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NORMA TCNICA COLOMBIANA

NTC 5167
2004-05-31

PRODUCTOS PARA LA INDUSTRIA AGRCOLA. PRODUCTOS ORGNICOS USADOS COMO ABONOS O FERTILIZANTES Y ENMIENDAS DE SUELO

E:

AGRICULTURAL INDUSTRY PRODUCTS. ORGANIC PRODUCTS USED AS FERTILIZERS AND SOIL AMENDMENTS

CORRESPONDENCIA:

DESCRIPTORES:

abono; fertilizante; enmienda; acondicionador; material orgnico.

I.C.S.: 65.080.00
Editada por el Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin (ICONTEC) Apartado 14237 Bogot, D.C. Tel. 6078888 Fax 2221435

Prohibida su reproduccin

Primera actualizacin Editada 2004-06-15

PRLOGO

El Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin, ICONTEC, es el organismo nacional de normalizacin, segn el Decreto 2269 de 1993. ICONTEC es una entidad de carcter privado, sin nimo de lucro, cuya Misin es fundamental para brindar soporte y desarrollo al productor y proteccin al consumidor. Colabora con el sector gubernamental y apoya al sector privado del pas, para lograr ventajas competitivas en los mercados interno y externo. La representacin de todos los sectores involucrados en el proceso de Normalizacin Tcnica est garantizada por los Comits Tcnicos y el perodo de Consulta Pblica, este ltimo caracterizado por la participacin del pblico en general. La NTC 5167 (Primera actualizacin) fue ratificada por el Consejo Directivo del 2004-05-31. Esta norma est sujeta a ser actualizada permanentemente con el objeto de que responda en todo momento a las necesidades y exigencias actuales. A continuacin se relacionan las empresas que colaboraron en el estudio de esta norma a travs de su participacin en el Comit Tcnico 73 Productos qumicos bsicos para la industria agrcola.

ABOCOL ABONOS INTEGRALES MI GRANJA ABIMGRA AGRILAB AGRO S.A. ALFA PRODUCTOS QUMICOS ASERYLAQ E.U. ASOCIACIN COLOMBIANA DE PORCICULTORES BIQUMIA LTDA. BOGOTANA DE AGUAS Y SANEAMIENTO COLJAP INDUSTRIA AGROQUMICA COMPAA COLOMBIANA DE INVERSIONES AGRCOLAS COLINAGRO COMPAA COLOMBIANA DE TABACO S.A. - COLTABACO CORPOICA CORPORACIN COLOMBIA INTERNACIONAL DOCTOR CALDERN ASISTENCIA TCNICA

ECOFERTIL S.A. EMPRESAS PBLICAS DE MEDELLN GEO GESTIN ORGNICA GEOBIOLOGO LEONARDO CARVAJAL INSTITUCIN UNIVERSITARIA DE CIENCIAS APLICADAS Y AMBIENTALES UDCA INSTITUTO COLOMBIANO AGROPECUARIO - ICA INSTITUTO GEOGRFICO AGUSTN CODAZZI MERCK COLOMBIA MICROFERTISA MORE QUMICA TECNOQUMICAS MULTIANLISIS E.U. SALACO COLOMBIA SISVITA BIOTECH TECSOL UNIVERSIDAD DE ANTIOQUIA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

Adems de las anteriores, en Consulta Pblica el Proyecto se puso a consideracin de las siguientes empresas:

BIOORGNICOS S.A. CALES Y DERIVADOS RIOCLARO COMORGANIC COSMOAGRO DISMACOL PRADERA UNIN TEMPORAL ECOFLORA LTDA. FEDERACIN NACIONAL DE AVICULTORES FERCON FERTIABONOS FERTICOL FERTILIZAR LTDA. GESTIN AMBIENTAL Y AMBIENTE EMPRESARIAL HALCN COLOMBIA INSTITUTO ALEXANDER VON HUMBOLDT

KIMEL DE COLOMBIA S.A. MARTHA LUCIA GUARDIOLA MINISTERIO DE AGRICULTURA Y DESARROLLO RURAL MINISTERIO DE COMERCIO, INDUSTRIA Y TURISMO MONOMEROS COLOMBO VENEZOLANOS SEPHIS COLOMBIA SUPERINTENDENCIA DE INDUSTRIA Y COMERCIO TECNIAGRO S.A. UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER ZAHENSA

ICONTEC cuenta con un Centro de Informacin que pone a disposicin de los interesados normas internacionales, regionales y nacionales. DIRECCIN DE NORMALIZACIN

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PRODUCTOS PARA LA INDUSTRIA AGRCOLA. PRODUCTOS ORGNICOS USADOS COMO ABONOS O FERTILIZANTES Y ENMIENDAS DE SUELO

1.

OBJETO

Esta norma tiene por objeto establecer los requisitos que deben cumplir y los ensayos a los cuales deben ser sometidos los productos orgnicos usados como abonos o fertilizantes y como enmiendas de suelo. 2. DEFINICIONES

Para efectos de la presente norma se aplican las definiciones consignadas en la NTC 1927. 3. 3.1 REQUISITOS REQUISITOS GENERALES

3.1.1 Los productos deben presentarse en forma slida como granulados, polvos o agregados o lquida como concentrados solubles, suspensiones o dispersiones. 3.1.2 Todo producto cuyo origen sea materia orgnica fresca debe ser sometido a procesos de transformacin que aseguren su estabilizacin agronmica tales como: compostaje o fermentacin. 3.1.3 Deber declararse el origen (clase y procedencia) de las materias primas y los procesos de transformacin empleados. 3.2 REQUISITOS ESPECFICOS

3.2.1 Los productos orgnicos empleados como fertilizantes o abonos y enmiendas del suelo, deben cumplir con los requisitos establecidos en la Tabla 1.

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Tabla 1. Requisitos especficos Fertilizantes o abonos orgnicos, orgnico minerales y enmiendas orgnicas Fertilizantes o abonos orgnicos

Clasificacin del producto 1

Indicaciones relacionadas con la obtencin y los componentes principales 2

Parmetros a caracterizar 3

Parmetros a garantizar (en base hmeda) 4 Contenido de carbono orgnico oxidable total (%C) Humedad mxima (%) Contenido de cenizas (%) -1 Capacidad de intercambio catinico (cmol(+) kg ) (meq/100 g) Capacidad de Retencin de Humedad (%) pH Contenido de Nitrgeno Total (% N) 3 Densidad (g/cm )

Abono orgnico

Producto slido obtenido a partir de la Prdidas por volatilizacin % * estabilizacin de residuos de animales, Contenido de cenizas mximo 60 % * vegetales o residuos slidos urbanos (separados en la fuente) o mezcla de los Contenido de humedad *: Para materiales de origen animal, mximo 20 % anteriores, que contiene porcentajes Para materiales de origen vegetal, mximo 35 % mnimos de materia orgnica expresada como carbono orgnico oxidable total y los Para mezclas, el contenido de humedad estar dado por el parmetros que se indican. origen del material predominante. Contenido de carbono orgnico oxidable total mnimo 15 % N, P2O5 y K2O totales (declararlos si cada uno es mayor de 1%) Relacin C/N -1 Capacidad de intercambio catinico, mnimo 30 cmol(+) kg (meq/100 g) Capacidad de retencin de humedad, mnimo su propio peso pH mayor de 4 y menor de 9 3 Densidad mximo 0,6 g/cm Lmites mximos en mg/kg (ppm) de los metales pesados expresados a continuacin: Arsnico (As) 41 Cadmio (Cd) 39 Cromo (Cr) 1 200 Mercurio (Hg) 17 Nquel (Ni) 420 Plomo (Pb) 300 Se indicar la materia prima de la cual procede el producto * La suma de estos parmetros debe ser 100

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Tabla 1. (Continuacin)

Fertilizantes o abonos orgnico-minerales Indicaciones relacionadas con la Clasificacin obtencin y los componentes del producto principales 1 2 Producto slido obtenido por mezcla o combinacin de abonos minerales y orgnicos de origen animal, vegetal, pedogentico (geolgico) o provenientes de lodos de tratamiento de aguas residuales, que contiene porcentajes mnimos de materia orgnica expresada como carbono orgnico oxidable total y de los parmetros que se indican. Abono orgnico mineral slido Parmetros a caracterizar 3 Prdidas por volatilizacin % * Contenido de cenizas %* Contenido de humedad, mximo 15 %* Contenido de Carbono Orgnico Oxidable Total, mayor de 5% y menor de 15 % N, P2O5 , K2O, CaO, MgO, elementos menores, reportar si la riqueza total de cada elemento mnimo es 2 % La suma de los elementos a reportar debe ser mnimo 10% Densidad, reportar pH, reportar Residuo insoluble en cido, mximo 50 % del contenido de cenizas Contenido de sodio, reportar Conductividad elctrica, reportar Lmites mximos en mg/kg (ppm) de los metales pesados expresados a continuacin (slo para productos de mezcla con residuos de plantas de tratamiento de aguas residuales): Arsnico (As) 41 Cadmio (Cd) 39 Cromo (Cr) 1 200 Mercurio (Hg) 17 Nquel (Ni) 420 Plomo (Pb) 300 Se indicar la materia prima de la cual procede el producto * La suma de estos parmetros debe ser 100 Parmetros a garantizar (en base hmeda) 4 Contenido de carbono orgnico oxidable total (% C) Humedad mxima (%) Contenido total de nitrgeno (% Nt) El nitrgeno se expresar en forma orgnica y + mineral N org N- NH4 y N- NO3 Contenido de Potasio total (% K2O) Contenido de Potasio soluble (% K2O) Contenido de Fsforo Total (% P2O5) Contenido de Fsforo soluble (% P2O5) Contenido de Calcio (% CaO) Contenido de Magnesio (% MgO) Contenido de Elementos menores (%) 3 Densidad (g/cm ) Contenido de metales pesados (mg/kg) (ppm) Residuo insoluble (%)

