Gnero

Bordetella
Ctedra de Microbiologa e Inmunologa Departamento de Patologa Veterinaria F.C.V.-U.C.V.

Prof. Aurico Sousa Fonseca

CLASIFICACIN CIENTFICA
Reino: Bacteria Filo: Proteobacteria Clase: Beta Proteobacteria Orden: Burkholderiales Familia: Alcaligenaceae Gnero: Bordetella
Moreno-Lpez 1952

Especies

B. ansorpii B. avium, B. bronchiseptica, B. hinzii, B. holmesii, B. parapertussis, B. pertussis, B. petrii, B. trematum

CARACTERSTICAS DEL GNERO Bordetella

Bacterias agrupadas en un gnero, diferenciado en 9 especies, cuatro de las cuales son patgenos importantes en humanos y animales:
Bordetella pertussis (especie tipo), Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica y Bordetella avium; (Sapian; 1991)

Todas estas especies estn asociadas con infecciones de las vas respiratorias;
Bordetella pertussis y Bordetella parapertussis son patgenos exclusivamente de humanos y las dos especies restantes, lo son para animales fundamentalmente (Hallander, Storsaeter and Mollby, 1991).

HABITAT
Comensales de las membranas mucosas del tracto respiratorio superior de humanos y animales. Solo sobreviven tiempos cortos en el ambiente B. pertussis y B. parapertussis son patgenos humanos que causan tos ferina y una forma leve de tosferina B. Bronchiseptica: Tracto respiratorio superior de porcinos, caninos, felinos, conejos, conejillos de indias, ratas, caballos y posiblemente otros animales. B. Avium: Tracto respiratorio de aves de corral, principalmente pavos Las infecciones en mamferos son transmitidas principalmente por aerosoles pero en los pavos la propagacin indirecta va agua y desechos puede ocurrir

Diferenciacin entre B. bronchyseptica y B. avium

Bordetella avium debe ser diferenciada de Alcaligenes faecalis, el cual no es patognico Ambas producen colonias plidas no fermentadoras de lactosa en MacConkey Agar Smith Baskerville: Azul de bromotimol La actividad hemaglutinante un atributo poco comn en las bacterias se produce en las cepas virulentas de ambas especies

Agar MacConkey

Agar Smith Baskerville

Morfologa y caractersticas diferenciales de Bordetella bronchiseptica.

Bacilo corto, pleomrfico de 0.4- 0.5 m m de dimetro y 1.5-2 m de longitud que presenta formas cocoides y bacilares Puede agruparse en parejas o cadenas pero por lo general se presenta como bacterias aisladas Mvil gracias a sus flagelos peritrcos. No forma esporas ni produce cpsula. Crece ptimamente en aerobiosis
Temperatura de 37 +/-2 C pH entre 7.0 y 7.2 Medios enriquecidos con tejido o plasma.

Examen microscpico
Debido a la lentitud de la fijacin de la safranina utilizada en la tincin de Gram, es caracterstica la coloracin plida.
Resulta til que la contra-coloracin de la safranina permanezca en el frotis durante dos minutos completos

En cultivos antiguos o en cultivos en medios que contienen antibiticos, las clulas son pleomrficas y pueden tener filamentos filiformes y formas bacilares gruesas.

Caractersticas de la especie Bordetella bronchiseptica.

Agar Sangre
Pequeas colonias grises circulares parecidas a gotas de roco

En Agar Mac Conkey

Colonias pequeas incoloras.

En medios lquidos
Produce turbidez uniforme, dando un sedimento granular, pero sin formar pelcula en la superficie.

Cuando el cultivo envejece, al agitarse toma forma de ltigo.

Control y muerte de Bordetella bronchiseptica

Este bacilo muere en 20 minutos a la temperatura de 55 C lo que lo hace menos resistente al calor que otros bacilos Gram negativos no esporulados. Es sensible a la luz, la desecacin y a los desinfectantes ordinarios y muere por congelacin (Merchant and Parker, 1973; Michel, 1982).

CARACTERSTICAS DE LA ESPECIE Bordetella bronchiseptica.

Falta de accin fermentativa sobre los carbohidratos Rpida accin sobre algunos sustratos como la urea, la cual descompone en menos de 4 horas a 37C, gracias a la fuerte accin de la enzima ureasa Esta bacteria no produce indol Puede o no reducir los nitratos a nitritos en dependencia de la cepa en cuestin (Griffith, Brasky and Lang, 1997).

Citrato

Agar Urea

Indol

Caractersticas Diferenciales del Gnero Bordetella.

PRUEBAS
Catalasa Oxidasa

Bordetella pertussis + +

Bordetella parapertussis + -

Bordetella bronchiseptica + +

Bordetella avium + +

Crec: Agar Mac ConKey

Reduccin del Nitrato Motilidad

+
-

+
+ +

+
+

Indol
Citrato de Simmons Urea Glucosa Lactosa

+ +

+ + -

+ + (4 h) -

+ -

Factores de Patogenicidad
Los factores de patogenicidad comunes entre Bordetella bronchiseptica y Bordetella pertussis son:
La Hemoaglutinina filamentosa (HAF) La presencia de aglutingenos (fimbrias), La enzima adenilato ciclasa, Las hemolisinas, La endotoxina (LPS) y la toxina termolbil, lo cual demuestra an ms la similitud antignica de estas dos especies (Burns et al, 1993).

