UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS E INGENIERA

QUMICA ANALTICA INSTRUMENTAL

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BOGOT, D.C. ENERO DE 2006

JOS HUMBERTO GUERRERO RODRGUEZ

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA FACULTAD DE CIENCIAS BSICAS E INGENIERA

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MDULO

PRIMERA UNIDAD. FUNDAMENTOS DE LA QUMICA ANALTICA 1. Palabras clave 2. Propsitos 3. Objetivos 4. Competencias 5. Metas de aprendizaje ESQUEMA CONCEPTUAL DE LA UNIDAD ACTIVIDADES INICIALES INTRODUCCIN TEMA 1. FUNDAMENTOS DE LA QUMICA ANALTICA 1. Conceptos, clases y campos de aplicacin 2. Mtodos de anlisis 3. Valoracin del mtodo analtico 3.1 Desarrollo del mtodo analtico 3.2 Condiciones del mtodo analtico ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 1 TEMA 2. REACCIONES QUMICAS EN LOS ANLISIS QUMICOS 1. Clasificacin de las reacciones 1.1 Reacciones cido base 1.2 Reacciones de precipitacin 1.3 Reacciones de oxidacin reduccin 1.4 Reacciones de hidrlisis 1.5 Reacciones de formacin de complejos 2. Cintica y equilibrio qumico 2.1 Cintica qumica 2.2 Equilibrio qumico 3. Criterios para la resolucin de problemas en Qumica Analtica ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 2 TEMA 3. PREPARACIN PARA EL ANLISIS QUMICO 1. La muestra 2. Material de vidrio 3. Descomposicin de la muestra 4. Equipo de laboratorio ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 3 TEMA 4. OBTENCIN Y MANEJO DE DATOS 1. Sistema Internacional de Medidas 2. El error asociado a las mediciones experimentales 2.1 Errores accidentales o groseros 2.2 Errores aleatorios o indeterminados 2.3 Errores sistemticos 2.3.1 Errores instrumentales de medicin 2.3.2 Errores por el mtodo de medicin 2.3.3 Errores de instalacin 3. Precisin y exactitud en las mediciones analticas 3.1 Determinacin de los errores en un anlisis qumico 3.1.1 Determinacin de la precisin del resultado 3.1.2 Propagacin del error 3.1.2.1 Suma y resta 3.1.2.2 Multiplicacin y divisin 3.1.2.3 Potenciacin 3.2 Estimacin de las cifras significativas 3.2.1 Reglas para la determinacin del nmero de cifras significativas 3.2.2 El resultado final 4. Determinacin de la muestra y criterio de aceptacin de datos 4.1 Significado estadstico de muestra 4.2 Criterios para la aceptacin de datos

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55 55 55 55 56 56 57 58 64 66 66 67 68 68 69 71 75 75 75 76 76 76 77 77 77 79 82 83 84 84 86 87 87 88 90 91 94 95 96 96 96 97 97 97 99 100 105 106 106 106 107 107 107 108 108 108

4.2.1 El contraste de Dixon (Contraste Q) 4.2.2 El contraste de Grubbs ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 4 ACTIVIDADES DE PROFUNDIZACIN Y TRANSFERENCIA ACTIVIDADES DE LABORATORIO LA SEGURIDAD EN EL LABORATORIO QUMICO 1. Riesgos en el laboratorio 1.1 Riesgos con compuestos qumicos 2. Almacenamiento de los reactivos GUA PARA LA PRESENTACIN DE INFORMES DE LABORATORIO 1. Estructura del informe 1.1 Ttulo de la prctica 1.2 Objetivos de la prctica 1.3 Teora 1.4 Procedimiento 1.5 Datos experimentales 1.6 Clculos 1.7 Resultados 1.8 Anlisis de resultados 1.9 Conclusiones 1.10 Bibliografa 2. Algunas normas para la redaccin del informe 3. Normas de seguridad 4. Recomendaciones para el uso de los equipos de anlisis qumico 4.1 Cuidados con la balanza 4.2 Cuidados con la centrfuga 4.3 Cuidados con las buretas INTRODUCCIN AL ANLISIS CUALITATIVO 1. Anlisis cualitativo de cationes 2. Anlisis cualitativo de aniones 3. Procedimiento 3.1 Anlisis cualitativo del grupo I de cationes 3.2 Anlisis cualitativo de algunos aniones 4. Tratamiento de datos DETERMINACIN DEL PESO DE UN GRANO DE UN CEREAL COLOMBIANO 1. Procedimiento 2. Tratamiento de datos SEGUNDA UNIDAD. MTODOS CLSICOS DE ANLISIS 1. Palabras claves 2. Propsitos 3. Objetivos 4. Competencias 5. Metas de aprendizaje ESQUEMA CONCEPTUAL DE LA UNIDAD TEMA 1. GRAVIMETRA 1. Solubilidad 2. Equilibrio qumico y reacciones de precipitacin 2.1 Conceptos generales 2.2 Factores que influyen a la constante de producto de solubilidad 2.2.1 Efecto de la temperatura 2.2.2 Efecto del ion comn 2.2.3 Efecto del ion no comn 3. La tcnica de la gravimetra 3.1 Condiciones 3.2 Mtodos 3.2.1 Tcnicas de electrodeposicin

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108 109 111 113 114 115 115 115 126 130 131 131 131 132 134 136 137 137 137 139 139 139 141 142 142 142 142 144 144 147 149 149 151 153 154 155 156

3.2.2 Tcnicas de precipitacin 3.2.3 Tcnicas de volatilizacin 3.3 Metodologa en el anlisis gravimtrico 3.4 Manejo de los datos y expresin de resultados ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 5 TEMA 2. VOLUMETRA 1. Conceptos 2. Fundamentos de la titulometra 3. Clases de anlisis titulomtricos 3.1 Volumetra cido base 3.1.1 Autoprotlisis del agua 3.1.2 La fuerza de cidos y bases 3.1.3 Hidrlisis de sales 3.1.3.1 Sales de cidos y bases fuertes 3.1.3.2 Sales de cido dbil y base fuerte 3.1.3.3 Sales de cido fuerte y base dbil 3.1.3.4 Sales de cido dbil y base dbil 3.1.3.5 Sales que producen aniones diprticos 3.1.4 Soluciones tampn o buffer 3.1.5 El problema del indicador y el punto final ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 6 3.2 Volumetra de precipitacin 3.2.1 Argentometra 3.2.1.1 Titulacin de Mohr 3.2.1.2 Titulacin del Volhard ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 7 3.3 Volumetra Redox 3.3.1 Permanganimetra 3.3.2 Yodometra ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 8 3.4 Volumetra de iones complejos 4. La tcnica de la volumetra 4.1 Condiciones 4.1.1 El material volumtrico 4.1.1.1 Matraces o balones aforados 4.1.1.2 Pipetas graduadas y aforadas 4.1.1.3 Buretas 4.1.1.4 Probetas 4.2 Metodologa de la titulacin 4.2.1 Preparacin de soluciones 4.2.2 Estandarizacin de las soluciones 4.2.3 Alcuota o volumen de la muestra 4.2.4 Purga y carga de la bureta 4.2.5 Titulacin de la muestra 4.2.6 Registro de resultados 4.3 Manejo de datos y expresin de resultados ACTIVIDADES DE LABORATORIO HUMEDAD, VOLTILES, EXTRACTO ETREO ALIMENTOS 1. Procedimiento 1.1 Humedad y voltiles 1.2 Extracto etreo 1.3 Fibra cruda 2. Expresin de resultados 2.1 Humedad, voltiles y slidos totales 2.2 Extracto etreo

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Y FIBRA CRUDA EN

2.3 Fibra cruda 3. Informe NDICE DE ACIDEZ 1. Procedimiento 1.1 Preparacin de la solucin de hidrxido de sodio 1.2 Estandarizacin de la solucin de hidrxido de sodio 1.3 Determinacin del ndice de acidez 2. Clculos DETERMINACIN DE NITRGENO EN ALIMENTOS 1. Procedimiento 1.1 Preparacin de reactivos 1.2 Digestin 1.3 Destilacin 1.4 Titulacin 2. Clculos 3. Informe CENIZAS Y DETERMINACIN DE CALCIO POR PERMANGANOMETRA 1. Procedimiento 1.1 Determinacin de las cenizas 1.2 Solubilizacin de las cenizas 1.3 Preparacin de la solucin de permanganato de potasio 0,1 N 1.4 Estandarizacin de la solucin de permanganato de potasio 1.5 Determinacin del calcio 2. Clculos 3. Informe DETERMINACIN DE CLORUROS MEDIANTE LA TCNICA DE VOLHARD 1. Procedimiento 1.1 Preparacin solucin estndar de nitrato de plata 1.2 Estandarizacin de la solucin de nitrato de plata 1.3 Preparacin de la solucin de tiosulfato o tiocianato de amonio o potasio 0,1 N 1.4 Estandarizacin de la solucin de tiosulfato 1.5 Preparacin de la muestra 1.6 Valoracin de Volhard 2. Clculos 3. Informe NDICE DE YODO EN ACEITES COMESTIBLES 1. Procedimiento 1.1 Preparacin de la solucin halogenante de Wijs 1.2 Preparacin de otros reactivos 1.3 Preparacin de la solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N 1.4 Estandarizacin de la solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N 1.5 Preparacin de la muestra 1.6 Determinacin del ndice de Yodo 2. Clculos 3. Informe ACTIVIDAD DE PROFUNDIZACIN Y TRANSFERENCIA TERCERA UNIDAD. MTODOS INSTRUMENTALES DE ANLISIS 1. Palabras claves 2. Propsitos 3. Objetivos 4. Competencias 5. Metas de aprendizaje ESQUEMA CONCEPTUAL DE LA UNIDAD INTRODUCCIN TEMA 1. pH METRA 1. Fundamento de los mtodos instrumentales

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1.1 Clasificacin de los mtodos instrumentales 1.2 Condiciones analticas de los mtodos instrumentales 2. Fundamentos de la pH metra 3. Equipo utilizado en pH metra 3.1 Electrodo Normal de Hidrgeno (E.N.H.) 3.2 Electrodo de calomel saturado 3.3 Electrodo de vidrio 4. Procedimiento 4.1 Preparacin de la muestra 4.2 Calibracin del pH metro 4.3 Determinacin analtica 4.4 Tratamiento de los datos ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 9 TEMA 2. ESPECTROFOTOMETRA 1. Principios 1.1 Radiacin electromagntica 1.2 El espectro electromagntico 1.3 Interaccin radiacin electromagntica sustancias 1.3.1 Procesos de absorcin y emisin de energa electromagntica 1.3.2 Fenmenos asociados a la emisin y absorcin de energa electromagntica 1.3.2.1 Espectroscopia visible 1.3.2.2 Espectroscopia ultravioleta 1.3.2.3 Espectroscopia infrarroja 1.3.2.4 Espectroscopia de absorcin atmica 1.4 Leyes de absorcin o de Bourguer Lambert Beer 1.4.1 Ley de Lambert 1.4.2 Ley de Beer 1.4.3 Ley de Bourguer Lambert Beer 1.4.4 Desviaciones de la Ley de Beer 1.4.4.1 Desviaciones de origen qumico 1.4.4.2 Desviaciones de origen fsico 2. Equipo instrumental 2.1 Fuentes de radiacin electromagntica 2.2 Sistema monocromador 2.3 Porta muestras y celdas 2.4 Detector transductor 2.5 Sistema de amplificacin, transformacin y comparacin 2.6 Sistema de registro 3. Procedimiento 3.1 Condiciones del mtodo 3.2 Material de laboratorio 3.3 Preparacin de las muestras 3.4 Caractersticas de la reaccin 3.5 Espectros de absorcin y seleccin de la radiacin apropiada 3.6 Curva de calibracin 3.7 Ajuste por mnimos cuadrados 3.8 Determinacin de la concentracin del problema ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 10 TEMA 3. CROMATOGRAFA 1. Mtodos de separacin y purificacin 1.1 Mtodos clsicos 1.2 Destilacin 1.2.1 Destilacin simple 1.2.2 Destilacin fraccionada 2. CROMATOGRAFA 2.1 Fundamentos

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2.2 Clases de cromatografa 2.2.1 Segn el fenmeno predominante 2.2.1.1 Cromatografa de adsorcin 2.2.1.2 Cromatografa de reparto 2.2.1.3 Cromatografa de intercambio inico 2.2.1.4 Cromatografa de filtracin por gel o de tamices moleculares 2.2.2 Cromatografas segn las fases implicadas 2.3 Criterios para la seleccin de la clase de cromatografa 3. Cromatografa en papel 3.1 Principio 3.2 Equipo empleado 3.2.1 Fase estacionaria 3.2.2 Aplicadores 3.2.3 Cmaras 3.2.4 Eluyentes o solventes 3.2.5 Reveladores 3.2.6 Atomizadores 3.3 Procedimiento 3.3.1 Preparacin de la muestra 3.3.2 Corte del papel 3.3.3 Ensayo de concentracin 3.3.4 Ensayo para elegir eluyentes y desarrollo 3.3.5 Revelado 3.4 Aplicaciones 3.4.1 Cromatografa preparativa en papel 3.4.2 Cromatografa cuantitativa en papel 3.4.2.1 Determinacin in situ 3.4.2.2 Determinacin por extraccin 4. Cromatografa en capa delgada 4.1 Principios 4.2 Equipos 4.2.1 Sorbentes o fase estacionaria 4.2.1.1 Gel de slice 4.2.1.2 Almina 4.2.1.3 Kieselghur o tierra de diatomceas 4.2.1.4 Celulosa 4.2.1.5 Poliamida 4.2.1.6 xido de magnesio 4.2.1.7 Geles de filtracin 4.2.1.8 Otros sorbentes 4.2.2 Placas 4.2.3 Eluyentes y reveladores 4.2.4 Las cmaras 4.3 Procedimientos 4.3.1 Activacin de las placas 4.3.2 Concentracin a aplicacin de la muestra 4.3.3 Eleccin del sistema eluyente 5. Cromatografa en columna 5.1 Fundamentos 5.2 Equipo utilizado 5.2.1 Columnas 5.2.2 Sorbentes 5.2.2.1 Resina de intercambio inico 5.2.2.2 Sorbentes para filtracin por gel 5.2.3 Eluyentes 5.3 Procedimiento

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5.3.1 Tcnicas de empaque de la columna 5.3.2 Aplicacin de la muestra 5.3.3 Elusin 5.3.4 Deteccin de las sustancias separadas 6. Cromatografa de gases 6.1 Principios 6.2 Equipo y condiciones previas 6.2.1 Gas de transporte o fase mvil 6.2.2 Introduccin de la muestra 6.2.3 Columnas 6.2.3.1 Tubera 6.2.3.2 Tamao: dimetro y longitud de la columna 6.2.3.3 Longitud 6.2.3.4 Soporte slido para la fase lquida 6.2.3.5 Fase lquida 6.2.3.6 Preparacin de la columna 6.2.3.7 Evaluacin de la columna 6.2.4 Temperatura de la columna 6.2.5 El detector 6.2.5.1 Detector de conductividad trmica (DTC) 6.2.5.2 Detector de ionizacin por llama (DILL) 6.2.5.3 Detector de captura de electrones (DCE) 6.2.6 Registrador 6.3 Metodologa 6.3.1 Anlisis cualitativo 6.3.2 Anlisis cuantitativo 6.3.2.1 Altura del pico 6.3.2.2 rea del pico 6.3.2.3 Normalizacin 6.3.2.4 Factores de correccin 6.3.2.5 Calibracin absoluta 6.3.2.6 Calibracin relativa o estandarizacin interna 7. Cromatografa lquida de alta eficiencia o HPLC 7.1 Fundamentos 7.2 Equipo y preparacin de la muestra 7.3 Metodologa

ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 11 ACTIVIDADES DE LABORATORIO DETERMINACIN DEL pH DE UNA MUESTRA 1. Procedimiento 1.1 Calibracin del pH metro 1.2 Lectura del pH en la muestra 2. Tratamiento de los datos TITULACIN POTENCIOMTRICA 1. Procedimiento 1.1 Preparacin de la muestra 1.2 Calibracin del pH metro 1.2 Desarrollo de la curva de titulacin potenciomtrica 2. Clculos 3. Informe DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE VITAMIA ESPECTROFOTOMETRA 1. Procedimiento 1.1 Preparacin de la curva de calibracin 1.2 Preparacin del equipo

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C MEDIANTE

1.3 Preparacin de la muestra 1.4 Determinacin espectrofotomtrica del contenido de vitamina C 2. Clculos 2.1 Transformacin a absorbancia 2.2 Diseo de la curva de calibracin 2.3 Determinacin de la concentracin de vitamina C en la muestra 3. Informe EXTRACCIN Y PURIFICACIN DE CAROTENO POR CROMATOGRAFA DE COLUMNA Y OBTENCIN DE SU ESPECTRO 1. Procedimiento 1.1 Preparacin de la columna 1.2 Preparacin de la muestra 1.3 Desarrollo de la cromatografa 1.4 Obtencin del extracto de carotenos 1.5 Obtencin del espectro de absorcin visible 2. Clculos 2.1 Elaboracin del espectro de absorcin visible 3. Informe ACTIVIDAD DE PROFUNDIZACIN Y TRANSFERENCIA

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PRIMERA UNIDAD

FUNDAMENTOS DE LA QUMICA ANALTICA

1. Palabras clave.
Anlisis qumico, Anlisis Cualitativo, Anlisis Cuantitativo, Equilibrio Qumico, Cintica Qumica, Muestra, Datos, Anlisis de Datos, Reaccin Qumica, Reaccin cido base, Gravimetra, Reaccin de oxidacin reduccin, Complejos.

2. Propsitos. Al ser la Qumica Analtica Instrumental una disciplina de la Qumica, comparte los fundamentos tericos, metodolgicos y procedimentales de la denominada Qumica General ya que tiene en cuenta fenmenos de reaccin con la finalidad de obtener datos al modificar el comportamiento de los mismos de modo que produzca un resultado visible (aparicin de un precipitado, de un cambio de color o de su potencial qumico) detectable por nuestros sentidos, de modo que nos de alguna certeza de su composicin o de su cantidad. Se inicia describiendo el campo especfico de la Qumica Analtica. Luego se estudia brevemente la reaccin qumica desde el punto de vista de su velocidad y de su capacidad de alcanzar el equilibrio, las condiciones que la dirigen y los factores que externamente se pueden influenciar conforme al inters particular de su aplicacin. El anlisis qumico conlleva la aparicin de un dato, el cual puede ser valorado mediante un conjunto de criterios que permiten valorar su reproducibilidad, el rango de variacin del mismo, los errores que se pueden cometer en su obtencin, los criterios para su valoracin y las posibles formas estadsticas de refinarlos. 3. Objetivos.

I. Comprender y aplicar los fundamentos conceptuales y metodolgicos de la qumica analtica como son los de cintica y equilibrio qumico, las reacciones qumicas que se pueden utilizar para determinaciones cualitativas y cuantitativas, las tcnicas para preparacin de muestras para anlisis y los criterios a tener en cuenta para ordenar un anlisis qumico. II. Establecer un mtodo para el estudio de los conceptos fundamentales de la Qumica Analtica. III. Determinar cules son los criterios que permitirn la formulacin de las mejores recomendaciones para la muestra analizada o para su rechazo definitivo.

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4. Competencias. En esta unidad el estudiante comenzar a determinar el campo real de trabajo de la Qumica Analtica Instrumental al comprender sus fundamentos, su subdivisin dependiendo del propsito del mismo: conocer si existe o no determinada sustancia o 11

determinar la cantidad de la misma que existe en una determinada muestra, las condiciones que debe cumplir la muestra para que sea representativa, cmo se conserva y como debe prepararse antes de utilizar cualquier mtodo analtico. Debe comenzar a estructurar su propio mtodo de estudio, utilizando las estrategias que ha venido desarrollando en otros cursos al efectuar la adecuada combinacin entre estudio individual, trabajo en grupo colaborativo y en grupo de curso ya que todos ellos le ayudan a alcanzar las metas del mismo. Necesariamente requiere el desarrollo de criterios que le permitan efectuar valoraciones y recomendaciones sobre las condiciones que debe cumplir una muestra y que necesariamente se han predeterminado. 5. Metas de Aprendizaje. Conocer el campo de trabajo de la Qumica Analtica Instrumental, las clases de anlisis, los fundamentos qumicos que sustentan los mtodos analticos, los procedimientos y tcnicas para la obtencin y conservacin de la muestra, lo mismo que los procesos requeridos para la valoracin de datos en trminos de su reproducibilidad dentro de un anlisis. Establecer su propio mtodo de trabajo para la seleccin de las muestras y su preparacin y definicin de los criterios para ordenar unos anlisis qumicos cualitativos o cuantitativos o ambos de ser necesario. Definir el procedimiento a seguir para establecer los criterios de anlisis de datos y sus resultados.

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ESQUEMA CONCEPTUAL DE LA UNIDAD

QUMICA ANALTICA Estudia FUNDAMENTOS, PROCESOS, MTODOS, VALORACIN DE RESULTADOS Expresados CUALITATIVA CUANTITATIVA

De un:

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ANALITO Presente en: MUESTRA Cuyos RESULTADOS Deben ser: PRECISOS EXACTOS Valorando su: ERROR ABSOLUTO PROPAGACIN ERROR ERROR RELATIVO

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ACTIVIDADES INICIALES
El presente taller tiene como propsito que usted pueda determinar cmo estn sus conocimientos previos requeridos para el desarrollo del curso de Qumica Analtica e Instrumental. Vamos a revisar sus conceptos de tomo, notacin espectral, tabla peridica, familias, grupos, nomenclatura, reacciones qumicas, balance de ecuaciones, soluciones y concentracin de soluciones que son necesarios para abordar con xito el trabajo acadmico de este curso. Se presentan problemas que se deben analizar cuidadosamente para manifestar si son correctos o no, resolver para obtener un resultado y elaborar un concepto en caso de que no se encuentre una posible solucin al mismo. Inicialmente se debe realizar de manera individual, luego se hace en pequeo grupo y finalmente pasar a consulta con su tutor en una sesin de tutora ya que si no se alcanzan los resultados esperados (se propone un 80%) es necesario que se disee una estrategia para que se puedan repasar nuevamente esos conceptos y volver a intentar la solucin del taller. Si se dominan, seguramente van a tener un xito permanente en el desarrollo del curso. Como criterio para la realizacin de la valoracin de los resultados es que acumule diez puntos por cada pregunta, situacin o problema correctos. De lo contrario, asigne cero (se considera que domina todo o no lo logra). Haga la sumatoria de todos los puntos; si logra un porcentaje mnimo equivalente al 70 %, puede continuar con el estudio del material. Si no lo alcanza, no se desespere planee junto con su tutor un mecanismo remedial para alcanzar los propsitos esperados en aquellos resultados deficientes y que ha podido detectar al calificar su examen. Repita nuevamente la prueba; esperamos que alcance los resultados esperados. Es importante que tome conciencia por s mismo del dominio suficiente de conceptos y las metodologas de resolucin de problemas para que pueda atender eficientemente su trabajo acadmico con los conceptos y fundamentos de los mtodos analticos. Propsito. Revisar su grado de dominio de los conceptos, mtodos estndar y forma de reportar los resultados de resolucin de problemas de la qumica bsica, como conocimientos previos para el curso de Qumica Analtica Instrumental. Desarrollo del Taller Seleccione para las siguientes preguntas, la respuesta correcta encerrndola en un crculo: 1. La mejor definicin de sustancia es: 14

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a. b. c. d.

Parte de materia homognea o heterognea. Porcin de materia que ocupa un lugar en el espacio y tiene volumen. Parte de la materia que ocupa un lugar en el espacio y tiene masa. Porcin de materia que puede ser slida, lquida, gaseosa o una mezcla.

2. La diferencia entre masa atmica y nmero atmico es: a. b. c. d. El nmero atmico representa la cantidad de neutrones que tiene el tomo. La masa atmica se representa por A y el nmero atmico por Z. El nmero atmico equivale a la cantidad de electrones que tiene el tomo. La masa atmica es la suma de protones y neutrones del tomo dado.

3. El hecho de que un tomo pueda absorber o emitir energa radiante luminosa demuestra: a. El movimiento de los electrones a niveles superiores o inferiores absorbiendo o emitiendo energa. b. La presencia de capas con energa cuantizada donde se puede intercambiar protones con electrones entre ncleo y capa electrnica. c. Que en cada nivel slo existe un nmero definido de electrones y si se llega a encontrar de ms no obedece las leyes del tomo. d. La facilidad de reaccin qumica que tiene la sustancia que exhibe el fenmeno. 4. En la Tabla Peridica de los elementos, una familia representa tomos: a. b. c. d. Con igual nmero de capas electrnicas, con igual nmero de electrones. Que tienen el mismo nmero de electrones en su ltimo nivel. Que por su afinidad electrnica pueden formar molculas entre s. Con el mismo nmero de niveles pero diferente cantidad de electrones.

5. La valencia en un tomo significa: a. b. c. d.

El potencial electrnico del elemento. Su capacidad para formar cationes. Su capacidad para transferir electrones. Su capacidad de combinacin.

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6. El enlace covalente ocurre: a. b. c. d. Por polarizacin de los tomos participantes en el enlace. Por cesin de electrones debido a diferente electronegatividad de tomos. Por comparticin de un par electrnico entre orbitales semillenos. Para mantener la estabilidad definida en la Regla del Octeto.

7. Un enlace covalente coordinado se caracteriza porque: a. Los tomos adquieren la estructura de un gas noble. b. Se comparten electrones entre los tomos implicados. 15

c. Un tomo aporta el par de enlace y el otro el orbital. d. Los tomos tienen diferente potencial de ionizacin y afinidad. 8. Un enlace inico se presenta entre dos tomos: a. Con la misma notacin espectral pero son de diferentes familias. b. En que uno de ellos puede sufrir hibridacin entre los niveles s y p. c. En que uno tiene bajo potencial de ionizacin y el otro alta afinidad electrnica. d. Que pertenecen a familias que se encuentran opuestos en la tabla peridica. 9. La tendencia de ocurrencia de una reaccin qumica se debe a: a. b. c. d. La rpida formacin del complejo activado. La diferencia de energa reactivo producto. El medio en que ocurre la reaccin qumica. Las condiciones de pH, temperatura y presin.

10. El equilibrio qumico que presentan las reacciones qumicas se comprende como: a. Velocidad de descomposicin igual a velocidad de formacin. b. La relacin de iguales cantidades de reactivos a iguales cantidades de productos. c. Las concentraciones de las sustancias afectadas por sus coeficientes estequiomtricos. d. La relacin con las condiciones de pH, temperatura, presin, agitacin y adicin de reactivos. 11. La funcin qumica es: a. b. c. d.

El grupo funcional que caracteriza a un conjunto de sustancias. La organizacin de los tomos que componen un compuesto dado. Las propiedades fisicoqumicas que tiene un compuesto. La proporcin de tomos que se encuentran en su frmula qumica.

12. El fundamento del balance de las ecuaciones qumicas es la ley de: a. b. c. d. Las proporciones mltiples. La conservacin de la materia. Las presiones parciales. La periodicidad qumica.

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13. En las reacciones de oxidacin reduccin, la sustancia que se oxida: a. b. c. d. Modifica su valencia. Es agente reductor. Produce corriente. Acepta electrones. 16

14. La normalidad y la molaridad de una sustancia se diferencian de su molalidad por la relacin de: a. b. c. d. Masa de soluto con respecto a la de solvente. Moles de soluto con respecto a los del solvente. Moles de soluto con respecto al volumen de solucin. Volumen del soluto con respecto al volumen de solucin.

15. Escriba la frmula qumica de los compuestos que tienen los siguientes nombres: xido de rubidio, cido arsnico, xido clcico, cido bromhdrico, xido de estao (II), cido selenhdrico, xido fosfrico, cido antimnico, xido perclrico, cido piroarsnico, cido metafosfrico, cido metabrico, cido hiponitroso, cido disulfuroso, cido pirosulfrico, cido titriocarbnico, cido piropermangnico, clorato potsico, cido pirocromoso, sulfito de bario, hidrxido de platino (II), sulfito de bario, hidrxido de nquel (II), nitrato de cadmio, hidrxido ferroso, fosfato arico, arseniato de plata, anhdrido selenioso, metasilicato ferroso, anhdrido carbnico, yodato de litio, anhdrido fosfrico, hipofosfito de cesio, anhdrido nitroso, hexahidrgeno pirofosfato cprico, xido ferrosofrrico, xido airoso, bixido de plomo, xido plumbosoplmbico, anhdrido silcico, hidruro niqueloso, perxido de estroncio. 16. Escriba los nombres qumicos para las siguientes sustancias teniendo en cuenta su frmula qumica: B2O3 PbO I2O7 H2CO3 HClO3 H3PO4 Pt(OH)4 Li2O2 Ca2SO4 Al2O3 Br2O5 ZnH2 H2SO4 Sn(IO3)4 PbSiO3 HKS H2 S HBr H2SO2 H2SO3 AuOH SiO2 P2O5 MnO H2CrO4 HMnO4 KNO2 Cu(OH)2 K2O2 BaO2 Fe2O3 As2O3 TeH2 HgOH Fe(OH)2 SnBr4 Sr(SeH)2 HF HI HNO3 Mn2P2O7 CuOH

17. Cules son las sales y dems productos que se forman cuando reacciona el: a. b. c. d. e. f. hidrxido de potasio con cido clorhdrico? hidrxido de magnesio con cido sulfhdrico? hidrxido de sodio con cido fosfrico? hidrxido de aluminio con cido carbnico? hidrxido frrico con el cido sulfrico? hidrxido de potasio con el cido permangnico?

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18. Escriba y balancee la ecuacin correspondiente a cada una de las siguientes descripciones: a. El hidrxido de litio reacciona con el cido bromhdrico para formar bromuro de litio y agua. b. En monxido de carbono reacciona con el pentxido de yodo para dar bixido de carbono y yodo. 17

c. Al mezclar sulfuro de cobre con oxgeno a alta temperatura, se obtienen cobre y dixido de azufre. d. El carbonato de sodio reacciona con cido clorhdrico para formar cloruro de sodio, bixido de carbono y agua. e. El fosfuro de calcio reacciona con agua produciendo fosfina e hidrxido clcico. f. La reaccin del xido de vanadio (II) con xido frrico da pentxido de vanadio y xido ferroso. g. El bicromato potsico reacciona con cido oxlico (H2C2O4) y cido sulfrico para dar sulfato cido de potasio, sulfato de cromo, bixido de carbono y agua. h. El aluminio reacciona con el xido de plomo para dar plomo y xido de aluminio. i. El ozono reacciona con el xido ntrico y agua produciendo cido ntrico y oxgeno. j. El calentamiento del perxido de bario produce xido de bario y oxgeno. 19. Las siguientes reacciones son Redox. Por favor, balancelas por cualquier mtodo (ion electrn o por nmero de oxidacin): CuS + HNO3 Cu(NO3)2 + S + H2O + NO MnSO4 + (NH4)2S2O8 + H2O MnO2 + H2SO4 + (NH4)2SO4 CoCl2 + KNO2 + CH3COOH K3Co(NO2)6 + NO + CH3COOK + KCl + H2O K3Fe(CN)6 + Cr2O3 + KOH K4Fe(CN)6 + K2CrO4 + H2O CdS + I2 + HCl CdCl2 + HI + S Ag2S + HNO3 AgNO3 + S + NO + H2O As2S5 + HNO3 H3AsO4 + H2SO4 + H2O + NO2 P2H4 PH3 + P4H2 CuO + NH3 N2 + H2O + Cu 20. Resuelva los siguientes problemas:

a) Al reaccionar el xido de zinc con monxido de carbono se producen zinc y dixido de carbono. En una combinacin de 475,6 g de xido de zinc con 376,5 g de monxido de carbono, qu reactivo se encuentra en exceso y cul como limitante de la reaccin? Cuntas moles del reactivo limitante se necesitan para que la reaccin sea completa? b) El sulfito de sodio reacciona con azufre para producir tiosulfato de sodio. Se hacen reaccionar 2,5 moles de sulfito de sodio con un mol de azufre; la reaccin es completa? Hay reactivo en exceso y reactivo limitante? Cmo puede hacer para que se combinen todos los reactivos? c) El perxido de bario se descompone por el calor en xido de bario y oxgeno. Cuntos gramos de perxido de bario se deben descomponer para obtener cinco moles de oxgeno? d) El vinagre se obtiene por la oxidacin del alcohol etlico mediante la reaccin: CH3CH2-OH + O2 CH3COOH + H2O Cuntos moles de cido actico se pueden obtener a partir de 560 g de alcohol etlico? 18

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e) El aluminio reduce al xido crmico en cromo y xido de aluminio. Cunto cromo se puede obtener de 5000 kg de xido crmico del 78 % de pureza? f) El bixido de manganeso reacciona con el sulfato ferroso en medio de cido sulfrico para producir sulfato de manganeso, sulfato frrico y agua. Cunto sulfato de manganeso se obtiene al hacer reaccionar 500 g de bixido de manganeso del 45 % de pureza con sulfato ferroso? g) Explique cmo preparara 250 g de una disolucin de cloruro de bario al 15 % en peso utilizando cloruro de bario dihidratado y agua. h) Se pesaron 5,0361 g de una solucin del cido sulfrico, se diluyeron con agua destilada y se les agreg un exceso de cloruro de bario. El precipitado formado de sulfato de bario lavado y seco pes 4,9768 g. Cul era el porcentaje de cido sulfrico que contena la solucin cida inicial? La reaccin involucrada es: H2SO4 + BaCl2 BaSO4 + HCl i) Qu molaridad tiene una solucin de permanganato de bario preparada disolviendo 36,54 g de la sal en 750 mL de agua? j) Una disolucin de cido hipocloroso tiene una pureza del 35 % y una densidad de 1,251 g/mL. Cul es la molaridad y la molalidad de esta solucin? k) Qu volumen de cido sulfrico concentrado (densidad 1,19 g/mL y del 93,2 % en peso de cido sulfrico) se necesita para preparar 500 mL de cido 3,5 N?

Este taller tiene programada una sesin de trabajo con el tutor para verificacin de las respuestas correctas y la definicin de estrategias para establecer las temticas dbiles que deben ser complementadas antes de continuar con el desarrollo del curso.

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INTRODUCCIN
La unidad uno se propone revisar los fundamentos que tiene esta disciplina de la Qumica mediante el desarrollo de cuatro temas, una actividad de laboratorio y una actividad de profundizacin y transferencia, para que adquiera los conocimientos y competencias motoras y afectivas que le permitan comprender la importancia de la Qumica Analtica Instrumental en su proceso formativo. El primer tema desarrolla el campo de trabajo de la qumica analtica como herramienta conceptual y metodolgica para conocer la composicin y la cantidad de cada uno de los elementos o sustancias que se encuentran formando una muestra, a la vez que da criterios para valorar la calidad de los anlisis por realizar. El segundo tema se dedica a estudiar el tipo de reacciones qumicas que ocurren tanto en las tcnicas clsicas de anlisis como en algunas de las instrumentales, lo mismo que las condiciones en que se deben realizar dichos anlisis para que cumplan con los requisitos definidos en el primer tema. El tercer tema explica los fundamentos y el procedimiento requerido para obtener las muestras para anlisis ya sea proveniente de cuerpos slidos, lquidos o gaseosos y las formas de garantizar su representatividad y conservacin ya que en muchos casos pueden sufrir cambios modificando su estructura o su composicin afectando los resultados del anlisis. Finaliza describiendo las tcnicas utilizadas para su adecuacin a los distintos anlisis, generalmente dejndolas en estado lquido o en una mezcla homognea (solucin). El cuarto tema describe el tratamiento estadstico de los resultados como criterio para valorar la calidad del anlisis y garantizar la representatividad de los mismos, de modo que al ser examinados puedan dar indicaciones fidedignas sobre la muestra que estn describiendo, su reproducibilidad y consistencia. El quinto tema corresponde a la parte prctica de la unidad diseada de modo que sirva con dos propsitos, uno ilustrar los fundamentos tericos tratados en los temas anteriores y otro que sea una oportunidad para practicar con sustancias reales, seleccionadas por el mismo estudiante y avaladas por su docente. Finaliza con una actividad de profundizacin y transferencia que tiene como finalidad poder aplicar los conceptos tratados en la unidad para su consolidacin y aplicacin a otros contextos que dentro de su carrera son posibles de efectuar. En ella tambin se revisa su mtodo de trabajo acadmico para valorar lo exitoso que est siendo o para darle otra orientacin pero que le ayude en lograr su autonoma en aprender. No olvide construir su portafolio, mostrando las estrategias, los ejercicios y las ampliaciones que ha venido realizando para lograr la plena comprensin de su proceso de construccin de conocimiento que le ayudarn a tomar la decisin de presentar o no la evaluacin respectiva, como nico responsable por su tarea de aprender. Adems, es un recurso que le ayudar al tutor para la asignacin de las calificaciones pactadas en la gua de actividades. 20

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TEMA 1.

FUNDAMENTOS DE LA QUMICA ANALTICA

El primer paso en la resolucin de una inquietud sobre lo que estamos aprendiendo es preguntarlos por el objeto o las caractersticas de lo que estamos estudiando. Si ha revisado cuidadosamente su Gua Acadmica ya tendr alguna idea de ello. 1. Concepto, clases y campo de aplicacin. Voy a considerar la siguiente definicin tomada de un texto clsico de anlisis cualitativo: la qumica analtica trata de los mtodos para determinar la composicin de las sustancias, de las mezclas de sustancias y de las soluciones1. Si se revisa ese concepto en otros textos o en la experiencia misma, todava es vigente. La Qumica Analtica Instrumental es una rama de la Qumica Aplicada que permite disponer de mtodos, tcnicas, procedimientos e instrumentos para responder a las preguntas qu es esta sustancia? Qu componentes tiene? En qu cantidad? Cmo se pueden determinar? Quizs el primer anlisis fisicoqumico lo relata la ancdota del rey griego que pidi a Arqumedes establecer si la corona que tena haba sido elaborada completamente en la cantidad de oro que le haba entregado a su orfebre de confianza, o si lo haba remplazado por plata. Al meterse a una tina llena encontr que desplazaba una cantidad de agua, lo cual le dio la idea de hacer una determinacin indirecta pidiendo al rey igual cantidad de oro y de plata a la de la corona; despus de muchos ensayos midiendo el agua desplazada encontr la proporcin correcta de metales que el artesano haba utilizado. Actualmente los anlisis qumicos son la herramienta fundamental para determinar sustancias presentes en productos diversos como metales, polmeros, petrleo, alimentos, medicamentos y en muestras de fluidos orgnicos para buscar metabolitos que se producen por enfermedades y otros. Sin embargo dos preguntas pueden esclarecer el campo de trabajo de la Qumica Analtica: qu es esto? En qu cantidad se encuentra? La primera se responde utilizando conocimientos, tcnicas y procedimientos de la Qumica Analtica Cualitativa y por lo general se recurre a ella cuando se tiene una muestra desconocida al permitir la deteccin de qu elementos o radicales estn presentes, lo mismo que su origen ya sea inorgnico u orgnico. La segunda se refiere a la Qumica Analtica Cuantitativa, encargada de efectuar las mediciones de los elementos o los radicales encontrados en la primera manteniendo cierta rigurosidad. Desde que Lavoiseur introdujo el mtodo experimental, la qumica pudo determinar las leyes fundamentales que la sustentan como las de las proporciones definidas, las de proporciones mltiples y la conservacin de la materia que sustentan, entre otras, el campo de conocimiento de la Qumica. Esto significa que la unidad de trabajo de la qumica analtica es el anlisis qumico que comprende los principios fundamentales tanto tericos como prcticos, el equipo de
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CURTMAN, Luis J. Anlisis Qumico Cualitativo. 8 Edicin. Manuel Marn y Ca. Editores: Barcelona, 1959. pgina 1.

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laboratorio requerido, los procedimientos para la preparacin de la muestra, su transformacin en analito, la realizacin de la determinacin (ya sea cualitativa y/o cuantitativa), las tcnicas para la transformacin y valoracin de los datos para encontrar el resultado esperado. Por ello encontramos ligados los siguientes conceptos a los que se les formula una definicin:
2. Muestra: Parte representativa de la materia objeto del anlisis. Analito: Especie qumica que se analiza. Tcnica: Medio de obtener informacin sobre el analito. Mtodo: Conjunto de operaciones y tcnicas aplicadas al anlisis de una muestra.

Mtodos de Anlisis.

Es importante tener en cuenta que cuando vamos a realizar un anlisis u ordenarlo estamos buscando un propsito. ste ayuda a orientar claramente al analista puesto que puede disponer de un conjunto de criterios que le ayudan a escoger el procedimiento ms adecuado. El primero a tener en cuenta es el origen de la muestra ya sea sta inorgnica u orgnica. Ello orienta sobre los procedimientos para disponerla para el anlisis. El segundo es determinar si se quiere establecer toda la composicin de la muestra o simplemente hacer una determinacin especfica de algunas de las sustancias que all se encuentran. Ayuda a determinar la complejidad del anlisis, el tiempo requerido y su costo. El tercero es definir a qu escala se desea realizar el anlisis. Se encuentra en estrecha relacin con el tamao de la muestra y la posible cantidad del analito que se quiere determinar. Tambin define la complejidad del anlisis y cul mtodo se va a utilizar, por lo general se denomina como la escala del anlisis la cual puede ser Macro, trabaja con muestras de 0,1 g a 2 g. Semimicro utiliza muestras de 0,01 g a 0,05 g requiriendo tcnicas ms complejas y precisas que las primeras. Micro, requiere muestras entre uno y pocos miligramos de muestra, por lo general requieren de equipo sofisticado y, por ltimo la escala Ultra micro o Microgramo que va desde 0,001 mg o 1 g que detecta sustancias traza en una muestra muy grande. Esto nos ilustra el significado de sensibilidad del anlisis. En este curso se trabajar a escala Macro. El cuarto es establecer el tipo de anlisis por realizar el cual puede ser clsico o instrumental. Tcnicas que se estudiarn y aplicarn en este curso. Son tcnicas clsicas el anlisis gravimtrico en el cual el analito se determina a partir de diferencias en peso y el anlisis volumtrico en que las mediciones se hacen a travs de titulaciones o determinaciones de volmenes de soluciones. El anlisis instrumental necesita de equipos especializados para efectuar las mediciones bajo ciertas condiciones que garanticen la reproducibilidad. Por ltimo, despus de realizados los anlisis en el laboratorio se obtiene un conjunto de datos. Estos deben ser analizados cuidadosamente para determinar su calidad utilizando criterios de tipo estadstico conforme a las condiciones en que fueron tomados; en muchos casos hay necesidad de hacer transformaciones matemticas para reportarlos finalmente como resultados en las condiciones requeridas por el mtodo. Lo anterior nos puede indicar al menos dos cosas, primero que cada mtodo tiene un soporte cientfico, unos criterios de valoracin y un protocolo de desarrollo que se debe observar cuidadosamente ya que en el momento de estandarizacin de la tcnica se estuvieron controlando las diferentes variables que acompaan la realizacin del anlisis y segundo que no necesariamente los datos de laboratorio establecen claramente los

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resultados buscados sino que tiene que hacerse un trabajo de interpretacin de los mismos y de verificacin de condiciones para que se puedan aceptar. 3. Valoracin del Mtodo Analtico.

Establecidas anteriormente las condiciones en las que se aplica un mtodo analtico, ahora se estudia cmo se plantea y qu condiciones debe cumplir. 3.1 Desarrollo del Mtodo Analtico.

El diseo o seleccin de un mtodo analtico, requiere de siete etapas2: i. ii. iii. iv. v. vi. vii. Planteamiento del problema. Obtencin de la muestra para el anlisis. Preparacin de materiales, incluyendo patrones. Tratamiento de la muestra, incluyendo separaciones de ser necesario. El anlisis en s. Interpretacin y conclusiones. Acciones.

El Planteamiento del problema comprende el estudio del propsito del anlisis, su alcance, la tecnologa disponible y los resultados esperados sobre todo si tiene que ver con control de calidad. La Obtencin de la muestra de anlisis, requiere una consideracin particular ya que al ser pequea comparada con la fuente que se desea analizar, debe cumplir con ciertos requerimientos para que realmente sea representativa. Existen tcnicas, equipos y procedimientos para la toma de la misma, lo mismo que su conservacin y transporte. Sin embargo, cada caso suele ser especial por lo que es necesario tener muy claro el punto anterior para hacer las modificaciones que sean del caso. La Preparacin de materiales y patrones, se dedica a considerar los procedimientos de preparacin de los reactivos requeridos para el anlisis y de algunas sustancias patrones que se utilizan ya sea para monitorear los resultados o eliminar interferencias. Es importante destacar la pureza del reactivo y los solventes utilizados para su dilucin ya que se debe evitar, especialmente en el anlisis cuantitativo, la adicin de sustancias extraas que puedan interferir en los resultados. Por ello, se debe tener en cuenta la calidad de los reactivos utilizados en los anlisis qumicos, la cual se denomina de varias formas, entre las que se destacan para anlisis o R.A., indicando que cumplen con los estndares definidos por la American Chemical Society y producidos por fabricantes bajo estrictas normas que les permite garantizar una pureza muy alta (cercana al 100% del compuesto) y que no contienen sustancias que puedan interferir con los anlisis. De la misma calidad deben ser los patrones utilizados en los ensayos comparativos. En la dilucin de los reactivos se debe tener en cuenta cul es la exactitud de su concentracin, lo mismo que su estabilidad qumica en el tiempo. El Tratamiento de la muestra se refiere a la necesidad de adecuarla a las condiciones del procedimiento, garantizando que el analito se encuentra en la concentracin requerida por el mtodo y que no posee interferentes. Si contiene estos ltimos, se deben extraer o transformar en otras sustancias que no influyan en los resultados o en el cambio qumico fundamento del mtodo. No es raro encontrar en los protocolos de anlisis etapas previas de precipitacin, separacin, extraccin o purificacin con otras tcnicas como la cromatografa para dejar al analito con la pureza requerida. En la etapa del Anlisis en s, est la esencia del mtodo aplicado, es decir si corresponde a tcnicas clsicas, instrumentales o trabajos con escalas pequeas como se haba mencionado antes. En Interpretacin y conclusiones, est el verdadero trabajo del analista. Al terminar la parte experimental en la ltima fase, se encuentra la posibilidad de hacer una valoracin de los resultados encontrados, compararlos
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RAMETTE. W, Richard. Equilibrio y anlisis qumico. Bogot: Fondo Educativo Interamericano, 1987. pginas 2 9.

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con los esperados y derivar conclusiones conforme los intereses que ordenaron el anlisis. Si se realiza un control de calidad donde se tiene que encontrar un cierto valor para el analito buscado, la conclusin es muy sencilla: cumple o no y la decisin va en la misma lnea; se puede despachar al mercado o, si se controlan las variables de un proceso poder decidir sobre la continuidad o los ajustes al mismo. Por ltimo, en Acciones se hacen las recomendaciones sobre lo que se debe hacer con el lote representado por la muestra o en la muestra misma. 3.2 Condiciones del Mtodo Analtico.

Revisado cuidadosamente lo anterior, queda por discutir en este tema cules son los requerimientos especiales que deben cumplir los anlisis qumicos relacionados con su calidad. Estos aspectos son: Exactitud: Grado de concordancia entre el resultado y un valor de referencia certificado. La ausencia de exactitud genera error sistemtico. Precisin: Grado de concordancia entre los datos obtenidos de una serie. Refleja el efecto de los errores aleatorios producidos durante el proceso analtico. Sensibilidad: Capacidad para discriminar entre pequeas diferencias de concentracin del analito. Se evala mediante la sensibilidad de calibracin, que es la pendiente de la curva de calibracin a la concentracin de inters. Lmite de deteccin: Concentracin mnima del analito que se puede medir con seguridad. Matemticamente corresponde a una seal de magnitud igual al blanco ms tres veces su desviacin estndar. Intervalo dinmico: Intervalo de concentraciones entre el lmite de cuantificacin (mnima cantidad que el mtodo puede detectar) y el lmite de linealidad (mnima cantidad que mantiene la reproducibilidad del mtodo). Es donde se encuentra la mejor respuesta del mtodo a la variacin de concentracin. Selectividad: Cuantifica el grado de ausencia de interferencias debidas a otras especies contenidas en la muestra en anlisis. Seguridad: Amplitud de condiciones experimentales en las que puede realizarse el anlisis.

Tambin, es necesario considerar otras variables prcticas como rapidez, costo, peligrosidad de los residuos, etc. Un mecanismo ptimo para conocer la calidad del mtodo analtico es participar en programas de intercomparacin con otros laboratorios. En ellos, un organismo independiente evala los resultados, tanto en exactitud como en precisin, sobre muestras iguales enviadas a los laboratorios participantes. Los resultados permiten corregir los errores de funcionamiento del mtodo analtico y, una vez comprobada su calidad, obtener la homologacin del laboratorio para realizar los anlisis. La homologacin requiere la puesta en marcha de un programa de garanta de calidad, que permita controlar el funcionamiento global del laboratorio. Lo importante de esta discusin es recalcar la necesidad de establecer criterios que ayuden en la toma de decisiones ya sea para ordenar un anlisis qumico, para la modificacin de las condiciones de produccin de la planta o fbrica, o la implementacin de un nuevo ensayo. Su esfuerzo garantiza que el costo de la decisin se cubra con los resultados esperados y la posibilidad de alcanzar un reconocimiento dentro del sector al brindar productos seguros a los consumidores.

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ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 1
Ya ha terminado de leer el tema. Ahora debe realizar un trabajo de comprensin y asimilacin del mismo, por ello de manera individual y luego en su pequeo grupo de aprendizaje colaborativo realice el siguiente taller:

Propsito
Consolidar el conocimiento sobre el campo de trabajo de la Qumica Analtica Instrumental y los tipos de anlisis que se pueden realizar y aplicar a su campo de trabajo.

Acciones
1. 2. 3. 4.

Elabore un cuadro sinptico sobre el significado de la Qumica Analtica, las clases de anlisis y los criterios para el uso y el diseo de una tcnica analtica. Compare su trabajo con los desarrollados por sus compaeros del pequeo grupo que le acompaan en el curso y haga los ajustes que considere adecuados para lograr entre todos acuerdos comunes tomando como referencia los contenidos del texto anterior. Elabore un acta del trabajo del pequeo grupo indicando los aspectos que fueron considerados como especiales por el grupo al no encontrarse incluidos en el trabajo individual. Adjunte los dos documentos a su Portafolio indicando qu actividad es la que desarroll.

Transferencia

Su campo de accin ser especfico sobre alimentos. All se encuentra que es necesario conocer la composicin de los mismos mediante el anlisis bromatolgico o proximal. A continuacin se presenta una pequea introduccin donde se explica cules son los ensayos, sus principales fundamentos y los resultados que se obtienen. Debe realizar una lectura cuidadosa del mismo y al finalizarla, trate de explicarla teniendo en cuenta los conceptos trabajados en este tema y responda a las preguntas que se formulan al final del taller. Haga el ejercicio de manera individual y luego en pequeo grupo colaborativo para llegar a las mismas conclusiones. No olvide adjuntar los documentos producidos a su portafolio. Anlisis proximal. La determinacin del contenido de los principios nutritivos que se encuentran en un alimento se realiza segn el Mtodo Clsico de Wende, desarrollado por los qumicos Henneberg y Stohman a mediados del siglo XIX

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en la estacin agrcola experimental de Wende, cerca de Gttingen (Alemania) para el control de calidad de concentrados para animales, determinando los siguientes componentes3: Humedad o prdidas por desecacin. Cenizas o sustancias minerales. Protenas. Extracto etreo o grasa bruta. Fibra cruda. Carbohidratos (Sustancias extractivas no nitrogenadas, E.N.N.). 1) Humedad. El agua hace parte de los seres vivos para actuar como disolvente y medio de transporte de otras sustancias dentro del cuerpo, al mismo tiempo que facilita la ocurrencia de las reacciones bioqumicas requeridas para la asimilacin y excrecin de los productos del metabolismo. En los animales de sangre caliente, el agua mantiene la temperatura debido a su alta capacidad calorfica y requiere una temperatura alta para evaporarse. La determinacin de humedad se basa en la prdida de peso que sufre la muestra de alimento al someterse a una temperatura constante de 100 C. En algunas de ellas no se pierde nicamente agua sino otras sustancias voltiles. (Puede imaginar cmo es el procedimiento para realizar esta determinacin?) 2) Cenizas.

La calcinacin de una muestra de alimento a 500 C permite que toda su estructura orgnica se oxide dejando un residuo slido constituido por xidos y carbonatos de los metales que se encuentran formando parte de l. Si se requiere conocer especficamente los elementos metlicos que se encuentran all, se parte de dicho residuo transformndolo o adecundolo para efectuar anlisis cuantitativos especficos de ellos.
3) Protenas.

Comprende un conjunto de sustancias orgnicas que tienen estructura compleja constituyen mayoritariamente los tejidos de los seres vivos donde tambin cumplen otras funciones, se caracterizan por contener el grupo amino (NH2) y se pueden descomponer mediante hidrlisis qumica o fermentacin en estructuras menos complejas como albumosas, peptonas, pptidos o incluso llegar a sustancias ms simples como aminocidos, aminas y amonaco. Su determinacin se hace a travs del Mtodo de Kjeldahl que consiste en la mineralizacin del nitrgeno orgnico hasta sulfato cido de amonio y su posterior determinacin por titulacin volumtrica. Esto significa que se realiza en dos etapas: digestin y destilacin. En la digestin, se toma una muestra del alimento, se digiere con cido sulfrico concentrado en presencia de un catalizador transformando el nitrgeno orgnico en sulfato cido de amonio mediante la siguiente reaccin: NORGNICO + H2SO4 CO2 + H2O + NH4HSO4

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MAHECHA, Gabriela, SEGURA Edgar y otros. Anlisis y Control de Calidad. Bogot, Unisur. 1993. Volumen 2, pginas 31 38.

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Para la destilacin, el sulfato cido de amonio se recupera de la mezcla de digestin al transformarlo en amonaco mediante el uso de un lcali fuerte, se arrastra con vapor que al ser condensado se recoge sobre cido brico para recuperarlo como borato de amonio el cual se titula con cido clorhdrico estandarizado, cuyo volumen permite, mediante una frmula, determinar la cantidad de protena presente en la muestra. Los cambios qumicos que se obtienen son los siguientes: NH4HSO4 + 2 NaOH NH3 + Na2SO4 + 2 H2O NH3 + H2O NH4OH NH4OH + H3BO3 NH4H2BO3 + H2O NH4H2BO3 + HCl NH4Cl + H3BO3

La frmula de transformacin de los datos es la siguiente:

VHCl NHCl meq (100) % N = _________________________ PESO MUESTRA Cuyos trminos significan: VHCl NHCl meq = Volumen del cido clorhdrico consumido. = Normalidad del cido clorhdrico usado en la titulacin. = peso del miliequivalente de nitrgeno = 14/1000.

Para obtener el porcentaje de protena bruta de la muestra, se realiza este ltimo clculo: % Protena bruta = % N (6,25).

El factor 6,25 aparece de la consideracin de que del nitrgeno determinado en el mtodo, slo el 16% proviene de la protena. 4) Extracto etreo.

Su determinacin comprende un proceso de extraccin con solvente orgnico como ter de petrleo o ter o una mezcla de los dos, sobre la muestra en la que se ha determinado la humedad. Este extracto contiene adems de los triglicridos, fosfolpidos, esteroles, cidos grasos libres, pigmentos, vitaminas liposolubles, clorofila y otras sustancias orgnicas que sean solubles en el solvente extractor. 5) Fibra cruda. Todava no se ha encontrado un mtodo analtico como los anteriores que determinen a los carbohidratos debido a su gran complejidad y a que no tienen una caracterstica analtica en comn, por lo que Henneberg y Stohman decidieron dividirla en dos; una parte insoluble en cidos y en bases a la que denominaron fibra cruda, donde se encuentra celulosa, pentosas, lignina, suberina y cutina y la soluble como extracto no nitrogenado. La importancia de realizar esta determinacin es debido a que la fibra no aporta ningn nutriente pero si permite conformar la estructura del bolo alimenticio y estimular el peristaltismo para su correcto movimiento en el tracto intestinal. El mtodo analtico tradicional en la determinacin de este componente, consiste en hacer dos digestiones con la muestra seca y sin grasa, iniciando con cido sulfrico al 1,25 % y luego con

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hidrxido de sodio en la misma concentracin. As se eliminan protenas, carbohidratos solubles, restos de grasa, vitaminas y otras sustancias que interfieren en el anlisis. 6) Extracto No Nitrogenado.

Corresponde a la parte soluble de celulosa, pentosanos, lignina, hemicelulosa, liquenina, almidn, inulina, azcares, materias pcticas, cidos orgnicos y otras sustancias solubles que no contienen nitrgeno. Su determinacin se hace restando de 100 los porcentajes de ceniza, humedad, protena, grasa y fibra.
Haga un cuadro sinptico que contenga el nombre del anlisis, el fundamento, el tratamiento de la muestra y la forma de trabajar los datos para obtener los resultados (frmulas de clculo) Elabore un diagrama de flujo que muestre el procedimiento seguido en la determinacin para un alimento de su inters y al que desee efectuarle el anlisis proximal. Escriba las conclusiones a las que haya llegado con su trabajo.

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TEMA 2.

REACCIONES QUMICAS EN LOS ANLISIS QUMICOS

Los elementos tienen un determinado nivel de energa que suele ser mayor que el de sus compuestos, por lo que en la naturaleza se encuentra frecuentemente estos ltimos. Esa reactividad se encuentra condicionada a factores como liberacin o absorcin de calor, temperatura de reaccin, concentracin de reactivos, presin, presencia o ausencia de un medio de reaccin que funcione como solvente, la aparicin de un equilibrio qumico y la extensin en que ste ocurre. Con respecto a la absorcin y/o liberacin de calor no siempre determinan que una reaccin produzca sustancias con menor contenido energtico que sus reactivos sino que pueda favorecer la formacin de estructuras ms reactivas. Generalmente se prefiere hablar de la espontaneidad de un cambio qumico al medirla con una variable termodinmica como la energa libre que relaciona tres variables: la entalpa o calor

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absorbido o liberado en la reaccin, la temperatura a la que ocurre el cambio qumico y la entropa, una medida del estado de organizacin que ocupa la sustancia dentro del universo. 1. Clasificacin de las reacciones.

Se tiene como criterio la descripcin del cambio que ocurre. En Qumica Analtica, utilizaremos slo aquellas que se encuentran en los mtodos clsicos de gravimetra y de volumetra ya que para la parte instrumental slo se analizar la aplicacin de formacin de complejos o sustancias coloreadas o la aplicacin de propiedades de tipo fisicoqumico como la posibilidad de generar enlaces intermoleculares.
1.1 Reacciones cido base.

Tenemos presente el concepto de cido base definido por Bronsted Lowry quienes consideran al cido como una sustancia que cede protones (H+) o iones hidronio y base como aquella que los acepta. Este cambio se ilustra as: HCl + H2O H3O+ + OH-

La sustancia que cede el protn es el cido clorhdrico y la base es el agua, la sustancia que recibe el protn para formar el ion hidronio hidratado [H.H2O]+. En este caso el hidronio no tiene electrones pero si un protn de ms (de ah su nombre para el ion H+) que garantiza un orbital desocupado; el oxgeno del agua tiene dos pares de electrones libres que puede compartir fcilmente acomodando al protn. Existe equilibrio ya que se puede afectar modificando la temperatura. Otro ejemplo que vale la pena analizar aqu es la autoprotlisis del agua, la cual la podemos representar mediante la ecuacin qumica: H2O + H2O H3O+ + OH-

Separamos las molculas de agua con propsitos didcticos de comparacin con la anterior reaccin puesto que en la realidad es muy difcil diferenciar qu molcula se comporta como cido y cul lo hace como base; los productos finales muestran la formacin de una molcula cida y una bsica. En ambos casos encontramos que las reacciones son reversibles ya que el nuevo cido est en capacidad de entregar su protn y la que se encuentra como base lo puede recibir para regenerar la molcula que le dio origen. Esto nos ilustra el concepto de par cido base conjugada que propusieron estos qumicos. 1.2 Reacciones de precipitacin.

Se presentan bsicamente con sustancias inicas o que se pueden ionizar, formando un slido que se puede separar y purificar del medio de reaccin el cual, en la mayora de los casos es agua. El ejemplo ms comn es la reaccin del ion cloruro con solucin de nitrato de plata que forma el precipitado de cloruro de plata como lo podemos observar en la siguiente reaccin: AgNO3 + NaCl AgCl( ) + NaNO3

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En estas ecuaciones se suele colocar despus de la frmula del compuesto que ha precipitado, la flecha hacia abajo ( ) indicando que es una sustancia slida, la cual a veces tambin se representa como (S). 1.3 Reacciones de oxidacin reduccin.

Se presentan cuando existe intercambio de electrones. Esto significa que habr una sustancia que cede o pierde electrones y otra que los acepta o recibe, transferencia que 30

podemos encontrar en las bateras de los automviles o pilas; la prdida y la ganancia la podemos localizar respectivamente en el nodo (donde existe una gran carga de electrones disponibles) y en el ctodo (donde se reciben esos electrones). Un ejemplo es el acumulador de plomo, utilizado como batera en los automviles:
Pb + PbO2 + 2 H2SO4 2 PbSO4 + 2 H2O

Donde el plomo es el ctodo y el oxido de plomo (II) es el nodo. 1.4 Reacciones de hidrlisis.

Son cambios que implican la ruptura de molculas complejas, generalmente orgnicas aunque tambin ocurren en las inorgnicas, permitiendo la adicin de una molcula de agua. Suelen requerir catalizadores cidos que ayudan a alcanzar el complejo activado ms rpido acortando el tiempo de la reaccin, como ejemplo con un compuesto inorgnico se tiene: Na2S 2 Na+ + S2S2- + H2O HS- + OH-

Como se puede ver, ocurre un cambio en la concentracin de iones presentes en el agua, principalmente en los hidroxilos, por lo que la solucin ser bsica. Otro ejemplo es el acetato de sodio, una sal orgnica que tiene el mismo comportamiento del sulfuro de sodio:

1.5

Reacciones de formacin de complejos.

Ciertos elementos generalmente metlicos, una vez han saturado sus valencias debidas a sus nubes externas, por su configuracin electrnica tienen la posibilidad de recibir pares electrnicos pues tienen orbitales atmicos libres pudiendo formar enlaces covalentes coordinados que pueden ser dos, tres, cuatro, seis y ocho. Ejemplos de estas sustancias son: 2 [Cu(NH3)4](OH)2 + K4[Fe(CN)6] Cu2[Fe(CN)6] + 4 KOH + 8 NH3

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CH3-CH2-COONa CH3-CH2-COO- + Na+ CH3-CH2-COO- + H2O CH3-CH2-COOH + OH-

Esta reaccin representa una reaccin cualitativa de identificacin del ion cobre en la cual los tres complejos tienen colores muy diferentes; el primero es azul oscuro, soluble en agua. El ferrocianuro de potasio es incoloro pero cuando se transforma en ferricianuro el complejo de cobre adquiere el color rojizo que puede ser soluble o si hay exceso del ferrocianuro se puede obtener un precipitado pardo rojizo. 2. Cintica y Equilibrio Qumico. Al estudiar las distintas clases de reacciones, se pregunta cmo ocurre una reaccin?, qu tan rpido puede ocurrir?, cules condiciones podemos controlar para llevarla hasta un determinado producto?, existe alguna forma de representar la rapidez y el equilibrio que puede presentar la reaccin? 31

2.1

Cintica Qumica.

Para ilustrar, se estudian dos fenmenos muy comunes: la combustin de una vela o esperma y la explosin de la plvora. Para encender la vela se requiere de un cerillo en combustin (prendido luego de frotarlo contra una superficie spera) y as poder iniciar la combustin a la parafina que est empapando el pabilo; vemos que inicialmente derrite o funde parte de la cera y luego lentamente aparece sobre el pabilo una llama. La cerilla ha calentado hasta el punto o temperatura de combustin de la parafina que se enciende y, por s misma, mantiene la reaccin de combustin produciendo calor, luz y humo. Situacin que se mantiene hasta cuando se consuma toda la cera, se suspenda la provisin de oxgeno o si se quiere apagarla. En el caso de la combustin de la plvora, imagine que tiene en sus manos un volador u otro artefacto pirotcnico de los que se usan en la celebracin de la navidad y el ao nuevo. Se enciende con una cerilla y lo suelta presuroso guardando una prudente distancia porque se produce una explosin cuando la chispa del cordn encendido alcanza a la plvora. Se observa que genera luz, calor, humo y un ruido caracterstico producido por ondas de choque al momento de ocurrir una rpida liberacin de energa. Cmo se explica este fenmeno de una manera ms cientfica? Se sabe que una reaccin qumica implica la ruptura con cambios de energa de los enlaces qumicos de las molculas que estn reaccionando para dar nuevos enlaces de los productos que se estn formando. La reaccin de combustin tiene dos reactivos y un iniciador del proceso: combustible (la parafina y la plvora), el comburente (oxgeno del aire) y la cerilla encendida que da la energa inicial para que los dos reactivos inicien el cambio qumico. Cmo ocurre el fenmeno a nivel atmico?

Se considera a la parafina y la plvora bsicamente formadas por tomos de carbono e hidrgeno; sin embargo entre los componentes de la plvora tambin se encuentra el oxgeno. La reaccin de combustin la podemos representar as: n C H + n O2 n CO2 + n H2O + H

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La cerilla suministra calor a la parafina, sta se funde y facilita la disolucin del oxgeno que al estar juntos aumenta la probabilidad de que diversos choques les permita interactuar para comenzar a formar los productos, manifestndose externamente con la aparicin de la llama. As que en un momento determinado los tomos que participan se reorganizan formando un estado intermedio al que se llamar complejo activado, en el que aparecen enlaces de tipo covalente que al liberar energa se reorganizan en los productos. En la figura 1 se encuentra un modelo que explica esta estructura intermedia. Figura 1. Esquema que representa el posible mecanismo de una reaccin de combustin.
O C C O O C H O

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O H H O

Complejo Activado

En la figura, los tamaos de los tomos no se encuentran a escala. Al observar el esquema superior de la figura, la parafina y el oxgeno activados por el calor generado por la cerilla, se encuentran formando el complejo activado ilustrado, ste se descompone debido a que tiene mucha ms energa que los reactivos pero con tendencia al cambio ya que las especies producidas tienen menor contenido energtico apareciendo el primer producto: bixido de carbono y un protn. En la parte inferior de la figura continua la reaccin; otros tomos de la molcula de parafina interactan con ms oxgeno y dos protones libres provenientes de la reaccin anterior formando otro complejo activado cuya descomposicin produce una molcula de agua y un radical de oxgeno que queda disponible para formar otro complejo activado. En esta forma, la secuencia va produciendo los compuestos finales y energa en forma de calor y luz. Intentar construir el mecanismo de reaccin de la plvora es muchsimo ms complejo al no poder simplificar su estructura ya que adems de carbn, contiene clorato o nitrato de potasio aumentando el nmero y diferencia de especies que participan, as que se tendra que estudiar los comportamientos del nitrgeno y el potasio en la reaccin para formar los correspondientes xidos. Sin embargo, con los elementos analizados se pueden determinar las condiciones que se deben tener en cuenta para cualquier reaccin. La primera es la homogeneidad del medio; entre ms fluido sea (lquido o gas) se favorecen ms los choques que permiten la configuracin del complejo activado. La segunda es la concentracin de los reactivos; a mayor cantidad de especies ms fcil ocurren los choques que ayudan a conformar la especie activa. La tercera es la temperatura, pues si aumenta tambin lo hace la energa cintica generando ms movimiento y aumentando las probabilidades de choque y las de obtener productos. Este hecho llev a Henry Le Chatelier a formular el principio de que por cada diez grados de aumento en la temperatura, se duplica la rapidez de reaccin en un sistema qumico. Dilucidar cul es la va ms apropiada para que unos reactivos se transformen en productos es un problema terico y experimental ya que los planteamientos de interaccin, como los expuestos para el caso de la reaccin de combustin, deben ser corroborados por los datos experimentales segn la aparicin de cierto producto o la 33

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desaparicin de un reactivo que pueda ser clave. No es posible aislar el complejo activo pues su existencia es muy corta debido a que tiene un mayor contenido energtico respecto a los reactivos de origen y a los productos finales. 2.2 Equilibrio Qumico.

El significado de equilibrio es de reposo, sin movimiento, la anttesis a cintica que es dinmica, cambio, aparicin y desaparicin de sustancias. En qumica es necesario ampliar ese concepto al combinarlo con el sentido de cambio porque el equilibrio qumico tambin involucra modificaciones que estn ocurriendo a nivel molecular. Parece una paradoja; la nica justificacin posible es que a nivel atmico la materia no modifica su capacidad de cambio pero si puede mostrar a los sentidos humanos que no est ocurriendo nada. Todos los cambios qumicos se comportan de manera diferente: unos son tan rpidos que son verdaderas explosiones y otros ocurren tan despacio que requieren mucho tiempo para mostrar un producto o es necesario modificar su ambiente para acelerar dicho cambio. Es el caso de los catalizadores, sustancias que no actan como reactivos pero que con su presencia disminuyen el tiempo de reaccin al bajar la barrera energtica para formar el complejo activado o favorecer el acercamiento de las molculas o tomos que van a interactuar para transformarse en productos. Al finalizar el proceso, el catalizador nuevamente aparece sin mostrar cambios en su composicin o en su estructura. Suponga que se tienen dos sustancias A y B que al reaccionar entre s producen C y D. La realidad muestra que no se transforman totalmente sino que luego de cierto tiempo se tiene una mezcla donde aparecen reactivos y productos. Lo cual se representa as: A+B=C+D

Imagine que se tiene un equipo que visualiza como cambian A y B para formar C y D. Inicialmente muestra que A y B interactan, forman su complejo activado y se descomponen en C y D; el equipo permite determinar la cantidad de reactivos que va disminuyendo y registra la cantidad de C y D producidos en la unidad de tiempo. Pasado cierto tiempo se observa que la cantidad de productos alcanza un mximo y lo mismo con la cantidad de reactivos remanente en la reaccin que llega a un valor mnimo. El aparato muestra una situacin muy interesante: los reactivos se transforman en productos y stos se desdoblan en reactivos, mostrando en el tiempo un valor constante en las concentraciones que se mantienen al conservarse las condiciones. Si estas cambian (por ejemplo, al variar concentracin, presin, temperatura y la presencia de catalizadores) se modifica el equilibrio hasta alcanzar una situacin semejante pero con valores diferentes. Se puede caracterizar al equilibrio qumico as:

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Apariencia externa. No se detectan cambios en las propiedades del sistema en el tiempo. Apariencia molecular. La velocidad de formacin de productos es igual a la velocidad de descomposicin de los reactivos. Contenido de energa. Cuando se alcanza el equilibrio qumico, la energa total del sistema alcanza un mnimo, estabilizndolo. Valor constante y caracterstico. La condicin de equilibrio qumico para un determinado sistema se puede medir a travs de un valor llamado constante de equilibrio que se utiliza para comparar y determinar el grado de extensin en que ha ocurrido el cambio qumico. El sistema qumico est formado por los reactivos, aadidos en cierta cantidad, dentro de un recipiente donde se dejan que interacten, la presencia del catalizador cuando es necesario y las condiciones de presin, temperatura y los instrumentos de medicin requeridos para su control. La velocidad de formacin de productos est expresada como una constante de equivalencia y la concentracin de productos, as: vf = kf [C][D] Siendo: vf = Velocidad de formacin. kf = Constante de formacin. [C], [D] = Concentracin de productos.

La reaccin de descomposicin tambin tiene una constante de equilibrio que se expresa as: vd = kd [A][B]

Donde:

vd = Velocidad de descomposicin. kd = Constante de descomposicin. [A],[B] = concentracin de los reactivos.

Al tener una condicin de equilibrio. Matemticamente se expresa como: vd = vf Remplazando por sus valores correspondientes se tiene: kd [A][B] = kf [C][D] Agrupando trminos: kd ___ [C][D] = __________ kf [A][B]

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El cociente de dos constantes es otra constante, llamada la constante de equilibrio Keq, por lo que la anterior expresin corresponde a la constante de equilibrio estudiado: [C][D] Keq = __________ [A][B] Keq tiene un valor que siempre se obtendr para el sistema qumico estudiado a las mismas condiciones y, por ende, lo representa. Es necesario hacer una claridad relacionada con los exponentes que acompaan a la expresin de concentracin de una sustancia. En la expresin anterior se encuentra que en todos los casos es uno, sin embargo en sistemas donde la ecuacin qumica contiene coeficientes estequiomtricos, los exponentes relacionados con su concentracin estarn afectados por los mismos. Se ilustra con el siguiente ejemplo: H2 + O2 = 2 H2O Su constante de equilibrio ser:

Cmo se puede interpretar el valor de una constante de equilibrio con respecto al grado de extensin de un cambio qumico? Si en un sistema qumico se encuentra un valor muy grande para su constante de equilibrio, casi de infinito, la matemtica dice que el dividendo es mayor que el divisor y en el fenmeno qumico indica que toda la reaccin se ha completado dando slo productos. Si el sistema tiene una constante tan pequea, casi tendiendo a cero, la matemtica seala que el divisor es ms grande que el dividendo y el fenmeno qumico que representa es en el que muy pocos reactivos se han transformado en productos. Para terminar este estudio, se discuten procedimientos que pueden afectar esta condicin de equilibrio para un cambio qumico particular: Henry Le Chatelier formul un principio en ese sentido as:

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[H2][O2]

Keq =

[H2O]2 __________

Cuando se vara una de las condiciones que determinan el equilibrio qumico de un sistema qumico, el sistema responde oponindose a la variacin de esa condicin. Traducido en trminos prcticos, es posible variar un equilibrio qumico de las siguientes maneras: Afectando la temperatura, si la reaccin es endotrmica (durante el cambio baja la temperatura) o exotrmica (produce calor). Modificando la concentracin de reactivos o de productos segn lo que se quiera modificar: si se desean ms productos, se aade exceso de uno de los reactivos, si se quiere un reactivo, se adiciona uno de los productos o algn otro reactivo que contenga un componente del producto (efecto del ion comn). 36

Usando reacciones competitivas que sustraigan a uno de los productos, para obtener ms cantidad del otro por ser de mayor inters. 3. Criterios para la resolucin de problemas en Qumica Analtica. Aunque se supone que ya ha adquirido ciertas competencias relacionadas con las formas de plantear problemas en Qumica General, es necesario que volver a considerarlas, especialmente para desarrollar estrategias en el planteamiento de sus soluciones teniendo en cuenta las proporciones que se deben establecer entre moles y gramos, el anlisis de las unidades cuya consistencia deben ayudar a verificar la certeza del planteamiento propuesto en la resolucin especfica del problema. Se recomienda seguir el programa de los cinco pasos4 as: Primer paso. Identifique el problema. Lea la pregunta con cuidado y escriba lo que se requiere. Segundo paso. Rena y escriba todos los datos y hechos conocidos relacionados con el problema. Tercer paso. Analice los datos, identifique el tipo de problema por resolver y plantee la solucin delineando un plan o camino especfico para la respuesta. Cuarto paso. Desarrolle el plan propuesto. Para los problemas de Qumica Analtica, es necesario que identifique plenamente los factores de conversin. Quinto paso. Evale la respuesta con respecto a lo solicitado por el problema, verifique la consistencia de las unidades que acompaan al resultado que deben coincidir con lo solicitado.

En el desarrollo de ejercicios de aplicacin de las diferentes tcnicas, especialmente en el tratamiento de datos tenga en cuenta las recomendaciones del anterior programa. ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 2

Se termina el segundo tema. Ahora tiene la oportunidad de valorar lo que ha aprendido. Para ello realice las siguientes acciones: 1) Elabore una tabla donde indique cules son las reacciones que se presentan en qumica analtica, establezca al menos dos caractersticas y cul sera su utilidad en los anlisis qumicos que vamos a estudiar ms adelante. 2) Haga un paralelo entre cintica qumica y equilibrio qumico teniendo en cuenta: concepto, caractersticas, expresin de ecuaciones (si es posible), condiciones particulares para modificar la velocidad de una reaccin y el estado de equilibrio qumico. Qu conclusiones puede derivar de su trabajo de comparacin? 3) Qu utilidad puede derivar del programa de cinco pasos recomendado para la resolucin de problemas en Qumica Analtica? Qu es un factor unitario o de conversin? De dnde se genera? Regrese a la actividad 1 y tome cualquiera de los ensayos descritos para el anlisis proximal de un alimento y aplique el programa de los cinco pasos a una situacin hipottica en la cual simula unos datos para determinar la propiedad que est estudiando.
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BURNS, Ralph A. Fundamentos de qumica. 2 edicin. Mxico: Pearson Educacin, 1996, p. 12.

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Si desea una ayuda puede consultar la tabla de composicin de los alimentos colombianos, seleccionar un alimento y escribir los porcentajes de la sustancia que quiere determinar usando una de las tcnicas de la actividad 1, para poder concretar mejor su ejercicio. No olvide discutir en su pequeo grupo de aprendizaje colaborativo el ejercicio y si tienen todava dificultades o para consolidar su conocimiento, no olvide recurrir al tutor en la franja de tutora.

PREPARACIN PARA EL ANLISIS QUMICO.

La realizacin de cualquier anlisis qumico cuenta con un conjunto de aspectos tericos que se deben revisar antes de comenzar a trabajar en la determinacin de una sustancia de inters. En esta parte del curso se discuten esos conceptos, los fundamentos requeridos para la preparacin de las muestras y las formas de identificacin y de conservacin ya que generalmente es necesario guardarlas para resolver algunos conflictos que se suelen presentar por la no concordancia de resultados o es necesario volver nuevamente a realizar el anlisis para confirmar los resultados. Al revisar cualquier mtodo analtico, ya sea por ser estndar o por la necesidad de desarrollar uno especfico para resolver alguna inquietud, se requieren tres elementos: la muestra, reactivos y equipos y una tcnica procedimental. Aqu se estudian los dos primeros ya que en las prximas unidades se discutirn los fundamentos de dichas tcnicas procedimentales. 1. La muestra. En el anlisis qumico, se deben considerar cinco pasos: Obtencin de una muestra representativa del material por analizar. Transformar la muestra en una especie adecuada para el anlisis (disolucin). Eliminar o enmascarar las sustancias interferentes en el anlisis. Realizar el anlisis. 38

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TEMA 3.

Interpretar los resultados.

El material del que se parte puede ser un alimento, un mineral, un fragmento de plstico, un lago, una carga de carbn o una moneda muy antigua, las cuales no son homogneas ya que su composicin vara en cada parte; esto implica la necesidad de seguir un procedimiento para poder establecer dos condiciones que debe cumplir una porcin del material a analizar como son el ser homognea y la de ser representativa. Lo que es lo mismo, cuando se analiza un material heterogneo, el resultado final depende de la forma en que se elijan las muestras del material y de cmo se trate la muestra una vez colectada5. La muestra es, una porcin pequea, seleccionada para su examen, de una cantidad de material mucho mayor. Raras veces contiene todo el material que ser analizado; comprende los constituyentes o los componentes por determinar, los cuales pueden ser: principales, estn en mayor cantidad, los menores, existen en menor contenido que los primeros y las trazas que aparecen en pequesimas cantidades, requiriendo tcnicas ms complejas para su determinacin y los ultratraza. La cantidad disponible del constituyente determina el tamao de la muestra, lo mismo que la tcnica de anlisis requerida6. Las diferencias de composicin, densidad y dureza, variaciones en el tamao de partcula, la segregacin de impurezas en las aleaciones, la suspensin de slidos en lquidos y otras variables que suelen presentar los materiales bajo anlisis implican la necesidad de establecer tratamientos diferenciales en la obtencin de la porcin representativa y homognea que requerimos para iniciar el anlisis. As, para el anlisis de alimentos, la Association of Oficial Agricultural Chemists ha determinado el procedimiento para obtener la muestra requerida en los ensayos con alimentos, siendo el material de primera consulta cuando se trabaja con esas sustancias. La composicin de la muestra puede variar con el tiempo luego de colectada, debido a cambios internos, reaccin con el aire o interacciones qumicas con el material del recipiente que la contiene. Por lo general se recomienda guardarlas en recipientes de tefln cuidadosamente lavados con agua destilada; aunque si se conoce la calidad del vidrio y su estabilidad qumica pueden ser usados sin que modifiquen la cantidad de sustancia considerada como muestra. Cmo se obtiene la muestra? Para ello se consideran conceptos como lote, muestra bruta, muestra de laboratorio y porciones de prueba. El lote corresponde al material completo del cual se quiere tomar la cantidad de sustancia homognea y representativa, siendo una carga de fruta, de reactivos, un lago o un rgano animal; estas tienen unidades muestrales que pueden ser las cajas donde estn embalados los productos, o un criterio para seleccionar las muestras (por ejemplo, si tiene un montn de arena o de arroz en un silo donde no es fcil establecer la unidad muestral). Para alcanzar la representatividad y la homogeneidad necesarias, no basta con tomar una nica unidad muestral; se requiere tomar varias para conformar la muestra bruta. Su correcta obtencin garantiza el xito en el anlisis, por ello se debe contar con un plan cuidadoso para la toma de varias partes del lote, generalmente al azar o de manera
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HARRIS, Daniel C. Anlisis qumico cuantitativo. Mxico: Grupo Editorial Iberoamrica, 1992, p 701. RAMETTE, Richard W. Equilibrio y anlisis qumico. Op. Cit., p 4.

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aleatoria. Existen herramientas estadsticas que ayudan a perfeccionar ese criterio basndose en la probabilidad asignada a la posibilidad de incluir en esa seleccin a los componentes bajo anlisis. Cuando se tienen materiales muy segregados, es decir que a simple vista se detecta su heterogeneidad, recurrimos a la conformacin de una muestra compuesta tratando de mantener las proporciones encontradas en el lote, pero tambin utilizando el azar. Una vez obtenida la muestra bruta, se homogeniza utilizando las tcnicas ms apropiadas para ello dependiendo de si son slidas o lquidas. En esta ltima es muy sencillo mezclarlas en un solo recipiente y agitarlas cierto tiempo, a baja revolucin para evitar incorporar aire que las puede alterar o utilizando atmsferas inertes como nitrgeno o bixido de carbono, siempre y cuando no sean componentes de la misma. Las slidas se deben moler seleccionando el equipo adecuado, evitando el exceso de calor y trabajando en condiciones que impidan su contaminacin y luego almacenarlas en un recipiente adecuado. En el caso de alimentos o partes provenientes de seres vivos, se recomienda primero secarlas, pulverizarlas y tamizarlas a travs de una malla de 100 a 200 mesh7. Finalmente, se obtiene la muestra de laboratorio, la cual depende de las tcnicas utilizadas en su determinacin. Sin embargo se recomienda obtener muestras de un kilo cuando son slidas y de un litro cuando son lquidas, se marcan cuidadosamente y se dividen en dos recipientes iguales, uno de los cuales se guarda en un sitio seco y fresco ya que se torna de referencia para posteriores anlisis de comprobacin. El otra se utiliza directamente en los anlisis. La forma de reduccin de tamao de la muestra se puede ilustrar para los slidos mediante la tcnica del cuarteo. Pulverizada y tamizada la muestra bruta, se hace un montn, se divide cuidadosamente en cuatro partes, se toman las dos opuestas, se mezclan y se amontona. Luego se divide en cuatro, se toman las opuestas y se repite el proceso hasta obtener el tamao deseado de la muestra, la cual se deposita en el recipiente seleccionado, marcado previamente, para contenerla. Figura 2. Tcnica del cuarteo en muestras slidas.

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MUESTRA

Las mallas o mesh significan la apertura del espacio que se tiene en el tejido del tamiz; ste se expresa en mm, por lo que para las medidas recomendadas, el dimetro de la partcula est entre 0,125 y 0,075 mm, un tamao adecuado para facilitar posteriores disoluciones.

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El proceso no finaliza aqu; es necesario tomar muestras exactamente medidas que corresponden a las porciones de prueba, las cuales son sometidas a otras condiciones experimentales conforme a la recomendacin de la tcnica seleccionada en la determinacin de las mismas. 2. Material de vidrio. Este puede ser una fuente de contaminacin de la muestra bajo anlisis, sobre todo cuando se trabaja en la determinacin de componentes menores, traza o ultratraza. Los materiales vtreos (vidrio y porcelana) contienen bastante slice y son atacados por las soluciones alcalinas, siendo ms afectado el vidrio. Sin embargo, el vidrio borosilicato (Pirex, Kimax) resiste muy bien el ataque qumico y los cambios de temperatura aunque suelen contaminar con algo de boro; el vidrio vycor (corning) supera al anterior. El cuarzo fundido es un buen material para el manejo del agua destilada y es mejor que los anteriores frente al ataque qumico, pero es afectado por el cido fluorhdrico que definitivamente destruye todo material derivado de la slice como los estudiados hasta ahora. Los recipientes plsticos de polietileno resisten muy bien al cido fluorhdrico, lcalis custicos, cidos comunes y al amoniaco. En la disolucin de muestras metlicas y minerales se suele recurrir a fusiones alcalinas, requiriendo materiales como platino, plata, oro, hierro o nquel para la fabricacin de crisoles. En el anlisis de materias provenientes de seres vivos, es posible trabajar con la mayora de materiales disponibles en los laboratorios aunque se deben revisar cuidadosamente las indicaciones de la tcnica en estos aspectos. 3. Descomposicin de las muestras.

