Qumica Biolgica I Hidratos de Carbono

2012

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CAPTULO 1

HIDRATOS DE CARBONO

ndice


1.1. Generalidades 2
1.2. Funcin biolgica 2
1.3. Definicin 2
1.4. Clasificacin 2
1.4.1. Monosacridos 3
1.4.2. Derivados de monosacridos 9
1.4.3. Disacridos 12
1.4.4. Polisacridos 13
1.4.4.1. Homopolisacridos 13
1.4.4.2. Heteropolisacridos 16
1.4.5. Peptidoglicanos 19
1.4.6. Proteoglicanos 21
1.4.7. Glicoprotenas 21
1.4.8. Glicolpidos 25
1.5. Anlisis de carbohidratos 26
1.5.1. Determinacin de carbohidratos 26
1.5.1.1. Oxidacin de azcares 26
1.5.1.2. Deshidratacin de azcares 27
1.5.1.3. Reaccin con la o-toluidina 27
1.5.2. Secuenciacin de oligosacridos 27
1.6. Bibliografa 29

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CAPTULO 1: HIDRATOS DE CARBONO

1.1. Generalidades

Los hidratos de carbono, tambin llamados carbohidratos o glcidos, son importantes componentes de
los seres vivos. Abundan en tejidos vegetales, en los cuales forman los elementos fibrosos o leosos de su
estructura y los compuestos de reserva nutricia de tubrculos, semilla y frutos. Tambin se encuentran am-
pliamente distribuidos en tejidos animales, disueltos en los humores orgnicos, y en complejas molculas
con diversas funciones.
Los vegetales sintetizan hidratos de carbono a partir de CO
2
y H
2
O, captando energa lumnica en un
proceso denominado fotosntesis. Estos glcidos son ingeridos por animales, y en gran parte utilizados como
combustible. En la alimentacin humana, los carbohidratos son los principales proveedores de energa. En
una dieta equilibrada, los hidratos de carbono deben proveer entre 50 y 60% del total de caloras.

1.2. Funcin biolgica

Los sacridos desempean una gran variedad de funciones en los organismos vivos. De hecho, el prin-
cipal ciclo energtico de la biosfera depende en gran parte del metabolismo de los hidratos de carbono.
Antes de pasar a la estructura de los hidratos de carbono, examinemos brevemente este ciclo. En la fotosn-
tesis, las plantas captan CO
2
de la atmsfera y lo fijan en hidratos de carbono. La reaccin bsica puede
describirse (de una manera enormemente simplificada) como la reduccin del CO
2
a hidratos de carbono, en
este caso representados por la glucosa, producida por la luz. Gran parte de estos hidratos de carbono se
almacenan en las plantas en forma de almidn o celulosa. Los animales obtienen los hidratos de carbono
ingiriendo las plantas o los animales herbvoros. As pues, los hidratos de carbono sintetizados por las plan-
tas pasan a ser en ltima instancia las principales fuentes de carbono de todos los tejidos animales. En la
otra mitad del ciclo, tanto las plantas como los animales realizan, a travs del metabolismo oxidativo, una
reaccin que es la inversa de la fotosntesis, mediante la cual producen de nuevo CO
2
y H
2
O (fig. 1-1). Esta
oxidacin de los hidratos de carbono es el principal proceso de generacin de energa del metabolismo.


Fig. 1.1. Ciclo energtico de la vida. En la fotosntesis, las plantas utili-
zan la energa de la luz solar para combinar CO
2
y H
2
O en hidratos de
carbono, liberando O
2
en el proceso. En la respiracin, tanto las plantas
como los animales oxidan los hidratos de carbono elaborados por las
plantas, liberando energa y volviendo a formar CO
2
y H
2
O.




Por cruciales que resulten el almacenamiento y la generacin de energa, no son stas las nicas funcio-
nes de los hidratos de carbono. Muchos materiales estructurales biolgicos son polisacridos en parte o en
su totalidad. Como ejemplos importantes de ello cabe citar la celulosa de las plantas leosas, las paredes
celulares de las bacterias, y los exoesqueletos de los insectos y otros artrpodos. Los polisacridos de las
superficies celulares o los que estn adheridos a las protenas desempean un papel diferente, que es facilitar
el reconocimiento molecular. As pues, al igual que las protenas, los hidratos de carbono son molculas
extremadamente verstiles, esenciales para todo tipo de organismo vivo.

1.3. Definicin

Los glcidos estn compuestos por carbono, hidrgeno y oxgeno y se definen como polihidroxialdeh-
dos o polihidroxicetonas. Es decir, son compuestos con una funcin aldehdo o cetona y varias funciones
alcohlicas. Tambin se consideran glcidos las sustancias que originan esos polihidroxialdehdos o polihi-
droxicetonas cuando son sometidas a hidrlisis.

1.4. Clasificacin

Segn la complejidad de la molcula, los hidratos de carbono se clasifican en monosacridos, oligo-
sacridos y polisacridos. A este grupo se agregan otras biomolculas que presentan en su estructura,
adems de la porcin glucdica, otra porcin qumicamente diferente: derivados de monosacridos, hetero-
polisacridos, peptidoglicanos, glicoprotenas y glicolpidos.
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1.4.1. MONOSACRIDOS

Los azcares simples responden a la definicin de polihidroxialdehdos (aldehdos polialcoholes) o po-
lihidroxicetonas (cetonas polialcoholes). En general, los glcidos se distinguen con el sufijo osa. Cuando
poseen funcin aldehdo, los monosacridos se llaman aldosas; si tienen funcin cetona, cetosas.
Tambin se acostumbra designarlos triosas, tetrosas,
pentosas, hexosas, de acuerdo con el nmero de carbonos
en su molcula. Comnmente se suele combinar en el
nombre la indicacin del nmero de carbonos y la funcin.
As, una aldohexosa es un glcido con una funcin aldeh-
do y seis carbonos, una cetopentosa tiene una funcin
cetona y cinco carbonos.
Los monosacridos ms simples son triosas (Fig. 1-2),
de las cuales existen una aldotriosa, el gliceraldehdo, y
una cetotriosa, la dihidroxiacetona
Las tetrosas, pentosas, hexosas, etc., se consideran de-
rivadas de estas triosas por sucesiva adicin de grupos
=CH-OH, en cadena lineal, entre el grupo aldehdo o cetona y la funcin alcohlica adyacente.
Los monosacridos son sustancias reductoras, particularmente en medio alcalino. Los grupos aldehdo
o cetona son responsables de esta propiedad. Algunas reacciones de reconocimiento de monosacridos utili-
zadas en el laboratorio, aprovechan esa capacidad reductora.


Fig. 1-3. Aldosas serie D




Gliceraldehdo Dihidroxiacetona
(Aldotriosa) (Cetotriosa)

Fig. 1-2. Triosas
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Como las aldosas se consideran derivadas del gliceraldehdo, existen dos familias de estos monosacri-
dos: una relacionada con el D-gliceraldehdo, y la otra con el L-gliceraldehdo. En la figura 1-3 se represen-
tan las aldosas derivadas del D-gliceraldehdo. Todas ellas tienen la misma configuracin en el carbono
secundario prximo a la funcin alcohol primario o, en otros trminos, en el carbono secundario ms aleja-
do de la funcin aldehdo. En las frmulas desarrolladas de la figura 1-3 se representa hacia la derecha el
OH de ese carbono, caracterstica comn a todas las aldosas de la familia o serie D.
Para las cetosas tambin se considera la existencia de dos series, D y L, segn la configuracin del car-
bono secundario ms alejado de la funcin cetosa. La figura 1-4 representa las cetosas de la serie D. La
notacin D slo indica la familia o serie a la cual pertenece el compuesto, no necesariamente el signo de
la rotacin que imprime a la luz polarizada. Por ejemplo, la cetohexosa D-fructosa es fuertemente levgira y
le corresponde la notacin D (-) fructosa.
La diferenciacin de los glcidos en estas series o familias tiene importancia biolgica. Los organis-
mos superiores prcticamente slo utilizan y sintetizan glcidos de la serie D. Son muy escasos los com-
puestos de la serie L presentes en estructuras celulares o en humores orgnicos del ser humano.


Fig. 1-4. Cetosas serie D
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Monosacridos de inters en bioqumica humana

No todos los monosacridos presentados en las figuras 1-3 y 1-4 tienen importancia desde el punto de
vista de la bioqumica del ser humano. Slo consideraremos algunos de ellos.
Las dos triosas, gliceraldehdo y dihidroxiacetona, son compuestos de inters; como steres de fosfato
se generan en el organismo durante transformaciones metablicas de hidratos de carbono y otras sustancias.
Entre las aldopentosas mencionaremos la ribosa y entre las aldohexosas, glucosa, galactosa y manosa. Fruc-
tosa es la cetosa de mayor importancia.


Tabla 1-1. Ejemplos de presencia y funciones bioqumicas de los monosacridos.

Algunos de estos monosacridos tienen otras funciones adicionales que no se indican.