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Tabla 1. (Continuacin) Fertilizantes o abonos orgnico-minerales Clasificacin del producto 1 Indicaciones relacionadas con la obtencin y los componentes principales 2 Producto lquido obtenido por adicin de agua a un abono orgnico, orgnico mineral slido o mezcla de los anteriores, con posterior extraccin al que puede o no, aadrsele un fertilizante mineral y que cumple con los parmetros que se indican. Parmetros a caracterizar 3 Slidos suspendidos mximo 4 % Contenido de Carbono Orgnico Oxidable total mnimo 20 g/l N total+ P2O5 + K2O, mnimo 40 g/l Riqueza mxima potasio 50 g/l de K2O CaO y MgO reportar en g/l Elementos menores, reportar en g/l Contenido de sodio, reportar Densidad, reportar pH, reportar Conductividad electrica, reportar Parmetros a garantizar 4 Slidos suspendidos (%) Contenido de carbono orgnico oxidable total (g/l) Contenido total de nitrgeno (g/l Nt) El nitrgeno se expresar en forma orgnica y + mineral N org N- NH4 y N- NO3 Contenido de Potasio (g/l K2O) Contenido de Fsforo (g/l P2O5) Contenido de metales pesados (mg/l)(ppm)

Abono orgnico mineral lquido

Lmites mximos en mg/l (ppm) de metales pesados (slo para productos de mezcla con residuos de plantas de tratamiento de aguas residuales o residuos slidos urbanos separados en la fuente): Arsnico (As) 41 Cadmio (Cd) 39 Cromo (Cr) 1 200 Mercurio (Hg) 17 Nquel (Ni) 420 Plomo (Pb) 300 Se indicar la materia prima de la cual procede el producto Contina...

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Tabla 1. (Continuacin) Enmiendas orgnicas Enmienda orgnica hmica Clasificacin del producto 1 Indicaciones relacionadas con la obtencin y los componentes principales 2 Parmetros a caracterizar 3 Si el producto no tiene tratamiento qumico debe ser insoluble en agua y su disolucin en medio alcalino debe ser mnimo el 50 % en peso. Si el producto tiene tratamiento qumico debe ser soluble en agua y la disolucin en agua debe desarrollar pH alcalino Contenido de carbono orgnico oxidable total, Mnimo 30 % Extracto hmico total expresado como carbono (carbono total soluble en medio alcalino). Mnimo 30 % del Carbono orgnico oxidable Total Carbono de cidos hmicos. Mnimo el 60 % del carbono del extracto hmico total. Nitrgeno orgnico, reportar % Humedad mxima: 20 % Granulometra: tamao de partcula, reportar Indicar el origen del cual procede el producto Extracto hmico total expresado como carbono del extracto hmico (carbono orgnico oxidable total soluble en medio alcalino), mnimo 40 g/l Carbono del extracto hmico total mnimo el 30 % del peso de sustancias solubles en medio alcalino Carbono de cidos hmicos mnimo el 60 % del carbono del extracto hmico total. Carbono de cidos flvicos % (declararlos) Ausencia de slidos suspendidos pH mnimo 9 Contenido de potasio (como KOH) Mx. 50 g/l Contenido de fsforo y otros elementos, reportar g/l Densidad, reportar Se indicar la materia prima de la cual procede el producto Parmetros a garantizar 4 Carbono orgnico oxidable total %C Carbono del Extracto Hmico Total %CEHT Carbono de cidos Hmicos % CAH (% CAH/ % CEHT) x 100 > % 60 Humedad mxima % Solubilidad en medio alcalino %

Producto orgnico slido de origen pedogentico o geolgico con o sin tratamiento qumico que aplicado al suelo aporta o genera humus mejorando las propiedades fsicas, qumicas y Enmienda hmica biolgicas del mismo y que cumple las especificaciones que slida se indican.

Producto orgnico lquido obtenido mediante solubilizacin en medio alcalino o por oxidacin qumica, de un material de origen pedogentico que aporta cidos hmicos y destinado Enmienda hmica flvicos, preferentemente a la lquida fertirrigacin y que cumple con las especificaciones que se indican.

Carbono del extracto hmico total CEHT g/l CEHT (g/l)/peso de sustancias solubles en medio alcalino > % 30 Carbono de cidos Hmicos CAH g/l (CAH(g/l)/CEHT(g/l)) x 100 > %60 Carbono de cidos flvicos CAF g/l Potasio (KOH) Mx 50 g/l

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Tabla 1. (Final) Enmienda orgnica no hmica

Clasificacin del producto 1

Indicaciones relacionadas con la obtencin y los componentes principales 2 Producto orgnico slido obtenido a partir de la deshidratacin y estabilizacin de los residuos provenientes de las plantas industriales y de tratamiento de a) aguas residuales industriales y urbanas y b) residuos slidos urbanos separados en la fuente.

Parmetros a caracterizar y otros requisitos 3 Si el producto se disuelve en agua, su disolucin no debe desarrollar pH alcalino Contenido de carbono orgnico oxidable total, mnimo 15 % -1 Capacidad de intercambio catinico, mnimo 30 cmol (+) kg (meq/100 g) Conductividad elctrica, declararla Contenido de sodio soluble (declararlo, restricciones de uso) Lmites mximos en mg/kg (ppm) de metales pesados (en base seca): Arsnico (As) 41 Cadmio (Cd) 39 Cromo (Cr) 1 200 Mercurio (Hg) 17 Nquel (Ni) 420 Plomo (Pb) 300 Se indicar la materia prima de la cual procede el producto

Parametros a garantizar 4 Contenido de carbono orgnico oxidable total %C Capacidad de intercambio cationico -1 cmol (+) kg (meq/100 g) Contenido de metales pesados mg/kg

Enmienda orgnica no hmica

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3.2.2 Macrocontaminantes

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En la siguiente tabla se presentan los lmites mximos permitidos para macrocontaminantes presentes en productos slidos.

Macrocontaminantes Plstico, metal, caucho > 2 mm Vidrio>2 mm Piedras> 5 mm Vidrio >16 mm deteccin (si/no)

Lmite (% en m.s.) < 0,2 < 0,02 <2 no

3.2.3 Niveles mximos de patgenos Los fertilizantes y acondicionadores orgnicos de origen no pedogentico, debern demostrar que no superan los siguientes niveles mximos de microorganismos patgenos: Salmonella sp: ausente en 25 g de producto final. Enterobacterias totales: menos de 1 000 UFC/g de producto final. Adems, si alguna de las materias primas es de origen vegetal, debern estar exentos de fitopatgenos de los gneros: Fusarium spp., Botrytis sp., Rhizoctonia sp., Phytophthora sp. y de nemtodos fitopatgenos. De igual manera deber garantizar la sanidad del material, en relacin con fitopatgenos especficos que pudieren estar presentes por el origen de las materias primas; por ejemplo: los subproductos de rechazo de la industria bananera deben estar libres de Pseudomonas solanacearum Cepa II y Micosphaerella fijiensis. 3.2.4 Carga microbiana Si el producto presenta contenidos de microorganismos benficos, debe declararse el recuento de microorganismos mesfilos aerobios, mohos y levaduras. 4. 4.1 TOMA DE MUESTRAS Y CRITERIO DE ACEPTACIN O DE RECHAZO TOMA DE MUESTRAS

Se efectuar de acuerdo con lo indicado en las NTC-ISO 8633, NTC-ISO 8634 y NTC 3795. 4.2 CRITERIO DE ACEPTACIN O RECHAZO

Si la muestra no cumple con uno o ms de los requisitos indicados en esta norma, ser rechazado el lote. En caso de discrepancia, se tendrn que repetir los ensayos sobre la muestra reservada para tales efectos. Cualquier resultado no satisfactorio en este segundo caso, ser motivo para rechazar el lote.