Factores de Patogenicidad
La infeccin ocurre en dos etapas:
PRIMERA ETAPA (colonizacin), ocurre la activacin de los genes de produccin de la Hemoaglutinina Filamentosa (HAF), la cual en unin con las fimbrias actan permitiendo la colonizacin de la bacteria en el hospedero SEGUNDA ETAPA (dao celular) ocurre la expresin de otros genes como los de las endotoxinas, la citotoxina traqueal y la enzima adenilato ciclasa, los cuales son los causantes de los daos sistmicos en el tracto respiratorio.

PRINCIPALES FACTORES DE PATOGENICIDAD DE Bordetella bronchiseptica. MECANISMOS DE ACCIN

Factores de virulencia Hemoaglutinina Filamentosa Fimbrias Enzima adenilato ciclasa Mecanismo de accin Referencia
Locht et al, 1993; Burns et al, 1993; Keil and Fenwick, 2000

Adherencia a las clulas epiteliales y macrfagos (Adhesina)

Adherencia a las clulas ciliadas (adhesina)

Locht et al, 1993; Burns et al, 1993; Keil and Fenwick, 2000 Locht et al, 1993; Burns et al, 1993; Keil and Fenwick, 2000

Impide la accin fagoctica (enzima extracitoplasmtica)

Impide la accin fagoctica (protena de membrana externa) Enzima que provoca dao celular (ciliostasis) Produce vasoconstriccin Provoca pirogenicidad, mitogenicidad y shock.

Protena 68 kDalton
Citotoxina traqueal Toxina termolbil Endotoxina

Novotny et al, 1985; Keil and Fenwick, 2000

Locht et al, 1993; Burns et al, 1993; Keil and Fenwick, 2000 Locht et al, 1993; Burns et al, 1993; Keil and Fenwick, 2000 Locht et al, 1993; Burns et al, 1993; Keil and Fenwick, 2000

Incidencia de Bordetella bronchiseptica

Parsito del tracto respiratorio de diversas especies de animales.
MGowan en 1911 describi el hallazgo en hurn, mono, cabra, cobayo, conejo, gato, perro y humano. En 1943, Phillips logra cultivos puros a partir de exudados bronquiales de cerdos.

La prevalencia de infeccin ha sido especialmente alta en cerdos, perros y curieles (Winsser, 1960, Smith, Baskerwille y Bronthwell, 1982). Afecta otras especies como ratas, ratones, conejos y otros (Good and May, 1971; Deeb et al, 1990). Afecciones respiratorias en personas inmunodeprimidas y convalecientes y humanos que han mantenido un contacto estrecho con animales enfermos

PROCEDIMIENTOS DIAGNSTICOS
Las muestras para los exmenes de laboratorio incluyen hisopados nasales, aspirados traqueales y exudados Bordetella se cultiva sobre agar sangre y agar MacConkey o en un medio selectivo Las placas se incuban a 37C por 24 a 48 horas Criterios de identificacin de los aislados
Aspectos de las colonias en agar sangre y agar selectivo Crecimiento sobre el MacConkey Perfil bioqumico Prueba de hemaglutinacin en lamina correlaciona con la virulencia del aislado

Las pruebas serolgicas desarrolladas poseen un valor diagnstico limitado

Cultivos de B. bronchiseptica
La infeccin se diagnostica mejor con muestras de hisopos orofarngeos o con muestras de secrecin nasal. Las muestras deberan obtenerse con hisopos de alginato de calcio estrilizados y colocados en un medio de transporte de carbn antes de colocarse sobre un medio selectivo como Agar Bordet-Gengou (BG) o Agar Smith Baskerville (SB)

Diferenciacin de las especies de Bordetella y Alcaligenes faecalis

CARACTERSTICA
Caracterstica colonial Agar sangre ovina Agar MacConkey Medio selectivo Smith and Baskerville Produccin Oxidasa Hemlisis Rosado plido Pequea, azul + No hemlisis Rosado plido Pequea, azul + No hemlisis Plido verdosa +

B. bronchiseptica

B. avium

Alcaligenes faecalis

Produccin Catalasa
Produccin Ureasa Citrato

+
+ +

+
+

+
+

Utilizacin de carbono exclusivamente

Malonato
Reduccin de Nitratos

+
-

Motilidad
Actividad de hemaglutinacin cepas virulentas

+
Aglutinacin de los eritrocitos ovinos y bovinos

+
Aglutinacin de los eritrocitos de los conejillos de indias

+
-

INFECCIONES CLNICAS
Los signos clinicos asociados con Bordetella se encuentran usualmente asociados a infecciones del tracto respiratorio superior. Los animales jvenes son ms susceptibles a las infecciones y en los adultos son leves o subclnicas. Factores predisponentes contribuyen a los brotes de campo de la enfermedad:
Tales como el stress o infecciones concurrentes.

Aunque la morbilidad puede ser alta, la mortalidad es baja

ESPECIES DE Bordetella CON IMPORTANCIA VETERINARIA Y CONDICIONES DE LA ENFERMEDAD CON LA QUE ESTN ASOCIADAS.

B. bronchiseptica

Cerdos Caninos Gatos Caballos Conejos laboratorio Roedores

Pavos Corderos

Rinitis atrfica Traqueo-bronquitis infecciosa canina Neumona Infecciones respiratorias Infecciones del tracto respiratorio superior Bronconeumona

B. avium B. parapertussis

Coriza neumona

PATGENOS MICROBIANOS IMPLICADOS EN LA TRAQUEOBRONQUITIS INFECCIOSA CANINA (TOS DE LAS PERRERAS) Bordetella bronchiseptica Adenovirus canino 2 Parainfluenzavirus canino 2 Virus del moquillo canino Adenovirus canino 1 Herpesvirus canino 1 Reovirus 1,2 y 3 Micoplasma spp