La transformacin de la muestra en soluciones para efectuar el anlisis correspondiente, es un paso fundamental. Su complejidad impide usar un mtodo nico para lograrlo, sin embargo si tenemos alguna idea de su composicin podemos seleccionar el procedimiento ms adecuado y efectuarlo. Para realizar la disolucin se ensayan diferentes solventes como el agua, cido clorhdrico diluido, cido clorhdrico concentrado, cido ntrico diluido, cido ntrico concentrado y agua regia (mezcla de los cidos clorhdrico y ntrico). Si quedan residuos lo mejor es intentar la fusin de la muestra con lcalis como carbonato de sodio, hidrxido de sodio, perxido de sodio (a la vez es oxidante) o el sulfato cido de potasio o piro sulfato; una vez realizada se procede a disolver utilizando agua. Cuando se trabaja con alimentos o con sustancias orgnicas, su tratamiento no es tan drstico ya que se puede realizar una calcinacin seca para recuperar los minerales que contiene o efectuar digestiones (calcinacin hmeda) para mineralizar algunas de las sustancias de inters y poderlas determinar en medio acuoso (p.e., determinacin de nitrgeno o de fibra en el anlisis bromatolgico revisado en la actividad 1). Una tcnica reciente consiste en hacer la digestin utilizando una bomba de tefln y un horno microondas. Se trabaja con pequeas cantidades de muestra exactamente pesadas, se adiciona el cido o combinaciones de cidos (generalmente cido ntrico y sulfrico), se cierra hermticamente y se coloca en el horno. All, en un minuto se pueden alcanzar temperaturas internas de 800 C y unas 80 atmsferas de presin. Para la 41

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digestin de material orgnico, la bomba tiene una vlvula de escape que deja elimina el exceso de CO2 producido. Mineralizada la muestra, se deja enfriar y luego se disuelve en agua hasta un volumen conocido utilizando para ello un baln aforado, se marca y de all se toman alcuotas exactamente medidas conforme a la tcnica que se vaya a utilizar. 4. Equipo de laboratorio. Al comenzar a trabajar las tcnicas, se encuentra la necesidad de utilizar otros equipos de vidrio o algunos de medicin como son la balanza, el espectrofotmetro, el pH metro, el cromatgrafo y otros que mediante la aplicacin de principios fsicos y qumicos muestran resultados cualitativos y cuantitativos sobre los componentes de una muestra. Al ser artificios construidos por el hombre, se han diseado con una finalidad especfica que necesariamente se debe conocer, lo mismo que sus caractersticas de sensibilidad y precisin para dar el nivel de confianza requerido en el anlisis qumico. En cada una de las tcnicas por estudiar en este material, se analizarn esas propiedades, especialmente la relacionada con su calibracin. El conocimiento al detalle del equipo que utiliza es el secreto del buen analista y condicin de certificacin del laboratorio qumico respectivo; afortunadamente se disponen de herramientas auxiliares que ayudan a valorar esos grados de confianza requeridos. Antes de emplear los equipos de laboratorio, se debe tener la certeza de que estn calibrados para que los resultados obtenidos con ellos sean confiables. Pensando en esto, fabricantes y qumicos han diseado los procedimientos ms apropiados para hacerlo, que frecuentemente involucran el uso de reactivos patrn y vienen incluidos en los manuales de funcionamiento de dichos aparatos pues a los fabricantes les interesa ofrecer toda la asistencia tcnica posible con el fin de mantener satisfechos a los usuarios. Una sustancia o reactivo patrn es aquella que cumple al menos tres condiciones: tiene una composicin conocida, no se afecta con el medio ambiente (no es higroscpico en exceso o delicuescente) y se puede calentar a 100 130 C para eliminarle el agua absorbida sin descomponerse o cambiar de composicin. En Qumica Analtica se utilizan para validar los mtodos analticos al determinar la precisin y exactitud del anlisis realizado con ellas y controlar los efectos de matriz o interferencia ocasionado por otros componentes presentes. Por lo general estn certificadas por el fabricante e indican con porcentajes la concentracin de la sustancia principal y los mayores contaminantes que la acompaan. As por ejemplo, el biftalato de potasio empleado como patrn para las titulaciones cido base viene rotulado con el 98 % de pureza, indicando que tiene un 2 % de otros contaminantes que tambin estn especificados. Adems, en ciertas tcnicas como la absorcin atmica, cromatografa de gases o la HPLC o cromatografa lquida de alta eficiencia, es frecuente el uso de patrones certificados que tienen el mximo posible de pureza, generalmente del orden de 99,99 % o ms, debido a que en dichas tcnicas las determinaciones se hacen en el orden de trazas o de ultra trazas.

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El camino del anlisis exacto est sembrado de obstculos que deben ser considerados por quienes utilizan los resultados analticos. Dichos obstculos constituyen un reto a las habilidades y la imaginacin de los analistas empeosos8. Los dems pasos implicados en el anlisis qumico los estudiaremos cuando trabajemos cada tcnica en particular. ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 3 Finalizando este tema, har un ejercicio que le permita consolidar el conocimiento dado en el mismo y luego le servir como referente para el trabajo de laboratorio por realizar al terminar esta unidad. 1) Elabore un resumen que contenga los principales referentes a considerar para preparar una muestra. 2) Suponga que le han contratado como analista en un laboratorio de control de calidad y le indican que debe obtener muestras de los siguientes alimentos en las bodegas de los clientes: Lote de 500 bultos de maz o arroz. Lote de 250 cantinas de leche cruda. Lote de vino de 300 cubas en fermentacin. 50 canales de carne de res. Lote de 1000 bultos de arveja verde en vaina.

Describa brevemente el procedimiento que utilizara para recolectar la muestra y si necesita de algn equipo especial para la toma de las mismas. Si desea puede recurrir a normas ICONTEC, para el muestreo o a manuales especficos. No olvide indicar en su trabajo la bibliografa consultada. 3) Tome uno de los ensayos descritos en la actividad de aprendizaje 1, consulte en la bibliografa cmo es la tcnica; haga un anlisis crtico de la misma teniendo en cuenta los conceptos trabajados en este tema, relacionado con toma de la muestra, tratamiento, equipo de laboratorio a utilizar, qu equipos debe calibrar, qu cuidados especiales debe tener en cuenta y recomendaciones especiales para lograr buenos resultados. Elabore un escrito de mximo dos pginas, comntela en su pequeo grupo colaborativo de aprendizaje y con su tutor.

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HARRIS, Daniel C. Op. Cit., p. 719.

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OBTENCIN Y MANEJO DE DATOS

El hombre sinti la necesidad de medir desde tiempos remotos; su primer esfuerzo, casi intuitivo, le permiti tomar medidas muy elementales. Todo parece indicar que las primeras mediciones las realiz para determinar longitud y masa; para la primera emple el tamao de los dedos, la longitud del pie, el ancho del pie, el largo de sus brazos, etc., mientras que para la segunda utiliz medios de referencia para comparar cantidades como conchas, granos, piedras, etc.9 Analizando lo anterior, se deduce que la medicin es un procedimiento por el cual, contamos el nmero de veces que cabe un patrn dado dentro de la caracterstica del cuerpo que se pretende medir, obtenindose al final un nmero que indica cuntas veces cupo el patrn y una denominacin de la caracterstica del cuerpo: la primera es un nmero y la segunda corresponde a la magnitud. Las propiedades o magnitudes que se utiliza para caracterizar la materia son: longitud, volumen, masa y temperatura. Estas son las bsicas que conforman cualquier sistema de medidas (S.I.). Para las ciencias naturales existe nicamente el sistema internacional de
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TEMA 4.

Evidentemente y aunque a la luz de nuestros conocimientos actuales parecen ridculas, estas unidades fueron escogidas en forma inteligente y prctica pues permitieron una comparacin con la precisin que requeran las elementales necesidades de esa poca primitiva y, por otra parte, para el hombre de esa era resultaba de gran comodidad llevar consigo sus propios patrones de medida para el trueque: el pie, la palma de la mano, el dedo. . En: ICONTEC. SI, sistema internacional de unidades. Bogot, Voluntad, 1976., p. 3.

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medidas, mientras que para las tcnicas conviven dos: el sistema mtrico decimal y el sistema ingls. Su campo de trabajo es netamente tcnico, luego se debe aprender a calcular con los dos sistemas y a mecanizar las formas de hacer conversiones entre las medidas, aunque la tendencia es a utilizar solamente el Sistema Internacional de Medidas, el cual ser por esta razn explicado con algn detalle. Toda medicin se caracteriza por tener tres componentes as: Valor de medicin = Cantidad numrica + Magnitud + nombre de la sustancia. Este cdigo permite comprender los datos que aparecen en los informes cientficos o en los handbooks o libros de datos y se debe observar siempre esta caracterstica cuando se reporten los resultados de algn trabajo experimental realizado durante el aprendizaje o ya en la vida profesional.

1. Sistema Internacional de Medidas. En 1960, la undcima Conferencia General de Pesas y Medidas (CGPM)10 defini como Sistema Internacional de Unidades (SI) al sistema coherente de medida basado en seis unidades: longitud, masa, tiempo, intensidad de corriente elctrica, temperatura termodinmica e intensidad luminosa. Posteriormente, se requiri incorporar la cantidad de sustancia ya que la magnitud definida para masa no se poda aplicar al campo de la Qumica. Este sistema tiene como ventajas:

Es un sistema coherente pues el producto o el cociente de dos o ms de sus magnitudes producen una unidad derivada. Su unidad de fuerza no depende de la gravedad siendo independiente de la aceleracin generada por ella, por lo que es constante en todo lugar. Cada magnitud tiene su propia unidad SI. El factor para la obtencin de unidades derivadas es siempre una unidad. Se utiliza exclusivamente el sistema arbigo de numeracin con base 10, permitiendo que la relacin de mltiplos y submltiplos en una misma magnitud siempre sean relaciones decimales con cada unidad. Se pueden utilizar prefijos antes de las unidades para facilitar el trabajo con las magnitudes SI demasiado grandes o muy pequeas. Todas las unidades SI estn definidas mediante experimentos fsicos que se puede replicar en laboratorio sin utilizar prototipos estndar. En comparacin con otros sistemas tales como el CGS, el Sistema Internacional posee unidades relativamente grandes como el kilogramo para la masa y el newton y no la dina para la fuerza.11 Las anteriores ventajas hacen actualmente que el Sistema Internacional de Unidades sea aceptado por la mayora de los pases y las autoridades internacionales.
10 11

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Corresponde a la mxima autoridad internacional en pesas y medidas y se rene cada seis aos. bid., p. 24 25.

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Corresponde al Sistema Mtrico Decimal. Este se basa en el sistema decimal (cada diez unidades genera otra superior); es decir, que puede tener mltiplos y submltiplos, todos sobre base diez (10). Las unidades que los componen son: Tabla 1. Unidades SI bsicas. Magnitud fsica Longitud Masa Tiempo Intensidad de la corriente elctrica Temperatura termodinmica. Cantidad de sustancia. Intensidad luminosa Nombre de la unidad. Metro Kilogramo Segundo Ampere (amperio) Kelvin Mole Candela Smbolo m kg s A K mol cd

Con criterio exclusivamente de cultura general se transcriben las definiciones dadas para cada una de estas unidades. Cada una de esas unidades tiene un smbolo que se debe aprender a escribir correctamente para evitar la generacin de errores en los informes. Metro. Es una longitud igual a 1.650.763,73 veces la longitud de onda en el vaco, de la radiacin correspondiente a la transicin entre los niveles 2p10 y 5d5 del tomo de Criptn 8612. Kilogramo. Es la masa del prototipo internacional del kilogramo13. Segundo. Es la duracin de 9.192.631.770 20 perodos de la radiacin correspondiente a la transicin entre los dos niveles hiperfinos del estado fundamental del tomo de Cesio 13314. Ampere. Es la intensidad de una corriente constante que mantenida en dos conductores rectilneos paralelos de longitud infinita, de seccin circular despreciable y colocados a una distancia de un metro el uno del otro en el vaco, ejercera entre ellos una fuerza igual a 2 X 10- 7 newton por metro de longitud15. Kelvin. Equivale a la fraccin 1/273,16 de la temperatura termodinmica del punto triple del agua16. Mole. Cantidad de sustancia de un sistema que contiene tantas unidades elementales como tomos de carbono hay en 0,012 kilogramos de carbono 12. Cuando se usa la mole deben especificarse las unidades elementales que pueden ser tomos, molculas, iones, electrones, otras partculas o grupos especficos de tales partculas17. Candela. Es la intensidad luminosa, en la direccin perpendicular de una superficie de 1/600.000 metros cuadrados de un cuerpo negro a la temperatura de solidificacin del platino, bajo una presin de 101.325 newton por metro cuadrado18.

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Las anteriores unidades tienen mltiplos y submltiplos, todos sobre base diez;
12 13

Undcima conferencia de CGPM, 1960. Resolucin 6. Tercera conferencia CGPM, 1901. 14 Dcima tercera conferencia CGPM, 1967. Resolucin 1. 15 Novena conferencia CGPM, 1948. Resolucin 2. 16 Dcima tercera conferencia. CGPM, 1967. Resolucin 3. 17 Dcima cuarta conferencia, 1971. Resolucin 3. 18 Dcima tercera conferencia CGPM, 1967. Resolucin 5.

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actualmente se disponen de 14 prefijos que indican cuantas veces es mayor o menor la unidad derivada. Su denominacin se hace de dos maneras; utilizando el nombre completo o empleando combinaciones de smbolos como se muestra en la tabla 2. Se debe tener en cuenta que existen algunas unidades, listadas en la tabla 3, que no son del Sistema Internacional pero que se pueden usar en combinacin con l. A continuacin se transcriben las reglas de escritura de las unidades SI y sus smbolos, con el fin de memorizar y mecanizar su escritura e interpretacin teniendo en cuenta la nomenclatura internacional y, de hecho, en las revistas especializadas19:

Tabla 2. Prefijos para formar mltiplos y submltiplos del SI.

a) Los smbolos de las unidades deben escribirse en tipo romano, independientemente del tipo usado en el texto (times roman). b) Los smbolos de las unidades no tienen plural. c) A los smbolos de las unidades no se les coloca punto final. d) Los smbolos de las unidades se escriben despus del valor numrico completo en la expresin de una magnitud, dejando un espacio entre el valor numrico y el smbolo. e) Los smbolos de las unidades se escriben con minscula excepto cuando el nombre de la unidad se deriva de un nombre propio; en este caso la primera letra se escribe con mayscula. Ejemplo: m metro; s segundo; A ampere; Wb weber. f) En los smbolos de las unidades no se debe remplazar una letra mayscula por la minscula o viceversa, an en los textos especiales, pues cambia el significado.
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Prefijo Tera Giga Mega Kilo Hecto Deca Deci Centi Mili Micro Nano Pico Femto Atto

Smbolo T G M k h da d c m n p f a

1012 109 106 103 102 101 10-1 10-2 10-3 10-6 10-9 10-12 10-15 10-18

Factor de Multiplicacin = 1.000.000.000.000 = 1.000.000.000 = 1.000.000 = 1.000 = 100 = 10 = 0,1 = 0,01 = 0,001 = 0,000001 = 0,000000001 = 0,000000000001 = 0,000000000000001 = 0,000000000000000001

ICONTEC. SI. Sistema internacional de unidades., p. 58 y ss.

Submltiplos

Mltiplos

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Por ejemplo: 10 kg significan diez kilogramos. 10 Kg significa diez kelvin gramos. g) Las unidades derivadas de nombres propios como ampere, newton, kelvin, no cambian en plural, tal como sucede en castellano cuando se citan apellidos por ejemplo los Rivera, los Garca. As se debe decir 10 ampere y no diez amperes. h) Las unidades no se escriben con maysculas porque no son realmente apellidos de los sabios sino nombres de unidades que perpetan su memoria. i) Los smbolos de las unidades no se deben usar solos en el texto, en lugar de las unidades. Se debe decir recorri cuatro metros y no recorri cuatro m. j) Los smbolos se usan nicamente a continuacin de los valores numricos, expresados en cifras y separados como se indica en (d). k) Cuando la unidad compuesta est formada por la multiplicacin de dos o ms unidades, esto debe indicarse en cualquiera de las formas siguientes: N.m Nm l) Cuando el smbolo de una unidad coincide con el de otra con prefijo, se debe tener cuidado para evitar confusiones. Por ejemplo, la unidad newton metro debe escribirse Nm m.N para evitar errores con el milinewton (mN). m) Cuando una unidad se forma por la divisin de una unidad por otra, esto se debe indicar por cualquiera de las formas siguientes: m/s m.s 1 m s n) La unidad de temperatura termodinmica es el kelvin y no el grado kelvin; su smbolo es K y no K. En la prctica se utiliza el grado Celsius cuyo smbolo es C. Ejemplos:

Con esta informacin ya se pueden resolver problemas de manejo de datos y de unidades, solamente que en Qumica Analtica trabajaremos con unidades de masa, volumen y cantidad de sustancia principalmente. Tabla 3. Unidades que no son del Sistema Internacional pero que se pueden utilizar con l. Magnitud Tiempo. Unidad Minuto. Hora. Da. Grado. Minuto. Segundo. Litro. Tonelada. Smbolo min h d L t Valor en Unidades SI 1 min = 60 s 1 h = 3600 s 1 d = 86400 s 1 = /180 rad 1 = /10800 rad 1 = /648000 rad 1 L = 10 3 m 3 1 t = 10 3 kg

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Correcto 5 km 25 kg 16 mm 50 km/h 5 cm3 Incorrecto 5 km. 25 kgs 16 M.M 16 MM 50KM/H 5 c.c 5 cc.

ngulo plano.

Volumen. Masa.

2. El error asociado a las mediciones experimentales20.

20

Se le recomienda volver a revisar los conceptos ya trabajados en el curso: SANTA ESCOBAR, Mnica Andrea. Estadstica descriptiva. UNAD, Bogot, 2005.

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Cada una de las magnitudes anteriores tiene definido un patrn, unas operaciones experimentales para determinarlas y un conjunto de reglas que se deben observar para obtener un conjunto de datos. Sin embargo algunas de ellas deben ser transformadas para obtener otras, lo que significa que se dispone de tres formas de obtenerlas: de forma directa, cuando se tiene al patrn y se efecta la comparacin (longitud, masa), indirecta entre dos medidas y luego se establece una relacin entre ellas (la densidad, para la cual se mide independientemente la masa y el volumen para luego dividirlas entre s) o mediante equipos previamente calibrados (caso de la masa). La ciencia es exacta en parte. Los datos que ahora se disponen o se obtendrn en el trabajo experimental son afirmaciones de probabilidad; esto significa que es imposible conocer el verdadero valor de los mismos. La evidencia es sencilla; suponga que se desea medir la masa de unas esferas metlicas de hierro que tienen un dimetro de cinco centmetros, se utiliza una balanza cuya escala est en kilos, apenas se detecta que hay un cambio en el indicador de la escala al subir poco pero no se puede determinar la masa. Ahora se emplea una graduada en gramos encontrando un resultado de 12,5 g, se mide la masa de otra y se obtiene una masa relativamente igual. En el laboratorio se dispone de una balanza que da tres cifras y el peso registrado es 12,345 g; luego se efecta la medida en una balanza analtica digital encontrando 12,3347 g. Cul es el valor real de la masa que tiene la esfera pesada si en todos los casos es la misma? Ahora se pesan cinco esferas que se supone se produjeron con el mismo material, la misma mquina y en el mismo lote encontrando valores tan diferentes como 12,3356 g, 12,3255 g, 12,3902 g, 12,3159 g y 12,3405 g. Qu significan esos datos? Todos son falsos? Cul es realmente el valor real de la masa de la esfera de cinco centmetros de dimetro? Los analistas experimentados han propuesto como principio: se debe conocer la incertidumbre asociada a un resultado y saber qu tan confiable es21. Muchos son los factores que entran en juego durante la determinacin de cualquier magnitud fsica o qumica: Al utilizar instrumentos de medicin se debe conocer muy bien su escala ya que la ltima cifra se estima una fraccin de la ltima divisin de la escala que posee. Actualmente se est implementando el equipo electrnico de pantalla digital, pero el principio es el mismo, slo que se tiene un poco de ms certeza ya que en el primer caso, a veces no es fcil diferenciar si esta entre tres y cuatro, por ejemplo. No siempre basta una sola medida, al menos se requieren dos y valorar la diferencia que presentan; si es muy alta se necesita realizar una tercera para poder descartar alguna de las dos anteriores. El resultado final se suele expresar como el promedio de las dos. Se deben desarrollar criterios para la seleccin adecuada de los mtodos, los equipos utilizados, la calidad de los mismos y su confiabilidad, comparados con otros mtodos ya que cada uno de ellos produce resultados diferentes. La experiencia del analista, las condiciones ambientales de que dispone el laboratorio y la calidad de los reactivos que emplea. Cada uno de ellos aporta un efecto al resultado final que se debe valorar. El error del
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HARRIS, Daniel C. Op. Cit., p. 35.

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resultado de una medicin permite revelar las cifras dudosas del valor numrico de una magnitud, que se obtiene como resultado de dicha medicin. Se redondea de acuerdo con el orden numrico de la cifra significativa del error, es decir, el valor numrico de la medida debe finalizar en una cifra del mismo orden que el valor del error. Por ello se ha establecido una clasificacin de los errores experimentales en tres categoras, definindose procedimientos que ayudan a identificarlos y a controlarlos; sin embargo, la experiencia es el primer factor que ayuda a minimizarlos. 2.1 Errores accidentales o groseros.

Son los de ms fcil identificacin ya que estn asociados al factor humano (dificultades en la percepcin o ceguera a un color, la posicin de los ojos frente a la escala del instrumento de medida (error de paralaje), prejuicio, impaciencia, confusin en la lectura de las cifras, (no sabe medir), a descuido en las recomendaciones definidas en el mtodo (no homogeniza las soluciones, contamina reactivos, usa cantidades equivocadas de reactivos, invierte el orden de adicin de reactivos) y al grado de experiencia en el trabajo analtico. El pleno conocimiento de s mismo disminuye la influencia de este tipo de errores. 2.2 Errores aleatorios o indeterminados.

Tienen una distribucin alrededor de un valor central que puede estar incluida o no en los datos obtenidos. No es fcil determinar qu los puede causar y estn asociados a las limitaciones del mtodo, del instrumento y del conocimiento que lo soporta. Si se logran corregir algunos de los anteriores factores, de hecho que mejorarn los resultados aunque siga mantenindose la limitacin. No obstante se puede estimar su magnitud, frecuencia y efecto en el resultado final mediante tcnicas estadsticas. Si al repetir las mediciones se obtienen valores numricos iguales, no significa que se carece de este tipo de errores sino que la precisin y sensibilidad del mtodo o de los equipos de medicin no es la ms adecuada. Los errores aleatorios son inconsistentes respecto a su valor y a su signo, no se pueden determinar por separado y provocan la inexactitud del resultado de medicin. 2.3 Errores sistemticos.

Son errores que se repiten constantemente o varan de manera regular durante la realizacin de la experiencia y tienen una fuente fcilmente identificable como son el mtodo o el instrumento entre otros. Siempre presentan una tendencia o sesgo en su reproducibilidad, es decir, tienen valores y signos determinados que pueden corregirse en la determinacin final. Entre estos se tiene el proceso de calibracin, sensibilidad del equipo frente al analito que se est determinando, uso del equipo en condiciones diferentes a las recomendadas por el fabricante, equipo defectuoso o sin mantenimiento, operaciones dentro del mtodo que generan contaminacin o modifican las propiedades de la sustancia bajo anlisis, utilizacin inadecuada de la teora y del manejo de los datos experimentales para obtener el resultado final. Cabe sealar que la correccin introducida en las mediciones del equipo de medicin corresponde a la correccin de la indicacin del aparato, la correccin agregada al valor de la medida se denomina correccin del valor de la medida. En algunos casos se determina un factor de correccin o un valor por el que se multiplica el resultado final de la 50

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medicin con el fin de eliminar el error sistemtico. Se pueden diferenciar las siguientes fuentes de error sistemtico: 2.3.1 Errores instrumentales de medicin.

Son los que dependen de los equipos de medicin utilizados. Si estos disponen de precisin elevada se pueden eliminar utilizando correcciones provenientes de la calibracin o mediante tcnicas como la pesada por diferencia en los mtodos gravimtricos. Por ello es necesario verificar en el instrumento las siguientes propiedades: Exactitud. Viene medida por el error, siendo tanto mayor cuanto sea menor ste. En esta cuestin se sigue la norma de que el instrumento de medida debe tener una exactitud diez veces superior a la prescrita para la medida; as, para medir dcimas de milmetro se usa un equipo que determine centsimas. Precisin. Cualidad que se confunde fcilmente con la exactitud y corresponde a la capacidad del instrumento de repetir la medida. La precisin est condicionada por la escala y los factores que la afecten: distancia entre trazos, nitidez de los mismos, medios pticos para ampliar, el problema del paralaje o para las digitales, la variacin de la ltima cifra que puede detectar. Sensibilidad. Es el cociente de la variacin en la indicacin sobre la variacin de la magnitud. En general depende de factores especficos del equipo y puede ser determinada en los procesos de calibracin. Fidelidad. Es la aptitud del equipo para reproducir la medida realizada sobre la misma muestra en igualdad de condiciones. Lmite de percepcin (apreciacin). Es la mnima variacin en la magnitud indicada por el equipo. Dispersin. Se presenta cuando al realizar un solo observador las mismas mediciones resultan diferentes valores. En cada caso, cada uno de ellos presenta pequeas diferencias o son completamente diferentes. 2.3.2 Errores por el mtodo de medicin.

Son los que ocurren a causa de la imperfeccin del mtodo utilizado; surgen con frecuencia al emplear tcnicas y procedimientos nuevos, al aplicar ecuaciones de la dependencia real entre las variables en estudio, con aproximaciones que pueden ser inexactas. Se deben precisar y tomar en consideracin al evaluar los errores producidos por el equipo, en la medida y en el resultado final de la determinacin. 2.3.3 Errores de instalacin.

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Surgen debido a la incorrecta ubicacin de la aguja del equipo de medida (cuando son analgicos) respecto a la marca inicial de la escala, condiciones requeridas para el montaje del equipo relacionadas con el correcto uso del equipo (temperatura, eliminacin de vibraciones, fuente de energa elctrica regulada). Como regla general en el trabajo de determinacin de los errores, es necesario considerar que incluso en las mejores condiciones experimentales la exactitud de la medicin nunca puede superar la que suministran los instrumentos de medida. 51

3. Precisin y exactitud en las mediciones analticas. En un tema anterior, se establecieron las condiciones de obtencin de las muestras antes de dar inicio a la determinacin analtica respectiva. Ahora se supone que se trabaja la tcnica correspondiente obteniendo un conjunto de medidas o de datos que estn compuestos de un valor numrico y de la unidad de magnitud correspondiente: una masa, un volumen, la concentracin de una solucin estndar, una absorbancia, una distancia recorrida en un determinado cromatograma, etc. Los datos obtenidos en cualquier medida estn afectados por errores que pueden ser despreciables o graves, afectando seriamente en este caso las conclusiones o recomendaciones que se haran a partir de ellos. Como no se saben de antemano, es necesario estimar la reproducibilidad y la confiabilidad de dichos datos; es decir, que tan verdaderos son. Cmo se resuelve esa duda? La figura 3 muestra la distribucin de un experimento que est determinando una magnitud fisicoqumica para un sistema ideal, del cual se conoce su valor verdadero o valor medio ubicado al centro de la escala horizontal y se ilustran cinco casos que se pueden encontrar al realizar la correspondiente medida utilizando el mtodo estndar previamente definido, el mismo utilizado para determinar el valor medio, y al lado derecho se encuentra una descripcin de la distribucin de cada uno de los resultados encontrados, los cuales se ubican en la correspondiente escala utilizando un cuadrado de color negro.

En el primero, los datos se distribuyen alrededor del valor medio sin que necesariamente coincidan con el valor medio, tanto hacia la izquierda como hacia la derecha. Corresponde a una situacin ideal, es decir, se han controlado eficazmente los tres tipos de error mencionados arriba. En el segundo, se encuentra una situacin parecida pero el valor medio del conjunto de datos no coincide con el valor verdadero definido para la magnitud medida; se presentan errores sistemticos principalmente. En el tercero, la distribucin es muy amplia, sin embargo se encuentra que el valor medio del conjunto de datos es muy cercano al valor verdadero, muestra una excelente combinacin de errores aleatorios y sistemticos, pero la determinacin tiene problemas al momento de valorar su coeficiente de error como lo veremos ms adelante. Para el cuarto caso, la distribucin de resultados muestra un sesgo, indicador de posibles errores sistemticos, menor que en el tercer caso pero ms amplia que la del segundo. El quinto caso presenta dos distribuciones de datos con una distribucin muy pequea cada uno pero sus valores medios no coinciden con el valor verdadero definido para la magnitud medida. Ojal la valoracin de los datos analticos fuera as de simple, pero la realidad es muy diferente. Los qumicos analistas se dedican a explorar cul mtodo se aproxima al valor verdadero en la determinacin de

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Figura 3. Valoracin de los conceptos de Precisin y Exactitud.
Exactitud y precisin altas. Precisin elevada, baja exactitud. Valor medio o verdadero

Baja precisin pero promedio cercano al valor medio. Precisin pobre y valor alejado de la media. Precisin elevada, pero lejos del promedio

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una propiedad fisicoqumica cualquiera controlando cada tipo de error, los fundamentos del mtodo y otras variables para encontrar un valor cercano al valor verdadero que slo conoce la naturaleza. Estos se recopilan en tablas que muestran el grado de exactitud y precisin alcanzadas para utilizarlos como criterios de comparacin para determinar cunto error se ha cometido en la medicin con otros mtodos o con la misma tcnica y hasta tecnologa. Entendemos la exactitud como el grado de concordancia entre el resultado de un ensayo y el valor de referencia aceptado para el analito, es decir da un estimado sobre la confianza del proceso seguido en esa medicin. Mientras que precisin es la reproducibilidad de los resultados; es causada o distorsionada por la contribucin de los errores aleatorios, el sesgo generado por los errores sistemticos y la proximidad de estos al valor de referencia considerado en el concepto de exactitud. Se puede establecer un primer criterio de medicin de la precisin y la exactitud de un resultado estableciendo el error absoluto y el error relativo; el primero corresponde a la diferencia entre el valor real y el valor obtenido, generalmente relacionado con la media de los resultados provenientes de la replicacin del ensayo dos o ms veces, dando un estimativo de la incertidumbre mientras que el segundo es la relacin entre la incertidumbre encontrada en el error absoluto y el valor medido. Tambin se llama incertidumbre relativa. Se ha medido una magnitud cualquiera de la cual se sabe que su valor exacto es A, pero cuando se efectan las medidas en otras porciones de muestra hallamos un valor a diferente al A inicial. El error absoluto equivale a: A a = a Al desconocer la magnitud de A no se puede determinar el signo del error por lo que conviene calcular el error E: E = |A a| = |a|

Esto significa que el valor real debe reportarse como:

El error absoluto mximo de un instrumento nunca es mayor a una divisin de la escala del instrumento. El error relativo es el cociente del error absoluto sobre el valor nominal de la magnitud que se mide, permite juzgar el grado de aproximacin de una medida. Se suele expresar en porcentaje: Error relativo = E/A = (Error absoluto/valor medido) 100

Lo anterior permite considerar que los datos son nmeros aproximados que llevan por s mismos una incertidumbre; para valorar su efecto sobre el resultado final es necesario elegir la variable o la medida menos favorable para que el valor real de la magnitud se encuentre dentro de un intervalo de valores dado por los lmites del error. Esto ser ms claro cuando se estudie el concepto de las cifras significativas. Regresando a la figura 3, el primer caso es lo ideal que se debe encontrar en cualquier determinacin analtica, los dems muestran tendencias que se presentan en la relacin entre estos dos conceptos. Afortunadamente existen formas de poder evaluar cmo se presentan los resultados y establecer sus causas para corregirlas como se analizarn ms adelante. 3.1 Determinacin de los errores en un anlisis qumico.

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A=aE

La realidad muestra la relatividad del conocimiento humano y el esfuerzo intelectual de reducirla. Es necesario aprender a eliminar los errores accidentales al mejorar habilidades, detectar las deficiencias de los sentidos, perfeccionar los equipos con los cuales se hacen las medidas y valorar las fuentes de error sistemtico ya descritas pues los errores aleatorios no se pueden eliminar completamente. Afortunadamente

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hay una forma de poder determinar la reproducibilidad y la confiabilidad de los datos. Ahora se devela el fundamento terico que soporta los criterios ya expuestos. En esta parte se desarrolla la determinacin experimental de la masa de un grano de frjol y sobre esa base explicar el modelo estadstico que ha ayudado a definir el significado del error absoluto y del error relativo. Para ello, se tiene una muestra comercial correspondiente a una libra proveniente del lote de un supermercado (ms adelante se discutir esta parte ya que desde aqu se comienza a controlar la incertidumbre en la determinacin), en el laboratorio se realiza un nmero significativo de medidas en una balanza analtica Metler con aproximacin a la diezmilsima de gramo (0,0001 g) la cual est debidamente calibrada y se encuentra en un sitio especial libre de vibraciones y conectada a una instalacin de corriente regulada. En la determinacin de la masa se observan todas las precauciones requeridas para una pesada obteniendo los datos de la tabla 4. Tabla 4. Medidas de masa (en gramos) para un grano de frjol proveniente de una muestra comercial22 0,1188 0,1795 0,2382 0,2505 0,1810 0,2833 0,2309 0,1746 0,2327 0,2311 0,2459 0,1996 0,2096 0,1814 0,2595 0,1848 0,1965 0,2593 0,2657 0,1399 0,2673 0,1910 0,2091 0,1823 0,2126 0,2380 0,2458 0,1677 0,2137 0,1902 0,2098 0,1995 0,2054 0,1340 0,1470 0,2184 0,1773 0,1799 0,2666 0,2790 0,1795 0,1409 0,2660 0,1590 0,1596 0,1930 0,1496 0,2456 0,1793 0,1970 0,1817 0,1732 0,1561 0,2051 0,2674 0,2254 0,1340 0,2585 0,2535 0,1988 0,2369 0,1733 0,2126 0,1722 0,2504 0,1980 0,1865 0,1828 0,2423 0.1644 0,1736 0,1987 0,1766 0,2455 0,1701 0,1573 0,2237 0,2153 0,1874 0,1904 0,1826 0,2146 0,2048 0,1462 0,2285 0,1402 0,2087 0,1663 0,2012 0,1935 0,2296 0,2482 0,2620 0,2008 0,2055 0,1696 0,1996 0,2365 0,1869 0,1911 0,1860 0,1965 0,2058 0,1985 0,3043 0,2060 0,2335 0,1971 0,1968 0,1421 0,2200 0,1708 0,1642 0,1740 0,2215 0,2262 0,1463 0,1629 0,2266 0,2186 0,2045 0,2326 0,1666 0,1769 0,1683 0,2097 0,2173 0,2341 0,2433 0,1202 0,2025 0,2465 0,2507 0,2089 0,2080 0,1950 0,1917 0,1875 0,2143 0,1606

Analice los datos. De una libra se han tomado 140 granos y se ha determinado su masa con una incertidumbre de 0,0001 g que corresponde a la sensibilidad de la balanza analtica. Cul es el valor verdadero que representa la masa del grano de frjol? Cul es el resultado obtenido en esta determinacin? 3.1.1 Determinacin de la precisin del resultado.

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Para resolver estas preguntas se recurre a la estadstica, una rama de las matemticas para trabajar con esta cantidad de datos. Ella define dos campos de actuacin para ese tratamiento: la primera es la descripcin, el resumen de la informacin de tal modo que se emplee mejor y la segunda es la induccin, consistente en formular generalizaciones a propsito de una determinada poblacin sobre la base de una muestra extrada de la misma. El primer asunto por resolver es cmo se obtiene la muestra, que caractersticas estadsticas debe tener para poder establecer las condiciones para poder efectuar las inferencias de la misma hacia la poblacin.
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Datos tomados de BENCIO DE BARROS NETO, IEDA SPACINO SCARMINIO, ROY EDWARD BRUNS. Como fazer experimentos. Pesquisa e desenvolvimiento na cincia e na indstria. Oficinas grficas da Universidade Estadual de Campinas, Brasil 2001., pg. 18

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Poblacin: conjunto de individuos, objetos o datos finitos o infinitos. Su tamao es tan grande que hace difcil identificar las caractersticas de cada uno de ellos. Muestra: una parte de la poblacin que ha sido seleccionada bajo ciertos criterios con el propsito de realizar inferencias de sus caractersticas hacia la poblacin de la cual fue tomada. Significa la necesidad de realizar un muestreo solo que los criterios son estrictamente estadsticos. Las tcnicas que se pueden utilizar para efectuar ese muestreo pueden ser: i. ii. iii. Aleatorias. Sobre la poblacin se asignan nmeros y mediante una tabla de datos aleatorios se procede a efectuar la seleccin asignando un nmero en secuencia y definiendo cual se selecciona. Sistemticas. Si la poblacin se encuentra afectada por tiempo, orden y espacio, se toma un criterio de sacar un individuo siguiendo una periodicidad o frecuencia de tiempo (cada minuto, cada metro, cada 100 unidades). Estratificadas. Si la poblacin se mantiene estable, se puede dividir en grupos ms pequeos denominados estratos, se define el grado de participacin en los mismos y se afina el criterio de seleccin tomando un porcentaje de individuos de cada estrato hasta completar el nmero correspondiente segn el porcentaje de importancia asignado.

En estos procesos vemos que se establece fundamentalmente un criterio de azar, es decir, de no establecer un proceso muy uniforme de seleccin y de buscar que realmente la muestra obtenida sea estadsticamente representativa. Se ratifica lo mencionado en el tema anterior, utilizando indistintamente el concepto de muestra para el anlisis qumico. Ahora, el problema es el anlisis de los datos obtenidos despus de aplicar un procedimiento analtico para determinar una caracterstica de la muestra ya seleccionada. Existen dos formas de presentacin de los datos: una es en forma de tabla, es decir, disponerlos en filas y columnas siguiendo las siguientes recomendaciones: Establecer un criterio de ordenacin: alfabtico, ascendente, descendente, cronolgico. Disear el cuadro o la tabla buscando su sencillez. Si aparecen varias tablas, es conveniente numerarlas. Escribirles un ttulo que los identifique, adems de suministrar informacin sobre la fuente y la fecha de recoleccin de los datos (si es relevante). Identificar claramente cada columna con ttulos y subttulos de modo que ubique claramente al lector. Incorporacin de los datos manteniendo la mayor uniformidad posible conforme a la precisin de los instrumentos de medida o a la incertidumbre definida para los mismos. Si se utiliza algn tipo de convencin para aclarar o destacar algunos de los datos, es necesario elaborar una tabla de convenciones que explique claramente su significado. Cerrar la tabla con lneas fuertes arriba y abajo de la agrupacin de datos de tal manera que conserve su identidad. La otra forma es mediante el uso de grficas utilizando figuras geomtricas enmarcadas dentro de un sistema de coordenadas rectangulares. Su finalidad es brindar la informacin visual clara del fenmeno o caracterstica medida. Utilizando los datos de la tabla 4 se establece como criterio de ordenacin ascendente, obtenindose la tabla 5: Tabla 5. Ordenacin ascendente de los datos de la tabla 4. 0,1188 0,1663 0,1810 0,1965 0,2058 0,2237 0,2458

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0,1202 0,1340 0,1340 0,1399 0,1402 0,1409 0,1421 0,1462 0,1463 0,1470 0,1496 0,1561 0,1573 0,1590 0,1596 0,1606 0,1629 0,1642 0,1644

0,1666 0,1677 0,1683 0,1696 0,1701 0,1708 0,1722 0,1732 0,1733 0,1736 0,1740 0,1746 0,1766 0,1769 0,1773 0,1793 0,1795 0,1799 0,1810

0,1814 0,1817 0,1823 0,1826 0,1828 0,1848 0,1860 0,1865 0,1869 0,1874 0,1875 0,1902 0,1904 0,1910 0,1911 0,1917 0,1930 0,1935 0,1950

0,1965 0,1968 0,1970 0,1971 0,1980 0,1985 0,1987 0,1988 0,1995 0,1996 0,1996 0,2008 0,2012 0,2025 0,2045 0,2048 0,2051 0,2054 0,2055

0,2060 0,2080 0,2087 0,2089 0,2091 0,2096 0,2097 0,2098 0,2126 0,2126 0,2137 0,2143 0,2146 0,2153 0,2173 0,2184 0,2186 0,2200 0,2215

0,2254 0,2262 0,2266 0,2285 0,2296 0,2309 0,2311 0,2326 0,2327 0,2335 0,2341 0,2365 0,2369 0,2380 0,2382 0,2423 0,2433 0,2455 0,2456

0,2459 0,2465 0,2482 0,2504 0,2505 0,2507 0,2535 0,2585 0,2593 0,2595 0,2620 0,2657 0,2660 0,2666 0,2673 0,2674 0,2790 0,2833 0,3043

Ahora empieza el ejercicio de interpretacin de los datos utilizando esquemas grficos que ayuden a establecer inferencias de los mismos conforme a los postulados de la estadstica. El primer descriptor es el rango, relativamente fcil de determinar al ordenar los datos de manera ascendente o descendente pues corresponde a la diferencia entre el mayor valor y el menor23. Para este caso son:

Este estadstico establece un lmite en el cual estn las variaciones de medidas pero todava no resuelve la primera pregunta ya que no representa al conjunto de datos, ni permite describir su comportamiento por ello es necesario recurrir al concepto de clase o de intervalo. El intervalo de clase son categoras contiguas definidas entre lmites para no incluir valores menores o mayores a su intervalo facilitando una representacin tabular o grfica con la ventaja de poder describir alguna caracterstica particular del conjunto de datos en observacin. Existe un principio o regla prctico que establece para un grupo de datos no menos de seis ni ms de 15 para definir el tamao de los intervalos24. Para este caso prctico, por facilidad de manejo de datos se tomarn intervalos de 10, con el cual se efecta la siguiente operacin: 0,1855/10 = 0,01855 Como slo se tienen cuatro cifras decimales, es necesario hacer una aproximacin quedando el valor del intervalo en 0,0186, el cual se suma al menor valor del intervalo y as sucesivamente para construir la primera columna de la tabla 6.

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0,3043 0,1188 = 0,1855

23

Con fines prcticos no vamos a identificar la magnitud de los valores que estamos trabajando en el ejemplo para no confundirnos. Sin embargo, cuando reportemos el resultado final si es necesario considerar la magnitud de la propiedad en discusin: masa. 24 En el curso de Estadstica descriptiva de la UNAD, se recomienda utilizar la regla de Sturges y aparece la tabla 2.6 que puede utilizar para validar esta recomendacin emprica. El estudiante puede comprobar que no se contrapone, sino que da un poco ms de maniobrabilidad para la interpretacin de los datos, que es lo que interesa mostrar aqu.

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Terminado el clculo total, se contabiliza cuntas medidas se encuentran en cada clase de intervalo, completando la columna dos de la tabla 6 y finalmente se suma la acumulacin de frecuencias para encontrar el nmero total de ellas que debe ser de 100. Los resultados finales se encuentran descritos en la tabla 6. Representando los datos en un histograma, se tiene la figura 4. Observando el histograma resultante, hay una tendencia de acumulacin para la frecuencia establecida en el rango cinco, la cual se considerara como si fuera la del valor verdadero, sin embargo se tiene una variabilidad que todava no representa cul es el valor verdadero del peso del grano de frjol. Por ello se recurre a otros estadgrafos como son el valor promedio y la desviacin estndar.

Tabla 6. Frecuencia de los datos determinados en la tabla 5. Intervalo de clase 0,1188 0,1374 0,1375 0,1561 0,1562 0,1748 0,1749 0,1935 0,1936 0,2122 0,2123 0,2309 0,2310 0,2496 0,2497 0,2683 0,2684 0,2870 0,2871 0,3043 Frecuencia 4 9 20 26 30 18 17 13 2 1 Frecuencia absoluta 4 13 33 59 89 107 124 137 139 140 Frecuencia relativa 0,13 0,20 0,37 0,47 0,60 0,77 0,87 0,90 0,93 1,00

Figura 4. Histograma de la distribucin de frecuencias de la tabla 6.

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30 25 20 15 10 Frecuencia 5 0 0,12 0,16 0,19 0,23 0,27

La aplicacin de dichos estadgrafos debe corresponder a la tendencia que estn presentando los datos en su distribucin como se ve en la figura 4. Tendencia que corresponde a lo que se denomina una curva normal de distribucin de frecuencias, donde existe un punto central que acumula el mayor nmero de datos. La curva que sigue esa tendencia se denomina la curva de Gauss la cual tiene como propiedades: La curva normal tiene forma de campana con un pico nico. En el centro de la curva se encuentra la media o valor esperado del conjunto de datos. Sus colas se extienden indefinidamente y nunca tocan el eje horizontal. Cada curva describe una poblacin a la que se puede diferenciar por su valor medio y su anchura.

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Independiente del ancho de la curva normal, el rea bajo ella siempre equivale a 1,00. propiedad permite efectuar predicciones utilizando el concepto de probabilidad.

Esta

Lo anterior, permite encontrar otras dos medidas que ayudan a caracterizar los datos como son la media aritmtica y la desviacin estndar. La media aritmtica, un estadgrafo de posicin ya que determina la tendencia central del conjunto de datos analizados, corresponde a la suma de todos los valores, dividido por el nmero total de datos. Se suele llamar nicamente media dndose por entendido que corresponde a esta medicin. Cuando se determina directamente sobre una poblacin se distingue con la letra y si corresponde a la de una muestra se escribe . La expresin matemtica es:

La desviacin estndar, un estadgrafo de dispersin, mide la extensin del conjunto de datos alrededor de la media. Corresponde a la raz cuadrada de la media de los cuadrados de las desviaciones de cada dato individual, de modo que la suma de esos cuadrados es mnima. Si se determina sobre la poblacin se identifica como , mientras que si se determina sobre una muestra se representa s. La expresin matemtica es:

Regresando al ejemplo y utilizando una calculadora con funcin estadstica o mediante una hoja de clculo electrnica, los resultados son: Media: 0,2023 g Desviacin estndar: 0,04

Como se debe hacer una descripcin de los datos, relacionada con errores aleatorios, la precisin de los resultados anteriores se expresa como la combinacin de la media y la desviacin estndar: Peso del grano de frjol = Media desviacin estndar = 0,20 0,04 g A pesar de la sensibilidad de la balanza, la variacin de la muestra es tan grande que hace disminuir la precisin de la medida. Es otra forma de reportar el error. 3.1.2 Propagacin del error.

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Aqu no termina la discusin con la valoracin de los errores aleatorios. Cuando se realizan operaciones con los datos, como suma, resta, multiplicacin, elevar a una potencia, aparecen condiciones que influyen la generacin de otros debido a la acumulacin de los errores ya valorados en cada medida, por ello se revisa el formulismo matemtico que ayuda a determinarlos.

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3.1.2.1 Suma y resta. Si la incertidumbre es la diferencia del valor de un dato con respecto a su valor real, sta puede tener dos signos: positivo o negativo segn su relacin sea por defecto o por exceso. Si se determina cmo influye en esta operacin matemtica, es necesario considerarla al cuadrado o, mejor, como su valor absoluto. Sea la siguiente relacin definida por tres mediciones diferentes as: Y=a+b-c Cada una de ellas tiene asociadas las incertidumbres a a, b b y c c. incertidumbres ser: Incertidumbre = (a)2 + (b)2 + (c)2 3.1.2.2 Multiplicacin y divisin. En este caso la relacin de variables para una determinada medicin es: Y = ab/cd Incertidumbre = La propagacin de

3.1.2.3 Potenciacin.

Cuando en la utilizacin de una expresin matemtica es necesario efectuar operaciones de potenciacin, la valoracin de la incertidumbre tendr la siguiente expresin25: Y = an

Cuando existe combinacin de operaciones, se sugiere que se haga el mismo tratamiento que cuando se despeja una forma algebraica, desarrollando los trminos Internos ms simples hasta cubrir toda la ecuacin. Al comienzo le va a costar algo de trabajo la aplicacin de la propagacin del error pero al final su destreza le permitir valorar la calidad de los resultados obtenidos. En los informes de laboratorio siempre se deben efectuar estos clculos. En cualquier experimento analtico ocurrirn errores aleatorios y sistemticos. El error combinado estimado para el resultado final, corresponde a la incertidumbre mostrando un intervalo real de valores dentro del cual probablemente estar ubicado el valor de la cantidad medida. 3.2 Estimacin de las cifras significativas.

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a + b + c + d Incertidumbre = n|a/a|

No todas las mediciones se pueden realizar con el mismo nmero de cifras ya que depende de la escala del instrumento como se mencion antes. Muchas veces cuando se efectan clculos para transformar esas mediciones en el resultado esperado se encuentra que muchos de ellos tienen entre dos y cuatro cifras decimales, cmo se hace para reportar el resultado con la precisin esperada?

25

No olvide que se trata de trabajar con el valor absoluto de la medicin o con la raz cuadrada de su cuadrado, para eliminar la influencia de los signos de cada incertidumbre.

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Una cifra significativa es aquella sobre la cual se tiene un grado de certeza de que es verdadera, pero tambin se puede encontrar que tiene un grado de incertidumbre de acuerdo con la posicin que ocupe dentro de un conjunto de datos. Por ello se prefiere hablar mejor del nmero de cifras significativas, para indicar al nmero de cifras que se pueden contar desde la izquierda hasta la primera cifra con incertidumbre que aparece en el dato analtico. En el caso de la balanza analtica, la cifra 0,0001 corresponde a la cantidad de incertidumbre que arroja el instrumento luego el peso 0,2345 g determinado para una sustancia tendr en la cuarta cifra su incertidumbre permitiendo tener certeza solamente de las otras tres. No ocurre lo mismo con el volumen que se determina con una incertidumbre de 0,01 mL. Al combinar estas dos medidas el resultado no podr ser reportado con una incertidumbre equivalente a cuatro cifras decimales. 3.2.1 Reglas para la determinacin del nmero de cifras significativas.

Como procedimiento para el tratamiento de datos, se recomienda trabajar con todos los datos y cantidad de cifras que sea posible hasta obtener el resultado final, luego se comienza a valorar el grado de significancia de cada una de ellas conforme a las siguientes reglas: El resultado final no debe poseer ms de un dgito dudoso o con incertidumbre. Cuando se tengan que eliminar los dgitos dudosos del resultado final debe efectuarse aproximaciones as: si el dgito es mayor de cinco, se debe incrementar en uno la cifra final del resultado. Si el dgito a rechazar es igual a cinco, debe observar la cifra dudosa pues si sta es impar la aumenta en uno y si es par se deja. Se elimina cuando el dgito es menor de cinco. En operaciones de suma, resta, multiplicacin o divisin, el nmero de cifras significativas se toma del dato que tenga el menor nmero de cifras significativas. Cuando se puede determinar para una serie de datos su media y su desviacin estndar, el nmero de cifras significativas del resultado ser el establecido por este ltimo resultado. 3.2.2 El resultado final.

No obsta resaltar la necesidad de establecer desde el inicio de cualquier experimento la vigilancia de la calidad de los resultados esperados. El error puede ser minimizado si se conocen los fundamentos tericos del mtodo, el procedimiento, la incertidumbre de los instrumentos de medicin y la representatividad de la muestra para poder tener certeza en la aproximacin hacia el dato verdadero que se busca. Esto significa que se puede recurrir a resultados ya reportados en los Handbook para comparar los nuestros o para referenciar una nueva tcnica que ayude al mejoramiento de la obtencin de los mismos. La comparacin siempre se efectuar en trminos del error absoluto y del error relativo que tambin pueden ser verificados y comparados mediante procedimientos estadsticos y la determinacin de la propagacin del error como se describi aqu. 4. Determinacin de la muestra y criterio de aceptacin de datos.

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En los temas anteriores se defini un procedimiento para el trabajo analtico y aunque se haba discutido sobre la muestra, qued pendiente estudiar un criterio estadstico para definir su grado de representatividad, caracterstica primordial de calidad. Por ello se regresa nuevamente a la estadstica para disponer de un criterio que ayude a la mejor seleccin de la misma a partir de una poblacin determinada. 4.1 Significado estadstico de la muestra.

La muestra tiene tal relacin estadstica con su poblacin, que permite inferir sus propiedades a partir de las de aquella (por ahora la media y la desviacin estndar). Para que esto se cumpla con el mnimo posible de error, es necesario que la muestra sea estadsticamente aleatoria, es decir debe ser tomada de tal modo que todos los miembros de la poblacin tengan la misma posibilidad de ser elegidos. 4.2 Criterios para la aceptacin de datos.

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En el ejemplo del grano de frjol no es necesario analizar cada uno de los datos para aceptarlos, es decir, considerarlos dentro de los valores incluidos en la tendencia de los mismos ya que al efectuar la experiencia cada uno de ellos es real; fue tomado de la naturaleza. La variabilidad de esta muestra depende de factores genticos, agronmicos, condiciones del cultivo, adicin de abono, manejo del grano, etc., variables complejas y difciles de controlar excepto con un adecuado diseo experimental que permitira minimizarlas al mximo (en otros cursos de la carrera se podr profundizar en el tema que no se puede cubrir aqu por no ser el objetivo del curso). Cuando se encuentra en un conjunto de medidas, resultados que difieren del resto de manera inexplicable, el primer impulso es eliminarlos porque se piensa que son producto de errores humanos. La mejor alternativa sera aumentar el nmero de observaciones con lo cual el error ocasionado al utilizar los valores sospechosos se minimizara o quedara compensado por observaciones desviadas en sentido contrario. Sin embargo, sucede frecuentemente que esto ya no es posible y como existe la posibilidad de que dichos resultados realmente pertenezcan al universo de la muestra y por ello sean estadsticamente vlidos, se debe utilizar un criterio tambin estadstico para analizarlos y tomar la decisin de eliminarlos o de aceptarlos. Existen varios mtodos estadsticos de los cuales es recomendable aplicar cualquiera una sola vez porque la media y la desviacin estndar del resultado final dependen de si los valores sospechosos se incluyen o no en el clculo respectivo. 4.2.1 El contraste de Dixon (contraste Q).

En muestras pequeas (de 3 a 7) el contraste evala la medida sospechosa comparando la diferencia con la ms prxima calculando el estadstico: Q= |Valor sospechoso valor| cercano| (valor mayor valor menor)

Luego se define un lmite de confianza que corresponde al 95 % y que en trminos de probabilidad se establece como P = 0,05 listado en la tabla 7. Si el valor de Q supera el valor crtico definido en dicha tabla lo debemos rechazar; si no es mayor se incluye dentro de los datos. Estudie el siguiente ejemplo. En el anlisis de cloruros en una muestra de un encurtido se obtuvieron los siguientes resultados: 0,56 mg/mL. 0,54 mg/mL. 0,48 mg/mL. 0,55 mg/mL. Se quiere saber si todos los resultados son vlidos o si es menester descartar alguno de ellos. Tabla 7. Valores crticos de Q (P = 0,05)26. Valor crtico 0,831 0,717 0,621 0,570

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Tamao de muestra 4 5 6 7 Q= |0,48 0,54| (0,56 0,48)

De los cuatro datos se sospecha del tercero, luego se calcula el factor Q:

Q = 12,75 que es mucho mayor al valor crtico definido para cuatro datos en la tabla 7 (0,831) por lo cual se elimina el cuarto dato.
26

MILLER, James N. MILLER, Jane C. Op. Cit., p 265.

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4.2.2

El contraste de Grubbs.

Otro criterio estadstico, recomendado por la ISO, compara la desviacin entre el valor sospechoso y la media muestral con respecto a la desviacin estndar de la misma, por lo que se debe calcular el estadstico: G = |Valor sospechoso - x|/s x y s son los estadsticos de la muestra calculada incluyendo al dato sospechoso. Luego se compara con los valores crticos definidos en la tabla 8 para P = 0,005. Si es mayor a este valor se rechaza, de lo contrario se acepta. Haga el mismo ejercicio con el ejemplo del contraste anterior. Los estadsticos para el conjunto de datos anteriores es media = 0,53 y desviacin estndar = 0,04. Ahora se calcula G: G = |0,48 0,53|/0,04 = 1,25 Tabla 8. Valores crticos de G (P = 0,005)27. Tamao de la muestra 3 4 5 6 7 8 9 10 Valor crtico 1,155 1,481 1,715 1,887 2,020 2,126 2,215 2,290

Comparado con el valor crtico de la tabla 8 se tiene que es menor a 1,48 por lo que debe ser incluido en el anlisis. Si todava se mantiene la incertidumbre, lo recomendable es volver a efectuar el anlisis si se dispone del tiempo, los reactivos y el costo financiero lo permite; de lo contrario es mejor continuar con el anlisis de los resultados. Se recalca nuevamente en la importancia de efectuar un buen diseo del experimento, analizando y controlando todas las posibles fuentes de error.

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27

bid. p 266.

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ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 4 1) Se quiso determinar la masa de un grano de frjol colombiano determinando sobre una muestra de una libra el peso de algunos de ellos conforme a la tabla 9. Efecte el anlisis estadstico de los mismos elaborando su histograma y calculando la media y la desviacin estndar. Qu conclusiones se pueden obtener del anlisis estadstico de esta muestra? Si tiene algunas recomendaciones para mejorar la experiencia no dude en escribirlas. Tabla 9. Datos experimentales para la determinacin del peso, en gramos, de un grano de frjol colombiano. 0,5628 0,5211 0,5570 0,5167 0,4957 0,3223 0,3641 0,3156 0,3996 0,2829 0,4938 0,3640 0,3007 0,4143 0,3021 0,4142 0,2945 0,3373 0,3869 0,5147 0,3795 0,4241 0,4554 0,4487 0,3434 0,3787 0,4079 0,3839 0,3342 0,3875 0,3217 0,3869 0,3992 0,4467 0,3606 0,2730 0,4049 0,4573 0,3000 0,3271

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0,4510 0,3286 0,4537 0,4496 0,4614 0,3957 0,3853 0,3331 0,3593 0,4814 0,3800 0,4362 0,4036 0,4185 0,3916 0,2840 0,4077 0,5170 0,4405 0,4774 0,4335 0,2020 0,4268 0,4917 0,3589 0,3397 0,3152 0,3976 0,3765 0,4608 0,4384 0,4110 0,3688 0,3760 0,3671 0,4117 0,3179 0,3459 0,3633 0,3912 0,4260 0,3141 0,4198 0,4117 0,4021 0,4602 0,2836 0,3424 0,2357 0,4093 0,4269 0,4809 0,5124 0,4076 0,3700 0,3989 0,4117 0,3430 0,3664 0,4388 0,3779 0,4279 0,3378 0,5083 0,3436 0,4237 0,3553 0,4384 0,3419 0,3519 0,3457 0,5047 0,3660 0,4286 0,3320 0,3630 0,3841 0,2821 0,2443 0,3223 0,2830 0,3833 0,4266 0,3546 0,3728 0,3930 0,4518 0,4351 0,3789 0,5102 0,3996 0,3963 0,2928 0,3397 0,4063 0,3463 0,3228 0,3117 0,3528 0,3227 Humedad de una harina de maz. 0,1506 g 0,1345 g 0,1196 g

0,2962 0,4018 0,5124 0,3552 0,3277 0,3924 0,3969 0,4897 0,5517 0,4794 0,3808 0,4278 0,3194 0,4028 0,4687 0,3841 0,3253 0,4042 0,2910 0,2576

2) Teniendo en cuenta los siguientes datos utilice los contrastes de Dixon y Grubbs para determinar si puede eliminar los datos sospechosos. Explique claramente los criterios que ha utilizado para tomar su decisin.

0,1232 g

0,1423 g

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Porcentaje de grasa en una muestra de aguacate. 10,5 9,3 11,0 10,9 13,3

Cantidad de fibra cruda en habichuela. 1,58 g 1,60 g 1,78 g 1,59 g 1,61 g

Contenido de nitrgeno en una muestra de leche de vaca. 0,5446 g 0,5021 g 0,5532 g 0,5489 g 0,5521 g 0,5500 g 0,5498 g

Contenido de vitamina C en un jugo de naranja natural. 49,7 mg 50,5 mg 51,0 mg 49,5 mg 45,9 mg 50,9 mg 50,5 mg

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ACTIVIDADES DE PROFUNDIZACIN Y TRANSFERENCIA

Reconociendo la importancia de este evento, tanto que se program en la gua de actividades un espacio temporal para un evento de interaccin estudiantes tutor, no se quiere direccionar desde el material el tipo de actividad por realizar ya que se deja en autonoma al docente tutor para que la disee conforme a las necesidades, disponibilidades y capacidades del grupo de estudiantes que est apoyando. Se sugiere un taller prctico, donde se tomen algunos ejemplos de las empresas de alimentos que se encuentren en el sector o se disee un estudio de casos hipottico teniendo en cuenta el desarrollo tecnolgico de la regin, de modo que sirva como punto de partida para el diseo de algn proyecto productivo o el mejoramiento del que sirve de anlisis. El tutor deber establecer claramente las competencias, productos y logros de la actividad que disee, de modo que se ajuste a los criterios previamente definidos por la institucin, que le proporcione al estudiante criterios para su autoevaluacin y consolidacin del conocimiento. No olvide que quien debe trabajar en el momento del encuentro es el estudiante, la funcin a desarrollar en el mismo es de asesora, apoyo y certificacin de la consolidacin del conocimiento por parte del grupo de estudiantes que participe activamente.

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ACTIVIDADES DE LABORATORIO
Al ser el curso de Qumica Analtica Instrumental metodolgico, requiere de la realizacin de eventos prcticos supervisados por el tutor que garanticen la posibilidad de que estudiante adquiera las destrezas, habilidades y competencias necesarias para la realizacin del trabajo experimental, como jefe de proceso responsable del control de calidad de un producto o para explorar su capacidad como investigador y dedicarse a este campo que permite conocer y explotar mejor los recursos disponibles de nuestro pas de manera sostenible, con una concepcin humanista de desarrollo. Con estas actividades se le brinda al estudiante la posibilidad de acercarse al concepto de riesgo, a conocer el tipo de sustancias que va a manejar, las precauciones recomendadas y las normas institucionales para el trabajo de laboratorio. Esta experiencia debe enriquecerlo, no generarle situaciones que atenten contra su vida; si es cuidadoso, protege su cuerpo y tiene una actitud proactiva, encontrar en el trabajo experimental otra experiencia de construccin y verificacin del conocimiento. Tambin, encontrar instrucciones para la elaboracin del informe de su experiencia prctica. La ciencia se construye con el mtodo que se aplicar en estas sesiones prcticas y el conocimiento se incrementa a travs de la construccin del artculo cientfico. En su vida profesional deber escribir informes de sus actividades, luego sta es una oportunidad para ejercitar esa destreza. Sin embargo, el objetivo no es escribir extensos documentos, se tiene que ser concreto y describir lo que realmente se hizo, con las propias palabras, resaltando lo que ha aprendido y sus conclusiones, sin copiarlas de otros textos. Por ltimo, habr dos prcticas en el laboratorio que deben ser preparadas con anterioridad. La primera se relaciona con la metodologa del anlisis cualitativo, mediante la aplicacin de unas tcnicas suficientemente probadas que permitirn verificar la presencia o la ausencia de un determinado grupo funcional. La segunda revisar el tema del error al efectuar la determinacin experimental del peso de un grano de maz proveniente del mercado diario.

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LA SEGURIDAD EN EL LABORATORIO QUMICO

1. Riesgos en el Laboratorio28.

28

ALFARO CUBILLOS, Ana Myriam. Seguridad en la industria de alimentos. UNISUR, Bogot, 1994, pp. 333 353.

66

No se desconoce la importancia que tiene el control de calidad en la industria de alimentos ya que se constituye en el respaldo de la garanta de ofrecer al consumidor un producto alimenticio que le aporte todos los nutrientes o buena parte de ellos, necesarios para tener y mantener una excelente salud y sin ningn organismo patgeno u otro elemento que se constituya en un riesgo para la salud.
En este tema se va a estudiar cules son aquellos factores de riesgo que se tienen en un laboratorio qumico. 1.1 Riesgos con compuestos qumicos.

Aparecen debido al manejo permanente y a la exposicin a aquellas sustancias que es necesario manipular, moler o destapar para medir pequeas cantidades, pesarlas, agregarlas a otras o disolverlas y a su manejo permanente o no. Los riesgos estn relacionados con la facilidad de ser inhalados, absorbidos a travs de la piel y las mucosas y por ingestin involuntaria del producto. La nica manera de prevenir y/o disminuir esos riesgos es logrando un profundo conocimiento de las propiedades particulares que tiene ese compuesto y de los mtodos ms apropiados para su manejo. Lo anterior permite concluir que para el manejo de los reactivos qumicos se deben reunir tres condiciones: Conocimiento del producto qumico. Conocimiento de su aplicacin. Conocimiento que posee el operario o analista. De los tres se enfatiza ms en el primero ya que para el segundo y el tercero la persona que va a manejar una sustancia como stas ya es un profesional en su manipulacin. Algunas de las sustancias qumicas al caer sobre la piel pueden ocasionar dermatosis por ser irritantes, corrosivas o alrgicas. Los reactivos lquidos son ms o menos peligrosos dependiendo de la temperatura, la presin atmosfrica, su estructura qumica, sus propiedades fisicoqumicas (volatilidad, inflamabilidad, temperatura de explosin) y de su interaccin con la piel, las mucosas y el metabolismo. Los riesgos estn relacionados con la facilidad de ser inhalados, absorbidos a travs de la piel y las mucosas y la ingestin involuntaria del producto. Los reactivos gaseosos son los ms peligrosos debido a la gran movilidad que presentan y a la facilidad de ser inhalados ocasionando somnolencia, asfixia, irritaciones, adormilamiento y envenenamiento. 1.1.1 Efectos de las sustancias qumicas.

Existe, al menos, tres vas de acceso de los compuestos qumicos al interior del organismo humano que van a afectar su normal funcionamiento. Estas vas son: Inhalacin. El efecto directo que pueden tener las sustancias qumicas sobre el organismo humano es muy variado ya que depende de su estado de agregacin: si es slido es fcil su dispersin como polvo o como humo. Los polvos al ser inhalados a travs del aparato respiratorio se van a alojar en los pulmones y producen un grupo de enfermedades llamadas neumoconiosis, que dejan secuelas permanentes como lo muestra la tabla 10. Tabla 10. Enfermedades producidas por reactivos qumicos slidos en polvo29.

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29

CORTES, Luis E. Seguridad en el trabajo. Bogot: Escuela Superior de Administracin Pblica, 1978, p. 21.

67

Sustancia
Asbesto Carbn Slice Caliza Estao Hierro Caa de azcar

Enfermedad Asbestosis Antracosis Silicosis Calicosis Estannosis Siderosis Bagazosis

Los humos son partculas generadas durante la volatilizacin de metales fundidos o de materiales sometidos al fuego. Pueden ser inhalados, afectar los ojos y originar enfermedades crnicas. En la tabla 11 se encuentra un listado de ellas. Tabla 11. Enfermedades causadas por la aspiracin de humos producidos por la vaporizacin de metales30.

Metales
Manganeso Mercurio Plomo Cadmio Zinc

Enfermedades
Manganismo Hidrargirismo Saturnismo Irritacin, edema pulmonar Irritacin, edema pulmonar

Absorcin.

Por lo general se relaciona con el contacto directo de la sustancia con la piel (especialmente las lquidas) atravesndola, acumulndose en el organismo y desencadenando enfermedades como el cncer. Durante un trabajo cualquiera puede facilitarse la aparicin de una serie de condiciones que favorecen la absorcin del compuesto como: o o o o o La transpiracin continua alcaliniza la piel saponificando la capa grasosa que es arrastrada con el sudor. Los disolventes y dems compuestos orgnicos se solubilizan relativamente fcil en las grasas y de all se difunden hacia el interior del cuerpo a travs de las glndulas sebceas. La aplicacin de ungentos y cremas grasosas sobre la piel favorecen el ingreso de sustancias txicas orgnicas. Las heridas, dermatitis y otros traumas que rompan o perforen la piel favorecen la entrada de los txicos al organismo. La falta de limpieza de la piel destruye la proteccin natural y permite la entrada de sustancias peligrosas.

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Ingestin. Es la va ms directa. Por lo general se considera como el medio para desarrollar las intoxicaciones crnicas involuntarias, ocasionadas por el desconocimiento de la peligrosidad del compuesto que se manipula, a la nula aplicacin de normas de higiene en
30

bid.

68

el consumo de los alimentos (no lavarse las manos antes de comer) o a hbitos peligrosos como fumar cuando se manipula el txico o comer al tiempo cuando se trabaja con ellos. 1.1.2 Conocimiento del producto qumico.

Es importante tener pleno conocimiento del nombre, propiedades, precauciones de manejo e incompatibilidades que tiene por s misma una determinada sustancia qumica y de lo que sepa el laboratorista que est trabajando con ella. La primera tarea que se debe atender es la de elaborar o consultar la ficha para cada producto qumico que est usando, verificar que esa informacin est disponible para todas las personas que tengan que trabajar con el reactivo y comprobar que todos ellos conocen cules son los riesgos que se corres si se manipula de una manera diferente a la considerada como segura. La informacin que debe contener dicha ficha es: Nombre del reactivo. Tanto el comn como el IUPAC para evitar su confusin cuando se le nombra por cualquiera de las dos formas. Propiedades fsicas. Explicar claramente su estado fsico, sus constantes fsicas, la facilidad de volatilizacin, la produccin de gases explosivos, su olor caracterstico (si es posible entrenarse en su deteccin a travs del olfato, cuando no es muy txico), su comportamiento frente al fuego, cambios de temperatura, golpes y frente a otras sustancias con las que sea incompatible, la densidad de sus vapores (para poder evacuar el rea ya sea arrastrndose o buscando salidas ms altas), los efectos a corto y a largo plazo sobre la salud humana y su comportamiento frente al agua ya que al ser el disolvente universal por excelencia y el medio ms apropiado para controlar y apagar incendios, no se puede olvidar que en algunos casos la reaccin de la sustancia qumica con el agua puede ser explosiva (caso de metales alcalinos, cloruros de fsforo), liberar gases txicos (soluciones de cianuro en medio cido) o generar calor (disolucin del cido sulfrico concentrado) en forma violenta liberando nuevos compuestos ms peligrosos o causando incendios. Incompatibilidad. Es el comportamiento qumico que se presenta cuando estn juntas dos sustancias debido a que sus vapores pueden interactuar causando explosiones e incendios. Esto es muy importante cuando se van a almacenar y cuando se van a utilizar. Toxicidad. Se debe disponer de toda la informacin sobre el manejo ms apropiado para disminuir los riesgos contra la salud y/o el efecto que puede tener a largo plazo al estar expuesto durante cierto tiempo. Norma de manejo. Son indicaciones para el uso de equipo de proteccin y de otros elementos de seguridad.

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Una gua para la elaboracin de la ficha del reactivo es la encuesta que aparece en la tabla 12. Tabla 12. Encuesta para la elaboracin de la ficha de seguridad para un producto qumico31.

31

HANDLEY, William. Manual de seguridad industrial. Bogot, Mc Graw Hill Latinoamericana, 1980., p 39.

69

1. 2. 3.

4.

5. 6.

7. 8. 9.

tem Nombre del producto qumico: Cul es su estado fsico? Es: txico? penetrante? crnico? txico por ingestin? txico por inhalacin? txico por absorcin? Cul es: la densidad de su vapor? la presin de vapor? la temperatura de congelacin? su peso especfico? su miscibilidad con el agua? Cul(es) es (son) sus(s) incompatibilidad(es)? Es inflamable o altamente inflamable? Cul es su: temperatura de vaporizacin? lmite de explosividad? temperatura de ignicin? Qu equipo contra incendio se debe usar? Qu equipo de proteccin personal se debe usar? Otras precauciones especiales.

Respuesta

1.1.3

Reglas para el manejo de los reactivos qumicos.

Antes de enunciarlas es necesario revisar primero las condiciones del sitio de trabajo. Por lo general el sitio de trabajo coincide con el laboratorio aunque en algunos casos tambin puede ser una operacin en la planta de produccin (por ejemplo, un pelado qumico). En cualquier caso, el sitio de trabajo debe tener suficiente espacio, buena iluminacin y ventilacin, adecuada distribucin de las mesas de trabajo y salidas de emergencia. En el laboratorio conviene separar el sitio de almacenamiento de las reas de manipulacin y preparacin de soluciones y dems reactivos, adems de tener buena ventilacin y salidas de incendio. Las instalaciones del laboratorio deben estar dotadas de infraestructura como: Ducha de emergencia. Instalada en un sitio de fcil acceso y apertura; una palanca y una cadena que llegue al piso. Lavaojos. Especie de lavamanos que entregan un chorro de agua potable de cierta fuerza, capaz de realizar un lavado rpido de los ojos cuando les ha cado algn reactivo. Absorbentes. Sustancias que pueden recoger los derrames de lquidos peligrosos. Proteccin contra incendio. Sistemas manuales (arena, extinguidores) o rociadores automticos (sprinklers). Botiqun de primeros auxilios. Dotado con antdotos, adems de los dems elementos que debe contener. Los mismos reactivos deben garantizar cierta estabilidad que facilite su manejo y almacenamiento ms confiable; en este sentido, los fabricantes responsables venden sus productos con etiqueta de seguridad y advertencias sobre su manejo y almacenamiento.

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70

Un buen hbito es el de revisar las etiquetas adheridas a los frascos y los catlogos que editan los productores de reactivos qumicos al ser las primeras fuentes de informacin disponibles antes de manipular un reactivo qumico. Existen trece reglas o normas de seguridad para el manejo seguro de los reactivos que siempre se deben tener en cuenta: Primera regla. grupos: Los reactivos pueden pertenecer a uno o a varios de los siguientes

Sustancias explosivas. Sustancias comburentes. Sustancias fcilmente inflamables. Sustancias txicas. Sustancias nocivas. Sustancias corrosivas. Sustancias irritantes.

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71

Tabla 13. Pictogramas e indicaciones de peligro en etiquetas para reactivos32.

Pictograma

Indicacin de peligro

Explosivo

Clasificacin Precaucin choque, percusin, Segn resultados Evitar friccin, formacin de chispas y experimentales segn la prescripcin de declaracin y accin del calor. control de la ley de productos qumicos (R.F.A.)

Comburente

Segn los resultados de los Evitar cualquier contacto con ensayos considerando la sustancias combustibles. inflamabilidad y el peligro de Peligro de inflamacin! Los explosin. incendios pueden ser favorecidos y ser difcil su extincin. Tras resultados de ensayos de toxicidad aguda oral, drmica, e inhalacin as como por indicios considerables de daos graves para la salud, posiblemente irreversibles, por absorcin nica, repetida o de larga duracin. Evitar cualquier contacto con el cuerpo humano ya que no se pueden descartar graves daos para la salud, posiblemente de consecuencias mortales. Se hace referencia especial a la accin cancergena o al riesgo de alteraciones genticas o de accin teratgena de diversas sustancias.

32

MERCK. Reactivos, diagnstica, productos qumicos. 1990/91. Darmstadt, Alemania, E. Merck, p 19.

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T+ T Muy txico Txico 73

Pictograma

Indicacin de peligro

Xn

Nocivo

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F+ Extremadamente inflamable F Fcilmente inflamable

Precaucin Evitar el contacto con el cuerpo humano, tambin la inhalacin de vapores. Pueden daar la salud en caso de empleo no adecuado. En algunas sustancias no es posible descartar totalmente una accin cancergena, alteracin gentica o teratgena. Se hace referencia a ello. Igualmente al peligro de sensibilizacin. Lquidos con punto de inflamacin Mantener lejos de llamas abiertas, inferior a 0 C y punto de ebullicin chispas y fuentes de calor. mximo 35 C; gases, mezclas de gases (aunque estn presentes en forma licuada), que con el aire a presin normal tienen punto de encendido. Determinados perxidos orgnicos, Mantener lejos de llamas abiertas, lquidos con punto de inflamacin chispas y fuentes de calor. inferior a 21 C, pero no extremadamente inflamables; sustancias slidas que son fciles de inflamar, de continuar quemando por s solas o arder sin llama por la accin de una fuente de encendido; liberacin de sustancias fcilmente inflamables

Clasificacin Segn resultados de ensayos de toxicidad aguda oral, drmica e inhalacin, as como por indicios considerables de posibles daos para la salud, posiblemente irreversibles, por absorcin nica, repetida o de larga duracin.

74

por la accin de la humedad u otras propiedades.

Pictograma

Indicacin de peligro

Corrosivo

Clasificacin Segn intensidad de la destruccin de la piel intacta, sana durante tiempos de accin definidos.

Precaucin Evitar el contacto con los ojos, la piel y la ropa mediante medidas protectoras especiales. No inhalar los vapores.

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Xi Irritante 75

Claros daos de los ojos o Evitar el contacto con los ojos y irritacin de la piel, que se la piel, no inhalar los vapores. mantienen como mnimo 245 horas posteriores al tiempo de accin o una irritacin clara de las vas respiratorias. Se hace referencia especial a una posible sensibilizacin por contacto con la piel.

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76

Algunos fabricantes han desarrollado una serie de programas que ayudan a identificar rpidamente el grupo y las medidas de seguridad para su manejo, un ejemplo lo tenemos en la tabla 13. Segunda regla. Observe y siga las seales de prevencin, advertencia, prohibicin y auxilio en su puesto o lugar de trabajo. Tercera regla. Tenga mucho cuidado al tratar con sustancias peligrosas ya que su manejo inadecuado puede provocar los peligros y los daos a la salud indicados en la tabla 4. Cuarta regla. Tenga en cuenta las instrucciones especficas cuando se combinan dos caractersticas anteriores (Merck lo indica a travs de la frases R y las frases S). Quinta regla. Revise en la literatura todas las particularidades de las sustancias que va a emplear. Sexta regla. No olvide el peligro que representa el uso de recipientes inadecuados, daados o con rotulacin insuficiente. Sptima regla. Utilice el equipo de proteccin. Antes de usarlo, revselo y si est daado o es inadecuado cmbielo. Octava regla. Debe observar todas las instrucciones de seguridad que conozca. Novena regla. Hacerse chequeos mdicos preventivos, sobre todo cuando maneja sustancias de alta peligrosidad o riesgo. Dcima regla. En caso de indisposicin y de heridas leves, recurra al puesto de primeros auxilios y acuda al mdico an en casos en que haya recibido tratamiento de urgencia. Undcima regla. Los menores de edad slo podrn usar sustancias txicas o de riesgo de incendio o de explosin en circunstancias muy especiales y bajo la vigilancia de un experto. Duodcima regla. Bajo ciertas circunstancias habr que cumplir la prohibicin de manejo de sustancias venenosas, custicas, nocivas para la salud o irritantes como son los casos con menores de edad, mujeres en embarazo y madres en lactancia. Dcima tercera regla. Si en un preparado se suponen propiedades peligrosas y no se tienen datos toxicolgicos, la sustancia se debe manejar con las mismas precauciones recomendadas para los productos qumicos peligrosos. No olvide que existe un grupo de sustancias que tienen la capacidad de producir tumores malignos en el hombre y en los animales de experimentacin (sustancias cancergenas). Tales compuestos se encuentran en la tabla 14. Cuando sea necesario manipular esas sustancias lo ms recomendable es extremar las medidas de seguridad en su manejo y utilizar el equipo de proteccin. 77

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A manera de resumen y para facilitar la memorizacin de las normas de seguridad a tener en cuenta en el manejo de un reactivo qumico, se han definido siete reglas bsicas que son: i. ii. iii. iv. v. vi. vii. Conocer previamente el tipo de sustancias que se va a utilizar. Llevar siempre gafas protectoras y si es posible, guantes. Realizar todos los trabajos en campana de extraccin de gases que tenga buena succin, con careta respiratoria o en locales bien ventilados. Evitar el contacto de los reactivos con la piel, ojos y mucosas. Lavar inmediatamente, en forma abundante, con agua fra cualquier salpicadura. Lavar los ojos con abundante agua si les ha cado sustancias custicas, desplazando ampliamente los prpados, mover el ojo en todas las direcciones. Visitar inmediatamente al oftalmlogo para su tratamiento. Quitarse toda la indumentaria que est impregnada o lavada con sustancias custicas o corrosivas y lavar si alcanz la piel. En caso de accidente o de encontrarse mal, buscar atencin mdica. Tabla 14. Listado de sustancias cancergenas33.
Sustancia Solucin de cido arsnico. cido hexametilfosfrico triamina. Acrilamida. Acrilonitrilo. Antimonio (III) xido. Arsnico (III) xido. Auramina. Benceno Benzo (a) pireno Berilio. 1,3 butadieno. Cadmio cloruro. Sustancia Cobalto (II) hidroxicarbonato. Cobalto (II, III) xido. Criseno. 1,2 dibromometano. Sustancia Hidracinio monobromuro. Hidracinio sulfato.

Cloroetileno (cloruro de vinilo) 4 clorometilanilina. Cobalto xido. Cobalto polvo. Cobalto (II) acetilacetonato. Cobalto (III) acetilacetonato. Cobalto (II) fluoruro

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4 metil 1,3 fenilendiamina. 4 metoxi 1,3 fenilendiamina. 1,4 dicloro 2 buteno. Nquel en polvo. Dietilo sulfato. Nquel perxido. 3,3 dimetilbencina. Nquel tetracarbonilo. N,N dimetilcarbamolo Nquel (III) hidroxicarbonato. cloruro. N,N dimetilhidracina. 2 nitropropano. N,N dimetilhidracinio N nitrosodietilamina. dicloruro. Dimetil sulfato. 1,2 propileno xido. N,N dimetilsulfamoilo cloruro. (R) (+) 1,2 propileno xido. 2,4 dinitrotolueno. (S) (-) 1,2 propileno xido. 2,6 dinitrotolueno. Di sodio hidrogenoarsenato. 3,4 dinitrotolueno. Sodio metaarsenito. Epiclorhidrina. o toluidina. Etileno xido. Yodometano Hidracinio dicloruro. Hidracinio hidrxido.

1.1.4

Indumentaria de proteccin.

Para una mejor proteccin de la persona que manipula sustancias qumicas es recomendable que lleve puestos los siguientes elementos de proteccin:

33

Ibd., p. 16.

78

Vestimenta fcil de quitar. Debe ser una blusa amplia, que abotone y desabotone fcil. Es importante que siempre est cerrada para mayor proteccin del traje de calle; recuerde que si le cae una sustancia corrosiva en la ropa se la tiene que quitar y con toda seguridad la va a perder. Mscara contra gases y vapores. Este elemento de proteccin dispone de filtros que retienen los vapores peligrosos (txicos, sofocantes o adormilantes), para su seguridad se debe determinar el tipo de filtro dependiendo del uso y remplazarlo una vez se haya saturado. Gafas de seguridad. Es un elemento de uso obligatorio en toda manipulacin de reactivos qumicos. Guantes. Es importante conocer las propiedades del material en que estn fabricados seleccionando el ms adecuado para manejar una determinada sustancia qumica ya que no debe ser atacado por ella. La tabla 15 resume el comportamiento de los distintos materiales de fabricacin de los guantes ante sustancias qumicas comunes. 2. Almacenamiento de los reactivos. Se ha mencionado que entre las sustancias qumicas existen incompatibilidades que originan riesgos ya que provienen de sus propiedades qumicas, al estar juntas pueden reaccionar espontneamente en forma explosiva o liberando gases txicos. Esto quiere decir que al almacenarlos y utilizarlos se debe tener en cuenta su comportamiento qumico y las condiciones ambientales en que se deben manipular como: Aire. Algunos productos secundarios producidos por oxidacin con ste pueden ser peligrosos, por ejemplo, la formacin de perxidos en el ter por exposicin prolongada al aire. La humedad ambiental. Su exceso en el sitio de almacenamiento hace que algunos reactivos se descomponga violentamente, por ejemplo, los alcoholatos de metales alcalinos y los hidruros. El calor. Puede alterar la calidad o desencadenar reacciones explosivas; se deben almacenar en refrigeracin, por ejemplo, las enzimas y los teres. Si en el sitio de trabajo necesariamente se tiene que almacenar reactivos qumicos, lo primero que hay que pensar es en un sitio especial ojal un cuarto separado, bien ventilado e iluminado, con salida de emergencia en caso de incendio. Los anaqueles deben ser de un material resistente y separados por grupos de sustancias segn su origen: inorgnicos e inorgnicos, ordenados como lo vemos en la figura 5. Los teres voltiles, hidrocarburos y afines se almacenan en un refrigerador a prueba de explosiones.

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79

Tabla 15. Comportamiento de los materiales de los guantes para la manipulacin de reactivos qumicos34. Sustancia cidos orgnicos. Fenoles. cido crmico (50 %) cido clorhdrico. cido fluorhdrico. Perhidrol. cido ntrico. cido perclrico. cido fosfrico. cido sulfrico (50 %) Amoniaco y sales. Calcio hipoclorito. Mercurio cloruro. Sodio hipoclorito. Sales de cobre. Sales de hierro, magnesio, potasio. Calcio hidrxido. Potasio hidrxido. Sodio hidrxido. Parafinas. Bencina de petrleo. Benceno, tolueno, xileno. Nafta de petrleo. Cloruro de bencilo. Carbono tetracloruro, cloroformo, diclorometano, percloroetileno, tricloroetileno. Acetato de etilo, butilo, amilo, etc. Propionatos, butiratos. teres. Formaldehdo, acetaldehdo. Benzaldehdo. Acetona, dietilcetona. Alcoholes. Aminas. Caucho Neopreno natural E E B B B B NR R B B E NR B NR B E E E E R R NR NR R R E E R B B B NR B B B E B B R B E E B B B B R R R R B B B E R B E B Nitrilo E B R B B B NR R B B E B B R B E E B B E E B R B B PVC NOR E E E E E E B E E E E E E E E E E E E B R R R R R R R R E B R E E PVC alto grado E E B B B E R B B B E E E E E E E E E E B B B B B B B B E R B E E

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R R R B R B E B B B E E E B E E

34

VELANDIA. C. Fabio. Seguridad en el laboratorio. Informaciones qumicas Merck (Bogot). (44), 3 (1985). Las convenciones son: E = Excelente, B = Bueno, NR = No Recomendado, R = Regular.

