capacidad de remocin a bajas concentraciones (100, 200 y 300 mg/L).
mg/L a 60 pH 1.0, con agitacin constante (100 rpm). % C, de remocin de Cr (VI) a 1 g , 2 g , 3 g .
Figura 5.- Efecto de 5 y 10 g de biomasa de camarn sobre la remocin de 1 g/L de Cr (VI), 60 pH 1.0, con agitacin C, constante (100 rpm). % de remocin de Cr (VI) a 5 g y 10 g Figura 3.- Efecto de la concentracin de Cr (VI) en solucin. 1 g de biomasa de camarn a 60 pH 1.0, con C, agitacin constante (100 rpm). % de remocin de Cr (VI): 100 mg/L , 200 mg/L , 300 mg/L , 400 mg/L , 500 mg/L+.
En la Figura 4 se muestra que al aumentar la cantidad de biomasa, se incrementa la remocin de Cr (VI). 3 g de biomasa remueven el 50% del metal a los 10 minutos de incubacin, pues hay ms sitios de bioadsorcin del metal. Hay reportes similares para M. hiemalis y R. nigricans [19, 20]. Es importante mencionar que si se utilizan 5 y 10 g de biomasa, la cantidad de Cr (VI) removido aumenta considerablemente (Figura 5), pues a los 60 y 30 minutos se elimina 1 g/L. Estos resultados son ms eficientes a los reportados con M. hiemalis (80 mg/L de Cr (VI)/10 g biomasa, pH de 2.0/4 horas, [19] y a los de A. niger (50 mg/L de Cr (VI)/20 g biomasa/pH 2.0 30 horas [7].
Adems, la presencia de otros metales en solucin como Cadmio, Plomo, Mercurio y Cobre (50 mg/L), no interfieren de manera significativa con la remocin de Cromo (VI) en solucin (Figura 6), lo cual puede deberse al pH ptimo (1.0-2.0) de remocin del metal reportado. Adems, coincide con muchos reportes de la literatura [6, 18, 19, 20].
Figura 6.- Efecto de diferentes metales pesados (50 mg/L) sobre la bioadsorcin de Cr (VI) 50 mg/L/1g, 60 pH 1.0, C, con agitacin constante (100 rpm). % de remocin de Cr (VI) con Cd , Pb , Hg , Cu , Control *.
Figura 4.- Efecto de la concentracin de biomasa de camarn sobre la bioadsorcin de Cr (VI) en solucin. 50
Tambin se realiz un ensayo de biorremediacin de Cromo (VI) con tierra contaminada con aproximadamente 297 mg Cr (VI)/g de tierra, obtenida de una tina de lavado de una cromadora de Celaya, Gto., observando que a los 4 das de incubacin la remocin es muy eficiente (80%, Figura 7). En comparacin con otras biomasas estudiadas, como carbn activado de grano de maz (35.2 mg de del metal/g de biomasa/4 das), [21], Aspergillus sp (195 g/semana), [22], levadura de
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pan (40 mg/L/6 horas), [23], y por Staphylococcus saprophyticus (5.16 mg/L/3 horas), [24].
Figura 7.- Biorremediacin de Cr (VI) a partir de tierra contaminada con 297 mg de Cr (VI)/g de tierra. (5 g de biomasa, 20 g de tierra, 28 100 rpm). C,
Conclusiones. La biomasa analizada remueve eficientemente Cr (VI) en solucin, y puede utilizarse para eliminarlo de aguas residuales industriales, por lo que su aplicacin presenta un gran potencial para la purificacin de stas, puesto que la biomasa es natural, fcil de obtener en grandes cantidades, su manejo es sencillo, es econmica y se aprovecha este material que se considera de desecho. Bibliografa.
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Efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de hidrocarburos de petrleo presentes en un suelo minero contaminado
Cisneros de la Cueva Sergio 1,*, Gamero Inda Eduardo1, Medrano Roldn Hiram 1, Soto Cruz Nicols Oscar 1 Rojas Contreras Juan Antonio, Torres Bustillos Luis Gilberto2 y Lpez Miranda Javier 1.
1. Instituto Tecnolgico de Durango. Blvd. Felipe Pescador 1630 Ote. COL. Nueva Vizcaya. Cp 34080, Durango, Dgo. 2. UPIBI-IPN. Av. Acueducto s/n Colonia Barrio La Laguna Ticoman. CP 07340 Mxico, DF .Tel (55)57296000 Autor de correspondencia*. efs_76@yahoo.com.mx
Palabras clave: Biorremediacin, Biodisponibilidad, Biodegradacin, Surfactante, Hidrocarburos de petrleo.1. Introduccin. Entre los principales contaminantes del ambiente se encuentran los hidrocarburos totales de petrleo (HTP), tales como los aceites lubricantes, diesel y los lodos orgnicos slidos. La mayora de la contaminacin del suelo es el resultado de derrames accidentales, fugas en los contenedores obsoletos, as como durante la limpieza de vehculos y maquinaria pesada (LaGrega et al., 2001). La remediacin del suelo contaminado se puede realizar ex situ o in situ, dependiendo de las condiciones en que se encuentre el sitio contaminado (Mulligan et al., 2001). Por razones econmicas, en los ltimos aos se han venido empleando tecnologas biolgicas de remediacin las cuales utilizan microorganismos para poder llevar a cabo la remocin de los hidrocarburos de petrleo. Para favorecer estos procesos se han utilizado surfactantes que son compuestos anfifilicos que reducen la tensin superficial e interfacial por acumulacin en la interface de los fluidos incrementando la solubilidad y movilidad de componentes orgnicos hidrofbicos o insolubles (Ron and Rosenberg, 2002, Mulligan, 2004) .El Tween 80 tambin conocido como polisorbato 80 es uno de los principales surfactantes que se han venido empleando debido a sus propiedades de baja solubilidad y a que tiende a reducir la tensin superficial de los componentes orgnicos hidrofbicos, aumentando su biodisponibilidad para los microorganismos biodegradadores del petrleo. En el presente trabajo se determin el efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de hidrocarburos de petrleo presentes en un suelo minero contaminado.
2. Metodologa. 2.1. Suelo Contaminado. Se utiliz suelo contaminado proveniente de la Unidad Minera San Antonio, ubicada en San Dimas Tayoltita, Durango. La clasificacin del suelo se realiz utilizando el Sistema Unificado de Clasificacin de Suelos (SUCS), el cual se basa en la diferenciacin por tamao de las partculas del suelo (Badillo et al., 1984). En la Tabla 1 se muestran las caractersticas fsicas y qumicas de la muestra de suelo empleada en el presente trabajo. El suelo se tamiz, eligindose un tamao de partcula de 2.36mm. El material se almacen a 4C, con el propsito de estabilizar su composicin y evitar la atenuacin natural. De las muestras, las cuales contenan 36616 mg/Kg de HTP. Los anlisis preliminares mostraron que el hidrocarburo contaminante presenta un espectro cromatogrficos parecido al del diesel (Figura 1).
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Muestra de suelo contaminado
Diesel STD.
Aceite quemado
Gasolina STD.
Figura 1. Cromatogramas muestra de suelo contaminado, Diesel
STD, Aceite quemado y Gasolina STD.
Tabla 1. Caractersticas fsicas y qumicas de la muestra de suelo proveniente de la unidad minera San Antonio.
Tabla 1. Caractersticas del suelo contaminado. Parmetro Resultado Espacio poroso 44.08 % Textura Densidad Humedad Arenoso arcilloso 3 2.496 g/cm 3.041 %
2.2. Conteo de microorganismos. El contenido de microorganismos presentes en el suelo se determin de la siguiente manera: se disolvi un gramo de suelo en 9 mL de solucin mineral de Makula y Finnerty (1981). A partir de esta mezcla se hicieron diluciones hasta 1X 10-7. De las diluciones 10-5 a 10-7 se tomaron alcuotas de 0.1 mL y se sembraron en cajas de Petri, conteniendo cada una 25 mL de agar para mtodos estandar. Las placas se incubaron por 2 das a 25C y las colonias producidas se contaron y reportaron como UFC/g de suelo. Los conteos microbianos se realizaron en la muestra inicial y cada 15 das a lo largo de los 60 das que duro el proceso. 2.3. Efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de hidrocarburos de petrleo. Para determinar el efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de los hidrocarburos de petrleo se utiliz la solucin mineral de Makula y Finnerty (1981) y hexadecano, para bioestimular el crecimiento de la microflora nativa del suelo. Para ello se pesaron 3 Kg de suelo y se colocaron en columnas de 40 cm de altura y 10 cm de dimetro interno (figura 2). El suelo se mezcl con diferentes concentraciones de Tween 80 (0, 0.5, 1, -1 1.5 y 2%). En todas las columnas se agregaron de hexadecano 308 mgKg de suelo. Mediante 3 un diseo experimental 2 factorial. En todas las columnas se incorporo 1 vvm de aire hmedo, a fin de mantener un contenido de humedad en el suelo de 70%. Durante los 60 das que duro el proceso.
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Figura. 2. Representacin esquemtica del experimento usando columnas con aireacin.
3. Resultados y discusin. 3.1. Determinacin del efecto de la concentracin de Tween 80 sobre la biodegradacin de hidrocarburos totales de petrleo. En la figura 3 se muestran los resultados de los de los tratamientos a diferentes concentraciones de Tween 80. Como se observa, la degradacin mxima que se obtuvo durante el experimento fue de 32%, despus de 60 das de proceso, para tratamientos que contenan una concentracin de 0.5%.de Tween 80. El valor de degradacin ms bajo fue de 3% para los tratamientos que contenan Tween 80 al 2%. Como se observa (figura 3), el suelo sin adicin de Tween 80 mostr valores de degradacin de 26.5%, los cuales son comparables con los obtenidos con 0.5% de degradacin.
Figura 3. Efecto de la concentracin de Tween 80 sobre los diferentes tratamientos.
Este comportamiento se debe a que el Tween 80 a concentraciones altas inhibe el crecimiento microbiano y con ello la biodegradacin de hidrocarburos de petrleo, ocasionando que el xito de la aplicacin de su utilizacin en la biodegradacin de hidrocarburos dependa de la
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tolerancia que las bacterias hayan desarrollado a la concentracin del surfactante. Esta tolerancia se debe principalmente a dos factores: Alteracin de las membranas celulares por interaccin con componentes lipdicos y a la reaccin de las molculas de surfactantes con protenas esenciales para el funcionamiento de la clula (Rouse et al. 1994). Estos resultados son comparables con los reportados por Willumsen (1998). Estos autores demostraron el efecto de la tolerancia de surfactante en bacterias para la degradacin de fluoranteno, utilizando un surfactante no inico (Triton X-100), en concentraciones de 5%, las cuales estuvieron por encima de la concentracin micelar critica, lo cual inhibi el crecimiento microbiano y redujo significativamente la biodegradacin del contaminante( Willumsen ,1998) En la figura 4 se muestra el comportamiento cintico del crecimiento microbiano expresado como UFC/g de suelo, para los tratamientos probados. Esta grfica muestra que todos los 5 8 valores estn en un intervalo de 10 -10 , y que, para los tratamientos con concentraciones altas de Tween 80 (2%) produjeron la inhibicin del crecimiento microbiano. Esto se debe a que a altas concentraciones de surfactante tienden a solubilizar la bicapa lipidica de la membrana celular, ocasionando su disolucin y consecuentemente la muerte celular (Helenius et al., 1975). Los tratamientos con bajas concentraciones de surfactante (0 y 0.5% de Tween 80), mostraron un incremento en el crecimiento microbiano, atribuible principalmente a dos factores: (1) Los surfactantes a bajas concentraciones pueden disminuir la tensin superficial e interfacial de los compuestos orgnicos hidrofbicos incrementando el rea de contacto y mejorando el transporte de masa de los contaminantes. (2) Las bajas concentraciones de surfactante tienden a provocar la solubilizacin de los contaminantes, aumentando su biodisponibilidad para los microorganismos (Helenius et al., 1975). Este comportamiento cintico se observ en el trabajo realizado por Torres et al., 2004, en el cual se evalu el efecto de seis surfactantes sobre la biodegradacin de HTP provenientes de diesel (Span 20, Span 60, Span 80, Tween 20 y Tween 80), demostrando que a concentraciones de surfactante mayores de la CMC los valores de la UFC/ g de suelo disminuyen notablemente, debido a que, valores de surfactante por arriba de la CMC provocan el rompimiento celular y por consecuencia la inhibicin microbiana.
Figura 4. Comportamiento cintico del crecimiento microbiano de los microorganismos presentes en suelo minero contaminado con hidrocarburos de petrleo, sometidos al proceso de biorremediacin por bioestimulacin, con la utilizacin de concentraciones diferentes de Tween 80.
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4. Conclusiones. En el presente trabajo se demostr que la concentracin de Tween 80 influye decisivamente en el proceso de biodegradacin de hidrocarburos de petrleo, durante la biorremediacin de suelos mineros contaminados. Tambin se demostr que es posible obtener una mejor remediacin para concentraciones de Tween 80, comprendidas entre 0 y 0.5% y que, concentraciones de Tween 80 mayores o iguales al 2%, inhiben el crecimiento de las bacterias responsables de la remediacin.
5. Agradecimientos. Queremos agradecer al FOMIX-DURANGO por el apoyo econmico otorgado para la realizacin de la presente investigacin, a travs del proyecto FOMIX DGO-2008- y al consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACYT), por la beca otorgada al primer autor y a Goldcorp Mines Corporation ya por el apoyo otorgado para la realizacin del presente trabajo
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Facultad de Qumico Farmacobiologa. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo, 2 Instituto de Investigaciones Qumico Biolgicas. Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Edif. B1, C.U., Morelia, Michoacn, Mxico, * Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo. Tzintzuntzan 173 Col. Matamoros, Morelia, Michoacn, Mxico, +52 (443)3142809 ext. 213, raulcortesmtz@gmail.com Palabras clave: biosorcin, aserrn de pino, metales pesados Introduccin. La contaminacin del agua, aire y suelo por metales pesados es uno de los problemas ambientales ms severos, adems de ser muy difcil de resolver. La contaminacin por metales pesados existe en corrientes acuticas de desecho de varias industrias, tales como las de galvanoplastia, la industria minera y las teneras, entre otras. Algunos de los metales asociados con estas actividades son: arsnico, cadmio, cobre, cromo, hierro, mercurio, nquel, plomo y zinc. Estos metales no son biodegradables y tienden a acumularse en los organismos vivos causndoles enfermedades y desrdenes en su funcionamiento. Por estas razones son considerados como contaminantes prioritarios. Estos contaminantes son descargados al medio ambiente alcanzando concentraciones por encima de los valores permitidos por la legislacin [1], siendo los recursos hdricos los que mayor riesgo presentan por su alta velocidad de propagacin. Actualmente existen varios mtodos para la eliminacin de metales pesados de corrientes acuticas de desecho; sin embargo, muchos de ellos pueden ser costosos o complicados de implementar, especialmente en disoluciones con bajas concentraciones de metales. Adems, pueden generarse lodos txicos y difciles de tratar, por lo que es necesario encontrar tecnologas que permitan remover metales de una manera eficiente y menos costosa. Por lo tanto, existe la necesidad de establecer estrategias de tratamiento que sean simples, consistentes y que involucren recursos locales [2]. Una alternativa que en los ltimos aos ha probado ser altamente efectiva para la remocin de metales pesados de aguas residuales es la biosorcin, que consiste en la remocin de los mismos por biomasa (viva o muerta) a travs de fenmenos fsicos como adsorcin, intercambio inico o procesos metablicos, y puede llegar a ser un mtodo preciso y selectivo que requiere de pocos minutos de tratamiento. Adems, este proceso resulta ser altamente efectivo para la eliminacin de especies metlicas. Recientemente, biosorbentes de bajo costo han sido preparados a partir de desechos generados de la industria maderera, la pesca y la agricultura, entre los que se encuentran: la cscara de cacahuate, el rastrojo del maz, la cscara de arroz, aserrn, bagazo de caa, residuos de caf, desechos de naranja, levaduras, etc. Estos biomateriales han sido reconocidos como una alternativa potencial a las tecnologas convencionales para la remocin de metales de aguas residuales. Por lo tanto, es factible recuperar y remover metales mediante el uso de estos desechos, as como tambin brindar un valor agregado a los diferentes desechos que, generalmente, son tratados como residuos slidos y que presentan tambin graves problemticas para su disposicin final. Por ello, la investigacin de este tipo de tecnologas es novedosa y su desarrollo puede ser particularmente competitivo en el tratamiento de efluentes industriales, ya que permiten la recuperacin de los metales y la reutilizacin de la biomasa y el agua. El uso de biomasa muerta tiene ventajas sobre la utilizacin de biomasa viva, ya que no es necesario adicionar nutrientes, el adsorbente resulta inmune a la toxicidad o a condiciones de operacin adversas, los procesos no estn gobernados por limitaciones biolgicas, la recuperacin de metales es ms fcil y la biomasa puede comportarse como un intercambiador inico [3]. Los materiales lignocelulsicos constituyen una fuente de materia prima importante para la obtencin de productos de amplia utilizacin en la agricultura. Dentro de estos materiales se encuentran el aserrn y la corteza que resultan de desechos del aprovechamiento de la madera. El objetivo de este trabajo es evaluar las capacidades de retencin de plomo y cadmio utilizando el aserrn de pino como biosorbente mediante el estudio de la cintica y parmetros de equilibrio de cada sistema metal-biosorbente en particular; as como determinar la influencia de la
Ral Corts Martnez 1*, Aura Roxana Hidalgo Vzquez 2, Hctor Eduardo Martnez Flores 1, Consuelo de Jess Corts Penagos,
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REMOCIN DE PLOMO Y CADMIO DE SOLUCIONES ACUOSAS POR BIOSORCIN EN ASERRN DE PINO
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temperatura sobre las capacidades de biosorcin de cadmio y plomo. Metodologa. El aserrn de pino se obtuvo como residuo de un aserradero, el cual posteriormente fue lavado varias veces con agua desionizada, secado en una estufa a 60 y tamizado para obtener un tamao de C partcula de aproximadamente 1mm. Este material se almacen en un desecador hasta ser utilizado en experimentos de biosorcin de cadmio y plomo en solucin acuosa. Para determinar la cintica de biosorcin de cadmio y plomo, se realizaron experimentos de contacto tipo lote con aserrn de pino y soluciones acuosas de plomo y cadmio, para lo cual se pesaron 0.5 g de aserrn y se colocaron en tubos de centrfuga. Se agregaron 5 mL de una solucin de Pb(NO3)2 0.001N o de Cd(NO3)2.4H2O 0.001N, y se colocaron los tubos en un termobao con agitacin a temperatura ambiente (25 C) agitando a diferentes tiempos de contacto (entre 5 y 180 min). Al trmino de cada tiempo, la solucin se filtr y el sobrenadante se coloc en viales para posteriormente hacer los anlisis de plomo y cadmio por espectroscopa de absorcin atmica (AAS). Se utiliz el mismo procedimiento para determinar la cintica de biosorcin de plomo y cadmio en aserrn a 35 y 50 C. Los experimentos se realizaron por triplicado para determinar su reproducibilidad. Las cantidades de cadmio y plomo adsorbidos en el aserrn fueron calculadas a partir de la concentracin inicial de la solucin, utilizando la siguiente ecuacin: . (1) Para obtener las isotermas de biosorcin de plomo y cadmio, se hicieron experimentos de contacto tipo lote con aserrn de pino y soluciones acuosas de nitrato de plomo y cadmio a diferentes concentraciones (desde 0.001N hasta 0.5N) y a diferentes temperaturas (25, 35 y 50 C) para determinar el efecto de este parmetro sobre las capacidades mximas de biosorcin del aserrn para estos metales. Para ello, se pusieron en contacto 0.05 g de aserrn en tubos de centrifuga con 5 mL de las soluciones de plomo y cadmio, por separado. Los tubos fueron agitados en el termobao ajustndose a la temperatura deseada y agitando durante el tiempo de equilibrio determinado en los experimentos de cintica, para cada sistema metal-biosorbente en particular. Al trmino del tiempo de contacto la
solucin se filtr y el sobrenadante se coloc en viales para su posterior anlisis de cadmio o plomo por AAS. Los experimentos se realizaron por triplicado al igual que los casos anteriores. Resultados y discusin. Las figuras 1 y 2 muestran los resultados de la biosorcin de cadmio y plomo en aserrn de pino, respectivamente, a diferentes temperaturas como una funcin del tiempo de contacto. Se puede observar que, en el caso del cadmio (Fig. 1), la remocin ocurre casi de manera inmediata al contacto de la solucin con el biosorbente, ya que ms del 80% de la remocin se lleva a cabo en los primeros 2 min de contacto. Se observa tambin que el tiempo de equilibrio se alcanza aproximadamente a los 9 min para los tres valores de temperatura bajo estudio, lo cual indica que este parmetro no tiene influencia significativa en la velocidad de biosorcin de cadmio sobre aserrn de pino; sin embargo, puede notarse que la remocin de cadmio disminuye conforme aumenta la temperatura, lo cual sugiere que un aumento en esta variable puede disminuir tambin la capacidad de biosorcin de cadmio del aserrn de pino.
Figura 1. Biosorcin de cadmio en aserrn de pino en funcin del tiempo de contacto a diferentes temperaturas (25, 35 y 50 C).
En el caso de la cintica de biosorcin de plomo (Fig. 2), se puede observar un comportamiento similar al anterior, donde la remocin de plomo es rpida al inicio del proceso, alcanzando tambin remociones de ms del 80% pero solamente para las temperaturas de 35 y 50 ya que para 25 la C, C remocin de Pb es menos rpida en estos primeros minutos. No obstante, el tiempo al cual se alcanza el equilibrio de remocin de Pb es aproximadamente de 9 min para las tres temperaturas. Sin embargo, la remocin de Pb a 35 es ligeramente mayor que a C
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25 y 50 lo cual indica que puede existir una C, mayor biosorcin de plomo conforme aumenta la temperatura, caso contrario a lo que sucede con la biosorcin de cadmio.
constante de velocidad aumenta de 3.4 mg/g.min a 140 mg/g.min en el mismo rango de temperatura [6]. Un comportamiento similar se observa para la biosorcin de plomo en aserrn en este estudio. Respecto a las isotermas de biosorcin de plomo y cadmio a diferentes temperaturas, stas se presentan en las figuras 3 y 4, respectivamente. Para la biosorcin de plomo (Fig. 3) se observa una mayor remocin a una temperatura de 25 con un valor C aproximado de qe= 200.3 mg Pb/g aserrn, seguido de la isoterma de aserrn a 35 con valor de qe= C 192.8 mg Pb/g aserrn y a una temperatura de 50 C se present la menor capacidad de adsorcin con un valor de qe= 179.28 mg Pb/g aserrn. De acuerdo a estos resultados, al aumentar la temperatura de 25 a 50 hay una ligera disminucin en la capacidad de C adsorcin.
Figura 2. Biosorcin de plomo en aserrn de pino en funcin del tiempo de contacto a diferentes temperaturas (25, 35 y 50 C).
En general, la remocin de iones metlicos por biosorcin depende de los mecanismos qumicos que involucran las interacciones de los iones metlicos con los grupos activos especficos asociados con la pared celular del biosorbente. Por lo tanto, la cintica de biosorcin indica la evolucin de cada una de las etapas a travs de las cuales sta se lleva a cabo, e indica tambin cul de estas etapas es la que controla el proceso de sorcin [3-4]. Con base en lo anterior, y observando los tiempos en los cuales se lleva a cabo el procesos de sorcin, se puede considerar que la remocin de cadmio y plomo mediante el aserrn de pino es un proceso cuya velocidad es controlada nicamente por las interacciones de los iones metlicos con los grupos funcionales del aserrn, ya que los tiempos en los cuales se alcanza el equilibrio (aproximadamente 9 min) para cada metal son significativamente cortos en comparacin con otros adsorbentes en los cuales la difusin juega un papel fundamental en la cintica de sorcin, como el caso de las zeolitas y el carbn activado, entre otros. Se ha reportado que para la sorcin de plomo con arena cubierta de xido de manganeso, indican que la capacidad de sorcin aumenta de 1.62 a 1.83 mg/g cuando la temperatura se eleva de 21 a 45 C, mientras que la velocidad de sorcin varia de 0.201 a 0.275 g/mg.min en el mismo rango de la temperatura [5]. Se ha reportado tambin que la capacidad mxima de sorcin de plomo con helechos, como biosorbente, se mantiene constante cuando la temperatura aumenta de 15 a 45 mientras que la C,
Figura 3. Capacidad de biosorcin de Pb (qe) con aserrn como una funcin de la concentracin al equilibrio en la solucin (Ce), a diferentes temperaturas.
En la figura 4 se observan los resultados obtenidos para el sistema cadmio-aserrn a diferentes temperaturas. A 25 se presenta una mayor C capacidad de adsorcin con un valor de qe= 221.45 mg Cd/g aserrn; mientras que a 35 la capacidad C, de adsorcin prcticamente no cambia, observndose un valor de qe= 221.85 mg Cd/g aserrn y, finalmente, a una temperatura de 50 se C presenta una menor capacidad de adsorcin con un valor de qe= 210.64 mg Cd/g aserrn. De acuerdo a los resultados obtenidos en este trabajo, se observa que la capacidad mxima del aserrn para adsorber cadmio es mayor a la presentada para el plomo.
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disminuyendo ligeramente su eficiencia conforme aumenta este parmetro. Agradecimientos. A la Coordinacin de la Investigacin Cientfica de la UMSNH por el apoyo financiero; as como la asistencia tcnica de B. VillalobosCastaeda. Bibliografa.
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Figura 4. Capacidad de biosorcin de Cd (qe) con aserrn como una funcin de la concentracin al equilibrio en la solucin (Ce), a diferentes temperaturas.
Otros materiales han sido estudiados para la biosorcin de Cd y Pb. En la tabla 1 se observan las capacidades de biosorcin de algunos biosorbentes.
Tabla 1. Capacidades mximas de sorcin (mg/g) para diferentes tipos de adsorbentes. Capacidad de Biosorbente Referencia sorcin Cd Pb Tallos de uva 9.18 --[7] Cscara de naranja 23 51.8 [8-9] Cscara de tamarindo 23 51 [8] Hueso de aceituna --6 [10] Quitosn 5.93 16.36 [11] Carbon activado en 3.37 26.94 [12] polvo Carbon activado 3.37 16.58 [12] granular
--- no reportado
Se puede observar que las capacidades reportadas en este trabajo para la biosorcin de cadmio y plomo con aserrn de pino, a las diferentes temperaturas, son mayores comparadas con los otros tipos de biosorbentes, incluyendo el carbn activado, por lo que se considera que este material tiene el potencial para ser utilizado en este tipo de procesos de remocin. Conclusiones. Se puede concluir que el aserrn de pino tiene un gran potencial para ser utilizado como biosorbente en la remocin de cadmio y plomo presentes en aguas contaminadas, ya que presenta altas capacidades de biosorcin comparado con otros adsorbentes usados para el mismo propsito. Adems, se observa tambin que la temperatura juega un papel importante en el proceso de biosorcin,
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SELECTION OF AMMONIUM OXIDIZING BACTERIA BY CONTINUOUS SYSTEM WITH HIGH DILUTION RATE (WASH OUT)
Naiana Gabiatti 1, Hugo Moreira Soares 2, Willibaldo Schmidell *
1*
Department of Chemical Engineering and Food Engineering, Federal University of Santa Catarina, Campus Universitrio, Trindade, CEP 88040-900, P.O Box 476, Florianpolis, SC, Brazil. Phone: +55-48-331-9448 E-mail: wschmidell@enq.ufsc.br Key words: nitrogen removal, Ammonia oxidizing bacteria (AOB), wash out.
Introduction New concepts for biological nitrogen removal in wastewater are being tested and studied. Novel process are based on the physiology of ammonia oxidizing bacteria (AOB), mainly Nitrosomonas sp. Nitrogen removal via nitrite has been recognized as economically beneficial, mainly because it significantly reduces the demand for carbon and oxygen during the process. However, the difficulty in utilizing this alternative lies in retaining the ammonia oxidizing bacteria (AOB) while eliminating the nitrite oxidizing bacteria (NOB) [1]. An interesting way to do this is to use a continuous process without sludge retention, washing out nitrite oxidizing bacteria (NOB) while retaining ammonia oxidizing bacteria (AOB), at elevated temperatures and introducing an ammonium rich medium. The objective of this work was to propose a way of enrich the interested microorganisms starting from a heterogeneous inoculum and, verify its removal efficiency of a high ammonium nitrogen concentrations media, compared to the original inoculum without any enrichment. Materials and Methods Sludge from an activated sludge system of the domestic WWTP of Florianpolis city in South Brazil, was used to seed the reactors. Two different reactors start-up strategies were compared: one with sludge wash out (Test 1) and one without sludge wash out (Test 2). Experiments were performed in two laboratory-scale fermentors (New Brunswick, model MF 14) with heating (temperature was maintained at 35C) and pH control system, that used NaOH and/or HCl to maintain pH around 7,5. The concentration of dissolved oxygen in the liquid remained always around the saturation and was controlled by the aeration rate (3 L/min) and stirring (400rpm). The net volume was 3 L.
In Test 1, the reactor was inoculated with 7,7 gTSS/L of sludge and during the start-up period it was operated as a CSTR using a dilution rate of 0.04h-1, which promoted the sludge wash-out, reaching 1,2 gTSS/L after 48 hours of operation. During wash-out, daily TSS determinations permitted the calculation of microorganisms specific growth rate () according to the biomass mass balance described in Equation 1 [2]. X = Xi. e ( -D) t Equation 1
where : Xi = initial cells concentration; X = cells concentration at t time; D = Dilution rate; = specific growth rate of cells. In Test 2, reactor was inoculated with 450 mL of the same sludge; the biomass remained retained in the reactor while it was gradually filled with the medium. After this first period, both reactors were operated as sequencing batch reactors (SBR). Kinetics assays to follow ammonium consumption during the operation cycle were carried out. Reactors were fed with synthetic medium [3] containing high ammonium concentration (500 mg/L). Ammonium (N-NH4+) was analyzed by the Nessler colorimetric method [4]. Nitrite (N-NO2-) was determined colorimetrically by HACH Company Nitriver kits and nitrate (N-NO3 ) determinations were carried out through the salicylic acid method [5]. Total suspended solids (TSS) were assayed using a modified method of the Standard Methods for Examination of Water and Wastewater [6, 7]. The measurement of oxygen specific consumption rate (QO2) was performed by respirometric technique with a dissolved oxygen transmitter Mettler Toledo (Impro 6800). This measurement was performed on each bioreactor, interrupting aeration and folowin the drop in the dissolved oxygen concentration [8].
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For biomass characterization during the experiments it had been used the molecular biology technique of fluorescence hybridization in-situ (FISH), performed as described previously [9]. After collecting the sample directly from the reactor its fixation was performed in paraformaldehyde [10]. Results and Discussion Reactor of Test 1 was submitted to a sludge washout during its start-up in a continuous process with a dilution rate high enough to promote the sludge wash out. Figure 1 shows the concentration of nitrogen compounds (NH4 +, NO2-and NO3-) and cell concentration (TSS) as a function of washing time.
sedimentation and subsequent supernatant removal was proceeded, prioritizing the biomass retention. The second cycle started at the moment the reactor volume was completed by the medium with the same ammonium concentration used in the wash out (500 mg N-NH4/L). Figure 2 shows the monitoring data of nitrogen forms concentrations during the five cycles performed.
Figure 2: Data from nitrogen forms concentrations present in the reactor along five kinetic cycles performed after sludge wash out.
Figure 1: TSS, N-NH4, N-NO2 and N-NO3 concentrations during the first step (wash out) of RI.
The experimental data were adjusted by an exponential equation (see Eq. 1) and it was found a maximum specific growth rate (max) for microorganisms of 0,0016 h-1, this is almost 20 times -1 less than the value already predicted (max=0,03 h ), to AOB, at 35C [11]. Although this indicates that cells selection process could be more effective, it must be remembered that the literature value refers to pure cultures, which is not the case with this work. Despite the oscillation that appears in nitrite and nitrate concentrations, both levels remained low while the increase in ammonia concentration showed almost a linear behavior, reaching 434 mg N-NH4/L. At the end of the wash out process, the reactor was operated as a SBR and immediately started the first kinetic cycle, keeping the other operational conditions. After 65 hours, the ammonium concentration reached levels close to zero, ending the first cycle. In the sequence, a period of sludge
It can be seen, in the first cycle, an initial period of low activity. Only after 40 hours, the ammonium consumption actually began, indicating an adaptation to the conditions imposed to the microorganisms. Moreover, it can be noticed that the washing process was effective in AOB selection, since the formation of nitrate along the cycles was practically null. Table 1 shows the total nitrogen removal obtained at the end of each cycle, the average cell concentration (Xm), and the specific ammonium consumption rate (QNH4), which is determined through linear regression of the ammonium concentration curve.
Table 1. Total removal percentage, average cell concentration and ammonium specific consumption rate for each of the five cycles. Removal (%) 19,1 27,5 29,5 21 20 Xm QNH4 (g TSS/L) (g N-NH4/g TSS.d) 0,920,12 0,24 0,780,09 0,81 0,79 0,99 0,65 1,57 0,78 1,75
Cycle 1 Cycle 2 Cycle 3 Cycle 4 Cycle 5
Due to the slow growth of this type of microorganism the cells concentration remains virtually constant
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throughout each cycle. As total time of each cycle tend to shorten, the removal efficiency and specific ammonium consumption rate also increased, reaching 1,75 gN-NH4/gTSS.d. Other authors [12], working with N. eutropha cultivation in the presence of NO (50ppm), achieved 51% nitrogen removal, in this case oxidation of ammonium occurred at a specific rate of approximately 2,32 g N-NH4 / gTSS.d It is believed that the AOB denitrification capacity is a way to protect cells against the toxic effects due to the accumulation of nitrite, particularly when faced with the greater availability of substrate [13]. Nitrogen removal in these cases is assigned to the intermediates accumulation, such as NO and NO2, which could induce a secondary metabolism in AOB [14]. Excess substrate allows obtaining high consumer rates, therefore, the generation of large amounts of these intermediates. Figure 3 shows the monitoring data of nitrogen forms concentrations during the five cycles performed during Test 2.
Table 2. Total removal percentage, average cell concentration and ammonium specific consumption rate for each of the five cycles. Removal (%) 4,0 4,0 13,4 Xm QNH4 (g TSS/L) (g N-NH4/g TSS.d) 0,960,05 0,28 0,89 0,55 0,72 0,64 0,9 0,89 0,95 1,12
Cycle 1 Cycle 2 Cycle 3 Cycle 4 Cycle 5
Figure 4 shows the values of specific respiration rate (QO2) during the first cycle of each test.
Figure 4: Oxygen consumption rates with the time during the first cycles of Test 1 and Test 2.
Figure 3: Data from nitrogen forms concentration present in the reactor along five kinetic cycles performed without previous sludge wash out.
Just 80 hours after the begining of the first cycle there was decrease in ammonium concentration, attributed to microbial activity. In this experiment, the biomass adaptation phenomenon takes place in a much slower way than the previous one, which can also be observed in the variables presented in Table 2, which has very low removal percentages, including zero, and specific ammonium consumption rates reached only 1,12 g NNH4/gTSS.d in the last cycle, even with cell concentrations slightly above those observed in Test 1. This emphasizes the importance of wash out procedure during the biomass adaptation period.
The specific respiration rate starts with very low values of hard determination in the initial instants and after few hours is replaced by a significant increase. Although the growth trend is observed in both tests its clear that the biomass activity in Test 1 is better. During FISH technique performance, four different probes were used in the samples hybridization: EUBmix, NSO, NIT and NEU. After washing out a significant increase in biomass homogeneity was detected, as well as the increase in metabolically active bacteria. The abundance of AOB increases after the wash out procedure and after some cycles. At the end of the fifth cycle, in Test 1, they represent about 90% of the microbial population. The NOB are rarely found in the final cycles, even in Test 2, without sludge wash out.
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Conclusions The wash out procedure shown to be an efficient technique to the selection of desired microorganisms and their subsequent adaptation to the imposed conditions (temperature, high ammonium concentrations). In short time it was possible to establish a process for ammonium oxidation and concomitant elimination, using a not adapted inoculum. Thus, it is established a consistent procedure for start up a nitrification process. Aknowledgements This research was supported by a grant from the National council for development and research (CNPq/Brazil).
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INFLUENCIA DEL NITRGENO SOBRE LA MIGRACIN DE ATRAZINA EN SUELO

1
Universidad Politcnica del Estado de Morelos, 2Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua Boulevard Cuauhnhuac #566, Col. Lomas del Texcal, Jiutepec, Morelos. CP 62550 / Tels/fax (777) 229 35 33 aguillen@upemor.edu.mx Area: ambiental Palabras clave: mineralizacin, inhibicin, nitrgeno Introduccin. La atrazina es un herbicida ampliamente usado para eliminar hierba de hoja ancha en cultivos de maz, sorgo, caa de azcar, frijol, soya, pia, pltano, entre otros1. Debido a sus caractersticas fisicoqumicas, movilidad y persistencia en el ambiente, a nivel mundial se ha considerado un contaminante orgnico persistente, prohibiendo y restringiendo su uso en pases de la Unin Europea, Canad y Estados Unidos. Sin embargo, en pases de Asia, frica y Latinoamrica, el uso de atrazina no est restringido ni prohibido2. Se ha determinado que la atrazina es fuente de nitrgeno para los microorganismos, por lo que la presencia de fertilizantes nitrogenados en el suelo, inhibe la mineralizacin de este herbicida, proceso importante en la disipacin y migracin de este herbicida en el ambiente3. Hasta este momento, slo se ha determinado que la inhibicin del proceso de biodegradacin de atrazina se debe a la presencia de fuentes de nitrgeno alterna, sin tener en cuenta el grado de concentracin de nitrgeno4. Por tanto, el presente trabajo, tiene como objetivo principal evaluar la influencia de diferentes concentraciones de nitrgeno, incluyendo las similares e inferiores a la recomendacin de aplicacin en campo que van desde 120 a 250 kg de N ha-1, sobre la migracin de atrazina en suelos de zonas tropicales de Mxico. Metodologa. La metodologa const de las siguientes fases: 1) Seleccin y muestreo del rea de estudio, 2) Caracterizacin de la dinmica de atrazina en las zonas de estudio (biodegradacin, adsorcin y dispersin), 3) Caracterizacin del proceso de mineralizacin de atrazina en diferentes tipos de suelo, con diferentes concentraciones de nitrgeno disponible, 4) Caracterizacin del proceso de mineralizacin de atrazina en suelo con diferentes concentraciones de fertilizacin con nitrgeno y 5) caracterizacin del proceso de mineralizacin de atrazina en medio lquido en presencia de diferentes concentraciones de nitrgeno. Esta ltima fase permiti evaluar la inhibicin del proceso de biodegradacin sin incluir procesos paralelos que se llevan a cabo en el suelo, tales como la dispersin y adsorcin. Resultados y discusin. En la mineralizacin de atrazina, en diferentes muestras de suelo, se obtuvo una relacin inversa entre la concentracin de nitrgeno disponible en el suelo, y la cintica y grado de mineralizacin de la atrazina, variando la vida media y el porcentaje de mineralizacin de 0.99 d y 99 % respectivamente para concentraciones de 24 mg kg -1 hasta ms de 18 d y 6 % para concentraciones de 2000 mg kg-1. Con el anlisis de estos resultados se seleccion la muestra con menor contenido de nitrgeno y vida media de la atrazina ms corta, para la realizacin de los experimentos de inhibicin de la mineralizacin en suelo y medio lquido con diferentes grados de fertilizacin nitrogenada, en ellos la tendencia fue similar a los experimentos en diferentes muestras de suelo. Al aumentar el grado de fertilizacin se favoreci el proceso de inhibicin de la mineralizacin de atrazina. Aunque en concentraciones similares a las recomendadas de -1 aplicacin de nitrgeno en campo (133 mg kg ) se alcanz una mineralizacin de atrazina del 74 %, con una vida media de 2.40.1 das. Dando una inhibicin parcial de la mineralizacin de atrazina en suelo, con lo que se puede establecer que a concentraciones de fertilizacin similares e inferiores a las recomendaciones de aplicacin en campo la inhibicin de la mineralizacin de atrazina es parcial (10 al 30 %). No obstante, si existe una sobrefertilizacin en el suelo, es decir que la concentracin de nitrgeno disponible sobrepase 350 mg kg-1, el proceso de inhibicin es mayor, limitando el grado de mineralizacin desde un 8 % hasta una inhibicin total de la mineralizacin (figura 1).
Rosa Anglica Guilln Garcs, 2Anne M. Hansen y 2Manfred van Afferden
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50 ] Atrazina [mg L
N-KNO3 [mg kg -1] 0
-1
N-KNO3
atrazina [mg kg-1]
0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 5 10 t [d] 15
40 30 20 10 0
[mg L-1] 1000 100 10 5 0
33 66 133* 266 2 000 3 650
20
25
10 t [d]
15
20
25
Figura 1. Mineralizacin de atrazina en suelo procedente de Crdenas, Tabasco (muestra 1) en presencia de diferentes concentraciones de nitrgeno como fertilizante; contenido de agua 50 % de la capacidad de campo; [atrazina]suelo=1.08 mg kg-1y temperatura= 35 C, *Concentracin de nitrgeno similar a la concentracin aplicada en campo
Figura 2. Mineralizacin de atrazina en medio lquido en presencia de diferentes concentraciones de nitrgeno como fertilizante; [atrazina]medio lquido= 50 mg L-1 y temperatura= 35 C
Con respecto a los resultados obtenidos en medio lquido, se aislaron y caracterizaron los microorganismos contenidos en el suelo, identificando siete especies (Micrococcus sp., Ochrobactrum anthropi, Yersinia pseudotuberculosis, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus capitis, Providence rustigianii, y Acinetobacter iwoffii), tres de ellas con capacidad de degradar atrazina De ellas nicamente tres crecieron en cultivo con atrazina como nica fuente de nitrgeno y slo de una se ha reportado en la literatura con capacidad de degradacin (Ochrobactrum anthropi). En estos experimentos tambin se observ que la inhibicin de la mineralizacin de atrazina en suelo fue menor que en medio lquido, lo anterior debido probablemente a la complejidad de la matriz de suelo que impide una menor disponibilidad del nitrgeno responsable de la inhibicin de la mineralizacin de la atrazina, lo que puede explicar el porqu la atrazina es ms persistente en agua que en suelo (Figura 2).
Conclusiones. En consideracin a que la mineralizacin de atrazina en suelo es el principal mecanismo de disipacin de este herbicida en el ambiente, la inhibicin total de este proceso permitir la migracin de atrazina en suelos principalmente sobrefertilizados, contaminado cuerpos de agua y favoreciendo la persistencia de este herbicida en el ambiente. Mientras que en suelos con concentraciones de nitrgeno similares a las recomendaciones de aplicacin, la inhibicin es parcial disminuyendo los riesgos de contaminacin por infiltracin. Agradecimientos. A la Universidad Nacional Autnoma de Mxico (UNAM), al Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (CONACyT) y al Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua (IMTA). Bibliografa.
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DETERMINACION DE SUBPRODUCTOS DE LA BIOTRANSFORMACION DEL FENANTRENO POR MUCOR ROUXII IM-80

Rosalina Magalln Snchez, Ma. Teresa Rodrguez Casasola, Elvira Ros Leal, Carlos Cruz Mondragn y Fernando J. Esparza Garca
Departamento de Biotecnologa y Bioingeniera, CINVESTAV-IPN, Av. Instituto Politcnico Nacional # 2508, CP. 07600, Mxico D.F. Telfono 57473800 ext. 4330 e-mail fesparza@cinvestav.mx Palabras clave: biotransformacin, fenantreno, mucor rouxii
Introduccin. Los microorganismos que metabolizan algn hidrocarburo producen una o varias enzimas con las que degradan o rompen algn enlace molecular de los compuestos hidrocarbonados y los utilizan como fuente de carbono [1]. En particular, en la degradacin de hidrocarburos aromticos que es catalizada por oxigenasas, se incluyen adems cadenas de transferencia de electrones, eliminacin de hidrgenos e inserciones de oxigeno (lo cual puede inducir a la apertura de los anillos aromticos) [2]. Con el fin de poder eliminar todos los posibles agentes contaminantes en un entorno dado, es necesario saber que microorganismo o conjunto de microorganismos son capaces de descomponer las molculas contaminantes en submolculas que no resulten dainas para el ambiente. Reconocer que componentes de una molcula pueden reaccionar con algn microorganismo resultara muy til para poder atacar un compuesto contaminante hasta subdividirlo en varias submolculas inocuas [3]. El fenantreno es un hidrocarburo aromtico tricclico, ampliamente distribuido en el ambiente como resultado de procesos pirlicos. No obstante que ste no es mutagnico ni carcinognico, se ha visto que es txico para los organismos acuticos; como se trata de un hidrocarburo aromtico de cadena corta, ste se emplea frecuentemente como un sustrato modelo para desarrollar estudios sobre el metabolismo de hidrocarburos aromticos policclicos carcinognicos. Es de consideracin mencionar que la biodegradacin de los contaminantes comienza con la participacin de enzimas extracelulares, pero que se requiere la presencia de la clula completa y de sus vas metablicas para completarse. Los hidrocarburos aromticos policclicos (HAPs) y otros contaminantes txicos se han transformado exitosamente por xido-reductasas e hidrolasas que se han aislado de hongos, bacterias y clulas vegetales en ensayos realizados bajo condiciones de laboratorio [4]. Los sistemas conjugados II-electrn de los HAPs son los responsables de su estabilidad qumica. Dependiendo de su carcter aromtico, los HAPs absorben luz ultravioleta y producen un espectro fluorescente caracterstico. Son solubles en muchos disolventes orgnicos, pero muy poco solubles en agua. Desde el punto de vista qumico, los HAPs reaccionan por sustitucin del hidrogeno o por adicin cuando se produce una saturacin. La mayora de los HAPs se fotooxidan, una reaccin importante para eliminarlos de la atmosfera [5]. El fenantreno es el ms simple de los HAPs que tiene las regiones K y baha y por eso es empleado como modelo para estudiar los HAPs. La regin de baha se forma entre los carbonos 4 y 5, mientras que la regin K se forma entre los carbones 9 y 10. La importancia de estas regiones estriba en el hecho de que el ataque microbiolgico es especfico en alguna de ellas dependiendo del microorganismo y la enzima producida. La degradacin del fenantreno por hongos acta en la regin K mediante la utilizacin de una monoxigenasa y una hidrolasa epxida [6]. El objetivo del presente trabajo es demostrar la capacidad de Mucor rouxii IM-80 para biotransformar a la molcula del fenantreno por anlisis cromatogrfico en TLC y HPLC.
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Metodologa. El ensayo se realizo en matraces erlenmeyer con medio YPG, extracto de levadura (Bioxon) 3 g/L, glucosa (J.T. Baker) 20 g/L, peptona de carne (Bioxon) 10 g/L, agua destilada 1 L, pH 50.2 [7] se inocularon con 7.5x107 esporas/ ml de Mucor rouxii IM-80, incubndose por 24 horas a 30 C y 150 RPM. A las 24 h de crecimiento se adicion fenantreno (Sigma-Aldrich) disuelto en metanol HPLC (J.T. Baker) a una concentracin 50 ppm, se incubaron los matraces por 72 y 96 horas. Al trmino de esta incubacin se separ el micelio por filtracin, se efectu la extraccin del hidrocarburo en el micelio en Soxhlet (extraccin S-L) y en el caldo de cultivo con 50 ml de cloroformo (J.T. Baker) (extraccin L-L) [8]. Los extractos obtenidos del caldo de cultivo se concentraron por evaporacin y se aforaron a 3 ml con metanol HPLC (J.T. Baker). El extracto se analiz por TLC en placa de gel de slice 60 F254 (Merck) utilizando como fase mvil acetonitrilo (J.T. Baker). El anlisis por HPLC se llevo a cabo con detector UV-DAD a 254nm, se utilizo una columna Hypersil Green PAH de 250x4.6mm, fase mvil acetonitrilo-agua 78:23.
Figura 1. Diagrama de Extraccin L-L.
Resultados. Al analizar los extractos por TLC con luz UV a 254 nm, en la figura 2 se pueden observar la separacin de tres subproductos que presentan diferentes Rf con relacin al fenantreno. En el anlisis por cromatografa en HPLC se encontraron cuatro picos de diferente tiempo de retencin con respecto al fenantreno correspondiendo estos a los subproductos de la biotransformacin por Mucor rouxii IM-80, como se observa en la figura 3.
Figura 2. Cromatograma TLC, A: Extracto de 72 h de incubacin, B: Extracto de 96 h de incubacin, C: Estndar de fenantreno, A1: subproducto de la biotransformacin a 72 h de incubacin (Rf=0.0357), A2: subproducto de la biotransformacin a 72 h de incubacin (Rf=0.1696), A3: subproducto de la biotransformacin a 72 h de incubacin (Rf=0.6548), B1: subproducto de la biotransformacin a 96 h de incubacin (Rf=0.0387), B2: subproducto de la biotransformacin a 96 h de incubacin (Rf=0.1577), B3: subproducto de la biotransformacin a 96 h de incubacin (Rf=0.6577), F: fenantreno estndar (Rf=0.7886).
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Figura 3. Cromatograma HPLC, A: Extracto de 96 h de incubacin, B: Extracto de 72 h de incubacin, C: Estndar de fenantreno, F: Fenantreno,1234: subproductos de biotransformacin .
Conclusiones. Por TLC y HPLC se separan subproductos diferentes al fenantreno, comprobando que el hongo Mucor rouxii IM-80 es capaz de biotransformar al fenantreno en las condiciones utilizadas. El primer subproducto conforme aumenta la incubacin disminuye su concentracin y simultneamente se presenta la aparicin de otros subproductos los cuales a su vez aumentan su concentracin conforme aumenta el tiempo de incubacin, esto es indicativo de la presencia de una va metablica de biotransformacin. La polaridad de los subproductos corresponde a compuestos oxigenados, pero hasta el momento no conocemos la posicin del hidroxilo correspondiente. Bibliografa.
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CINTICA DE LA BIODEGRADACIN DE PLAGUICIDAS DEL TIPO PIRETROIDE MEDIANTE BACTERIAS PSICRFILAS

Yazmin Stefani Perea Vlez1, Jaime Antonio Salvador1, ngel Silveti Loeza2, Miriam Araceli Martnez Gmez2, Jos Carlos Mendoza Hernndez1*.
1
Benemrita Universidad Autnoma de Puebla 4 sur 104, (222) 2-29-55-00 ext 5270, Universidad tecnolgica de Puebla (222) 3-09-88-64, jcharlymh@yahoo.com. Biodegradacin, plaguicidas, piretroides, permetrina, cipermetrina.
Introduccin El trmino plaguicida se aplica a insecticidas, herbicidas, fungicidas y algunas otras sustancias de origen natural o sinttico usadas para el control de plagas. Los plaguicidas representan un peligro potencial para los seres humanos, animales, plantas y para el ambiente en general. Estos son de gran utilidad para la agricultura, brindan ventajas para eliminar vectores, plagas, roedores. Los piretroides han llegado a ser los insecticidas urbanos dominantes usados en muchas partes del mundo y en california. Los piretroides son aplicados en las 58 ciudades del estado de california con aproximadamente 345 000 kg reportados usados para el control de plagas que daan a la salud. Aproximadamente el 60% de los piretroides usados en California son reportados por las ciudades del sur Riverside, los ngeles, Orange y San Diego. El estudio de estos plaguicidas se debe a que cada da se distribuyen ms en ambientes acuticos y causan considerables daos a los peces y animales acuticos invertebrados. [1]. El mal manejo de estos plaguicidas puede provocar intoxicacin al usuario en forma accidental. La exposicin a plaguicidas est asociada a un creciente nmero de efectos crnicos en la salud[2,3,4]. Como alternativa al tratamiento fsico y qumico de agentes orgnicos contaminantes, los procesos biolgicos ofrecen las ventajas del funcionamiento a temperatura y presin ambiental, reduciendo gastos del capital y de operacin. Sin embargo, una limitacin de los sistemas de
biotratamiento, es el potencial toxico de agentes xenobioticos. En la prctica, esto significa que se debe de tener un gran cuidado con los microorganismos usados ya que pueden ser inhibidos o causar su muerte por los efectos txicos de los contaminantes orgnicos. Los biorreactores bifsicos pueden ayudar a la eliminacin de sustancias orgnicas debido a que las clulas que se encuentran en la fase acuosa, estn en contacto con la fase orgnica inmiscible, en la cual las concentraciones elevadas del sustrato se pueden disolver, as las clulas son protegidas de los niveles txicos de los substratos. Sin embargo este procedimiento es solo aplicable a ciertas cepas microbianas, o limitado a algunos tipos de consorcios.[5] Recientemente, se ha demostrado que los polmeros inertes y baratos se pueden utilizar, de manera semejante como solventes orgnicos inmiscibles, para repartir los substratos orgnicos txicos lejos de las clulas en un bioreactor de divisin bifsica. Las ventajas de usar los polmeros, ms all del bajo costo y de la disponibilidad amplia, incluyen biocompatibilidad y no bioavilidad, lo cual permite el uso de diversos consorcios. El uso de bioreactores de divisin bifsica en la secuencia de los reactores batch ha agregado otra dimensin a la operacin de proceso, caracterizado por una significativa flexibilidad en las condiciones de funcionamiento, y en la capacidad para permitir el desarrollo de los microorganismos y realizar sus rutas metablicas de manera eficaz para la degradacin de compuestos xenobioticos. [5]
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El objetivo de este trabajo fue analizar y cuantificar la biodegradacin de los plaguicidas permetrina y cipermetrina mediante Pseudomonas putida, Pseudomonas mendocina, Chromobacterium violaceum y Burkholderia cepacia utilizando espectrofotometra uv-visible e infrarrojo. Metodologa. Las cepas de Pseudomonas putida, Pseudomonas mendocina, Chromobacterium violaceum y Burkholderia cepacia se propagaron en medio mnimo mineral a 25 C durante72 horas; para la obtencin del inoculo de los bioreactores; posteriormente se hizo un ajuste espectrofotomtrico a 0.2 A en una longitud de onda de 600 nm, para obtener aproximadamente 1x106 bacterias/ml. Los reactores biolgicos fueron preparados con medio mnimo mineral y el plaguicida (permetrina o cipermetrina) en concentraciones de 50 ppm. Se agrego 3 ml del inoculo por cada 10 ml de medio mnimo mineral. Una vez preparados los biorreactores se tomaron muestras cada 5 das durante 20 das. De las muestras obtenidas en cada muestro se realizo una centrifugacin a 15, 000 rpm durante 30 minutos, para separar el paquete celular del sobrenadante. Al sobrenadante se le realizo anlisis de espectrofotometra Uv/Vis para determinar el porcentaje de biodegradacin obtenido de cada cepa con los diferentes plaguicidas. Al plaguicida permetrina se le realiz la lectura a 220.5nm, mientras que para la cipermetrina fue a 219.1 nm. As mismo al sobrenadante se le realizo un anlisis por espectrofotometra de infrarrojo, para determinar la generacin de nuevos compuestos resultantes de la biodegradacin. Por otra parte se cuantifico el crecimiento bacteriano mediante Uv/Vis; al paquete celular obtenido de la centrifugacin se resuspendi en 5ml de medio mnimo mineral y se determino su absorbancia a 600nm. Resultados y discusin. En el proceso de biodegradacin de los plaguicidas de tipo piretroide se encontr que las cepas Pseudomonas putida,
Pseudomonas mendocina, Chromobacterium violaceum, Burkholderia cepacia y el consorcio bacteriano formado por una mezcla de las cepas anteriores, son capaces de emplear el plaguicida como su nica fuente de carbono; dando como resultado la biodegradacin del mismo. El porcentaje de biodegradacin del plaguicida permetrina va desde el 80% a los 5 das hasta un 96% a los 20 das, esto concuerda con lo reportado por malik, en la que el proceso de biodegradacin de permetrina es un periodo de 30 das. Las cepas que mayor capacidad de biodegradacin de la permetrina presentaron fueron Pseudomonas mendocina y Burkholderia cepacia como se puede observar en la Figura 1.
La cepa que mostro una mayor biodegradacin de la permetrina y cipermetrina es Pseudomonas mendocina En el caso del crecimiento bacteriano
Figura 1 Grafico comparativo del porcentaje de biodegradacin del pesticida permetrina realizado Pseudomonas putida, Pseudomonas mendocina, Pseudomonas mendocina, Chromobacterium violaceum y cepacia y consorcio bacteriano Burkholderia
En la figura 2 podemos observar que el porcentaje de biodegradacin del plaguicida cipermetrina va desde un 76 a un 83% en los primeros cinco das, alcanzando un mximo a los 20 das que vara desde un 85 a un 90%, siendo la cepa de Pseudomonas mendocina la presenta el mayor porcentaje de biodegradacin bacteria asiciada a la biodegradacin de plaguicidas organofosforados como lo ha reportado Bhadbhabe en el 2002, seguida por Burkholderia cepacia, y de ah todas las
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dems cepas incluyendo el consorcio bacteriano degradan al plaguicida en un 85%, concordando con lo reportado por Grant et. al 2002, Lee et. al 2004, y Maloney et. al 1998.
Figura 3 Curva de crecimiento bacteriano de

Pseudomonas mendocina, putida, Pseudomonas mendocina, Pseudomonas
Chromobacterium violaceum y Burkholderia cepacia y consorcio bacteriano durante la biodegradacin del plaguicida permetrina
Durante la biodegradacin del plaguicida cipermetrina el crecimiento de todas las cepas fue muy similar, en donde Pseudomonas mendocina present el mayor crecimiento, mientras que el consorcio establecido por todas las cepas bacterianas usadas fue el que presento el menor crecimiento.
Figura 2 Grafico comparativo del porcentaje de

biodegradacin del pesticida cipermetrina realizado Pseudomonas putida, Pseudomonas mendocina, Pseudomonas mendocina, Chromobacterium violaceum y Burkholderia cepacia y consorcio bacteriano
Al comparar el crecimiento bacteriano en la biodegradacin del plaguicida permetrina Chromobacterium violaceum fue la que presento mayor crecimiento, y la que presento un menor crecimiento fue Burkholderia cepacia, pero todas mantuvieron una buena viabilidad y crecimiento durante el proceso de biodegradacin.
Figura 4 Curva de crecimiento bacteriano de

Pseudomonas mendocina, putida, Pseudomonas mendocina, Pseudomonas
Chromobacterium violaceum y Burkholderia cepacia y consorcio bacteriano en la biodegradacin del plaguicida cipermetrina
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Conclusiones Las cepas de Pseudomonas mendocina y Burkholderia cepacia son capaces de biodegradar los plagucidas permetrina y cipermetrina en un periodo de aproximadamente 20 das usndolos como nica fuente de carbono. Esto nos ayuda para emplearlas en diferentes procesos en donde estn presentes los plaguicidas del tipo piretroide. Agradecimientos Se agradece el financiamiento de este proyecto a PROMEP.
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ESTUDO CINTICO DA DESNITRIFICAO AUTOTRFICA COM TIOSSULFATO COMO DOADOR DE ELTRONS: AVALIAO ESTEQUIOMTRICA
Hugo Moreira Soares 1, Camila Michels 1*, Willibaldo Schmidell1
Universidade Federal de Santa Catarina Depto de Engenharia Qumica e de Engenharia de Alimentos, *Universidade Federal de Santa Catarina, Depto. de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos - Campus Universitrio Trindade Cep 88040-900 CP 476 Florianpolis SC Brasil 55(48)3721 9448 R.235 camilamichels@yahoo.com.br Palavras chave: desnitrificao autotrfica, tiossulfato, estequiometria Introduo A queima de combustveis fsseis, o uso de fertilizantes nitrogenados e emisso indiscriminada de efluentes lquidos de indstrias (produo de plsticos, corantes, colas, nylon, entre outros) e de esgoto sanitrio em corpos hdricos causam um desequilbrio no ciclo do nitrognio. O acmulo de compostos nitrogenados no ambiente gera impactos negativos no ambiente e na sade humana. A presena de xidos de nitrognio pode ocasionar a acidificao de lagos e rios [1]. Alm disso, a elevada concentrao de NH4+, NO2- e NO3- em ecossistemas aquticos pode causar eutrofizao, provocando a reduo do oxignio dissolvido na gua, criando um ambiente imprprio para o desenvolvimento da fauna e da flora. A ingesto de gua com elevadas concentraes de nitrito e nitrato causa uma doena chamada metamoglobinemia, principalmente em recm nascidos, impedindo o transporte de oxignio pelas hemcias, asfixiando e provocando a morte [2]. Processos convencionais para a remoo desse nutriente atravs da nitrificao e desnitrificao esto bem fundamentados. Para a desnitrificao heterotrfica (convencional), os compostos orgnicos presentes no efluente geralmente so usados como doadores de eltrons, no entanto, essas molculas podem ser complexas, dificultando seu consumo direto pelos microrganismos, havendo muitas vezes, necessidade de adicionar compostos de fcil degradao como cido actico e metanol para a remoo eficiente de nitrognio [3], o que pode elevar o custo do processo. Com isso, esto sendo pesquisadas novas substancias doadoras de eltrons para a desnitrificao autotrfica. Compostos sulfurosos como enxofre elementar, sulfetos e tiossulfatos [4-6] podem exercer esta funo. Existem, na literatura, diferentes propostas para a reao que descreve a reduo do nitrato a nitrognio gasoso, utilizando tiossulfato como doador de eltrons. Campos [7] props uma reao terica para a reduo do nitrato, com tiossulfato como doador de eltrons (Equao 1). Esta reao considera o crescimento celular e a relao estequiomtrica molar estabelecida por ela 0,844 mol S2O3-2/mol NO3- e a mssica 3,86 mg S-S2O32 /mg N-NO3
20,844S2O3 + NO3 + 0,347CO2 + 0,086HCO3 + + 20,086NH4 + 0,434H2O 1,689SO4 +0,500N2 +0,086C5H7O2N +0,697H+ (1) 1
J Santana [8] utilizou em seus estudos a reao indicada pela Equao 2. Onde a relao estequiomtrica molar 0,625 mol S2O3-2/mol NO3-2 e a mssica 2,86 mg S-S2O3-2/mg N-NO3-. Essa no considera o crescimento celular e o consumo de carbono para tal fim. 5S2O32- + 8NO3- +H2O 10SO42- +4N2 + 2H+ (2)
Esse trabalho tem como objetivo verificar, atravs de estudos cinticos, qual dessas reaes melhor representa o processo de desnitrificao autotrfica via tiossulfato. Metodologia Para realizar este experimento foram feitos dois testes cinticos conforme Tabela 1.
Tabela 1 Condies utilizadas nos ensaios cinticos Cintica YN/Sterico
(mgN-NO3 2/mgS-SO4 )
-
S-S2O3-2
(mgS-2 S2O3 /L)
N-NO3(mgNNO3 /L)
Slidos
(gSSV/L)
A B
0,26 0,35
500,00 500,00
130,00 179,00
1,02 1,03
Meio de cultivo O meio de cultivo utilizado foi uma adaptao de meio indicado por Campos [9], composto por (mg/l): 125 de KH2PO4, 46 de MgSO4.7H2O, 500 de NaCl e -2 500 de S-S2O3 , 1,2 g/l de NaHCO3 e 0,4 mL/L de soluo de micronutrientes [9]. A concentrao de N-
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NO3 foi diferente em cada experimento, 130 mg NNO3- em A e 179 mg N-NO3- em B. Sistema operacional Para a realizao do ensaio cintico foram utilizados dez frascos de penicilina de 30 mL, em duplicata, um shaker com temperatura controlada. A agitao foi mantida em aproximadamente 220 rpm e a temperatura em 301 O inculo foi retirado de um . reator operado em batelada alimentada, com aerao intermitente, onde os processos de nitrificao e desnitrificao autotrfica j estavam estabelecidos. Foram retirados 125 mL do reator SBR homogneo, permitiu-se a decantao e foi removido o sobrenadante. Aps isso, adicionou-se soluo isotnica para que qualquer resduo de compostos nitrogenados e sulfurosos presentes no reator fossem removidos, impedindo que concentraes residuais causassem interferncia nas anlises da cintica. Esse procedimento foi repetido quatro vezes. Foram adicionadas nos frascos as solues com substrato e demais nutrientes. Borbulhou-se com argnio por 3 minutos para que todo oxignio fosse removido. Aps isso, aproximadamente 1 gSSV/L foi introduzida e o frasco foi vedado com tampa de borracha e levado ao shaker. Cada ensaio foi realizado durante 30 horas e determinaram-se as concentraes de nitrato, nitrito e sulfato de cada ponto. Mtodos analticos A determinao dos slidos suspensos volteis foi feita conforme Standard Methods for Examination of Water and Wastewater [11]. Para a determinao do nitrito e do sulfato foram utilizados kits reagentes da marca Hach. Um mtodo do cido saliclico [12], adaptado [13] foi utilizado para determinar a concentrao de nitrato. Clculos Para o clculo da velocidade de consumo de nitrato e produo de sulfato foram utilizadas as equao 3 e 4, que nada mais so que a representao da inclinao da reta tangente s curvas dos grficos de concentrao x tempo. (3) (4) Onde:
rN-NO3 Velocidade de consumo de nitrognio na forma de nitrato (mg N-NO3-/L.h) rS-SO4 Velocidade de produo de enxofre na forma de sulfato (mg S-SO4-2/L.h) Obteve-se tambm fator de converso YN/S, Equao 5, e a velocidade especfica de consumo de nitrato foi obtida dividindo-se a velocidade de consumo, pela concentrao de biomassa no experimento (Equao 6). (5) (6)
Onde: Y fator de converso entre nitrato consumido e 2sulfato produzido (mgN-NO3 /mgS-SO4 ) N Velocidade especifca de consumo de nitrognio na forma de nitrato (mgN-NO3-/gSSV.h) X concentrao celular (gSSV/L). Resultados e discusses O ensaio A foi realizado com a relao estequiomtrica 3,86 mg S-S2O3-2/mg N-NO3-, sugerida por Campos [7]. Na Figura 1 verifica-se que h um consumo do nitrato e a produo de sulfato, indicando a atividade das bactrias oxidadoras de enxofre. O mesmo pode ser observado na Figura 2, que representa a desnitrificao autotrfica com a estequiometria indicada por Santana [8], 2,86 mg SS2O3-2/mg N-NO3-. A ausncia da fase lag sugere que a biomassa estava ativa, sendo capaz de oxidar tiossulfato anaerobicamente. Observou se tambm a queda do pH durante o experimento evidenciando a desnitrificao autotrfica. A literatura atribui esta atividade desnitrificante, utilizando o tiossulfato como doador de eltrons, ao Thiobacillus denitrificans [14].
Figura 1. Perfis de concentrao do ensaio A em mg/L de N-NO3-, N-NO2- e S-SO4-2.