GLUCOSA
Llamada tambin dextrosa en razn de sus propiedades dextrorrotatorias, es el monosacrido ms
abundante y de mayor importancia fisiolgica, utilizado como combustible por las clulas. Se encuentra
libre en frutos maduros y tambin en sangre y humores orgnicos de los vertebrados. La unin de muchas
molculas de glucosa forma polisacridos como almidn, celulosa, glucgeno, etc. Tambin integra disac-
ridos de inters, entre ellos sacarosa y lactosa.
Estructura cclica. Se ha presentado a los monosacridos como aldehdos o cetonas con cadena lineal
de carbonos. Sin embargo esa estructura no explica algunas de las propiedades observadas en estas sustan-
cias.
La existencia de formas o y |, as como la reactividad anmala del grupo aldehdo o cetona de los mo-
nosacridos, se debe a la formacin de molculas cclicas. La orientacin de los enlaces entre carbonos
determina aproximacin de los extremos de la cadena. La funcin aldehdo del primer carbono queda cerca-
na al hidroxilo del carbono 5, y puede formar una unin tipo hemiacetal (un hemiacetal resulta de la reac-
cin entre aldehdo o cetona y alcohol). Se genera as un anillo heterocclico de seis elementos (fig. 1-5).
Los anillos con ciclo hexagonal se consideran derivados del ciclo heterocclico pirano y aquellos con anillo
pentagonal, del furano. Por esto se refiere a formas piranosa o furanosa de monosacridos, segn la con-
formacin que adopten. En solucin, la piranosa es ms estable; sin embargo, suelen encontrarse en la natu-
raleza azcares en forma furanosa.
En la estructura cclica expuesta, el carbono 1 no posee ya la funcin aldehdo. Sin embargo, por ruptu-
ra del ciclo se genera esta funcin. Es por ello que las reacciones tpicas de aldehdos se dan con mayor
lentitud en estos azcares. Se dice que el carbono 1 de las aldosas cclicas posee una funcin aldehdo po-
tencial, responsable de la capacidad reductora de estos glcidos.

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6
C
C
C
C
CH
2
OH
OH
HO H
H OH
H OH
H
C H
O
C
HO
H
C
H
C
CH
2
OH
OH
C
H
OH
C
OH
H O
H
6
5
4
3
2
1
C
HO
H
C
H
C
CH
2
OH
C
H
OH
C
OH
H
O
H
6
5
4
3
2
1
H HO
C
HO
H
C
H
C
CH
2
OH
C
H
OH
OH
H
6
5
4
3
2
O
C
OH
H
1
D-glucosa
(lineal)
Aproximacin
de los C 1 y 5
C
H
C
H
OH
OH
3
2
C
OH
H
O CH
C
H
HO
CH
2
OH
6
5
4
1
Formacin de hemiacetal
entre C 1 y 4
D-glucosa
Ciclo hexagonal
D-glucosa
Ciclo pentagonal


Fig. 1-5. Ciclizacin de glucosa


Por otra parte, la estructura cclica explica la existencia de formas o y | de azcares y el fenmeno de
mutarrotacin. El carbono 1 en las formas cclicas es asimtrico; por lo tanto, existen dos configuraciones
posibles (fig. 1-6).
A este tipo de ismeros se les denomina anmeros y el carbono 1 es referido como carbono anomrico.
Se acostumbra a representar la forma o con el OH del carbono 1 hacia abajo y la forma |, con el OH
hacia arriba.

o-D-glucosa |-D-glucosa

Fig. 1-6. Formas de glucosa


GALACTOSA
Esta aldohexosa excepcionalmente se encuentra libre en la naturaleza. Comnmente se asocia en mol-
culas ms complejas. Con glucosa forma el disacrido lactosa o azcar de leche. La galactosa es menos
dulce que la glucosa.
Es epmero de glucosa, difiere en la configuracin del C4. Presenta forma cclica piranosa y, por lo tan-
to, anmeros o y | (fig. 1-7).

C
C
C
C
C
CH
2
OH
OH H
H HO
H HO
OH H
H
O
1
2
3
4
5
6

O
H
H OH
H
OH
H OH
HO
CH
2
HO
H

o-D-galactosa D-galactosa |-D-galactosa
o-D-galactopiranosa (lineal) |-D-galactopiranosa

Fig. 1-7. Formas de galactosa

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MANOSA
Es una aldohexosa integrante de oligosacridos asociados a glicoprotenas en organismos animales.
Tambin se la obtiene por hidrlisis de polisacridos vegetales llamados mananos. Es epmero de glucosa;
difiere de ella en la configuracin del C2 (fig. 1-8).


C
C
C
C
C
CH
2
OH
H HO
H HO
OH H
OH H
H
O
1
2
3
4
5
6

O
OH
H H
H
OH
OH OH
H
CH
2
HO
H

o-D-manosa D-manosa |-D-manosa
o-D-manopiranosa (lineal) |-D-manopiranosa

Fig. 1-8. Formas de manosa


FRUCTOSA
Cetohexosa, tambin llamada levulosa debido a sus propiedades levorrotatorias; su ndice de rotacin
especfica es -92,4. Se encuentra libre en frutos maduros, en otros rganos de vegetales y en la miel. Con
glucosa forma sacarosa o azcar de caa. La fructosa libre tiene mayor poder edulcorante que la sacarosa y
mucho ms que la glucosa. Gracias a esta propiedad, la fructosa es utilizada en la elaboracin de bebidas
carbonatadas y golosinas. A estos fines, se produce en gran escala a partir de almidn de maz, el cual es
hidrolizado a glucosa y sta convertida en fructosa por isomerizacin enzimtica.
La fructosa posee una funcin cetona en el carbono 2. En productos naturales que contienen fructosa,
sta adopta forma cclica, por unin hemicetlica entre C2 y C5. Se establece as un anillo pentagonal simi-
lar al del ciclo furano. De este modo, la funcin cetona del carbono 2 es potencial, responsable de las
propiedades reductoras de fructosa. Hay dos configuraciones posibles a nivel del carbono 2 en la forma
cclica, o y | (fig. 1-9).
En molculas complejas en cuya constitucin participa la fructosa, sta se encuentra preferentemente en
la forma furanosa. En cambio, en soluciones de fructosa libre predomina la forma piranosa.

CH
2
OH
C
C
C
C
CH
2
OH
O
H HO
OH H
OH H
1
2
3
4
5
6

O
CH
2
H
OH
H
2
C
HO
OH
OH
H
H
OH

o-D-fructosa D-fructosa |-D-fructosa
o-D-fructofuranosa (lineal) |-D-fructofuranosa

Fig. 1-9. Formas de fructosa


PENTOSAS
La de mayor importancia es la aldopentosa D-ribosa, componente de cidos ribonucleicos (ARN) y
otras sustancias de gran inters biolgico.
En la naturaleza se encuentran en forma cclica tipo furanosa y, por lo tanto, presenta ismeros o y |
(fig. 1-10).

C
C
C
C
CH
2
OH
OH H
OH H
OH H
H
O
2
3
4
5
1

O
CH
2
H
OH
H
HO
H
OH
H
OH

o-D-ribosa D-ribosa |-D-ribosa
o-D-ribofuranosa (lineal) |-D-ribofuranosa

Fig. 1-10. Formas de ribosa
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FRMULAS DE HAWORTH

Haworth propuso representar los anillos pirano y furano de monosacridos como un plano y considerar
los elementos o grupos funcionales unidos a los carbonos del anillo, ubicados arriba o debajo de ese plano.
En la formulacin de Haworth, se omiten los carbonos integrantes del anillo y se procura representar en
relieve el lado del hexgono o del pentgono prximo al lector, para dar sensacin del plano visto en pers-
pectiva (fig. 1-11).













Fig. 1-11. Frmulas de Haworth

La representacin de Haworth no es enteramente correcta, pues los tomos integrantes del anillo no
estn, en realidad, situados en el mismo plano. La molcula tiende a adoptar conformaciones de menor
energa; para el anillo piranoso, las conformaciones llamadas silla y bote (fig. 1-12).
La forma silla C1 es ms favorable desde el punto de vista termodinmico, razn por la cual es ms es-
table. En estas conformaciones, los dos enlaces que restan a los carbonos del anillo se proyectan en dos
direcciones; perpendicular al plano primitivo del ciclo (axiales), o aproximadamente en la misma direccin
de ese plano (ecuatoriales), a y e respectivamente en la figura 1-11.



Fig. 1-11. Conformaciones del anillo piransico. La conformacin de la izquierda (C1) corresponde a las forma
de silla; la de la derecha (B), a la forma de bote. C1 es la ms estable. Se indica la direccin de los enlaces, a: axial,
e: ecuatorial.


La conformacin ms comn para glucopiranosa y otros monosacridos es C1 (fig. 1-12).













Fig. 1-12. -D-glucopiranosa. Conformacin silla C1
|-D-glucopiranosa |-D-manopiranosa |-D-galactopiranosa |-D-fructofuranosa

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1.4.2. DERIVADOS DE MONOSACRIDOS

GLICSIDOS
El carbono hemiacetlico de aldosas y cetosas puede reaccionar con otra molcula para formar un com-
puesto designado con el nombre genrico de glicsido. Por ejemplo, si se hace reaccionar metanol con D-
glucosa en medio cido, se establece, con prdida de agua, una unin entre el carbono 1 de la glucosa y el
alcohol.

o-D-glucosa Metanol o-D-metil-glucsido

Se habla de glicsido o de unin glicosdica cuando est comprometido el carbono hemiacetlico de al-
dosas o hemicetlico de cetosas. Segn la configuracin del monosacrido original, pueden formarse dos
tipos de glicsidos, o o |. La unin con el grupo agregado es de tipo o o | glicosdica respectivamente. Una
vez formado el glicsido, las formas o y | no se interconvierten, es decir, no presentan el fenmeno de
mutarrotacin. Por otra parte, las reacciones del aldehdo o cetona potencial dejan de ser evidentes. Estos
compuestos no son reductores. Otra propiedad caracterstica de la unin glicosdica es que es hidrolizable.
Cuando el monosacrido es glucosa, estos compuestos se designan glucsidos. Si es galactosa, galact-
sidos; si es fructosa, fructsidos, etc.
Los monosacridos tambin establecen unin glicosdica entre s, como en los oligo- y polisacridos
que consideraremos ms adelante.
Cuando la molcula unida al carbono hemiacetlico del monosacrido no es de carcter glucdico, se da
el nombre de aglicona a esa porcin del glicsido. Aglicona puede ser muy simple, como en el caso presen-
tado arriba (metilo) o mucho ms complejo. Un conjunto de glicsidos de gran inters mdico, pues se utili-
zan como tnicos cardacos (digitlicos, ouabana), tienen como aglicona una estructura tipo esteroide.