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5. 5.1 MTODOS DE ENSAYO MTODOS FISICOQUMICOS

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Los mtodos de anlisis fisicoqumicos del componente orgnico, de los productos clasificados como orgnicos, se basan en su mayora en metodologas de anlisis de suelos y de material vegetal. La razn de esto, es que dichos materiales o bien son de aplicacin directa al suelo o bien son de uso como sustratos para siembra directa. En consecuencia los resultados de los parmetros evaluados son comparables y compatibles con los de suelos especficamente en lo relacionado con los aspectos de salinidad y de comportamiento del material orgnico. 5.1.1 Preparacin de la muestra y cuantificacin de la humedad La preparacin de las muestras de los productos orgnicos, involucra la cuantificacin de la humedad, por cuanto todos los mtodos se desarrollan sobre la muestra seca, molida y tamizada. Si bien todos los mtodos de ensayo fisicoqumicos se realizan sobre la muestra seca, los resultados debern expresarse en base hmeda. 5.1.1.1 Equipos y materiales Estufa de secado Molino Tamiz No. 35 ASTM (0,5 mm) Cuarteador Recipientes para secado en estufa de aproximadamente 400 ml Balanza (con precisin de 0,01 g) Desecador

5.1.1.2 Procedimiento Se cuartea la muestra original. Se pesa el recipiente vaco en el cual se cuantificar la humedad. Se pesa en el recipiente una cantidad de muestra suficiente como para recolectar 300 g de material seco. (Si es necesario se coloca la misma muestra en dos recipientes) Lleve el recipiente a la estufa de secado y mantngalo a 70 C durante 24 h. Se saca de la estufa, se deja enfriar dentro de un desecador hasta peso constante. Se pesa Se muele el material en el molino. Se tamiza (tamiz No. 35 ASTM (05, mm)). Se empaca la muestra en recipientes debidamente rotulados. 8

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5.1.1.3 Clculos
% Humedad =

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peso muestra hmeda peso muestra sec a 100 peso muestra hmeda

5.1.2 Cuantificacin de la densidad real en productos orgnicos 5.1.2.1 Principio del mtodo El mtodo se basa en la cuantificacin de la masa de producto que se deposita libremente por unidad volumen, en un recipiente de volumen conocido. 5.1.2.2 Equipo y materiales Balanza (con precisin de 0,01 g) Probeta de vidrio de 50 cm3 de capacidad Embudo Soporte universal Pinzas para soporte o aro de hierro.

5.1.2.3 Procedimiento Pese la probeta vaca, limpia y seca. Tare la balanza. Se deja caer libremente una cantidad de material (preparado como se indica en el numeral 5.1.1) suficiente para obtener una lectura cercana a 30 cm3. Registre el volumen ocupado por el material. Se determina el peso de la probeta con el material. Se realizan tres determinaciones sobre muestras diferentes.

5.1.2.4 Clculos La densidad del producto se expresa en g/cm3 y se calcula segn la ecuacin:
W W Densidad real = 2 1 V

en donde W1 W2 V = = = peso en g de la probeta vaca. peso en g de la probeta con el material. volumen ocupado por el material en la probeta, expresado en cm
3

El resultado ser el promedio de las tres determinaciones.

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5.1.3 Cuantificacin de la capacidad de retencin de agua, pH y conductividad elctrica en un producto orgnico 5.1.3.1 Principio del mtodo El mtodo utilizado para evaluar el pH y la conductividad elctrica de un producto orgnico, es el mismo empleado para la caracterizacin de la salinidad en suelos, esto es en pasta de saturacin. Este mtodo permite tener resultados comparables entre los laboratorios, a la vez que aporta informacin muy cercana a la realidad, puesto que slo tiene la influencia del medio acuoso, situacin semejante al comportamiento del material al entrar en contacto con el suelo. Sobre el mismo mtodo de anlisis es posible obtener informacin acerca de la capacidad de retencin de agua del material (porcentaje de saturacin). A su vez el pH se puede determinar utilizando una relacin material orgnico agua, 1:10. 5.1.3.2 Equipos y materiales Recipiente de plstico de boca ancha. Esptula de madera. Papel de filtro cualitativo de filtracin rpida tipo S&S 595 u otro equivalente. Probeta de 100 ml. Potencimetro con electrodo de vidrio. Conductmetro. Erlenmeyer con desprendimiento lateral para filtracin al vaco. Recipientes para recolectar el filtrado. Embudo Buchner para vaco. Bomba de vaco.

5.1.3.3 Procedimiento 5.1.3.3.1 Procedimiento para determinar la capacidad de retencin de agua Pese aproximadamente 100 g de material preparado como se indica en el numeral 5.1.1, colquelos en el recipiente plstico. Aada pequeos volmenes de agua destilada o desmineralizada (utilizando una probeta). Se agita continuamente con la esptula de madera, esto con el fin de eliminar aire y formar poco a poco una masa. De vez en cuando se debe consolidar la muestra golpeando el recipiente suavemente sobre la superficie de trabajo. Se adiciona agua hasta llegar a un punto de equilibrio (punto de saturacin) cuya evidencia est dada por un contenido de agua suficiente que refleja un brillo metlico sobre la superficie, estado en el cual no absorbe ms agua ni la escurre, aunque habr un poco de agua libre que asciende a la superficie cuando se deja en reposo. 10

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Se registra el volumen de agua utilizado. Tambin es posible pesar la totalidad del producto slido con el agua a punto de saturacin. Se deja en reposo durante 2 h. La pasta no debe acumular agua en la superficie, perder su brillo o endurecerse durante el reposo. Si la pasta es demasiado hmeda se debe agregar ms material, registrando el peso adicional, o si es demasiado dura o se ha perdido el brillo se agrega ms agua mezclando nuevamente, registrando el volumen de agua aadido.

5.1.3.3.2 Procedimiento para medir el pH Se calibra el potencimetro con las soluciones reguladoras de pH 7,0 y pH 4,0 (soluciones buffer) Se introduce el electrodo de vidrio en la pasta saturada y se registra la lectura.

5.1.3.3.3 Procedimiento para medir la conductividad elctrica Se separacin del extracto. Se transfiere la pasta a un embudo Buchner o similar con papel de filtro cualitativo rpido y se aplica vaco. Se calibra el conductmetro con soluciones estandarizadas de cloruro de potasio 0,01 N y 0,02 N, conductividades aproximadas de 1,36 y 2,70 dS/m respectivamente. Se mide la conductividad elctrica en el filtrado. Registre y corrija las lecturas con base en la temperatura. Si el conductmetro no dispone de compensacin de temperatura, debe hacerse la correccin a 25 C por medio de las tablas correspondientes.

5.1.3.4 Clculos 5.1.3.4.1 Capacidad de retencin de agua (porcentaje de saturacin) Se expresa teniendo en cuenta la siguiente relacin:
A 100 100 % humedad % Saturacin = 100 Wm

en donde A Wm = = volumen en ml de agua utilizado para alcanzar el punto de saturacin. peso en g de la muestra seca Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

% humedad =

5.1.3.4.2 pH Se expresa en unidades de pH.

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5.1.3.4.3 Conductividad elctrica

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La conductividad elctrica es la lectura obtenida en el conductmetro con la respectiva correccin por temperatura y se expresa en dS/m. 5.1.4 Cuantificacin de cenizas por el mtodo de prdidas por volatilizacin 5.1.4.1 Principio del mtodo Esta determinacin es una aproximacin del contenido de materia orgnica presente en el producto, considerando que el 100% del producto menos la suma del porcentaje de cenizas, carbonatos y humedad refleja el contenido de materia orgnica. No obstante es importante verificar la presencia de otros componentes voltiles provenientes principalmente de fuentes nitrogenadas. 5.1.4.2.Equipos y materiales Balanza analtica Mufla Desecador Crisoles de porcelana

5.1.4.3 Procedimiento Pese aproximadamente 5 g del material preparado segn lo indicado en el numeral 5.1.1, en un crisol de porcelana. Se coloca el crisol en la mufla y se deja a 650 C durante 4 h. Al cabo de este tiempo, se deja enfriar y se pasa el crisol a un desecador. Se registra el peso final.

5.1.4.4 Clculos
peso final 100 % humedad % cenizas = 100 peso inicial 100
% prdidas por volatizacin = 100 % cenizas

en donde % humedad = contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.5 Cuantificacin de carbonatos 5.1.5.1 Principio del mtodo El mtodo descrito para la cuantificacin de carbonatos se fundamenta en la adicin de un volumen en exceso de una solucin normalizada de cido clorhdrico, el cual reacciona con los 12

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carbonatos presentes. El exceso de cido se valora con una solucin de hidrxido de sodio normalizada. 5.1.5.2 Equipos y materiales Balanza analtica. Bureta de 25 ml. Pipeta aforada de 25 ml. Erlenmeyer. Estufa.

5.1.5.3 Reactivos Solucin de cido clorhdrico (HCl) 0,5 N Solucin de hidrxido de sodio (NaOH) 0,5 N Solucin de fenolftalena.

5.1.5.4 Procedimiento Pese aproximadamente 0,5 g de material preparado como se indica en el numeral 5.1.1, en un erlenmeyer. Se adiciona 25 ml de HCl 0,5 N. Se lleva a ebullicin durante 5 min. Se deja enfriar y se titula con NaOH 0,5 N en presencia de fenolftalena.