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Figura 2. Perfis de concentrao do ensaio B em mg/L -2 de N-NO3 , N-NO2 e S-SO4 .
O comportamento das duas cinticas foi semelhante, em ambas o tiossulfato no foi completamente oxidado e houve um residual de nitrato e nitrito. Isto pode indicar que no houve tempo suficiente para a reao ocorrer completamente. O percentual de remoo de nitrognio foi de 81,8% para A e 80% para B. Conforme descrito no item 2.4 calculou-se as velocidades de consumo nitrato e de produo sulfato, o fator de converso e a velocidade especfica de consumo de nitrato, conforme Tabela 2.
Tabela 2 Resultados dos ensaios cinticos Cint ica rN
(mgNNO3 /l.h) (mgSSO4 2 /l.h)
rS
(mgNNO3 /mg -2 S-SO4 )
YN/S
(mgNNO3 /gSSV.h)
(mgSSO4 2 /gSSV. h)
A B
12,257 10,377
37,758 35,076
0,32 0,30
12,02 10,07
37,01 34,05
De acordo com as equaes 1 e 2, as relaes estequiomtricas tericas entre nitrato e sulfato (YN/S) so, respectivamente, 0,26 e 0,35 mgN-NO3 -2 /mgS-SO4 , para A e para B. Os valores obtidos experimentalmente foram similares, indicando uma possvel semelhana entre os comportamentos dos microrganismos de cada experimento, mesmo quando submetidas a diferentes quantidades de aceptor de eltrons. Amim (2008) [13] testou as seguintes relaes estequiomtricas para a desnitrificao autotrfica via tiossulfato: 3,81, 2,86 e 2,29 mgS-S2O3-2/mgN-
NO3 e obteve os fatores de converso (YN/S), respectivamente, 0,356, 0,311 e 0,333 mgN-NO3-2 /mgS-SO4 . Nota-se que para a estequiometria utilizada na cintica B, 2,86 mgS-S2O3-2/mgN-NO3-, o valor de YN/S obtido nesta pesquisa foi semelhante ao encontrado por esse autor. Porm, os valores aqui obtidos no esto de acordo com as reaes propostas (Equaes 1 e 2). A equao 1, que apresenta uma estimativa do crescimento celular, uma reao terica, ou seja, foi desenvolvida atravs de clculos matemticos e no por experimentos, estando sujeita a variaes dos processos reais. A Equao 2, apenas mostra o consumo de nitrato e de tiossulfato, sem estimar o consumo de CO2 e bicarbonato para a formao de biomassa. Desde modo, percebe-se que ambas reaes apresentam falhas que devem ser investigadas. A relao estequiomtrica proposta por Campos [7] permite que se faa uma estimativa de crescimento celular no experimento. Sabendo que o fator de converso terico nitrato para biomassa (YN/X) 1,44gN-NO3-/g de biomassa, pode-se estimar que o consumo de 130,50 mg de N-NO3- deveria ter produzido 0,091 gramas de biomassa no ensaio A. Fazendo o mesmo clculo para B, observar-se-ia um crescimento de 0,095 g, com o consumo de 136,67 mg de N-NO3-. Esses valores so semelhantes, pois na cintica A houve um aumento da concentrao de nitrato na primeira hora do experimento, provavelmente devido liberao deste composto pelos microrganismos. Mas se considerarmos apenas o primeiro ponto deste teste, o crescimento seria de apenas 0,067 gramas. Certo est que a produo de biomassa na desnitrificao autotrfica muito pequena, assim como nos demais processos do mesmo tipo, necessitando de outras tcnicas para a medio de crescimento celular. A metodologia empregada neste trabalho no ideal para este tipo de medida, pois so usados vrios frascos, havendo pequenas variaes na concentrao de biomassa no momento de inocular cada um. Conclui-se que nenhuma das reaes citadas acima representa realmente o que acontece no processo de desnitrificao autotrfica via tiossulfato, necessitando de ensaios para medir a produo celular de forma mais precisa e a partir destes dados, determinar a equao qumica que representa o processo de desnitrificao autotrfica. Concluses Os experimentos mostraram que a biomassa testada realmente capaz de desnitrificar utilizando
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tiossulfato como doador de eltrons. Tambm indicaram que apequenas variaes na concentrao do aceptor de eltrons (nitrato) no influenciam significativamente a atividade dos microrganismo, que se mostraram aptos a desnitrificar em ambas situaes. No foi possvel perceber qual das reaes propostas representa a verdadeira estequiometria da desnitrificao autotrfica via tiossulfato, sendo necessrios testes mais especficos e precisos para determinar, principalmente o crescimento celular. Agradecimentos Agradeo CAPES pela concesso da bolsa, a Fapesc pelo financiamento do projeto e aos professores pelo auxlio no desenvolvimento de trabalho. Bibliografia
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DECOLORACION DE AGUAS RESIDUALES TEXTILES CON HONGOS LIGNINOLITICOS INMOVILIZADOS UTILIZANDO UN REACTOR DE LECHO FIJO
Juliana Osorio Echavarria1, Juan Carlos Quintero Daz 1, J. Osorio*
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Universidad de Antioquia, * Universidad de Antioquia, Calle 67 Nmero 53 - 108Institucin, 21995537, juliana.osorio.echavarria@gmail.com. Palabras clave: Hongos ligninolticos, decoloracin, efluentes textiles
Introduccin. Los hongos de pudricin blanca de la madera han mostrado gran potencial para ser utilizados en procesos de biorremediacin de aguas y suelos contaminados con compuestos recalcitrantes y generalmente txicos; esta propiedad se debe principalmente al sistema enzimtico oxidativo extracelular que emplean naturalmente para la degradacin de la lignina de la madera. En este trabajo, el hongo Anthracophyllum discolor se emple con el fin de evaluar y desarrollar una tecnologa continua utilizando un biorreactor de lecho de fijo de 0.25 L para tratar efluentes contaminantes provenientes de industrias textileras. Metodologa. Decoloracin de efluentes textiles en matraces
500 mL con 200 mL de volumen de trabaj empleando un 10% v/v de inculo homogenizado con una concentracin de 0.168 0.024 g/L. Los matraces se esterilizaron antes de la inoculacin a 121 y 15 psi (excepto los usados para estudios no C estriles) y se incubaron a 30 y 175 rpm durante 8 C das. Se tomaron muestras diarias para anlisis de decoloracin, determinacin de actividad enzimtica Manganeso Peroxidasa (MnP), Lignino Peroxidasa (LiP) y recuento microbiano en cmara de Neubauer. Se realizaron pruebas de toxicidad para el agua residual industrial en condiciones estriles antes y despus del tratamiento. Adems, se realizaron controles experimentales con biomasa inactiva (inactivacin con NaCl y calor) [1], para cuantificar la posible adsorcin de colorantes en la biomasa y controles abiticos para evaluar la degradacin por factores fisicoqumicos y/o contaminacin bacterial. Decoloracin en el biorreactor de lecho fijo
Se realizaron 5 experimentos con agua residual industrial textil como medio base para la decoloracin: a) 20 ml de de inculo homogenizado con una concentracin de 0.168 0.024 g/L, suplementando el medio base con glucosa, peptona (conservando una relacin C/N: 20/3) y trazas sales, b) 0.96 g de trozos de espuma de poliuretano con biomasa de hongo inmovilizada en medio base sin control de pH (pH inicial de 4.5), c) 0.96 g de trozos de espuma de poliuretano con biomasa de hongo inmovilizada en medio base preparado en buffer acetato 0.2 M pH 4.6, d) 0.96 g de trozos de espuma de poliuretano con biomasa de hongo inmovilizada en medio base suplementado con glucosa y peptona (conservando una relacin C/N: 20/3), y sin control de pH (pH inicial de 4.5) y e) 0.96 g de trozos de espuma de poliuretano con biomasa de hongo inmovilizada en medio base en buffer acetato 0.2 M pH 4.6, suplementado con glucosa y peptona, conservando la relacin C/N propuesta para hongos filamentosos 20/3. Todos los experimentos se realizaron en matraces de
Tras el llenado del reactor con la solucin de alimentacin conformada por agua residual textil en condiciones no estriles, se pone en marcha el sistema de control PCL, iniciando as el ciclo de tratamiento. La condiciones de operacin fueron, tiempo de Residencia (60 horas), fraccin hueca: 0.81, pulsos de aire cada 5 minutos de 0.74 vvm, caudal alimentacin de agua: 0.054 mL/min (pulsos de 5 mL 98 minutos). La determinacin del porcentaje de decoloracin se realiz monitoreando el cambio en la absorbancia con el tiempo de muestras recogidas peridicamente en el efluente y a lo largo de la longitud del reactor. Tambin se realiz mediciones de consumo de sustrato y produccin de enzimas ligninolticas. Anlisis de actividad enzimtica La actividad enzimtica de la lignino peroxidasa (LiP), manganeso peroxidasa (MnP) y lacasa fue
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determinada espectrofotomtricamente (Thermo Spectronic Heios ) a una temperatura de 30 a C partir del filtrado obtenido de cada cultivo. La actividad manganeso peroxidasa (MnP) y la lacasa se determin a partir de la oxidacin del compuesto 2,6 dimetoxifenol (2,6-DMP) a 468 nm, 468 nm= 49600 M-1 cm-1 [2]. La actividad Lignino peroxidasa (LiP) se determin mediante la oxidacin de alcohol veratrlico a aldehdo veratrlico (AV) a 310 nm, 310 nm= 9300 M-1 cm-1 [3]. Una unidad de actividad (U) se define como la cantidad de enzima (en mL) necesaria para oxidar 1 mol de sustrato (DMP para MnP y Lacasa y AV para LiP) en un minuto. Determinacin de la decoloracin Cada muestra tomada de los ensayos de decoloracin en medio lquido se centrifug a 8000 rpm durante 10 minutos para eliminar las posibles interferencias de biomasa. Para determinar el grado de decoloracin en los tratamientos con la mezcla de los colorantes industriales, se determinaron los perfiles espectrofotomtricos de cada muestra en el rango de 450 a 700 nm (espectro visible) y la decoloracin se asoci con la diferencia de las reas bajo la curva entre el tiempo inicial y final del tratamiento [4], como indica la siguiente relacin: D = 100(Ai - Af) / Ai Donde: D es el porcentaje de decoloracin (%) A es el valor del rea bajo la curva y los subndices i y f son al tiempo inicial y final del tratamiento respectivamente. Resultados y discusin. Decoloracin de efluentes textiles reales en matraces De acuerdo con resultados anteriores, se evalu el grado de decoloracin con las aguas residuales textiles sin diluir y en condiciones no estriles, con el fin de conocer la capacidad de decoloracin del hongo A. discolor frente a un ambiente competitivo por otros microorganismos. Se encontr una decoloracin del 40% para el efluente real en condiciones no estriles con clulas libres (Figura 1). Se observa un alto grado de inhibicin de la decoloracin cuando el efluente no se esteriliza. Resultados obtenidos de ensayos control (sin la presencia de A. discolor) bajo condiciones no
estriles, indicaron que no hay una decoloracin significativa (3%) por la presencia de los microorganismos endgenos o ambientales que crecieron durante el tratamiento, indicando que esta micro flora no tiene capacidad para la decoloracin.
1.8 1.6 1.4
Absorbancia
1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 450 500 550 600 650 700
Longitud de Onda (nm)
Figura 1. Cambios en el espectro de absorbancia de aguas residuales textiles reales durante el tratamiento con el hongo A. discolor libre. A) Tratamiento en condiciones estriles; B) Tratamiento en condiciones no estriles. Da cero () y Da 8 (---) de tratamiento.
Durante el tratamiento de decoloracin del agua residual en condiciones no estriles con A. discolor libre, se observ un incremento del pH de 4.5 a 9 al final del tratamiento. Este comportamiento se debi a la liberacin de amonio durante la fase de metabolismo endgeno en que entr el hongo cuando hay condiciones ambientales de limitacin de nutrientes, la cuales se alcanzaron rpidamente debido a que en el sistema proliferaron bacterias, que alcanzaron un recuento final de 6 millones de clulas por mL. Su micro morfologa corresponda a bacterias tipo cocos. En el tratamiento con el agua residual no estril los valores de MnP y LiP, fueron de 2.2 y 3.6 U/L, respectivamente. La competencia por los nutrientes del medio y el incremento del pH a valores no tolerables por el hongo ni las enzimas, puede explicar por qu obtuvieron bajos valores de actividad enzimtica en el efluente no estril y por consiguiente por que se obtuvieron bajos valores de decoloracin. El valor de decoloracin del 40% es similar al grado de adsorcin obtenido en los ensayos con medios sintticos salinos, de lo que se puede inferir, que el mecanismo principal para alcanzar este valor de decoloracin fue la adsorcin ms que la degradacin, pues las enzimas se vieron sensiblemente afectadas por las condiciones de pH alcalino. Por tanto, para garantizar la accin eficaz del hongo y de sus enzimas degradadoras, es
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importante crear condiciones ambientales adecuadas principalmente de bajo pH y limitacin por competencia de otros microorganismos. Por lo anterior, se crea la necesidad de desarrollar estrategias para reducir el impacto negativo del micro flora endgena y as hacer viable esta tecnologa, que ha demostrado un gran potencial para la decoloracin de efluentes de la industria textil. El control de pH durante el tratamiento de efluentes no estriles y la inmovilizacin del hongo son estrategias que se comienzan a evaluar como posibles alternativas para evitar la excesiva proliferacin de otros microorganismos y crear microambientes adecuados para los hongos [4-7]. Los resultados de la evaluacin de la inmovilizacin y el control del pH como estrategias para la optimizacin de la decoloracin de aguas residuales en condiciones no estriles se muestran en la figura 3. Dentro de las condiciones evaluadas con micelio inmovilizado, se observ que la adicin de fuente de carbono y nitrgeno para la produccin de enzimas, no mejor la decoloracin, solo se tienen cambios cuando se realiza control del pH, en donde el porcentaje de decoloracin para ambos casos (sin y con suplementos) aumenta ms o menos de 5 8%. Adems, se observ que no hay una degradacin significativa por microorganismos endgenos o ambientales que crecieron en dichos cultivos, solo para el caso del experimento D, la degradacin fue igual o mayor a la alcanzada con la presencia del hongo. Con estos resultados podemos decir que la inmovilizacin es un elemento clave para evitar que el sistema de incubacin sea dominado por otros microorganismos.
C.
Figura 2.. Resultados del tratamiento del agua residual textil en condiciones no estriles con el hongo A. discolor inmovilizado en espuma de poliuretano y en presencia de diferentes condiciones ambientales: A) Sin control de pH, B) Con control de pH, C) Medio suplementado con glucosa y peptona y sin control de pH, D) Medio suplementado con glucosa y peptona con control de pH. Barras Blancas (Control Sin Presencia de Hongo) y Barra Oscura (tratamiento con el hongo). a) Decoloracin, b) Recuento de Microorganismos, c) pH Final, en el tratamiento bajo condiciones no estriles.
A.
B.
El seguimiento de pH en los ensayos en los cuales no hay control de este, se observ un aumento del valor inicial de 4.6 a valores de 9 (Figura 3C). Igual al observado en los ensayos con hongo libre, el aumento de pH puede tener una influencia negativa en el crecimiento y reproduccin del hongo ligninoltico, debido a que hay proliferacin de microorganismos que pueden competir con este en requerimientos de nutrientes. Se observ un decrecimiento notorio en la produccin de enzimas en el tratamiento de efluentes textiles no estriles en comparacin con los alcanzados en el tratamiento con el hongo bajo condiciones estriles, 85.6 U/L y 62.8 U/L para MnP y LiP, respectivamente; con clulas inmovilizadas fue 1.5 U/L para MnP y 14 U/L para LiP los cuales se dieron en el experimento con suplemento del efluente textil y control de pH. El incremento en la actividad para la enzima LiP, en el montaje con clulas inmovilizadas puede deberse a la predominancia del hongo usando esta estrategia de incubacin. Decoloracin en biorreactor de lecho fijo de aguas residuales industriales textiles.
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Evidentemente, es poco prctico y costoso para el tratamiento de aguas residuales que contienen colorantes, realizar el tratamiento en condiciones estrictas de esterilizacin. Si las medidas de esterilizacin no fueran tomadas en cuenta para la decoloracin con hongos ligninolticos de esta agua, es necesario el estudio de diferentes mtodos que permitan que la tasa de decoloracin no se vea altamente afectada por la no esterilizacin, que podra generar la contaminacin por otro tipo de microorganismos. Se encontr que la mejor estrategia es la inmovilizacin del hongo, regulacin de pH a 5.0, suplemento de fuente de carbono y nitrgeno y una dilucin de 1 en 5. Bajo condiciones no estriles en una operacin en continuo con flujo pulsante durante 420 horas (18 das aprox.), se obtuvo un porcentaje de decoloracin del 60%, valor un poco menor al obtenido a nivel de matraz que fue del 70%, pero igual al obtenido cuando se le resta el valor de la decoloracin por otros microorganismos que fue 55%. En la figura 3, se puede observar el perfil de decoloracin y consumo de sustrato para el proceso de tratamiento de agua residual textil en condiciones no estriles en un reactor de lecho fijo con hongo inmovilizado, para una operacin en continuo durante 18 das. Se puede observar que el porcentaje de decoloracin, es decir la decoloracin, fue aumentando paulatinamente durante los 18 das de tratamiento, siendo menos marcado el cambio despus de las 300 horas. Adems de un bajo consumo de glucosa, por lo cual es posible manejar concentraciones ms bajas de la fuente de carbono lo que implicara una reduccin en costos del 50 al 75%, asociados a la cantidad de glucosa utilizada en el suplemento del agua residual. En la figura 4 se observa fotografas del agua residual textil antes y despus del tratamiento en el reactor de lecho fijo con Anthracophyllum discolor. La muestra de la izquierda corresponde al agua residual sin tratar y la ultima a la derecha el agua residual tratado despus de 420 horas de operacin del reactor.
Figura 3. Perfiles de decoloracin (%) () y consumo de glucosa () durante el tratamiento del agua residual textil en forma continua con Anthracophyllum discolor. A partir de los resultados obtenidos en esta investigacin se puede concluir que el control de pH y el suplemento de glucosa y peptona en el agua residual textil fueron estrategias que permitieron una primera optimizacin de la decoloracin de este tipo de efluentes en forma continua utilizando un reactor de lecho fijo con A. discolor inmovilizado.
Figura 4. Fotografa del agua residual textil: A. 0 horas, B. 60 horas, C. 120 horas, D. 180 horas, E. 240 horas y F. 420 horas de tratamiento en un reactor de lecho fijo con Anthracophyllum discolor inmovilizado en espuma de poliuretano. Anlisis de HPLC realizados a las muestras de agua residual sin y con tratamiento, muestran un cambio significativo en los cromatgramas obtenidos, lo que indica que la decoloracin se debi a la degradacin de los colorantes, principalmente por el ataque oxidativo por parte de las enzimas producidas por el hongo A. discolor. Esto se puede inferir, debido a que no se present ninguna clase de contaminacin por microorganismos endgenos o ambientales durante el tratamiento del agua residual, por tanto el proceso degradativo que estaba ocurriendo fue principalmente por la maquinaria metablica del hongo. En la figura 6 se pueden observar los cromatgramas para el agua residual antes y despus del tratamiento. Se aprecia que hubo una disminucin significativa en la intensidad de la seal de picos entre los tiempos de retencin de 1.3 y 1.7
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min, adems de la completa desaparicin de los picos presentados a los tiempos de retencin de 5.7, 7.2 y 13.7 min, en la muestra de agua residual tratada. Analizando la estructura del colorante Negro Everzol B, se podra vislumbrar que el pico correspondiente a los colorantes presentes en el agua residual textil, son representados por la seal del pico en un tiempo retencin de 13.7 min; con lo cual podramos inferir que el hongo A. discolor y sus enzimas, fueron capaz de degradar los colorantes presentes en esta agua. Es posible, los picos presentes en los tiempos de retencin menores correspondan a los dems compuestos orgnicos presentes en el agua residual y que igualmente el hongo fue capaz de tratarlos, al observar la disminucin de los picos. A.
Conclusiones. El hongo Anthracophyllum discolor exhibi una importante capacidad para decolorar aguas de la industria textil. La decoloracin se vio favorecida por la presencia de altas concentraciones de sales que son propias de este tipo de aguas residuales, indicando que el hongo tiene capacidad para desarrollarse en condiciones hipersalinas. La posibilidad de la explotacin del hongo Anthracophyllum discolor para la decoloracin de efluentes se confirm cuando el hongo mostr una capacidad decolorativa en un efluente real estril, similar a la observada en un efluente sinttico. El cultivo de clulas inmovilizadas de Anthracophyllum discolor en espuma de poliuretano como soporte y controlar el pH del medio, en valores cidos, probaron ser buenas estrategias para suprimir la contaminacin por otros microorganismos y obtener buenos porcentajes de decoloracin bajo condiciones no estriles Los resultados de este trabajo proponen una alternativa interesante para la degradacin de compuestos recalcitrantes, por lo que es necesario encontrar estrategias adecuadas para maximizar la eficiencia de la operacin. Su aplicacin debe ser considerada como un paso dentro de un tratamiento combinado, que traer beneficios en la reduccin del contaminante y el aumento en la eficiencia de tratamiento respecto a los problemas que hoy en da no tienen soluciones simples. Bibliografa.
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B.
Figura 6. Cromatgrama de HPLC para la muestra de agua residual (A) y una muestra de 420 horas de tratamiento del agua residual textil con el hongo Anthracophyllum discolor inmovilizado en espuma de poliuretano en un reactor de lecho fijo (B) Debido a que la mayora de los resultados reportados bajo condiciones no estriles se remiten a decoloraciones de colorantes individuales, los resultados obtenidos en esta investigacin son un primer acercamiento al tratamiento de aguas residuales textiles en condiciones no estriles con hongos ligninolticos en Colombia, pues se alcanzaron buenas remociones de color (60%), comparables con estudios de decoloracin de otros autores llevados a cabo durante 15 das de tratamiento.
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[5] Libra, J. A., Borchert, M., Banit, S., Competition strategies for the decolorization of a textile-reactive dye with the white-rot fungi Trametes versicolor under nonsterile conditions. Biotechnology And Bioengineering 2003, 82, 736-744. [6] Blanquez, P., Sarra, M., Vicent, T., Development of a continuous process to adapt the textile wastewater treatment by fungi to industrial conditions. Process Biochemistry 2008, 43, 1-7. [7] Dawen, G., Xianghua, W., Yi, Q., Decolorization of reactive brilliant red K-2BP with the white-rot fungi under non-sterile conditions. Chinese Science Bulletin 2004, 49, 981-982.
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CULTIVO DE MICROALGAS OBTENIDAS DE CUATRO CINEGAS COAHUILA, EN FOTOBIORREACTORES.

Alma Toledo-Cervantes1, Marcia Morales2, Sergio Revah2*
Departamento de Biotecnologa, Universidad Autnoma Metropolitana UAM-I 2Departamento de Procesos y Tecnologa, Universidad Autnoma Metropolitana UAM-C. * Universidad Autnoma Metropolitana. Av. San Rafael Atlixco N 186, Col. Vicentina, C.P. 09340, Mxico DF, Tel. 01(55)58046538 srevah@xanum.uam.mx Palabras clave: Microalgas, Fotobiorreactores, Dixido de carbono. Introduccin. Las estrategias para reducir las emisiones de CO2 pueden clasificarse en dos categoras, reacciones qumicas y reduccin biolgica del CO2. Actualmente la reduccin biolgica ha tenido mucho inters porque permite la produccin de energa de biomasa aunado al proceso de fijacin de CO2, [1], este proceso puede llevarse a cabo por plantas y microorganismos fotosintticos, sin embargo se estima que la captura de CO2 por agricultura de plantas contribuye slo en un 3-6 % de las emisiones de los combustibles fsiles [2]. Las microalgas tienen la habilidad de fijar CO2 con una eficiencia de 10 a 50 veces mayor que las plantas terrestres [3]. La estrategia de utilizar microalgas para la reduccin de CO2 ofrece ciertas ventajas: 1) tienen altas tasas de crecimiento [4,3], 2) permiten reciclar el CO2 ya que el dixido de carbono es convertido en energa qumica va fotosntesis, lo cual puede ser convertido en combustibles utilizando tecnologas existentes y 3) la mitigacin del CO2 por reaccin qumica requiere de energa y costos de proceso. Comnmente el cultivo de microalgas se realiza en tanques abiertos utilizando luz natural o artificial [5], este mtodo presenta ciertas desventajas: difcil control de las condiciones de cultivo, evaporacin del medio, grandes reas de cultivo y disminucin de la incidencia de luz cuando se incrementa la profundidad. Una alternativa a estos problemas, es el uso de los fotobiorreactores tubulares, ya que permiten el cultivo en un sistema cerrado, previenen la contaminacin y facilitan el control de las variables de proceso, con la desventaja de mayores costos de produccin [4]. El objetivo general de esta investigacin fue caracterizar el crecimiento y la fijacin de CO2 en un fotobiorreactor de una comunidad de microalgas provenientes de Cuatro Cinegas, Coahuila. Metodologa. La comunidad de microalgas fue cosechada de la laguna Churince (26'50'25"N; 102'08'02"O) localizada a 19.5 Km al sur-oeste de Cuatro Cinegas, Coahuila [6]. Las microalgas se propagaron en medio de cultivo BG-11 estril, a pH 7.5. A una temperatura de incubacin de 30 C, bajo iluminacin continua artificial de 54.7 mol m-2s-1. El sistema experimental que se instal const de fotobiorreactores de columna de burbuja (BCR) de vidrio, con un volumen de operacin de 2.5 L, colocados dentro de una cmara de fotoregulacin. Las medidas se presentan en la figura 1, los parmetros de operacin fueron: Velocidad superficial UG (0.00384 m s-1), Flujo (0.4 y 0.8 vvm), rea iluminada (0.232 m2), Iluminacin (54.7, 94.4 y 134mol m -2) y Temperatura (30 C).
1
Figura 1. Configuracin del fotobiorreactor de columna de burbujas.
Los reactores fueron alimentados con una mezcla de CO2 y aire, a concentraciones de 5 y 10% de CO2 v/v. Las concentraciones de CO2 a la entrada y salida de los fotobiorreactores fueron determinadas por
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cromatografa de gases [7]. La intensidad de luz incidente en el reactor se midi en la superficie externa de las columnas utilizando un medidor de luz de servicio. La cantidad de carbono presente en la fase lquida del sistema se determin en un equipo analizador de carbono orgnico total TOC-VCSN (Total organic carbon analyzer). Para cuantificar la biomasa a lo largo de los experimentos se us el mtodo gravimtrico de la determinacin del peso seco [8]. Al final de los experimentos, la biomasa de cada lote del reactor se cosech floculando las clulas con quitosano y se dej secar en una estufa a una temperatura de 60 durante 24 horas [9]. Se C extrajeron los aceites utilizando el mtodo de Soxhlet, con ter anhidro [5]. Resultados y discusin. Microalgas: En estudios previos, la comunidad compuesta por microalgas de las divisiones Chlorophyta y Cyanobacteria (figura 2) se transform en un cultivo de predominancia Chlorophyta.
10 m
gelatinosa, con cloroplasto parietal y con un pirenoide que a veces es difcil de observar y medir.
10 m
10 m
Figura 3. a) Clulas formando autosporas, b) Clula en divisin. Imgenes tomadas a 63 x y zoom de 2.2.
a)
b)
Figura 2. Inculo inicial. a) 63x y zoom de 1.4. b) Contraste de fases a 63x y zoom de 1.4.
Existen reporte que sealan que las Cyanobacteria tienden a dominar cuando las concentraciones de CO2 son bajas (pH alto); mientras que, cuando el CO2 es alto (pH bajo) dominan las microalgas flageladas y que niveles de CO2 intermedios (pH neutro) benefician a microalgas Chlorophyta no flageladas [10], es probable que las Cyanobacteria compitieran con las microalgas eucariotas (Chlorophyta), llegando a dominar las ltimas al presentar una mayor tasa de crecimiento y habilidad para captar los nutrientes. Se identific morfolgicamente a la microalga ms abundante, la cual result pertenecer a la divisin: Chlorophyta, orden: Chlorococcales, familia: Coccomyxaceae, gnero: Ourococcus Grobety. Las clulas son unicelulares inmviles, que se multiplican por la formacin de autosporas y raramente por divisin simple vegetativa (figura 3). Adems son fusiformes, solitarias, con pequeas espinas en los pices, de forma sigmoidea, sin vaina
Efecto de la irradiancia. Con un suministro del 5% de CO2 v/v, se observ que al incrementar la intensidad de luz de 54.7, 134 mol m-2 s-1, hubo un aumento en la capacidad de captura de CO2, sin embargo se observ una disminucin de la CE, lo cual fue atribuido a la alta concentracin celular (6 gL-1) que pudo impedir la incidencia de luz al interior del reactor. La tasa de fijacin de CO2 (PCO2) y la mxima captura de CO2 (CE) aumentaron al incrementarse la intensidad de luz. La mayor fijacin de CO2 en la biomasa y la mayor captura de CO2 en el sistema se logr alimentando el reactor con 10% de CO2 a un -2 -1 flujo de 0.4 vvm y 134 mol m s . La max se ve favorecida (Tabla 1) con el incremento en la intensidad de luz, y slo se presenta diferencia significativa debido al suministro de CO2 cuando se trabaja a 94.4 mol m-2 s-1, siendo mayor al 10% de CO2. La mxima remocin de CO2 en el sistema se logr al 10% de CO2 sin diferencia al 94.4 y 134 mol m-2 s-1.
Tabla 1. Parmetros obtenidos a distintas intensidades de luz con suministro de 5 y 10% CO2 v/v. -2 -1 mol m s 54.7 94.4 134 54.7 94.4 134 % CO2 5 5 5 10 10 10 Xmax (g L-1) 3.37 3.12* 6.00 3.1* 2.7 5.7 Pmax (g L-1 d-1) 0.25 0.32 0.50 0.26 0.31 0.52 -1 max (d ) 0.18* 0.23 0.37* 0.18* 0.34 0.38* PCO2 (g L-1 d-1) 0.47 0.60 0.95 0.49 0.57 0.97
* No hay diferencia significativa Pvalue< 0.0001.
Efecto del flujo de aire. En la figura 4 muestra la curva de crecimiento y capacidad de captura de CO2 a 94.4 mol m-2 s-1 y 5% de CO2, la mayor CE se logr con un flujo de 0.8 -1 -1 vvm, alcanzando un mximo de 16.7 g L d . Para -1 -1 0.4 vvm se tuvo un mximo de 8.2 g L d , adems
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se observ un aumento en la concentracin de biomasa, para 0.8 vvm. La biomasa mxima -1 -1 cuantificada fue de 3.8 g L y 3.1 g L para 0.8 y 0.4 vvm, respectivamente. Asimismo las tasas de crecimiento especfico aumentaron 2.3 veces al -1 incrementar el flujo, teniendo 0.51 d para 0.8 vvm y -1 0.22 d para 0.4 vvm. En el caso del experimento con alimentacin del 10% de CO2, se obtuvo un mximo de captura de 51.2 g L1 -1 d en 0.8 vvm y de 21.8 g L-1 d-1 para 0.4 vvm, de igual forma las mayores tasas de crecimiento -1 ocurrieron en 0.8 vvm con un valor de 0.69 d , en -1 comparacin de 0.33 d obtenido con un flujo de 0.4 vvm. Tambin la biomasa producida en el reactor fue mayor a 0.8 vvm (3.8 g L-1).
4 Biomasa (g L )
-1
con ello la remocin del contaminante. En la tabla 2 se resumen, las tasas de fijacin de CO2 con respecto a la biomasa y la productividad, de algunas especies de microalgas utilizadas en la remocin de CO2 en corrientes gaseosas. Comparando los resultados de este estudio, vemos que Ourococcus sp. tuvo mayor capacidad para fijar CO2 en forma de biomasa, y que su productividad le permiti obtener la mayor cantidad de biomasa respecto a otras especies de microalgas.
Tabla 2. Tasas de fijacin de CO2 y productividad de biomasa de distintas microalgas [1]. Pmax -1 PCO2 -1 -1 -1 Microalga %CO2 (g L d ) (g CO2 L d ) Chlorella kessleri Fott et Novkov. [12] Chlorella vulgaris Beijerinck [13]. Haematococcus sp [14]. Scenedesmus obliquus (Turpin) Ktzing [7]. Spirulina sp [7]. Ourococcus sp. Ourococcus sp.
la ecuacin
0.4 vvm 0.8 vvm
18 aire 16-34 18 12 5 10
0.087 0.04 0.076 0.14 0.22 0.505 0.517

.
0.163* 0.075* 0.143 0.26 0.413* 0.95* 0.92*
0 18 16 14 12 10 8 6 4 0 2 4 6 8 10 12 14
CE (g L d )
CE 0.4 vvm CE 0.8 vvm
*Valores calculados a partir de la productividad de biomasa (P) de acuerdo a
-1
-1
Tiempo (d)
Figura 4. Evolucin de la biomasa suspendida en peso seco y capacidades de captura de CO2, suministrando 5% de CO2 v/v a 94.4 mol m-2 s-1con 0.4 y 0.8 vvm.
El mximo porcentaje de remocin de CO2 obtenido fue de 25 % con un suministro del 10 % v/v con una max de 0.69 d-1, una Xmax de 3.8 g L-1 y una -1 -1 productividad mxima (Pmax) de 0.45 g L d . de Morais y Costa (2007a) [11] reportaron que en el cultivo de Scenedesmus obliquus con 12% de CO2 v/v usando un fotobiorreactor tubular con volumen de operacin de 1.9 L se obtuvo un %Rmax de 28%, con una max de 0.33 d-1, una Xmax de 3.38 Kg m-3 y una -3 -1 Pmax de 0.17 Kg m d . Al comparar estos datos con los obtenidos en este estudio, se observa que aunque el porcentaje de remocin es menor, los parmetros cinticos obtenidos con Ourococcus sp., fueron mayores a los reportados para la microalga S. obliquus, sin embargo hay que considerar que sta fue cultivada en tres FBRR conectados en serie, los cual incrementa el tiempo de residencia del CO2 y
Contenido de aceites. Para conocer la capacidad de las microalgas para acumular aceites se realizaron extracciones en la biomasa obtenida en los experimentos anteriores y se determin que contienen entre 20-30% de aceites en relacin a su peso seco, lo cual concuerda con lo reportado para otra especie de Ourococcus (27%) [15]. Balances de carbono. Se realiz un estudio de los compuestos orgnicos voltiles (COV) en el gas de salida del reactor, ya que se tienen reportes de que son ampliamente producidos en ambientes marinos [16]. En la tabla 3 se presenta el balance de carbono para el experimento donde se obtuvo la mayor concentracin de biomasa, tomando en cuenta la cantidad de carbono (C) en el medio de cultivo, el gas de salida del reactor y el contenido de carbono en la biomasa. Estudios previos han mostrado que solo una pequea fraccin (~3%) del carbono capturado en los fotobiorreactores se recupera como biomasa, indicando la existencia de otras rutas de conversin de CO2 [17].
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Tabla 7. Balance de carbono.
Biomasa total (g) CO2 total capturado (g) Gramos de C en biomasa Gramos de C capturados en el sistema % C en biomasa* % C en COV % C en medio de cultivo % C por error experimental en la mezcla** % Total
12 278.2 6.2 75.9 8.96 0.05 0.66 15 24.67
*Suma de la biomasa final y la retirada por mediciones. ** Corroborado con una mezcla estndar al 10% CO2/aire (Praxair).
Conclusiones. Las tasas de fijacin de CO2 y la productividad mxima obtenidas en este estudio, fueron mayores que los obtenidos por algunas especies de microalgas utilizadas en la remocin de CO2. No se observ inhibicin por la cantidad de CO2 suministrado hasta el 10%, por lo que las microalgas obtenidas de Cuatro Cinegas son especies con potencial para la captura del CO2 producido por los gases de combustin y la obtencin de aceites. Debido a que no se logr cerrar el balance de carbono es necesario continuar con las investigaciones. Agradecimientos. A CONACyT por la beca otorgada para la realizacin de esta investigacin. Bibliografa.
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TOLERANCIA Y REMOCION DE METALES POR HONGOS AISLADOS DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS Y METALES
1*
Norma G. Rojas-Avelizapa1* Karina L. Zarco-Tovar1,2, Regina Hernndez-Gama1

Centro de Investigacin en Ciencia Aplicada y Tecnologa Avanzada del IPN, Cerro Blanco 141, Col. Colinas del Cimatario 76090, Quertaro. Tel. 014422290804 ext. 81031, nrojasa@ipn.mx. 2Universidad Autnoma de Quertaro, Centro Universitario, Cerro de las Campanas s/n 76010, Quertaro.
. Palabras clave: aislamiento, concentracin mnima inhibitoria, remocin, sitios contaminados ampliamente documentada. As, el objetivo del Introduccin. presente trabajo fue obtener microorganismos En Mxico, como en muchos otros pases, las capaces de tolerar y remover a los metales Ni, Mo actividades industriales generan contaminacin con metales a travs de diferentes procesos y por la y V a partir de muestras de suelo provenientes de cantidad de residuos que disponen al ambiente [1]. San Nicols para evaluar su potencial aplicacin en Sin embargo, los ambientes generados son tambin el tratamiento de materiales contaminados con estos una fuente importante de microorganismos con metales. capacidades que pueden ser aprovechadas en procesos biotecnolgicos [2,3]. El tipo de interaccin Metodologa. que existe entre los microorganismos y los metales Fuente de microorganismos. Los cultivos esta en funcin de las caractersticas del metal tales microbianos fueron obtenidos a partir de una como estado de oxidacin y especiacin, as como muestra de suelo proveniente de San Nicols, del tipo de microorganismo en estudio. La principal ubicado en el municipio de Tequisquiapan, al sureste divisin de los procesos microbianos y su interaccin del estado de Quertaro. Esta localidad se sita, con metales se relaciona con el efecto que se aproximadamente, a 8 kilmetros de la cabecera produce en la movilidad del metal, es decir, si es municipal y su principal actividad econmica es la movilizado, un proceso conocido como lixiviacin produccin artesanal de tabique para la construccin microbiana, o inmovilizado lo cual puede ocurrir por [7]. En la tabla 1 se presentan los metales y las diversos mecanismos como son la bioabsorcin, concentraciones encontradas en la muestra de suelo bioacumulacin, biotransformacin, codificada como M3. biomineralizacin y la quimiosorcin mediada por microorganismos [3]. Estudios previos realizados en Tabla 1. Concentraciones de metales encontrados en la el municipio de San Nicols, perteneciente al muestra de suelo M3. municipio de Tequisquiapan Quertaro, demostraron Metal Concentracin (mg/kg) que los suelos presentan contaminacin con As 1.79 hidrocarburos de alto peso molecular, compuestos halogenados y metales [4] generados durante las Cu 91.1 actividades de elaboracin de ladrillo rojo que Cr 18.8 emplea combustleo y materiales de baja calidad como combustible tales como aceites gastados, Pb 1.1 basura, llantas [5,6] y plsticos [7]. A pesar de esta Ni 1522 condicin, algunas muestras de suelo presentaron cuentas microbianas importantes, motivo por el cual Zn 456 se consider que dichos suelos podran ser una fuente de microorganismos para procesos de Obtencin de microorganismos. Para la obtencin de remocin de metales. los microorganismos se prepararon cultivos de El inters principal en organismos capaces de enriquecimiento en matraces de 125 ml con 30 ml de interactuar con metales obedece a la necesidad de medio PHG-II que contiene (g/l) dextrosa 2, extracto dar tratamiento a una gran cantidad de residuos que de levadura 1, peptona 4, y agar bacteriolgico 17 generan diversas industrias a nivel nacional, de (en caso de cultivo slido). El medio PHG-II se particular inters, son aquellos que contienen a los esteriliz en autoclave a 15 psi durante 15 min. Una metales Ni, Mo y V, cuya toxicidad ya ha sido
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vez esterilizado el medio, a cada matraz se le adicion el metal en estudio en solucin, para V y Mo la concentracin fue de 100 mg/l, en tanto que para Ni se prepar el medio con 50 mg/l. Las soluciones metlicas previamente fueron esterilizadas por filtracin con membranas Millipore de 0.2 m. En total se prepararon tres cultivos de enriquecimiento, uno por cada metal en estudio. Posteriormente, cada uno de los matraces fue inoculado con 1 g de muestra de suelo (M3) e incubado a 30 180 rpm durante 72 hr. Despus C, de este periodo se realizaron tres pases sucesivos (1 ml) a medio de cultivo fresco hasta obtener un cultivo estable. Aislamiento de microorganismos. Apartir de los cultivos estables se tom 1 ml del contenido de cada matraz y se realizaron diluciones 1:10, 1:100 y 1:1000 en tubos con solucin salina (NaCl al 0.85%). En forma paralela se prepararon cajas de Petri adicionadas con medio PHG-II agar, los cuales fueron adicionados con el metal a la misma concentracin que la utilizada en el cultivo de enriquecimiento. El aislamiento se realiz por dilucin en placa aadiendo 150 L de la dilucin correspondiente y extendiendo sobre el medio PHG II slido, las cajas Petri se incubaron a 30 durante C 48 hrs. A partir de colonias bien separadas y de morfologa diferente se procedi a realizar el aislamiento mediante estra cruzada en placa con medio PHG II. Una vez obtenidos los diferentes aislados se describieron sus caractersticas morfolgicas y se realiz el microcultivo para los hongos. Evaluacin del pH ptimo de crecimiento. El pH ptimo de crecimiento de cada microorganismo aislado se evalu a 30C y 200 rpm en tubos tipo Eppendorf. Los valores de pH evaluados fueron 2,3,4,5,6 y 7 utilizando el medio RPMI, sin metal. El pH se ajust con HCl al 10%. El valor de pH ptimo, para ensayos posteriores, se eligi considerando: a) no crecimiento, b) crecimiento moderado y c) crecimiento abundante. Evaluacin de la concentracin mnima inhibidora (CMI). El inoculo para este ensayo se prepar a partir del cultivo de hongos en medio agar papa dextrosa (PDA) en cajas Petri e incubados a 30C durante 72 hrs. A estos cultivos se les adicionaron 5 ml de solucin salina 0.85% y se agitaron con movimientos circulares. Posteriormente, el sobrenadante se filtr y el filtrado se centrifug a
4400 rpm por 10 min a 8C, el botn obtenido se suspendi en 2 ml de solucin salina para posteriormente realizar el conteo y ajuste a un 6 inoculo de 2.5 X10 UFC/ml. Este inoculo fue depositado en tubos (1 ml) conteniendo medio liquido RPMI y el metal a la concentracin a evaluar (Tabla 2). En la Tabla 2 se observan las concentraciones metlicas evaluadas para cada uno de los metales en estudio.
Tabla 2. Concentracin de los metales para evaluar la CMI de los hongos aislados. Concentracin del metal ppm Ni 2 4 6 8 10 20 40 60 80 100 Mo 1 000 2 000 3 000 4 000 5 000 6 000 7 000 8 000 9 000 10 000 V 1 000 2 000 3 000 4 000 5 000 6 000 7 000 8 000 9 000 10 000
Remocin de metales en medio slido Evaluacin de crecimiento en presencia del metal. Esta etapa consisti en evaluar el crecimiento de los microorganismos en presencia de los metales en estudio y evidenciar la remocin de metales en cultivo slido mediante una tcnica de revelado en placa [8]. Este ensayo se realiz en placas Petri preparadas con medio PDA, el cual fue adicionado con el metal en estudio a la concentracin seleccionada en los ensayos de la CMI. Cada uno de los aislados se inocul por puncin, las placas se incubaron a 30C por 72 hrs. Pasado este tiempo se midi el crecimiento (cm) de las colonias desarrolladas.
Tabla 3. Concentracin de metales en placas, para evaluar la remocin de metales en cultivo slido. Microorganismo Concentracin de metal (mg/l) Ni Mo V
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Hongo A1 Hongo A2
6 6
7000 4000
2000 1000
Evaluacin de la remocin del metal. La remocin del metal se evalu midiendo el halo transparente que se form despus de haber expuesto los cultivos microbianos crecidos en presencia del metal (ensayo previo) a vapores de H2S, el cual reacciona con el metal presente en la placa formando el sulfuro metlico correspondiente [8]. La formacin de un halo transparente alrededor de las colonias es un indicador de la ausencia del metal en el medio. Los halos as formados fueron medidos y se reportan tanto en cm como la relacin tamao de halo/tamao de la colonia. Resultados. A partir de los cultivos de enriquecimiento de la muestra M3, se lograron obtener nicamente tres microorganismos, dos hongos a partir de los cultivos adicionados con Ni y V (uno por cada metal) y una bacteria a partir del cultivo adicionado con Mo. Los estudios siguientes continuaron nicamente con los hongos por provenir de los metales que se presentan con ms frecuencia en algunos residuos peligrosos. Aunque cabe indicar que en todos los ensayos los hongos fueron evaluados para los tres metales. Con base en las caractersticas morfolgicas de los hongos y los microcultivos realizados, se identific al hongo A1 como Aspergillus sp. El hongo A2, an no ha sido clasificado. Existen diversos reportes sobre el aislamiento de Aspergillus de ambientes contaminados tanto con compuestos orgnicos como inorgnicos [9], por lo que no fue extrao el aislamiento de este hongo. El gnero Aspergillus se encuentra fcilmente en el suelo, en el agua y en los restos vegetales y representa hasta el 40% de la flora fngica del ambiente domstico y hospitalario. El crecimiento de los hongos se vio favorecido a un pH 5, observando que a pH menores el crecimiento se ve fuertemente disminuido, a pH 2 no se observ crecimiento. A pH mayores se observ crecimiento pero este fue menor al observado a pH 5. Con base en este resultado, el ensayo de CMI se realiz a pH de 5. En el ensayo de la CMI, la cual proporciona informacin sobre aquella concentracin de metal a partir de la cual el crecimiento de un microorganismo se ve inhibido se obtuvieron los siguientes
resultados, en el caso del Ni y V se encontraron concentraciones de 10 mg/l para Ni y entre 2000 y 5000 mg/l para V. Al respecto, existen muy pocos reportes sobre estos metales, la mayor parte de los estudios se enfocan a los metales pesados, sin embargo los metales Ni, Mo y V estn siendo ya de inters por su cada vez ms frecuente presencia en el ambiente. Para el caso del Mo, la CMI no se logr determinar, lo anterior debido a que la concentracin evaluada era muy alta y por encima de esta concentracin se presentaron problemas de solubilidad, sin embargo el crecimiento de los hongos tuvo lugar. En la tabla 4, se presentan los resultados obtenidos para cada uno de los microorganismos. La remocin de los metales en medio solido (formacin de halo alrededor de la colonia) fue medida en cm, los resultados se presentan en la Tabla 5, donde se observa que nicamente en presencia de V fue posible observar los halos de remocin demostrando que los dos microorganismos presentan capacidad para remover V. Aspergillus sp. fue el que present un mayor halo en comparacin con el hongo no identificado (Fig. 1).
Tabla 4. Concentracin Minima Inhibidora de metal para cada uno de los microorganismos evaluados. Microorganismo CMI (mg/l) Ni Aspergillus sp. Hongo no clasificado 10 10 Mo >10000 >10000 V 5 000 2 000
Tabla 5. Dimetro promedio del halo (cm) formado alrededor de las colonias. Metal Aspergillus sp. Hongo no identificado Ni Diam. halo (cm) Diam. Colonia (cm) Rel. halo/colonia 1.4 Mo 0.9 V 1.2 0.7 1.8 Ni 1.6 Mo 1 V 1.7 1.1 1.5
Nota. (-) no hubo formacin de halo. Medidas promedio (cm). El tiempo revelado fue de 120 min. A B
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Figura 1. Fotografas que muestran el crecimiento de los hongos A) Aspergillus sp y B) Hongo no identificado. Se observa la formacin de halo alrededor de la colonia.
Es importante resaltar que los hongos fueron capaces de crecer en la concentracion evaluada de todos los metales, sin embargo y de acuerdo al alcance de esta prueba solamente se observ el halo para el V, lo que sugiere la necesidad de evaluar su capacidad de remocin en cultivo lquido empleando tcnicas especiales para evaluar la remocin del metal. En la literatura se han reportado una gran diversidad de hongos como bioadsorbentes naturales de diferentes metales pesados, pero del gnero Aspergillus hay pocos reportes [10,11,12]. Existen otros reportes sobre la remocin de metales como Cu y As [9] pero muy escasos sobre Ni, Mo y V. Conclusiones. Se aislaron 2 hongos que presentan CMI muy altas para los metales en estudio, aunque se observa que son sensibles a Ni (10 mg/l). Lo anterior se evidenci tambin en el ensayo de remocin, ya que nicamente se observ halo en presencia de V. Los resultados sugieren que los hongos solo estn tolerando y resistiendo a los metales Ni y Mo. Este hecho resulta interesante pues seguramente estos microorganismos presentan capacidades mayores a las examinadas en el presente trabajo y por tanto un potencial de aplicacin aun no explorada. Agradecimientos. Este trabajo fue financiado por la Secretara de Investigacin y Posgrado del IPN a travs del proyecto SIP 20101007. Bibliografa.
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CARACTERIZACIN DE LA COMUNIDAD MICROBIANA DE SUELOS IMPACTADOS POR LA ACTIVIDAD PETROLERA Y SU POTENCIAL PARA LA RECUPERACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS Milagros Salas1, Nelda Dezzeo2, Rodrguez Mara3, Nora Malaver3,
1
Escuela de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela, AP 47270, Caracas 2 1030-A, Venezuela, Laboratorio de Ecologa de Suelos. Centro de Ecologa. Instituto Venezolano de Investigaciones Cientfica. 3Laboratorio de Microbiologa Ambiental, Instituto de Zoologa Tropical, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela, AP 47270, Caracas 1030-A, Venezuela. m cada una (PI, PII, PIII), tomndose como criterio la magnitud del impacto (PI = alto impacto, PII = mediano impacto y PIII = poco impacto) (Fig.1). De cada parcela se tomaron 4 muestras de suelo entre 0-10 cm de I: Zona del obtener profundidad, y se mezclaron paraborde de la fosa una muestra compuesta. II: Zona intermedia de la fosa
III: Zona alejadas de la fosa
Introduccin. En Venezuela existen unas 12.000 fosas petroleras [1], donde se han almacenado por dcadas desechos de las actividades de explotacin y produccin de hidrocarburos, que representan un alto riesgo operacional, ambiental y humano. Las comunidades microbianas poseen propiedades catablicas y adaptativas que les permiten colonizar y establecerse en ambientes impactados por la actividad petrolera. Su abundancia y estructura comunitaria vara con las condiciones ambientales imperantes. La estructura de la comunidad microbiana, fundamentada en el potencial bioqumico frente a diferentes sustratos, permite reconocer grupos de microorganismos: proteolticos, lipolticos, celulolticos y lignolticos, con potencial para degradar los contaminantes presentes en el ambiente. De all la importancia de caracterizar la comunidad microbiana en suelos afectados por la actividad petrolera, especficamente en el rea de influencia de una fosa, lo cual representa el objetivo fundamental de este trabajo. Metodologa. El trabajo se realiz en la Fosa Bared-9, ubicada a 8 5546,2 de latitud N y 64 744,8 de longitud W, en el Distrito San Tom, Estado Anzotegui, Venezuela. Para la toma de muestras en el campo, se trazaron transectas en 3 puntos diferentes alrededor de la fosa (T1, T2, T3), y en cada transecta se ubicaron 3 parcelas de 10 m x 5
Fig. 1. Esquema del diseo muestreal realizado en la Fosa BARE-9. Los anlisis microbiolgicos realizados en el laboratorio incluyeron: (a) aislamiento de cepas cultivables de la comunidad microbiana, para lo cual se sigui el mtodo propuesto por [2]; (b) caracterizacin macromorfolgica, que consisti en describir las cepas en trminos de su morfologa, incluyendo borde, forma, elevacin y coloracin. De esta manera se obtuvo un Cepario de hongos y bacterias en tubos de ensayo; (c) caracterizacin micromorfolgica, que se realiz usando la tcnica de Tincin Gram [3] para las bacterias, clasificndolas segn su forma celular y composicin de la pared celular; en el caso de los hongos microcultivos [4]. Asimismo, se caracterizaron bioqumicamente las cepas bacterianas y
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fngicas, enfrentndolas a compuestos carbonados simples (glucosa, lactosa) y complejos (pectina, quitina, celulosa, y lignina); actividad lipoltica y proteoltica, fuentes de nitrgeno y de fsforo. Resultados y discusin. En la transecta 1 las formas celulares que predominaron corresponden a los cocos Gram negativo en 37,7% de abundancia, seguidos de un 26,4% para los bastones Gram positivos y negativos, y en menor proporcin los cocos bastones Gram positivos, con un 1,9% de abundancia. Sin embargo, entre las 3 parcelas vari la distribucin de las diferentes formas celulares, encontrndose que a medida que nos alejamos del borde de la fosa, la proporcin de cocos Gram negativos disminuy desde 47,1% en PI a 27,8% en PIII y aumentaron los bastones Gram positivos desde 17,7% en PI a 38,9% en PIII. En la comunidad bacteriana presente en las muestras de suelo de la transecta 2, dominaron los bastones Gram positivos con un 46% de abundancia, seguido de cocos Gram negativos (22%) y bastones y cocos bastones Gram negativos con 16%, cada uno. En las parcelas de esta transecta la tendencia fue similar a la observada en la transecta 1, encontrndose que los cocos Gram negativos disminuyeron de 15% en PI a 5,9% en PIII y los bastones Gram positivos se mantuvieron entre 55% en PI y 58,8% en PIII. En la transecta 3 la mayor proporcin correspondi a los bastones Gram positivos con un 73,2%, los cuales mostraron una gran abundancia en las 3 parcelas consideradas, seguidos por los bastones Gram negativos, con una proporcin de 10,7%. Estos resultados permiten sealar que la presencia y permanencia de las poblaciones bacterianas en los suelos muestreados podran estar sujetas a la capacidad que ellas tienen de metabolizar una determinada fuente de carbono, as como a la disponibilidad de macro y micro nutrientes y al contenido de agua y oxgeno en el suelo, entre otros. En las tres transectas se observaron formas celulares similares, pero distribuidas en proporciones diferentes. Estas
diferencias pueden atribuirse a variaciones microclimticas, a perturbacin ambiental y a la ocupacin de diferentes nichos por las poblaciones bacterianas, lo que se refleja en cambios en la estructura micromorfolgica de dichas poblaciones.
PARCELAS DE LA TRANSECTA 1.
PI PII
PIII
PI PII
PIII
PI PII
PIII
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Fig. 2. Distribucin de los morfotipos bacterianos en las diferentes transectas. En el caso de las poblaciones fngicas en las tres transectas, se observ dominancia de las levaduras. Al estudiar las parcelas por separado, en la transecta 1 se observ dominancia total (100%) de levaduras. En la parcela II de la transecta 2 se aislaron hongos filamentosos del gnero Aspergillus sp. en un 23 %. En la parcela I de la transecta III se registr Fusarium sp. (14 % en PI y 22 % en PIII) y 11 % de Oidium sp. en PIII. Al respecto, [5-6] encontraron que los hongos de los gneros Aspergillus sp. y Fusarium sp. son degradadores de hidrocarburos, lo que explicara la presencia de stos en el rea de influencia de la fosa. La presencia de dichos hongos en estos ambientes impactados supone la produccin de oxigensa en sus membranas citoplasmticas, lo que les permite permanecer en esos ambientes [7]. Esa proporcin de hongos filamentosos con respecto a las levadura puede atribuirse a que los hongos filamentosos del suelo son oportunistas y se inactivan en ausencia de sustancias disponibles, conservando su viabilidad [8]. Al ser oportunistas crecen cuando las condiciones son favorables, llevando a cabo un metabolismo activo [9]. Cabe destacar que las parcelas III se muestran como las zonas ms diversas, tanto en formas celulares como en la permanencia de diferentes hongos. Este comportamiento puede atribuirse a la mayor cobertura vegetal de alto y bajo porte que poseen dichas parcelas. Bajo estas circunstancias, los hongos cumplen funciones, tales como: fragmentacin de las hojas, degradacin de la madera y de la materia orgnica en el suelo. PARCELAS DE LA TRANSECTA 1
PI
PII
PIII
PARCELAS DE LA TRANSECTA 3
PI PII
PIII
En condiciones de laboratorio, las comunidades bacteriana y fngica aisladas de esos ambientes mostraron una importante accin degradativa frente a sustratos simples carbonados (glucosa y lactosa) y complejos (celulosa, lignina, pectina, lignina), adems de actividad lipoltica, por lo que infiere que poseen la capacidad de degradar productos derivados del petrleo, utilizndolos como fuente de carbono y energa. Las comunidades bacteriana y fngica juegan un papel importante en el ciclaje de nutrientes de dichos suelos. Conclusiones.
PARCELAS DE LA TRANSECTA 2
En las transectas estudiadas, las parcelas ms alejadas del impacto de la actividad petrolera mostraron proporciones
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diferentes de morfotipos bacterianos y fngicos, encontrndose mayor porcentaje de bastones Gram positivos y la presencia de hongos del gnero Fusarium sp. y Oidium sp. Las poblaciones bacterianas y fngicas degradaron los sustratos a los que fueron expuestos, en su mayora compuestos complejos como: celulosa, lignina, quitina y pectina, por lo que se puede inferir que esta comunidad microbiana muestra un potencial bioqumico para ser enfrentada a molculas hidrocarbonadas complejas. Agradecimientos. Esta investigacin fue financiada por el Proyecto Misin Ciencias, titulado: Desarrollo, validacin y transferencia de nuevas tecnologas para el saneamiento ambiental de pasivos generados por la actividad petrolera; en el subproyecto 1: Caracterizacin del Medio Fsico Natural en reas Impactadas con hidrocarburos y en el subproyecto 4: Restauracin ecolgica en sectores con pasivos ambientales relacionados con fosas petroleras. Bibliografa.
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DETERMINACIN DE LOS AZUCARES TOTALES Y MONOSACARIDOS PROVENIENTES DE LOS RESIDUOS SLIDOS URBANOS.
Basalda Acosta R.C., Serafin Muoz A.H.*, Cano Canchola C., Alvarez Vargas A, Coreo Alonso A.
Universidad de Guanajuato, Campus Guanajuato, Divisin de Ingenieras, Divisin de Ciencias Naturales y Exactas, Jurez No. 77, zona centro,Guanajuato, Gto. C.P. 36000,01 (473) 1020100, sermuah@quijote.ugto.mx Palabras clave: FORSU, bioetanol, monosacridos.
Introduccin. La acumulacin de Residuos Slidos Urbanos (RSU) generados principalmente como consecuencia de las transformaciones sociales, econmicas y tecnolgicas ofrece una amenaza al ambiente y una oportunidad biotecnolgica al aprovechar los componentes que conforman dichos RSU. Existen trabajos referentes que apoyan los estudios de investigacin para utilizar los RSU como materia prima para la produccin de bioetanol combustible. La generacin de energa proveniente de la basura puede ayudar, no slo a relajar la presin del aumento de la superficie de tiraderos municipales, sino que pudiera ser una forma sostenible de energa [1], tan slo en la ciudad de Guanajuato se genera 150 ton de RSU/da de las cuales la FORSU (Fraccin Orgnica de los Residuos Slidos Urbanos) es 42.7% [2]. El bioetanol puede producirse a partir de fraccin orgnica de los residuos slidos urbanos que contenga cantidades significativas de azcares o compuestos como el almidn o la celulosa que puedan ser transformados en monosacridos fermentables. Actualmente existe un creciente inters por la investigacin en el desarrollo de tecnologas sustentables para la produccin de bioetanol como posible biocombustibles renovable, ya que ofrece una alternativa energtica en sustitucin con los combustibles fsiles, adems que favorece la disminucin de las emisiones atmosfricas contribuyendo con la problemtica del calentamiento global [3-5]. En este trabajo se expone una alternativa del manejo de la FORSU en el que se estudia el contenido de azcares fermentables que posteriormente puede ser utilizado como sustrato para la fermentacin y por consiguiente la produccin de Bioetanol. Metodologa. Inicialmente se realizo la recoleccin de FORSU en los principales mercados de algunas de ciudades del estado de Guanajuato (Central de abastos, Len, Gto.; Mercado Hidalgo, Guanajuato, Gto). Las
muestras recolectadas fueron clasificadas cualitativamente y pesadas. Para el presente estudio, se seleccionaron principalmente residuos de frutas, las muestras seleccionadas fueron: Cscara de pltano (Musa paradisiaca), Cscara de naranja (Citrus aurantium), Cscara de papaya (Carica papaya), Cscara de meln (Cucumis melo) y se obtuvo una mezcla de los residuos antes mencionados. Se procedi con la homogenizacin mecnica de cada una de las muestras en una licuadora industrial de capacidad de 5 L, Reimse, que consisti en molienda y licuado realizado en cinco oportunidades hasta obtener un homogenizado fluido de 1.35 + 0.4 g/ml, posteriormente los homogenizados obtenidos fueron pesados y divididos en dos fracciones para estudio: en una fraccin de cada homogenizado se llevo a cabo la determinacin directa de azcares totales por el mtodo de Dubois [5]. En paralelo, de la segunda fraccin se tomaron muestras, las cuales fueron hidrolizadas mediante hidrlisis cida, HA, por cido sulfrico (0.5-0.75%,v/v,Sigma) e hidrlisis enzimtica, HE, por enzimas comerciales (40mg/g de celulasas de T. reesei, Sigma-Aldrich). La hidrlisis cida fue llevada a cabo a 80oC por una hora en un thermoblock Biometra Trio, mientras que la hidrlisis enzimtica fue llevada a cabo a pH 5.4 en buffer de fosfatos, a 37oC por 24hrs a 140rpm en un micro reactor de capacidad de 0.5 L con agitador mecnico de de rango de 30-500rpm, Corning, acoplado a un termostato tipo MLW de 0-100oC. En ambos diseos experimentales se tomaron 1gr de cada muestra y se realizaron por triplicado. La determinacin de azcares totales provenientes de las muestras tratadas con los dos tipos de hidrlisis (cida y enzimtica) fue determinada por el mtodo de Dubois, utilizando como estndar glucosa, grado reactivo Sigma-Aldrich, [6], por medio de un espectrofotmetro de UV - vis, (Bacharach COLEMAN modelo 35). Para la identificacin de la cantidad de monosacridos presentes en cada una de las muestras, se utilizaron los estndares de
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glucosa, fructuosa, arabinosa, galactosa y manosa grado reactivo, Sigma-Aldrich, mediante el anlisis por cromatografa de intercambio inico (DIONEX ICS 1500) [7-12]. Resultados y discusin. En relacin a las muestras recolectadas de la FORSU provenientes de los mercados en referencia, la mayor parte de los residuos corresponden a vegetales y frutos podridos, 30+6 %, siendo principalmente cscaras y pulpas de meln, papaya, naranja, pltano y hortalizas. Por lo cual se opto como estudio los residuos provenientes de frutas. Una vez homogenizadas las muestras e hidrolizadas mediante hidrlisis cida y enzimtica, se cuantifico la cantidad de azcares totales por el mtodo de Dubois, la ecuacin de la curva de calibracin obtenida a partir de estndar de glucosa en un rango de concentracin de 0-100 g/ml, fue y=0.0045x + 0.0525, como se muestra en FIGURA 1, con un coeficiente de correlacin de, R2= 0.9999.
que en comparacin con la hidrlisis cida. Esta diferencia
muestra correspondiente a la cscara de pltano presento una mayor cantidad de azcares totales mediante la hidrlisis enzimtica, 308.2 3.65 mg/g,
probablemente se derive porque el homogenizado de pltano tenga ms enlaces glucosdicos- en comparacin con los otros homogenizados. En relacin a los resultados obtenidos sin tratamiento de hidrlisis, el homogenizado correspondiente a la mezcla de residuos fue el que presento el mayor valor de azucares totales, 144.3 +4.11, mientras que el valor menor fue el correspondiente al de la papaya, 10.7+ 2.04, lo cual acenta el hecho de que este homogenizado es a fin al tratamiento enzimtico especifico con celulasas. Los valores comparativos entre los tratamientos por hidrlisis cida a diferentes concentraciones de cido sulfrico, 0.5 y 0.75%, arrojan una diferencia notable, IVP 5.5481.30, por lo que es claro observar que se obtiene un mejor rompimiento de polisacridos con HA al 0.75%. Sin embargo, en base a referencias el tratamiento cido puede producir subproductos como aldehdos que pudieran interferir en la cuantificacin de los azcares totales, por lo que se procedi a la identificacin de monosacridos mediante el anlisis por cromatografa de intercambio inico.
TABLA 1. Cantidad de azcares totales(*) presentes en muestras hidrolizadas y sin hidrolizar provenientes de la FORSU. Muestra Sin Tratamiento de Hidrlisis 92.7 3.76 30.5 2.85 134.5 4.31 H. cida 0.5% 163.4 4.50 72.9 3.61 H. cida 0.75% 171.0 4.52 84.2 3.60 235.3 6.39 22.3 2.68 179.0 4.98 H. Enzimtica 308.2 3.65 56.4 3.11 158.9 4.07 62.7 4.17 156.9 3.81
Pltano FIGURA 1. Curva de calibracin a partir de un estndar de glucosa , 0-100g/ml. Meln Naranja
En la TABLA 1, se puede observar la comparacin entre la cantidad de azcares totales presentes en los homogenizados obtenidos sin aplicacin de la hidrlisis y los homogenizados hidrolizados mediante hidrlisis cida y enzimtica. Se observa la mayor cantidad de azcares totales en el homogenizado hidrolizado mediante cido sulfrico al 0.5% correspondiente a la mezcla, 190.7 + 5.07 mg/g, mientras que el valor mnimo de los homogenizados hidrolizados fue el de la conversin por hidrlisis enzimtica de la muestra de meln. La mayora de las muestras presentaron mayor obtencin de azcares mediante hidrlisis cida, sin embargo la
210.2 6.14 23.9 Papaya 10.7 2.04 2.69 190.7 Mezcla 144.3 4.11 5.01 *mg azcares totales/g muestra
La determinacin de los monosacridos fue llevada a cabo por cromatografa de intercambio inico (presin 1839 psi, flujo 0.8ml/min, eluyente
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Homogenizado pltano meln naranja papaya
Glucosa
18.2 +0.81%,
Fructuosa
9.6 +0.81%,
12.5 + 0.2 %,
6.8 + 0.2 %
14.6+0.61%,
12.3+0.61%,
11.0+0.25%
6.9+0.25%
NaOH 4mM, Helio como gas acarreador), las muestras analizadas fueron las provenientes de la hidrlisis enzimtica. En el anlisis de monosacridos se obtuvieron los siguientes coeficientes de correlacin de estndares: Manosa R2=0.9995, Arabinosa R2=0.9999, Glucosa 2 R =0.9998. Los resultados obtenidos se muestran en la Tabla 2, los monosacridos identificados de mayor cantidad (%, w/w) fueron glucosa y fructuosa principalmente. La de mayor concentracin de glucosa, fue la correspondiente para el homogenizado del pltano, 18.2 +0.81%, seguida por la de naranja, 14.6+0.61%, meln 12.5 + 0.2 %, la de menor concentracin fue en el homogenizado de papaya 11.0+0.25%. Para fructuosa, la mayor concentracin fue la correspondiente para el homogenizado del naranja, 12.3+0.61%, seguida por pltano, 9.6 +0.81%, meln 6.8 + 0.2 %, la de menor concentracin fue en el homogenizado de papaya 6.9+0.25%. Los resultados globales corroboran el contenido de azcares totales siendo la concentracin mayoritaria de glucosa en el homogenizado de pltano en donde se observo la mayor conversin en la hidrlisis enzimtica para la obtencin de glucosa en comparacin con los otros homogenizados. Cabe sealarse que en este anlisis el homogenizado de papaya present la menor concentracin a diferencia de los azcares totales donde el menor contenido fue en el de meln, esto probablemente debido a que en el homogenizado de papaya estn presentes otros monosacridos como arabinosa y manosa,3.4 + 0.9 %, 1.2 + 0.4 % respectivamente.
TABLA 2. Cantidad de monosacridos(%, w/w) presentes en muestras hidrolizadas provenientes de la FORSU.
Figura 2. Porcentaje de Glucosa y fructuosa, % w/w, presente en cada una de las muestras tratadas previamente con hidrlisis enzimtica obtenida mediante cromatografa de intercambio inico.
Conclusiones. En los FORSU recolectados, se observo que los principales componentes son de origen vegetal, en mayor contenido hortalizas y cscaras de frutas. Los resultados obtenidos a partir de las hidrlisis efectuadas bajo las condiciones experimentales realizadas en el presente trabajo demostr la factibilidad de los procesos de biodegradacin enzimtica de la FORSU, sin embargo es necesario aumentar el grado de conversin de los residuos para poder optimizar el proceso con la posibilidad de escalarlo a nivel planta piloto. Estos residuos pueden constituir una excelente materia prima, que mediante procesos de biodegradacin pueden obtenerse productos de valor agregado como jarabes o propiamente la obtencin de biocombustibles como bioetanol, por lo que podemos sealar que la fraccin orgnica proveniente de los RSU se proyecta como una excelente fuente de obtencin de azcares fermentables para la etapa de fermentacin. Adems resultados nos abren pauta a trabajo futuro de investigacin para la obtencin de otros biocombustibles potenciales tales como el biogs y biodiesel. Agradecimientos. A la Dra. Alma Serafin, Dra. Carmen Cano
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Canchola, Dr. Francisco Martnez de la Universidad de Guanajuato, M.C. Aurelio lvarez Vargas, M.C. Juan Ignacio Macas Segoviano, al programa de apoyo Beca-Practica del Gobierno del Estado de Guanajuato, al Ing. Guilermo Galvn y Al Sr. Daz del Castillo de la Empresa Manufacturas Diversas S.A. de C.V. por el valioso apoyo en el estudio realizado. Bibliografa.
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ELIMINACIN DE METALES. NITRATOS Y FOSFATOS DE AGUAS RESIDUALES CON M. piperita y H. annuus Y EL EFECTO DE TRES SOPORTES
Torres Caldern J 2., Angulo Riba A. J1., Altamirano Segovia N. E1., Franco Hernndez M. O. 1*
1
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa, Instituto Politcnico Nacional, 2 Escuela Sup. de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas, Instituto Politcnico Nacional, Av. Acueducto S/N Col. La Laguna Ticomn, Mx. DF CP 07340. Tel 57296000 Ext. 56325 *Correo-e: mfrancoh@ipn.mx; iqijtc_1311@yahoo.com.mx Palabras clave: Mentha piperita, aguas residuales, fitorremediacin.
Introduccin. Existen pocos procesos que usen especies vegetales para tratar aguas residuales contaminadas con metales. Una alternativa de tratamiento que est siendo poco a poco ms conocida por sus bajos costos de instalacin y operacin son los denominados humedales artificiales, usando especies vegetales que crecen fcilmente en condiciones hidropnicas. Este tipo de sistemas es usado en un 5.8 % del total de las plantas de tratamiento instaladas en el 2005 en Mxico. Los humedales artificiales, en general, son cuerpos de agua de baja profundidad que retienen temporalmente el agua y que pueden ser diseados con diferentes fines, por ejemplo el formar un hbitat para diversas especies vegetales y animales, generar jardines acuticos decorativos, o bien funcionar como sistemas depuradores de aguas pluviales, entre otros. Los humedales pueden ser construidos de tal forma que el agua se ve en la superficie (superficiales) o bien cuya superficie de agua se encuentre por debajo de un lecho de piedras y prcticamente el agua no se ve (subsuperficiales). Existen ms de 400 especies de plantas repartidas en 45 familias botnicas [2] que podran funcionar como hiperacumuladoras de diferentes contaminantes. Esta capacidad de sobrevivir y crecer en ambientes contaminados, acumulando gran cantidad de contaminantes convierte a las hiperacumuladoras en organismos indicados para la fitoextraccin. La hiperacumulacin en el caso de metales, implica la existencia de mecanismos internos de detoxificacin de los iones metlicos libres, para evitar que puedan causar dao oxidativo a las clulas. La planta puede protegerse formando complejos metlicos estables menos txicos con quelantes (como fitoquelatinas, cidos orgnicos, aminocidos o fenoles de tipo flavonoides) y/o secuestrando los metales desde zonas con un
metabolismo activo (citoplasma) hacia el interior de vacuolas o en la pared celular, dnde no puedan ocasionar efectos adversos [4, 5, 16]. La tolerancia en estas plantas esta determinada por la accin de varios mecanismos internos, que actan conjuntamente. En general, las hiperacumuladoras presentan una tasa de crecimiento baja, poca produccin de biomasa y un sistema radicular pobre, posiblemente debido al coste energtico que supone acumular niveles de metales en su interior que pueden exceder valores tan altos como el 1% del peso seco de la planta. En este proyecto se plantea la fitorremediacin con Mentha piperita y Helianthus annuus, para eliminar compuestos inorgnicos de aguas residuales. La fitorremediacin es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados. Aunque se encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante, debido a la capacidad que tienen algunas especies vegetales de absorber, acumular y/o tolerar altas concentraciones de contaminantes como metales pesados, compuestos orgnicos y radioactivos [1]. El objetivo del presente trabajo fue eliminar metales, nitratos y fosfatos de aguas residuales usando plantas de Mentha piperita (menta), y Helianthus annuus (girasol), mediante cultivos hidropnicos. Metodologa. Se utiliz agua potable como control y agua residual industrial de la planta de tratamiento AISJISU. Muestreo [7, 8, 9], se tomaron muestras al azar del agua residual en las instalaciones de la planta, a la salida del desarenador y reactor biolgico. Anlisis fisicoqumicos y microbiolgicos. Coliformes totales de acuerdo a la [10]. Al inicio y final del experimento se realiz la determinacin de DQO y DBO de acuerdo a lo descrito en la Norma Mexicana NMXAA-028 [11 y 12]. En las muestras de agua y plantas las sales de nitratos y fsforo soluble, se midieron de
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acuerdo a la NOM-021 [13]. La concentracin de metales se realiz mediante digestin cida de las muestras de agua y en el caso de las plantas, las muestras se secaron y se molieron y tambin se sometieron a digestin cida con HNO3, H2SO4 y H2O2 en proporcin 2:3:1, en los extractos se determinaron metales (ICP-OES, 4600DV-Perkin Elmer, USA), [14]. En las plantas adems se evalu el desarrollo (crecimiento y nmero de hojas), Nitrgeno total por el mtodo de Kjeldahl. Las especies vegetales utilizadas fueron Mentha piperita y Helianthus annus, y los tres soportes fueron: tezontle negro, TZN; tezontle rojo, TZR y arcilla, AR. Se hicieron 30 repeticiones por cada planta y por soporte con dos lotes tratamientos. En un lote se recircul agua potable, y en otro lote se us agua residual. Se desarroll un sistema de recirculacin y aireacin semi continua de agua potable (AP) y agua residual (AR), con intervalos de 24 h y 11 L/min. Resultados y discusin. Las condiciones que se establecieron en el sistema utilizado fueron las siguientes: tanque de alimentacin 100 L, aireado con un difusor de 0.5 L aire/min. Volumen de cada cama hidropnica fue de 40 L, flujo de entrada a cada cama hidropnica, 11 L/min y flujo de salida 2 L/min. Los resultados de la caracterizacin del agua residual del desarenador y del reactor biolgico, se presentan en la tabla1. Se utiliz el agua residual a la salida del desarenador de la planta, antes de entrar al reactor biolgico y su caracterizacin se observa en la tabla 1. La DBO a la entrada fue de 88.3 mg O2/L y disminuy a 52.9 mg O2/L, lo cual indica una remocin del 40%, el mismo porcentaje se obtuvo para DQO. Es posible que se requiera de ms tiempo de contacto del agua residual con las plantas para que la DBO y DQO disminuyan a niveles recomendados (80%), y as tener un tratamiento que pudiera competir con los ya existentes. De la caracterizacin microbiolgica del agua residual se obtuvieron los siguientes resultados de coliformes que rebasan lo indicado por la norma, por lo que fue necesario un pretratamiento para bajar esta cuenta microbiana, el pretratamiento usado fue la adicin de hipoclorito de sodio al 2%, durante 24 h, debido a que se ha reportado en la literatura que este tiempo y concentracin son suficientes para eliminar microorganismos patgenos. An as se realiz el anlisis de Salmonella, despus de las 6 semanas del proceso y no se detect presencia de stos microorganismos, lo cual era el resultado esperado.
Tabla 1. Demanda bioqumica y qumica de oxgeno en los diferentes puntos de muestreo del agua residual Punto de muestreo Reactor Desarenador Biolgico 69.5 41.7 1480 740 88.3 52.9 800 400
Parmetro DBO mg/L Inicial DBO mg/L Despus del proceso DQO mg/L inicial DQO mg/L Despus del proceso NOM 002 ECOL-96 DBO NOM 071 ECOL-96 DBO
75-150 mg/L DBO 200 mg/L
La concentracin de fsforo soluble contenido en el agua residual, vari en 44 % (tabla 2). Las sales de nitrato disminuyeron en un 50%, en ambos casos los valores estn por debajo de lo marcado por la normatividad. Comparando con el reactor biolgico de la planta de tratamiento, present una mayor concentracin fsforo soluble y nitratos debido al crecimiento bacteriano. En las aguas residuales de la empresa en estudio, no se han encontrado concentraciones importantes de metales, por lo que las concentraciones totales de Ni, Fe, Cu, Zn, Pb, Cd, K y Cr, presentaron valores por debajo de la normatividad marcada para Mxico [7,8], con respecto a aguas residuales, La concentracin de metales presentes podra proveer de micronutrientes a las plantas y microorganismos del suelo [3]. La concentracin de Cobre fue de 3.7 ppm para los tres soportes y es menor a lo reportado por las normas 001 y 002 para aguas, por lo que en caso de solubilizarse en el agua de riego, no rebasaran los lmites. La concentracin de Fierro contenida en los soportes fue 866 ppm para arcilla, 192 ppm para tezontle negro y 150 ppm para tezontle rojo, por lo que este mismo metal se analiz en las , plantas. En menta la mayor absorcin de Fe y considerando los tres soportes y los dos tipos de agua, se lleva a cabo en la raz concordando con lo que reporta Lasat [6], despus en las hojas y mnima en los tallos (Figura 1.)
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Tabla 2. Caractersticas qumicas del agua residual antes y despus del proceso Parmetro Nitrgeno Total mg Nitrgeno/L
usa tezontle rojo como soporte y entre los otros casos no hubo diferencias significativas. Al analizar el crecimiento de las plantas se obtuvieron alturas de 45 cm. para las plantas de girasol y 35 cm. para la menta usando agua residual, lo cual represent un 40% mas que con agua potable, sin embargo en suelo se han obtenido alturas hasta de 1 m para girasoles y de 70 cm. para la menta, lo cual significa que falta algn nutriente que no esta proporcionando el agua y que probablemente podra ser nitrgeno [15].
6
Punto de muestreo
Fsforo soluble mg P3PO4 /L
Sales de nitrato mg NO3-1/L
DESARENADOR INICIO DEL PROCESO HIDROPONICO DESARENADOR FIN DEL PROCESO HIDROPONICO REACTOR BIOLOGICO
22 X 10-3
33.85
28
15X10
-3
21.3
12
mg fierro/Kg de planta
5 4 3 2 1 0
Hoja
Raz
Tallo
2970X10
-3
232.98
43
Norma 001
20 -30
23-30
40-60
Se observ una mayor concentracin absorbida de fierro en raz y tallo, con arcilla como soporte y agua potable; sin embargo las hojas presentaron una mayor concentracin cuando se uso tezontle rojo como soporte y ligeramente mayor con agua residual. Esto podra ser debido a que el fierro se encuentre en una forma biodisponible. En este caso la mayor absorcin se dio en raz-tallo-hoja. Sin embargo de acuerdo al anlisis estadstico no se encontraron diferencias significativas, lo cual indicara que son los soportes y no el tipo de agua el factor que influye en la absorcin de fierro. En la figura 2 para el caso del H. annus, la mayor cantidad de Fe se encuentra en la flor y despus en la raz y la menor concentracin se da en el tallo y hoja. Analizando la concentracin de fierro en las plantas con respecto a los diferentes soportes usando agua potable, se observa que la mayor concentracin es en Tezontle rojo y la menor en arcilla. En tallo y hoja no hubo diferencia significativa. Cuando se us agua residual, se observaron resultados parecidos, la mayor concentracin se acumul en la flor concordando con la bibliografa [LASAT], teniendo como soporte tezontle rojo. Para la raz igualmente los valores mas altos se presentaron teniendo arcilla como soporte. Para el caso del tallo la mayor absorcin se da cuando se
AP Trojo
AR
AP
AR
AP
AR
Tnegro
Arcilla
Figura 1. Concentracin de Fierro (Fe) en hojas, raz y tallo de plantas de Mentha piperita cultivadas en diferentes soportes (T. rojo, T. negro y arcilla) y regadas con agua potable (AP) y agua residual (AR).
6
mg Fe/ Kg Planta
5 4 3 2 1 0 AP
Tallo y hoja
Raz
Flores
AR Trojo
AP
AR
AP
AR Arcilla
Tnegro
Figura 2. Concentracin de Fierro (Fe) en hojas, raz y tallo de plantas de H. annuus cultivadas en diferentes soportes (T. rojo, T. negro y arcilla) y regadas con agua potable (AP) y residual (AR).
Conclusiones.
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Se estableci un sistema hidropnico con aguas residuales usando dos plantas, girasoles (H. annuus) y menta (M. piperita), con un sistema de recirculacin con un flujo de 11.0 L/min. de agua. El proceso utilizado no fue 100% efectivo, la eliminacin de compuestos de nitratos y fosfatos de las aguas residuales estudiadas fue parcial, alcanzando solo un 40% en la remocin de fosfatos y un 60% en la remocin de nitratos. En general la remocin de compuestos en funcin de la DQO, alcanz un 50%, el valor manejado normalmente en empresas privadas de tratamiento de aguas residuales es de aproximadamente 80 %. Se obtuvo una remocin de potasio y magnesio de 45% y en otros metales como calcio no hubo remocin. Sin embargo en los procesos normales, no hay remocin de metales, por lo que se podra considerar la aplicacin potencial de este proceso. Las especies vegetales usadas tienen potencial para eliminar nitratos y fosfatos de las aguas residuales. Tanto la menta como el girasol absorbieron potasio y fierro, pero no cobre.
Agradecimientos. A la SIP-IPN por el financiamiento otorgado. Proy. 20100147. Bibliografa. 1. Assunao, A.G.L., Da Costa Martins, P., De Folter, S., Vooijs, R., Schat, H. y Aarts, M.G.M. (2001). Elevated expression of metal transporter genes in three accessions of the metal hyperaccumulator Thlaspi caerulescens. Plant Cell Environ. 24: 217-226. 2. Baker, A.J.M., McGrath, S.P., Reeves, R. y Smith, J.A.C. (2000). Metal Hyperaccumulator Plants: A Review of the Ecology and Physiology of a Biological Resource for Phytoremediation of Metal-Polluted Soils. En: Phytoremediation of Contaminated Soil and Water. (eds Terry, N. y Bauelos, G.), Lewis Publishers, Boca Raton, FL, USA. pp. 85-107 3. Baker, A.J.M. (1981). Accumulators and excludersstrategies in the response of plants to heavy metals. J. Plant Nutrition 3:643-654. 4. Barcel, J. Poschenrieder, C. (2002). Fast root growth responses, root exudates, and internal detoxification as clues to the mechanisms of aluminum toxicity and resistance: a review. Environ. Exp. Bot. 48: 75-92. 5. Krmer, U., Cotter-Howells, J.D., Charnock, J.M., Baker, A.J.M. y Smith, J.A.C. (1996). Free histidina as a metal chelator in plants that accumulate nickel. Nature 379: 635638. 6. Lasat. M. M., Pence. N. S., Garvin. D. F. (2000). Molecular physiology of zinc transport in the Zn hyperaccumulator Thlaspicaerulescens. J Exp Botany., pp. 71_79. 7. Norma Oficial Mexicana NOM-001-ECOL-1993. 8. Norma Oficial Mexicana NOM-002-ECOL-1996.
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ANLISIS DE CICLO DE VIDA DE LA CUNA A LA CUNAAPLICADO A LA PRODUCCIN DE BIODIESEL