80

Figura 5. Organizacin de estantes para el almacenamiento de reactivos. SUSTANCIAS INORGNICAS 1 5 10 14 16 19 24 29 33 20 25 30 17 21 26 31 22 27 6 11 2 7 12 15 18 23 28 32 59 54 55 58 60 61 3 8 4 9 13 40 46 49 50 53 56 57 SUSTANCIAS ORGNICAS

41

42 47

43

44

45 48

51

52

34

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25.

Sustancias inorgnicas 39 Azufre. Fsforo. Arsnico. Pentxido de fsforo. Haluros. Sulfatos. Tiosulfatos. Fosfatos. Halgenos. Amidas. Nitratos (excepto el de amonio). cidos. cido ntrico. Metales. Hidruros (mantenerlos lejos del agua). Cianuros. Cianatos. cido cianhdrico. Hidrxidos. xidos. Silicatos. Carbonatos. Carbn activado. Sulfatos. Seleniuros.

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35 36 37 38 62

Sustancias orgnicas 63 64 40. Alcoholes. 41. Glicoles. 42. Amidas. 43. Imidas. 44. Iminas. 45. Aminas. 46. Hidrocarburos. 47. steres. 48. Aldehdos. 49. teres. 50. Cetonas. 51. Hidrocarburos halogenados. 52. xido de etileno. 53. Compuestos etoxidados. 54. Sulfuros. 55. Polisulfurados. 56. Sulfxidos. 57. Nitrilos. 58. Fenoles. 59. Perxidos. 60. Hidroperxidos. 61. cidos orgnicos. 62. cidos orgnicos. 63. Anhdridos. 64. Percidos (mantenerlos lejos de los dems reactivos).

81

26. 27. 28. 29. 30. 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 39.

Fosfuros. Carburos. Nitruros (a nivel del ojo humano y lejos del agua). Boratos. Cromatos. Manganatos. Permanganatos. Cloratos. Percloratos. cido perclrico. Cloritos. Hipocloritos. Perxidos. cidos inorgnicos.

Los teres voltiles, los hidrocarburos y afines se deben almacenar bajo refrigeracin y a prueba de explosiones.

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82

GUA PARA LA PRESENTACIN DE INFORMES DE LABORATORIO35

Si toda actividad humana se puede organizar en una secuencia permitiendo la obtencin de un determinado producto, la ciencia es la actividad del hombre que produce conocimiento a travs de un proceso secuencial el mtodo cientfico y la forma de comunicar sus logros es a travs de la publicacin en medios especializados. El profesional que se dedique a la investigacin aplicada (tecnlogo o ingeniero), debe conocer la metodologa para estructurar y elaborar un artculo para su publicacin en una revista; el estudiante necesita formarse tambin y para ello utiliza la experimentacin que adelanta en sus sesiones prcticas de laboratorio. Si bien es cierto que all lo que se pretende es comprobar algunos principios tericos y aprender el manejo de equipo de laboratorio (balanza, centrfuga, pH metro, mufla, estufa) y material (vasos de precipitados, erlenmeyer, soporte universal, buretas, probetas, pipetas y otros), tambin es una oportunidad intelectual ya que favorece el intento de hallar una explicacin (lgica y coherente) del fenmeno observado, de encontrar nuevas relaciones entre hechos que aparentemente pueden no tener ningn vnculo y de construir su propio modelo terico. El informe de laboratorio debe ser elaborado como si se fuera a publicar; debe ser claro, sencillo, con suficiente profundidad (garanta de que no es una burda copia), reflejo de la seriedad profesional de su autor, completo y de fcil interpretacin para quien lo lea. En esta gua se pretende dar algunos criterios para la elaboracin de los informes que deben ser entregados como parte de la evaluacin de las sesiones prcticas para el curso de Qumica Analtica Instrumental y que servirn de base para la asignacin de la calificacin correspondiente, llegando a un acuerdo en este delicado punto (el ms cuestionado dentro del proceso educativo) y le sirva como referente para aceptar su nota final. El objetivo del curso no es formar investigadores ni analistas de laboratorio, su importancia es darle la oportunidad de conocer y practicar la metodologa de elaboracin de un informe cientfico. La manera ms sencilla de hacerlo es seguir el procedimiento universal para elaborar un informe proveniente de un trabajo experimental. 1. Estructura del Informe

La preparacin del informe de laboratorio tiene dos partes, el preinforme y el informe propiamente dicho. El pre informe es un documento que permite la preparacin del laboratorio por parte del practicante. Bien elaborado, ayuda a quien realizar la prctica a comprenderla, organizarse y disponerse mentalmente a las distintas actividades que deber realizar para su desempeo.
35

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA. Apuntes para la elaboracin de tesis. Bogot, mimeo, s.f., 73 p. RAMETTE, Richard. Equilibrio y anlisis qumico. Fondo Educativo Interamericano. Mxico, 1983., p. 9. UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA. Indicaciones generales sobre el funcionamiento del laboratorio de Fisicoqumica. Facultad de Ciencias, Seccin de Fisicoqumica. Bogot, mimeo, 1975. 5 p. MAHECHA, Gabriela. Presentacin de informes de laboratorio. Universidad Nacional de Colombia, Facultad de Ciencias. Bogot, mimeo. 1981, 4 p.

83

Se elabora en un cuaderno de cien hojas, dejando como mnimo diez hojas por cada prctica. Comienza revisando y adecuando la gua de laboratorio que aparece en el material del curso acadmico a las indicaciones de esta gua. La gua de laboratorio le orienta en el desarrollo de su trabajo experimental, le ayuda a organizar su cuaderno de notas para la toma de apuntes, registro de datos y de aquellos detalles que aparentemente pueden ser insignificantes pero que suelen ser la clave para resolver inquietudes durante el trabajo con los datos alcanzando los resultados esperados. Debe presentarlo a su tutor antes de iniciar la prctica. El pre informe debe contener las siguientes partes: 1.1 Ttulo de la prctica

Se copia el que aparece en la gua. Si no lo tiene, se elabora teniendo en cuenta que sea exacto, breve y claro (mximo 15 palabras); no debe ser tan extenso que resulte un compendio del artculo ni tan breve que no diga nada; lo importante es que debe dar por s mismo suficiente informacin sobre el contenido del informe. Es recomendable que en el ttulo no aparezcan frmulas, particularmente las qumicas. 1.2 Objetivos de la prctica

Comprende la informacin o los resultados que se esperan obtener de la sesin de laboratorio. Generalmente las guas suelen traerlos ya formulados, sin embargo, pueden ser reformulados cuando no corresponden a la prctica que se va a realizar o cuando el procedimiento expuesto en la gua se va a adaptar al anlisis de una materia prima distinta a la que trae descrita. Cuando tenga que elaborar un objetivo se recomienda iniciar con un verbo en infinitivo, luego describir lo que se desea obtener y las condiciones para hacerlo. Por ejemplo: determinar la concentracin de calcio, como xido de calcio, en partes por milln, presente en una muestra de harina de maz utilizando una valoracin por permanganometra. Esta descripcin permite establecer lo que se busca en el anlisis de un producto, con el fin de interpretar resultados, discutir la bondad del mtodo o decidir sobre la calidad del ensayo y de la muestra. Para que practique y hagan el ejercicio correspondiente, en ninguna de las guas de laboratorio de este curso aparecern formulados los objetivos. Sin embargo, en el preinforme si debe escribir los objetivos correspondientes, siguiendo estas directrices. 1.3 Teora

Es la base de sustentacin del trabajo experimental, le permite verificar la obtencin de un resultado, por eso es importante aclarar cules son las teoras y las hiptesis adicionales con las cuales va a trabajar. Es deseable adquirir el hbito de seleccionar las fuentes de informacin disponibles (libros y revistas, direcciones URL en la web), en fin, todo aquello que le va a servir dependiendo del objetivo que haya formulado previamente y del mtodo seleccionado para lograr los resultados deseados. Esto implica que en un trabajo mucho ms estricto haga lo que se denomina una revisin bibliogrfica o de literatura la cual consiste en la bsqueda y revisin de fuentes de informacin que permitan dar respuesta a interrogantes como: Cul es el problema planteado? Por qu es importante solucionar el problema planteado? Cules son los objetivos que se formularon para resolver el problema planteado? Cules son los mtodos aplicados y en qu forma se contribuy a la solucin del problema?

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Esta revisin no debe ser excesivamente larga, los comentarios (abstracts) de cada fuente bibliogrfica deben ajustarse a la realidad para asegurar su interpretacin precisa y dar crdito a los respectivos autores. La teora que encuentra en el informe le permite disponer de los criterios para la discusin de los resultados, su comparacin con los obtenidos por otros investigadores y le da una base ms slida al trabajo ya que se puede establecer el aporte realizado segn el estado actual de las investigaciones, las tendencias, los problemas no resueltos y los mtodos de trabajo utilizados. Como el laboratorio de Qumica Analtica Instrumental tiene como intencin la comprobacin de los principios tericos contenidos en el mdulo (susceptibles de ser ampliados mediante la consulta de la bibliografa disponible, de personas que trabajan en el rea y otras fuentes) y el conocimiento y entrenamiento en algunas tcnicas analticas para el Control de Calidad, no es necesario adelantar una revisin bibliogrfica muy extensa e intensa, sino ms bien utilizarla para desarrollar la capacidad de sntesis, teniendo en mente los fundamentos tericos y metodolgicos que sustentan la prctica. Por lo tanto, para la calificacin se tendr en cuenta la aparicin de los siguientes apartes: 1.3.1 Sumario de principios tericos

Es un resumen muy concreto sobre los aspectos tericos que respaldan un procedimiento, por ejemplo en la prctica de valoracin de la acidez uno de los principios es: el equilibrio inico del agua determina el concepto de pH. 1.3.2 Reacciones

En este aparte se escriben las ecuaciones qumicas que ocurren durante la aplicacin del mtodo de anlisis y permite identificar la forma en que se encuentra la especie qumica de inters, cmo es modificada por el mtodo y la forma como es cuantificada y reportada despus. Por ejemplo, en el caso de la determinacin gravimtrica del hierro, las reacciones implicadas son: Precipitacin:

Control de cloruros:

Calcinacin:

Como se puede deducir, es conveniente identificar qu cambio qumico ocurre en cada paso en donde se agregan reactivos, adems de tener presente que las ecuaciones deben estar correctamente balanceadas pues la mayora de las veces, los clculos y resultados se basan en ellas. 1.3.3 Condiciones

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FeCl3 + 3 NH4OH Fe(OH)3 + 3 NH4Cl NH4Cl + AgNO3 AgCl + NH4NO3
700 C

2 Fe(OH)3 Fe2O3 + 3 H2O

Es el resumen, compendio o listado de los principales factores que condicionan a una reaccin qumica para que ocurra, como son: medio (acuoso u orgnico), pH (cido, bsico o neutro), temperatura, agitacin, reposo, influencia de la luz, presin atmosfrica, accin del papel de filtro, etc. Estas se encuentran descritas en el procedimiento que trae la gua; su lectura cuidadosa permite elaborar ese listado, el cual le permite determinar posibles errores que impidan obtener el resultado esperado. Por ejemplo, en la determinacin gravimtrica del hierro, una de las recomendaciones es: asegurar que todo el hierro de la muestra debe estar como Hierro (III).

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1.3.4

Frmulas de clculo

Son expresiones matemticas que permiten realizar los clculos necesarios con los datos a fin de obtener los resultados. Se deducen a partir de las ecuaciones qumicas generales del mtodo y la unidad en que se exprese el resultado (porcentaje, p.p.m., M, N, m, mg); esto implica que se debe realizar un anlisis dimensional para que el resultado obtenido con la frmula se exprese en las unidades indicadas. Por ejemplo, para determinar la normalidad de una solucin de hidrxido de sodio contra biftalato de potasio (patrn primario), la frmula que se utiliza es: N = g/mL(e) Donde: N = Normalidad del hidrxido de sodio. g = Masa de biftalato de potasio (en mg). mL = Volumen del hidrxido de sodio utilizado para virar el indicador. e = peso miliequivalente del biftalato de potasio. Si realizamos el anlisis dimensional las unidades nos quedan: Meq = mL

N= mL 1.4 Procedimiento

mg mg meq

En esta parte se da una descripcin del procedimiento empleado y, cuando es necesario, la ilustracin de los materiales y elementos utilizados, esto favorece el que un lector razonablemente inteligente y familiarizado con el campo de trabajo se forme una idea del equipo en sus elementos esenciales (es muy til cuando es nuevo; si es ampliamente conocido basta con dar las especificaciones o la marca). Para la sesin de laboratorio esta parte le facilita mucho su trabajo al determinar la secuencia de cada paso, economizar el tiempo ya que permite saber cuntas y cules operaciones puede hacer a la vez (secar la muestra, titular la acidez de otra o medir el color de una secuencia de tubos con patrones), seleccionar el reactivo requerido o emplear el equipo ms adecuado que le permita controlar la reaccin qumica y evitar errores pues stos obligan a repetir todo el ensayo con la subsiguiente prdida de tiempo y reactivos (podra calcular cunto le costara en pesos un error de este tipo?) En su pre informe deben aparecer los siguientes apartes: 1.4.1 Materiales y equipos

Es un listado de los materiales de vidrio, metal o porcelana, de reactivos y los equipos que va a utilizar en la prctica. Se elabora leyendo cuidadosamente la gua. 1.4.2 Operaciones de laboratorio

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Son los procedimientos ms o menos estandarizados que permiten obtener un producto o un dato. Su mencin en el informe implica un procedimiento o una metodologa. Por ejemplo, si se indica pesar una muestra, representa disponer de una muestra del alimento, pesar un vidrio de reloj o una pesa sustancia seca y limpia, agregar la porcin de muestra y volver a pesar para registrar cunta masa se ha tomado para realizar el ensayo. En el laboratorio se suelen realizar las operaciones que se indican en la tabla 16.

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1.4.3

Diagrama de flujo

Es la representacin secuencial de los principales pasos que se siguen dentro de un procedimiento. En el cuadro que representa el paso, debe describirse en forma concreta (un poco parecido al estilo telegrama) cmo se realiza, cules son las condiciones que se deben tener en cuenta. Es recomendable indicar el paso sin explicarlo, es decir, si en la gua se describe: pesar 0,5000 g de muestra sobre un vidrio de reloj usando la balanza analtica, el cuadro del diagrama debe describir: Pesar 0,5000 g de muestra

Tabla 16. Tipos de operaciones de laboratorio. Reduccin del tamao de slidos Molienda. Trituracin. Pulverizacin. Tamizado. Tratamiento trmico de slidos Ignicin. Fusin. Calcinacin. Deflagracin. Reduccin. Sublimacin. Vaporizacin

Disolucin, extraccin y desecacin Solucin. Maceracin. Cocimiento. Infusin. Digestin. Emulsin. Desecacin. Determinacin de masa

Pesado. Peso especfico.

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Evaporacin. Destilacin.

Precipitacin y separacin Precipitacin. Clarificacin. Centrifugacin. Decantacin. Filtracin. Lixiviacin. Cristalizacin. Granulacin. Dilisis. Operaciones cuantitativas Titulacin. Gravimetra.

Por la forma como est escrita la cantidad de muestra que se debe pesar (con la proximidad a 0,0001 g o de cuatro cifras decimales) ya se sabe que se debe utilizar la balanza analtica utilizando un vidrio de reloj. Una vez elaborado el diagrama, ms fcil de consultar que la gua de laboratorio, se tiene una visin general de lo que se va a hacer y se pueden programar operaciones simultneas que ahorrarn tiempo, que se puede

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utilizar para pesar, hacer las anotaciones correspondientes en su cuaderno de laboratorio y utilizar formas de controlar errores durante el trabajo experimental. Con la preparacin de estos apartes se termina el pre informe; el estudiante est ya enterado de lo que debe realizar en la sesin experimental, ser muy productiva pues dispone de un conjunto de criterios que le facilitarn su trabajo, el registro de los datos (nmeros, magnitudes que se identifican con las abreviaturas del Sistema Internacional de Medidas, cantidades de cifras significativas), las anotaciones de las observaciones ms importantes y hechos significativos durante el desarrollo de la prctica que luego tendr en cuenta en la interpretacin y anlisis de los resultados. 1.5 Datos experimentales

Esta seccin se elabora durante el trabajo experimental utilizando el cuaderno de notas de laboratorio, escribiendo cuidadosamente los datos de las medidas efectuadas y las observaciones que considere necesarias. La presentacin debe hacerse en orden lgico, de acuerdo al procedimiento, agrupando convenientemente los diversos resultados y con una breve identificacin que facilite su comprensin. La forma ms recomendable es utilizando tablas numeradas, en arbigos, siguiendo el orden consecutivo de aparicin y respondiendo a preguntas como: qu?, dnde?, y cundo? Por ejemplo, en la determinacin de la acidez de un producto alimenticio, la tabla de datos puede ser: Tabla 17. Determinacin de la acidez en pulpa de manzana. Determinacin Masa de la muestra Masa del vidrio de reloj Volumen de dilucin Alcuota tomada Normalidad del NaOH Volumen de NaOH gastado 1 15,2897 g 15,0000 g 250 mL 25,0 mL 0,095 N 15,9 mL Experimento nmero 2 15,3010 g 15,0010 g 250 mL 25,0 mL 0,095 N 16,1 mL Repeticin 15,2985 g

Esta presentacin economiza explicaciones en el texto, su ttulo resume los hechos ms importantes y evita aclarar cada uno de los datos experimentales. Las anotaciones adicionales deben ser escritas identificndolas previamente y pueden constituir en observaciones adicionales que no estn dadas en la teora, modificaciones al procedimiento o a la aclaracin de un resultado reportado en la literatura y que al ser comprobado result diferente. Las siguientes recomendaciones se deben tener en cuenta para lograr una adecuada presentacin de los datos: Deben ser presentados en forma objetiva, exacta, lgica y clara. Los datos y observaciones expuestos deber ser nica y exclusivamente los logrados por la persona o el grupo de trabajo no importa que parezcan contradictorios. Desarrollar la capacidad de observacin, lo cual implica estar muy atento a todos los fenmenos que se suceden y de ellos, deducir lo importante. Detalles insignificantes pueden ser la clave para resolver dudas o lograr resultados satisfactorios. Es importante ser honrado cientficamente hablando, esto quiere decir que se debe estar libre de prejuicios durante la toma de los datos; es indispensable la sinceridad en el registro, estar seguros de los que se obtienen as se demuestran errados al final, ya que es permitida y necesaria la explicacin sustentada de las razones y causas que estn motivando dichas diferencias y que no necesariamente son errores fortuitos. Como es muy posible cometer errores durante el registro de los datos lo aconsejable es no tachar totalmente el dato para que desaparezca bajo una capa de tinta sino cruzarlo con una lnea delgada y al frente escribir el verdadero, esto favorece la no desaparicin de algo que despus puede ser considerado como cierto.

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1.6

Clculos

En un artculo cientfico no aparece esta parte; en los informes de laboratorio se exigen para conocer el procedimiento del razonamiento seguido por el estudiante con el fin de verificar su dominio de los conceptos tericos y si conoce con suficiencia lo realizado durante la sesin experimental. En esta seccin se solicita ejemplificar el procedimiento utilizando los datos propios. Es conveniente efectuar el anlisis dimensional con cada una de las frmulas utilizadas en el tratamiento de los datos para que el resultado obtenido est expresado con las magnitudes requeridas (porcentaje, masa, volumen, concentracin expresada en normalidad, molaridad, molalidad, partes por milln, etc.) 1.7 Resultados

Son el recuento completo y detallado de los hechos obtenidos (valores y observaciones) en el proceso de investigacin, los cuales van a conformar la base para su posterior interpretacin, anlisis y derivacin de conclusiones y recomendaciones. Su presentacin debe ser sencilla y fcil de comprender por el lector, usando tablas, figuras o postulados. Los resultados numricos deben reportarse dentro de los lmites de exactitud permitidos por la tcnica utilizada y con el nmero de cifras significativas apropiado. Es importante ser objetivos y seguir las recomendaciones expuestas en la seccin 1.5. Si para la expresin de los resultados se necesitan grficas como ayudas visuales para facilitar la comprensin y armonizar las explicaciones del texto, se deben denominar como figuras, numerarlas en forma secuencial y escribirles un ttulo pequeo como se estableci para las tablas. 1.8 Anlisis de resultados

Esta seccin es la ms importante del reporte del trabajo experimental ya que el autor realiza un examen crtico de sus resultados, verificando el cumplimiento de los objetivos planteados, su correlacin con los principios tericos utilizados e interpreta su significado y alcance. Lo importante es comprender que sin una interpretacin apropiada y completa de los resultados obtenidos en un anlisis qumico no valdra la pena recogerlos y sera una prdida de tiempo y dinero valiosos. Al plantear un proyecto de anlisis qumico, se debe responder la pregunta se puede suponer que estos anlisis darn los resultados que contribuirn a resolver el problema planteado? Dependiendo de la forma en que se evalen los datos, se podr dar respuesta a ese interrogante. A continuacin se ofrece una estructura adecuada para lograr una buena interpretacin y evaluacin del trabajo analtico. Est en discusin por otros autores pero si se sigue paso a paso, ofrece la seguridad razonable del lenguaje cientfico y permite conocer los aciertos y errores a fin de que puedan ser corregidos, mejorando la capacidad crtica y enfrentando con xito el reto de mantener la calidad en la industria de alimentos. El anlisis de resultados busca:

Establecer relaciones entre causas y efectos (contrasta teora con los hechos observados) Deducir principios bsicos y efectuar generalizaciones sobre lo que se ha comprobado. Aclarar las concepciones, modificaciones o contradicciones entre las hiptesis, la teora y los principios bsicos con los hechos observados. Sealar las aplicaciones prcticas y tericas de los resultados obtenidos, dentro de las limitaciones impuestas o encontradas. Servir de base para deducir las conclusiones. Los datos buenos y malos se deben estudiar con la misma profundidad, juntos aportan para la mejor comprensin del problema que se intenta resolver; lo importante es tener en cuenta que cualquier discrepancia o desviacin significativa que se presente entre los resultados y afecte las conclusiones con respecto al

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objetivo propuesto en el trabajo exige una breve discusin y una explicacin razonable que aseguren la verdad sobre lo que se busca. En la interpretacin de los resultados analticos se busca resolver dudas sobre dos aspectos: El primero tiene que ver con la confiabilidad de las medidas o sea, la determinacin de errores en cada una de las etapas del anlisis: cmo se realiz el muestreo?, la muestra es realmente representativa?, la muestra es homognea?, se utiliz la forma ms adecuada de tomar la muestra?, se sigui el procedimiento recomendado?, cules fueron los cambios que se hicieron?, qu finalidad tena cada cambio y cmo podra afectar la obtencin del resultado?, cul es su respaldo terico?, qu instrumentos utiliz para efectuar las mediciones?, cul es su precisin?, con cuntas cifras el instrumento permite precisar las mediciones?, cmo se puede medir la precisin y la exactitud del mtodo?, cules son los datos que pudo encontrar en otras publicaciones sobre el problema analizado?, cules son los errores sistemticos?, cules son aleatorios?, cules datos se rechazaron y por qu?, qu criterios utiliz para desechar esos datos?, qu cuidados se tuvieron en cuenta durante la realizacin del trabajo experimental? En esta parte trata de saber qu tan bien ha realizado su experiencia y que tan buenos son los resultados obtenidos. En segundo lugar se determina cmo los datos obtenidos ayudan a resolver el problema, es decir, los resultados permiten lograr los objetivos?, qu aspectos dados en la teora se comprobaron en la parte experimental?, las anotaciones realizadas concuerdan con lo predicho en la teora, son contrarias o la complementa?, cmo se explicaran esas discrepancias?, se pueden aplicar a otros casos?, qu limitaciones tendran esas aplicaciones?, cmo se relacionan los resultados obtenidos con los criterios de calidad establecidos para ese producto?, qu se puede decir de la calidad de la muestra?, por qu razones son diferentes?, qu sugerira para mejorar los factores de calidad deficientes? La discusin se podra estructurar as: 1. Explicacin de resultados.

Interpretar los resultados significativos. Discutir las discrepancias ms importantes. Determinar los niveles de exactitud y precisin de los resultados obtenidos (se puede emplear la estadstica). 2. Correlacin, comparacin e interpretacin.

Coherencia de los resultados entre s. Puntos discrepantes que merezcan destacarse ya que aclaran o contradicen la teora. Posibilidades de aplicacin y sus limitaciones. Comparacin con datos reportados en otras publicaciones cientficas y con la teora existente. 1.9 Conclusiones

Este aparte rene el aporte del trabajo de investigacin al conocimiento realiza su trabajo de investigacin y da criterios para tomar una decisin frente a un problema por resolver. Aqu se enumeran y puntualizan las conclusiones que se fueron insinuando en la interpretacin y anlisis de resultados puesto que con dicho ejercicio se obtiene una idea sobre lo bueno o malo bueno o malo que result el trabajo realizado. Lo importante es que deben basarse solamente en hechos comprobados en el trabajo realizado en orden lgico; no debe ser copia de deducciones reportadas en los libros ya que ellas son parte de la teora. 1.10 Bibliografa

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Esta parte es importante porque:

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Las citas le indican al lector donde encontrar ms informacin sobre el tema. Evita la sospecha del plagio. Revela cortesa profesional para con los otros autores que trabajaron en el tema. Es garanta de seriedad y da respetabilidad al trabajo pues seala qu tanto se ha consultado y estudiado sobre el tema. Si no aparecen se formulan inquietudes como: El autor pretende dar la impresin de todo lo que dice es original y nuevo?, ser que el autor desconoce la literatura o las normas sobre bibliografa? 2. Algunas normas para la redaccin del informe Un pensamiento debidamente elaborado, abre la puerta a una expresin tambin debidamente elaborada. Al ser el medio escrito una forma de comunicacin dentro del ambiente cientfico, es necesario que el estudiante desarrolle sus capacidades en la redaccin del mismo. El informe de laboratorio no es una carga adicional al trabajo experimental, es una comprobacin del dominio en el tema, del conocimiento sobre el desarrollo del trabajo y de la capacidad selectiva y organizativa que ha venido adquiriendo en su trabajo de aprender. Tampoco se debe olvidar que se est escribiendo una obra literaria por lo cual es necesario cuidar la claridad, precisin y concisin, respetando las normas de escritura del idioma espaol. Se debe buscar que el escrito tenga mrito cientfico y literario simultneamente teniendo en cuenta que lo que se pretende escribir debe ser un reporte objetivo hecho con criterio cientfico sobre una serie de mediciones y observaciones. Para facilitar esa redaccin se sugiere tener en cuenta las siguientes recomendaciones: a) Sin olvidar los objetivos previstos, escribir las principales ideas en la forma en que vayan apareciendo y dejar espacios en blanco para concretar aspectos, reforzar ideas o ampliar informacin. b) Escribir siempre en tercera persona, eliminando los pronombres personales cuando se quieran los propios aportes. c) Verificar permanentemente los tiempos de los verbos; como se trata del reporte de un trabajo ya realizado, stos deben estar en tiempo pasado. d) En las descripciones se debe escudriar y detallar la estructura misma de los hechos y objetivos para dejarlos en forma clara y precisa, eliminando lo vano y metafrico, haciendo uso adecuado de las palabras y evitando el exceso de las mismas dentro de un mismo prrafo empleando los sinnimos adecuados. e) La claridad que se tenga sobre el material que escribe permite la correcta comprensin e interpretacin del mensaje por parte del lector. Un escrito ininteligible indica un pensamiento confuso e imperfecto y con profundos vacos conceptuales por parte de quien lo escribe. f) Al escribir tenga en cuenta al lector, no crea que l lo sabe todo o es un nefito en el tema; dle los elementos necesarios para que lo pueda comprender e interpretar, para que le entiendan el escrito. Seleccione adecuadamente el material y sea equilibrado en el empleo del lenguaje tcnico; el mensaje debe ser completo y coherente en cada una de las partes y entre ellas. g) Organizar el material en forma sistemtica, secuencial manteniendo coherencia interna (relaciones entre frases, entre prrafos y entre los de anlisis y los que contienen las conclusiones). Permita al lector que le siga mentalmente en la forma como se obtuvieron los resultados (cules fueron los supuestos tericos usados, qu mtodos emple para su comprobacin, qu resultados obtuvo, cmo los evalu, cmo resolvi el problema, cmo se pueden aplicar a otros problemas semejantes). 3. Normas de seguridad

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La observacin de las siguientes reglas de trabajo en el laboratorio puede obtener resultados en forma segura y a un costo relativamente econmico (sin romper material, daar equipos o ir al hospital).

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1) La presencia del estudiante es obligatoria durante todo el tiempo asignado a la sesin de laboratorio. 2) Para el trabajo experimental el estudiante debe tener una blusa de laboratorio que le proteja los vestidos, gafas plsticas para proteccin de los ojos, un pao para la limpieza, detergente, churrusco, un pincel, jabn de tocador, toallas para cocina. Un encendedor o una caja de cerillas. 3) Se debe disponer de un cuaderno para toma de notas de laboratorio donde debe estar consignado el pre informe de laboratorio como se indic anteriormente, bolgrafo, regla y cinta de enmascarar. 4) Durante la sesin prctica no debe estar realizando otras actividades que le distraigan del trabajo y pueden ser peligrosas como fumar, comer, escuchar radio, jugar o recibir visitas (si es urgente atender a alguien, hgalo fuera del laboratorio). 5) No deben estar en el laboratorio personas ajenas a la experiencia, ni nios. 6) Mantener el sitio de trabajo ordenado, limpio y completamente seco. 7) Los reactivos slidos, los papeles y los restos de cerillas ya utilizados deben depositarse en la caneca de la basura; nunca en el desage ni en el piso. 8) Los reactivos lquidos deben ser regados en el desage y diluidos con abundante agua, especialmente si son cidos o solventes orgnicos que pueden disolver las conducciones plsticas de PVC, aunque es mejor desecharlos en botellones dispuestos especialmente para este fin y marcados apropiadamente. 9) Antes de usar un reactivo, asegurarse de que es el requerido, evitndose equivocaciones peligrosas o mortales. 10) Utilizar la cantidad de reactivo necesaria. Si es slido emplear una esptula limpia y seca. Si es lquido, depositar una pequea cantidad dentro de un vaso de precipitados y tomar el volumen necesario utilizando una probeta o una pipeta limpia y enjuagada con el reactivo, o medir directamente con una probeta. 11) Si necesita diluir un cido concentrado en agua, verter el cido al agua con bastante agitacin, evitar salpicaduras y sobrecalentamientos peligrosos. 12) Manejar los lquidos inflamables (alcohol, acetona, ter) lejos de las llamas y en sitios bien ventilados. 13) Revisar permanentemente el lquido de los baos de mara, sobre todo cuando se estn calentando, para evitar su desecacin que puede ser peligrosa. 14) Los tubos de ensayo se calientan en la parte superior del lquido, inclinados, agitndolos suavemente y cuidando de no apuntar a ningn compaero; evitar accidentes por quemaduras ocasionados por el sobrecalentamiento del lquido que ocasiona proyecciones peligrosas. 15) Si una reaccin desprende muchos gases, es necesario realizarla en la vitrina. 16) Al utilizar un recipiente vaco, verificar que realmente lo est y tambin completamente limpio. 17) No probar los reactivos. Todos son potencialmente txicos por lo que solo se permite hacerlo en casos especiales, siguiendo las directrices de la prctica correspondiente. Para oler una sustancia (nicamente bajo la supervisin de alguien responsable), se debe dirigir una parte de los vapores hacia la nariz. 18) Si le cae cido, base o cualquier otra sustancia en las manos, lavar con abundante agua y jabn. Si le cae en los ojos (por no usar las gafas plsticas) lavar con abundante agua y avisar al profesor. 19) Evitar el pnico cuando ocurra cualquier anomala. Mantener la puerta y las ventanas del laboratorio siempre abiertas. 20) Si desconoce el manejo del equipo de laboratorio, pida instrucciones y djelos completamente limpios y apagados. 21) Una vez terminada la prctica, cercirese de que las llaves de agua y gas estn bien cerradas y los aparatos elctricos desconectados.

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4. 4.1

Recomendaciones para el uso de los equipos en anlisis qumico. Cuidados con la balanza.

Para su empleo, tenga en cuenta las siguientes recomendaciones: i. ii. Realizar las pesadas utilizando un vidrio de reloj, nunca papel. No derramar los reactivos sobre el plato de la balanza, si ocurre limpie inmediatamente utilizando el pincel.

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iii. iv. v. 4.2 i. ii. iii. iv. 4.3 i. ii.

No agregar ms sustancia cuando la balanza est en la posicin de mxima sensibilidad. Al terminar de pesar, la balanza debe quedar apagada y en ceros. Al utilizar la balanza analtica, antes de efectuar la determinacin de masa, verifique que las puertas laterales estn cerradas as evitar las corrientes de aire que producen variaciones en dichas lecturas. Cuidados con la centrfuga. Verificar que est conectada a la lnea de 110 voltios. Cargarla colocando tubos semejantes uno frente al otro con el mismo nivel de lquido para garantizar su equilibrio. Verificar que los tubos sean de la longitud correcta para permitir la libre oscilacin de los porta tubos (de lo contrario, dichos tubos se pueden romper) evitando el derrame de lquidos que pueden daar el equipo. Esperar a que la centrfuga se detenga por s misma, facilitando su apertura. Si no tiene freno (brake) no se debe parar manualmente. Cuidados con la bureta. Lavarla muy bien con agua, jabn y nuevamente agua, de tal manera que al fluir el lquido por dentro quede una capa que no forme gotas. Verificar que la llave gira sin problemas ni escapes. De lo contrario, desmontarla y lubricarla con grasa controlando el libre giro y la ausencia de fugas (si son de tefln, no requieren lubricante). Si no es posible desmontarla, o si despus de lubricarla queda con escapes, informarle al encargado del laboratorio quien eventualmente la puede cambiar por otra. Al montarla en el soporte universal, verificar que la pinza la sujeta firmemente y sin romperla. Antes de comenzar a utilizarla, purgarla con un poco del reactivo con el que vaya a efectuar la determinacin analtica.

iii. iv.

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INTRODUCCIN AL ANLISIS CUALITATIVO

Al principio, el anlisis cualitativo se estudiaba principalmente como un arte, que consista en la aplicacin con destreza y habilidad de algunos mtodos que se haban deducido empricamente. A medida que ha avanzado la Qumica como ciencia, se ha demostrado que todos estos mtodos prcticamente se apoyan en principios cientficos. Por esta razn, el anlisis cualitativo moderno no solamente considera los distintos procedimientos de laboratorio que emplea el qumico para la identificacin de sustancias, sino que tambin comprende el estudio de las leyes y teoras que proporcionan la interpretacin racional de estos mtodos36. Introduccin con vigencia para el trabajo experimental; en esta prctica inicial tendr la oportunidad de efectuar esa consideracin al analizar la presencia de ciertos grupos atmicos (cationes y aniones) que se encuentran en una determinada solucin. Se identifican primero los cationes del Grupo I de la marcha analtica clsica, tcnica que mediante la aplicacin de reacciones de precipitacin, de complejos y de Redox permiten identificar cada uno de los elementos. Est entrando en desuso debido a la fuerte
36

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CURTMAN, Luis J. Op. Cit., p. 1.

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incursin de tcnicas analticas instrumentales que permiten realizar en un solo ensayo la determinacin cualitativa y la cuantitativa de dichos elementos permitiendo economa de tiempo y dinero, factores en los cuales estos mtodos tradicionales no les presentan competencia. Posteriormente se revisarn las reacciones de identificacin de algunos aniones importantes de cada uno de los tres grupos en que se estudian, como los halgenos, sulfatos, nitratos y cloratos; algunos caractersticos como bromatos y yodatos y en particular los permanganatos. 1. Anlisis cualitativo de cationes. La experiencia demuestra que ciertos iones metlicos se comportan de manera semejante, conformando una especie de grupo, cuando se tratan con ciertos reactivos (precipitantes, colectores o de grupo) que pueden ayudar en su identificacin, aislndolos de otros iones para posteriormente poder confirmar su identidad con otros reactivos (confirmatorios). Algunos reactivos precipitantes son el cido clorhdrico, el sulfuro de hidrgeno, el sulfuro de amonio y el carbonato de amonio. La marcha analtica sistemtica clsica ha determinado cinco grupos conforme se comporten los cationes metlicos ms comunes, sin embargo el principio qumico que rige todo el anlisis se basa en las diferencias de las solubilidades de sus cloruros, sulfuros y carbonatos37. En la tabla 18 se encuentran las principales caractersticas de los grupos de cationes. Tabla 18. Marcha analtica cualitativa clsica de cationes38.
Propiedades Descripcin Grupo I Grupo II Grupo III Grupo IV Cloruros poco Sulfuros poco Hidrxidos poco Sulfuros poco solubles, sulfuros solubles. solubles. solubles. insolubles en medio cido. cido clorhdrico cido sulfhdrico Cloruro en medio cido y amonio poco ionizado. hidrxido amonio solucin. de e de en

Reactivo colector

Grupo elementos

de Plata (i) Mercurio (I) Plomo (II)

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Mercurio (II) Plomo (II) Bismuto (III) Cobre (II) Cadmio (II) Arsnico (III) Antimonio (III) Estao (IV) Aluminio (III) Hierro (III) Cromo (III) Sulfuro amonio solucin reguladora amoniacal. (cido sulfhdrico ionizado en medio bsico) Cobalto (II) Nquel (II) Manganeso (II) Cinc (II) Calcio (II) Estroncio (II) Bario (II) Magnesio (II)

Grupo V Carbonatos poco solubles en agua y fosfatos insolubles en agua. de Carbonato de en amonio o fosfato de amonio acuosos.

Grupo VI Cloruros, Carbonatos y sulfuros solubles en agua. No tiene reactivo precipitante.

Potasio (I) Sodio (I) Amonio (I) Magnesio (II)

Segn lo anterior: El grupo I comprende los cationes cuyos cloruros son insolubles en agua39 y en cidos diluidos.
37 38

VOGEL, Arthur. Qumica analtica cualitativa. 6 edicin. Buenos Aires, Kapelusz. 1979., p 235. Adaptada de: BERNAL, Ins de y otros. Qumica analtica. Op. Cit., p 735. 39 El cloruro de plomo es ligeramente soluble en agua.

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El grupo II incluye los cationes cuyos cloruros, solubles en agua, precipitan con cido sulfhdrico en una solucin de cido clorhdrico 0,3 M. El grupo III comprende los cationes cuyos sulfuros no se precipitan con el cido sulfhdrico en solucin de cido clorhdrico 0,3 M, pero cuyos hidrxidos o sulfuros si lo hacen en medio bsico con soluciones de amoniaco y que contienen cloruro de amonio40. El grupo IV contiene los cationes cuyos sulfuros o hidrxidos no precipitan con los reactivos de los grupos II III pero cuyos sulfuros precipitan en medio alcalino. En el grupo V se hallan los cationes cuyos sulfuros o dixidos no precipitan con los reactivos de los grupos II, III y IV pero cuyos carbonatos si lo hacen por accin de una mezcla de amoniaco y cloruro de amonio. El grupo V comprende los cationes restantes cuyos cloruros, sulfuros, hidrxidos y carbonatos son solubles en presencia de cloruro de amonio. Por lo tanto no precipitan en ninguno de los grupos precedentes. El grupo I est formado por los cloruros insolubles de plata, mercurio (oso) y plomo, para comprender el grado de disolucin que todava pueden tener en la solucin problema observe la tabla 19 que relaciona la constante de producto de solubilidad y la solubilidad del mismo para cada uno de los precipitados. Como los valores estn afectados por un exponente, a mayor valor del mismo ms insoluble es la sustancia como lo puede corroborar observando el dato de solubilidad que representa la cantidad del soluto que todava se encuentra en la solucin. Tabla 19. Propiedades de los cloruros del grupo I.

La comparacin de las solubilidades, permite deducir que el cloruro de plomo es tres mil veces ms soluble que el cloruro de plata y cincuenta y tres mil ms que el cloruro mercurioso. Adems las solubilidades indican que el cloruro mercurioso casi precipita completamente y el de plomo slo lo hace en pequea cantidad precipitando completamente en el grupo II. Para comenzar a separar los componentes de este grupo, se puede aprovechar el cambio en la solubilidad del cloruro de plomo al pasar de temperatura ambiente a 80 C (la solubilidad del cloruro de plomo a 0 C es de 0,67 g/100 mL y a 80 C es de 3,34 g/100 mL), para separarlo de los otros, facilitando su identificacin. Luego de separarlo, el plomo se reconoce mediante dos reacciones; una utiliza el cromato de potasio para obtener un precipitado amarillo de cromato de plomo: Pb2+ + CrO42+ PbCrO4 (amarillo) Se confirma mediante otra reaccin con yoduro de potasio, si se forma un precipitado amarillo se dice que existe plomo en la solucin:
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Sustancia Kps AgCl Hg2Cl2 PbCl2 1,5 X 10-10 2,0 X 10-18 1,0 X 10-4 Solubilidad (mol/L) 1,3 X 10-5 7,5 X 10-7 0,04

Impide la precipitacin del hidrxido de magnesio.

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PbCl2 + 2 KI PbI2 (amarillo) + 2 KCl En el precipitado remanente luego de separar el plomo, la tcnica separa al cloruro de plata del cloruro mercurioso aprovechando su disolucin con amoniaco ya que forma un complejo. Es importante vigilar la concentracin de la solucin de amonio y la cantidad de cloruro de plata disponible. Se presenta la siguiente reaccin: AgCl + 2 NH3 [Ag(NH3)2]+ + Cl-

La solucin de amoniaco tambin se comporta como un medio de autorreduccin del cloruro mercurioso insoluble, produciendo mercurio metlico y cloruro de amin mercurio (I), un residuo gris o negro que ayuda a la identificacin del catin. La reaccin que ocurre es: Hg2Cl2 + 2 NH3 HgNH2Cl (negro) + Hg (negro) + NH4+ + Cl-

Por ltimo es necesario tener en cuenta que el xito de la tcnica depende de factores como el producto de solubilidad de los distintos precipitados, el eficiente control del pH, la formacin de iones complejos, el comportamiento de los cationes frente a las soluciones reguladoras (o buffer) y al efecto del ion comn. 2. Anlisis cualitativo de aniones. Estos iones todava no tienen una marcha analtica como la de los cationes, ni existen reactivos capaces de reunirlos en grupos como aquellos. Sin embargo, en el anlisis rutinario se los clasifica en tres grandes grupos, dependiendo de la accin que tienen sobre ellos dos reactivos precipitantes o de grupo. Los grupos mencionados son: Grupo del sulfato. Comprende los cidos o aniones que pueden precipitar con el cloruro de bario (BaCl2) o una mezcla de cloruro de bario y cloruro de calcio en medio neutro o amoniacal. Son Sulfato, carbonato, sulfito, tiosulfato, silicato, cromato, fosfato, arsenito, arseniato, borato, fluoruro, oxalato y tratrato. Grupo del cloruro. Son aquellos cidos o aniones que pueden precipitar por accin del nitrato de plata. Son: cloruro, bromuro, yoduro, sulfuro, cianuro, tiocianato o sulfocianuro, ferrocianuro y ferricianuro. Grupo del nitrato. Comprende los cidos o aniones que no precipitan con ninguno de los reactivos precipitantes de los grupos anteriores. Son principalmente nitrato, nitrito, clorato y acetato. Como no hay una marcha analtica similar a la de los cationes, para el anlisis de los aniones se efectan reacciones de verificacin, dependiendo del grupo del cual se sospecha que pertenecen, comprobando o descartando su presencia de acuerdo con el resultado que muestren con el reactivo indicado. En la prctica, se tomarn algunos aniones importantes de los dos primeros grupos, seleccionndolos entre los que dan soluciones neutras y son por lo tanto aprticos (recuerde que los aniones provenientes de los cidos dbiles hidrolizan el agua para dar un pH bsico), de los cuales se estudiarn sus reacciones de precipitacin o de grupo.

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Adems, del tercer grupo se experimentarn las reacciones de reducciones de nitratos, cloratos, yodatos y permanganatos. Todos estos aniones se han seleccionado por tener algn inters analtico adems de ilustrar las reacciones generales de grupo. Del primer grupo, se selecciona al sulfato como el representante ms importante. Este anin en medio moderadamente cido puede reaccionar con cualquier sal soluble de bario obtenindose un precipitado blanco de sulfato de bario, as: Ba2+ + SO42 BaSO4 BLANCO

Esta reaccin es la base de una gama de anlisis denominados gravimtricos, en el cual se determina por diferencia de pesadas algunos aniones presentes en agua y materias primas como sulfatos, silicatos, fosfatos y boratos. Del grupo del cloruro, el anin cloruro se puede identificar con una solucin al 1 % de nitrato de plata en medio actico para formar el precipitado: Cl- + Ag+ AgCl BLANCO Esta reaccin es la base de la argentometra, una tcnica que permite cuantificarlos, acerca de la cual se realizar una prctica ms adelante. Del tercer grupo, el nitrato, en presencia de iones ferrosos, en medio cido, sufre reduccin, producindose finalmente un complejo coloreado soluble (dificultan el ensayo los cloratos, cromatos, yoduros y bromuros entre otros y especialmente los nitritos por dar la misma reaccin. Adems, el complejo formado es termo inestable por lo que la solucin debe estar completamente fra antes de hacerlo).

El ion clorato puede ser reducido con ion nitrito obtenindose cloruro, reconocible con nitrato de plata como se describi antes: ClO3- + 3 HNO2 + 3 H2O Cl- + 3 NO3- + 3 H2O

Esta reaccin es importante porque ilustra la forma de transformar algunos aniones para su cuantificacin posterior. As, los cloratos que no se pueden cuantificar directamente por ser oxidantes poderosos, se transforman en cloruros, los cuales se cuantifican por argentometra. Los yodatos presentan un comportamiento muy interesante, porque actan como oxidantes ante el yoduro de potasio que normalmente es un oxidante y, adems, porque tanto el producto de oxidacin como el de reduccin es yodo libre: IO3- + 5 I- + 6 H+ 3 I2 + 3 H2O Se identifica por el color que imparte a la solucin, en la cual se confirma su presencia por la adicin de unas gotas del reactivo de almidn, obtenindose un complejo de adsorcin de color caracterstico. 98

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3 Fe2+ + NO3- + 4 H2O Fe2+ + NO 3 Fe3+ + NO + 6 H2O H2O + FeNO2+ COMPLEJO PARDO

Esta reaccin es la base de una tcnica cuantitativa denominada yodometra, en la cual la sustancia de inters se hace reaccionar con yoduro de potasio para producir yodo libre, que a su vez se puede cuantificar directamente con tiosulfato utilizando el almidn como indicador, tcnica de mucha aplicacin en la determinacin de sulfitos en vinos. Los bromatos, aunque tienen una mecnica de reaccin muy similar, son interesantes desde el punto de vista analtico por ser uno de los aditivos utilizados en algunos alimentos como la harina de trigo. Su identificacin transcurre as: BrO3- + 6 I- + 6 H+ 3 I2 + Br- + 3 H2O Finalmente se efectuar una reaccin de especial relevancia por ser la base de una tcnica analtica que permite cuantificar una gran diversidad de compuestos qumicos denominada permanganimetra. En ella, los permanganatos actuando como oxidantes y auto indicadores en medio cido y en caliente se decoloran por accin de los oxalatos, desprendiendo bixido de carbono y formando agua: 5 C2O42 - + 2 MnO4- + 16 H+ 10 CO2 + 2 Mn2+ + 8 H2O

3. Procedimiento. Antes de comenzar su experiencia, verifique que no le hacen falta los materiales de laboratorio respectivos. Se le recomienda marcar los tubos para no confundirlos durante la adicin de los reactivos ya sea con cinta de enmascarar o con lpiz de cera. Una vez efectuada la reaccin deje los tubos en su gradilla y proceda a escribir los resultados en su cuaderno de laboratorio. 3.1 Anlisis cualitativo del grupo I de cationes.

Encontrar en el laboratorio un recipiente que contiene la muestra con los tres cationes que va a identificar del grupo I. En un vaso de precipitados de 50 mL, tome la cantidad requerida y por ningn motivo devuelva al frasco el resto que le sobre ya que la diluye41. 3.1.1 Precipitacin del grupo.

En un tubo de ensayo limpio o en el requerido por la centrfuga, mida aproximadamente 2 mL de la solucin problema suministrada por el auxiliar de laboratorio y agregue lentamente gotas de solucin de cido clorhdrico diluido hasta que no se forme ms precipitado.
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En el anlisis cualitativo no se debe recurrir a la pipeta graduada para medir los reactivos debido a que no es prctico por la cantidad de veces que es necesario tomar volmenes pequeos de diferentes soluciones y a la facilidad con que se pueden contaminar stas. Medirlos con probeta tampoco sera muy prctico debido al gran volumen de esta. Adems, como no se requiere gran exactitud en las medidas, para los reactivos que estn en frascos goteros, se puede considerar que un mililitro equivale aproximadamente a 20 25 gotas (dependiendo de su viscosidad) y para los que se utilizan en frascos de tapa rosca, teniendo en cuenta que un tubo de ensayo estndar contiene aproximadamente 10 mL, a simple vista se puede determinar la cantidad de un mililitro (alrededor de 1 cm, contando desde el fondo del tubo).

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Centrifugue42 por un minuto cuidando de equilibrar la centrfuga con otro tubo que contenga una cantidad semejante de agua destilada. Aada unas gotas ms de solucin de cido clorhdrico para comprobar que se ha efectuado toda la precipitacin43. Si aparece siga aadiendo y centrifugando hasta ensayo negativo (no aparece turbidez en el lquido sobrenadante). Decante el lquido, (si se va a efectuar la marcha clsica, ese sobrenadante se debe reservar para seguir el anlisis del grupo II), como la muestra solo contiene cationes del grupo I la puede desechar siguiendo las instrucciones del instructor.

3.1.2

Separacin y anlisis del ion plomo.

Tome el tubo de ensayo con el precipitado del grupo I, aada 9 mL de agua destilada previamente calentada casi a ebullicin, agite el precipitado ayudndose con un pequea varilla de vidrio44, vuelva a centrifugar por un minuto. Decante el lquido sobrenadante en otro tubo de ensayo limpio y coloque el otro tubo en la gradilla marcndolo con los iones Ag+ y Hg22+. Tome otro tubo de ensayo limpio y divida el lquido sobrenadante, coloque uno de ellos en la gradilla marcndolo con el ion Pb2+. Al que tiene en la mano, aada cinco gotas de solucin de cromato de potasio. La aparicin de un precipitado amarillo es positivo para el ion plomo. Registre los resultados en el cuaderno de laboratorio. Reserve el tubo en la gradilla.

Coja el otro tubo que haba dejado en la gradilla, conteniendo la mitad de la solucin calentada. Agregue unas gotas de solucin de yoduro de potasio; si aparece un precipitado amarillo tambin confirma la presencia de plomo. Registre sus resultados y reserve el tubo en la gradilla. Proceda a calentar el tubo cuidadosamente para solubilizar el yoduro de plomo, deje enfriar en la gradilla para detectar un precipitado en forma de agujas brillantes denominado lluvia de oro. 3.1.3
42

Separacin y anlisis del ion mercurioso.

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Se debe empezar centrifugando a 1000 RPM (revoluciones por minuto) para evitar romper los tubos por inexperiencia. Pero dependiendo del caso, si al terminar de centrifugar se observa turbio el sobrenadante, es seal de que el precipitado es muy fino y se debe incrementar la velocidad de la centrfuga de 100 en 100 RPM cuidadosamente. 43 Una forma de verificacin es sosteniendo el tubo que contiene al sobrenadante transparente, al nivel de los ojos, dejar caer una gota del reactivo precipitante en el seno del lquido y observar si aparece turbidez. Si ocurre, debe seguir aadiendo ms reactivo gota a gota y luego centrifugar. 44 Se le recomienda agitar siguiendo las paredes del tubo, no golpee el fondo so riesgo de romper el tubo y perder la suspensin, adems de tener que pagar el tubo de ensayo roto.

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Tome el tubo con precipitado dejado en la gradilla y aada 5 mL de solucin diluida de amoniaco, agite ayudndose de una varilla de vidrio y centrifugue por un minuto. Observe el tubo; si se forma un precipitado negro, indica la presencia de mercurio (I) en la solucin. Separe el lquido sobrenadante en otro tubo de ensayo y djelo en la gradilla para el anlisis del catin plata, luego de marcarlo. Reserve el tubo con precipitado en la gradilla, marcndolo como ion mercurioso. 3.1.4 Anlisis del ion plata.

Tome el tubo con lquido de la gradilla para investigar la presencia de ion plata, divdalo por la mitad en otro tubo de ensayo y resrvelo en la gradilla luego de marcarlo. Al tubo que tiene en la mano, agrguele gota a gota solucin de yoduro de potasio; si comienza a formar un precipitado amarillo indica la presencia de plata en la solucin. Registre el resultado en el cuaderno de laboratorio y deje el tubo en la gradilla. Tome el tubo que reserv en la gradilla y adale cido ntrico diluido hasta reaccin cida al tornasol azul, controlando luego de agitar con la varilla al aadir una gota de la solucin problema sobre el papel y observando el cambio de color. Observe si comienza a formarse un precipitado blanco, en cuyo caso se confirma la presencia de la plata. Reserve el tubo en la gradilla. Deje transcurrir diez minutos, revise nuevamente cada tubo y escriba en el cuaderno las observaciones a lugar. Tendr una idea de la estabilidad de cada reaccin. Disponga los residuos de la experiencia conforme le indique el instructor o asistente de laboratorio, lave y seque cuidadosamente cada uno de los materiales utilizados en la experiencia. 3.2 Anlisis cualitativo de algunos aniones.

En el laboratorio encontrar unos frascos con gotero marcados con los nombres de los aniones sulfato, cloruro, bromuro, yoduro, nitrato, clorato, bromato y permanganato. Debe tomar la cantidad necesaria de la misma siguiendo el procedimiento utilizado para el anlisis de cationes. Por ningn motivo regrese restos de solucin ya que afecta la concentracin de la misma por disolucin, perdiendo la sensibilidad requerida por el anlisis. 3.2.1 Anlisis de iones halgeno.

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Tome tres tubos de ensayo limpios. Mrquelos con los smbolos qumicos de los iones cloruro, yoduro y bromuro45. Adicione 1 mL de soluciones de cloruro de sodio, de bromuro de sodio y de yoduro de potasio a cada uno de los tubos marcados con el in correspondiente. Djelos en la gradilla.

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Estas soluciones deben prepararse al 1 % en peso.

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Aada a cada tubo cinco gotas de solucin de cido actico al 1% y agite suavemente utilizando las manos. Luego agregue al tubo con cloruro, gota a gota, solucin de nitrato de plata al 5 % hasta que no aparezca ms precipitado. Verifique el color formado y regstrelo en su cuaderno. Contine con los dems tubos efectuando la misma operacin de adicin del nitrato de plata. No olvide registrar sus resultados. Deje los tubos en la gradilla. 3.2.2 Anlisis del ion sulfato.

Utilice otro tubo de ensayo, mrquelo con el smbolo del ion sulfato, adicione 1 mL de la solucin de sulfato de sodio al 1 %. Aada dos gotas de cido clorhdrico diluido y homogenice la solucin. Luego adicione gota a gota, solucin de cloruro de bario al 5 % hasta que no forme ms precipitado. Registre en su cuaderno los resultados. Deje el tubo en la gradilla. 3.2.3 Anlisis del in nitrato.

En un tubo de ensayo limpio, coloque 1 mL de solucin de nitrato de potasio al 1 %. Adicione 1 mL de solucin de sulfato ferroso al 1 %. Por las paredes del tubo de ensayo deje escurrir lentamente y sin agitar 1 mL de cido sulfrico concentrado de modo que se forme una capa viscosa debajo de los reactivos. Mantenga el tubo inclinado y espere un tiempo prudencial mientras se forma un anillo pardo entre las dos capas, dando positivo el ensayo. Registre sus resultados en el cuaderno de laboratorio. La importancia de no disturbar el sistema favorece el mantenimiento de la interfase y de no mezclar el cido sulfrico concentrado que genera bastante calor obligando a colocar el tubo en la gradilla o a soltarlo con los riesgos subsecuentes. Deje el tubo en la gradilla procurando no agitarlo. 3.2.4 Anlisis del ion clorato.

En un tubo de ensayo limpio, mrquelo con el smbolo qumico del ion clorato, adicione 1 mL de la solucin de clorato de potasio al 1 %. Luego agregue 1 mL de solucin de nitrito de sodio al 1 % recin preparada y cinco gotas de cido actico 2 N y agite suavemente el tubo de ensayo. Posteriormente aada gotas de solucin de nitrato de plata hasta que no precipite ms. Observar la forma y color del precipitado, comparndolo con el tubo reservado para el anlisis de ion cloruro. Registre los resultados en el cuaderno de laboratorio. Deje el tubo en la gradilla. 102

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3.2.5

Anlisis de los iones bromato y yodato.

Tome dos tubos de ensayo limpios. Mrquelos con los smbolos qumicos de los aniones y aada 1 mL de la solucin de yoduro de potasio al 5%, cinco gotas de la solucin de cido sulfrico al 5 % agitar y aadir diez gotas de las soluciones de yodato y de bromato. Observar la aparicin de algn color. Aada dos o tres gotas de la solucin de almidn al 1 %, agitar y registrar el desarrollo de algn color en el cuaderno de laboratorio. Deje los tubos en la gradilla. 3.2.6 Identificacin del ion permanganato.

En un tubo de ensayo limpio, marcado con el smbolo qumico del permanganato, aada 1 mL de la solucin de permanganato de potasio al 0,3 %, agregue cinco gotas de solucin de cido sulfrico al 5 % y caliente cuidadosamente sobre un mechero, utilizando unas pinzas para tubo de ensayo. Una vez est la solucin caliente, aada gota a gota solucin de oxalato de potasio al 5 % hasta que decolore completamente. Observar y anotar los resultados en el cuaderno de laboratorio. Deje el tubo en la gradilla y espere diez minutos. Ahora revise nuevamente cada uno de los tubos y registre los cambios que han ocurrido. As tendr una idea de la estabilidad de cada reaccin. Terminada la experiencia, disponer de los residuos de acuerdo a las instrucciones del director de la prctica o del auxiliar. Lavar y secar el material de vidrio utilizado. 4. Tratamiento de datos.

Preparar el informe correspondiente de acuerdo a las directrices dadas en la Gua para la presentacin de informes de laboratorio.

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DETERMINACIN DEL PESO DE UN GRANO DE UN CEREAL COLOMBIANO

La masa de una sustancia es una propiedad fsica de amplio uso para describir las caractersticas de la misma. Para la determinacin analtica se utiliza un instrumento que permite comparar masas hasta encontrar un determinado equilibrio y poder concluir que tienen exactamente la misma masa, o mejor, el mismo peso ya que dicha comparacin se hace bajo las mismas condiciones gravitacionales. El instrumento que permite efectuar dicha comparacin se denomina balanza. Su sensibilidad o capacidad de detectar el peso mnimo depende de las condiciones de su construccin y est en estrecha relacin con la precisin que es capaz de generar en la medicin, por ello el plato donde se coloca el objeto a pesar se encuentra dentro de una vitrina protegido de agentes extraos y de la influencia de corrientes de aire. Su principio es muy simple ya que equivale a una aplicacin de las leyes de la palanca estudiadas en la fsica, sin embargo ha sufrido modificaciones tan sustanciales en su diseo que las balanzas actuales son mucho ms simples, sensibles y con mayor reproducibilidad que las primeras debido principalmente a la utilizacin de la electrnica en su construccin y uso.

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Una balanza de dos platos tena tres factores fundamentales que determinar en su calibracin: la determinacin del punto cero, de los puntos de equilibrio, la sensibilidad y rapidez; una buena balanza debera ser sensible hasta cuatro divisiones de la escala, con perodo de mximo diez segundos. El esfuerzo de medicin consista en equilibrar lo mejor posible a la cruz de la balanza alcanzando la posicin del fiel en el sitio de la escala que mostraba el punto cero. Posteriormente se pas a la balanza monoplato fundamentada en el principio de sustitucin. El platillo de la balanza y sus pesas estn suspendidos en el mismo sitio y se encuentra exactamente equilibrada con un contrapeso constante y frenado por un amortiguador de aire, en esta condicin su escala se encuentra en cero. Para realizar la pesada, se van quitando pesas del platillo utilizando botones externos, comenzando por el de mayor peso hasta obtener un valor para el cual se sobrepasa el peso del objeto en medicin, luego se pasa al botn de menor peso realizando la misma operacin hasta cuadrar la tercera cifra decimal de la pesada. La diferencia de peso entre la posicin de equilibrio de la balanza y el punto cero de la cruz se logra equilibrando una escala de proyeccin calibrada en unidades de miligramo estableciendo la ltima cifra decimal. En las balanzas electrnicas, este mecanismo se sustituye por el uso de sensores piezoelctricos de presin en el punto en el que se encuentra localizado el platillo produciendo una diferencia de potencial que es equilibrada con otra estndar. Esa diferencia se traduce en unidades de peso que se despliegan en una pantalla digital, de donde se toma el dato o se puede almacenar en una base de datos. A pesar de la facilidad con la cual se realiza actualmente el trabajo analtico de determinacin de pesos (o masa) se deben observar ciertos cuidados para evitar influencias del aire que por empuje afecta la medicin disminuyendo la lectura, deben tomarse precauciones para minimizar los errores de pesada. Durante sta no debe tocarse el recipiente con las manos descubiertas, puesto que las huellas digitales modifican su masa. Una muestra siempre debe estar a la temperatura ambiente antes de pesarla, para evitar los errores causados por las corrientes de conveccin del aire. Para enfriar una muestra secada en un horno, generalmente se requiere que permanezca media hora en un desecador a temperatura ambiente. El platillo de la balanza debe estar en posicin de bloqueo cuando en l se coloca una carga, y en posicin de semibloqueo cuando se hacen los ajustes de pesada. De esta forma se protegen las cuchillas contra el desgaste causado por esfuerzos bruscos. Las puertas de vidrio de la balanza analtica deben estar cerradas durante las operaciones de lectura, a fin de evitar oscilaciones producidas por las corrientes de aire. Las balanzas abiertas que se cargan por arriba deben estar provistas de una proteccin eficaz alrededor del platillo, para minimizar los efectos de dichas corrientes. Las balanzas sensibles se montan frecuentemente sobre una base pesada (como una plancha de mrmol) para reducir los efectos de las vibraciones sobre las lecturas. Una balanza se nivela mediante los soportes ajustables, y haciendo uso del nivel de burbuja46.

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El propsito de esta prctica, adems de brindarle la oportunidad de comenzar a trabajar con la balanza analtica, tiene como finalidad que conjuntamente con sus compaeros de prctica realice la determinacin de la masa de un grano de maz o de otro cereal que se encuentre en la regin para determinar cul es la masa real del mismo y valore la precisin del resultado conforme a lo discutido en la teora de la primera unidad, por ello
46

HARRIS, Daniel C. Anlisis qumico cuantitativo. Op. Cit., p 17.

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trabajar experimentalmente el concepto de poblacin, muestra estadstica, exactitud, precisin y determinacin de las fuentes de error en esta determinacin cuantitativa. 1. Procedimiento. El grupo debe ponerse de acuerdo para adquirir una libra de un cereal tpico de la regin, por ejemplo de maz. Una vez en el laboratorio tomar un vaso de precipitados de 600 mL limpio y seco, pesarlo en una balanza corriente de una o dos cifras decimales, luego agregar la libra de maz (u otro cereal) sin el empaque y pesar nuevamente. Todo el grupo debe registrar en sus cuadernos las pesadas efectuadas y su descripcin. Si el cereal seleccionado tiene material extrao (harina, insectos, restos vegetales) se debe eliminar grano por grano con una toalla limpia, aseando igualmente el interior del vaso y volver a pesar los granos completamente limpios, registrando el dato en los cuadernos de laboratorio. Luego cada integrante del grupo debe seleccionar al azar diez granos (procurando no tomarlos con las manos desnudas) y determinar sus masas en la balanza analtica, registrando en su cuaderno los datos obtenidos. Lo remplaza otro compaero quien agita nuevamente el vaso y procede a efectuar sus diez mediciones. Mientras se realizan las pesadas, un integrante del grupo debe ir registrando en una hoja los datos de todas las mediciones. Al finalizar las pesadas, cada estudiante debe tomar una fotocopia de la informacin consolidada, la cual debe adjuntarse al cuaderno de laboratorio. 2. Tratamiento de los datos.

Cada integrante del grupo debe calcular con los datos que obtuvo la media y la desviacin estndar y reportar el peso encontrado con el nivel de precisin logrado. Igualmente cada uno debe efectuar dicha operacin con todos los datos de la hoja fotocopiada, elaborando adems el histograma y el polgono de frecuencias. Entre todos, discutir los resultados obtenidos y elaborar el informe correspondiente como se indic en la Gua para la presentacin de informes de laboratorio

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6. Palabras clave.

Gravimetra, Volumetra, Complejometra, volumetra REDOX, materiales, reactivo analtico, alcuota, equipo de vidrio.

MATERIAL MTODOS CLSICOS DE EN ANLISIS REVISIN

SEGUNDA UNIDAD

7. Propsitos.
Aqu, buscaremos que usted comprenda los fundamentos de los anlisis clsicos divididos en dos grupos grandes de tcnicas: gravimtricas y volumtricas, captulos que compondrn dicho material. En ambos casos estudiaremos los fundamentos, los fenmenos fsicos y qumicos implicados en los mtodos lo mismo que la descripcin de los mismos, de modo que usted posteriormente pueda aplicarlos en las actividades prcticas de laboratorio definidas en el ltimo de los captulos de la unidad para que conforme a sus intereses haga la respectiva adecuacin a una muestra que desee analizar utilizando estos mtodos, previa aprobacin por parte del tutor.

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8. Objetivos.
2) Establecer los fundamentos qumicos y fsicos de los mtodos clsicos de anlisis cualitativo y cuantitativo en productos alimenticios o en otro tipo de productos, los mtodos tradicionales de realizaciones de los mismos y aplicarlos a una muestra especfica que sea de inters del estudiante. 3) Dar la oportunidad para que selecciones los mtodos de anlisis y los apliques a un producto de su inters teniendo en cuenta las condiciones disponibles en los CEAD que oferten el curso. 4) Elaborar un informe escrito donde explicite los resultados encontrados, los criterios para el anlisis realizado y las recomendaciones para su mejoramiento o su rechazo.

9. Competencias. En esta unidad el estudiante comenzar su trabajo acadmico estudiando mtodos de anlisis concretos y especficos de aplicacin en su campo de trabajo profesional. Sin embargo nuestro inters no es que se transforme completamente en un analista sino que conozca los fundamentos, las limitaciones y las bondades que presentan las tcnicas analticas clsicas en la determinacin de algunas sustancias de inters en el campo de los alimentos y, cuando requiera los servicios de un laboratorio especializado, sepa ordenarlos, definir los resultados esperados y efectuar las correspondientes aplicaciones para que pueda tomar decisiones fundamentales sobre un lote de materia prima, de insumos o de producto terminado, conforme a los lineamientos de control de calidad que haya definido en la empresa donde se encuentra laborando. Debe comenzar a estructurar su propio mtodo de estudio, utilizando las estrategias que ha venido desarrollando en otros cursos al efectuar la adecuada combinacin entre estudio individual, trabajo en grupo colaborativo y en grupo de curso ya que todos ellos le ayudan a alcanzar las metas del mismo. Necesariamente requiere el desarrollo de criterios que le permitan efectuar valoraciones y recomendaciones sobre las condiciones que debe cumplir los resultados del anlisis ordenado mediante las tcnicas analticas clsicas. 10. Metas de Aprendizaje.

Establecer las condiciones conceptuales, experimentales, metodolgicas, recomendaciones, seleccin de materiales y reactivos adecuados para la aplicacin de las tcnicas analticas clsicas en la determinacin de sustancias de inters dentro de una materia prima, un proceso o un producto final y que tiene utilidad como alimento apto para los seres humanos. Establecer su propio mtodo de trabajo para la seleccin de muestra, su preparacin y definicin de criterios para ordenar unos anlisis qumicos cualitativos o cuantitativos o ambos de ser necesario. Definir el procedimiento a seguir para establecer los criterios de anlisis de datos y sus resultados.

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FUNDAMENTOS Como

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ESQUEMA CONCEPTUAL DE LA UNIDAD
LOS MTODOS CLSICOS DE ANLISIS Tienen PROCESOS Como TCNICAS Como GRAVIMETRA VOLUMETRA PESADA TITULACIN Midiendo:

EQUIPOS Como

SOLUBILIDAD EQUILIBRIO PRECIPITADO pH REDOX

BALANZA BALN AFORADO PIPETAS BURETA

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MASA

Esta unidad va a trabajar dos temas relacionados con las tcnicas analticas denominadas clsicas ya que fueron las que inicialmente se comenzaron a utilizar en la determinacin de sustancias. El desarrollo del mtodo cientfico tena un espacio importante durante el siglo XVII, producto del trabajo de Galileo Galilei quien aument a las tcnicas de induccin y deduccin heredadas de la civilizacin grecolatina con el planeamiento sistemtico de experimentos y la medicin de variables. Antoine Laurent de Lavoisier es el padre de la Qumica Moderna y un fuerte impulsor de la medicin experimental basndose fundamentalmente en la determinacin del peso o masa de las sustancias luego de su purificacin. El desarrollo cuidadoso de esta tcnica y su complementacin con la volumetra han hecho de estas las herramientas ms utilizadas con el mayor grado de precisin; a pesar del avance de la tecnologa, principalmente de la microelectrnica y el desarrollo de software no han podido eliminarlas del todo ya que en muchos casos es necesario tomarlas como referentes para la calibracin de los equipos o de determinacin de la reproducibilidad de las tcnicas instrumentales.

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INTRODUCCIN

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En esta unidad analizaremos los fundamentos, los mtodos, las tcnicas y los equipos utilizados en el desarrollo de la gravimetra y la volumetra, manteniendo claros y siempre en uso los conceptos y criterios que se desarrollaron en la primera unidad y que tienen como objeto ayudarle a establecer conclusiones adecuadas al valorar los resultados experimentales que est trabajando. El nfasis de esta unidad, estar dado a comprender el fundamento de los mtodos de anlisis ms comnmente utilizados en el campo de los alimentos, tanto en su control de calidad como en el esbozo de tcnicas para el anlisis ms especializado si se trata de ahondar en el conocimiento de las caractersticas y el comportamiento de este conjunto de materiales tiles para la manutencin de la vida de seres vivos (humanos y animales con fines comerciales). Recurrir a la bibliografa, reforzar conceptos y realizar ejercicios planteados no slo en este material son el secreto para lograr el aprendizaje requerido en este curso. La parte experimental que se encuentra al final, tiene como propsito que confronte la teora con la prctica, desarrolle las habilidades necesarias para ordenar e interpretar los resultados obtenidos en los anlisis. El (la) tutor (a) es un apoyo que la institucin le brinda y al que debe acudir cuando lo requiera para clarificar y afianzar sus conocimientos; tambin le dar informacin de retorno sobre los productos de aprendizaje que aqu se le presentan para consolidar mejor su saber en esta disciplina.

Corresponde a la primera tcnica clsica, su principio es la determinacin de la masa o el peso de una sustancia mediante una balanza analtica. 1. Solubilidad

Nuestra primera experiencia es el contacto con el agua. La utilizamos para resolver los problemas de limpieza de la mayora de las situaciones de nuestra vida cotidiana, la preparacin de alimentos, el consumo de medicamentos y otras ms. Cul es la propiedad que la hace tan especial para esa utilidad? La solubilidad es una propiedad que presenta una sustancia al disolverse en otra una determinada cantidad a una cierta temperatura para establecer el siguiente equilibrio: Soluto puro = Soluto disuelto Todava no se ha podido formular una teora sobre la solubilidad. Las teoras del enlace qumico no han podido dar una explicacin suficiente al fenmeno, aunque se sabe que esa propiedad se relaciona con tres factores que dan la posibilidad de la disolucin:

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TEMA 1.

GRAVIMETRA

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Las fuerzas moleculares inicas que unen entre s a las partculas de la sustancia pura, deben desaparecer si se va a dispersar como soluto en un medio lquido47 (energa reticular). Si la sustancia tiende a pasar a la fase lquida, slo puede lograrlo si es capaz de romper los enlaces de hidrgeno que tiene el agua, por ejemplo, y poder penetrar en la estructura molecular del lquido estableciendo nuevas uniones (energa de hidratacin). Las sustancias capaces de superar esas dos barreras energticas y establecer interacciones poderosas con las molculas del solvente, se dice que son solubles.

Si recordamos qu ocurre cuando colocamos un soluto inico o molecular en agua, sabemos que en la superficie del cristal la facilidad con que la partcula inica o la molcula entra a formar parte de la solucin es mayor ya que las molculas del agua las rodean orientndose segn las polaridades que reinen entre ellas de modo que las puedan sacar del slido (aqu se consume la energa reticular). Cuando se encuentra la partcula de soluto libre, nuevamente es rodeada por otras molculas del solvente correspondiendo a la hidratacin o solvatacin del soluto (el consumo de energa corresponde a la energa de hidratacin o de solvatacin). Lo anterior nos permite deducir una regla experimental importante en qumica: semejante disuelve a semejante, que podemos interpretarla segn la polaridad que pueda tener cualquier sustancia cuyo comportamiento vayamos a considerar frente a un determinado solvente. En la hidratacin48 de las partculas parece predominar la formacin de enlaces de hidrgeno o el establecimiento de enlaces covalentes coordinados (por ejemplo, en el caso de algunos cationes metlicos) como lo podemos ver en la figura 6. La mxima concentracin que se puede lograr en el proceso de disolucin de un slido a una temperatura dada se describe como una solucin saturada, la cual, para una temperatura dada, no presenta ningn cambio neto en la cantidad de la fase slida en contacto con la disolucin. Si se enfra la solucin y no se separa slido, la solucin se encuentra en un estado meta estable denominado solucin sobresaturada. La formacin de una solucin bajo la influencia de factores como la composicin del solvente, la concentracin de otras sustancias (efecto del ion comn o el efecto sal) que pueden acompaar al soluto, la presin y la temperatura. En nuestro caso podemos representar el equilibrio as:

Si consideramos el efecto de la temperatura, al incrementarse podemos establecer, de acuerdo con el principio de Le Chatelier que se desplazar en el sentido de absorber calor, es decir, se incrementa la solubilidad. Este es el efecto ms comn, en especial cuando se trata de sustancias inorgnicas; sin embargo, hay casos, como el del sulfato de calcio, donde ocurre el fenmeno contrario. En los gases la situacin es diferente; por lo general su solubilidad es mayor a baja temperatura pero cuando ella se incrementa la solubilidad disminuye. Este fenmeno es crtico cuando el agua sufre de contaminacin

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Energa + Soluto + Solvente = Solucin saturada

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Se dice lquido para trabajar las soluciones en este estado, que corresponde a la experiencia que trabajaremos en este mdulo. Sin embargo, se prefiere hablar de medio fluido para agrupar los estados lquido y gaseoso cuyo comportamiento en la formacin de soluciones son iguales. Una solucin corresponde a una fase homognea; por ello se constituye como una especie de estado que se diferencia de una suspensin o de un coloide. 48 Cuando hablamos de hidratacin, nuestro solvente siempre es el agua. Por ello el trmino ms amplio es solvatacin puesto que tenemos otros solventes lquidos provenientes de sustancias orgnicas como el ter, la acetona, el etanol entre otros donde el fenmeno de solubilidad es semejante. Todava no se han escrito trminos para explicar el mismo fenmeno de manera tan particular con cada uno de ellos, sino estrictamente con el agua por las razones ya anotadas.

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trmica pues la cantidad de oxgeno disuelto se hace ms baja alcanzando niveles de concentracin menores que los requeridos para la sobrevivencia de peces y otros animales acuticos. El otro factor que afecta la solubilidad de una sustancia es la presin, la cual es importante para las disoluciones de los gases en el agua. En este caso, su comportamiento se expresa mediante la Ley de Henry si se pretende preparar soluciones diluidas y a presiones relativamente bajas ya que en otras condiciones su comportamiento no es tan fcil de describir.

Figura 6. Posibles estructuras para dos iones hidratados. 2+

H O

O H

H O

Be O H H H

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O H O O H O S O H O O H O H

Hidratacin de un catin

2-

La variacin de la solubilidad con la composicin del medio puede ser importante de conocer ya que su manejo puede incrementar o disminuir la cantidad de soluto facilitando su recuperacin. Hidratacin de un anin La presencia de iones comunes o de otros son formas en que se afecta la solubilidad de una sustancia. Este fenmeno es muy comn en el caso de los compuestos inorgnicos. Hasta el momento tenemos una serie de caractersticas del comportamiento general que sigue la mayora de las sustancias, pero no podemos todava disponer de unos criterios que nos permita predecir si la sustancia va a ser soluble o no en agua; todo lo que podemos establecer es si es polar o no lo es. Para poder construir esas reglas de solubilidad dividamos las sustancias en dos grupos: las inorgnicas y las orgnicas.

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Estudiemos, en primer lugar, los referentes para las sustancias inorgnicas. Estas se caracterizan por tener en la mayora de los casos enlaces inicos o covalentes polares; para los iones se ha encontrado que su hidratacin se puede predecir ya que: Los iones con cargas elevadas atraen fuertemente los tomos de hidrgeno de la molcula de agua. Los iones pequeos son ms efectivos que los grandes debido a que la carga se concentra ms en los de menor tamao.

Esto nos puede ayudar a comprender el comportamiento de la solubilidad de sustancias inorgnicas como son: La mayora de las sales de sodio, potasio, amonio, nitratos, nitritos, cloratos, percloratos y acetatos son solubles en agua aunque el nitrato de plata es poco soluble. Los xidos e hidrxidos metlicos son insolubles con excepcin de los metales alcalinos y el de amonio. Todos los sulfuros son insolubles salvo los de los metales alcalinos, los de los alcalinotrreos (los de calcio, estroncio y bario son ligeramente solubles) y el de magnesio. Los cloruros son solubles menos el de plomo, plata, mercurio (I) y los hipocloritos de bismuto y de estroncio. Todos los yoduros son solubles excepto los de plata, plomo (II), mercurio (I), el de cobre (I) y los hipoyoditos de bismuto y de antimonio. Los yoduros de bismuto (II) y de estao (II) son ligeramente solubles. Los fluoruros son insolubles pero no los de los metales alcalinos y los de plata, bismuto, hierro (II) y estao (IV). Los sulfatos son solubles menos los de plomo, mercurio (I) y estroncio que son insolubles; los de plata, mercurio (II) y de calcio son ligeramente solubles. Todos los cromatos son insolubles pero no los de metales alcalinos y los de calcio, magnesio y cinc. Los carbonatos, sulfitos, fosfatos, boratos y oxalatos son insolubles en agua salvo los de los metales alcalinos. Sin embargo, estos se pueden disolver modificando el pH (acidificacin).

Quizs, para que entendamos mejor lo que puede ser una sustancia soluble observemos la siguiente escala de solubilidad relativa para las sustancias inorgnicas: Soluble: ms de 50 g/L Moderadamente soluble: de 10 a 50 g/L Ligeramente soluble: 1 a 10 g/L Moderadamente insoluble: 0,01 a 1 g/L Insoluble: menos de 0,01 g/L

Sin embargo, no podemos olvidar que se puede incrementar la solubilidad de una sustancia si variamos su pH, si facilitamos la formacin de complejos, si recurrimos a los efectos del ion comn o a iones que tienen mayor carga. Ahora estudiemos el comportamiento que presentan en su solubilidad frente al agua las sustancias orgnicas. Nuevamente encontramos que en ellas aparecen dos situaciones: los compuestos no polares o poco polares con fuerzas de asociacin muy dbiles que pueden ser disueltas por otras molculas semejantes para formar soluciones verdaderas (ejemplo: el hexano se solubiliza en Heptano o en tetracloruro de carbono), o aquellos polares cuyas energas de asociacin no pueden ser alcanzadas por los solventes no polares y que al no poderse disolver, permanecen insolubles. No obstante, los anteriores hechos no son tan excluyentes puesto que entre compuestos orgnicos, solubles en agua, se encuentra que al aumentar el tamao de la cadena la solubilidad disminuye y que sustancias con gran cantidad de grupos capaces de establecer puentes de hidrgeno no forman soluciones acuosas (caso de la celulosa).

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Lo anterior nos tiene tambin que permitir formular algunos referentes para entender esta propiedad: Los compuestos orgnicos son prcticamente insolubles en agua a no ser que posean uno o ms tomos de oxgeno o de nitrgeno en sus molculas capaces de formar puentes de hidrgeno con el agua, en cadenas carbonadas no mayores de cinco a seis carbonos. Los compuestos que contengan un tomo de nitrgeno o de oxgeno generalmente son miscibles en agua o moderadamente solubles en ella si su molcula tiene hasta cinco tomos de carbono. El aumento de carbonos sin incrementar los oxgenos o los nitrgenos hacen que la solubilidad disminuya rpidamente. Muchos compuestos orgnicos son solubles entre s en alguna cantidad. Las molculas que tienen composicin similar, por lo general, son muy solubles entre s, que aquellas que presentan grandes diferencias en sus frmulas qumicas. Las sales orgnicas son solubles en agua e insolubles en solventes orgnicos49. Los compuestos que contengan carbono e hidrgeno; carbono, hidrgeno y azufre o carbono, hidrgeno y halgeno frecuentemente son insolubles en agua. El anillo aromtico de seis carbonos unido a grupos polares como hidroxilo, amida o cido carboxlico, tiene una solubilidad parecida a la que presenta el compuesto aliftico correspondiente de cuatro tomos de carbono. El aumento del peso molecular del compuesto orgnico, aumenta sus fuerzas intermoleculares hacindolo insoluble. Los ismeros de cadena y de posicin son ms solubles que el correspondiente compuesto de cadena normal; el ismero ramificado es el que tiene mayor solubilidad.

Los tomos de hidrgeno de la molcula de agua forman puentes de hidrgeno con los grupos funcionales de alcoholes, teres, aldehdos, cetonas y aminas siempre que su cadena carbonada no tenga ms de cinco carbonos. Si es mayor, las fuerzas intermoleculares que existen entre ellas son ms fuertes que las que pueden establecer los puentes de hidrgeno y se presenta la insolubilidad. Es importante que tengamos presente esta caracterstica del agua: ella de por s es un mal solvente para la mayora de sustancias orgnicas, dificultad que se supera si le adicionamos un solvente orgnico polar como el metanol; estos solventes se denominan prticos porque son cidos, su importancia tiene que ver con su reactividad y el poder nucleoflico que aparece en ciertas reacciones orgnicas. Vale la pena que recordemos el comportamiento especfico que presentan molculas con parte polares y no polares como detergentes, protenas, lpidos polares (esfingolpidos, fosfolpidos) entre otros, que orientan su parte polar hacia el agua y la no polar que emplean como un solvente para solubilizarse mutuamente jugando un papel muy importante en la conformacin de las membranas celulares y de los organelos celulares o favorecer la aparicin de la estructura terciaria de las protenas. Por lo tanto, podemos deducir que cuando una sustancia orgnica se disuelve en agua nos puede dar indicios sobre sus grupos funcionales, el tamao de su cadena carbonada y la accin que ejercer sobre su capacidad de modificar el equilibrio de su ionizacin. Lo que hasta ahora hemos discutido nos sirve para formarnos una idea general de cmo se comportara una sustancia orgnica frente al agua, pero si se trata de casos muy particulares, por ejemplo, el comportamiento de los cidos carboxlicos, las aminas secundarias o terciarias y las amidas es necesario estudiarlas particularmente lo cual no es objeto de este curso. De modo que lo tratado nos permite establecer que cuando una sustancia se solubiliza en agua es porque es: Un electrolito, o sea un compuesto inico capaz de romper los puentes de hidrgeno del agua e hidratarse para formar interacciones dipolo dipolo.

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Son solventes orgnicos aquellas sustancias que a temperatura ambiente son lquidas y que generalmente son combustibles como el ter de petrleo, hexano, benceno, tolueno, ter etlico, metanol, etanol, cloroformo o tetracloruro de carbono entre otros.

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Un cido o una base, puede alterar el equilibrio de ionizacin del agua, formando puentes de hidrgeno con el solvente. Un compuesto polar capaz de formar uniones dipolo dipolo ms fuertes que los puentes de hidrgeno que tiene el agua o una combinacin de los dos.

Recordemos que se pueden establecer ciertas proporciones entre soluto y solvente que constituyen las unidades de concentracin, las cuales son de dos tipos, las unidades fsicas y las unidades qumicas. En la siguiente tabla encontramos esas expresiones: Molaridad M = nSo/VSn Fraccin molar X = nSo/nTotales Porcentaje en volumen %V/V = (VSo/VSn) 100 So = soluto Molalidad m = nSo/kgSe Porcentaje molar %Mol = X (100) Relacin peso a volumen %P/V = (gSo/VSn) 100 Se = solvente Normalidad N = eqSo/VSn Porcentaje en peso %P/P = (gSo/gSn) 100 Partes por milln ppm = mgSo/kgSn Sn = solucin

Las tres primeras expresiones corresponden a las unidades qumicas y las otras son unidades fsicas. 2. 2.1 Equilibrio qumico y reacciones de precipitacin. Conceptos generales.