5.1.5.5 Clculos
(V N HCl ) (VNaOH N NaOH ) 0,03100 100 % humedad % Carbonatos (CO3 = ) = HCl Wm 100

o
(V N HCl ) (VNaOH N NaOH ) 0,05 100 100 % humedad % Carbonatos (CaCO3 ) = HCl Wm 100

en donde VHCl NHCl VNaOH NNaOH Wm = = = = = volumen en ml utilizado de solucin de cido clorhdrico. normalidad de la solucin de cido clorhdrico. volumen en ml utilizado de solucin de hidrxido de sodio. normalidad de la solucin de hidrxido de sodio. Peso en g de la muestra seca

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5.1.6 Cuantificacin del carbono orgnico oxidable total 5.1.6.1 Principio del mtodo El mtodo descrito para la cuantificacin del carbono conocido como el mtodo de Walkley Black se fundamenta en la reduccin del in dicromato y el contenido de carbono se mide por el in dicromato no reducido, en consecuencia es un mtodo indirecto. Esto significa que est sujeto a interferencias tales como cloruros. El mtodo aqu enunciado es volumtrico, sin embargo colorimtricamente, previa estandarizacin de la curva respectiva. 5.1.6.2 Equipos y materiales Balanza analtica Erlenmeyer de 250 ml Bureta de 50 ml Pipetas aforadas de 20 ml y 10 ml puede hacerse tambin

5.1.6.3 Reactivos Agua destilada Solucin de dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1,0 N Acido sulfrico concentrado (H2SO4) Acido ortofosfrico concentrado Solucin indicadora de ortofenantrolina o difenilamina Solucin de sulfato ferroso amnico 0,5 N

5.1.6.4 Procedimiento (Este procedimiento se ilustra en la marcha analtica indicada en el Anexo A) Pese en un erlenmeyer de 250 ml entre 0,1 g y 0,5 g del producto preparado como se indica en el numeral 5.1.1, con aproximacin a 0,0001 g. Se adiciona 10 ml de solucin de dicromato de potasio 1,0 N, se deja en contacto unos minutos y se agregan 20 ml de cido sulfrico concentrado. Se agita manualmente durante 1 min y se deja enfriar durante 30 min. A continuacin se agrega agua (volumen no mayor de 50 ml ni menor de 20 ml), 5 ml de cido ortofosfrico y 5 gotas de solucin indicadora. Si al adicionar la mezcla oxidante (K2Cr2O7 y H2SO4) la solucin se torna verde brillante, se deben duplicar las cantidades aadidas o pesar menos producto segn sea el caso.

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Se prepara paralelamente un blanco de reactivos (10 ml de K2Cr2O7 1,0 N y 20 ml de H2SO4 concentrado). Este paso permite tener un blanco de reactivos y valora la normalidad de la solucin del sulfato ferroso amnico. Se titula el blanco de reactivos con la solucin de sulfato ferroso amnico. El cambio de color observado ser de un amarillo tpico de la solucin de dicromato, a un verde brillante. Se registra el volumen (debe ser aproximadamente 20 ml) Se titulan las muestras objeto del ensayo, con la solucin de sulfato ferroso amnico valorada. El cambio de color observado debe ser desde el amarillo (poco o ningn contenido de carbono) o desde un caf rojizo hasta color verde brillante.

5.1.6.5 Clculos 5.1.6.5.1 Normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico


Normalidad = 10 ml V

en donde 10 ml V = = volumen de solucin de dicromato 1N usado para el blanco volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin

5.1.6.5.2 Contenido de carbono orgnico oxidable total del producto


(Vb Vm ) x N x 0,003 x 100 100 % humedad % C.O.ox = Wm 100

en donde Vb Vm N Wm = = = = volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la muestra normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico. peso en g de muestra seca. Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

% humedad = NOTA

Se debe tener en cuenta el valor de la densidad en caso de haber tomado un peso de muestra.

5.1.7 Cuantificacin de la capacidad de intercambio catinico (C.I.C) 5.1.7.1 Principio del mtodo El mtodo descrito es el del acetato de amonio 1 N pH 7,0 el cual presenta algunas ventajas sobre los dems mtodos conocidos. Se basa en el reemplazo de las posiciones de intercambio por el in amonio y su posterior desplazamiento con una solucin de cloruro de sodio, produciendo cloruro de amonio el cual en presencia de formaldehdo forma estequiomtricamente un complejo nitrogenado y cido clorhdrico el cual es evaluado con hidrxido de sodio. 15

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5.1.7.2 Equipos y materiales Balanza

NTC 5167 (Primera actualizacin)

Frascos de vidrio o plstico de 250 ml Varillas de vidrio Bomba de vaco Embudos Buchner de porcelana Erlenmeyers con desprendimiento lateral Bureta Agitador recproco

5.1.7.3 Reactivos Solucin de acetato de amonio 1N pH 7,0 Etanol 95 % Solucin de cloruro de sodio (NaCl), 10 % Solucin de formaldehdo, 37 % neutralizada Solucin de hidrxido de sodio (NaOH), 0,1N valorada Fenolftalena

5.1.7.4 Procedimiento Pese en un frasco 5 g de muestra preparada como se indica en el numeral 5.1.1. Se adiciona 100 ml de acetato de amonio 1N pH 7,0 Se agita durante 2 h en agitador recproco o con una varilla de vidrio y se deja en contacto durante la noche. Se filtra al vaco Se lava lentamente el residuo sobre el embudo con 5 porciones de 10 ml de acetato de amonio. Luego se lava con 5 porciones de 10 ml cada una de etanol al 95 %. Se sustituye el erlenmeyer por otro limpio. Se lava con 5 porciones de 10 ml cada una, de solucin de NaCl al 10 %. Desconecte el erlenmeyer y adicione al filtrado 10 ml de formaldehdo al 37 %, unas gotas de fenolftalena y titule con NaOH 0,1N. 16

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-

NTC 5167 (Primera actualizacin)

Se lleva simultneamente un blanco de reactivos.

5.1.7.5 Clculos
(VNaOHmuestra) (VNaOHblanco) NNaOH 100 100 % humedad C.I .C. cmol (+)kg1(me/100g) = 100 Wm
en donde VNaOH muestra VNaOH blanco NNaOH Wm % humedad = = = = = Volumen en ml de NaOH empleado en la titulacin de la muestra. Volumen en ml de NaOH empleado en la titulacin del blanco. Normalidad de la solucin de NaOH. Peso en gramos de la muestra seca Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.8 Cuantificacin del nitrgeno total, nitrgeno orgnico, nitrgeno ntrico y nitrgeno amoniacal en materiales clasificados como orgnicos y orgnico minerales Se determinan de acuerdo con lo indicado en las NTC 370, NTC 208, NTC 209 y NTC 211, teniendo en cuenta que se parte de una muestra de ensayo preparada como se indica en el numeral 5.1.1. 5.1.9 Cuantificacin de fsforo y potasio en productos clasificados como orgnicos 5.1.9.1 Principio del mtodo Los mtodos de anlisis para la cuantificacin de los elementos minerales presentes en un producto orgnico, son los establecidos para cuantificar los mismos, en un material vegetal. Para tal efecto existen diferentes mtodos, el aqu descrito es un mtodo definido como mineralizacin por va seca. Por este mtodo es posible cuantificar fsforo, potasio, calcio, magnesio, sodio, hierro, cobre, manganeso, zinc, boro y azufre. Sin embargo estos elementos tambin se pueden determinar por mineralizacin va hmeda. 5.1.9.2 Equipos y materiales Balanza analtica. Mufla. Crisoles de porcelana. Plancha de calentamiento. Balones aforados de 50 ml. Embudos. Papel de filtro cualitativo.

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5.1.9.3 Reactivos -

NTC 5167 (Primera actualizacin)

cido clorhdrico concentrado (HCl).

5.1.9.4 Procedimiento Pese de 2,0 g a 2,5 g de muestra seca, molida y tamizada, en el crisol de porcelana. Se calcina en la mufla a 650 oC durante 4h. Se deja enfriar. Se humedece con agua destilada. Luego se adiciona 2 ml de HCl concentrado. A continuacin se coloca sobre la plancha de calentamiento y se evapora lentamente hasta sequedad, evitando salpicaduras. Se agrega 2 ml de agua destilada y 2 ml de HCl concentrado. Se calienta suavemente sin permitir que se seque. Deje enfriar. Se transfiere cuantitativamente a un baln aforado de 50 ml (puede o no ser necesario filtrar). Se lleva a volumen. Sobre este extracto se cuantifica el fsforo y el potasio.

5.1.9.5 Clculos Los clculos se realizan de acuerdo con lo establecido en las NTC 202 y NTC 234. 5.1.10 Cuantificacin de Fsforo, Potasio, Calcio, Magnesio, elementos menores y metales pesados en productos clasificados como orgnico-minerales y en enmiendas orgnicas no hmicas 5.1.10.1 Principio del mtodo Para los productos orgnico minerales, el mtodo de mineralizacin de los elementos tiene en cuenta su presencia en el material orgnico como en el mineral. Para el primer tipo de nutrientes se requiere un agente oxidante y en el caso de los de origen mineral es suficiente la digestin con cido clorhdrico. A su vez, con esta muestra es posible cuantificar los metales pesados tales como el Cadmio, Plomo, Cromo, Nquel, Mercurio y Arsnico, empleando los mismos mtodos con los que se cuantifican en suelos. La muestra se mineraliza en una mezcla de cido ntrico y clorhdrico (agua regia) y se evalan por absorcin atmica o por otro mtodo equivalente. 5.1.10.2 Equipos y materiales Balanza analtica. Plancha de calentamiento. 18

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Balones aforados de 50 ml. Embudos. Papel de filtro cualitativo.