DESOXIAZCARES
Son derivados de monosacridos por prdida de oxgeno de uno de los grupos alcohlicos. El ms
abundante en la naturaleza es la 2-desoxirribosa, producto resultante de la sustraccin del oxgeno unido al
carbono 2 de la aldopentosa ribosa. Es un derivado de importancia, pues participa en la constitucin de
cido desoxirribonucleico (ADN).
Fucosa es un desoxiazcar que participa en la constitucin de molculas complejas como glicoprote-
nas de animales superiores y de paredes celulares bacterianas. El compuesto que se encuentra en la naturale-
za pertenece a la serie L y puede considerarse derivado de la L-galactosa, por prdida del oxgeno en el
carbono 6 (6-desoxi-L-galactosa).
C
C
C
C
CH
2
OH
OH H
OH H
H H
O
H
C
C
C
C
C
OH H
OH H
H HO
O
CH
3
HO H
H

2-desoxi-D-ribosa L-fucosa

AZCARES CIDOS
Bajo la accin de oxidantes suaves, la funcin aldehdo se oxida a carboxilo y se originan cidos ald-
nicos. El cido aldnico formado por oxidacin del carbono 1 de glucosa es designado cido glucnico.
Una oxidacin ms enrgica afecta a ambos carbonos terminales de la aldosa (C1 y C6) originando ci-
dos dicarboxlicos. Estos dicidos reciben el nombre de cidos sacridos o aldricos. El derivado de gluco-
sa recibe el nombre de cido glucrico o glucosacrido.
En condiciones controladas, con el carbono 1 protegido, se obtiene oxidacin del carbono 6. Se origi-
nan as cidos urnicos, derivados de aldosas con carboxilos en C6. Forman parte de polisacridos comple-
jos. El cido urnico generado a partir de glucosa recibe el nombre de cido glucurnico.
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De todos los derivados por oxidacin, obviamente slo pueden existir en la forma cclica los cidos
urnicos, ya que le reaccin no afecta en ellos la unin hemiacetlica.

C O
C
C
H OH
C
H HO
C
OH H
CH
2
OH
H OH
H
C O
C
C
H OH
C
H HO
C
OH H
CH
2
OH
H OH
H
Oxidacin
C 1
COOH
C
C
H OH
C
H HO
C
OH H
CH
2
OH
H OH

D-glucosa cido glucnico

COOH
C
C
H OH
C
H HO
C
OH H
CH
2
OH
H OH
COOH
C
C
H OH
C
H HO
C
OH H
COOH
H OH
Oxidacin
C 6

cido glucnico cido glucrico


Oxidacin
C 6
H
OH
O
H
OH
H
H
OH
CH
2
OH
OH
H
H
OH
O
H
OH
H
H
OH
COOH
OH
H

o-D-glucosa cido o-D-glucurnico


STERES FOSFRICOS
En muchas reacciones biolgicas se producen steres de monosacridos con cido fosfrico. La forma-
cin de estos steres es denominada fosforilacin; en general, es el primer paso en la utilizacin de mono-
sacridos en el organismo. A continuacin se presentan algunos:
D-gliceraldehdo-3-fosfato |-D-glucosa-1-fosfato
|-D-glucosa-6-fosfato o-D-fructosa-6-fosfato



AMINOAZCARES
En ellos se ha sustituido un hidroxilo del monosacrido por un grupo amina. Los ms comunes en la na-
turaleza son glucosamina y galactosamina (fig. 1-13), en las cuales el grupo amina se une al carbono 2.
Forman parte de polisacridos y glicolpidos complejos y frecuentemente estn acetilados en el grupo ami-
na. Un derivado acetilado de glucosamina es la unidad constituyente de quitina, polisacrido muy abundante
en la naturaleza.





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o-D-glucosamina o-D-galactosamina

Fig. 1-13. Aminoazcares ms comunes en la naturaleza

Otros compuestos nitrogenados relacionados con hexosas son cido neuramnico y cido murmico.

cido neuramnico (fig. 1-14) es importante componente de polisacridos en glicoprotenas y glicolpidos
en membranas celulares. Estos compuestos de nueve carbonos pueden considerarse formado por el amino-
azcar manosamina y cido pirvico. Generalmente se encuentra acetilado en el N formando cidos sili-
cos. El cido silico ms comn es el N-acetil-neuramnico, uno de los cidos orgnicos ms fuertes en
seres vivientes (pK = 2,6).
COOH
C
C
C
C
C
C
C
CH
2
OH
O
H H
OH H
H
HO H
H OH
H OH
H
2
N

cido neuramnico cido N-acetilneuramnico (cido silico)

Fig. 1-14. cido neuramnico y derivados


cido murmico (fig. 1.15), formado por D-glucosamina con su C3 unido al C2 de cido lctico (enlace
ter). Un derivado acetilado de cido murmico, el cido N-acetil-murmico, es componente de polisacri-
dos de paredes bacterianas.





cido murmico cido N-acetilmurmico

Fig. 1-15. cido murmico y derivados

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1.4.3. DISACRIDOS

Los disacridos se forman por unin de dos monosacridos con prdida de una molcula de agua. Des-
cribiremos los de mayor inters en bioqumica humana.

Tabla 1-2. Presencia y funciones bioqumicas de algunos disacridos representativos.



MALTOSA
Tambin llamado azcar de malta, es producto de hidrlisis del almidn catalizada por la enzima amila-
sa. Es algo dulce y muy soluble en agua, formada por unin del carbono 1 de o-D-glucosa (unin o-
glucosdica) al carbono 4 de otra D-glucosa.
El aldehdo potencial de una de las glucosas queda libre; el disacrido es reductor y puede existir for-
mas o y |.


Fig. 1-16. maltosa.
O-o-D-glucopiranosil-(14)-o-D-glucopiranosa*

*Nombre de acuerdo con la nomenclatura actual. La letra O al comienzo indica que
el C1 de la glucosa de la izquierda est unido al oxgeno del C4 de la otra.




LACTOSA
Se encuentra en la leche. Por hidrlisis origina los monosacridos constituyentes: galactosa y glucosa.
La unin de estos monosacridos se establece entre el carbono 1 de |-D-galactosa (unin |-glicosdica) y el
carbono 4 de D-glucosa. Como el carbono 1 de la glucosa queda libre, el compuesto es reductor y presenta
formas o y |.

Fig. 1-17. -lactosa
O-|-D-galactopiranosil-(14)-|-glucopiranosa




SACAROSA
Es el azcar habitualmente utilizado como edulcorante en la alimentacin. Se lo obtiene de caa de
azcar y remolacha. Est formada por glucosa y fructosa, unidas por un enlace doblemente glicosdico, ya
que participan el carbono 1 de o-glucosa y el carbono 2 de |-fructosa.
Ambos grupos, aldehdo y cetona potenciales, estn bloqueados y el
disacrido no tiene capacidad reductora.
La sacarosa es dextrgira; si se la somete a hidrlisis, resulta una
mezcla equimolecular de glucosa y fructosa, en la cual predomina la
accin levorrotatoria de fructosa sobre la dextrgira de glucosa. Como
el sentido de la rotacin se invierte, la mezcla de glucosa y fructosa
resultante de la hidrlisis es llamada azcar invertido. La miel es,
en gran parte, azcar invertido.


Fig. 1-18. Sacarosa
o-D-glucopiranosil-(21)-|-D-fructofuransido

o
OH
OH
CH
2
OH
O
O
CH2OH
OH
CH
2
OH
HO
OH
o-D-Glc
|.D-Fru
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13


1.4.4. POLISACRIDOS

Son compuestos mucho ms complejas que los glcidos hasta aqu considerados. Est constituidos por
numerosas unidades de monosacridos, unidas entre s por enlaces glicosdicos. Algunos de ellos son pol-
meros de un solo tipo de monosacrido y reciben el nombre de homopolisacridos, mientras otros dan, por
hidrlisis, ms de una clase de monosacridos; a stos se les llama heteropolisacridos. Todos son denomi-
nados genricamente glicanos. La mayora de los glicanos son compuestos amorfos, blancos, inspidos, no
reductores. El tamao de la molcula es en general muy grande; pertenecen a la categora de macromolcu-
las. Algunos son insolubles en agua, otros forman en ellos soluciones coloidales.


1.4.4.1. HOMOPOLISACRIDOS

Se los denomina agregando el sufijo ano al nombre del monosacrido constituyente. Los homopolisac-
ridos formados por glucosa sern glucosanos o glucanos; por manosa, mananos, etc.
El tamao de la molcula de estos polmeros no es constante como el de protenas, que poseen un
nmero definido de unidades componentes. La masa molecular de glicanos vara dentro de amplios lmites,
pues en el organismo constantemente se produce adiccin o sustraccin de restos monosacridos segn las
necesidades.

ALMIDN
Reserva nutricia en vegetales, se deposita en las clulas formando grnulos cuya forma y tamao varan
segn el vegetal de origen. El almidn es el principal hidrato de carbono de la alimentacin humana. Se
encuentra en abundancia en cereales, papa y ciertas legumbres.
Est compuesto por dos glucanos diferentes, amilosa y amilopectina. Ambos son polmeros de glucosa,
pero difieren en estructura y propiedades. Generalmente el almidn contiene alrededor de 20% de amilosa y
el resto es amilopectina. Esta proporcin vara segn el origen del almidn.
Amilosa. Compuesta por 1.000 a 5.000 unidades de D-glucosa, lo cual da una masa molecular entre
160 y 800 kDa. Las glucosas se asocian entre s por enlaces glucosdicos tipo o desde el carbono 1 de una
glucosa al carbono 4 de la siguiente (enlace o-14), formando largas cadenas (fig. 1-19).

O
O
O O
O O
O
Uniones o1 4

FIG. 1-19. Esquema de un segmento de molcula de amilosa

Este tipo de unin permite una disposicin helicoidal de la cadena, enrollada alrededor de un eje cen-
tral. Cada vuelta de hlice abarca seis unidades de glucosa (fig. 1-20). Los grupos hidroxilo de los restos
monosacridos se disponen hacia el exterior, lo cual deja el interior de la hlice convertido en un ambiente
relativamente hidrfobo.




