Protoplasm The term protoplasm includes both the substance within and the cell membrane and is the

" living substance" of the cell. It can be differentiated into cytoplasm and the nucleus. Physical properties of protoplasm. It is a transparent and jelly-like material, the consistency varying from the more liquid, slightly gelatinous white of a fresh egg to that of semi-solidified gelatin of jelly. If the protoplasm is more liquid it is termed a sol, if more gelatinous, a gel. Chemical properties of protoplasm. The chemical properties of protoplasm can be divided into inorganic and organic substances.
o

Inorganic Substances. Inorganic substances are water, which make up 90% of the protoplasm, mineral salts, such as NaCl-salt, and gases like oxygen and carbon dioxide.

Organic Substances. Organic substances include proteins, carbohydrates, lipids, nucleic acids and enzymes.

Functions of the Protoplasm

o

Reproduction Cells divide to form identical daughter cells; function of the nucleus of the protoplasm, e.g. the meristematic region of angiosperms.

Irritability The living protoplasm responds to stimuli, e.g. retinal cells in the eye respond to light.

Chemical All these functions are carried out inside the cell, e.g. respiration in the mitochondria;

Excretion Cells must get rid of excretory wastes; they usually diffuse out of the cell through the cell membrane.

Movement Movement is exhibited by certain cells, e.g. unicells; the protoplasm of these cells has a contractile ability.

Growth Growth follows on cell division; there is an assimilation of protoplasm and an increase in size.

PRCTICA DE GLCIDOS

Materiales: Disoluciones diluidas (5 gr. en 100 ml.) de glucosa, sacarosa o azcar comn y almidn. Reactivo de Fehling A y B. Lugol (solucin iodada). cido clorhdrico al 50 %. Gradilla con tubos de ensayo, pinzas sujetatubos, pipetas y mechero.

Desarrollo de la prctica: Se preparan tres tubos de ensayo con 2 ml. de la solucin de glucosa, otros tres con la misma cantidad de la solucin de sacarosa y otros tres con la misma cantidad de la de almidn. En un tubo de cada tipo de glcido se aade 1 ml. de reactivo de Fehling A y, con otra pipeta, 1 ml. de reactivo de Fehling B. Se calienta con cuidado hasta el comienzo de la ebullicin. Si el glcido presente tiene poder reductor (prueba positiva), el lquido deber adquirir un color rojizo al formarse un precipitado de este color que se produce cuando el in cprico del Fehling pasa a cuproso. En los tubos que han dado negativo en la prueba anterior se aaden 2 ml. de HCl al 50 % y se calientan suavemente. A continuacin se repite la prueba del Fehling. Dar una explicacin a los resultados obtenidos. En otro tubo de cada tipo de glcido se aaden unas gotas de lugol. Si la prueba es positiva la disolucin se tie de violeta. Anotar el resultado. Posteriormente, se calienta la disolucin teida de violeta hasta que pierda el color. Dejar enfriar el tubo bajo el grifo, esperar unos minutos y anotar lo que sucede. Explicar los resultados. Poner en otro tubo de ensayo 2 ml. de la disolucin de almidn y una cierta cantidad de saliva. Mezclarlo bien y calentar ligeramente durante poco tiempo. Aadir unas gotas de lugol y anotar los resultados. Realizar un anlisis comparativo entre esta prueba y la anterior. Completar el siguiente cuadro: Glcido GLUCOSA SACAROSA ALMIDN Fehling +++Fehling + HCl +++Lugol +++-

EXPERIENCIAS CON LPIDOS 1.- Prueba de solubilidad Colocar en un tubo de ensayo 2 ml. de aceite y aadir 2 ml. de un disolvente apolar (por ejemplo cloroformo o ter de petrleo). En otro tubo hacer lo mismo, pero aadir agua en vez de disolvente apolar. Agitar y anotar los resultados. 2.- Tincin con Sudn III Poner 2 ml. de aceite en un tubo, aadir 2 ml. de agua y dejar reposar. Una vez formadas las dos fases, dejar caer unas gotas de Sudn III y agitar. Dejar reposar el tubo y anotar los resultados. Colocar 2 ml. de leche en un tubo, verter 10 ml. de agua, unas gotas de Sudn III y agitar fuertemente. Observar que se tie todo de rosa. Si aadimos 1 ml. de HCl al 50 % y calentamos aparecern, dependiendo del tiempo de reposo, dos o tres fases:

a) una superior, de color rosa oscuro, formada por las grasas teidas. b) una intermedia, con agua y lactosa disuelta. c) una inferior, con las protenas desnaturalizadas. 3.- Prueba de la emulsin. Poner 2 ml. de aceite en un tubo, aadir 10 ml. de agua, agitar fuertemente, esperar unos minutos y anotar lo sucedido. Aadir despus 1 ml. de una solucin concentrada de jabn lquido, volver a agitar, esperar unos minutos y anotar lo sucedido. 4.- Prueba de la saponificacin. Colocar 2 ml. de aceite y 2 ml. de Na OH al 20 %, hervir suavemente (de forma controlada) y agitar durante algunos minutos. Dejar reposar y aparecern dos o tres capas: a) Superior (puede no aparecer): aceite que no ha reaccionado. b) Intermedia semislida de jabn. c) Inferior: glicerina disuelta en el agua.

EXPERIENCIAS CON PROTENAS Desnaturalizacin o coagulacin de protenas Hacer series de 4 tubos de ensayo con 2 ml de una disolucin de albmina al 2 % y numerar los tubos. Realizar la misma operacin con leche y con una disolucin de clara de huevo (una clara en 500 ml de agua con sal). A los tubos n 1 aadir 2 ml de HCl, a los n 2 se les aade 2 ml de una disolucin concentrada (al 4 %) de NaCl, a los n 3 aadir 2 ml de NaOH al 20 % y a los n 4 se les calienta suavemente. Interpretar los resultados. Prueba de Biuret El Biuret es una reaccin tpica de los enlaces peptdicos, en la cual los tomos de cobre del reactivo se unen a varios grupos NH, lo que produce una coloracin rosa-violcea. Esta reaccin no sirve para dipptidos ni para aminocidos. Colocar en tubos diferentes disoluciones protenicas, aadir igual cantidad de una disolucin de NaOH al 20 %, agitar y dejar caer 4 o 5 gotas de CuSO4 al 1 %. Interpretar los resultados. Prueba xantoproteica Esta prueba consiste en la nitracin de anillos de fenol presentes en ciertos aminocidos, con la consiguiente formacin de nitrocompuestos de color amarillo. Aadir a cada tubo de ensayo 2 ml de cada disolucin de protena, verter la misma cantidad de HNO3 al 40 %, anotar la coloracin, calentar al bao Mara y anotar los resultados. Prueba enzimtica: reconocimiento de la catalasa La catalasa acelera la siguiente reaccin: 2 H2O2 = 2 H2O + O2 Colocar en tubos de ensayo aproximadamente el mismo peso de varios tejidos animales y vegetales, aadir a cada tubo 5 ml de H2O2 y anotar lo que sucede. Explicar lo que est ocurriendo y ordenar los tejidos segn su actividad enzimtica. Repetir el mismo proceso anterior, pero hervir antes los tejidos durante unos diez minutos. Explicar los resultados obtenidos.

RECONOCIMIENTO DE PRINCIPIOS INMEDIATOS EN LA LECHE

MATERIALES Gradilla con 12 tubos de ensayo. Pinza de madera para sujetar los tubos. Esptula metlica. Embudo. Papel de filtro. Mechero. Vaso de precipitados. Pipeta Pasteur o cuentagotas. Pipetas graduadas. Bombona de agua.

PRODUCTOS BIOLGICOS Y REACTIVOS Leche entera. Leche fermentada de forma natural. cido clorhdrico puro. cido clorhdrico: solucin al 50 %. cido ntrico puro. Cloruro sdico: solucin concentrada. Hidrxido sdico: solucin al 20 %. Reactivo de Benedict o de Fehling. Sudan III: solucin alcohlica al 0,5 %.