Paola Acevedo 1, Viatcheslav Kafarov 1*, Sam Mannan 2
1
Universidad Industrial de Santander, 2 Artie McFerrin Department of Chemical Engineerring Texas A&M University, * Universidad Industrial de Santander, Carrera 27 Calle 9 Edificio de Ingeniera Qumica (Bucaramanga, Santander, Colombia), 6344000, kafarov@uis.edu.co. Palabras clave: Anlisis de Ciclo de Vida, Biodiesel, Higuerilla.
ABSTRACT En las ltimas dos dcadas el inters por el uso del biodiesel como alternativa al diesel proveniente del petrleo ha venido en aumento debido a su carcter renovable y amigable con el medio. Sin embargo, en aos ms recientes, diferentes Anlisis de Ciclo de Vida (ACV) realizados a biodiesels elaborados con diferentes materias primas han puesto en tela de juicio la sostenibilidad de este producto ya que los estudios realizados no reportan resultados unnimes. Las principales razones por las cuales los diferentes anlisis llegan a conclusiones diferentes son: los estudios no contemplan las mismas etapas del ciclo de vida, los anlisis son realizados para escenarios completamente diferentes y, en algunos casos, se tiene parcialidad por parte de los autores. Con el objeto de superar las dos primeras limitaciones y hacer comparables los resultados se propone el uso de la metodologa de la cuna a la cuna. Dentro del presente trabajo se describe la metodologa mencionada y se aplica a un escenario de la geografa colombiana para la produccin de biodiesel de higuerilla. Introduccin. En la historia de la sociedad humana los sistemas naturales han sido la fuente de recursos y sumideros de residuos, inicialmente y durante mucho tiempo percibidos como ilimitados; en la medida en que la poblacin mundial fue aumentando y los procesos de explotacin alcanzaron escalas industriales, se intensific el uso de la naturaleza sin que los flujos desde y hacia ella fueran incluidos en los balances, hasta el punto de que se estn detectando en forma tarda graves problemas ambientales de los modelos y prcticas de desarrollo y crecimiento de la poblacin humana. En la situacin descrita el ejemplo ms significativo ha sido el manejo de las fuentes de energa y la disposicin de sus residuos y en la historia reciente el uso y disposicin de combustibles fsiles, la bsqueda de sustitutos en
especial gaseosos y lquidos hasta desembocar en el auge y esperanza de solucin a travs de los biocombustibles. El petrleo hoy muestra dramticamente su escasez, su alta participacin en la contaminacin atmosfrica y la necesidad de buscarle sustitutos renovables; muchas alternativas se proponen y entre ellas los alcoholes carburantes, biodiesel, celdas de combustible, celdas solares, etc. Recientemente, inspirados por el modelo de desarrollo sostenible que tiene impulsores en todo el mundo, se han desarrollado instrumentos analticos y de gestin orientados a incluir la variable ambiental y los flujos desde y hacia la naturaleza en los balances, con el nombre y categora genrica de impacto ambiental, en las cuentas, en los criterios sobre proyectos e inversiones y en la toma decisiones sobre inversiones y produccin. Pasando por muy numerosas metodologa intermedias que se concentraron inicialmente en etapas individuales del ciclo de vida de un producto, se fue incluyendo el impacto ambiental en los anlisis. Con esfuerzos posteriores se llega a una metodologa que tiene significativos avances con respecto a las anteriores y supera varias de sus limitaciones y en particular integra en un nico instrumento de anlisis y cuentas, los impactos ambientales de las diversas etapas del ciclo de vida de un producto. Se trata del Anlisis del ciclo de vida, con el paradigma de la cuna a la tumba. No obstante, esta metodologa tiene an limitaciones y entre ellas las ms significativas son la libertad que se deja a la escogencia de la cuna de un producto y de la tumba del mismo, que no se cierran los ciclos de los flujos de materia y energa, que cada anlisis es vlido para el escenario de referencia y por tanto los resultados de uno y otro ACV no son o son difcilmente comparables. Para superarlas las anteriores dificultades se necesita el enfoque de la cuna a la cuna que precisamente coloca la cuna de un producto en el mismo sitio de su tumba y por tanto pretende cerrar los ciclos. No se supera la dependencia de los resultados del ACV con respecto al escenario, en el
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sentido de que los resultados sern diferentes para cada escenario pero se obtienen resultados que al corresponder a marcos conceptuales y metodologas unificadas, permiten comparar los efectos e impactos precisamente. Metodologa. El propsito del ACV desde su concepcin ha sido el de analizar procesos, incluyendo las etapas que lo preceden y las necesarias para la obtencin de las materias primas. Las normas ISO 14040 y 14044 (2006) contienen los lineamientos generales de la metodologa ACV, pero debido a que estos documentos no son lo suficientemente explcitos es que los resultados entre uno y otro ACV no son consistentes. Las normas contemplan un enfoque de la cuna al tumba, donde se fija un inicio y un fin en el ciclo de vida del producto. Normalmente la ltima etapa que se analiza en un ACV es la disposicin y uso, sin tener en cuenta etapas como reciclaje y se ignoran los ciclos biogeoqumicos de la naturaleza. Con el enfoque que se propone, de la cuna a la cuna, se pretende cerrar los ciclos. Sin embargo, para poder hablar acerca de un anlisis de la cuna a la cuna en un sentido estricto se deben cerrar todos los ciclos de todas las sustancias que ingresan al sistema y no nicamente el ciclo principal del producto principal. No obstante, siempre en algn punto se tendr que delimitar el anlisis, de lo contrario se convertira en una tarea imposible. Algunas suposiciones son necesarias para definir un sistema prctico. En este orden de ideas, los ACVs de la cuna a la cuna para comparar biodiesels deben realizarse al ciclo principal que incluye las etapas presentadas en la figura 1, usando resultados de ACVs de la cuna a la tumba para las sustancias que ingresan al sistema (e.g. metanol).
Figura 1. Ciclo de Vida para la produccin de biodiesel. El ciclo principal se cierra teniendo en cuenta que un porcentaje de los residuos totales es fijado por la naturaleza gracias a los diferentes ciclos biogeoqumicos (ciclos de carbono y nitrgeno). En lo que respecta a la calidad de los datos y variacin espacial, se propone el uso de datos que correspondan al rea geogrfica especfica del caso de estudio. La comparacin entre datos de reas con caractersticas similares es importante para corroborar su consistencia. Por otro lado, el que los datos varen dependiendo del escenario y del sistema se convierte en una ventaja cuando lo que se quiere es realizar estudios comparativos. De acuerdo con la normativa ISO 14040 un estudio de ACV est compuesto por cuatro fases: definicin del objetivo y alcance, anlisis de inventario, evaluacin del impacto e interpretacin de resultados. Los cuatro elementos que estructura el ACV no solo son secuenciales, sino tambin son iterativos entre s, como puede observarse en la figura 1.
Figura 2. Etapas de un ACV. Fuente: ISO 14040, 2006. Definicin de objetivos y alcance del estudio. La definicin del alcance y objetivos es la primera etapa del anlisis del ciclo de vida, en la cual se busca definir sin ambigedades cules son las metas del estudio. Adems, se establece la unidad funcional, las funciones del sistema del producto, el sistema del producto a estudiar, los lmites del sistema del producto, las reglas de asignacin, los tipos de impacto y la metodologa de evaluacin y los requisitos de los datos. El propsito de este estudio fue examinar la sostenibilidad ambiental del sistema de produccin del biodiesel a partir del aceite de higuerilla a travs
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de la tcnica de Anlisis de Ciclo de Vida mediante la metodologa de la cuna a la cuna con la que se pretendi integrar los ciclos biogeoqumicos de la naturaleza junto con los modelos correspondientes a cada una de las etapas del proceso. La funcin del producto fue servir como combustible para un vehculo que trabaje con mezclas de diesel de origen fsil y vegetal tomando como unidad funcional la capacidad de produccin de la planta de biodiesel (80.000 ton/ao). Los sistemas involucrados en el ACV del biodiesel fueron: actividad agrcola e integracin de los ciclos biogeoqumicos, extraccin del aceite de ricino, transesterificacin del aceite y distribucin y uso del biocombustible. Por otra parte se tom 60 aos como horizonte temporal y un nico escenario para el anlisis constituido por sabana como tipo de terreno en la regin del Magdalena Medio colombiano y semilla de higuerilla de tipo blanca moteada. Adems, no se tuvo en cuenta la etapa de construccin ni el mantenimiento de la infraestructura de la planta, no se incluyeron factores econmicos, factores sociales, y fenmenos naturales catastrficos. Para el caso de los insumos empleados en el proceso diferentes a los provenientes de la cadena de higuerilla, se estableci una cuna y una tumba. Ciertos impactos ambientales no fueron cubiertos en su totalidad, debido a la dificultad en la recoleccin de datos para las condiciones locales. Respecto a las reglas de asignacin se sigui la jerarqua propuesta por la norma ISO 14040 y se aplicaron en las etapas de extraccin y transesterificacin. Siguiendo la metodologa reportada por Antn (2004), para la evaluacin de los diferentes impactos se tuvieron en cuenta las siguientes categoras: cambio climtico, formacin de oxidantes foto-qumicos, acidificacin, eutrofizacin, efectos respiratorios y energa no renovable teniendo en cuenta que no se desestimaron datos, pero, se reconoce el grado de incertidumbre inherente a ellos. Para los procesos en los cuales no se encontraron datos primarios, se recurri al uso de datos de fuentes ya publicadas. Para el caso de las emisiones resultantes y de la energa consumida en los procesos de produccin de los insumos, electricidad, y vapor, al igual que los gases de combustin provenientes de los diferentes medios de transporte empleados en las distintas etapas del estudio, se colectaron los datos de fuentes tales como Sheehan et al., 1998; Lechn, 2006; Cardim de Carvalho Filho, 2001; Universidad de Chile, 2007; EPA, 2004; ECETOC, 1994; Sinha & Haldar, 2006.
Anlisis de Inventario. En esta etapa del ACV se contabilizaron los flujos ambientales y energticos de las diferentes materias primas y procesos involucrados en el ciclo de vida del biodiesel obtenido a partir de higuerilla mediante el desarrollo de los balances de masa y energa. Para la recoleccin de los datos, el ciclo de vida del biodiesel se dividi en cuatro etapas que fueron mencionadas anteriormente. 1. Actividad agrcola e integracin de los ciclos biogeoqumicos: En la etapa de la actividad agrcola se involucr la identificacin y contabilizacin de los flujos ambientales y energticos asociados con la produccin de la semilla de higuerilla, y se tuvo en cuenta todas las labores relacionadas con la parte agrcola, as como todos los procesos de produccin y transporte de los insumos. Para esto se consider que el terreno en el cual se desarroll el cultivo era tipo sabana y no presentaba vegetacin alta. Adems, no se realiz rotacin con otro cultivo. Durante el tiempo de estudio del ACV se estableci que el terreno sera productivo durante cuatro aos, pasado este tiempo, se le realizara una limpieza, y finalmente, el terreno entrara en un periodo de recuperacin por cuatro aos. Este ciclo se repiti hasta terminar el tiempo de estudio del ACV. Por lo tanto, se mantuvo un cultivo alterno para suplir la produccin de semilla que se dej de obtener mientras el terreno estaba en reposo. Adicionalmente, no se consideraron efectos por el uso de agroqumicos (herbicidas, pesticidas, insecticidas, entre otros) debido a que para la higuerilla an no se tienen los productos especficos a emplear. Adems, no se cuenta con datos referentes a stos (Audsley, 2003) y segn la literatura su aporte es mnimo (Da Costa et al., 2005). Se consider la integracin del ciclo del carbono y del nitrgeno en la etapa del cultivo de la higuerilla teniendo en cuenta que un porcentaje de los residuos vertidos al medio ambiente son fijados por la naturaleza gracias a los diferentes ciclos biogeoqumicos. 2. Extraccin del aceite de ricino: Se eligi como mecanismo de extraccin inicialmente un prensado y, posteriormente para remover el contenido de aceite residual en la torta una extraccin con solvente. El aceite crudo obtenido se someti a un proceso de desgomado y neutralizacin. 3. Transesterificacin del aceite: El proceso de transformacin a biodiesel se fundamenta en la reaccin del aceite de ricino con el metanol en presencia del sulfato de zirconio como catalizador, la cual da como resultado el biodiesel y glicerina. Para
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esto se tuvo en cuenta las siguientes etapas: obtencin del ster, purificacin del biodiesel, purificacin de la glicerina y recuperacin del metanol. 4. Distribucin y uso del biocombustible: Incluye los impactos provenientes de la distribucin del biodiesel, la mezcla B10 y la combustin de sta en un vehculo de carga pesada. Evaluacin de impacto. La evaluacin de impacto tiene por objeto valorar los resultados del anlisis de inventario del producto o servicio en cuestin, cuantificando los impactos medioambientales. El procedimiento a seguir es: seleccionar y definir las categoras de impacto, donde los indicadores de stas y los modelos de estimacin, buscan precisar los efectos sobre el medio ambiente que causa el sistema en estudio; clasificar las emisiones con el fin de asignarlas a cada una de las categoras de impacto previamente seleccionadas y, caracterizar los datos del inventario para modelarlos mediante los factores de equivalencia a cada una de las categoras de impacto. Cada categora de impacto se representa por medio del indicador de la categora, el cual es la adicin de diferentes intervenciones ambientales ocasionadas por las diferentes sustancias que la conforman. Interpretacin de ciclo de vida. En la cuarta fase del ACV se combinan los resultados del anlisis de inventario con la evaluacin de impacto, con el fin de realizar una evaluacin de las incertidumbres y generar un informe con las conclusiones y recomendaciones. Resultados y discusin. Para interpretar los datos obtenidos del anlisis de inventario fue necesario evaluar el impacto ambiental asociado con las emisiones y usos de las fuentes naturales. Cada categora de impacto se represent por medio del indicador de la categora, el cual es la adicin de diferentes intervenciones ambientales ocasionadas por las diferentes sustancias que la conforman. En la clasificacin de las emisiones cada intervencin ambiental se asoci con las categoras de impacto en las que ella tiene un efecto; por ejemplo, el CO2 est asociado con el cambio climtico. Una vez clasificados los datos, se realiz la adicin de stos para cada una de las categoras empleando los factores de equivalencia y la siguiente ecuacin:
Ind . categora impacto = mi ( factor de equivalencia )i
i
donde mi es la emisin del recurso utilizado y (factor de equivalencia)i es propio para cada recurso (Antn, 2004). Con los resultados obtenidos se calcul el porcentaje de participacin que tiene cada una de las etapas consideradas para la produccin del biodiesel en las diferentes categoras de impacto. El perfil medioambiental refleja que la distribucin y uso es la etapa que tiene una mayor participacin en todas las categoras sin olvidar que las otras etapas contribuyen en una menor proporcin, como se aprecia en la figura 3.
Figura 3. Perfil medioambiental. En el indicador de cambio climtico los mayores porcentajes de participacin los tienen la distribucin y uso y, la adecuacin e integracin de los ciclos; sin embargo, el efecto que tiene cada una de stas es opuesto. La adecuacin del terreno e integracin de los ciclos disminuye los kg-eq. de CO2 emitidos a la atmsfera gracias a la fotosntesis de las plantas, dando como resultado una reduccin en el indicador, fenmeno que no se presenta en las dems etapas del proceso. El escenario en el que se desarroll la cadena de produccin de la higuerilla promueve la acidificacin, categora generada principalmente por las emisiones de dixido de azufre y xidos de nitrgeno producidas por el consumo de combustibles fsiles en la distribucin y uso de la mezcla B10, presentando un mayor aporte el NOx,, a pesar que su potencial de acidificacin es ms bajo que el reportado para el SO2.
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Las mismas emisiones de xidos de nitrgeno tambin favorecen el enriquecimiento de nutrientes de las reservas acuticas y suelos agrcolas, por consiguiente, aumenta la eutrofizacin. Cabe resaltar, que la integracin de los ciclos en el ACV contribuye a la disminucin del anterior fenmeno por medio de la captura del nitrgeno atmosfrico por parte de los microorganismos presentes en el suelo. En las categoras de formacin de oxidantes fotoqumicos y efectos respiratorios, nuevamente las mayores contribuciones son debidas a la distribucin y uso de la mezcla, aunque las fuentes generadoras son diferentes; para el caso de la formacin de oxidantes, los mayores contribuyentes son los hidrocarburos (no incluye CH4) producidos en la combustin del B10, y para los efectos respiratorios son el NO2 y el PM emitidos principalmente al ambiente en las etapas de adecuacin, extraccin y distribucin por el gasto de combustible de origen fsil y el consumo de electricidad. La categora de impacto para el consumo de energa no renovable reflej que su mayor participante es la etapa de distribucin y uso, resultado esperado por el amplio requerimiento de petrleo para la produccin del diesel presente en la mezcla B10. Conclusiones. - Al integrar como una etapa ms los ciclos biogeoqumicos de la naturaleza, la implementacin de la metodologa de la cuna a la cuna en el ACV permiti evaluar el impacto real en el ambiente que tiene la produccin de biodiesel a partir de aceite de ricino. - A travs de la cuantificacin de los flujos de entrada y salida en las diferentes etapas del proceso se pudo conocer las emisiones ms relevantes en cada una de ellas junto con el consumo energtico asociado. - El perfil medioambiental elaborado refleja que la etapa de distribucin y uso de la mezcla B10 es aquella que ejerce mayor influencia tanto en las categoras de impacto de salida como en la categora de impacto de entrada. Bibliografa.
Antn, M. A. (2004). Utilizacin del anlisis del ciclo de vida en la evaluacin del impacto ambiental del cultivo bajo invernadero mediterrneo. Tesis de Doctorado para la obtencin del ttulo de Doctor en Ingeniera Ambiental, Universitat Politcnica de Catalunya, Barcelona, Espaa. Audsley, E. et al. (2003). Harmonisation of environmental life cycle assessment for agriculture : Final Report [Versin electrnica]. European Commission DG VI Agriculture.
Cardim de Carvalho Filho, A. (2001). Anlisis del ciclo de vida de productos derivados del cemento Aportaciones al anlisis de los inventarios del ciclo de vida del cemento. Tesis de Doctorado para la obtencin del ttulo Doctor en Ingeniera Civil, Universidad Politcnica de Catalua, Escuela Tcnica Superior de Ingenieros de Caminos, Canales y Puertos de Barcelona, Barcelona, Espaa. Da Costa, R. E. (2005). The energy balance in the production of palm oil biodiesel -Two case studies: Brazil and Colombia [Versin electrnica]. CENIPALMA, 1-5. Environmental Protection Agency. (2002). A Comprehensive Analysis of Biodiesel Impacts on Exhaust Emissions Draft Technical Report. Estados Unidos: EPA. European Centre for Ecotoxicology and Toxicology of Chemicals. (1994). Technical Report 62: Ammonia Emissions to Air in Western Europe. Belgium: ECETOC. International Organization for Standardization. (2006). Environmental management - Life cycle assessment Principles and framework. Geneva: ISO 14040. International Organization for Standardization. (2006). Environmental management Life cycle assessment Goal and scope definition and inventory analysis. Geneva: ISO 14044. Lechn, Y. et al. (2006). Anlisis de Ciclo de Vida de Combustibles Alternativos para el Transporte. (Fase II. Anlisis de Ciclo de Vida Comparativo de Biodiesel y Diesel). Espaa: Ministerio de Medio Ambiente Centro de Investigaciones Energticas, Medioambientales y Tecnolgicas. Sheenan, J. et al. (1998). Life Cycle Inventory of Biodiesel and Petroleum Diesel for Use in an Urban Bus. Estados Unidos: U.S. Department of Energy. Sinha, A. D. & Haldar, C. (2006). Renewable Fuel from Castor Oil [Versin electrnica]. Universidad de Chile. (2007). Actualizacin de factores de emisin para buses y transporte de carga de la regin metropolitana. Santiago de Chile: Fundacin para la transferencia tecnolgica.
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EVALUACIN EXERGTICA DE LA PRODUCCIN DE BIODIESEL DE PALMA VA CATLISIS HETEROGNEA

Paola Acevedo, Wilmer Jaimes, Viatcheslav Kafarov*
Universidad Industrial de Santander, Carrera 27 Calle 9 Bucaramanga Colombia +57 7 6344000 ext. 2603, vkafarov@gmail.com Palabras clave: Anlisis Exergtico, Biodiesel, Aceite de Palma Resumen La necesidad actual de nuevas fuentes de energa y adicionalmente que sean amigables con el ambiente han venido implementando en los ltimos aos los llamados biocombustibles y especialmente aquellos provenientes de cultivos oleaginosos, como la soya, el maz, colza, higuerilla, coco, palma, entre otros, este ltimo en especial por sus altos rendimientos por hectrea, variedad de usos a los co-productos, viabilidad econmica entre otros, son los que dan al biodiesel de palma una gran ventaja. En este trabajo, el proceso de produccin de Biodiesel incluy tres etapas: 1. Un pretratamiento que consiste en la hidrlisis de los triglicridos del aceite de palma, 2. La esterificacin de los cidos grasos usando catlisis heterognea acida, 3. La etapa de separacin y purificacin. El anlisis realizado se llevo a cabo mediante la metodologa propuesta por Dincer y Rocen, adems de otros autores que han realizado trabajos en este campo, donde al aplicar los conceptos de primera y segunda ley de la termodinmica es posible determinar la calidad de la energa usada y aquella que la cual pudiera ser til. Mediante las eficiencias energticas y exergticas aplicadas a cada uno de las etapas del proceso se encontr que las mayores perdidas exergticos estn en el sistema de separacin y purificacin adems de la ausencia de integracin energticas. Adicionalmente la metodologa desarrollada puede ser usada como herramienta para lograr procesos ms eficientes y ambientalmente sostenibles. Tambin como un instrumento de comparacin con otros procesos de produccin de biodiesel y de fuentes diferentes. Introduccin. Actualmente, el biodiesel es considerado como uno de los combustibles ms amigables con el medio ambiente, comparado con los aceites y otros combustibles de origen fsil porque cumple con varios de los criterios referentes a la sostenibilidad ambiental. Este combustible posee algunas desventajas, como el menor poder calorfico en relacin con el diesel fsil, aunque tambin unos de los puntos ms favorables es su alta relacin energa-producida/energa-consumida para su produccin, cercana a las 6.5 veces y sus rendimientos por hectrea de 5550 l/ha-ao aproximadamente. Por tanto la evaluacin de la eficiencia exergtica del proceso de produccin de biodiesel a partir de aceite de palma es muy importante para validar la sostenibilidad de este proceso; para llevar a cabo esto, fue necesario aplicar la metodologa de anlisis exergtico. De acuerdo con Dincer and Rosen (2007) [1], el anlisis energtico es un mtodo tradicional de evaluacin energtica de procesos fsicos y qumicos con transferencia y/o conversin de energa. Este anlisis implica solo balances de energa o balances de primera ley de la termodinmica (PLT) y la evaluacin de las eficiencias; pero un balance de energa no provee informacin sobre la degradacin de la energa o recurso durante un proceso y no cuantifica la utilidad o la calidad de una corriente de masa, energa o de un producto o residuo. La metodologa de anlisis exergtico corrige las limitaciones de la PLT, porque el concepto de exerga est basado tanto en la PLT como en la Segunda Ley de la Termodinmica (SLT). El anlisis exergtico indica la ubicacin donde se est llevando a cabo la degradacin de la energa en un proceso, y que puede servir para el desarrollo de mejoras en los procesos y/o tecnologas, adems puede cuantificar la energa til de una corriente de desecho. Uno de los objetivos principales del anlisis exergtico es evaluar la eficiencia exergtica, las causas y la magnitud real de las prdidas de exerga, pero la exerga de un sistema depende del Ambiente Estable de Referencia (AER) y una mala eleccin de ste, puede llevar a resultados errneos del anlisis. La exerga total involucra una componente fsica, qumica, cintica y potencial pero para este trabajo se considero despreciable las exergas cintica y potencial. Metodologa. La metodologa aplicada en este trabajo es la propuesta principalmente por Dincer y Rosen (2007) [1] y otros autores que han centrado sus trabajos en este campo, como Sorin et. al. (1998), Talens et. al
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(2007), Koroneos et. al (2003), Wall (1988)[2-4], adems de unas gua estipuladas en el Reference Standard Environment (RSE), en donde, como primera instancia se procedi a simular el proceso en Aspen Hysys teniendo en cuenta tres etapas fundamentales, una que fue la Hidrlisis de los triglicridos presentes en el aceite crudo de palma bajo condiciones estudiadas ampliamente por Saka y Kusdiana (2001, 2004, 2006) [6-8] como eran vapor de agua de 290 y 20 MPa de presin y una C relacin Agua/aceite de 60:1 logrando conversiones superiores al 70%, la segunda etapa es la esterificacin heterognea de los cidos grasos provenientes de la etapa anterior usando el Sulfato de Zirconio como catalizador y en condiciones de 120 y 0,45 MPa y una relacin molar etanol/Acido C Grasos = 100 como lo reportaron trabajos realizados por Lpez et al (2008), Kumar y Rajesh (2008), Suwannakarn et al. (2008), Mekhemer (2006) y Busto et al. (2008) [9-13] y se considero el modelo Langmuir-Hinshelwood-Hougen-Watson para predecir el comportamiento de reactor. La ltima etapa consiste en los procesos de separacin del etanol en exceso el cual se recircula y la respectiva purificacin del Biodiesel y la glicerina como los productos principales del proceso. Una vez simulado el proceso se procedi a realizar los balances de 2da ley (entropa) y de exerga donde era necesario conocer propiedades especficas de cada unas de las corrientes como son entalpias, entropas, calores, corrientes de energa, y otras propiedades que la simulacin nos suministraba. Balance de 2da ley o entropa, ecuacin 1. (1) Balance global de exerga, ecuacin 2. (2) Donde, la exerga de flujo corresponde a las exergas fsica o de flujo, qumicas, potencial y cinticas, ecuacin 3. (3) Para realizar el balance de exerga se considero nicamente la exerga fsica y qumica de las corrientes (despreciando la cintica y potencial), donde la exerga fsica est definida por la ecuacin 4. (4) Para la exerga qumica de las corrientes era necesario conocer las exerga qumicas de cada uno
de los componentes individuales y esto involucra exerga de compuestos poco usuales, como eran los cidos grasos y triglicridos, para estos casos, se consider lo siguiente: La exerga qumica de los compuestos individuales se tuvo en cuenta la ecuacin 5 propuesta por Ayres and Ayres (1999), Szargut et al. (1988) [14,15], donde es la exerga qumica del compuesto por , la exerga qumica de los componentes mol, elementales y es el nmero de tomos de los elementos del compuesto y es la energa libre de Gibbs de formacin del compuesto. (5) La exerga qumica de una corrientes del proceso se evalu mediante la ecuacin 6, donde es la fraccin molar del compuesto , es la exerga qumica del compuesto como componente puro. (6) Siguiendo con el balance de exerga, la exerga debida a un flujo de calor y al trabajo son descritas por las ecuaciones 7 y 8.
(7) (8) Una vez realizados los balances de entropa y exerga a cada uno de las etapas y equipos que conforman la planta de produccin de biodiesel, fue posible confrontar los valores encontrados para la exerga destruida gracias al Teorema Gouy Stodola, donde dice que la exerga destruida en un proceso es igual a la entropa total generada multiplicada por la temperatura de referencia, ecuacin 9. (9) Resultados y discusin. Los principales resultados de este trabajo se presentan en forma de figuras y tablas a continuacin:
Tabla 1. Eficiencias e irreversibilidades de algunos equipos usados en la produccin de Biodiesel. Equipos Bomba B1 Bomba B2 Bomba B5 Eficiencias 37% 68% 67% kJ/h 618.825 85.282 30.571
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Intercambiador E - 100 Intercambiador E - 101 Intercambiador E - 104 Vlvula VLV - 100 Vlvula VLV - 102 Vlvula VLV - 103 Reactor CRV - 100 Reactor PFR - 100 Columna T - 100 Columna T - 101
98% 77% 77% 96% 82% 28% 80% 98% 25% 69%
11.300.722 20.908.468 476.542 1.663.487 796.848 12.936.787 1.095.737 519.170 2.645.845 5.215.243
Figura 1. Este diagrama representa la distribucin de la exerga fsica en el proceso global de produccin de biodiesel del caso de estudio.
Figura 1. Simulacin en Aspen Hysys 6.5 del procesos de produccin de biodiesel de aceite de palma va catlisis heterognea.
Conclusiones. Con la metodologa del anlisis exergtico se estimaron las irreversibilidades o perdidas exergticas del proceso de produccin de biodiesel de aceite de palma en 106.739 MJ/h teniendo como base de clculo 80.000 ton/ao de biodiesel (capacidad promedio de una planta en Colombia), en los sistemas de separacin estn las mayores prdidas exergticas del proceso con un valor cercano al 40%. Con la implementacin de sistemas de integracin energtica al proceso es posible aumentar considerablemente las eficiencias tanto energticas
como exergticas. Agradecimientos. Programa Iberoamericano de Ciencia y Tecnologa para el Desarrollo (CYTED) proyectos 306RTO279 Nuevas Tecnologas para la Produccin de Biocombustibles, y el Departamento Administrativo de Ciencia, Tecnologa e Innovacin (COLCIENCIAS) cdigos CT 475-2007 y CT 2722008. Bibliografa.
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FERMENTACIN EN SUSTRATO SLIDO DE BAGAZO ALGAL PARA LA PRODUCCIN CIDOS GRASOS