FIG. 1-20. Conformacin helicoidal de la amilosa. Modelo de esferas y vari-
llas. Slo se representan los elementos del anillo pirano.





En agua, las molculas de amilosa tienden a asociarse y precipitar, razn por la cual no forman solu-
ciones estables. La reaccin con iodo es utilizada para el reconocimiento de almidn. La amilosa con iodo
da un color azul intenso. El dimetro interno de la hlice de amilosa es suficientemente amplio para alojar
molculas de iodo. El complejo amilosa-iodo es responsable del color azul.
Amilopectina. Tiene mayor tamao molecular que amilosa; puede llegar a masas de hasta 100 millo-
nes de Da, lo cual implica polimerizacin de ms de 600.000 glucosas. La estructura bsica es similar a la
de amilosa, es decir, est constituida por glucosas unidas por enlaces glucosdicos o de carbono 1 a carbono
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14
4, pero se distingue por poseer ramificaciones. Las ramificaciones son cadenas lineales de unas 24 a 26
glucosas unidas entre s por enlaces glucosdicos o-14, que se unen a una cadena central de estructura
similar, por unin glucosdica o desde el carbono 1 de la primera glucosa al carbono 6 de una glucosa en la
cadena principal (enlace o-16). Las ramificaciones estn separadas entre s por unas diez unidades de
glucosa de la cadena sobre la cual se insertan. De las ramificaciones primarias se desprenden, por enlaces o-
16, otras secundarias y de stas, ramas terciarias que tienen una extensin de 15 a 16 unidades. El esque-
ma de la figura 1-21 indica la estructura posible de amilopectina.







FIG.1-21. Esquema de un segmen-
to de molcula de amilopectina






Cuando se calienta almidn en agua, la amilopectina forma soluciones de gran viscosidad. Los numero-
sos grupos hidroxilos en la superficie de la molcula atraen agua y se forma un gel estable (engrudo de al-
midn).
Las diferencias estructurales entre las molculas de amilosa y amilopectina determinan que el complejo
con iodo tenga coloracin; la amilopectina da color violeta.
El almidn no tiene capacidad reductora, las uniones glucosdicas en las molculas de amilosa o de
amilopectina bloquen las funciones aldehdo potencial (excepto una en un extremo de la cadena principal).
El almidn de los alimentos es degradado por enzimas de jugos digestivos hasta dejar libres sus unida-
des constituyentes. Slo monosacridos pueden ser absorbidos por la mucosa intestinal y utilizados por el
organismo.


GLUCGENO
Polisacrido de reserva en clulas animales. El hgado y msculos son los tejidos ms ricos en glucge-
no.
Es un polmero de o-D-glucosas muy semejante a la amilopectina, es decir, presenta una estructura ra-
mificada, con cadenas lineales de glucosas unidas por enlaces o-14, insertas en otras por uniones o-16.
Su masa molecular alcanza cientos de millones de Da. Las ramificaciones estn separadas por menos de
diez unidades de glucosa de la cadena de la cual se insertan. La fig. 1-22 muestra un esquema de un seg-
mento de la molcula.
Como su estructura es muy compacta debido a la proximidad de las ramificaciones, no forma geles
pues no queda espacio para retener agua; en cambio, la amilopectina, con estructura ramificada ms abierta,
fija mayor cantidad de agua. Las soluciones acuosas de glucgeno tienen aspecto opalescente. Da color
rojo-caoba con iodo; no es reducto
O
O
O
O
O
Uniones
o 1 6
Uniones
o 1 4

FIG. 1-22. Esquema de un segmento de molcula de glucgeno
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HIDRLISIS ENZIMATICA DE GLUCANOS 14: amilasas

-Amilasa. (Nombres alternativos: 1,4--D-glucano-glucanohidrolasa; glucogenasa)
Las amilasas son enzimas dependientes de cloruro, completamente afuncionales en ausencia de iones de
cloruro. Actan a lo largo de cualquier punto de la cadena de los carbohidratos, descomponindolos en
dextrina desde la amilopectina. Dado que puede actuar en cualquier punto de la cadena es ms rpida que la
-amilasa. En los animales es una enzima digestiva mayor y su pH ptimo est entre 6.7 y 7.2.
- Ami l asa ( Nombr es al t er nat i vos: 1,4--D-gl ucano-mal t ohi dr ol asa; ami l asa sacar ogni ca)
Otra forma de amilasa, la -amilasa es tambin sintetizada por bacterias, hongos y plantas. Acta desde
el extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrlisis del segundo enlace -1,4, rompiendo dos uni-
dades de glucosa (maltosa) a la vez. Durante el proceso de maduracin de la fruta la -amilasa rompe el
almidn en azcar dando lugar al sabor dulce de la fruta. La amilasa presente en el grano de cereal es la
responsable de la produccin de malta. Muchos microorganismos tambin producen amilasa para degradar
el almidn extracelular. Los tejidos animales no contienen -amilasa, aunque puede estar presente en mi-
croorganismos saprfitos del tracto gastrointestinal. Tiene un pH ptimo de 12.

DEXTRINAS
Cuando el almidn es parcialmente hidrolizado por accin de cidos o enzimas (amilasas), se degrada a
productos de menor tamao molecular denominados dextrinas. Existe un tipo de dextrinas, llamado dextri-
na lmite, producto remanente de la digestin con amilasa. Como esta enzima cataliza la hidrlisis de
uniones o-14 y no afecta los enlaces o-16, su accin se detiene en los puntos de arranque de ramifica-
ciones. Queda un resto inatacable por amilasa que es el lmite de accin de esta enzima; de all su nombre.


DEXTRANOS
Polisacridos producidos por ciertos microorganismos, son polmeros de D-glucosa con estructura ra-
mificada; difieren de amilopectina y glucgeno en el tipo de enlaces. Las cadenas principales estn forma-
das por glucosas en unin glucosdica o-16. Las ramificaciones se desprenden por uniones o-12, o-
13 o o-14 segn el tipo de dextrano.
Dextranos de masa molecular alrededor de 75 kDa dan soluciones de alta viscosidad que tienen uso
clnico. Se utilizan como sustitutos de emergencia del plasma sanguneo. Sus soluciones sirven para reesta-
blecer la volemia en casos de prdidas agudas de sangre o plasma, hasta tanto se pueda instituir el tratamien-
to transfusional adecuado.


INULINA
Polisacrido de reserva de tubrculos de dalia y raz de alcaucil. Es un fructosano, formado por largas
cadenas de fructosa unidas por enlaces glicosdicos |-21. Soluble en agua caliente; es utilizada en pruebas
funcionales de rin para medir filtracin glomerular.


CELULOSA
Glucano con funciones estructurales en vegetales; es uno de los componentes principales en paredes ce-
lulares. La pulpa de madera contiene alto porcentaje de celulosa y el algodn es prcticamente celulosa
pura. Este polisacrido es el compuesto orgnico ms abundante en la naturaleza. La industria procesa, para
distintos fines, ms de 800 millones de toneladas de celulosa por ao.
Constituida por ms de 10.000 unidades de glucosa unidas mediante enlaces glucosdicos |-14. Su
estructura es lineal, no posee ramificaciones. La diferencia en la geometra de los enlaces o-14 y |-14
es responsable de la distinta conformacin de las molculas de amilosa y celulosa, pese a ser ambos polme-
ros lineales de glucosa.
En las uniones |-14 de celulosa, cada unidad de glucosa gira 180 con respecto a la anterior (fig. 1-
23). Esto permite formar largas cadenas rectilneas, estabilizadas por uniones tipo puente de hidrgeno. En
cambio, los enlaces o-14 de amilosa favorecen la conformacin helicoidal. Las hebras de celulosa se
agrupan paralelamente en haces que forman microfibrillas de gran resistencia fsica. A esta resistencia con-
tribuyen los numerosos puentes de hidrgeno existentes entre cadenas vecinas.
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O
H O
O
OH
CH
2
OH
O
O
O
CH
2
OH
OH
O
H
---
O
H O
O
OH
CH
2
OH
O
O
O
CH
2
OH
OH
O
H
---
Uniones | 1
4
--

FIG. 1-23. Esquema de un segmento de molcula de celulosa. Cada unidad de glucosa gira 180 con respecto a la
anterior. Ntese los puentes de H que estabilizan la hebra del polmero.


Los jugos digestivos humanos no poseen enzimas capaces de catalizar la hidrlisis de uniones glucos-
dicas | y por esta razn no se puede utilizar celulosa como nutriente. La celulosa que ingresa con los ali-
mentos vegetales no es modificada en su trnsito por el tracto intestinal.
En las paredes celulares de vegetales, las microfibrillas de celulosa estn inmersas en una matriz que
contiene otros polisacridos y protenas de tipo fibroso. La composicin de esta matriz vara en diferentes
vegetales y aun en diferentes porciones de una misma planta; generalmente se encuentran polisacridos ms
complejos y variables, como hemicelulosas y pectinas.


QUITINA

Es un polisacrido muy abundante en la naturaleza, ya
que constituye el exoesqueleto de artrpodos tales como
insectos y crustceos. Est formada por N-acetil-D-
glucosaminas unidas entre s por enlaces glucosdicos |-
14 (fig. 1-24).


Fig. 1-24. Quitina





PECTINAS
Las pectinas estn presentes en las paredes celulares de todas las plantas y se caracterizan por su capa-
cidad de formar geles. Su presencia en la pared: determina la porosidad, proporciona superficies cargadas
que modulan el pH y el balance inico, sirven como molculas de reconocimiento a seales de organismos
simbiticos, patgenos e insectos.
Algunas son homopolisacridos y otras heteropolisacridos. A su vez se las clasifica en neutras (galac-
tanos y arabinanos) y cidas. Estas ltimas son polmeros formados por unidades de cido galacturnico
(enlaces |-14), a cuyos extremos se unen cadenas cortas de otros monosacridos. Estas molculas con
numerosas cargas negativas (restos carboxilos de cidos urnicos) fijan cationes, principalmente Ca
2+
, y
atraen vidamente molculas de agua, razn por la cual estn altamente hidratadas y forman geles. Esta
propiedad es utilizada en la industria de alimentos (jaleas, mermeladas).