Las sustancias cuando interactan entre s requieren de un conjunto de condiciones para transformarse como lo podemos deducir del curso de qumica general y su comportamiento permite diferenciar dos procesos uno reversible, unidireccional que lleva a obtener slo productos y otro a formar mezclas de reactivos y de reaccionantes; estas se dice que son reversibles y que se encuentran en un equilibrio dinmico de sntesis y de descomposicin. Es posible definir cuatro criterios para que un sistema qumico tenga dicha condicin: i. ii. iii. iv. A nivel macroscpico, decimos que el sistema est en equilibrio, si las observaciones directas no revelan cambios en las propiedades generales con el transcurso del tiempo, pareciendo estar esttico. A nivel microscpico o molecular, al comparar las velocidades en que estn ocurriendo las dos reacciones (sntesis y descomposicin) se encuentran los mismos valores por ello no se detecta ningn cambio neto en las propiedades del sistema con el tiempo. Teniendo en cuenta el cambio energtico el sistema debe de estar en un nivel mnimo de energa y an as se dispone de suficiente para poder permitir los cambios en los dos sentidos. Se puede describir dicho cambio utilizando una ecuacin matemtica que corresponde a una constante llamada de equilibrio50.

Lo anterior lo podemos establecer utilizando una ecuacin generalizada: aA+bB dD+eE

Correspondera a la caracterstica discutida en el primer criterio. Ahora establezcamos las velocidades de la reaccin de sntesis y la de descomposicin: v = k1 [D]d [E]e v = k2 [A]a [B]b Como se encuentran en equilibrio, podemos igualar las dos ecuaciones: k2 [A]a [B]b = k1 [D]d [E]e
50

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RAMETTE, Richard. W. Equilibrio y anlisis qumico. Op. Cit., p. 86

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Expresin que concuerda a la Ley de Accin de Masas propuesta por Guldberg y Waage, donde dice que la velocidad de reaccin es proporcional a las masas activas de las sustancias reaccionantes51. Los estados estndares para poder pasar de la masa activa a la expresin de concentracin afectado por su coeficiente estequiomtrico son: Un slido puro y un lquido puros tienen como actividad la unidad. Las actividades del soluto y del solvente dependen de su fraccin molar. La actividad de un gas puro depende de su presin y temperatura: se considera uno cuando estn en condiciones normales (una atmsfera y 20 C)

Por ello podemos despejar la frmula anterior as: k2 k1 [D]d [E]e = [A]a [B]b

KEQ =

Esta expresin es aproximada porque requiere la determinacin de los coeficientes de actividad y la determinacin de la influencia de la fuerza inica de cada una de las especies que participa; sin embargo como en el anlisis qumico se trabajan con soluciones diluidas este efecto es despreciable y tiende a la unidad. Cuando se trabajen soluciones concentradas, esta ecuacin no tiene sentido. Las reacciones de precipitacin comprenden un equilibrio entre una sustancia slida y los iones que la componen, por ello la expresin del equilibrio es mucho ms simple; hagamos uso de una ecuacin generalizada: FGSLIDO fF+gG

En la realidad encontramos dos fases: una slida y otra lquida, las dos se encuentran en equilibrio y es posible establecer un conjunto de comportamientos debidos a la interaccin soluto solvente como lo mencionamos atrs, la condicin de la solucin sobresaturada y la cantidad de soluto que se encuentra disuelto en una cantidad definida de solvente. La expresin de su ecuacin de equilibrio es:

Observemos algunos detalles que hacen especial este tipo de equilibrio: en primer lugar la forma como diferenciamos la constante, generando la condicin de cambio de su nombre por la de Constante de producto de solubilidad y, en segundo lugar, no aparece la concentracin del reactivo as hallamos establecido que existe en el sistema qumico considerado pero, como establecimos tambin unas condiciones de estado estndar, el slido sin disolver se encuentra en estado fundamental quedando como denominador el nmero uno; por convencin no lo escribimos. Por consiguiente, el principio de producto de solubilidad, en general, puede enunciarse as: en una solucin saturada de un electrolito difcilmente soluble, el producto de las concentraciones molares de los iones, elevada cada una a la potencia igual al nmero de veces que existe en la frmula, es una constante a una temperatura dada52. Veamos la tabla 20 que presenta valores de estas constantes, y utilicmoslos en la realizacin de algunos ejercicios para demostrar el cumplimiento de los principios estudiados arriba. Tomemos el primer compuesto de esa tabla, el bromuro cuproso. La reaccin de disolucin en agua ser: CuBr
51 52

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KPS = [F]f [G]g Cu+ + Br-

AYRES, Gilbert H. Anlisis qumico cuantitativo. Op. Cit., p 55 62. RAMREZ, Bernal. Ins de. GAVIRIA Salazar, Luis Enrique. MORALES, Alicia Luca. YOUNG, Torres Stella de. Qumica analtica. Bogot, UNISUR. 1996., p. 141.

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La constante de producto de solubilidad ser: KPS = [Cu+] [Br-] = 4,2*10- 8 Con estos datos podremos calcular la solubilidad, o cantidad de sustancia que se disuelve totalmente en un solvente dado y se expresa como g/L. Para ello recurrimos al lgebra suponiendo que X representa la cantidad molar de cada uno de los iones disueltos, que para el caso del bromuro cuproso sera nicamente dos ya que estn en la misma proporcin. La ecuacin de KPS queda: KPS = [X] [X] = 4,2*10- 8 = [X]2 La solubilidad queda expresada en molaridad (M) y correspondera a la raz cuadrada del valor de KPS, lo que equivale a 2,1*10- 5 M. Para pasarla a g/L, debemos efectuar el cambio teniendo en cuenta el peso molecular de la sustancia53, lo cual nos da 3,0*10- 3 g/L. Ahora, podemos efectuar una comparacin de los valores de las KPS entre las diferentes sustancias, observemos los dos primeros compuestos de la tabla 20; el bromuro de cobre y el bromuro de plata; si comparamos las solubilidades de cada uno de ellos podemos establecer que la del bromuro de cobre es ms alta que la del bromuro de plata (3,0*10- 3 g/L para el primero y de 1,65*10- 4) podemos establecer que el valor de la constante del producto de solubilidad es un ndice cualitativo de la solubilidad; un valor muy pequeo indica que la sustancia es casi insoluble y un valor mayor, que ella es soluble; ahora, recordemos que debemos tener un poco de cuidado con la regla ya que depende del nmero de iones que se encuentren en solucin ya que si estoa aumentan se modifica el comportamiento de la sustancia y se tendra que efectuar el clculo correspondiente. Ahora podemos tambin efectuar el clculo de la KPS si conocemos el valor de la solubilidad como en este caso; el cromato de bario tiene una solubilidad de 3,7*10- 3 g/L. Recordemos que las unidades de las constantes son moles por litro por lo que debemos efectuar el cambio correspondiente. Establecemos el peso molecular del cromato de bario: 253 g/mol, luego calculamos el nmero de moles disueltos en un litro de solucin: 1,4*10- 5 mol/L. Ahora escribimos la ecuacin de disolucin de la sal para establecer cuntos iones aparecen en la solvatacin: BaCrO4 Ba2 + + CrO42

Escribimos su constante de producto de solubilidad:

Como los dos iones son idnticos en su concentracin, el valor de la constante ser: KPS = [1,4*10- 5] [1,4*10- 5] = 1,96*10- 10

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KPS = [Ba2+] [CrO42 -] Tabla 20. Constantes de producto de solubilidad

53

No se ilustra el clculo por corresponder ms a los que ya trabaj en su curso de Qumica General. Si tiene alguna duda, resulvala en su grupo de estudio y si no es posible, hgalo con su tutor(a).

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Nombre del compuesto Bromuro de cobre (I) Bromuro de plata Carbonato de bario Carbonato de calcio Carbonato de estroncio Carbonato de magnesio Carbonato de plata Carbonato de plomo (II) Cloruro de mercurio (I) Cloruro de plata Cloruro de plomo (II) Cromato de plomo (II) Cromato de plata Fluoruro de bario Fluoruro de calcio Fluoruro de plomo (II) Fosfato de calcio Fosfato de plomo (II) Hidrxido de aluminio Hidrxido de calcio Hidrxido de cobre (II) Hidrxido de cromo (III) Hidrxido de hierro (II) Hidrxido de hierro (III) Hidrxido de magnesio Hidrxido de zinc Sulfato de bario Sulfato de estroncio Sulfato de plata Sulfuro de bismuto Sulfuro de cadmio Sulfuro de cobalto (II) Sulfuro de cobre (II) Sulfuro de estao (II) Sulfuro de hierro (II) Sulfuro de manganeso (II) Sulfuro de mercurio (II) Sulfuro de nquel (II) Sulfuro de plata Sulfuro de plomo (II) Sulfuro de zinc Yodato de bario Yoduro de cobre (I) Yoduro de plata Yoduro de plomo (II) 2.2

Frmula CuBr AgBr BaCO3 CaCO3 SrCO3 MgCO3 Ag2CO3 PbCO3 Hg2Cl2 AgCl PbCl2 PbCrO4 Ag2CrO4 BaF2 CaF2 PbF2 Ca3(PO4)2 Pb3(PO4)2 Al(OH)3 Ca(OH)2 Cu(OH)2 Cr(OH)3 Fe(OH)2 Fe(OH)3 Mg(OH)2 Zn(OH)2 BaSO4 SrSO4 Ag2SO4 Bi2S3 CdS CoS CuS SnS FeS MnS HgS NiS Ag2S PbS ZnS Ba(IO3)2 CuI AgI PbI2

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4,2*10- 8 7,7*10- 13 8,1*10- 9 8,7*10- 9 1,6*10- 10 4,0*10- 5 8,1*10- 12 3,3*10- 14 3,5*10- 18 1,8*10- 10 2,4*10- 4 2,0*10- 14 2,37*10- 12 1,7*10- 6 4,0*10- 11 4,1*10- 8 1,2*10- 26 7,9*10- 43 1,8*10- 33 8,0*10- 6 2,2*10- 20 3,0*10- 29 1,6*10- 14 1,1*10- 36 1,2*10- 11 1,8*10- 14 1,1*10- 10 3,8*10- 7 1,4*10- 5 1,6*10- 72 8,0*10- 28 4,0*10- 21 6,0*10- 37 1,0*10- 26 6,0*10- 19 3,0*10- 14 4,0*10- 54 1,4*10- 24 6,0*10- 51 3,4*10- 28 3,0*10- 23 1,57*10- 9 5,1*10- 12 8,3*10- 17 1,4*10- 6

KPS

Factores que influyen a la constante de producto de solubilidad.

Las reacciones de precipitacin se encuentran afectadas por los siguientes factores: 2.2.1 Efecto de la temperatura.

La temperatura modifica los valores de solubilidad aumentndolos o disminuyndolos dependiendo de la termodinmica de cada una de las reacciones de solvatacin que favorecen la reaccin de disolucin o la de cristalizacin respectivamente, en la mayora de los casos encontramos un comportamiento favorable hacia la disolucin como lo encontramos en la tabla 21: Tabla 21. Modificacin de KPS con la temperatura para el cloruro de plata54. Temperatura ( C) 4,7 9,7 25,0 50,0 KPS 2,1*10- 11 3,7*10- 11 1,56*10- 10 1,32*10- 9

Esto significa que se requiere definir unas condiciones estndar para los valores de la KPS para poder compararlos; se establece la temperatura ambiente y una atmsfera de presin. 2.2.2 Efecto del in comn.

Cuando a una solucin de un compuesto en equilibrio con su soluto se le aade uno de los iones que libera, el otro disminuye su concentracin para volver a mantener las condiciones de equilibrio iniciales. Ilustremos este caso con una solucin de sulfuro de cobre (II): CuS Cuya constante de producto de solubilidad ser: KPS = [Cu2 +] [S2 -] = 6,0*10- 37 Calculamos la concentracin de cada uno de los iones que se encuentran en solucin como lo hicimos con un ejemplo anterior. El valor de la solubilidad molar ser: 7,75*10- 19. Ahora, aumentemos la concentracin de iones cobre hasta 10- 10, entendemos que se debe modificar el equilibrio ocasionando la disminucin de los iones sulfuro, as: [Cu2 +] [S2 -] = 6,0*10- 37. Remplazando el nuevo valor de concentracin de iones cobre: [1*10- 10] [X] = 6,0*10- 37, despejamos X = 6,0*10- 27. Cu2 + + S2

Concluimos que la adicin de un ion comn produce una disminucin en la solubilidad de la fase slida sin afectar el valor de la constante a esa temperatura. Este principio se usa en la qumica analtica para efectuar una precipitacin cuantitativa de un ion de inters. No obstante, se debe tener cuidado ya que algunas sustancia en exceso del reactivo precipitante puede solubilizarse nuevamente al formar complejos. Veamos este otro ejemplo. Cul es la solubilidad del cromato mercrico, en g/L, en una solucin 0,1 M de cromato de potasio? Lo primero que hacemos es plantear la expresin de la constante de producto de solubilidad y establecer su valor: Hg2CrO4 2 Hg+ + CrO42

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KPS = [Hg+]2 [CrO42 -] = 2,0*10- 9

Si X es la concentracin molar del cromato mercurioso inicialmente disuelto, 2 X ser la concentracin del ion mercurio (I) en la solucin y 0,1 + X la concentracin del ion cromato; estamos suponiendo que existe
54

RAMREZ, Bernal Ins de, y otros. Qumica analtica., p. 155.

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mayor concentracin de cromato en la solucin 0,1 M proveniente del aporte de la sal de cromato mercurioso ya disuelta. Remplacemos en la expresin de la constante de producto de solubilidad: [2 X]2 [0,1 + X] = 2,0*10- 9 Si la desarrollamos nos encontramos con una ecuacin cbica, un poco compleja de resolver; no nos interesa el mtodo matemtico para hacerlo, por ello observando los valores de la constante, hallamos que el aporte por esta ionizacin inicial es realmente despreciable55 por lo que suponemos que [0,1 + X] [0,1]. Con esta aproximacin resolvemos la ecuacin as: 4 X2 = 2*10- 9/0,1 = 2,0*10- 8 Podemos calcular la raz cuadrada a cada miembro de la ecuacin: 2 X = 1,4*10- 4. Despejando X = 7*10- 5 M. Ahora transformamos a solubilidad sabiendo que el peso molecular del cromato mercurioso es 517,23 g/mol. El resultado final es: 3,6*10- 2 g/L. No olvide la importancia de efectuar el anlisis dimensional para poder expresar adecuadamente el resultado. 2.2.3 Efecto del ion no comn.

Se presenta cuando en el equilibrio presente en la solucin de una sal poco soluble se le aade otro electrolito con iones diferentes. La solucin salina formada tiene propiedades diferentes a las del agua pura, pero se establece que los iones cargados modifican la velocidad de la reaccin de cristalizacin; el exceso de cationes envuelve a los aniones desprendidos de la estructura cristalina del slido y lo mismo ocurre con los aniones que son rodeados por el exceso de los cationes del electrolito disuelto, modificando el equilibrio aumentando la solubilidad del slido en equilibrio con la solucin, desplazando el valor de la constante de producto de solubilidad. Este efecto se llama efecto sal. Por ejemplo, si al yoduro de mercurio (HgI2) se disuelve en una solucin de cloruro de potasio y en otro recipiente se le disuelve el yoduro mercrico en una solucin de sulfato de potasio, encontramos mayor concentracin disuelta en ste ltimo debido a que la proporcin de cargas en las dos soluciones es diferente en proporcin a las de yoduro de mercurio: en la primera la razn es uno a uno mientras que en la segunda es de dos a uno. 3. La tcnica de la gravimetra.

Estamos discutiendo este comportamiento, precisamente porque la gravimetra (del latn gravis que significa pesado) tiene como fundamento terico este tipo de equilibrio; sustancias que se encuentran en solucin pueden ser precipitadas aadiendo el elemento que les hace falta o cambiando las condiciones de estabilidad de la misma como lo vamos a discutir en seguida: 3.1 Condiciones.

Los fundamentos de estas tcnicas se establecieron en el siglo XIX, al observar los cambios que ocurran en la masa al transformar una sustancia en otra y comprende una gran variedad de mtodos basados en la determinacin de un determinado peso de un analito o especie analizada. Como esta determinacin se hace en una balanza de buena exactitud, estos mtodos son los ms exactos de la qumica analtica. El procedimiento que se sigue en estas tcnicas, en lneas generales, comprende al menos tres etapas: Figura 7. Etapas de un anlisis gravimtrico. Si usted efecta el calculo de la solubilidad encuentra que es de 8,7*10- 4 M para el ion cromato proveniente del cromato mercurioso, luego es vlida la aproximacin.
55

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MUESTRA CON EL COMPONENTE A SER ANALIZADO.

TRATAMIENTO QUMICO ADECUADO

MODIFICACIN QUE PUEDE SER PESADA Y RELACIONADA CON EL COMPONENTE DE INTERS.

El material de origen puede ser un slido o un lquido y que contiene en cantidad suficiente el componente analtico de inters, de donde se toma una muestra exactamente medida. El tratamiento qumico corresponde a la aplicacin de una tcnica debidamente probada y que permite la extraccin del componente analtico de inters y su transformacin en un compuesto medible mediante su masa en las condiciones del laboratorio. El compuesto obtenido finalmente contendr en su composicin o ser el elemento analtico de inters proveniente nicamente de la muestra, el cul podr despus ser relacionado con la muestra de origen y establecer las proporciones en las cuales el analito determinado se encuentra en ella. Cada mtodo gravimtrico tiene sus propios problemas tcnicos, condiciones especiales de acuerdo a las transformaciones qumicas utilizadas, es necesario indagar previamente en la literatura sus detalles, procedimientos y equipos utilizados con el fin de obtener resultados reproducibles y comparables con los usualmente reportados. 3.2 Mtodos.

Las tcnicas que se suelen emplear en la determinacin de analitos de inters las podemos agrupar en tres: 3.2.1 Electrodeposicin. Precipitacin. Volatilizacin.

Tcnicas de electrodeposicin.

El analito de inters es un metal y se deposita de su solucin mediante su deposicin en el ctodo de una celda electroqumica inerte, mediante la aplicacin de una determinada cantidad de corriente en un tiempo determinado. El anlisis simplemente se reduce a pesar el electrodo antes de la reaccin y despus de la reaccin luego de limpiarlo y secarlo cuidadosamente; es un mtodo rpido y muy sencillo que requiere observar las condiciones en que se debe efectuar la electrodeposicin. No ahondaremos ms en el asunto ya que en el campo de los alimentos esta tcnica no tiene ningn inters. 3.2.2 Tcnicas de precipitacin.

Son los procedimientos ms utilizados y que generalmente identifican a la gravimetra. Las condiciones en que se deben efectuar este tipo de anlisis son: La reaccin de precipitacin debe tender, principalmente, a la formacin del precipitado; por ello se necesita conocer las condiciones que favorecen el desplazamiento del equilibrio de la reaccin hacia el analito de inters. La solubilidad del precipitado, en la solucin madre, debe ser de una magnitud tan pequea que la cantidad de componentes que queden en la solucin, sea despreciable en comparacin con la cantidad total original de dicho componente que el mtodo no la puede detectar. El precipitado debe ser puro o tener un grado de pureza conocido o ser fcilmente transformado a otra especie ms pura al momento de efectuar la medicin final. El precipitado debe tener una forma fsica adecuada, de tal manera que sus partculas tengan un tamao apropiado para facilitar operaciones de recuperacin, lavado y secado al momento de disponer de la especie final para determinar su masa.

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Para comprender mejor las anteriores exigencias, es necesario que revisemos el proceso de precipitacin y las condiciones a tener en cuenta en la formacin de los precipitados y el tratamiento posterior al que se someten para establecer la forma ms adecuada del analito en la determinacin final de su masa. En todo proceso de precipitacin, el tamao final promedio de las partculas, naturaleza y pureza depende de tres factores principalmente: Las condiciones en las que se efecta la precipitacin. Las caractersticas de las sustancias precipitantes. El tratamiento posterior del precipitado.

Recordemos que el producto ideal de este tipo de anlisis debe ser muy insoluble, fcilmente filtrable, muy puro y de composicin conocida y constante. Si logramos disolver nuestra muestra o si ya la disponemos en solucin, debemos reunir las condiciones adecuadas para precipitar el analito. Cuando discutamos el fenmeno de solucin encontramos que existe un lmite de solubilidad dependiendo de la concentracin y la temperatura donde hallaremos un valor mximo donde ya no se disuelve ms sustancia; al alcanzar esa condicin nuestro sistema se denomina solucin sobresaturada y si se modifica comienza a establecerse un equilibrio con la fase slida no disuelta. Nuestras tcnicas deben garantizar alcanzar dicha condicin para que comience a formarse el precipitado de inters. El anlisis de tal fenmeno comprende dos situaciones: alcanzar la condicin de sobresaturacin y el logro de la nucleacin al interior de la solucin para comenzar la cristalizacin del slido. Estos ncleos son partculas de slidos muy pequeas generalmente formados por aglutinaciones de los mismos iones manteniendo una estructura cristalina definida para la sustancia y se estima que deben ser entre ocho y diez iones, luego comienza su crecimiento de manera catica generando partculas coloidales de aspecto diverso, con tamaos comprendidos entre 1000 tomos y dimetros de 10- 7 cm. Si en la solucin existen impurezas slidas muy pequeas56, pueden tornarse tambin en centros de nucleacin. En la medida en que se deje en contacto las sustancias en reaccin, los ncleos formados comenzarn a modificar su tamao hasta precipitar, siguiendo este orden: Iones (10- 8 cm) grupos de nucleacin (10partculas de precipitado (> 10- 4 cm).

Dependiendo del grado de sobresaturacin alcanzado, se aumenta proporcionalmente el nmero de ncleos. Cmo podemos lograrlo? El crecimiento de las partculas se puede modificar mediante tres tcnicas: i. ii. iii. Elevar la temperatura de la solucin para incrementar la solubilidad, reducir la sobresaturacin relativa. A Agregar lentamente el agente precipitante, agitando vigorosamente evitando alta condiciones locales de alta sobresaturacin en el punto en que el reactivo precipitante se mezcla con el analito. Utilizar volmenes grandes de solucin, de manera que las concentraciones de analito y precipitante sean bajas.

Lo anterior tiene sentido con el problema que se tiene al recuperar el precipitado. Si es un coloide, la dificultad es poderlo recuperar ya que pasa los papeles de filtro utilizados para su separacin de las aguas madres, adems de si queda algo retenido cuando se hace el proceso de lavado tendremos el fenmeno de las partculas caminantes que corresponden a coloides que se van desplazando con el lquido de lavado por fuera del papel de filtro. Esto lo podemos controlar mediante la floculacin que consiste en eliminar las cargas que dan la estabilidad a los coloides inicialmente formados en el proceso de precipitacin, para ello

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8

a 10-

cm) partculas coloidales (10-

a 10-

cm)

56

Este contratiempo no se puede eliminar ya que el agua destilada y los reactivos utilizados no se encuentran libres de las partculas de polvo, pedazos microscpicos de vidrio y que en millones se encuentran suspendidas en las soluciones utilizadas o preparadas.

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recurrimos al efecto del ion comn aadiendo un exceso medido del agente precipitante, modificando las condiciones de temperatura de la solucin o dejando madurar los precipitados durante cierto tiempo57. Como podemos comprender, el xito de la formacin del precipitado y luego su separacin y purificacin dependen de las condiciones en que se aplica la tcnica correspondiente, pero todava no tenemos la garanta de que est completamente puro ya que puede incluir en su estructura cristalina otras partculas extraas, adsorbidas a su superficie otras sustancias provenientes de los lquidos madre de cristalizacin o la inclusin de lquido madre dentro del floculo proveniente de un coloide. Suponemos que ya tenemos nuestro precipitado recuperado sobre un papel de filtro; nuestro esfuerzo es tratar de dejarlo lo ms limpio de las aguas madres, sabemos que tenemos impurezas provenientes de dos fuentes las adsorbidas del lquido madre donde ha ocurrido la precipitacin (son inclusiones) y las ocluidas dentro de la estructura cristalina del precipitado; luego el solvente utilizado para tal fin debe reunir como caractersticas: Alta solubilidad de impurezas y baja solubilidad de nuestro precipitado. Sea un electrolito que impida la peptizacin58 del coloide recuperado. Un electrolito que facilite el intercambio inico para eliminar los iones absorbidos u ocluidos por el cristal del precipitado.

El xito alcanzado depende de la forma de lavado, pero se debe tener en cuenta que estos deben ser numerosos y con pequeas cantidades de solvente que con volmenes ms grandes. Si hay alguna disolucin de precipitado se va a obtener la misma prdida pero se garantiza que el precipitado se encuentra mucho ms limpio de los contaminantes del lquido madre en el primer proceso que en el segundo. Por ltimo tenemos que secar o transformar en otra sustancia ms estable nuestro precipitado ya que en esta forma encontramos un slido mucho ms puro y que representa la cantidad de analito de inters buscado en la muestra inicial. Esto porque estamos ya efectuando la determinacin como tal, es decir, la medicin del peso de analito obtenido, el secado normalmente se hace a temperaturas de 100 C para eliminar el solvente de lavado y se puede determinar una vez fro el peso que tiene, finalizando la experiencia. Pero si este residuo no cumple todava con la condicin de ser un compuesto de composicin constante y conocida, necesariamente se tiene que transformar en otro que realmente cumpla esa condicin por ello se recurre a la calcinacin ya que los xidos obtenidos suelen ser qumicamente ms estables y de composicin conocida, aqu recurrimos a la mufla donde trabajamos temperaturas cercanas a los 1000 C donde la mayora de sustancias inorgnicas se nos transforman en xidos.

3.2.3

Tcnicas de volatilizacin.

Se fundamentan en la deteccin de la prdida de peso o en la recuperacin de masa mediante ciertos aditamentos y modificaciones qumicas que recuperan las sustancias volatilizadas. Estas tcnicas tienen mayor importancia en la industria de alimentos ya que permiten la cuantificacin de compuestos de inters como es el caso de la humedad, cenizas y extracto etreo como lo vimos en la actividad uno de la anterior unidad. El otro se utiliza para determinar la composicin elemental de sustancias orgnicas. Discutamos brevemente los fundamentos del anlisis por combustin. Esta tcnica se ha depurado tanto que se ha tornado en el paso obligado cuando se trata de la caracterizacin e identificacin de nuevas sustancias y existe un equipo comercial para efectuar este anlisis de rutina.
57

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Este procedimiento se llama digestin, envejecimiento o maduracin de Ostwald. Permite la redisolucin de las partculas ms pequeas y su deposicin en las estructuras cristalinas ms grandes, aumentndolas y facilitando su recuperacin en la filtracin. 58 La peptizacin es la dispersin nuevamente del coloide al modificar las condiciones electrolticas en que fue precipitado.

124

Se pesa una determinada cantidad de la sustancia orgnica de inters, se calcina bajo atmsfera de oxgeno y los productos se pasan por catalizadores (como tela de platino, xido de cobre, xido de plomo y xido de manganeso), los productos de esa combustin (bixido de carbono, agua y otros xidos) pasan por cmaras que hacen la retencin selectiva de esas productos como agua en la cmara de pentxido de fsforo, la de ascarita (asbesto con hidrxido de sodio) que recupera el bixido de carbono. El equipo tiene una cmara que impide el acceso de bixido de carbono y de agua desde el medio ambiente. Posteriormente se pesa cada cmara y la diferencia de peso permite establecer la proporcin de carbono e hidrgeno de la muestra. La determinacin del agua y voltiles en los alimentos es ms sencilla; consiste en la determinacin de la masa de la muestra, someter a calentamiento en una estufa por determinado tiempo y, luego de estar fra, volver a pesarla para cuantificar la diferencia de peso. Dicha prdida equivale al agua y a los voltiles que perdi la muestra durante el anlisis. Con respecto a la cuantificacin del extracto etreo, el proceso consiste en medir una cantidad de muestra seca y someterla a extraccin con un solvente orgnico. El recipiente de recoleccin est previamente pesado, luego de efectuada la extraccin, se evapora el solvente, se verifica que no existen residuos de vapor mediante secado del extracto que una vez fro de determina nuevamente la masa, la diferencia de pesos nos permite tener el dato para la cuantificacin de la grasa que tiene dicho producto alimenticio. 3.3 Metodologa en el anlisis gravimtrico.

En la unidad anterior discutimos cmo se debe obtener la muestra y las condiciones en que se debe almacenar para que mantenga sus caractersticas. Ahora vamos a utilizarla para efectuar la determinacin analtica por gravimetra de algunos de sus componentes. Aqu explicaremos la secuencia de pasos general que tiene cada tcnica haciendo la salvedad de lo comentado ms arriba: es necesario recurrir a la literatura para establecer claramente la secuencia y condiciones en que se tiene que efectuar cada ensayo, especialmente para buscar su reproducibilidad y comparar los resultados obtenidos con otros ya publicados. Buscamos que usted tenga un conocimiento previo de los equipos a utilizar y las operaciones comunes que puede realizar para lograr una experiencia de aprendizaje significativa, de modo que pueda generar los criterios que requiere para ordenar e interpretar los resultados del anlisis, propsito central de este curso. La figura 8 ilustra las operaciones comunes en cualquier tipo de anlisis gravimtrico. Figura 8. Operaciones seguidas en un anlisis gravimtrico. MUESTRA

ELECTRODEPOSICIN

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DETERMINACIN DEL PESO DE LA ALCUOTA PRECIPITACIN, FILTRACIN LAVADO SECADO Y/O CALCINADO PESADO

VOLATILIZACIN

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RESULTADO FINAL

La alcuota corresponde a una parte cuantitativa y representativa de la muestra que se conoce exactamente, es decir, que aunque desconocemos las proporciones de los elementos que la componen sabemos cunta masa posee puesto que la hemos medido utilizando una balanza. En el laboratorio es posible utilizar la balanza mecnica y la electrnica. Sin embargo el principio fundamental es el mismo: comparar dos masas, una de ellas es conocida exactamente que sirve de referencia para establecer si son iguales, se establece un equilibrio que siempre busca un valor de cero, o para decidir que no son iguales y se sigue efectuando la comparacin de que realmente estn en equilibrio. Una vez logrado se efecta la medida determinando cul es la cantidad de masa que tiene el mismo peso. Esto porque las condiciones de la gravedad en el laboratorio se suponen homogneas. No se describe la diferencia de los dos tipos de balanza y se deja en la inquietud del estudiante por conocerla. Mencionaremos tres factores a tener en cuenta en su uso: la sensibilidad que poseen por la vibracin, por lo que se deben instalar en mesas de mrmol, la necesidad de efectuar la adicin o sustraccin de masa teniendo la balanza en freno o apagada para no afectar su sensibilidad, cuando se efecta la determinacin del peso y el cuidado de mantener las puertas de la balanza cerradas, para impedir el efecto de empuje aerosttico por corrientes de aire externo o por diferencias de temperatura, requiriendo de las muestras tener la misma temperatura ambiente de la balanza. Lo anterior implica que la determinacin de masas siempre se hace por diferencia ya que nunca se debe colocar la muestra a pesar sobre el platillo sino que se debe utilizar un vidrio de reloj, un pesa sustancias con tapa especialmente si la muestra es higroscpica o un pequeo vaso de precipitados los cuales deben estar limpios, secos y a temperatura ambiente. Se pesan primero vacos escribiendo en el cuaderno de laboratorio su peso o masa y luego si con la cantidad de sustancia requerida. Si falta o sobra es necesario definir si realmente est en exceso o defecto para calcular la porcin a aadir puesto que no es recomendable aadirla o quitarla estando la balanza en posicin de mxima sensibilidad por la posibilidad de daarle esta caracterstica. Ya hemos mencionado los cuidados especficos a tener en cuenta durante la determinacin analtica, simplemente que esas reacciones ocurren en vasos de precipitados y la agitacin se efecta con un agitador provisto de una pequea banda de caucho, por ello tambin se le llama polica, que funciona para la homogenizacin rpida de los reactivos, la facilidad de trasvase del precipitado desde el vaso hasta el papel de filtro y los lavados efectuados para recuperarlo o para concentrarlo dentro del filtro de papel. El traslado del precipitado al papel de filtro requiere el montaje previo del equipo de filtracin, que consta de un soporte universal, un aro metlico con nuez, un embudo de filtracin de vstago largo y un vaso de precipitados seco. Como nos interesa recuperar el slido nuestra atencin se debe centrar en el embudo; para su recuperacin se recurre a un papel de filtro que tiene unas caractersticas especiales tanto en su composicin como en tamao de poro. La tcnica recomienda el tipo de papel requerido por lo que no vamos a detenernos describindolo, simplemente utilizamos el recomendado el cual se debe plegar y montar en el embudo para que calce perfectamente sin dejar burbujas de aire entre el papel y la pared interna, por ello se recomienda humedecerlo con agua destilada o el solvente de lavado utilizando un frasco lavador. La figura 9 esquematiza este proceso. Figura 9. Montaje, plegado de papel y proceso de filtracin.

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Si requerimos calcinar el precipitado para su transformacin en otra sustancia ms estable, es necesario hacer el traslado del papel conteniendo el precipitado cuidadosamente a un crisol de porcelana provisto de tapa y efectuar un primer proceso de secado y combustin de toda la materia orgnica que se tiene puesto que no es conveniente hacerlo en la mufla debido a la dispersin de los gases de combustin, desconociendo cun txicos pueden ser y a que es poco esttico observar en las paredes del equipo el carbn acumulado por la combustin incompleta, por ello se hace un tratamiento previo utilizando un trpode que tiene un tringulo de porcelana donde se coloca inclinado el crisol de porcelana, se le coloca la tapa dejando parcialmente destapado y se comienza a aumentar la temperatura hasta la combustin completa que se suspende cuando el fondo del crisol ha tomado color rojo. Como hay desprendimiento de gases, se recomienda efectuarlo en una vitrina y cuidando el aumento de temperatura para que no haya prdida del slido de inters por proyeccin debidas a diferencias de temperaturas localizadas. La figura 10 ilustra ese procedimiento. Figura 10. Tcnica de calcinacin.

Ya sea que la muestra se haya secado o calcinado, es necesario dejarla alcanzar la temperatura ambiente del laboratorio; al existir el riesgo de hidratacin de la muestra, lo que afecta el resultado final, se suelen dejar dentro de un recipiente de vidrio llamado desecador que contiene dos zonas separadas por una placa de porcelana. En el fondo se encuentra un agente desecante que mantiene el interior a un nivel muy bajo de humedad, un espacio superior donde se coloca el pesa sustancia o el crisol de porcelana calientes, manipulados con una pinza para crisol, se tapa parcialmente para evitar vaco generado por el desplazamiento de cierto volumen de aire ocasionado por la diferencia de temperatura que dejara relativamente sellado el equipo impidiendo su apertura ya que la boca y la tapa encajan perfectamente y para facilitar su movimiento se encuentra lubricada con grasa para desplazarla horizontalmente, no como hacemos con otro tipo de artefactos que tienen tapa. 3.4 Manejo de los datos y expresin de resultados.

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Las tcnicas gravimtricas establecen ciertas condiciones en la manipulacin de la muestra que incluye la preparacin de soluciones concentradas a partir de las cuales se efectan diluciones que se deben tener en cuenta, lo mismo que relaciones entre el analito determinado y el resultado final en que debe ser expresado, por ello es necesario tener en cuenta esos cambios y cmo estn relacionados con las modificaciones efectuadas a la muestra y al analito determinado. Los clculos ms simples son los requeridos para las tcnicas de electrodeposicin y la de volatilizacin y calcinacin puesto que nicamente se relacionan dos masas por diferencia y el clculo final para expresar el resultado final. Ilustremos con el caso de determinacin de humedad y voltiles en una muestra de alimento. Digamos que queremos determinar la humedad que tiene un lote de leche en polvo; efectuamos el dimensionamiento del

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lote, establecemos los criterios para determinar cul es la cantidad de muestra requerida, la tomamos, homogenizamos, marcamos y llevamos cuidadosamente al laboratorio. Una vez all medimos un peso definido por la tcnica, dice que se pesen exactamente cinco gramos, luego la colocamos en una estufa a 105 C por una hora, pasamos al desecador y una vez fra la pesamos. El registro que llevamos en nuestro cuaderno de laboratorio tiene el siguiente aspecto: Tabla 22. Determinacin de la humedad de leche en polvo. Leche en polvo: la vaquita risuea Nmero de lote: 3147 S -05-22-05 Fecha de recoleccin: 05-23-05 Peso de muestra: 200 g Mtodo: Azar y tabla MS. Determinacin Ensayo 1 Peso de la pesa sustancia vaco. 5,3697 g Peso de la pesa sustancia con leche. 10,2598 g Peso de la pesa sustancia con leche seca. 8,9598 g

Ensayo 2 4,8627 g 10,3785 g 9,0102 g

La tcnica nos comenta que debemos reportar el resultado en porcentaje de humedad, luego debemos utilizar una frmula sencilla para expresar dicho resultado:

PORCENTAJE DE HUMEDAD

PRDIDA DE PESO MUESTRA

100

El resultado obtenido es: 25 anterior59.

1 %, teniendo en cuenta el tratamiento de datos definido en el captulo

El otro caso, un poco ms complejo considera tratamientos de la muestra que incluye diluciones y transformaciones a otras especies qumicas ms estables. En este caso es necesario considerar el factor de transformacin volumtrico (relacin de un volumen pequeo tomado frente a otro mayor) y el factor gravimtrico, cuando se hace una relacin de masas entre especies qumicas diferentes. Tomemos un ejemplo concreto del campo de los alimentos. Se desea determinar por gravimetra la cantidad de hierro que se encuentra en morcilla, mediante la precipitacin del elemento como hidrxido frrico y su determinacin como xido frrico. La tcnica consiste en pesar una determinada cantidad de la muestra (unos 20 g), su calcinacin en medio de cido sulfrico concentrado para eliminar toda la materia orgnica posible, disolucin de los xidos en cido ntrico, diluir a 100 mL y aadir hidrxido de amonio al 10 % hasta lograr la precipitacin de todo el hidrxido de hierro, recuperar el precipitado sobre papel de filtro, lavar con agua caliente. Como puede tener algo de impurezas ocluidas, se disuelve en cido clorhdrico al 15 %, se precipita nuevamente con hidrxido de amonio, se filtra y lava controlando que no haya cloruros en las aguas de lavado. Finalizado se calcina en una mufla entre 650 700 C, se enfra y pesa el residuo final. El resultado final se debe reportar como porcentaje de elemento hierro presente en la muestra. Los resultados que se obtuvieron en un anlisis especfico fueron:

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Tabla 23. Determinacin de hierro en morcilla. Morcillas: el cerdo volador Fecha de recoleccin: 10-21-05 Mtodo: Azar y tabla MS.

Nmero de lote: 0124 g -10-19-05 Peso de muestra: 200 g

59

Debe analizar cuidadosamente los datos para aplicar la frmula. Si mira los datos al final de la tabla, su diferencia permite establecer la prdida de peso mientras que la diferencia de los dos primeros da la muestra tomada. Al final no olvide calcular el promedio y la desviacin estndar previa aplicacin de los criterios para aceptar o rechazar resultados estudiados en el tema cuatro de la primera unidad.

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Determinacin Peso de la pesa sustancia vaco. Peso de la pesa sustancia con muestra. Peso del crisol. Peso del crisol con xido frrico.

Ensayo 1 10,5463 g 29,9025 g 5,6892 g 5,7016 g

Ensayo 2 9,8999 g 29,4663 g 6,0234 g 6,0360 g

Lo primero que hacemos es verificar la forma en que debemos reportar el anlisis, normalmente estos resultados se expresan en mg/100 g de muestra, para el elemento hierro60. Luego escribimos el esquema de transformacin del elemento hierro desde su fuente original; como lo sabemos, el hierro en seres vivos superiores est asociado a la hemoglobina, protena presente en la sangre siendo necesario efectuar su mineralizacin mediante digestin cida y calcinacin que nos lo lleva hasta xidos, luego solubilizamos todo el hierro en la forma de in frrico (Fe3 +) mediante su digestin con cido ntrico concentrado, posteriormente se precipita de all como hidrxido frrico como una forma de purificacin y nuevamente se lleva a xido frrico forma en la cual se determina gravimtricamente. Podemos efectuar el seguimiento de reacciones, pero finalmente nos interesa es: FeORGNICO Fe2O3 Fe Para efectuar los clculos tenemos que hacer consideracin sobre una expresin que permite resolver ms rpidamente la transformacin de elementos, como en nuestro caso el paso de xido frrico a hierro elemental en el establecimiento de las proporciones finales en las que se debe expresar el resultado, esta expresin se conoce como el factor gravimtrico. Los principios que permiten su obtencin corresponden a la constancia en la composicin de las sustancias y a las relaciones ponderales o estequiomtricas entre las reacciones qumicas, permitindonos considerar las siguientes reglas para su obtencin: En el clculo solamente intervienen la sustancia cuyo peso se busca y el compuesto cuyo peso se conoce, sin considerar ninguno de los productos intermedios. El peso atmico o molecular de la sustancia buscada se coloca siempre en el numerador y el de la sustancia conocida en el denominador. El nmero de molculas de cada una de las sustancias relacionadas debe ser tal que contenga el mismo nmero de tomos a los referidos en el anlisis.

En nuestro caso, la ecuacin simplificada nos permite establecer el factor gravimtrico a utilizar, sabiendo que la sustancia desconocida es el hierro y la conocida el xido frrico, luego la proporcin, en masas moleculares, ser:
FACTOR GRAVIMTRICO =

En la misma forma es posible establecer una relacin entre las masas definidas para la muestra y la expresin final de los resultados, de modo que podemos derivar una ecuacin que nos permite alcanzar el resultado esperado: mg Fe 100 g 2 Fe 100 g

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2 Fe Fe2O3 = Masa Fe2O3 1000 mg/g Fe2O3 Muestra

Desarrollndola con los datos de la tabla 23, tenemos como resultado final: 44,92 g de morcilla.

0,17 mg de hierro en 100

MINISTERIO DE SALUD, Instituto Colombiano de Bienestar Familiar. alimentos colombianos. 6 ed. Bogot, I.C.B.F. 1992, p. 89.

60

Tabla de composicin de

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La recomendacin es recurrir a los textos recomendados en la gua para desarrollar la suficiente destreza para poder resolver este tipo de transformaciones que pueden parecer muy engorrosas. No olvidar las recomendaciones establecidas para el factor gravimtrico, ni descuidar las relaciones que se deben establecer con lo datos encontrados en el laboratorio o reportados en los mismos ejercicios.

ACTIVIDAD PRCTICA 5

1) Explique, con base en las reglas de solubilidad en el agua, cules de los siguientes compuestos son solubles o no en dicho solvente: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Compuesto K3[Fe(CN)6] K2PtCl6 (NH4)2S2 + (NH4)2S4 + (NH4)2S5 AgAsO2 AgO2 PbS HgCrO4 Hg2I2 BiI3 (BiO)2Cr2O7 Color Amarillo Amarillo Amarillo Amarillo Caf a negro Caf a negro Rojo Verde opaco Caf a negro Amarillo Solubilidad

2) Elabore un mapa conceptual que relacione solubilidad, solvatacin, equilibrio qumico, constante de producto de solubilidad y las unidades de expresin utilizadas tanto en soluciones como en constante de producto de solubilidad. 3) Escriba las constantes de producto de solubilidad de las siguientes sustancias y el valor numrico de las mismas: Hidrxido de aluminio, sulfuro cprico, carbonato de bario, tiocianato cuproso, oxalato de bario, sulfuro frrico, sulfuro de bismuto, yodato de plomo, fluoruro de calcio, cloruro mercurioso. 4) Ordene de mayor a menor la solubilidad que tienen estas sustancias solubles en agua: Sulfuro de zinc, sulfato de estroncio, sulfuro de plata, sulfuro de nquel, oxalato de magnesio61, fluoruro de plomo, sulfuro ferroso, Bromuro cuproso, cromato de calcio y carbonato de bario. 5) Calcule el valor de KPS para las siguientes sustancias, utilizando el valor de su solubilidad: Sulfato de plata (1,8*10- 2 M), bromuro de plata (0,11 mg/L), yodato de plomo (1,0*10- 2 g/L para el ion yodato), fluoruro de bario (7,5*10- 3 M), sulfato de calcio (1,1 mg/mL) y fluoruro de calcio (0,016 mg/mL). 6) La sal BC se disuelve en agua hasta alcanzar el equilibrio: BC B+ + C- + H

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Las KPS del oxalato de magnesio es 8,6*10- 5, del cromato de calcio corresponde a 2,3*10- 2 y del carbonato de bario 8,1*10- 9; el resto las encuentra en la tabla 20.

61

130

Explique qu ocurre cuando: Se le adiciona calor, se enfra la solucin, se le aaden 3,6 g de una sal DC y se le agregan 3,8 g de otra sal AX. 7) Pronostique qu le ocurre a la solubilidad del sulfuro de mercurio (I) cuando a su solucin saturadas adicionamos las siguientes sales: cloruro de sodio, sulfato de sodio, nitrato de sodio y cloruro de amonio. 8) Elabore una monografa sobre la balanza analtica, explicando su principio, los factores que afectan su precisin y exactitud, los cuidados que se deben tener con ellas y cmo se puede calibrar. En lo posible establezca ecuaciones matemticas que muestren fcilmente las variaciones ms significativas en la sensibilidad de estos equipos. Incluirla en su portafolio. 9) Complemente el trabajo anterior estableciendo la composicin, clasificacin de papel de filtro y otras tcnicas de filtracin como son la de vaco, diferencia entre secado y calcinacin (tener en cuenta equipo y diferencias de temperatura) y los cuidados que se deben de tener con el desecador, lo mismo que hacer un listado y definir las propiedades que debe tener un agente desecante. Incluir ese trabajo en su portafolio. 10) Resuelva los siguientes problemas: Elabore los diagramas de flujo que ilustren el procedimiento seguido para determinar las cenizas en muestras como: fruta fresca, salchichn cervecero, jugo de tamarindo, arroz, pltano, papa. Cul es el peso del azufre contenido en 8,9576 g de sulfato de bario? Se pesan 1,2050 g de un fluoruro soluble el cual se precipita como CaF2, pesando 0,5953 g. Cul es el porcentaje de fluoruro que tiene la muestra? En el anlisis de un fertilizante, se encontraron los siguientes resultados: Peso de muestra: Peso cpsula + muestra: Peso cpsula + muestra seca: Peso crisol tarado + muestra: Peso crisol tarado + cenizas:

Calcule los porcentajes de humedad y de cenizas que tiene la muestra analizada. Establezca los factores gravimtricos en cada uno de los siguientes casos: Pasar de: AgCl KClO4 (NH4)2PtCl6 Mn3O4 Cu2(SCN) BaSO4 Nb2O5 Mg2P2O7 KClO4 Fe3O4 CaCO3 Fe(OH)3 Au(OH)3 Pt(OH)2 SnO A: KClO4 K2O NH3 Mn2O3 HSCN Ba Nb MgO K2O Fe2O3 Ca Fe Au Pt Sn

MATERIAL EN REVISIN
0,5000 g 10,4580 g 10,3795 g 8,7500 g 8,7155 g

131

ZnS

Zn

11) Para analizar un compuesto que contiene calcio, se pesaron exactamente 2,0000 g, se disolvieron a un volumen final de 500 mL. Se tom una alcuota de 150 mL precipitndose cuantitativamente como hidrxido de calcio, se calcin hasta obtener xido de calcio cuyo peso fue de 0,0850 g. Cul es el porcentaje de CaO y Ca que tiene la muestra? 12) Un mineral contiene magnesio, se le tom una muestra de 4,0000 g, se disolvieron hasta un volumen exacto de 750 mL, luego se midi una alcuota de 200 mL, precipitndose cuantitativamente como hidrxido de magnesio, posteriormente se calcin hasta xido de magnesio obteniendo un peso de 0,9875 g. Calcule el porcentaje de magnesio que posee el mineral.

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132

TEMA 2.

VOLUMETRA
Segundo conjunto de mtodos analticos clsicos basados en la medicin de volmenes. Se relacionan con la gravimetra para poder establecer con exactitud la concentracin de las sustancias a utilizar como elementos de comparacin en la determinacin de una sustancia desconocida, mediante la comparacin de volmenes. Esto significa necesariamente que los dos compuestos se encuentran en solucin. 1. Conceptos.

El anlisis volumtrico o titulomtrico comprende tcnicas de medicin del volumen del reactivo requerido (titulante) para que reaccione exactamente con todo el analito (sustancia desconocida y que se desea conocer su cantidad) presente en un volumen exactamente conocido de la solucin. Las condiciones que requiere un sistema para ser analizado por estas tcnicas son: La reaccin involucrada debe ser estequiomtrica, es decir que se conozcan los cambios entre reactivos, los productos y las proporciones que se dan entre ellos. Debe ser rpida, es decir que se transforme en el menor tiempo posible en los productos de la reaccin. Permita la deteccin del punto final de la reaccin, es decir, cuando se ha acabado el reactivo limitante, que correspondera a la concentracin del analito. Se complete totalmente, de modo que no quede analito sin determinar; esto significa la necesidad de aadir un exceso medido de titulante para garantizar que la concentracin del analito remanente no sea detectable en las condiciones del ensayo. Los mtodos volumtricos requieren disponer de una sustancia patrn, que en algunos casos puede ser parte de la solucin titulante, siempre y cuando cumpla con los siguientes requerimientos: Tener una composicin exactamente conocida y de fcil obtencin. Su pureza debe ser muy alta o cercana al 100 %. Mantener su estabilidad en las condiciones del ensayo (no ser afectada por la gravedad, la temperatura, la humedad o la luz). Muy soluble en el solvente utilizado, generalmente agua destilada. Con alto peso molecular, de modo que su peso equivalente tambin lo sea. En la mayora de procedimientos analticos, el titulante no es un estndar primario pero se ha podido establecer por convencin la posibilidad de determinar con exactitud su concentracin mediante la determinacin del punto de equivalencia entre el estndar primario y la concentracin real del analito, utilizando la misma tcnica solo que se establece una relacin entre masa y volumen empleando unidades qumicas como la Molaridad y la Normalidad. Este procedimiento se llama estandarizacin y permite obtener una solucin estndar, es decir, una solucin que contiene una concentracin exactamente conocida de la sustancia activa.

MATERIAL EN REVISIN

133

Por lo general, los sistemas analticos utilizados en estas tcnicas no permiten visualizar directamente el cambio estequiomtrico requerido por lo que se necesita la adicin de los indicadores. Estos son sustancias que tiene una propiedad fsica (generalmente el color) que cambia al modificarse las condiciones que se dan en el punto de equivalencia: ha desaparecido el analito o hay un exceso de titulante. Determinar el punto de equivalencia es el secreto de la exactitud de esta tcnica, por lo que exige del analista un suficiente entrenamiento y experiencia para detectar cundo ocurre el cambio generando lo que se llama como error de titulacin; sin embargo se ha establecido tcnicas que ayudan a su minimizacin como son la titulacin de un blanco (un volumen equivalente al de la alcuota slo que sin el analito pero que contiene una cantidad igual del indicador, permite establecer el volumen de titulante requerido para efectuar el cambio en el indicador conforme a la destreza del analista y que se suele restar del volumen final de la titulacin con la muestra). El procedimiento de comparacin de la solucin valorada con una alcuota de la solucin con el analito, se denomina titulacin directa que auxiliados con un indicador apropiado nos permite determinar los volmenes equivalentes. En otros casos, cuando no es posible disponer de un indicador apropiado que nos ayude a la deteccin del punto de equivalencia, se aade un exceso medido de la solucin estandarizada y con otra medimos cuidadosamente el exceso, este proceso se denomina titulacin por retroceso. En la parte experimental del curso tendremos la oportunidad de entrenarnos en el uso de las dos tcnicas. 2. Fundamentos de la titulometra.

Como lo mencionamos arriba, se trata de establecer comparaciones de volmenes de una solucin de analito (A) con los de una titulante (T) para alcanzar una estequiometra definida por una ecuacin que podemos escribir as: A+TP+D Debemos considerar la posibilidad de un equilibrio qumico, pero aadimos un exceso muy pequeo para poder completar la reaccin o llevarla a concentraciones que no son posibles detectar por el mtodo. Imaginemos el procedimiento para efectuar el anlisis; inicialmente tomamos un volumen VA del analito, denominado alcuota, el cual aparece en una concentracin CA que no conocemos, luego la cantidad de analito que disponemos, se puede representar por la ecuacin: VA CA = Cantidad de A

Cuando comenzamos la titulacin, es decir aadimos volmenes conocidos del titulante, comienza a disminuir la concentracin de A por lo que podemos establecer la siguiente expresin matemtica: VA CA VT CT = Cantidad de A

Como es necesario tener en cuenta el volumen final, es necesario efectuar una correccin por dilucin a la anterior ecuacin por lo que quedara: VA CA VT CT VA + VT

MATERIAL EN REVISIN
Cantidad de A =

Esto significa que existir una zona de lento incremento de la concentracin de titulante porque no podemos despreciar el efecto del equilibrio, puesto que todava no hemos aadido ningn exceso y es posible que el producto del analito con el titulante se descomponga. Cuando hemos alcanzado el punto de equivalencia, el numerador de la anterior ecuacin tiende a cero, por matemticas sabemos que en toda funcin se puede hallar una pendiente, la cual a medida que se alcanza ese punto de equivalencia adquiere su mximo valor. Pasado, la pendiente comienza a disminuir porque empieza

134

a predominar excesos de titulante. Cuando analicemos las tcnicas de titulacin potenciomtrica podemos hacer evidente lo que hemos discutido aqu. Lo ms importante que tenemos que comprender en esta discusin es el cambio de concentracin establecido por la adicin continua de volmenes medidos del titulante, la condicin de equilibrio que se presenta en la reaccin del analito con el valorante y el efecto de dilucin que se obtiene en la concentracin final de las especies implicadas en el cambio qumico, como lo podemos deducir del concepto de soluciones y de su concentracin como se estudi en su curso de Qumica General. Para comprender mejor lo anterior, establezcamos las condiciones de la volumetra en trminos de comparar cantidades de sustancias. Sabemos que la concentracin de una sustancia la podemos establecer en unidades fsicas (gramos) y en unidades qumicas (moles y equivalentes) en referencia al volumen del soluto o de la misma solucin como lo encontramos en el tema anterior. Si ello es claro, podremos comprender las siguientes relaciones volumtricas que ayudan en la resolucin de los clculos: Nmero de moles = masa (g)/Peso Frmula (P.F.); Nmero milimol = mg/P.F. Molaridad (M) = mol/L = mmol/mL Nmero de moles de A = VA MA Si tengo la reaccin qumica hipottica: aA +bB pP+dD

Puedo establecer relaciones estequiomtricas entre ellos conforme a sus coeficientes estequiomtricos as: No moles de B/No moles de A = b/a = R. Luego: No mol B = No mol A (R) = VA MA (R) y masa de B (g) = VA MA (R) P.F.B

Ahora tenemos que no solamente se puede establecer una relacin de masas teniendo en cuenta sus pesos moleculares (o peso frmula), sino que es posible hacerlo teniendo en cuenta el cambio qumico que ocurre. Con este concepto es ms fcil comprender el significado del punto equivalente porque estamos estableciendo relaciones de cambio entre especies con carga (hidronios, hidroxilos, protones) y cambio de electrones; para ello debemos observar la ecuacin implicada para definir ese cambio. Por ello naci la Normalidad, establecida como la relacin del peso equivalente en un determinado volumen: Normalidad = No Equivalentes por litro de solucin = Eq/L y el equivalente se determina por la relacin del peso molecular con el nmero de cargas o de electrones cambiado en la reaccin qumica: Eq = P.F./No H+, OH-, e- cambiados. No equivalentes = g/Eq. No miliequivalentes = mg/mEq.

No EqA = VA NA y No EqB = VB NB. En el punto de equivalencia tenemos: No EqA = No EqB Por lo que: VA NA = VB NB Podemos, entonces, establecer estas otras relaciones:

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Masa de B = gB = VA NB EqB; %B = (gB/masa muestra) 100; %(P/V) = (gB/Volumen muestra) 100. Ms adelante tendremos la oportunidad de utilizarlas para resolver problemas; por ahora el reto es que usted verifique si son correctas o no, recurriendo a sus conocimientos de Qumica General y comprobndolo en su pequeo grupo de aprendizaje colaborativo o con su tutor(a).

135

3.

Clases de anlisis titulomtricos.

Se consideran cuatro a saber: cido base, de precipitacin, Redox y complejomtricas. Vamos a revisar los fundamentos y aplicaciones de cada una de ellas. 3.1 Volumetra cido base.

En sustancias que tienen la propiedad de ceder o aceptar protones, o de interactuar con el solvente para generar especies provenientes de este intercambio. Como el solvente ms utilizado es el agua, estudiaremos su comportamiento, la fuerza de los cidos y las bases y la hidrlisis de sales. Usaremos la definicin de Bronsted Lowry: un cido es la especie qumica que tiene tendencia a perder o a donar un protn, mientras que la base es la sustancia que tiende a aceptar o a recibir dichos protn. En todo equilibrio cido base se encuentran cidos y bases conjugadas de las sustancias inicialmente en interaccin: CH3COOH + H2O
cido Base Base conjugada

CH3COO- + H3O+ H+

cido conjugado

Base

NH3 + H2O
cido

Base conjugada cido conjugado

NH4OH +

En estos ejemplos encuentra un doble papel para el agua: acta como cido o como base, sin embargo esta propiedad no la exhibe frente a otras sustancias sino que en ella misma ocurre este cambio qumico al que se denomina autoprotlisis:
cido

H2O + H2O
Base

cido conjugado Base conjugada

H3O+ +

OH-

3.1.1

Autoprotlisis del agua.

El agua tiene una propiedad que le ha definido su capacidad como solvente universal: la posibilidad de establecer enlaces de hidrgeno ya sea con sustancias orgnicas o inorgnicas, su autoprotlisis le confiere la capacidad ambivalente de ser cido o ser base y la interaccin con algunas sustancias de carcter inico le permiten modificar su conductividad elctrica. Desde el punto de vista del equilibrio qumico, podemos expresar la constante de equilibrio para esta reaccin as: KEQ = [H3O+] [OH-] [H2O]2

Si remplazamos teniendo en cuenta que trabajamos con un litro de solucin para hallar su molaridad, encontramos que el denominador es muy grande y casi constante (55,6 g/mol) por lo que podemos integrar la ecuacin anterior as: KEQ(55,6)2 = [H3O+] [OH-] = KW

MATERIAL EN REVISIN
[H3O+] [OH-] = 1*10- 14 [H3O+] = [OH-] = 1*10- 7

Esta expresin de equilibrio se denomina constante del producto inico del agua, que a temperatura ambiente tiene un valor de 1*10- 14, de donde deducimos que en el agua pura la concentracin molar de los iones hidronio y de los iones hidroxilo es de 1*10- 7:

En soluciones diluidas el producto inico es el mismo que para el agua pura a una temperatura dada. Es decir, al solubilizar sustancias en agua, las concentraciones de los iones hidronio e hidroxilo pueden cambiar pero el producto inico se mantiene constante.

136

Para ilustrar lo anterior, es necesario el estudio de otro concepto como lo es la fuerza de los cidos y las bases. 3.1.2 La fuerza de los cidos y las bases.

Conforme al concepto de Bronsted Lowry, encontramos que un protn no existe solo en solucin sino que se asocia a la base, en nuestro caso al agua para formar el hidronio (H3O+); la mayor o menor facilidad de ceder o recibir un protn determina la fuerza de estas sustancias. As, los cidos y las bases fuertes lo ceden o reciben fcilmente, mientras que los considerados cidos y bases dbiles lo hacen muy lento y hasta cierto lmite estableciendo un equilibrio qumico donde identificamos un par de cidos cidos conjugados y de bases bases conjugados como lo habamos encontrado ms arriba. El fenmeno de disociacin de un cido o una base implica la modificacin de las caractersticas electrolticas del agua, un cido o base fuerte se disocia completamente aumentando la capacidad de transportar corriente elctrica, mientras que los cidos y bases dbiles slo aumenta un poco esa propiedad del agua, pudiendo demostrar el fenmeno de disociacin de esas sustancias. La disociacin de los cidos y las bases dbiles es una reaccin reversible que se puede representar: MA Su ecuacin de equilibrio qumico ser: [M+] [A-] KEQ = [MA] [M+] [A-]

Recordemos que la expresin de la concentracin de las sustancias en equilibrio corresponde a molaridad, es decir, moles/L. En la naturaleza existen sustancias clasificables como electrolitos dbiles como la sangre, la leche, los jugos de fruta, los jugos digestivos; el control de la concentracin del ion hidronio en el protoplasma vivo es un mecanismo de equilibrio de electrolito dbil, semejante al aqu estudiado. Los cidos y las bases monoprticas dbiles son sustancias que al disolverse en agua pierden o ganan un protn, hasta alcanzar un equilibrio qumico de poca extensin, como ocurre con los cidos frmico, actico y lctico o con el amoniaco: CH3COOH + H2O NH3 + H2O CH3COO- + H3O+

Las constantes de equilibrio son:

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NH4+ + OH[CH3COO-] [H3O+] [CH3COOH] [NH4+] [OH-] [NH3] Ka = Kb =

Las constantes de disociacin del cido (Ka) y de la base (Kb) representan el equilibrio del electrolito dbil con valores a 25 C y una atmsfera de presin en la tabla 24; incluimos en ella el valor de la concentracin del agua debido a que su concentracin se mantiene constante por lo que la ecuacin de la constante de disociacin queda simplificada a los reactivos y productos provenientes de la especie cida o bsica estudiada.

137

Tabla 24. Constantes de disociacin de algunos cidos y bases dbiles. cido Actico Acetil saliclico Arsnico Arsenioso Benzoico Brico Butanoico Carbnico Cianhdrico Ctrico Cloroactico Fenol Fluorhdrico Frmico Fosfrico Fosforoso Fumrico Gliclico Hidrazoico Hipocloroso Ion amonio Ion anilinio
Ion dimetil amonio Ion etanol amonio Ion etil amonio

Frmula CH3COOH C9H8O4 H3AsO4 H3SO3 C6H5COOH H3BO3

CH3CH2CH2COOH

Ka1 1,75*10- 5 5,8*10- 3 5,1*10- 10 6,28*10- 5

5,81*10- 10

H2CO3 HCN
HO2C(OH)C(CH2CO2H)2

Ion etiln amonio Ion hidrazinio Ion metil amonio Ion piperidinio Ion piridinio Lctico Malico Mlico Malnico Mandlico Nitroso o Ftlico Oxlico Perydico Pcrico Pirvico Propanoico Saliclico Succnico Sulfmico Sulfrico

Ion hidroxil amonio

Ion trimetil amonio

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+

ClCH2COOH C6H5OH HF HCOOH H3PO4 H3PO3 trans HOOCCH=CHOOH HOCH2COOH HN3 HOCl NH4+ C6H5NH3+ (CH3)2NH2+ HOC2H4NH3+ C2H5NH3+
NH3CH2CH2NH3+

1,52*10- 5 4,45*10- 7 6,2*10-10 8,4*10-4 1,36*10- 3 1*10- 10 6,8*10- 4 1,8*10- 4 7,11*10- 3 3*10- 2 8,85*10- 4 1,47*10- 4 2,2*10- 5 3*10- 8 5,7*10- 10 2,51*10- 5 2,31*10-11 1,42*10- 7 1,05*10- 8 1,1*10- 6 2,3*10- 11 7,5*10- 12 5,9*10- 6 1,38*10- 4 1,3*10- 2 3,48*10- 4 1,42*10- 3 4*10- 4 7,1*10- 4 1,12*10- 3 5,6*10- 2 2,2*10- 12 2*10- 2 4,3*10- 1 3,2*10- 3 1,24*10- 5 1,06*10- 3 6,21*10- 5 1,03*10- 1 Fuerte

pKa1 4,75 3,49 2,23 9,29 4,20 9,23 4,81 6,35 9,20 3,08 2,86 10 3,16 3,74 2,14 1,52 3,05 3,83 4,65 7,52 9,24 4,60 10,77 9,49 10,63 6,84 7,97 5,95 10,63 11,12 5,22 9,80 3,86 1,88 3,45 2,84 3,39 3,14 2,95 1,25 11,65 1,69 0,36 2,49 4,87 2,97 4,20 0,98

Ka2 1,1*10- 7

pKa2 6,95

Ka3 3,2*10- 12

pKa3 11,49

4,69*10- 11

10,32

1,8*10- 5

4,74

4,0*10- 6

5,4

6,32*10- 8 1,62*10- 7 3,21*10- 5

7,19 6,79 4,49

4,5*10-13

12,34

1,68*10- 11 3,18*10- 10

H2NNH3+ HONH3+ CH3NH3+ C5H11NH+ C5H5NH+ (CH3)3NH+

1,58*10- 10

CH3CHOHCOOH cis HOOCCH=CHCOOH HOOCCH2COOH

5,9*10- 7

6,22 5,09 5,69 5,40 4,26 8,30

HOOCCHOHCH2COOH

8*10- 6 2,01*10- 6

Perxido de hidrgeno

C6H5(CHOHCOOH) HNO2 C6H4(COOH)2 HOOCCOOH H2O2 H2IO6 (NO2)3C6H2OH CH3COCOOH CH3CH2COOH C6H4(OH)COOH
HOOCCH2CH2COOH

3,91*10- 6 5,42*10- 5 5*10- 9

2,31*10- 6 1,02*10- 2

5,63 1,99

H2NSO3H H2SO4

138

Sulfhdrico Sulfuroso Tartrico Tiocinico Tiosulfrico Tricloroactico Ydico

HOOC(CHOH)2COOH

H2S H2SO3

HSCN H2SO3 Cl3CCOOH HIO3

9,6*10- 8 1,23*10- 2 9,2*10- 4 0,13 0,3 3 1,7*10- 1

7,01 1,91 3,03 0,88 0,52 - 0,47 0,76

1,3*10- 14 6,6*10- 8 4,31*10- 5 2,5*10- 2

13,88

7,18 4,36 1,60

Observando la tabla anterior encontramos varios aspectos que debemos analizar un poco: Existen cidos que tienen ms de una constante de ionizacin o de disociacin en agua, stos se llaman cidos poliprticos. El grado de acidez depende de la facilidad que tienen de liberar el protn, por lo que los valores de las constantes de la segunda y tercera ionizacin reflejan esa caracterstica comparada con la primera constante. Se incluyen bases como el amonio y otras que en la tabla se identifican como iones, teniendo en cuenta el concepto de cido base conjugada. Los valores de la constante de ionizacin son directamente proporcionales a la fuerza del cido, entre ms pequeo sea, menos se ioniza siendo, por lo tanto ms dbil. Se presentan tambin valores de pKa, que corresponde al potencial de concentracin de especies disociadas. Este concepto lo estudiaremos ms adelante y comprenderemos su utilidad, especialmente en trminos de comparacin de esta propiedad qumica entre sustancias. Para comprender el concepto del cido o base politrpica, consideremos el caso de la ionizacin del cido arsnico62: H3AsO4 La expresin de la constante de ionizacin ser: H2AsO41- + H+

Como existe otro protn para ceder, la ecuacin de esta ionizacin ser: H2AsO41 HAsO42 - + H+

Su constante de ionizacin ser:

= 1,1*10- 7 [H2AsO41 -] Comparando los valores de las constantes, encontramos que esta es menor, siendo ms difcil esta ionizacin. Ka2 = Ahora, describamos la ionizacin del tercer protn: HAsO42 La constante de ionizacin ser: [AsO43 -] [H+] Ka3 =
62

MATERIAL EN REVISIN
[H2AsO41-] [H+] [H3AsO4] Ka1 = = 5,8*10- 3 [HAsO42-] [H+] AsO43 - + H+ [AsO43 -] = 3,2*10- 12

Vamos a simplificar la expresin H3O+ por la de H+ en la representacin del hidronio, pero haciendo la salvedad de que se encuentra hidratado.

139

La cual tiene el valor ms bajo posible de las tres constantes indicando que el protn se encuentra mucho ms ligado a la molcula que los otros dos. Sin embargo se puede lograr la ionizacin completa si modificamos la concentracin de los hidroxilos de modo que ocurra la neutralizacin de toda la molcula y el desplazamiento del equilibrio. Revisemos nuevamente el equilibrio de autoprotlisis del agua: 2 H2O [H3O +] [OH -] = 1*10- 14

Encontramos que si [H3O +] = [OH -] = 1*10- 7, debemos buscar expresar estos valores de una manera ms fcil para poderlos comparar, por ello, si recurrimos a las propiedades de los logaritmos y calculamos el logaritmo negativo para esta concentracin encontraremos que es 7 y para la constante equivale a 14, por lo que fsicamente podemos decir que la variacin de la concentracin molar de los hidronios va de 0 a 14 y de los hidroxilos de 14 a 0 para poder mantener el valor de la constante del producto inico del agua: Aumenta [H3O+] 0 14 1 13 2 12
-

3 11

4 10

5 9

6 8

7 7

8 6

9 5

10 4

11 3

12 2

13 1

14 0

Aumenta [OH ] Por lo anterior, encontramos que el pH corresponde al logaritmo negativo en base diez, de la concentracin de hidronios y pOH es el logaritmo negativo en base diez de la concentracin de hidroxilos. Para efectos prcticos se prefiere trabajar con la primera escala, es decir la de pH: un valor bajo de pH indica una zona bastante cida, a un valor de pH siete, se encuentra en la neutralidad ya que existe la misma concentracin de iones hidronio y de hidroxilo, mientras que un alto valor de pH est indicando zona de alta basicidad o de ionizacin de las bases:

La misma expresin encontramos con los valores de las constantes de ionizacin de los cidos y las bases dbiles; si calculamos el valor del logaritmo negativo de K, encontramos un valor de pKa o pKb que nos permite tambin compararlas encontrando que las variaciones son inversas: a mayor valor de pK, esta menos ionizada como lo encontramos para cada una de ellas en el caso de la ionizacin del cido arsnico: 2,23 para el pKa1, 6,95 para el pKa2 y de 11, 49 para el pKa3. Se puede establecer una relacin interesante entre las constantes de disociacin de un cido dbil con una base dbil y el producto inico del agua: Consideremos el equilibrio de disociacin para el cido dbil: AH + H2O Su constante de disociacin es: Ka = [A-] [H3O+] [AH] A- + H3O+

MATERIAL EN REVISIN
pH = - log [H3O+] pOH = - log [OH-] pH + pOH = 14

Ahora veamos el equilibrio de disociacin de una base dbil:

140

A- + H2O Su constante de equilibrio es:

AH + OH-

[AH] [OH-] [A-] Multipliquemos entre s estas dos expresiones y simplifiquemos: Ka Kb = [H3O+] [OH-] El miembro de la derecha corresponde al producto inico del agua, cambimoslo: Ka Kb = KW Calculemos los logaritmos decimales a la anterior ecuacin: log Ka + log Kb = log KW Valores que nos recuerdan a pK; remplacemos: pKa + pKb = pKW = 14 Expresin que nos permite hallar los valores de Kb para algunos iones que se han reportado como cidos en la tabla 24 como es el caso del ion amonio, cuyo valor de Ka es de 5,7*10- 10, con un pKa de 9,24. Usando la anterior ecuacin, encontramos que pKb = 4,76. Para hallar la concentracin de hidroxilos aplicamos la ecuacin: Kb =

Ahora intentemos aplicar todo este marco terico en la resolucin de problemas de ionizacin de cidos y bases: Si la constante de ionizacin del cido actico es 1,75*10-5 cul es la concentracin molar de hidronio en una solucin 0,03 M? Qu ocurre al equilibrio cuando se aade un mL de una solucin de cido actico 0,1 N? Cul es el pH y el pOH que presenta la solucin final? Planteemos la ecuacin de ionizacin:

Su correspondiente constante de disociacin:

MATERIAL EN REVISIN
[OH-] = 10- pKb = 1,74*10- 5. CH3COOH CH3COO- + H+ [CH3COO-] [H+] [CH3COOH] Ka = = 1,75*10- 5 [X] [X] Ka = [0,03 - X] = 1,75*10- 5

Sabemos que la concentracin inicial del cido es 0,03 M; una vez alcanzado el equilibrio se habr disociado una cantidad desconocida que representaremos por X, y que podemos remplazar como concentraciones en la constante de disociacin:

141

Despejando los valores correspondientes encontramos la siguiente expresin matemtica que nos recuerda una ecuacin lineal de segundo grado: X2 + 1,75*10- 5 X 5,25*10- 7 = 0 Se resuelve aplicando la ecuacin general de solucin, as:

-b X=

b2 - 4 a c 2a X=

- (1,75*10- 5)

(1,75*10-5)2 + 4 (1)(5,25*10- 7) 2 (1)

X = 7,16*10-4 M Utilizamos nicamente el valor positivo de la resolucin de la anterior ecuacin ya que nunca en la naturaleza tendremos concentraciones negativas. La cantidad de cido actico sin disociar ser 0,03 7,16*10- 4 = 0,02928 M. Los resultados de estos clculos deben ser de dos cifras significativas, ya que la exactitud de los valores de las constantes de ionizacin no los permiten; eso significa que los valores de la tabla 24 tienen estas cifras as solamente en algunos de ellos aparezca uno solo, lo que significa que se debe colocar el nmero cero. Ahora miremos cul es el comportamiento del equilibrio cuando aadimos un mL de HCl 0,1 N; la concentracin de iones hidronio equivale a: (1 mL/1000 mL/L)(0,1 Eq/L) = 1*10- 4 Eq. El cido clorhdrico es un cido monoprtico fuerte, es decir se disocia completamente y su peso molecular equivale al peso equivalente por lo que la cantidad anterior equivale exactamente a 1*10- 4 M. Comparando los valores iniciales con los adicionados hallamos: [H3O]ACIDO ACTICO = 7,16*10- 4 M, y [H3O]CIDO CLORHDRICO = 1*10- 4 M, siendo comparables y de la misma magnitud por lo que la cantidad total debera restarse, afectando el equilibrio reduciendo la cantidad de cido actico disociado en la misma magnitud; luego la cantidad de cido actico sin disociar sera: 0,02928 1 *10- 4 = 0,02918 M. Por ltimo, el pH de la solucin corresponder al logaritmo negativo de la concentracin de hidronios hallados: pH = - log [7,16*10- 4] = 3,15

El pOH ser: 14 pH = 14 3,15 = 10,85. 3.1.3 Hidrlisis de sales.

Una sal proviene de la reaccin de un cido con una base. Generalmente estos electrolitos se ionizan totalmente en soluciones acuosas produciendo los correspondientes aniones (iones con carga negativa) y cationes (iones con carga positiva), sin embargo ellos pueden interactuar con el agua para generar el cido o la base que les dio origen, principalmente si provienen de sustancias con comportamiento cido base dbil. Por ello se generan cinco grupos: Sales de cido y base fuertes. Sales de cido dbil y base fuerte. Sales de cido fuerte y base dbil. Sales de cido dbil y base fuerte. Sales que generan aniones diprticos.

MATERIAL EN REVISIN

142

Estudiaremos su comportamiento especfico ya que modifican sustancialmente la acidez o la basicidad final de la solucin. 3.1.3.1 Sales de cido y bases fuertes. Corresponden a sustancias que provienen de cidos fuertes como el clorhdrico y el ntrico o de la neutralizacin completa de otros como el sulfrico principalmente que al disociarse en agua se ionizan sin modificar el pH final de la solucin ya que no se hidrolizan. HCl + NaOH NaCl + H2O Na+ + ClHNO3 + KOH KNO3 + H2O K+ + NO3-

3.1.3.2 Sales de cido dbil y base fuerte. Provienen de la neutralizacin completa de cidos dbiles como el actico, cianhdrico, sulfhdrico, carbnico y otros que se ionizan parcialmente en agua con bases fuertes. La disolucin de esas sales en agua afecta su producto inico ya que regeneran nuevamente el cido que sufre ionizacin parcial modificando el pH final de la solucin. CH3COONa + H2O CH3COOH + NaOH CH3COOH + H2O CH3COO- + H3O+

Esta situacin es la que se denomina hidrlisis. Cmo calculamos la concentracin de iones hidronio en estas soluciones? Supongamos que tenemos una solucin de acetato de sodio, para utilizar las ecuaciones qumicas escritas arriba. Vemos que debe aumentar la concentracin de hidroxilos para mantener el equilibrio inico del agua, quedando la ecuacin as: CH3COO- + H2O CH3COOH + OH-

La constante de equilibrio para esta reaccin ser:

Simplificamos la anterior ecuacin al incluir en la constante de equilibrio la concentracin del agua debido a su cantidad, expresando la anterior ecuacin como una constante de hidrlisis KH: [CH3COOH] [OH-] [CH3COO-] KH =

MATERIAL EN REVISIN
[CH3COOH] [OH-] KEQ = [CH3COO-] [H2O] KW [OH ] =
-

Como en este equilibrio se afecta el producto inico del agua, remplazamos el valor de la concentracin de hidroxilos en la ecuacin anterior por este:

[H3O+]

143

Quedando la constante de hidrlisis as: [CH3COOH] KW KH = [CH3COO-] [H3O+]

Observando la anterior ecuacin, identificamos el recproco de la constante de equilibrio de ionizacin del cido actico, puesto que tiene la siguiente expresin: [CH3COOH] / [CH3COO-] [H3O+] = 1 / Ka Remplazando en la constante de hidrlisis nos queda as: KH = KW / Ka Segn esta ecuacin, la magnitud de la reaccin de hidrlisis es directamente proporcional al producto inico del agua e inversamente proporcional a la constante de ionizacin del cido dbil Por lo que la expresin de la constante de hidrlisis ser: KW Ka [CH3COOH] [OH-] = [CH3COO-]

Ecuacin til para el clculo del grado de hidrlisis de la sal. En la ecuacin original de la reaccin de la sal con el agua, encontramos que se produce un hidroxilo por cada molcula de cido, luego podemos establecer que:

Sustituyendo en la expresin de la constante de hidrlisis tenemos: KW =

Podemos suponer que la sal se encuentra totalmente ionizada en la solucin quedando que la concentracin de la sal y del anin acetato son prcticamente las mismas, C, y que la extensin de la hidrlisis del acetato para transformarse en cido actico es muy pequea, casi despreciable que mantiene la misma concentracin C definida anteriormente, por lo que nuestra ecuacin quedar: C KW Ka

MATERIAL EN REVISIN
[CH3COOH] = [OH-] [OH-]2 Ka [CH3COO-] [OH ] =
- 2

Como necesitamos determinar la concentracin de hidronios en la solucin acuosa de la sal recurrimos nuevamente a la expresin del producto inico del agua donde: [OH-] = KW / [H3O+] Remplazando nos queda: (KW)2 C KW Ka

[H3O+]2

144

Despejando la ecuacin, tenemos como expresin final para el clculo de la concentracin de hidronios en la disolucin de la sal de un cido dbil con una base fuerte, la siguiente: [H3O+] = KW Ka C

Se prepara una solucin de acetato de potasio disolviendo 0,5 moles de la sal en un litro de solucin. Cul es la concentracin de hidronio, el grado de hidrlisis de la sal y el pH de la solucin resultante? Identifiquemos los valores de las constantes que requerimos y la concentracin de la sal: Ka = 1,75*10- 5 KW = 1*10- 14 C = 0,5 M. Calculemos la concentracin de hidronios utilizando la ecuacin que acabamos de deducir, dando como resultado: [H3O+] = 5,9*10- 10 Ahora determinamos el pH, calculando el logaritmo negativo: pH = 9,2. Comprobamos que realmente hay una modificacin sustancial en el producto inico del agua, generando una solucin de carcter bsico. Ahora calculemos el grado de hidrlisis que ha ocurrido. Para ello planteemos la reaccin de hidrlisis:

Planteamos la ecuacin de hidrlisis:

Por cada X moles de acetato que reaccionan se forman X moles de cido actico y X moles de hidroxilo, por consiguiente: [CH3COOH] = [OH-] = X [CH3COO-] = 0,5 X

Remplacemos estos valores en la ecuacin de hidrlisis: [X] [X]

MATERIAL EN REVISIN
CH3COO- + H2O CH3COOH + OHKW = [CH3COOH] [OH-] [CH3COO-] Ka 1*10- 14 = [0,5 - X] 1,75*10- 5

Comparando los valores de (0,5 X) frente al valor de las dos constantes (5,7*10- 10) podemos efectuar una aproximacin para resolver la ecuacin cuadrtica y es considerar a X muy pequeo dejando la expresin (0,5 X) 0,5, como lo puede comprobar resolviendo la ecuacin correspondiente. Desarrollando la ecuacin anterior se obtiene un valor de X = [CH3COOH] = [OH-] = 1,69*10- 5 M. El grado de hidrlisis lo calculamos as:

145

%HIDRLISIS = (1,69*10- 5) 100 / 0,5 = 3,3*10- 3 = 0,0033 % Una magnitud bastante pequea que justifica efectuar las aproximaciones que se realizaron anteriormente. 3.1.3.3 Sales de cido fuerte y base dbil. Como en el caso anterior, son sales que provienen del amonio y sus derivados. Reaccionan con el agua para producir un catin donador de protones por lo que las soluciones finales tienen pH cido. Dentro de los metales tenemos a los iones hierro (III) y aluminio (III) que tambin presentan el mismo fenmeno: NH4Cl + H2O NH4+ + 2 H2O Al(H2O)63 + + H2O HCl + NH4OH NH4OH + H3O+ Al(H2O)5(OH)22 + + H3O+

Es necesario que deduzcamos una frmula semejante al caso anterior para determinar cul es la concentracin de hidronio que aparece al final de la disolucin de cierta cantidad de sal. Revisemos la reaccin de hidrlisis de la sal de amonio: NH4+ + 2 H2O Su constante de hidrlisis ser: [NH4OH] [H3O+] KH = NH4OH + H3O+

Efectuando los reemplazos por producto inico del agua y encontrando la expresin inversa de la constante de ionizacin de la base encontramos la siguiente expresin intermedia: [H3O+]2 = KW

Que al despejar nos da la siguiente ecuacin til para hallar la concentracin del hidronio en las soluciones acuosas de estas sales: [H3O+] = (KW / Kb) C

Cul es la constante de hidrlisis para el cloruro de amonio si una solucin 0,1 M tiene un pH de 5,13? Definamos los valores conocidos: C = 0,1 M. pH = - log [H3O+]. Despejando encontramos: [H3O+] = 10- pH = 7,41*10- 6 M. [H3O+] = [NH4OH] = 7,41*10- 6 M. Planteamos la ecuacin correspondiente y su constante de hidrlisis: NH4+ + 2 H2O NH4OH + H3O+

MATERIAL EN REVISIN
[NH4+] Kb [NH4OH] [H3O+] KH = [NH4+]

[NH4+]

146

Remplazando valores encontramos el valor de KH, incluso asumiendo que la mayora de la concentracin del ion amonio es 0,1 M, debido a la escasa participacin que tiene en la disociacin. KH = (7,41*10- 6)2 / 0,1 = 5,49*10- 10 3.1.3.4 Sales de cido dbil y base dbil. Provienen de la neutralizacin completa de cidos dbiles con bases dbiles como es el acetato de amonio y el cianuro de amonio por mencionar un ejemplo. La hidrlisis de estas sales producen cationes que se comportan como cidos (donadores de protones) y aniones que lo hacen como bases (decepcionan protones), por lo que no es posible definir un tipo de pH en sus soluciones acuosas ya que pueden ser cidas, neutras o bsicas dependiendo de la fuerza relativa que tenga el anin o el catin. Como en los casos anteriores, vamos a deducir una frmula que nos permita calcular la concentracin de hidronios o hidroxilos en las soluciones correspondientes dependiendo de la concentracin de las mismas. Utilicemos como sustancia ejemplo el acetato de amonio, que tiene las siguientes ecuaciones reversibles: NH4+ + H2O CH3COO- + H2O 2 H2O Las expresiones de las constantes de hidrlisis sern: NH3 + H3O+ CH3COOH + OHOH- + H3O+

KW Kb

Como la extensin de la hidrlisis de una sal depende de la fuerza relativa del cido y de la base que participan, se divide el producto de las dos ecuaciones anteriores por la ecuacin del producto inico del agua, quedando la siguiente expresin: KW KW Kb (KW)2 [NH3] [H3O+] [CH3COOH] [OH-] [NH4+] [CH3COO-] [H3O+] [OH-]

KW

MATERIAL EN REVISIN
= KH = [NH3] [H3O] [NH4+] KW Ka = KH = [CH3COOH] [OH-] [CH3COO-] Ka = Kb Ka = KW KW Ka Kb = KH = KH = KW Ka Kb = [NH3] [CH3COOH] [NH4+] [CH3COO-]

Simplificando tenemos:

Las constantes de ionizacin del cido y de la base son casi de la misma magnitud; si la sal est completamente ionizada se puede suponer que:

147

[NH3] = [CH3COOH] = [NH4] = [CH3COO-] = C Remplazando y simplificando tenemos: [CH3COOH] = C KW Ka Kb

Podemos remplazar la concentracin de cido actico a partir de la ecuacin de ionizacin, quedando: [H3O+] [CH3COO-] Ka = C KW Ka Kb

Como [CH3COO-] = C, remplazamos y simplificamos hasta obtener finalmente la siguiente ecuacin: [H3O+] = KW Ka Kb

El clculo de la concentracin de hidronios para una sal de cido dbil con base dbil no depende de la concentracin de la misma, es decir, el pH es independiente de la concentracin de la sal. Calcule el porcentaje de hidrlisis, la concentracin de iones hidronio y el pH de una solucin 0,4 M de cianuro de amonio. Esta sal proviene de la neutralizacin del cido cianhdrico con amoniaco, en la tabla 24 hallamos los valores de las constantes de ionizacin de dichas sustancias. Ka = 6,2*10- 10, para el cido cianhdrico. Kb = 1,74*10- 5, para el amonio. KW = 1*10- 14, para el agua.

Remplazamos en la ecuacin final que encontramos para estas sales: [H3O+] = (KW Ka) / Kb = pH = log [H3O] = 9,22.