NTC 5167 (Primera actualizacin)

5.1.10.3 Reactivos cido clorhdrico (HCl), concentrado. cido ntrico (HNO3), concentrado. Los dems reactivos especificados en las NTC 1860, NTC1369, NTC 234 y NTC 202.

5.1.10.4 Procedimiento Se pesan aproximadamente 5 g de la muestra preparada como se indica en el numeral 5.1.1. Se adicionan 35 ml de agua regia (HCl :HNO3) (3 :1). Se coloca sobre una plancha de calentamiento y se evapora lentamente hasta sequedad. Se adicionan 15 ml de agua regia. La mezcla se calienta durante 30 min ms y se deja enfriar. Se adicionan 100 ml de agua y se filtra empleando papel de filtro cualitativo previamente pesado. Se lava el papel de filtro con agua destilada o desmineralizada. El papel de filtro junto con el residuo se seca en estufa a 80 C, hasta peso constante. El filtrado se lleva a 250 ml con agua destilada y se cuantifica el contenido de fsforo, potasio, calcio, magnesio y los elementos menores de acuerdo con lo establecido en las NTC 1860, NTC 1369, NTC 234, NTC 202. Los metales pesados se cuantifican por absorcin atmica o un mtodo equivalente.

5.1.10.5 Clculos 5.1.10.5.1 Residuo insoluble en cido


W W2 100 % humedad % Residuo insoluble en cido = 3 100 W1 100 en donde W1 W2 = Peso en g de la muestra seca. = Peso en g del papel de filtro.

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W3

NTC 5167 (Primera actualizacin)

= Peso en g del papel de filtro junto con el residuo seco.

% humedad = contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

5.1.10.5.2 Fsforo, calcio, magnesio y elementos menores Los clculos se realizan de acuerdo con lo indicado en las NTC 1860, NTC 1369, NTC 234 y NTC 202. 5.1.11 Determinacin de la fraccin hmica Por definicin las materiales hmicos son de origen pedogentico y analticamente es la fraccin de materia orgnica (carbono orgnico) extrable o soluble en medio alcalino. En la actualidad, los productos cuyo componente principal son las sustancias hmicas, se comercializan en dos presentaciones: slidos y lquidos 5.1.11.1 Determinacin de la fraccin hmica en enmiendas orgnicas hmicas slidas 5.1.11.1.1 Cuantificacin del carbono orgnico del Extracto Hmico Total (CEHT) y de la solubilidad en medio alcalino 5.1.11.1.1.1 Principio del mtodo El extracto hmico total se define como el contenido de carbono total extrable en medio alcalino sobre un material de origen pedogentico, esto es de un suelo, de una leonardita o de un carbn oxidado qumicamente. La marcha analtica consignada en el Anexo C, esta diseada para llevar el material orgnico hmico slido a las condiciones fisicoqumicas bajo las cuales se comercializan las enmiendas orgnicas hmicas lquidas. 5.1.11.1.1.2 Equipos y materiales Agitador recproco Erlenmeyer de 250 ml Embudos de vidrio Papel de filtro cualitativo rpido (S&S 595) o centrfuga Tubos para centrfuga Pipetas aforadas de 2 ml y 5 ml Vasos de precipitados de 400 ml y 100 ml Bao de agua Bureta de 25 ml Recipientes de plstico para agitacin

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5.1.11.1.1.3 Reactivos -

NTC 5167 (Primera actualizacin)

Agua destilada o desmineralizada. Solucin de hidrxido de potasio (KOH) del 4 % p/v Solucin de dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1,0 N Acido sulfurico concentrado (H2SO4) Acido ortofofrico concentrado Solucin indicadora de ortofenantrolina o difenilamina Solucin de sulfato ferroso amnico 0,5 N

5.1.11.1.1.4 Procedimiento Se pesan 15 g del producto preparado como se indica en el numeral 5.1.1 y se adicionan 100 ml de solucin de KOH del 4 % p/v. Se agita durante 2 h en agitador recproco. Se filtra con papel cualitativo rpido o se centrfuga. Por cualquiera de los dos mtodos se obtiene un sobrenadante y un residuo insoluble. El residuo insoluble se somete a lavados sucesivos con agua sobre un embudo de filtracin hasta fin de alcalinidad. Se seca en estufa a 50 C y se pesa. Del sobrenadante obtenido se toma una alcuota de 2 ml en un erlenmeyer de 125 ml y se evapora en bao de Mara a 50 C (se debe tener cuidado que la temperatura no se exceda de los 70 C), o sobre plancha de calentamiento cuidando que no se produzcan salpicaduras. Se adiciona la mezcla oxidante (K2Cr2O7 y H2SO4) y una vez fro se procede como se describe en el numeral 5.1.6.4

5.1.11.1.1.5 Clculos 5.1.11.1.1.5.1 Clculo de la solubilidad del producto en medio alcalino


W 100 % humedad % slidos solubles en medio alcalino = R 100 100 Wm en donde WR Wm = = Peso en g del residuo seco Peso en g de la muestra seca

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NTC 5167 (Primera actualizacin)

5.1.11.1.1.5.2 Clculo del carbono del extracto hmico total


(Vb Vm ) x N x 0, 003 x 100 x 100 100 % humedad % C EHT = A x Wm 100 en donde % C EHT = Vb Vm = = gramos de carbono del extracto hmico total por 100 g de producto hmedo. volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico utilizado en el blanco volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico utilizado en la titulacin de la muestra en estudio. normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico. volumen en ml de solucin extractante de KOH alcuota de la solucin problema peso en g de la muestra seca Contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

N 100 A Wm

= = = =

% humedad =

5.1.11.1.2 Distribucin del carbono del extracto hmico total 5.1.11.1.2.1 Carbono orgnico en los cidos hmicos %C AH 5.1.11.1.2.1.1 Principio del mtodo El carbono de los cidos hmicos es el contenido de carbono precipitable a pH 2 a partir del extracto hmico total es decir del extracto en medio alcalino. De igual manera el contenido de carbono que no es precipitable a pH 2 y que se mantiene en solucin se denomina carbono de cidos flvicos. 5.1.11.1.2.1.2 Equipos y materiales Centrfuga o embudos de vidrio Papel de filtro cualitativo rpido Vasos de precipitados de 250 ml Potencimetro

5.1.11.1.2.1.3 Reactivos Agua destilada cido sulfrico concentrado (H2SO4)

5.1.11.1.2.1.4 Procedimiento Se toma una alcuota de 25 ml del extracto hmico total en un vaso de precipitados y se adiciona cido sulfrico concentrado hasta pH 2. Se coloca el vaso de precipitados con la solucin a 4 C por 24 h. Al cabo de este tiempo se centrifuga por 15 min a 4 000 rpm o se filtra. 22

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-

NTC 5167 (Primera actualizacin)

Si se centrfuga, se pasa el precipitado con agua destilada ayudado por un frasco lavador de chorro fino, a un vaso de precipitados de 50 ml. En caso de filtrar se procede de igual manera. Se seca el precipitado a 50 C en bao de Mara y se pesa. Se toma 0,1 g del precipitado seco y se procede como en el numeral 5.1.6.4.

5.1.11.1.2.1.5 Clculos
(Vb Vm ) x N x 0, 003 x Wt x 100 ml x 100 g 100 % humedad % C AH = 0,1 g x 25 ml x 15 g 100 en donde % C AH = Vb Vm = = gramos de carbono de cidos hmicos por 100g de muestra. volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin de la muestra en estudio. normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico. peso total del residuo en g. contenido de humedad del producto (vase el numeral 5.1.1.3)

N Wt

= =

% humedad =

5.1.11.1.2.2 Carbono orgnico en Acidos Flvicos %C AF


% C AF = % CEHT % CAH

5.1.11.2 Determinacin de la fraccin hmica en las enmiendas orgnicas hmicas lquidas 5.1.11.2.1 Cuantificacin del carbono orgnico del extracto hmico total 5.1.11.2.1.1 Equipos y materiales Se emplean los equipos y materiales descritos en el numeral 5.1.11.1.1.2. 5.1.11.2.1.2 Reactivos Agua destilada o desmineralizada. Solucin de dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1,0 N Acido sulfurico concentrado (H2SO4) Acido ortofofrico concentrado Solucin indicadora de ortofenantrolina o difenilamina Solucin de sulfato ferroso amnico 0,5 N

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5.1.11.2.1.3 Procedimiento

NTC 5167 (Primera actualizacin)

(Este procedimiento se ilustra en la marcha analtica indicada en el Anexo D) Se homogeneiza y verifica el pH. Se cuantifica el potasio. Se toma una alcuota de 2 ml en un erlenmeyer de 125 ml y se evapora en bao de Mara a 50 C (se debe tener cuidado que la temperatura no se exceda de los 70 C), o sobre plancha de calentamiento cuidando que no se produzcan salpicaduras. Se adiciona la mezcla oxidante (K2Cr2O7 y H2SO4) y una vez fro se procede como se describe en el numeral 5.1.6.4

5.1.11.2.1.4 Clculos
g / l CEHT =

(Vb Vm) N 0,003 1 000


A

en donde g/l C EHT = Vb Vm = = gramos de carbono del extracto hmico total por litro de producto. volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin de la muestra en estudio. normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico. alcuota tomada

N A

= =

5.1.11.2.2 Distribucin del carbono de extracto hmico total 5.1.11.2.2.1 Carbono orgnico de cidos hmicos g/l C AH 5.1.11.2.2.1.1 Procedimiento Se realiza de acuerdo con lo indicado en el numeral 5.1.11.1.2.1. 5.1.11.2.2.1.2 Clculos
g / l C AH = en donde % C AH = Vb Vm = = gramos de carbono de cidos hmicos por litro de producto. volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en el blanco volumen en ml de solucin de sulfato ferroso amnico gastado en la titulacin de la muestra en estudio. normalidad de la solucin de sulfato ferroso amnico.