1.4.4.2. HETEROPOLISACRIDOS

Estos compuestos dan, por hidrlisis, un tipo de monosacrido o derivado de monosacridos. Frecuen-
temente se asocian a protenas formando grandes complejos moleculares.

GLICOSAMINOGLICANOS
Los glicosaminoglicanos, anteriormente llamados mucopolisacridos, son compuestos de gran inters
biolgico. Son polmeros lineales constituidos por la sucesin de unidades estructurales disacardicas for-
madas generalmente por un cido urnico y una hexosamina. Suelen presentar grupos sulfato. Debido a la
existencia de numerosos grupos ionizables de cidos urnicos (-COO
-
) y sulfatos (-SO
3
-
) en la molcula, se
comportan como polianiones.
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Excepto heparina, intracelular, los restantes se encuentran en el espacio extracelular, principalmente en
la sustancia fundamental del tejido conjuntivo. Existen varios tipos de glicosaminoglicanos, cuya estructura
analizamos a continuacin.

cido hialurnico. La unidad estructural es el disacrido formado por cido D-glucurnico unido por un
enlace glucosdico |-13 a N-acetil-D-glucosamina. Cada unidad se une a la siguiente por un enlace |-
14 (fig. 1-25).



Fig. 1-25. Unidad estructural de cido hialurnico.
cido D-glucurnico-|-13-N-acetil-D-glucosamina.
Al pH del organismo, la funcin carboxilo est disociada (-COO
-
)





El cido hialurnico es el glicosaminoglicano de mayor masa molecular (de 100.000 a varios millones
de Da). Forma soluciones muy viscosas (geles), con propiedades lubricantes. Se encuentra en la sustancia
intercelular de tejido conjuntivo, especialmente en piel y cartlago, humor vtreo del ojo, gelatina de Whar-
ton del cordn umbilical, lquido sinovial, etc.


Condroitinsulfato. La unidad disacardica es semejante al cido hialurnico, con N-acetil-D-galactosamina
en lugar de N-acetil-D-glucosamina. Los tipos de enlaces son los mismos. Se distingue adems del cido
hialurnico por poseer sulfato (-SO
3
-
) que esterifica hidroxilos de C4 o C6 de galactosamina. De acuerdo
con la posicin de estos grupos se consideran dos tipos de condroitinsulfato, condroitn-4-sulfato o A (fig.
1-26) y condroitn-6-sulfato o C. Su masa vara entre 10 y 50 kDa. Son importantes componentes de cartla-
go, hueso, etc.


Fig. 1-26. Unidad estructural de condroitinsulfato C (condroitn-6-sulfato).
cido D-glucurnico-|-13-N-acetil-D-galactosamina-6-sulfato.
Al pH del organismo, las funciones carboxilo y sulfato estn disociadas (-COO
-
, -SO
3
-
)


Dermatansulfato. Es similar a condroitinsulfato. La principal diferencia es el cambio de cido glucurnico
por cido L-idurnico. Este compuesto resulta de epimerizacin del C5 de cido glucurnico (la funcin
carboxilo del C6 queda por debajo del plano del anillo pirano). Posee restos sulfato unidos a galactosamina
en el C4 y/o C2 de cido idurnico (fig. 1-27).
Era llamado condroitnsulfato B. se encuentra en piel y en tejido conjuntivo de otros rganos.




Fig. 1-27. Unidad estructural de dermatansulfato.
cido L-idurnico-o-13-N-acetil-D-galactosamina-4-
sulfato. Al pH del organismo, las funciones carboxilo y
sulfato estn disociadas.



O
OH
COOH
OH
HO
3
S
O
NH
CH
2
OH
CO
CH
3
O
O O
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Queratansulfato. Se diferencia de los anteriores por carecer de cido urnico. La unidad estructural est
formada por galactosa y glucosamina acetilada,
esterificada por sulfato en el C6. Se encuentra en
crnea y cartlago.



Fig. 1-28. Unidad estructural de querantansulfato




Heparina. La unidad disacrida es cido urnico y glucosamina unidos por enlaces |-14 ( o 14 si el
acido uronico es de la serie L) . Se encuentran cidos glucurnico e idurnico, este ltimo en mayor pro-
porcin. Muchos grupos amina de glucosaminas estn sulfatados; unos pocos acetilados. Los sulfatos se
unen al C6 de glucosamina y al C2 de cido urnico. La presencia de tantos restos sulfato otorga a este
compuesto un carcter fuertemente cido. Heparina es la macromolcula biolgica con mayor densidad de
cargas negativas. Los enlaces glicosdicos entre disacridos son de tipo o-14 (fig. 1-29). Su masa molecu-
lar oscila entre 8 y 20 kDa.



Fig. 1-29. Segmentos de la molcula de heparina.
Al pH del organismo, las funciones carboxilo y sulfato
estn disociadas.










En virtud de sus numerosas cargas negativas, heparina tiene gran tendencia a interaccionar con una va-
riedad de protenas, como enzimas, inhibidores de enzimas, protenas de matriz extracelular, citoquinas, etc.
Expresin de este tipo de interacciones es su accin anticoagulante tanto in vitro como in vivo, razn
por la cual encuentra frecuentemente aplicacin en medicina. Otra accin de heparina es el aclaramiento del
plasma sanguneo despus de una comida rica en grasas. Las grasas se absorben en intestino y pasan a la
sangre formando partculas llamadas quilomicrones, cuya presencia en cantidad da al plasma un aspecto
lechoso. La heparina acelera la desaparicin de esos quilomicrones de sangre circulante.

Heparansulfato. De estructura parecida a la heparina, generalmente ms sulfatado que ella y con menor
proporcin de cido idurnico. Est distribuido en superficies celulares y matriz extracelular. La interaccin
heparansulfato-protenas es responsable de distintos procesos fisiolgicos, como adhesin entre clulas,
regulacin de enzimas, accin de citoquinas, etc.


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1.4.5. PEPTIDOGLICANOS
Las bacterias poseen, por fuera de la membrana celular, una pared resistente que las protege de cambios
osmticos y de otro tipo en el medio. Esta pared est formada por una enorme estructura molecular consti-
tuida por un gran nmero de cadenas de un polisacrido cuyas unidades estructurales son N-acetil-D-
glucosamina y cido N-acetil-murmico. Las cadenas se disponen paralelamente y estn unidas entre s por
pequeos trozos transversales de oligopptidos. El conjunto tiene el aspecto de una densa trama o red que
envuelve toda la bacteria. Esta estructura recibe el nombre de murena.
En bacterias Gram negativas, sobre esta trama de peptidoglicano se encuentra otra cubierta rica en lpi-
dos y protenas hidrofbicas a los cuales deben estos microorganismos su propiedad de no teirse con colo-
rante de Gram.
Uno de los antibiticos ms tiles para combatir infecciones producidas por bacterias, la penicilina,
acta inhibiendo la sntesis de murena.
Las bacterias y la mayora del resto de organismos unicelulares poseen una pared celular. La naturaleza
de esta pared celular es la base de la clasificacin de las bacterias en dos grandes clases: las que retienen el
colorante de Gram (un complejo de iodo), que se denominan bacterias grampositivas, y las que no lo hacen,
a las que se da el nombre de gramnegativas (fig. 1-29). Las bacterias grampositivas poseen una pared celu-
lar que tiene en su superficie, por fuera de la membrana celular lipdica, un complejo polisacrido-pptido
de mltiples capas con enlaces cruzados, al que se denomina peptidoglicano (fig. 1-29A). Las paredes celu-
lares de las bacterias gramnegativas contienen tambin peptidoglicano, pero ste forma una sola capa y est
cubierto por una capa de membrana lipdica externa (fig. 1-29B). Esta diferencia permite eliminar el colo-
rante de Gram mediante lavado de las bacterias gramnegativas.
La estructura qumica del peptidoglicano de una bacteria grampositiva es la que se muestra en la figura
1-30. Hay cadenas largas de polisacridos, que son copolmeros de N-acetilmurmico con alternancia estric-
ta, que presentan enlaces cruzados a travs de pptidos cortos (fig. 1-29A). Estos pptidos tienen unas es-
tructuras poco habituales. Unido a la porcin de cido lctico del cido N-acetilmurmico se encuentra un
tetrapptido con la siguiente secuencia: (L-Ala)-(D-Glu)-(L-Lys)-(D-Ala). Este pptido es poco habitual en
dos aspectos: contiene algunos aminocidos D y el residuo de cido glutmico est unido a la cadena me-
diante su grupo -carboxilo en vez de a travs del enlace habitual o-carboxilo. El grupo c-amino de cada
residuo de lisina est unido a un pentapptido de glicina, que est unido por su otro extremo al residuo D-
Ala terminal de una cadena adyacente. El resultado es la formacin de una estructura con enlaces cruzados
covalentes que envuelve a la clula bacteriana. Toda la pared celular puede considerarse como una nica
molcula enorme formada por mltiples capas de cadenas de peptidoglicano con enlaces cruzados. Adems
de los componentes mencionados anteriormente, hay unos complejos alargados de lpido-oligosacrido,
denominados cidos lipoteicoicos, que sobresalen de la membrana a travs de la pared de peptidoglicano.
La pared celular protege a las bacterias de la lisis cuando se encuentra en la sangre de los animales huspe-
des.
En las bacterias gramnegativas, la capa de peptidoglicano es mucho ms delgada. Aunque est presente
la misma estructura bsica de polisacrido, las cadenas peptdicas y sus uniones son algo diferentes (fig. 1-
29B).
Evidentemente, el ensamblaje de una estructura tan compleja como la pared celular bacteriana requiere
una batera de enzimas y reacciones. Diversos antibiticos (por ejemplo, la penicilina) inhiben el crecimien-
to bacteriano al inferir sobre la formacin de la capa de peptidoglicano.
Debemos sealar que una clase de sustancias antibiticas que se encuentran en la naturaleza acta no
slo interfiriendo sobre la sntesis de la pared celular, sino tambin atacando a la propia capa de peptidogli-
cano. Estas sustancias son las lisozimas, enzimas muy extendidas, que se encuentran por ejemplo en los
bacteriofgos, la clara del huevo y las lgrimas del ser humano. Las lisozimas catalizan la hidrlisis de los
enlaces glucosdicos entre los residuos N-acetilglucosamina y cido N-acetilmurmico en el polisacrido.
As pues, estas enzimas disuelven la pared celular, dando lugar a la lisis y la muerte bacteriana.