Para calcular el porcentaje de hidrlisis, recurrimos a la expresin de equilibrio de hidrlisis para esta sal: [NH3] [HCN] = = KH Ka Kb KW

MATERIAL EN REVISIN
(1*10- 14)(6,2*10- 10) / 1,74*10- 5 = 5,97*10- 10. [NH4+] [CN-]

Para facilitar los clculos y teniendo en cuenta la concentracin final de las especies, podemos suponer que: [NH3] = [HCN] = X [NH4+] = [CN-] = 0,4 X. Remplazando en la ecuacin de hidrlisis, tenemos:

148

(X)2 / (0,4 X)2 = 1*10- 14 / (6,2*10- 10)(1,74*10- 5) = 0,93. La X en el denominador es muy grande para descartarla debido al valor de KH. Se extrae la raz cuadrada a ambos miembros de la ecuacin para tener: X / (0,4 X) = 0,79; X = 0,79(0,4 X) = 0,32 0,79 X Por consiguiente: 1,79 X = 0,32; X = 0,22 M. Ahora calculemos el porcentaje de hidrlisis %HIDRLISIS = (0,22 / 0,4) 100 = 55,0 %

3.1.3.5 Sales que producen aniones diprticos. Son un grupo de sales de cidos dbiles y bases fuertes que en solucin son capaces de aceptar dos protones como es el caso de los carbonatos, fosfatos y sulfatos entre otros. Utilizamos como ejemplo para comprender el comportamiento de estas sales el carbonato de sodio Supongamos que tenemos una solucin 0,5 M de carbonato de sodio y queremos hallar su pH y el porcentaje de hidrlisis. Las ecuaciones a considerar son: NaCO3 CO32 + + 2 Na+

En estos sistemas interesa la primera ecuacin de hidrlisis ya que el aporte de la segunda es muy pequeo. Lo importante es que al determinar el valor de la constante de acidez a utilizar, corresponder a la segunda o a la tercera respectiva del cido. En estas condiciones se nos alivia el trabajo del clculo pues consideramos el sistema idntico a uno de cido dbil con base fuerte y se puede utilizar la ecuacin deducida para hallar el valor de la concentracin de hidronios. [H3O+] = KW Ka C

Remplazando tenemos: [H3O+] = 9,69*10-3; pH = 12,01.

Para hallar el porcentaje de hidrlisis, recurrimos a la expresin de la constante correspondiente que es: KH = KW Ka2 = [HCO3-] [OH-] [CO32 +]

MATERIAL EN REVISIN
CO32 + + H2O HCO3- + OHHCO3- + H2O H2CO3 + OH-

Los clculos respectivos son: KH = 1*10- 14 / 4,69*10- 11 = X2 / (0,5 X) Podemos considerar comparando los valores de C con los de KH, encontrando que realmente el aporte de la disociacin es despreciable. El resultado obtenido es: 0,01 M. El porcentaje de disociacin es: (0,01/0,5)*100 = 2,0 %.

149

3.1.4

Soluciones tampn o buffer.

Una solucin amortiguadora (tambin llamada solucin reguladora, tampn o buffer) es aquella que limita los cambios de pH cuando se le agregan cidos o bases o cuando se efectan diluciones. Un amortiguador, tampn o buffer consiste en una mezcla de un cido y su base conjugada63. Es un ejemplo de la aplicacin del efecto del ion comn. Vamos a intentar la comprensin de esta definicin utilizando un ejemplo. Supongamos que preparamos un litro de una solucin, tomando una alcuota de 25 mL de cido actico 4 M y disolviendo en un baln aforado de litro utilizando agua destilada, homogenizamos la solucin y calculamos su pH. Como estamos usando volmenes y hemos tomado cantidades equivalentes, podremos hallar la nueva concentracin de la solucin utilizando esta expresin: VA MA = VF MF Como no conocemos la concentracin final, despejamos de la frmula anterior MF, hallando: MF = VA MA / VF. Remplazando encontramos: MF = 0,1 M. Con este valor podremos calcular el pH que tiene esta solucin, como lo hemos hecho con otros casos, encontrando [H3O+] = 1,31*10- 3; pH = 2,88. Ahora, pesamos exactamente 15 g de acetato de potasio pursimo, los aadimos a dicha solucin y ahora vamos a determinar el pH final que presenta esta solucin. Debemos calcular la molaridad de la solucin en acetato de sodio. Necesitamos conocer el peso molecular de la sal que es 78,99 g/mol, para poder determinar el nmero de moles que tendr el litro de solucin puesto que no estamos aadiendo ms solvente. Los moles de acetato de sodio son: 15/78,99 = 0,19 mol que al estar en un litro de solucin, tendremos 0,19 M. Ahora procedemos a averiguar la cantidad de hidronios presentes en la solucin final. Recurrimos a la expresin de la constante de disociacin del cido despejando la concentracin de hidronios: [H3O+] = Ka [CH3COOH] [CH3COO-]

Remplazando, el resultado es [H3O+] = 9,2*10- 6; pH = 5,04.

Como podemos destacar, ha disminuido aunque todava sigue siendo cido. Ahora efectuemos el clculo del pH cuando a esta solucin le aadimos 10 mL de una solucin 0,5 M de cido clorhdrico. Aqu hemos modificado el volumen final de la solucin: 1010 mL totales, que debemos tener en cuenta para la determinacin final de la concentracin de hidronio. Nos podemos auxiliar del siguiente esquema: Reaccin Condiciones iniciales 10 mL HCl 0,5 M Condiciones finales CH3COO+ + 0,19 - 4,95*10- 3 0,18505 H3O+ 9,2*10- 6 + 4,95*10- 3 4,9592*10- 3 CH3COOH 0,1 + 4,95*10- 3 0,10495

MATERIAL EN REVISIN

Para poder efectuar los clculos requerimos manejar las mismas unidades de concentracin para poder sumar y restar; todo est expresado en moles y se ha tenido en cuenta el factor de dilucin. Los signos en el balance muestran que operacin matemtica se ha efectuado. Con los anteriores datos hallaremos la concentracin final de hidronios utilizando la misma expresin usada arriba.

63

HARRIS, C. Daniel. Anlisis qumico cuantitativo. Op. Cit., p. 191.

150

Obtenemos, entonces: [H3O+] = 9,36*10- 6; pH = 5,02. Como podemos comparar, slo se ha afectado la segunda cifra decimal del valor de pH, mostrando la capacidad que tienen estas soluciones. Ahora aadimos 10 mL de una solucin de hidrxido de sodio 0,5 M. Efectuamos el mismo cuadro de balance: Reaccin Condiciones iniciales 10 mL NaOH 0,5 M Condiciones finales. CH3COOH + 0,10495 - 4,90*10- 3 0,10985 OH+ 4,90*10- 3 4,90*10- 3 CH3COO- + H2O 0,18505 + 4,90*10- 3 0,190

Realizando el mismo tipo de clculos que para el caso anterior, encontramos que [H3O+] = 1,84*10- 6; pH = 5,74. Comparado con el inicial de la solucin, encontramos que se ha afectado las cifras decimales (ha aumentado) pero se mantiene en el mismo rango. Existe una deduccin matemtica que nos permite calcular ms fcilmente el pH de este tipo de soluciones, se trata de la ecuacin de Henderson Hasselbalch que corresponde a otra forma de expresar Ka: Suponemos la siguiente reaccin: AH + H2O Escribimos su constante de disociacin: [H3O+] [A-] [AH] H3O+ + A-

Ka =

Tomemos los logaritmos a ambos lados de esa expresin:

Ahora despejemos la concentracin de hidronios:

Remplazando los trminos ya conocidos y agrupando la ecuacin, tenemos la expresin de Henderson Hasselbalch: [A-] pH = pKa + log [AH]

Esta ecuacin presenta un conjunto de propiedades que vamos a revisar: a)

MATERIAL EN REVISIN
[A-] log Ka = log [H3O ] + log [AH]
+

- log [H3O+] = - log Ka + log [A-] + log [AH]

Cuando la concentracin del anin es igual al del cido sin disociar, pH = pKa. Esto significa que si en la solucin se tienen varias especies cidas, habr una nica concentracin de hidronios en la solucin. b) El cambio en una orden de magnitud (una potencia de diez) el valor de la razn anin sobre cido sin disociar cambia en una unidad. 3.1.5 El problema del indicador y el punto final.

151

Una reaccin se considera completa cuando el nmero de equivalentes de la solucin valorante es igual al nmero de equivalentes de la solucin del analito o cuando el nmero de miliequivalentes de A es igual al nmero de miliequivalentes de T: A+T AT

Si consideramos una solucin 1 N en la que hay N equivalentes y n miliequivalentes en un mililitro, el punto final se alcanza cuando: VA NA = VT NT Esto permite calcular tambin el nmero de miliequivalentes de las dos sustancias reaccionantes cuando se conocen los volmenes y las normalidades. Por ejemplo: Cuntos mL de una solucin 0,1 N de cido clorhdrico se necesitarn para neutralizar 25 mL de una solucin 0,05 N de hidrxido de sodio? NaOH + HCl NaCl + H2O VA = 25 mL. NA = 0,05 N. VT = X. NT = 0,1 N. Despejando la ecuacin y resolviendo tenemos: VT = VA NA/NT = 12, 5 mL. El problema es sencillo, sin embargo en la prctica cmo podemos detectar el punto final si la mayora de soluciones son incoloras y no es fcil percibir el cambio a simple vista? Significa que tenemos que encontrar un medio que nos detecte el punto equivalente. En las titulaciones cido base hay un cambio brusco del pH al aadir un pequeo exceso del valorante, un indicador debe detectarlo hacindolo manifiesto mediante la aparicin o desaparicin de un color. Para hallar el indicador ms apropiado debemos calcular el pH en el punto de equivalencia y se selecciona el ms cercano o que coincida con ese cambio. En la tabla 25 hallamos los nombres de algunas de esas sustancias, el rango de variacin de colores y el color que presenta en medio cido y el que tiene en medio bsico. Un indicador cido base es en s un cido o una base dbil cuyas distintas formas protonadas tienen diferentes colores. La forma de seleccin del ms idneo es algo emprica aunque si se conoce el punto final, se selecciona el indicador que mejor cambie en esa zona, tratando de minimizar el error del indicador o error de titulacin. Tabla 26. Indicadores cido base64.

Indicador

Rojo de parametilo. Azul de bromofenol. Anaranjado de metilo. Rojo de metilo. Azul de bromotimol. Fenolftalena. Timolftalena. 2,4,6 trinitrotolueno.
64

MATERIAL EN REVISIN
Intervalo de transicin de pH 1,0 3,0 3,0 4,6 3,1 4,4 4,2 6,2 6,0 7,6 8,0 9,6 9,3 10,6 12,0 24,0 Roja Amarilla Roja Roja Amarilla Incolora Incolora Incolora

Color de la forma cida Color de la forma bsica Amarilla Azul Amarilla Amarilla Azul Rosada Azul Anaranjada

RAMREZ, Ins Bernal de, y otros. Qumica analtica. Op. Cit., p. 119.

152

En general, se busca un indicador cuyo intervalo de transicin se superponga lo ms posible con la zona de mayor pendiente de la curva de titulacin. El error de titulacin debido a la no coincidencia del punto final y el punto de equivalencia ser tanto ms pequeo cuanto ms inclinada sea la curva de titulacin en la vecindad del punto de equivalencia65. Un ejemplo es la determinacin de la alcalinidad en aguas. En esta determinacin encontramos que el agua puede tener disueltos hidrxidos, carbonatos y bicarbonatos. Hemos estudiado la situacin que se presenta en cada uno de ellos, pero ahora nos inquieta si podemos establecer una diferencia analtica entre ellos. La respuesta es si y ahora la cuestin es saber cmo; nuevamente la respuesta nos la da los indicadores. Para valorar una solucin alcalina usamos cido clorhdrico y el primer cambio que logramos en la neutralizacin de todos los hidrxidos y el cambio del carbonato a bicarbonato: OH- + HCl H2O CO32 - + HCl HCO3- + ClEso significa que podemos utilizar otro indicador para determinar el cambio de bicarbonato a cido carbnico. Este dato nos permite determinar la cantidad de alcalinidad debida a carbonatos y poder definir la exclusivamente debida a hidrxidos: HCO3- + HCl H2CO3 + ClEstudiemos el siguiente ejemplo para establecer la forma de trabajar los datos y expresar los resultados. Calcule la concentracin en g/L, de carbonato y de bicarbonato de sodio en una muestra de agua si al titular una alcuota de 100 mL con una solucin de cido clorhdrico 0,1 N, se necesitaron 2,5 mL para decolorar la fenoltalena y 10 mL para hacer virar el metil naranja. Determinemos los datos disponibles:

Peso equivalente de Na2CO3 = PF/2 = 53,0 g/Eq.

Peso equivalente de NaHCO3 = PF/1 = 84,02 g/Eq.

El problema nos est preguntando cunto carbonato tiene. La neutralizacin con fenolftalena nos da nicamente la mitad del proceso, luego para la neutralizacin completa requeriremos del doble del volumen, o sea 5,0 mL. Con estos datos calculemos los resultados teniendo en cuenta los factores gravimtricos y de dilucin que habamos planteado en el tema anterior: 53,0 mg/Eq. 1000 mL/L. 100 mL.

Masa de Na2CO3 = 5,0 mL (0,1 Eq/L)

Ahora, analicemos la segunda situacin. Sobre la misma solucin se ha aadido el indicador metil naranja y se titula con cido clorhdrico estandarizado hasta virar, como tenemos contribucin de bicarbonato por la neutralizacin de la primera parte del carbonato inicial, debemos restar los volmenes para saber realmente cuanto bicarbonato es el que tiene la solucin: 10,0 mL 2,5 mL = 7,5 mL que corresponden exclusivamente a bicarbonato. La concentracin de bicarbonato solicitada se calcula como la anterior: 84,02 mg/Eq. Masa de NaHCO3 = 7,5 mL.(0,1 Eq/L) 1000 mg/g.
65

MATERIAL EN REVISIN
= 0,26 g/L. 1000 mg/g. 1000 mL/L. = 0,63 g/L. 100 mL.

HARRIS. C. Daniel. Anlisis qumico cuantitativo. Op. Cit., p. 244.

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Qu pasa cuando encontramos mezcla de hidrxidos y carbonatos y bicarbonatos? Simplemente debemos comparar entre s los volmenes del cido titulante usados en la titulacin con fenolftalena y con el naranja de metilo. Si el primero es mayor que el segundo, tendremos mezclas. Si es menor no habr hidroxilos sino slo carbonatos. Si no hay cambio de color, no existen carbonatos ni hidroxilos. ACTIVIDAD PRCTICA 6 1) Elabore un mapa conceptual de la volumetra cido base. 2) Para la reaccin HCl + H2O H3O+ + Cl, identifique los pares cido base conjugados.

3) Cul es la concentracin de iones hidronio, pH y pOH que presenta una solucin 0,05 M de cido cloroactico? 4) Cul es la concentracin de iones hidroxilo y su pOH que presenta una solucin de cido lctico 3,5*104 M? 5) Cul es la concentracin de iones hidronio de una solucin de cido p nitro benzoico 0,1 M, si su Ka = 4*10- 4? Qu pH y pOH tendr la solucin? 6) El cido ctrico es una sustancia que se encuentra en las naranjas, limones, mandarinas, etc., un grupo denominado frutas ctricas. Cul es la concentracin de hidronios que posee una solucin 0,05 M del cido? 7) Qu concentracin de iones hidronio tendr una solucin de hidrxido de potasio 0,092 M? 8) Teniendo como base la tabla 24, verifique el valor de pKa para los siguientes cidos y ordnelos segn la fuerza de acidez que presentan: cido actico, cido carbnico, cido frmico, cido sulfhdrico, amonaco, etil amonio, piridinio, y piperidinio. 9) Calcule la concentracin de hidronio, pH, pOH y grado de hidrlisis para la disolucin de las siguientes sales preparadas con una concentracin de 0,45 M: Formiato de sodio (CHO2Na), lactato de potasio (C3H5O2K) y del citrato de sodio (C6H5O7H2Na). Las constantes de disociacin de los cidos las encuentra en la tabla 24. 10) Calcular la concentracin de hidronio, el pH y el pOH de una solucin acuosa de clorhidrato de anilina 0,09M, sabiendo que Kb es 4*10- 10. (Clorhidrato de anilina = C6H5NH3Cl). 11) Calcule la concentracin de hidronio y el porcentaje de hidrlisis que tiene una solucin 0,03 M de borato cido de amonio (H2BO3NH4). 12) Calcular el valor de pH y el grado de hidrlisis que presenta una solucin 0,36 M de bisulfito de sodio (Na2SO3). 13) Deduzca la ecuacin de Henderson Hasselbalch para un buffer formado por la sal de una base dbil y su base dbil, pero expresndola en pH. 14) Se prepara una solucin buffer mezclando 0,5 moles de amoniaco y 0,5 moles de cloruro de amonio completando el volumen a un litro de solucin. Posteriormente se aaden 0,1 moles de hidrxido de sodio, cul es la concentracin de hidroxilos y el pH que tiene la solucin finalmente? 15) Calcule la concentracin de hidronio y el pH que tiene una solucin que contiene 0,49 moles de citrato de sodio y 0,5 moles de cido ctrico disueltos en un litro de solucin y luego se aadieron 0,05 moles de hidrxido de potasio.

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16) Calcular el pH de una solucin de amoniaco 0,05 M y cloruro de amonio 0,1 M. 17) Calcular el pH de una solucin preparada a partir de la mezcla de volmenes iguales de cido actico 0,1 M y de hidrxido de sodio 0,12 M. 18) Cuntos gramos de cloruro de amonio se deben aadir a 200 mL de amoniaco 0,05 M para obtener una disolucin de pH = 10? 19) Calcule el pH cuando a un litro de una solucin que contiene 0,5 moles de cido lctico y 0,5 moles de lactato de sodio se les agregan los siguientes volmenes de una solucin de hidrxido de sodio 0,05 N: 5 mL; 10 mL; 15 mL y 20 mL. 20) En la valoracin de alcalinidad de una solucin acuosa se toma una alcuota de 50 mL, la cual se valor con cido clorhdrico estandarizado 0,2 N. Para hacer virar la fenolftalena se gastaron 25,0 mL y a continuacin se necesitaron 5,0 mL para hacer virar el metil naranja. Determinar la concentracin de hidrxido de sodio y de carbonato de calcio presentes en g/L. 21) Una muestra de 100 mL de agua de caldera se titul con cido clorhdrico 0,01 N gastando 12,0 mL para hacer virar la fenolftalena y 12, 0 mL para hacer virar el metil naranja. Qu especies estn presentes? Exprese su concentracin en p.p.m., de la sal de sodio. 22) Al analizar una alcuota de 100 mL de agua no hubo cambio de color cuando se aadi el indicador de fenolftalena. Se aadi metil naranja. El punto de viraje de este indicador se alcanz cuando se aadieron 15,0 mL de una solucin 0,5 N de cido clorhdrico. Qu especie est presente? Calcule la concentracin de la sal sdica expresndola en mg/L. 23) Se quiere determinar a qu se debe la alcalinidad de un agua residual de una planta de tratamiento de leches. Se toma una alcuota de 50 mL la cual se valora con 10,0 mL de solucin 0,02 N de cido clorhdrico. Al aadir el metil naranja para continuar con la titulacin se nota el viraje del indicador con la primera gota de cido. Diga a qu se debe la alcalinidad y exprese el resultado en g/100 mL de la sal de potasio. 3.2 Volumetras de precipitacin.

Comprende aquellas tcnicas en las que la reaccin de la titulacin produce un precipitado o sal poco soluble. Las condiciones que debe cumplir son: La reaccin de precipitacin deber ser muy rpida, luego de la adicin de titulante. No se deben producir situaciones de interferencia (oclusin, coprecipitacin, adsorcin entre otras). Disponer de un indicador que localice el punto de equivalencia con exactitud razonable. Realmente es una tcnica muy antigua pero de aplicaciones reducidas, siendo el ms importante la argentometra o determinacin de halgenos y tiocianato con plata (I). Los indicadores en esta tcnica son aquellos que:

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Pueden formar un segundo precipitado con la sustancia titulante cerca o en el punto de equivalencia. Este precipitado se detecta claramente por su color. Participan en procesos de adsorcin sobre la superficie del precipitado, proporcionando un cambio de color en el punto de equivalencia o cercano al mismo, producto de esa interaccin. Forman con la sustancia titulante un complejo soluble coloreado bien ntido cerca o en el punto de equivalencia.

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Experimentan un cambio de color asociado a un cambio en el potencial de la solucin cerca o en el punto de equivalencia (funcionan por principios Redox)66. Como ilustracin, puede observar la tabla 27 que muestra los reactivos, patrones y usos de algunas tcnicas que aunque tienen un nombre, lo mencionaremos en caso necesario. Tabla 27. Ejemplos de valoraciones de titulacin67. Reactivo AgNO3 KCNS KCN Hg(NO3)2, Hg(ClO4)2 KCl, NaCl K4Fe(CN)6 (NH4)2MoO4 Mtodo de normalizacin 1) Pesada directa de AgNO3. 2) Directa de Ag + HNO3. 3) Contra KCl o NaCl. 1) Contra AgNO3. 2) Contra Hg o HgO disueltos en HNO3. Contra Cu disuelto en HNO3; aadir NH3. Contra KCl, NaCl o KCNS. Uso Valoracin de iones Cloro (I), Bromo (I), cianuro (I) y algunas de sus mezclas. Valoracin de plata (I) y mercurio (II). Valoracin de cobre (I) y Nquel (II). Valoracin de cloro (I), bromo (I) y tiocianato (I).

1) Preparacin directa. Valoracin de plata (I). 2) Contra AgNO3. Contra Zn o ZnO disueltos en H2SO4. Valoracin de zinc (II). Contra PbSO4 disuelto en acetato de Valoracin de plomo (II). amonio.

Como una aplicacin especfica de estas tcnicas vamos a estudiar la argentimetra. 3.2.1 Argentometra.

Es una tcnica volumtrica que utiliza soluciones estandarizadas de nitrato de plata, utilizada para determinar la concentracin de halgenos mediante la reaccin:

Hay dos tcnicas titulomtricas para determinar el contenido de halgenos: la titulacin de Mohr y la valoracin de Volhard. 3.2.1.1 Titulacin de Mohr.

Tcnica muy antigua, involucra la titulacin de cloruro o de bromuro con una solucin estandarizada de nitrato de plata, su indicador de punto final es una sal de cromato soluble, preferencialmente de potasio, que tiene como reacciones: Cl- + Ag+ AgCl

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NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 Br- + Ag+ AgBr CrO42 - + 2 Ag+ Ag2CrO4

El precipitado del indicador da un color rojo a la solucin dando fin a la titulacin. El yoduro y el tiocinato no se pueden determinar por este mtodo pues ocurren procesos de adsorcin que quitan nitidez al punto final. Otro indicador que se puede utilizar exitosamente es la fluorescena, un indicador de adsorcin. Fajans y sus colaboradores demostraron que los precipitados de las sales haloides de plata por su carcter coloidal DICK, J.A. Qumica analtica. Mxico: el manual moderno, 1979., p. 329 330. AYRES, Gilbert H. Anlisis qumico cuantitativo. Mxico: Harla, Harper & Row latinoamericana, 1970., p 351.
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adsorben iones plata arrastrando consigo otros aniones de colorantes orgnicos, generando variaciones en el pH que cambian el color, la fluorescena en solucin acuosa tiene color verde amarillento, pasa a violeta rojizo cuando detecta un ligero exceso de iones plata. Requiere para su realizacin de considerar dos condiciones fundamentales para que el indicador funcione correctamente: el control del pH que debe estar entre siete y no mayor de 10 y realizarse a temperatura ambiente por la tendencia de solubilizarse que presenta el precipitado indicador. 3.2.1.2 Titulacin del Volhard. Corresponde a una tcnica para titular ion plata ya que se utiliza una titulacin por retroceso. Primero se aade a la solucin con el analito a determinar un exceso medido de solucin de nitrato de plata en medio cido para que ocurra la reaccin: Cl- + Ag+ AgCl

Se separa el cloruro de plata y el exceso de plata se titula con una solucin estandarizada de tiocianato de potasio en presencia de ion frrico para formar un complejo rojo: Ag+ + SCNFe3 + + SCNAgSCN FeSCN2 +

Cuando aparece el color rojo, se suspende la valoracin. Al conocer la cantidad de tiocianato necesaria para la titulacin por retroceso, se puede saber la cantidad de plata sin reaccionar luego de reaccionar con la sal halgena. En la determinacin de cloruros, el color del punto final se desvanece lentamente debido a que el cloruro de plata es ms soluble que el tiocinato de plata por ello se filtra o aadir uno mililitros de nitrobenceno que recubre al precipitado de cloruro de plata aislndolo de la accin del tiocinato. Las sales de bromo y yodo no requieren esta tcnica por ser menos solubles que el tiocianato de plata.

1) En el mtodo de Mohr durante la valoracin, aparece en el punto de contacto un precipitado rojo que desaparece al agitar. De qu es ese precipitado? Por qu desaparece al agitar? 2) Qu reacciones se producen al agregar sulfocianuro de potasio a una solucin que contenga iones frricos y plata? 3) Por qu es necesario en el mtodo de Volhard, separar el precipitado de cloruro de plata antes de valorar el exceso de plata con sulfocianuro alcalino y se utiliza como indicador una solucin de sal frrica? 4) Se quiere determinar el porcentaje de ion cloruro que contiene una muestra impura de cloruro de sodio. Se disolvieron 0,5000 g de la muestra, el cloruro se precipit cuantitativamente y peso 0,8550 g. Cul es el porcentaje de cloruro presente en la muestra? 5) Calcule el volumen de una solucin de cloruro de plata 0,53 N requerido para precipitar cuantitativamente el cloruro presente en 2,5000 g de cloruro de bario dihidratado. 6) Calcule el porcentaje de cloruro frrico que contiene 1,0000 g de una muestra, sabiendo que se requirieron 25,0 mL de una solucin de nitrato de plata 0,125 N. 7) Calcule la normalidad de una solucin de nitrato de plata si 35,0 mL producen 0,3987 g de cloruro de plata.

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ACTIVIDAD PRCTICA 7

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8) Una muestra contiene cloruro de sodio y bromuro de sodio. Se pes una muestra de 0,5763 g que consumieron 53,0 mL de una solucin de nitrato de plata 0,15 N. Se pes otra muestra idntica, se trat con una solucin cida de bicromato que oxid el bromuro a bromo siendo expulsado por ebullicin. La solucin resultante gast 45,0 mL de la misma solucin de nitrato de plata. Calcule el porcentaje de cloruro y de bromuro presente en la muestra. 9) Calcule el porcentaje de plata que contiene una amalgama si 0,5000 g requieren 20,0 mL de una solucin de tiocianato de potasio 0,1 N para precipitar toda la plata. 10) Una muestra impura de cloruro de magnesio pesa 0,5000 g. Para determinar su cantidad se precipit cuantitativamente el cloruro con 50 mL de nitrato de plata 0,05 N, si filtr y para determinar la plata disuelta en el filtrado se necesitaron 15 mL de tiocianato de potasio 0,02 N. Calcule el porcentaje de cloruro de magnesio presente en la muestra. 11) Una muestra de mineral de nquel pesa 0,3000 g. Se disolvi en cido clorhdrico concentrado, luego se adicionaron 50 mL de nitrato de plata 0,3 N (una vez se elimin el exceso de cido); precipitado cuantitativamente el cloruro, se filtr y valorado gasto 25,0 mL de tiocianato de potasio 0,02 N. Calcule el porcentaje de nquel que tiene la muestra. 3.3 Volumetra Redox.

Como un esfuerzo de recordacin de este tema ya estudiado en su curso de Qumica General, establecemos que la tcnica volumtrica a estudiar comprende reacciones en las que hay cambios en los estados de oxidacin de los tomos involucrados: se entiende por oxidacin de un elemento cuando incrementa su nmero de oxidacin y si disminuye el tomo ha sufrido una reduccin. En todo cambio qumico la oxidacin de un elemento va acompaada de la reduccin de otro y viceversa. El nmero de oxidacin corresponde a nmeros positivos o negativos asignados siguiendo ciertas reglas de modo que la combinacin de ellos en una molcula siempre es cero, es decir, es neutra. Tericamente, el nmero de oxidacin de un elemento se explica por el comportamiento de los electrones en su capa perifrica, los cuales determinan el comportamiento qumico. Si un elemento fuertemente electronegativo, reacciona con otro de electronegatividad menor, la capa electrnica del elemento ms electronegativo toma uno o ms electrones del otro tomo. Por ejemplo, al reaccionar el cloro con el potasio se forma el ion cloruro (I) (Cl-), con una carga negativa a partir del tomo de cloro. Inversamente, la capa electrnica del elemento menos electronegativo (el potasio) cede uno o varios electrones. En esta reaccin, el ion potasio (I) (K+), tiene origen en el tomo de potasio neutro. Puede decirse que el proceso de oxidacin consiste en una cesin o prdida de electrones y que el de reduccin consiste en una fijacin de los mismos. Hablamos de unas reglas de oxidacin68, recordmoslas:

Para todos los elementos libres (no combinados) el nmero de oxidacin es cero. Para todo compuesto neutro la suma de los nmeros de oxidacin es cero. Para todo ion monoatmico, el nmero de oxidacin es igual a la carga del ion. Para todo ion poli atmico, la suma de los nmeros de oxidacin es igual a la carga del ion. Para el hidrgeno, el nmero de oxidacin en sus compuestos es uno (1), excepto para los hidruros metlicos, en el cual el nmero es 1. Para el oxgeno, el nmero de oxidacin en sus compuestos es 2, excepto para los perxidos en los cuales el nmero es 1.

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RAMREZ, Ins Bernal de y otros. Qumica analtica. Op. Cit., p 282.

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La propiedad que tiene una sustancia de actuar como oxidante o como reductor depende principalmente de su afinidad electrnica y de su energa de ionizacin; cuanto ms fcilmente se oxida la sustancia, tanto mayor es su accin como agente reductor. Por ejemplo, colocar en contacto zinc metlico con una solucin de iones cobre (II), el zinc comienza a recubrirse de cobre metlico: Zn + Cu2 + Cu + Zn2 +

Observe: hay una oxidacin del zinc y una reduccin del cobre. Fenmeno que descomponemos en dos reacciones: Zn Zn2 + + 2 eCu

Cu2 + + 2 e-

Una barra de zinc, colocada en una solucin de una sal de zinc, reacciona inicialmente de acuerdo con la primera ecuacin y entra rpidamente en equilibrio por ser reversible la reaccin. La barra de zinc adquiere una ligera carga negativa, porque el zinc metlico se disuelve, en una pequea cantidad a la forma de catin zinc (II). Inversamente, en una barra de cobre, colocada en una solucin de sal cprica, se separa una pequea cantidad de cobre metlico, de acuerdo con la segunda ecuacin, y la barra de cobre se carga positivamente. Las combinaciones zinc metlico zinc disuelto y cobre metlico cobre disuelto reciben el nombre de semielementos y sus potenciales en de potenciales parciales. Al combinar aparece una diferencia de potencial (f.e.m., o fuerza electromotriz) en cada semielementos formando una pila galvnica. En este caso, el mejor agente reductor es el cobre y el mejor agente oxidante es el cobre. El valor relativo de los potenciales parciales depende de la concentracin de las soluciones electrolticas en las que se sumerge el metal respectivo Este valor de determina experimentalmente combinando sucesivamente los distintos semielementos con uno de referencia y midiendo las diferentes fuerzas electromotrices producidas en cada pila con un voltmetro. En la siguiente unidad discutiremos este tema. Cada uno de los sistemas Redox requieren de efectuar balances, hay dos mtodos que usted como estudiante selecciona y se adiestra para efectuar la resolucin de los problemas analticos que involucran esta tcnica, es la oportunidad para que los revise por su cuenta ya que no es nuestro inters profundizar en ello en este tema. Por ltimo, haremos una revisin del concepto de peso equivalente en estas sustancias ya que las concentraciones se calculan sobre la base de unidades qumicas como la normalidad. En las volumetras Redox, la regla consiste en dividir el peso frmula o el peso molecular del reactivo por el cambio que ha ocurrido en el nmero de oxidacin que sufre el elemento o ion reducido u oxidado. El cambio de nmero de oxidacin puede ser determinado fcilmente por la reaccin y se puede calcular balancendola y ubicando directamente el nmero de electrones ganados o perdidos por la sustancia en cuestin. Por ejemplo: El peso equivalente del sulfato ferroso heptahidratado es:

Las sales ferrosas en solucin se transforman en sales frricas, el hierro pasa de hierro (II) a hierro (III), luego el peso equivalente ser el mismo peso frmula. Determinar el peso equivalente del tiosulfato de sodio pentahidratado: En solucin acuosa los iones tiosulfato se oxidan a iones tetrationato: 2 S2O32 S4O62 - + 2 e-

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En el radical tiosulfato, el nmero de oxidacin del azufre es + 2 y en tetrationato de + 2,5. El aumento de cambio es de electrn por cada azufre, como existen dos azufres el cambio total ser de un electrn, luego el peso equivalente del tiosulfato ser su mismo peso frmula o molecular.

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Miremos el caso del permanganato de potasio, en medio cido presenta la reaccin: MnO4- + 8 H+ + 5 eMn2 + + 4 H2O

El cambio del nmero de oxidacin del manganeso es de + 7 a + 2, es decir cinco, luego su peso equivalente equivaldr a la quinta parte del peso frmula. En el bicromato de potasio, en medio cido la reaccin que exhibe es: Cr2O72 - + 14 H+ + 6 e2 Cr3 + + 7 H2O

El cambio en el nmero de oxidacin en cada cromo es de + 6 a + 3, es decir de tres electrones, como en la molcula tenemos dos tomos el total ser de seis luego el peso equivalente equivaldr a dividir por seis el peso frmula. Por ltimo determinemos el peso equivalente del yodo, este se reduce a yoduro: I2 + 2 e2 I-

El cambio en el nmero de oxidacin por cada yodo es de uno, como en la molcula se tienen dos tomos, el cambio total ser de dos y el peso equivalente ser la mitad del peso frmula o molecular del yodo. Los valorantes oxidantes ms conocidos son el permanganato de potasio, el bicromato de potasio y el yodo, los cuales dan origen a los mtodos llamados Permanganimetra, dicromatometra y yodometra respectivamente. Los reductores ms utilizados son el oxalato de sodio, el tiosulfato de sodio y el anhdrido arsenioso, los cuales se utilizan en conjunto con los oxidantes nombrados. Los requisitos fundamentales para que una sustancia pueda utilizarse como oxidante en una valoracin dada, son los siguientes: El oxidante ha de ser lo bastante fuerte como para que la reaccin con la sustancia que valora sea prcticamente completa. El oxidante slo debe reaccionar con la especie deseada, ignorando las dems especies presentes en la solucin, es decir, debe ser selectivo. La reaccin de valoracin debe ser rpida; en caso de que la velocidad no sea la ptima, deben darse las consideraciones necesarias para acelerarla y hacerla til en el anlisis. Despus de esta introduccin, vamos a analizar los fundamentos de dos tcnicas de volumetra Redox que tiene inters en el campo de los alimentos: permanganimetra y yodometra. 3.3.1 Permanganimetra.

El permanganato de potasio es un oxidante fuerte, sin embargo puede actuar de diversa manera dependiendo de si el medio es cido, neutro o alcalino. Su estndar primario es la sal de Sorensen u oxalato de sodio, es importante tener en cuenta las siguientes precauciones para su estandarizacin como: Una vez disuelto el oxalato, en una concentracin 1,5 N en medio sulfrico, se debe titular inmediatamente. La disolucin se debe calentar entre 80 y 90 C para realizar la valoracin y el punto final no debe estar a menos de 60 C. La solucin valorante de permanganato se debe adicionar directamente sobre la solucin a valorar y agitando para evitar la acumulacin de un gran exceso localizado que forma un precipitado oscuro de xido de manganeso por la disminucin local de hidronios.

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La agitacin no debe ser muy violenta ya que puede solubilizar aire permitiendo que el oxalato pase a cido percarbnico que se descompone en dixido de carbono y perxido de hidrgeno que puede perderse modificando los resultados obtenidos. De ser posible, es necesario hacer un blanco de reactivos. Vamos a estudiar su comportamiento en medio francamente cido, preferencialmente junto al cido sulfrico que es el nico cido al que no reduce; ya habamos visto la reaccin qumica de esta sustancia y conocemos que su peso equivalente es la quinta parte de su peso molecular, ya que el ion permangnico pasa a ion manganoso perdiendo cinco electrones por molcula. La solucin normal (1 N) es demasiado concentrada por lo que se prefiere utilizarla 0,1 N o ms diluida. El ion permangnico tiene color violeta, mientras que el manganoso es incoloro, lo que significa que el mismo sirve de indicador, pero buscando un tenue color rosado para evitar el error de la titulacin. Este color no dura demasiado por lo que desaparece debido a que el permanganato en exceso reacciona con el manganoso mediante la siguiente reaccin: MnO4- + 4 H+ + 3 eMn2 + + 2 H2O MnO2 + H2O MnO2 + 4 H+

Una de las aplicaciones de este mtodo es la determinacin de metales bajo la forma de oxalatos. Muchos metales, excepto los alcalinos, forman oxalatos insolubles con el agua, las cuales se solubilizan en medio cido librando el oxalato y pudindose determinar de manera indirecta la concentracin del metal. Las reacciones implicadas son: C2O42 - - 2 eMnO42 - + 8 H+ + 5 e2 CO2 Mn2 + + 4 H2O

Ilustremos el caso con la determinacin de calcio en productos lcteos (leche, queso, yogurt) a partir de sus cenizas. Una vez calcinada la muestra, es necesario efectuar una solubilizacin con cido como el sulfrico, despus se procede a la precipitacin del oxalato de calcio, como se encuentra conjunto con el magnesio, es necesario eliminarlo para ello se realiza la precitacin del calcio utilizando un buffer de amoniaco cloruro de amonio; se adiciona el oxalato de amonio garantizando la precipitacin del oxalato de calcio: Ca2 + + (NH4)2C2O4 CaC2O4 + 2 NH4Cl

El reactivo precipitante debe aadirse en caliente, lentamente y agitndolo con el fin de obtener una cristalizacin apropiada para facilitar el proceso de filtracin y7 el lavado. Se deja madurar el precipitado por media hora y en caliente, luego se separa por filtracin y se lava para eliminar el exceso de oxalato controlndolo con solucin de permanganato. Despus se solubiliza el oxalato de calcio con cido sulfrico liberando el cido oxlico: CaC2O4 + H2SO4 CaSO4 + H2C2O4

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Sigue la valoracin del cido oxlico, la cual se hace en caliente para acelerar la reaccin del permanganato con el cido oxlico hasta alcanzar un ligero color violeta momento en el que se suspende la valoracin. Para los clculos se tiene en cuenta cmo por cada mol de cido oxlico hay un mol de calcio y cmo el cambio electrnico en la oxidacin es de dos electrones por cada mol de oxalato y el peso equivalente equivaldr a la mitad del peso molecular del calcio.

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No estudiamos los cambios qumicos del permanganato en medio neutro o bsico ya que su aplicacin en el campo de los alimentos es reducido o nulo, pero si tiene algn inters puede ubicar cualquiera de los textos de la bibliografa y profundizar en el tema. 3.3.2 Yodometra.

El yodo se solubiliza en agua formando soluciones 1,33*10- 3 M a temperatura ambiente, sin embargo se puede incrementar en presencia de yoduros solubles como el de potasio, hasta mayores concentraciones debido a que se forma el complejo: I2+ II3-

Ese ion es la especie principal en las soluciones usadas como valorante de mtodos directos o en soluciones provenientes de la oxidacin del yoduro en los mtodos indirectos, sin embargo, por convencin se utiliza la frmula molecular del elemento en las reacciones qumicas en las que participa. Esta sustancia se puede utilizar en dos formas; una como valorante directo y otra, aadiendo un exceso conocido y titulando por retroceso con otras soluciones estandarizadas como la del tiosulfato o el arsenito de sodio, aunque el ms usado es el primero: I2 + 2 S2O32 2 I- + S2O62

El medio en que ocurre esta reaccin debe ser neutro o dbilmente cido ya que en medio bsico sufre los siguientes cambios: I2 + 2 OH3 IOH2O + I- + IO2 I- + IO3-

Adems, la valoracin del yodo con tiosulfato en disolucin alcalina no transcurre segn la reaccin indicada sino que parte del tiosulfato se oxida a sulfato, siendo proporcional a la alcalinidad de la disolucin: S2O32 - + 4 I2 + 10 OH2 SO42 - + 8 I- + 5 H2O

Esta tcnica tiene dos fuentes de error: una es la volatilidad del yodo que se minimiza acomplejndolo y titulando a temperatura ambiente y la segunda es la oxidacin que puede sufrir con el oxgeno del aire; si la solucin est en medio neutro no ocurre ese fenmeno, ya que depende de la concentracin de hidronios que haya en el medio de reaccin, por ello el agua de disolucin debe hervirse para eliminar el oxgeno disuelto, ni tampoco utilizar fuentes de luz muy fuertes que ayuda en este fenmeno. El yodo puede servir de auto indicador ya que en solucin acuosa tiene un ligero color amarillo fcilmente detectable, sin embargo para tener mucho ms seguridad, se utiliza una solucin de almidn, al calentar esos grnulos se descompone en amilosa y que al interactuar con el yodo forma un complejo de adsorcin azul intenso yodo amilosa yoduro. No se puede utilizar en medio cido debido a que el almidn y sus restos se hidrolizan y pierde sensibilidad de deteccin cuando se encuentra en medio alcohlico. En las titulaciones directas la primera gota del yodo valorante produce inmediatamente el complejo coloreado indicando el fin de la reaccin, pero en las titulaciones indirectas, el almidn se aade hasta que se haya valorado la mayor cantidad posible de yodo pues forma un complejo menos sensible al tender a mantenerse unido al almidn, dificultando la ubicacin del punto final. El complejo yodo almidn es afectado por la temperatura, siendo muy sensible a temperaturas cercanas a 0 C, y los solventes orgnicos que promueven la disolucin del yodo en ellos sobre la formacin del complejo. En el campo de los alimentos, se utiliza una tcnica de yodometra para determinar el ndice de yodo de las grasas y aceites, el yodo se adiciona a los dobles enlaces de los cidos grasos no saturados cuantitativamente y bajo condiciones controladas:

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CH3 CH = CH CH3 + I2 CH3 CH CH CH3 | | I I Basndose en est reaccin, el ndice de yodo se define como los gramos de yodo adsorbidos por 100 g de la sustancia grasa. El ndice de yodo esa tal vez el mejor mtodo para clasificar las sustancias grasas, de acuerdo co su capacidad de secantividad. As, los aceites secantes y los de pescado tienen ndices de yodo muy elevados que sobrepasan de 120. Los no secantes tienen ndices inferiores a 100 y los semisecantes tienen ndices intermedios. Las grasas vegetales entre 30 y 60 y los animales por debajo de 90. Es tambin un mtodo excelente para comprobar la pureza de una sustancia grasa. En los aceites hidrogenados no se altere sensiblemente el ndice de saponificacin pero si notablemente el ndice de yodo, dependiendo de la intensidad de la hidrogenacin. En cambio, su punto de fusin es ms elevado que el de los aceites de origen. Son solubles en los disolventes de las grasas (ter, cloroformo, etc.) pero son muy poco solubles en alcohol. Si conocemos los constituyentes de una mezcla, por ejemplo de dos aceites, podemos calcular el porcentaje de cada uno aplicando las siguientes frmulas: 100 (I n) X = mn En las cuales: ; Y = 100 X

X = % de aceite M. Y = % de aceite N. m = ndice de yodo de M puro. n = ndice de yodo de N puro. I = ndice de yodo de la mezcla.

El ndice de yodo puede variar ligeramente con la edad y el estado de conservacin de las sustancias grasas. Los materiales viejos y mal conservados tienen por lo general valores inferiores a la misma sustancia fresca y bien conservada. Esta variacin es ms crtica para los aceites secantes que absorben fcilmente el oxgeno del aire. Se han propuesto varios mtodos para esta determinacin, los cuales son similares en su tcnica y solamente se diferencian en la solucin de halgenos utilizada y en el tiempo de contacto; nos referimos a los siguientes mtodos: Tabla 28. Tcnicas para la determinacin del ndice de yodo en aceites y grasas. Mtodo Hbl Wijs Hanus Solucin halogenante Yodo el alcohol, HgCl2 en alcohol. Yodo cloruro en cido actico. Yodobromuro en cido actico.

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| | I Br C=C + | | CC

Actualmente se prefiere el mtodo de Hanus, el cual debe efectuarse corriendo un blanco de reactivos paralelo al anlisis. En esta tcnica, el mecanismo por el cual ocurre la reaccin parece ser el siguiente:

163

I Cl

| Br I

Pues se ha comprobado que el yodo requiere del bromo o del cloruro para adicionarse al doble enlace69. ACTIVIDAD PRCTICA 8 1) Mediante un mapa conceptual, establezca las relaciones de reacciones Redox, oxidacin, reduccin, agente oxidante, agente reductor, nmero de oxidacin y peso equivalente. 2) Balancee las siguientes reacciones: Hg2Cl2 + NH3 Hg(NH2)Cl + Hg + NH4+ + Cl HgCl42 - + S + NO Bi + Sn(OH)62 -

HgS + Cl- + NO3- + H+ Bi(OH)3 + Sn(OH)3 + OH-

3) Qu es el agua regia? Para que sirve? Ilustre su comportamiento mediante reaccin. 4) Calcule el peso equivalente de estas sustancias en las siguientes reacciones: H2C2O4.2H2O 2 CO2 + 2 eH3Fe(CN)6 K4Fe(CN)6 1 e-

3.4

Volumetra de iones complejos.

Vamos a mencionar rpidamente esta tcnica ya que su aplicacin en el campo de los alimentos es muy reducida. Un ion complejo es una sustancia proveniente de la unin por enlace covalente coordinador generalmente a un catin metlico y principalmente de los del grupo de transicin en la tabla peridica debido a la disponibilidad de orbitales atmicos que pueden dar cabida a un par de electrones libres que tienen otras sustancias denominadas ligandos. La teora de coordinacin de Werner permiti la explicacin de esas uniones que desde la teora atmica moderna no eran comprensibles; esta teora considera una esfera de ionizacin que corresponde a la que normalmente tiene el tomo para efectuar las uniones corrientes y otra interna, denominada esfera de coordinacin donde est la posibilidad de establecer uniones covalentes coordinadas. Veamos el caso del hierro en un compuesto como el hexacianoferrato de potasio (K4Fe(CN)6). La valencia del hierro es + 2, lo que indicara que recibira dos aniones cianuro, pero en la molcula hay seis y fuera de eso aparecen cuatro cationes de potasio, utilizando los conocimientos de la teora atmica moderna trabajada en su curso de Qumica General no encontramos forma de poder acomodar todas esas especies qumicas que aparecen en la molcula.

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H2S 8 e- SO42 -

H2S 2 e- S

69

MAHECHA, Gabriela y otros. Anlisis y control de calidad. Volumen II. Bogot: UNISUR, 1993., p. 167 170.

164

Lo que podemos hacer es mirar en detalle la estructura electrnica del hierro, sabemos que tiene un Z = 26 y una distribucin electrnica: 1s2 2s2 2p6 3s2 3p6 3d6 4s2. En el caso del catin ferroso, ha cedido un par de electrones, acomodando dos cianuros que saturaran sus valencias. Si observamos en detalle los cianuros restantes, encontramos que tienen un par de electrones libres provenientes del nitrgeno, los cuales se acomodaran en los orbitales 3d, 4s y 4p del hierro que estaran disponibles conformando su esfera de coordinacin, algo parecido a un fenmeno de hibridacin slo que sera sd. Esto comprendera tambin la modificacin de la estructura espacial de la molcula correspondiendo a una bipirmide tetragonal. La figura 11 nos ilustra grficamente la explicacin que acabamos de escribir. Figura 11. Esquemas de la esfera de coordinacin y de la estructura espacial del K4Fe(CN)6 3d
CN

4s

4p

CN CN Fe CN CN

Algunas de estas reacciones tienen importancia en el anlisis cualitativo para la identificacin especfica de algunos cationes metlicos70, que incluso pueden ser usados con fines cuantitativos en las tcnicas de absorcin de energa luminosa como lo veremos en la prxima unidad. En las tcnicas volumtricas suele tener importancia la determinacin de algunos metales utilizado el ligante del cido etilendiaminotetractico EDTA o de su sal de sodio, debido a que es mucho ms soluble, adems se considera como un estndar primario por lo que no es necesario estandarizarla, como la solucin es incolora y tampoco desarrolla colores cuando se compleja con el catin metlico se utilizan indicadores que lo forman cuando interactan con el catin. Una vez se inicia la titulacin, son eliminados del indicador hasta cambiar completamente el color. Esos indicadores son especficos para los metales como en el caso del negro de eriocromo T usado en valoracin de calcio, magnesio, plomo, zinc y cadmio, la murexida para valorar calcio, cobalto, nquel y cobre, el cromo azurol S en la titulacin de hierro y cobre o la prpura de ftalena para el bario y el silicio. 4. La tcnica de la volumetra.

Una vez estudiadas cada una de las posibles formas de emplear la titulacin dependiendo del tipo de reaccin qumica por utilizar, ahora establezcamos las condiciones en que experimentalmente o en el laboratorio desarrollamos estos procesos. 4.1 Condiciones.

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CN

70

Si est interesado (a) en profundizar sobre este tema, puede recurrir al texto: RAMREZ, Ins Bernal de, y otros. Qumica analtica. Op. Cit., p. 217 274.

165

Primero vamos a discutir el material volumtrico utilizado y las precauciones en su uso aunque ya se dieron algunas recomendaciones en la primera unidad, especialmente en lo relacionado con el error y la exactitud que pueden tener estas tcnicas en la determinacin qumica de sustancias de inters. 4.1.1 El material volumtrico.

Las tcnicas volumtricas, como ya se ha mencionado anteriormente, se basan en la comparacin de volmenes de sustancias de concentracin conocida contra los volmenes medidos de las sustancias de concentracin desconocida, luego su equipo fundamental son los balones aforados, las buretas, las pipetas y las probetas. Materiales elaborados en vidrio al boro silicato preferentemente para evitar el ataque qumico sobre todo de las soluciones alcalinas, aunque por prevencin se prefiere almacenarlas en recipientes de plstico que son ms resistentes. Estn diseados y calibrados por el fabricante para verter una cantidad conocida de lquido a 20 C, pero es necesario para la obtencin de resultados ms exactos la calibracin de los mismos, generalmente estableciendo el peso de agua destilada y haciendo las relaciones de correccin por empuje de las pesas de la balanza y de dilatacin por la temperatura del material. Haremos algunos comentarios al respecto cuando estemos describiendo las caractersticas de cada uno de ellos; en nuestro trabajo experimental no incluimos estas tcnicas debido a lo escaso del tiempo y a la necesidad de ilustrar otras tcnicas ms importantes para su formacin profesional. 4.1.1.1 Matraces o balones aforados. Son recipientes diseados para contener un determinado volumen, por ello se tienen de 25, 50, 100, 250, 500 y 1000 mL, que el fabricante ha marcado con una lnea grabada en el cuello del mismo; por lo general se busca que el fondo del menisco coincida con la lnea de enrace. Tienen una tapa esmerilada o de tefln que le da cierta hermeticidad sobre todo para poder homogenizar la solucin final mediante agitacin. El fabricante cumple con especificaciones definidas por el National Bureau of Standards relacionadas con la construccin, forma, dimensiones, posicin de los trazos de calibracin, dimetros del cuello y tolerancia de la capacidad indicada. Se pueden calibrar por comparacin con las ampollas de calibracin del Morse Blalock o por peso de la cantidad de agua que contienen hasta el enrace, efectuando las correcciones de densidad del agua por temperatura, correccin por expansin del vidrio por diferencia de temperatura y de empuje de la balanza utilizada. Efectuadas dichas correcciones es necesario identificar el baln correspondiente para sumar o disminuir la diferencia de volumen encontrada en dicha calibracin. Como todo material de vidrio, es necesario manejarlo a la temperatura de calibracin, si necesariamente se tiene que usar modificando la temperatura, establecer condiciones para que ocurra en equilibrio trmico con el medio ambiente y necesariamente se debe volver a calibrar. Para su limpieza basta un cepillo, jabn detergente y suficiente agua destilada, verificando que escurre de manera homognea sin fraccionamientos grasos de la pelcula de agua. 4.1.1.2 Pipetas graduadas y aforadas.

Recipientes de vidrio que entregan volmenes de lquidos. Las graduadas pueden hacerlo parcialmente, mientras que las aforadas entregan un volumen total definido por su capacidad hasta una marca en el mismo aparato. Generalmente se utilizan de 5, 10, 25 y 50 mL aunque existen las llamadas micro pipetas que lo hacen en volmenes muchsimo ms pequeos. En trabajos con equipos de espectrofotometra se usan de 1, 2, 3 y 5 mL; por ser equipo de precisin y se construyen siguiendo especificaciones del National Bureau of Standards (NBS) como en el caso de los balones aforados. Se calibran midiendo el peso del volumen de agua que entrega en un recipiente de vidrio previamente tarado; es decir, al que se le ha determinado exactamente su peso en una balanza analtica y dejando que escurra la ltima gota tocando la pared del recipiente. Por ningn motivo se debe soplar una pipeta para expulsar el

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agua residual de la punta de la misma, efectuando la medida varias veces se puede saber exactamente el volumen que entrega la pipeta y que corresponder al que se debe registrar cuando la utilicemos. Por ningn motivo se debe pipetear utilizando la boca, para llenarla se recurre a una pera de goma, la cual tiene vlvulas que ayudan a regular la entrada y la salida del lquido. El uso de la misma se lo dir el instructor de laboratorio en el momento en que tenga que utilizarla. 4.1.1.3 Buretas. Es un cilindro de vidrio con una llave de paso de tefln, que entrega volmenes muy precisos. En el trabajo volumtrico se utilizan de 25 y de 50 mL de capacidad y su escala permite efectuar medidas precisas de 0,05 mL. Las normas de construccin del NBS establecen que entre dos trazos adyacentes deben tener el espacio de 1 mm; los trazos deben cubrir al menos la mitad de la circunferencia de la seccin transversal de la bureta y cada intervalo de diez divisiones deben tener un trazo que cubra toda la circunferencia de esa seccin, la longitud de la parte graduada de la bureta no debe exceder de 70 cm y disponer de un tiempo de entrega no mayor a 3 minutos. Se calibra mediante el peso de agua entregado por pequeos volmenes (p.e., cada 5 mL) hasta alcanzar su capacidad final. Al momento de cargar la bureta, es necesario verificar que el vstago debajo de la llave contenga lquido y nada de burbujas ya que puede cambiar a lo largo de la determinacin cuantitativa ocasionando errores groseros. 4.1.1.4 Probetas. Cilindros de vidrio que tienen una escala graduada en su pared, utilizado para la medida algo precisa de volmenes relativamente grandes sin necesidad de utilizar las pipetas o la misma bureta que si los entregan un poco ms exactos. Todo material de vidrio debe estar perfectamente limpio y sus paredes internas libres de grasa, por ello despus de su uso se lavan muy bien con cepillo o churruzco (de ser posible) y una solucin de detergente, despus se juaga muy bien con agua destilada, controlando que no exista fractura en la pelcula homognea que queda o zonas con aspecto graso tpico; si ello ocurre, es necesario lavar nuevamente utilizando tcnicas apropiadas que les puede indicar el instructor. Al momento de utilizar cualquier equipo volumtrico es necesario juagarla con un poco del reactivo para evitar su dilucin y despus si llenarlo, llevar hasta el afore y realizar el proceso de disposicin final del mismo segn las instrucciones del procedimiento. Esta tcnica se denomina purgar el equipo volumtrico. 4.2 Metodologa de la titulacin.

Vamos a realizar una descripcin de los dos procedimientos que se suelen utilizar en el laboratorio en estas determinaciones, como evento preparatorio a las experiencias que debe realizar en el laboratorio. De hecho que estas orientaciones tienen sentido al desarrollarlas en la prctica, sirven para que se prepare mentalmente en la ejecucin de las mismas; su instructor es de gran ayuda para minimizar los errores. 4.2.1 Preparacin de soluciones.

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Los reactivos ms comunes son slidos y lquidos, esto significa que para preparar las soluciones a utilizar en el laboratorio se requiere realizar un conjunto de operaciones preliminares para obtenerlas. Digamos que vamos a preparar el estndar primario o la solucin de un reactivo slido como el hidrxido de sodio en perlas. Lo primero es disponer de un vidrio de reloj, un pesa sustancias o un pequeo vaso de precipitados (de 50 mL) al que taramos o, mejor, determinamos su masa en la balanza analtica de precisin. Fuera de la balanza, se toma un poco del reactivo slido del recipiente donde se almacena utilizando una

167

esptula y se deposita en el material de vidrio tarado, nuevamente se determina la masa en la balanza analtica tratando de no manipular tanto el recipiente con los dedos sino con una pinza para crisol para no cometer errores de masa debido a la grasa natural que tenemos en la mano. Aqu el analista debe tener una medida dada por la experiencia para tomar la cantidad de sustancia requerida para la solucin. Una vez pesada, ya se puede tomar con la mano y transferirla a un vaso de precipitados para dar inicio a la disolucin de la misma, con ayuda de un frasco lavador, se aade agua y con un agitador de vidrio se homogeniza. En el caso de la base se genera calor, siendo necesario proteger la mano y los ojos de posibles proyecciones sino se hace cuidadosamente, se sigue diluyendo con agua destilada hasta un volumen cercano al de la solucin y se transfiere al baln aforado y se completa a volumen usando el frasco lavador. Se tapa y se homogeniza agitando circularmente cuidando de no hacer derramaderos. Para el caso del patrn primario, se transfiere a un erlenmeyer lavando cuatro veces el vaso y el agitador para garantizar la transferencia cuantitativa de toda la sustancia que ha sido pesada. Luego se aade unas gotas del indicador y se da inicio a la titulacin siempre y cuando el reactivo valorante no sea auto indicador en cuyo caso no se adiciona. La preparacin de reactivos es ms simple cuando se trata de uno lquido, en ste se toma la cantidad requerida en una probeta y se adiciona al agua destilada contenida en un vaso de precipitado limpio; si se trata de una sustancia como un cido, este proceso genera mucho calor por lo que es necesario adicionar lentamente y con agitacin continua ayudado de un agitador de vidrio para poder distribuir uniformemente la energa trmica generada sin que vaya a producir proyecciones que afecten la concentracin de la sustancia por prdida, o lo ms grave, ocasionarle quemaduras en la piel o en los ojos, de ah la importancia de que en el equipo de laboratorio siempre tenga unas gafas puestas y sin lentes de contacto. Una vez adicionado todo el reactivo y permitiendo la disminucin de la temperatura puede pasar la solucin al baln aforado, juagar muy bien el vaso y aadir esas aguas de lavado al baln y completar al afore utilizando el frasco lavador. No olvide homogenizar luego de colocar la tapa mediante rotacin. 4.2.2 Estandarizacin de las soluciones.

Algo ya mencionamos en la parte anterior. Se pesa el estndar primario y se disuelve en un poco de agua destilada, se transfiere cuantitativamente a un erlenmeyer y dependiendo de las condiciones de la reaccin se agrega un indicador externo o se modifica la temperatura. Luego se carga en la bureta luego de ser juagada con el reactivo de titulacin, se llena con un vaso pequeo teniendo cuidado de tener la llave cerrada hasta un poco ms arriba de la primera marca, despus se abre un poco la llave y se recoge el excedente en el vaso utilizado para llenarla cuidando de no dejar en el vstago burbujas de aire y verificando que la llave abre y cierra sin dificultad y sin ocasionar derrames por los lados, lo que sera fatal en el momento del ensayo. Una vez llena la bureta y enrazada a cero, coge el erlenmeyer con la mano derecha y la llave de la bureta con la izquierda y va adicionando pequeos volmenes y agitando el sistema para que la reaccin sea rpida y controla el cambio de color durante la adicin, los analistas expertos comienzan aadiendo las cantidades de reactivo mediante una vuelta completa de la llave, giro ocasionado con la mano que tiene la llave, y continan as hasta el momento en que la desaparicin del color del indicador es muy lenta. Aqu regulan la llave para entregar gota a gota de modo que en el momento en que persista el color tenue del indicador (al menos de un segundo) se suspende la adicin y se hace una primera medida del volumen consumido directamente de la bureta. Si ha desaparecido, aaden otra gota y esperan hasta que persista al menos por un minuto mostrando el punto final. Como lo puede deducir, el analista no espera hasta que ocurra un cambio franco de color sino aquel que puede percibir en un corto tiempo. No olvide que estas mediciones tambin se hacen por duplicado para determinar la reproducibilidad del resultado y la precisin del mismo como lo mencionamos en la primera unidad. 4.2.3 Alcuota o volumen de la muestra.

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En esta etapa se da inicio a la valoracin de la sustancia problema la cual tambin se encuentra en solucin. Para su medicin se recurre a la pipeta aforada, normalmente de 25 mL, aunque muchas veces el mtodo indica la que se debe utilizar. Como se mencion antes, la toma se debe realizar mediante una pera de

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caucho, por ello es necesario que se entrene varias veces en su manejo utilizando agua destilada. Una vez adquirida la destreza de preparacin, aspirada de volumen y entrega dentro del erlenmeyer donde se va a efectuar la titulacin, realiza la toma de muestra y aade el indicador siempre y cuando la tcnica lo requiera y se procede a efectuar la titulacin. 4.2.4 Purga y carga de la bureta.

Como lo mencionamos en el aparte de la estandarizacin de la solucin valorante, se realiza la preparacin de la bureta. Para ello se juaga con agua destilada para eliminar restos de reactivo, a no ser que sea la misma sustancia la que se vaya a utilizar para la valoracin del problema, en cuyo caso lo que hacemos es llenarla empleando un vaso de precipitados, se ajusta a la marca de cero teniendo cuidado de no cometer el error de paralaje. Este se debe a la posicin que tiene la marca de cero con respecto al ojo del analista; lo ptimo es efectuar la medicin en sentido perpendicular a la bureta, es decir observndola directamente, no en ngulos por encima o por debajo ya que la apreciacin que se tiene es distinta. Mientras se desarrolla la habilidad adecuada para la medicin, se aconseja tener una tarjeta blanca con una lnea negra trazada en el centro, que se coloca detrs de la marca de cero y el observador se coloca al frente y busca la mejor posicin de coincidencia de las dos marcas y con ella controla el menisco o forma arqueada que toma la solucin dentro de la bureta (lo mismo que en la pipeta). El mejor procedimiento es hacer coincidir el fondo del menisco con la marca de cero, a no ser que el solvente sea muy coloreado que realmente impida detectarlo, en cuyo caso el enrace se har con la superficie externa del menisco que est en contacto con la pared interna de la bureta. Esto puede parecernos algo complejo de comprender pero se har ms fcil ya en el trabajo experimental 4.2.5 Titulacin de la muestra.

Listo el erlenmeyer con la alcuota y el indicador, se toma con la mano izquierda utilizando los dedos pulgar e ndice para sujetar el cuello y efectuar el movimiento de rotacin del frasco mientras que con la derecha se sujeta la llave de la bureta y se comienza a girar para que haga entregas uniformes y rpidas o, mientras adquiere la destreza, efectuar la adicin gota a gota relativamente rpida, se agita el erlenmeyer rpidamente hasta que desaparezca el color del indicador. Como lo mencionamos al momento de estandarizar la solucin, es necesario controlar el tiempo que dura el color del indicador; al inicio de la titulacin es muy corto, pero a medida que nos acercamos al punto final, se demora mucho ms en desaparecer por lo que se debe controlar cuidadosamente la adicin del valorante. Cuando se demore ms de un minuto, hemos alcanzado el punto final y debe ser muy tenue; un color intenso del indicador indica que nos hemos sobrepasado y hay error, siendo necesario repetir el ensayo, sin embargo al registrar el volumen titulado, podemos en la repeticin aadir rpidamente un volumen inferior a 10 mL del registrado y luego seguirla gota a gota hasta obtener el color tenue del indicador en el tiempo indicado No olvide la necesidad imperiosa de efectuar las determinaciones mnimo por duplicado para poder reportar los resultados como lo aprendimos en la unidad anterior. 4.2.6 Registro de resultados.

Como en la gravimetra, el cuaderno de laboratorio es la herramienta fundamental para el registro de los datos de la muestra, la forma de obtencin, las determinaciones efectuadas y el orden de los mismos utilizando tablas como lo hemos mencionado anteriormente. Es necesario que usted adquiera ese hbito y que se lo reforzar su profesor (a) tutor (a), como parte de los requisitos para la aprobacin de este curso. 4.3 Manejo de datos y expresin de resultados.

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Dependiendo de la tcnica volumtrica, se expresarn los resultados correspondientes; como en el caso de la gravimetra, es necesario efectuar clculos utilizando los correspondientes factores volumtricos, sobre todo debido a las alcuotas tomadas y a la expresin de las concentraciones en unidades qumicas que siempre estn relacionadas a volmenes de un litro, a pesos o a fracciones molares. Por ello, al expresar los resultados de cualquier ensayo, es necesario que verifique la forma en que los debe reportar (porcentajes, relaciones

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masa/volumen, volumen/volumen, unidades qumicas/unidades fsicas). Parte de ello lo estaremos trabajando en el laboratorio.

ACTIVIDADES DE LABORATORIO
En estas actividades prcticas, tendr la oportunidad de aplicar sus conocimientos tericos trabajados en esta unidad en la resolucin de problemas prcticos que se suelen encontrar en el campo de los alimentos, especialmente en actividades relacionadas con la investigacin y el control de calidad. Las determinaciones que va a efectuar comprenden a trabajos que debe realizar utilizando mtodos cuantitativo clsicos de la gravimetra y la volumetra, por ello es necesario tener presente las indicaciones ya estudiadas y practicadas en la unidad anterior relacionadas con las normas de seguridad, los elementos de proteccin que debe traer al laboratorio, la preparacin conceptual y de organizacin previas al mismo y, lo ms indispensable su cuaderno de laboratorio. Conjuntamente con su tutor (a) debern establecer el cronograma de trabajo ya que aunque parecen muchas prcticas, es posible realizarlas en una sesin de dos das siempre y cuando se distribuya adecuadamente el tiempo, se puedan realizar algunos ensayos en paralelo ya que algunas de ellas requieren cierto tiempo, aunque controlado, no exige de su plena dedicacin quedndole tiempo libre que puede utilizar para iniciar otra prctica que puede terminar mientras la otra est en ejecucin. Esto significa que necesariamente requerimos de un ejercicio de planeacin eficiente que optimice nuestro proceso de aprendizaje con la oportunidad de cumplir con los propsitos del curso. Las prcticas por realizar son: humedad y voltiles, extracto etreo y fibra cruda, uno de los procedimientos utilizados en el anlisis de los alimentos, cenizas y determinacin de calcio por permanganometra donde combinaremos gravimetra con volumetra Redox, determinacin del ndice de acidez y determinacin de nitrgeno, como aplicaciones de la volumetra cido base, determinacin del contenido de sal en una muestra alimenticia para demostrar la utilizacin de la tcnica argentomtrica de Volhard y finalmente, determinacin del ndice de yodo en grasas para mostrar la tcnica de yodometra, quedando ilustrado todo el componente terico trabajado en la unidad. El compromiso de parte del estudiante, le permitir realizar exitosamente estas experiencias y complementar mucho mejor su aprendizaje.

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HUMEDAD, VOLTILES, EXTRACTO ETREO Y FIBRA CRUDA EN ALIMENTOS.

En la primera actividad de la Unidad uno de este curso, mencionamos el sentido del anlisis bromatolgico o de alimentos, describiendo los principales ensayos que lo componen, aqu vamos a seguir una secuencia debido a la facilidad de trabajar con la misma muestra por lo que debemos ser muy cuidadosos en su manipulacin para evitar los errores groseros y necesariamente efectuar las determinaciones por duplicado para poder establecer la exactitud de nuestros ensayos. El agua no es un nutriente, sin embargo forma parte de casi el 80 % de los alimentos en su mayora y se requiere para el funcionamiento de las reacciones metablicas, el control de la temperatura en los animales de sangre caliente, por su momento dipolar alto es un buen solvente (disuelve aminocidos, electrolitos) que permite el movimiento de las sustancias metablicas. Tambin es un factor de conservacin de los alimentos ya que es necesario controlar su contenido y el equilibrio en sitios de almacenamiento. El contenido de humedad es un ndice de la estabilidad, calidad, rendimiento y cantidad de slidos que tiene un determinado alimento. Cuando est en contacto con el ambiente, se presentan tres fenmenos a considerar: el equilibrio que mantiene con la humedad relativa, la capacidad de adsorcin que pueda presentar el alimento y la transferencia que pueda presentar al estar en contacto con otros o con el mismo ambiente hasta alcanzar un determinado equilibrio. Esta tcnica tiene conceptos muy simples, comprende el peso de una muestra, secarla a una temperatura dada, enfriar y determinar la prdida de masa; la determinacin experimental es muy compleja porque depende de las caractersticas de la muestra, la facilidad de descomposicin de la misma (oxidacin de cidos grasos insaturados, fenoles entre otros), la prdida de otras sustancias voltiles debidas a aromas u otros componentes de la misma (aceites esenciales, etanol o cido actico). La exactitud requerida depende del producto analizado, el propsito del anlisis y las exigencias legales. El agua en un alimento se encuentra en tres formas: como solvente permitiendo la dispersin de los cristaloides de azcares, sales, cidos de bajo peso molecular y de macromolculas hidroflicas como protenas, gomas, compuestos fenlicos y otros presentes como coloides; adsorbida a las superficies de las estructuras del alimento como una especie de capa mono o polimolecular asociada mediante fuerzas intermoleculares o por caliparidad y en combinacin qumica como agua de hidratacin o de gelificacin. Los mtodos de determinacin del agua contenida en el alimento cuentan con esas fuerzas ya que por lo general pueden llegar a la determinacin de la denominada agua libre, es decir aquella que se evapora fcilmente en las condiciones del ensayo. El fundamento de la tcnica que vamos a experimentar es la prdida de agua y algunos voltiles de poca importancia al secar la muestra en una estufa a temperatura constante hasta obtener un valor permanente luego de dos determinaciones de masa. Es necesario tener en cuenta que esta tcnica no se aplica a alimentos con mucho aroma o que se descompongan a 100 C. En la misma determinacin podemos calcular la humedad y el contenido de slidos totales que tiene el alimento. Una vez seca la muestra, podremos determinar sobre la misma la cantidad de grasa o extracto etreo mediante la extraccin con solvente en caliente. Se recupera el solvente, se seca la muestra grasa y se pesa. Los lpidos contenidos en los alimentos no se encuentran dispersos debido a que son hidrofbicos, de cadena carbonada muy compleja y frecuentemente estn asociados a estructuras celulares del alimento (formacin de membranas). Sin embargo su determinacin es compleja porque depende del tipo de alimento y muchas veces se requiere utilizar tcnicas para su descomposicin en las unidades ms sencillas cuidando de no modificar sus propiedades qumicas (principalmente evitando la oxidacin); los solventes utilizados en la extraccin corresponde a ter, ter de petrleo o cloroformo, sin embargo la tcnica indica que tipo de sustancia y que solvente se puede utilizar en la determinacin analtica.

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Por ltimo, la fibra cruda representa un conjunto de carbohidratos que los animales monogstricos no podemos digerir pero que tienen una importante funcin en el movimiento de los desechos de la digestin dentro del tracto digestivo. Representa el contenido de lignina y de celulosa que contiene un determinado alimento. Se fundamente en la hidrlisis cida y luego bsica de una muestra previamente desengrasada con ter de petrleo, que es pesada seca y luego incinerada y vuelta a pesar; la diferencia encontrada en las dos determinaciones de masa representa la fibra cruda presente en el alimento analizado. Procedimiento 1) Humedad y voltiles. Pesar una cpsula de porcelana limpia y seca, luego de haberla dejado en la estufa a una temperatura de 100 a 102 C por quince minutos, luego de dejarla enfriar en un desecador71, utilizando la balanza analtica. Manipule la cpsula con una pinza para crisol. Determine exactamente la masa a 5 gramos de la muestra de alimento de su inters en la cpsula de porcelana, registre el dato en el cuaderno de laboratorio. Lleve a la estufa con temperatura entre 100 y 105 C y deje al menos seis horas. Pasadas, tome la cpsula con una pinza y colquela en el desecador hasta que se enfre, psela y pase nuevamente a la estufa, deje una media hora, saque, enfre y pese. Si la diferencia no es mayor de 1 a 3 mg puede terminar la determinacin analtica. Utilice el ltimo peso registrado. No olvide efectuar la determinacin por duplicado. 2) Extracto etreo. Tomar las muestras secas y pasarlas cuantitativamente a un dedal de extraccin de Soxhlet. Si no lo dispone, tome una hoja circular de papel de filtro de 15 cm de dimetro y a 5 cm de uno de los bordes dblelo y coloque en ese espacio al centro la muestra seca, luego a otros 5 cm del borde y perpendicular al doblez anterior haga otro cubriendo la muestra, repita lo mismo en el otro lado de modo que tiene una especie de sobre dentro del cual est la muestra, por el extremo libre enrrllelo y colquelo dentro del recipiente de extraccin. El baln, normalmente de 100 mL o recipiente de recibido del extracto, si utiliza un extractor Goldfish, debe ser previamente tarado como lo hizo con la cpsula de porcelana en la determinacin anterior. Determine su masa con exactitud. Luego aada 50 mL de ter de petrleo. Monte el aparato siguiendo las instrucciones del instructor de laboratorio, asegrese de mantener agua en el refrigerante, caliente cuidadosamente y permita la extraccin continua por unas tres horas o hasta que verifique que el solvente que sale del sitio de extraccin es incoloro. Apague la fuente de calor. Deje enfriar el sistema, retire la muestra, monte nuevamente y caliente hasta recuperar la mayor cantidad posible del ter de petrleo. No olvide manipular con pinzas o con guantes el recipiente de recoleccin del extracto para no aumentar el peso del mismo. Coloque el recipiente con el extracto graso en una estufa de secado a 100 102 C y controle hasta que haya desaparecido el olor al solvente. Pase al desecador, deje enfriar y determine la masa exactamente. Registre sus resultados en el cuaderno de laboratorio. No olvide efectuar la determinacin por duplicado. 3) Fibra cruda.
71

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Al dejar enfriar muestras en el desecador, por ningn motivo vaya a cerrar completamente la tapa ya que puede sellarla por diferencia de temperatura que genera al interior un vaco dificultando enormemente la apertura de la misma, demorando la experiencia.

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Pase la muestra desengrasada cuantitativamente a un recipiente del equipo de determinacin de fibra cruda, si no es posible, pselo a un baln de fondo redondo de 500 mL. Agregue 0,5 g de asbesto y 200 mL de solucin de cido sulfrico que contenga 1,25 g/ 100 mL, monte el equipo o al baln colquele un refrigerante en la boca y proceda a calentar por 30 minutos. Utilizando un crisol poroso, para filtracin o de Gooch, recupere el slido remanente y lvelo hasta fin de acidez controlando con un papel indicador. Pase cuantitativamente el residuo recuperado en el crisol de filtracin al baln de fondo redondo o al vaso del equipo, aada 200 mL de una solucin de hidrxido de sodio que contenga 1,25 g/100 mL y caliente a reflujo por otros 30 minutos. Filtre nuevamente en el crisol de Gooch, lave hasta fin de basicidad con agua caliente, seque en la estufa de 100 a 102 C hasta peso constante. Registre el dato en su cuaderno de laboratorio. Calcine el crisol en una mufla de 500 a 550 C hasta obtener cenizas grises o blancas, ms o menos una hora. Pase a un desecador y una vez fro determine su masa exactamente. Registre sus datos en el cuaderno de laboratorio. Expresin de resultados. Puede utilizar las siguientes frmulas para expresar los porcentajes de cada una de las determinaciones efectuadas: I. Humedad, voltiles y slidos totales. Peso de la muestra = Prdida de peso = Peso de la muestra seca = W3.

Porcentaje de humedad = Porcentaje de slidos totales = II. Extracto etreo.

Peso de la muestra = Peso del recipiente vaco = Peso recipiente y extracto =

Porcentaje de extracto etreo = III. Fibra cruda.

Peso de la muestra = Peso material insoluble = W6. Peso de cenizas = Porcentaje de fibra cruda = Informe.

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(W2/W1)* 100. (W3/W1)* 100. W1. W4. W5. [(W5 W4)/ W1]* 100. W1. W7. [(W6 W7)/ W1]* 100.

W1. W2.

No olvide presentar a su tutor(a) el documento conteniendo los resultados de esta experiencia luego de haberla trabajado en su grupo de estudio y siguiendo los lineamientos dados en la primera unidad.

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NDICE DE ACIDEZ
Determinacin analtica relacionada con la concentracin de hidronios disponibles que presenta un determinado alimento o producto alimenticio. La acidez es una propiedad que presentan los alimentos y que muchas veces est relacionada con el metabolismo de los organismos vivos de donde proviene y se utiliza con fines analticos para determinar propiedades relacionadas con su conservacin. En la leche y derivados lcteos puede determinar el grado de frescura, es decir, como han sido obtenidos y si se han observado los procedimientos que se siguen para su conservacin. En el caso de la leche cruda, si se deja cierto tiempo en contacto con el aire y a temperatura ambiente, se agria detectndose por cambios en aroma y sabor caractersticos, un descenso en el pH y un incremento en la cantidad de cido lctico. No obstante, existen productos madurados donde se busca, de forma controlada, aumentar su acidez. Otro ejemplo es la carne; cuando el ganado ha sido subalimentado o sometido a intenso ejercicio antes del sacrificio, por procesos normales de metabolismo se disminuye el contenido de glucgeno en el msculo, que impide la disminucin del pH y la desnaturalizacin de las protenas al alcanzar su punto isoelctrico, disminuyendo la capacidad de retener agua, propiedad favorable para la textura y la pigmentacin de la carne. El pH queda en valores de 6,6 y la cantidad de cido lctico es muy pequea, produciendo una carne de baja calidad. En frutas y hortalizas se puede presentar variaciones en su carcter cido debido a la presencia o ausencia de cidos orgnicos provenientes de la degradacin de los carbohidratos que producen principalmente cido ctrico y cido mlico. El contenido de cido vara con las fases de maduracin y senescencia, pero en las frutas tienen un rango de 2,4 (ctricas) hasta 5,0 (banano), mientras que en los vegetales el rango va de 5,0 a 7,0. Los cidos ms abundantes en los tejidos vegetales son el ctrico y el mlico; el primero predomina en las frutas ctricas, fresa y pia y en los vegetales en las papas, leguminosas, tomate y hortalizas de hoja. El cido mlico se encuentra en manzanas, ciruelas, albaricoques y en los vegetales en la lechuga, brcoli y coliflor. Otros cidos importantes son el oxlico que se encuentra en las espinacas y el tartrico en las uvas. En los cereales y derivados, la determinacin de la acidez es una prueba utilizada para evaluar la calidad del grano y de la harina puesto que dependiendo del grado de infestacin y la humedad pueden ocurrir fermentaciones indeseables, responsables de la aparicin de cidos que normalmente no se encuentran en esos productos.

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En la determinacin analtica de la acidez se suele expresar los resultados en el cido ms importante. Para el caso que nos ocupa, complementamos con la frmula y el peso equivalente de los cidos ms comunes: cido ctrico: (C6H8O7) CH2 COOH | HO C COOH | CH2 COOH cido mlico: (C4H6O5) HO CH COOH | CH2 COOH cido tartrico: (C4H6O6) COOH | HO C H | H C OH | COOH Procedimiento. Eq = P.F./2 = 67 g/Eq.

Eq = P.F./ 3 = 64 g/Eq.

Eq = P.F./2 = 75 g/Eq.

1) Preparacin de solucin de hidrxido de sodio.

Efecte los clculos para preparar 250 mL de una solucin 0,1 N de hidrxido de sodio partiendo del reactivo analtico. Pese la cantidad calculada en una balanza gramera utilizando un vaso de precipitados de 250 mL, aada agua destilada recin hervida, agite hasta disolver y controle la temperatura antes de transferirla a un baln aforado de 250 mL, cuando est fra, transvsela y complete a volumen utilizando un frasco lavador. Homogenice la solucin y psela a un frasco de plstico ya que por ser una solucin alcalina puede atacar el vidrio del baln aforado. No olvide marcar el frasco con el nombre de la sustancia y la fecha de preparacin. 2) Estandarizacin de la solucin de hidrxido de sodio.

La solucin anteriormente preparada no es un estndar primario, debido a la facilidad de hidratacin y de carbonatacin que presenta el hidrxido de sodio en perlas, por ello es necesario estandarizarla contra biftalato de potasio que si cumple las condiciones de un estndar primario. Mediante titulacin con una masa conocida del patrn primario, podremos efectuar la determinacin de la concentracin exacta de la solucin de hidrxido de sodio recin preparada. En un vidrio de reloj o en un vaso de precipitados de 50 mL, pese exactamente 0,5 g del biftalato cido de potasio, calidad reactivo analtico, previamente secado a 100 102 C y conservado dentro del desecador. Registre la masa en su cuaderno de laboratorio. Disuelva en un poco de agua destilada recin hervida y transfiera cuantitativamente a un erlenmeyer de 250 mL, aada dos a tres gotas de solucin alcohlica de fenolftalena al 1 %.

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Purgue y cargue la bureta con la solucin recin preparada de hidrxido de sodio y afore a cero. Titule la solucin de biftalato hasta obtener una coloracin rosa que persista 30 segundos. Registre en su cuaderno el valor obtenido y no olvide efectuar la determinacin por duplicado. Realice el clculo correspondiente y escriba en la etiqueta del frasco la concentracin en normalidad de la solucin con dos cifras significativas. 3) Determinacin del ndice de acidez. Dependiendo de su inters y de la muestra que ha trado al laboratorio (vinagre, encurtidos, frutas ctricas, leche, harina, vino, uvas), establezca previamente con su tutor (a) el tratamiento previo por realizar al tipo de muestra o consultando los mtodos definidos por la literatura para obtener la solucin del cido. Los alimentos lquidos necesariamente hay que efectuar una dilucin (excepto la leche que se toma la alcuota directamente y se titula) como ocurre con el caso del vinagre y del encurtido donde se debe tomar una alcuota de 10 mL y se diluye en un baln aforado de 100 mL. De all se toma una alcuota de 25 mL a la que se adiciona tres gotas del indicador fenolftalena y se titula con la solucin estandarizada de hidrxido de sodio hasta color rosado persistente por 30 segundos. Lo importante es que su titulacin no sobrepase los 25 mL o hasta 50 mL, correspondientes a la escala de la bureta utilizada en la titulacin para minimizar errores de procedimiento, sin perder la exactitud del mtodo que sigue manteniendo hasta la segunda cifra decimal. Clculos. La determinacin de la normalidad de la solucin de hidrxido de sodio se puede efectuar con la siguiente frmula: N = masa biftalato/(volumen consumido NaOH)Eq biftalato. EqBIFTALATO = 204,22 g/Eq.

En todos los casos, el resultado se debe reportar en gramos del cido principal presentes en 100 mL o gramos de muestra. Elabore el informe correspondiente conforme a las indicaciones dadas.

DETERMINACIN DE NITRGENO EN ALIMENTOS

Las protenas, adems de su importancia nutricional tienen un papel importante en sus propiedades organolpticas, textura debidas a interacciones con los lpidos y los carbohidratos o, como en el caso de la harina de trigo, un ndice de su capacidad de panificacin. Los mtodos utilizados en su determinacin se fundamentan en la determinacin de un elemento o un grupo especfico y luego calculando el contenido de protena utilizando un factor emprico ya establecido. El ms universal es la determinacin de nitrgeno y luego considerando que compone el 16 % de cualquier protena, es fcil determinar la cantidad total presente en la muestra analizada. El mtodo de anlisis de protenas ms exacto y confiable se basa en la determinacin de nitrgeno segn Kjeldahl, la cual se aplica a una gran variedad de compuestos orgnicos. Primero, la muestra se digiere

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qumicamente con cido sulfrico en ebullicin junto a un catalizador el cual convierte todo el nitrgeno orgnico en una sal de amonio. La solucin se alcaliniza para convertirlo en amoniaco, que se destila y se absorbe sobre un exceso conocido de cido clorhdrico acuoso. El exceso de cido clorhdrico sin reaccionar se titula luego por retroceso con hidrxido de sodio. Inicialmente el mtodo contempla la recoleccin del amoniaco destilado en solucin de cido brico y luego la valoracin con cido clorhdrico estandarizado, utilizando una mezcla de indicadores (rojo de metilo y azul de metileno) que permite efectuar la determinacin a un pH de 5,4. Las reacciones las habamos establecido en la actividad 1 de la primera unidad. Procedimiento. 1) Preparacin de reactivos. Catalizador. Mezclar 18,77 g de sulfato de cobre penta hidratado, 900 g de sulfato de potasio y 0,4 g de selenio finamente pulverizados, homogenice y guarde en un frasco de vidrio oscuro debidamente marcado. En algunos casos se consigue en forma de pastillas, por lo que se recomienda utilizarlas. cido brico. Pesar 20 g de cido brico, disolver y completar a 1 L; antes de aforar adicione 6,5 mL del indicador de Tashiro. La solucin debe quedar de un color morado plido que virar a verde brillante cuando tiene exceso de amoniaco. Indicador de Tashiro. Mezclar 50 mL de solucin alcohlica de azul de metileno al 0,05 % con 50 mL de solucin alcohlica al 0,1 % de rojo de metilo. Este indicador no dura mucho tiempo. cido sulfrico concentrado. Grado analtico. Hidrxido de sodio al 40 %. Almacenar en recipiente plstico ya que ataca fcilmente al vidrio, perdiendo su ttulo. cido clorhdrico 0,1 N. Debidamente estandarizado. 2) Digestin.