OBJETIVOS Se pretende conseguir que el alumnado compruebe de forma sencilla la existencia de diversos principios inmediatos fundamentales como protenas, grasas y azcares en un alimento bsico como la leche, as como el comportamiento de las protenas lcteas ante determinados cambios fsicos y qumicos. PROCEDIMIENTO A) Desnaturalizacin o coagulacin de protenas lcteas. Hacer una serie de cuatro tubos de ensayo y numerarlos. Al tubo n 1 se le aade 2 ml de leche y 2 ml de HCl puro. Al tubo n 2 se le aade igual cantidad de leche y 2 ml de una disolucin concentrada de NaCl. Al tubo n 3 aadir 2 ml de leche y 2 ml de NaOH al 20 %. Al tubo n 4 se le aade 2 ml de leche y despus se le calienta levemente. Anotar los resultados obtenidos y comparar los diferentes tubos. B) Reconocimiento de grasas en la leche. Colocar 2 ml de leche en un tubo de ensayo, aadir 10 ml de agua y unas gotas de Sudan III y agitar fuertemente. Observar que se tie todo de rosa. Si aadimos 1 ml de HCl al 50 % y calentamos pueden aparecer dos o tres fases: a) superior, de color rosa, formada por las grasas teidas por el Sudan III, que es un colorante especfico de grasas. b) intermedia, con el agua y ciertos compuestos solubles, como la lactosa y algunas protenas disueltas (lactoalbmina y lactoglobulina). c) inferior, con las protenas coaguladas y precipitadas. C) Reconocimiento de glcidos en la leche. Se recoge aparte con una pipeta Pasteur o cuentagotas la fase soluble de la prueba anterior, se filtra y se aade 1 ml del filtrado a un tubo de ensayo. A este tubo se le agrega 1 ml del reactivo de Fehling (o de Benedict) y se le calienta durante unos minutos. Si la prueba es positiva (hay presencia de un glcido reductor, en este caso la lactosa) aparecer un precipitado de xido de cobre, de color rojo.

D) Reconocimiento de protenas en la leche: Prueba xantoproteica. Recoger con una esptula el precipitado de la leche coagulada (casena), llevarlo a un trozo de papel de filtro y secarlo. Poner en un tubo de ensayo una pequea porcin del precipitado seco, aadir unas gotas de cido ntrico puro y calentar ligeramente. Anotar los resultados obtenidos.

ESTUDIOS ENZIMTICOS 1.- Hidrlisis enzimtica del almidn por la saliva: Accin digestiva de la amilasa salivar. Primero se hace un tubo patrn con 2 ml. de una disolucin de almidn al 2 % y unas gotas de disolucin de yodo (lugol). Observar el resultado. Despus se calienta suavemente el tubo hasta que la mezcla pierda el color. Dejar enfriar el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos. Anotar lo sucedido. Colocar en un segundo tubo 2 ml. de la disolucin de almidn y una cierta cantidad de saliva, mezclar bien la saliva con la disolucin y calentar muy suavemente durante unos segundos. Aadir unas gotas de lugol. Anotar los resultados y dar una explicacin a lo ocurrido. 2.- Reconocimiento de la enzima catalasa en tejidos. La catalasa se encuentra tanto en tejidos vegetales (patata, zanahoria, lechuga, etc.) como en tejidos animales (carne, pescado, etc.) produciendo la siguiente reaccin qumica: H2O2 (agua oxigenada) ==== H2O + O2 (gaseoso) Es decir, la enzima descompone el perxido de hidrgeno o agua oxigenada en agua y oxgeno gaseoso, que se desprender en forma de burbujas en un medio acuoso. Poner en varios tubos de ensayo previamente numerados distintos tejidos (ms o menos el mismo peso de cada tejido). Aadir 5 ml. de agua oxigenada a cada tubo y anotar lo que sucede. Explicar lo ocurrido y ordenar los tejidos segn su actividad. Repetir el proceso anterior, pero hervir antes los tejidos durante diez minutos. Explicar los resultados obtenidos. 3.- Actividad cataltica de la catalasa. En un tubo de ensayo se coloca un trozo de hgado (o 1 ml. de extracto de hgado) y 10 ml. de agua oxigenada. Se cierra el tubo con un tapn, que se deja algo flojo para el escape de los gases producidos en la reaccin, en cuyo centro exista un orificio por el cual se pueda introducir un termmetro. As, hemos hecho un calormetro. Se anota la temperatura ambiente, que se toma como temperatura inicial de la reaccin, y despus se va anotando las variaciones de temperatura que se producen en el interior del calormetro cada treinta segundos durante un perodo de cinco minutos. Hacer la grfica de la reaccin y explicar los resultados.