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FIG. 1-29. Paredes celulares bacterianas. En estos esquemas se muestran las estructuras de los dos tipos de pared
celular bacteriana. (A) La pared celular de una bacteria grampositiva representativa, Staphylococcus aureus, consta de
una capa de peptidoglicano gruesa formada por cadenas de polisacridos y pptidos cortos. Los pptidos estn unidos
mediante pentapptidos de glicina. (B) La pared celular de una bacteria gramnegativa representativa, Escherichia coli,
tiene una capa de peptidolgicano fina y una membrana lipdica externa. Esta diferencia explica las distintas propiedades
de tincin de las bacterias grampositivas y gramnegativas, y la distinta sensibilidad de estas clases de bacterias a dife-
rentes antibiticos.









FIG. 1-30. Capa de peptidoglicano de las
bacterias grampositivas. Los enlaces cruzados
entre los pptidos se forman mediante cadenas de
pentaglicina entre el grupo c-amino de la lisina (*)
de una cadena, y el grupo carboxilo terminal de la
alanina (**) de la cadena adyacente.


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1.4.6. PROTEOGLICANOS

Glicosaminoglicanos se asocian con protenas para formar proteoglicanos. La unin se realiza por enla-
ces glicosdicos entre cadenas polisacardicas y el hidroxilo de restos serina o N de restos asparragina de la
protena. Ms de 100 cadenas de glicosaminoglicanos se insertan en cada una de las protenas. A su vez,
muchos de estos proteoglicanos se fijan, por un extremo de la cadena polipeptdica, a un tallo central de
cido hialurnico. La asociacin entre ste y la protena del proteoglicano se realiza mediante otra protena
intermediaria, llamada de enlace (fig. 1-31). Hasta 100 proteoglicanos pueden unirse a una cadena central
de cido hialurnico. Los enormes agregados moleculares que resultan, cuya masa alcanza a decenas de
millones de Da, son visibles al microscopio electrnico.




FIG. 1-31. Estructura del proteoglicano del cartlago bovino.
El queratansulfato y el condroitinsulfato estn unidos de forma covalente
a las molculas proteicas del centro extendidas. Las protenas del centro estn
unidas de manera no covalente a una molcula larga de cido hialurnico con
la ayuda de una protena de enlace.


Debido a la naturaleza polianinica de los glicosaminoglicanos
estos complejos interactan con otras macromolculas. En tejido
conjuntivo se unen por fuerzas electrostticas a la protena colgena.
Tambin tiene gran capacidad para atraer agua, a tal punto que gran
parte del agua extracelular del organismo se encuentra fijada a estos
proteoglicanos de tejido conjuntivo. El cartlago puede amortiguar
fuerzas de compresin gracias a estos polianiones muy hidratados.
El conjunto de proteoglicanos forma un reticulado tridimensional
que representa una barrera para el transporte extracelular de compues-
tos. Pueden contener condroitinsulfato, dermatansulfato o queratansulfato. La composicin en glicosamino-
glicanos de tejido conjuntivo de diferentes rganos vara. Adems, tambin se producen cambios con la
edad. Por ejemplo, en el cartlago de recin nacido la proporcin de queratansulfato es reducida. La longitud
de las cadenas y su cantidad relativa aumenta con la edad hasta llegar casi al 50% del peso total de glicosa-
minoglicanos en la vejez.
Un proteoglicano inserto en membranas celulares, el sindecan, formado por heparansulfato y condroi-
tinsulfato, se une al colgeno y media en la adhesin de clulas de tejido conectivo a la matriz extracelular.
Heparina forma un proteoglicano unindose a una protena muy peculiar, constituida slo por serinas y
glicinas alternadas a lo largo de su cadena.


1.4.7. GLICOPROTENAS

Son protenas conjugadas con carbohidratos como grupo prosttico. Esta definicin tambin comprende
a los proteoglicanos. Las glicoprotenas se diferencian de stos porque sus cadenas glucdicas son ms cor-
tas (oligosacridos), pueden ser ramificadas y generalmente, por hidrlisis, dan ms de dos monosacridos
diferentes.
En las cadenas oligosacardicas de glicoprotenas se encuentran D-galactosa, D-manosa, L-fucosa, D-
xilosa, N-acetilglucosamina, N-acetilgalactosamina, cidos glucurnico, idurnico y silicos. El nmero de
cadenas oligosacardicas en glicoprotenas es muy variable; algunas slo poseen una (ovoalbmina) y otras
pueden llegar a tener 800 (glicoprotena de glndula submaxilar). Correlativamente, el porcentaje de hidra-
tos de carbono vara entre el 5 y 85% de la molcula. Las glicoprotenas ricas en cidos silicos forman
soluciones ms viscosas y pueden actuar como lubricantes.
Son glicoprotenas: a) casi todas las protenas de la cara externa de membrana plasmtica de clulas
animales (la porcin glucdicas de esas protenas forma el llamado glucoclix); b) la mayor parte de las
protenas plasmticas; c) protenas excretadas por glndulas mucosas de tracto digestivo, respiratorio, geni-
tal, etc.; d) algunas hormonas; e) muchas enzimas, etc. En general, las protenas sintetizadas por la clula
para exportar son glicoprotenas.


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Diversidad estructural de oligosacridos de glicoprotenas. Los oligosacridos que forman las ca-
denas laterales de glicoprotenas tienen una estructura particular para cada una de ellas, pero hay ciertas
caractersticas comunes. Restos N-acetilglucosamina y galactosa tienden a situarse prximos al extremo
fijado a la protena, mientras los cidos silicos se disponen en el extremo distal. Casi siempre el cido sili-
co est ubicado a continuacin de una galactosa.
La unin del oligosacrido a la protena se realiza por enlace glicosdico al hidroxilo de restos serina o
treonina (unin O-glicosdica) o al N de un resto asparragina (unin N-glicosdica). En el colgeno, pueden
unirse hidratos de carbono al hidroxilo de hidroxilisina o hidroxiprolina.
El residuo ms frecuente en uniones O-glicosdicas es N-acetil-D-galactosamina. En cambio, en enlaces
N-glicosdicos est comprometido casi siempre un resto N-acetil-D-glucosamina. Los oligosacridos con
enlace N-glicosdico contienen un ncleo pentasacardico comn formado por dos residuos N-acetil-
glucosamina y tres manosas (fig. 1-33). A este ncleo comn se unen azcares adicionales para dar una gran
variedad de patrones diferentes. En la figura 1-32 se muestran ejemplos de cadenas de oligosacridos unidos
a restos serina (o treonina) por enlaces O-glicosdicos.

NANA Gal GalNAc Serina
(o Treonina)
| | 1 3 | 2 3
| 1 4
Gal
Gal
GalNAc
GlcNAc Gal
GlcNAc
Seri na
(o Treonina)
|
| 1 3 | 1 3
| 1 3
| 1 6
| 1 3
| 1 3
| 1 3
Gal
Gal
Gal
Gal
Fuc
Fuc GalNAc
GalNAc
GlcNAc
GlcNAc
GlcNAc
Gal
Fuc
Fuc
Fuc
Seri na
(o Treonina)
| 1 4
| 1 4
| 1 4 | 1 6 o 1 4
o 1 2
o 1 2
o 1 2
o 1 3
o
A
B
C

FIG. 1-32. Estructuras de oligosacridos de glicoprotenas unidos por enlaces O-glicosdico.
A. Oligosacrido de glicoforina, glicoprotena de membrana de eritrocitos. B. Oligosacrido de mucina gstrica. C.
Oligosacrido de mucina de glndula submaxilar. Referencias: NANA: cido N-acetil-neuramnico; Gal: galactosa;
GalNAc: N-acetil-D-galactosamina; GlcNAc: N-acetil-D-glucosamina; Fuc: fucosa.

Por su parte, los oligosacridos fijados a N amdico de restos asparragina (enlaces N-glicosdicos) se
clasifican en tres tipos, segn la proporcin de unidades manosa: a) de alto contenido de manosas; b) com-
plejos; y c) hbridos. Los tres tipos comparten la misma estructura bsica, formada por dos restos N-acetil-
glucosamina y tres unidades manosas (fig. 1-33A). En los de alto contenido de manosas, al ncleo bsico se
adicionan slo molculas de manosa. Contienen en total 5 a 9 restos de ese monosacrido (fig. 1-33B). Los
de tipo complejo contienen, sobre la estructura bsica, cantidades variables de otros residuos distintos de
manosa, como N-acetil-D-glucosamina, galactosa, glucosa, fucosa, cido silico (fig. 1-33C). En los hbri-
dos o mixtos, sobre una de las manosas distales del ncleo comn se agregan slo manosas, y sobre la otra,
cadenas de tipo complejo (fig. 1-33D).