Dependiendo del tipo de equipo disponible en el laboratorio se tienen dos mtodos que vamos a describir aqu: Macro mtodo. Pesar exactamente 2 g de la muestra y pasar a un baln de Kjeldahl de 750 mL. Agregar 10 g del catalizador y 20 mL de cido sulfrico concentrado. Calentar en el digestor o sobre una llama, con el baln inclinado 40 dentro de una vitrina de gases hasta que la muestra se lice y presente al final un color verde claro. Dejar enfriar y agregar cuidadosamente y agitando unos 250 mL de agua destilada. Micro mtodo. Pese exactamente 0,2 g de la muestra y pasar a un baln de Kjeldahl de 100 mL, aada 5 mL de cido sulfrico concentrado y 1 g del catalizador. Caliente hasta obtener una solucin de color verde claro. En ambos casos debe estar girando los balones para evitar sobrecalentamientos. 3) Destilacin.

El destilado se recibe sobre 50 mL de solucin de cido brico contenidos en un erlenmeyer de 250 mL, buscando que el extremo del refrigerante quede algo sumergido dentro del erlenmeyer. Al baln de Kjeldahl se le adicionan dos o tres granallas de zinc; de 50 mL (baln micro) a 100 mL (baln macro) de hidrxido de sodio al 40 %, sin agitar, resbalando por las paredes y cerca al equipo de destilacin para minimizar las prdidas de amoniaco. Algunos equipos de destilacin traen un embudo con llave que facilita esta operacin. Se conecta a una trampa de Kejdahl, agitar cuidadosamente el baln, calentar a ebullicin hasta casi destilar la mitad del contenido del baln o hasta pH neutro. (Puede controlar con papel tornasol rojo). Suspender la destilacin, sacar cuidadosamente el extremo sumergido en el erlenmeyer, lavar con agua destilada ayudndose del frasco lavador y colocar otro erlenmeyer conteniendo unos 150 mL de agua

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destilada para que efecte el proceso de lavado inverso del equipo. Asegrese de tener los balones bien asegurados ya que esa succin es muy fuerte. 4) Titulacin. Purga, carga y enrasa la bureta con la solucin de cido clorhdrico previamente estandarizada. Comienza a efectuar la titulacin cuidadosamente hasta que la solucin pase del verde brillante al morado que tena inicialmente, registre en su cuaderno de laboratorio los datos respectivos. No olvide efectuar la determinacin por duplicado. Se recomienda efectuar una titulacin a un blanco de reactivos, para determinar la cantidad de cido clorhdrico requerido para hacer virar la solucin. Clculos. Puede utilizar la siguiente frmula para determinar el contenido de nitrgeno hallado: W V1 V2 N = Peso de la muestra (g). = Volumen de cido clorhdrico requerido en el blanco (mL). = Volumen de cido clorhdrico requerido en la muestra (mL). = Normalidad de la solucin de cido clorhdrico utilizada.

Determinacin de contenido de nitrgeno: (V2 V1) N W

Porcentaje Nitrgeno =

1,4

El factor 1,4 corresponde a la conversin por peso equivalente entre el cido clorhdrico y el nitrgeno. Determinacin de protena cruda:

El factor que se debe utilizar es 6,38 para leches y derivados; 5,70 para cereales y 6,25 para el resto de productos alimenticios. Informe.

Entregue a su tutor (a) un documento escrito con los resultados obtenidos, teniendo en cuenta las orientaciones dadas en la primera unidad. Reporte el error obtenido comparando el contenido con los valores reportados para el alimento en las tablas de composicin de alimentos colombianos publicados por el Instituto Colombiano de Bienestar Familiar.

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Porcentaje protena cruda = Porcentaje Nitrgeno (factor).

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CENIZAS Y DETERMINACIN DE CALCIO POR PERMANGANIMETRA

Las cenizas corresponden al residuo inorgnico proveniente de la incineracin de la materia orgnica. Su composicin y cantidad depende de la naturaleza del alimento calcinado y del mtodo correspondiente. Los derivados lcteos lquidos tienen del 0,5 al 1 %, mientras que las grasas y los aceites prcticamente no contienen cenizas, en la margarina, mayonesa y aceites para ensaladas contienen principalmente cloruro de sodio; en las frutas depende del contenido de humedad, frescas pueden contener entre 0,2 al 0,8 % mientras que en secas pueden alcanzar el 3,5 %, las nueces van del 1,5 al 2,5 %. En los peces del 1 al 2 %, en carnes, especialmente las procesadas, puede llegar al 12 %. Los elementos minerales que generalmente se determinan en las cenizas de algunos alimentos son el calcio y el fsforo (harinas, leches y sus derivados). En esta prctica se utilizarn los fundamentos de la permanganimetra con el fin de determinar el contenido de calcio presente en algunas de estas muestras que seleccionar el estudiante segn su inters. Al calcinar una muestra de algunos de los anteriores alimentos, se obtienen cenizas, las cuales se encuentran en formas de xidos o de carbonatos como es el caso del calcio. Al tratar las cenizas con cido clorhdrico para facilitar su disolucin, el carbonato sufre una reaccin ya conocida: CaCO3 + 2 HCl CaCl2 + CO2 + H2O

Si aadimos oxalato de amonio a la solucin que contiene calcio y mantenemos un medio bsico tamponizado con cloruro de amonio, podremos precipitar cuantitativamente el calcio disuelto: CaCl2 + (NH4)2C2O4 CaC2O4 + 2 NH4Cl

El precipitado lo dejamos madurar para que adquiera un tamao adecuado facilitando la filtracin y posterior lavado del exceso de reactivo, que ms adelante puede interferir en la determinacin cuantitativa. Posteriormente, adicionamos cido sulfrico para poner en libertad el cido oxlico del precipitado, que corresponde a la especie analtica a valorar por permanganometra: CaC2O4 + H2SO4 H2C2O4 + CaSO4 La titulacin se hace en caliente para poder hacerla rpida y cuantitativa: C2O42 - + MnO4- + 8 H+ Mn2 + + 2 CO2 + 4 H2O

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Como un mol de oxalato reacciona con un mol de calcio, los pesos equivalentes dependen del nmero de electrones transferidos por la molcula durante la reaccin, as el oxalato libera dos electrones luego su peso equivalente ser la mitad del peso frmula; mientras que para el calcio ser semejante: la mitad del peso molecular. Se pueden presentar algunas interferencias en el mtodo; todos los metales, excepto los alcalinos forman oxalatos insolubles, sin embargo el magnesio no precipita cuando se tiene el buffer de amoniaco cloruro de amonio. El permanganato de potasio no es un estndar primario a pesar de obtenerse con gran pureza, debido a la facilidad de oxidacin que presenta por lo que es factible su contaminacin con estas sustancias mediante polvo y trazas de sales amoniacales en el agua destilada, las cuales pueden bajar el ttulo siendo necesario estandarizarla contra oxalato de sodio. Procedimiento 1) Determinacin de las cenizas. El estudiante selecciona la muestra de inters (harina o queso). En un crisol de porcelana previamente tarado72 a 500 550 C en la mufla se determina exactamente la masa de 3 g de la muestra homogenizada. Se registran los datos en el cuaderno de laboratorio. Inicialmente se calcina la muestra en la vitrina y utilizando un mechero bunsen de modo que se reduzcan a cenizas lo ms posible, evitando el ahumado de la mufla al colocar directamente la muestra. Finalizado el proceso, se termina en la mufla durante tres horas, verificando que se ha logrado cenizas blancas o grises o hasta obtener un peso constante. Para los clculos se utiliza el ltimo dato registrado. 2) Solubilizacin de las cenizas.

Una vez determinado el peso de las cenizas, se aade 5 mL de cido clorhdrico (1:1) y se evapora en la vitrina utilizando un bao de mara. Repite el tratamiento dos veces ms. Luego monte un embudo de filtracin y recibe en un vaso de precipitados de 250 mL y comienza a lavar con agua caliente hasta fin de cloruros, ensayo que puede comenzar a realizar despus de unos 10 lavados para no cometer errores. El ensayo consiste en recoger una gota del filtrado que sale del vstago del embudo y aadir una gota de solucin de nitrato de plata, si aparece precipitado blanco lechoso todava se tienen cloruros. Para finalizar el lavado se requiere que no aparezca el precipitado. Finalizado, transferir el filtrado cuantitativamente a un baln aforado de 100 mL, completar a volumen y homogenizar. No olvide marcar el baln. 3) Preparacin de la solucin de permanganato de potasio 0,1 N.

Efecte los clculos de la masa de permanganato de potasio que debe pesar para preparar 250 mL de una solucin 0,1 N, partiendo del slido. Pese, disuelva en agua, transfiera cuantitativamente, complete a volumen y homogenice la solucin. Transfiera a un frasco oscuro y mrquelo con el nombre del reactivo y la fecha de preparacin. Se recomienda prepararla unos das antes de efectuar su estandarizacin para que se estabilice su ttulo.

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Siempre que utilicemos la expresin material tarado, significa que se ha colocado en la estufa o la mufla por una hora, se ha dejado enfriar y luego se determina exactamente su masa. Se debe manipular con una pinza para crisol y en un desecador.

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4) Estandarizacin de la solucin de permanganato de potasio. Pesar exactamente en un vidrio de reloj, pesa sustancias o vaso de precipitado de 50 mL 0,3 g de oxalato de sodio previamente secado en la estufa a 100 105 C, disuelva con agua destilada y pase a un erlenmeyer de 250 mL y aada 100 mL de cido sulfrico (5 mL en 95 mL de agua, hervido previamente para oxidar toda la materia orgnica), calentar casi a ebullicin (70 C). Para efectuar la titulacin y evitar quemarse los dedos, utilice una pinza para condensador. Purgar, cargar y enrasar la bureta con la solucin de permanganato de sodio anteriormente preparada. Comience a titular la solucin de estndar contenida en el erlenmeyer hasta obtener un ligero color rosado que persista 30 segundos. Registre en su cuaderno el volumen consumido. No olvide efectuar un duplicado y calcular la normalidad de la solucin de permanganato y marcarla en el frasco que la contiene. 5) Determinacin del calcio. Tomar una alcuota de 25 mL, de la solucin guardada en el baln aforado de 100 mL y pasarla a un vaso de precipitados de 250 mL, aadir tres gotas de fenolftalena al 1 %, calentar a ebullicin y adicionar lentamente una solucin de hidrxido de amonio (1:1) hasta reaccin alcalina. Aadir 10 mL de la solucin saturada de oxalato de amonio, mantener la ebullicin por 5 minutos agitando permanentemente, dejar en reposo el precipitado de oxalato de calcio durante una hora y luego filtrar. Lavar con agua caliente hasta fin de cloruros, pasar el papel con el precipitado a un erlenmeyer de 250 mL, aadir 100 mL de agua destilada y 10 mL de solucin de cido sulfrico (1:1), agitar para disolver el precipitado, agarrar el recipiente con una pinza para condensador y calentar a ebullicin. Una vez caliente comenzar a titular con la solucin estandarizada de permanganato de potasio hasta obtener la coloracin rosada persistente por 30 segundos. Registrar el volumen consumido y efectuar un duplicado. Clculos.

No olvide determinar la concentracin de la solucin de permanganato.

El contenido de calcio se expresa como porcentaje o mg/100 g de muestra. Informe.

No olvide preparar su informe en su grupo de aprendizaje colaborativo, siguiendo las indicaciones de la primera unidad y entregarlo a su tutor (a) para valoracin e informacin de retorno. Puede determinar el clculo de error comparando sus resultados con los reportados en la tabla de composicin de los alimentos.

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DETERMINACIN DE CLORUROS MEDIANTE LA TCNICA DE VOLHARD

El cloruro de sodio es una sal soluble en agua, favoreciendo su determinacin por volumetra de precipitacin con nitrato de plata en un medio dbilmente acidificado con cido ntrico. Las sustancias que pueden interferir en la tcnica son las sales de plata de los aniones bromuro, yoduro, tiocianato, cianuro y sulfuro que tambin precipitan en las condiciones de la determinacin analtica, o la presencia de agentes reductores del catin plata como el estao (II), hipofosfitos, formaldehdo, hidroquinona y celulosa. Por ello, cuando se trabaja con sustancias de origen orgnico se deben calcinar antes de realizar el anlisis. Conviene anotar que los haluros de plata son sensibles a la luz directa o a la artificial semejante a la diurna por lo que puede presentarse un obscurecimiento artificial que no afecta el resultado final. La determinacin de cloruros se puede realizar mediante dos tcnicas, la directa o de Mohr, utilizando como indicador el ion cromato para obtener un precipitado de color rojo naranja en el punto final de la reaccin de valoracin, o indirecta como la tcnica de Volhard que utilizaremos en el esta determinacin analtica. Sobre una alcuota de la solucin problema, se aade un exceso conocido de nitrato de plata, El exceso se valora por retroceso utilizando una solucin estandarizada de tiocinato de potasio utilizando una solucin de alumbre frrico como indicador.

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La ventaja de esta tcnica es la posibilidad de determinar el punto final claramente, siempre y cuando se elimine el haluro de plata formado ya sea mediante filtracin o aadiendo un volumen de nitrobenceno a la suspensin para recubrirlo y permitir que el exceso de nitrato de plata reaccione con el tiocianato sin que ocurra reacciones secundarias del haluro de plata con el tiocinato que ocasionara errores en la determinacin final. Procedimiento. 1) Preparacin solucin estndar de nitrato de plata. Efecte los clculos para preparar 250 mL de una solucin de nitrato de plata 0,1 N. En un vaso de precipitados de 50 mL, pese exactamente la cantidad de nitrato de plata requerida, disuelva en agua destilada y transfiera a un baln aforado de 250 mL y complete a volumen. Transvase a un frasco color mbar y etiqutelo con el nombre de la sustancia y la fecha de preparacin. 2) Estandarizacin de la solucin de nitrato de plata. Se suele establecer que el nitrato de plata puede ser un estndar primario y con la determinacin de su masa exacta se puede efectuar el clculo de concentracin de la misma; sin embargo en trabajos ms estrictos si se exige la estandarizacin de la misma contra cloruro de sodio, reactivo analtico, efectuando la valoracin directa de Mohr. Dejo en manos del tutor (a) la posibilidad de efectuar esta parte si la considera necesaria o si realmente exige un grado de precisin alto en el resultado esperado en la determinacin del contenido de cloruro de sodio en la muestra que haya decidido analizar. En un vidrio de reloj, una pesa sustancias o un vaso de precipitados de 50 mL, determine la masa exacta a 0,1 g de cloruro de sodio reactivo analtico, transfiralo analticamente a un erlenmeyer de 250 mL. Agregue un mililitro de solucin de cromato de potasio al 5 %. Purgue, cargue y enrace la bureta con la solucin de nitrato de plata recin preparada.

Comience a titular hasta que obtenga un tenue color rojo naranja. Prepare un blanco tomando un volumen de agua semejante al usado con el estndar, aada una pizca de carbonato de sodio y titule hasta el color rojo naranja. Descuente ese volumen del que obtuvo con la titulacin del estndar para mayor exactitud. No olvide efectuar el ensayo por duplicado. Efecte los clculos y registre el valor de normalidad hallado en la etiqueta del frasco. 3) Preparacin de la solucin de Tiosulfato o tiocianato de amonio o potasio 0,1 N.

Efecte los clculos para preparar 250 mL de una solucin 0,1 N de tiocianato de amonio o de potasio conforme a la disponibilidad de reactivo en el laboratorio. Pese exactamente la cantidad del reactivo requerido en un vidrio, pesa sustancias o vaso de precipitado de 50 mL, diluya con agua y transfiera cuantitativamente a un baln aforado de 250 mL, complete a volumen y homogenice. Transfiera a un frasco de vidrio y mrquelo con una etiqueta indicando el nombre de la solucin y la fecha de preparacin. 4) Estandarizacin de la solucin de tiosulfato. Tome una alcuota de 25 mL de nitrato de plata y depostela en un erlenmeyer de 250 mL, agregue 10 mL de cido ntrico 6 M, 25 mL de agua destilada y 5 mL del indicador cromato de potasio. Titule hasta obtener un ligero color rojo naranja.

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5) Preparacin de la muestra. Recomendamos que el estudiante consiga un encurtido que contenga sal, ya que si trabaja con alimentos procesados al que se le ha aadido sal, por ejemplo papas fritas, queso, habas, man o mezclas de nueces es necesario triturar la muestra, tomar una cantidad exacta de 10 g y calcinarla a 500 550 C en una mufla. Las cenizas obtenidas se deben disolver en agua a un volumen de 100 mL. Con el encurtido tomamos una alcuota de 10 mL, se pasa a un baln aforado de 100 mL, se completa a volumen y se homogeniza. Es necesario que en el cuaderno quede registro de esas diluciones para efectos de clculo. 6) Valoracin de Volhard. De la muestra se toman 25 mL con una pipeta aforada, se transvasa a un erlenmeyer de 250 mL, agregue 10 mL de cido ntrico 6 M incoloro, si no lo est se debe hervir hasta que se torne incoloro; se aaden, utilizando la bureta, 100 mL de la solucin estandarizada de nitrato de plata, homogeniza por agitacin, se aade 2 mL de nitrobenceno y 1 mL de alumbre frrico amnico al 5 %. Con otra bureta previamente purgada, cargada y enrazada a cero con solucin de sulfocianuro de amonio o de potasio 0,1 N, previamente preparada y estandarizada, se comienza a titular el exceso de plata hasta la aparicin de una coloracin rojiza dbil que se mantiene por cierto tiempo. Puede efectuar un blanco para determinar el color del indicador en ausencia de muestra. Clculos. Adems de realizar la determinacin de las concentraciones de las dos soluciones utilizadas en la prctica, es necesario reportar los resultados como masa de cloruro de sodio en 100 gramos de muestra. Informe.

No olvide realizar el documento escrito, luego de discutir los resultados con su grupo de aprendizaje colaborativo, teniendo en cuenta las indicaciones dadas en la primera unidad. Revise si existen datos de contenido de sal en el alimento que usted utiliz para efectuar la determinacin y calcule el error.

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NDICE DE YODO EN ACEITES COMESTIBLES

Es una de las determinaciones analticas ms importantes ya que permite la clasificacin de las grasas y definicin de cuidados especiales en los procesos de manufactura y de almacenamiento de los mismos conforme a estndares de calidad. El ndice de yodo o nmero de yodo, corresponde al nmero de gramos de yodo que pueden reaccionar con 100 gramos de muestra. El mtodo, en esencia, es adicionar una cantidad de yodo a una muestra exactamente pesada del aceite, esperar un determinado tiempo y valorar la cantidad del halgeno que no ha reaccionado. Existe dos tcnicas para la determinacin de este ndice: la de Wijs y la de Hanus, sin embargo la primera es la ms utilizada debido a que sus resultados se acercan muchsimo a los tericos, teniendo en cuenta la composicin del aceite, mientras que la de Hanus debe su bondad a la estabilidad del reactivo. En ambos casos se corre al tiempo del ensayo un blanco utilizado para determinar la cantidad de halogenante utilizado y remanente en las condiciones del ensayo. En esta prctica utilizaremos la tcnica de Wijs. Procedimiento.

1) Preparacin de la solucin halogenante de Wijs.

Pesar 13 g de yoduro y disolver con cido actico glacial, calentando suavemente si es necesario, aada 3 mL de bromo, transferir a un baln aforado de un litro, completar a volumen y homogenizar. Pasar a un frasco oscuro, marcar con el nombre y la fecha de preparacin. Almacene en un lugar fresco. 2) Preparacin de otros reactivos.

Prepare una solucin de yoduro de potasio al 15 % utilizando agua destilada recin hervida y enfriada. Se debe preparar al momento de efectuar el ensayo en las cantidades requeridas debido a su inestabilidad: se oxida fcilmente liberando yodo. Pese 1 g de almidn, reactivo analtico, dilyalo en agua destilada caliente o hirviendo mediante agitacin, complete a 100 mL y pase a un frasco gotero. Mrquelo con el nombre del reactivo y la fecha de preparacin. 3) Preparacin de la solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N. Efecte los clculos para preparar 250 mL de la solucin, pese exactamente el reactivo en un vidrio de reloj, pesa sustancias o vaso de precipitados de 50 mL, diluya con agua destilada y transvase cuantitativamente a un baln aforado de 250 mL, complete a volumen, homogenice y transfiera a un frasco de vidrio. Mrquelo con el nombre y la fecha de preparacin. 4) Estandarizacin de la solucin de tiosulfato de sodio 0,1 N.

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Secar previamente entre 100 y 110 C, una masa de yodato de potasio, reactivo analtico, durante una hora y dejar enfriar dentro de un desecador. Pesar exactamente 0,2 g del yodato y transferirlo cuantitativamente a un erlenmeyer de 250 mL y aadir 50 mL de agua destilada recin hervida y fra, aadir 2 g de yoduro de potasio, agitar hasta disolucin y agregar 16 mL de una solucin de cido clorhdrico preparado a partir de 1 mL del cido concentrado en 15 mL de agua destilada. Purgue, cargue y enrase una bureta con solucin de tiosulfato y comience a valorar el yodo librado en el erlenmeyer hasta la desaparicin del color amarillo, agregue 2 mL de la solucin acuosa de almidn y contine hasta que desaparezca el color azul. Registre en su cuaderno de laboratorio el volumen consumido. Haga el ensayo por duplicado. 5) Preparacin de la muestra. Consiga una muestra de aceite comestible comercial y determine en la literatura si en secante, semisecante o no secante. Lo puede hacer consultando las normas ICONTEC. Pese exactamente utilizando un erlenmeyer de 250 mL 0,1 g del aceite secante, 0,3 g si es semisecante y de 0,4 g si no es secante, registre los datos en su cuaderno de laboratorio. Aada 10 mL de cloroformo, agite. Luego adiciones 25 mL de la solucin de Wijs o de yodo bromuro. Tape el erlenmeyer y deje en reposo por una hora, en un lugar fresco y oscuro, agitando cuidadosamente cada 5 minutos. Prepare un blanco con cloroformo y solucin de Wijs, mrquelo, tape y djelo junto al erlenmeyer con la muestra. No olvide hacerlo por duplicado. 6) Determinacin del ndice de yodo.

Pasado el tiempo, aada con pipeta aforada 10 mL de la solucin de yoduro de potasio, agite y deje en reposo un minuto, haga lo mismo con el blanco. Despus adicione 100 mL de agua destilada.

Purgue, cargue y enrace a cero la bureta con la solucin estandarizada de tiosulfato de sodio y comience a titular la muestra hasta que casi desaparezca el color amarillento de la solucin, en ese momento adicione 1 mL de la solucin de almidn, la cual si hay exceso de yodo inmediatamente toma color azul. Siga adicionando tiosulfato gota a gota hasta la desaparicin de ese color. Registre el volumen consumido. Ahora, tome el erlenmeyer con el blanco y haga el mismo proceso. Registre el volumen consumido. No olvide efectuar el ensayo por duplicado. Clculos.

Ya sabe cmo se efectan las operaciones para determinar la concentracin de la solucin valorante de tiosulfato de sodio. Para la determinacin del ndice de yodo, puede recurrir a la siguiente frmula, las unidades finales son gramos de yodo/100 gramos de muestra del aceite: 126,9 ndice de yodo = (VBLANCO VPROBLEMA)NTIOSULFATO 1000 100 WMUESTRA

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Informe. No olvide realizar la discusin de sus resultados en su grupo de trabajo colaborativo y presentar el informe a su tutor (a) para la correspondiente valoracin e informacin de retorno, siguiendo las indicaciones establecidas en la primera unidad. Calcule el error de sus resultados teniendo en cuenta los valores de ste ndice reportado en las normas ICONTEC.

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ACTIVIDAD DE PROFUNDIZACIN Y TRANSFERENCIA

Los temas de esta unidad juegan un papel fundamental en el proceso formativo del futuro tecnlogo e ingeniero de alimentos. Considero que el proceso educativo iniciado con este material sera incompleto sin contar con el compromiso y el profesionalismo del colega que ejerce sus funciones como tutor. No lo concibo como un mero instructor, sino alguien que tiene un conocimiento y una experiencia que debe colocar al servicio del estudiante que emprende su aventura de adquirir conocimientos, habilidades y actitudes frente al trabajo acadmico de este curso.

187

Si se ha seguido cuidadosamente el modelo acadmico pedaggico de la UNAD, es el (la) tutor (a) quien puede dar fe de la eficiencia y la eficacia de la interaccin estudiante material didctico, de los vacos que pueden tener el mdulo y el mismo estudiante, de modo que pueda disear estrategias remediales que ayuden a sobrepasar esa dificultad que puede desanimar al estudiante al no hallar la solucin ms adecuada a su dificultad de comprensin y de asimilacin. Por ello, aprovecho esta ventaja competitiva del modelo para invitar al docente tutor a que me colabore en garantizar el aprendizaje significativo de nuestro estudiante, al disear una actividad holstica que envuelva los contenidos trabajados, la experiencia de laboratorio y la problemtica que pueda detectar conjuntamente con los estudiantes en trminos de hallar soluciones a problemas del rea en el campo de los alimentos, especialmente los relacionados con medio para valorar y controlar la calidad de los mismos, como una opcin de competitividad para mercados locales, nacionales y globales. De alguna manera invito a los estudiantes y a los tutores, me comuniquen los desaciertos de este material, que como toda obra humana debe perfeccionarse para que sea un medio de desarrollo de las estrategias de pensamiento autnomo que debe lograrse como parte del proceso formativo propuesto por la institucin.

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TERCERA UNIDAD

MTODOS INSTRUMENTALES DE ANLISIS

1. Palabras clave. Espectrofotometra, cromatografa, pH metra, electrodo, celda. 2. Propsitos.

Aqu trabajaremos los fundamentos tericos de estos mtodos de anlisis en tres captulos, se describirn los fundamentos de los instrumentos sin entrar en ningn modelo en particular ya que el fabricante suele hacer presentaciones especficas de sus equipos. Cuando se tenga la oportunidad de trabajar con algunos de ellos, lo mejor es recurrir a los respectivos manuales o al soporte tcnico que suelen dar cuando se adquiere el equipo. Como la Universidad no tiene un modelo especfico de equipo en sus laboratorios, es necesario que al momento de la prctica hable con el encargado del mismo para que lo ilustre y lo entrene en el uso de mismo. El ltimo captulo presenta las prcticas que se pueden realizar para que el estudiante escoja alguna de ellas, la adecue a sus necesidades conforme a la muestra que desee analizar. 3. Objetivos.

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I. Determinar los fundamentos fisicoqumicos de los mtodos analticos instrumentales como pH metra, espectrofotometra y cromatografa, los mtodos de tratamiento de muestra, realizacin del anlisis, tratamiento y anlisis de los datos y reporte del informe. II. Brindar al estudiante la posibilidad de utilizar algunas de las herramientas analticas instrumentales para la realizacin de un anlisis qumico a una muestra de su inters. 189

III. Elaborar un informe escrito donde explicite los resultados encontrados, los criterios para el anlisis realizado y las recomendaciones para su mejoramiento o su rechazo. 4. Competencias. Un amplio conocimiento de los mtodos qumicos aplicables a la determinacin de propiedades qumicas en muestras de productos, permitindole la seleccin, recomendacin e interpretacin de los resultados ms apropiados conforme a criterios previamente definidos. La capacidad de realizar por su cuenta los anlisis qumicos de inters, responsabilizarse por el buen manejo de equipos, reactivos y materiales de vidrio en muestras previamente seleccionadas por l. Valorar apropiadamente los resultados y darles un manejo tico. 5. Metas de aprendizaje. Establecer su propio procedimiento para la seleccin de los anlisis requeridos en una determinada muestra de su inters para establecer el cumplimiento de sus caractersticas qumicas definidas como criterio de calidad. Establecer un conjunto de criterios que le permitan la obtencin, procesamiento y anlisis de datos provenientes de un mtodo qumico teniendo en cuenta conceptos, mtodos y procedimientos analticos recomendados previamente. Dar cuenta de los fundamentos qumicos y fsicos de los mtodos clsicos de anlisis y de los mtodos instrumentales.

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ESQUEMA CONCEPTUAL DE LA UNIDAD

UN MTODO INSTRUMENTAL REQUIERE:

PRINCIPIO

BASADO:

PROPIEDAD FSICA

QUE:

VARE DIRECTO

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CON: LA:
FUENTE PORTAMUESTRA DETECTOR

EQUIPO

PROCEDIMIENTO

COMO:

CALIBRACIN

MEDICIN Y:

MANEJO DE DATOS

COMO SON:

pH - METRA

ESPECTROSCOPA

CROMATOGRAFA

191

INTRODUCCIN
Despus de haber experimentado con los mtodos clsicos de anlisis y de comprender sus fundamentos, procedimientos y manejo de datos para determinar la precisin y la exactitud de un determinado anlisis, ahora vamos a establecer como objeto de estudio los mtodos instrumentales siguiendo el mismo modelo. El desarrollo de estos instrumentos analticos ha nacido de la necesidad de efectuar mediciones de rutina relativamente rpidas, con un grado de precisin comparable a la de los mtodos clsicos, incluso dentro del proceso de calibracin que se requiere siempre se hace referencia a los mtodos clsicos principalmente a la gravimetra o a combinaciones de las dos como lo veremos en algunos de ellos. Los fundamentos de los mtodos instrumentales hacen referencia a una propiedad fisicoqumica particular de la sustancia por analizar y la existencia de una relacin directa entre la variacin de esa propiedad y la concentracin de la misma al menos en un rango determinado que facilite efectuar dicha correlacin. Esto ayuda muchsimo ya que se puede tener la posibilidad de ajustar la concentracin de la sustancia a analizar a las condiciones de sensibilidad del mtodo sin perder exactitud. Comenzaremos analizando las propiedades que se pueden utilizar con fines cuantitativos o a veces cualitativos, descripcin general del equipo utilizado y el procedimiento normalmente aceptado para la aplicacin en un mtodo particular de anlisis aunque se hace la salvedad de que, como en los casos anteriores, las tcnicas y mtodos ya suelen estar determinadas previamente siendo conveniente seguir sus indicaciones. El estudio dedicado, la consulta de la bibliografa y el trabajo con el grupo colaborativo, junto a la asesora de su tutor(a) hacen que el xito en su meta de aprendizaje sea alcanzado con xito. Cualquier sugerencia para mejorar este material es bienvenida pues la intencionalidad es hacerlo lo ms didctico posible para que sea fcil su aprendizaje en las condiciones de la Educacin a Distancia.

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192

TEMA 1

pH METRA
1. Fundamentos de los mtodos instrumentales. La experiencia ha mostrado que algunas propiedades fisicoqumicas de las sustancias pueden ser asociadas a propiedades como variaciones de corriente elctrica continua, interacciones entre superficies o con radiaciones electromagnticas, pero lo ms interesante es que algunas de ellas tienen una relacin directa con la concentracin de esa sustancia y que suele ser caracterstica de ella sirviendo a un doble propsito, identificacin y cuantificacin, esencia de la qumica analtica. En la mayora de los casos esa relacin suele ser lineal dentro de ciertos intervalos de concentracin por lo que se requiere adecuar las condiciones experimentales para poder lograr dicha relacin. La tabla 29 presenta una relacin de las seales analticas y los mtodos en que se utilizan, para que tengamos una idea de este campo de desarrollo. Tabla 29. Seales y mtodos utilizados en anlisis instrumental73.
Seal Mtodos analticos que miden la seal Espectroscopia de emisin (rayos X, ultravioleta, radiacin visible), fotometra de llama, fluorescencia (rayos X, ultravioleta, radiacin visible), mtodos radio qumicos. Espectrofotometra (rayos X, ultravioleta, radiacin visible, infrarrojo), colorimetra, absorcin atmica, resonancia nuclear magntica, espectroscopia de resonancia espn electrn. Turbidimetra, nefelometra, espectroscopia Raman. Refractometra, interferometra. Rayos X, mtodos de difraccin electrnica. Polarimetra, dispersin ptica rotatoria, dicrosmo circular. Potenciometra, cronopotenciometra.

Emisin de radiacin

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Absorcin de radiacin Dispersin de radiacin Refraccin de radiacin Difraccin de radiacin Rotacin de radiacin Potencial elctrico
73

SKOOG, Douglas A. WEST, Donald M. Anlisis instrumental. 2 edicin. Mxico: Intramericana, 1985, p. 3.

193

Corriente elctrica Resistencia elctrica Razn masa a carga Velocidad de reaccin Propiedades trmicas Masa Volumen

Polarografa, amperometra, coulombimetra. Conductimetra. Espectrometra de masa. Mtodos cinticos. Conductividad trmica y mtodos de entalpa. Anlisis gravimtrico. Anlisis volumtrico.

1.1

Clasificacin de los mtodos instrumentales.

Se han establecido tres clases segn la propiedad utilizada: Electroqumicos o electro analticos: que tienen que ver con modificaciones en las propiedades elctricas de las sustancias, especialmente en lo que tiene que ver con la conformacin o participacin en la constitucin de celdas electroqumicas, tenemos la potenciometra, la electrogravimetra, la coulombimetra y la voltametra. Aqu estudiaremos a la primera especialmente en lo relacionado con el pH. De separacin: asociados a interacciones superficiales y a equilibrios entre fases como es el caso de la cromatografa en sus diferentes variantes: placa, papel, columna HPLC y gases entre otras. pticos: relacionados con interacciones que presentan en el espectro electromagntico ya sea absorbiendo energa radiante o emitindola, trabajando principalmente la visible, infrarroja, ultravioleta y la absorcin atmica. En esta unidad trabajaremos aquellas tcnicas que tienen aplicacin en la industria de los alimentos y en el desarrollo de investigaciones en ellos. 1.2 Condiciones analticas de los mtodos instrumentales.

Cualquier mtodo instrumental requiere cumplir los siguientes requerimientos para producir resultados precisos y exactos: Precisan de ser calibrados antes de su utilizacin. Se referencia a patrones o estndares que son generalmente trabajados mediante gravimetra o volumetra o la combinacin de las dos tcnicas. Comprobar y permitir que el mtodo se desarrolla dentro del rango de linealidad establecido para el mismo. En esa forma es posible establecer comparaciones entre las diferentes tcnicas analticas para definir su sensibilidad como la encontramos en la figura 12. Figura 12. Comparacin de mtodos analticos.
GRAVIMETRA VOLUMETRA POTENCIOMETRA ELECTROGRAVIMETRA VOLTAMETRA FOTOMETRA FLUOROMETRA ABSORCIN ATMICA

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194

2. Fundamentos de la pH metra. El 20 de Marzo del ao 1800 Alessandro Volta comunica por carta al presidente de la Royal Society de Londres la primera noticia de su invento: la "pila a colonna" (conocida hoy en da como "pila de Volta"). Volta invent una serie de aparatos capaces de producir un flujo elctrico. Para ello utiliz recipientes con una solucin salina conectados a travs de arcos metlicos. Conectando varios de esos recipientes consigui la primera batera elctrica de la historia. Para reducir complicaciones debido a la necesidad de utilizar soluciones, empez a utilizar pequeos discos redondos de cobre y cinc y otros de pao o cartn en agua acidulada. De manera que los una formando una serie: cobre, zinc, pao, cobre, zinc, pao, etc.; todos ellos apilados formando una columna. Cuando una los extremos de la pila mediante un hilo conductor, al cerrase el circuito se obtena una corriente elctrica. Se encuentra relacionada con reacciones Redox, aprovechando las posibilidades de generacin de corriente elctrica que se puede poner a circular por un circuito externo y no dentro de la misma solucin como lo hemos comprendido hasta ahora. Las celdas electroqumicas son artefactos que pueden generar corriente elctrica o facilitar un fenmeno qumico debido a la aplicacin de corriente elctrica. Estn compuestas por dos elementos: los electrodos y una solucin de electrolitos. Son de dos clases; galvnicas o volticas cuando generan corriente elctrica y electrolticas cuando consumen electricidad de una fuente externa cuando realiza un cambio qumico. Una modificacin a la pila de Volta y que vamos a utilizar para explicar el fenmeno electroqumico y su relacin con la potenciometra es la pila de Daniell. Est formada por electrodos de zinc y cobre, cada uno sumergido en una solucin de sulfato de zinc y de cobre respectivamente que conforman las semiceldas unidas por un puente salino normalmente formado con una solucin de cloruro de potasio envasado en un tubo en U ya sea solidificado con agar o separado con unos tapones de algodn para que permitan el movimiento de iones. La figura 13 nos ilustra dicha pila: Figura 13. Celda electroqumica de Daniell.
V

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195

Para orientarnos, el vaso de la izquierda contiene el electrodo de zinc con su solucin de sulfato de zinc y el de la derecha, electrodo de cobre con solucin de sulfato de cobre. Dentro de la celda ocurren los siguientes flujos elctricos o de cargas; entre los electrodos de zinc y de cobre se genera un potencial elctrico que permite el flujo de electrones entre ellos del zinc al cobre mediante el cable elctrico que los une, al interior de las soluciones hay una migracin de iones: los cationes van del zinc al del cobre y los aniones en sentido contrario y todos los iones participan en ese proceso. Entre el electrodo y la solucin se cierra el circuito de conexin de movimiento elctrico con el inico ya que desde la solucin se desplazan los electrones para formar los cationes correspondientes. Eso significa que en cada semicelda o vaso ocurren las siguientes reacciones: Zn Zn2 + + 2 eCu

Cu2 + + 2 e-

En la celda electroqumica aparece un ctodo, que se ha asociado con la reduccin o sea ganancia de electrones, en nuestro caso corresponder al electrodo de cobre, mientras que en el nodo se presenta la oxidacin, es decir la prdida de electrones y que en nuestro caso corresponder al electrodo de zinc. Como podemos ver, es una reaccin en equilibrio y se generar potencial elctrico hasta cuando alcance el equilibrio donde no habr voltaje. Sin embargo, podremos, al menos en teora, restituir el equilibrio si aplicamos una diferencia de potencial un poco mayor a la generada por la pila, y en este caso tendremos una celda electroltica donde cambian las condiciones de la celda cmo seran? Una anotacin sobre la unin lquida utilizada para juntar las dos semiceldas. Estas evitan que se mezclen los componentes de los dos vasos, disminuyendo la eficiencia de la celda al ocurrir el depsito directo del cobre sobre el zinc, lo nico por aclarar es que se genera adicionalmente un potencial de unin que se suele tener en cuenta en el balance elctrico de la celda. Los qumicos dedicados al trabajo con este tipo de celdas han desarrollado una nomenclatura que vale la pena conocer, sobre todo para comprender mejor la literatura especializada. i. ii. Se utilizan los smbolos qumicos para indicar los elementos, iones o molculas que componen la celda, seguidos de la indicacin de su concentracin o presin si se usa gases, encerrada en parntesis cuadrados. Los lmites entre fases, entre electrodo y su solucin acompaante, o entre dos fases diferentes, se representa por una lnea vertical, indicando que aparece una diferencia de potencial entre la fases y que hace parte de la fuerza electromotriz (F.E.M.) que produce la celda. La lnea vertical doble nos indica la presencia de una unin lquida o puente salino. 196

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iii.

Siguiendo dicha notacin es factible escribir la reaccin que est ocurriendo en la celda. Apliqumoslo en el caso de la celda de Daniell: Zn | ZnSO4 [M] CuSO4 [M] | Cu Cu + ZnSO4 CuSO4 + Zn

Cmo podemos hacer que no fluya corriente entre los electrodos y no cambien sus condiciones iniciales ni sus concentraciones al efectuar las medidas? La respuesta es introducir en el sistema una fuerza electromotriz en sentido inverso que neutralice la que se genera espontneamente. Corresponde al principio de medicin potenciomtrica. Un potencimetro es un artefacto que permite medir la fuerza electromotriz necesaria para contrarrestar una F.E.M., generada en una reaccin qumica. Comprende una batera de potencial conocido que suministra la corriente necesaria para contraponerse a la que produce la celda bajo medicin. El circuito contempla otra celda estndar que calibra a la batera de referencia; inicialmente se equilibra a cero el equipo con ella mediante la manipulacin de un conmutador o restato. Despus se mide la celda problema y se equilibra nuevamente el sistema hasta que los potenciales sean cero, ese desplazamiento se registra en una escala ya sea analgica o digital. La figura 14 muestra el fundamento del potencimetro:

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B R L CR I CP

Figura 14. Esquema del potencimetro.

Revisando la figura anterior encontramos: B, la batera de potencial conocido que sirve de comparacin para efectuar las mediciones con el potencimetro (la lnea ms delgada representa el nodo y la ms grande el ctodo), tiene una resistencia R que sirve para equilibrar desviaciones o en algunos casos, variaciones debidas a la temperatura que pueda modificar la produccin de F.E.M, un galvanmetro, cuya finalidad es establecer el 197

equilibrio ya sea para la determinacin del punto cero o para restablecer el equilibrio de ausencia de corriente en el circuito luego de efectuar la medicin. CR corresponde a la celda estndar con la cual calibramos el aparato, mientras que CP representa a la celda problema, es decir, aquella a la cual vamos a medir su propiedad especfica. Significa que primero calibramos la celda B contra esta, despus efectuaremos la medicin con el problema. La resistencia MO, corresponde a la escala de medicin del aparato. Cuando efectuamos la medicin de potencial de B o de CP, es necesario mover el restato L hasta hacer que el galvanmetro registre cero; en el primero tendremos el cero y en el segundo el potencial de la celda problema. El circuito se abre y se cierra mediante un interruptor I, conforme se realicen los pasos de calibracin y de medicin. La utilizacin de estas propiedades en la definicin de la concentracin para una sustancia requiere definir dos tipos de electrodos: uno de referencia, que mantiene su potencial constante ya que no es afectado por la generacin de F.E.M., en la celda y otro indicador que si vara al modificarse la concentracin de la sustancia (ya sea hidronios u otros elementos a los cuales ese electrodo sea sensible. 3. Equipo utilizado en pH metra. De esta tcnica analtica nicamente vamos a discutir su aplicacin en la medicin del pH, por ello, en la unidad anterior como trabajamos este concepto y la variacin del mismo con el volumen de una solucin valorante no es conveniente volverlo a tener en cuenta pero si es importante que tenga muy claro esos fundamentos ya que aqu nos limitaremos a describir el equipo y su uso para el registro de esas variaciones. En alguna forma, en las curvas de titulacin experimentales que se logren desarrollar ac tienen que ver con las tericas que trabajamos en volumetra cido base. El sistema instrumental para efectuar estas mediciones consta de dos electrodos, uno indicador y otro de referencia y el potencimetro. Los electrodos indicadores son el electrodo normal de hidrgeno (E.N.H), el electrodo de calomel saturado y el electrodo de vidrio. Vamos a describir cada uno de ellos: 3.1 Electrodo Normal de Hidrgeno (E.N.H).

Es un alambre de platino, paladio u oro, sumergido en una solucin de hidronios, saturada con hidrgeno puro a una atmsfera de presin, su potencial lo establece la semirreaccin: 2 H+ + 2 eH2

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Pt | H2 SATURADO, HCl [0,01 M]

Tiene una F.E.M., por convencin de cero voltios ya que es una celda estndar. La notacin de esta semicelda es:

3.2

Electrodo de calomel saturado.

198

Es un tubo de vidrio que contiene mercurio metlico en contacto con una solucin saturada de cloruro de mercurio, Hg2Cl2, usualmente 1 M. El calomel saturado estrictamente hablando tiene solucin de cloruro de potasio conjuntamente con la de mercurio. Su potencial vara en la siguiente forma: E = 0,0591 log [H3O+] Frmula que nos facilita la construccin de la curva de titulacin de manera experimental. La notacin de esta semicelda es: Hg |Hg2Cl2 SATURADO, KCl [X M] La concentracin del cloruro de potasio vara entre 0,1 M y la saturacin, dependiendo de la utilizacin segn la temperatura. En trabajos analticos corrientes se utiliza el que tiene los dos cloruros saturados. 3.3 Electrodo de vidrio.

Corresponde al electrodo indicador, es decir, el que sufre variaciones directamente con la modificacin de la concentracin de hidronios presentes en la solucin. Consta de bulbo de vidrio sensible al pH, al extremo de un tubo de vidrio de paredes gruesas, se llena con una solucin de cido clorhdrico 0,1 M, saturada con cloruro de plata, se sumerge un alambre de plata en la solucin u luego si al cable externo que lo conecta al potencimetro. La notacin de este electrodo es:

La celda para efectuar la medicin del pH corresponde, entonces a una combinacin de dos electrodos, uno de referencia y uno indicador. En la prctica se utiliza el electrodo de calomel saturado y el electrodo de vidrio; si miramos juiciosamente la escritura de los dos electrodos encontramos que en el electrodo de vidrio existe uno de referencia y es el de plata cloruro de plata saturado, la necesidad de disponer de este sistema es pode efectuar la medicin de la variacin de la diferencia de potencial que puede detectar la membrana de vidrio, ya que la notacin del sistema completo sera:
Hg | Hg2Cl2 SATURADO, KCl SATURADO [H3O ] | Membrana de vidrio | [H3O ], [Cl, 1M] AgCl SATURADO | Ag
+ +

A los dos lados de la membrana de vidrio encontramos soluciones de hidronio de concentracin diferente, el electrodo de referencia y el electrodo de vidrio deben detectarla para poder hacer que el potencimetro funcione. Esto significa que la membrana de vidrio debe tener propiedades que ayuden a la determinacin: ser altamente especfico a la variacin de concentracin de hidronios, mantenerse en un ambiente hmedo para mantener su higroscopicidad y que minimicen el error alcalino. Este corresponde a que a pH muy bajos, superiores a 9,0, la membrana se hace sensible a otros iones como el sodio y otros cationes alcalinos, modificando su comportamiento. En raras ocasiones en las mediciones analticas se alcanzan pH cercanos a 14. 4. Procedimiento.

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| Membrana de vidrio |[H3O+], [Cl-] AgClSATURADO | Ag

199

En la determinacin potenciomtrica de pH podemos efectuar dos tipos de mediciones: una es la determinacin del pH de una solucin y la otra es efectuar la determinacin de la curva de titulacin con el fin de determinar con mayor exactitud el punto final de la misma sin la necesidad de recurrir a un indicador de pH. En ambos casos es necesario efectuar la preparacin previa de la muestra, la calibracin del pH metro y luego si la determinacin ya sea del pH o de la variacin del pH en funcin del volumen de titulante. Vamos, entonces, a describir cada uno de las anteriores etapas: 4.1 Preparacin de la muestra.

La sustancia a la que se le desea determinar su pH o a la muestra a la que se le desea conocer su concentracin de iones hidronio, deben estar homogeneizadas como lo mencionamos en la primera unidad, pero deben garantizar que se encuentran como una pasta hidratada en agua o realmente en solucin. Lo anterior, debido a que en algunas determinaciones de alimentos, caso frutas, vegetales o algunos cereales, se encuentran slidos, requiriendo constituir la pasta hidratada para poder utilizar los electrodos del pH metro, que como ya lo hemos estudiado, necesitan que la muestra est hmeda. Si el producto o la muestra son lquidos, se puede efectuar la medicin directa, caso leche, vinagre, vinos, cervezas, etc., salvo que si la concentracin de hidronio es muy alta, es necesario efectuar diluciones medidas para poder ajustarla a las condiciones de medida del equipo. 4.2 Calibracin del pH metro.

Para ello se recurren a dos soluciones patrones o bferes de pH exactamente conocido. El fabricante ya ha calibrado la celda B de referencia interna del equipo contra la variacin del pH, como hemos hablado de errores del instrumento, este proceso nos garantiza un comportamiento uniforme del equipo dentro del rango de pH calibrado. Por ello se utiliza una solucin buffer de pH 7,0 y luego de ajustar el equipo, otra de pH 4,0. En el trabajo experimental del laboratorio tendr la oportunidad de conocer el proceso y de desarrollar las habilidades requeridas para el correcto manejo del equipo. Como estamos trabajando con soluciones de concentracin conocida, es necesario observar precauciones tendientes a mantener su concentracin por lo que antes de utilizarlas, se debe garantizar que el electrodo se encuentra limpio, humedecido adecuadamente; para ello se utiliza el frasco lavador y esta tcnica: quita el tapn protector del extremo del electrodo que se encuentra con agua, juaga el electrodo con agua destilada, lo seca con un trozo de papel de filtro, luego lo sumerge en un vaso de precipitados que contiene la solucin de buffer, enciende el equipo, efecta la medida y hace los ajustes de lectura, apaga el equipo, juaga el electrodo lo seca y luego de efectuar la correspondiente calibracin con la otra solucin de buffer dispone del equipo listo para efectuar la medida. 4.3 Determinacin analtica.

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Una vez calibrado el pH metro procede a efectuar la determinacin del valor de pH, para ello, introduce el electrodo en el centro de la pasta humedecida o en la solucin, enciende el equipo, espera que se estabilice y registra en su cuaderno de laboratorio el valor 200

obtenido. Apaga, saca el electrodo y lo lava con agua destilada secndolo con el trozo de papel de filtro; si no desea efectuar ms mediciones, le coloca la cubierta plstica conteniendo un poco de agua destilada para mantenerlo humedecido. Si va a efectuar una titulacin, debe realizarla dentro de un vaso de precipitados suficientemente grande para que contenga la solucin problema, el electrodo (normalmente es nico ya que las industrias han simplificado el equipo y en un mismo electrodo se encuentra el de referencia y el indicador) y un sistema de agitacin que puede ser uno con varilla de vidrio manejado por el analista teniendo cuidado de no golpear el electrodo o si dispone de ms recursos, tiene un agitador magntico (un imn recubierto de tefln que se puede hacer girar con un motor externo que tambin mueve otro imn) observando las mismas precauciones anteriores, la solucin valorante se adiciona con la bureta, normalmente en un volumen determinado (p.e., 1 mL, 5 mL,), con el equipo apagado y luego e homogenizar muy bien con el agitador, se determina el valor del pH registrando en el cuaderno de laboratorio el volumen y el pH obtenido. Este proceso se sigue hasta despus de alcanzar el punto de equivalencia y obtener valores de pH superiores a 10,0. 4.4 Tratamiento de los datos.

Si el propsito era efectuar la medicin del pH del alimento, el valor obtenido luego de un duplicado es suficiente y se reporta el resultado. En el caso de efectuar una titulacin ya se requiere manejar los datos para definir el volumen real de equivalencia ya que aqu no disponemos de ningn indicador de pH. Para ello se recurre al significado matemtico de la curva de titulacin en la cual podemos efectuar determinaciones de su pendiente, que significara determinar la primera derivada, para hallar una tendencia en la misma. Observando cuidadosamente la forma de estas curvas, encontramos la presencia de un punto de inflexin, es decir, un punto donde la pendiente cambia de signo o de sentido; por lo general ese punto siempre coincide con el punto de equivalencia de la reaccin, especialmente cuando la relacin entre las dos sustancias es equimolecular74. En caso de que no ocurra, hay necesidad de verificar la rapidez de cambio del potencial alrededor del punto de equivalencia; si es muy grande, se puede utilizar cualquiera de las tcnicas de definicin del punto de inflexin de las curvas de titulacin sin que se introduzca un error significativo en su determinacin. Existen varios mtodos para hallar ese punto como el de la biseccin; si la curva es simtrica a ambos lados del punto de inflexin, se pueden proyectar lneas paralelas a la zona de la curva donde existe cierta linealidad, se define un cuadrado o un rectngulo al que se define su punto medio que se proyecta a la curva de valoracin, su extrapolacin al eje del volumen define el volumen de equivalencia del sistema. Otro es el mtodo de ajuste del crculo, en el cual utilizando una plantilla con diferentes crculos, se ajusta el mejor a la forma curva de la figura de titulacin, se trazan y luego desde su centro de giro, obviamente ayudados por un comps, se unen y el punto de interseccin con la curva de titulacin, proyectado al eje de volumen, permite determinar el punto de equivalencia. Aqu vamos a ilustrar el mtodo matemtico ya que puede ajustarnos mejor los dos puntos ya que el mtodo grfico depende de la habilidad del observador, mientras que en
74

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DICK, J.G. Qumica analtica. Mxico: Manual moderno, 1979, p. 245 254.

201

el primero trata de seguir la tendencia que muestran los datos de la curva, adems de no ser necesaria su grfica. Para ello primero debemos calcular las variaciones de pH sobre la variacin de volumen conforme a los datos, luego graficamos pH/ V en funcin del volumen, no podemos evitar la construccin de la grfica y ayudados con un curvgrafo, proyectamos los dos extremos de las curvas hasta que se crucen, el punto de corte se extrapola al eje horizontal para determinar el volumen de equivalencia que luego se utiliza en los clculos. La posibilidad de efectuar esta determinacin es que utilizamos el concepto de mximos y mnimos del clculo diferencial: la variacin de la curva en un cambio de sentido, define la posibilidad de hallar un mnimo. Desafortunadamente todava no se ha encontrado la ecuacin que define exactamente cada punto de la curva de pH en funcin del volumen. Otra forma es nuevamente calcular los valores entre las variaciones de pH/V previamente hallados para encontrar las variaciones de 2pH/V2 y esos valores nuevamente graficarlos en funcin del volumen. Se obtiene otra curva que permite obtener con mayor exactitud el volumen de equivalencia de la titulacin, independiente de si la relacin es equimolecular o no. Para hacer comprensible este ltimo mtodo, vamos a realizar un ejemplo75. En una fbrica de levadura se desea conocer la composicin en gramos por litro de una solucin nutriente de Na2HPO4 y de Na3PO4, al titular potenciomtricamente una alcuota de 25 mL de la mezcla con cido clorhdrico 0,10 N, obteniendo los datos expresados en la tabla 30. Tabla 30. Registro de la valoracin de una solucin de nutrientes de fosfatos con cido clorhdrico. Volumen HCl (mL) 0,0 5,0 10,0 12,0 12,2 12,4 12,5 12,6 12,7 12,8 12,9 pH Volumen HCl (mL) 13,0 13,5 14,0 15,0 21,0 25,0 30,0 30,5 30,6 30,7 30,8 pH Volumen HCl (mL) 30,9 31,2 31,3 31,4 31,5 31,6 31,8 32,0 32,5 33,0 pH 5,50 5,20 4,85 4,50 4,20 4,00 3,92 3,80 3,60 3,50

MATERIAL EN REVISIN
11,90 11,60 10,75 9,70 9,50 9,15 9,00 8,80 8,70 8,60 8,50 8,40 8,10 8,00 7,72 6,95 6,50 6,05 5,80 5,75 5,70 5,60 Na2PO4 + HCl Na2HPO4

Las reacciones que se suceden hasta el primer punto de equivalencia:

75

BERNAL de Ramrez, Ins y otros. Qumica analtica. Op. Cit., p. 412 417.

202

Para el segundo punto de equivalencia: Na2PO4 + HCl NaH2PO4 Como con estas reacciones slo se llegan a remplazar dos sodios de la sal, los pesos equivalentes sern: Na3PO4/2 y Na2HPO4/1. Para hallar los puntos de equivalencia procederemos a calcular los pH y los V para luego hallar la relacin pH/V y efectuar posteriormente la grfica de ese valor en funcin del volumen. Clculos que se muestran en la tabla 31. Tabla 31. Datos para hallar los puntos de equivalencia de la titulacin de la mezcla de sales de fosfato con cido clorhdrico.
VOLUMEN HCl (mL) 0,0 5,0 12,0 12,2 12,4 12,5 12,6 12,7 12,8 12,9 13,0 13,5 14,0 15,0 21,0 25,0 30,0 30,5 30,6 30,7 30,8 30,9 31,2 31,3 31,4 pH 11,90 11,60 0,15 10,75 9,70 9,50 0,35 9,15 9,00 0,15 0,20 0,10 0,10 0,10 0,10 0,30 0,10 0,28 0,77 0,45 0,45 0,25 0,05 5,75 5,70 5,60 0,10 5,50 5,20 0,35 4,85 0,2 1,75 0,30 0,1 0,3 1,00 1,00 0,05 0,10 0,1 0,1 0,50 1,00 0,2 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,5 0,5 1,0 6,0 4,0 5,0 0,5 0,1 1,75 1,50 2,00 1,00 1,00 1,00 1,00 0,60 0,20 0,28 0,12 0,11 0,09 0,50 0,50 0,05 0,20 2,0 0,02 0,025 1,00 5,0 0,03

pH
0,30

V
5,0

pH/ V
0,06

MATERIAL EN REVISIN
8,80 8,70 8,60 8,50 8,40 8,10 8,0 7,72 6,95 6,5 6,05 5,80

203

31,5 31,6 31,8 32,0 32,5 33,0

4,50 4,20

0,20 0,30 0,20

0,1 0,1 0,1 0,1 0,2 0,5 0,5

2,00 3,00 2,00 0,80 0,50 0,40 0,20

4,00 3,92

0,08 0,10

3,60 0,20 3,50 0,10

Luego se traza la curva de pH/V en funcin de V para hallar los dos puntos de inflexin, de donde se obtiene que el primer punto de equivalencia es 12,6 mL y el segundo corresponde a 31,5 mL. Le sugerimos que elabore la grfica y confirme los anteriores resultados, si tiene alguna inquietud, no dude el consultar a su tutor (a). Por curiosidad cientfica, le reto a que haga el clculo de la segunda derivada tanto de pH como de volumen utilizando los datos de las columnas tres y cuatro y efecte la correspondiente divisin, despus elabore la grfica de 2pH/V2 en funcin de V y compare los resultados obtenidos con la primera y segunda grfica. ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 9 1. Construya las grficas tericas para las titulaciones de los siguientes sistemas cido base: a) b) c) d) e)

Las tres primeras grficas hgalas en el mismo papel milimetrado, las otras en papeles diferentes pero en lo posible manteniendo la misma escala ya que luego debe compararlas. Qu conclusiones obtiene? 2. En la titulacin de 50,0 mL de una solucin de KOH con cido clorhdrico 0,105 N empleando un pH metro para seguir la titulacin se obtuvieron los siguientes datos: Volumen HCl (mL) 40,00 45,00 45,50 45,70 45,90 46,10 46,30 46,50 46,70 pH 11,86 11,14 10,90 10,75 10,54 10,12 4,06 3,52 3,28

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25 mL de cido clorhdrico 1 N titulado con hidrxido de sodio 1 N. 25 mL de cido clorhdrico 0,1 N titulado con hidrxido de sodio 0,1 N. 25 mL de cido clorhdrico 0,01 N titulado con hidrxido de sodio 0,01 N. 25 mL de cido actico 0,01 N titulado con hidrxido de sodio 0,01 N. 25 mL de carbonato de sodio 0,01 N con cido clorhdrico 0,01 N.

204

47,00 47,50 48,00

3,08 2,86 2,72

Mediante la tabulacin de 2pH/V2, determine el volumen de solucin de HCl en el punto de equivalencia. Determine la molaridad de la solucin de KOH. 3. En la titulacin de 50,0 mL de una solucin de un cido monobsico dbil con hidrxido de sodio 0,096 N, efectuada con un pH metro se obtuvieron los siguientes datos: Volumen de NaOH (mL) 56,50 56,70 56,80 56,90 57,00 57,10 57,20 57,50 pH 4,36 4,58 4,77 5,08 7,50 9.98 10,27 10,66

Elabore un cuadro de pH/V y de 2pH/V y determine el punto de equivalencia. Es posible determinar el grado de incertidumbre por acumulacin de errores para este resultado? Si es as cmo se hace? 4. En la valoracin potenciomtrica de 60 mL de cido clorhdrico 0,05 N con hidrxido de sodio 0,1 N se obtuvieron los siguientes datos: Volumen HCl (mL) 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0 60,0 Volumen NaOH (mL) 0,0 10,0 20,0 25,0 28,0 30,0 32,0 35,0 40,0 pH

Construya las grficas de pH en funcin del volumen y las de pH/V en funcin del volumen y de 2pH/V2 en funcin del volumen, determine el punto de equivalencia y compruebe si es el mismo que obtiene si trabaja la ecuacin de neutralizacin utilizada en volumetra. 5. Averige los tipos de errores que se pueden presentar en esta tcnica y compruebe el grado de exactitud establecido para el mtodo de pH metra.

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1,30 1,54 1,90 2,23 2,64 7,00 11,43 11,72 12,00

205

TEMA 2

ESPECTROFOTOMETRA
Corresponden a un conjunto de mtodos que utilizan la interaccin de la energa radiante con los enlaces de las molculas permitiendo la movilidad electrnica ya sea absorbindola o emitiendo a una longitud de onda caracterstica, de manera proporcional a la concentracin de la sustancia dentro de un rango determinado. 1. Principios. Se conoce que una radiacin electromagntica tiene una dualidad de onda y de partcula, la onda sigue los fundamentos de la mecnica ondulatoria que ya estudi en el curso de Fsica general, de cul solamente traeremos a colacin dos conceptos bsicamente relacionados con la distancia y el nmero de oscilaciones en la unidad de tiempo, mientras que de la caracterstica de partcula tendremos en cuenta el concepto de fotn. 1.1 La radiacin electromagntica.

Comprende una interrelacin muy ntima entre un campo elctrico y un campo magntico que pueden o no variar con el tiempo y estn asociadas a una carga. Si sta se mueve, origina una perturbacin que se puede propagar. Esa modificacin en el tiempo que se distribuye en el espacio, en el vaco o a travs de un medio material, es lo que llamamos radiacin electromagntica. Se caracteriza por:

Tiene un campo magntico y uno elctrico, perpendiculares entre s y a la direccin de propagacin de la onda; la modificacin de uno afecta al otro. Mantienen una relacin definida entre los dos campos que permite diferenciarlas bsicamente por la longitud de onda () y su frecuencia () ya que todas ellas tienen la misma velocidad de propagacin. En el vaco se desplazan de forma constante y a un valor de 2,9979246*108 m.s- 1. Se relaciona con la longitud y la frecuencia as: c = .. Cuando viajan a travs de un medio material (gas, lquido, slido o plasma)es modificada por las partculas del medio variando su direccin o la propagacin de la onda. Son ondas sinusoidales que varan con el tiempo. 206

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Transporta energa que depende de la magnitud de los campos elctrico y magntico, es medible en la unidad de tiempo y de rea de influencia de la radiacin. Lleva asociada una cantidad definida de energa que Einstein denomin fotones y Compton encontr idntica a un paquete cuantificado de materia elstico asociada a la frecuencia y a la longitud de onda de la radiacin. Una radiacin electromagntica tiene una frecuencia asociada a la de la fuente oscilatoria que la produce; cuando pasa a travs de un medio, puede cambiar la direccin o su velocidad y, en algunos casos, en su longitud de onda. 1.2 El espectro electromagntico.

Es un artificio de ordenacin del conjunto de radiaciones electromagnticas que efectuamos cuando las ordenamos por su longitud de onda y su frecuencia. Los lmites son arbitrarios y dependen del instrumento utilizado. La tabla 32 nos ilustra lo anterior, vale la pena que haga un esfuerzo por establecer la relacin entre la longitud de onda y la frecuencia de las mismas para establecer un criterio comparativo sobre la base de cantidad de energa, es decir, cul es ms energtica y cual menos. Esto para comprender la interaccin entre la radiacin y la materia, fundamento analtico de estas tcnicas: Tabla 32. Regiones del espectro electromagntico. Regin

Rayos gamma Rayos X Ultravioleta lejano Ultravioleta cercano Visible Infrarrojo cercano Infrarrojo medio Infrarrojo lejano Microondas Ondas de radio 1.3

Interaccin radiacin electromagntica sustancias.

Podemos encontrar tres comportamientos especficos, uno donde cambia la velocidad de propagacin de la radiacin electromagntica, teniendo fenmenos como la Refractometra, la reflectancia y la polarimetra; aqu no hay ninguna interaccin de tipo qumico sino fsico. Mtodos que se clasifican como no espectroscpicos los cuales no vamos a estudiar aqu. Otros comprenden la interaccin de la radiacin electromagntica con ciertos niveles electrnicos o moleculares implicando la absorcin de energa o su emisin. Estos dos comportamientos se recogen en tcnicas analticas denominadas espectroscpicas, que podemos diferenciar en espectroscopias de absorcin que pueden ser rayos X, 207

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Rango de longitud de onda Menor a 0,01 nm. 0,01 10 nm. 10 200 nm. 200 380 nm. 380 780 nm. 0,75 2,5 m. 2,5 50 m. 50 100 m. 0,1 10 cm. 10 a 300 cm.

Rango de frecuencia (Hz) 1,0*1020 1,0*1016 1,0*1016 1,0*1015 11,0*1015 7,5*1014 7,5*1014 4,0*1014 4,0*1014 1,2*1014 1,2*1014 6,0*1012 6,0*1012 1,0*1011 1,0*1011 1,0*108 1,0*108 1,0*105

ultravioleta, visible e infrarroja; aqu la sustancia toma energa de la radiacin electromagntica. Las espectroscopia de emisin, de rayos X, fluorescencia o fosforescencia efectan un proceso diferente ya que al recibir la radiacin electromagntica, generan nuevas radiaciones pero en regiones diferentes, por ello habrn visible o ultravioleta. Circunstancias que determinan equipos y procedimientos diferentes. Ahora, establezcamos cules son las interacciones que se presentan: el amplio intervalo de energa que exhiben las ondas electromagnticas, coinciden con la energa estructural de los tomos y las molculas, lo cual origina una interaccin directa entre la energa radiante y la materia. Dicha interaccin puede relacionarse como lo muestra la tabla 33: Tabla 33. Interacciones atmicas y moleculares con las diferentes regiones del espectro electromagntico. Regin Rayos X Ultravioleta Visible e infrarroja Infrarrojo lejano Microondas Ondas de radio Interaccin Capa interna, transiciones electrnicas Capa de valencia, transiciones electrnicas Vibraciones moleculares Rotaciones moleculares Orientaciones de espn

Los fenmenos ms importantes de interaccin tiles para la qumica analtica son los de absorcin e de emisin de energa radiante por la materia. 1.3.1 Procesos de absorcin y de emisin de energa electromagntica.

Utilicemos como modelo a una molcula cualquiera compuesta por tomos unidos por enlaces qumicos estableciendo zonas alrededor de los ncleos donde se encuentran orbitando los electrones con una determinada cantidad de energa que los hace totalmente estables. Analicemos cules son los tipos o clases de energa que posee: se encuentra en movimiento, es decir, posee energa cintica asociada a fenmenos como el de traslacin, que le permite desplazarse en el espacio dentro de tres grados de libertad (un grado de libertad es una coordenada espacial que permite describir su posicin), rotar alrededor de un centro de gravedad, establecer posiciones de longitud y de ngulo en relacin con otros tomos correspondiendo a una energa de vibracin y otra asociada a la posicin y movimiento de los electrones bsicamente de enlace, por lo que se denomina energa electrnica. En esta condicin no ganan ni pierden energa y se dice que se encuentran en su estado fundamental. Podemos describir esa situacin as: ETOTAL = ETRASLACIN + EROTACIN + EVIBRACIN + EELECTRNICA En espectroscopia nos interesan las tres ltimas ya que se encuentran cuantizadas, es decir, estn definidas por un contenido especfico de energa que puede ser modificada en regiones especficas del espectro electromagntico permitiendo la deduccin de propiedades y la posibilidad de cuantificarla.

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208

La absorcin o emisin de radiacin electromagntica por parte de las sustancias se origina en su propia estructura y la disposicin de los tomos en el espacio y la distribucin de los electrones en ella, es decir, la estructura define la especificidad de una sustancia para absorber o emitir radiacin electromagntica. Si irradiamos esa molcula con energa electromagntica, algunos de sus electrones absorbern una determinada cantidad de energa pasando a niveles energticos ms altos, dicha condicin se denomina estado excitado. Es inestable, por lo que luego se cierto tiempo regresar nuevamente al estado fundamental liberando una cantidad de energa equivalente a la absorbida cuando alcanz su estado excitado, luego podremos establecer esta especie de equilibrio: Estado fundamental + energa Estado excitado

Lo especfico de este proceso es que depende de la composicin de la molcula, de los tomos que la componen, por lo que se encontrar una regin de absorcin y de emisin de energa que le es propia, pero lo ms importante es que la cantidad de energa absorbida o emitida es proporcional a la cantidad de sustancia que est en interaccin con la energa radiante. 1.3.2 Fenmenos asociados a la emisin y absorcin de energa electromagntica.

La tabla 33 indica los fenmenos que ocurren a nivel atmico cuando una determinada molcula es irradiada en una determinada regin del espectro electromagntico y que hemos comprendido, depende del equipo de anlisis para definir en cul de ella nos encontramos. Vamos a estudiar los fundamentos de las espectroscopias visible, ultravioleta, infrarrojo y la de absorcin atmica que son las ms comunes. 1.3.2.1 Espectroscopia visible.

Se presenta en la regin visible del espectro electromagntico y tiene que ver con la posibilidad de emitir o de presentar un color cuando la sustancia se encuentra en solucin o de formarlo mediante una reaccin qumica. Una solucin coloreada absorber fotones de una longitud de onda correspondiente a su color complementario. Qu significa esto? Sabemos que la radiacin electromagntica de la regin visible se encuentra formada por siete colores (disco de Newton) cuya combinacin forma la coloracin blanca que vemos normalmente como ahora. Si la luz blanca pasa a travs de un prisma o cuando la luz solar atraviesa una llovizna encontramos que se forma el arco iris que de manera continua van definiendo regiones de color como lo podemos ver en la tabla 34. El color que emite una solucin, se debe a fenmenos de absorcin, ella retira del espectro una de las radiaciones del espectro, devolviendo las dems cuya combinacin define un color aparente. Si observamos cuidadosamente la tabla 34 podemos comprender el fenmeno; supongamos que tenemos una solucin de color verde amarillo, si la pasamos por un espectrofotmetro visible, encontramos que absorbe la radiacin entre 400 y 465 nm, correspondiente al color violeta. Por ello se habla de un color aparente pues la absorcin de energa la efecta en otra regin del espectro. 209

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La absorcin de energa en la regin del espectro visible est asociada a las transiciones de las capas electrnicas, es decir, corresponde a energa electrnica. Por esta razn los iones inorgnicos coloreados presentan capas electrnicas incompletas y con niveles de energa muy cercanos, las sustancias orgnicas presentan dficit de electrones en ciertos niveles de energa. Al absorber un fotn de energa correspondiente a la diferencia entre dos niveles permitidos, el electrn pasa a otro nivel energtico. Tabla 34. Colores correspondiente al intervalo visible del espectro electromagntico. Rango aproximado de longitud de onda (nm) 400 465 465 482 482 487 487 493 493 498 498 530 530 559 559 571 571 576 576 580 580 587 587 597 597 617 617 780 Color de la radiacin Violeta Azul Azul verdoso Azul verde Verde azuloso Verde Verde amarillento Amarillo verde Amarillo verdoso Amarillo Naranja amarillento Naranja Naranja rojizo Rojo Color aparente complementario de la solucin Verde amarillo Amarillo Naranja Rojo naranja Rojo Rojo prpura Prpura rojizo Prpura Violeta Azul Azul Azul verdoso Azul verde Azul verde

Ante la complejidad del espectro, es necesario definir algunas caractersticas especiales a la radiacin utilizada en el anlisis. En primer lugar es necesario que sea monocromtica, es decir que slo corresponda al rango de absorcin requerido por la sustancia; si hay mezcla de otra regin generar ruidos en el sistema de deteccin. Segundo, la radiacin incidente en la sustancia debe corresponder a la regin del anlisis, es decir, a la longitud de onda de absorcin. Tercera, debe tener un rango que permita mantener constante las condiciones del anlisis, es decir, debe aportar la cantidad de energa requerida para el anlisis. 1.3.2.2 Espectroscopia ultravioleta.

Corresponde a la regin superior del espectro electromagntico que hemos denominado regin visible. Se caracteriza porque la interaccin se efecta principalmente por transiciones de los electrones en las capas externas de las sustancias absorbentes. Los fotones de esta regin tienen mayor contenido de energa que los del rango visible, eso significa que las transiciones electrnicas son mucho ms drsticas. Las sustancias que absorben en este intervalo se caracterizan por ser incoloras o dbilmente amarillas. Dentro de las sustancias inorgnicas su aplicacin es reducida ya que aplica al anlisis de complejos haluros y cianuros de metales, tierras raras y elementos de transicin. Se recurre a la sntesis qumica mediante la formacin de iones complejos con ligandos orgnicos. 210

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Con sustancias orgnicas tiene muchsima ms aplicacin, pero los hidrocarburos saturados y los alcoholes y teres no absorben en esta regin por lo que se suelen utilizar como solventes. Un cromforo es un grupo atmico que presenta absorcin en la regin visible o ultravioleta, cuando est aislado se le llama cromforo simple y si esta asociado a otro mediante dobles enlaces, se le llama sistema conjugado. Estos sistemas absorben fotones en la regin ultravioleta y entre ms grande sea mejor ser su absorcin desplazndose a la zona visible, es decir, es coloreado. Por lo general, cada grupo cromforo tiene un rango de absorcin caracterstico que se suele utilizar con fines cualitativos, su identificacin, y cuantitativos, cunta sustancia existe. En la tabla 35 encontramos algunos de estos grupos. Cuando un tomo de hidrgeno unido a un carbono de un grupo cromforo se remplaza por otro tomo o un grupo atmico, el valor de mxima absorbancia del grupo cromforo se desplaza, generalmente, a longitudes de ondas mayores, cambiando los calores de absorbancia de la solucin. Estos grupos se llaman auxocromos. Tabla 35. Longitudes de onda de mxima absorbancia correspondiente a ciertos grupos funcionales76. Grupo absorbente Olefina Olefina conjugada Acetileno Benceno Estructura | | C = C | | Longitud de absorcin mxima (nm) 190

Naftaleno

ter Tioter Amina Nitro Azo Cetona Tiocetona Aldehdo Carboxilo Bromuro Yoduro
76

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C=CC=CC=CC=C

CC

210 230 175 180

184, 202, 255

220, 275, 312

O S NH2 NO2 N=N >C=O >S=O CHO COOH Br I

185 194, 215 195 210 285 400 195, 270 285 205 210 200 210 208 260
Mxico:

FISHER, R.B. PETERS, D. Interamericana, 1971., p. 433.

Compendio de anlisis qumico cuantitativo.

211

Es necesario tener en cuenta el efecto del solvente; sus valores para la longitud de onda no son absolutos. Se debe notar que varios grupos exhiben valores mximos de absorcin y su posicin puede variar ligeramente segn la estructura del resto de la molcula. Por ejemplo, la banda de 255 nm para el benceno se desplaza a 262 nm para el tolueno y a 265 nm para el clorobenceno. 1.3.2.3 Espectroscopia infrarroja. Corresponde a la regin del espectro electromagntico entre 750 y 1*106 nm, cuya interaccin con la materia genera vibraciones y rotaciones moleculares como los movimientos de estiramiento donde la distancia entre tomos aumenta o disminuye, los movimientos de deformacin donde hay desplazamientos de tomos respecto al eje de unin que tienen entre si, y movimientos de deformacin relacionados con el plano donde se encuentran los tomos y que implica salida o entrada respecto a ese plano. Estas tcnicas realmente tienen poca aplicacin en el anlisis cuantitativo en alimentos pero si es fundamental en la determinacin de estructuras de las sustancias orgnicas ya que permite determinar con cierto grado de precisin la configuracin espacial, la presencia de grupos funcionales y variaciones particulares en la cadena carbonada. 1.3.2.4 Espectroscopia de Absorcin Atmica. Es una variacin de las anteriores tcnicas que utiliza un fenmeno de resonancia atmica que permite a los tomos de los metales en estado de vapor efectuar absorciones a longitudes de onda caractersticos, facilitando la determinacin cuantitativa ya que la cantidad de fotones absorbidos es directamente proporcional a la cantidad de tomos de la especie analtica absorbente. El fenmeno de resonancia se presenta porque la fuente de radiacin electromagntica es producida por la excitacin de los tomos del elemento metlico, energa que entra en contacto con los tomos del mismo metal pero provenientes de una muestra que ha sido previamente vaporizada, al encontrarse en esta situacin, los tomos vaporizados encuentran fotones con la cantidad de energa necesaria para pasar a niveles energticos excitados. El equipo puede determinar esa diferencia facilitando la cuantificacin de la misma. 1.4 Ley de absorcin o de Bourguer Lambert Beer.

Corresponde al fundamento de la espectroscopia de absorcin, respecto a su uso como tcnica analtica. Partiendo de la tesis de que los fotones de energa y la longitud de onda absorbidos preferencialmente son caractersticos de los tomos, iones, o molculas que los absorben, se han desarrollado mtodos analticos cualitativos y cuantitativos. En la misma forma, mediante investigacin se ha determinado que el nmero de fotones absorbidos es directamente proporcional al nmero de tomos o molculas absorbentes presentes en la muestra, lo que ha permitido la aplicacin analtica de esos principios; por esto, es necesario estudiar las leyes en que se basan estos mtodos.

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212

Aclaremos primero algunos trminos: cada fotn tendr su propia energa caracterstica segn la radiacin electromagntica a la que pertenezca. Cada radiacin estar definida por algunos parmetros. Generalmente se usa la longitud de onda. Llamaremos intensidad de radiacin (I), al nmero de fotones por unidad de tiempo y por unidad de volumen, no a la cantidad de energa por fotn. El camino que recorre la radiacin dentro de la muestra lo llamaremos b y la concentracin de la especie absorbente, atmica o molecular, en unidades de peso/volumen, la denominaremos c. Examinemos la figura 15: Figura 15. Diagrama fundamental de los mtodos analticos de absorcin de energa electromagntica.

IO RADIACIN INCIDENTE

b SOLUCIN A ANALIZAR DE CONCENTRACIN C

I RADIACIN TRANSMITIDA

Si sobre la muestra contenida en un recipiente transparente hacemos incidir una radiacin de intensidad IO, al otro lado del recipiente obtendremos una radiacin de menos intensidad I, puesto que experimentalmente es difcil medir la intensidad de la radiacin sola, se efecta normalmente la comparacin cuantitativa de las dos intensidades IO/I, lo cual es ms til en nuestro caso. 1.4.1 Ley de Lambert.

Lambert investig qu pasaba en la relacin de intensidades cuando se variaba el camino recorrido por el rayo dentro de la muestra, manteniendo la concentracin de la misma de manera constante, estableciendo que la intensidad de la radiacin transmitida disminua a medida que aumenta el recorrido de la muestra. Matemticamente expres esa relacin as: IO I Siendo: K = constante de proporcionalidad. b = camino recorrido. 213

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Log = Kb

1.4.2

Ley de Beer.

Beer hall que al variar la concentracin de la especie absorbente, manteniendo constante el camino recorrido por la radiacin, se lograba establecer una proporcin directa entre la razn de las intensidades y esa concentracin. Por lo tanto, formul matemticamente la siguiente expresin: Log Donde: K = constante de proporcionalidad. c = concentracin. El valor de K est determinado por la naturaleza de la sustancia absorbente y por la longitud de onda de la radiacin empleada. Esta ley slo puede aplicarse para soluciones muy diluidas de especies suficientemente estables y usando radiacin monocromtica. Para aquellas soluciones que al diluirlas o concentrarlas, la sustancia absorbente experimenta cambios en su grado de ionizacin, de hidratacin o de formacin de complejos, no cumplen con esta ley. Bourguer trabaj tambin con estas relaciones, pero logr establecerlas a nivel del peso molecular, derivando que las constantes K de las dos expresiones anteriores tenan que ver con la concentracin molar de las especies absorbentes por lo que las denomin absortividad molar, , cuyas unidades son cm- 1L mol- 1. 1.4.3 Ley de Bourguer Lambert Beer. IO I = Kc

En la prctica se han combinado las tres expresiones anteriores formando una sola expresin matemtica, utilizada como base en todas las determinaciones cuantitativas. La frmula es: = bc I En la expresin de esta ley, se pueden encontrar en los textos dos formas diferentes de expresin teniendo en cuenta si se relaciona como absorcin o como transmitancia ya que los espectrofotmetros posibilitan obtener la medida de la razn entre intensidad de luz o potencia radiante en esas dos formas. La relacin I/IO se llama transmitancia, T, la cual tambin se puede expresar como porcentaje de transmitancia, % T. La relacin log (IO/I) se denomina absorbancia o tambin absorcin, A. Expresiones que podemos relacionar entre s mediante la ecuacin: A = log (100 - % T) = 2 log %T. 214 Log IO

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Relacin que debemos utilizar cuando requiramos la construccin de las curvas de calibracin para hacer mucho ms precisas las determinaciones cuantitativas. Como para pode dejar un criterio claro sobre las relaciones entre intensidad, potencia radiante, transmitancia y absortividad, la tabla 36 nos ayuda a comprender mejor lo analizado: Tabla 36. Smbolos y trminos, ms importantes utilizados en las medidas de absorcin77. Trmino y smbolo Potencia radiante. P y PO Absorcin, A. Transmitancia, T. Trayectoria, b, de la radiacin, (cm) Absortividad, a. Absortividad molar, . Definicin Otros nombres y smbolos Energa de la radiacin incidente en el detector por Intensidad de la radiacin, I cm2 de superficie y por e IO. segundo. Densidad ptica, D; Log (PO/P) extincin, E. P/PO Transmisin, T. Distancia de la celda. A/bc A/bc l, d. Coeficiente de extincin, K Coeficiente de extincin molar.

La transmitancia de una solucin es la fraccin de radiacin incidente que transmite la solucin. La diferencia entre transmitancia y absorbancia es que la absorbancia de una solucin aumenta en la medida en que aumenta la atenuacin del haz. La absorbancia es directamente proporcional a la trayectoria de la radiacin a travs de la solucin y a la concentracin de la especie que realiza la absorcin; la constante de proporcionalidad corresponde, entonces a la absortividad y ser molar cuando en la relacin considera concentraciones molares de la especie que est analizndose. Por ello, podremos expresar la Ley de Bourguer Lambert Beer as: I/IO = 10bc; log T = b c; A = b c

Teniendo c, concentracin del soluto absorbente (mol/L), , coeficiente de absortividad molar (cm- 1L mol- 1), b, la distancia de recorrido de la radiacin electromagntica dentro de la celda (cm). Se sabe que es funcin de la longitud de onda, el ndice de refraccin caracterstico del sistema soluto solvente; es una propiedad intensiva que no depende de la concentracin del soluto y representa la absorcin de energa radiante por mol de soluto a esa longitud de onda dada. Cuando no se conoce el peso molecular del soluto, se puede expresar como A = a b c donde a representa al coeficiente de absortividad y sus unidades dependen de la concentracin c.
77

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Anlisis instrumental.

SKOOG, Douglas A. WEST, Donald M. Interamericana, 1985., p 159.

2 edicin.

Mxico:

215

El registro de la variacin del coeficiente de absortividad molar, Absorbancia o Transmitancia en funcin de la longitud de onda origina al espectro o curva espectral de la sustancia absorbente e indica las caractersticas de absorcin de esa sustancia con respecto a la longitud de onda. La Absorbancia en funcin de la longitud de onda permite disponer del espectro de absorcin, mientras que la transmitancia en funcin de la longitud de onda corresponde al espectro de transmisin. Si se registra la emisin de la radiacin electromagntica en funcin de la longitud de onda se tendr el espectro de emisin o de fluorescencia. 1.4.4 Desviaciones de la ley de Beer.

Dentro de los textos se suele resumir la anterior ley a uno solo de sus descubridores; ahora vamos a estudiar los dos tipos de desviaciones que se presenta en la prctica al aplicar esa expresin matemtica, y que tiene sus orgenes en aspectos de orden fsico y otros de naturaleza qumica. 1.4.4.1 Desviaciones de origen qumico. Encontramos dos: Efecto del equilibrio qumico. Las principales causas de origen qumico se deben a reacciones de asociacin o disociacin que cambian la concentracin real de las especies o modifican el pH. Por ejemplo, una solucin de bicromato se convierte progresivamente en cromato por dilucin con agua si no hay un estricto control del pH. Si se aumenta se tiende a favorecer la formacin de ion cromato y si se disminuye, se facilita la formacin del bicromato; cada uno de ellos tiene su mxima absorcin para radiaciones electromagnticas de diferentes longitudes de onda y slo existe una de ellas en la cual presentan absorcin los dos iones, si bien esa absorcin no corresponde a la mxima. Efectos del solvente. En general, se ha determinado que la misma sustancia disuelta en diferentes solventes, presentan diferentes picos de mxima absorcin y esta circunstancia se aprovecha analticamente para identificar compuestos, midiendo los cambios de absortividad de sus soluciones en diferentes solventes. En ocasiones se presentan desviaciones porque el solvente absorbe en el mismo intervalo de longitud de onda que lo hace la muestra. Este problema es particularmente grave en los rangos infrarrojo y ultravioleta. 1.4.4.2 Desviaciones de origen fsico. Podemos encontrar tres:

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Efecto del intervalo de radiacin incidente. La ley de Beer slo funciona cuando se emplea radiacin monocromtica. Sin embargo, como le estudiaremos ms adelante al revisar los fundamentos de los equipos instrumentales, la radiacin monocromtica estricta no es posible en la prctica. Es de esperarse que un instrumento que no emplee una radiacin lo suficientemente monocromtica, cumpla con la ley de Beer en menor extensin que otro con mayor resolucin, es decir, que logre una radiacin mucho ms monocromtica o una banda muye estrecha de radiacin. 216

Efecto de las celdas. Las celdas pueden tener pequeas diferencias en su anchura o camino ptico, as provengan de la misma fbrica. Lo ideal sera que todas las lecturas se hicieran con la misma celda, haciendo el trabajo muy tedioso. As, pues, este parmetro se convierte en un error sistemtico que en los trabajos rutinarios se suele omitir al considerarlo despreciable, pero se busca controlar que las celdas en lo posible tengan el mismo tamao y calidad de vidrio. Efecto de la concentracin. Es evidente que la ley de Beer slo se cumple para soluciones diluidas, pero el intervalo de concentraciones tiles vara muchsimo de mtodo a mtodo y naturalmente cambia con las condiciones instrumentales. Siempre es conveniente conocer ese intervalo, por lo cual se acostumbra a construir la grfica de absorbancia en funcin de la concentracin utilizando soluciones patrones o de concentracin conocida. Dicha grfica debe ser una lnea recta en ese intervalo de concentracin, rango en el cual el cumplimiento de la ley de Beer es estricto, fuera de ellos se consideran que hay desviaciones y no son tiles para los fines analticos esperados. 2. Equipo instrumental. Podemos generalizar que los componentes instrumentales requeridos en estas tcnicas tienen las siguientes partes: Fuente de radiacin electromagntica. Puede ser continua cuando emite radiaciones en una determinada regin del espectro o de lneas, cuando lo hace en ciertos sectores. Sistema monocromador. Permite seleccionar radiaciones de una determinada longitud de onda, til para efectuar el ensayo analtico. Portamuestra y celdas. Depende del tipo de radiacin electromagntico utilizado. Transductor detector. Sistema que permite transformar la radiacin electromagntica proveniente de la fuente y de la muestra en seal elctrica. Sistema de amplificacin, transformacin y comparacin de la seal elctrica. Permite obtener los resultados cuantificados de la diferencia de energa proveniente de las dos seales: fuente de energa y muestra. Sistema de registro. Corresponde al medio externo que permite efectuar la medida ya sea en una escala graduada, un visor digital o un registrador de papel, especialmente diseado para poder obtener el espectro de absorcin. Establezcamos, entonces, las caractersticas de cada uno de los anteriores componentes diferencindolos en visible, ultravioleta, infrarrojo y absorcin atmica. 2.1 Fuentes de radiacin electromagntica.