(Vb Vm ) N 0,003 1 000


0,1 g 25

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5.1.11.2.2.2 Carbono orgnico de cidos flvicos g/l C AF


g / l C AF = g / l CEHT g / l CAH

5.2

MTODOS MICROBIOLGICOS

5.2.1 Enriquecimiento, aislamiento y deteccin de salmonella 1. Enriquecimiento previo no selectivo (regeneracin) Pese 25 g de muestra y virtalos en un erlenmeyer con 225 ml de caldo lactosado haciendo una suspensin. Incube a 35 C durante 24 h - 48 h. 2. Enriquecimiento selectivo En un erlenmeyer se disuelve 1,38 g de caldo tetrationato en 30 ml de agua destilada, se mezcla y calienta hasta ebullicin (NO UTILIZAR AUTOCLAVE), se enfra y cuando alcance los 45 C agregar solucin de yodo. Se mezcla todo y se adicionan 10 ml en dos o tres tubos previamente esterilizados. Preparacin de la solucin de yodo: se pesa 0,18 g de yodo y 0,15 g de yoduro de potasio, todo esto se adiciona a los 30 ml de caldo tetrationato. (Si se tiene la solucin de yodo preparada, se adicionan 0,6 ml de esta solucin a los 30 ml de caldo tetrationato) 5.2.1.1 Procedimiento Despus de la incubacin del caldo lactosado ms los 25 g de muestra por 24 h 48 h, se toma 1 ml de esta solucin y se lleva a los tubos con caldo tetrationato (1 ml por cada tubo). Tratar de adicionar el mililitro cuando el medio est ms o menos a 30 C - 35 C. Se incuba de 24 h a 48 h a 37 C. Aislamiento: se toma una asada llena de inculo de cada uno los tubos con el caldo y se extiende sobre medios de cultivo slidos (agar Bismuto Sulfito o agar Salmonella - Shigella), hasta agotar la muestra, de tal forma que se puedan obtener colonias aisladas. Se incuba a 37 C durante 24 h a 48 h.

5.2.1.2 Lectura En agar bismuto sulfito: colonias pardas con el centro negro, borde claro, precipitado negro con brillo metlico alrededor de las colonias: Salmonella, excepto Salmonella paratyphi A y Salmonella pollorum. En agar Salmonella Shigella: Colonias incoloras: Shigellas y la mayora de Salmonellas. Transparentes con el centro negro: Proteus y algunas Salmonellas. Reportar los resultados como presencia ausencia de Salmonella en 25 g de muestra.

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5.2.2 Recuento total de microorganismos mesfilos facultativos (Mtodo estndar de recuento en placa por siembra en profundidad) 5.2.2.1 Equipos y materiales Balanza analtica. Estufa de incubacin. Contador de colonias. Pipetas de 1 ml y 10 ml estriles. Cajas de petri estriles. Recipientes de vidrio resistentes a la temperatura del autoclave. Instrumentos para preparar la preparacin de muestras: cuchillos, pinzas, esptulas. Todo el material debe estar previamente esterilizado.

5.2.2.2 Reactivos Agua peptonada al 0,1 %: frascos con 90 ml y tubos con 9 ml, estriles. Agar para recuento en placa, fundido y enfriado a 48 C 2 C.

5.2.2.3 Procedimiento a) Preparar las muestras y las diluciones de los homogenizados de la siguiente manera: Pese 10 g de muestra representativa. Se aade 90 ml del diluyente (agua peptonada) y se mezcla durante 2 min como mximo. Se deja la mezcla en reposo, a temperatura ambiente, durante 15 min. De esta manera se obtiene la dilucin 10-1. Se mezcla nuevamente el contenido de la primera dilucin agitando y se toma con pipeta una alcuota de 1 ml y se lleva a un tubo con 9 ml del diluyente (agua peptonada). Se mezcla con otra pipeta diferente para homogeneizar la muestra. Esta es la dilucin 10-2. Se continua preparando el nmero de diluciones necesarias.

b)

Siembra de las muestras: Se toma con pipeta y por duplicado, en cajas de petri, alcuotas de 1 ml de las diluciones 10-1 , 10-2 , 10-3 , 10-4 , 10-5 y 10-6. Estas diluciones se recomiendan cuando no se conozca previamente el nmero aproximado de microorganismos presentes en la muestra. Otras 26

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veces se escogen aquellas que por experiencia permiten realizar adecuadamente los conteos. Inmediatamente despus de adicionar la alcuota, se agrega a cada placa de petri 12 ml a 15 ml de agar de cuenta grmenes, fundido y mantenido entre 45 C a 48 C. Luego se mezclan de manera homognea el inculo con el agar, agitando las placas en varias direcciones con movimientos cortos pero firmes; de esta manera se asegura que las colonias se separen y se puedan contar fcilmente.

5.2.2.4 Lectura y clculos de recuento Seleccione las placas de una misma dilucin que presente entre 30 y 300 colonias. Utilizando el contador de colonias, se cuentan todas las colonias. Se calcula el nmero de colonias visibles por gramo de muestra.

5.2.3 Recuento total de hongos y levaduras 5.2.3.1 Equipos y materiales Balanza analtica. Contador de colonias. Bao de Mara a 50 C. Cajas de petri estriles. Pipetas de 1 ml y 10 ml estriles. Recipientes de vidrio, resistentes a la temperatura del autoclave. Instrumentos para preparar las muestras: cuchillos, pinzas, tijeras, esptulas. Todo el material debe estar previamente esterilizado.

5.2.3.2 Reactivos Agua peptonada al 0,1 % estril: frascos con 90 ml y tubos con 9 ml. Oxitetraciclina Gentamicina Extracto de Levadura Agar (Agar OGY) fundido y mantenido entre 46 C a 48 C.

5.2.3.3 Procedimiento a) Se preparan las muestras y las diluciones de los homogenizados de la siguiente manera: Se pesa 10 g de la muestra. 27

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-

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Se aade 90 ml del diluyente (agua peptonada) y se homogeneiza o mezcla por 2 min como mximo. Se deja la mezcla en reposo, a temperatura ambiente durante 15 min. De esta manera se obtiene la dilucin 10-1. Se mezcla nuevamente el contenido de la primera dilucin agitando, y se toma con pipeta una alcuota de 1 ml a un tubo con 9 ml del diluyente (agua peptonada). Se mezcla con otra pipeta diferente para homogeneizar la muestra. Esta es la dilucin 10-2. Se continua preparando el nmero de diluciones necesarias.

b)

Siembra de las muestras: Se toma con una pipeta por duplicado, en placas de petri, alcuotas de 1 ml de las diluciones 10-1, 10-2, 10-3, 10-4 , 10-5 y 10-6. Las citadas diluciones se aconsejan en los casos en que no se conozca previamente el nmero aproximado de microorganismos presentes en la muestra; pero puede modificarse siempre que lo aconseje la cantidad de microorganismos esperados. Inmediatamente despus deadicioanar la alcuota, se agrega a cada placa de petri 12 ml a 15 ml del medio oxitetraciclina-gentamicina-extracto de levadura. Se mezcla el inculo con el agar, inclinando y girando las placas. Como prueba de control de la esterilidad, se vierte una cantidad de medio de cultivo sobre una placa de petri sin muestra (marcarla como Control). Se dejan las placas sobre una mesa en reposo hasta que se solidifique el agar. Se invierten las placas y se incuban a temperatura de laboratorio (temperatura ambiente) durante 3 d a 5 d.

5.2.3.4 Lectura y clculos de recuento Se seleccionan las placas de una misma dilucin que presente entre 30 y 300 colonias. Utilizando el contador de colonias, se cuentan todas las colonias. Se calcula el nmero de hongos y levaduras visibles por gramo de muestra.

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5.2.4 Recuento de enterobacterias 5.2.4.1 Equipos y materiales Balanza analtica.

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Estufa de incubacin a 35 C - 37 C. Contador de colonias. Instrumentos para preparar muestras: esptulas, tubos de ensayo, pipetas de 1 ml, cajas de petri (100 mm x 15 mm) estriles.