La multiplicidad de combinaciones posibles en las cadenas de los oligosacridos no slo depende de la
secuencia de las unidades componentes o estructura primaria, como en los polipptidos, sino tambin de
otras caractersticas peculiares de este tipo de polmeros: 1) el carbono anomrico (C1) puede presentar dos
configuraciones (o y |), lo cual da lugar a dos clases diferentes de uniones glicosdicas; 2) los enlaces gli-
cosdicos pueden dirigirse a cualquiera de los grupos hidroxilos disponibles en cada resto monosacrido
(C2, C3, C4, C6); 3) son frecuentes las ramificaciones. Todos estos atributos estructurales ofrecen un reper-
torio muy amplio de posibilidades de constituir oligosacridos diferentes a partir de un conjunto de mono-
sacridos. Por esta razn, es mucho mayor la cantidad de ensambles tericamente posibles con un nmero
dado de monosacridos, que de pptidos resultantes de la unin de igual nmero de aminocidos.
Lectinas. Hace muchos aos se descubrieron, en distintos vegetales, protenas capaces de reconocer y
unirse especficamente, con gran afinidad, a determinados mono- u oligosacridos. Estas protenas, llamadas
lectinas, resultaron muy tiles para estudiar la constitucin de los carbohidratos de superficies celulares.
Posteriormente se comprob que la distribucin de este tipo de protenas es muy amplia en la naturaleza. Se
encuentran lectinas no slo en vegetales, sino tambin en bacterias y tejidos animales.

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Man
Man
Man GlcNAc GlcNAc
Man Man
Man
Man
Man
Man
Man Man
Man Gl cNAc Gl cNAc
NANA Gal Gl cNAc Man
Man NANA Gal GlcNAc
Man Gl cNAc GlcNAc
Fuc
Gl cNAc
Gl cNAc Gal
Man
Man
Man
Man
Man Gl cNAc Gl cNAc
|
|
|
|
| 1 4 | 1 4
| 1 4 | 1 4
| 1 4
| 1 4
| 1 4 | 1 4
| 1 4
| 1 4 | 1 4
| 1 2
| 1 2
| 1 2
| 1 2
o 1 6
o 1 6
o 1 6
o 1 6
o 1 6
o 1 6
o 1 6
o 1 3
o 1 3
o 1 3
o 1 3
o 1 3
o 1 3
o 2 6
o 2 6
o 1 2 o 1 2
o 1 2
o 1 2
Asparragina
Asparragi na
Asparragi na
Asparragina
A
B
C
D


FIG. 1-33. Estructuras de oligosacridos unidos por enlaces N-glicosdico a protenas.
A. ncleo bsico comn a todos los oligosacridos en unin N-glicosdica. B. Oligosacrido del tipo de alto conte-
nido en manosas. C. Oligosacrido de tipo complejo. D. Oligosacrido de tipo hbrido. Referencias: NANA: cido N-
acetil-neuramnico; Gal: galactosa; GlcNAc: N-acetil-D-glucosamina; Fuc: fucosa; Man: manosa.



Grupos sanguneos. La superficie de glbulos rojos y de otras clulas posee glicoprotenas y glicolpi-
dos que actan como antgenos. El determinante antignico de esas molculas reside en la porcin glucdica,
cuya estructura est genticamente determinada. Segn la composicin de los oligosacridos en estas mol-
culas es posible caracterizar diferentes grupos de individuos en una poblacin. Se conocen varios de estos
sistemas de antgenos en humanos; el mejor estudiado es el llamado ABO, que permite clasificar los indivi-
duos en cuatro grupos (A, B, AB y O).
El antgeno O es un oligosacrido formado por N-acetilglucosamina, galactosa y fucosa, unido a la ga-
lactosa de un resto lactosilo fijado a una ceramida en glicolpidos o al hidroxilo de un resto aminoacdico en
glicoprotenas. Los antgenos A y B tienen los mismos componentes del O y adems, ligada al resto galacto-
sa terminal, N-acetil-galactosamina en el A y galactosa en el B (fig. 1-34). Todas las personas pueden sinte-
tizar el antgeno O, pero para completar las cadenas de A y B se requiere una enzima que catalice especfi-
camente la transferencia del monosacrido adicional en cada caso. Las personas de grupo O carecen de
ambas enzimas; las del grupo A han heredado el gen que sintetiza la enzima que transfiere N-acetil-
galactosamina; las de grupo B, la transferasa de galactosa y los AB poseen las dos. Por otra parte, cada
individuo produce anticuerpos para l o los antgenos que no sintetiza. As, los de grupo O tienen anticuer-
pos contra A y B; los de grupo A y B contra B y A respectivamente y los de grupo AB no producen anti-
cuerpos ni A ni B. En las transfusiones el donante y el receptor deben ser cuidadosamente tipificados, pues
la administracin de sangre de tipo incompatible provoca reacciones muy severas (Tabla 1-3).
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FIG. 1-34. Composicin de los oligosacridos de grupos sanguneos del sistema ABO.



Tabla 1-3. Relaciones transfusionales entre los distintos grupos sanguneos ABO.











En principio, esta relacin es vlida. Sin embargo, a los individuos AB no se les transfunde nunca sangre de otros grupos, puesto
que los anticuerpos del donante podran reaccionar con los antgenos del receptor
.

Glicoprotenas como molculas sealizadoras. La complejidad y diversidad de los carbohidratos en
las glicoprotenas los convierte en estructuras moleculares aptas para contener informacin. Los oligosac-
ridos en superficies de clulas y molculas representan a menudo verdaderos marcadores o seales, que
sirven para su reconocimiento. Los ejemplos siguientes dan idea de su papel en interacciones celulares y
moleculares.
Una glicoprotena de la zona pelcida del vulo (ZP3) contiene oligosacridos reconocidos por recepto-
res en la superficie del espermatozoide; esto permite la interaccin de las gametas femenina y masculina
previa a la fecundacin.
La adhesin de bacterias, virus y toxinas a la superficie de las clulas es la etapa previa a su penetra-
cin. Esta adhesin requiere la presencia de determinados componentes glucdicos, no slo en glicoprote-
nas, sino tambin en glicolpidos de membrana plasmtica. Por ejemplo, las bacterias Escherichia coli y
Salomonella tiphimurium se unen a restos manosa. Una observacin de inters en relacin con este fenme-
no es le prdida de capacidad invasora de bacterias, virus o toxinas cuando se las incuba previamente con
una solucin del glcido que reconocen selectivamente. El compuesto bloquea el sitio receptor en el micro-
organismo o toxina y los torna inocuos.
En clulas tumorales malignas se han observado cambios en oligosacridos de superficie. Algunos au-
tores proponen a esos cambios como determinantes de la conducta anmala de clulas neoplsicas.
La alteracin de las seales que condicionan las relaciones sociales entre clulas contribuira al des-
control de los procesos de multiplicacin y crecimiento.
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Estas referencias aisladas dan idea de la importancia de este tipo de molculas. Los avances en este
campo han abierto nuevas perspectivas en la interpretacin de muchos fenmenos biolgicos y brindan
oportunidades de aplicacin en la prctica clnica.
Por qu desempean los oligosacridos con tanta frecuencia el papel de marcadores celulares? No lo
sabemos, pero se plantean varias posibilidades. En primer lugar, los oligosacridos pueden presentar una
notable variedad de estructuras en cadenas relativamente cortas. Las mltiples posibilidades de eleccin de
monmeros (entre ellos, azcares modificados), enlaces y patrones de ramificacin permite utilizar un vo-
cabulario amplio, pero especfico. En segundo lugar, los oligosacridos son antgenos especialmente poten-
tes, lo cual implica que pueden desencadenar rpidamente anticuerpos especficos contra ellos. No est claro
si esta interaccin es el resultado de una propiedad intrnseca de las molculas de azcar o de las molculas
de anticuerpos. Es posible que los anticuerpos evolucionaran como una defensa frente a las bacterias, que
tienen unas paredes ricas en polisacridos, y que ello favoreciera el uso de los sacridos como dianas.
Parece probable que la bioqumica de los hidratos de carbono, que durante mucho tiempo se ha consi-
derado una parte ms bien prosaica de este campo, est a punto de entrar en una nueva fase muy atractiva.
Al ir centrando los bioqumicos cada vez ms su atencin en las relaciones entre las clulas y los tejidos que
forman un organismo integrado, observan que muchas de estas relaciones se dan a travs de los hidratos de
carbono.




FIG. 1-35. Representacin esquemtica de una
membrana lipdica. Los oligosacridos estn unidos a la
superficie externa, mediante protenas embebidas en la
membrana o mediante molculas de lpidos especiales.






1.4.8. GLICOLPIDOS

Se desarrollaran en el captulo 2, referente a lpidos.



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1.5. Anlisis de carbohidratos

1.5.1. DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS

1.5.1.1. OXIDACIN DE AZCARES

La fcil oxidacin de los aldehdos y o-hidroxi cetonas, grupos funcionales presentes en aldosas y ceto-
sas respectivamente, suministra una prueba cualitativa de la presencia de dichas funciones y del carcter
reductor de los hidratos de carbono. Hay varios reactivos que provocan oxidacin de azcares, pero slo se
describirn los que tienen aplicacin en el laboratorio qumico y clnico.


REACCIN CON LOS REACTIVOS DE BENEDICT Y FEHLING
Aunque las sales de numerosos metales pesados como el cobre, plata, mercurio y bismuto se reducen
por accin, en caliente, de soluciones alcalinas de azcares, en las determinaciones analticas se utilizan
generalmente reactivos que contienen cobre.
El hidrxido cprico oxida a los hidratos de carbono, pero su poca solubilidad en los lcalis diluidos
permite solamente una reaccin lenta. La velocidad de oxidacin aumenta mucho si se mantiene al cobre en
solucin por formacin de una sal compleja con el in tartrato (Solucin de Fehling) con el in citrato
(solucin de Benedict). En el primero se usa hidrxido de sodio para la reaccin alcalina, mientras que en
este ltimo se utiliza carbonato de sodio.
Ecuacin esquemtica de la reaccin:
u
R - C.HO + 2 Cu (OH)
2
R- CO.OH + Cu
2
O .+ 2 H
2
O

La formacin del xido cuproso rojo, que precipita, pues el in cuproso no forma complejos con los io-
nes tartrato citratos, indica que ha ocurrido reduccin.
Las cetosas (por ej. fructosa) tambin reducen al reactivo de Fehling aunque las cetona simples no redu-
cen esta solucin. La explicacin es la reaccin de los azcares con lcalis, que no solamente interconvierte
aldosas con cetosas (isomerizacin), sino que da productos de degradacin que tienen propiedades reducto-
ras.