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Las fuentes ms conocidas son las de luz visible, generalmente provienen del calentamiento de los cuerpos los cuales producen radiaciones trmicas. A 330 C produce radiaciones infrarrojas (se siente como calor) pero a medida que aumenta la temperatura el cuerpo irradia luz (a 3000 C un cuerpo es blanco), esto significa que para los rangos de radiacin infrarroja y visible se utiliza este principio. Las lmparas utilizadas en el rango infrarrojo, visible y ultravioleta producen una radiacin continua cuya potencia no vara bruscamente entre longitudes de onda adyacentes. Las ms comunes son la lmpara de hidrgeno o deuterio, produce un espectro continuo en la 217

regin ultravioleta al excitar hidrgeno o deuterio a baja presin mediante descarga elctrica. Unas emplean potenciales entre 2000 a 6000 voltios entre electrodos de aluminio requiriendo refrigeracin con agua, otras lo hacen a 40 voltios mediante un arco formado por un filamento revestido de xido y un electrodo metlico. El filamento en caliente libera electrones para mantener corriente continua; necesita de una fuente de energa elctrica regulada. El rango de radiacin producido va entre 160 y 375 nm y disponen de una ventana de cuarzo ya que el vidrio la absorbe. Las lmparas de filamento de tungsteno son las fuentes de radiacin utilizadas para el rango visible e infrarrojo cercano, la emisin de radiacin depende de la temperatura y en la mayora de instrumentos opera a 2870 K emitiendo radiaciones entre 320 y 2500 nm, facilitando el trabajo en la regin infrarroja. Requiere voltajes pequeos y corrientes muy reguladas para una emisin continua de radiacin. Para la regin del infrarrojo se suele emplear lmparas como el emisor incandescente de Nernst, compuesto por xidos de tierras raras compactados en un cilindro de 1 a 2 mm y de 20 mm de longitud, a los extremos tiene unos alambres de platino que le permiten el paso de corriente calentndolo hasta rojo oscuro donde emite radiacin constante. Una vez usado se desecha ya que destruye. Otra es la fuente Globar, una barra de carburo de silicio de 5 cm de longitud y 0,5 cm de dimetro que se calienta elctricamente, es necesario refrigerarla para evitar la formacin de un arco. Finalmente, se tiene la fuente de filamento incandescente, un alambre de nicromo en espiral que se calienta al paso de una corriente elctrica, tiene mayor vida til que las dos fuentes anteriores. En la espectroscopia de absorcin atmica, la fuente emite lneas de radiacin que se escoge segn el anlisis de metales a efectuar. Corresponde a la fuente de ctodo hueco, consiste en un nodo de tungsteno y un ctodo cilndrico construido con el metal o una aleacin metlica de los elementos que se desean determinar, sellado dentro de un tubo de gas lleno de nen o argn a una presin de 1 a 5 torricellis. La ionizacin del gas se produce al aplicar un potencial que genera una corriente de 5 a 10 mA obligando a la migracin de los iones hacia los electrodos. Los cationes metlicos gaseosos comienzan a adquirir suficiente energa cintica desalojando tomos de la superficie del ctodo produciendo una nube atmica; algunos de ellos se excitan y comienzan a emitir radiacin regresando a su estado basal depositndose en el ctodo o en la superficie interna del vidrio. El tubo se ha diseado para que concentre la radiacin en una regin limitada del tubo y que la deposicin ocurra sobre el ctodo y su eficacia depende de su diseo y del potencial de trabajo aplicado que generalmente recomienda el fabricante. 2.2 Sistema monocromador.

Corresponde a uno de los elementos del instrumento que define su calidad en trminos de precisin y exactitud ya que es el responsable de obtener la banda de radiacin electromagntica adecuada para el anlisis, debido a que debe seleccionarla y emitirla como radiacin monocromtica estable, comprende los siguientes elementos: Rendija de entrada. Apertura de un determinado ancho que permite el ingreso de una cantidad de radiacin proveniente de la fuente. Lente o espejo colimador. Dispositivo ptico que permite recoger la radiacin que ha pasado por la rendija de ingreso y colocarla en paralelo o enfocarla como un haz de radiacin electromagntica. 218

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Prisma o red de difraccin. Elemento vital del colimador, permitiendo la obtencin de la radiacin monocromtica requerida en el anlisis al separar del haz de radiacin proveniente de la fuente, la banda de radiacin til en el anlisis. La red de difraccin es una superficie metlica pulida rayada en surcos con una distancia igual a la de la longitud de onda de la radiacin que se desea purificar. Igual al prisma que permite obtener el arco iris cuando se le hace incidir luz. Lente colimador de salida. Otro dispositivo ptico que permite concentrar la radiacin electromagntica seleccionada en el anterior elemento dejndola disponible para el anlisis. Rendija de salida. Perforacin de un determinado ancho que deja salir del colimador la radiacin seleccionada hacia el porta muestras, por lo general ese ancho se puede regular. La pureza de la radiacin emergente del colimador depende de la capacidad de dispersin de la rejilla o prisma y el tamao de la rendija de salida, se busca obtener el 75 % de la radiacin electromagntica que ha logrado purificar el elemento de dispersin; por ello en los equipos se suele determinar el poder de resolucin, como la capacidad de definir bandas de radiacin cercanas, el diseo ptico del monocromador, el ancho de la rendija de salida y si tiene sistemas automticos, de la velocidad de barrido y la sensibilidad del sistema de registro. 2.3 Porta muestras y celdas.

Corresponde a la parte del instrumento que permite efectuar el anlisis. Generalmente se utiliza la muestra en solucin, colocada en un recipiente o celda de material transparente a la radiacin. Las celdas para los mtodos de la regin visible pueden ser de vidrio, los de ultravioleta son de cuarzo fundido y la del infrarrojo con del cloruro de sodio, bromuro de potasio o yoduro de cesio. Estos materiales requieren un estricto control de la humedad en la muestra y su disolucin en solventes orgnicos que no absorban en esa regin electromagntica. Se tienen dos tcnicas que resuelven el problema: la elaboracin de una pastilla de bromuro de potasio con la muestra y la suspensin de la muestra en nujol y su disposicin entre dos placas de cloruro de sodio, bromuro de potasio o yoduro de cesio. El tamao de la celda es un parmetro a considerar en la ley de Beer, por ello se construyen con un dimetro de un centmetro, utilizndose para el anlisis en las regiones visible y ultravioleta y en el infrarrojo son del orden de milmetro o inferiores o de mayor tamao cuando se analizan gases. En la tcnica de absorcin atmica la celda corresponde a una llama, siendo el paso ms crtico de la tcnica ya que la muestra problema primero se nebuliza, ocurre un mezclado de combustible comburente, sigue la evaporacin del solvente y finalmente la formacin de tomos y su excitacin. La temperatura de la llama es el factor importante del proceso ya que entre mayor sea se facilita la atomizacin, ionizacin, la relacin tomos excitados tomos no excitados, disminuye la altura de los picos al anchar la banda, siendo favorables en la determinacin. Por ello se utilizan varias mezclas como las presenta la tabla 37: Tabla 37. Tipos de llamas tiles en absorcin atmica. Mezclas Temperatura (C) 219

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Gas aire Acetileno aire Acetileno oxgeno Hidrgeno aire

1700 1900 2100 2400 3050 3150 2000 2100

2.4

Detector transductor.

Es el dispositivo que permite ver, detectar u observar la radiacin que emerge de la muestra y la transforma en una corriente elctrica que se enva al sistema de amplificacin y de registro, son especficos para cada tipo de radiacin electromagntica utilizada en el anlisis, por ello se pueden encontrar cuatro dispositivos: Foto tubo. Se utiliza en las regiones ultravioleta, visible e infrarrojo cercano. Es un tubo al vaco que contiene un ctodo sensible a la radiacin y que emite electrones cuando la detecta, y un nodo que recoge los electrones generando la corriente requerida en cantidad proporcional a la radiacin incidente. Foto multiplicador. El principio es semejante al anterior solo que entre el ctodo y el nodo existe un conjunto de dnodos, sometidos a un campo electrosttico que enfoca los electrones y los acelera entre estos aditamentos. Funcionan as: el ctodo recibe la radiacin y emite los electrones que son enfocados al primer dnodo, un electrodo curvo recubierto con una sustancia sensible a los electrones y que genera ms electrones que son luego enfocados a otro dnodo aumentando su cantidad, es decir, son amplificados hasta llegar al nodo donde son conducidos al sistema de registro. Fotodiodos. Utilizan el mismo principio del transistor ya que tienen una unin p n polarizada que impide la generacin de corriente elctrica. Al incidir la radiacin electromagntica cambian la polarizacin produciendo una cantidad de corriente proporcional a la potencia radiante incidente. Termocuplas y cristales piro elctricos. Son los detectores para el infrarrojo y que tienen como principio recibir energa trmica, normalmente la que compone a esta radiacin transformndola en corriente elctrica que se enva al sistema de amplificacin y de registro. 2.5 Sistema de amplificacin, transformacin y comparacin.

Es un aditamento de tipo electrnico que efecta la comparacin de corriente elctrica generada por la radiacin sin muestra (con el blanco de reactivos) y la que produce la radiacin emergente de la muestra. Permite efectuar tambin una purificacin de la seal eliminando el ruido, esto porque al detector llega la seal del analito, la de otras matrices presentes en la muestra y la que genera el propio instrumento, por ello es necesario poder eliminarlas, al menos el mtodo permite ensearle al detector las seales de la matriz de la muestra mediante el empleo del blanco de reactivos que en principio las anulara, dejando la del instrumento junto con las del analito, aqu se ha establecido que el equipo debe generar la mitad o un tercio de la seal correspondiente a la del analito. 2.6 Sistema de registro.

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Corresponde al conjunto de medios de expresin de las mediciones que tiene el aparato y que son ledas por el analista. Estas pueden ser un sistema analgico o una escala lineal 220

que registra el porcentaje de transmitancia o una escala logartmica que registra la absorbancia de la muestra, un dispositivo digital de lectura que puede dar esas dos mediciones en nmeros (nos evita el error de paralaje de la anterior escala) o un registrador grfico que puede trazar el espectro cuando hacemos el barrido de la regin de anlisis y registramos la variacin de absorbancia o porcentaje de transmitancia en funcin de la longitud de onda. Este registrador grfico puede ser una pantalla de computador o un plotter. 3. Procedimiento. Vamos a establecer cmo realizamos un anlisis qumico utilizando estas tcnicas de manera genrica ya que las variaciones que se tienen que hacer son muy pocas, por lo que podemos definir como tres procesos diferenciados: absorcin visible y ultravioleta, absorcin infrarroja (preparacin de las muestras) y absorcin atmica (manejo de la fuente y de la celda), que mencionaremos en las partes del procedimiento correspondiente. No obsta la posibilidad de efectuar la prctica pero el curso al menos da la posibilidad de trabajar experiencias en el rango visible y que se sugiere se efecten para lograr los propsitos del mismo. 3.1 Condiciones del mtodo.

El empleo de estas tcnicas analticas es posible debido a que cumplen con las siguientes caractersticas a tener en cuenta: Disponer de un agente cromforo que permita la absorcin en la regin electromagntica de anlisis o tener la posibilidad de desarrollarlo mediante la adicin cuantitativa de uno que facilite la absorcin. Su sensibilidad est en el rango de 10-4 a 10-5 M, lo que facilita el trabajo con pequeas concentraciones del analito. Selectividad entre moderada y alta, definiendo tcnicas relativamente sencillas para la determinacin de sustancias de inters. Buena exactitud. Si se logra un buen control de los errores provenient4es del mtodo, de la muestra y del instrumento, es factible controlarlos al 5 %. Mtodos cmodos, fciles de trabajar y con muchsimas posibilidades de ser automatizados para efectuar controles en procesos. Posibilidad de seleccionar las longitudes de onda de trabajo donde sea mucho ms sensible la variacin de la absorbancia con la concentracin del analito, controlar los interferentes fsicos y qumicos que puedan generar error. La especie absorbente debe representar la totalidad de la especie en solucin. La solucin debe ser completamente transparente a la vista del analista, si presentar partculas en suspensin. Cualquier partcula presente puede causar difusin o dispersin de la luz incidente produciendo errores en la lectura. El equipo debe producir la radiacin electromagntica ms monocromtica posible para que el detector pueda establecer sin dificultades la diferencia de absorcin recurrida en la medicin. La longitud de onda de anlisis debe tener un ancho de banda apropiado de modo que pequeas variaciones de la misma no afecte el valor de la absorbancia de la muestra.

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3.2

Material de laboratorio. 221

Debido a la sensibilidad de estos mtodos y a la posibilidad de detectar pequeas cantidades de analito en una muestra, a veces sin modificarla tanto, es importante que todo el material volumtrico que se utilice se encuentre debidamente calibrado, usando suficiente balones y pipetas aforadas preferencialmente de la misma marca, igual capacidad para disminuir en lo posible el error sistemtico y de baja capacidad para controlar los errores por dilucin. 3.3 Preparacin de las muestras.

Para el caso de una muestra suficiente, pero con contenidos pequeos de la sustancia problema, se prefiere tomar una cantidad adecuada de muestra y efectuar la medida directamente si es posible. Cuando se trata de slidos o muestras con sustancias interferentes, se pesa o se mide un volumen suficiente, se disuelve y se hace el tratamiento requerido para eliminar las interferencias. Luego se lleva la solucin resultante al menor volumen conocido posible. A veces se logra, mediante este procedimiento, concentrar especies que inicialmente estaban muy diluidas en la muestra. En la realizacin de la preparacin de la muestra, es necesario conocer muy claramente el procedimiento posterior de medida, pues un error redundar en la obtencin de medidas falsas. La solucin resultante debe cumplir con las condiciones especficas del mtodo al cual se va a someter posteriormente. Por ejemplo, si se va a medir mediante espectrofotometra visible, se deben saber las condiciones estequiomtricas de la reaccin que produce el color y las reacciones colaterales que se puedan presentar, con el fin de evitarlas, puesto que afectara la exactitud y precisin del mtodo. 3.4 Caractersticas de la reaccin.

Es necesario que el equipo instrumental sea el adecuado para el mtodo y sus condiciones de operacin sean tales que se logre una radiacin lo suficientemente caracterizada y confiable, apropiada a la sensibilidad y selectividad del mtodo. Por lo general, stos indican la marca y el modelo del aparato utilizado para obtener los resultados esperados. En nuestro laboratorio emplearemos el Spectronic 20 un equipo muy verstil y de amplio uso en el trabajo analtico de rutina. 3.5 Espectro de absorcin y seleccin de la radiacin apropiada.

La construccin del espectro de absorcin de una sustancia, requiere preparar una solucin patrn que contenga el analito en una concentracin conocida y un blanco de reactivos. Se mide la absorbancia de dicha solucin en el intervalo de longitudes de onda del instrumento, tomando lecturas en un rango determinado, digamos 25 nm, hasta llegar a la zona de mximo de absorcin; en esta regin se efectan lecturas ms cercanas, por ejemplo cada 5 10 nm. El blanco de reactivos se utiliza para ajustar el 100 % de transmitancia antes de medir el problema. Luego se grafican las absorbancias ledas en funcin de la longitud de onda a las cuales se midieron, obtenindose el espectro de absorcin. La grfica nos permite seleccionar el intervalo de longitudes de onda o el valor de la longitud de onda ms adecuado para efectuar el anlisis cuantitativo. 3.6 Curva de calibracin.

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222

Se selecciona la longitud de onda considerada la apropiada para el anlisis, se procede a preparar la curva de calibracin midiendo la absorbancia de un conjunto de soluciones patrones previamente preparadas. La curva de calibracin es la grfica resultante de dibujar los datos de absorbancia medidos para cada solucin patrn, en funcin de la concentracin correspondiente a dicho patrn expresada en unidades fsicas (partes por milln, gramos por litro, miligramos por cien mililitros, etc.) o en unidades qumicas segn el caso. La regin til de la curva de calibracin est comprendida por los valores que cumplen con la ley de Beer, es decir, la regin que se ajusta a una lnea recta y que pase por el origen. Cuando hay datos que se acercan a la lnea recta ms no estn dentro de ella, se ajustan mediante la tcnica de los mnimos cuadrados o por tcnicas de correlacin estadstica. 3.7 Ajuste por mnimos cuadrados.

Vamos a revisar esta tcnica de ajuste de datos, ya que las tcnicas de regresin lineal se trabajan ampliamente en los cursos de estadstica. En la obtencin de datos experimentales, cuando un conjunto de ellos son funcin de otro conjunto, puede presentarse el caso de que al graficarse la relacin entre ellos aparecen varias lneas rectas que unen la mayora de esos puntos. Se tiene, entonces, que decidir cul es la verdadera lnea recta que recoja a la mayor cantidad de puntos y que tambin se ajuste a la realidad experimental que tratan de representar. Para determinar esa mejor recta, se recurre al mtodo de los mnimos cuadrados, cuyo fundamento y frmulas vamos a estudiar enseguida: Sea una funcin tal que:

Que se cumple para todo i = 1, 2, 3, , n.

Y cuya forma matemtica se ajusta a una ecuacin de la lnea recta de la forma: Yi = axi + b + ri

Siendo a la pendiente, b un intercepto con el eje y, y ri un residuo. Como el valor Yi se determina experimentalmente, la cantidad: axi + b = Yi

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Yi = f(xi) ri = Yi axi b = Yi Yi

Corresponde al valor calculado de Yi al emplear el xi determinado en las medidas de las dos variables (xi, Yi), dando origen a la cantidad ri en la ecuacin de la lnea recta, considerada ms arriba, puesto que proviene de la diferencia entre el Yi medido experimentalmente y el Yi calculado:

223

Para el clculo de los parmetros a y b de la anterior ecuacin, se coloca como condicin que la suma de los cuadrados de los n residuos debe ser mnima: n r2i > 0 debe ser una cantidad mnima.

i=1 Remplazando a ri por su valor, la anterior expresin queda: n [Yi (axi + b)]2 debe ser un mnimo.

i=1 Para satisfacer esta condicin las derivadas parciales de la anterior ecuacin con respecto a los parmetros a y b de la ecuacin en ajuste deben ser equivalentes a cero: n r2i = 0 n r2i = 0

i=1 a

i=1 b

Estas constituyen un sistema de dos ecuaciones con dos incgnitas. Su resolucin origina las siguientes ecuaciones para los parmetros a y b, correspondiendo a la pendiente y al intercepto respectivamente, utilizndose para la determinacin de los valores de esas dos caractersticas de la ecuacin y que se utilizan para el ajuste de la ecuacin emprica correspondiente:

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n n n xiyi xi yi i=1 i=1 i=1 n n xi2 n xi i=1 n a =
2

i=1

n n n xi yi xi xiyi i=1 i=1 i=1 i=1 n n i=1 xi2 n xi i=1

2

b =

224

Estas ecuaciones se consideran como las fundamentales del mtodo de los mnimos cuadrados y se utiliza en el ajuste de los datos para funciones que cumplan con una relacin equivalente a la de la lnea recta. 3.8 Determinacin de la concentracin del problema.

Al igual que con los patrones, se mide la absorbancia del problema. A partir de esa lectura, se determina la concentracin del problema interpolndolo en la grfica de la curva de calibracin; luego se efectan las operaciones necesarias para determinar la concentracin del problema en la muestra original, teniendo en cuenta las diluciones realizadas y el peso original de la muestra sometida al anlisis. Con el fin de aplicar el procedimiento expuesto, realicemos los siguientes ejercicios: Ejemplo 1. Para la determinacin del contenido de fsforo de una harina comestible, por un mtodo espectrofotomtrico, se obtuvieron los siguientes datos de absorbancia para las soluciones patrones: Tabla 38. Datos espectrofotomtricos de la determinacin de fsforo en harinas. Patrn No. 1 2 3 4 5 6 Concentracin (p.p.m.) 2 4 6 8 10 12 Absorbancia 0,112 0,222 0,342 0,456 0,532 0,585

De la muestra de harina se tom 1,0000 g y luego de tratarla apropiadamente se llev a un volumen de 100 mL. La lectura de absorbancia de esta solucin fue de 0,237. Construya la curva de calibracin (absorbancia en funcin de la concentracin) y determine, por interpolacin en esa curva, la concentracin de fsforo en la harina expresndola en mg/100 g y en porcentaje. Al realizar la curva de calibracin en papel milimetrado e interpolar los valores de la absorbancia de la muestra, se encuentra que tiene una concentracin de 4,2 p.p.m. Si la solucin de un gramo de muestra en 100 mL contiene 4,2 p.p.m., o sea 4,2 mg/L, en los 100 mL habrn 0,42 mg correspondientes a un gramo de muestra; en cien gramos tendremos 42 mg de fsforo. La expresin de la concentracin de fsforo en la harina comestible es de 42 mg/100 g, correspondiendo al 0,042 %. Ejemplo 2. Para ilustrar cmo se hace un anlisis complejo para una especie coloreada utilizando la espectrofotometra visible, resolvamos el siguiente problema:

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225

Para determinar la cantidad de nquel que posee un alimento, se dise u mtodo de determinacin utilizando la espectrofotometra visible puesto que el cloruro de nquel hexahidratado produce soluciones coloreadas. Con el fin de determinar la longitud de mxima absorcin, se corri el espectro cuyos datos se encuentran en la tabla 39. Una vez encontrada la longitud de onda de mxima absorcin, que la puede comprobar construyndola en papel milimetrado, se prepar la curva de calibracin utilizando como patrn una solucin de cloruro de nquel hexahidratado, efectuando una serie de diluciones para obtener los datos reportados en la tabla 40. Tabla 39. Curva espectral para el NiCl2.6H2O Longitud de onda (nm) 370 380 390 395 400 405 410 415 420 Porcentaje de transmitancia 45,0 27,5 19,5 18,5 19,0 18,0 28,5 34,0 41,0 Longitud de onda (nm) 440 460 480 500 520 540 560 580 600 Porcentaje de transmitancia 75,2 88,5 95,5 99,0 98,0 97,0 93,2 87,8 79,0

Luego se calcinaron 10 g del alimento, las cenizas se trataron con cido clorhdrico concentrado y luego se llev a un volumen de un litro, en donde fue leda, obtenindose un 45,0 % de transmitancia. Cul es la concentracin en p.p.m., de nquel presente en la muestra? Cul es su porcentaje? Para elaborar la curva espectral, es necesario transformar los valores del porcentaje de transmitancia a absorbancia, utilizando la frmula A = 2 log (% T). Usted debe obtener esos datos y construir sobre papel milimetrado la curva espectral y comprobar que la longitud de onda donde se presenta la mxima absorcin es de 405 nm. Ahora, debe dibujar la curva de calibracin (tambin en papel milimetrado), para lo cual debe hallar los valores de la absorbancia para cada porcentaje de transmitancia; una vez obtenidos, dibujar la curva y se dar cuenta que algunos de los datos no se ajustan

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Tabla 40. Curva de calibracin para el nquel. Concentracin (p.p.m.) 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 Porcentaje de transmitancia 84,9 71,6 61,7 51,9 46,2

226

completamente a la lnea recta que debe pasar por el origen, por lo tanto es necesario ajustarla por el mtodo de los mnimos cuadrados. La tabla 41 ilustra la forma en que se aplican las ecuaciones para hallar los valores de las constantes a y b. En algunos casos es necesario forzar a la curva a pasar por el origen ya que suele aparecer valores para el parmetro b, provenientes de la acumulacin de errores. Si estos son muy grandes, es necesario revisar las condiciones de desarrollo del mismo para lograr su minimizacin. Si no es posible, se debe remplazar por otro mtodo mucho ms preciso. Tabla 41. Valores calculados para ajuste por mnimos cuadrados. ni 1 2 3 4 5 Concentracin (xi) (p.p.m.) 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0 75,0 Absorbancia (yi) 0,071 0,145 0,210 0,285 0,335 1,046 (xi)2 = 5625 (xiyi) 0,355 1,450 3,150 5,700 8,375 19,030 (xi)2 25 100 225 400 625 1375

Remplazando en las expresiones de las ecuaciones para calcular los valores de los parmetros b y c tenemos: (5) (19,030) (75,0) (1,046) (5) (1375) (5625) a = = 13,36*10- 3

Para ajustar finalmente la curva, consideramos que 8,8*10- 3 0, quedando la expresin de la ecuacin: A = 13,36*10- 3 Con esta ecuacin se vuelven a calcular los valores de la absorbancia para cada concentracin, se ajustan nuevamente los puntos y se trza la correspondiente recta, que servir como la curva de trabajo. Para el ejemplo que se est estudiando, el ajuste se encuentra en la tabla 42: Tabla 42. Curva de trabajo para la determinacin de nquel en alimentos. 227

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(1375) (1,046) (75,0) (19,030) (5) (1375) (5625) b = = 8,8*10- 3

Concentracin (p.p.m.) 5,0 10,0 15,0 20,0 25,0

Absorbancia 0,067 0,134 0,200 0,267 0,334

Con el dato de absorbancia para el problema, se interpola en la curva de trabajo para hallar la concentracin, la cual es de 62,0 p.p.m., encontrndose la primera pregunta resuelta. Para la segunda, relacionamos con el peso de la muestra y hacemos la proporcin a los cien gramos de la misma para encontrar un porcentaje que corresponde al 0,26 %. No queda resuelto el problema.

ACTIVIDAD DE APRENDIZAJE 10 1. Construya un mapa conceptual para el tema de espectrofotometra. 2. Elabore un cuadro comparativo con los elementos que conforman el equipo de espectrofotometra y diferencie cuando es visible, infrarroja, ultravioleta y de absorcin atmica. 3. Si dispone de los recursos o asocindose con otros compaeros (as) intente construir un colormetro y si le es posible disee una experiencia para determinar el espectro de absorcin de los extractos de ptalos de flores previamente estabilizados. 4. Consulte en la literatura y tome fotocopias o clquelas, espectros de sustancias en el visible, el ultravioleta y el infrarrojo. Para absorcin atmica ya conoce los espectros de emisin de los metales, que debi conocerlos en su curso de Qumica general. 5. Elabore una pequea monografa sobre los errores que se suelen presentar en estas tcnicas y cul es la absorbancia donde es factible minimizarlo. 6. Para determinar el cobalto en los alimentos, generalmente se recurre a la calcinacin del mismo y al posterior tratamiento con cido clorhdrico de modo que se forme el cloruro de cobalto hexahidratado, el cul puede ser determinado por espectrofotometra visible. Para hallar la mejor longitud de onda se corri la siguiente curva espectral: Longitud de onda (nm) 370 Porcentaje de transmitancia 91,5 Longitud de onda (nm) 500 Porcentaje de transmitancia 15,0 228

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380 400 420 440 460 480 485 490 495

90,2 85,0 73,5 52,2 30,0 20,0 18,7 17,5 16,0

505 510 515 520 525 540 560 580 600

14,0 13,5 14,0 14,5 15,8 27,9 52,0 74,5 84,0

a) Calcule la absorbancia para cada caso. b) Construya la curva espectral graficando absorbancia en funcin de la longitud de onda. c) Determine la longitud de onda de mxima absorcin. Para determinar la concentracin de cobalto, se construy la siguiente curva de calibracin: Concentracin (p.p.m.) 32,0 48,0 60,0 80,0 100,0 Porcentaje de transmitancia 52,2 38,0 29,1 20,0 13,0

7. La provitamina A se determina como caroteno. Para lo cual se hace una extraccin previa, se purifica por cromatografa de columna y el extracto se diluye a un volumen conocido y se lee a 450 nm. Para determinar el contenido de esta sustancia en un alimento, se prepar la siguiente curva de calibracin: Concentracin (g/100 mL) 2,3 4,6 6,9 9,2 11,5 13,8 Porcentaje transmitancia 84,0 70,0 60,5 52,0 46,5 42,0

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Calcule las unidades internacionales (U.I) de vitamina A que posee el alimento, sabiendo que se pes 1,0000 g, se extrajo y purific el caroteno, llevndolo a un volumen de 100 mL. Al leer en el espectrofotmetro se encontr que tena un 66,0 % de transmitancia. (1 U.I. = 0,6 g de caroteno). 8. El cido ascrbico (vitamina C) se determina en los alimentos que lo contienen utilizando el mtodo de Mohr, en el cual la vitamina se trata con la 2 nitroanilina diazotada para formar el derivado 2 nitrofenilhidrazida del cido oxlico, quien 229

frente a un exceso de hidrxido de sodio forma la sal sdica que presenta un color rojizo violeta cuya absorbancia se puede medir a 540 nm. A un alimento se le determin su contenido de cido ascrbico utilizando esta tcnica. Se pesaron 5,0000 g de la muestra, se extrajo la vitamina y se ley en el espectrofotmetro encontrndose un 63,1 % de transmitancia. Calcule la cantidad en mg de la vitamina que se encuentra en 100 g de muestra. La curva de calibracin utilizada fue la siguiente: Concentracin (p.p.m.) 5,0 8,0 10,0 12,0 15,0 18,0 20,0 25,0 Porcentaje de transmitancia 78,5 65,3 58,9 52,5 43,5 37,6 34,3 31,0

Desarrolle el ejercicio conforme a los procedimientos establecidos.

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TEMA 3

CROMATOGRAFA
En este ltimo tema, vamos a considerar los mtodos clsicos de anlisis ya que dan algunos de los fundamentos de un tcnica ms moderna y de amplia aplicacin como es la cromatografa, la cul tambin ha desarrollado algunos medios instrumentales especialmente en el trabajo con gases y con columna lquida de alta presin. Seguiremos de cerca el texto anterior que tena implementado la universidad ya que muchos de esos principios son todava vlidos y la escritura de los mismos ha sido didctica, nos limitaremos especialmente ha efectuar las adecuaciones requeridas para ajustarlos a la forma en que hemos venido desarrollando este mdulo78. 1. Mtodos de separacin y purificacin. 1.1 Mtodos clsicos.

Antes de entrar a estudiar los mtodos de separacin y purificacin cromatogrficos, recordemos los mtodos clsicos empleados para realizar estas operaciones: sedimentacin, decantacin, filtracin, precipitacin, extraccin, cristalizacin y destilacin, algunos de los cuales se mencionaron y emplearon en las tcnicas clsicas de anlisis estudiadas en la primera unidad. La sedimentacin es el depsito de materiales insolubles, suspendidos o formados en medios lquidos. Con la decantacin se separan el lquido y el slido obtenidos en la sedimentacin, vertiendo o sifoneando el lquido. La sedimentacin y la decantacin permiten una separacin rpida pero no completa entre un slido y un lquido.

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78

RAMREZ, Ins de Bernal y otros. Qumica analtica. Bogot, Unisur, 1996., pp. 555 706.

231

La precipitacin es la operacin mediante la cual una sustancia soluble se convierte en una insoluble, por una accin fsica (variacin de temperatura) o una accin qumica (adicin de un reactivo). La filtracin es la operacin a travs de la cual se separan lquidos de slidos mezclados, hacindolos pasar por un material poroso que retiene los slidos y permite el paso del lquido. Mediante este mtodo no se pueden separar entre s los lquidos ni los slidos cuando existen mezclas entre ellos. El mtodo de separacin por precipitacin se utiliza en la industria, por ejemplo, en la fabricacin de panela, cuando se agregan el muclago vegetal o fosfato monoclcico para precipitar los materiales que contamina el jugo de caa o guarapo, los cuales se separan por filtracin con espumaderas. Este mtodo solamente es aplicable a sustancias que se precipitan mediante la adicin de un reactivo o por la variacin del pH. La extraccin es una operacin por medio de la cual se separan los componentes de una mezcla que interesan de los que no se requieren. Para esto se pone en contacto con la mezcla un lquido (solvente) capaz de disolver las sustancias de importancia y que sea inmiscible con el resto de material. La extraccin puede realizarse utilizando el solvente en fro o en caliente y de acuerdo con la temperatura se utiliza el extractor de Soxhlet o un embudo de decantacin o equipos especiales para la extraccin con solventes lquidos que utilizan la diferencia de densidad. Generalmente estas tcnicas utilizan solventes orgnicos como etanol, benceno, ter etlico y ter de petrleo e inorgnicos, principalmente el agua. El sistema de extraccin puede ser continuo o discontinuo, un ejemplo del primer proceso es la extraccin de la grasa de muestras slidas de alimentos, empleando el extractor tipo Goldfish o el Soxhlet y del segundo el empleo del embudo de separacin. Cmo se efecta el proceso de extraccin lquido lquido?

Imaginemos un compuesto C que se encuentra disuelto en el solvente A en una determinada cantidad, no necesariamente hasta alcanzar el grado de saturacin. Para extraerlo utilizamos un solvente B, inmiscible con la mezcla CA. Al aadir B sobre el sistema CA y agitamos, el compuesto C se distribuye entre los dos solvente conforme a la solubilidad diferencial que tiene en cada solvente. A la relacin entre la concentracin de soluto en cada solvente se le denomina coeficiente de distribucin o de particin que se puede expresar matemticamente as: CB CA Siendo: CA = concentracin del compuesto C en A. 232

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Coeficiente de particin = K =

CB = concentracin del compuesto C en B. Es ms efectivo extraer el compuesto con varias porciones sucesivas de pequeos volmenes de B que en una sola extraccin con un mayor volumen del solvente. Esto se puede plantear matemticamente as: S = gramos iniciales del soluto C en A. VB = volumen de solvente B en mL. VA = volumen de solvente A en mL. X = gramos de soluto C extrado en un volumen de B. Despus de la primera extraccin, la concentracin S en el solvente A ser: SX CA = Mientras que en el solvente B ser: X CB = VB VA

Ahora remplazamos en la expresin del coeficiente de distribucin, efectuamos el despeje respectivo, simplificamos y finalmente obtenemos la siguiente expresin que nos permite calcular, al menos tericamente, la cantidad X del componente C que estamos extrayendo con cada cantidad de solvente B: K VB S

La cristalizacin es un mtodo empleado para purificar slidos, en el cual se realizan los siguientes pasos: Eleccin de un lquido que disuelva bastante al slido en caliente y relativamente poco en fro. Disolucin del slido en la mnima cantidad del solvente elegido, en caliente. Filtracin de la solucin en caliente. Reposo de la solucin hasta la cristalizacin del slido. Separacin del lquido madre mediante filtracin. Lavado de los cristales con el solvente fro. Las impurezas ms solubles que el slido a purificar quedan disueltas en los lquidos madres y las menos solubles quedan sobre el filtro. Generalmente, es necesario repetir este proceso varias veces para obtener slidos mucho ms puros. 233

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X = VA + K VA VB

1.2

Destilacin.

Puesto que algunos principios de la destilacin son anlogos a los fundamentos de algunos de los mtodos cromatogrficos, estudiaremos con ms detalle esta tcnica. El proceso utilizado permite la separacin y purificacin de sustancias lquidas basado en la diferencia de su volatilidad o mejor, de sus puntos de ebullicin. 1.2.1 Destilacin simple.

Consiste en calentar el lquido hasta la ebullicin dentro de un recipiente adecuado, conectado a otro llamado refrigerante en donde es posible enfriar los vapores para que se condensen a lquido ms puro, recibindolo en otro recipiente recolector. Lo anterior lo logramos a que las molculas del lquido ms voltil tienen una energa cintica mayor que les permite escapar de la mezcla pasando a vapor, lo que significa que un lquido a una determinada temperatura siempre estar en equilibrio con una atmsfera enriquecida con vapor. La presin que ejercen dentro del lquido es directamente proporcional a la temperatura; si la aumentamos suministrando calor vamos a encontrar que esa atmsfera tendr ms vapor que aire. Al alcanzar el punto de ebullicin, se igualan los valores de la presin de vapor del lquido a la atmosfrica y la atmsfera sobre el lquido ser nicamente de vapor. La destilacin simple purifica un lquido con slidos disueltos o lquidos con puntos de ebullicin muy diferentes; cuando la mezcla de lquidos tiene puntos de ebullicin semejantes o vecinos, es necesario realizar destilaciones simples sucesivas, recogiendo slo una fraccin cada vez o empleando la siguiente modificacin. 1.2.2 Destilacin fraccionada.

Esta modificacin permite efectuar las destilaciones sucesivas requeridas para separar los lquidos de punto de ebullicin vecinos sin que sea necesario recoger o transferir fracciones intermedias. Para entender el proceso de la destilacin fraccionada consideramos que, si se somete a ebullicin una mezcla de dos lquidos miscibles podemos observar uno de los siguientes comportamientos: El punto de ebullicin es una temperatura variable entre los puntos de ebullicin de los dos componentes. El punto de ebullicin es una temperatura constante ms baja que la esperada para cualquiera de los dos componentes. El punto de ebullicin es una temperatura constante ms alta de la que se espera para cualquiera de los dos componentes. Aquellas mezclas que presenten el comportamiento descrito en el primer inciso se pueden separar por la tcnica de la destilacin fraccionada. Imaginemos una mezcla de dos compuestos A y B. A tienen un punto de ebullicin menor que el de B. 234

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Cuando esta mezcla se somete a ebullicin, el vapor que se forma tiene una mayor proporcin de A y al condensarlo, el lquido ser mucho ms rico en A que en B, el cual se considerara como una contaminacin. El equipo utilizado tiene los siguientes recipientes: un baln de fondo redondo con un cuello estrecho, una columna de fraccionamiento que tiene muchas formas pero la ms sencilla es un tubo de vidrio con una tubuladura lateral y dentro de l existen pedazos de vidrio, un condensador de forma variada aunque se usa el recto, una alargadera que permite depositar el lquido condensado dentro de un recipiente. Figura. 16. Esquema de un equipo de destilacin fraccionada.

Si al baln de destilacin le conectamos una columna de vidrio llamada columna de fraccionamiento, la cual est rellena por pedazos de vidrio para aumentar la superficie de condensacin, ser mucho ms eficiente entre ms platos tericos tenga. Un plato terico equivaldra al sitio real de la columna donde ocurre una destilacin simple y el nmero de esos platos dara la cantidad de destilaciones que ocurren en la longitud de la columna, cada una de ellas enriqueciendo mucho ms el vapor en el componente A o el ms voltil hasta que al final solo destila A puro. En el baln de destilacin, al someter a ebullicin la mezcla AB, el vapor de AB ascender por la columna, sufre un enfriamiento, de tal forma que el compuesto con mayor punto de ebullicin, B, se condensa regresando al baln, mientras que el vapor ser cada vez ms rico en A aunque lleva algo de B, sigue subiendo a regiones de la columna ms fras donde se sigue condensando B, descendiendo por la columna hasta encontrar otro punto de equilibrio. Esto significa que en la columna se est presentando un gradiente de temperatura, es decir, regiones en las que existe un equilibrio no solamente entre vapor lquido sino tambin de temperatura, siendo ms caliente cerca al baln de destilacin y ms fro en la zona de la tubuladura que descarga el vapor al condensador donde se enfra pasando a lquido. La columna de destilacin se cierra con un termmetro que nos permite controlar la temperatura del vapor que est emergiendo de la columna y que debe coincidir con el punto de ebullicin de A. Hay otras tcnicas como son la destilacin por arrastre con vapor de agua. Procedimiento utilizado para separar las sustancias voltiles de otras no voltiles o menos voltiles presenten en mezclas acuosas o para separar lquidos inmiscibles con agua. Un ejemplo del primer caso es la destilacin del etanol presente en una bebida alcohlica y del segundo caso, la obtencin de aceites esenciales a partir de extractos vegetales que los contienen. Para comprender el mecanismo de estos procesos debemos recordar la ley de Dalton sobre las presiones parciales: cuando dos o ms gases o vapores, que no reaccionan entre s, se mezclan a temperatura constante, cada gas ejerce la misma presin que si 235

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estuviera solo y la presin total del sistema es la suma de las presiones de cada uno de los componentes de la mezcla. Si: PT = presin total de la mezcla. P1 = presin del componente 1. P2 = presin del componente 2. La ley de Dalton ser: PT = P1 + P2 + + Pn El punto de ebullicin de una mezcla de dos lquidos inmiscibles es la temperatura en la cual la suma de las presiones de vapor de los componentes es igual a la presin atmosfrica y siempre es menor al punto de ebullicin del componente ms voltil cuando est puro. Esta propiedad permite realizar el proceso trabajando a presin atmosfrica y tomando al agua como uno de los compuestos. As es posible separar el componente de ms alto punto de ebullicin a una temperatura menor de 100 C, previniendo en muchos casos la descomposicin del componente de inters o a separar. 2. Cromatografa. Los mtodos clsicos de separacin fueron insuficientes, especialmente en los campos de la qumica orgnica y la bioqumica, para la separacin de mezclas complejas tales como las de hidrocarburos, colorantes, aminocidos, vitaminas y muchas ms. Por tanto, fue necesario desarrollar otras tcnicas ms eficientes, como la cromatografa; si se utiliza uno de los mtodos clsicos, por ejemplo la filtracin para la separacin de los constituyentes de una fruta, se comprobar que al preparar el jugo de la fruta en agua y luego de filtrarlo, sobre el filtro quedar material fibroso y a travs del filtro pasarn disueltos en el agua los azcares, aminocidos, vitaminas y otros todos ellos mezclados. Podremos recuperar algunos de ellos a travs de la cristalizacin pero otros definitivamente no lo podemos realizar. Pero si recurrimos a tcnicas cromatogrficas adecuadas cono la de gases y la de intercambio inico es posible lograr recuperar la mayora de ellas e incluso identificarlas. Cuando una sustancia se encuentra acompaada de otras, se puede purificar utilizando una de las siguientes tcnicas: destilacin si la sustancia es lquida, cristalizacin si es slida y cromatogrfica si es lquida, slida o gaseosa. Si obtiene un compuesto o sustancia procedente de un producto natural o sinttico y requiere saber qu es o que grupos funcionales posee, puede recurrir a la cromatografa o incluso tratar de identificarlo sabiendo a que grupo pertenece, como en el caso de azcares, pero desea saber si es glucosa, fructosa, sacarosa o almidn. La cromatografa es una tcnica sencilla y relativamente econmica en el uso de equipo, reactivos y procedimientos como lo estudiaremos ms adelante; requieren una cantidad pequea de muestra o la podemos utilizar para purificar compuestos y recuperarlos para 236

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iniciar estudios mucho ms complejos donde se exige que la pureza de la misma sea muy alta. Es as que dentro de las clasificaciones de pureza se hable del grado cromatogrfico. 2.1 Fundamentos.

Todos los mtodos de separacin y purificacin de los constituyentes de mezclas se basan en la diferencia de alguna propiedad fsica o qumica de esos componentes. Los mtodos clsicos: sedimentacin, decantacin, filtracin, precipitacin y cristalizacin se fundamentan en la diferencia de solubilidad de las sustancias en un solvente. La destilacin como mtodo de separacin y purificacin de los componentes de mezclas lquidas se basa en la diferencia de los puntos de ebullicin de esos lquidos. Los mtodos cromatogrficos para la separacin y purificacin de los componentes de mezclas se fundamentan en la diferencia de una propiedad, pero diferente a la de los mtodos clsicos y especfica para cada clase de cromatografa. El trmino cromatografa se aplica generalmente a aquellos procesos en los cuales se aprovecha la diferencia de velocidad de migracin presentada por los componentes de la mezcla analizada, entre un medio estacionario y la accin de una fase mvil. Supongamos que tenemos una mezcla de tres tipos de bolas de plstico, unas tienen la superficie perfectamente pulidas, otras presentan superficies rugosas y las terceras son ms pesadas que las anteriores. Queremos separarlas sobre una superficie fija de pao, utilizando un chorro de aire; una vez hemos iniciado el proceso, encontramos que ellas corren a diferente velocidad: las de superficie lisa se colocan al frente, las rugosas se ubican en un espacio intermedio segn la fuerza de la corriente de aire y las terceras constituyen el ltimo grupo en moverse. La separacin lograda depende de la interaccin superficial de cada esfera con el pao y de la fuerza de la corriente de aire. En la cromatografa, el aire representa a la fase mvil o eluyente, el pao a la fase estacionaria. Mientras que el tipo de interaccin esfera pao representara a las fuerzas que intervienen en la separacin de las mezclas, siendo el que separara a cada tipo de cromatografa. Este modelo sera el que utilizaramos para estudiara cada uno de los tipos de cromatografa que podramos emplear para separar las mezclas de inters e identificar inicialmente a cada tipo de sustancias separada. 2.2 Clases de cromatografa.

Podemos establecer dos criterios: uno es el tipo de fenmeno predominante y el otro segn las fases implicadas. De todas formas, lo importante es conocer realmente las fuerzas que intervienen y que se pueda constituir como el elemento fundamental para la seleccin de algunas de esas tcnicas segn el tipo de mezcla problema que tengamos que separar. 2.2.1 Segn el fenmeno predominante.

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237

Las separaciones de los constituyentes de la mezclas por mtodos cromatogrficos, se basan principalmente en los fenmenos de absorcin, reparto, intercambio inico y diferencias en el peso molecular. Con base en esos fenmenos, la cromatografa ser de adsorcin, reparto, intercambio inico y de filtracin por gel o de tamices moleculares. Sin embargo, en muchas de ellas participan combinaciones de fenmenos descritos pero esencialmente la separacin depender mucho de la predominancia de uno de ellos, dndole su carcter distintivo. Tambin se clasifica segn la tcnica empleada en cromatografa de papel, de capa delgada o de columna. 2.2.1.1 Cromatografa de adsorcin. La adsorcin es un fenmeno basado en la diferencia de interacciones entre la superficie del slido estacionario y los solutos o adsorbatos transportados en el solvente o fase mvil. Las interacciones adsorbente soluto son del tipo de fuerzas de Van der Walls, puentes de hidrgeno y enlaces de tipo electrosttico. Durante el desarrollo cromatogrfico, el adsorbente retiene en su superficie al soluto presente en la solucin, pero al moverse el adsorbato es eluido parcialmente y adsorbido nuevamente en otra zona del adsorbente, recordando el fenmeno de la destilacin fraccionada por lo que se utiliza el concepto del plato terico encontrando la posibilidad de establecer un equilibrio entre las dos fases. El equilibrio entre el soluto adsorbido y el disuelto es funcin de un coeficiente de adsorcin caracterstico del sistemas adsorbente adsorbato y vara con la concentracin del soluto y la temperatura. Se representa grficamente como una isoterma de adsorcin, donde la concentracin del soluto en el adsorbente es una funcin de la concentracin del soluto en fase mvil; se esperara que idealmente fuera una lnea recta, pero en la realidad corresponde a parbolas con una linealidad en la regin de baja concentracin. La isoterma de adsorcin ideal (lineal) expresa que el coeficiente de adsorcin es constante, es decir, el adsorbente siempre retiene igual cantidad de adsorbato y no hay saturacin en la superficie del adsorbente. Adems, indica que el equilibrio es instantneo y no hay difusin de soluto en la fase lquida. Cuando las condiciones de idealidad se presentan en la cromatografa de adsorcin, despus de realizado el desarrollo, los solutos se separan en la columna cromatogrfica en secciones cilndricas perfectamente definidas, mientras que en la cromatografa de placa se obtienen manchas totalmente circulares y con bordes bien delineados, sin colas. En la realidad, la saturacin del adsorbente, la demora en establecer el equilibrio adsorbente adsorbato y la presencia de fenmenos de difusin hace que la isoterma se transforme en parbola y exista una lnea de asntota imaginaria que muestra la mxima capacidad de trabajo del sistema. Esta limitacin, realmente es una ventaja comparativa ya que es adecuada para trabajar con pequeas cantidades de sustancias, lo que realmente ocurre en los problemas de separacin e identificacin de sustancias provenientes de productos como los alimentos. 238

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El xito de la tcnica es poder tener componentes en la mezcla con diferentes isotermas de adsorcin y lo ms alejados posibles entre ellas, y cada una de ellas con un comportamiento de adsorcin diferente; ni tan dbil que se aproxime al eje de las abscisas ni tan fuerte que se acerque al eje de las ordenadas. 2.2.1.2 Cromatografa de reparto. El reparto es un fenmeno debido a la diferencia de solubilidades entre la fase mvil y la fase estacionaria. Se presenta cuando ambas fases son lquidas permitiendo que el adsorbente tenga diferentes concentraciones segn su solubilidad en cada una de ellas. El coeficiente de reparto es especfico del sistema solvente adsorbato y depende nicamente de la temperatura. La tcnica cromatogrfica requiere una modificacin y es la de disponer de un soporte donde fijar a la fase lquida estacionaria; su desarrollo naci de la necesidad de separar los hidrolizados de protena buscando la separacin y caracterizacin de cada uno de los aminocidos que conformaban la protena analizada. Se ha efectuado el clculo del tamao de un plato terico de esta tcnica encontrndose en rangos de 0,002 mm; por lo tanto, una columna cromatogrfica de unos pocos centmetros tendr muchsimos ms regiones de separacin que la columna de destilacin fraccionada ms eficiente. Las isotermas de reparto o de particin representan la concentracin de soluto en la fase estacionaria en funcin de la concentracin de soluto en la fase mvil determinando la constante de reparto que tiene las mismas implicaciones de la isoterma de adsorcin, sin embargo las impurezas no influyen tanto en la separacin logrndose valores ms reproducibles que en la tcnica anterior. 2.2.1.3 Cromatografa de intercambio inico.

La base de este tipo de cromatografa es encontrar diferencias en la afinidad que exhiben ciertas sustancias de intercambiar iones o especies de igual carga puesto que el sistema debe ser siempre elctricamente neutro. El ejemplo clsico es remover la dureza del agua potable, debida al exceso de concentracin de iones de calcio (II) y de magnesio (II), utilizando una zeolita de sodio. La reaccin que ocurre es: Ca2 + + Zeolita Na 2Na+ + Zeolita Ca

Los intercambiadores inicos son un conglomerado macromolecular, slido, denominado macro Ion, que contiene cargas positivas o negativas que por atraccin electrosttica retiene cargas de signo contrario, llamadas iones mviles o contraiones que pueden ser susceptibles de intercambiar por iones del mismo signo como lo describe la ecuacin de equilibrio de la zeolita. El modelo fsico ms idneo para ilustrar la matriz de esta cromatografa es el de la esponja, la estructura slida correspondera al macro Ion y en los poros se encontraran los contraiones. Cuando se pasa la solucin con exceso de iones por la esponja, se desplazaran son contraiones de los poros dejando paso a los que trae la solucin. 239

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En los intercambiadores catinicos, el macro Ion son aniones, mientras que el contraion es catinico como es el caso de la zeolita de sodio. En los intercambiadores aninicos el contra Ion es catinico y los contraiones son aniones. Estas resinas de intercambio inico se pueden reconstituir haciendo un lavado con una solucin que contenga el ion original de la misma, por ejemplo, la zeolita Ca se regenera pasando una solucin diluida de cloruro de sodio dejndola nuevamente como Zeolita Na. Comercialmente se les asigna las caractersticas que poseen como el ser fuertes o dbiles, porcentaje de enlace transversal efectuado por el componente activo su composicin y la cantidad de iones que puede intercambiar tericamente en miliequivalentes por gramo de resina seca como cido o como cloruro. Otros fenmenos que pueden participar en el proceso de separacin cuando se utiliza esta tcnica es el equilibrio del intercambio, pH, hinchamiento de la resina, tiempo de contacto, sustancias disociadas y no disociadas, signo y tamao de la carga, tamao de los iones, formacin de complejos y fenmenos de adsorcin, pero como lo mencionamos antes, la separacin depende principalmente del intercambio inico. 2.2.1.4 Cromatografa de filtracin por gel o de tamices moleculares. Las separaciones en este tipo de cromatografa dependen de la conformacin estructural de las molculas por separar. Las molculas muy grandes no podrn penetrar la estructura de la fase estacionaria, mientras que las pequeas lo harn difundindose en los poros del gel, movindose ms lentamente a lo largo de la columna, fluyendo siguiendo un orden descendente de pesos moleculares. Los materiales usados en esta tcnica determinan un grado de selectividad definiendo los pesos moleculares que pueden separar. 2.2.2 Cromatografas segn las fases implicadas.

Hay establecidas cuatro tipos segn se tengan combinaciones de fases lquidas y gaseosas, as: Cromatografa lquida. (CLL). Las fases mvil y estacionaria son lquidas. La fase estacionaria est adherida a un soporte slido. Cromatografa gas lquido. (CGL). La fase estacionaria es lquida mientras la mvil es gaseosa. Cromatografa gas slida. (CGS). Se diferencia de la anterior en que la fase estacionaria es un slido y la mvil sigue siendo un gas. Cromatografa lquida slida. (CLS). La fase estacionaria es un slido y la fase mvil es un lquido. Estas tcnicas requieren equipos ms sofisticados por lo que siguiendo el smil de las tcnicas instrumentales trabajadas en los temas anteriores corresponderan a mtodos instrumentales de la cromatografa que comnmente se identifican con las tcnicas de cromatografa de gases y cromatografa de alta presin o HPLC. 2.3 Criterios para la seleccin de la clase de cromatografa.

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Para seleccionar la clase de cromatografa apropiada y separar los constituyentes de una mezcla, debemos tener en cuenta las siguientes propiedades: 240

Carcter hidroflico o lipoflico de la mezcla. Carcter inico. Peso molecular relativo. Si la mezcla es soluble en agua se emplea generalmente cromatografa de reparto, utilizando como fase estacionaria un sorbente que retenga agua, por ejemplo, de tal manera que se realice el reparto ente el eluyente de la fase mvil y el agua de la fase estacionaria, de acuerdo con su coeficiente de reparto. Pero si la mezcla no es soluble en agua sino en los solventes de las grasas (ter etlico, ter de petrleo, etc.), es decir, es lipoflica, se obtendr una buena separacin de sus constituyentes por cromatografa de adsorcin. Observamos que en el caso de la cromatografa de reparto se nombra el agua porque es indispensable para que la muestra se distribuya en las dos fases. En cambio, cuando se trata de cromatografa de adsorcin el agua debe eliminarse para que la fase estacionaria tenga mayor capacidad de adsorcin. Si la mezcla es inica, sus constituyentes se separarn muy bien empleando cromatografa de intercambio inico, para lo cual se utiliza como fase estacionaria una resina de intercambio inico adecuada. Si el problema tiene componentes de alto peso molecular en los cuales hay inters, la cromatografa por filtracin en gel es el mtodo que dar buenos resultados en la separacin y purificacin de esas molculas. 3. Cromatografa en papel.

Vamos a estudiar cada una de las tcnicas de uso ms comn, que corresponderan a las clsicas en nuestro esquema de estudio para finalizar con las instrumentales (cromatografa de gases y lquida de alta eficiencia). 3.1 Principio.

La cromatografa en papel es una tcnica que permite la separacin e identificacin de sustancias qumicas al utilizar un solvente que se desplaza sobre hojas o tiras de papel de filtro en cantidades que no superan al microgramo. La separacin de cada sustancia es producto de la accin de fuerzas propulsoras y de retardantes. Entre las primeras tenemos el flujo del disolvente y la solubilidad de cada componente de la mezcla en la fase mvil y entre las segundas se cuenta la adsorcin y reparto dependiendo de las caractersticas del sistema. 3.2 Equipo empleado.

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Los materiales adecuados para trabajar con la cromatografa en papel son: papel adecuado que constituya la fase estacionaria, aplicadores de muestra, cmaras para el desarrollo, eluyentes utilizados para el desarrollo, reveladores para localizar los componentes de la mezcla ya separados y atomizadores para la aplicacin de los agentes de revelado. 241

Dentro del equipo adicional, no indispensable, est una cmara provista de luz ultravioleta para la confirmacin de la presencia de ciertos componentes y un densmetro para efectuar anlisis cuantitativo. 3.2.1 Fase estacionaria.

El papel utilizado en cromatografa est constituido por celulosa; el ms adecuado es a base de linters79, no debe contener aprestos ni sustancias solubles. Se fabrican varias clases que se diferencian entre s por el espesor y la velocidad de flujo; los ms delgados se utilizan en cromatografa analtica y los ms gruesos para cromatografa preparativa. Las marcas ms conocidas son: Tabla 43. Caractersticas, utilidad y casa productora de algunos papeles para cromatografa. Marca y referencia
Whatman (W) No. 1

Caractersticas
Corre con lentitud. Superficie suave. Superficie rugosa.

Utilidad

Casa productora

El ms usado comnmente. Whatman No. 3 Para grandes cantidades de muestra. Whatman No. 4 Desplaza ms rpido Cromatografa que el W. No. 1. ascendente. Whatman 3 MM Grueso Cromatografa cuantitativa. Scheilcher &Schuell (S- Equivale al W No. 1. Buenos resultados en Pesa 120 g/m2. S) 2043 b casi todas las separaciones.

Reeve & Angel Ltd. Inglaterra. Reeve & Angel Ltd. Inglaterra. Reeve & Angel Ltd. Inglaterra. Reeve & Angel Ltd. Inglaterra. Scheilcher & Schuell. Dassekem Krs, Einbeck, Alemania o Estados Unidos. Scheilcher & Schuell. Scheilcher & Schuell Muy parecido al anterior. Pesa 80 g/m2. Dassekem Krs, 2043 a Einbeck, Alemania o Estados Unidos. Scheilcher & Schuell Ms lento que los Separan muy Scheilcher & Schuell. 2045 a y b anteriores. ntidamente. Dassekem Krs, Einbeck, Alemania o Estados Unidos. Scheilcher & Schuell Corren con rapidez. Corresponden al W N. Scheilcher & Schuell. 2040 a y b 4. Dassekem Krs, Einbeck, Alemania o Estados Unidos.

El papel viene generalmente en pliegos de aproximadamente 60 por 58 cm y en ocasiones en rollos. Es necesario manipularlo con guantes para evitar contaminaciones. 3.2.2 Aplicadores.

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La aplicacin o siembra de la muestra en el papel se hace utilizando tubos capilares. Si es cromatografa cuantitativa, se hace con micro pipetas para determinar los microlitros aplicados a la fase estacionaria.
79

Linters: son las fracciones de las fibras del algodn que quedan adheridas a la semilla en el desmote.

242

3.2.3

Cmaras.

Son recipientes comnmente de vidrio y de mayor tamao al del papel utilizado para la separacin. 3.2.4 Eluyentes o solventes.

El solvente transporta la muestra y efecta su desarrollo a travs de la fase estacionaria. Debido a que con la cromatografa se detectan cantidades en el orden de los microgramos, los disolventes o eluyentes empleados deben ser muy puros en clasificaciones denominadas grado analtico o grado cromatogrfico80. Cuando no se dispone de esta clase de reactivos es necesario purificarlos. En ocasiones estos eluyentes se emplean solos, pero la mayora de las veces se utilizan en mezclas binarias, ternarias o cuaternarias. 3.2.5 Reveladores.

El revelado es la operacin que permite localizar las sustancias incoloras en la fase estacionaria, luego del desarrollo cromatogrfico. Este proceso puede realizarse utilizando propiedades fsicas o qumicas de los constituyentes de la mezcla a separar. Las propiedades fsicas puede ser radioactivitas, absorcin de luz ultravioleta en el rango de 240 a 260 nm. En estos casos se utilizara un contador Geiger o la cmara provista con luz ultravioleta para poderlas ubicar sobre el papel. La mayora de las veces se aprovechan las propiedades qumicas de los componentes de las mezclas. As, si se trata de aminocidos se revelan utilizando un agente cromforo como la solucin de ninhidrina que produce con ellos una mancha de color violeta tpica. 3.2.6 Atomizadores.

La aplicacin del agente de revelado se hace utilizando un recipiente aspersor, atomizador o pulverizador. Hay muchos de ellos a nivel comercial. 3.3 Procedimiento.

Conocido el equipo, ahora vamos a estudiar la forma como se realiza la tcnica cromatogrfica utilizando papel. Se recomienda efectuar algunos ensayos preliminares para tener certeza del tipo de mezcla por separar y del principal fenmeno que lo permita: adsorcin o reparto. 3.3.1 Preparacin de la muestra.

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80

Una sustancia es grado cromatogrfico cuando al desarrollarse en diferentes sistemas cromatogrficos, produce solamente una mancha, correspondiente a una sustancia.

243

En algunos casos, la preparacin es muy sencilla, como en el caso del anlisis de los azcares presentes en una fruta, donde la muestra se obtiene haciendo un jugo y filtrndolo. Cuando se trata de mezclas mucho ms complejas, primero se debe eliminar los compuestos que puedan interferir en el anlisis, es el caso de la preparacin de la muestra de aminocidos proveniente de un tejido animal, que requiere la eliminacin previa de grasas, carbohidratos y sales inorgnicas para obtener buenos resultados. Si la muestra es slida, se pulveriza y se extrae con un solvente de bajo punto de ebullicin y luego se somete al anlisis respectivo. Lo ms importante es que la solucin debe ser completamente transparente. 3.3.2 Corte del papel.

Los trazos se hacen con lpiz de grafito puesto que los colorantes que componen la tinta interfieren en el anlisis. El papel se corta de un tamao adecuado al nmero de muestras a analizar y a la clase de cromatografa que se va a realizar. Se aconseja que la distancia entre muestras y con los bordes de papel sea mnimo de un centmetro, un largo de la tira de 8 cm es adecuado para ensayos preliminares y de 12 a 25 cm cuando se vayan a separar constituyentes de la mezcla. El sentido de la flecha indicado en los pliegos del papel debe quedar en el sentido de desarrollo, es decir, a lo largo de la tira. Siempre que se corte papel, conviene tener la precaucin de marcar la flecha en el resto del pliego; si no se encuentra, se coloca sobre un pedazo del papel una gota de agua destilada con una pipeta o un gotero y se marca la flecha en el sentido en que se desplaza el valo buscando su mayor dimetro. 3.3.3 Ensayo de concentracin.

Con la muestra en solucin, se realiza un ensayo para determinar la cantidad adecuada de ella, es decir, suficiente para que se obtengan en los cromatogramas, las manchas definidas para cada compuesto con buena intensidad, pero tampoco tan concentradas que se produzcan estelas o colas. Para ello se lleva un ensayo in situ (sin ningn desarrollo), aplicando en distintos sitios de un papel apropiado de unos 5 x 5 cm diferentes cantidades: una, dos, cinco, diez gotas y sin son materiales biolgicos se aconseja aplicar la muestra como una lnea o raya. Si las sustancias no son coloreadas, se revela y se escoge la cantidad que produzca una mancha de buena intensidad. Cuando el ensayo in situ ha determinado aplicar dos o ms gotas de la solucin, se recomienda dejar evaporar el solvente antes de sembrar la siguiente gota, esto impide que la muestra se difunda y se logre la separacin esperada. 3.3.4 Ensayo para elegir eluyentes y desarrollo.

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Aunque la literatura sobre cromatografa recomienda los eluyentes para separar muchas clases de mezclas, es muy conveniente realizar algunos ensayos preliminares de estos, debido a que la mezcla por separar, probablemente es diferente a las citadas y, adems, seguramente no se dispone de toda clase de eluyentes. 244

Tales ensayos preliminares se pueden realizar de dos maneras: in situ o efectuando desarrollos; en los dos casos, empleando varios eluyentes. Para efectuar el ensayo in situ, se siembran varias manchas con la cantidad de gotas previamente definidas, se deja evaporar el solvente y se aplica a cada una de ellas los eluyentes a utilizar recomendados por la literatura y otros disponibles con polaridad similar a la de la mezcla en cantidades adecuadas, se revela si es necesario y se escoge el que mejor separacin de, es decir, el que produzca ms manchas concntricas ya que cada una de ellas correspondera, en principio, a los componentes de la mezcla por separar. La tabla 44 rene la serie mixotrpica o de ordenamiento de solventes tiles en cromatografa de papel comenzando por los ms polares y terminando con los ms lipoflicos. Tabla 44. Serie mixotrpica de los solventes ms usados. Orden 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 Solvente Agua Formamida cido frmico Acetonitrilo Metanol cido actico Etanol Isopropanol Acetona n - propanol Dioxano cido propinico Tetrahidrofurano t - butanol cido isobutrico s - butanol Metil etil cetona Ciclohexanona Fenol Alcohol t amlico n butanol m cresol Orden 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 Solvente Ciclohexanol Alcohol isoamlico Alcohol n amlico Acetato de etilo n hexanol Colidina ter Acetato de n butilino Nitrometano Cloruro de metileno Cloroformo Dicloroetano Benceno Tricloroetileno Tolueno Xileno Disulfuro de carbono Ciclohexano ter de petrleo Kerosene Aceite de parafina

Para elegir los eluyentes, efectuando desarrollos, se alistan tantas tiras de papel cuantos eluyentes se deben ensayar y cada una de ellas se marca con lpiz el origen a unos 2 3 cm del borde inferior de la tira y se aplica la cantidad de gotas determinadas en el ensayo de concentracin, se desarrollan sumergiendo la tira por el extremo ms prximo al sitio donde se marc la muestra en cada eluyente contenido en un frasco o cubo hermticamente tapado, denominado cmara. Con el objeto de obtener mejores resultados, se permite que la cmara se sature de los vapores de los componentes del eluyente, antes de colocar el papel, conservndola hermticamente tapada. Para acelerar las saturaciones de la cmara, se acostumbra colocar papel de filtro empapado en el solvente de desarrollo en aproximadamente la mitad del interior de los papeles de la cmara. 245

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El eluyente asciende o desciende por el papel separando los componentes de la mezcla, esta parte corresponde al desarrollo y se busca que el frente del solvente alcance a llegar casi al borde contrario al de siembra de la muestra, el cual se marca con un lpiz de grafito, se retira el papel de la cmara, se deja secar y se observan los compuestos separados si ellos son coloreados o se revelan cuando son incoloros. El sentido del desarrollo puede hacer que la tcnica de la cromatografa sea ascendente, descendente u horizontal donde tambin puede haber variaciones como sencillo, mltiple, continuo, circular, en cua o bidimensional. Pero la ms comn es la ascendente ya que los requerimientos de las cmaras en muy simple de resolver, en las otras requieren de un diseo especial. Un desarrollo es sencillo cuando la fase mvil migra una sola vez y es mltiple cuando lo hace dos o ms veces en el mismo o en otro sistema eluyente, para ello se deja secar el primero antes de sumergir el papel en el otro sistema, en estos casos se busca que los solventes recorran la misma distancia y se utiliza cuando las distancias entre las manchas no superan 0,5 unidades de separacin. 3.3.5 Revelado.

Si las sustancias separadas no son coloreadas, no se puede observar en qu sitio quedaron localizadas; para solucionar este problema se usa la operacin de revelado. Si se dispone de una lmpara de luz ultravioleta, se observa el trozo de papel cuidando que la luz no llegue directamente a los ojos o se utilizan gafas que los protejan y se resaltan los bordes de las manchas con un lpiz de punta fina. Si la sustancia no es sensible a esta radiacin electromagntica, se recurre a otras sustancias como es el caso de los vapores de yodo que trata de ser el agente revelador universal. Se recomienda marcar los bordes de las manchas detectadas con el lpiz ya que con el tiempo los vapores de yodo se van volatilizando desapareciendo la mancha dejada en el papel cromatogrfico. Hay otras formas de revelar y es sometiendo a agentes cromforos ms especficos ya sea rociando uniformemente con un atomizador o, si el solvente no afecta la separacin, sumergiendo el papel en una cpsula de porcelana que lo contenga. A veces se requiere calentar el papel para favorecer la reaccin qumica teniendo cuidado de no quemarlo. Inmediatamente han aparecido las manchas, por seguridad se resaltan los bordes de las mismas con un lpiz y se registra en el cuaderno de laboratorio los colores presentes ya que la mayora de las veces desaparecen con el tiempo. Finalmente se calculan los valores de ubicacin de cada mancha o Rf. Estos son caractersticos del sistema cromatogrfico y se suelen utilizar para comparar resultados con las mismas sustancias o como criterio de identificacin; se derivan del comportamiento de la respectiva isoterma y corresponden al cociente de la distancia recorrida por la mancha sobre la distancia recorrida por el frente del solvente. La figura 17 representa la forma de efectuar la medicin de esas distancias. De acuerdo con los valores Rf se analiza si la cromatografa en papel es adecuada para separar los constituyentes de la mezcla problema. Lo ser si los componentes se separan lo ms posible a lo largo de la fase estacionaria, siendo deseable que esos valores estn comprendidos entre 0,15 y 0,85. Si son muy bajos, del orden de 0,15 se recomienda elegir otro sistema eluyente teniendo en cuenta el grado de polaridad de la 246

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mezcla y la ubicacin del primer eluyente empleado en la serie mixotrpica. Lo mismo cuando se tienen valores superiores a 0,85. Lo ideal es conocer el tipo de comportamiento que presenta la mezcla y sobre esa base, definir el mecanismo de separacin ms apropiado (reparto o adsorcin) y dependiendo de ello las caractersticas del sistema eluyente que deben corresponder a ellas para mejorar el proceso de separacin, utilidad de la serie mixotrpica: si es reparto recurrir a solventes polares, y si es adsorcin a solventes menos hidroflicos. Figura 17. Determinacin de los valores Rf.

FRENTE DEL ELUYENTE. SUSTANCIA A a c

SUSTANCIA B b APLICACIN DE LA MUESTRA

Los valores Rf para cada sustancia sern:

El valor Rf es adimensional, por ello la mencionamos atrs como unidades de separacin y es caracterstica de cada sistema cromatogrfico ya que refleja alguna de las propiedades del componente separado como su peso molecular relativo o su polaridad, por ejemplo, los azcares migran en una fase estacionaria adecuada (con grupos polares) de acuerdo a su peso molecular, a mayor peso molecular, mayor valor de Rf. En el caso de los aminocidos, su velocidad de migracin depende del carcter polar, polar no cargado o no polar de la cadena del aminocido facilitando su separacin e identificacin. 3.4 Aplicaciones.

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RfA = a/c y RfB = b/c

Vamos a discutir dos procedimientos relacionados precisamente con la capacidad de separacin de la tcnica y la forma de determinacin cuantitativa. 3.4.1 Cromatografa preparativa en papel.

La cromatografa preparativa en papel permite obtener miligramos de constituyentes de mezclas, utilizando generalmente los desarrollos ascendente o descendente. Algunas 247

veces las sustancias no se obtienen muy puras, por lo cual se hace necesario repetir el proceso o alternarlo con la cromatografa en columna. El papel empleado en esta tcnica es grueso (tipo Whatman 3 MM). En este caso, la aplicacin se hace a lo largo de uno o varios papeles cuadrados, en forma de raya o banda continua, con la ayuda de una micropipeta o un aplicador especial, procurando que quede uniforme y angosto. Despus del desarrollo se revelan nicamente las extremos, se marcan con lpiz las zonas correspondientes, se cortan, se eluyen con solventes apropiados para recuperar las sustancias luego de evaporar el solvente. 3.4.2 Cromatografa cuantitativa en papel.

Para obtener resultados reproducibles en cromatografa cuantitativa es necesario tener en cuenta los siguientes requisitos: Aplicar volmenes de la solucin problema exactamente medidos, obtener manchas uniformes y reproducibles en la siembre mediante el uso de una micropipeta. Emplear un sistema de eluyentes que produzcan manchas redondas y sin colas. El reactivo revelador debe emplearse en cantidad suficiente para que reaccione con la totalidad de los compuestos presentes en la mezcla problema y aplicarse homogneamente lo que se obtiene ms fcilmente empleando la tcnica de inmersin que la de aspersin. Cuando se trate de sustancias que se descomponen por accin de la luz, el papel se debe proteger durante el desarrollo y revelado. Las determinaciones en cromatografa cuantitativa se realizan midiendo el soluto (si es coloreado) o su derivado, directamente en el papel (in situ) o luego de recuperarlos del papel. 3.4.2.1 Determinacin in situ.

Si obtenemos manchas bien definidas y redondas, su tamao e intensidad se puede relacionar con su concentracin. La valoracin determinando el tamao de la mancha se puede realizar midiendo el rea con un plangrafo obteniendo una exactitud del 2 %, la longitud de la mancha y determinado su logaritmo, por recuento de cuadrados, mtodo que da una exactitud del 5 %. Cuando se utiliza la intensidad de la coloracin de las manchas, la valoracin se puede efectuar fotomtricamente o visualmente; con la primera la exactitud es del 5 % y la segunda se alcanza un 20 %. Para la determinacin fotomtrica se emplea el densitmetro, que efecta la medicin comparando las manchas de patrones de referencia. En la visual se elabora una serie de manchas de concentracin conocida con el patrn y otra con el problema, luego se hacen comparaciones visuales para determinar las concentraciones semejantes. 248

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3.4.4.2 Determinacin por extraccin. Los compuestos separados se extraen del papel utilizando el solvente adecuado y tcnicas como la extraccin con Soxhlet y luego se caloran por espectrofotometra, microtitulacin o microgravimetra. 4. Cromatografa en capa delgada. Tcnica semejante a la anterior pero con una amplia gama de fases estacionarias. 4.1 Principios.

En la cromatografa de capa delgada, las separaciones se deben a procesos como la adsorcin, reparto, intercambio inico y diferencia de tamao de las molculas presentes en una muestra problema. Sus principales ventajas sobre la de papel son la rapidez y la sensibilidad, debido a: La muestra se difunde menos en la capa delgada, permitiendo separar cantidades ms pequeas de muestra. La localizacin de los compuestos (revelado) puede realizarse con reactivos ms sensibles y que no atacan a la fase estacionaria como es el caso de los cidos sulfrico y clorosulfnico que destruyen al papel. 4.2 Equipo.

Son semejantes a los de la cromatografa de papel, pero se diferencia en que se tienen ms posibilidades con las fases estacionarias y la necesidad de utilizar un soporte inerte para su colocacin. 4.2.1 Sorbentes o fase estacionaria.

Corresponde a los materiales utilizados para realizar la separacin cromatogrfica, como adsorbentes, intercambiadores de iones y geles de filtracin. Estos ya se encuentran producidos en el comercio, con propiedades bien establecidas, tamaos de partcula uniforme dependiendo si es placa (entre 1 y 25 m), para columna (100 a 200 m) y para HPLC o cromatografa de alta presin (entre 5 a 30 m). Dentro de su composicin pueden tener aditivos, definiendo su clasificacin con el caso de los G que contiene del 5 al 30 % de yeso o almidn que les da mejor consistencia y resistencia mecnica, indicadores de luz ultravioleta designndoseles con la letra F y un nmero que indica la longitud de onda de absorcin o contener nitrato de plata (del 1 al 15 %) para facilitar la separacin de cidos grasos. Si aparece la letra P, se puede utilizar para cromatografa preparativa. 4.2.1.1 Gel de slice. Los trminos gel de slice y cido silcico corresponden al mismo sorbente. Es el ms utilizado en cromatografa de placa o capa delgada y en columna. Sus propiedades de porcin dependen exclusivamente de los grupos hidroxilo unidos a los tomos de silicio 249

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superficiales que pueden formar puentes de hidrgeno como las molculas adsorbidas. Al calentar por encima de 200 C pierden esta propiedad debido al cambio a uniones Si O Si. Como esta fase tiene la propiedad de perder o recuperar agua, se puede utilizar en cromatografa de adsorcin o de reparto ya sea que se active o se trabaje con solventes polares incluyendo agua. 4.2.1.2 Almina. El xido de aluminio o almina tiene reaccin alcalina, neutra o cida segn el mtodo de obtencin que tambin le define grados de actividad Brokcman como se aprecia en la tabla 45, relacionada con la cantidad de agua adicionada a la almina anhidra: Tabla 45. Actividad del xido de aluminio. Nivel de actividad I II III IV V Porcentaje de agua 0 3 6 10 15

La ltima es menos inerte que el gel de slice, puede catalizar la descomposicin de algunos compuestos orgnicos como cetonas insaturadas. Sin embargo, en el anlisis de alimentos se emplea en la separacin de vitaminas liposolubles. 4.2.1.3 Kieselgur o tierra de diatomceas.

El Kieselgur, tierra de diatomceas o de infusorios est constituido por los caparazones fsiles de algas marinas llamadas diatomceas. Este sorbente neutro es empleado como soporte para las separaciones por reparto, especialmente de oligosacridos. 4.2.1.4 Celulosa.

Como en la cromatografa en papel, la celulosa utilizada en placas absorbe gran cantidad de agua predominando el reparto en la separacin que utiliza este adsorbente. Por lo tanto es muy eficiente en la separacin de mezclas hidroflicas como aminocidos, azcares, etc. Se consiguen dos clases de celulosa pulverizada para cromatografa en capa delgada: fibrosa y microcristalina. Se conocen tambin seis tipos de celulosa modificada: la acetilada para cromatografa en fase invertida y las otras cinco para intercambio de iones usadas en la separacin de macromolculas como protenas, enzimas y cidos nucleicos. 4.2.1.5 Poliamida. 250

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El polvo para cromatografa se obtiene a partir de nailon 66, nailon 11, nailon 6, o perln o nailon 6 acetilado. Los nombres comerciales son: Poliamida 66, adipato de polihexametildiamino o nailon 66. Poliamida 11, cido poliamino undacanoico o anilon 11. Poliamida 6, amino policaprolactama o nailon 6. Poliamida acetilada o derivados acetilados de las tres primeras. En este sorbente, las separaciones son producidas por diferencias en los enlaces de hidrgeno entre la poliamida y los grupos hidroxilo o carboxilo de los compuestos que se van a separar. La desercin se obtiene alcalinizando o utilizando solventes que tambin formen puentes de hidrgeno fuertes. La poliamida permite separar fenoles, taninos, flavonoides, cidos carboxlicos y derivados de aminocidos. 4.2.1.6 xido de magnesio. El xido de magnesio es un adsorbente para separar compuestos aromticos y sustancias con varios dobles enlaces conjugados como el caso de los carotenoides. 4.2.1.7 Geles de filtracin. Estos sorbentes son geles de dextrano, poliacrilamida o de azarosa, conocidos comercialmente como Sephadex. Con estos geles, las separaciones se producen por diferencias en los tamaos de las molculas; las ms pequeas se difunden en los poros del gel mientras que las ms grandes van migrando con el eluyente. Los anteriores geles de filtracin se utilizaron primero en cromatografa en columna para la separacin de aminocidos, oligopptidos y protenas. 4.2.1.8 Otros sorbentes.

Aunque con menos frecuencia se emplean otros sorbentes tales como el polvo de polietileno, sus steres metlicos y la urea en la separacin de cidos grasos. El carbn activado, muy activo, se aplica en la industria azucarera para retener y eliminar sustancias coloreadas y cidos orgnicos. 4.2.2 Placas.

La placa en cromatografa de capa delgada es el conjunto de fase estacionaria o sorbente extendido homogneamente sobre un soporte inerte ya sea de vidrio, plstico o lmina metlica. Se pueden adquirir comercialmente siendo muy reproducibles o prepararlas en el laboratorio, segn las posibilidades. La preparacin es muy simple. El sorbente se suspende generalmente el agua, en proporciones requeridas para el anlisis. Los soportes, usualmente placas de vidrio deben estar previamente limpios, secos y desengrasados ya que el fraguado de la suspensin una vez extendidos sobre ellas demoran de dos a cuatro minutos para la gel de slice o la almina. 251

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Una vez preparada la suspensin, se agita manualmente o en licuadora. El Sephadex se agita manualmente luego de dejar un tiempo en agua para favorecer el hinchamiento de las partculas. La extensin sobre los soportes se puede hacer de varias formas: Si el soporte es un portaobjetos, tan necesarios para la realizacin de ensayos preliminares, la suspensin se prepara en un frasco cilndrico de unos 8,5 cm de altura y 4 cm de dimetro (frascos de mermelada o de compota son los ideales), se agita y se sumergen dos portaobjetos unidos por sus caras, se retiran del frasco, se deja evaporar el solvente y se separan cuidadosamente teniendo dos placas listas para el anlisis preliminar. Un buen solvente es realizar la suspensin en mezcla de etanol al 96 % y acetato de etilo (1:1) o de cloroformo metanol (3:1) volumen a volumen y dejando evaporar en sitios ventilados y teniendo los cuidados correspondientes sobre todo el manejo del metanol que puede ocasionar ceguera debido a exposiciones prolongadas. Otra forma es extendiendo la suspensin utilizando una varilla de vidrio gruesa. Para ello se colocan placas de vidrio de 30 x 30 cm sobre una superficie de madera; encima se fijan las que se van a utilizar como soporte (vidrios de 20 x 20, 10 x 20, 10 x 10 cm etc.) se coloca a la varilla un aditamento que permita controlar el espesor de la pelcula de sorbente, se vierte la suspensin y se distribuye uniformemente con la varilla. Se deja secar el solvente y se separa cuidadosamente cada placa. El equipo ideal es el aplicador Desaga o Camag el cual permite regular exactamente el espesor de la pelcula de sorbente: 250 m para cromatografa analtica y de 200 a 500 m para la cromatografa preparativa. 4.2.3 Eluyentes y reveladores.

Se siguen los fundamentos establecidos para la cromatografa en papel y observando el tipo de fenmeno que se busca predomine en la separacin conforme a las caractersticas de la muestra problema. 4.2.4 Las cmaras.

Las ms empleadas han sido las de vidrio, ahora se tienen de acero inoxidable y plstico, con diseos para desarrollos ascendente, horizontal y circular. En el desarrollo ascendente se tienen diferentes tamaos: desde recipientes cilndricos hasta paraleleppedos que albergan placas de 10 x 20 a 20 x 50 cm, ideales para la cromatografa preparativa. Las casas fabricantes de equipo para cromatografa ofrecen varios tipos de cmaras: uno de estos es el que efecta la tcnica sndwich en la cual la placa se protege, durante el desarrollo, con una lmina de vidrio o metal para evitar la preadsorcin de la fase estacionaria con el solvente obteniendo resultados ms reproducibles. Otro modelo, adems de aplicar la tcnica anterior, dispone de varios compartimientos, localizados debajo de donde se sitan las placas y en los cuales se colocan diversos solventes para acondicionar e impregnar las placas antes del ensayo o para ensayar hasta cinco sistemas de eluyentes simultneamente. 252

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Para utilizar geles de filtracin en esta tcnica se requiere de una cmara especial, constituida por dos partes: una plataforma fija horizontal y un marco graduable a diferentes ngulos respecto a la plataforma donde se colocan las placas. 4.3 Procedimientos.

Se siguen los mismos pasos ya discutidos en la cromatografa de papel, siendo necesario realizar previamente este y modificar los mtodos de aplicacin de muestra a la placa: 4.3.1 Activacin de las placas.

Para separar mezclas lipoflicas, requeriremos activar las placas, es decir, eliminar el agua empleada en su preparacin. Dicha activacin se realiza calentndolas en una estufa entre 100 y 110 C durante media a dos horas, dependiendo del carcter lipoflico del problema. 4.3.2 Concentracin y aplicacin de la muestra.

La mezcla debe tener una concentracin entre el 0,01 al 1 %, disuelta en el solvente menos polar posible y fcil de evaporar una vez se haya sembrado sobre la placa. La aplicacin de la muestra en la placa conduce a mejores resultados cuando se realiza en forma de banda o raya que cuando se hace en gota o puntual, debido a que las sustancias separadas se pueden desplazar ms rpido en sentido horizontal que en el vertical, evitando la formacin de colas o estelas que impidan la determinacin del nmero de compuestos. 4.3.3 Eleccin del sistema eluyente.

Se entiende como sistema cromatogrfico al conjunto de fase estacionaria o sorbente y a la fase mvil o eluyentes ya que entre ellos se establecen las interacciones con cada uno de los componentes de la mezcla que permiten su separacin y purificacin, generalmente relacionadas con la acidez basicidad, reacciones con las fases, establecimiento de uniones con los componentes de la mezcla y otros: Las mezclas de compuestos lipoflicos se separan mejor en placas de gel de slice o almina activadas, celulosa acetilada, poliamida y solventes no polares o mediante cromatografa en fase reversa. Las mezclas de carcter inico se separan en placas de celulosa con intercambiadores de iones. Mezclas con constituyentes de alto peso molecular se separan y purifican sobre geles de filtracin. El gel de slice es cido y algunas alminas son alcalinas; debe observarse el comportamiento cido base de la mezcla para evitar descomposiciones por reacciones indeseadas. Los fenoles, taninos, enoles, cido ascrbico, cidos carboxlicos, se separan idealmente con poliamidas y solventes alcalinos. Si una mezcla se puede separar con un solo solvente, ste debe ensayarse a partir de mezclas que contengan uno que la haga migrar mucho con otro que la mantenga en el origen de modo que el elegido entre ellas le permita disponer de un valor Rf adecuado para la separacin. 253

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Cuando se desconoce el carcter de la mezcla (lipoflica, hidroflica, inica) se realizan ensayos selectivos de sistemas cromatogrficos hasta encontrar el que permita la mejor separacin, siendo til comenzar con los menos polares de la serie mixotrpica de eluyentes. El resto de etapas ya descritas para la cromatografa en papel, tienen utilidad en esta tcnica, siendo vlido recordar la posibilidad de utilizar reveladores ms selectivos, sin que se altere la composicin de la fase estacionaria. 5. Cromatografa en columna. Esta tcnica tiene la ventaja de poder realizar trabajos de separacin y purificacin de sustancias con mayores cantidades de muestra, manteniendo casi el mismo consumo de solventes, eficiencia semejante a las dos tcnicas anteriores y siendo adecuada para separaciones de tipo preparativo. 5.1 Fundamentos.