Avendao Morales B1, Hernndez-Martnez R2, Garca Mendoza E3, Daz Jimnez L4, Rodrguez Varela J4, Valdez-Vazquez I1*
1
Depto. de Biotecnologa Marina, Depto. de Microbiologa, Dpto. de Ecologa Marina, CICESE, Baja California, Mxico. 4Depto. de Recursos Naturales y Energticos, CINVESTAV, Saltillo, Mxico. * E-mail: valdez_idania@yahoo.com Palabras clave: cidos grasos, fermentacin, hongos filamentosos.
Introduccin Debido a la alta demanda de combustibles es necesario ampliar los estudios de su produccin de manera sustentable. En este aspecto el Biodiesel es una opcin interesante por sus mltiples ventajas frente a los combustibles de origen fsil [1]. Sin embargo, su produccin a partir de grasas vegetales o animales no es suficiente para cubrir la demanda actual y futura, por lo que es necesario el estudio de fuentes alternas como los lpidos sintetizados por microorganismos oleaginosos como ciertos gneros de hongos filamentosos que tienen la capacidad de producir cidos grasos (materia prima para la generacin de Biodiesel) mediante la fermentacin en sustrato slido (FSS) [2]. Para que la FSS sea econmicamente atractiva debe de generar una alta cantidad del producto deseado, en un corto periodo de tiempo y utilizar como matriz a fermentar un residuo local abundante y de bajo costo [3]. El objetivo del presente estudio fue producir cidos grasos a partir de la FSS de bagazo de un algal roja Gelidium robustum generado en industrias locales. Metodologa Aislamiento y seleccin de hongos filamentosos Para el aislamiento de hongos filamentosos en medio PDA se tomaron muestras de sedimentos marinos, lama, algas, del ambiente del Laboratorio de Biotecnologa Ambiental y Biocombustibles y en casas particulares en Ensenada Baja California Mxico, Los aislados fueron crecidos por 3 das en un medio con dficit de nitrgeno y una alta cantidad de carbono para inducir la acumulacin de lpidos [4]. Despus del periodo de incubacin a 30 con C agitacin constante se realizaron tinciones del micelio con el colorante Negro Sudn B para observar los cuerpos lipdicos intracelulares [5]. La extraccin de lpidos en las cepas positivas, se realiz con solventes segn lo reportado por Cunniff [6]
Identificacin molecular Para la identificacin molecular de las cepas fngicas seleccionadas se amplific por PCR un fragmento de la regin del espaciador transcrito interno (ITS por sus siglas en ingls) [7] y de la protena -tubulina [8]. Los fragmentos obtenidos fueron purificados con el kit QIAquick de Quiagen y secuenciados por Eton Bioscience, Inc., San Diego California. Se generaron rboles filogenticos consenso a partir del anlisis de las secuencias obtenidas y de otras reportadas en el banco de genes del NCBI usando el mtodo del vecino ms cercano en MEGA [9]. Ensayo de fermentacin en sustrato slido Para el ensayo de FSS se utiliz un diseo factorial completo 2^2 para evaluar el efecto de la temperatura (21 y 26 y humedad (50 y C) 80 %) sobre la produccin de cidos grasos (tabla I). La extraccin de lpidos se realiz mediante la tcnica reportada por Bligh Dyer [10] y los resultados fueron expresados en trminos de lpidos producidos por unidad de sustrato seco adicionado (mglip/gsc). Los resultados fueron sujetos de un anlisis de varianza (ANOVA) con un nivel de significancia del 0.05.
Tabla I. Diseo factorial completo para el ensayo de Fermentacin en Sustrato Slido Factor Humedad (%) Temperatura ( C) Bajo 50 21 Niveles Alto 80 26
Para llevar a cabo el ensayo de FSS, el bagazo algal seco fue molido y esterilizado. Para cada tratamiento se mezclaron 5 g de bagazo seco algal en matraces Erlenmeyer inoculados con 2% w/w de biomasa fngica. Los matraces fueron incubados por 4 das a
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21 en forma esttica. Posteriormente, los matraces C fueron suplementados con 2.5 g de sacarosa estril e incubados por 6 das ms bajo las condiciones mostradas en el diseo factorial (tabla 1). Al final, se realiz la extraccin de los lpidos acumulados [10], determinando el perfil de cidos grasos mediante la transesterificacin de las muestras y la cuantificacin por cromatografa de gases [4]. Resultados Aislamiento y seleccin de hongos filamentosos Se aislaron 17 hongos filamentosos principalmente de fuentes marinas, 5 fueron positivos a la tincin con Negro Sudn B. El aislado denominado M11 proveniente de sedimento marino de la zona intermarial, present la mayor acumulacin lipdica despus de su incubacin en el medio con dficit de nitrgeno con 0.185 mg de lpidos por mg de biomasa hmeda. A partir del anlisis del fragmento del ITS y del gen de la protena -tubulina, este aislado fue identificado como Penicillium toxicarium M11. Ensayo de fermentacin en sustrato slido La Tabla 2 muestra la produccin de lpidos al final de la FSS en bagazo algal. Los resultados del ANOVA mostraron que el factor humedad tuvo un efecto altamente significativo sobre la produccin de lpidos (p<0.01), mientras que la temperatura tuvo un efecto significativo (p<0.05) sobre esta variable de respuesta.
Tabla 2. Produccin de lpidos durante la Fermentacin en Sustrato Slido de bagazo algal con P. toxicarium M11. Trat. 1,2 3,4 5,6 7,8 Humedad (%) 50 80 50 80 Temperatura ( C) 21 21 26 26 Produccin (mglip/gsc) 16.6 12.2 38.7 13.9
que coloniz, hidroliz y consumi los nutrientes de forma ms eficiente. De esta manera, la cantidad de nutrientes disminuy rpidamente lo que indujo la acumulacin lipdica. Por el contrario, a 80 % de humedad el hongo no tuvo acceso a los nutrientes de la matriz slida y slo creci sobre la interfase lquida formada. [11]
40.0 ) s p 32.0 g / g 24.0 m ( s 16.0 o d i p 8.0 L 0.0 50 Humedad (%) 80
Figura 1. Efecto del factor humedad sobre la produccin de lpidos generados despus de llevar a cabo la FSS (p<0.01)
En la Figura 2, se muestra la grfica de efectos principales para el factor de temperatura. Se observ que en promedio, el nivel alto tuvo un efecto positivo y significativo sobre la acumulacin lipdica produciendo 26.3 mglip/gsc vs. 14.4 mglip/gsc generados al nivel bajo. Para P. toxicarium M11 la temperatura ptima de crecimiento fue de 21 por lo que su incubacin a C una temperatura diferente disminuira su metabolismo de crecimiento y por ende los cidos grasos sintetizados sern acumulados.
40.0 ) s 32.0 p g / g 24.0 m ( s 16.0 o d i 8.0 p L 0.0 21 Temperatura (\ C) 26
Figura 2. Efecto del factor temperatura sobre la produccin de lpidos generados por la FSS (p<0.05)
En la Figura 1, se muestra el efecto principal del factor de humedad; se observ que en promedio, el nivel bajo de humedad tuvo un efecto positivo sobre la acumulacin lipdica lo que produjo en promedio 27.7 mglip/gsc vs. 13.1 mglip/gsc generados en el nivel alto. Se postula que a niveles bajos de humedad, el hongo tuvo un mayor acceso a la matriz slida, por lo
La combinacin de un nivel alto de temperatura (26 y un nivel bajo de humedad (50 %) resultaron en C) la mayor acumulacin lipdica, 38.7 mglip/gsc (equivalente a 19.01 glip/kgC, que se refiere a los lpidos cosechados por kg de carbono alimentado). Este rendimiento lipdico por carbono alimentado, fue considerablemente mayor que aquel reportado por
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otros estudios. Por ejemplo, en un estudio con Mucor hiemalis incubado por 72 h a 25 se cosecharon 1.5 C glip/kgC al emplear xilosa como fuente de carbono [12]. En un estudio similar se emple un cultivo sumergido que contuvo de 1 a 4 % de aceite y 1 % de extracto de levadura, incubado a 150 rpm y 25 con C Rhizopus sp., obteniendo una cosecha de 1.48 glip/kgC [13]. Un estudio realizado con Mortierella sarnyensis se obtuvo un rendimiento de 1.19 glip/kgC durante 11 das en bagazo de cebada con el 80 % de humedad [14]. De esta forma, el rendimiento obtenido en este trabajo es muy superior debido a que la FSS permite obtener una alta cantidad del producto, adems que es posible que P. toxicarium M11 asimile de manera ms eficiente el carbono disponible. La tabla 2 muestra el perfil de metil steres identificados en el tratamiento con 50 % de humedad e incubado a 26 C.
Tabla 2. Perfil lipdico de cidos grasos generados bajo 50 % de humedad y a 26 mediante la FSS de bagazo algal C con Penicilium toxicarium M11. Perfil lipdico c. Mirstico c. Miristolico c. Palmtico c. Palmitolico c. Esterico c. Olico c. Linolico c. Araqudico c. Behnico % 1 0.1 62.2 0 22.3 7 5.3 0.6 1.5
Conclusiones El aislado designado como M11 proveniente de una fuente marina result ser el mayor acumulador lipdico bajo condiciones de estrs nutricional. ste fue identificado como Penicillium toxicarium M11. Despus de 10 das del ensayo de FSS Se encontr que niveles bajos de humedad (50 %) y niveles altos de temperatura (26 afectaron de forma positiva y C) significativa la sntesis de cidos grasos. El cido palmtico fue el mayor cido graso producido bajo estas condiciones ambientales, seguido del cido esterico. De esta forma, se concluye que la produccin de lpidos pudo ser controlada por las condiciones ambientales a las cuales se incub la cepa fngica, en este caso, la temperatura de incubacin y la humedad del sustrato. Agradecimientos. A CONACYT por la beca de maestra otorgada a Berenice Avendao para realizar sus estudios. Se agradece al Subsistema Nacional de Recursos Genticos Microbianos (SUBNARGEM), por el financiamiento parcial otorgado para el aislamiento y caracterizacin de microorganismos. Finalmente, se agradece el apoyo otorgado por la Red de Fuentes de Energa del CONACYT. Bibliografa.
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El 100% est referido a la suma del rea bajo la curva en los cromatogramas de los 9 metil steres que contena el estndar.
Los cidos sintetizados en mayor porcentaje fueron el cido palmtico y esterico, lo cual es comn para especies fngicas [15]. Por otra parte, el cido araqudico y miristolico no rebasaron el 1%.
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CARACTERIZACIN FISICOQUMICA DE CUERPOS DE AGUA DULCE COMO FUENTES POTENCIALES PARA LA OBTENCIN DE BIODIESEL EN EL ESTADO DE GUANAJUATO, MXICO.
Universidad de Guanajuato, Divisin de Ciencias de la Vida, Campus Irapuato-Salamanca; 2 CINVESTAV, IPN Unidad Irapuato *Universidad de Guanajuato, Divisin de Ciencias de la Vida, Campus Irapuato-Salamanca, ExHacienda El Copal, Km 9 Carr. Irapuato-Silao, Apdo. Postal 311. C.P. 36500. Irapuato, Gto. Mxico. Tels y Fax: 01(462)6245215, 6242484, 6248678, 6244118, 6241889 ext.1530 Palabras clave: Cuerpos de agua dulce, Caractersticas fisicoqumicas, bacterias fotosintticas, biodiesel qumica y esta a su vez transformarse en INTRODUCCIN biomasa [6-7, 10-13]. Las fuentes acuticas para obtener microorganismos acumuladores de En el ltimo siglo el consumo de combustibles TAGs puede no ser la solucin total de las fsiles en el mundo se ha incrementado 17 veces demandas y necesidades de energa en el atribuyndoseles como la principal causa de la mundo, pero ofrece una solucin parcial [14]. contaminacin atmosfrica, por lo que en la Considerando que los parmetros fisicoqumicos ltima dcada se han realizado diversos estudios de los cuerpos de agua dulce determinan la para la posible sustitucin de los mismos, siendo abundancia y diversidad de las bacterias la bioenerga una alternativa de energa presentes en los mismos, el objetivo de este renovable que dara solucin a este problema [1trabajo fue caracterizar fisicoqumicamente 3]. Se ha investigado y estimado la viabilidad, as diferentes cuerpos de agua dulce, as como como la sustentabilidad al utilizar la biomasa, con realizar el aislamiento de bacterias fotosintticas el fin de producir biodiesel [4]. Esta es un como fuentes potenciales para la obtencin de componente muy importante de la energa que biodiesel. actualmente se consume en el mundo, siendo aproximadamente del 11% del consumo total METODOLOGIA mundial. En muchos de los pases en vas de Muestreo desarrollo representa el 35 % del total y en Los cuerpos de agua dulce estudiados en el mes Mxico, es una fuente importante de energa de Marzo del 2010, localizados en el estado de renovable que puede generar mltiples Guanajuato, Mxico, fueron: Ro Laja ubicado en beneficios y alcanza el 8% del consumo total [5]. la comunidad de Valtierrilla, Salamanca, Adicionalmente, las demandas actuales de Guanajuato (RL), la Laguna de Tres Villas energa requieren fuentes que sean ubicada en Cuermaro, Guanajuato, (LV), la sustentables, baratas, no contaminantes y Presa de la Pursima en Irapuato, Guanajuato. parece poco probable que una nica fuente de (PP), un Estanque acucola de la comunidad de energa vaya a resolver todos estos problemas, la Angostura en Yuriria, Guanajuato (EA) y un por lo que la diversificacin sera la mejor Manantial de la comunidad de Santiago de solucin [6,7]. Se ha reportado que muchas Capitiro, Jaral del Progreso, Guanajuato (MSC). bacterias, plantas y animales producen cidos Para los sitios de muestreo se consider las grasos por diferentes vas metablicas [8,9]. condiciones del lugar, su accesibilidad, flujo de Existen algunos reportes, que indican que las agua y la presencia de una capa superficial bacterias fotosintticas pueden acumular pigmentada proveniente de microorganismos grandes cantidades de triacilglicridos (TAGs) fotosintticos. En total se recolectaron seis como material de almacenamiento, por lo que submuestras de cada acufero, se colocaron en pueden ser considerados como fuentes de envases de polietileno de 5 L, previamente lpidos con aplicacin potencial para la lavados con HCL diluido y eliminando el cido produccin de biodiesel, ya que todas las rutas con abundante agua destilada, enjuagando los para la produccin de biocombustibles empiezan recipientes con la muestra tres veces antes de con la fotosntesis cuyo principio es captar la llenarlos con el agua que servira para los energa del sol para convertirla en energa
Leticia Castro Barrita 1, Claudia K. Snchez Snchez 1, Jaquelina Gonzlez Castaeda*, Vctor Olalde Portugal2
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anlisis [15]. Caracterizacin fisicoqumica de los cuerpos de agua Se midieron in situ los siguientes parmetros: temperatura, pH, conductividad elctrica y slidos disueltos totales, con un equipo multiparmetro de la marca HANNA Instruments modelo HI 991301. El resto de las determinaciones se realizaron conforme a lo establecido por las Normas Mexicanas NMX-AA034-SCF1-2001, NMX-AA-028-SCF1- 2001, NMX-AA-030-SCF1-2001 y NMX-AA-029-SCI2001. Para el procesamiento de los datos, se hizo un ANOVA completamente al azar a una p<0,05 con el programa Statgraphics plus 5.1 en espaol por sextuplicado. Aislamiento de bacterias fotosintticas y morfologa microscpica A partir de las submuestras de cada acufero, se obtuvo una muestra compuesta, Se inoculo utilizando el medio de cultivo de Dubos reportado por Mc Faddin [16] y se sigui la tcnica por siembra en superficie en agar slido, descrita por varios autores [17-21] e incubando a 25C, a una intensidad lumnica de 2000 lux con fotoperiodos de 12 hrs. de iluminacin y 12 hrs. de obscuridad. Para la morfologa microscpica se hicieron frotis de las bacterias aisladas, se tieron de acuerdo a la tcnica de tincin de Gram reportada en [22] y se observaron en un microscopio ptico marca Wesco modelo Bio UV 2300 con el objetivo 100X. RESULTADOS Y DISCUSIN Los parmetros fsicos de los cuerpos de agua del estado de Guanajuato se muestran en la Tabla 1, donde se observa que los valores de temperatura fueron entre 33,2 y 26,3C mostrando una diferencia entre el valor mximo y mnimo de 6,9 C siendo esta diferencia estadsticamente significativa. La temperatura afecta la tasa metablica y el consumo de oxgeno en los cuerpos de agua. Abada y col. reportaron el efecto de la temperatura y la tasa metablica en cuerpos de agua con diferencia de temperatura de 0,22C lo que nos puede indicar que a intervalos de temperatura mayores se pueden observar mayores diferencias metablicas. Con lo que respecta al pH el rango ptimo para cuerpos de agua dulce es de 6,0 a 9,0 por lo que todos los cuerpos de agua estudiados se encuentran dentro de este rango ya que los valores fluctuaron entre 6.7 y 8.6 [23-
25]. La conductividad elctrica (CE) indica la capacidad de un cuerpo de agua de transmitir la corriente elctrica, entre menor sea el valor de la CE, mejor ser la calidad del agua y con base en este criterio el cuerpo de agua que tuvo el valor ms bajo fue el MSC y el que presento el valor ms alto fue el EA (2866,7 Scm-1 y 9800 Scm 1 respectivamente). Los slidos disueltos totales (SDT) aumentan la concentracin de sales en el agua, segn la NOM-001-SEMARNAT-1996, donde se reportan los valores mximos permitidos para Ros, Embalses Naturales y Artificiales, todos los cuerpos de agua estudiados rebasaron de dos a tres veces dichos valores, siendo el MSC el que tuvo el valor ms -1 bajo (146,7 mgL ), en tanto que EA present el -1 valor ms alto (498,3 mgL ). El incremento de SDT indica un aumento en la presin osmtica de los acuferos teniendo impacto en la seleccin de la flora microbiana presente, lo que pudiera alterar la biodiversidad de los mismos [23-26, 2931]
Tabla 1. Parmetros fsicos de cinco cuerpos de agua dulce del estado de Guanajuato, Mxico* Cuerpo de T** SDT** pH CE** -1 -1 (C) (Scm ) (mgL ) agua dulce* 26,3e 6,69e 7916,7c 405,0 b RL (0,29) (0,02) (147,2) (5,5) 33,2a 8,17 c 6400b 330,0 c LV (0,10) (0,10) (0,0) (0,0) 26,8c 8,34b 3500 d 176,7d PP (0,09) (0,16) (89,4) (5,2) 30,8b 8,60a 9800 a 498,3 a EA (0,63) (0,03) (89,4) (14,7) 26,4d 6,87d 2866,7e 146,7e MSC (0,20) (0,02) (51,6) (5,2)
*RL=Ro Laja en la comunidad de Valtierrilla, en Salamanca, Guanajuato; LV= Laguna de Tres Villas en Cuermaro, Guanajuato; PP= Presa La Pursima en Irapuato, Guanajuato; EA= Estanque acucola de la comunidad de la Angostura en Yuriria, Guanajuato y MSC= Manantial de Santiago de Capitiro en Jaral del Progreso, Guanajuato. **T=Temperatura, CE= Conductividad Elctrica, SDT= Slidos Disueltos Totales. Promedio de seis repeticiones, valor entre parntesis indica la desviacin estndar y las letras diferentes muestran que hay diferencia significativa a p<0,05
Los valores para los slidos sedimentables, slidos voltiles y slidos suspendidos de los acuferos estudiados se muestran en la Tabla 2, como era de esperarse el Manantial (MSC) es el cuerpo de agua que muestra los valores ms
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bajos, lo que pudiera indicar una alteracin menor, en la biodiversidad del acufero, en comparacin con los otros cuerpos de agua estudiados. Los valores encontrados indican el arrastre de una gran cantidad de nutrientes tanto orgnicos como inorgnicos, provenientes de las actividades agrcolas, industriales, urbanas o pecuarias que se desarrollan alrededor de dichos acuferos, que alteran las condiciones naturales y seleccionan la flora microbiana presente. Resultados similares han sido reportados por otros investigadores al estudiar las caractersticas fisicoqumicas de diversos cuerpos de agua dulce [23-30].
Tabla 2. Slidos sedimentables, slidos voltiles y slidos suspendidos en cinco cuerpos de agua dulce del estado de Guanajuato, Mxico* Cuerpo SV** de SS** SSus** -1 -1 -1 (mgL ) (mgL ) (mgL ) agua dulce* RL 0,2 d 148,0 b 681,7 b (0,0) (7,6) (12,7) LV 0,4 a 90,0 c 4420,7 a (0,1) (8,6) (96,0) PP 0,3 c 186,7 a 461,3 c (0,06) (11,6) (10,4) EA 0,4 b 21,7 e 440,0 d (0,06) (2,9) (19,5) MSC 0,1 e 26,7 d 105,0 e (0,0) (7,6) (8,7)
*RL=Ro Laja en la comunidad de Valtierrilla, en Salamanca, Guanajuato.; LV= Laguna de Tres Villas en Cueramaro, Guanajuato.; PP= Presa La Pursima en Irapuato, Guanajuato.; EA= Estanque acucola de la comunidad de la Angostura en Yuriria, Guanajuato y MSC= Manantial de Santiago de Capitiro en Jaral del Progreso, Guanajuato. ** SS= Slidos Sedimentables, SV= Slidos voltiles, SSus= Slidos Suspendidos y SD= Slidos disueltos. Promedio de seis repeticiones, valor entre parntesis indica la desviacin estndar y las letras diferentes muestran que hay diferencia significativa a p<0,05.
desarrollo de la flora microbiana, as como, la biodiversidad del medio [15, 23-28]. Los cuerpos de agua estudiados no rebasaron los valores reportados por la Norma para MO y fsforo total sin mostrar diferencia estadstica significativa lo que nos est indicando que la actividad microbiana es diferente en los acuferos estudiados, lo que puede deberse al efecto que ejercen las caractersticas fisicoqumicas en la seleccin o disminucin de la biodiversidad. Resultados similares han sido reportados por varios autores en el estudio de las caractersticas fisicoqumicas de diferentes cuerpos de agua dulce [15, 23-27]. Son pocos o nulos los estudios que hay sobre los cuerpos de agua del estado de Guanajuato, Mxico especficamente de los acuferos reportados en este estudio.
Tabla 3. Parmetros qumicos de cinco cuerpos de agua dulce del estado de Guanajuato, Mxico* Cuerpo de DBO5** DQO** MO** Fsforo -1 -1 (mgL ) (mgL ) (%) agua Total -1 (mgPL ) dulce* RL LV PP EA MSC 36,1 c (7,9) 26,1 d (3,5) 4,4 e (0,9) 70,0 a (0,0) 53,3 b (23,1) 186,8 d (6,3) 189,3 c (5,8) 186,8 e (8,0) 196,0 a (5,0) 191,9 b (3,8) <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a <1,0 a
En cuanto a los parmetros qumicos (Tabla 3), la demanda bioqumica de oxgeno (DBO5) es una medida de la cantidad de oxgeno que requieren los microorganismos para oxidar la materia orgnica. Cabe resaltar que el acufero PP presenta un valor nueve veces menor que el resto (4,4 mgL-1). Con respecto a la DQO, RL y PP, presentaron el mismo valor (186,8 mgL-1) correspondiendo al ms bajo en tanto que el ms alto fue para EA (196,0 mgL-1) lo que indica que PP es el acufero con menor contenido de nutrientes, lo que limita el crecimiento y
*RL=Ro Laja en la comunidad de Valtierrilla, en Salamanca, Guanajuato; LV= Laguna de Tres Villas en Cueramaro, Guanajuato; PP= Presa La Pursima en Irapuato, Guanajuato.; EA= Estanque acucola de la comunidad de la Angostura en Yuriria, Guanajuato y MSC= Manantial de Santiago de Capitiro en Jaral del Progreso, Guanajuato. **PQ= Parmetros qumicos, DBO5= Demanda Bioqumica de Oxigeno, DQO= Demanda Qumica de Oxigeno y MO= Materia Orgnica Promedio de seis repeticiones, valor entre parntesis indica la desviacin estndar y las letras diferentes indican que hay diferencia significativa a p<0,05
Las unidades formadoras de colonia (UFC) aisladas de los cuerpos de agua dulce estudiados se muestran en la Tabla 4, siendo EA el acufero con mayor biodiversidad en lo que se refiere a la morfologa colonial ya que fue posible aislar once UFC diferentes, por el contrario, PP fue el acufero que present menor biodiversidad (7 UFC). Las UFC aisladas, mostraron pigmentaciones blanca, azul, rosa, amarilla y
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caf siendo muy similares en todos los cuerpos de agua analizados en este trabajo.
Tabla 4. UFC aisladas de cinco cuerpos de agua dulce del estado de Guanajuato, Mxico.* Cuerpo de UFC** aisladas con agua dulce* morfologa colonial diferente RL 8 LV PP EA MSC 10 7 11 8
Es necesario tomar conciencia de la importancia que tienen nuestros acuferos y su potencialidad como fuentes para obtener microorganismos que acumulen o produzcan TAGs para producir biodiesel. AGRADECIMIENTOS A la Direccin de Apoyo al Posgrado de la Universidad de Guanajuato por el apoyo econmico ofrecido para la realizacin de este proyecto. A Mara del Roco Duarte Castillo y Adn Rey Torres Snchez por su valiosa colaboracin y ayuda en este trabajo de investigacin BIBLIOGRAFA
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*RL=Ro Laja en la comunidad de Valtierrilla, en Salamanca, Guanajuato; LV= Laguna de Tres Villas en Cuermaro, Guanajuato; PP= Presa La Pursima en Irapuato, Guanajuato; EA= Estanque acucola de la comunidad de la Angostura en Yuriria, Guanajuato y MSC= Manantial de Santiago de Capitiro en Jaral del Progreso, Guanajuato. **UFC= Unidades formadoras de colonias
Se han reportado algunas poblaciones microbianas en ros y lagos, los cuales han sido ms estudiados que las presas y los manantiales. Algunos de los gneros estudiados y que acumulan TAGs son: Achromobacter,Flavobacterium, Micrococcus, Bacillus, Pseudomonas, Nocardia, Streptomyces, entre otros [11, 32]. Con respecto a la morfologa microscpica se observaron cocos y bacilos Gram positivos y Gram negativos, as como, consorcios de algasbacterias y consorcios de bacterias-bacterias. Algunos investigadores reportan estudios en sistemas acuticos y mencionan la importancia del trabajar con dichos ecosistemas a fin de aislar microorganismos con potencial en la sntesis o acumulacin de compuestos tiles, en diversos campos [17-18, 20- 21]. CONCLUSIONES La biodiversidad de los acuferos estudiados resulta modificada por sus caractersticas fisicoqumicas. Los parmetros fisicoqumicos que tuvieron una mayor influencia sobre la biodiversidad fueron: T, CE, SDT, DBO5 y DQO lo que indica que los acuferos que presentaron mayor biodiversidad fueron LV y EA, y el acufero con menor biodiversidad fue PP teniendo una relacin directa con los valores de sus caractersticas fisicoqumicas.
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OBTENCIN Y EVALUACIN DE UN NUTRIMENTO VEGETAL GENERADO A PARTIR DE RESIDUOS DE CRISANTEMO (Dendranthema grandiflora) MEDIANTE EL USO DE MICROORGANISMOS CELULOLITICOS NATIVOS
Adriana Matiz Villamil*, Johanna Buitrago, Dolly Tenjo, Mara Ximena Rodrguez, Luis David Gmez y Balkys Quevedo
Facultad de Ciencias, Departamento de Microbiologa. Pontificia Universidad Javeriana, Cra. 7 No. 40 83, Bogot, Colombia. amatiz@javeriana.edu.co. Tel: 3208320 ext: 4020, 4030. Palabras clave: actividad celuloltica, celulosa, crisantemo (Dendranthema grandiflora), residuo vegetal. INTRODUCCION El crisantemo ocupa el cuarto lugar en flores de exportacin en Colombia. Este sector libera altos volmenes de residuos vegetales que dificultan su manejo, debido a su lenta degradacin se convierten en un problema de alto impacto ambiental; prdida de espacio fsico, generacin de plagas, impacto paisajstico etc. Dentro del programa de gestin ambiental los residuos vegetales generados son tratados en pilas de compostaje, sin embargo, otra alternativa biotecnolgica es la utilizacin de microorganismos celulolticos capaces de degradar estos residuos, con la consecuente produccin de azcares fermentables que a su vez puedan ser usados como sustrato glicosdico natural. Esto promete doble beneficio para el ambiente: primero una alternativa de manejo y reduccin en volumen de residuos vegetales y segundo, la posible utilizacin de sus tres componentes principales: celulosa, hemicelulosa y lignina [3]. Los microorganismos encargados de la degradacin de la celulosa, principal componente de la pared celular de las plantas incluyen bacterias y hongos, aerobios, anaerobios, mesoflicos y termoflicos, los cuales cuentan con la maquinaria enzimtica necesaria para dicho propsito por tal razn, su aislamiento e identificacin representa un importante recurso para lograr la disminucin del impacto ambiental y la generacin de un sustrato fermentable cuya utilidad podra estar en la produccin de etanol, obtencin de cidos orgnicos, edulcorantes, productos farmacuticos y alimentos, entre otros [18]. El objetivo de este trabajo fue la obtencin de un sustrato vegetal a partir de la conversin del residuo vegetal de crisantemo (Dendranthema grandiflora), por pretratamiento biolgico con microorganismos celulolticos y su evaluacin con clulas libres de Saccharomyces cerevisiae, para comparar su crecimiento con un medio sinttico. METODOLOGIA Localizacin y condiciones de muestreo El muestreo se realiz a partir de residuos en compostaje de un cultivo de crisantemo (Dendranthema grandiflora) localizado en el municipio de Tocancip, Colombia, ubicado a 2606 m.s.n.m. Se tomaron en forma aleatoria cinco submuestras de diferentes puntos de la pila de compostaje de 4 semanas de degradacin, registrando una temperatura de 50C y un pH de 8.6. Aislamiento de microorganismos celulolticos De residuos vegetales en compostaje y se realizaron -1 -5 diluciones seriadas de 10 a 10 y siembra en superficie en agar Carboximetilcelulosa (CMC) al 1%(p/v), se incub o a 35 C por 48 horas. Posteriormente, se revel rojo congo al 1%(p/v) y recuento de las colonias que presentaron halos de hidrlisis [28]. Se realiz aislamiento secundario en agar CMC al 1%(p/v) de las colonias que presentaron actividad celuloltica. Pruebas de antagonismo Se sigui el mtodo de Gauze. Se utilizaron suspensiones celulares de cada uno de los microorganismos seleccionados, a 108 celulas/ml. Por triplicado se dispusieron sobre agar CMC al 1%(p/v), 2%(p/v) y 3%(p/v) [6, 22]. Las cepas seleccionadas fueron conservadas con glicerol al 25%(v/v) y almacenadas a 20C. Residuo vegetal fresco para la evaluacin de las cepas Se utilizaron residuos vegetales frescos provenientes del cultivo de crisantemo. Este residuo se lav con el fin de eliminar fragmentos de tierra, luego secado durante 24h a 90 y finalmente molido, hasta alcanzar un tamao de C partcula menor a 0.3mm. Con el fin de determinar composicin nutricional y contenidos de celulosa, hemicelulosa y lignina del residuo vegetal, se realiz una caracterizacin fsico-qumica. Proceso de fermentacin en cultivo discontinuo de cepas seleccionadas Cultivo discontinuo en forma individual Se realizaron curvas preliminares para evaluar el comportamiento enzimtico utilizando las cepas aisladas y seleccionadas. Estas se llevaron a cabo en caldo CMC al 1%(p/v), 3%(p/v) y 5%(p/v). Posteriormente, se evaluaron las cepas en consorcio en caldo sustrato vegetal suplementado con sales y nutrientes (SVS). Cultivo discontinuo en consorcio Para evaluar la actividad hidroltica de las cepas en consorcio se realizaron fermentaciones en caldo CMC al 1%(p/v) y en SVS al 10%(p/v), incubando a 35C y 120 rpm. A partir de los muestreos realizados se determin
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http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/ concentracin enzimtica. de azcares reductores y actividad individuales de las cepas seleccionadas. La fermentacin se realiz en caldo residuo vegetal suplementado (SVS) estril, al 10%(p/v), 35 y 130 rpm, por 24 horas. C Adicionalmente, se realizaron cultivos con residuo vegetal en agua destilada (Caldo SV). Se evalu la produccin de azcares reductores mediante la tcnica de DNS [21], pH y actividad enzimtica [10, 27]. Con el fin de determinar la composicin del extracto crudo correspondiente a la hora de fermentacin en la que se present la mayor liberacin de azcares reductores se llev a cabo una cromatografa lquida (HPLC) en un cromatgrafo WATERS, con detector de ndice de refraccin (Waters Corporation, Milford, MA). La temperatura de la columna fue 84 Para el anlisis de C. los resultados se us el programa Millenium V 2.15.01. Para la determinacin de los factores de respuesta se utiliz glucosa grado cromatogrfico (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Evaluacin del Sustrato obtenido con Saccharomyces cerevisiae A partir de las concentraciones de residuo vegetal evaluadas se seleccion el sustrato (S) que aport mayor concentracin de azcares reductores para el crecimiento y desarrollo de S. cerevisiae. Como control de la cepa se realizaron fermentaciones en caldo YGC modificado, cuya composicin en g/L: extracto de levadura 5, D-glucosa 2 y cloramfenicol 0.1, pH final 6.6 [20], y se llev a cabo la modificacin de este medio de cultivo para comparar con el sustrato vegetal. Se prepar el inculo de S. cerevisiae en caldo YGC bajo condiciones controladas de 120rpm, 30C por 12 horas. Fermentacin discontinua Se realiz en caldo YGC modificado y S a 30 por 16 C horas para cultivo con YGC modificado y 32 horas para el sustrato seleccionado (S) con agitacin de 70rpm, tomando muestras cada dos horas. A estas muestras se les determin la concentracin de biomasa por el mtodo de peso seco [7], de azcares reductores mediante la tcnica de DNS [21]. Anlisis Estadstico El anlisis estadstico de los datos obtenidos durante la prueba experimental se realiz determinando inicialmente la distribucin normal de los datos mediante la prueba de Chapiro Wilk y como prueba paramtrica T student, utilizando el programa estadstico SPSS, versin 14. RESULTADOS Y DISCUSIN Aislamiento de microorganismos celulolticos A partir de los residuos vegetales en compostaje se logr el aislamiento de 8 cepas bacterianas con actividad celuloltica. Bacilos esporulados Gram positivos, probablemente porque en el proceso de compostaje la actividad metablica microbiana se incrementa, adems, el tiempo de degradacin transcurrido, la alta temperatura y el pH alcalino facilitan que bacterias esporgenas y actinomicetes incrementen su actividad y por ende su poblacin [8].
Determinacin de actividad celuloltica Se tom extracto crudo correspondiente a cada tiempo de muestreo de cada una de las fermentaciones, para hacerlos reaccionar con CMC 1%(p/v) en buffer fosfato pH 7 a 37C durante 1h. Para evaluar la concentracin de azcares reductores liberados, se emple la tcnica de DNS [1,5]. Una unidad de actividad celuloltica fue definida como la cantidad de enzima capaz de liberar 1 micromol de glucosa/min (UC). Se realiz a los microorganismos que finalmente fueron seleccionados para conformar el consorcio microbiano celuloltico, por presentar la mejor actividad hidroltica sobre el sustrato vegetal evaluado [13]. Evaluacin del consorcio microbiano en cultivo discontinuo con sustrato vegetal Teniendo en cuenta que los residuos vegetales tienen lignina en su composicin, se plantearon diferentes pretratamientos, con el objeto de facilitar la degradacin de estos por parte del consorcio microbiano. Pretratamiento del residuo vegetal Lavado con SDS ( Sodio Dodecil Sulfato) Los residuos vegetales de Crisantemo se lavaron con SDS (Sodio Dodecil Sulfato) al 1% (p/v), ebullicin por un periodo de una hora con SDS al 1% (p/v), lavado y secado a 90 durante 12h y por ltimo se redujo de tamao C realizando molienda [10]. Pretratamiento qumico con perxido de hidrgeno (delignificacin oxidativa) En una solucin alcalina de perxido de hidrgeno al 2%, se suspendi el residuo vegetal molido y pretratado con SDS en una relacin 10:1, se llev a un bao termostatado durante 12 horas a 50 Luego se filtr y lav con agua C. destilada. Finalmente, se someti a un proceso de secado a 90 por 12 horas [27]. C Evaluacin de los pretratamientos por medios de fermentacin discontinua Se realizaron procesos de fermentacin utilizando el consorcio microbiano celuloltico seleccionado anteriormente, con residuo vegetal al 10%(p/v) tratados y no tratados, con el fin de determinar el mejor proceso, evaluando azucares reductores liberados en las horas 22h de cultivo. La fermentacin se realiz en caldo residuo vegetal con y sin tratamientos, estril a la concentracin correspondiente 10%(p/v), 35 y agitacin de 130 rpm, C por 22 h. Se determin concentracin de azcares reductores mediante la tcnica de DNS [21]. Proceso de fermentacin del residuo con el pretratamiento seleccionado en cultivo discontinuo Con el objetivo de incrementar la produccin de azucares reductores, se llevaron a cabo fermentaciones con residuo al 10% (p/v) por triplicado, adicionando el mismo suplemento de nutrientes empleado para las curvas
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http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/ entre la cepa 8 y un actinomiceto con buena actividad celuloltica cualitativa en CMC al 1%(p/v) (halos de hidrlisis de 2.14cm de dimetro) aislado de suelo de un cultivo de Stevia [11]. Para lo anterior se realizaron curvas de cada microorganismo por separado en caldo SVS al 10%(p/v) con el fin de evaluar la actividad enzimtica sobre dicho sustrato. Los dos microorganismos presentaron una degradacin del sustrato vegetal de crisantemo, lo que se evidenci con la cuantificacin de azcares reductores y la actividad enzimtica obtenida. Identificacin Bioqumica Los resultados del perfil bioqumico y la observacin de las caractersticas macro y microscpicas realizadas a la cepa 8 y el actimomicete permitieron identificarlos como Bacillus sp. y Streptomyces sp. Tanto Bacillus sp. como Streptomyces sp. han sido reportados como microorganismos con alta actividad celuloltica. Muchas especies del gnero Bacillus estn normalmente presentes en el suelo y en la materia orgnica en degradacin, por lo que se considera que juegan un papel importante en la biodegradacin y bioconversin de componentes de alto peso molecular [17,12, 15, 2]. Por otro lado, Streptomyces sp. ha sido muy estudiado debido a que es parte importante de la comunidad microbiana del suelo responsable de la degradacin y recirculacin de biopolmeros como la celulosa, la hemicelulosa y la lignina (26, 9,16,24]. Evaluacin del consorcio microbiano en cultivo discontinuo con sustrato vegetal Pretratamiento del residuo vegetal Se evaluaron diferentes pretratamientos para determinar cual permita obtener mayor concentracin de azcares reductores, al facilitar la hidrlisis enzimtica de la celulosa por parte del consorcio celuloltico. Con el residuo vegetal molido tratado con y sin SDS; se obtuvo que la mayor cantidad de azcares reductores liberados se present en el residuo vegetal sin tratamiento con SDS teniendo una concentracin de 2.46 g/L comparado con 1.44g/L del tratado con SDS a la hora 22. Al realizar los pretratamientos del residuo al 10% (p/v) con y sin perxido de hidrgeno 2%, se presentaron valores de concentracin de azcares reductores de 0.555 g/L y 1.502 g/L, respectivamente. Estos resultados reflejaron que el tratamiento con SDS y H2O2 causa una inhibicin enzimtica en el consorcio celuloltico, esto se debe a que el SDS es un tensoactivo inico y desnaturalizante de protenas, y al quedar trazas de ste en el residuo impide la degradacin de la celulosa por parte del complejo enzimtico [4], al igual que el perxido de hidrgeno, agente oxidante usado para remover la lignina y la hemicelulosa presentes en materiales lignocelulsicos. Segn la caracterizacin fsico qumica del residuo vegetal de crisantemo, el porcentaje de lignina es 0.51%, de hemicelulosa 2.03% y celulosa 65.3%, por lo tanto, el pretratamiento con perxido no sera necesario por la baja proporcin de lignina y hemicelulosa. Se determin que era suficiente la reduccin de tamao del material para
Pruebas de Antagonismo Slo 4 cepas fueron seleccionadas para hacer parte de este consorcio, lo que demostr que a pesar de tratarse de microorganismos aislados de una misma fuente puede generarse inhibicin entre ellos, puede ser porque existan diferencias en la complejidad del sistema enzimtico que les permite degradar el sustrato, generando diferentes tasas de crecimiento y dando lugar a una competencia por sustrato y espacio. Residuo vegetal fresco para la evaluacin de las cepas La caracterizacin fiscoqumica realizada al residuo vegetal de crisantemo mostr un alto contenido de celulosa y la presencia de lignina, hemicelulosa, carbohidratos no estructurales y nutrientes como: fsforo, calcio y slice, en menores proporciones. El pretratamiento mecnico utilizado permiti la obtencin de un tamao de partcula menor a 850m, que favorece el acceso de las enzimas hidrolticas del consorcio y facilita la preparacin de los medios de produccin y el seguimiento de las fermentaciones realizadas [15]. Proceso de fermentacin en cultivo discontinuo de cepas seleccionadas Cultivo discontinuo de manera individual Con las cepas seleccionadas en las pruebas de antagonismo se realizaron pruebas preliminares, los resultados indicaron una actividad celuloltica nula en todas las cepas, en las tres concentraciones y durante las 20h de fermentacin, lo cual indic la falta de concordancia entre la evaluacin cualitativa y cuantitativa de actividad, una posible explicacin de este hecho es que en la prueba cualitativa, el microorganismo permaneci en contacto con el sustrato durante 48 horas de incubacin, aumentando as la probabilidad de liberar las enzimas necesarias para degradar el polisacrido; mientras que en la tcnica de actividad cuantitativa por DNS, el extracto enzimtico entr en contacto con la celulosa con un tiempo de reaccin de 60 min. que probablemente no fue suficiente para que se diera una reaccin enzima-sustrato completa. As mismo, la tcnica de DNS, puede no es tan sensible en la deteccin de pequeas cantidades azucares reductores. Cultivo discontinuo en consorcio Al evaluar la actividad celuloltica del consorcio, los resultados obtenidos tanto en la fermentacin realizada en caldo CMC al 1% (p/v) como en caldo SVS al 10%(p/v), mostraron que la cantidad de azcares reductores y la actividad enzimtica del consorcio en los dos sustratos fue nula. Con base en los resultados anteriores se decidi buscar una segunda opcin que incluy la evaluacin de la cepa 8 que haba sido inicialmente descartada en las pruebas de antagonismo. Esta fue evaluada alcanzando actividades enzimticas superiores al consorcio. Con el objetivo de potencializar la actividad enzimtica de la cepa 8, teniendo en cuenta que fue un microorganismo nativo del sustrato vegetal a evaluar se evalu el efecto sinrgico
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http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/ obtener mayor concentracin de azcares reductores y de actividad enzimtica, pues algunos factores que afectan la hidrlisis de la celulosa son el contenido de lignina y hemicelulosa, la porosidad de la materia prima (rea superficial accesible) y cristalinidad de la celulosa, la cual se reduce con la molienda. Fermentacin discontinua del residuo vegetal con el consorcio celuloltico En la tabla 1 se muestran los resultados obtenidos usando el consorcio celuloltico compuesto por Bacillus sp. y Streptomyces sp. Tabla 1. Fermentacin con el consorcio celuloltico en residuo vegetal 10% (p/v) suplementado y sin tratamiento Con suplemento (SVS) Sin suplemento (SV) Tie Azcares Azcares mp Reductore Actividad Reductore Actividad o s Enzimtica s Enzimtica (h) g/L UC/L g/L UC/L 0 1,1 ND 1,5 ND 6 1,4 54,4 1,6 59,7 12 1,6 55,7 2,1 80,8 14 1,6 56,2 2,1 97,6 22 1,1 37,9 2,5 98,4 ND= No se determin Fuente: Autores La adicin de un suplemento de nutrientes, disminuye la actividad celuloltica lo que se ve reflejado en la baja produccin de azucares reductores (Tabla 1), debido a la presencia de otras posibles fuentes de carbono que hacen innecesario el gasto energtico que implicara la degradacin de la celulosa como sustrato complejo. Teniendo en cuenta lo anterior, no es necesario adicionar ningn suplemento al medio de cultivo. Utilizacin del sustrato vegetal por parte del consorcio celuloltico Al comparar la concentracin de azcares reductores obtenidos en las pruebas preliminares en las que Bacillus sp. y Streptomyces sp. actuaron individualmente en la degradacin de SVS al 10%(p/v), con los obtenidos con el consorcio (Bacillus sp.- Streptomyces sp.) en el mismo sustrato y a la misma concentracin, demuestran que se estableci un sinergismo que favoreci la degradacin del sustrato con el consecuente aumento en la liberacin de azcares reductores (Tabla 1). Por otro lado, las interacciones complejas entre las enzimas encargadas de hidrolizar la celulosa (endoglucanasas, exoglucanasas y glucosidasas ) y los cambios en las caractersticas del sustrato durante la hidrlisis han sido simulados por modelos matemticos aplicados a una variedad de materiales lignocelulsicos, dicho modelo sugiere que es casi imposible la prediccin del funcionamiento hidroltico de una mezcla de celulasas de un sustrato a otro debido a variaciones como la concentracin de celulasas, la proporcin endo/exocelulasas, el tiempo de reaccin y las caractersticas del sustrato [29]. De esta manera, la actividad celuloltica de los microorganismos va a ser especfica para cada sustrato celulsico a evaluar. Evaluacin del sustrato obtenido con Saccharomyces cerevisiae Fermentacin discontinua control caldo YGC modificado ( 2 g/L de glucosa). En esta fermentacin Saccharomyces cerevisiae no present fase de adaptacin, con una concentracin celular de 2.7g/L y de glucosa 0.35g/L, a partir de la hora 8 empez la fase estacionaria y la concentracin de la fuente de carbono se mantuvo estable. Fermentacin discontinua del sustrato obtenido (S) con Saccharomyces cerevisiae Se alcanz una concentracin de biomasa de 2.5g/L. El consumo de azcares reductores fue rpido hasta la hora 14, terminando la fermentacin con una concentracin de 0.667 g/L, estos posiblemente pueden ser azcares reductores no asimilables por S. cerevisiae como la celobiosa, que es producto de la hidrlisis de la celulosa del residuo vegetal de crisantemo. Por otra parte, se determin el tiempo de duplicacin de 57 min para el control de 2 g/L y 46.5 min para el sustrato vegetal, esto evidenci que la levadura tiene un crecimiento ms rpido en este sustrato. Las nutricionales del sustrato promueven el crecimiento de la levadura sin necesidad de adicionar otros componentes, ya que se obtuvo un tiempo de duplicacin menor y una concentracin de biomasa similar que en caldo YGC con 2 g/L de glucosa. Adems los rendimientos biomasa a partir de sustrato (Yx/s) para las dos fermentaciones fueron iguales, arrojando un valor de 1,45 g/g. Para comparar el crecimiento de S. cerevisiae en el control con 2 g/L de glucosa y la fermentacin del sustrato vegetal se llev a cabo la estadstica de prueba con la distribucin t student, concluyendo que no existe evidencia estadsticamente significativa en la concentracin celular promedio de S. cerevisiae tanto en el control de 2g/L de glucosa como en el sustrato vegetal evaluado [14]. CONCLUSIONES Se logr el aislamiento de ocho cepas con actividad celuloltica en CMC 1% (p/v) a partir de residuos vegetales de crisantemo en compostaje No se estableci una relacin directa entre la actividad celuloltica cualitativa y cuantitativa de los microorganismos evaluados durante el estudio. La mayor concentracin de azcares reductores y actividad enzimtica se obtuvieron en el cultivo del consorcio (Bacillus sp. y Streptomyces sp.) en SV 10%(p/v). El residuo vegetal de crisantemo aport los nutrientes necesarios para estimular la actividad enzimtica de los microorganismos evaluados por
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http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/ lo cual no se hace necesario suplementar el residuo con sales.
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PRODUCCIN DE BIOMASA Y BIOHIDRGENO DE MICROALGAS EN REACTORES AL AIRE LIBRE

Ricardo Escalante, Gener Kauil, Julia S. Martn del Campo, Rodrigo Patio*
* Departamento de Fsica Aplicada, Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados-Unidad Mrida, A.P. 73 Cordemex, 97310 Mrida, Yucatn, Mxico, +(999) 942 9438, rtarkus@mda.cinvestav.mx. Palabras clave: Chlamydomonas reinhardtii, fotobioreactores, hidrgeno Introduccin. La especie Chlamydomonas reinhardtii es un modelo para el estudio del metabolismo de las microalgas, incluyendo la fotosntesis as como su genoma, que han sido ampliamente estudiados [1]. Tambin ha llamado la atencin por su capacidad de producir gas hidrgeno (H2) por medio de la biofotlisis del agua. En efecto, la biofotlisis es un proceso en el cual est involucrada la fotosntesis y que, acoplado a la actividad de la enzima hidrogenasa en condiciones anaerobias limitadas en azufre, permite una produccin continua de hidrgeno molecular por varios das. El H2 ha captado un gran inters como combustible alternativo a los de origen fsil, por su transformacin que no involucra gases de efecto invernadero y porque podra obtenerse de agua como materia prima [2]. Sin embargo, el problema es que se requiere energa para separar la molcula de agua en oxgeno e hidrgeno. La biofotlisis aprovecha justamente la energa solar para llevar a cabo este proceso de manera natural dentro de las clulas de C. reinhardtii, lo que lo hace atractivo para desarrollarse de forma sostenible, econmica y ecolgicamente. Con la finalidad de proponer una metodologa para la produccin de este gas por C. reinhardtii en Yucatn, en este trabajo se ha estudiado su crecimiento en biorreactores que utilizan la radiacin solar como fuente luminosa. Aunado al estudio de produccin de biomasa, se estudian las condiciones para la produccin de biohidrgeno por estas mismas algas en condiciones controladas de laboratorio, con el fin de proponer un biorreactor al aire libre que opere con radiacin solar como fuente luminosa. Metodologa. Se utiliza la cepa CC-124 de Chlamydomonas reinhardtii proveda por el Chlamydomonas Center (Estados Unidos de Norteamrica). Se ha trabajado con tres medios de cultivo, dos reportados en la literatura [3] y uno ms modificado en este trabajo: (1) el Sueoka alto en sales que recomienda el proveedor de la cepa para su mantenimiento, (2) el TAP (trisacetato-fosfato) que comnmente se reporta en la literatura para la bioproduccin de hidrgeno [4], y (3) una modificacin del medio TAP, nombrado medio TP, en el que se evitan contaminaciones con microorganismos hetertrofos al no utilizar cido actico. Es importante mencionar que tanto en el crecimiento de biomasa como en la produccin de hidrgeno, los medios de cultivo se esterilizaron mediante filtracin al vaco (microfibra de vidrio, Whatman GFC, 0.2 m) y el material empleado solamente se lav con agua clorada antes de enjuagarse con agua destilada. Para el cultivo de microalgas se utilizaron los medios de cultivo Sueoka y TP, as como dos tipos de reactores. Los reactores tubulares verticales (RTV) se construyeron con tubos de acrlico transparente de 25 mm de espesor y altura de 90 cm, utilizando tres distintos dimetros internos: 70, 95 y 120 mm. La parte inferior de los RTV se sell con una tapa de acrlico, permitiendo el paso de aire comprimido a travs de un conducto con varios agujeros pequeos (~1 mm). Los volmenes de los RTV son de 3, 6 y 9 L, respectivamente. Tambin se utiliz un reactor plano tipo panel (RPP), con dimensiones de 50 cm de altura por 50 cm de largo y 10 cm de ancho, con paredes de acrlico transparente de 50 mm de espesor. El volumen del RPP es de 20 L; en el fondo del reactor se instalaron piedras porosas por las que pasa aire comprimido. En ambos tipos de reactores se colocaron tapas de acrlico con una salida de aire; el aire de entrada proviene de una compresora y es pasado por un humidificador antes de dirigirse a los reactores. El flujo de aire fue controlado siempre a 1 L de aire por minuto por litro de cultivo. La iluminacin de los cultivos fue natural, es decir, con radiacin solar en ciclos luz/oscuridad marcados por el da y la noche. Se hicieron 14 experimentos en los reactores tubulares verticales y un par de experimentos en el reactor plano tipo panel. El crecimiento de biomasa fue seguido utilizando dos mtodos igualmente tiles: densidad ptica y peso seco. La densidad ptica se determin utilizando un espectrofotmetro porttil (StellarNet, EPP2000) a
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640 nm de longitud de onda para evitar la interferencia de la absorbancia de la clorofila y utilizando el medio de cultivo como blanco y para diluir las muestras. El peso seco se determin utilizando membranas de poro de 2 micras (Whatman, GFC) para filtrar el cultivo (10 ml de muestra) mediante un sistema de vaco y enjuagar con el mismo volumen de medio de cultivo. Antes y despus del filtrado, la membrana se sec en un horno de microondas (15 minutos a 10 W) y se dej enfriar en un desecador durante 30 minutos para ser pesado despus en una balanza analtica (OHAUS Adventurer, Serie ARx). La densidad ptica y el peso seco estn correlacionados con la densidad celular determinada utilizando un microscopio ptico (Olympus, CH-2). Se determin tambin la cantidad de clorofila a en las algas vivas utilizando un fluormetro (Varian, CARY Eclipse), con longitudes de onda de excitacin de 432 nm y de emisin de 668 nm. El equipo fue previamente calibrado mediante una curva para diferentes concentraciones conocidas de clorofila. Adicionalmente, algunas de las condiciones del cultivo pueden medirse automticamente: la temperatura y la iluminancia se determinan mediante sensores programables (HOBO Pendant UA-002-64, Onset); el pH y el pO2 se determinan mediante sensores (Sensorex) conectados a una fuente de poder y una interfaz (chass cDAQ-9172 y mdulos NI9203 y NI9205, National Instruments). La interfaz se conecta a su vez con una computadora donde los datos son capturados a travs del programa LabView Signal Express (National Instruments). La produccin de biohidrgeno se tiene apenas en una etapa preliminar en la que se han utilizado RTV con iluminacin artificial utilizando una fuente luminosa fluorescente continua (~100 E), dentro de un laboratorio con temperatura controlada (298-300 K) y agitacin magntica constante durante todo el proceso. Los reactores estn construidos con el mismo tubo de 70 mm de dimetro descrito previamente, pero con una altura de 30 cm y un volumen nominal de 1 L. La base del tubo est sellada con una lmina de acrlico y la tapa superior, fabricada en tefln, utiliza un empaque polimrico y tiene una salida de gas que es conducido por una columna empacada con almina para la retencin de humedad. Se realizaron cinco experimentos con diferentes concentraciones iniciales de biomasa: 0.048, 0.054, 0.071, 0.164 y 0.349 g/L de peso seco. En todos los casos, el cultivo tena una antigedad de 7 das en medio Sueoka, excepto el experimento de concentracin inicial de 0.054 g/L, para el cual el inculo empleado para la generacin de biomasa fue
tomado de un reactor anaerobio con medio TAP. El medio TAP fue utilizado en todos los experimentos de produccin de hidrgeno. La produccin de hidrgeno se detecta en tiempo real mediante una celda de combustible tipo PEM (elaborada y donada por el grupo del Dr. Omar Solorza, Cinvestav-Zacatenco) que fue conectada a la salida de la columna de almina. Se midi como respuesta un voltaje debido a la reaccin del hidrgeno producido con el oxgeno del aire, a 10 dando por resultado una seal de voltaje, proporcional a la cantidad de hidrgeno producido por las algas y transformada en agua por la celda. El voltaje es registrado por el mismo sistema utilizado para el registro del pH utilizado tanto en el crecimiento de biomasa como en el sistema de produccin de hidrgeno. La temperatura y la iluminancia tambin son registrados de manera automtica con los sensores programables antes mencionados. Resultados y discusin. La figura 1 muestra los patrones de cambio de la temperatura y la iluminancia de un reactor como consecuencia de su exposicin a las condiciones climticas de varios das. Se observan claramente los perodos de luz/oscuridad, con temperaturas pico que superan los 310 K en das soleados. Sin embargo, las algas fueron capaces de sobrevivir los cortos periodos de altas temperaturas. La figura 2 permite mostrar una curva de crecimiento tpico de la biomasa de microalgas en los reactores, la cual no mostr el ajuste exponencial caracterstico de la cintica de Monod, sino que se ajust mejor al llamado modelo de Gompertz [5-6]. En la tabla 1 se comparan 12 experimentos con los RTV en los que se determinan la densidad celular mxima, la velocidad especfica de crecimiento y el tiempo de residencia, en funcin del medio de cultivo, el dimetro del reactor y la poca del ao del cultivo. La velocidad especfica de crecimiento corresponde a la pendiente de una lnea recta de acuerdo con la ecuacin correspondiente al modelo de Gompertz; en general, el coeficiente de correlacin lineal fue siempre R2 > 0.9. El tiempo de residencia se calcul como el rea bajo la curva de un grfico del inverso de la velocidad instantnea de crecimiento contra la concentracin de biomasa en cada da durante los experimentos [7]. Los experimentos 1 y 2 se realizaron en invierno, la estacin ms fra en Yucatn, con valores promedio de temperatura de 298 K y valores promedio de iluminancia inferiores a 10 klux. En contraste, los experimentos realizados en primavera, la estacin ms calurosa en la regin, con
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valores promedio de temperatura de 303 K y valores promedio de iluminancia superiores a 10 klux.
(a)
residencia corresponden al medio TP, aunque los mayores rendimientos celulares corresponden para el medio Sueoka. Esto se confirm en subsecuentes experimentos simultneos con ambos medios de cultivo y se atribuye a una limitacin de fosfato en el medio TP.
(a)
(b)
(b)
Figura 1. Comportamiento tpico de los valores de (a) temperatura y (b) iluminancia durante un experimento con varios das de cultivo al exterior. En este caso se muestran los comportamientos al interior de dos reactores tubulares verticales (uno con medio Sueoka y otro con medio TP). Tambin se muestran los valores correspondientes para la tapa superior del reactor (al Sol) y para la temperatura ambiente (a la Sombra).
Como puede observarse, en general se observa que los mejores valores de cultivo se registran para el reactor de 95 mm de dimetro. Al comparar los experimentos 1 y 3, 2 y 4, se encuentra la influencia de las condiciones climticas en los cultivos; la temporada invernal muestra mejores condiciones de operacin que la primavera. Finalmente, cuando se comparan los experimentos 1 y 2, 3 y 4, se tiene que los mayores valores de velocidad especfica de crecimiento y los menores valores de tiempo de
Figura 2. (a) Crecimiento tpico de biomasa seguido por densidad ptica, comparando los medios de cultivo Sueoka y TP. (b) Ajuste del modelo de Gompertz al crecimiento de biomasa con el medio Sueoka considerando los valores de peso seco; la pendiente de la lnea representa la velocidad especfica de crecimiento.
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Tabla 1. Comparacin de resultados para 12 experimentos en reactores tubulares verticales de tres distintos dimetros (d). Se muestran los valores de la densidad celular mxima en forma de peso seco (D), la velocidad especfica de crecimiento () y el tiempo de residencia (T). Experimento y medio de cultivo 1. Sueoka d (mm) 70 95 120 70 95 120 70 95 120 70 95 120 D (g/L) 0.01 0.63 0.64 0.60 0.31 0.47 0.45 0.34 0.52 0.44 0.33 0.39 0.35 T (da) 1.0 8.5 7.8 9.8 5.2 3.4 4.1 9.2 7.2 8.0 5.0 3.8 4.5
(da ) 0.22 0.02 0.30 0.02 0.21 0.01 0.42 0.05 0.49 0.03 0.41 0.04 0.09 0.01 0.17 0.01 0.16 0.01 0.49 0.03 0.48 0.01 0.41 0.03
-1
2. TP
3. Sueoka
4. TP
operacin de un reactor, con el fin de aprovechar el mismo sistema para una mxima produccin. Tambin falta por estudiar el efecto de distintos flujos de aire y el uso de una mezcla de aire con dixido de carbono en distintas proporciones, con el fin de encontrar las mejores condiciones de produccin de biomasa. De hecho, la fijacin de dixido de carbono por el cultivo se considera como uno de los limitantes para la produccin de biomasa fotosinttica [9]. En cuanto a la produccin de hidrgeno, la tabla 2 muestra un resumen de los resultados obtenidos hasta ahora de manera preliminar. Aunque se carece an de una calibracin formal de la celda de combustible, ntese que la tasa de produccin de hidrgeno es proporcional al valor medido de la diferencia de voltaje (V) y que, en un grfico de voltaje contra tiempo, el rea bajo la curva corresponde en proporcin a la produccin total de hidrgeno. En general ha podido observarse que la produccin de hidrgeno aumenta gradualmente durante las primeras 30 horas, despus de las cuales se mantiene una tasa de produccin constante por cierto tiempo hasta que decrece a valores de cero o cercanos.
Tabla 2. Produccin de biohidrgeno en funcin de la concentracin inicial de biomasa inicial, con T = 298 K y presin atmosfrica. La tasa mxima de produccin de hidrgeno est representada por Vmax y la produccin total de hidrgeno es proporcional a la seal integrada. Los experimentos en los que no se determin el valor integrado fueron suspendidos antes de culminar la produccin de hidrgeno. Biomasa inicial (mg/L) 48 54 71 164 349 Biomasa final (g/L) 79 87 219 180 835 Seal integrada (Vh) 10166 n.a. 195524 n.a. 614030
Se obtuvieron crecimientos celulares similares en dos cultivos estudiados en el RPP durante la primavera: los valores de densidad celular mxima y velocidad especfica de crecimiento son muy semejantes en los dos tipos de reactores utilizando el medio Sueoka. Esto confirma que el dimetro crtico entre los RTV probados (95 mm) debe considerarse en el ancho de un RPP Por otro lado, cabe mencionar que el RPP fue orientado para que las superficies ms grandes no recibieran radiacin solar directa en ningn momento. Experimentos previos [8] mostraron que los incrementos de temperatura al interior del reactor pueden ser ms intensos si las paredes ms grandes del reactor reciben directamente los rayos del Sol. La ventaja del reactor plano sobre los tubulares verticales es que tienen un mayor volumen de operacin. De hecho, un reactor plano, se puede ver como una serie de reactores tubulares pegados unos a otros sobre una lnea recta. Sin embargo, para escalar un reactor plano es necesario tener varias consideraciones. Como ya se ha visto en lo experimentos con los reactores tubulares, prcticamente el ancho del reactor no puede variarse. El largo de un reactor plano estar limitado por la capacidad tcnica de los materiales de construccin. Finalmente, es posible hacer tambin experimentos para distinguir la altura lmite de
Vmax (mV) 134 19 210 197 220
La duracin de esta etapa de produccin estacionaria est directamente relacionada con la concentracin inicial de biomasa. Sin embargo, la tasa mxima de produccin de hidrgeno prcticamente no cambia entre 71 mg/L y 349 mg/L de concentracin inicial de biomasa. En el caso del experimento con biomasa inicial de 54 mg/L, la produccin de biohidrgeno fue significativamente menor que en los otros casos
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porque las clulas provinieron de un cultivo previamente adapatado a condiciones anaerobias, por lo que se piensa que las clulas estaban daadas. Se realiz tambin un experimento con el medio TP en vez del medio TAP, pero no se observ la ms mnima produccin de hidrgeno, lo que confirma la necesidad de tener acetatos en el medio de cultivo para inducir la bioproduccin de hidrgeno [10]. En cuanto al pH, no se encontraron cambios significativos durante los experimentos de produccin de hidrgeno, con valores entre 7.0 y 7.5 en la escala de pH como funcin del tiempo. En cambio, de las mediciones de temperatura se encontr que la temperatura del cultivo fue invariablemente ms baja que la temperatura ambiente, por lo que se postula un metabolismo de tipo endotrmico para estos sistemas. Ms an, la diferencia de temperaturas entre el reactor y el laboratorio se hace ms pronunciada para concentraciones bajas de biomasa, lo que implica que el efecto de autosombreado de las clulas a concentraciones altas de biomasa desfavorece el proceso endotrmico. Este autosombreado se puede seguir de las medidas de iluminancia al interior del reactor como funcin del tiempo cuando la fuente luminosa es constante. Finalmente, es necesario mencionar que en todos los experimentos de produccin de biohidgeno, debido a la presencia de acetato en el medio de cultivo TAP y a que no se tuvieron condiciones de total asepsia, se encontraron productos de contaminacin biolgica de la cepa de microalgas. Un conjunto de bacterias y hongos son acumulados en el medio de cultivo, formando una biomembrana orientada hacia la parte del reactor con mayor iluminacin; la contaminacin aporta colores entre rojizos y marrn al sistema. Adems de poder identificar estas especies contaminantes, sera interesante saber si estas contribuyen de cierta forma a la produccin de hidrgeno del sistema. Otros experimentos que se planean hacer son estudiar el efecto de distintas intensidades luminosas y los ciclos luz/oscuridad, antes de probar la bioproduccin de hidrgeno en reactores al aire libre. Conclusiones. Las microalgas de Chlamydomonas reinhardtii se pueden adaptar a las condiciones climticas de la pennsula de Yucatn, por lo que su cultivo en reactores al aire libre es posible. Existen varios estudios por realizar para mejorar la produccin de biomasa de C. reinhardtii y convertirla en un proceso econmicamente viable. La produccin de biohidrgeno ha sido probada en condiciones no
aspticas pero con temperatura e iluminacin controladas. Se ha encontrado que existe un incremento en la cantidad de hidrgeno producido como funcin de la concentracin de biomasa, aunque el efecto de autosombreado entre clulas se hace evidente. Deber probarse la bioproduccin de hidrgeno por C. reinhardtii en reactores al aire libre para poder integrar un proceso atractivo para la produccin sostenible de hidrgeno. Agradecimientos. Este proyecto est siendo financiado por el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (Conacyt-Mxico) y por el Gobierno del Estado de Yucatn a travs del sistema de Fondos Mixtos. Se agradece tambin la asistencia tcnica de la Q.B.B. Mara Luisa Zaldvar Romero. Bibliografa.
1. Rupprecht J. (2009). From systems biology to fuelChlamydomonas reinhardtii as a model for a systems biology approach to improve biohydrogen production. Journal of Biotechnology. 142:10-20. 2. Sorensen B. (2005). Hydrogen and fuel cells: emerging technologies and applications. Elsevier, Estados Unidos de Norteamrica. 450 pp. 3. Chlamydomonas Center. (2010). Recipes for Commonly used culture media. Disponible en www.chlamy.org. 4. A. Hemschemeier, A. Melis, T. Happe. (2009). Analytical approaches to photobiological hydrogen production in unicellular green algae. Photosynthesis research 102:523-540. 5. P. Castorina, P.P. Delsanto, C. Giot (2006). Classification scheme for phenomenological universalities in growth problems in physics and other sciences. Physical Review Letters 96: 188701(1-4). 6. P. Castorina, T.S. Deisboeck, P. Gabriele, C. Giot. (2007). Growth laws in cancer: implications in radiotherapy. Radiation Research Society 168: 349-356. 7. J.M. Lee (2001). Biochemical engineering. Prentice-Hall, Estados Unidos de Norteamrica. Captulo 6. 8. L. Pant, P. Chvez, D. Robledo, R. Patio. (2007). A solar photobioreactor for the production of byohydrogen from microalgae. Solar Hydrogen and Nanotechnology Proc. of SPIE. SPIE. San Diego, 2007, 66500Z166500Z9. 9. H.J. Ryu, K.K. Oh, Y.S. Kim. (2009). Optimization of the influential factors fo the improvement of CO2 utilization efficiency and CO2 mass transfer rate. Journal of Industrial and Engineering Chemistry.15:471-475. 10. S. Fouchard, A. Hemschemeier, A. Caruana, J. Pruvost, J. Legard, T Happe, G Peltier, L. Cournac. (2005) Autotrophic and mixotrophic hydrogen photoproduction in sulfur-deprived Chlamydomonas cells. Applied and Environmental Microbiology 71:6199-6205.
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PRODUCCIN SOSTENIBLE DE BIOHIDRGENO A PARTIR DE MICROALGAS

Julia S. Martn del Campo 1, Daniel Robledo 2, Rodrigo Patio 1*
1
Departamento de Fsica Aplicada, 2 Departamento de Recursos del Mar, Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados Unidad Mrida, A.P. 73 Cordemex, 97310 Mrida, Yucatn, Mxico, *+(999) 942 9438, rtarkus@mda.cinvestav.mx. Palabras clave: Chlamydomonas reinhartii, sostenibilidad, hidrgeno
Introduccin. El uso excesivo de combustibles de origen fsil en el ltimo siglo ha dado paso a dos problemas fundamentales de orden mundial: la amenaza continua de un desabastecimiento de recursos energticos para las demandantes sociedades de consumo y la inminente desestabilizacin del equilibrio ecolgico de nuestro planeta. Se conoce que el cambio climtico de nuestros das es consecuencia precisamente de un aumento de gases de efecto invernadero en la atmsfera, por causa del modelo energtico explotado masivamente durante el siglo XX a partir de combustibles fsiles. Existen fuentes alternativas de energa que intentan mitigar estos problemas mediante el uso de recursos naturales renovables que tienen como origen primario la energa proveniente del Sol. Entre estas fuentes alternativas de energa se encuentran los biocombustibles, que se ofrecen como una opcin a los combustibles fsiles, en la que los insumos son organismos vivos que, de manera directa o indirecta, captan la radiacin solar a travs de procesos fotosintticos y la transforman en sustancias qumicas con alto valor energtico que puede recuperarse a travs de la combustin. Tambin es atractivo de los biocombustibles su efecto neutro en los gases de efecto invernadero que se producen para obtener energa, principalmente dixido de carbono, pues el carbono liberado como emisin fue previamente captado fotosintticamente en un ciclo muy rpido comparado con la formacin de combustibles fsiles [1-2]. Por otro lado, el hidrgeno, H2, tambin se ha propuesto como un combustible alternativo de gran potencial en el futuro por no generar gases de efecto invernadero durante su combustin. Su conversin a energa trmica, mecnica o elctrica lo convierte en un vector energtico verstil. Si se extrae el gas hidrgeno a partir del agua, se tiene una fuente infinita del combustible, pues el agua es regenerada en un ciclo despus de la combustin. Sin embargo, la produccin masiva de hidrgeno presenta an grandes retos econmicos y de sostenibilidad: de la
produccin comercial actual, ms del 90% de hidrgeno se obtiene de combustibles con carbono, principalmente los de origen fsil, y mediante procesos que utilizan grandes cantidades de energa. Slo una pequea porcin del hidrgeno producido comercialmente utiliza un proceso renovable con agua como materia prima y radiacin solar como fuente energtica [3]. Una propuesta interesante es entonces la produccin de hidrgeno a travs de bioprocesos, con la intencin de unir ambas ventajas inherentes a los biocombustibles y al hidrgeno. En efecto, distintos microorganismos tienen la capacidad de producir H2, algunos lo hacen como parte de su metabolismo natural: las bacterias anaerbicas producen hidrgeno a travs de las fermentaciones o las cianobacterias por medio de la fijacin de nitrgeno. Otros microorganismos producen hidrgeno como consecuencia de ciertas condiciones de estrs, por ejemplo, las microalgas durante la fotosntesis anoxignica o las cianobacterias en una fotofermentacin [4]. Las microalgas y cianobacterias llaman la atencin por su capacidad de utilizar directamente la energa solar en sus sistemas fotosintticos y la posterior produccin de hidrgeno. En este trabajo se propone la produccin de biohidrgeno a partir de microalgas como un proceso alternativo que busca la sostenibilidad. Se orienta esta bsqueda a un procedimiento que sea econmico, simple, amigable con el medio ambiente, de fcil transferencia tecnolgica y aplicado en comunidades rurales. Metodologa. Se utiliza la cepa CC-124 de Chlamydomonas reinhardtii proveda por Chlamydomonas Center (Estados Unidos de Norteamrica). El proceso de produccin se plantea en dos etapas: una primera en la que se produce biomasa microalgal y otra posterior en la que se induce la sntesis de biohidrgeno en condiciones anxicas a partir de las microalgas [5]. En ambas etapas se prueba el empleo de biorreactores construidos en acrlico transparente
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para poder captar la iluminacin procedente del exterior. Los reactores para la produccin de biomasa, con capacidades entre 3 y 20 L de cultivo, se han probado con luz natural, es decir, radiacin solar en ciclos luz/oscuridad marcados por el da y la noche. En cambio, la produccin de biohidrgeno slo ha sido probada con luz artificial fluorescente continua en reactores tubulares verticales con volumen de 1 L. Se hace un cambio de medio de cultivo entre los procesos de produccin de biomasa y biohidrgeno; este cambio se propone en este trabajo a travs de una columna empacada con borra de algodn que retiene las clulas pero deja pasar por fuerza de gravedad el medio de cultivo. Las clulas se lavan con el nuevo medio de cultivo y se recuperan para la bioproduccin de hidrgeno. Algunas de las condiciones del cultivo, tanto en la produccin de biomasa como en la de biohidrgeno, pueden medirse automticamente: la temperatura y la iluminancia se determinan mediante sensores programables (HOBO Pendant UA-002-64, Onset), el pH y el pO2 se determinan mediante sensores (Sensorex) conectados a una fuente de poder y una interfaz (cDAQ-9172, National Instruments) conectada a su vez con una computadora donde los datos son capturados a travs del programa LabView Signal Express (National Instruments). La produccin de hidrgeno se detecta en tiempo real mediante una celda de combustible no comercial conectada a la misma interfaz, dando por resultado una seal de voltaje, proporcional a la cantidad de hidrgeno producido por las algas y transformada por la celda. Lo insumos energticos para mantener los cultivos de algas en las dos etapas de produccin, bsicamente para burbujeo de aire en la primera etapa y para mezclado en la segunda etapa, se proponen obtener a partir de una planta hbrida solarelica en la que se tienen cuatro paneles solares fotovoltaicos policristalinos (4 x 110 W, Yingli Solar), un generador elico (1000 W, Whisper 200, Southwest Windpower), junto con un banco de cuatro bateras de plomo cido (4 x 6 V, Rolls Surette) y un inversor de corriente directa de 24 V a corriente alterna de 120 V (DR1524, Xantrex). La produccin de corriente elctrica en este sistema hbrido se pretende correlacionar con los recursos solar y elico medidos a travs de un sistema meteorolgico (Vantage Pro 2 Plus, Davis). Entre otros datos, la estacin meteorolgica incluye velocidad y direccin del viento, radiacin solar y temperatura ambiente en el lugar de la instalacin, Estacin Marina del Cinvestav, ubicada en Telchac Puerto, Yucatn (5 m snm, LAT: 21 20' 28" N, LONG: 89 18' 21" W).
El hidrgeno producido ser convertido a corriente elctrica a travs de una celda de combustible que se integrar al sistema hbrido solar-elico. Los flujos energticos del sistema completo sern seguidos en tiempo real a travs de una interfaz (Field Point, National Instruments) que permitir la adquisicin automtica de datos por medio de programacin en LabView Real-Time (National Instuments). Resultados y discusin. Por la naturaleza multidisciplinaria del proyecto, en este trabajo se muestran solamente resultados parciales, con la idea de integrarlas en un trabajo futuro. Los detalles de la produccin de biomasa y biohidrgeno se muestran en otro trabajo presentado en el mismo Congreso [6]. Se tiene por resultado que la produccin de biomasa es posible en reactores al aire libre con dos tipos de diseo: planos tipo panel y tubulares verticales. El mximo de concentracin de biomasa se logra entre los 6 y 12 das de cultivo, dependiendo de las condiciones del cultivo. La figura 1 muestra un par de fotografas con los dos diseos utilizados.
Figura 1. Fotografas que muestran los dos diseos de reactores para probar la produccin de biomasa algal en condiciones al aire libre: reactor plano tipo panel y reactores tubulares verticales.
Entre los dos diseos de reactores, se destaca el reactor plano porque permite el manejo de mayores volmenes de cultivo y amortiguar las variaciones de temperatura. Estas ltimas, al disminuirse, evitaran afectar el crecimiento adecuado del cultivo. Los reactores tubulares, sin embargo, se caracterizan por su fcil manejo para el estudio comparativo de distintas condiciones de cultivo, lo que los hace ms prcticos en trabajos de investigacin. An es posible incrementar la produccin masiva de biomasa proponiendo un mejor sistema de intercambio gas/lquido, estudiando distintos flujos de burbujeo con aire, aadiendo un porcentaje de dixido de carbono al aire que se burbujea o controlando el pH.
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Tambin se trabaja en cambiar la composicin del medio de cultivo, buscando una reduccin en su costo por el uso de fertilizantes comerciales, y en cambiar la operacin por lotes a una produccin semicontinua. Aunque en la literatura [5] y en experiencia propia, apenas se tienen estudios de la produccin de hidrgeno por las microalgas en condiciones controladas de laboratorio (ver figura 2), es posible tener algunas guas para la implementacin en sistemas al aire libre. Los resultados de este trabajo muestran que la produccin de hidrgeno es posible en el sistema propuesto durante procesos continuos de hasta 16 das de duracin. La cantidad de hidrgeno producido depende de la concentracin de biomasa algal utilizada en el cultivo. Queda por probar la influencia de la intensidad luminosa en el bioproceso, as como de los periodos luz/oscuridad, antes de proponer un sistema al aire libre que funcione con luz natural. El sistema de produccin de biohidrgeno est acoplado a la fotosntesis, por lo que depende justamente de la calidad y cantidad de iluminacin que se le proporcione a las microalgas. Sin embargo, tambin se ha observado que la cantidad de hidrgeno producido depende de un efecto de autosombreado que se hace ms evidente a concentraciones altas de biomasa.
columna empacada con borra de algodn para separar las microalgas del medio de cultivo utilizado en el crecimiento celular, enjuagar y recuperar las clulas en el medio de cultivo utilizado para la induccin de la bioproduccin de hidrgeno. Se est diseando ahora un proceso integral donde la biomasa se obtiene de un primer reactor semicontinuo, en el que existe un flujo intermitente de entrada con medio de cultivo fresco y un flujo de salida hacia el sistema de separacin. Las clulas recuperadas se introducen a un segundo reactor para la obtencin de hidrgeno en un proceso por lotes. Por otro lado, se han hecho algunos anlisis del potencial de recursos solar y elico en Telchac Puerto a partir de las correspondientes mediciones de las condiciones meteorolgicas. A manera de ejemplo, en la figura 3 se muestra un grfico con resultados durante poco ms de un ao para los valores promedio mensuales de la temperatura, la radiacin solar y la velocidad del viento. Aunque no se observa variaciones grandes durante el ao, en general se pueden observar dos periodos para la temperatura: un periodo corto invernal con temperaturas entre 295 K y 298 K, y un periodo ms largo con temperaturas entre 298 K y 301 K. Para las radiaciones solares, se encuentran dos periodos correlacionados con los mencionados para la temperatura, uno con radiaciones menores a 250 Wm-2, y otro con radiaciones mayores a este valor. Con respecto a las velocidades de viento, se encuentran dos grupos, uno con valores promedio mensuales entre 6.2 ms-1 y 4.7 ms-1 y otro con valores entre 4.1 ms-1 y 3.6 ms-1.
Figura 2. Fotografas que muestran el sistema para bioproduccin de hidrgeno por microalgas en condiciones de laboratorio.
Los procesos de produccin de biomasa y biohidrgeno deben integrarse a travs de un proceso de separacin que permita cambiar el medio de cultivo de las microalgas e inducir los cambios metablicos correspondientes. Los resultados de este trabajo muestran que es posible utilizar una
Figura 3. Valores promedio mensuales de temperatura (T), radiacin solar (R) y velocidad del viento (V) durante 14 meses consecutivos en Telchac Puerto, Yucatn.
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No se encontr una correlacin directa entre los valores de la velocidad del viento y la radiacin solar, por lo que se pueden considerar complementarios ambos recursos en una planta hbrida. Es necesario recalcar tambin que esta complementariedad se hace evidente en el transcurso de un da, pues la radiacin solar est limitada slo al periodo diurno, mientras que los vientos pueden tenerse prcticamente en cualquier momento del da. Con los datos meteorolgicos obtenidos se estn calculando los valores de energa que pueden producirse con la planta elctrica hbrida solar-elica. Los valores energticos calculados permitirn hacer una estimacin del potencial de escalamiento de la planta de produccin de biomasa y biohidrgeno. El anlisis meteorolgico durante varios aos permite hacer una mejor estimacin de los recursos solar y elico en una zona geogrfica. Ser interesante comparar estos mismos recursos energticos con los del puerto de Sisal y de la ciudad de Mrida, ambos en la pennsula de Yucatn, donde tambin se cuenta con estaciones meteorolgicas, para analizar la variacin entre distintos puntos geogrficos de la regin. Finalmente, se tienen algunos comentarios con respecto de la planta elctrica hbrida solar-elica. Estas tecnologas se comercializan de manera ms o menos habitual pero los costos de inversin an son altos para competir con los costos de la red elctrica a costo y mediano plazo. A pesar de que se ofrecen en el mercado como productos de uso amigable, no se cuenta realmente con las facilidades para su instalacin y su mantenimiento, incluyendo materiales de repuesto, por lo que la operacin de los equipos pude ser bastante complicada. En la figura 4 se muestran fotografas de los sistemas instalados en la Estacin Marina del Cinvestav.
Figura 4. Fotografas que muestran la planta elctrica hbrida solar-elica instalada en Telchac Puerto.
En cuestiones de costos de inversin por capacidad de produccin de energa, las celdas fotovoltaicas son un 50% ms costosas que el generador elico. Sin embargo, el sistema solar fotovoltaico fue de fcil instalacin y no requiere mayor mantenimiento durante su uso, adems de tener un tiempo de vida de hasta 25 aos. La turbina elica, por su parte, implica asistencia para su instalacin, adems que requiere de un servicio de mantenimiento al menos cada seis meses, para limpiar los productos de corrosin ocasionados por el ambiente marino; su tiempo de vida no es mayor a 5 aos. Los sistemas electrnicos de control de la planta elctrica requieren de un cuidado especial para evitar la corrosin de sus partes y afectar su buen funcionamiento. Estn en proceso los procedimientos para la adquisicin automtica de los datos de energa producida por la planta elctrica hbrida, as como un anlisis de correlacin de la cantidad energtica producida por la planta con los recursos estimados de los datos obtenidos de la estacin meteorolgica. La integracin de los bioprocesos con el sistema hbrido es la meta final, con el fin de hacer una valoracin de los costos de produccin de hidrgeno utilizando esta estrategia, compararlos con otros procedimientos y establecer un criterio de pertinencia para modificar una o varias partes de la planta de produccin. Conclusiones. Entre las ventajas del proceso se tiene que la produccin de biomasa implica la captacin del gas dixido de carbono del aire como parte del proceso fotosinttico. Otras ventajas del cultivo de microalgas son (i) que no compite con los procesos de produccin de alimentos ni con las tierras de cultivo, (ii) que el agua utilizada puede ser reciclada en el proceso, (iii) que los nutrientes requeridos se reducen a algunas sales inorgnicas en pequeas concentraciones y (iv) que se utiliza luz solar como fuente renovable de energa. En cuanto a la produccin de hidrgeno, se tiene la ventaja de que se utiliza agua como fuente de materia prima y que las algas al final del proceso se pueden usar como abono o alimento para animales. Tambin se consideran otros factores que aumentan la sostenibilidad del proceso: el aprovechamiento de los recursos energticos de la regin (energa solar y elica), as su aplicacin en comunidades rurales
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como una fuente autogeneradora de la propia energa de consumo y como una actividad econmica alternativa. Agradecimientos. Este proyecto est siendo financiado por el Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologa (Conacyt-Mxico) y por el Gobierno del Estado de Yucatn a travs del sistema de Fondos Mixtos. Bibliografa.
1. Sorensen B. Renewable energy; its physics, engineering, environmental impacts, economics & planning. 3 ed. (2004). Elsevier, Estados Unidos de Norteamrica, 928 p. 2. Hinrichs R.A., Kleinbach M.. Energy: its use and the environment. 4 ed. (2006). Thomson Brooks/Cole, Estados Unidos de Norteamrica, 2006. 3. Patio R. (2009). Ecologa contra economa: es el biohidrgeno el combustible del futuro?. IX Congreso Internacional de la SMH. Sociedad Mexicana del Hidrgeno. Saltillo (Coahuila), septiembre de 2009, 702-708. 4. Martn del Campo J.S., Patio R. (2010). Mtodos de bioproduccin de hidrgeno. X Congreso Internacional de la SMH. Sociedad Mexicana del Hidrgeno. Toluca (Estado de Mxico), septiembre-octubre de 2010. 5. Hemschemeier A, Melis A., Happe T. (2009). Analytical approaches to photobiological hydrogen production in unicellular green algae. Photosynth. Res. 102: 523540. 6. Escalante R., Kauil G., Martn del Campo J.S., Patio R. (2010). Produccin de biomasa y biohidrgeno de microalgas en reactores al aire libre. Segundo Congreso SOLABIAA. Sociedad Latinoamericana de Biotecnologa Ambiental y Algal. Cancn (Quintana Roo), diciembre de 2010.
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CAPACIDAD DE ADSORCIN DE Pb2+ DE Leptolyngbya crossbyana, CIANOBACTERIA RIZOSFRICA DEL MANGLE NEGRO (Avicennia germinans). Roxana Angeles-Torres, Gloria Snchez-Galvn y Eugenia J. Olgun* Red de Manejo Biotecnolgico de Recursos. Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz, 91070 Mxico. * Autor de correspondencia: eugenia.olguin@inecol.edu.mx 1.INTRODUCCIN La contaminacin por metales pesados es uno de los problemas medioambientales ms importantes, especialmente cuando contaminan cuerpos de agua. Este tipo de contaminantes impactan negativamente a diversos ecosistemas, entre los que se encuentran los manglares. stos son muy vulnerables a los impactos por derrames de petrleo y efluentes contaminantes en general. Su capacidad de resistencia a contaminantes y de resiliencia depende de la capacidad tanto de los mangles como de sus comunidades microbianas asociadas a sus races. El uso de plantas y microorganismos acuticos para remover metales del agua a travs de procesos de bioacumulacin y bioadsorcin es un campo con amplio potencial para contribuir a la conservacin del medio ambiente. La ficorremediacin es el uso de macroalgas o microalgas para la remocin o biotransformacin de nutrientes y otros contaminantes tales como los metales pesados en cuerpos de agua (Olgun y col., 2003). Estos microorganismos son capaces de remover metales mediante procesos de bioadsorcin y bioacumulacin (Wang y col., 1998). Existen muy pocas investigaciones relacionadas al uso de microalgas rizosfricas de plantas para la remocin de metales pesados. En una reciente investigacin, se aislaron diversas cianobacterias de pneumatforos de Avicennia germinans (Rubio y Olgun, 2008), determinando que debido a sus caractersticas de crecimiento, dos de las cepas aisladas y cultivadas en medio ASN-III modificado tienen potencial para la ficorremediacin y restauracin de manglares. El objetivo de este trabajo fue evaluar la capacidad de adsorcin de Pb2+ de Leptolyngbya crossbyana , cianobacteria filamentosa , aislada de los pneumatforos de A. germinans. 2.MATERIAL Y MTODOS 2.1 Cintica de crecimiento en matraces El crecimiento de Leptolyngbya crossbyana se evalu durante 12 das en matraces Erlenmeyer de 250 mL, conteniendo 100 mL medio ASN-III modificado (con 50 g NaCl/L), el cual es especifico para cianobacterias fijadoras de nitrgeno (Toledo y col., 1995) Los matraces se incubaron en condiciones controladas de intensidad luminosa y temperatura (213 mol/m s y 252 a un pH de 7.6 y a una agitacin de 150 rpm. Cada dos das se C), monitore el crecimiento del microorganismo mediante la determinacin de peso seco. Se calcul la velocidad especfica de crecimiento utilizando la siguiente ecuacin: (da-1) =ln Nt-ln N0)/t donde: N0= Peso seco al tiempo cero Nt= Peso seco al tiempo final t= Diferencia del intervalo de tiempo (tt-to).
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2.2 Cultivo y produccin de biomasa de Leptolyngbya crossbyana La biomasa se cultiv en el medio ASN-III modificado (con 50 g NaCl/L). Se utilizaron reactores tipo pecera con un volumen de medio de 2 L. Estas unidades experimentales se incubaron en una cmara de crecimiento bajo las condiciones ambientales descritas en la seccin anterior. La biomasa fue retirada del cultivo a travs de filtracin (papel filtro Whatman N 4) despus de 15 das. Posteriormente se sec (35 24 hrs), se moli y se C, tamiz (malla 40). 2.3 Caracterizacin fisicoqumica del bioadsorbente La superficie especfica se determin al cuantificar la adsorcin de azul de metileno en la biomasa seca de Leptolyngbya crossbyana mediante espectrofotometra (Kaewprasit y col., 1998.). La acidez total, acidez carboxlica e hidroxifenlica se determinaron de acuerdo a Prado y col. (1999) y Schneider y Rubio (1999). 2.4 Diseo experimental Las unidades experimentales fueron tubos de vidrio conteniendo 5 mL de una solucin de nitrato de Pb2+ a un pH de 4.5 y con diferentes concentraciones de Pb2+ (Ci): 12.80, 34.40, 79.80, 112.30 y 122.40 mg/L. Se montaron 3 unidades experimentales por cada tratamiento colocando 0.005 g de biomasa seca en cada una. Como controles se utilizaron 2 unidades experimentales con agua desionizada con plomo y sin la cepa. Se evaluaron 4 diferentes tiempos de contacto 10, 20,30,40,50 y 60 min. Los tubos se colocaron dentro de una cmara de crecimiento y se agitaron a una velocidad de 150 rpm a una temperatura de 252 C. Cumplido el tiempo de contacto establecido, se filtr la biomasa (papel filtro Whatman N 1, 11m) y el filtrado se recolect y almacen en refrigeracin hasta la cuantificacin del contenido de plomo a travs de espectrofotometra de absorcin atmica. Se utiliz un ANOVA para evaluar las diferencias entre medias de los tratamientos y regresiones lineales para obtener las variables de los modelos de adsorcin. 2.5 Determinacin de la remocin de Pb+2 y de la capacidad de adsorcin de la biomasa seca de Leptolyngbya crossbyana qmx) Porcentaje de remocin de Pb+2: %R=[Ci-Cf]/Ci(100) donde: Ci= Concentracin inicial de plomo (mg/L) Cf= Concentracin final de plomo (mg/L) Capacidad de adsorcin de Pb+2 (q) (Volesky, 2004): q= [( q= Capacidad de adsorcin (mg metal/g adsorbente) Ci= Concentracin inicial de plomo (mg/L) Cf= Concentracin final de plomo (mg/L) V= Volumen de la solucin a tratar (L) s= Cantidad de material adsorbente (g) El equilibrio de adsorcin se evalu utilizando dos modelos: a) Modelo de Langmuir: q=qmxbCe/1+bCe donde: Cf= Concentracin del metal en solucin en el equilibrio b= Constante de afinidad adsorbato/adsorbente
)V]/s donde:
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qmx= Capacidad mxima de adsorcin (mg/g) Se utiliz la forma lineal del modelo, al graficar 1/q vs 1/ Cf se obtiene como pendiente 1/qmaxb mientras 1/qmax es el intercepto. b) Modelo de Freundlich: q=K Ce 1/n donde: Kf= Capacidad del adsorbente n= Intensidad de adsorcin La ecuacin anterior se lineariz y al graficar log q contra log Ce se obtiene la pendiente que es n y Kf es el antilogaritmo del intercepto. 3. RESULTADOS Y DISCUSIN El crecimiento de L. crossbyana en matraces fue evaluado a lo largo de 12 das (Figura 1). Los resultados mostraron dos fases exponenciales de crecimiento, la primera (1) del da 0 al 6 y una segunda fase (2) del da 6 al 8. El valor de 1 fue 0.08 d-1 y el de 2 fue 0.20 d-1. Esto confirma que la cepa tiene un crecimiento acelerado en condiciones de cultivo con alta concentracin salina. En trabajos previos (Rubio y Olgun, 2008) se encontr un perfil de crecimiento muy similar al observado en este trabajo.
Tabla 1. Caracterizacin fisicoqumica parcial de la biomasa no viable de la cepa D. Parmetro Superficie especfica Acidez total Acidez carboxlica Acidez hidrofenlica Valor 45,580 m/g 11 mmolH+/g 0.2 mmolH+/g 10.8 mmolH+/g
Figura 1. Cintica de crecimiento de la cepa D cultivadaen medio ASN-III modificado con 50 g/L NaCl.
Tambin se realiz una caracterizacin fsico-qumica de la biomasa seca y se encontr una superficie especfica muy alta (Tabla 1). La superficie especfica determina el rea que presenta un gramo del material, es decir, a mayor rea superficial se supone una mayor cantidad de sitios activos disponibles para la adsorcin de los iones metlicos. El valor encontrado en L. crossbyana se puede considerar alto comparado con otras microalgas tales como Spirogyra sp., Oedogonium sp. y Nostoc sp. las cuales mostraron valores de 1.3, 1.22 y 1.14 m2/g determinado por el mtodo BET (Gupta y Rastogi., 2007). El hecho de encontrar valores tan diferentes entre estas microalgas, se puede deber a que el valor de superficie especfica es intrnseco de cada cepa y adems, a que se utilizaron mtodos
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diferentes entre el presente trabajo y los dos reportes antes mencionados. Por otro lado, la acidez total comprende a los grupos carboxilo e hidroxi-fenlicos y es importante dado que se ha comprobado que se encuentran en la pared celular y que atraen y secuestran a los iones metlicos (Lee y col., 2002). En la cepa aqu descrita, se encontr un alto contenido especialmente de grupos carboxilo (Tabla 1). Se ha descrito que stos constituyen el porcentaje ms alto (ms del 70%) de los sitios titulables en la biomasa de las algas cafs (Davis et al., 2003). Se probaron Ci desde 12 hasta 122 mg Pb2+/L y en trminos generales despus de 60 min el % de remocin de Pb2+ encontrado fue entre 35 y 53% (Tabla 2). Especialmente en las Ci ms altas, el Pb2+ fue removido en ms del 70% en tan slo los primeros 10 min. Sin embargo, no se encontr un efecto de la Ci o tiempo de exposicin sobre el % de remocin del metal. Tabla 2. Porcentajes de remocin de Pb2+ (%) usando biomasa no viable de Leptolyngbya crossbyana Tiempo Concentracin inicial de Pb2+ (mg/L) (min) 12.80 34.40 79.80 112.30 122.40 10 22.040.55 87.770.75 42.616.76 48.784.71 32.591.00 20 7.923.21 49.001.41 57.531.94 52.101.60 32.932.49 30 45.872.20 42.774.22 47.754.46 47.932.54 46.312.95 40 32.208.80 58.866.27 41.034.83 33.681.05 36.082.00 50 39.7621.3 54.642.19 48.381.64 44.018.48 39.483.81 60 50.003.93 52.974.59 42.342.98 35.111.99 46.435.53 Se calcul la capacidad de adsorcin en todos los tratamientos (q) (Figura 2). Los resultados mostraron que si hubo un efecto de la Ci sobre la q especialmente entre la Ci de 12.8 y 34.4 mg Pb2+/L y entre stas y las Ci ms altas (p<0.05). No se observ un efecto del tiempo de exposicin sobre la q. El equilibrio de adsorcin se evalu usando el modelo de Langmuir y el de Freundlich (Tabla 3) y se encontr que los datos se ajustaron a ellos con un alto coeficiente de determinacin (r). De Philippis y col. (2003) encontraron una qmax de 962 y 793 mg de Cu2+/g para Cyanospira capsulata y Nostoc PCC7936, respectivamente. Por otro lado, Hernndez y Olgun (2002) evaluaron la capacidad de adsorcin de Spirulina sp. y encontraron una qmax para plomo de 172.41 mg/g de clulas, cuando la biomasa se produjo en un medio complejo y una intensidad de luz que favorecieron la acumulacin de polisacridos. Sin embargo, en otros estudios como el realizado con la cianobacteria Gloeocapsa sp, se encontr una qmax de 232.56 mg/g de adsorcin de plomo (Raungsomboon y col., 2008), lo cual indica que la composicin de la pared celular de esta cianobacteria favorece la adsorcin.
Tabla 3. Parmetros de los modelos de equilibrio de adsorcin