MTODO DE SOMOGYI-NELSON
Los azcares reductores en medio alcalino y en caliente transforman el catin cprico en cuproso. ste
reacciona con el reactivo arsenomolbdico dando xidos inferiores del molibdeno, de color azul. La intensi-
dad del color es proporcional a la cantidad de glcido presente en la muestra. La estabilidad del color es de
12 hs.
*Reactivo de Somogyi: Na
2
HPO
4
, tartrato de sodio y potasio, NaOH, CuSO
4
.
*Reactivo de Nelson (reactivo arsenomolbdico): molibdato de amonio, H
2
SO
4
concentrado,
Na
2
HAsO
4
.
Tcnica: se mezcla el reactivo de Somogyi con la muestra, se incuba 10 minutos a 100C, se enfra y
luego se agrega el reactivo de Nelson. Se lee la absorbancia a 530nm.


REACTIVO DE TOLLENS
La accin reductora de los azcares sobre una solucin amoniacal de nitrato de plata (Reactivo de To-
llens), incolora, se comprueba por la aparicin de un precipitado negro de plata metlica. Si el precipitado de
plata se deposita sobre las paredes del tubo constituye el denominado espejo de plata.



MTODO ENZIMTICO

La glucosa es oxidada enzimticamente por la glucosa oxidasa a cido glucnico y agua oxigenada. El
perxido de hidrgeno en presencia de peroxidasa produce la reaccin (copulacin oxidativa) del fenol con
la 4-aminofenazona dando lugar a la formacin de un cromgeno rojo cereza con absorbancia mxima a 505
nm.



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1.5.1.2. DESHIDRATACIN DE AZCARES

Por accin del calor de los cidos concentrados sobre las pentosas y hexosas, se produce un proceso
de deshidratacin, originando furfurales, los cuales dan reaccin coloreada caracterstica con fenoles, permi-
tiendo el reconocimiento de azcares. Controlando la temperatura y tiempo de incubacin la tcnica es selec-
tiva para cetosas (80C - 8)
Mtodo de Roe
Reactivo 1: resorcina 0,1% P/V (resorcinol
1
en solucin alcohlica
2
)
Reactivo 2: HCl 30%
Tcnica para determinacin de cetosas: se mezclan la muestra con los reactivos 1 y 2, se calienta 8 minutos
exactos a 80 C
3
. Se lee a 530 nm.
Nota: tener en cuenta que el medio fuertemente cido hidroliza uniones glucosdicas en el caso de estar
presentes.


1.5.1.3. REACCIN CON LA O-TOLUIDINA

La glucosa, la manosa y la galactosa reaccionan selectivamente con la o-toluidina en medio actico gla-
cial para formar un complejo coloreado (verde) cuya estructura corresponde a la de una base de Schiff, con
coeficientes de absorcin molar idnticos a 630 nm, mientras que el derivado que se forma con la fructosa
tiene una absorcin mucho menor a esa longitud de onda. Los disacridos reaccionan en grados diferentes y
el color que se obtiene con las pentosas tiene un coeficiente de absorcin molar muy bajo a 630 nm, presen-
tando sin embargo un mximo de absorcin a 480 nm, lo que permite que puedan cuantificarse en presencia
de hexosas.
La reaccin cumple con la ley de Beer en cierto rango de concentraciones, por lo tanto puede ser utili-
zada para la determinacin cuantitativa de aldohexosas en lquidos biolgicos (sangre, lquido cefalorraqu-
deo, etc.). Debido a la gran sensibilidad de la reaccin resulta ideal para el dosaje de glucosa en micromues-
tras, ya que necesitan 20 - 50 l de material biolgico para realizar la determinacin. El color del complejo
formado es estable durante 30, por lo tanto la lectura debe realizarse antes de transcurrido ese tiempo.



1.5.2. SECUENCIACIN DE OLIGOSACRIDOS

La determinacin de las secuencias de oligosacridos plantea problemas similares a los que se dan en la
secuenciacin de protenas, aunque de mayor dificultad. Dados lo muchos tipos de monmeros que pueden
hallarse y la diversidad de enlaces entre ellos, no ha podido disearse un mtodo nico, como la degrada-
cin de Edman de los polipptidos.
El primer paso en cualquier anlisis de secuencia consiste, como en el anlisis de los polipptidos, en la
determinacin de la composicin. El oligmero se hidroliza en una solucin cida, que produce una mezcla
de monosacridos. En la actualidad, estos monosacridos casi siempre se separan, identifican y cuantifican
mediante cromatografa gas-lquido.
La determinacin de la secuencia en s resulta mucho ms difcil. En el pasado se utilizaron ampliamen-
te mtodos qumicos, pero en la actualidad stos se han sustituidos, en gran parte, por la ruptura enzimtica
del oligmero, seguida del empelo de mtodos sofisticados para la identificacin de los fragmentos. Los
investigadores estn familiarizados en la actualidad con el uso de un gran nmero de enzimas (glucosidasas)
que catalizan la ruptura de los enlaces glucosdicos entre los fragmentos de azcares. Algunas de estas en-
zimas tienen una accin muy especfica. Pueden dividirse en dos grupos: exoglucosidasas, que eliminan el
residuo terminal de una cadena de oligosacridos, y endoglucosidasas, que catalizan la ruptura dentro de la
cadena. En la tabla 1-4 se indican algunos ejemplos de estas enzimas.


1
metadifenol
2
aumenta el poder deshidratante del cido clorhdrico
3
mayor tiempo de incubacin mayor temperatura reaccionan las aldosas
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Tabla 1-4. Algunas glucosidasas especficas utilizadas para la secuenciacin de oligosacridos

Nombre de la enzima Origen Especificidad
Exoglucosidasas
Neuraminidasa

|-Galactosidasa

o-Fucosidasa

Endoglucosidasas
Endo-|galactosidasa

Emulsin de almendras

Streptococcus pneumoniae

Streptococcus pneumoniae

Clostridium perfringens


Escherichia freundii

Almendras amargas

c. Silico-o (23 6)-Galactosa o c. Silico-
|(26)-N-acetilglucosamina
Galactosa-|(14)-N-acetilglucosamina

Fucosa-o(12)-Galactosa


N-acetilglucosamina-| (13)-Galactosa-| (14)-
Glucosa (N-acetilglucosamina)
Rompe el enlace con asparagina en muchos oligosac-
ridos con enlaces -N



Un ejemplo sencillo de la aplicacin de glucosidasas especficas para la determinacin de la secuencia
es el que se presenta en la fig. 1-35. El oligosacrido mostrado es una parte de uno de los diversos oligo-
sacridos unidos a la protena srica oromucoide. El residuo del extremo no reductor de la cadena puede
eliminarse mediante la neuraminidasa. Segn se
indica en la tabla 1-4, el residuo terminal debe
ser cido silico, unido a galactosa o N-
acetilglucosamina. Se encuentra el cido silico,
y la posterior liberacin de galactosa por la |-
galactosidasa de Streptococcus indica que el
residuo siguiente corresponde a galactosa, unida
a N-acetilglucosamina mediante un enlace 14.
Este ltimo residuo se confirma mediante su
liberacin por la |-N-acetilglucosaminidasa.
Con el empleo de tcnicas modernas de anlisis,
pueden determinarse de esta forma las secuen-
cias al nivel de picomol.
Aunque estos mtodos pueden proporcionar
a menudo una informacin definitiva, son labo-
riosos y no siempre resultan eficaces. En lo
ltimos aos se ha desarrollado considerable-
mente la RM de alta resolucin y le espectro-
metra de masas como tcnicas para la identifi-
cacin de los oligosacridos complejos. El em-
pleo de estos mtodos se describe en las revisio-
nes de Jones y Wait, pero son demasiado tcni-
cos para describirlos aqu.




FIG. 1-35. Ruptura de un oligosacrido mediante
glucosidasas. El oligosacrido est unido a la prote-
na oromucoide (R)










O
c. silico
O
Galactosa
O
N-acetil-
glucosamina
R
O
c. silico
O
Galactosa
O
N-acet il-
glucosamina
R
O
O
| (1 4)
o (2 6)
O
N-acetil-
glucosamina
R
O
Galactosa
O
N-acet il-
glucosamina
R O
Paso 1
Neurami ni dasa
Paso 2
-galactosi dasa
Paso 3
-N-acetil -
gl ucosami ni dasa

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29
1.6. Bibliografa

- Blanco A. Qumica Biolgica. El Ateneo. (2000).
- Devlin T. Bioqumica, libro de texto con aplicaciones clnicas. 3 Edicin. Editorial Revert (1999).
- Holme DJ. y H. Peck. Bioqumica Analtica. Ed. Acribia. (1987).
- Mathews C, Ahern KG, Van Holde KE.Bioqumica. Editorial Pearson Educacin (2003)
- Murray R, Granner D, Mayes P, Rodwell V. Bioqumica de Harper. Ed. El Manual Moderno (1992)
- Rawn J. Bioqumica. Interamericana Mc Graw- Hill (1989)
- Stryer L. Berg J, Tymoczko JL. Bioqumica. Ed. Revert. 5 Edicin. (2003).
- Voet D,Pratt CW, Voet JG. Fundamentos de Bioqumica. Editorial Medica Panamericana. (2007).



Dra. Laura C. Leiva de Vila