5.2.4.2 Reactivos Agar-cristal violeta-rojo neutro-bilis-glucosa. Bactident-oxidasa.

5.2.4.3 Procedimiento Se disuelven 10 g de la muestra en 90 ml del diluyente (agua peptonada) se deja en agitacin durante 5 min (Esta es la dilucin 101). Con pipeta de 1 ml se mezcla con cuidado aspirando varias veces. Se transfiere 1 ml de la dilucin 101 en un tubo con 9 ml de diluyente, se descarta la pipeta, esta es la dilucin 102. Se repiten los dos ltimos pasos hasta realizar el nmero de diluciones necesarias. Se toma con la pipeta y por duplicado en placas de petri, alcuotas de 1 ml de la serie de diluciones. A continuacin se agrega aproximadamente 10 ml del medio cristal violeta rojo neutro - bilis-glucosa, fundido enfriado a 46 C - 48 C, a cada una de las placas. Se mezclan las diluciones con el medio, inclinando y girando las placas en varias direcciones. Como prueba de esterilidad, se vierte una cantidad de medio de cultivo sobre una placa de petri sin muestra (control). Se dejan las placas sobre la mesa hasta que el medio se solidifique. Una vez solidificado el medio de las placas se agrega otra vez, aproximadamente 8 ml del medio fundido y enfriado a 46 C - 48 C. Despus de solidificada esta nueva etapa, se invierten las placas y se incuban a 35 C - 37 C durante 21 h 3 h.

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5.2.4.4 Lectura y clculo de los recuentos Se seleccionan las placas que contengan entre 30 y 300 colonias violetas, rodeadas por precipitado rojo violeta. Se toman mnimo tres colonias y se realiza a cada una de ellas la prueba de la oxidasa. Se calcula de acuerdo a las diluciones, el nmero de enterobacterias viables por gramo de muestra.

5.3

INFORME DE LOS ENSAYOS

El informe de los ensayos deber incluir los siguientes datos: 6. 6.1. Identificacin de la muestra. Condicin fsica de la muestra. Referencia al mtodo utilizado. El resultado y el mtodo de expresin. Cualquier caracterstica inusual durante la determinacin.

EMPAQUE Y ROTULADO EMPAQUE

El empaque debe ser tal que garantice la calidad el producto contenido. 6.2 ROTULADO

El rotulado debe cumplir con la NTC 40. 7. 7.1 APNDICE REFERENCIAS NORMATIVAS

Los siguientes documentos normativos referenciados son indispensables para la aplicacin de este documento normativo. Para referencias fechadas, se aplica nicamente la edicin citada. Para referencias no fechadas, se aplica la ltima edicin del documento normativo referenciado (incluida cualquier correccin). NTC 40:2003, Fertilizantes y acondicionadores de suelos. Etiquetado. NTC 202:2001, Mtodos cuantitativos para la determinacin de potasio soluble en agua, en abonos o fertilizantes de materias para su fabricacin. NTC 208:1999, Abonos o fertilizantes. Mtodo cuantitativo de determinacin del nitrgeno ntrico. 30

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NTC 209:1996, Abonos o fertilizantes. Mtodo de ensayo cuantitativo para la determinacin del nitrgeno amoniacal y de nitratos. NTC 211:1997, Abonos o fertilizantes. Mtodo cuantitativo de determinacin del nitrgeno amoniacal por destilacin. NTC 234:1996, Abonos o fertilizantes. Mtodo de ensayo para la determinacin cuantitativa de fsforo. NTC 370:1997, Abonos o fertilizantes. Determinacin del nitrgeno total. NTC 627:1972, Abonos o fertilizantes. Determinacin del cobre. NTC 642:1972, Abonos o fertilizantes. Determinacin del cobalto. NTC 650:1997, Abonos o fertilizantes. Determinacin del boro. NTC 1369:1976, Fertilizantes. Determinacin de cinc, cobre, hierro, manganeso, calcio y magnesio por absorcin atmica. NTC 1860:1997, Productos qumicos para uso agropecuario. Abonos o fertilizantes. Mtodo de ensayo para determinar el contenido de boro. Mtodo de azometina-h. NTC 1927:2001, Fertilizantes y acondicionadores de suelos. Definiciones, clasificacin y fuentes de materias primas. NTC-ISO 8633:1995, Fertilizantes slidos. Mtodo de muestreo simple para lotes pequeos. NTC-ISO 8634:1995, Fertilizantes slidos. Plan de muestreo para la evaluacin de una entrega grande. NTC 3795:1995, Fertilizantes slidos. Derivacin de un plan de muestreo para la evaluacin de una entrega grande.

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ANEXO A (Informativo)

MARCHA ANALTICA PARA LA CUANTIFICACIN DEL CARBONO ORGNICO OXIDABLE TOTAL EN UN PRODUCTO ORGNICO U ORGNICO MINERAL SLIDO

0,1 g de producto o residuo slido

Blanco de reactivos

Adicionar 10 ml de K2Cr2O7 1,0N

Dejar en contacto por unos minutos

Adicionar 20 ml de H2SO4 concentrado

Agitar manualmente durante 1 min

Dejar enfriar y adicionar agua

Adicionar 5 gotas de indicador

Titular con sulfato ferroso amnico 0,5 N

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ANEXO B (Informativo)

CRITERIOS PARA EVALUAR LA PRESENCIA DE SUSTANCIAS HMICAS EN ENMIENDAS ORGNICAS SEGN LOS PARMETROS DE ESTA NORMA

15 g de producto

Llevar a 100 ml con agua destilada

El producto es soluble ? Si No

Medir pH

Pesar 15 g

pH del agua utilizada

pH alcalino

Adicionar 100 ml de KOH 4 %

?
No hay sustancias hmicas Si hay sustancias hmicas El producto es soluble mnimo 50% Si Consultar el Anexo D No cumple la norma No

Cumple la norma

Consultar el Anexo C

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ANEXO C (Informativo)

MARCHA ANALTICA PARA LA CUANTIFICACIN DE LA FRACCIN HMICA EN ENMIENDAS ORGNICAS HMICAS SLIDAS
15 g de material

Adicionar 100 ml de KOH 4%

Agitar por 2h (agitador recproco)

Centrifugar o filtrar

Sobrenadante

Residuo insoluble

Lavar con agua Tomar alcuota de 2ml Tomar alcuota de 25 ml (en vaso de 50 ml o tubo de centrfuga de 50 ml) Secar y pesar Secar Adicionar H2SO4 hasta pH 2

Cuantificar el Carbono orgnico % C EHT

Dejar en reposo durante 24 h a 4C

Filtrar o centrifugar

Sobrenadante, cidos flvicos

Residuo, cidos hmicos

Cuantificar el carbono de cidos flvicos % C AF

Secar y pesar

Tomar 0,1 g del residuo

Cuantificar el carbono de cidos hmicos % CAH

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ANEXO D (Informativo)

MARCHA ANALTICA PARA LA CUANTIFICACIN DE CARBONO ORGANICO EN LA FRACCIN HUMICA EN ENMIENDAS ORGANICAS HUMICAS LQUIDAS

Homogeneizar y verificar el pH

Cuantificar el potasio

Pesar 0,5 g o tomar una alcuota de 2 ml

Tomar una alcuota de 25 ml (en vaso de 50 ml o tubo de centrfuga de 50 ml)

Secar

Adicionar H2SO4 hasta pH 2

Cuantificar el carbono orgnico % C EHT

Dejar en reposo durante 24 h a 4C

Filtrar o centrifugar

Sobrenadante, cidos flvicos

Precipitado, cidos hmicos

Cuantificar el carbono de cidos flvicos %C AF

Secar y pesar

Tomar 0,1 g del residuo

Cuantificar el carbono de cidos hmicos % C AH

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ANEXO E (Informativo) BIBLIOGRAFA

ALMENDROS G. Mtodos de Anlisis del Consejo Superior de Investigaciones Cientficas, Centro de Ciencias Medio Ambientales. E- mail ccma@cc.csic.es. ALMENDROS, G., A. POLO., E. DORADO y J. GALVAN. 1982. Estudio al microscopio electrnico de transmisin de diferentes tipos de sustancias hmicas y prehmicas y de sus derivados organo-metlicos. Agrochimica. Vol XXVI: 305-318. ALMENDROS, G. POLO, A. y DORADO, E. 1983. Estudio de la Materia Orgnica de Diversos Tipos de Lodos Residuales de la Provincia de Madrid. Agrochimica, 27, 439-454. ALMENDROS, G. y F. VELASCO. 1984. Influencia de la vegetacin en la evolucin del humus de las Tierras Pardas Meridionales sobre areniscas trisicas de la provincia de Guadalajara. Revue D Ecologie et de Biologie du Sol. 21: 415-429. ANDREUX, F. 1986. Genese et propietes des macromolecules humiques. D.E.A. Agro Eco Pedologie. Notas de curso. BARRIUSO, E. 1981. Contribution a letude quantitative et qualitative des methodes disolement des composes humiques des sols. D.E.S. de Pedologie. BARRIUSO, E., J.M. PORTAL., P. FAIVRE and F. ANDREUX. 1984. Separation des composes humiques et des associations organo-minerales dun sol ocre humifere a structre microagregee (Umbric Dystrochrept): influence du pH des reactifs dextraction. Pedologie, XXXIV : 257-274. BENDECK, M. 1978. Caracterizacin de los Acidos Hmicos de dos suelos colombianos. Tesis de Pregrado. Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias Departamento de Qumica. Bogot. BENDECK, M. 1992. Caracterizacin del Humus en Suelos del Noroccidente del Caquet. Tesis (Magister Scientiae). Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Agronoma, Bogot. BLANCO, M. y ALMENDROS, G. 1995. Evaluation of Parameters Related to Chemical and Agrobiological Qualities of Wheat-Straw Composts Including Different Additives. Bioresource Technol.,51, 125-134. BRUCKERT, S. 1982. Analysis of the organo-mineral complexes of soils. In : Bonneau, M and B. Souchier. (ed.), Pedologie. Tomo II. Constituents and Properties of soils. pp, 217-235. Academic Press. London, England. COLEMAN, D.C., J. M. OADES y G. UEHARA. 1989. Introduction Soil organic matter : tropical vs. temperate. En: Coleman D.C., M. Oades y G. Uehara (eds.), Dynamics of Soil Organic Matter in Tropical Ecosystems, pp 1-5. University of Hawaii Press, Honolulu, Hawaii USA. DUCHAFOUR, Ph. 1970. Prcis de Pedologie. 3. ed. Masson. pp. 481.