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100
Capacidad de adsorcin (q) mg Pb2+/g biomasa
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0
12.8 mg Pb/L 79.8 mg Pb/L 122.4 mg Pb/L
34.4 mgPb/L 112.3 mg Pb/L
Langmuir qmax=142.860.00 b=0.010.00 r2=0.9976
Freundlich Kf=1.280.004 n=0.830.01 r2=0.9966
10
20
30
40
50
60
70
Tiempo de exposicin (min)
Figura 2. Capacidad de adsorcin de Pb2+ por la cepa D a diferentes tiempos de exposicin y Ci.
De acuerdo a las investigaciones antes descritas, se puede considerar que la capacidad mxima de bioadsorcin de Leptolyngbya crossbyana, cianobacteria aislada de pneumatforos de Avicennia germinans , se encuentra dentro del rango reportado de las cianobacterias como materiales bioadsorbentes, adems de los reportados para otros microorganismos. 4.CONCLUSIONES Leptolyngbya crossbyana tiene una gran capacidad de adsorcin de Pb+2, lo que sugiere que en condiciones naturales, esta cianobacteria rizosfrica puede contribuir a que los mangles negros acten como una barrera de resistencia a contaminacin por metales y contribuir a la resiliencia del ecosistema. AGRADECIMIENTOS. Este trabajo recibi financiamiento a travs del proyecto CONACYT104173 de la convocatoria SNI-Estudiantes-2008-01. Se agradece el apoyo tcnico de la M en C. Karla Tapia Fierro. Se agradece el trabajo de identificacin taxonmica realizado por el Dr. Eberto Novelo del Departamento de Biologa Comparada, grupo de Ecologa y Taxonoma de Algas continentales, de la Facultad de Ciencias, UNAM. REFERENCIAS Davis, T.A., Volesky, B., Mucci, A. 2003. A review of the biochemistry of heavy metal. Water Res 37:4311-4330. De Philippis R., Paperi R., Sili C. y Vincenzini M. (2003). Assessment of the metal removal capability of two capsulated cyanobacteria, Cyanospira capsulata and Nostoc PCC7936. J. Applied Phycol. 15: 155161. Gupta ,V. K. y Rastogi A. (2007). Biosorption of lead from aqueous solutions by green algae Spirogyra species: Kinetics and equilibrium studies. J. Hazardous Materials. 152: 407-414.
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BIORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS EN LA ZONA COSTERA DE PUNTA MAJAGUA. CIENGUEGOS.
Jelvys Bermdez Acosta1, David J. Castro Rodrguez 2, Jos Reinol Poma2, Jelvys Bermdez Acosta.*
1
Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos, *Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos. Carretera Castillo de Jagua km1/2, Ciudad Nuclear, Cienfuegos, Cuba. Telfonos: (53) (43) 965146, 525478.E-mail: ceac@ceac.cu. Palabras Clave: Biorremediacin, Bioestimulacin, Bioaumentacin
Introduccin Los crudos de petrleo se caracterizan por ser lquidos negros, viscosos y con una composicin qumica sumamente compleja, pudiendo contener miles de compuestos, bsicamente de la familia de los hidrocarburos [1]. Su manejo genera grandes volmenes de residuos, fundamentalmente, lodos petrolizados, aguas de formacin y petrleo crudo, los cuales son difciles de degradar de manera natural por la complejidad de su estructura. Las investigaciones relacionadas con la biorremediacin surgen como una alternativa eficiente para la recuperacin de los ecosistemas. Esta tcnica aprovecha la capacidad que tienen los microorganismos de crecer a partir de sustancias nocivas al medio ambiente, de manera que la degradan hasta dixido de carbono y agua [2], adems, permite tratar grandes volmenes de contaminantes con un impacto ambiental mnimo, a diferencia de otros procedimientos de descontaminacin [3]. Dentro de los mtodos de biorremediacin estn la bioestimulacin y bioaumentacin. La bioestimulacin, consiste en la adicin de nutrientes, sustratos o tensioactivos que estimulen el crecimiento y actividad metablica de los microorganismos degradadores presentes en la zona impactada [4-5]. La bioaumentacin comprende el uso de enzimas o cultivos de microorganismos con alta capacidad de oxidacin con el propsito de eliminar sustancias indeseables [6], donde se asegura que estn presentes los microorganismos especficos capaces de degradar al compuesto contaminante no deseado hasta sus molculas bsicas [7]. La zona de anlisis est localizada en la pennsula de Punta Majagua, ubicada en la
porcin centro norte de la Baha de Cienfuegos (Fig. 1).
La severa contaminacin ambiental en el rea tuvo como origen la presencia de restos de cuatro tanques con aproximadamente 479 m3 de fuel-ol de alta viscosidad, altos contenidos de sedimentos y agua, tras el abandono de las instalaciones de la Unidad Distribuidora de Combustibles de Cienfuegos. La persistencia de estas condiciones, constituyen un peligro potencial para los habitantes de la zona, adems de ser un riesgo potencial de contaminacin para las aguas de la baha y el suelo, siendo una causa directa de la prdida de biodiversidad en la zona. El presente trabajo describe resultados preliminares del desarrollo del proyecto de Rehabilitacin Ambiental Integral de Punta Majagua en lo referente a la biorremediacin de suelos contaminados con hidrocarburos, que tiene como objetivo reducir la contaminacin por hidrocarburos en la zona de Punta Majagua, Reina.
Figura 1. Pennsula de Punta Majagua.
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Metodologa El diseo propuesto, se bas en tcnicas de bioaumentacin, a partir de la aplicacin del bioproducto BIOIL-FC, un conglomerado bacteriano producido y patentado por del Centro de Biopreparados Marinos de Cuba cuya formulacin contiene un cultivo mixto de bacterias extradas de la Baha de Matanzas, con un alto espectro de degradacin de los hidrocarburos del petrleo. Se dise una parcela de Biorremediacin in situ de 115 por 75 (metros), seccionada en cuatro sub-parcelas con muros de contencin de 1.70 m de alto por 2,00 m de ancho. Las dimensiones del rea de manejo fueron calculadas de acuerdo a los siguientes criterios tcnicos: Volumen total a biorremediar (1916 m3), altura mxima de la columna de la mezcla (30 cm), caractersticas del suelo de la zona (Grado de percolacin), cercana de la parcela de biorremediacin a la costa (20 m), facilidades de humectacin y aireacin. Posteriormente se proyectan dos fermentadores industriales de 970 l y 12000 l respectivamente, para el escalado inicial y la produccin de los 54,5 m3 de bioproducto estimados a inocular. Para su diseo fue considerado el volumen de trabajo de los fermentadores (86%), presin 3 (7atm) y flujo de de aire requerido (12m /h). El escalado de laboratorio fue ejecutado hasta el completamiento de dos botellones de 20 l a una concentracin del 2.7*106 cel/ml. Inoculado el fermentador de 12000 l se hizo un incremento a 4000 l con intervalo de 6 horas y una concentracin inicial de 1.0 * 107 cel/ml; completado el incremento a 10000 l con la 8 concentracin requerida (6*10 cel/ml). Se aplic el producto en las parcelas de biorremediacin, comenzando un nuevo ciclo de incremento hasta producir el volumen total estimado. 3 Se aplicaron 54,5 m de BIOL FC segn los clculos realizados (40 l/m3 de masa a biorremediar). La aplicacin del producto en el rea se realiz por aspergeo directo mediante un carro cisterna de 8 m3, aplicndose el producto al 100% del rea de manejo (Tabla 1).
Tabla 1. Volmenes de BIOL aplicados por Parcela. Fuente: Elaboracin propia. No. de Parcelas 1 2 3 4 Rectificado Volumen de BIOIL-FC 2000 10000 12000 24000 6500
Las parcelas fueron aireadas cada 21 das con la utilizacin de tractores con rusters acoplados, a profundidad de 30 cm. Se humect durante el perodo de anlisis mediante el uso de camiones cisternas con una frecuencia de 15 das, aprovechando las precipitaciones ocurridas en el perodo. El muestreo y los ensayos de laboratorio se disearon y ejecutaron de acuerdo a los mtodos estandarizados de muestreos y ensayos de suelos contaminados con hidrocarburos [8]. El por ciento de remocin de hidrocarburos totales del petrleo se determin de acuerdo a la metodologa CIGEA [9]. Resultados y Discusin En la tabla 2 se muestran los resultados de concentracin de hidrocarburos en el tiempo obtenidos para cada sub parcela analizadas.
Tabla 2. Hidrocarburos Totales del Petrleo (mg/kg). Das 0 das 45 das Sub P- 1 26060 12480 Sub P- 2 11610 8760 Sub P- 3 7690 4480
Los resultados demostraron que se produjo una reduccin significativa de la concentracin de hidrocarburos totales en el tiempo en las tres subparcelas evaluadas; registrndose valores inferiores a los lmites establecidos por la Resolucin 08/99 de la Unin Nacional de Petrleo (CUPET) [10].
Figura 2. Evolucin de los hidrocarburos en el tiempo para cada sub-parcela analizada.
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Se reportan porcentajes de remocin de hidrocarburos superiores al 50 % en el caso de la sub-parcela No.1. Los valores de remocin en la sub-parcela No.2 podran estar asociados al hecho de que fueron depositados los residuos petrolizados de los tanques No.2 y No.3 respectivamente, residuos de alta viscosidad con presencia de gomas y asfaltos (Fig. 3).
registraron adems porcientos de de 20,6 y 30,5 en las sub-parcelas 2 y 3 respectivamente.
Figura 4. Evolucin de las fracciones afaltnicas, en el tiempo para cada sub parcela analizada.
Figura 3. Porcentaje de remocin de hidrocarburos.
La figura 4 describe los resultados obtenidos del anlisis de SARA en el tiempo para cada sub parcela.
Los compuestos afaltnicos presentan una mayor recalcitrancia a la biodegradacin que el resto de las fracciones analizadas, sin embargo se produjo una reduccin significativa de las concentraciones de estos en cada una de las tres sub-parcelas (Fig. 5). 0 Das
45 Das
Figura 4. Evolucin de las fracciones saturadas, aromticas y resinas en el tiempo para cada subparcela analizada.
Las fracciones saturadas registraron una disminucin de sus concentraciones inciales, con valores inciales desde 1540 mg/kg hasta 5480 mg/kg y siendo degradas hasta concentraciones inferiores a 1400 mg/kg respectivamente, las fracciones aromticas, denotan una reduccin en los niveles de concentraciones con marcada degradacin en el caso de la No.1 con 48,9 % de remocin, se
Figura 5. Sub parcela No1 antes y 45 das despus de la aplicacin del BIOIL-FC.
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Conclusiones Se logr la correcta implementacin de las tcnicas y metodologas para asegurar las condiciones necesarias en el proceso de biorremediacin, obtenindose concentraciones de hidrocarburos totales inferiores a los establecidos por la Resolucin 08/99 de CUPET, en las sub-parcelas 2 y 3 respectivamente. Aunque no se lograron valores inferiores en la No.1, se obtuvieron altos porcientos de remocin (52.1%), superiores al resto de las parcelas. Se reportan los mayores valores de remocin de SARA, en la sub-parcela No.1, logrndose porcientos de 54.5 (Saturados), 48.9 (Aromticos), 40.8 (Resinas) y 34.3 (Afaltenos). Los resultados obtenidos en un perodo de tiempo de solamente 45 das de trabajo, corroboran la eficacia de la biorremediacin como mtodo de tratamiento de suelos contaminados con residuos petrolizados. Agradecimientos El presente trabajo se realiz de conjunto con especialistas del Centro de Biopreparados Marinos, el procesamiento analtico realizado en el Centro de Investigaciones del Petrleo; al Fondo Global para el Medio Ambiente Manejo Integrado de Cuencas y reas Costeras (GEF IWCAM) por brindar el financiamiento para este evento. Bibliografa
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7.
8.
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ACTIVIDAD MICROBIANA DURANTE LA APLICACIN DE DIFERENTES TRATAMIENTOS DE BIORREMEDIACIN EN SUELO CONTAMINADO CON PETRLEO CRUDO OLMECA
Ildefonso. J. Daz-Ramrez*, Samantha Priego Rangel, Jess Torres Colorado, Diana Ivet Aguirre Marn y Erika Escalante Espinosa
Universidad Jurez Autnoma de Tabasco. Divisin Acadmica de Ciencias Biolgicas. Cuerpo Acadmico de Evaluacin y Tecnologa Ambiental. Lab. de Bioprocesos. Edif. H. Carr. VillahermosaCrdenas Km 0.5, Villahermosa, Tabasco, Mxico. C.P. 86039.
E-mail: Ildefonso.diaz@dacbiol.ujat.mx
Palabras clave: Lipasa, deshidrogenasa, Co-cultivo, Biodegradacin, Petrleo crudo Introduccin. En la actualidad el auge petrolero causa un impacto ambiental, econmico y social al encontrarse frecuentemente algunos hidrocarburos como contaminantes, afectando las propiedades fisicoqumicas del suelo y los ecosistemas, lo que en muchos casos representa un riesgo potencial a la salud humana. Por tal razn, existe la necesidad de mejorar las alternativas tecnolgicas para el tratamiento biolgico del suelo, como la bioestimulacin, la bioaumentacin usando microorganismos degradadores previamente aislados de los sitios contaminados, as como la atenuacin natural [1, 2]. El desarrollo y optimizacin de estas estrategias requiere de la determinacin de parmetros que permitan valorar el potencial de biodegradacin de las poblaciones microbianas involucradas, el nmero y tipo de microorganismos predominantes, actividades enzimticas (ej. deshidrogenesa, lipasa-estearasa, oxigenasas, etc.), la composicin de la comunidad por mtodos moleculares; as como parmetros cinticos (vida media, constante de biodegradacin, etc.) calculados a partir de datos experimentales [2, 3]. Los ensayos enzimticos como la determinacin de la actividad deshidrogenasa, o de la fosfatasa, reflejan la actividad metablica global de la comunidad microbiana; mientras que determinaciones de enzimas como la lipasa-estearasa, se han utilizado ms especficamente en ensayos con hidrocarburos, con la finalidad de valor el efecto de diferentes regmenes de bioestimulacin [4]. En el presente trabajo se compararon diferentes determinaciones de la actividad microbiana, (actividades enzimticas, nmero de degradadores y parmetros cinticos); como una alternativa para la valoracin del potencial de biodegradacin (B%) de diferentes concentraciones de hidrocarburos totales de petrleo (HTP) por poblaciones exgenas y nativas en suelo. Metodologa. Inculo utilizado Se prepar un co-cultivo (CC) compuesto por seis cepas bacterianas degradadoras de hidrocarburos y dos cepas fngicas aisladas previamente de la rizsfera de una planta nativa de un sitio altamente contaminado [5]. Se utiliz una mezcla estandarizada para preparar el co-cultivo [6]. Ensayos de biodegradacin Se realizaron en charolas con suelo (200 a 400 g) no esterilizado y suelo esterilizado previamente contaminado con petrleo crudo Olmeca (10, 20, 30 g HTP/Kg de suelo), pretratado trmicamente (70 5 C, das). Se probaron los siguientes tratamientos: a) suelo inoculado (SI), b) suelo no inoculado (SNI). Adicionalmente, se ensayaron: c) suelo estril inoculado (SE-bioaumentado) (10 g de HTP/Kg de suelo). En todos los casos se adicion bagazo de caa como acondicionador orgnico (2%) y nutrientes (bioestimulacin, C/N~7). La humedad se mantuvo alrededor del 60% de la CRA del suelo. Paralelamente, se prepararon controles con suelo no inoculado no contaminado. Mtodos analticos Se determin el nmero de microorganismos heterotrficos y el nmero de degradadores de hidrocarburos (NMP, crudo Olmeca como f de C); as como la biodegradacin (%). Se determin la actividad enzimtica lipasa-estearasa (g pNP/ g suelo seco*min) y deshidrogenasa (g INF/g suelo seco*h) de acuerdo a los mtodos propuestos por [7] y [8], respectivamente. Brevemente, para la determinacin de la enzima lipasa-estearasa se us p-nitro-fenil butirato (pNPB) como sustrato determinndose el p-nitro fenol producido (pNB) espectrofotomtricamente (400 nm). Mientras que para la enzima deshidrogenasa, se utiliz iodo-nitro-tetrazolio (INT) como aceptor alterno de electrones, detectndose espectrofotomtricamente el iodo-nitro-formazan (INF) producido (493 nm). Los HTP se cuantificaron gravimtricamente (mtodo Soxhlet). Con los datos obtenidos se calcularon la biodegradacin (B%), la tasa de consumo global y mxima (mg/kg*d), as como la constante de
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biodegradacin y la vida media. Resultados y discusin. Se realizaron ensayos a escala laboratorio con la finalidad de determinar el potencial de actividad enzimtica y de biodegradacin, de diferentes concentraciones de hidrocarburos (crudo Olmeca) en presencia de un inculo (co-cultivo), compuesto por 6 cepas bacterianas degradadoras y dos fngicas previamente aisladas [5], y de las poblaciones nativas presentes en el suelo. Despus de 40 das de cultivo, se observaron diferencias significativas en la actividad enzimtica, tanto para la lipasa (Fig.1), como para la deshidrogenasa (Fig. 2). Los valores de actividad de ambas enzimas se incrementaron con respecto a la concentracin de HTP. Para la enzimas lipasa, en el SI (bioaumentacin) los valores de actividad fueron 1.3 veces mayores, con 30 g de HTP/Kg de suelo respecto a los valores obtenidos con el SIN para esta misma concentracin. El periodo de mayor actividad se registr entre los 25 y 40 das de tratamiento. La actividad mxima de la lipasa se registr con 30 g/Kg de HTP y fue de alrededor de 5,940 g de pNP/g de suelo y 4,360 g de pNP/g de suelo, para el SI y el SNI, respectivamente.
7000.0 ) o l 6000.0 e u s e d 5000.0 g / P N p e4000.0 d g ( a3000.0 s a p i l d a2000.0 d i v i t c A 1000.0 SI-C-B 30 SI-C-B 20 SI-C-B 10 7000.0 SNI-C-B 30 SNI-C-B 20 SIN-C-B 10
suelo). La actividad lipasa mxima (registrada en presencia de nutrientes respecto al control no bioestimulado) fue de alrededor de 2,500 g de pNP/g de suelo en presencia de 20 g/Kg de diesel.
30
SI-C-B 30 SI-C-B 20 SI-C-B 10
30
SNI-C-B 30 SNI-C-B 20 SNI-C-B 10
o l e u 25 s e d g / F N I 20 e d g ( a 15 s a n e g o r 10 d i h s e d d 5 a d i v i t c A 0
0
25
20
15
10
0
10 20 30 40
10
20 Tiempo (d)
30
40
Tiempo (d)
Figura 2. Actividad deshidrogenasa durante el tratamiento de suelo contaminado con diferentes concentraciones de petrleo crudo Olmeca (10, 20, 30 g de HTP/Kg de suelo seco). a) Suelo inoculado, b) Suelo no inoculado.
6000.0
5000.0
4000.0
3000.0
2000.0
1000.0
0.0 0 10 20 Tiempo (d) 30 40
0.0 0 10 20 Tiempo (d) 30 40
Figura 1. Actividad lipasa-estearasa en presencia de diferentes concentraciones de petrleo crudo Olmeca (10, 20, 30 g de HTP/Kg de suelo seco). a) Suelo inoculado, b) Suelo no inoculado.
La actividad lipasa registr un incremento respecto a la concentracin de los hidrocarburos, y una mejora en relacin a la presencia del co-cultivo, siendo 6 veces menor en el suelo control no contaminado. Estos datos son comparables a los reportados en [3], con valores crecientes de actividad lipasa en funcin de la concentracin de diesel (2.5, 5, 10 y 20 g/Kg de
El mismo comportamiento se observ para el caso de la enzima deshidrogenasa (Fig. 2), notndose una mayor actividad en presencia del inculo y en la concentracin ms alta de hidrocarburos (30 g/Kg). Se observ una mayor variabilidad en el comportamiento de esta enzima, debido probablemente a que refleja la actividad metablica global de la comunidad microbiana presente. Mientras que la actividad de la enzima lipasa-estearasa se encuentra ms estrechamente relacionada a la biotransformacin de los hidrocarburos; especialmente los de cadena lineal. Despus de un anlisis de la composicin de los HTP residuales (datos no mostrados) se registr la mayor degradacin sobre la fraccin aliftica del crudo Olmeca; seguida de la fraccin aromtica en presencia del co-cultivo. Esto posiblemente debido a la co-oxidacin de sta ltima fraccin en presencia de los alifticos; lo que correspondera con la elevada actividad deshidrogena observada. Durante los experimentos, el NMP de microorganismos 6 7 degradadores se mantuvo entre 10 -10 cel/ g de suelo, para el SI, y en el caso del SNI los valores fueron ligeramente menores. Esto podra explica el comportamiento similar en cuanto a la actividad enzimtica. Los resultados indican que probablemente a concentraciones bajas de HTP (10-20 g/Kg de HTP) los microorganismos nativos fueron capaces de remover significativamente los HTP, lo que se refleja como actividad enzimtica creciente (Fig.1B)
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En un experimento independiente realizado con suelo esterilizado (SE) y no esterilizado (SNE) (10 g de HTP/Kg de suelo); la biodegradacin (Tabla 1) fue mayor en presencia del inculo (entre 56% a 58%), respecto al suelo no bioaumentado (37% a 48%) despus de 90 das de cultivo. Las tasas mximas de consumo (Tabla 1) se alcanzaron en el suelo inoculado durante los primeros 20 das de cultivo.
Tabla 1. Biodegradacin de petrleo Olmeca despus de 90 das de cultivo, velocidad global y mxima calculada para los diferentes tratamientos ensayados. Tratamiento SNEBioaumentado SNE-No Bioaumentado SEBioaumentado SE-No Bioaumentado
a
B (%)a 58.353.20 48.092.31 55.801.99 37.592.30
TCG (mg /Kg *d) 72.3 59.6 69.1 46.6
TCM (mg /Kg *d) 142.6 150.5 259.4 210.6
Biodegradacin calculada de acuerdo a los HTP residuales. b Tasa o velocidad de consumo global (mg /Kg *d) determinada con los datos de consumo de HTP obtenidos por mtodo gravimtrico. c Tasa o velocidad de consumo mxima (mg /Kg *d) determinada con los datos de consumo de HTP.
Recientemente se reportaron resultados similares [7] utilizando diesel como fuente de carbono a diferentes concentraciones, encontrando que para 10,000 mg/Kg la biodegradacin fue del 31% al 53% en 38 das de cultivo, destacando la sola bioestimulacin del suelo probado. Utilizando inoculantes para estimular la biorremediacin in situ de hidrocarburos [9], se report una disminucin del 48.5% de HTP comparada con un 17% de reduccin con aplicacin solamente de nutrientes (reduccin de 91.8 g/kg de suelo a 47.2 g/kg of suelo en 120 das). En general, estos resultados demuestran un efecto positivo de la combinacin bioestimulacinbioaumentacin principalmente sobre la actividad lipasa-estearasa, lo que se refleja como un incremento en el potencial de remocin de hidrocarburos totales de petrleo. Asimismo, permite ver que bajo las condiciones probadas (sin re-adicin de nutrientes o re-inoculacin), la mayor actividad microbiana se presenta en los primeros 30 das de cultivo. Adems, la actividad de la enzima lipasa-estearasa registrada, aunado al alto nmero de microorganismo y actividad deshidrogenasa creciente podra explicar el alto grado de biodegradacin y consecuente disminucin del tiempo de vida media. Conclusiones. Se registr un aumento en la actividad de las enzimas lipasa-estearasa y deshidrogenasa en relacin con el incremento en la concentracin de los hidrocarburos, los cuales presentaron valores elevados de biodegradacin y una reduccin en el tiempo de vida media en presencia del inculo probado, respecto al suelo no-bioaumentado. Los ensayos probados pueden usarse como indicadores en la deteccin del potencial de bioaumentacin, aplicando inculos estandarizados, as como de la biodegradacin natural en condiciones de laboratorio y campo. Otros experimentos bajo condiciones de re-inoculacin y diferente relaciones C/N deben ser realizados para determinar en mayor detalle el efecto de estas variables sobre la actividad microbiana. Agradecimientos. Este trabajo fue financiado a travs del fondo PFICAUJAT-2010 (Proyecto No. 20100819). Bibliografa.
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En el caso del suelo inoculado los datos obtenidos presentaron un ajuste adecuado al modelo de primer orden (r2>0.94), mientras para el suelo estril noinoculado la concentracin de hidrocarburos present un comportamiento no-lineal (r2 entre 0.6 a 0.74). Con estos datos se calcularon las constantes de biodegradacin (Tabla 2) siendo mayores (1.2 a 1.5 veces) en los tratamientos bioaumentados (adicionados con el co-cultivo). En tanto que el tiempo de vida media super los 3.4 meses para el suelo estril no-bioaumentado, mientras que este valor fue de alrededor de 2 meses en presencia del co-cultivo (Tabla 2).
Tabla 2. Constantes de biodegradacin de petrleo Olmeca y vida media calculada a partir del modelo de primer orden, (90 das de cultivo). Tratamiento SNE-Bioaumentado SNE-No Bioaumentado SE-Bioaumentado SE-No Bioaumentado -k (d-1) -0.0110 -0.0088 -0.0103 -0.0067 Vida media (d) 63.0 79.1 67.5 103.6 D.E. 0.0 1.4 5.0 5.2
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Bioremediation. En Nyer, E. K., Palmer, P. L., Carman, E. P., Boettcher, G., Bedessman, J. M., Lenzo, F., Crossman T. L. Rorech, G. J. y Kidd, D. F. (Eds). In situ Treatment Technology. pp.261-281, Arcadis, Geraghty & Miller. FL. USA. Margesin, R. 2005. Determination of Enzyme Activities in Contaminated Soil. En: Margesin, R. & Schinner, F. (Eds). Manual for Soil Analysis Monitoring and Assessing Soil Bioremediation. Soil Biology, Vol 5. Springer, Germany. pp. 309-313, 316-319. Margesin, R; Schinner, F. 2001. Bioremediation (Natural Attenuation and Biostimulation) of Diesel-OilContaminated Soil in an Alpine Glacier Skiing Area. Appl. Environ. Microbiol. 67(7), 31273133. Daz-Ramrez, I. J., Gutirrez-Rojas, M., RamrezSaad, H., y Favela-Torres, E., 2003. Biodegradation of Maya crude oil fractions by bacterial strains and a defined mixed culture isolated from Cyperus laxus rhizosphere soil in a contaminated site. Can. J. Microbiol. 49: 755-761. Daz-Ramrez, I. J., Escalante-Espinosa, E., FavelaTorres, E., Gutirrez-Rojas, M.; Ramrez-Saad, H. 2008. Design of bacterial defined mixed cultures for biodegradation of specific crude oil fractions, using populations dynamics analysis by DGGE. Int. Biodet. Biodeg. 62: 21-30. Margesin, R.; Hmmerle, M; Tscherko, D. 2007. Microbial activity and community composition during bioremediation of diesel-oil-contaminated soil: effects of hydrocarbon concentration, fertilizers, and incubation time. Microbial Ecology. 53, 25926. Von Mersi, W. y Schinner, F. 1991. An improved and accurate method for determining the dehydrogenase activity of soils with iodonotrotetrazolium chloride. Biology and fertility of soils. 11: 216-220 pp. Mishra, S., Jyot, J., Kuhad, R.C., Lal, B., 2001. Evaluation of inoculum addition to stimulate in situ bioremediation of oily-sludge-contaminated soil. Appl. Environ. Microbiol. 67, 16751681.
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REMOCIN DE HIDROCARBUROS TOTALES DEL PETRLEO Y DE HIDROCARBUROS POLIAROMTICOS EN SEDIMENTOS DE MANGLAR CON Avicennia germinans: EFECTOS DE BIOESTIMULACIN Y BIOAUMENTACIN Claudia L. Navarro-Lamarque1, Enrique Navarro2, Gloria Snchez-Galvn1, Flor de Mara Cuervo3, Guillermo Angeles1 y Eugenia J. Olgun*1
Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya,Xalapa, Veracruz, 91070. Mxico. 2 Instituto Tecnolgico de Izucar de Matamoros, Puebla, Mxico. 3Universidad Autnoma Metropolitana Iztapalapa, Mxico. * Autor de correspondencia: eugenia.olguin@inecol.edu.mx
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INTRODUCCIN Los manglares son ecosistemas muy importantes desde el punto de vista ecolgico y econmico. Se estima que en las ltimas dos dcadas se ha perdido aproximadamente el 35% de los manglares del mundo. En Mxico, se calcula una prdida del 12 al 60% en la superficie de los manglares, en un periodo de 20 aos, la cual ha sido causada entre otros factores, por la contaminacin por hidrocarburos debido a derrames de petrleo o gasolina (Carrera y De La Fuente, 2004). Asimismo, se ha reportado que la bioacumulacin de hidrocarburos poli-aromticos (HPAs) en los organismos marinos ocurre como consecuencia de alimentarse con organismos bentnicos que consumen materiales contaminados con HPAs del sedimento (Coates, et al., 1997). Las operaciones de limpieza despus de un derrame son costosas y difciles. Algunos investigadores sugieren que toma por lo menos 20 aos para que desaparezca totalmente la toxicidad del ecosistema contaminado (Kathiresan, et al, 2001). Los suelos contaminados con hidrocarburos, generalmente contienen consorcios microbianos con la capacidad de degradar o transformar los contaminantes en subproductos, idealmente no txicos. Este fenmeno se conoce como atenuacin natural. Por otro lado, se han desarrollado las estrategias de bioestimulacin (adicin de nutrientes estimuladores de la degradacin) y de bioaumentacin (adicin de consorcios microbianos con caractersticas especiales para degradar los contaminantes) ambas con la posibilidad de ser aplicadas in situ o ex situ (Wilson, et al., 2004, Olgun, et al., 2007; Acua et al., 2008). A pesar de lo anterior, existen muy pocos reportes sobre dichas estrategias para la remediacin de sedimentos contaminados de manglares. Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de bioestimulacin mediante la adicin de efluentes anaerobios de vinazas y de adicin de fertilizantes inorgnicos, as como el efecto de bioaumentacin mediante la adicin de cianobacterias rizosfricas aisladas de neumatforos de A. germinans, sobre la remocin de hidrocarburos poli-aromticos (HPAs) y de hidrocarburos totales del petrleo (HTPs) presentes en sedimentos de manglar sembrados con A. germinans, a nivel de microcosmos. 2.MATERIAL Y MTODOS 2.1 Descripcin de los microcosmos Se montaron 80 microcosmos en un invernadero, los cuales consistieron en macetas de plstico de 20 cm dimetro por 20 cm de alto, a los que se le adicion 4.87 Kg de sedimento de manglar. Para simular la hidrologa en los microcosmos de una maneja semejante a las que ocurren en el ecosistema del manglar, las macetas fueron inundadadas, reciclando agua salina (25 g NaCl/L) de las 10 a las 17h. 2.2 Contaminacin de sedimentos Aproximadamente 400 Kg de sedimento fueron colectados del manglar La Mancha, ubicado en el Municipio de Actopan, Veracruz, situado en el Golfo de Mxico a N 19 3525 y O 96 2256. Para la -1 contaminacin de ellos, se utiliz petrleo crudo Maya con una densidad de 0.8 g L . El crudo fue temperizado previamente a 150C, durante 8 horas, para eliminar los hidrocarburos voltiles. La contaminacin del sedimento se realiz de acuerdo a Huesemann y col. (2009). Cuatro kilos de sedimento de manglar fueron secados y molidos y se le aadieron 1.25 L de petrleo temperizado disuelto en 100 mL de acetona. Se mezcl vigorosamente manualmente y se dej evaporar la acetona por tres das a temperatura ambiente. Este lote concentrado se dividi en 40 sub-muestras
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de 121.5 g cada una, los cuales fueron mezclados con aproximadamente 3.9 kg de sedimento no contaminado. Posteriormente se sembraron las plntulas de A. germinans. 2.3 Diseo experimental En una primera etapa, se evalu el efecto de la adicin de efluentes anaerobios de vinazas sobre la degradacin de los hidrocarburos totales de petrleo (HTPs) y los hidrocarburos poliaromticos (HPA) y alcanos. Las vinazas se obtuvieron del ingenio La Gloria (ubicado en el municipio de rsulo Galvn) y posteriormente fueron tratadas en un digestor anaerobio operando con un tiempo de retencin hidrulico de 25 das. Los tratamientos fueron los siguientes: Controles: (1) Mangle y sedimentos; (2) Mangle, sedimentos y Concentracin 1 (Cc1) de efluentes anaerobios de vinazas (conteniendo 1.681 g N/Kg suelo y 0.125 g P/Kg suelo); (3) Mangle, sedimentos y Concentracin 2 (Cc 2) de efluentes anaerobios de vinazas (conteniendo 0.877 g N/Kg suelo y 0.0625 g P/Kg suelo); (4) Mangle, sedimentos; (5) Sedimentos Tratamientos: (6) Mangle, sedimentos y petrleo crudo; (7) Mangle, sedimentos, petrleo crudo y efluentes anaerobios de vinazas (Cc1); (8) Mangle, sedimentos, petrleo crudo y efluentes anaerobios de vinazas (Cc2); (9) Mangle, sedimentos y petrleo crudo; (10) Sedimentos y petrleo crudo. Durante la segunda etapa, la cual inici a los 110 das de iniciada la contaminacin de sedimentos, se evalu tanto la adicin de fertilizantes inorgnicos (NH4NO3 y K2HPO4), como la adicin de cianobacterias rizosfricas aisladas de A.germinans y cultivadas en medio ASN III modificado a 35 C. Los tratamientos fueron los siguientes: Controles: (1) Mangle y sedimentos; (2) Mangle, sedimentos y agua filtrada; (3) Mangle, sedimentos y cianobacterias (cepa D); (4) Mangle, sedimentos y fertilizante inorgnico (0.3322 g N/Kg suelo seco y 0.0664 g P/Kg suelo seco); (5) Sedimentos Tratamientos: (6) Mangle, sedimentos y petrleo crudo; (7) Mangle, sedimentos. y petrleo crudo; (8) Mangle, sedimentos, petrleo crudo. y cianobacterias (cepa D); (9) Mangle, sedimentos, petrleo crudo. y fertilizante inorgnico (0.3322 g N/Kg suelo seco y 0.0664 g P/Kg suelo seco); (10) Sedimentos y petrleo crudo. Adems, durante las dos etapas experimentales, se evalu el efecto de los HTPs y HPAs sobre el crecimiento de A. germinans La concentracin inicial de hidrocarburos fue de 2.71 mg de -1 hidrocarburos totales del petrleo (HTPs) g sedimento. Las concentraciones de nitrgeno y fsforo se escogieron tomando en cuenta que la relacin recomendada N:P debe estar en el rango de 10 a 14 (Claassens, et al., 2006; Vzquez, et al, 2009). 2.4 Determinacin de diversos parmetros La intensidad luminosa se monitore 3 veces por da (10 am, 2 pm y 5 pm). A los das 0, 35, 110 y 210 se tomaron muestras de sedimentos (3 sub-muestras por maceta) para determinar el contenido de hidrocarburos (HTPs, HPAs y alcanos). Tambin se determin la textura y humedad en los sedimentos de manglar adems del contenido de nitrgeno total Kjeldahl (NTK). En el agua se cuantific el NTK, nitratos y fosfatos (mtodo HACH). El crecimiento de las plntulas de mangle se evalu mediante el conteo de nmero de hojas, la medicin de la altura de la planta y rea foliar, cada mes. La extraccin de hidrocarburos del sedimento se llev a cabo usando una mezcla acetonahexano (1:1) mientras que la cuantificacin se realiz por cromatografa de gases-masas (GC/MS). RESULTADOS Y DISCUSIN La cantidad de humedad en el sedimento vari de 18.28% a 232.31% antes y despus de ser inundado, respectivamente. Sin embargo, no se detect NTK en las muestras analizadas (lmite de detencin de 0.5 mg/L), lo que indica que los sedimentos podran contener una cantidad mnima de NTK. Esto concuerda con lo reportado previamente por Holgun y Bashan (2007) sobre las bajas concentraciones de nitrgeno encontradas en sedimentos de manglar. El anlisis de textura mostr que el sedimento contena principalmente arena de un tamao de partcula muy pequeo (Tabla 1).
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Tabla 1. Determinacin de textura en sedimentos de manglar (%)

Arcilla (<2m) 10.70.47 Limo fino (2-20 m) 5.50.59 Limo grueso (2053 m) 5.41.03 Arena Arena fina (53-250 m) 73.52.60 Arena media (250500 m) 4.40.50 Arena gruesa (500-2000 m) 0.40.15
78.41.96
Se evalu el efecto de la presencia de hidrocarburos sobre el crecimiento de las plntulas de A. germinans, durante un perodo de cinco meses, mediante diversos parmetros de crecimiento tales como la altura de tallos (Figura 1), nmero de hojas y rea foliar (Figura 2). El anlisis de varianza mostr que los contaminantes no afectaron el crecimiento de las plntulas. Estos resultados concuerdan con lo reportado por Ke et al, (2003), quienes evaluaron algunas caractersticas de crecimiento (nmero de hojas, ramas y nodos) de plntulas de dos especies de mangle (Kandelia -1 candel y Bruguiera gymnorrhiza), contaminadas con 5,000 ng g de pireno y no observaron efecto de la presencia de dicho contaminante sobre el crecimiento del mangle.
Fig. 1 Crecimiento (altura de tallos) de A. germinans en sedimentos contaminados con hidrocarburos
Fig. 2 Crecimiento (rea foliar) de A. germinans en sedimentos contaminados con hidrocarburos Por otro lado, en el presente trabajo, la adicin del fertilizante, ya sea en forma inorgnica o medio de cultivo de las cianobacterias, parece haber favorecido el aumento del rea foliar (Fig. 2). Sin embargo, debido a la heterogeneidad en las muestras, el anlisis estadstico, indic que no hubo diferencias significativas entre los tratamientos. En cuanto a la remocin de hidrocarburos en la primera etapa (0-110 das), se observ una cintica de remocin de HTPs con tendencia bifsica en los todos los tratamientos (de T6 a T10), caracterizada por presentar un periodo inicial (0-35 das) con elevadas tasas de remocin (ms del 50%), seguido de un periodo tardo (35-210 das) con bajas tasas de remocin de los HTPs (aproximadamente 20%) (Figura 3).
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Figura 3. Remocin de HTPs en microcosmos con A. germinans durante el perodo experimental Estos resultados concuerdan con lo reportado por Tsai, et al. (2009), donde estudiaron la biotransformacin anaerbica del fenantreno, con un porcentaje de remocin de 65.6% total (54.9 y 10.7%, fase I y II respectivamente). Este comportamiento podra ser debido a diversos factores, como son: la disminucin en la biodisponibilidad de los HPAs, la acumulacin de metabolitos de HPAs txicos, o el enriquecimiento de compuestos ms recalcitrantes y tambin a un cambio en las poblaciones microbianas (Sabat et al., 2004). Despus de 35 das de exposicin al petrleo, se observ que el mayor porcentaje de remocin (71.42%) ocurri en el tratamiento T10, el cual solo contena sedimento contaminado (Tabla 2). En contraste, el menor porcentaje de remocin observado (50.76%) fue en el tratamiento T7, el cual recibi la concentracin ms alta de E.A.V. (C1). Sin embargo, el ANOVA mostr que no hubo diferencias significativas entre ninguno de los tratamientos. De acuerdo a estos resultados, la atenuacin natural jug el papel ms importante en la remocin de los HTPs, seguida de la estimulacin por la menor dosis de efluentes anaerobios de vinazas. Esto indica que es posible que la remocin de HTPs, no slo pudo haber sido estimulada por la adicin de N y P, sino tambin por la adicin de sulfatos y de microorganismos contenidos en los E.A.V. Estudios publicados por Miralles, et al, (2007), mencionan que las bacterias sulfato-reductoras aumentaron cuando se les agreg petrleo crudo, lo que indica que estos organismos son activos en la degradacin de agentes contaminadores, como los hidrocarburos. Al final del experimento (210 das), el tratamiento en el que se observ una mayor remocin fue el T8 (el cual fue adicionado con cianobacterias rizosfricas) con un 77.50% (Tabla 2) y el menor fue el T9, tratamiento con fertilizantes inorgnicos en la etapa 2, con un 63.25%. Estos resultados son indicativos de que la adicin de cianobacterias pudo haber tenido un efecto positivo en la degradacin de HTPs. Tabla 2. Remocin de hidrocarburos totales de petrleo (HTPs) en etapa 1 y 2. Tratamiento Remocin a los 35 das ETAPA 1 Remocin a los 210 das ETAPA 2 6 55.74 11.98 71.18 11.62 7 50.76 11.67 66.25 6.57 8 66.77 1.30 77.50 0.97 9 57.70 0.65 63.25 4.65 10 71.42 14.35 71.30 6.42
Concentracin inicial 2.710.07 (mg petrleo g sedimento b.s.)
-1
La remocin de los alcanos despus de 210 das (Tabla 3) fue mayor en el T8 (86.80%) al cual se le adicionaron cianobacterias rizosfricas. Estas cianobacterias pudieron haber desempeado una funcin indirecta soportando el crecimiento y la actividad de los verdaderos degradadores de los componentes del petrleo. Las cianobacterias tienen una funcin muy importante, ya que son responsables del establecimiento de gradientes de oxgeno y de la sntesis de materia orgnica que utilizan las bacterias heterotrficas (Martinez-Alonso y Gaju, 2005).
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Tabla 3. Remocin de alcanos despus de 35 y 210 das de experimentacin. Tratamiento Remocin a los 35 das Remocin a los 210 das 6 32.95 38.27 * 79.96 4.41 7 36.00 31.23 * 64.96 24.1 8 56.53 1.19 86.80 10.86 9 36.09 15.87* 47.83 42.46 10 66.62 18* 81.63 14.70
Concentracin inicial: 29.293.86 g g sedimento b.s.) * Las desviaciones estndar son muy altas, posiblemente debido a que los sedimentos contaminados no fueron homogneos
-1
Por otro lado, la remocin de los hidrocarburos aromticos fue mayor cuando no se agreg ningn tipo de fertilizante o microorganismo (T10) (Tabla 4). Sin embargo, los anlisis estadsticos no mostraron diferencias significativas entre los diversos tratamientos. Tabla 4. Remocin de hidrocarburos aromticos despus de 35 y 210 das de experimentacin Tratamiento Remocin a los 35 das Remocin a los 210 das 6 88.20 3.38 92.67 5.33 7 54.63 6.61 85.85 1.3 8 84.11 5.58 93.26 7.75 9 77.09 6.93 93.90 0.27 10 79.58 19.49* 99.06 0.86
Concentracin inicial: 38136.33.13 ng g sedimento b.s.) * Las desviaciones estndar son muy altas, posiblemente debido a que los sedimentos contaminados no fueron homogneos
-1
CONCLUSIONES La remocin de HTPs y de HPAs fue muy efectiva despus de 35 das posiblemente debido a la atenuacin natural y parece que los efectos de los bioestimulacin y de la bioaumentacin fueron secundarios. AGRADECIMIENTOS. Este proyecto fue financiado por los fondos FOMIX Veracruz-CONACYT (P36998). REFERENCIAS
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CARACTERIZACIN DE LA COMUNIDAD MICROBIANA DE SUELOS IMPACTADOS POR LA ACTIVIDAD PETROLERA Y SU POTENCIAL PARA LA RECUPERACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON HIDROCARBUROS Milagros Salas1, Nelda Dezzeo2, Rodrguez Mara2, Nora Malaver3,
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Escuela de Biologa, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela, AP 47270, Caracas 2 1030-A, Venezuela, Laboratorio de Ecologa de Suelos. Centro de Ecologa. Instituto Venezolano de Investigaciones Cientfica. 3Laboratorio de Microbiologa Ambiental, Instituto de Zoologa Tropical, Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela, AP 47270, Caracas 1030-A, Venezuela. m cada una (PI, PII, PIII), tomndose como criterio la magnitud del impacto (PI = alto impacto, PII = mediano impacto y PIII = poco impacto) (Fig.1). De cada parcela se tomaron 4 muestras de suelo entre 0-10 cm de profundidad, y se mezclaron para obtener una muestra compuesta.
III
Introduccin. En Venezuela existen unas 12.000 fosas petroleras [1], donde se han almacenado por dcadas desechos de las actividades de explotacin y produccin de hidrocarburos, que representan un alto riesgo operacional, ambiental y humano. Las comunidades microbianas poseen propiedades catablicas y adaptativas que les permiten colonizar y establecerse en ambientes impactados por la actividad petrolera. Su abundancia y estructura comunitaria vara con las condiciones ambientales imperantes. La estructura de la comunidad microbiana, fundamentada en el potencial bioqumico frente a diferentes sustratos, permite reconocer grupos de microorganismos: proteolticos, lipolticos, celulolticos y lignolticos, con potencial para degradar los contaminantes presentes en el ambiente. De all la importancia de caracterizar la comunidad microbiana en suelos afectados por la actividad petrolera, especficamente en el rea de influencia de una fosa, lo cual representa el objetivo fundamental de este trabajo. Metodologa. El trabajo se realiz en la Fosa Bared-9, ubicada a 8 5546,2 de latitud N y 64 744,8 de longitud W, en el Distrito San Tom, Estado Anzotegui, Venezuela. Para la toma de muestras en el campo, se trazaron transectas en 3 puntos diferentes alrededor de la fosa (T1, T2, T3), y en cada transecta se ubicaron 3 parcelas de 10 m x 5
I: Zona del borde de la fosa II: Zona intermedia de la fosa III: Zona alejadas de la fosa
II
I III II I
FOS
I
II
III
Fig. 1. Esquema del diseo muestreal realizado en la Fosa BARE-9. Los anlisis microbiolgicos realizados en el laboratorio incluyeron: (a) aislamiento de cepas cultivables de la comunidad microbiana, para lo cual se sigui el mtodo propuesto por [2]; (b) caracterizacin macromorfolgica, que consisti en describir las cepas en trminos de su morfologa, incluyendo borde, forma, elevacin y coloracin. De esta manera se obtuvo un Cepario de hongos y bacterias en tubos de ensayo; (c) caracterizacin micromorfolgica, que se realiz usando la tcnica de Tincin
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Gram [3] para las bacterias, clasificndolas segn su forma celular y composicin de la pared celular; en el caso de los hongos microcultivos [4]. Asimismo, se caracterizaron bioqumicamente las cepas bacterianas y fngicas, enfrentndolas a compuestos carbonados simples (glucosa, lactosa) y complejos (pectina, quitina, celulosa, y lignina); actividad lipoltica y proteoltica, fuentes de nitrgeno y de fsforo. Resultados y discusin. En la transecta 1 las formas celulares que predominaron corresponden a los cocos Gram negativo en 37,7% de abundancia, seguidos de un 26,4% para los bastones Gram positivos y negativos, y en menor proporcin los cocos bastones Gram positivos, con un 1,9% de abundancia. Sin embargo, entre las 3 parcelas vari la distribucin de las diferentes formas celulares, encontrndose que a medida que nos alejamos del borde de la fosa, la proporcin de cocos Gram negativos disminuy desde 47,1% en PI a 27,8% en PIII y aumentaron los bastones Gram positivos desde 17,7% en PI a 38,9% en PIII. En la comunidad bacteriana presente en las muestras de suelo de la transecta 2, dominaron los bastones Gram positivos con un 46% de abundancia, seguido de cocos Gram negativos (22%) y bastones y cocos bastones Gram negativos con 16%, cada uno. En las parcelas de esta transecta la tendencia fue similar a la observada en la transecta 1, encontrndose que los cocos Gram negativos disminuyeron de 15% en PI a 5,9% en PIII y los bastones Gram positivos se mantuvieron entre 55% en PI y 58,8% en PIII. En la transecta 3 la mayor proporcin correspondi a los bastones Gram positivos con un 73,2%, los cuales mostraron una gran abundancia en las 3 parcelas consideradas, seguidos por los bastones Gram negativos, con una proporcin de 10,7%. Estos resultados permiten sealar que la presencia y permanencia de las poblaciones bacterianas en los suelos muestreados podran estar sujetas a la capacidad que ellas tienen de metabolizar una determinada fuente de carbono, as como a la
disponibilidad de macro y micro nutrientes y al contenido de agua y oxgeno en el suelo, entre otros. En las tres transectas se observaron formas celulares similares, pero distribuidas en proporciones diferentes. Estas diferencias pueden atribuirse a variaciones microclimticas, a perturbacin ambiental y a la ocupacin de diferentes nichos por las poblaciones bacterianas, lo que se refleja en cambios en la estructura micromorfolgica de dichas poblaciones.
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hojas, degradacin de la madera y de la materia orgnica en el suelo.
Fig. 2. Distribucin de los morfotipos bacterianos en las diferentes transectas. En el caso de las poblaciones fngicas en las tres transectas, se observ dominancia de las levaduras. Al estudiar las parcelas por separado, en la transecta 1 se observ dominancia total (100%) de levaduras. En la parcela II de la transecta 2 se aislaron hongos filamentosos del gnero Aspergillus sp. en un 23 %. En la parcela I de la transecta III se registr Fusarium sp. (14 % en PI y 22 % en PIII) y 11 % de Oidium sp. en PIII. Al respecto, [5-6] encontraron que los hongos de los gneros Aspergillus sp. y Fusarium sp. son degradadores de hidrocarburos, lo que explicara la presencia de stos en el rea de influencia de la fosa. La presencia de dichos hongos en estos ambientes impactados supone la produccin de oxigensa en sus membranas citoplasmticas, lo que les permite permanecer en esos ambientes [7]. Esa proporcin de hongos filamentosos con respecto a las levadura puede atribuirse a que los hongos filamentosos del suelo son oportunistas y se inactivan en ausencia de sustancias disponibles, conservando su viabilidad [8]. Al ser oportunistas crecen cuando las condiciones son favorables, llevando a cabo un metabolismo activo [9]. Cabe destacar que las parcelas III se muestran como las zonas ms diversas, tanto en formas celulares como en la permanencia de diferentes hongos. Este comportamiento puede atribuirse a la mayor cobertura vegetal de alto y bajo porte que poseen dichas parcelas. Bajo estas circunstancias, los hongos cumplen funciones, tales como: fragmentacin de las
En condiciones de laboratorio, las comunidades bacteriana y fngica aisladas de esos ambientes mostraron una importante accin degradativa frente a sustratos simples carbonados (glucosa y lactosa) y complejos (celulosa, lignina, pectina, lignina), adems de actividad lipoltica, por lo que infiere que poseen la capacidad de degradar productos derivados del petrleo, utilizndolos como fuente de carbono y energa. Las comunidades bacteriana y fngica juegan un papel importante en el ciclaje de nutrientes de dichos suelos.
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Conclusiones. En las transectas estudiadas, las parcelas ms alejadas del impacto de la actividad petrolera mostraron proporciones diferentes de morfotipos bacterianos y fngicos, encontrndose mayor porcentaje de bastones Gram positivos y la presencia de hongos del gnero Fusarium sp. y Oidium sp. Las poblaciones bacterianas y fngicas degradaron los sustratos a los que fueron expuestos, en su mayora compuestos complejos como: celulosa, lignina, quitina y pectina, por lo que se puede inferir que esta comunidad microbiana muestra un potencial bioqumico para ser enfrentada a molculas hidrocarbonadas complejas. Agradecimientos. Esta investigacin fue financiada por el Proyecto Misin Ciencias, titulado: Desarrollo, validacin y transferencia de nuevas tecnologas para el saneamiento ambiental de pasivos generados por la actividad petrolera; en el subproyecto 1: Caracterizacin del Medio Fsico Natural en reas Impactadas con hidrocarburos y en el subproyecto 4: Restauracin ecolgica en sectores con pasivos ambientales relacionados con fosas petroleras. Bibliografa.
1. Madriz, M., Cataldi, A. 2002. Caracterizacin de fosas petroleras y sitios contaminados por crudo a travs de mtodos geofsicos y sensores geoqumicos in situ. Sociedad Venezolana de Ingenieros Geofsicos. Caracas, Venezuela. 2. Mac Faddin J. 2003. Pruebas Bioqumicas para la Identificacin de Bacterias de importancia clnica. 3era Edicin. Editorial Panamericana. Argentina. 3. Manual de procedimientos de laboratorio y de Productos BBL. 1974. Editores Asociados S.A. Mxico. 4. Samson R. 1995. Curso de deteccin e identificacin de hongos en alimentos. Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos. UCV. Caracas, Venezuela. 5. Leahy, J., Colwell, R. 1990. Microbial degradation of hydrocarbons in the environment. Microbiological Reviews. 3: 305-315. 6. Okerentugba, P., Ezeronye, O. 2003. Petroleum degrading potentials of single and mixed microbial cultures isolated from rivers and refinery effluent in Nigeria. African Journal of Biotechnology. 2:288-292. 7. Rosenberg, E., Ron, E. 1998. Bioremediation of petroleum contamination. In: R.L. Crawford Y D.L. Crawford edition. Bioremediation: Principles and applications. Cambridge University Press. Cambridge, UK. 8. Atlas, R., Bartha, R. 2001. Ecologa microbiana y Microbiologa ambiental. 3ra Edicin. Editorial Addison Wesley. Espaa. 9. Hernndez, C. 2008. Interrelacin entre las comunidades microbianas y los procesos edficos de un suelo agrcola, modificaciones inducidas por un abono orgnico. Tesis Doctoral. Universidad Central de Venezuela. Facultad de Ciencias. Venezuela, Caracas.
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CONCENTRACIONES DE ELEMENTOS DE LANTANIDOS EN ESPECIES DE ALGAS DE LA BAHA DE LA PAZ, EN BAJA CALIFORNIA SUR., MXICO
Snchez-Rodrguez I, Shumilin E., Sapozhnikov D. Rodrguez A.P.
Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas (CICIMAR-IPN), Av.. IPN s / n Col. Playa Palo de Santa Rita, Baja California Sur, Mxico. Correo electrnico: isrnacho@hotmail.com - isanchez@ipn.mx Becario-COFAA-EDI V.I. Vernasdki Instituto de Geoqumica y Qumica Analtica de la Academia de Ciencias de Rusia, Mosc, Rusia. Palabras clave: Lantnidos, Algas, Bioacumulacin
Introduccin La bioacumulacin de elementos en las macroalgas se realiza por captacin pasiva y/o activa desde el ambiente acutico. Para los elementos traza se ha observado que las concentraciones de algunos elementos en macroalgas pueden ser varios ordenes de magnitud superiores a las encontradas en el agua de mar circundante. Generalmente sus concentraciones en algas son proporcionales a las de los elementos disueltos en al agua [6]. El conocimiento sobre la presencia de lantnidos en las diferentes especies de macroalgas es casi nulo [1,5]. Ya se obtuvieron datos sobre las concentraciones de los lantnidos en los sedimentos y en la materia particulada en hundimiento de la Baha y Laguna de La Paz. Para aumentar el conocimiento biogeoqumico de los lantnidos en estos ambientes, se plante como objetivo determinar las concentraciones de este grupo de elementos en algunas especies de macroalgas y comparar sus patrones normalizados con la lutita norteamericana con las huellas geoqumicas del agua del mar y del material sedimentario de la zona. Metodologa 35 muestras de algas fueron recolectadas por buceo en la baha de La Paz, en agosto de 1998. 12 especies de algas fueron identificadas (Fig. 1). Las algas han sido limpiadas, a continuacin se lavan con agua destilada y secadas a temperatura ambiente en papel absorbente, una vez completamente secas, cada muestra fue aplastada, tamizada y mantenerse hasta el anlisis. Los contenidos de los sedimentos se determin mediante anlisis de activacin neutrnica instrumental (flujo de neutrones trmicos 2.8 x 1013 n s-1 cm-2). La radiactividad inducida de cada muestra se registr
con un espectrmetro de rayos gamma (Nokia, de Finlandia) con 4096 canales suministrados por una alta resolucin de Ge (Li) La precisin del detector y la precisin del anlisis fue mejor que el 8-10% y se revisaron las normas material de referencia de los sedimentos marinos SDN (OIEA) y el NIST 1646 bis (EE.UU).
Sargassum
Ulva
Codium
Fig 1. Macroalgas que presentan mayor bioacumulacin de lantnidos en la Baha de La Paz B.C.S.
Resultados Los elementos de las tierras raras en sedimentos superficiales de la Baha de La Paz en general presentaron valores menores a los de las concentraciones promedio reportadas por [8] para la lutita americana (Tabla 1). La distribucin espacial de los ETR en los algas de la baha fue muy similar entre si ya que los principales aportes se presentan en la zona oeste y sur, por lo que se registraron acumulaciones en las zonas costeras desde Punta Coyote hasta el rea de el Mogote, as como en la parte central de la baha en donde la presencia de sedimentos finos probablemente favorece las altas concentraciones de los elementos. Los resultados obtenidos de la normalizacin de los ETR de las algas de la Baha de La Paz se encontraron que los elementos presentaron razones menores a uno, los valores normalizados variaron entre un mnimo del elemento Nd y un mximo del elemento de Gd. Lo
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anterior refleja de manera general el comportamiento geoqumico de los elementos de las tierras raras en las algas de la Baha de La Paz. Sin embargo de manera particular la distribucin espacial de las razones normalizadas para un elemento de las tierras raras ligeras (La), uno de las intermedias (Eu) y uno pesadas (Yb) para para mostrar las zonas con anomalas positivas. Las reas con valores de la relacin ETR/lutita mayores a uno fue similar para todos los elementos y se encuentran en la parte oeste de la baha en donde los contenidos altos de ETR estn influenciados por los aportes del material continental del rea de San Juan de la Costa, los cuales son ricos en fosforita, que es un material que destaca por los contenidos altos de elementos de las tierras raras con que se asocian (Fig.2).
Tabla 1.- Concentracin mxima/mnima y promedio de ETR en las especies de algas que se encuentran durante el muestreo en el rea de estudio.
-1
Especie
U. intestinalis
Elementos Tierras Raras (mg kg )

