EXTRACCIN DEL LICOPENO Y B-CAROTENO DEL TOMATE Resumen Se aislaron los pigmentos vegetales licopeno y beta caroteno del

tomate, a partir de una extraccin solido-liquido con diclorometano como solvente; estos compuestos se purificaron por cromatografa en columna y caracterizaron por espectrofotometra UV-vis, determinando tres mximos de absorcin para el licopeno en 482nm, 514nm y 455nm y dos para el beta caroteno en 448nm y 474nm, confirmando con base en los datos de la literatura la extraccin de estos carotenoides. Palabras clave: licopeno, beta caroteno, tomate.

Anlisis de resultados En la primera etapa del proceso de extraccin de los carotenoides, la pasta de tomate se trat con 20mL de etanol 95% con el fin de separar todos los compuestos polares que no son de inters y de esta manera disminuir la complejidad del extracto. Entre las sustancias separadas en esta etapa, se encuentran los minerales como el K, P, Ca, Na, y Mg, el agua que es aproximadamente el 93% del tomate, los azucares, algunas protenas, y las vitaminas hidrosolubles B1, B2, B3, B6, B9, B12 y C, que hacen parte del tomate. Los compuestos apolares que quedaron en el residuo de la pasta, entre los que se encuentran los carotenoides, as como algunas grasas y vitaminas (A y E) se extrajeron por maceracin qumica con diclorometano como solvente (fig. 1) que al ser de naturaleza apolar solubiliza muy bien estos compuestos.

Fig. 1 Extraccin de los carotenoides del tomate Extrados los analitos de inters junto con otros componentes de igual polaridad, se procedi a realizar una extraccin liquido-liquido con una solucin saturada de NaCl, la cual al aumentar la fuerza inica del medio, destruye cualquier emulsin que se genere y

hace mas polar esta fase, por lo que si existen algunos componentes apolares disueltos en la fase acuosa, son arrastrados hacia la orgnica (fig. 2). El extracto orgnico separado se trat con NaSO4 anhidro, con el fin de eliminar las trazas de agua presentes en esta fase.

Fig. 2 Extraccin liquido-liquido de los carotenoides El solvente diclorometano se evapor con el rotavaporador, con lo que se obtuvo un residuo fino color anaranjado, el cual contena los carotenoides. Este residuo se disolvi con una pequea cantidad de tolueno, que al ser un solvente ms apolar que el diclorometano, es ms selectivo, por lo que solubiliza los componentes ms apolares del extracto, como el licopeno y el beta caroteno (fig. 2).

La purificacin de estos pigmentos se realiz por cromatografa en columna, utilizando como fase estacionaria silica gel. La muestra se introdujo en la columna previamente humedecida con diclorometano y se empez adicionar este solvente (fase mvil) hasta la elucin del licopeno, que al ser el ms apolar de los dos carotenoides fue eludido primero. Dado que la fase estacionaria es de naturaleza polar, retiene con mayor fuerza el componente con carcter ms levemente polar de estos dos compuestos, por lo que el

beta-caroteno fue el ltimo en ser eludido (fig. 3). La elucin de este pigmento se realiz con metanol, un solvente de carcter polar.

Fig. 3 Separacin por cromatografa en columna del licopeno y beta caroteno

Debido al gran nmero de dobles enlaces conjugados que presentan estos carotenoides en su estructura, absorben radiacin en la regin visible del espectro electromagntico, razn por la cual exhiben su color caracterstico. Tanto el licopeno como el beta caroteno, se caracterizaron por espectrofotometra UV-vis, obteniendo sus espectros en el rango de 300-700nm.

Grafico 1. Espectro de absorcin del licopeno extrado Grafico 2. Espectro de absorcin terico del licopeno

A partir de los grficos 1 y 2 se determina que el compuesto extrado corresponde al licopeno, ya que su espectro de absorcin el cual muestra tres mximos (482nm, 514nm y 455nm) coincide con el reportado en la literatura. El desplazamiento del espectro experimental hacia longitudes de onda mayores, se debe a un efecto batocrmico generado por el solvente. Cabe mencionar que el licopeno al absorber radiacin azul verdosa (482nm) de la luz blanca, emite el color anaranjado observado.

Grafico 3. Espectro de absorcin del beta caroteno extrado

Grafico 4. Espectro de absorcin terico del beta caroteno

Como se puede observar en los grficos 3 y 4, se determina que el beta caroteno fue aislado satisfactoriamente del tomate, ya que los mximos de absorcin del espectro obtenido para este compuesto (448nm y 474nm) coinciden con los registrados en la literatura; Sin embargo se debe tener en cuenta que este pigmento no esta totalmente

puro, ya que se puede observar en el espectro ciertas bandas que no corresponden a este carotenoide. A parte de la caracterizacin por esta tcnica espectroscpica, tambin se llev a cabo dos pruebas cualitativas para determinar carotenoides; una con acido sulfurico y otra con tricloruro de antimonio. Tanto el licopeno como el beta caroteno dieron positivo estos ensayos, ya que al reaccionar con estos reactivos, se observ que tomaban una color azul intensa, caracterstica de los carotenoides al llevar a cabo estas reacciones. Conclusiones. A partir de espectrofotometra UV-vis y pruebas cualitativas, se logr establecer que los carotenoides licopeno y beta caroteno es aislaron satisfactoriamente del tomate. En el espectro obtenido del beta caroteno se observa que este pigmento no esta totalmente puro, ya que las bandas caractersticas de este compuesto estn solapadas por las bandas de otros componentes.