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DUXBURY, J. M., M. S. SMITH and J. W. DORAN. 1989. Soil organic matter as a source and a skin of plant nutrients. En: Coleman D. C., M. Oades y G. Uehara (eds.), Dynamics of Soil Organic Matter in Tropical Ecosystems, University of Hawaii Press, Honolulu, Hawaii USA. pp 33-67. FARIAS, D. 1997. Caracterizacin Qumica de un Proceso de Compostaje. Tesis (Qumica). Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias, Bogot. FLAIG, W. 1971. Organic Compounds in Soil. Soil Sci. ,111, 19-33. FLAIG, W., H. BEUTELSPACHER and E. RIETZ. 1975. Chemical Composition and Physical Properties of Humic Substances. En: Geieseking, J.E. (ed.), Soil Components. Vol I. Organic Components, Illinois, USA. pp 4-51. GIUSQUIANI, P., PAGLIALI, M. GIGLIOTTI, G., BUSENELLI, D. y BENETTI, A. 1995. Urban Waste Compost: Effects on Physical, Chemical and Biochemical Soil Properties. J. Environ. Qual., 24, 175-182. KLINKA, K., R.N. GREEN., R. L. TROWBRIDGE. y L. E. LOWE. 1981. Taxonomic classification of humus forms in ecosystems of British Columbia. First Aproximation. Province of British Columbia. Ministry of Forest, Vancouver, Canada. pp. 54. HARADA, Y. y INOKO, A. 1980. The measurement of the cation-exchange capacity of composts for the estimation of the degree of maturity. Soil Sci. Plant Nutr., 26, 127-134. IGLESIAS, E. y PEREZ V. 1992. Determination of Maturity Index for City Refuse Compost. Agric. Ecosyst. Environ., 38, 331-343. INSTITUTO GEOGRFICO AGUSTN CODAZZI (I.G.A.C.). 1990. Mtodos Analticos del Laboratorio de Suelos. Caracterizacin de Materia Orgnica. Myriam Bendeck Lugo. Subdireccin Agrolgica. Bogot. JACKSON, M. 1970. Anlisis Qumico de Suelos. Ed. Omega. Barcelona. MALAVOLTA, E., VITTI, G. e OLIVEIRA, S. 1989. Avaliao do Estado Nutricional das Plantas: Princpios e Apliaces. Associao Brasileira para Pesquisa da Potasa e do Fosfato. Piracicaba, Brasil. MEHLICH, A. 1984. Photometric determination of humic matter in soils, a proposed method. Communications in Soil Science Plant Anal. 15: 1417-1422. MELGAREJO, M. 1997. Evaluacin de los Parmetros de Calidad en Humus de Lombriz y Composts Obtenidos a partir de Diferentes Sustratos. Tesis (Qumica). Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Ciencias, Bogot. NOGALES, R., GALLARDO-LARA, F. y DELGADO, M. 1982. Aspectos Fisicoqumicos y Microbiolgicos del Compostaje de Basuras Urbanas. An. Edafol. Agrobiol., 41, 1159-1174. PARNES, R. 1990. Fertile Soil. A Growers Guide to Organic & Inorganic Fertilizers. AgAccess, California.

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SANCHEZ, P. A., Ch. A. PALM, L. T. SZOTT., E. CUEVAS and R. LAL. 1989. Organic input management in tropical agroecosystems. En: Coleman, D. C., M. Oades y G. Uehara (eds.), Dynamics of Soil Organic Matter in Tropical Ecosystems, pp. 125-152. University of Hawaii Press, Honolulu, Hawaii USA. SEVINK, J. y J. M. LIPS. 1987. Humus forms. Humus description sampling. Documento de Discusin Proyecto Tropembos. STEVENSON, F. 1982. Humus Chemistry: Genesis, Composition, Reactions. Wiley, New York, USA. STEVENSON, F. J. 1986. Cycles of Soil. Carbon, Nitrogen, Phosphorus, Sulfur, Micronutrients. A Wiley-Interscience. STEVENSON, F. J. y E. T. ELLIOT. 1989. Methodologies for assessiong the quantity and quality of soil organic matter. En: Coleman, D. C., M. Oades y G. Uehara (eds.), Dynamics of Soil Organic Matter in Tropical Ecosystems. University of Hawaii Press, Honolulu, Hawaii USA. pp 173-199. TROPICAL SOIL BIOLOGY AND FERTILITY. (TSBF). 1988. Methods handbook. ANDERSON, J. M. (ed.), Department of Biology Science, Exeter, Devon. UK. VELASCO, F y P. de MINGO. 1981. Distribucin de la materia orgnica libre y ligada y de las fracciones de humina en suelos climcicos y en suelos degradados. Anales de Edafologa y Agrobiologa. Tomo XL: 179-189. WILDE, S. A. 1971. Forest Humus : Its classification on a genetic basis. Soil Science 111 : 1-12. ISO 7851-1983. Fertilizers and soil conditioners. Classification. Legislacin de fertilizantes de Espaa (Comunidad Europea); Reglamento de fertilizantes de Italia (CE), Reglamento de Fertilizantes de Costa Rica. Documento Impacto Ambiental: Gallinaza y Compost de: Acevedo, Liliana; Moreno, Mara Eugenia; Morales, Gladis; Acevedo, Miguel y Pelez, Carlos. Investigadores del grupo GIEM de la Universidad de Antioquia. Aline R, M.; Vega, L. C. 8 Curso Internacional de Microbiologa e Higiene de los Alimentos. Agosto 15 29 /82 Lima Per. Centro Latinoamericano de Enseanza e Investigacin de Bacteriologa Alimentaria (CLEIBA) Bacteriological Analytical Manual Online. Feb. 2001. http://www.cfsan.fda.gov/~ebam/bam-toc.html Brock, T. Microbiologa. 6 edicin. Prentice Hall. Mayo 1991. 956 p. Escobar, M. B. Programa Latinoamericano de Microbiologa e Higiene de los Alimentos. Manual de Tcnicas y Procedimientos. Universidad de Antioquia, Facultad Nacional de Salud Pblica, Medelln, 1993. 392 p.

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Gonzlez, G., Holgun, G. Manual sobre Tcnicas Microbiolgicas. Universidad de Antioquia Facultad de Qumica Farmacutica. Medelln, 1990. 232 p. MERCK. Manual de medios de cultivo. Pag. 58-59, 122, 141-142, 271-277. Mtodos normalizados para el anlisis de aguas potables y residuales. Dcimo sptima edicin. U.S.A pp. 9-1, 9-260 Pelczar, M. Microbiologa. 4 edicin. Mc Graw Hill. Mxico, 1992. 826 p. Smith, D., and Onions, A.H. S. IMI Tecchnicals Handbooks N2. The Preservation and Maintenance of Living Fungi. Second Edition. Standard Methods. 17 edition. 1989 U. S. Pharmacopeia. The Official Compendia of Standards. January 01/2000. Philadelphia, PA. P. 1809, 1830. Velsquez, L.F, Saldarriaga Y. Manual de Laboratorio de Microbiologa General. Universidad de Antioquia. Medelln, 1986. 110 p. Wistreich, G., Lechtman, M. Laboratory Exercises in Microbiology. 4 edition. U.S.A 1981; 420 p. www.epa.gov

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ANEXO F (Informativo)

El anteproyecto de norma sobre clasificacin de los materiales orgnicos y mtodos de anlisis qumicos fue aportado por la doctora Myriam Bendeck Lugo, Qumico, Director Tcnico de Agrilab Ltda, con base en su experiencia e investigacin en el rea y apoyada en la bibliografa referenciada. Los mtodos de anlisis biolgicos fueron aportados por el doctor Carlos Pelez, Profesor de la Universidad de Antioquia. Adicionalmente se agradece el apoyo de los doctores: Dr. Ral Zapata, profesor de la Universidad Nacional de Medelln y Presidente de la Sociedad Colombiana de la Ciencia del Suelo; Dr. Jos Rincn, ex profesor de qumica de carbones de la UN, Bogot; Ingeniero Agrnomo Ph. D. Jairo Gmez Zambrano, profesor U.N. Palmira; Francisco Ramrez, experto en Gestin Tecnolgica; Productores de Abonos Orgnicos de Medelln; ABINGRA Ltda., Valagro Andina Ltda., HQS Importa-Exporta (Productores de Aminocidos);

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