La
1.6- 30 109
Ce
6.5 - 57 1918
Nd
3 - 22 87
Sm
0.9 - 5 21
Eu
0.2 - 0.9 0.40.3
Tb
0.2 - 0.9 0.40.3
Yb
0.5 - 2.5 11
Lu
0.1 - 0.4 0.20.1
C. cuneatun
0.4-2.2 11
0.8 - 5 33
0.4 - 3 22
0.1 - 1 0.50.6
0.04 - 0.2 0.10.1
0.03 - 0.2 0.10.1
0.2- 0.3 0.30.1
0.05 - 0.05 0.050
C. sertularioides
0.6-3.7 1.51.1
1.1 - 7.6 3.2 2.1
0.5 - 3.5 1.8 1
0.1 - 1 0.5 0.3
0.1 - 0.3 0.1 0.1
0.03 - 0.2 0.1 0.05
0.15-0.5 0.4 0.1
0.03 - 0.1 0.06 0.02
H. discoidea
0.2-0.6 0.4 0.2
0.6 - 2 1. 2 1
0.3 - 2.6 1.51.5
0.1 - 1 0.60.7
0.04 - 0.2 0.10.1
0.04 - 0.2 0.10.1
0.4 - 0.6 0.5 0.1
0.09 - 0.1 0.090.001
D. divaricata
5
) 1 g k g m ( n o i t a r t n e c n o C
6.6 - 8 7.61.2
13 - 19 16 4
6 - 10 83
1.6 - 3 2.31
0.3 - 0.7 0.50.3
0.3 - 0.6 0.50.3
0.7 - 1.6 1.20.6
0.1 - 0.3 0.2 0.1
S. filamentosa 4 S. sinicola 3 2 1 0 Sm Eu REE D. divaricata C. sertularioides U. intestinalis
P. mexicana
3.4- 10 74
7 - 22 157
3 - 10 74
0.8 - 3 21
0.08 - 0.6 0.4 0.3
0.1 - 0.6 0.30.2
0.3 - 1.5 0.80.6
0.05 - 0.3 0.10.1
S. sinicola
0.4 - 0.8 0.60.2
1.2 - 1.7 1.40.2
0.8 - 1.1 10.2
0.2 - 0.5 0.40.1
0.06 - 0.1 0.10.04
0.06 - 0.1 0.090.03
0.2 - 0.5 0.30.1
0.04 - 0.1 0.060.02
G. tenuis
0.3-1.7 10.7
0.5 - 3.5 21.5
0.2 - 2 0.90.9
0.040.5 0.20.2
0.05 0.1 0.080.03
0.01 0.1 0.060.06
0.05 0.7 0.40.3
0.01 0.14 0.080.07
6 5 ) 1 g k g m ( n o i t a r t n e c n o C 4
S . filam e n to sa S . s in ico la
S. filamentosa
1.5 - 5 32
3 - 10 64
1.5 - 5 32
0.4 - 1 0.80.4
0.1 0.3 0.20.1
0.1 0.2 0.20.06
0.7 - 1 0.80.1
0.1 0.2 0.20.04
D . d iv a ric ata
2 1 0
C. se rtu la rio id es U . in tes tin alis Gd Tb Yb R EE Lu
D. simplex
11
1.2
0.1
0.2
0.5
0.1
6 5
Concentration (mg kg-1 )
S. filamentosa S. sinicola
4 3 2 1 0
D. divaricata C. sertularioides U. intestinalis Gd Tb Yb Lu
REE
Fig. 2.- Mxima concentracin absoluta media de ETR que se encuentran en las algas en la zona de estudio.
Muchas macroalgas han sido descritas como excelentes bioindicadores ya que los contenidos de metales en sus tejidos reflejan las concentraciones existentes en el agua circundante [2, 3, 9]. La composicin qumica encontrada en las macroalgas reflejo la accin de los factores naturales y el enriquecimiento natural de algunos elementos, los procesos metablicos particulares de cada especie de alga y los factores relevantes como la temperatura, pH, luz y disponibilidad de nitrgeno modulan la acumulacin de los elementos. Se menciona que las especies de macroalgas con mayor capacidad de acumular metales son las algas cafs [7].
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Conclusiones La concentracin de los elementos de tierras raras depende de la especie del alga y la localidad de muestreo. La mayor concentracin de La (30 mg kg1), Ce (57 mg kg-1), Pr (6 mg kg-1), Nd (22 mg kg-1), Sm (5 mg kg-1), Eu (0,9 mg kg-1), Di-s (6 mg kg-1), Tb (0,9 mg kg-1), Dy (5 mg kg-1), Ho (1 mg kg-1), Er (3 mg kg- 1), Tm (0,5 mg kg-1), Yb (2,6 mg kg-1) y Lu (0,5 mg kg-1) se encontraban en las especies Ulva intestinalis recolectados en la zona que rodea a San Juan de la Costa. El contenido mayor de ETRs se encontr en los sedimentos de la misma zona a causa de las contribuciones de los terrenos adyacentes. El patrn de las concentraciones de los elementos de tierras raras, normalizados con la NASC, de las macroalgas en diferentes zonas de estudio se puede dividir en tres tipos: a) Un patrn similar a las aguas del mar con el enriquecimiento de lantnidos pesados (a la al norte, en la zona de las islas) b) similares a los sedimentos (hacia el oeste, influenciado por el material continental), y c) con anomala negativa de Eu, tpica de sedimentos finos y liquidacin de la materia particulada (al este). Agradecimientos Al Centro Interdisciplinario de Ciencias Marinas Instituto Politcnico Nacional y a la Comisin de Operacin y Fomento de Actividades Acadmicas y al financiamiento otorgado mediante programa del proyecto institucional SIP. Bibliografia 1.- Bertine K.K., Koide M., Goldberg E.D., 1996. Comparative marine chemistries of some trivalent metals bismuth, rhodium and rare earth elements. Mar. Chem., 53:89-100. 2.- Bryan Hummerstone, 1973; Brow seaweed as indicator of have metals in estuaries in southwest England.J. Mar. Biol. Assoc., U.K. 53:705-720. 3.-Forsberg,A.,S. Soderlund, A. Frank, L.R. Petersson, M. Pedersn, 1988. Studies on metal content in the brown seaweeds Fucus veciculosus, from the Archipelago of Stockholm. Eviron. Pollut, 49: 245-263. 4.- Foster, P. 1976. Concentration and concentration factors of have metals in brown algae. Eviron. Pollut, 10:45-53.
5.- Hou X., Yan X., 1998. Study on the concentration and seasonal variation of inorganic elements in 35 species of marine algae. Sci.Total Environ., 222, 141156. 6.- Lobban, C.S., P.J. Harrison, 1994. Seaweed Ecology and Physiology. Cambridge University Press, Cambridge, 365 pp. 7.-Snchez Rodrguez,I., M.A. Huerta Diaz., E. Shumili., O.Holguin., J.A. Zertuche Gonzalez. 2001. Elemental concentrations in different species of seaweeds from Loreto Bay, Baja California Sur, Mxico: implications for the geochemical control of metals in algal tissue. Eviron. Pollut, 114:146-160. 8.-Ross, T. S., McLennan, 1885. The Continental Crust: its composition and evolution: An examination the geoquimical record preserved in sedimentary rocks. Geosciences Texts. Blackwell Scientific Publications. Oxford. 9.-Fuge, R., K.H. James, 1973. Trace metal concentrations in brown seaweeds in Cardigan Bay, Wales. Mar. Chem. 1:281-293.
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CARACTERIZACIN DE GENES INVOLUCRADOS EN LA DEGRADACION DE ACIDO CLORANILICO POR Pseudomonas putina TQ07
Luis Gerardo Trevio Quintanilla 1*, Gloria Sobern Chvez 2
1
Universidad Politcnica del Estado de Morelos, 2 Instituto de Investigaciones Biomdicas-UNAM,
Boulevard Cuauhnahuac No. 566, Col. Lomas del Texcal, Jiutepec, Mor., C.P. 62550. Tel/Fax: (777) 2293524 ltrevino@upemor.edu.mx Palabras clave: acido cloranlico, biorremediacin, pirona hidrolasa Introduccin. El Pentaclorofenol (PCP) es actualmente utilizado como el mayor conservador sinttico de madera y es adems empleado en una variedad de aplicaciones por sus propiedades biocidas. A pesar de que la produccin y uso del PCP ha sido prohibido en muchos pases y su empleo ha sido severamente restringido en otros, es aun ampliamente utilizado en Mxico, por lo que permanece como un importante contaminante del ambiente. La degradacin aerbica de PCP ha sido estudiada extensivamente y se han caracterizado varias bacterias capaces de degradarlo a travs de la formacin de clorocatecoles o hidroquinonas. La ruta de degradacin aerbica de PCP en algunas bacterias, contiene cinco enzimas catalticas, responsables de su mineralizacin. La primera enzima de esta va es la PCP-4-monooxigenasa que cataliza la remocin oxigenoltica del primer cloro del PCP para formar tetracloroparabenzoquinona (pcloranilo) (Chen and Yang, 2008). El p-cloranilo es tambin el sub-producto principal de la oxidacin de PCP por su metabolismo con hongos y por fotolisis. Trabajos realizados en los 90s (Sarr et al., 1995) indican que el p-cloranilo es hidrolizado, bajo condiciones ambientales neutras a alcalinas, en cido cloranlico (2,5- dicloro-3,6-dihidroxi-1,4benzoquinona) un sub-producto del PCP soluble en agua y que presenta en solucin acuosa una coloracin violeta rojiza. El cido cloranlico se ha identificado como un sub-producto en los efluentes del blanqueado de pulpa de papel con hipoclorito (Remberger et al., 1991). La coloracin que presenta el cido cloranlico en solucin acuosa hace a este compuesto cloroaromtico una molcula muy til para el aislamiento, caracterizacin y manipulacin molecular de microorganismos capaces de degradarlo. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar genes involucrados en la degradacin de acido cloranlico (AC) de la cepa Pseudomona putida TQ07 capaz de utilizar este compuesto como nica fuente de carbono y a partir de esta caracterizacin proponer una va de degradacin de este compuesto. Metodologa. Medios y condiciones de cultivo. Las cepas y plsmidos utilizados en este trabajo se describen en la Tabla 1. Los cultivos de P. putida TQ07 se realizaron en un medio mnimo: agua desionizada, 1000ml; K2HPO4 1.0g; KH2PO4 0.5g; NH4NO3 1.0g; MgSO4.7H2O 0.2g; NaCl, 0.1g; y FeCl3 0.02g (El pH final se ajust a 6.8) o en caldo nutritivo. El AC se aadi a una concentracin final de 600mg/l al medio. Los cultivos se incubaron a una temperatura de 30 con una velocidad de agitacin de 250 rpm. El crecimiento celular se determin midiendo la densidad ptica a 600nm o cuantificando el peso seco de los cultivos centrifugados. Los antibiticos utilizados para P. putida TQ07: cloramfenicol, 50 g/ml; cido nalidxico, 50 g/ml; kanamicina, 50 g/ml y tetraciclina, 20 g/ml.
Tabla 1. Cepas y plsmidos utilizados en este estudio. Cepa o Plsmido Referencia Pseudomonas putida TQ07 Este trabajo Mutantes P. putida TQ07 Cad26, Cad50, Cad58, Este trabajo Cad64, Cad78 y Cad82 Escherichia coli HB101 Gibco BRL Escherichia coli DH5a Gibco BRL de Lorenzo et al. 1990 Escherichia coli S17.1 pir pUTminiTn5lacZ2 de Lorenzo et al. 1990 Csmido pLG3020 Este trabajo
Mutagnesis al azar de Pseudomonas putida TQ07. Para llevar a cabo la mutagnesis al azar de la cepa silvestre TQ07, se realizaron cruzas biparenterales, en cajas con una mezcla 6:1 de agar nutritivo y LB, entre la cepa receptora TQ07 (Cmr) y la cepa r donadora E. coli S17.1 ( pir Ap )/pUTminiTn5lacZ2 r (Km ), la cual alberga el transposn miniTn5lacZ2 en un vector suicida que solamente se replica en cepas
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12 kb 1 2 3 4
pir (de Lorenzo et al. 1990). La seleccin de las clulas de P. putida TQ07 que contenan la insercin del miniTn5lacZ2 se realiz en cajas de agar nutritivo con kanamicina y cloranfenicol. Para la identificacin de las cepas incapaces de degradar el AC, se creci el banco de mutantes en agar nutritivo con 600 mg/l de AC durante 48hr y se aislaron aquellas colonias que no forman halos incoloros en torno a ellas. Para confirmar que estas cepas mutantes no degradan AC por estar afectadas en la va catablica de este compuesto y no en algn paso del metabolismo general se sembraron en medio mnimo suplementado con AC o con otras fuentes de carbn (piruvato y succinato). Resultados y discusin. Seleccin de mutantes de la cepa Pseudomonas putida TQ07 incapaces de degradar acido cloranlico. La cepa de P. putida TQ07 forma halos de decoloracin en torno a las colonias cuando crece en agar nutritivo suplementado con AC (Figura 1). Utilizando este fenotipo aislamos 16 mutantes deficientes en la formacin de halo (mutantes Cad) de 3000 clonas con inserciones del mini-Tn5lacZ2. Ninguna de las mutantes aisladas fue capaz de crecer sobre medio mineral suplementado con AC como nica fuente de carbono, pero si sobre piruvato o succinato, confirmando de esta manera que estn afectadas en la degradacin de este compuesto.
5.5 kb
Figura 2. Hibridizacin Southern blot de DNA total de Pseudomonas putida TQ07 y mutantes afectadas en la degradacin de AC digerido con la endonucleasa PstI usando como sonda marcada el csmido pLG3020 que contiene algunos de los genes afectados en la degradacin de AC. Las lneas corresponden a: 1 patrn de hibridacin de la insercin del mini-Tn5lacZ2 en un fragmento de 12kb, las mutantes 26, 58, 64, y 78 presentan este patrn; 2 patrn de hibridacin de la cepa silvestre; 3 patrn de hibridacin de la insercin del mini-Tn5lacZ2 en un fragmento de 5.5-kb, las mutantes 50 y 82 presentan este patrn; 4 patrn de hibridacin de las 10 mutantes espontneas de TQ07 Cad-. Secuenciacin de las mutantes afectadas en la degradacin de acido cloranlico y de los ORFs del csmido pLG3020.
Figura 1. Fenotipo de P. putida TQ07 y una mutantes (Cad26) afectada en la degradacin de acido AC en agra nutritivo suplementado con 600 mg/l de AC.
Las mutantes Cad fueron posteriormente clasificadas en tres grupos dependiendo del tamao del fragmento obtenido con la enzima de restriccin PstI que hibrid, en una hibridacin tipo Southern blot, con el csmido pLG3020 que fue inicialmente seleccionado de una biblioteca genmica de TQ07 por complementar el fenotipo de algunas mutantes Cad (Figura 2).
Despus de realizar la clasificacin de las mutantes afectadas en la degradacin de AC aquellas que presentaban inserciones en los fragmentos de 5.5 y 12-kb PstI del csmido pLG3020 fueron secuenciadas. Para realizar la secuencia, el ADN total de la mutantes Cad fue digerido con la enzima de restriccin PstI, los fragmentos obtenidos se r ligaron al plsmido pKS+ (Ap ) y se seleccionaron las clonas que contenan los fragmentos con el miniTn5lacZ2 mediante su seleccin en LB suplementado con ampicilina y kanamicina. La secuenciacin se realizo utilizando los olgonucleotidos TnI y TnO obtenidos a partir de los extremos del trasposon. Adems de secuenciar las inserciones en las mutantes Cad se secuenciaron parcialmente los fragmentos de 5.5 y 12-kb del csmido PLG3020 para establecer la presencia de otros genes candidatos posiblemente involucrados en la degradacin de AC y que no presentaran insercin (Figura 3).
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Fragmento PstI 2kb
PstI PstI
Fragmento PstI 12kb

PstI
Fragmento PstI 5.5kb

PstI
ORF11
ORF10
ORF9
ORF8
ORF7
ORF6
ORF5
ORF1 ORF2
ORF3
ORF4
CAD26 CAD58 y 64 CAD78
CAD82 CAD50
2,5-dicloro-3,6-dihidroxi-1,4-hidroquinona. En este momento, estamos tratando de comprobar esta funcin (Fig. 4).
X X O2 NA DP H N AD P + OH
ORF 1: Regulador Transcricional Familia LysR (Cad82) ORF 2: Pirona Hidrolasa (Cad50) ORF 3: Hidrolasa Aldolasa ORF 4: Funcin desconocida ORF 5: Protena de Quimiotaxis ORF 6: Porina de membrana externa ORF 7: Trasportador de cidos dicarboxilicos (Cad78) ORF 8: Porina de membrana externa (Cad58 y Cad64) ORF 9: FAD-Monoxigenasa (Cad26) ORF 10: Funcin desconocida ORF 11: Acetil-CoA acetiltrasferasa
X = H + , N O 2-, N H 2 -, C OO -, C l -
Figura 4. Reaccin general de las FAD-Monooxigenasas.
Figura 3. Mapa de los ORFs de la regin secuenciada de 19.5-kb del csmido pLG3020. La direccin de transcripcin de cada ORF esta sealada por las flechas, la localizacin de las inserciones de las diferentes mutantes Cad esta indicada y la posible funcin de cada uno de los ORFs se especifica.
Va Hipottica de la degradacin de acido cloranlico de Pseudomonas putida TQ07. En base a la caracterizacin de los ORFs afectados en las mutantes Cad y de aquellos no afectados en el csmido pLG3020, as como, a las funciones de genes homlogos en vas de degradacin de compuestos aromticos de otros microorganismos. Planteamos a continuacin la va hipottica de degradacin del AC en P. putida TQ07. El mecanismo general de las FAD-monooxigenasas de compuestos aromticos es la introduccin de un grupo hidroxlo al anillo aromtico generando un compuesto fenlico. Durante la introduccin de este nuevo grupo se remueven otros del anillo, por ejemplo, hidrgenos, nitros, aminos, carboxilos y halogenuros (Fig. 4). La 2,4-dihidroxibenzoato monooxigenasa de Sphingomonas sp. RW1 (Armengaud et al. 1999) es la enzima que presenta la ms alta identidad contra el ORF9 (32%) y participa en la remocin de un grupo carboxlo (proximal a un grupo hidroxlo) del 4-hidroxisalicilato para generar hidroxiquinol. Existen tambin monooxigenasas que remueven grupos Cl- que se encuentran en posicin ortho con respecto a un grupo hidroxilo como la clorofenol 4-monooxigenasa de Burkholderia cepacia AC1100 (Garrec et al. 2001). De lo anterior, podemos concluir que la funcin de ORF9 es remover un grupo cloruro de la
En analoga al mecanismo reportado por Kersten et al. en 1985 para la degradacin de Protocatecuatos substituidos, se obtendra un compuesto similar al cido 2-pirona-6-carboxlico a partir del AC (reducido e hidroxilado) por la accin de una protocatecuato 4,5-dioxigenasa. Este compuesto, se forma tambin cuando la protocatecuato 3,4-dioxigenasa y la catecol 1,2-dioxigenasa, que son intradiol dioxigenasas, cortan el anillo aromtico del 1,2,3trihidroxibenzeno pirogalol (Saeki et al. 1980) (Fig. 5). La formacin de esta lactona se ha observado tambin en la degradacin de difenilether (Pfeifer et al. 1989, 1993) como resultado de un corte extradiol por la 2,3-dihidroxibifenil 1,2-dioxigenasa sobre el 2,3-dihidroxidifenilether. Sin embargo, el cido 2pirona-6-carboxlico no fue posteriormente degradado. Este compuesto ha sido detectado tambin en la degradacin del herbicida cloridazon por Phenylobacterium immobilis DSM 1986 (Mller et al. 1982).
A)
OH
COOH
Catecol 2,3-dioxigenasa
COOH OH
cido -hidroximucnico
OH OH
Catecol 1,2-dioxigenasa
COOH O
pirogalol Protacatecuato 3,4-dioxigenasa
cido 2-pirona-6-carboxlico
COOH
B)
COOH
HCl O2 Protacatecuato 4,5-dioxigenasa
Cl OH
OH
COOH
5-cloroprotocatecuato
cido 2-pirona-4,6-dicarboxlico
Figura 5. A) Corte oxidativo del pirogalol por tres dioxigenasas diferentes, catecol 1,2-dioxigenasa, catecol
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2,3-dioxigenasa y protocatecuato 3,4-dioxigenasa. B) Corte oxidativo del 5-cloroprotocatecuato por una protocatecuato 4,5-dioxigenasa.
Posteriormente a la remocin del grupo Cl- del anillo aromtico del AC reducido, el siguiente paso de la degradacin involucrara la participacin de una dioxigenasa (que no hemos identificado) que corte este compuesto (Fig. 6). Como mencionamos anteriormente, un corte meta por una protocatecuato 4,5-dioxigenasa entre un grupo hidroxilo y el grupo Cl- adyacente generara una pirona. Adems, el corte entre 2 grupos hidroxilo (que presenten otro grupo hidroxilo vecinal como en el pirogalol) por una catecol 1,2-dioxigenasa, una protocatecuato 2,3-dioxigenasa probablemente una hidroxiquinol 1,2-dioxigenasa producira tambin una pirona, que es el sustrato de la enzima pirona hidrolasa. La remocin de un grupo cloruro del AC reducido le permitira a una variedad ms amplia de dioxigenasas cortar este compuesto y generar en el proceso una pirona (Fig. 6). La secuencia de amino cidos deducida a partir del ORF2 del fragmento de 5.5-kb PstI presenta una identidad del 32 al 35% con enzimas que participan en la hidrlisis del compuesto cido 2-pirona-4,6dicarboxlico y que esta involucrada en la degradacin del protocatecuato por la va de corte meta-4,5. La mutante Cad50, que es incapaz de utilizar el AC como nica fuente de carbn y energa, contiene una insercin del transposon miniTn5lacZ2 en el ORF2. El compuesto generado a partir del 5cloro-2,3,6-trihidroxi-1,4-benzoquinol por cualquiera de las dioxigenasas mencionadas anteriormente producira una pirona que probablemente sea el sustrato de la enzima codificada por el ORF2 y que generara por hidrlisis un compuesto similar al 2hidroximuconato. Para generar a partir del 2,3,4,5tetrahidroximuconato intermediarios del ciclo de cidos tricarboxlicos podran actuar dos enzimas diferentes: 1) La acetil-CoA acetiltransferasa (thiolasa) que esta codificada por l ORF11 del fragmento de 12-kb PstI. Sin embargo, para que esta enzima intervenga se necesitan dos pasos enzimticos previos realizados por la maleilacetato reductasa y la 3-oxoadipato succinil-CoA transferasa 2) Otra posibilidad es la protena codificada por el ORF3 del fragmento de 5.5-kb PstI que presenta una identidad promedio a nivel de amino cidos del 35% con enzimas involucradas en la sntesis degradacin de compuestos similares al 2,3,4,5tetrahidroximuconato generado en el paso anterior. El dihidrodipicolinato, un intermediario de la sntesis
de lisina, es sintetizado por la enzima dihidrodipicolinato sintasa a partir de piruvato y aspartato-3-semialdehido (Pisabarro et al. 1993). La secuencia de amino cidos deducida del ORF3 presenta relacin tambin con la enzima 2-ceto-3desoxigluconato aldolasa que produce piruvato y gliceraldehido a partir del 2-ceto-3-desoxigluconato (Buchanan et al. 1999). Por ultimo, existe relacin entre el ORF3 y la liasa que produce piruvato y Nacetilmanosamina a partir del cido silico (Walters et al. 1999). Posiblemente, este ORF codifica una enzima que genera intermediarios del ciclo de cidos tricarboxlicos (Fig. 6).
Cl HO O (Red) (Oxi) HO Cl OH OH HO OH OH
OH
Cl cidio cloranlico
Cl HO Clorohidroxiquinol monooxigenasa (CadA) Cl OH 2,5-dicloro-3,6-dihidroxiMut 26 3-cloro-2,5,6-trihidroxi1,4-hidroquinona 1,4-hidroquinona Cl OH HO HO COOH COOH Pirona HO hidrolasa Mut 50 Dioxigenasa ? COOH O O
HO
HO
OH 2,3,4,5-tetrahidroxi muconato
OH cido 2,3,4-trihidroxi2-pirona-6-carboxlico
?
TCA
Figura 6. Ruta hipottica de la degradacin de cido cloranlico por Pseudomonas putida TQ07.
Conclusiones. El presente trabajo nos permiti caracterizar genes cuyos homlogos ms cercanos no haban sido relacionados con la degradacin de compuestos clorados en ningn organismo. Adems, realizamos el primer reporte en el que se emplea una benzoquinona clorada (cido cloranlico) como sustrato inicial para el aislamiento y caracterizacin de genes involucrados en el metabolismo aerbico de este tipo de compuestos, mediante el uso de un fenotipo muy claro y que se encuentra estrechamente ligado a la capacidad de la cepa TQ07 para degradar esta benzoquinona. En general las aportaciones de este estudio, aunque no son totalmente concluyentes, nos permitieron desarrollar el modelo de degradacin de cido cloranlico (Fig. 6).
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Agradecimientos. Agradecemos el financiamiento otorgado para la realizacin de la presente investigacin por el Programa de Mejoramiento del Profesorado (PROMEP) de la Secretaria de Educacin Publica de Mxico al proyecto Degradacin de plaguicidas por microorganismos en diferentes condiciones nutricionales y caracterizacin molecular de las vas metablicas utilizadas Bibliografa.
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dioxygenase
from
Phenylobacterium
immobilis DSM 1986. Eur. J. Biochem. 125:579-584. 8. Pfeifer F, Schacht S, Klein J, and Trper HG. (1989). Degradation of diphenylether by Pseudomonas cepacia. Arch. Microbiol. 152:515-519. 9. Pfeifer F, Trper HG, Klein J, and Schacht S. (1993). Degradation of diphenylether by Pseudomonas cepacia Et4: enzymatic release of phenol from 2,3dihydroxydiphenylether. Arch. Microbiol. 159:323-329. 10. Pisabarro A, Malumbres M, Mateos LM, Oguiza JA, and Martn JF. (1993). A Cluster of Three Genes (dapA, orf2, and dapB) of Brevibacterium lactofermentum Encodes Dihydrodipicolinate
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characterization reductase
tetrachlobenzoquinone biodegradation
involved
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ANLISIS MICROBIOLGICO DEL LAGO DE XOCHIMILCO

Berenice Salgado-Estrada 1, Juan Carlos Gonzlez-Snchez 2, Ral Arcos-Ramos *
1, 2,
* Laboratorio de Contaminacin Acutica, FES-Zaragoza, UNAM, Batalla 5 de mayo s/n Esq. Fuerte de Loreto. Col. Ejrcito de Oriente, Iztapalapa, C.P. 09230 Mxico D.F.,* TEL:56230700 ext.39168 E-mail: biolrar@terra.com.mx. Palabras clave: bacteriologa, microbiologa, Xochimilco.
Introduccin. La composicin qumica del agua natural es dependiente del rea de drenaje, la erosin, solubilizacin e intemperizacin de los suelos (geologa), la cantidad de lluvia, evaporacin y sedimentacin. Debido a los cambios climticos hay ciclos diarios, estacionales y a mayor plazo de los componentes biolgicos los que a su vez determinan estacionalidad en la composicin qumica de las aguas [1]. En la regin sureste del Distrito Federal, se encuentra el Lago de Xochimilco, zona sujeta a Conservacin Ecolgica (segn decreto con fecha de 7 de mayo de 1992), constituye una de las reas naturales protegidas de mayor importancia en el DF, tanto por ser la ms extensa en cuanto a superficie, como por el inmenso valor ambiental que tiene para la ciudad. Tal valor, fue reconocido en 1987 por la UNESCO quien declar a Xochimilco, como Patrimonio de la Humanidad. La problemtica que amenaza a Xochimilco es: el acelerado proceso de invasin de asentamientos irregulares, las descargas de drenajes domsticos en los canales, y las descargas de aguas residuales mal tratadas [2]. El agua natural constituye un reservorio de microorganismos autctonos (Pseudomonas, Bacillus, Micrococcus) o exgenos (Escherichia coli, Enterococcus). Estas son de gran importancia, puesto que participan en los procesos de autopurificacin del agua y procesos biogeoqumicos presentes en la misma, tambin intervienen en la produccin de diversas enfermedades [3]. El objetivo e importancia de este trabajo implic el conteo de las bacterias hetertrofas a travs de unidades formadoras de colonias utilizando el mtodo de placa difusa, as como la cuantificacin de las bacterias del grupo coliformes en la columna de agua y el sedimento, en tres diferentes zonas (Cuemanco, Texhuilo y Asuncin). Estas zonas se establecieron considerando el tipo de vertimiento de agua residual. Metodologa. El periodo de trabajo abarc del mes de enero a el
mes de septiembre de 2009, durante este lapso de tiempo se le determin al sistema: temperatura, transparencia, pH, conductividad elctrica, demanda bioqumica de oxgeno (DBO), demanda qumica de oxgeno (DQO) y oxgeno disuelto (OD), considerando la metodologa establecida por APHA-1996; as como, diversas pruebas bacteriolgicas. Se comenz por un recuento bacteriolgico hetertrofo en placa (RHP), con muestras de agua tomadas por duplicado a 2 niveles en cada estacin de monitoreo en superficie (a 0.20m) y a 0.20m de la profundidad total del sitio, utilizando una botella Van Dorn horizontal de 2 litros. Para calcular el nmero de bacterias vivas hetertrofas que existen en el agua, el nmero final depende de las interacciones entre las colonias en desarrollo. Las colonias pueden surgir en pares, cadenas, grupos o clulas nicas, todas ellas englobadas bajo el trmino de unidades formadoras de colonias (UFC), basado en el mtodo de placa difusa [4]. Por otro lado, tambin se determin el nmero de unidades formadoras de colonias (UFCs) en caldo EC para la concentracin de coliformes totales y otra en caldo de bilis brillante al 2% para la concentracin de coliformes fecales, en base a la Tcnica del Nmero ms Probable (NMP), en base a la NORMA Oficial Mexicana PROY NMX-AA-042-SCFI-2005, Resultados y discusin. A los resultados de los parmetros fsicos, qumicos y biolgicos analizados en muestras de agua y sedimento (tabla 1), se les aplic anlisis exploratorio, as como, pruebas de KolmogorovSmirnov y de Levene, para determinar la normalidad y la homocedasticidad respectivamente. Posteriormente se efectu un anlisis de varianza para determinar si existan diferencias estadsticamente significativas entre la profundidad, estacin y meses de muestreo. Todas estas pruebas se realizaron empleando los paquetes estadsticos Intercooled Stata versin 8.0 (Stata, 2003), NCSS versin 2001 (NCSS, 2001).
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Tabla 1. Valores promedio de parmetros monitoreados. Estaciones Parmetro Profundidad Transp Conduct pH Oxgeno Texhuilo S 1.221 0.382
0.77 0.77 8.33 8.17 6.76 4.26
Asuncin S 1.913 0.287

0.78 0.79 8.03 7.83 3.91 0.94
Cuemanco S 1.467 0.233

0.67 0.69 9.46 9.30 10.28 7.14 21.82 20.6 44.58 51.8 382 453
medio del anlisis de Kruskal Wallis (p<0.05), despus de realizar las pruebas de homocedasticidad y normalidad correspondientes. Los valores de conductividad no mostraron diferencia significativa entre niveles de profundidad ( =0.6832, p= 0.167), obtenindose en promedio 76 mho cm-1 y un valor mnimo de 61 mho cm-1 (en Texhuilo, en la profundidad), se observa que en general las estaciones monitoreadas presentan un comportamiento parecido a excepcin de Cuemanco que tiene valores inferiores en promedio de 68.55 -1 mho cm , que son los valores menores reportados. En relacin a los valores de pH medidos en los canales de Xochimilco se observ que, la relacin entre superficie y fondo fue homognea, resultado tal vez del elevado transito de trajineras y lanchas con motor fuera de borda, ocasionando que se mezcle continuamente la columna de agua, fenmeno que se ve acentuado a su poca profundidad de menos de 2 m; (ANDEVA Fc = 1.00, p=0.3194), teniendo como media 8.36, mientras que el promedio mnimo se present en el mes de junio (7.57) y el valor mximo en abril (9.02), meses correspondientes a la temporada de lluvias y poca de secas respectivamente. El pH promedio es de entre 7 y 8, esto puede ser un indicativo de una afeccin al crecimiento bacteriolgico el cual tambin puede verse afectado por la gran cantidad de materia orgnica presente en el sistema. La mayor cantidad de crecimiento bacteriolgico estacionalmente se presento en primavera y verano, esto resulta congruente ya que este parmetro cataliza la mayora de las reacciones de descomposicin. El oxgeno disuelto present diferencia estadstica significativa entre superficie y el fondo (ANDEVA, Fc = 15.66, p<0.05), teniendo en promedio para superficie 6.53 mg l-1 y en el fondo 4.28 mg l-1, con un valor mnimo de profundidad de 0.61 mg l-1 registrado en el mes de Agosto para Asuncin, y con un valor mximo en superficie de 15.5 mg l-1 en el mes de Junio para Cuemanco. La elevada concentracin de oxgeno observada en la superficie es debido en parte al gradiente de difusin en la interfase aire-agua con la atmsfera, as como por los procesos fotosintticos que estn restringidos relativamente a una pequea zona, la cual esta limitada por el rango vertical de transmisin de luz efectiva; no obstante la parte inferior se caracteriza por ser una rea en donde los procesos de descomposicin trfica de materia orgnica (MO) agotan el O2 debido principalmente a reacciones oxidativas, sobretodo en la interfase agua-sedimento,
Temperatura 21.2520.04 20.37 19.76 DBO5 DQO

47.8149.63 45.29 50.17 310 414 353 437
La profundidad, ejerce efectos en el comportamiento de los parmetros fsicos, qumicos y biolgicos en el sistema y no present variaciones significativas durante los muestreos (ANDEVA, Fc = 0.22, p=0.9841). La Asuncin presenta la profundidad mayor con un promedio que oscila entre los 2 m y 2.3 m, esto es debido al aporte de aguas residuales provenientes del rea urbana y de algunos asentamientos humanos irregulares que son constantes. Finalmente el canal se Cuemanco, que recibe aportes de agua con tratamiento secundario provenientes de las plantas de tratamiento del Cerro de la Estrella y de San Luis Tlaxialtemalco presenta una profundidad en promedio de 1.46 m. La transparencia se ve afectada por la presencia de partculas en suspensin de origen orgnico e inorgnico que crean interfases entre los medios lquidos y slidos en los cuales la materia orgnica acumulada en el agua es convertida en formas asimilables por microorganismos y que ciertas comunidades algales de especies verdiazules florezcan anormalmente como es el caso de Cuemanco, esto ocasiona que la luz solar no llegue a aguas profundas y asociado a que Xochimilco es un sistema cerrado rico en materia orgnica que recibe aportes de agua tratada, la transparencia se ve muy disminuida existiendo diferencia significativa (ANDEVA, Fc = 6.73, p<0.05) al considerar los puntos de monitoreo resultado razonable dado que las estaciones de muestreo presentan diferentes tipos de descargas. Los datos de la conductividad, se manejaron por
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en donde la actividad microbiana en ms intensa. Se pueden observar tendencias en donde podemos encontrar condiciones aerbicas y anaerbicas, particularmente en verano, en donde el agua de la parte superior se calienta por la absorcin de luz solar mediante la materia orgnica y biolgica, mientras que en la parte inferior, el nivel de penetracin de luz disminuye, permaneciendo fra, ocurriendo poca trasferencias entre ellas. Por otra parte en otoo e invierno la capa superior de agua se enfra por el aire caracterstico de la poca, ocasionando que sta se torne ms densa que la inferior y la gravedad provoque la mezcla de ambas homogenizndolas. La determinacin de la temperatura ayuda a relacionar diferentes procesos del sistema acutico, el comportamiento de la temperatura del agua como era de esperarse, no fue homogneo mostrando diferencias significativas entre superficie y fondo 2 ( c =6.632, p<0.05) resultado esperado (grfica 1), ya que en el lago existe mucha materia flotante orgnica e inorgnica, as como una proliferacin acentuada de fitoplancton (sobre todo en Cuemanco), lo que no permite el buen paso de la luz hacia el fondo, dejando en claro que la temperatura es ms elevada en la superficie que en la profundidad, teniendo una diferencia al gradiente trmico que oscil entre 1 a 3C.
Grafica 1. Variacin temporal de la Temperatura en Asuncin, y Texhuilo, Cuemanco.
25 22.5 C 20 17.5 15 ENE
25 22.5 20 17.5 15
C
FEB
MZO
ABR
MAY
JUN
JUL
AGT
SEP
ENE
FEB
MZO
ABR
MAY
J UN
J UL
AGT
SEP
25 22.5 20 17.5 15
TSuperficie
ENE FEB MZO ABR MAY J UN J UL
T Fondo
AGT SEP
El anlisis estadstico de la DQO indic que la relacin entre superficie y fondo present significancia (ANDEVA Fc= 17.97, p<0.05), las diferencias entre niveles fue muy acentuada oscilando entre los 157 y 32 mg O2 l-1, siendo en general las de fondo ms elevadas. El comportamiento de esto es explicable por que, como se sabe la DQO es un proceso analtico de contaminacin que mide el material orgnico contenido, mediante oxidacin qumica (APHA, 1996); no obstante, los materiales oxidables que incluye son de origen orgnico o mineral. DBO5, indica la existencia de sustancias orgnicas disueltas que en su mayora no son biodegradables cuando menos su descomposicin es lenta por medios biolgicos. Los resultados nos indican que existe mayor cantidad de compuestos difcilmente biodegradables en el fondo, debido tal vez por el elevado contenido de celulosa, proveniente de las paredes celulares del tejido vegetal, efecto que se refleja en las estaciones de la zona agrcola, principalmente en Texhuilo. Por otra parte el hecho de que exista poco oxgeno disuelto en la profundidad promueve la fermentacin de materia orgnica, proceso poco eficiente, haciendo que exista un rezago de degradacin en la zona trofoltica del lago, alterando el rgimen de reciclaje de nutrientes y modificando la dinmica de los ciclos biogeoqumicos. Estadsticamente se encontraron diferencias significativas en el perodo de muestreo (ANDEVA Fc=5.87, p<0.05), con valores promedio mximos en mayo de 483.84 y 573.65 mg O2 l-1 en superficie y fondo (grfica 2). Cabe destacar que los meses correspondientes al invierno, se caracterizan por tener valores de nutrientes elevados coincidiendo con elevados valores de DQO, indicando que existe una gran cantidad de materia difcilmente biodegradable en estos meses; para los meses posteriores se registra un incremento paulatino hasta llegar a meses correspondientes a primavera-verano alcanzando en este perodo los valores mximos para todas las estaciones. Las determinaciones de las bacterias se realizaron por un lado en caldo EC para la concentracin de coliformes totales y en caldo de bilis brillante al 2% para la concentracin de coliformes fecales (grfica 3). Los datos obtenidos a travs del anlisis del agua indican que la calidad sanitaria de los canales es variable en el periodo analizado presentndose elevados NMP de coliformes totales en los meses
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Grafica 2. Variacin temporal de la DBO5.
ms clidos (marzo-junio), de igual manera sucedi con las concentraciones de coliformes fecales. Los valores para coliformes totales en sedimento fluctuaron entre 0 y 526000 clulas/100g con un promedio de 85906 clulas/100mL . Para coliformes fecales variaron de 0 a 167000 clulas/100mL, con un promedio de 21500 clulas/100mL, mientras que en agua se obtuvieron valores promedio de 59561 clulas/100mL para coliformes totales y 45033 clulas/100mL para coliformes fecales. Las muestras de agua tambin indicaron que el punto de monitoreo con mayor concentracin de coliformes tanto fecales como totales, fue el canal de Asuncin.
Grafica 3. Cultivo de coliformes en ambos medios de cultivo
CALDO EC & CALDO BILIS 2%
180000 160000 140000 120000 ( ) 100ml 100000 80000 60000 40000 20000 0
SUP EC MED EC SED EC SUP MED SED BILIS BILIS BILIS
ASUNCION TEXHUILO
CUEMANCO
caldos
La situacin anterior la relacionamos con los asentamientos humanos. Dado que el punto monitoreado con menor concentracin de bacterias fue Texhuilo, zona con una menor densidad urbana. En relacin con el sedimento, la presencia de coliformes fue homognea en todos los puntos de muestreo, lo que indica el elevado grado de contaminacin fecal en el sedimento de toda la zona
chinampera. En la columna de agua el nmero de bacterias hetertrofas muestra grandes fluctuaciones de una rea a otra y de un tiempo a otro; sin embargo, las poblaciones bacterianas en la superficie de los sedimentos (correspondientes a las muestras tomadas en el fondo) siempre son numricamente mas estables por lo que las fluctuaciones estacionales con mayorl nmero de bacterias se presenta despus de la produccin fitoplanctonica. Las bacterias que se encuentran en el agua de los canales proviene principalmente de los drenajes de aguas grises, de las heces fecales provenientes de asentamientos aledaos a los canales, de los vertidos, de aguas semi depuradas y de la precipitacin pluvial de los contaminantes atmosfricos. Estadsticamente no se encontr diferencias significativas entre niveles, aunque se observ una mayor cantidad de UFCs en la profundidad (en -1 promedio 97510 UFC ml ) que en la superficie (79255 -1 UFC ml ) debido en parte a que el metabolismo hetertrofo (casi exclusivamente microbiano) se desarrolla en las aguas y se desplaza hacia los sedimentos, siendo estos el principal escenario de esta transformacin especialmente cuando el sistema es somero, por otra parte la gran cantidad de MO en los niveles profundos son cualidades de un sistema eutrfico, lo cual incentiva una gran actividad microbiana. Dada la poca transparencia y las bajas concentraciones de oxgeno en el fondo (principalmente en Asuncin 0.945 mg O2l-1, podemos asegurar que los procesos metablicos de catabolismo se dan por parte de bacterias anaerobias generando metano y otros compuestos gaseosos (adems de cidos orgnicos alcoholes, cetonas y productos inestables ) al menos en algunos meses del ao, principalmente en Junio-Julio; sin embargo los procesos de descomposicin que prevalecen, son aerobios y facultativos, prevaleciendo los organismos saprfobos y fagtrofos. Una de las estaciones con elevadas comunidades planctnicas es Cuemanco por lo que se atribuye que contribuye a que esta zona presente elevadas UFCs (las mayores de todo el estudio) con un promedio de 110665 UFC ml-1 en superficie y 130081 UFC ml-1 en fondo. Suponemos que esta situacin junto con los aportes de aguas tratadas industriales que son ricas en nutrientes y MO contribuyen a incrementar la actividad bacteriana significativamente. Otra de las estaciones con elevadas UFCs es Texhuilo (106451UFC ml-1 superficie, 133708 UFC ml-1 fondo), la cual por el tipo de actividad agrcola,
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tiene grandes aportes de materia orgnica vegetal. Los valores mayores de bacterias se encontraron en los meses de julio (132981 UFC ml-1 superficie 157172 UFC ml-1 fondo) y los mnimos en poca de invierno principalmente en enero (19020 UFC ml-1 superficie 34641 UFC ml-1 fondo) lo cual parece razonable, ya que la temperatura desempea un factor muy trascendental en el crecimiento de microorganismos; otro aspecto que influye es que en los lagos de baja profundidad, la gran cantidad de produccin por parte de los productores primarios es en primavera-verano que posteriormente gracias a la actividad bacteriana se da el reciclado de materia, reingresando los nutrientes (Vila, 2003) en los meses siguientes por medio de los diferentes ciclos biogeoqumicos.
Grafica 4. Variacin temporal de las Unidades Formadoras de Colonias en las estaciones monitoreadas.
Bibliografa.
1. Alfaro, S. G. Y Orozco, Ch. F. 1991. Estudio Edafolgico del Ejido de Xochimilco (Cienga Grande). Instituto de Geografa. UNAM. Terra. Vol. 9(1). Enero/junio 1991. pp 24-32. INEGI (2000). Cuaderno Estadstico Delegacional, Xochimilco, Distrito Federal, 50-60 p. Vila, PI. (2003). Caracterizacin de Ecosistemas Acuticos. Interacciones Sedimento-Agua. II Jornadas Iberoamericanas sobre Enfoques Integrados de la Problemtica del Agua. CYTED-XVII., Espaa.: 17-23. American Public Health Association, American Water Works Association, Water Enviroment Federation. (1996) Standard methods for the examination of water and wastewater 18a ed Washington, D.C. American Public Health Asssociation, 9-48.
2. 3.
4.
Conclusiones. Los resultados nos indican que las estaciones monitoreadas presentan elevadas concentraciones de diversas comunidades bacterianas hetertrofas, sin embargo su distribucin est directamente relacionada con la materia orgnica a nivel temporal y estacional, resultando ser Texhuilo y Asuncin las estaciones con la mayor cantidad de unidades formadoras de colonias, en relacin con la bacterias coliformes, podemos concluir estn en gran cantidad mayormente en Asuncin por aportes clandestinos de aguas sin tratamiento por parte los asentamientos humanos irregulares. El lago de Xochimilco dado que posee gran cantidad de materia orgnica es considerado hipereutrfico, lo cual favorece el desarrollo de microorganismos, como lo son las bacterias hetertrofas y coliformes.
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HERRAMIENTAS DE ECOLOGA INDUSTRIAL PARA EVALUAR LA SUSTENTABILIDAD DE SITIOS DE DISPOSICIN FINAL DE RSU: EMISIONES DE GEI E INDICADORES DE DESARROLLO SUSTENTABLE
Gemma Cervantes*1, Lelis Cardozo1, Jenni Arce1, Wilverth Villatoro2
GIEI, Grupo de Investigacin en Ecologa Industrial; UPIBI, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa; IPN, Instituto Politcnico Nacional. 2 UAQ, Universidad Autnoma de Quertaro. Facultad de Qumica. * IPN, Instituto Politcnico Nacional. Av. Acueducto s/n. Barrio La Laguna Ticomn. 07340 Mxico DF tel. (+52 55) 57296000 ext 56387, 56342. Fax, ext 56305 gemma.cervantes@gmail.com Palabras clave: ecologa industrial, sitios de disposicin final, gases efecto invernadero, indicadores de desarrollo sustentable, residuos slidos urbanos. Introduccin. Emisiones de GEI, Residuos slidos y Ecologa Industrial. En las ltimas dcadas se han registrado profundas transformaciones a nivel mundial que afectan a las caractersticas biofsicas de los ecosistemas y a la calidad de vida de la poblacin. Uno de los factores ms importantes ha sido el incremento en la liberacin de Gases de Efecto Invernadero (GEI), por la quema de combustibles fsiles, que contribuyen al calentamiento global. Otro de ellos, de especial importancia en Mxico es la gran generacin de residuos y su disposicin, que provoca la proliferacin de fauna nociva, la generacin de lixiviados y la emisin de GEI. Tan slo en 2009 se generaron aproximadamente 38 325 000 toneladas de residuos slidos urbanos (RSU) en Mxico [1]. Es necesario buscar soluciones a la problemtica de la disposicin de RSU. Esto puede lograrse de diferentes maneras y una de ellas es mediante la aplicacin de la Ecologa Industrial (EI), ya que sta tiene como objetivo fundamental el promover el desarrollo sustentable en sistemas industriales. La EI es una temtica interdisciplinaria cuyo objetivo es crear sistemas industriales que operen en forma similar a los ecosistemas naturales mediante la interaccin de las industrias, la sociedad y la naturaleza para cerrar el flujo de materia, optimizar el uso de energa e incrementar la eficiencia de los procesos [2]. La EI utiliza diferentes herramientas, como son los indicadores de desarrollo sustentable, los diagramas de flujo, el Anlisis de Ciclo de Vida, el clculo de emisiones de GEI, etc. Clculo de emisiones de GEI Diferentes iniciativas internacionales han intentado ayudar a solucionar el problema del exceso de emisiones de GEI. En 2005 la emisin anual mundial fue de 44.153 Gt de CO2 eq. [3] y la concentracin de CO2 en la atmsfera era de 389 ppm en octubre de 2009. El Panel Intergubernamental para el Cambio Climtico (IPCC) es un organismo internacional creado por el programa de la ONU para el medio ambiente, cuyo objetivo es analizar la informacin cientfica, tcnica y socioeconmica relativa al cambio climtico. Como resultado ha desarrollado guas metodolgicas para estimar las emisiones de GEI procedentes de cinco sectores: energa; procesos industriales y uso de productos; agricultura, silvicultura y otros usos de tierra; residuos y otros. Por otro lado la Agencia de Proteccin Ambiental de los Estados Unidos (U.S. EPA) y la Agencia de los Estados Unidos para el Desarrollo Internacional (USAID) tambin han desarrollado un mtodo de clculo de emisiones, en este caso preparado especficamente para Mxico: el Modelo Mexicano de Biogs, que sirve para estimar la generacin de biogs en Sitios de Disposicin Final (SDF). Sitios de disposicin final Un SDF es un lugar donde se depositan los residuos slidos urbanos y de manejo especial en forma definitiva. Existen tres tipos de SDF: Los Rellenos Sanitarios, los rellenos de tierra controlados y los sitios no controlados [4]. Un relleno sanitario es una obra que involucra mtodos y obras de ingenieras para la disposicin final de los RSU, con el fin de controlar, a travs de la compactacin e infraestructura adicional, los impactos ambientales; un relleno de tierra controlado es un sitio que cuenta parcialmente con inspeccin y vigilancia; mientras que un sitio no controlado es un lugar inadecuado de disposicin final en el cual se depositan los residuos sin ningn control tcnico y recibe el nombre de tiradero a cielo abierto. Los SDF se pueden considerar como grandes reactores complejos y heterogneos cuyos principales productos son el biogs y los lixiviados. Algunos rellenos sanitarios cuentan con sistemas de captura de biogs, que puede utilizarse para la generacin de energa. En este trabajo se analiz un Relleno Sanitario ubicado en Jalisco, con las herramientas de la EI: diagramas de flujo, indicadores de desarrollo sustentable y clculo de emisiones de GEI. Metodologa. Se recopil informacin cualitativa y cuantitativa del Relleno Sanitario a travs de visitas y entrevistas a los encargados de la operacin y administracin del sitio de disposicin final. Se construy el diagrama de flujo para el SDF y se analiz para detectar las posibles alternativas u opciones de mejoras que se pueden aplicar. Se calcularon las emisiones de GEI para conocer la magnitud del impacto que tiene la disposicin de los RSU
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en el cambio climtico. Estas emisiones se calcularon segn la metodologa IPCC [5] y la desarrollada por la U.S.EPA USAID [6] y se compararon ambos valores con los valores de biogs medidos in situ por el propio relleno. El Modelo IPCC se basa en el mtodo de descomposicin de primer Orden (FOD, del ingls, First Order Decay), que formula la hiptesis de que el componente orgnico degradable (carbono orgnico degradable, COD) de los residuos se descompone lentamente a lo largo de unas pocas dcadas, durante las cuales se forman el CH4 y el CO2. Uno de los principales factores que influyen sobre las emisiones provenientes de SDF es la composicin de los residuos, ya que los residuos contienen diferentes cantidades de COD. El Modelo mexicano de biogs utiliza una ecuacin de degradacin de primer orden y estima el volumen de generacin de biogs multiplicando la generacin de metano por dos (se asume que el biogs est compuesto de 50% metano y 50% dixido de carbono). El modelo asume que por cada unidad de residuos, despus de un ao la generacin disminuye exponencialmente la generacin de metano mientras la fraccin orgnica de los residuos es consumida. Se elabor un sistema de indicadores de desarrollo sustentable en base a los indicadores del proyecto MESVAL [7], y a otros proyectos desarrollados por GIEIUPIBI [8]. Algunos de los indicadores encontrados en dichas fuentes fueron seleccionados para ser aplicados directamente al sistema, mientras que otros necesitaron ser adaptados para ser utilizados en el SDF. Con base en los datos obtenidos del Relleno Sanitario se procedi a calcular los indicadores de desarrollo sustentable propuestos para conocer el grado de desarrollo sustentable que posee el SDF. Resultados. El Relleno Sanitario estudiado est ubicado en Jalisco, y opera desde 1998. De acuerdo a la NOM-083SEMARNAT-2003, es un relleno tipo A ya que recibe ms de 100 ton de residuos por da. Emplea material de cobertura, posee geomembrana y cuenta con 3 lagunas de lixiviados. En la Figura 1 se observa el diagrama de flujo del Relleno Sanitario. Se realiz la identificacin de las diferentes entidades que se tienen en el sistema, diferencindose las siguientes: rea de recepcin y pepena de residuos, rea efectiva, planta de quema de biogs, oficinas, laguna de lixiviados y maquinaria. Para cada una de ellas se muestran las entradas de materia prima, el consumo energtico y de agua, las salidas de residuos, la generacin de emisiones, y las relaciones internas y externas en el sistema.
Empresa de reciclaje Plstico
Empresa de reciclaje Metales
Atmsfera Metano
Atmsfera Dixido de Carbono Metano Planta de quema de biogs Lixiviados Dixido de carbono
Tlaquepaque RSU Empresas privadas RSU
Recepcin de Resto de Residuos y rea los RSU de pepena Material de cobertura RS
rea efectiva Lixiviados
Atmsfera
Agua
Comisin Electricidad Federal de Electricidad
Oficinas
Laguna de Lixiviados
Maquinaria
Diesel
Gasolinera
Pozo
Predio
Simbologa: Energa Agua Materia prima Residuos Intercam residual bio (dentro del SDF)
Figura 1. Diagrama de Flujo Cualitativo del Relleno Sanitario.
Se realiz el clculo de emisiones empleando la metodologa IPCC y el Modelo Mexicano de Biogs, obtenindose los resultados mostrados en la tabla 1.
Tabla 1. Clculo de emisiones de CH4 en el Relleno Sanitario mediante la Metodologa IPCC y el Modelo mexicano de biogs. Metodologa IPCC Ao 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 CH4 generado [Gg CH4/ao] 0.1597 0.4974 1.3160 1.9530 2.0134 2.1483 2.3190 2.3889 1.9490 1.4728 1.4280 1.4195 2.226 CH4 emitido [Gg/ao] 0.1488 0.4642 1.2266 1.8183 1.8746 5.5176 5.5572 2.0830 1.8143 1.3710 2.2262 Promedio 1998-2009 Modelo mexicano de biogs. CH4 generado [Gg CH4/ao] 0.0852 0.2821 0.7906 1.2873 1.7663 2.2953 2.8273 3.3270 3.5532 3.7325 3.9118 4.194
Si comparamos los valores calculados con la metodologa IPCC y con el Modelo mexicano de biogs se observa que el valor del IPCC es la mitad del valor del modelo mexicano de biogs. Las metodologas empleadas para la estimacin de emisiones de CH4 en el SDF poseen el mismo fundamento, por lo que la diferencia en los resultados obtenidos puede deberse a diferentes factores. La metodologa del IPCC se basa en el contenido de carbono orgnico degradable de los residuos separados por tipo: madera, parques y jardines, alimenticios, textiles, paales desechables y papel y cartn. Estos sufren la descomposicin anaerobia generando biogs. Por otro lado el modelo mexicano de biogs tiene como punto de
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partida una masa de residuos orgnicos en general, por lo que ambas metodologas asignan constantes de reaccin distintas, que arrojan resultados diferentes en cuanto a emisiones de CH4 en un SDF determinado. En especfico, el modelo mexicano de biogs emplea una constante de reaccin mayor en comparacin con el IPCC, lo que significa que en base al modelo mexicano los residuos se degradan en un menor tiempo, dando as una generacin ms alta de CH4 en el relleno sanitario. En el caso de la metodologa IPCC se emplean constantes dadas por defecto, que no estn adaptadas a Mxico, mientras que el modelo mexicano aplica constantes ms adecuadas al pas. Evaluacin del nivel de desarrollo sustentable a travs de indicadores. Para evaluar la tendencia del Relleno Sanitario al desarrollo sustentable se cre una batera de 81 indicadores de los cuales 41 pertenecen al mbito ambiental, 14 al econmico y 24 al social. stos indicadores fueron elaborados en base a 13 objetivos principales, que persiguen el cierre de ciclos de materia, la proteccin a la calidad del agua, la reduccin en el uso de recursos naturales, energa y emisiones en el aspecto ambiental. En trminos econmicos se busca lograr una reduccin en costos y mejorar la inversin para el mejoramiento de la calidad. En el mbito social, se persigue la creacin de nuevos empleos, incrementar la responsabilidad social corporativa y la responsabilidad ambiental, mejorar la calidad, la creacin de redes sociales y el fomento a la investigacin y la educacin. En las Tablas 2, 3 y 4 se muestran los valores de algunos indicadores ambientales, econmicos y sociales creados para el Relleno Sanitario.
Tabla 2. Indicadores ambientales del relleno sanitario Valor Unidades 1998/2009 OBJETIVO: CIERRE DE CICLOS DE MATERIA TEMA: Reutilizacin de agua 3 Volumen de agua reutilizada. /0 m /ao Porcentaje de agua reutilizada. /0 % TEMA: Utilizacin de RSU como materia prima Cantidad de RSU que llegan al SDF. / ton/ao 243 211.5 Cantidad total de RSU que llegan al / 51 925 ton/ao SDF utilizados como materia prima Porcentaje de RSU reutilizados. 0/0 % Porcentaje de RSU reciclados. ND / 21.3 % 3 Cantidad de biogs utilizado como 0/0 m /ao fuente de energa. Porcentaje de biogs utilizado como 0/0 % fuente de energa. OBJETIVO: REDUCCIN EN EL USO DE RECURSOS NATURALES TEMA: Consumo de agua Volumen de agua (total) consumida en / 3960 m /ao
3
el SDF. 3 Proporcin de agua consumida por / 0.04 m /t unidad de RSU dispuesta. TEMA: Consumo de combustibles fsiles 3 Consumo de combustibles fsiles. 156 / 208 m /ao Proporcin de consumido por acumulada. Proporcin de consumido por dispuesta. combustible unidad de combustible unidad de fsil 6.7 / 0.136 RSU fsil RSU 6.7 / 1.9 L/t
L/t
TEMA: Uso de suelo rea empleada por el SDF. Densidad de los RSU en el SDF. / 100 / 750 - 800 Ha 3 Kg/m
3
Volumen de material de cobertura / 20 000 m empleado por el SDF. OBJETIVO: REDUCCIN EN EL USO DE ENERGA Y/O EN EL USO DE ENERGA PROCEDENTE DE FUENTES NO RENOVABLES. TEMA: Consumo energtico Cantidad de energa elctrica que 222048 / Kw-h/ao consume en el SDF. ND 9.6 / Kw-h/ao Proporcin de energa elctrica consumida por unidad de RSU acumulada. Proporcin de energa elctrica 9.6 / Kw-h/ao consumida por unidad de RSU dispuesta. TEMA: Uso de energa de fuentes no renovables Proporcin de energa elctrica 100 / 100 empleada proveniente de fuentes no renovables. TEMA: Uso energa de fuentes renovables Proporcin de energa proveniente de 0/0 fuentes renovables. TEMA: Uso de fuentes alternativas %
Indicador
Generacin de energa/ electricidad 0/0 Kw-h/ao por uso de biogs. OBJETIVO: REDUCCIN DE EMISIONES A LA ATMSFERA Y COMPENSACIN. TEMA: Emisiones de gases de efecto invernadero. Cantidad de emisiones de CO2 equivalentes totales generadas por el SDF. Cantidad de biogs generado en el SDF. / 369 708 ton CO2 eq/ao m /ao
3
25404000/ 92308500
OBJETIVO: PROTECCIN DE LA CALIDAD DEL AGUA TEMA: Tratamiento de agua. 3 Volumen de agua tratada. 0/0 m /ao Porcentaje de agua tratada. 0/0 % Tabla 3. Indicadores econmicos del relleno sanitario Valor Unidades 1998/2009 OBJETIVO: REDUCCIN DE LOS COSTOS AMBIENTALES Indicador
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TEMA: Costo de Manejo de residuos Costo del manejo de RSU. 8640000 / 3 000 000 Costo del manejo de residuos por 371.61/ unidad de RSU acumulada. 1.97 Costo del manejo de residuos por 371.61/ unidad de RSU dispuesta. 27.41 TEMA: Costo de Uso de agua Costo por consumo de agua. ND / ND
TEMA: Obtencin de premios y/o reconocimientos $/ao $/ao $/ao Nmero de premios y/o /0 Reconocimien reconocimientos. tos OBJETIVO: INCREMENTAR EL CAPITAL SOCIAL LOCAL TEMA: Cohesin social Nmero de relaciones productivas ND Relaciones locales en el SDF productivas OBJETIVO: CREACIN DE REDES SOCIALES TEMA: Actividades de divulgacin, formacin y culturales realizadas por la entidad Nmero de actividades de divulgacin /1 Actividades al ao /ao Nmero de asistentes a las / 244 Personas actividades de divulgacin. TEMA: Relacin e intercambio de informacin con SDF similares Nmero de SDF con los que se ND SDF intercambia informacin TEMA: Aumento en el nmero de clientes y proveedores Nmero de clientes y proveedores al ND clientes/ao ao OBJETIVO: FOMENTO A LA INVESTIGACIN Y EL DESARROLLO TECNOLGICO TEMA: Acciones de investigacin desarrolladas por la entidad Nmero de actividades de 6/1 Actividades investigacin en las que est involucrada la entidad Nmero de investigadores vinculados /2 Investigadore con la entidad s TEMA: Actualizacin y/o mejora de la tecnologa Nmero de equipos y/o desarrollos /4 Equipos tecnolgicos implementados en el SDF OBJETIVO: FOMENTO A LA EDUCACIN TEMA: Trabajos acadmicos desarrollados en el SDF Nmero de estudiantes vinculados con /2 Estudiantes el SDF Nmero de trabajos acadmicos /8 Tesis desarrollados en coordinacin con el SDF. Nmero de universidades con las que /4 Universidades tienen relacin.
$/ao
Cantidad de dinero ahorrado por la 0/0 $/ao reutilizacin del agua. TEMA: Costo Reduccin de contaminantes. Costo por emisin de contaminantes. Costo por elctrica. consumo de energa 0/0 / 44 000 $/ao $/ao TEMA: Costo de uso de energa.
TEMA: Costo de uso de materias primas Costo por adquisicin de material de ND / ND $/ao cobertura al ao. OBJETIVO: INVERSIN EN LA MEJORA DE LA CALIDAD Tema: Costo de mejoramiento de la calidad Cantidad de dinero invertido en 7 000 000 $/ao proyectos de mejoramiento de la / 642 785 calidad.
Tabla 4. Indicadores sociales del relleno sanitario Valor Unidades 1998/2009 OBJETIVO: CREAR NUEVOS EMPLEOS O EMPLEOS DE MEJOR CALIDAD TEMA: Capacidad de crear nuevos empleos o capacidad para mejorar el empleo Nmero de empleos directos 25 / 25 Empleos generados en el SDF /ao Nmero de empleos indirectos generados en el SDF Nmero de empleos revalorizados Empleos /ao 0/0 Empleos /ao OBJETIVO: INCREMENTAR LA RESPONSABILIDAD SOCIAL CORPORATIVA, AMBIENTAL Y MEJORAR LA CALIDAD. TEMA: Aplicacin de medidas ambientales 155 / 800 Indicador
Nmero de acciones de mejora /1 Acciones ambiental realizadas al ao /ao TEMA: Aplicacin de medidas de calidad Nmero de acciones de mejora de la /2 Acciones calidad realizadas al ao. /ao TEMA: Aplicacin de medidas de responsabilidad social Nmero de acciones de mejora de la /1 responsabilidad social realizadas al ao. TEMA: Obtencin de certificados Nmero de certificados de calidad y/o /0 responsabilidad social obtenidos. Nmero de certificados ambientales /0 obtenidos. Acciones /ao
Certificados Certificados
A partir del anlisis de los indicadores se observa que el relleno no cumple muchos de los objetivos de desarrollo sustentable en el aspecto ambiental, pues no se reutiliza el agua, no se utiliza el biogs como fuente de energa, toda la energa que se consume proviene de fuentes no renovables, no existe tratamiento para aguas residuales y la cantidad de combustibles fsiles consumidos es mayor a la de otros SDF. En el SDF estudiado se consumen 1.9 litros de diesel por tonelada de residuo depositado mientras que en otro relleno del mismo estado se consumen nicamente 0.46 L/t. Sin embargo el relleno recicla en un porcentaje notoriamente superior al de otros SDF. Por ejemplo en Bordo Poniente la media de reciclaje fue del 6 % [GDF Secretaria de Obras y Servicios Tercer informe de labores
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www.obras.df.gob.mx]. en 2008 mientras que en el SDF de Jalisco se tuvo el 21% de RSU reciclados en 2009; por otro lado desde 1998 a 2009 ha mejorado significativamente su ndice de eficiencia de uso de combustible. Tambin utilizan menor cantidad de material de cobertura para la misma cantidad de residuos depositados. Mientras en Sonora se emplean 0.53 m3/t de material de cobertura, en el SDF del presente trabajo se utilizan nicamente 0.18 m3/t. Es de destacar que ste es uno de los pocos rellenos sanitarios que cuenta con un sistema de captura y quema de biogs. Aunque no se utilice el biogs para la produccin de energa elctrica, el hecho de quemarlo reduce en un 25 % las emisiones de CO2. En el aspecto econmico se observa que, en el SDF estudiado, ha disminuido significativamente el costo por el manejo de residuos desde 1998 a 2009, tanto en el caso de considerar por unidad de RSU dispuesto como por RSU acumulado, cumpliendo as el objetivo de desarrollo sustentable de reduccin de costos ambientales. Es interesante sealar que el valor de 0$/ao por emisin de contaminantes indica que el SDF no ha recibido ninguna sancin, debido a que tiene una gestin correcta del relleno. Pero cabe destacar que no es posible hacer un anlisis a mayor profundidad de otros aspectos econmicos del relleno pues no se dispone de suficientes datos. En el mbito social en algunos aspectos se observa un dinamismo en cuanto al cumplimiento de objetivos de desarrollo sustentable como en la creacin de nuevos empleos (indirectos), que aument significativamente en 2009 debido a la instalacin de un sistema de captacin de biogs. Tambin se realizan acciones de mejora, tanto en el aspecto ambiental, como en la calidad, como en la responsabilidad social, que aunque sean pocas indican un inters por la innovacin y la mejora global. Tambin es de destacar que van avanzando en el cumplimiento de los objetivos de fomento a la investigacin, fomento al desarrollo tecnolgico y fomento de la educacin. Conclusiones. La diferencia entre los valores de emisiones de GEI calculados para el SDF segn la metodologa IPCC y segn el Modelo mexicano del biogs puede deberse, entre otros factores, al hecho que el modelo mexicano de biogs considera datos propios de Mxico mientras que el IPCC maneja datos internacionales. La comparacin de la evolucin de los indicadores de desarrollo sustentable dentro del propio SDF, as como la comparacin de sus valores con otros SDF permite detectar el nivel de desarrollo sustentable en los aspectos ambiental, social y econmico. A pesar de que el SDF estudiado no muestra un comportamiento ambiental muy avanzado, es muy importante para la reduccin de emisiones la captura y quema del biogs generado que este SDF realiza. El SDF muestra un dinamismo importante en el aspecto social y una buena evolucin en los aspectos econmicos medidos.
Bibliografa.
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CARACTERIZACIN FISICA Y PRESENCIA DE ALGAS FOTOSINTTICAS EN DOS LAGUNAS, UNA GRANJA ACUCOLA Y UN MANANTIAL DEL ESTADO DE GUANAJUATO, MXICO.
Claudia Karina Snchez Snchez1, Leticia Castro Barrita1, Juan T. Fras Hernandez1 Jaquelina Gonzlez Castaeda*
Universidad de Guanajuato,* Universidad de Guanajuato, Divisin de Ciencias de la Vida, Campus Irapuato-Salamanca, Ex Hacienda El Copal Km 9 Carr. Irapuato-Silao, C.P 36500, Irapuato Gto., Tel. (462)62 4 24 84 ext.1530, jaquegc1@hotmail.com Palabras clave: Caractersticas fsicas, algas fotosintticas, aguas dulceacucolas Introduccin: Los cuerpos de agua epicontinentales son muy importantes como fuente de recursos naturales y representan una riqueza considerable para diversas actividades. Sin embargo la progresiva degradacin de los ecosistemas acuticos, es uno de los problemas ms graves que actualmente se presenta, la contaminacin originada por la acumulacin de los desechos orgnicos, el arrastre de fertilizantes usados en la agricultura, as como la creciente industrializacin y urbanizacin, provocan la disminucin de la calidad de los mismos, el incrementando de los nutrientes promueve el desequilibrio de la flora natural, induciendo a cambios en la estructura de las comunidades acuticas, afectando de esta manera su ciclo de vida, crecimiento y condicin reproductiva [1-2], lo cual puede hacer que predominen algunos microorganismos como es el caso de las algas, siendo stas un indicador de eutrofizacin en los sistemas acuferos [3-5]. Alcocer y col., Quiroz y col., reportaron sistemas acuferos de nuestro pas, que se encuentran en condiciones de hipertrofia [6-7]. Sin embargo, a pesar de ser cada vez ms comunes han recibido poca atencin. Los factores fsicos y qumicos en un sistema acutico tambin se modifican durante el proceso de eutrofizacin, su cuantificacin permite evaluar el grado de contaminacin y de esta manera poder proponer estrategias para su conservacin, mejorando el uso y manejo de los mismos, para consumo humano, la agricultura, la pesca y la recreacin [8-9]. En el estado de Guanajuato, Mxico, algunos de sus cuerpos de agua dulce son utilizados tanto para consumo humano, actividades recreativas y riego, tal es el caso del Manantial Santiago de Capitiro en Jaral del Progreso. El objetivo de este trabajo fue caracterizar fsicamente y aislar algas fotosintticas, de dos lagunas, una granja acucola y un manantial, para conocer el grado de eutrofizacin de los mismos sirviendo como base para proponer medidas de conservacin y manejo sustentables. Metodologa: Muestreo. Los acuferos de esta investigacin se localizan en el estado de Guanajuato, Mxico, fueron muestrearon en el mes de marzo de 2010 y son: la Laguna de Tres Villas en Cuermaro, Guanajuato (LTV), una Granja Acucola (GA) y la Laguna de Yuriria (LY) en la Comunidad de la Angostura, en Yuriria, Guanajuato, y un Manantial de la Comunidad de Santiago de Capitiro, en Jaral del Progreso, Guanajuato (MSC). Para el muestreo se consideraron las condiciones del lugar, su accesibilidad, flujo de agua y la presencia de una capa superficial pigmentada proveniente de microorganismos fotosintticos [10]. Se recolectaron en total seis submuestras de cada acufero, fueron recolectadas en envases de polietileno de 5 L, previamente lavados con HCI diluido y eliminando el cido con abundante agua destilada. En el momento de la toma de muestra se lavan los recipientes tres veces con el agua a muestrear. Caracterizacin fsica de los cuerpos de agua. Los parmetros fsicos medidos in situ, fueron: temperatura (T), pH, conductividad elctrica (CE) y slidos disueltos totales (SDT), utilizando un equipo multiparmetro de la marca HANNA Instruments HI 991301. Las submuestras fueron trasladadas al laboratorio
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para realizar el aislamiento de las algas fotosintticas. Los datos se analizaron mediante un anlisis de varianza (ANOVA) completamente al azar, a una p<0,05 utilizando el paquete estadstico Minitab en espaol versin 15.0 considerando un total de seis repeticiones. Aislamiento de algas fotosintticas A partir de las submuestras, de cada uno de los cuerpos de agua dulce muestreados, se obtuvo una muestra compuesta, para posteriormente realizar el aislamiento de las algas fotosintticas, utilizando el medio slido de Dubos citado por Mc Faddin [11-12] y se sigui la tcnica por siembra en superficie en agar slido, descrita por los siguientes autores [13-16], la intensidad lumnica de incubacin fue de 2000 luxes con un fotoperiodo de 12hrs. Tincin y observaciones al microscopio. Para la observacin microscpica de las algas fotosintticas aisladas, se realiz una tincin en fresco con lugol [17]; posteriormente se observ al microscopio. Resultados y discusin: En la Tabla 1, se muestran los parmetros fsicos analizados. La variacin de la temperatura fue de 0,5 mostrando valores C, entre 25,1 y 25,6 C presentando diferencias estadsticamente significativas. Es importante mencionar que los cambios en la temperatura afectan directamente a la tasa metablica de las comunidades acuticas, mientras mayor es la temperatura mayor es la tasa metablica del cuerpo de agua [18], lo que pudiera reflejarse en una modificacin de la flora del sitio, Oliva y col. [19], reportaron la variacin del crecimiento de algas en poca de lluvia y estiaje. El pH ms alcalino se observ en la GA el cual fue de 8,3 y el ms cido se observo en el MSC con un valor de 7,9. La mayora de los organismos toleran cambios de pH dentro del intervalo de 6 a 9 que normalmente se presenta en los ambientes acuticos [18], lo que pudiera indicar que el pH no es un factor crtico para el desarrollo de las algas, la Norma considera valores entre 6,5 y 8,5, como se observa en los resultados obtenidos, los acuferos estudiados estn dentro de la Norma [20]. La CE fue casi ocho veces mayor en LTV que en el MSC (2383 y -1 320Scm respectivamente). La CE refleja la concentracin total de sales solubles
contenidas en el agua, es de gran importancia pues nos da una idea del grado de mineralizacin del agua, entre menor sea el valor de CE es mejor la calidad. En base a este criterio se puede observar que el MSC es el cuerpo de agua con menor mineralizacin. Los resultados de SDT mostraron una tendencia similar a la CE, donde el valor ms -1 alto fue de 1232 mgL en LTV (veinte veces mayor que el Lmite Mximo Permisible de la NOM-001-ECOL-1996 X) siendo el MSC con el valor ms bajo 160 mgL-1 [20], mostrando diferencias significativas estadsticamente todos los acuferos estudiados, como era de esperarse, dado que LTV se destina para riego en poca de estiaje, fue el sistema que mostr un mayor incremento de los SDT, siendo una constante amenaza para la estabilidad de los ecosistemas acuticos. El incremento de SDT, la alta concentracin de sales provoca un aumento en la presin osmtica de los acuferos,favoreciendo el desarrollo de algas que impiden el paso de luz, alterando la biodiversidad. Resultados similares han sido reportados por otros investigadores en estudios realizados en lagos y lagunas del
Cuerpos de agua* LTV LY GA MSC T** ( C) 25,6 a (0,08) 25,1 d (0,12) 25,3 c (0,15) 25,4 b (0,15) pH 8,0 c (0,05) 8,1 b (0,08) 8,3 a (0,02) 7,9 d (0,14) CE**
(Scm )
-1
2 383 a (0,08) 723 c (0,05) 1 400 b (0,07) 320 d (0,03)
SDT** (mgL-1) 1231,7a (38,2) 371,7c (27,9) 726,7b (30,8) 160,0 d (46,5)
Estado de Mxico [19-21-22].

Tabla 1. Temperatura, pH, Conductividad Elctrica y Slidos Disueltos Totales en Cuerpos de Agua Dulce en el Estado de Guanajuato* *LVT, Laguna de Tres Villas, Cuermaro Gto., LY Laguna de Yuriria y GA Granja Acucola en la comunidad de la Angostura, Yuriria Gto., MSC Manantial Santiago de Capitiro, Jaral del Progreso Gto. ** T= Temperatura, CE= Conductividad Elctrica, SDT= Slidos Disueltos Totales. Letra igual indica que no hubo diferencia estadsticamente significativa a p<0,05 entre su desviacin estndar. Promedio de seis repeticiones, valor entre parntesis indica la desviacin estndar.
En la Tabla 2, se muestra el nmero de Unidades Formadoras de Colonias (UFC) con
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morfologa colonial diferente, las cuales fueron aisladas de los diferentes cuerpos de agua muestreados en el estado de Guanajuato.
Tabla 2. UFC aisladas en los diferentes cuerpos de agua dulce en el estado de Guanajuato. UFC aisladas con morfologa colonial Cuerpo de agua diferente *LTV LY GA 3 2 7
agua con mayor eutrofizacin, ya que fue el lugar con los valores ms altos de CE y SDT, as como la presencia de algas, las cuales son indicadores de eutrofizacin en los sistemas acuferos, esta investigacin puede ayudar a implementar medidas de conservacin y manejo sustentables. Agradecimientos: Agradezco a la Direccin de Investigacin y Posgrado (DINPO) por el apoyo otorgado para el desarrollo del proyecto. A Rosa Mara Isabel Rodrguez Montalvo, Alma Karina Prieto Gallaga y Adn Rey Torres Snchez. Bibliografa:
1. Daz M., Elizalde E., Quiroz H., Garca J., Molino I. (2005). Caracterizacin de algunos parmetros fsico qumicos del agua y sedimento del Lago de Zempola, Morelos, Mxico. Acta Universitaria. 15(002):57-65. Borrego C. M., Garca-Gil L. J. (1994). Caracterizacin limnolgica de la Coromina, una laguna hipereutrfica del sistema lacustre de Banyoles. Lirnntica. 10 (1): 43-51. Gmez L., Larduet Y., Abrahantes N.,(2001). Contaminacin y Biodiversidad en ecosistemas acuticos. El Fitoplancton de la Baha de Santiago de Cuba. Rev. Invest. 22(3):191-197 Gonzlez, J. M., Bcares, E. (2001). Limnologa de sistemas experimentales de lagunaje para el tratamiento de aguas residuales. Limntica. 20(2): 267-277. Oliva Martinez M. G., Rodriguez R. A., Lugo V. A y Sanchez R. M. (2008). Composicin y dinmica del fitoplancton en un lago urbano hipertrfico. Hidrobiolgica. 18 (1): 1-13. Alcocer D., Lugo A.,(1995). The urban lakes of Mxico City (Lago Viejo de Chapultepec). Lakeline 15(2):14-31. Quiroz H, Solis O, Garca J,Molina F, Daz M. (2006). Variacin de Componentes fitoplanctnicos en un bordo temporal utilizado para acuicultura extensiva en Norte del Estado de Guerrero, Mxico. REDVET. 7(11):1-25 Arcos R. (2007).Comparacin del deterioro ambiental en relacin al comportamiento fsico y qumico en tres diferentes perodos del lago de Xochimilco. VII Congreso internacional y XII nacional de ciencias ambientales. ANCA. Ciudad de Chihuahua, Chih., Mxico, 6, 7 y 8 de junio del 2007,688-693.
MSC 2 *LVT, Laguna de Tres Villas, Cuermaro Gto., LY Laguna de Yuriria y GA Granja Acucola en la comunidad de la Angostura, Yuriria Gto., MSC Manantial Santiago de Capitiro, Jaral del Progreso Gto.
Las UFC aisladas mostraron diferentes pigmentaciones: verde, blanco, negro, caf; siendo similar en todos los sistemas acuferos analizados en esta investigacin. De la Granja Acucola se aislaron siete UFC con diferente morfologa macroscpica, adems de observarse al microscopio diversos tamaos y formas de algas (Figura 1).
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Figura 1. Morfologa fotosintticas aisladas.
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microscpica de algas 6. 7.
Existen estudios de acuferos donde se ha relacionado el aislamiento de algas con la calidad del agua, destacando principalmente las diatomeas (Bacillariophyceae) y las algas verdes (Chorophyceae) [5-19-23]. Adicionalmente, cabe destacar la importancia que en la actualidad tienen estos microorganismos, al ser considerados como materia prima para la produccin de biocombustibles [24-26] Conclusiones: De los resultados obtenidos se concluye que la Laguna de Tres Villas, puede ser el cuerpo de
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http://www3.inecol.edu.mx/solabiaa/ 9. Arredondo J.L., Flores A., (1992).Caractersticas Limnolgicas de pequeos embalses epicontinentales, su uso y manejo en la acuicultura. Hidrobiolgica 3(4):1-10. Avila, A. (1984). Composicin quimica de los arroyos del Montseny (Barcelona). Limnetica. 1:128-135. MacFaddin, J.F. (1985). Media for isolation-cultivation-identification maintenance of medical bacteria. Williams&Wilkins, Baltimore. 1: 652. Dubos R.J., Fenner F. Pierce C.H. (1985).Properties of a culture of BCG grown in liquid media containing Tween 80 and the fltrate of heted serum. Am Rev. Tuberc.61:66. Tomaselli L., Gioia L. , Bosco M. y Piero T. (2000). Biodiversity of photosynthetic micro-organisms dewelling on Stone monuments. International Biodeterioration & Biodegradation. 46: 251-258. Santamara, O. M,G., J. Garca-Mena y M. T. Nez-Cardona. (2001). Aislamiento y Estudio de las bacterias fottrofas de la familia Chromatiaceae que habitan el Golfo de Mxico. III Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Nez M.T. (2003). Aislamiento y caracterizacin pigmentaria de las bacterias rojas del azufre de la laguna de Tampamachoco, Veracruz. Hidrobiolgica. 13(3):171-176. Pacheco V., J (2003). Aislamiento y estudio de las bacterias fottrofas de la familia Rhodospirillaceae a partir de muestras de agua obtenidas del Golfo de Mxico. III Encuentro Participacin de la Mujer en la Ciencia. Berk S.,Gunderson J. (1993). Wastewater Organisms: A Color Atlas. Lewis Publisher CRL Press USA.10-11 Abada, J., Adames, K., Alvarado, K., Aparicio, R., Cedeo, M., Fray, A., Pea, A., Ortega, O., y Ros, R. (2005). Caracterizacin fisicoqumica y biolgica de la Laguna de Ro Sereno, Chiriqu. Autoridad de los Recursos Acuticos de Panam. Oliva Martinez M. G., Rodriguez R. A., Lugo V. A y Sanchez R. M. (2008). Composicin y dinmica del fitoplancton en un lago urbano hipertrfico. Hidrobiolgica. 18 (1): 1-13. NOM-001-ECOL-1996 que establece los lmites mximospermisibles de contaminantes en las descargas de aguas residuales en aguas y bienes nacionales. De la Lanza Espino G., Alcocer Durand J, Moreno Ruz J.L., Hernndez Pulido S. (2008). Anlisis Qumico-Biolgico para determinar el estatus trfico de la laguna de Tres Palos, Guerrero, Mxico. Hidrbiolgica 18(001): 15-30 Daz M., Elizalde E., Quiroz H., Garca J., Molino I. (2005). Caracterizacin de algunos parmetros fsico qumicos del agua y sedimento del Lago de Zempola, Morelos, Mxico. Acta Universitaria. 15(002):57-65. Silva A.M., Sili C., Torzillo G. (2008). Cyanoprocaryota y microalgas (Chlorophyceae y Bacillariophyceae) bentnicas dominantes en ros de Costa Rica. Rev. Biol. Trop.56(4):221-235. Khan, A. S., Rashmi., Hussain, Z. M., Prasad, S., and Banerjee, U. C.. (2009). Prospects of biodiesel production from microalgae in India. Renewable and Sustainable Energy Reviews 13: 2361 2372. Bastianoni, S., Coppola, F., Tiezzi, E., Colacevich, A., Borghini, F., and Focardi, S. (2008). Biofuel potential production from the Orbetello lagoon macroalgae: A comparison with sunflower feedstock. Biomass and Bioenergy 32: 619-628. 24.Rojo F. (2008). Biofuels from microbes: a comprehensive view. Microbial Biotechnology 1(3):208-210.
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LA REHABILITACIN AMBIENTAL DE UN REA COSTERA PETROLIZADA DESDE LA PERSPECTIVA DEL MANEJO INTEGRADO DE CUENCAS Y REAS COSTERAS EN CIENFUEGOS, CUBA.
Jos Reinol Poma Rodrguez1, Mara Elena Castellanos Gonzlez2, ngel Ral Len Prez2 y Dora Daz Aguilar2.Jos Reinol Poma Rodrguez*. E-mail: reinol@gestion.ceac.cu
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Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos, *Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos, carretera Castillo de Jagua km1/2, Ciudad Nuclear, Cienfuegos, Cuba. Telfonos: (53) (43) 965146, 525478.E-mail: ceac@ceac.cu Palabras Clave: Manejo Integrado, Zona Costera.
Introduccin. En las zonas costeras coexisten diversos ecosistemas de gran productividad y por consiguiente, necesarios para la subsistencia y desarrollo de comunidades humanas locales desde el punto de vista econmico, social y medio ambiental. Actualmente, ellas se encuentran en franco deterioro ambiental dada su fragilidad frente a un enfoque antropocntrico irracional. [1] Estiman que el 60 por ciento de la poblacin vive a menos de 100 kilmetros de la costa. Esta situacin se empeora, porque las actividades realizadas desde tierra adentro tienen su repercusin en la zona costera, a travs de las relaciones eco sistmico. Entonces, es imprescindible tener una mirada integral a la hora de buscar solucin a los problemas ambientales en una u otra rea. Por ello, el Manejo Integrado de Cuencas y reas Costeras (MICAC) emerge como una alternativa de desarrollo en este milenio [2]. Uno de los problemas que ms preocupa, y que debe ser analizado desde este enfoque [3] es el causado por la contaminacin, que se traslada a travs de diferentes vas, llegando a la zona costera, el deficiente tratamiento dado a los contaminantes orgnicos e inorgnicos, afecta a las aguas superficiales, subterrneas, costeras y marinas, as como suelos de la cuenca, de ah, la importancia de vigilar los efectos sinrgicos por contaminantes en una u otra rea para tomar decisiones cada vez ms certeras. Este enfoque resulta imprescindible en Cuba y el proyecto Rehabilitacin Ambiental Integral de Punta Majagua en Reina, Cienfuegos, Cuba parte de aplicar los principios de este proceso (MICAC), los cuales promueven una visin integral a la hora decidir e implementar las decisiones [4]. El proyecto antes mencionado, es el resultado de un servicio ambiental brindado por la Divisin de Ingeniera Ambiental del Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos (CEAC), a la Refinera
de Petrleo de Cienfuegos, Cuba, en su proceso de reanimacin industrial. Punta Majagua, pertenece al Consejo Popular de Reina segn la divisin poltico- administrativa del pas. Es un rea costera ubicada en la porcin centro norte de la baha de Cienfuegos, ecosistema este que recibe la influencia de sus cuencas tributarias. En el ao 1998, con el sierre la base de combustible que operaba la Empresa Comercializadora de Combustibles de Cienfuegos, perteneciente a la Unin Nacional de CUPET, durante el cese temporal de su proceso productivo, legaban a la barriada residuos de petrleo en nmero de 479 m3, este residual lleg a contaminar el suelo de la punta, erosionndolo como consecuencia de la prdida de vegetacin, disminuyendo tambin sus propiedades agronmicas. Al encontrarse la fuente contaminante a menos de 20 metros de la lnea de costa, constitua real peligro de contaminacin de las aguas de la baha, que ya de por si estaba afectado por otras fuentes contaminantes. Los vecinos del lugar, desde el ao 2000, han sufrido el deterioro ambiental del entorno, al cual ellos mismo han contribuido, ya que en un rea de 10 hectreas pululaban todo tipo de vectores, producto 3 de ms de 600 m de desechos slidos, 7 hectreas de vegetacin invasora sin control, bosque sin manejo (Fig. 2).
Leyenda Tanques de Almacenamiento. Vertimiento de residuos Vertimiento de residuos de Hidrocarburos..
Fig 2. Representacin grfica de focos contaminantes en Punta Majagua.
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participacin obtenidas en las comunidades de Obourque y Castillo de Jagua. Metodologa. Se transit del estudio de teoras generales, experiencias prcticas anteriores [2] al estudio del caso particular de Reina, para lograr un proceso de integracin de todos los actores claves y de reas del conocimiento tal y como presupone el enfoque de MICAC. La acciones concretas, surgieron de la prctica, por la aplicacin del mtodo de Investigacin Accin Participacin (IAP), que a su vez requiri de la aplicacin de tcnicas de investigacin como fueron el anlisis de documentos, conversaciones, encuestas y observaciones participantes con charlas educativas en recorridos por la costa, lo cual permiti apreciar por todos el estado ambiental del lugar. Entre los actores sociales enclavados en el rea se identificaron a: un Ncleo Zonal correspondiente a la organizacin poltica del Partido Comunista de Cuba, Autoridades del Consejo Popular, una escuela primaria, los Consultorios Mdicos y las empresas de La Pesca (ESCASUR), Talleres de Construccin Naval (NASCAR) y las oficinas de la Direccin de Estudiantes Latino Americanos de Medicina (ELAM), adems de los miembros de la comunidad que fueron concientizado con la necesidad de participar en el proceso de rehabilitacin del lugar al que pertenecen. Los documentos generados en la primera fase de la investigacin, tales como la caracterizacin de las condiciones higinicas sanitarias, resmenes del consultorio mdico, y el diagnstico ambiental son los elementos de base para el inicio de las acciones participativas y educativas A cada uno de ellos se le explic tcnicamente en qu consista el proyecto, no slo para que entendieran los beneficios que podan lograr con este, sino tambin para que se apropiaran en un lenguaje claro del contenido tcnico de la herramienta cientfica de manejo que se iba utilizar, constituyendo esto una va de educacin ambiental como resultado de la aplicacin del mtodo de IAP. En este caso se estaba haciendo referencia a la Tcnica de la Biorremediacin de suelos petrolizados y a las acciones de reforestacin del rea, posterior a la aplicacin de la misma. De conjunto con los actores, se realiz un diagnstico ambiental participativo in situ para valorar las condiciones naturales del lugar y como esto podra empeorar el estado ambiental de la baha. Entre los principales temas que dominaron el
Fig 3. Base de Almacenamieto de Combustibles en Punta de Majagua.
Las actividades comenzaron en el ao 2009. El universo de este trabajo estuvo enmarcado en la circunscripcin No.1 del Consejo Popular de Reina, especficamente en las zonas No 2 y 131. La poblacin de estudio y la muestra se hicieron coincidir y estn relacionadas con los pobladores de Punta Majagua que constituyen un total de 331 habitantes. Punta Majagua, constituye un rea costera con singular caracterstica geogrfica y social, por lo que se impona, integrar las autoridades gubernamentales y las instituciones de produccin y servicios, as como los ciudadanos comunes (poblacin o vecinos del lugar) que radican en la comunidad para lograr el propsito de un proyecto de tal envergadura. El objetivo del presente trabajo consisti precisamente en valorar las contribuciones del enfoque de MICAC en el xito del proceso de rehabilitacin ambiental de esta rea y para ello fue necesario desarrollar los siguientes objetivos especficos: 1- Demostrar la efectividad de la contribucin del enfoque del MICAC en el proceso de participacin comunitaria para la transformacin ambiental del rea. 2- Elaborar una metodologa de participacin comunitaria para la rehabilitacin ambiental del proyecto. 3- Identificar las lecciones aprendidas a travs del proceso de contextualizacin de las experiencias de
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intercambio, se encontraba la real afectacin de sus tradiciones de pesca y a la salud de sus pobladores, lo cual no haba sido valorado por ellos en toda su magnitud. Durante este intercambio con los diferentes actores del rea, fueron surgiendo preguntas y respuestas que explicaban las causas del estado ambiental de Punta Majagua y sus implicaciones de no transformarse esa realidad. Para ello fue necesario adentrarse en un anlisis social de la ciencia y la tecnologa (CTS) [5] con el fin de que entendieran que la imagen de la ciencia y la tecnologa que gui el desarrollo de Cienfuegos en un momento dado, fue tecnocrtica, benefactora y triunfalista, propias del momento histrico en que la Refinera de Cienfuegos fue emplazada. Actualmente esta imagen ha cambiado, de ah en insistir en la comprensin de lo imprescindible de participacin comunitaria, porque el proyecto era de ellos, aunque con ayuda de los interventores. Algo que caracteriza al MICAC es la vinculacin de las instancias de gobierno; este enfoque permiti que desde el inicio del mismo, tanto el gobierno provincial como municipal fueron comprometidos para apoyar con los recursos necesarios que demandaba un proyecto de esta magnitud, tal como el aporte de su autoridad para convocar y organizar en el momento oportuno las entidades que tenan la responsabilidad social de participar. De manera que, se pudo realizar una valoracin integral del problema ambiental que presentaba Punta Majagua para aplicar soluciones tcnicas con la participacin de los miembros de la comunidad. Resultados y Discusin. Teniendo en cuenta que se aplic el mtodo de IAP, la metodologa desarrollada desde el mismo y que singulariza este trabajo, fue resultado de adentrase en la prctica y de sistematizar las experiencias obtenida. Por ello, en la medida en que se fundament cada paso, fue necesario para una mejor comprensin del mismo de reconocer cuales eran las lecciones aprendidas. Primer paso:Lo importante no es saber, sino saber quin sabe para integrar saberes. Nos aconsej una sabia compaera. Con la orientacin de especialistas en MICAC del CEAC nos acercamos a la comunidad desde el principio del proyecto y contactamos a la mayor cantidad de lderes oficiales y naturales, de acuerdo con la experiencia obtenida en las comunidades de Obourque y El Castillo [2]. Esto permiti encontrar a otros lderes, y todos de una forma u otra ayudaron a
caracterizar a los habitantes del lugar y conocer el medio social y natural en el que se iba a ejecutar el proyecto. Lecciones aprendidas: Antes de comenzar cualquier trabajo consulte a los que tengan experiencia acumulada. Sensibilice a los lderes oficiales y naturales, ellos le suministrarn la informacin que no est escrita en ningn documento. Segundo paso: Concientizacin de los ciudadanos comunes y eleccin de la institucin de anclaje del proyecto. La direccin tcnica del proyecto conjuntamente con las autoridades del Consejo Popular y las direcciones de las empresas enclavadas en la zona de los trabajos, durante 15 das, interactuaron con los vecinos casa a casa, explicando las soluciones y beneficios que dara el proyecto, de estos encuentros surgi la propuesta de la institucin anclaje, siendo elegida las oficinas de la ELAM. Los vecinos argumentaron que el trabajo de la institucin (oficinas de la ELAM) para con los pobladores del lugar era muy aceptado, por tanto tenia significado para ellos. Es de resaltar como testimonio, el haber visto a un ex presidiario llorar de emocin al hablar de los trabajadores de la ELAM que le haban devuelto su dignidad. Lecciones aprendidas: Interacte con los vecinos, hgalos partcipes de su proyecto aunque duden le apoyarn, ah! Pero ejecute lo prometido. Las instituciones enclavada en el lugar son importantes para lograr el triunfo, ellas son el puente entre UD y los vecinos, tambin te brindaran informacin que no est en ningn lugar. La institucin anclaje no es impuesta, todos deben sealarla y aprobarla. Tercer paso: Diagnstico Ambiental Participativo de la comunidad y auto reconocimiento de su responsabilidad social. Por el grado de incredulidad de la poblacin, se decidi comenzar primero los trabajos de campo asociado a la rehabilitacin ambiental del rea. Cuando los pobladores obtuvieron la confianza necesaria en que la promesa se converta en realidad, se aplicaron encuestas y entrevistas para comprender la percepcin ambiental de los comunitarios. Los vecinos, antes incrdulos, pasaron a ser protagonistas activos, admiradores de los trabajadores que cambiaban sin palabreras su realidad, por tanto la informacin recogida con estos instrumentos era bien sentida y brindaba certeza.
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Se conoci del grado de arraigo al barrio que tienen estos vecinos, (de los cuales no existen muy buenas opiniones por entidades fuera del rea), por tanto el sentido de pertenencia pudo ser aprovechado para que ellos se comprometieran a cambiar su realidad. Adems se palp la necesidad de sentirse tratados como buenas personas, como realmente son. La identificacin de la problemtica ambiental con ellos permiti un auto reconocimiento de cmo podan cambiar la realidad sin pedirle nada al gobierno, con acciones locales, muchos comprendieron que pedir a instituciones estatales es algo que se gana desde la practica personal y colectiva de la comunidad. Durante el recorrido por la lnea de costa para la realizacin del diagnostico ambiental participativo, que incluy adultos y nios, se fueron realizando constantes reflexiones sobre su problemtica. Lecciones aprendidas: La comunidad participa activamente cuando la realidad los convence, ellos abren sus puertas, sus patios, brindan lo que pueden y defienden los logros, lo que queda demostrado en los siguientes ejemplos durante la ejecucin del proyecto: 1. Los 16 trabajadores gozaron de las meriendas que todos los das preparaban los vecinos. 2. A pesar de la escasez de agua, siempre recibimos toda la que necesitamos para tomar. 3. Nunca ms dejaron botar basura en el rea. 4. Las 5400 posturas sembradas fueron preservadas. 5. Nos informaban de los vecinos que soltaban animales que podan afectar la siembra. 6. Todo el riego de herbecida se realiz con el agua brindada por los vecinos. 7. Todos los implementos de trabajo fueron guardados en las viviendas de los vecinos. 8. Los fermentadores para la biorremediacin, los termin un vecino, pailero soldador. 9. Las empresas, nos ahorraron 5 600.00 $ por concepto de guardias para cuidar los equipos pesado. Cuando ejecute trabajo social, no se pre enjuicie por las malas opiniones, sea sincero, no se canse de explicar y no prometa nada que no pueda cumplir, UD se convertir en una persona apreciada y escuchada por todos. Haga lo tcnicamente necesario y lo que quiere la comunidad, solo as preservar los resultados. Discutir la realidad ambiental y el sentido de pertenencia que deben tener, en un acercamiento a los vecinos casa a casa, les convence, de que ellos, pueden contribuir a solucionar sus problemas ambientales.
Cuarto Paso: Implementacin de Acciones educativas. La educacin se fue haciendo una prctica paralela desde el inicio del proyecto en cada casa, discutiendo con cada uno como evitar el vertimiento de los residuos slidos a la orilla del mar, dndoles a conocer experiencias de otros lugares de cmo se solucionan estos problemas. Las acciones educativas se proyectaron en dos vertientes: una dirigida a los vecinos y otra hacia la escuela del lugar. En ambos casos, los ejecutores del proyecto se convirtieron en conferencistas itinerantes. Sobre la marcha se fue sondeando a los vecinos, conociendo sus intereses y preocupaciones para orientarlos desde el punto de vista ambiental en el contexto de actuacin. Mientras que la vertiente de la escuela primaria Jess Villa Fuerte, sirvi de escenario para la aprobacin y aplicacin de acciones sobre los temas de inters de la comunidad y del proyecto. Se realizaron trabajos de saneamiento y concursos de dibujo, y se cre un grupo coral que cant canciones sobre temas ambientales de autores de la propia escuela. Se convers sobre lo importante de la unidad, la familia, dejar los vicios y sobre todo perfeccionar la cultura. Lecciones aprendidas: Los nios siempre aman al medio ambiente, ellos son los mejores promotores. El concurso de dibujo y la exposicin de los trabajos se convirti en un taller magistral sobre el cuidado del medio ambiente. La creacin de grupos artsticos, como el grupo coral conformado en la escuela, se constituyen en vas excelentes para realizar acciones de educacin ambiental que sensibilicen a los espectadores de la comunidad. Conclusiones 1. Los fundamentos tericos del MICAC guiaron a los ejecutores del proyecto, al brindarle la comprensin de integralidad de los procesos sociales y naturales que deben ser tenidos en cuenta, durante las intervenciones tecnolgicas, que se realizan como solucin a los problemas ambientales en la zona costera. 2. La participacin comunitaria desde la perspectiva de MICAC propicia un ambiente de aprendizaje que combina armnicamente la tradicional sabidura popular con lo cientfico. Todos los saberes se fusionan en un aprendizaje mutuo, en un mismo discurso, sin distincin de generaciones, razas y credos, el cual prepara adecuadamente el camino a exitosas actividades
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multidisciplinarias, interdisciplinarias e intersectoriales necesarias en la transformacin de una problemtica ambiental en un rea costera dada. 3. Es importante involucrar a la comunidad desde el inicio del proyecto, para asumir conscientemente las actividades en las que deben cooperar y para que se sientan parte del mismo porque el resultado es de ellos y solo ellos lo pueden mantener. 4. Anclar el proyecto en una institucin de reconocido prestigio para la comunidad, permite darle credibilidad al proyecto y reafirmar el valor de la institucin en el entorno. Agradecimientos. Se agradece a todas las entidades que colaboraron con esta investigacin, y al Fondo Global para el Medio Ambiente - Manejo Integrado de Cuencas y reas Costeras (GEF IWCAM) por brindar el financiamiento para este evento. Bibliografa 1. Cohen, J. E., C. Small, A. Mellinger, J. Gallup, J. Sachs, 1997: Estimates of Coastal population, en Science, Washington, D.C., Estados Unidos, volumen 278, 1211-1212. 2. Castellanos M. E., ngel R. Len, Clara E. Miranda, ngel Moreira, Mabel Seisedos, Ral Fernndez, y Yenisei Cabrera (2009): La Educacin Ambiental sobre el MICAC. Experiencias en la comunidad del Castillo de Jagua, Cienfuegos, Cuba. Frum de Ciencia y Tcnica del CEAC. 3. Len . R., Miranda C. E., Castellanos M. E. y M. Abrahantes, (2009). Diplomado en Manejo Integrado de Cuencas y reas Costeras en Cienfuegos. Resmenes. IV Evento Internacional Educacin Ambiental y Manejo Integrado Costero. Del 11 al 13 de mayo del 2009. Varadero. Cuba 4. Len . R., Castellanos M. E. y C. E. Miranda (2009-a): Formacin de capacidades en manejo de cuencas y reas costeras en la Universidad de Cienfuegos. Anuario Cientfico de la Universidad de Cienfuegos. Editora Universo Sur. Cienfuegos. Cuba 11 p. 5. Castellanos M. E., Miranda C. E. y . R. Len, (2009-a): La Educacin Ambiental Comunitaria desde el enfoque: una premisa del MIZC. Resmenes. IV Evento Internacional Educacin Ambiental y Manejo Integrado Costero. Del 11 al 13 de mayo del 2009. Varadero. Cuba
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DESARROLLO SUSTENTABLE DE LAS CASCADAS DE AGUA BLANCA EN MACUSPANA, TABASCO, MXICO. APLICANDO EL MODELO LES BELLEVILLE.
Julio Cesar Romelln Cerino1, Armando Tosca Castillo2, Mario Jos Romelln Cerino*, Juan Soto Sierra4, mjrcerino@hotmail.com *
Instituto Tecnolgico de Villahermosa1,2,3,4 ,Instituto Tecnolgico Superior de Macuspana1 1,2,3,4 Carretera Vhsa-Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial, Villahermosa, Tabasco C.P. 86010 Tel.(993) 3530259 Av. Tecnolgico s/n. Lerdo de Tejada 1ra. Seccin, Macuspana, Tabasco. C.P. 867191 Tel. (936) 3623330 Palabras clave: Modelo, ecoturismo, parque estatal. Introduccin. A consecuencia de hechos que han ocurrido en nuestro planeta, el hombre est tomando conciencia que es l quien est sobreexplotando y contaminando los recursos naturales, ocasionando la deforestacin, desertizacin, la prdida de mantos friticos, de especies animales y vegetales, y de la biodiversidad en s, todo esto ha generado un cambio de actitud del hombre hacia la naturaleza. Ante este cambio el hombre de las grandes ciudades, que vive diariamente el trnsito vehicular, la tensin cotidiana generada por las presiones por obtener xito en su labor y la remuneracin econmica por ello, para satisfacer sus necesidades, encuentra en el contacto con la naturaleza, el complemento necesario y vital para no sentirse alienado por el ambiente artificial en el que vive y satisfacer sus necesidades de autorrealizacin. El turismo ha estado ligado a este proceso y cambio de tendencia, en donde el turista est a la bsqueda de experiencias nicas, acorde a sus nuevos gustos, necesidades y preferencias, como lo es el tener experiencias con las comunidades receptoras, el interrelacionarse con la naturaleza, realizar actividades que le impliquen reto fsico, bsqueda de emociones significativas, el mantenerse en forma, cuidar su salud y realizar actividades al aire libre. El modelo aplicado est enfocado al Desarrollo Sustentable en el Parque Estatal Agua Blanca, porque la finalidad es generar actividades recreativas en armona con la naturaleza y cuidando puedan ser disfrutadas por las generaciones futuras, adems de que el Desarrollo Sustentable se presenta como una alternativa para buscar el progreso, con base en el aprovechamiento racional de los recursos naturales y humanos, con el fin de satisfacer las necesidades del presente, sin comprometer la posibilidad de las generaciones futuras de satisfacer sus propias necesidades de alimentacin, vivienda, vestido, educacin y salud entre otros
Metodologa. Para hallar la respuesta al anlisis se utiliz la investigacin exploratoria para conocer los atractivos con los que cuenta el lugar, como lo son grutas, vegetacin y la fauna; se emple el tipo de investigacin descriptiva, ya que sta comprende la descripcin, registro, anlisis e interpretacin de la naturaleza actual, composicin o procesos de los fenmenos. El enfoque se hace sobre conclusiones dominantes, o sobre cmo una persona, grupo o cosa, se conduce o funciona en el presente. La investigacin descriptiva trabaja sobre realidades de hecho y su caracterstica fundamental es la de presentarnos una interpretacin correcta. El tipo de estudio descriptivo utilizado es el estudio causal, determinando el porqu de la aparicin de ciertos fenmenos, apoyndonos con un cuestionario aplicado a personas asistentes al Parque Estatal Cascadas de Agua Blanca. Este tipo de investigacin Interpreta lo que es y es efectuada en la vida real. Las encuestas o cuestionarios aplicados se efectuaron a personas que asisten al lugar para saber cul es su conocimiento sobre el desarrollo sustentable y cul es su opinin acerca de los servicios que se pretenden introducir en el Parque Estatal Agua Blanca y qu tan motivados se encuentran para retornar al sitio. Asimismo entrevistar a los residentes de la zona para externarnos que otras atracciones posee el Parque Estatal Agua Blanca, los cuales no se dan a conocer. Las variables de estudio fueron las potencialidades ecotursticas del Parque Estatal Agua Blanca que se pueden ofertar al turismo, siendo estos los servicios que pueden generar un mayor contacto con la naturaleza, as tambin los empleos que se generaran principalmente a los habitantes del Ejido Palomas y la satisfaccin de los turistas al permanecer en contacto con el ecosistema.
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Resultados y discusin. En el Parque Estatal Agua Blanca lo que principalmente se promueve es lo que se observa en la fotografa, en la que slo se hace mencin a que existe selva alta perennifolia en el lugar, cascadas, albercas y grutas, sin enfatizar que actividades o servicios se pudieran llevar a cabo con stos.
Este modelo lo present Preau en 1968, gegrafo francs; Les Belleville es una estacin de deportes de invierno construida en los aos setenta, ubicada en un municipio del mismo nombre, la idea fue promover el desarrollo turstico con el nico motor con el que contaban, l cual era la montaa, aprovechando las ganas de trabajar de la poblacin y unos pocos implementos de las reas urbanas, todo esto sin dudar alguno les atrajo empleos, mejores servicios a la comunidad y a los turistas una opcin ms de recreo y esparcimiento sano en convivencia con la naturaleza (Callizo, 1991:111) [1]. Por potencial ecoturstico se entiende como la capacidad que tiene el Parque Estatal Agua Blanca para desarrollar servicios ecotursticos. VARIABLE DIMENSIN INDICADORES Observacin de flora Observacin de fauna Ecoturismo
Fotografa 1.- Letrero localizado en la entrada del parque.
Talleres de educacin ambiental Senderismo interpretativo
Descripcin del Modelo Potencialidades Ecotursticas
Caminata Turismo de Aventura Espeleismo

Figura 2.- Cuadro sinptico de las potencialidades ecotursticas del Parque Estatal Agua Blanca.
Figura 1.- Modelo Les Belleville.
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Figura 3.- Modelo Les Belleville Aplicado.
Este modelo en el cual nos basamos explica la forma tan relacionada en que estn todas las partes involucradas en la actividad turstica, en el Parque Estatal Agua Blanca. Como primer paso existe un gran atractivo natural y ecoturstico en el Parque Estatal Agua blanca, del cual se puede aprender mucho y disfrutarlo en todo su esplendor. Los turistas desde antes de ingresar al Parque, traen un sin nmero de necesidades y muchos deseos de poder olvidarse de lo que sucede en las ciudades donde viven, buscando con esto el que existan actividades recreativas y de convivencia con la naturaleza; la comunidad de Palomas que los albergar por algunas horas en el Parque tendr que estar preparada para ofrecer los servicios que los motivarn a desestresarse y retornar al lugar, siendo estos servicios generadores de empleo para la comunidad. Para cumplir con estas actividades la poblacin sabe de antemano que slo se necesita tener pocas instalaciones con algunos agentes que pudieran venir del ambiente urbano, debido a que su principal finalidad es descansar y convivir con la naturaleza. Lo que se espera del modelo en el Parque estatal Agua Blanca, es parecido a lo ocurrido en Les Belleville, aprovechando en su mximo esplendor las caractersticas con las que cuenta el Parque para hacerlo ms atractivo, con una variedad de servicios para que los visitantes puedan disfrutarlo y convivir con la naturaleza. Esto apoyado por la mano de obra de la poblacin en la que se encuentra el sitio.
Conclusiones. Con la investigacin se pudo constatar que los visitantes al Parque desean otros servicios o alternativas de entretenimiento, que s les parece atractivo el lugar, adems de encontrar y disfrutar de la naturaleza. Cabe aclarar que los turistas en su gran mayora retornan al sitio en bsqueda de disfrutar de lo natural y en espera de encontrar algo nuevo. El modelo al aplicarse tal cual, colocando los diferentes servicios o necesidades que los turistas demandan, seran generadores de empleos en la comunidad en la que se encuentra enclavado el Parque, todo esto apoyado con pocas instalaciones y mnimos implementos urbanos, procurando que puedan aprovechar al mximo las maravillas que la naturaleza de la zona provee. En cuanto a la generacin de empleos se infiere que si se llevan a cabo cada una de las actividades de las que se mencionan como potencialidades del lugar, se llega a la conclusin de que se generaran empleos para la comunidad por la captacin de servicios, debido a que ellos seran los encargados de ofertarlos en comunicacin con la Secretara de Turismo, para as recibir la capacitacin de cada actividad y su coordinacin. La comunidad y su gente se veran con mayor movimiento de capital, mejor calidad de vida, lo cual va a redundar en mayores beneficios sociales y servicios a la comunidad, como lo ocurrido en Les Belleville. Agradecimientos. Instituto Tecnolgico de Villahermosa Instituto Tecnolgico Superior de Macuspana Bibliografa. [1] Callizo J. (1991). Aproximacin a la geografa del
turismo. Editorial Sntesis, Espaa. Pag.-111.
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NDICE DE AUTORES
Abdala Roberto, 190 Absaln ngel, 81, 128, 130, 139 Aburto Jorge, 217 Acereto Escoffi Pablo, 115 Acevedo P., 214 Acevedo Pabn Paola A., 212 Acevedo Paola A., 215, 347, 352 Acien Gabriel, 13, 23 Acosta Martnez Mara Lilian, 195 Acosta Rodrguez Ismael, 98, 99, 290 Aguilar Ma. Guadalupe, 60 Aguilar Uscanga Blanca Rosa, 234, 247 Aguirre Marn Diana Ivet, 39, 390 Aguirre Vladimir, 248 Aiello Mazzarri Cateryna, 61 Alarcn Alejandro, 36 Alarcn Herrera M.T., 114 Alarcn Len Jheni, 97 Aldana-Avils Cynthia Elizabeth, 186 Alfaro Cuevas Villanueva Ruth, 138, 276 Almaguer Cant Veronica, 143 Almaguer Cant Vernica, 53, 144 Altamirano Segovia Norma Eleana, 42, 92, 343 Alva Medina Erick Octavio, 193 Alvarado Lpez Carlos J., 73 lvarez Vargas Aurelio, 67, 259, 339 lvarez-Hernndez Sergio, 193, 195 Amaya-Chvez Araceli, 74 Amezcua Allieri Miriam Adela, 180, 282 Anaisell Reyes Cesar, 128, 139 Andrade Charity, 173 Angeles Guillermo, 54, 394 Angeles-Torres Roxana, 207, 380 Angulo Escalante Miguel Angel, 238 Angulo Riba Alan de Jess, 42, 92, 343 Araya Blanca, 192 Arce Jenni, 220, 417 Arceo Dzib C., 206 Arceo Gmez M., 206 Arcos Ramos Ral, 246, 412 Arvalo Nio Katiushka, 83, 100, 101, 102, 113, 143, 279, 283 Arias Torres scar, 213 Ariza C., 163 Armendriz Galvn Jess Fidel, 180, 282 Arredondo Bertha, 164 Arredondo Vega Bertha Olivia, 152, 158, 193 202, 203
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Arroyo Figueroa Gabriela, 65, 66 Avendao Juan Ramon, 47 Avendao Morales B., 219, 356 Ayala Vzquez Claudia, 119 Balderas Rentera Isaas, 132 Bambill G., 189 Barahona Prez Luis F., 176 Brcenas Ochoa Evelyn Mariana, 213 Barragn-Huerta B.E., 103 Barrera Garca Anbal, 251 Barrera-Daz Carlos E., 74 Barrientos-Miranda Ana Laura, 229 Basalda Acosta Ruth Corina, 67, 339 Batista A., 161 Bautista Mata Diana Carina, 99 Bayona Tosca Ricardo, 135 Becerril Moctezuma Javier, 40 Ben-Amotz Ami, 14, 18 Bermdez Acosta Jelvys, 41, 251, 386 Bermdez Jos, 157, 172, 196 Bermdez Jos Luis, 196 Bernal Gonzlez Marisela, 121 Bernal Martnez Arod, 65, 66, 87 Bibbins Martnez Martha, 97 Bojaca Vivian, 56 Bravo Vernica, 129
Bravo Vernica, 145 Bremauntz Michavila Pilar, 187 Bressan Clo Rodrigo, 250, 255 Briceo-Domnguez D, 175 Buitrago Johanna, 209, 365 Buitrn G., 91 Buitrn-Morales Pablo, 78 Burgos Crdova David Aarn, 95 Cano Canchola Carmen, 67, 241, 339 Cano Hernndez Maribel, 116 Cano-Rodrguez Claudia T., 74 Caizares Villanueva Rosa Olivia, 187 Crdenas Carmen, 120, 173 Crdenas Gonzlez Juan F., 99, 290 Crdenas Juan F., 98 Cardozo Lelis, 220, 417 Carlos Hernndez S., 226 Carmenate Mayeln, 243 Carrin Gregori, 59 Casais Molina Melissa L., 177, 269 Casas Godoy Leticia, 236 Casas Valdez M., 178 Casquete Gustavo, 164 Castaeda Briones Mara Teresa, 48 Castaeda Chvez Ma del Refugio, 221 Castaeda Roldn Elsa Iracena, 112
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Castaeda-Chvez M. R., 109 Castellanos Gonzlez Mara Elena, 94, 426 Castellanos M. Antonio, 228 Castillo Hernndez Dalia, 97 Castillo Zaragoza Sergio, 216 Castillo-Carvajal L.C., 103 Castrillo Marisol, 239 Castro Barrita Leticia, 237, 249, 360, 422 Castro Rodrguez David Javier, 251, 386 Cedeo Garca Neira Noem, 234 Cedillo Alcantar M. E., 114 Cedillo Ramrez Lilia, 112 Cepero Mara C., 50 Cerino Crdova Felipe de Jess, 151 Cervantes Garca David, 76 Cervantes Gemma, 220, 417 Csar Mara Eugenia, 243 Chacn Lee Tebbie Lin, 159 Chanona J., 126 Chvez Carlos, 129 Chvez Carlos, 145, 248 Chulalaksananukul Warawut, 236 Cinco Castro S., 206 Cisneros de la Cueva Sergio, 141, 295 Clivio Camila, 71 Colmenero Romero Edna Berenice, 87
Concha Guerrero S. I., 140 Contreras Esquivel J.C., 210 Contreras Pool Patricia Y., 176 Coreo Alonso A., 339 Cordero Esquivel Beatriz, 57, 150 Cortaza Hernandez Banihadid, 123 Corts Espinosa Diana V., 130 Corts Martnez Ral, 134, 138, 276, 300 Corts Penagos Consuelo de Jess, 134, 300 Corts-Espinosa Diana V., 81, 128, 139 COSTA Jorge Alberto Vieira, 191 Covarrubias Rubio Yadiralia, 216 Cristiani-Urbina E., 103 Cruz Alejandra, 153 Cruz Coln Mara del Roco, 48 Cruz Gamez Celia, 124 Cruz Lpez Oscar Noe, 132 Cruz Mondragn Carlos, 107, 310 Cruz-Suarez L. Elizabeth, 170, 181 Cuautle Tecanhuey Gerardo, 133 Cuervo Flor de Mara, 54, 394 Cuervo Soto Laura, 43, 104 Cuervo Soto Laura Ins, 104 Cuervo-Lpez F.M., 91 Cuevas Diaz Mara del Carmen, 48
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Cuevas Rodrguez Germn, 65, 66, 85, 87, 136 Cumbal Luis, 248 Cuna-Prez Estela, 229 Curatti L., 166 Dasgupta-Schubert Nabanita, 73 Dvila-Solano Valeria, 77, 78 De La Cruz Sanchez Maria Del Rosario, 123 De la Pea A. L. A., 96 De los Santos Snchez Mara Leticia, 112 De Sisto A., 35 De Zan Arturo, 168 Delgado Villegas Ana Laura, 65 Dezzeo N., 125, 335, 400 Daz Aguilar Dora, 94, 426 Daz Alvaro, 192 Daz Borrego Laugeny, 61 Daz Godnez Gerardo, 97 Daz Godnez Rubn, 97 Diaz I., 90 Daz Jimnez L., 219, 356 Daz M., 126 Daz Ramrez Ildefonso J., 39, 390 Do Nascimento M., 166 Dondiego-Rodrguez Liliana, 79 Duquesne S, 232, 236
Duquesne Sophie, 236 Durn de Baza Carmen, 121, 213 Dussn Garzn Jenny, 56, 71, 110 Erazo Roberto, 129, 145 Escalante E. V., 96 Escalante Espinosa Erika, 39, 82, 3980 Escalante Estrada Violeta Erndira, 55 Escalante Rndiz Diana, 115 Escalante Ricardo, 184, 370 Escandn J. A., 126 Escobar Maria Camila, 110 Esparza Garca Fernando J., 107, 310 Espndola Andrs, 153 Espinoza Claudio, 164 Esponda Santa, 243 Esquivel Ferrio Patricia, 132 Estrada Carrillo Marisa, 119 Evangelista M. Zahaed, 225 Fernndez Linares Luis, 187 FERREIRA Mauren de Chiaro, 191 Ferrera Cerrato Ronald, 36 Flores Gonzlez Mara del Socorro, 101 Flores Gonzlez S., 100, 279 Flores Meja Miguel Angel, 195 Flores Ortega Ronny A., 213 Flores Valle Sergio Odn, 223
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Folch Mallol Jorge, 43, 104 Folch Mallol Jorge Lus, 104 Franco Hernndez Marina Olivia, 40, 42, 44, 89, 92343 Fregoso Aguilar Tomas Alejandro, 223 Freile-Pelegrn Yolanda, 204 Freites M., 35, 69, 211 Fras Hernndez Juan T., 249, 422 Gabiatti Naiana Cristine, 127, 304 Galn Wong Luis, 113 Galarza Tipn Janeth Isabel, 179 Galaviz Villa Itzel, 221 Galvan Castillo Luis Gerardo, 123 Galvn de la Garza A., 244 Gamboa M., 126 Gamero Inda E., 295 Garca A. O. Merced, 228 Garca D., 35 Garca Gmez Rolando Salvador, 213 Garca Ileana, 243 Garca Julimar, 205 Garcia Mendoza Ernesto, 150 Garca Mendoza E., 219, 356 Garca Meza J.Viridiana, 216 Garca Prez Gregorio, 240 Garca Rodrguez Mara Isabel, 247
Garibay Benitez Guillermo, 119 Garibay Orijel Claudio, 187 Garza Garca Andrs Adrian, 101, 279 Garza Garca Y., 210 Garza Gonzlez Ma. Teresa, 53, 132, 144, 151 Garza Gonzlez Ma.Teresa, 143 Garzn Z. M. A., 96 Garzn Zuiga Marco Antonio, 85, 87 Gaytn-Eskildsen J.Y., 244 Genezareth Mayra, 123 Gil Estrada Jos Luis, 233 Gmez Fermn Egle, 59, 205 Gmez Gmez Yolanda, 89 Gmez Alejandro, 268 Gmez Etith, 268 Gmez J., 91 Gmez Liliana, 172 Gmez Luis David, 209, 365 Gmez Patricia I., 152 Gonzlez Castaeda Jaquelina, 237, 249, 360, 422 Gonzlez Duran E., 206 Gonzlez Durn L., 206 Gonzlez Erik, 230 Gonzlez M., 35, 70 Gonzlez Mario Gloria E., 159
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Gonzlez Miranda Ulises, 85 Gonzlez Portela Ricardo E., 60 Gonzlez Roberto, 47 Gonzalez Sanchez Juan Carlos, 246, 412 Gonzlez Santos Judith, 48 Gonzlez-Mendoza Daniel, 76 Gorgorita Soberano Johana del Carmen, 135 Govea-Alonso Dania, 199 Gracida Jorge, 47 Grandes-Blanco Israel, 97 Greene-Yee Adriana, 186 Greque de Morais Michele, 182 Guerra Rivas Graciela, 57, 150 Guevara Miguel, 152 Guilln Garcs Rosa Anglica, 137, 308 Guinand Carol, 120 Gunter Kretschmar T., 226 Gutirrez Castillo Mara Eugenia, 40, 89 Gutirrez Corona J. F., 140 Gutirrez Espinoza L.R., 114 Guzmn A., 155, 156 Guzman Lopez Isela Magali, 135 Hansen Anne M., 137, 308 Heredia Jos Basilio, 238 Hernndez Arvizu Nathalie, 98, 290 Hernndez Carmona G., 210
Hernndez -De Jess M.L., 103 Hernndez Elizabeth, 230 Hernndez Escoto Hctor, 241 Hernandez Gama R., 131, 331 Hernndez Hernndez Mercedes, 135 Hernndez Martnez R., 219, 356 Hernndez Vanesa, 142 Hernndez Ventura Jess, 240 Hernndez Vctor Javier, 60 Hernndez-Carmona G, 175 Hernndez-Hernndez Nelson, 82 Hernndez-Lpez Rafael Evenezer, 252 Hernndez-Olicn Aura, 79 Hernndez-Rodrguez Csar, 79 Hernndez-Zrate G., 109 Herrera Estrella Luis Rafael, 62 Herrera Valencia Virginia A., 176, 177, 198, 269 Hidalgo Vzquez Aura Roxana, 134, 300 Hinojosa-Reyes L., 244 Horta Rangel Francisco Antonio, 241, 259 Houbron E., 37, 49 Ibaez-Salazar Alejandro, 199 Inojosa Y., 35 Iracheta Crdenas Mara Magdalena, 102, 113, 283
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Jaimes W., 214 Jaimes Wilmer A., 215, 352 Jan-Roblero Janet, 79 Jimnez Gonzlez Anglica, 124 Jonte Lorena, 157, 167, 196 Kafarov V., 212, 214, 215, 347, 352 Kauil Gener, 184, 370 Kazandjan Aniuska, 239 Koch Alma, 153, 160 Kunz Airton, 250, 255 Landeros Snchez Cesreo, 221 Lango-Reynoso F., 109 Lara Ana Catalina, 122 Lara Cisneros G., 210 Lemus Prez Mildred, 86 Leon Armando, 170, 181 Len Prez ngel Ral, 94, 426 Lezama Rodrguez Ma. Isabel, 240 Licea Alexei, 190 Lian Montes Adriana, 53, 144 Lizarraga Marcial L., 226 Loera Corral Octavio, 116 Loera-Quezada Maribel M., 171 Lpez Adrin Silvia J., 176 Lpez Chuken Ulrico, 132 Lopez Cobos J., 206
Lopez Felix, 190 Lpez Lpez Alberto, 58 Lopez Mayra, 190 Lpez Meja Violeta Gabriela, 195 Lpez Miranda Javier, 80, 141, 295 Lpez Montoya Cynthia, 57 Lpez Valdivieso Alejandro, 216 Lopez Valentn Maria del Rosario, 246 Lora Mara C, 15, 186 Loyo. Felipe de Jess H., 240 Loza Sandra, 243 Lozano Lucia, 56 Lozano-Ramrez Cruz, 193, 195 Lucero M, 189 Lucho Constantino Carlos Alexander, 124 Luckas B., 161 Luvano Martnez Jos Salvador, 64, 95 Luzardo Milangel, 173 Magallon Sanchez Rosalina, 70, 125, 310 Malaver N., 70, 125, 335, 400 Mannan S., 212, 347 Marn Julio, 61 Marroquin Morales O., 206 Martn del Campo Julia S., 184, 242, 370, 375 Martn Lpez Mariana, 115 Martnez Anaya Claudia, 43
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Martnez D., 214 Martnez Flores Hctor Eduardo, 134, 300 Martnez Gmez Miriam Araceli, 146, 313 Martnez Jurez Victor Manuel, 99, 290 Martnez Jurwez Victor Manuel, 98 Martnez Leon Juliana, 86 Martnez Mnica J, 66 Martnez Palacios C. E., 140 Martnez Prez Rigoberto, 98, 290 Martnez Rivera Silvia, 247 Martnez Tristn Alejandra, 151 Martnez-Ruiz Denise, 229 Marty Alain, 16, 20, 232, 236 Mata Ernesto, 205 Matiz Adriana, 209, 365 Medina Moreno Sergio Alejandro, 124 Medrano Roldn Hiram, 141, 295 Meja Leyda, 183, 185 Meja Lpez Adn, 241, 255 Melo Banda Jos Aarn, 240 Mndez-Hernndez M.A., 244 Mendoza de la Cruz Manuel, 135 Mendoza Hernndez Jos Carlos, 146, 313 Mendoza Mrquez Ana Mara, 213 Mendoza Ortega Adriana Lizeth, 64 Mendoza Prez Jorge Alberto, 223
Mercado Francisco J., 38 Michels Camila, 72, 317 Mnguez-Rodrguez M. M., 109 Moeller-Chvez Gabriela, 77 Molina-Solano Lucila, 78 Moll Benjamin, 170, 181 Monje Ramrez Ignacio, 66 Monroy O., 33, 93 Montaez J.C., 210 Montero A. Gisela, 106 Monterrubio Badillo Ma. Del Carmen, 83, 84 Montes Villafn S., 44 Mora Roberta, 167 Morales Anzures Fernando, 240 Morales Ever, 61, 120, 157, 167, 172, 173, 183, 185, 196 Morales Ibarria Marcia, 149 Morales Marcia, 218, 327 Morales Ramos Lilia H., 143 Moreira Soares Hugo, 127, 255, 317, 72, 304 Moreno Mauricio, 153 Moreno N., 155, 156 Moreno Quiroz Roberto, 48 Mukul Snchez Ismael de Jesus, 115 Murillo Murillo Misael, 133 Naranjo Blanca, 153, 160
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Naranjo Briceo L., 35, 211 Naranjo Leopoldo, 164 Naranjo-Briceo L., 68, 69, 70, 224 Nava Montes de Oca Jos Luis, 241 Navarro Enrique, 54, 394 Navarro-Lamarque Claudia L., 54, 394 Nevarez Morillon Guadalupe Virginia, 136 Nicomedes Melgarejo, 230 Nieto L., 46, 162, 163 Nikolskii Gavrilov Iourii, 221 Nio J., 46 Nez Marisel, 120 Ojeda Camara Sheila, 204 Olalde Portugal Victor, 237, 360 Olascoaga Guerrero Lizzeth, 40 Olgun Eugenia J., 11, 26, 38, 54, 60, 171, 207, 230, 380, 394 Orantes valos Julio Csar, 138, 276 Ordaz Alemn Roberto Carlos, 151 Orozo Maria Camila, 111 Ortega Gutirrez J.A., 114 Ortega-Gonzlez Diana-Katherine, 79 Ortiz Gutirrez Felipe, 97 Ortiz Mrquez J.C.F., 166 Osorio Echavarria Juliana, 45, 321 Osorio J., 321
Osuna Enciso Tomas, 238 Owen Toms, 230 Pacheco-Gonzlez Daniel, 83, 84 Padilla Gasca Edith, 58 Paniagua Chvez Carmen G., 57 Panizza de Len Amalia, 121 Pardo Benito Mauricio, 168 Parra Jos, 164, 165 Patio Rodrigo, 184, 242, 370, 375 Pavn-Meza E. Luca, 252 Pedroza-Rodrguez A.M., 103 Pena-Rodriguez Alberto, 170, 181 Pea Carolina, 142 Perea Vlez Yazmin Stefani, 146, 313 Peredo-Guerrero M.C., 244 Pereira Carlos, 142 Prez Avils Ricardo, 112 Perez Barahona Diana Arlyne, 135 Prez C. H. Jaime, 228 Prez Garca Octavio, 193 Prez Garca Ral Octavio, 158 Prez Hidalgo Luis Felipe, 133 Prez Hoyos Alma, 86 Prez J.E., 91 Prez Mndez Herminia I, 233 Prez Rubio Vernica, 238
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Prez S., 126 Prez Vzquez Arturo, 221 Perna B., 35, 68, 69, 70, 211 Perna Beatriz, 239 Prsico M. M., 189 Prsico Mara Marta, 75 Piamtongkam Rungtiwa, 236 Pimienta A., 46, 155, 156, 162, 163 Pineda Flores Gabriel, 83, 84 Pin Castillo H. A., 140 Poirrier Paola, 192 Poleo Germn, 165 Poma Rodrguez Jos Reinol, 94, 251, 386, 426 Portilla Andrs, 160 Posadas Beltrn Adriana, 180, 282 Prado Tarango D. E., 114 Priego Rangel Samantha, 39, 390 Putzu Torres Ana Paola, 202 Quevedo Balkys, 209, 365 Quintero Daz Juan Carlos, 45, 321 Quiroz Castaeda Rosa Estela, 43 Ramrez C. Laura, 225 Ramrez Castillo Mara Leticia, 133 Ramrez Lpez Citlally, 188 Ramrez Melo M., 44
Ramrez Ramirez Natividad, 67, 241, 259 Ramrez-Prez Teresa, 252 Ramos H. J., 126 Ramos Morales Rafael, 48 Ramos Ponce L.M., 210 Re Denise, 190 Reinol Poma Jos, 41 Restrepo Silvia, 50, 86 Revah Moiseev Sergio, 149 Revah Sergio, 218, 327 Reyes Blanco Mara Teresa, 247 Reyes Milln Nayelka, 59 Reyes V. Damaris, 228 Reyes-Fernndez Zehila, 174, 200, 268 Reyna Lpez G. E., 140 Reynoso-Cereceda Greta, 79 Ricque-Marie Denis, 170, 181 Rincn Jos, 183, 185 Rios Berny Omar, 223 Ros Leal Elvira, 107, 310 Rivera I, 20, 222, 232 Rivera Ivanna, 222 Roa-Morales Gabriela, 74 Robledo Daniel, 204, 242, 375 Robles Martnez Hctor Alfredo, 136 Rodriguez Buenfil Ingrid, 225
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Rodrguez C. A.P., 88, 404 Rodrguez Casasola Ma. Teresa, 107, 310 Rodrguez Castro David J., 41 Rodrguez Dorantes A., 44 Rodrguez Jos L. Pablo, 60 Rodrguez M., 125, 335, 400 Rodrguez Mara Ximena, 209, 365 Rodrguez Nava Celestino Odn, 223 Rodrguez Palacio Mnica Cristina, 12, 158, 172, 193, 194, 195, 202 Rodrguez Sandra, 167 Rodrguez Susa Manuel, 86 Rodriguez Tovar A., 44 Rodrguez Varela J., 219, 356 Rogelio Carrillo Gonzlez, 121 Rojas Avelizapa N.G., 131, 331 Rojas D., 224 Rojas Diego, 164, 165 Rojas Contreras J.A., 295 Rojas Herrera Rafael, 115 Rojas Tortolero D., 35, 211 Rojas Verde Guadalupe, 101, 102, 113, 279, 283 Rojas-Tortolero D., 68, 69 Rojas-Verde G., 100 Romelln Cerino Julio Cesar, 118, 431
Romellon Cerino Mario Jos, 118, 135, 431 Romero Dimas Nancy Paola, 202 Romero Torres Fernando, 119 Rosales Loaiza Nstor, 157, 167, 196 Rosales Nestor, 172 Rosales-Mendoza Sergio, 199 Ruz Flores A.N., 44 Ruiz Leal N., 131 Rustrin E., 37 Rustran E., 49 Rutiaga Quiones Olga Miriam, 80 Ruvalcaba Sil Jos Luis, 36 Saavedra-Villarreal N., 244 Saenz Tavera Isabel del Carmen, 53, 144 Senz Tavera Isabel del Carmen, 151 Salas M., 70, 125, 335, 400 Salazar Carlos, 154 Salazar Villa Edith, 238 Salazar-Gonzlez H. I., 100 Salgado Estrada Berenice, 246, 412 Salinas Pastora, 240 Salvador Jaime Antonio, 146, 313 Snchez Caldern Lenin, 62 Snchez Contreras Angeles, 225 Snchez Galvn Gloria, 38, 60, 380, 394 Snchez Gloria, 230
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Snchez H. G. Rub, 228 Snchez Magaly, 243 Snchez Martnez Diana Rocio, 124 Snchez No, 81, 130 Snchez Rizza L., 166 Snchez Rodrguez I., 178, 404 Snchez Snchez Claudia K., 237, 249, 360, 422 Snchez Viveros Gabriela, 36 Snchez-Galvn Gloria, 54, 207 Snchez-Garca Alma, 78 Snchez-Rodrguez I., 88 Sandoval G, 16, 20, 222, 232, 236 Sandoval Ibarra Patricia, 99 Sandoval Rojas M. E., 49 Sapozhnikov D., 88, 404 Saubidet A., 189 Saubidet Alejandro, 75 Schmidell Netto Willibaldo, 72 Schmidell Willibaldo, 127, 304, 317 Scholz Carola, 154 Schwarz A, 90 Segura-Salazar Juan, 78 Sena DAnna L., 224 Sena L., 35, 70 Sena Lucia, 164
Serafin Muoz Alma Hortensia, 241, 259, 67, 339 Serrano Pablo, 129, 145 Serrano Rosangel, 59 Serrato Gallardo Sarahi Areli, 246 Shumilin E., 88, 404 Silva Muoz Sergio Antonio, 87 Silveti Loeza ngel, 146, 313 Soberon Gloria, 407 Soares Hugo Moreira, 250 Solis Myrna, 116 Sols Oba Aida, 233 Sols Oba Ada, 116 Sols Oba Myrna, 233 Sols Pacheco Josu Raymundo, 234, 247 Sols Rojas Carlos, 101, 279 Sols Soto Aquiles, 141 Sols-Rojas C., 100 Soria-Guerra Ruth Elena, 199 Sosa Segura Maria de la Paz, 238 Soto Cruz Nicols Oscar, 80, 141, 295 Soto Regalado Eduardo, 151 Soto Sierra Juan, 431 Stoytcheva Margarita, 106 Tenjo Dolly, 209, 365 Tern T. S Esbeidy, 228
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Texier A.C., 91 Toledo Cervantes Alma Lilia, 149, 327 Torres Aguilar Rosendo, 133 Torres Alexia, 164, 165 Torres Bustillos Luis, 47, 187, 295 Torres Caldern Jess, 42, 92, 343 Torres Colorado Jess, 39, 390 Torres Martn Jos Eduardo, 223 Torres Ramrez Eduardo, 112 Torres Rubn, 164 Torres Velzquez Diana Sofa, 80 Tosca Castillo Armando, 118, 431 Toscano P. Lydia, 106 Trejo Lpez Beatriz, 195 Trejo-Vela No, 83, 84 Trujillo Alberto, 120 Trevio Quintanilla L. G., 407 Trujillo Tapia Ma. Nieves, 188 Tzel Padilla R., 206 Undurraga Daniel, 192 Urrutia H., 90 Vaca Mier Mabel, 121 Valds-Arias Ricardo A., 74 Valdespino Carolina, 230 Valdez Torres Jos Benigno, 238 Valdez Vazquez I., 219, 356
Valencia Leal Selene Anaid, 138, 276 Valenzuela Nicols, 192 Valle C. S., 96 Van Afferden Manfred, 137, 308 Vasco Mara F., 50 Vsquez Murrieta M.S., 44 Vsquez Perez Rosa, 268 VAZ Bruna da Silva, 191 Vzquez Perales Ricardo, 158, 193, 202 Vega Jurez Germn, 195 Velsquez Yakeln C., 205 Velazquez Pech Luz Maria, 150 Vlez de la Rocha Rosabel, 238 Veloz Nancy, 129 Veloz Nancy, 145 Ventura Jorfran, 173 Vera Alexandra, 61, 120, 173 Vera Fidel, 157 Vergara Galicia Jorge, 119 Vetter W., 161 Viancha Linares Valerie, 86 Vieira Costa Jorge Alberto, 182 Villalobos Narcy, 154 Villanueva Flores Francisca, 62 Villanueva Tiburcio Juan Edson, 234 Villatoro Wilvert, 417
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Villegas Moreno Hctor J., 73 Virgen Flix Marte, 202, 203 Vives Florez Martha J., 50, 122 Vives Martha, 111 Zafra G., 162 Zambrano Gmez Diana Carolina, 158
Zamora Jorge, 230 Zamora-Bustillos Roberto, 76 Zenteno U. S., 126 Zarco Tovar N. G., 331 Zoilabet Duque, 35 Zniga Cristal, 218
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ASISTENTES AL CONGRESO
ABSALN CONSTANTINO ANGEL EDUARDO Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada del IPN. Carretera Estatal Santa Ins TecuexcomacTepetitla, Tepetitla de Lardizabal, Tlaxcala, Mxico CP 90700 aabsalon@ipn.mx ABURTO JORGE Instituto Mexicano del Petrleo Mxico, DF. jaburto@imp.mx ACEVEDO PABN PAOLA ANDREA Universidad Industrial de Santander Colombia paolaacevedo@gmail.com ACIN FERNDEZ GABRIEL Dpto. Ingeniera Qumica, Universidad de Almera Espaa facien@ual.es AGUILAR USCANGA BLANCA ROSA Universidad de Guadalajara Av. Jurez #975. Col. Centro. C.P 44100. Guadalajara, jalisco. Mxico. agublanca@gmail.com ALMAGUER CANT VERNICA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON AV. UNIVERSIDAD S/N , CD. UNIVERSITARIA, SAN NICOLAS DE LOS GARZA, NL, MEX. C.P. 66451, RFC UAN691122MK2 Mxico veroalcan@yahoo.com.mx ALVARADO LPEZ CARLOS JUAN Universidad Michoacana de San Nicolas de Hidalgo Santiago Tapia # 403 colonia centro, Morelia Michoacan Mxico charliealvarado@gmail.com ALVARES CESAR LOPEZ Instituto Tecnolgico de Sonora (ITSON) Mxico roberto_gl14@hotmail.com NGELES ROXANA Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz, 91070 Mxico. Mxico svetlana1416@hotmail.com AREVALO NIO KATIUSHKA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON AV. UNIVERSIDAD S/N, CD. UNIVERSITARIA SAN NICOLAS DE LOS GARZA, N.L. CP 66450 Mxico karevalo01@hotmail.com ARMENDRIZ GALVN JESS FIDEL Instituto Mexicano del Petrleo. Eje Central Lzaro Crdenas Norte 152. Col. San Bartolo Atepehuacn, C.P. 07730 Mxico, DF, Mxico. Mxico jagalvan@imp.mx
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ARREDONDO VEGA BERTHA OLIVIA Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Km 1 a San Juan de la Costa, El Comitn. La Paz, Baja California Sur. kitty04@cibnor.mx Mxico kitty04@cibnor.mx AVENDAO MORALES BERENICE Centro de Investigacin Cientifica y de Educacin Superior de Ensenada, Baja California RFC: CIC7309189 G8 Direccin: Carretera Ensenada Tijuana, Nmero 3918. Zona Playitas. Ensenada, B.C. C.P. 22860 Mxico kuikiri@gmail.com BALDESSARI ALICIA Laboratorio de Biocatlisis. Depto. Qumica Orgnica Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires Ciudad Universitaria. Pabelln 2. Piso 3. Buenos Aires. C1428EGA. Argentina Tel.: 54 11 4576 3300 ext. 262 Fax: 54 11 4576 3385 Argentina alib@qo.fcen.uba.ar BASALDA ACOSTA RUTH CORINA Division de Ingenierias Universidad de Guanajuato Mxico cori_quim@hotmail.com BATISTA CEBALLOS ARIADNA Universidad Autonoma de Chiriqu, Centro de Investigaciones de Productos Naturales y Biotecnologa (CIPNABIOT), 0427 David, Panam Panama aribat20@hotmail.com
BECERRIL MOCTEZUMA JAVIER UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA DEL I.P.N.- AV.ACUEDUCTO S/N COL. BARRIO DE LA LAGUNA TICOMAN C.P.07340 MX. D.F. RFC.- IPN 811229-H26 Mxico javoc70@hotmail.com BEN-AMOTZ AMI The National Institute of Oceanography Nature Beta Technologies Ltd & Seambiotic Ltd, Israel ami@benamotz.com BERMDEZ ACOSTA JELVYS Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos (CEAC). E-mail: jelvys@gestion.ceac.cu, reinol@gestion.ceac.cu, david@gestion.ceac.cu Cuba jelvys@gestion.ceac.cu BOJACA BAUTISTA VIVIAN ANDREA Universidad de los Andes Colombia va.bojaca23@uniandes.edu.co BRAVO BASANTES VERONICA DE LAS MERCEDES CESTTA Direccion: Panamericana Sur Km 1 Riobamba- Ecuador Telefono: 032998232 Ecuador celeste_veronica@hotmail.com CABREJO LICETH Microbiologia Industrial Pontificia Universidad Javeriana Colombia Colombia liz_alejandra26@yahoo.com
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CAMARENA B. CRISTOBAL BIOTECNOLOGIA MEXICANA DE MICROALGAS, S.A.DE C.V. NIOS HEROES 530 TLAJOMULCO DE ZUIGA, JAL Mxico ccamarena@itesm.mx CAMILA OROZCO MARIA Universidad de los Andes Colombia mc.orozco162@uniandes.edu.co CANO HERNNDEZ MARIBEL SECRETARIA DE EDUCACIN PBLICA INSTITUTO TECNOLGICO DEL ALTIPLANO DE TLAXCALA KM. 7.5 CARRETERA FEDERAL SAN MARTN- TLAXCALA SAN DIEGO XOCOYUCAN, TLAXCALA C.P. 90122 RFC:SEP 210905778 Mxico maribel_cano@hotmail.com CARLOS ALBERTO LIM VEGA Instituto Tecnolgico de Sonora (ITSON) Mxico roberto_gl14@hotmail.com CASAIS MOLINA MELISSA LESSEN Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn, A.C. Calle 43 No. 130, Col. Chuburn de Hidalgo, CP. 97200 Mrida, Yucatn, Mxico. Tel. (999) 981-3923 meles85@hotmail.com CASTILLO ERIKA SARTORIUS DE MEXICO S.A. DE C.V. CIRCUITO CIRCUNVALACIN PTE # 149 CIUDAD SATELITE, NAUCALPAN EDOMEX. CP 53100 Mxico erika.castillo@sartomex.com.mx
CASTRO BARRITA LETICIA Universidad de Guanajuato Lazcurain de Retana No. 5 Guanajuato, Guanajuato Mxico letcasbar@yahoo.com.mx CASTRO RODRGUEZ DAVID JAVIER Centro de Estudios Ambientales. Cienfuegos Cuba david@gestion.ceac.cu CERVANTES GEMMA IPN, Instituto Politcnico Nacional UPIBI, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa Av. Acueducto s/n. Barrio La Laguna Ticomn. Del. Gustavo A. Madero 07340 Mxico DF Mxico gemma.cervantes@gmail.com CHAVEZ GOMEZ CARLOS ANDRES CESTTA Panamericana Sur Km 1 RiobambaEcuador Telefono: 032998232 Ecuador carluchoec@hotmail.com CISNEROS DE LA CUEVA SERGIO Secretaria de Educacion Publica BLVD.Felipe Pescador 1830 ote.Col. Nueva Vizcaya C.P. 34080 Durango, Dgo. Mxico efs_76@yahoo.com.mx CLIVIO HERNANDEZ CAMILA CIMIC-Universidad de los Andes Colombia c-clivio@uniandes.edu.co
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CONCHA GUERRERO SANDRA IXMUCAM Universidad de Guanajuato, Lascuran de Retana no. 5 Col. Centro; CP. 36000; Guanajuato, Mxico sandra_concha17@hotmail.com CONTRERAS PEREZ MAYRA GENEZARETH INDUSTRIAS CHARRICOS S.A. de C.V. Calle 6 No. 124, Col. Espejo 1 Villahermosa, Tabasco, Mxico C.P. 86108 Mxico mjrcerino@hotmail.com,mayrita09@live.com.m x CONTRERAS POOL PATRICIA YOLANDA CENTRO DE INVESTIGACIN CIENTFICA DE YUCATN A.C CALLE 43 No. 130 Col. CHUBURN DE HIDALGO C.P 97200 TEL: (999)9813923; FAX (999) 9813900 Mxico pati_contreraspool@hotmail.com CORDERO BEATRIZ Centro de Investigacin Cientifica y de Educacin Superior de Ensenada (CICESE) Mxico bcordero@cicese.mx CORTAZA HERNANDEZ BANIHADID INDUSTRIAS CHARRICOS S.A. de C.V. Calle 6 No. 124, Col. Espejo 1 Villahermosa, Tabasco, Mxico C.P. 86108 Mxico mjrcerino@hotmail.com, mayrita09@live.com.mx
CORTS ESPINOSA DIANA VERNICA Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada del IPN. Carretera Estatal Santa Ins TecuexcomacTepetitla, Tepetitla de Lardizabal, Tlaxcala, Mxico CP 90700 Tel: (55)57296000 (248)4870767 Mxico dcortes@ipn.mx CORTS MARTNEZ RAL Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo Santiago Tapia 403. Centro. C.P. 58000. Morelia, Michoacn. Mxico raulcortesmtz@gmail.com COVARRUBIAS RUBIO YADIRALIA Universidad Autnoma de San Luis Potos lvaro Obregn 64, Colonia Centro, San Luis Potos 78000 SLP, Mxico Mxico jvgm@uaslp.mx CRUZ COLN MARA DEL ROCO Universidad Veracruzana. Lomas del Estadio S/N, Colonia Zona Universitaria. Cdigo Postal 91000. Xalapa, Veracruz. Mxico ccmr@correo.azc.uam.mx CRUZ MONDRAGN CARLOS Centro de Investigacin y Estudios Avanzados del Instituto Politecnico Nacional # 2508, Col. San Pedro Zacatenco, DeGustavo A. Madero cp. 07360 RFC CIE6010281U2 Mxico ccruz@cinvestav.mx
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CUEVAS-VILLANUEVA RUTH ALFARO Universidad Michoacana de San Nicols de Hidalgo Santiago Tapia 403. Col. Centro. C.P. 58000. Morelia, Michoacn. Mxico racv11@gmail.com CUNA PREZ ESTELA NOMBRE: UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO DIRECCIN: CUIDAD UNIVERSITARIA, DELEGACIN COYOACN. C.P.04510, MXICO, D.F. Mxico estela_cuna@hotmail.com CURATTI LEONARDO Fundacion para Investigaciones Biologicas Aplicadas Argentina lcuratti@fiba.org.ar DAVILA SOLANO VALERIA Universidad Politcnica del estado de Morelos Blvd. Cuahunahuac N .566, Col. Lomas del Texcal. Jiutepec, Morelos. CP62550. Mxico Mxico vdavila@upemor.edu.mx DE LOS SANTOS SNCHEZ MARA LETICIA Universidad Autnoma de Puebla Direccin: 4 Sur 104, Ciudad Universitaria, Colonia San Manuel, Puebla Pue. C.P. : 72000 Mxico ing_biot_lety_santos@hotmail.com DELGADO VILLEGAS ANA LAURA Universidad de Guanajuato Lascurain de Retana No. 5 Zona Centro, Guanajuato. Gto. Mxico l_ove_deva@hotmail.com
DAZ ALVARO Pontificia Universidad Catlica de Valparaso Chile alvaro.diaz@ucv.cl DIAZ ISABEL Laboratorio de Biopelculas y Microbiologa Ambiental. Centro de Biotecnologa. Universidad de Concepcin Chile isabel.diaz.b@gmail.com DAZ RAMREZ ADELITA Universidad Jurez Autnoma de Tabasco AVENIDA UNIVERSIDAD S/N, ZONA DE LA CULTURA COL. MAGISTERIAL, C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO. Mxico ildefonso.diaz@dacbiol.ujat.mx DAZ RAMREZ ILDEFONSO JESS Universidad Jurez Autnoma de Tabasco AVENIDA UNIVERSIDAD S/N, ZONA DE LA CULTURA. COL. MAGISTERIAL, C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO. Mxico ildefonso.diaz@dacbiol.ujat.mx DUSSAN GARZON JENNY Centro de Investigaciones MicrobiolgicasCIMIC-Universidad de los Andes Colombia jdussan@uniandes.edu.co ELIZONDO GONZLEZ REGINA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON AV. UNIVERSIDAD S/N, CD UNIVERSITARIA SAN NICOLAS DE LOS GARZA CP. 66451 Mxico reginaeg@hotmail.com
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ESCALANTE ESPINOSA ERIKA Universidad Jurez Autnoma de Tabasco AVENIDA UNIVERSIDAD S/N, ZONA DE LA CULTURA COL. MAGISTERIAL, C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO. Mxico erika.escalante@dacbiol.ujat.mx ESCALANTE ESTRADA VIOLETA ERNDIRA Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua Paseo Cuauhnhuac 8532, Colonia Progreso, Jiutepec, Morelos. C.P. 62550 Mxico vescalan@tlaloc.imta.mx ESCALANTE RNDIZ DIANA YAMILY Universidad Autnoma de Yucatn. Calle 60 No. 491-A x 57. Centro. Mxico derendiz@uady.mx ESTRADA CARRILLO MARISA DEL ROSARIO Universidad Politcnica del estado de Morelos Blvd. Cuahunahuac N 566, Col. Lomas del texcal. Jiutepecm Morelos. CP: 62550. Mxico Mxico mecarrillo@upemor.edu.mx FERNNDEZ LINARES LUIS CARLOS INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA AV. ACUEDUCTO S/N COL. BARRIO DE LA LAGUNA TICOMAN GUSTAVO A. MADERO, MEXICO D.F. C.P., 07340 TEL. 7296000 Mxico lfernandezl@ipn.mx
FOLCH JORGE Facultad de Ciencias - Universidad Autnoma del estado de Morelos. Av. Universidad No. 1001 colonia chamilpa CP 62209 Cuernavaca Morelos Mxico. Mxico jordifo@gmail.com GABIATTI NAIANA Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC) Laboratrio de Tratamento Biolgico de Efluentes (LTBR) Campus Universitrio, C.P. 476 - CEP 88040900 - Florianpolis-SC Telefone: (48) 3721 9448 Brasil naianagabiatti@yahoo.com.br GABRIELA SHEILA NOMBRE DE LA INSTITUCIN: CENTRO DE INVESTIGACIN Y DE ESTUDIOS AVANZADOS DEL INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL DIRECCIN: CARR. ANTIGUA A PROGRESO KM.6 C.P. 97310, MRIDA, YUCATN Mxico sheila_ojca@hotmail.com GALAVIZ VILLA ITZEL INSTITUTO TECNOLGICO DE BOCA DEL RO. KM.12 CARR. VERACRUZ-CORDOBA. C.P.94290. BOCA DEL RO, VER. Mxico itzelgalaviz@gmail.com GALVAN CASTILLO GERARDO Instituto Tecnolgico de Villahermosa Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico mjrcerino@hotmail.com
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GALVAN DE LA GARZA ALEJANDRA Universidad Autonoma de Nuevo Leon Facultad de Ciencias Quimicas Ave.Universidad S/N Cd. universitaria San Nicolas de los Garza,NL. CP.66451 Mxico alexa89.g@gmail.com GARCA GMEZ ROLANDO SALVADOR Universidad Nacional Autnoma de Mxico Facultad de QUmica Ciudad Universitaria C.P. 04510 Del. Coyoacn Mxico, D.F. Mxico rolandoga2000_a@yahoo.com GARCA RODRGUEZ GABRIELA (SEP)-INSTITUTO TECNOLGICO DE MINATITLN BLVD. INSTITUTOS TECNOLGICOS S/N COL. BUENA VISTA NORTE C.P. 96848 MINATITLN, VER. TEL. (922) 222 4345 Mxico gabygarcia_r@hotmail.com GARCIA SERRANO JOAN UNIVERSITAT POLITCNICA DE CATALUNYA C/JORDI GIRONA, 1-3 08034 BARCELONA Espaa joan.garcia@upc.edu GARZA GONZLEZ MARA TERESA Universidad autnima de Nuevo Len. Facultad de Ciencias Qumicas. Ave. Universidad s/n. Cd Universitaria. San Nicols de los Garza Nuevo Len. CP 66451 Mxico tgarza@fcq.uanl.mx
GAYTAN ESKILDSEN JUDITH YAELI Universidad Autonoma de Nuevo Leon Facultad de Ciencias Quimicas Ave. Universidad S/N Cd. Universitaria San Nicolas de los Garza ,NL. CP RFC:66451UAN691126MK2 Mxico nenaeskildsen87@hotmail.com GIL ESTRADA JOS LUIS Universidad Autonma Metropolitana Prol. Canal de Miramontes No. 3855 Col Exhacienda de San Juan de Dios. C. P. 14387 Delegacin Tlalpan, Mxico, D.F. Mxico atzinnicole@yahoo.com GMEZ CRUZ RODOLFO UNIVERSIDAD JUREZ AUTNOMA DE TABASCO, AVENIDA UNIVERSIDAD S/N COL. MAGISTERIAL C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO Mxico rgomezcruz@hotmail.com GMEZ FERMN EGLE rea de Ecologia y Ambiente, Instituto de Investigaciones Cientficas, Ncleo Nueva Esparta,U. D. O. Boca de Ro, Venezuela Venezuela eglee.gomez@ne.udo.edu.ve GONZLEZ GLORIA Universidad de la Sabana. Nit . 860075558-1 Direccin: Campus Universitario Puente del Comun, KM 21 Autopista Norte de Bogot. Cha, Cundinamarca. Telefono (571) 8615555 Ext. 2523, 2557. Fax 8615555 Ext, 2515 Colombia doctorado.biociencias@unisabana.edu.co
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GONZLEZ GMEZ MARISELA BERNAL Universidad Nacional Autnoma de Mxico Facultad de QUmica Ciudad Universitaria C.P. 04510 Del. Coyoacn Mxico, D.F. Mxico marisela_bernal2000@yahoo.com.mx GONZALEZ MARTINEZ ANGELICA angelik_1703@hotmail.com Colombia angelik_1703@hotmail.com GONZLEZ PORTELA RICARDO ERIK Red de Manejo Biotecnolgico de Recursos. Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz 91070 Mxico Mxico erik.gonzalez@inecol.edu.mx GONZALEZ RUEDA VIVIANA Facultad de Ciencias, Departamento de Microbiologa Pontificia Universidad Javeriana, Cra. 7 No. 40 83, Bogot, Colombia vivianagonzalez90@hotmail.com GREQUE DE MORAIS MICHELE Laboratory of Biochemical Engineering College of Chemistry and Food Engineering Federal University of Rio Grande (FURG) P. O. Box 474 Rio Grande-RS, 96201900, Brazil. Brasil michele.morais@pq.cnpq.br GUERRA RIVAS GRACIELA UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL ESTADO DE BAJA CALIFORNIA AV. ALVARO OBREGON Y JULIAN CARRILLO S/N COL NUEVA CP 21100 MEXICALI, BAJA CALIFORNIA Mxico gguerra@uabc.edu.mx
GUERRERO LUGO JOSE ROBERTO Instituto Tecnolgico de Sonora (ITSON) Mxico roberto_gl14@hotmail.com GUEVARA ACOSTA MIGUEL NGEL Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas Departamento de Botnica Universidad de Concepcin Casilla 160-C, Concepcin, Chile Venezuela miguevara2003@yahoo.es GUEVARA VARELA SAUL SARTORIUS DE MEXICO S.A. DE C.V. CIRCUITO CIRCUNVALACIN PONIENTE # 149 CIUDAD SATELITE, NAUCALPAN ESTADO DE MEXICO. CP 53100 Mxico saul.guevara@sartomex.com GUILLEN GARCS ANGLICA Universidad Politcnica del estado de Morelos Blvd. Cuahunahuac N .566, Col. Lomas del Texcal. Jiutepec, Morelos. CP62550. Mxico UPE07070482A Mxico aguillen@upemor.edu.mx GUILLEN GARCS ROSA ANGLICA UniversidadPolitcnica del Estado de Morelos, 2Instituto Mexicano de Tecnologa del Agua Boulevard Cuauhnhuac #566, Col. Lomas del Texcal, Jiutepec, Morelos. CP 62550 / Tels/fax (777) 229 35 33 Mxico aguillen@upemor.edu.mx
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GUZMAN LOPEZ ISELA MAGALI INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico MJRCERINO@HOTMAIL.COM, CHICAPODEROSA_A@HOTMAIL.COM GUZMAN NOZ YOLANDA ALICIA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHE, FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICOBIOLGICAS Mxico koala.yoal@gmail.com HERNANDEZ HERNANDEZ MERCEDES INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico MJRCERINO@HOTMAIL.COM, CHICAPODEROSA_A@HOTMAIL.COM HERNNDEZ TERN FERNANDO UNIVERSIDAD AUTNOMA DE COAHUILA BLVD. VENUSTIANO CARRANZA ESQUINA GONZLEZ LOBO COL. REPBLICA ORIENTE C. P. 25280 SALTILLO, COAHUILA MXICO Mxico teranfernando@hotmail.com HORTA RANGEL FRANCISCO ANTONIO UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO LASCURAIN DE RETANA NO 5 CENTRO 36000 GUANAJUATO, GTO Mxico sermuah@quijote.ugto.mx, sermuah@yahoo.com,maldiaas@hotmail.com
HUAZANO ALICIA CENTRO DE INVESTIGACION Y DE ESTUDIOS AVANZADOS DEL INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL. Kilometro 9.6 Libramiento Norte Carretera Irapuato-Len. C.P. 36821. Irapuato Guanajuato Mxico ahuazano@ira.cinvestav.mx ISABEL LEZAMA MARIA UNIVERSIDAD DEL ISTMO CIUDAD UNIVERSITARIA S/N BARRIO SANTA CRUZ CUARTA SECCIN SANTO DOMINGO TEHUANTEPEC, OAXACA C.P. 70760 Mxico i.lezama@hotmail.com JAIME ANTONIO SALVADOR Universidad Autonoma de Puebla 4 Sur 104 Colonia Centro Puebla, Puebla. C.P. 72000 Mxico jcharlymh@yahoo.com JONTE LORENA Supervisor de Microbiologa Laboratorio Central Carabobo Gcia. Captacin Tratamiento y Mantenimiento C.A. Hidrologica del Centro Venezuela lorenajonte@gmail.com LOPEZ DE LA TORRE MAYRA FABIOLA CICESE 3918 carretera Ensenada-Tijuana Ensenada Baja California. Mxico mayralopez1502@hotmail.com
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LOPEZ MONTOYA CYNTHIA UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL ESTADO DE BAJA CALIFORNIA AV. ALVARO OBREGON Y JULIAN CARRILLO S/N COL NUEVA CP 21100 MEXICALI, BAJA CALIFORNIA Mxico cynthiacf@hotmail.com LOPEZ SUAREZ RAMON ANTONIO Biotecnologia y Medio Ambiente de Colombia SAS Carrera 80 # 66-36, Bogota Colombia Tel: 4307773 Colombia aingenieros@ymail.com LORA VILCHIS MARA CONCEPCIN Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR), Mxico Mxico cony04@cibnor.mx MAGALLON SANCHEZ ROSALINA Centro de Investigacion y de Estudios Avanzados del Instituto Politcnico Nacional Av. Instituto Politcnico Nacional #2508, Col. San Pedro Zacatenco, Delegacin Gustavo A. Madero CP. 07360 Mxico kurtbikev@hotmail.com MALAVER NORA Instituto de Zoologa y Ecologa Tropical (IZET), Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela (UCV), Caracas, Venezuela. Venezuela nora.malaver@gmail.com MANZANAREZ QUIN CARMEN GUADALUPE Instituto Tecnolgico de Sonora (ITSON) Mxico roberto_gl14@hotmail.com
MARIN PONCE ANA KAREN INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 35302-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico mjrcerino@hotmail.com MARTN DEL CAMPO JULIA S. NOMBRE DE LA INSTITUCIN: CENTRO DE INVESTIGACIN Y DE ESTUDIOS AVANZADOS DEL INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL DIRECCIN: CARR. ANTIGUA A PROGRESO KM.6 C.P. 97310, MRIDA, YUCATN Mxico jsanchezm@mda.cinvestav.mx MARTN LPEZ MARIANA Universidad Autnoma de Yucatn. C. 60 No. 491-A x 57 Centro. RFC: UAY8409012S1 Mxico mlopezmariana@gmail.com MARTINEZ BARRAGAN MARIA DEL PILAR Centro de Investigacin Cientifica y de Educacin Superior de Ensenada, Baja California Direccin: Carretera Ensenada Tijuana, Nmero 3918. Zona Playitas. Ensenada, B.C. C.P. 22860 Mxico valdez_idania@yahoo.com MARTINEZ NUEZ CINTHIA LIZETH INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 35302-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico mjrcerino@hotmail.com
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MARTNEZ RAMREZ MONICA JACQUELINA Universidad de Guanajuato Lascurain de Retana No. 5 Zona Centro, Guanajuato, Gto. Mxico monika7704@gmail.com MATIZ VILLAMIL ADRIANA Facultad de Ciencias, Departamento de Microbiologa Pontificia Universidad Javeriana, Cra. 7 No. 40 83, Bogot, Colombia amatiz@javeriana.edu.co. Tel: 3208320 ext: 4020, 4030. Colombia amatiz@javeriana.edu.co MAYO DE LA CRUZ FRANCISCO INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico mjrcerino@hotmail.com MEJIA LOPEZ ADAN UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO LASCURAIN DE RETANA NO 5 CENTRO 36000 GUANAJUATO, GTO Mxico sermuah@quijote.ugto.mx, sermuah@yahoo.com,maldiaas@hotmail.com MNDEZ HERNNDEZ MARGARITA ARACELY Universidad Autonoma de Nuevo Leon Facultad de Ciencias Qumicas Ave. Universidad S/N Cd. Universitaria, San Nicols de los Garza, N.L. Mxico maggi_mh@live.com.mx
MENDOZA GUERRERO ANIL Instituto de Ecologa, A.C. Carretera Antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz 91070 Mxico Mxico cazadora-de-almas@hotmail.com MOLINA ARCE CARLOS JOS UNIVERSIDAD AUTONOMA DE YUCATAN CALLE 60 491-A X 57 CENTRO Mxico crls_molina@hotmail.com MOLINA AULESTIA DENISSE TATIANA ESPE, Quito, Ecuador Ecuador molinadenisse_19@hotmail.com MONROY HERMOSILLO OSCAR Universidad Autnoma Metropolitana Iztapalapa Av. San Rafael Atlixco 186, Col. Vicentina C.P. 09340 Delegacin Izapalapa, Mxico, D.F. TELFONO 58046408 EXTENSIN 5804 Mxico monroy@xanum.uam.mx MONTES GARCIA LUIS ALFONSO INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA. Carretera Villahermosa_Frontera km 3.5 Cd. Industrial. Villahermosa, Tabasco C.P. 86010. Mxico mjrcerino@hotmail.com, luisponcha@hotmail.com MORALES AVENDAO EVER Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias. Universidad del Venezuela evermster@gmail.com
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MORALES MARCIA Universidad Autnoma Metropolitana Unidad Cuajimalpa Mxico mmorales@correo.cua.uam.mx MUOZ TORRE RAUL Ral Muoz Departamento de Ingeniera Qumica y Tecnologa del Medio Ambiente Escuela de Ingenierias Industriales. Universidad de Valladolid Valladolid C/ Dr. Mergelina s/n CP 47005 Espaa mutora@iq.uva.es NARANJO BRICEO LEOPOLDO rea Energa y Ambiente Fundacin IDEA Telfono: +58 212 9035092 Fax: +58 212 9035093 Venezuela lnaranjo@idea.gob.v NAVARRO LAMARQUE CLAUDIA LORENA Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya,Xalapa, Veracruz, 91070. Mxico Mxico claudianavarro17@hotmail.com NIEHUS CHARLES XOCHITL DEL ROCO Unidad de Biotecnologa Industrial. Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco (CIATEJ), Av. Normalistas 800, 44270 Guadalajara, Jal. Mxico Mxico xniehus@gmail.com NIETO ESTEVEZ LUDDY PATRICIA Laboratorio de Biotecnologa - Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A. Colombia luddy.nieto@ecopetrol.com.co
NEZ MARISEL Programa de Ingeniera y Tecnologa, Universidad Nacional Experimental Rafael Mara Baralt, Ciudad Ojeda, Zulia, Venezuela (E-mail: marisel2506@gmail.com) Venezuela marisel2506@gmail.com OLGUN EUGENIA INSTITUTO DE ECOLOGA, A.C. Carretera Antigua a Coatepec #351 El Haya, Xalapa, Ver. 91070 Mxico. Mxico eugenia.olguin@inecol.edu.mx OSORIO ECHAVARRIA JULIANA Universidad de Antioquia Colombia juliana.osorio.echavarria@gmail.com PADILLA GASCA EDITH Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco, A. C. Av. Normalistas 800, Colinas de la Normal, CP 44270, Guadalajara, Jalisco, Mxico Mxico edpaga2007@hotmail.com PATIO RODRIGO NOMBRE DE LA INSTITUCIN: Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados del Instituto Politcnico Nacional DIRECCIN: Carr. Antigua a Progreso Km. 6 C.P.97310, Mrida, Yucatn Mxico rtarkus@mda.cinvestav.mx PAVN MEZA ELVIA LUCA NOMBRE: UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO DIRECCIN: CUIDAD UNIVERSITARIA, DELEGACIN COYOACN. C.P. 04510, MXICO, D.F. Mxico luciapav@hotmail.com
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PEA RODRGUEZ ALBERTO UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NUEVO LEON AV. UNIVERSIDAD S/N, CD UNIVERSITARIA SAN NICOLAS DE LOS GARZA CP. 66451 Mxico apr_22@hotmail.com PEREDO GUERRERO MARIA DEL CARMEN Departamento de Microbiologa, Facultad de Ciencias Qumicas, UANL. Mxico carmen_7488@hotmail.com PREZ ALFARO JESS EMMANUEL Universidad Autonoma Metropolitana. Prolongacin canal de miramontes No. 3855, Col. Exhacienda de San Juan de Dios, C.P. 14387 Delegacin Tlalpan, Mex. D.F. Mxico jemalfaro@gmail.com PEREZ BARAHONA DIANA ARLYNE INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico MJRCERINO@HOTMAIL.COM, CHICAPODEROSA_A@HOTMAIL.COM PEREZ HOYOS ALMA Centro de Investigaciones en Ingeniera Ambiental, departamento de Ingeniera Civil y Ambiental. Universidad de los Andes. Bogot, Colombia Colombia alm-pere@uniandes.edu.co PIMIENTA ASTRID-LORELY Laboratorio de Biotecnologa - Instituto Colombiano del Petrleo ICP de Ecopetrol S.A. Colombia Astrid.Pimienta@ecopetrol.com.co
POMA RODRGUEZ JOS REINOL Centro de Estudios Ambientales de Cienfuegos (CEAC). Cuba reinol@gestion.ceac.cu POSADAS BELTRN ADRIANA Instituto Mexicano del Petrleo. Eje Central Lzaro Crdenas Norte 152. Col. San Bartolo Atepehuacn, C.P. 07730 Mxico, DF, Mxico. Mxico aposadas@imp.mx RAMREZ FRAS ADELA Universidad Jurez Autnoma de Tabasco AVENIDA UNIVERSIDAD S/N, ZONA DE LA CULTURA COL. MAGISTERIAL, C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO. Mxico ildefonso.diaz@dacbiol.ujat.mx RAMREZ GUILLERMO Pionero Software, S.A de C.V. Guadalajara, Jal. Mxico gramirez_mexico@hotmail.com RAMREZ PREZ TERESA NOMBRE: UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO DIRECCIN: CUIDAD UNIVERSITARIA, DELEGACIN COYOACN. C.P.04510, MXICO, D.F. Mxico teresar@servidor.unam.mx
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RAMOS PONCE LUZ MARIA DEL SOCORRO UNIVERSIDAD AUTONOMA DE COAHUILA BLVD. VENUSTIANO CARRANZA Y GONZALEZ LOBO. COLONIA REPUBLICA. SALTILLO, COAHUILA. Mxico luz.ramos@uadec.edu.mx REYES CACERES HIRAM INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 35302-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico mjrcerino@hotmail.com REYES FERNNDEZ ZEHILA ELVIRA UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL CARMEN DIRECCION: CALLE 56 No.4 ESQ AV. CONCORDIA COL. BENITO JUAREZ C.P. 24180 CD. DEL CARMEN, CAMPECHE Mxico zreyes@pampano.unacar.mx REYNA LPEZ GEORGINA ELENA Universidad de Guanajuato, Lascuran de REtana no. 5 Col. Centro; C.P. 36000; Guanajuato. Gto. Mxico reinalg@quijote.ugto.mx RIINCN JOS JOS DEPARTAMENTO DE BIOLOGA FACULTAD EXPERIMENTAL DE CIENCIAS DIVISIN DE ESTUDIOS PARA GRADUADOS Venezuela jerincon04@gmail.com
RIVERA CORONA JOSE LUIS Universidad Politcnica del Estado de Morelos Blvd. Cuahunahuac N 566, Col. Lomas del Texcal. Jiutepec, Morelos. CP. 62550. Mxico. Mxico jrcorona@upemor.edu.mx RIVERA ESPINOSA IVANNA YVONNE CENTRO DE INVESTIGACIN Y ASISTENCIA EN TECNOLOGA Y DISEO DEL ESTADO DE JALISCO (CIATEJ). Av. Normalistas 800, 44270 Guadalajara, Jal. MXICO Mxico ivannaiq@yahoo.com.mx RODRIGO BRESSAN CLO Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina - Brasil Brasil cleorb@gmail.com RODRIGUEZ CASASOLA MA. TERESA Centro de Investigacion y de Estudios Avanzados del Instituto Politcnico Nacional Av. Instituto Politcnico Nacional #2508, Col. San Pedro Zacatenco, Delegacin Gustavo A. Madero CP. 07360 Mxico casasola@cinvestav.mx RODRGUEZ PALACIO MNICA CRISTINA Laboratorio de Ficologa Aplicada AS-202 Universidad Autnoma MetropolitanaIztapalapa tel: 58044739 fax: 58044737 Mxico mony@xanum.uam.mx
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ROJAS AVELIZAPA NORMA GABRIELA INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL CERRO BLANCO 141 COLONIA COLINAS DEL CIMATARIO, CP 76090 QUERETARO Mxico dra.normara@hotmail.com ROMELLON CERINO JULIO CESAR INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR DE MACUSPANA AV. TECNOLOGICO S/N LERDO DE TEJADA 1 SECCION MACUSPANA, TABASCO C.P. 86719 Mxico mjrcerino@hotmail.com, jcromellon@hotmail.com ROMELLON CERINO MARIO JOSE INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA CARRETERA VILLAHERMOSA-FRONTERA KM 3.5 CD. INDUSTRIAL C.P. 86010 Mxico mjrcerino@hotmail.com ROSALES LOAIZA NESTOR Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa, Facultad Experimental de Ciencias, Universidad del Zulia. Maracaibo, Venezuela Venezuela nestoralgae@gmail.com ROSALES MENDOZA SERGIO Universidad Autonoma de San Luis Potosi Alvaro Obregon #64, Zona Centro, CP 78000 San Luis Potosi, SLP, Mexico Mxico rosales.s@fcq.uaslp.mx
SABIDO RUIZ ERICK SARTORIUS DE MEXICO S.A. DE C.V. CIRCUITO CIRCUNVALACIN PONIENTE # 149 CIUDAD SATELITE, NAUCALPAN ESTADO DE MEXICO. CP 53100 Mxico erick.sabido@sartomex.com.mx SALAS MILAGROS Escuela de Biologa Facultad de Ciencias Universidad Central de Venezuela (UCV) Caracas, Venezuela. Venezuela milasalas87@gmail.com SALGADO ESTRADA BERENICE Vanessa Salgado Estrada Hueltaco N int 2 Col. San Andres Tetepilco 16 C.P. 09440 Iztapalapa Mxico D.F. Mxico biosaesbe@live.com.mx SANCHEZ CONTRERAS MARIA DE LOS ANGELES Centro de Investigacin y Asistencia en Tecnologa y Diseo del Estado de Jalisco (CIATEJ) Unidad Sureste, Merida, Yucatan Mxico msanchez@ciatej.net.mx SNCHEZ GLORIA INSTITUTO DE ECOLOGA, A.C. Carretera Antigua a Coatepec #351 El Haya, Xalapa, Ver. 91070 Mxico. Mxico gloria.sanchez@inecol.edu.mx
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SNCHEZ GONZLEZ NO Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada del IPN. Carretera Estatal Santa Ins TecuexcomacTepetitla, Tepetitla de Lardizabal, Tlaxcala, Mxico CP 90700 Tel: (55)57296000 (248)4870766 Mxico noesy74@hotmail.com SNCHEZ RODRIGUEZ IGNACIO COFAA Tres Guerras #27 Esq/c M. Tolsa, Col Centro, Mexico, D.F., CP 06040, Mxico isrnacho@hotmail.com SANCHEZ SALAZAR HUGO ENRIQUE INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico mjrcerino@hotmail.com SANCHEZ SALAZAR YOLANDA ANALISIS AMBIENTALES E INSUMOS SA DE CV FRESNOS 151 COL. ARBOLEDAS RESID. CP 25200 Mxico analisis.amb@gmail.com SNCHEZ SNCHEZ CLAUDIA KARINA Universidad de Guanajuato Lascurain de Retana No. 5 Guanajuato, Gto. C.P. 36000 Mxico javier_alex3@hotmail.com
SNCHEZ VIVEROS GABRIELA Nombre: Instituto Tecnologico Superior de Tantoyuca. Direccin: Desviacin Lindero Tametate S/N, Col. La Morita, Tantoyuca, Ver. CP: 92100. Mxico gabrielauv@gmail.com SANDOVAL GEORGINA Unidad de Biotecnologa Industrial CIATEJ Av. Normalistas 800 44270 Guadalajara, Jalisco +52(33)33455200 x 1302 Mxico georgina@confluencia.net SANDOVAL ROJAS MARTHA ELVIRA SEP-INSTITUTO TECNOLGICO DE MINATITLN BLVD. INSTITUTOS TECNOLGICOS S/N; COL. BUENA VISTA NORTE. C.P. 96848 MINATITLN, VERACRUZ. Mxico marsanrojas@hotmail.com SERAFIN MUOZ ALMA HORTENSIA UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO LASCURAIN DE RETANA NO 5 CENTRO 36000 GUANAJUATO, GTO Mxico sermuah@quijote.ugto.mx, sermuah@yahoo.com,maldiaas@hotmail.com SOARES HUGO M. Federal University of Santa Catarina, Brazil Brasil soares@enq.ufsc.br
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SOLS PACHECO JOSU RAYMUNDO Universidad de Guadalajara. Av. Juarz #975. Col Centro C.P 44100. Guadalajara, Jalisco. Mxico. Mxico josuesolisp@gmail.com SOLS VZQUEZ GABRIELA INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA. Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico. Tel. (993) 35302-59, 353-02-50, 353-26-49 Mxico dodoria7@msn.com SORIA GUERRA RUTH ELENA Universidad Autonoma de San Luis Potosi Alvaro Obregon #64, Zona Centro, CP 78000 San Luis Potosi, SLP, Mexico Mxico ruth_soria2@hotmail.com TAPIA FIERRO KARLA LISZETH Instituto de Ecologa, A.C. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz, 91070 Mxico. Mxico karla.tapia@inecol.edu.mx TEBAR HERNANDEZ EDUARDO DAVID INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Mxico mjrcerino@hotmail.com TYER CERN MARIANELA UNIVERSIDAD JUREZ AUTNOMA DE TABASCO, AVENIDA UNIVERSIDAD S/N COL. MAGISTERIAL C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO Mxico rgomezcruz@hotmail.com
TOLA JIMNEZ IRMA BELEM UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA DEL I.P.N AV. ACUEDUCTO S/N COL. BARRIO LA LAGUNA TICOMN C.P. 07340 MEX.D.F. Mxico ibelemt@gmail.com TOLEDO CERVANTES ALMA LILIA Universidad Autnoma Metropolitana Prol. Canal de Miramontes No. 3855 Col exhacienda San Juan de Dios Deleg. Tlalpan. CP. 14387 Mxico DF. Mxico almatolecerv@hotmail.com TORRES BUSTILLOS LUIS GILBERTO UPIBI-IPN Calle Acueducto sn Col BArrio La LAguna Ticoman Del Gustavo A Madero Mexico DF CP 07340 Mxico LTorresB@ipn.mx TORRES CALDERN JESS Escuela Sup. de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas, Instituto Politcnico Nacional (ESIQIE). Mxico iqijtc_1311@yahoo.com.mx TORRES RAMREZ EDUARDO Centro de Qumica-ICUAP Benemrita Universidad Autnoma de Puebla Edificio 103G Ciudad Universitaria Phone. (+52) (222) 2295500 ext. 7273 Mxico eduardo.torres.ramirez@gmail.com
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TREVIO QUINTANILLA LUIS GERARDO Universidad Politcnica del estado de Morelos Blvd. Cuahunahuac N 566, Col. Lomas del texcal. Jiutepecm Morelos. CP: 62550. Mxico Mxico ltrevino@upemor.edu.mx TRUJILLO TAPIA MA NIEVES UNIVERSIDAD DEL MAR CD. UNIVERSITARIA S/N, PUERTO ANGEL DISTRITO DE SAN PEDRO POCHUTLA C.P. 70902 OAXACA, OAXACA Mxico nieves@angel.umar.mx VAZQUEZ DUHALT RAFAEL Instituto de Biotecnologa UNAM Cuernavaca, Morelos Mxico vazqduh@ibt.unam.mx VAZQUEZ PERALES RICARDO Electrotecnia y Suministros, S.A de C.V ESU-871109-QQ5 25 poniente 502-C Col. Chulavista Puebla, Puebla. C.P. 72420 Mxico ricardo.vazquez.perales@iberopuebla.edu.mx VEGA VALERO GUILLERMO BIOTECNOLOGIA MEXICANA DE MICROALGAS, S.A. DE C.V. NIOS HEROES 530 TLAJOMULCO DE ZUIGA, JAL Mxico gvegava@gmail.com VELAZQUEZ PECH LUZ MARA Bienvenidos al CICESE Centro de Investigacin Cientfica y de Educacin Superior de Ensenada, Baja California, Mexico Mxico radianthus@hotmail.com
VELOZ MAYORGA NANCY CECILIA CESTTA Panamericana Sur Km 1 Riobamba Ecuador Telefono: 032998232 Ecuador ncveloz@yahoo.es VIANCHA LINARES VALERIE Universidad de los Andes Colombia v-vianch@uniandes.edu.co VIEIRA COSTA JORGE ALBERTO Laboratory of Biochemical Engineering, College of Chemistry and Food Engineering, Federal University of Rio Grande (FURG), P. O. Box 474 Rio Grande-RS, 96201900, Brazil. Brasil jorge@pq.cnpq.br VILLALOBOS SANDI NARCY Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Escuela de Ciencias Biolgicas, Universidad Nacional de Costa Rica. e-mail: nvillalo@una.ac.cr Costa Rica nvillalo@una.ac.cr VIVES FLOREZ MARTHA JOSEFINA Universidad de los Andes Colombia mvives@uniandes.edu.co ZAMORA CASTRO JORGE Instituto de Ecologa, A.C. Carretera Antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz 91070 Mxico. Costa Rica ghb65@hotmail.com
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INSTITUCIONES PARTICIPANTES
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ANALISIS AMBIENTALES E INSUMOS SA DE CV Fresnos 151 Col. Arboledas Resid. CP 25200 MEXICO BENEMRITA UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA Centro de Qumica-ICUAP Edificio 103G Ciudad Universitaria, Puebla, Pue. MEXICO Tel. (+52) (222) 2295500 ext. 7273 BIOTECNOLOGIA MEXICANA DE MICROALGAS, S.A. DE C.V. Nios Hroes 530 Tlajomulco De Ziga, Jal. MEXICO BIOTECNOLOGA Y MEDIO AMBIENTE DE COLOMBIA SAS Carrera 80 # 66-36, Bogot Colombia Tel: 4307773 CENTRO DE ESTUDIOS AMBIENTALES DE CIENFUEGOS (CEAC). Cuba CENTRO DE INVESTIGACIN CIENTFICA DE YUCATN, A.C. Calle 43 No. 130, Col. Chuburn de Hidalgo, CP. 97200 Mrida, Yucatn, Mxico. Tel. (999) 981-3923 Fax. (999) 981-3900 CENTRO DE INVESTIGACIN CIENTFICA Y DE EDUCACIN SUPERIOR DE ENSENADA (CICESE), Baja California Direccin: Carretera Ensenada Tijuana, Nmero 3918. Zona Playitas. Ensenada, B.C. C.P. 22860 MEXICO CENTRO DE INVESTIGACIN Y ASISTENCIA EN TECNOLOGA Y DISEO DEL ESTADO DE JALISCO (CIATEJ), A. C. Av. Normalistas 800, Colinas de la Normal, CP 44270, Guadalajara, Jalisco, Mxico CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLGICAS DEL NOROESTE (CIBNOR), Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Km 1 a San Juan de la Costa, El Comitn. La Paz, Baja California Sur MEXICO
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CENTRO DE SERVICIOS TCNICOS Y TRANSFERENCIA TECNOLGICA AMBIENTAL Direccin: Panamericana Sur Km 1 Riobamba- Ecuador Telfono: 032998232 ELECTROTECNIA Y SUMINISTROS, S.A DE C.V ESU-871109-QQ5 25 poniente 502-C Col. Chulavista Puebla, Puebla. C.P. 72420 MEXICO ESPE, Quito, Ecuador FEDERAL UNIVERSITY OF RIO GRANDE (FURG) Laboratory of Biochemical Engineering, College of Chemistry and Food Engineering P. O. Box 474 Rio Grande-RS, 96201900, Brazil. FEDERAL UNIVERSITY OF SANTA CATARINA, BRAZIL FUNDACIN IDEA Telfono: +58 212 9035092 Fax: +58 212 9035093 FUNDACIN PARA INVESTIGACIONES BIOLGICAS APLICADAS Argentina INDUSTRIAS CHARRITOS S.A. de C.V. Calle 6 No. 124, Col. Espejo 1 Villahermosa, Tabasco, Mxico C.P. 86108 INSTITUTO COLOMBIANO DEL PETRLEO ICP DE ECOPETROL S.A. Laboratorio de Biotecnologa Instituto de Biotecnologa UNAM Cuernavaca, Morelos +52 (777) 329-1655 INSTITUTO DE ECOLOGA, A.C. Red de Manejo Biotecnolgico de Recursos. Carretera antigua a Coatepec No. 351 El Haya, Xalapa, Veracruz 91070 Mxico
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INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CIENTFICAS Ncleo Nueva Esparta,U. D. O. Boca de Ro, Venezuela INSTITUTO DE ZOOLOGA Y ECOLOGA TROPICAL (IZET) Facultad de Ciencias, Universidad Central de Venezuela (UCV), Caracas, Venezuela. INSTITUTO MEXICANO DE TECNOLOGA DEL AGUA Paseo Cuauhnhuac 8532, Colonia Progreso, Jiutepec, Morelos. C.P. 62550 INSTITUTO MEXICANO DEL PETRLEO Eje Central Lzaro Crdenas Norte 152. Col. San Bartolo Atepehuacn, C.P. 07730 Mxico, DF, Mxico. INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL UPIBI, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa Escuela Sup. de Ingeniera Qumica e Industrias Extractivas Centro de Investigacin en Biotecnologa Aplicada Centro de Investigacion y de Estudios Avanzados Comisin de Operacin y Fomento de Actividades Acadmicas Av. Acueducto s/n. Barrio La Laguna Ticomn. Del. Gustavo A. Madero 07340 Mxico DF INSTITUTO TECNOLGICO DE BOCA DEL RO. KM.12 CARR. VERACRUZ-CORDOBA. C.P.94290. BOCA DEL RO, VER. INSTITUTO TECNOLGICO DE MINATITLN BLVD. INSTITUTOS TECNOLGICOS S/N COL. BUENA VISTA NORTE C.P. 96848 MINATITLN, VER. TEL. (922) 222 4345 INSTITUTO TECNOLGICO DE SONORA (ITSON) INSTITUTO TECNOLOGICO DE VILLAHERMOSA Carretera a Frontera Km. 3.5 Cd. Industrial Villahermosa, Tabasco, Mxico Tel. (993) 353-02-59, 353-02-50, 353-26-49
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INSTITUTO TECNOLGICO DEL ALTIPLANO DE TLAXCALA KM. 7.5 CARRETERA FEDERAL SAN MARTN- TLAXCALA SAN DIEGO XOCOYUCAN, TLAXCALA C.P. 90122 RFC:SEP 210905778 INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR DE MACUSPANA AV. TECNOLOGICO S/N LERDO DE TEJADA 1 SECCION MACUSPANA, TABASCO C.P. 86719 INSTITUTO TECNOLOGICO SUPERIOR DE TANTOYUCA. Desviacin Lindero Tametate S/N, Col. La Morita, Tantoyuca, Ver. CP: 92100. LABORATORIO CENTRAL CARABOBO Gcia. Captacin Tratamiento y Mantenimiento C.A. Hidrologica del Centro PIONERO SOFTWARE, S.A DE C.V. Guadalajara, Jal. PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATLICA DE VALPARASO Pontificia Universidad Javeriana Microbiologia Industrial Colombia SARTORIUS DE MEXICO S.A. DE C.V. CIRCUITO CIRCUNVALACIN PONIENTE # 149 CIUDAD SATELITE, NAUCALPAN ESTADO DE MEXICO. CP 53100 THE NATIONAL INSTITUTE OF OCEANOGRAPHY Nature Beta Technologies Ltd & Seambiotic Ltd, UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CAMPECHE FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICO-BIOLGICAS UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIRIQU Centro de Investigaciones de Productos Naturales y Biotecnologa (CIPNABIOT), 0427 David, Panam
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UNIVERSIDAD AUTNOMA DE COAHUILA BLVD. VENUSTIANO CARRANZA ESQUINA GONZLEZ LOBO COL. REPBLICA ORIENTE C. P. 25280 SALTILLO, COAHUILA MXICO UNIVERSIDAD AUTNOMA DE NUEVO LEN. Facultad de Ciencias Qumicas. Ave. Universidad s/n. Cd Universitaria. San Nicols de los Garza Nuevo Len. CP 66451 UNIVERSIDAD AUTNOMA DE PUEBLA Direccin: 4 Sur 104, Ciudad Universitaria, Colonia San Manuel, Puebla Pue. C.P. : 72000 UNIVERSIDAD AUTONOMA DE SAN LUIS POTOSI Alvaro Obregon #64, Zona Centro, CP 78000 San Luis Potosi, SLP, Mexico UNIVERSIDAD AUTONOMA DE YUCATAN CALLE 60 491-A X 57 CENTRO UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL CARMEN CALLE 56 No.4 ESQ AV. CONCORDIA COL. BENITO JUAREZ C.P. 24180 CD. DEL CARMEN, CAMPECHE UNIVERSIDAD AUTONOMA DEL ESTADO DE BAJA CALIFORNIA AV. ALVARO OBREGON Y JULIAN CARRILLO S/N COL NUEVA CP 21100 MEXICALI, BAJA CALIFORNIA Universidad Autnoma del estado de Morelos Facultad de Ciencias Av. Universidad No. 1001 colonia chamilpa CP 62209 Cuernavaca Morelos Mxico. UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA - IZTAPALAPA Av. San Rafael Atlixco 186, Col. Vicentina C.P. 09340 Delegacin Izapalapa, Mxico, D.F. TELFONO 58046408 EXTENSIN 5804
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UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA (UCV) Escuela de Biologa Facultad de Ciencias Caracas, Venezuela. UNIVERSIDAD DE ALMERA Dpto. Ingeniera Qumica UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES Laboratorio de Biocatlisis. Depto. Qumica Orgnica Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Ciudad Universitaria. Pabelln 2. Piso 3. Buenos Aires. C1428EGA. Argentina Tel.: 54 11 4576 3300 ext. 262 Fax: 54 11 4576 3385 UNIVERSIDAD DE CONCEPCIN Facultad de Ciencias Naturales y Oceanogrficas Departamento de Botnica Casilla 160-C, Concepcin, Chile UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA Av. Jurez #975. Col. Centro. C.P 44100. Guadalajara, jalisco. Mxico. UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO LASCURAIN DE RETANA NO 5 CENTRO 36000 GUANAJUATO, GTO UNIVERSIDAD DE LA SABANA. Campus Universitario Puente del Comun, KM 21 Autopista Norte de Bogot. Cha, Cundinamarca. Telefono (571) 8615555 Ext. 2523, 2557. Fax 8615555 Ext, 2515 UNIVERSIDAD DE LOS ANDES Centro de Investigaciones en Ingeniera Ambiental, departamento de Ingeniera Civil y Ambiental. Centro de Investigaciones Microbiolgicas-CIMIC Bogot, Colombia
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UNIVERSIDAD DE VALLADOLID Escuela de Ingenierias Industriales Departamento de Ingeniera Qumica y Tecnologa del Medio Ambiente Sede Dr Mergelina Valladolid C/ Dr. Mergelina s/n CP 47005 UNIVERSIDAD DEL ISTMO CIUDAD UNIVERSITARIA S/N BARRIO SANTA CRUZ CUARTA SECCIN SANTO DOMINGO TEHUANTEPEC, OAXACA C.P. 70760 UNIVERSIDAD DEL ZULIA Divisin de Estudios Bsicos y Generales, Facultad de Ciencias de la Educacin, Universidad Jos Antonio Pez. Valencia, Venezuela Laboratorio de Microorganismos Fotosintticos, Departamento de Biologa. Facultad Experimental de Ciencias, Maracaibo, Venezuela. UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER Universidad Jurez Autnoma de Tabasco AVENIDA UNIVERSIDAD S/N, ZONA DE LA CULTURA COL. MAGISTERIAL, C.P. 86040 VILLAHERMOSA, CENTRO, TABASCO. UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLAS DE HIDALGO Santiago Tapia # 403 colonia centro, Morelia Michoacan UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO Facultad de Qumica Ciudad Universitaria C.P. 04510 Del. Coyoacn Mxico, D.F. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COSTA RICA Laboratorio de Biotecnologa de Microalgas. Escuela de Ciencias Biolgicas e-mail: nvillalo@una.ac.cr UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL RAFAEL MARA BARALT Programa de Ingeniera y Tecnologa Ciudad Ojeda, Zulia, Venezuela
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UNIVERSIDAD POLITCNICA DEL ESTADO DE MORELOS Blvd. Cuahunahuac N .566, Col. Lomas del Texcal. Jiutepec, Morelos. CP62550. Mxico UNIVERSIDAD VERACRUZANA. Lomas del Estadio S/N, Colonia Zona Universitaria. Cdigo Postal 91000. Xalapa, Veracruz. UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA (UFSC) Departamento de Engenharia Qumica e Engenharia de Alimentos Laboratrio de Tratamento Biolgico de Efluentes (LTBR) Campus Universitrio, C.P. 476 - CEP 88040-900 - Florianpolis-SC Telefone: (48) 3721 9448 UNIVERSITAT POLITCNICA DE CATALUNYA C/JORDI GIRONA, 1-3 08034 BARCELONA
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MEMORIAS DEL CONGRESO

II Congreso Latinoamericano de Biotecnologa Ambiental y Algal

Curso pre-congreso patrocinado por:

II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 1

II Congreso Latinoamericano de Biotecnologa Ambiental y Algal

II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 3

II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 4

II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 5

Dra. Georgina C. Sandoval F.

Dra. Eugenia J. Olgun

Dra. Gloria Snchez-Galvn. Editores

II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 7

International Society for Applied Phycology

II Congreso, Cancn, Q. Roo Mxico, 5-9 diciembre 2010 8

RESUMEN DEL PROGRAMA

INAUGURACIN AMI BEN AMOTZ

RECESO ASAMBLEA SOLABIAA

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BIORREACTORES PARA EL CULTIVO DE MICROALGAS

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PLENARIAS Y CONFERENCIAS INVITADAS

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Palabras clave: Biotecnologa, Petrleo, Ambiente, Faja del Orinoco

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Mesa Redonda - Agua

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Mesa Redonda - Bioprocesos Ms Limpios y Sustentabilidad

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Mesa Redonda - Biocombustibles

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