Las separaciones por esta tcnica, similar a la de capa delgada, se deben a varios fenmenos que dependen de la clase de sorbente utilizado y el grado de actividad en que se encuentre: predomina la adsorcin cuando la fase estacionaria est activada y seca y de reparto si tiene algn grado de humedad (se ha establecido como lmite de los dos fenmenos de 17 a 32 % de contenido en agua en la fase estacionaria). Hay intercambio inico cuando a travs de la zeolita o de otra resina de intercambio inico adecuada se pasa la solucin problema inica. Cuando se emplea un gel de dextrano de poliacril o de azarosa y la mezcla tiene sustancias de alto peso molecular, tendremos una cromatografa de columna por filtracin en gel de afinidad. Para obtener buenos resultados en la separacin de los componentes de la mezcla problema utilizando cromatografa de columna, es necesario tener en cuenta: Capacidad. La relacin de la cantidad de muestra a la de adsorbente debe impedir su saturacin. Empaque. La columna se debe empacar con el sorbente seleccionado, del tamao de partcula adecuado y garantizar su distribucin homognea para que la elusin se haga uniformemente sin pasar por vas falsas o retrasarse por tener zonas muy compactas. Velocidad. Debe permitir el establecimiento del equilibrio de los componentes de las mezclas entre la fase mvil y la fase estacionaria, pero no tan baja que favorezca la difusin de las bandas. Resolucin. Se relaciona con eficiencia y selectividad; la eficiencia es la capacidad de la columna para separar los componentes de la mezcla en bandas angostas y ntidas, dependiendo del nmero de platos tericos logrados, mientras que la selectividad se relaciona con la separacin lograda entre dos bandas contiguas. Los parmetros anteriores determinan el mejor sistema cromatogrfico elegido para la separacin y purificacin de una solucin problema. 254

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5.2

Equipo utilizado.

Aqu se estudia la cromatografa de columna clsica, cuyos elementos de trabajo son la columna, el sorbente o fase estacionaria (en algunos casos se transforma en soporte de la fase estacionaria) y el o los eluyentes utilizados para efectuar la separacin y purificacin. Existe equipo adicional sofisticado como es el sistema colector de fracciones que se utiliza en cromatografa de columna preparativa. 5.2.1 Columnas.

Son tubos de vidrio, metal o plstico que se empacan con la fase estacionaria. Se tienen las columnas capilares que en s mismas son la fase estacionaria. Generalmente tienen accesorios como placas de vidrio sinterizado, llaves para el control del flujo de la fase mvil y embudos de decantacin para regular el ingreso del eluyente utilizado en el desarrollo cromatogrfico. Sus dimensiones dependen de la cantidad de sorbente a empacar, de la cantidad y caractersticas de la mezcla a separar y su diseo debe permitir acomodar un pequeo depsito de solvente en la parte superior y al embudo de decantacin que lo provee. Por ningn motivo la columna debe dejarse secar durante el desarrollo ya que se modifican las condiciones de equilibrio en la separacin evitando su reproducibilidad. Como la eficiencia de la columna depende del nmero de platos tericos, siendo proporcional a su longitud, se recomienda guardar proporciones entre altura dimetro de 10:1 a 100:1 sin olvidar la capacidad de resistencia que tenga el material (el vidrio aguanta hasta 10 libras por pulgada cuadrada). Cuando se utilizan eluyentes voltiles o sorbentes con partculas muy finas es conveniente aplicar presin en la parte superior de la columna, fundamento de la cromatografa lquida de alta presin (HPLC) que estudiaremos ms adelante.

5.2.2

Sorbentes.

Los sorbentes empleados en la cromatografa de adsorcin y de reparto se pueden utilizar en columna pero sin adhesivos y con un tamao un poco mayor (10 a 200 m). Sin embargo se deben observar las recomendaciones ya discutidas sobre la activacin del sorbente (eliminar el agua para adsorcin o lavar la columna con agua para reparto). Haremos una breve discusin sobre las resinas de intercambio inico y las de filtracin por gel ya que suelen ser las fases estacionarias ms empleadas en esta tcnica. 5.2.2.1 Resinas de intercambio inico. Ya habamos discutido anteriormente su estructura y el mecanismo de separacin, lo mismo que la forma de activarlas nuevamente luego se utilizarlas en la separacin de algunos iones.

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255

Las resinas para columna tienen un tamao mayor que las utilizadas para desarrollos en capa delgada y se utilizan siguiendo las instrucciones del fabricante. Las tablas 46 y 47 muestran las principales caractersticas que se deben tener en cuenta para su seleccin y uso, siendo necesario conocer a fondo la composicin de la solucin problema para sacar el mejor provecho de la misma, logrando la eficiencia deseada en la separacin y purificacin de los componentes de la misma.

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256

Tabla 46. Resinas de intercambio catinico comerciales. Nombre comercial Amberlite IR 120 Amberlite 200 Amberlite I RC 50 Amberlite CG 120 Dowex 50 x8 Dowex 50 Wx8 Duolite C 3 Duolite CS Polmero 101 aliftico Permuit Q Zerolit 225 Lewolite CNO Poliestireno Poliestireno Macro in Poliestireno Poliestireno Polmero metacrlico Poliestireno Poliestireno Poliestireno Grupo activo cido sulfnico cido sulfnico cido carboxlico cido sulfnico cido sulfnico cido sulfnico Metiln sulfnico cido carboxlico cido sulfnico cido sulfnico Forma H+, Na+ H+ H+ Na+ H+, Na+ H+ H+ H+ H+ 8 2,3 10 8 8 4,8 2,9 10,2 4,8 2,0 Porcentaje de enlaces transversales 8 Capacidad de intercambio (meq/g) Seca Hmeda 5,0 4,3 10 5,0 1,9 1,75 3,5 1,9 1,9 1,7 Lmites de uso Temperatura 120 C 120 C 120 C 120 C 150 C 150 C 60 C 100 C 120 C pH 1 a 14 1 a 14 4 a 14 1 a 14 1 a 14 1 a 14 1a9 6 a 14 1 a 14
Rhom y H As (USA) Rhom y H As (USA) Rhom y H As (USA) Rhom y H As (USA) Dow Chemical I (USA) Dow Chemical I (USA) Diamond Alcali Company (USA) Diamond Alcali Company (USA) p. Co. Zerolit United Water Softeners Ltd (London) Bayer Farbenfabriken (Alemania)

Fabricante

Fenlica cido dbil condensada

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Na
+

H+

4,0

4 C

1 a 10

257

Tabla 47. Resinas de intercambio aninico comerciales.

Porcentaje de enlaces transversales 8 4 Capacidad de intercambio (me/g) Seca Hmeda 3,8 4,3 5,0 8 8 3a5 9,0 1,2 10,0 2,0 1,3 3,0

Nombre comercial Amberlite IR A 400 Amberlite IR A 401 Amberlite IR 45 Dowex 1 x 8

Lmites de uso Temperat ura 77 C 77 C 100 C 150 C 60 C pH 0,1 a 12 1 a 12 0,1 a 9 1 a 14 1 a 14 Fabricante Rhom y H As (USA) Rhom y H As (USA) Rhom y H As (USA) Dow Chemical I (USA) Dow Chemical I (USA) Zerolit United Water Softeners Ltd (London) Zerolit United Water Softeners Ltd (London)

Macro in Poliestireno Poliestireno Poliamida Poliestireno

Grupo activo Amonio cuaternario Amonio cuaternario Base dbil Trimetil amonio bencil

Forma ClClOHClCl-

Dowex 2 x 8 Poliestireno Zerolit E Poli condensada

Dimetil bencil dimetil hidroxietilamonio Base dbil

ClZerolit FF Polimerizado Base dbil Cl-

3a5

9,0

3,0

60 C

0,1 a 7

38

1,5

60 C

0,1 a 14

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258

5.2.2.2 Sorbentes para filtracin por gel. Estas fases se escogen de acuerdo al intervalo de fraccionamiento seleccionado y al peso molecular de los componentes de la solucin problema. Para la cromatogrfica por filtracin en gel, la casa sueca Pharmacie Fine Chemicals, produce los diferentes tipos de fases estacionarias las cuales se escogen de acuerdo con el intervalo de fraccionamiento indicado y con los pesos moleculares de las especies que van a ser fraccionadas. Las tablas 48, 49 y 50 incluyen listas de sorbentes cuyas marcas registradas son Sephadex, Sephacryl y Sepharosa con sus principales propiedades. El Sephadex es un gel preparado de dextrano con enlaces transversales de epiclorhidrina. Debido al gran nmero de grupos hidroxilo, el gel es extremadamente hidroflico pero la acilacin o alquilacin de esos grupos produce Sephadex con caractersticas lipoflicas como el Sephadex LH 20. Tabla 48. Propiedades de diferentes tipos de Sephadex. Intervalo de fraccionamiento Dimetro de la (peso molecular) partcula seca Pptidos y (mm) protenas globulares 40 120 < 700 40 120 1500 100 300 50 150 20 80 10 40 100 300 50 150 20 80 10 40 40 120 10 40 40 120 10 40 40 120 10 40 40 120 10 40 1000 5000

Tipo y grado

Dextranos

Volumen del lecho (mL/g) Sephadex seco 2a3 2,5 a 3,5 4,6

G 10 G 15 G 25 Grueso Medio Fino Superfino G 50 Grueso Medio Fino Superfino G 75 Superfino G 100 Superfino G 150 Superfino G 200 Superfino

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100 5000 1500 30000 500 10000 30000 80000 30000 70000 4000 150000 4000 100000 5000 300000 5000 150000 5000 600000 5000 250000 1000 50000 1000 150000 1000 150000 1000 200000

> 700 1500

9 a 11

12 a 15 15 a 20 20 a 30 18 a 22 30 a 40 20 a 25

La Sepharosa se obtiene al purificar la azarosa. Para la cromatografa de afinidad se emplean geles, obtenidos por la reaccin de dextrano o de agarosa con cianuro de bromo. Estos sorbentes se pueden reutilizar si se conservan siguiendo las instrucciones de los fabricantes, sin embargo es posible derivar algunas recomendaciones generales.

259

Algunos sorbentes son fcilmente regenerados pudindose usarlos nuevamente, como los geles de filtracin y los intercambiadores de iones. Otros como el gel de slice y la almina requieren de varios pasos que se realizan si la cantidad por recuperar de la fase estacionaria es grande. Las fases estacionarias de Sephadex, Sephacryl y Sepharosa se pueden limpiar tratndolas con soluciones 0,2 M de hidrxido de sodio y con detergentes no inicos. La Sepharosa debe exponerse a valores de pH entre 4 y 9. Tabla 49. Algunos tipos de Sephacryl. Tipo y grado S 200 superfino S 300 superfino Dimetro de la partcula hmeda (m) 40 105 40 105 Intervalo de fraccionamiento Protenas 5*10 2,5*10 1*104 7,5*104
3 5

Polisacridos 1*103 8*104 1*105 7,5*105

La regeneracin de una resina de intercambio inico, tambin llamada activacin, se realiza generalmente en la columna, observando tres parmetros: la concentracin de la solucin regenerante, el volumen requerido y la rata de flujo. Comnmente se emplean soluciones 1 N, en cantidades que oscilan entre el 150 y el 500 % de la capacidad de la columna. Tabla 50. Propiedades de algunos tipos de Sepharosa. Tipo

Sepharosa 2 B Sepharosa 4 B Sepharosa 6 B

En la prctica, la relacin de meq de regenerante/meq de resina es alrededor de cuatro para resinas fuertes, ya sean catinicas o aninicas, y de dos para las dbiles. En seguida se ilustra un ejemplo del clculo del volumen requerido para activar una resina de intercambio inico que ha sido utilizada antes. Qu volumen de solucin de cido clorhdrico al 5 % (p/v) se necesita para regenerar 200 mL de resina amberlita IR 120 (hmeda) a su forma H+? Primero se calcula el nmero de miliequivalentes de cido clorhdrico requeridos: 200 (36,5)/1000 = 7,3 meq de cido. Como la capacidad de intercambio terica de la resina amberlita IR 120 hmeda es de 1,9 meq/mL, y la relacin de meq regenerante/meq resina para un intercambiador fuerte es cuatro, el peso de cido requerido para regenerar la resina es: 7,3 (1,9) 4 = 55,48 g de cido. Como la solucin se encuentra a una concentracin del 5 % (p/v), el volumen del cido ser: 55, 46 g (100 mL/5 g) = 1109,6 mL de cido clorhdrico.

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Concentracin aproximada de agarosa (%) 2 4 6 Dimetro de partcula hmeda (m) 60 200 60 140 45 165

Intervalo de fraccionamiento (peso molecular) Protenas Polisacridos 7*104 40*106 105 20*106 4 6 6*10 20*10 3*104 5*104 1*104 4*106 1*104 1*106

260

Para regenerar el gel de slice se siguen los siguientes pasos: Mezclarlo con cinco a diez veces su volumen de solucin de hidrxido de sodio al 1 % y calentarlo a ebullicin por 30 minutos. Si la mezcla queda alcalina a la fenolftalena, se lava con agua y se mezcla con tres a seis veces su volumen de solucin de cido actico al 5 %. Se filtra y se lava con agua destilada hasta reaccin neutra. Se activa calentando a 120 C por 24 horas. Para regenerar la almina empleada en columnas, conviene remover primero las capas con sustancias fuertemente adsorbidas y luego lavar con solventes polares, como metanol, soluciones diluidas de cido actico o hidrxido de sodio (de acuerdo con el empleo que se le va a dar) y luego con agua. La almina puede quedar coloreada, pero con la activacin decolora. Es conveniente recomendar que los frascos que contienen los sorbentes deben conservarse en lugares secos y bien tapados. 5.2.3 Eluyentes.

Se debe establecer el poder de elusin del solvente o la mezcla de los mismos teniendo en cuenta los criterios y la serie mixotrpica que se discuti en las cromatografas de papel y placa delgada. 5.3 Procedimiento.

Antes de realizar una cromatografa de columna, se recomienda efectuar ensayos en cromatografa en capa delgada para elegir un sistema eficiente y susceptible de poder reproducirlo en columna. 5.3.1 Tcnicas de empaque de la columna.

En primer lugar se escoge una columna de tamao apropiado. Si no dispone de una placa de vidrio sinterizado, se puede remplazar por un tapn de lana de vidrio o de algodn no muy apretada. La cantidad de sorbente se relaciona con la cantidad de muestra teniendo en cuenta el proceso de separacin segn la complejidad de la muestra. As, en procesos de adsorcin a escala preparativa la relacin va entre 1:20 y 1:100, para reparto va entre 1:50 y 1:500. Tratndose de mezclas difciles de separar, se requiere cromatografiar de nuevo, por lo que las relaciones anteriores se multiplican entre 10 y 50. Las separaciones por intercambio inico requieren relaciones mayores, como en el caso de anlisis de tiamina, la proporcin es 1:100000. En cuanto al empaque propiamente dicho, en los casos de las cromatografas de adsorcin o de reparto, las columnas se pueden empacar con el sorbente seco o mezclado (en forma de papilla) con el primer eluyente a utilizar en la separacin. Para empacar las columnas con almina, se obtienen mejores resultados cuando se coloca cierta cantidad del primer eluyente a utilizar, se agregan porciones de almina, se aplica vibracin mecnica (puede ser golpeando la columna con una manguera de caucho) cuidando de mantener por encima de la fase estacionaria un nivel del solvente. 261

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Para empacar las columnas con gel de slice, se prepara la papilla y se vierte poco a poco en la columna, dejando sedimentar y agregando eluyente en tal cantidad que su nivel se mantiene por encima de la fase estacionaria. De lo contrario, se formarn falsas vas por donde pasar la muestra sin efectuar el fenmeno de separacin cromatogrfica. Comercialmente se pueden comprar columnas ya empacadas, que tienen la ventaja de garantizar su distribucin homognea. Para el empaque de las columnas con intercambiadores de iones o geles de filtracin, es indispensable que estn hmedos previamente para que las partculas tomen el tamao adecuado para el anlisis. 5.3.2 Aplicacin de la muestra.

sta se aplica en la parte superior de la columna ya empacada, en solucin concentrada o mezclada con materiales inertes como Celita. No es conveniente aplicar suspensiones debido a la facilidad con que tapan la columna impidiendo una excelente separacin. Debe efectuarse cuidadosamente para evitar turbulencias que perturben la homogeneidad de la superficie de la fase estacionaria, por lo que se recomienda aplicar la muestra con una pipeta en contacto con la pared interna de la columna de modo que escurra por ella. 5.3.3 Elusin.

Consideremos en caso de una muestra constituida por compuestos de diferente polaridad como por ejemplo en un vegetal verde su extracto contiene caroteno, caroteno, xantofilas, clorofilas a y b y queremos separarlos. Encontramos que podemos separarlos por cromatografa de columna de adsorcin sobre fases estacionarias de gel de slice o de almina activadas, con solventes relativamente polares. Al iniciar el desarrollo, una vez obtengamos la solucin del extracto en la concentracin deseada, aplicamos cuidadosamente a la columna ya empacada, empezando con ter de petrleo, un solvente de baja polaridad, que nos permite separar los carotenos, mientras que los otros comienzan a distribuirse en la columna muy lentamente. Una vez recuperados, podemos aumentar la polaridad del eluyente para comenzar a separar las xantofilas y las clorofilas. Esta modificacin de la tcnica se llama cromatografa por gradiente de elusin. La cromatografa por gradiente de elusin consiste en que al tener un conjunto de compuestos con diferente polaridad, es posible separarlos nicamente con dos solventes, uno polar y otro no polar. Se inicia aplicando el no polar puro hasta lograr cierto grado de separacin y luego se va aadiendo solvente polar en pequeas cantidades, controlando la concentracin hasta que finalmente se termina con el solvente polar puro. Se pueden controlar las fracciones separadas y recogerlas una vez eluyen de la columna para su posterior verificacin de pureza o para volver a recromatografiarlas hasta obtener la sustancia pura. Este control se puede efectuar con detectores especiales ubicados a la salida de la columna y que controlan equipos automticos de recoleccin de fracciones. En la cromatografa por filtracin en gel, la elusin se realiza generalmente empleando soluciones buffer o modificando el pH.

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262

En general, la resolucin de las columnas decrece al aumentar la velocidad de flujo, pero tambin conviene tener en cuenta que un flujo muy lento o la suspensin del mismo puede retener en la columna algunos compuestos impidiendo su separacin adems de generar problemas de difusin de muestras que impiden separarse despus. Por ello, es recomendable mantener las siguientes velocidades de flujo: para cromatografa de adsorcin y de reparto mantener 8 mL/hora.cm2. En filtracin por gel debe ser de 2 mL/hora.cm2. En intercambio inico lo ideal es tener un rango entre 0,5 mL/min. a 2,0 mL/min. Sin embargo, la experiencia y el adecuado control del sistema cromatogrfico permitirn los mejores resultados en estas tcnicas. 5.3.4 Deteccin de las sustancias separadas.

En cromatografa de columna se pueden detectar as: Directamente en la columna, ya sea porque son coloreados o tienen alguna propiedad que hace fcil detectarlos en ella, por ejemplo pueden exhibir fluorescencia o usando reactivos marcadores. En las fracciones eluidas, mediante la utilizacin de agentes reveladores a travs de cromatografa de placa. Utilizando detectores que verifican la variacin de una propiedad fsica o qumica en el flujo de la fase mvil, relacionada con la presencia de la sustancia separada. Para la deteccin y agrupamiento de las fracciones eluidas, se utiliza generalmente la cromatografa en placa delgada. Se aplican muestras de dos fracciones segn su orden de salida de la columna sobre placas montadas en portaobjetos, se desarrollan y se revelan: las manchas que tienen los mismos valores de Rf se renen en una sola y las que mantienen dos o ms manchas se recogen y vuelven y se recromatografan buscando un sistema que mejore la separacin entre ellas ya sea en placa preparativa o en columna. 6. Cromatografa de gases.

Comenzamos a estudiar las tcnicas instrumentales que posee la cromatografa, la cuales aunque mantienen los principios de separacin ya analizados en las anteriores tcnicas, presentan un mejoramiento sustancial en el manejo mismo de las muestras, su proceso de separacin, el control de procedimientos de gradientes ya sea de solventes o de temperatura, que permiten acortar los tiempos requeridos en el desarrollo, posibilidades de combinacin del anlisis cualitativo y del cuantitativo sobre una misma muestra debido a la facilidad de reproducir las condiciones del anlisis. 6.1 Principios.

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La cromatografa de gases es un de los mejores mtodos de separacin de mezclas complejas. Esta tcnica analtica separa los componentes de esas mezclas en una serie de compuestos puros, que luego pueden ser identificados y cuantificados basados en su comportamiento. Su utilidad en la qumica de los alimentos es alta al permitir el anlisis de vitaminas, grasas, alcoholes, carbohidratos, aromas, etc. La separacin de los componentes de la mezcla se desarrolla debido a la diferente distribucin entre la fase mvil (gas) y la fase estacionaria mantenida en la columna. Si la fase estacionaria es un slido, la tcnica se llama cromatografa gas slido predominando como fenmeno de separacin la adsorcin selectiva de los 263

componentes en esta fase, pero si la fase estacionaria es un lquido adherido como una pelcula al soporte slido inerte, se llamar cromatografa gas lquido y el fenmeno de separacin predominante es la particin entre la fase lquida y la gaseosa que se desplaza. La cromatografa de mayor aplicacin es la de gas lquido la que estudiaremos en esta parte del material. 6.2 Equipo y condiciones previas.

El sistema cromatogrfico se encuentra como un equipo o instrumento con una serie de bloques que lo evidenciamos en la figura 18: Figura 18. Diagrama del equipo de cromatografa de gases.
GAS DE TRASPORTE

CONTROL DE FLUJO

PUESTO DE INYECCIN

COLUMNA

DETECTOR

ELECTRMETRO

REGISTRADOR

El cromatgrafo utiliza un gas de transporte (fase mvil) que bajo presin mueve una muestra en fase gaseosa desde el inyector, a travs de una columna (fase estacionaria) donde ocurre la separacin, hasta el detector cuya funcin es sentir la llegada de cada componente y producir una seal elctrica que se registra y grafica en un registrador en forma de picos. El registrador produce una grfica llamada cromatograma sobre la cual podremos efectuar el anlisis cualitativo porque cada sustancia, representada por un pico tiene una posicin que le es caracterstica, la separacin entre cada pico presenta un criterio de eficiencia del sistema y tambin cuantitativo porque el rea del pico es proporcional a la cantidad de sustancia presente en la muestra. La figura 19 presenta un cromatograma proveniente de la identificacin de cidos grasos en una fruta colombiana. 6.2.1 Gas de transporte o fase mvil.

Tiene la funcin primordial se conducir la muestra a travs del sistema cromatogrfico. Generalmente se encuentra almacenado a alta presin en cilindros con un mecanismo para regular la presin y, en esta forma, asegurar una presin uniforme a la entrada de la columna manteniendo un flujo de gas constante, condicin ptima para el anlisis. A una temperatura dada el gas facilita que los componentes de la mezcla, una vez separados, emerjan de la columna en un tiempo caracterstico, denominado el tiempo de retencin. Figura 19. Cromatograma.

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Los gases de transporte ms utilizados en esta tcnica son el helio, hidrgeno y nitrgeno. La consideracin ms importante para su seleccin es el tipo de detector utilizado, por ejemplo, un detector de conductividad trmica funciona mejor si se usa helio o hidrgeno o mezclas de los dos, pero pierde eficiencia cuando se emplea como gas de arrastre al nitrgeno. Tambin debe ser inerte, seco y libre de impurezas. La inercia qumica del gas se debe a que no se puede permitir reacciones secundarias dentro de la columna, el material del equipo y la muestra. Generalmente los gases utilizados cumplen esa condicin pero a veces no son secos por lo que es necesario pasarlos a travs de un filtro molecular a la salida del cilindro, evitando que en el cromatograma aparezcan picos fantasmas que molesten el anlisis, reduciendo el tiempo de uso de la columna y modifique la lnea base. La eficiencia de la columna depende de la seleccin apropiada de la velocidad lineal del gas de transporte. El valor ptimo se escoge experimentalmente haciendo una grfica de Van Deemter: AEPT en funcin de la velocidad lineal del gas. La velocidad ms eficiente corresponde a la Altura Equivalente del Plato Terico mnima encontrada durante la evaluacin de la columna. 6.2.2 Introduccin de la muestra.

El segundo bloque del diagrama del cromatgrafo de gases es el inyector o puesto de inyeccin. En este sitio se permite que la muestra ingrese al sistema cromatogrfico, se mezcle con el gas de transporte y pase a la columna. Adems, en el puesto de inyeccin se transforman las muestras no gaseosas en vapores para que puedan ser separadas, entonces la temperatura debe ser variable y controlada. Por lo general, el puesto de inyeccin es un bloque metlico con calentadores y sensores de temperatura con una septa o sello externo y una conexin a la columna. El puesto de inyeccin debe reunir como caractersticas:

Mantenerse a una temperatura lo suficientemente elevada para permitir la vaporizacin rpida de los componentes de la muestra. Poseer una alta velocidad lineal para el gas de transporte que permita trasladar la muestra gaseosa a la columna. Debe ser de un material adecuado para evitar la interaccin con los componentes de la muestra. Las muestras que se analizan por cromatografa de gases pueden estar en estado gaseoso, lquido o slido puesto que para cada una de ellas existen los dispositivos adecuados para su introduccin al sistema cromatogrfico. En una estimacin aproximada, el 80 % de las muestras analizadas por esta tcnica son lquidas, generalmente soluciones de lquidos o slidos en el solvente ideal. La tcnica ms comn de introduccin al sistema es empleando una micro jeringa, la cual atraviesa el sello o septa del bloque de inyeccin, la vaporiza pasndola a la columna.

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Las muestras gaseosas se introducen tambin con micro jeringas cuando son volmenes pequeos (0,1 mL). Para obtener mejores resultados (mayor reproducibilidad) existen en el mercado varios tipos de vlvulas muestreadotas de gases que se conectan al puerto de inyeccin. La obtencin de buenos resultados de anlisis depende mucho de la habilidad del analista si no se cuenta con un inyector automtico, ya sea para muestras lquidas, slidas o gaseosas. La razn es simple, puesto que la muestra debe ser introducida limpiamente en la corriente del gas a presiones y temperaturas superiores a las condiciones ambientales y debe llegar a la columna como una banda nica, angosta y uniforme. Bandas de inyeccin estrechas producen picos agudos, los cuales son los deseados para lograr la separacin completa de compuestos con tiempos de elusin cercanos. Como una condicin para el uso de esta tcnica es el de las muestras gaseosas o fciles de transformar a dicho estados, si la muestra no cumple con esa condicin, es posible efectuar modificaciones como: Recurrir al estudio de productos voltiles formados por accin de alta temperatura en el inyector (pirlisis). Formacin de derivados voltiles trmicamente estables y posterior anlisis. Su tamao depende del tipo de columna empleada como se observa en la tabla 51. Tamaos inferiores a 1 mL, requiere de modificaciones en el inyector si no es posible el uso de micro jeringas. 6.2.3 Columnas.

La separacin en cromatografa de gases se realiza en la columna, por lo tanto es la parte ms importante del sistema; aqu estudiaremos materiales de construccin, soportes, fases lquidas y criterios de seleccin, lo mismo que la forma de evaluacin de la misma. Tabla 51. Relacin cantidad de muestra y columna para cromatografa de gases.
Tipo de columna Preparativa (1 de 20 % lquido) Analtica ( de 10 % de lquido) Alta eficiencia (1/8 de 2 % lquido) Capilares (1/16 de 50 % pelcula) Gas Tamao de la muestra Lquida 0,02 2,0 mL

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0,05 5,0 L 0,05 50,0 mL 0,1 1,0 mL 0,1 10,0 L

0,02 20,0 L 0,04 4,0 L

0,004 0,5 L

6.2.3.1 Tubera. Sirve para contener los materiales que efectan la separacin, por tanto debe ser completamente inerte y no interferir en la separacin. La tabla 52 compara los materiales ms usados. Tabla 52. Caractersticas de los materiales empleados para columnas.

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Propiedad Inercia

Acero Buena

Vidrio Excelente Mala Excelente Excelente

Aluminio Cobre Plstico Buena, mala Buena, mala Excelente, bajo ciertas bajo ciertas mala bajo condiciones condiciones ciertas condiciones. Buena Excelente Excelente Excelente Excelente Excelente Excelente Regular Regular

Resistencia y Excelente flexibilidad Rango de Excelente temperatura Impermeabilidad Excelente

6.2.3.2 Tamao: dimetro y longitud de la columna. Para determinar el dimetro adecuado, se debe establecer cul es el tipo de separacin requerida: analtica o preparativa. Las columnas analticas pueden ser: Capilares. Tienen 0,25 a 0,50 mm de dimetro interno, se usan para separar mezclas complejas como derivados del petrleo, aceites esenciales y otros. Son las que tienen mejor poder de resolucin pero son costosas. De 1/18 de pulgada. Las ms comunes. Columnas de de pulgada. Se utiliza preferencialmente en el anlisis de gases al requerirse mayores volmenes en la muestra de anlisis. Las columnas preparativas son: Mayores de de pulgada. Requieren el diseo de un horno especial que las pueda albergar. De 3/8 a de pulgada. Manteniendo condiciones de preparacin y uso adecuado, se alcanzan resoluciones semejantes a las obtenidas con columnas de 1/8 a de pulgada. Sin embargo, cada vez que se dobla el dimetro de la columna, la capacidad de muestra aumenta cuatro veces. 6.2.3.3 Longitud.

Se debe escoger la menor longitud que produzca la separacin deseada. En la evaluacin de la columna se ver que la resolucin es proporcional a la raz cuadrada de la longitud de la columna. 6.2.3.4 Soporte slido para la fase lquida.

El soporte debe ser inerte y no intervenir en el desarrollo cromatogrfico ya que su principal funcin es proporcionar un soporte slido dentro de la columna para suministrar un rea superficial alta sobre la cual se extiende la fase lquida. Sus principales caractersticas son: Alta rea superficial por unidad de volumen. Resistir los procedimientos de empaque y recubrimiento. Tamao de partcula uniforme y preferencialmente esfrica. No mayor a 120 mallas. Inerte, no favorece interacciones qumicas ni fenmenos de adsorcin. El material ms utilizado es proveniente de tierra de diatomceas o kieselghur cuyo nombre comercial es el Chromosorb, fundamentalmente son dos:

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Chromosorb P. Mezcla calcinada de arcilla con tierra de diatomceas, tiene color rosado y tolera la mayor cantidad de fase lquida (30%) especfico para cromatografa preparativa. Chromosorb W. Mezcla calcinada de un fundente (carbonato de sodio) con tierra de diatomceas, su color es blanco, frgil y con caractersticas alcalinas ideal para analizar compuestos cidos. Si se desea analizar muestras de compuestos polares, ninguno de los anteriores soportes es inerte pero se pueden desactivar para eliminar sitios activos ya sea lavando con cidos o bases, silanizando o recubrimiento previo antes de aplicar la fase estacionaria. Por ello es recomendable consultar la literatura para determinar las condiciones del anlisis de una muestra problema y efectuar los ensayos respectivos para obtener la mejor separacin. La determinacin del factor de coleo es una medida de la inercia del soporte. Se basa en la comparacin del ancho de la base de la segunda mitad del pico con el de la primera mitad, medidos a un 10 % de la altura del pico: a mayor inercia, mayor simetra del pico y mayor valor del factor de coleo. 6.2.3.5 Fase lquida. Su seleccin requiere experiencia previa puesto que es ms emprica que basada en criterios derivados de la teora. Solamente ha sido posible definir cules son los requisitos a cumplir: Debe ser un buen solvente absoluto y diferencial para los componentes de la mezcla. No voltil, con una presin de vapor entre 0,01 y 0,1 mm de mercurio a la temperatura de trabajo. Trmicamente estable. Qumicamente inerte hacia los solutos de inters, a la temperatura de la columna. Depende de la composicin de la mezcla. Para una separacin eficiente, la fase lquida debe poseer una estructura qumica similar a la de los componentes de la muestra. Por ejemplo, una muestra de hidrocarburos se separa mejor en una fase lquida como el Escualario (hidrocarburo de cadena larga), los compuestos polares como los alcoholes lo hacen con una fase como el Hallcomid (una amida). Una vez seleccionada la fase lquida, se debe cuantificar para recubrir al soporte con una pelcula uniforme; demasiada fase forma piscinas entre partculas que disminuyen la eficiencia de la columna. El tiempo de retencin es proporcional a los gramos de fase lquida presente, entonces bajos recubrimientos conducen a anlisis ms rpidos, por ello no se debe pasar del 2 al 10 % de fase lquida respecto al soporte. 6.2.3.6 Preparacin de la columna. Para obtener una columna lista para el anlisis de una muestra, se requieren cinco pasos: Adecuacin de la tubera: limpieza y enrollado (cuando se trabaja con columna de vidrio). Preparacin de la fase estacionaria: recubrimiento del soporte slido con la fase lquida. 268

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Empacado de la columna: garantizar uniformidad y homogeneidad. Enrollado: cuando se trabaja con columnas metlicas. Acondicionamiento: renovacin de impurezas voltiles que puede tener el soporte o la fase lquida estacionaria. 6.2.3.7 Evaluacin de la columna. La separacin de los constituyentes de una mezcla en la columna, es el resultado de la diferencia en los coeficientes de particin de los distintos componentes entre la fase estacionaria y la fase mvil. La resolucin de la columna (R), significa la capacidad que tiene para poder separar un compuesto de otro. Se determina directamente del cromatograma trabajando dos picos adyacentes (llamados 1 y 2), midiendo la distancia entre ellos y luego los anchos de sus bases, aplicando la siguiente frmula: R = 2 d/(W1 + W2) Una resolucin de 1 es completa, y una de 1,5 equivale al 99,7 %. La eficiencia de la columna se determina segn el nmero de platos tericos la cual se determina tambin del cromatograma midiendo la distancia del pico de aire hasta el pico de la sustancia (t), se mide el ancho de la base de ste pico (W) y se utiliza la siguiente frmula: N = 16(t/W)2 Muchos factores afectan la eficiencia de la columna, la mayora de los cuales han sido evaluados por su efecto en N o, mejor en la Altura Equivalente de Plato Terico: AETP = L/N

L es la longitud real de la columna, en cm. Permite comparar columnas de diferente longitud siendo la medida preferida de eficiencia de la columna. La variacin de AETP en funcin del flujo () en mL/min, muestra un mnimo en el cual se logra la mayor eficiencia. Tiene la siguiente expresin matemtica, denominada la Ecuacin de Van Deemter: AETP = A + (B/) + C

El trmino A describe las variaciones de velocidad del gas en el empaque poroso (caminos mltiples). Al tener diferentes longitudes, las molculas del soluto tienen diferentes tiempos de permanencia dentro de la columna, llevando al ensanchamiento de los picos. El trmino B, corresponde a la difusin en la fase gaseosa; disminuye cuando aumenta la velocidad del gas de arrastre o tambin si se incrementa su densidad (empleo de nitrgeno). El trmino C determina la resistencia a la transferencia de masa gas lquido gas. Depende de la cantidad de fase lquida en el soporte slido o fase inerte. Para disminuirlo se requiere una pelcula muy delgada y uniforme de la fase lquida y ojal de baja viscosidad.

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El flujo del gas de arrastre debe ser muy bajo y los coeficientes de distribucin de las sustancias a separar entre la fase estacionaria y la fase mvil muy altos para favorecer el equilibrio que gobierna el fundamente de la separacin analtica en esta tcnica instrumental, como lo podemos encontrar en la tabla 53. 6.2.4 Temperatura de la columna.

Se puede trabajar de dos formas, a temperatura constante o isotrmica y con temperatura programada o por gradiente de temperatura. Tabla 53. Relacin entre N y la eficiencia en Cromatografa de Gases.
N Ms de 500 platos/pie 300 500 200 300 Menor de 100 Eficiencia Excelente Buena Regular Por revisar

Operacin isotrmica. La temperatura de trabajo se escoge teniendo en cuenta el promedio de los puntos de ebullicin de los componentes de la muestra. Sin embargo, cuando se trabaja con columnas de alto porcentaje de fase lquida o la fase presenta alta afinidad por los componentes (tiempos de retencin elevados) es necesario trabajar temperaturas ms altas. En la mayora de los casos, la temperatura de la columna se escoge de tal forma que se obtenga buena resolucin en un tiempo de anlisis corto. Como criterio de trabajo, cara aumento de 30 C disminuye a la mitad el tiempo de retencin. Programacin de temperatura. Es un procedimiento que permite efectuar un cambio controlado de la temperatura de la columna durante el anlisis. Se utiliza cuando los componentes de la muestra tienen componentes que varan en un amplio rango de puntos de ebullicin o tienen tiempos de retencin muy grandes. Esta tcnica reduce el tiempo de anlisis y permite obtener picos simtricos para todos los componentes. 6.2.5 El detector.

Permite registrar el cambio ocurrido en la homogeneidad de la fase gaseosa cuando se ha separado un determinado componentes al transformarlo en una seal elctrica que luego es graficada en el registrador o transformada en cantidades mediante integradores electrnicos. Este elemento del cromatgrafo de gases debe tener como caractersticas: Sensibilidad al cambio de composicin de la fase gaseosa. Bajo nivel de ruido, es decir, que logre detectar pequeas cantidades de componentes equivalentes al doble de la mxima variacin del ruido electrnico generado por los circuitos electrnicos propios del elemento. Rango lineal. Su respuesta debe ser la misma ya sea para grandes cantidades de componente como para las mnimas detectables; es decir, mantenga la proporcionalidad en su respuesta. Respuesta. Capaz de detectar los diferentes componentes de la mezcla. 6.2.5.1 Detector de conductividad trmica (DCT). Es un filamento calentado elctricamente (termistor) pero cuya resistencia vara al encontrar sustancias diferentes en la fase gaseosa a la salida de la columna.

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Comprende dos elementos, uno de referencia que monitorea la conductividad trmica del slo gas de transporte y el otro que controla el gas que sale de la columna, trabajando a la misma temperatura, al ocurrir variaciones en la composicin de los gases, se modifica la resistividad de uno de ellos que vuelve a ser compensada aumentando el paso de corriente el cual es medido y registrado por el detector como una seal de voltaje. 6.2.5.2 Detector de ionizacin por llama (DILL). Esta unidad mide la corriente generada cuando un material combustible en el gas de transporte entra en una llama de hidrgeno aire. Un potencial de corriente continua se aplica a la llama mediante electrodos capaces de detectar las especies ionizadas en la llama generando una corriente proporcional a la cantidad de sustancia. La sensibilidad de este detector es tan alta que permite detectar de 0,1 a 10 ng. Tiene algunas limitaciones en su uso en sustancias orgnicas donde su sensibilidad disminuye en la escala: CH2 > CH2 OH > C=O y definitivamente no se puede emplear en el anlisis de CS2, NH3, SO2, N2, O2, H2, H2O, CO, CO2 y xidos de nitrgeno, debido a la facilidad de reaccin que tienen estas sustancias a la temperatura de trabajo del detector. 6.2.5.3 Detector de captura de electrones (DCE). Es un elemento muy selectivo ya que su seal es generada solamente cuando un componente es capaz de capturar electrones de un flujo permanente de ellos dentro de una celda. El flujo se obtiene de una fuente radiactiva (tritio o Ni63) en una hoja metlica unida a uno de los dos electrodos creando una corriente permanente de 10- 9 amperios. Cuando un compuesto que captura electrones entra en el campo, la cantidad que puede ser colectada en menor modificando la corriente, la cual es amplificada y registrada como un pico. Es muy sensible a haluros de alquilo, carbonilos conjugados, nitritos, nitratos. No lo es a hidrocarburos, alcoholes, cetonas y otros. 6.2.6 Registrador.

El ltimo elemento del cromatgrafo de gases; aqu las seales del detector son registradas como un pico o tambin como un dato numrico, que permite ser utilizado en el anlisis cuantitativo y cuantitativo de las sustancias puras separadas. 6.3 Metodologa.

En cromatografa de gases existe una caracterstica para definir el compuesto, el tiempo de retencin. An as, las condiciones deber ser estandarizadas para que este valor tenga significado. Si se considera el intervalo de tiempo transcurrido desde el momento en que se inyecta la muestra y su aparicin como un pico, parte del intervalo se debe al tiempo que se gasta en el recorrido del sistema cromatogrfico, ste vara entre instrumentos y no se incluye en la medida, es lo que se denomina tiempo muerto (tm) y corresponde al tiempo de retencin del soluto no retenido (aire o solvente de la muestra, tambin denominado ta). No es posible determinar un tiempo de retencin absoluto ya que depende de variables del equipo como la temperatura de la columna, clase de fase lquida y porcentaje de recubrimiento, velocidad del gas de transporte y cantidad de fase estacionaria, por lo que prefiere determinarse un tiempo de retencin relativo al compararlo con el tiempo de un estndar ya sea que se encuentre dentro de la misma 271

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muestra o haya sido aadido a propsito, lo importante es que registre un buen cromatograma en cercanas de los compuestos de inters. Para comparar resultados por esta tcnica entre laboratorios, se deben reportar las sustancias de referencia que deben ser las mismas. Kovats, desarroll un concepto de ndice de retencin que evita ese problema al seleccionar como material de referencia a parafinas normales. Por definicin, el ndice de retencin para una parafina es 100 veces el nmero de tomos de carbono; para el hexano ser de 600. El ndice de retencin para una sustancia desconocida se calcula mediante la expresin: I = log X + 100 Z log (PZ Siendo: log X el valor del logaritmo de la retencin del compuesto X, relacionado con el estndar de parafina de Z nmero pares de carbonos. log (PZ + 2) el valor del logaritmo de la retencin relativa de la parafina normal de Z nmero par de tomos de carbono. El valor del ndice de retencin es caracterstico de una sustancia en una determinada fase lquida a una cierta temperatura; los mejores resultados se reproducibilidad estn limitados a trabajos en columnas con temperatura isotrmica o con programacin lineal de temperatura a velocidades de 1 a 2 C por minuto. 6.3.1 Anlisis cualitativo.
+ 2)

Los caminos para identificar un compuesto por cromatografa de gases pueden ser: Utilizacin del tiempo de retencin absoluto. Se determina el tiempo de retencin del compuesto desconocido y se compara con el tiempo de retencin de sustancias patrn. Tiene los inconvenientes ya discutidos. Utilizacin de tiempos de retencin relativos de ndices de retencin. Una vez determinados estos parmetros, se comparan con los valores reportados en la literatura (si existen en las mismas condiciones) o con los determinados previamente para sustancias conocidas, los cuales se sospecha sean componentes de la mezcla desconocida. Sin embargo la coincidencia no es suficiente para establecer la identidad del compuesto; por ello se busca coincidencias en valores cuando se cambia polaridades de la fase estacionaria, primero corriendo en una no polar y luego desarrollando en una polar. Adicin del compuesto que se sospecha est presente. til cuando el pico se encuentra resuelto de otro cercano. Se corre el cromatograma con la muestra, luego se adiciona el probable componente y nuevamente se desarrolla, si aparece uno nuevo, se descarta pero si se mantienen y uno de ellos ha aumentado su tamao, se incrementa la probabilidad de que sea la misma sustancia. Para confirmar se recurre a cromatografiar con columnas de diferente polaridad. Acople a otras tcnicas ya sean clsicas de identificacin como el aislamiento del componente, utilizar otras tcnicas instrumentales como infrarrojo, ultravioleta, resonancia magntica nuclear o espectroscopia de masas o formar derivados a los que se les determina sus propiedades fisicoqumicas.

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6.3.2

Anlisis cuantitativo.

Los resultados de un anlisis por cromatografa de gases se obtienen a partir del registro grfico o cromatograma en el cual el nmero de picos trazados da informacin acerca del nmero de constituyentes de la muestra y el rea bajo cada pico o su altura sirve para la evaluacin cuantitativa de cada componente, haciendo las correcciones necesarias debido a la selectividad del detector. Antes de seleccionar el mtodo de anlisis cuantitativo ms adecuado se debe escoger la tcnica de medida de los picos: altura o reas. Aunque ms adelante discutimos cuatro tcnicas que tienen la ventaja de reducir errores y hacer ms reproducibles los resultados. 6.3.2.1 Altura del pico. La medida de la altura del pico es la ms fcil de las dos tcnicas. La altura del psico es la distancia desde la lnea base hasta su vrtice, generalmente expresada en milmetros; es la ideal cuando se tienen picos simtricos y agudos. 6.3.2.2 rea del pico. El rea del pico no depende de las condiciones de operacin como ocurre con la anterior. Existen varias formas de medirla: planimetra, altura por el ancho a media altura, triangulacin, cortado y pesado del papel, integrador de disco, integrador electrnico entre otros. Debido a que muchas veces los equipos disponibles producen registro grfico, se suelen utilizar las tcnicas manuales: Altura por el ancho a media altura. Un pico puede asimilarse a un tringulo y su rea se determina multiplicando la altura del pico por el ancho a media altura. Adecuada para picos simtricos que tengan una anchura razonable. Triangulacin. Se trazan las tangentes a los lados de cada pico prolongndose por arriba de l y cortando la lnea base formando el tringulo correspondiente, se mide la altura y la base y se calcula mediante la ecuacin del rea del tringulo A = ( base) altura. Los picos deben ser semejantes a la campana de Gauss. Cortado y pesada del papel. Las reas de los picos son determinadas por el cortado del pico cromatogrfico y pesada en la balanza analtica. Este mtodo es lento, destruye el cromatograma y requiere destreza para cortar adems de la homogeneidad del papel. til cuando los picos no son simtricos. 6.3.2.3 Normalizacin.

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% A = (rea de A/ reas) 100

Comprende el clculo de la composicin porcentual de las reas:

Este mtodo puede usarse para calcular porcentaje en peso cuando se analizan componentes de una serie homloga con puntos de ebullicin cercanos. Se asume que todos los picos se han detectados y que cada componente tiene la misma respuesta en el detector. 6.3.2.4 Factores de correccin.

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Las reas de los compuestos no son directamente proporcionales a la composicin porcentual debido a que cada sustancia tiene una respuesta diferente en el detector, entonces es necesario determinar factores de correccin. Una vez determinados se utilizan en la evaluacin de la composicin porcentual; son tpicos de cada detector. Se prepara una solucin con patrones de las sustancias desconocidas, se corre el cromatograma, determina el rea y se calcula la relacin rea/unidad de peso para cada componente. Se selecciona uno de ellos como referencia y su factor de correccin se toma como la unidad, luego se calcula los porcentajes relativos de cada uno de los dems componentes. La tabla 54 ilustra esta tcnica: Tabla 54. Forma de calcular los factores de correccin en Cromatografa de Gases. Pico 1 2 3 4 rea 2172 2516 1237 3488 Porcentaje en peso 20,5 26,6 17,0 35,9 rea/peso 106,0 94,6 72,8 97,2 Factor de correccin 1,12 1,00 0,77 1,03

De estos resultados se puede determinar el porcentaje en peso del componente tres en una muestra desconocida si: W2 A3 F3 A2

W3 =

Siendo: W3 W2 A2 A3 F3

Peso desconocido del componente tres. Peso del estndar dos. rea medida del estndar dos. rea medida del componente tres. Factor de correccin del compuesto tres.

6.3.2.5 Calibracin absoluta.

Se preparan soluciones de cantidades conocidas de los compuestos y se analizan por cromatografa de gases. El valor del rea (o de la altura) correspondiente a los picos, se grafica contra el peso de muestra inyectada. Un peso exacto de la muestra desconocida se inyecta y su rea se compara con la de los patrones. Los resultados se relacionan mediante una grfica (rea del pico en funcin del porcentaje de componente, que debe ser una recta ajustada) o a travs de la siguiente expresin matemtica: Porcentaje de patrn B % B = (rea de B) K y K = rea del patrn B La calibracin absoluta presenta algunas desventajas como son: se debe conocer la cantidad exacta de muestra inyectada, la sensibilidad del detector y todos los

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parmetros de operacin deben permanecer constantes para poder comparar los resultados con los de la grfica de calibracin. 6.3.2.6 Calibracin relativa o estandarizacin interna. Muestras de composicin conocida del componente problema que se va a determinar y de un estndar interno se preparan y analizan por cromatografa de gases. Se miden sus reas y se construye una grfica de relacin de reas (rea del componente/rea del estndar) contra la relacin de pesos, la cual tambin debe ser una recta ajustada. sta corresponde a la curva de calibracin. Se aade a la muestra problema una cantidad conocida del estndar interno y se analiza por cromatografa de gases, luego se mide la relacin de reas que se compara con la grfica de calibracin para establecer la relacin de pesos; como conocemos la cantidad de estndar, se puede determinar la cantidad del componente presente en el problema. Este mtodo no requiere conocer la respuesta del detector, la cantidad exacta de muestra inyectada, ni que se mantenga constante ya que cualquier cambio no afecta la relacin de reas. Sin embargo, presenta como desventaja la seleccin del patrn interno, el cual debe cumplir con los siguientes requerimientos: Debe resolverse muy bien de los otros picos. Debe eluir cerca de los compuestos de inters. Debe ser de concentracin similar a la del compuesto de inters. Debe tener una estructura qumica semejante a la del componente en estudio. 7. Cromatografa lquida de alta eficiencia o HPLC81.

Otra de las tcnicas instrumentales de la cromatografa que comienza a tener aplicaciones en el estudio de los alimentos. Como en el caso anterior, vamos a efectuar un estudio terico sobre los fundamentos y procedimientos para que tenga una idea de cmo se puede emplear y si eventualmente va a trabajar en procesos de investigacin, disponga de unos referentes que le ayudarn en su desempeo con este tipo de tcnicas. Sin embargo, sera necesario que tomara un curso de profundizacin en el tema incluyendo la posibilidad de utilizar el equipo. 7.1 Fundamentos.

Es una tcnica analtica instrumental muy verstil, cuyo proceso de separacin se debe a fenmenos de transferencia de masa entre los solutos contenidos en una fase lquida mvil y una estacionaria empacada dentro de una columna cromatogrfica. Los analitos por separar se encuentran disueltos, se inyectan a una fase lquida que luego es forzada a pasar mediante alta presin a travs de la columna cromatogrfica; la resolucin alcanzada en la separacin depende de la intensidad de la interaccin de los solutos con la fase estacionaria. Seleccionado la combinacin adecuada de fase mvil y fase estacionaria es posible lograr la separacin, identificacin y cuantificacin de una gran variedad de mezclas de compuestos.

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81

En espaol se est implementando la expresin CLAR: Rendimiento.

Cromatografa Lquida de Alto

275

Como en la cromatografa de gases, es posible efectuar el proceso de separacin teniendo en cuenta fenmenos como la adsorcin, el intercambio inico y el tamao de la molculas de los analitos presentes en el problema; la eleccin de estos fenmenos depende de la combinacin de fase estacionaria y fase mvil, que como en el caso de la cromatografa de intercambio inico, factores como la fuerza inica y el pH del sistema permitirn la separacin deseada de la muestra. El desarrollo de la cromatografa puede ser isocrtico o por gradiente, en la primera tcnica se mantiene constante la composicin de la fase mvil, mientras que en la segunda sta va cambiando, facilitando la separacin al minimizar los tiempos requeridos. La HPLC tiene como ventajas sobre otras tcnicas analticas las siguientes: Las columnas son en acero inoxidable, reutilizables y con dimetros entre 2 y 5 mm. Hay una amplia variedad de sustancias para utilizar como fases estacionarias y con dimetros de partculas de 3, 5 y 10 mm. Mecanismos eficientes para el trabajo a alta presin y fcil control de flujo. Sistemas muy precisos de inyeccin de muestra que permiten el trabajo con tamaos relativamente pequeos. Detectores de flujo que pueden trabajar a bajas condiciones de velocidad de flujo y mantener sensibilidades altas. Instrumentos estndares automatizados. Anlisis muy rpidos. Alta resolucin. La resolucin de esta tcnica no depende exclusivamente de la presin de trabajo como se podra pensar debido al nombre que posee, sta depende del rango de distribucin del tamao de la partcula, tamao uniforme del poro, tcnicas de empacado de la columna, capacidad del inyector, mantenimiento de la sensibilidad de deteccin ante variaciones de la velocidad de flujo de la fase estacionaria y la calidad del sistema de bombeo.

7.2

Instrumental o equipo de HPLC.

Comprende la bomba, inyector, columna, detector y sistema de registro. La figura 20 presenta un diagrama de relacin de cada una de las partes del instrumental requerido en esta tcnica. Figura 20. Esquema del equipo de HPLC.

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INYECTOR COLUMNA RECIPIENTE Y BOMBA DESGACIFICADORA BOMBA IMPULSORA DE LA FASE MVIL

REGISTRADOR GRFICO

DETECTOR

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El recipiente de almacenamiento de la fase mvil es un frasco de vidrio con un sistema de purga de gases utilizando helio o al vaco y un sistema de filtracin que garantiza la pureza del solvente. Su almacenamiento se hace bajo atmsfera de helio, evitando interferencias de los gases en la eficiencia de la columna y del detector. La bomba es un elemento importante en el sistema HPLC pues garantiza la eficiencia de la separacin y el correcto funcionamiento de la columna, el detector y la obtencin de cromatogramas reproducibles. Se requiere que mantenga una buena capacidad de flujo, evitar pulsaciones y ser controlable fcilmente por medios electrnicos, los parmetros que debe cumplir son: un rango de velocidad de flujo de 0,01 a 10 mL/min, un flujo con variaciones mximo del 1 %, pulsaciones por cambios de presin del 0,2 %, una presin de mximo 5000 psi y con sistema de desgasificado y manejo de atmsferas de helio. Son de dos tipos de presin constante que producen los mejores registros slo que es afectada por la temperatura y la viscosidad de la fase mvil y el otro es la de flujo constante. La columna es metlica, con tamaos de 10, 15 y 25 cm de longitud y dimetros internos de 4,0 a 4,6 mm capaces de albergar tamaos de partculas de 3, 5 o 10 mm. Al ser el elemento esencial de la cromatografa HPLC, el empaque y homogenizacin de las mismas requiere de un equipo especial por lo que se suelen comprar ya empacadas. Su duracin depende de las condiciones del anlisis, siendo factible su reutilizacin. Los detectores por lo general son pticos, detectando las variaciones de propiedades como el ndice de refraccin, absorcin o emisin de energa radiante monocromtica, cambios electroqumicos o variacin de la masa: el rayo de luz incidente pasa por un volumen del eluido de la columna siendo registrado como una seal electrnica por el detector que puede ser de ndice de refraccin (el ms comn), fluorescencia, electroqumico o de espectroscopia de masas el ms sofisticado. Las seales electrnicas producidas en el detector se pueden transformar en datos digitales fcilmente almacenables en bases de datos o utilizados en integradores electrnicos que reportan las reas bajo la curva del pico cromatogrfico reportando resultados como se discuti en la tcnica de la cromatografa de gases. 7.3 Metodologa.

La preparacin de la muestra para el anlisis es semejante a la de cromatografa de gases, es decir, se debe disolver en un solvente adecuado y tener las caractersticas de una solucin verdadera. Su interaccin con la fase mvil sigue el mismo comportamiento de dicha cromatografa slo que ya no se evapora sino que se debe distribuir en el seno de dicha fase conforme a la propiedad fisicoqumica que gobierne la separacin: adsorcin, reparto, intercambio inico o distribucin en gel ya que se pueden utilizar esas fases estacionarias. Se puede generar un conjunto de criterios para seleccionar cualquiera de las dos tcnicas, pero es necesario conocer muy bien el sistema por separar; si se puede aplicar la cromatografa de gases, excelente debido a su rapidez y simplicidad instrumental. Si la muestra est compuesta por sustancias no voltiles, est conformada por iones inorgnicos o por materiales trmicamente inestables, la HPLC es la ms indicada. No obstante, a veces suele ser complementarias la una de la otra para un determinado anlisis. La tabla 55 presenta las ventajas y desventajas de estas dos tcnicas que pueden ayudar a tomar una decisin sobre cul de ellas utilizar mejor.

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Tabla 55. Comparacin entre las cromatografas de gases y HPLC. Caractersticas para ambas tcnicas Eficiente, selectivas y de gran campo de aplicacin. Requieren de muestras pequeas. Por lo general, no destruyen la muestra. Se adaptan fcil al anlisis cuantitativo. Ventajas de la tcnica de HPLC Procesa muestras no voltiles, inestables a alta temperatura y a iones inorgnicos. Ventajas de la cromatografa de gases Equipo muy sencillo y ms econmico. Rpida.

1. Al frente de cada muestra, escriba el nombre de los mtodos que utilizara para separar los constituyentes de las siguientes mezclas: a) b) c) d) e) Mezcla de agua y sal. Mezcla de aceite vegetal y torta de donde se ha obtenido. Mezcla de etanol y agua. Hidrolizado de lpidos vegetales para obtener cidos grasos. Aceite esencial a partir de la corteza de naranja.

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ACTIVIDAD DE APENDIZAJE 11 Aplicaciones

2. Complete el siguiente cuadro: Mtodo Sedimentacin Decantacin Precipitacin Filtracin Limitaciones

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Extraccin Cristalizacin Destilacin Destilacin simple Destilacin fraccionada Cromatografa 3. Complete el siguiente cuadro: Clase de cromatografa De adsorcin De reparto De intercambio inico Por filtracin por gel Cromatografa de gases HPLC Fundamento

4. Una fruta contiene los azcares: sacarosa, fructosa y glucosa. Disee el procedimiento que efectuara para lograr su separacin mediante cromatografa de papel. 5. Calcule los valores Rf para el siguiente cromatograma. Qu sustancias podramos decir que contiene la muestra problema (identificada como 1 y 8 en el cromatograma)?

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FRENTE DEL SOLVENTE

. 1

. 2 3 4 5 6 7

. 8

6. Suponga que usted debe identificar y separar las vitaminas A y D presentes en una margarina. Elabore un diagrama de flujo indicando el procedimiento que seguira para resolver el problema utilizando la cromatografa de capa delgada tanto analtica como preparativa.

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7. Al frente de cada una de las siguientes mezclas escriba el tipo de adsorbente que utilizara para separarlas utilizando cromatografa de capa delgada. Indique tambin el principal fenmeno que empleara para lograr esa separacin. Mezcla Azcares cidos carboxlicos Carotenoides Vitaminas a y D Protenas Sorbente Principio de separacin

8. Construya un cuadro comparativo entre las tcnicas de cromatografa de papel, cromatografa de capa delgada, cromatografa de columna, cromatografa de gases y HPLC destacando principio, equipo, preparacin de la muestra, resultados esperados, ventajas y desventajas. 9. Mediante un diagrama de flujo, ilustre el procedimiento que seguira para separar, purificar y analizar los componentes que presenta un alimento en azcares y en lpidos, mediante cromatografa de gases. Se sugiere consultar la literatura o por Internet. 10. Calcule la concentracin hallada en la separacin de una sustancia hipottica mediante cromatografa de gases, utilizando la tcnica de normalizacin a partir de los siguientes datos: Sustancia 1 2 3 4 5

11. Calcule la concentracin de las anteriores sustancias utilizando el mtodo de factores de correccin tomando como estndar el pico de la sustancia tres. Sustancia 1 2 3 (estndar) 4 5 6 rea (mm2) 4327 1345 6789 9236 4538 9325 Porcentaje en peso 12,17 3,78 19,09 25,97 12,76 26,22

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Base (mm) 215 18 136 52 229 Tiempo de retencin (mm) 26,50 21,25 19,75

Altura (mm) 4131 4321 3217 2179 5203

12. En un anlisis cromatogrfico se obtuvieron los siguientes resultados: Compuestos o xileno m xileno p xileno Ancho del pico en la base (mm) 7,90 6,25 6,00

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Si la altura equivalente de un plato terico (AEPT) fue de 1,11 mm, cul era la longitud de la columna, en mm? 13. En un anlisis cromatogrfico se obtuvieron los siguientes resultados: Pico A B Tiempo de retencin (mm) 19,0 24,0 Ancho del pico en la base (mm) 5,5 8,0

Calcule la resolucin de los picos, escriba las conclusiones encontradas con base en el resultado hallado. 14. En el anlisis por cromatografa de gases de una muestra tomada de una botella marcada Decalina, se obtuvieron dos picos, A y B, con tiempos de retencin de 52,0 y 57,6 mm respectivamente. Bajo las mismas condiciones de anlisis, el tiempo de retencin de n decano, usado como estndar, fue de 25,5 mm y el tiempo de retencin del aire fue de 1,5 mm. Dado que el tiempo de retencin relativo al n decano de la trans decalina es de 2,1 cul de los dos componentes se identific como trans decalina? 15. Calcule el ndice de Kovats para una sustancia S, cuyo tiempo de retencin es de 74 mm, si en la misma columna y bajo las mismas condiciones, los tiempos de retencin para el n octano y el n decano son de 45,0 y de 111,0 mm respectivamente. 16. Consulte en la literatura o por Internet, qu anlisis de componentes especficos de los alimentos puede realizar utilizando la cromatografa de HPLC. Seleccione una de las tcnicas y describa las condiciones de anlisis que debe tenerse en cuenta para la realizacin de la tcnica. Puede utilizar diagramas de flujo o mapa conceptuales.

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ACTIVIDADES DE LABORATORIO
En este ltimo evento del curso metodolgico, tendr la oportunidad de conocer, manipular, obtener resultados y elaborar los informes correspondientes de dos tcnicas analticas instrumentales de uso corriente en el laboratorio de control de calidad de los alimentos como es la pH metra, la espectrofotometra y una introduccin a la cromatografa de columna ya que por condiciones particulares en la institucin, no es posible todava la implementacin de la cromatografa de gases ni mucho menos la de HPLC; sin embargo, con los referentes tericos discutidos en la unidad, es posible que con un curso de profundizacin y la oportunidad de trabajar con los equipos pueda asimilar los fundamentos tericos y procedimentales para el uso de esas tcnicas. Es importante que para la realizacin de las prcticas mencionadas haga un ejercicio preparatorio mediante el pre informe, ubique las muestras que desea analizar segn sus intereses, disponga de algunos elementos del laboratorio que posiblemente no los va a disponer y que el instructor le comentar a su debido tiempo, sea cuidadoso en la observancia de las normas de seguridad y de manejo de los reactivos correspondientes para que la experiencia de aprendizaje realmente sea significativa. El (la) tutor (a) que est asesorando el curso, les establecer claramente las condiciones de entrega del informe, las etapas previas de preparacin de la sesin de laboratorio y la forma de evaluacin de las mismas, conforme a los lineamientos institucionales y el Reglamento Estudiantil. Como en los casos anteriores, el xito del trabajo acadmico depende del compromiso, dedicacin, esfuerzo e intereses del estudiante; la universidad, el tutor, el auxiliara de laboratorio son simplemente apoyos para que pueda aprender.

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DETERMINACIN DEL pH DE UNA MUESTRA

Se conoce el origen del pH, su significado en un alimento, los principios fundamentales de la potenciometra y del equipo utilizado. La mayora de pH metros tienen las caractersticas del mostrado en la figura 20 y que debe constatar cuando trabaje con uno de ellos. Figura 20. Esquema de la pantalla de control de un pH metro.

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1 2

pH meter

5 6 4

FUNKTION

mV/pH

pH

La funcin que tiene cada parte del equipo es la siguiente:

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1 2 3 4 5 6

Indicador de encendido. Permite conocer si el aparato est conectado a la red de energa elctrica y se encuentra estabilizado. El testigo estar luminoso cuando el botn de encendido se encuentre en la posicin ON. Pantalla de lectura. Suministra el valor de la medida que se ha realizado con el equipo. Por lo general da dos tipos de lectura: en unidades de pH y en milivoltios cuando se est determinando una F.E.M. Compensador manual de temperatura. Este botn permite seleccionar la temperatura en que se quiere realizar la medicin de pH o de la F.E.M., con el fin de asegurar su reproducibilidad. Botn para ajuste del p H neutro. Permite calibrar este valor en la escala de pH. Botn para ajuste de la pendiente. Interviene en la calibracin de la escala de pH, especialmente para asegurar la reproducibilidad de la medida que se va a realizar con la muestra. Botn para seleccionar las funciones. Permite establecer el rango de medicin del equipo ya sea en unidades de pH (pH metro) o en milivoltios (potencimetro).

En el procedimiento se revisar el uso de cada uno de los anteriores elementos del pH metro. 1. Procedimiento. 1.1 Calibracin del pH metro. Conectar el aparato. Algunos de ellos necesitan estar enchufados algunos minutos antes de ser utilizados ya que requieren estabilizar sus circuitos. No olvidar que los electrodos deben estar ya conectados al equipo antes de encenderlo. Mientras se estabiliza el equipo, disponer de tres vasos de precipitados de 100 mL muy limpios y secos: en el primero colocar unos 50 mL de la solucin buffer estndar de pH = 7,0, en el segundo 50 mL de la solucin buffer de pH = 4,0 y en el tercero disponer la muestra en jugo o en pur previamente preparado. Regresar al pH metro, seleccionar en el botn 3 el valor de la temperatura que tengan las soluciones buffer y la muestra. Quite la cubierta del electrodo, lvelo con agua destilada utilizando un frasco lavador y recogiendo las aguas de lavado en un vaso de precipitados. Seque el electrodo con un trozo de papel de filtro. Sumerja el electrodo en la solucin buffer de pH = 7,0. Con el botn 6 en la posicin de pH espere hasta que estabilice la lectura en la pantalla en ese valor, si no lo hace, con el botn 4 ajstelo al de la solucin buffer. Por ningn motivo debe volver a tocar este botn durante las dems medidas. Mueva el botn 6 o de funcin a la posicin cero. Saque el electrodo del buffer de pH = 7,0. Lvelo y squelo como se indic anteriormente. Sumerja el electrodo completamente seco en la solucin buffer de pH = 4,0. Mueva el botn 6 a la posicin de pH y espere hasta que se estabilice a la lectura del buffer. Si no ocurre ajstelo utilizando el botn 5; alcanzado el valor, por ningn motivo debe volver a tocar ese botn. Pase el botn 6 a la posicin de 0, saque el electrodo, lvelo y squelo. El pH metro se encuentra calibrado. Si no se va a utilizar pronto,

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se recomienda colocarle la cubierta hmeda para evitar la desecacin de la membrana de vidrio permeable. 1.2 Lectura del pH en la muestra. Si ya tiene lista la muestra, si ha extrado el jugo, no olvide que debe estar completamente transparente ya sea porque ha sido filtrado a travs de tela o gasa o se ha centrifugado de modo que trozos de fruta han sido separados. Si no es posible obtener el jugo, macere la muestra hasta obtener una pulpa homognea utilizando un mortero, si la muestra es de un cereal seco, puede aadir un poco de agua destilada hasta formar la pasta en el mortero. Quite la caperuza de proteccin del electrodo, juguela y squela como se ha venido indicando, introdzcalo dentro de la muestra, pase el botn 6 a pH y espere hasta que se estabilice el valor en la pantalla. Regstrelo en su cuaderno de laboratorio. No olvide efectuar la medicin al menos dos veces. 2. Tratamiento de datos. Elabore el informe correspondiente de la prctica identificando la muestra y los valores encontrados. Haga una pequea discusin sobre el origen de la acidez de la muestra que ha analizado y que importancia tiene esta propiedad para la calidad de la misma.

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TITULACIN POTENCIOMTRICA
Tendr la oportunidad de aplicar los principios tericos y metodolgicos de la potenciometra en el registro de la variacin del pH en funcin del volumen de titulante en la determinacin de la concentracin de un cido en una muestra comercial de su eleccin (vinagre, encurtidos, jugos de ctricos como naranja, limn, mandarina y de uvas, leche y derivados lcteos). El ndice de acidez de un alimento es una propiedad qumica cuantitativa que puede utilizarse como un parmetro de calidad al estar en estrecha relacin con el pH, factor que permite controlar el efecto perjudicial de algunos microorganismos que son txicos por s mismos o por las toxinas que producen. El ndice de acidez se puede definir como la cantidad, en gramos o en miligramos, presentes en 100 gramos del alimento. Segn la cantidad presente y considerada como normal, se puede establecer el grado de conservacin del alimento; generalmente los valores estn expresados en las normas de calidad del mismo. La potenciometra cido base permite la elaboracin de las curvas de titulacin al poder registrar la variacin del pH en funcin del volumen de titulante. El comportamiento del sistema que se est midiendo es exactamente el mismo que se discuti en las prcticas de titulacin volumtrica, salvo que aqu el punto de equivalencia lo va a determinar utilizando un artificio matemtico en vez de utilizar un indicador de pH. La potenciometra es la medida de la F.E.M., producida en una celda galvnica a travs de la cual la corriente que pasa es virtualmente cero, por lo que no tienen lugar cambios importantes en la concentracin de las especies electroactivas y la variable que interesa es la modificacin del potencial de un electrodo (semicelda) en que tiene lugar variacin de la concentracin de uno o de ambos componentes. Como el potencial de un electrodo sencillo no se puede medir directamente, el par de electrodos de la celda consiste en un electrodo de referencia que mantiene el potencial constante y un electrodo indicador cuyo potencial depende de la composicin de la disolucin electroltica que en nuestro caso tiene iones hidronio e iones hidroxilo. 1. Procedimiento. 1.1

Preparacin de la muestra.

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El estudiante trae una muestra de su inters, ojal en solucin, o si la trae slida, debe efectuar un tratamiento de extraccin (preparacin de jugos para el caso de las frutas ctricas o las uvas). Si est muy turbia, psela por un papel de filtro, recibiendo en vasos de precipitados limpios y secos para evitar cualquier dilucin; es importante recordar la necesidad de disponer la muestra en solucin. Si va a utilizar el vinagre comercial o el lquido de gobierno del encurtido, se recomienda efectuar una dilucin de la muestra de 1:10 para que pueda manejarse dentro del rango de medicin del equipo. No olvidar tener en cuenta ese factor registrando en el cuaderno de laboratorio la alcuota tomada (10 mL, 25 mL) y el volumen final a la que fue diluida utilizando el baln aforado (100 mL, 250 mL).

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1.2

Calibracin del pH metro.

Revise nuevamente la calibracin del equipo, siguiendo el procedimiento realizado en la prctica anterior. 1.3 Desarrollo de la curva de titulacin potenciomtrica.

Verifique si en el laboratorio existe la solucin de hidrxido de sodio 0,1 N ya preparada y estandarizada; de lo contrario, proceda a prepararla y a estandarizarla como se le indic en las tcnicas de volumetra cido base ya estudiadas. En un vaso de precipitado de 250 mL limpio y seco, deposite una alcuota de 25 mL de la solucin problema, aada 25 mL de agua destilada y coloque dentro del mismo el imn recubierto de tefln del agitador magntico si se dispone en el laboratorio. Si no lo hay, puede emplear un agitador de vidrio con aditamento de caucho o polica. En una bureta de 50 mL coloque una solucin estandarizada de hidrxido de sodio 0,1 N, teniendo en cuenta los cuidados y recomendaciones para la purga, llenado y enrasado de la misma. Colquela sobre el vaso de precipitados que contiene la muestra, manteniendo la llave cerrada. Proceda a introducir dentro de la solucin contenida en el vaso de precipitados el electrodo de vidrio conectado al pH metro pero con el botn de funcin en cero y observe cuidadosamente que no este tocando o en cercanas al imn con tefln o a la bureta, evitando cualquier movimiento brusco que pueda ocasionar su ruptura ya que si ello ocurre le ser cobrado o deber comprarlo nuevo. Inicie la agitacin para verificar el funcionamiento del sistema o para que pueda determinar el espacio disponible para utilizar el polica. Pase el botn de funcin a pH, espere que se estabilice la medida y regstrela en su cuaderno de laboratorio frente al volumen cero. Coloque el botn en cero y aada con la bureta 5 mL de la solucin estndar de hidrxido de sodio 0,1 N. Cirrela, agite y pase el botn a pH, espere unos minutos hasta estabilizar la medicin, regstrela en su cuaderno para el volumen aadido. Nuevamente lleve el botn a cero. Contine aadiendo solucin de hidrxido de sodio, repitiendo el proceso de agitacin, medida de pH y desconexin del pH metro con el botn de funcin hasta obtener medidas hasta 50 mL o alcance una medida de pH en la solucin equivalente a 10. Si alcanza a tener tiempo disponible, efecte la valoracin por duplicado para que pueda valorar el error en la medicin efectuada. 2. Clculos. Con los valores de pH en funcin del volumen, construya en papel milimetrado las curvas de pH vs volumen de solucin, y de pH/V en funcin del volumen de solucin para encontrar el volumen equivalente. Con ese dato y teniendo en cuenta la solucin estandarizada, calcule el ndice de acidez de su muestra, expresndolo en gramos del cido ms importante por 100 gramos de alimento o 100 mL del vinagre o del lquido de gobierno. 287

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Conociendo la concentracin del cido presente en la muestra, construya la grfica terica de la valoracin del mismo volumen de la muestra y con el mismo rango de volumen de solucin valorante de hidrxido de sodio e idntica concentracin. Trcela sobre la curva de titulacin experimental utilizando otro color. 3. Informe. Teniendo en cuenta las orientaciones dadas en la primera sesin de laboratorio, elabore el respectivo informe adjuntando los resultados de la concentracin de cido, ndice de acidez, las curvas de titulacin, conjuntamente con la discusin de resultados y conclusiones obtenidas.

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DETERMINACIN DEL CONTENIDO DE VITAMINA C MEDIANTE ESPECTROFOTOMETRA

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En la determinacin analtica de la vitamina C se pueden utilizar mtodos clsicos como la volumetra Redox al utilizar el fuerte poder reductor de esta sustancia, como ocurre con el mtodo de J. Tillmans frente al 2,6 diclorofenol indofenol; colorante que en estado slido es de color azul, con el mismo color en soluciones neutras o alcalinas y en medio cido es rosado que se reduce a un derivado incoloro. La reaccin que ocurre con el cido ascrbico o vitamina C es:
O C | C OH O C OH | HC | HO C H | CH2 OH O O C | C=O | C=O + | HC | HO C H | CH2 OH OH |

Cl +

Cl

Cl

Cl

N |

| NH |

| OH

| OH

Esta tcnica se puede utilizar tambin en espectroscopia visible ya que se puede medir la variacin de la intensidad de la coloracin conforme cambia la concentracin del cido ascrbico presente en soluciones provenientes de zumos de alimentos como frutas y verduras, piensos y en algunos materiales biolgicos como el caso de la orina. Es especfico del cido ascrbico; como en algunas frutas se ha transformado en cido deshidroascrbico que todava tiene actividad como vitamina C, es necesario en la determinacin analtica su transformacin a cido ascrbico para efectuar la determinacin total de esa vitamina en la muestra en anlisis. En los materiales vegetales el cido ascrbico se encuentra, en ciertas proporciones, en formas combinadas (ascorbgeno), forma en que no puede ser utilizada por el organismo, que no las detecta el mtodo pero si se hidroliza previamente con cido oxlico por un tiempo, se puede recuperar en la especie detectada por el mtodo. En el mtodo que se va a utilizar aqu, el cido ascrbico se extrae del material en una licuadora con ayuda de cido oxlico. El efecto decolorante del cido ascrbico extrado sobre el indofenol, se mide en un espectrofotmetro visible. Requiere que exista mnimo una concentracin de 0,01 a 0,05 mg de cido ascrbico presente. El espectrofotmetro visible es un equipo manual o de registro, de haz simple o doble, que permite medir la absorbancia o el porcentaje de transmitancia que tiene una solucin coloreada. En la figura 21, se muestra el equipo de uso ms comn en el laboratorio, el cual tiene los siguientes controles y sitios de colocar la muestra o portamuestra. Lo primero que se evidencia es la escala o sitio donde el aparato muestra el resultado obtenido, la cual puede ser analgica o digital, dependiendo del modelo. Figura 21. Esquema del espectrofotmetro visible.

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Luego se encuentra el sitio de colocacin de la muestra o porta muestra, que tiene una tapa o una puerta que permite cerrarlo para poder efectuar la calibracin a cero del equipo o ausencia de corriente interna o absorbancia infinita (cero de porcentaje de transmitancia). Existen tres botones: uno de ellos con una escala que permite seleccionar la longitud de onda del anlisis o efectuar el barrido del rango visible para obtener el correspondiente espectro de absorcin de la sustancia. Otro destinado a encender el equipo y efectuar el ajuste del cero en la escala del equipo como se coment anteriormente y otro destinado a ajustar el 100 % de transmitancia para establecer el rango de sensibilidad que tendr el equipo durante el anlisis. Una vez efectuada la calibracin del equipo, por ningn motivo se modifica la posicin de estos dos ltimos botones so pena de cambiar las condiciones del ensayo y cometer errores sistemticos. 1. Procedimiento. 1.1

Preparacin de reactivos.

A continuacin se darn las instrucciones para la preparacin de los reactivos requeridos. 1.1.1 Solucin patrn de cido ascrbico.

Pesar exactamente 100 mg de cido ascrbico y transfiera analticamente a un baln aforado de 100 mL utilizando solucin de cido oxlico al 0,4 %; complete a volumen. Pase a un frasco de vidrio color mbar, para evitar la oxidacin por efecto de la luz. 1.1.2 Solucin de colorante.

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Pese exactamente 40 mg de la sal sdica del 2,6 diclorofenol indofenol, disuelva en agua destilada hasta completar 100 mL en un baln aforado. Tome una alcuota de 30 mL, depostela en un baln aforado de un litro y complete a volumen. Transfiera a un frasco de vidrio. 1.2 Preparacin de la curva de calibracin.

Disponga de cinco balones aforados de 500 mL cada uno limpios y mrquelos de uno a cinco usando un lpiz de cera o cinta de enmascarar. A cada baln aada la

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cantidad de solucin estndar de cido ascrbico y luego complete a volumen utilizando una solucin de cido oxlico al 0,4 %: Baln nmero Volumen de estndar (mL) 1 5,0 2 10,0 3 15,0 4 20,0 5 25,0

Una vez completado el volumen, agite para homogenizar, deje en reposo y transfiera a frascos de vidrio color mbar para evitar la oxidacin del cido ascrbico por accin de la luz. Colocando el espectrofotmetro en la longitud de onda 540 nm, proceder a tomar las lecturas de porcentaje de transmitancia de la siguiente manera. En una gradilla coloque siete tubos de ensayo marcados de cero a siete y coloque en cada uno de ellos las siguientes soluciones, homogenice utilizando un agitador de vidrio y deje en reposo 15 segundos antes de tomar la medida de porcentaje de transmitancia. Tubo de ensayo nmero: Solucin cido ascrbico (mL) Solucin de colorante (mL) Agua destilada (mL) 0 0,0 0,0 10,0 1 1,0 9,0 0,0 2 1,0 9,0 0,0 3 1,0 9,0 0,0 4 1,0 9,0 0,0 5 1,0 9,0 0,0 6 0,0 9,0 0,0

Calibre el cero del espectrofotmetro utilizando la solucin del tubo de ensayo cero. Para ello transfiera cuidadosamente la solucin a la celda y con el botn de cero del equipo ajuste la escala analgica o digital. Luego ajuste el 100 % de transmitancia utilizando la solucin marcada con el nmero seis, utilizando el botn del equipo que tiene esa finalidad. Una vez realizado, no debe tocar por ningn motivo ninguno de los botones de cero y de 100 % de transmitancia. Proceda en la misma forma con las soluciones uno a cinco. No olvide purgar la celda antes de cada medida para evitar problemas de dilucin. Registre los valores de absorbancia o de porcentaje de transmitancia conforme haya calibrado el equipo, no olvide el error de paralaje si est utilizando un equipo con escala analgica; para ello haga coincidir la imagen del puntero con el objeto real cuando haga la lectura. 1.3 Preparacin de la muestra y determinacin del contenido de vitamina.

Pese en un vaso de precipitados exactamente 50 g del material vegetal al que le desea determinar su contenido de vitamina C. Pselo cuantitativamente a una licuadora y aada 350 mL de solucin de cido oxlico al 0,4 % previamente preparado, licue por tres minutos, filtre a travs de papel Whatman nmero cuatro, lave el filtro con solucin de cido oxlico y transfiera a un baln aforado de 100 mL, complete a volumen, homogenice y pselo a un frasco de vidrio mbar marcado como muestra. Si es un jugo, verifique que sea completamente transparente o de lo contrario fltrelo. Mida exactamente 50 mL dentro de un baln aforado de 250 mL, complete a volumen con solucin de cido oxlico, homogenice y transfiera a un frasco de vidrio de color mbar, marcado como muestra. Proceda a efectuar la medida de porcentaje de transmitancia o absorbancia que tiene un mililitro de la muestra diluido con nueve mililitros de solucin de cido oxlico previamente preparados como hizo con la curva estndar, en el espectrofotmetro 291

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previamente calibrado. Registre el resultado en el cuaderno de laboratorio. Haga un duplicado del ensayo. 2. Clculos. Determine la concentracin del estndar de cido ascrbico en mg/mL o partes por milln y calcule las concentraciones para cada uno de los patrones que utiliz en la construccin de la curva de calibracin. Constryala en papel milimetrado y ajstela por el mtodo de mnimos cuadrados, teniendo en cuenta que en la abscisa va la absorbancia y en la ordenada la concentracin de cido ascrbico en p.p.m. Recuerde la frmula para transformar el porcentaje de transmitancia a absorbancia si sus datos se tomaron en esa forma. Interpole en la curva el valor de absorbancia que tiene la muestra para encontrar la cantidad de cido ascrbico que tiene la muestra. Reporte el resultado de vitamina C de la muestra en mg de cido ascrbico por 100 g de muestra. 3. Informe. Elabore un documento escrito que contenga los resultados y conclusiones obtenidos en esta experiencia, siguiendo los lineamientos dados en la Gua para la elaboracin de informes y entrguelo al tutor para la revisin, informacin de retorno y calificacin.

EXTRACCIN, PURIFICACIN Y ANLISIS DE CAROTENOIDES POR CROMATOGRAFA Y ESPECTROSCOPA VISIBLE

En los materiales vegetales, especialmente aquellos que pueden ser utilizados como alimento se encuentran dos tipos de sustancias que generalmente les comunica color como son las clorofilas y los carotenoides; grupos de compuestos orgnicos de color verde, para los primeros, amarillos o rojos para los segundos, que tienen diferente estructura qumica. Los carotenoides son pigmentos importantes en la alimentacin, puesto que muchos de ellos pueden convertirse en vitamina A en el organismo animal o humano, por lo que se les considera como provitamina A y pueden estar asociados o no a las clorofilas.

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Las clorofilas son pigmentos que tienen una funcin fundamental en la fotosntesis de los vegetales superiores. Para procesos de control de calidad y de maduracin de los frutos, los colores que presentan se deben al predominio de uno de estos pigmentos, as, cuando se dice que estn verdes, predomina la clorofila que les comunica ese color, pero en la medida en que alcanza la madurez biolgica para la poca de reproduccin va desapareciendo dejando en evidencia los colores de los carotenoides dando la gama de amarillo a rojos o a la presencia de otros pigmentos (antocianinas) para el morado, azul, etc. El fundamento de esta prctica est en la extraccin de estas sustancias de materia vegetal seleccionada previamente por el estudiante, la separacin y purificacin utilizando la cromatografa de columna y posterior registro del espectro de absorcin del grupo de carotenoides. Si se dispone de tiempo y de patrn de caroteno, efectuar la cuantificacin del mismo. 1. Procedimiento 1.1 Extraccin de los carotenoides y clorofilas.

Pese exactamente 20 g del material vegetal del que ha decidido determinar su contenido de carotenos, en un vaso de precipitados limpio y seco. Registre el dato en el cuaderno de laboratorio. Pselos a una licuadora y aada 50 mL de una mezcla de metanol y cloroformo 1:1 utilizando guantes y gafas protectoras. Licue por tres minutos, pase a un embudo buchner al que le ha adaptado un lecho de fibra de vidrio o si es posible utilizar un embudo que tenga lecho de vidrio sinterizado para filtracin por vaco. Juague con otros 50 mL de la muestra. Pase a un embudo de decantacin, separe las dos capas y haga dos lavados con 10 mL de agua destilada cada uno, para recuperar la mayor cantidad posible de metanol, luego transfiera a un erlenmeyer de 250 mL, aada unos 5 g de sulfato de sodio anhidro y agite para secar lo ms que se pueda el extracto clorofrmico. Caliente sobre una plancha de calentamiento colocada en una vitrina de gases y evapore la solucin hasta alcanzar 10 mL. 1.2 Preparacin de la columna y desarrollo cromatogrfico.

Tome una bureta de 25 mL y colquele un tapn de lana de vidrio al fondo de la misma para que pueda acomodar sin dejar escapar la fase adsorbente, pero que deje salir a la fase eluente. Llnela con cloroformo o con ter de petrleo y mntela en un soporte universal. Mediante un vaso de precipitado de 50 mL vaya agregando almina previamente activada o slica gel G, deje que se asiente al fondo de la bureta y luego con una manguera del mechero de bunsen dle golpecitos suaves para que se vaya acomodando uniformemente y deje salir todo el aire que puede estar atrapado; recuerde que el xito de la separacin depende del empaque uniforme de la columna. Contine ese proceso hasta formar una columna de unos 20 cm de alto con la fase adsorbente y verifique que el solvente sale sin dificultades y sin arrastrar la fase estacionaria abriendo un poco la llave como para que salga gota a gota. Controle que encima de la superficie de la columna siempre haya al menos 5 mL de fase mvil. Verificada las condiciones de salida, cierre la llave. Finalmente aada una capa de sulfato de sodio anhidro de modo que alcance una altura de 3 mm. Da garanta de que no se est incluyendo agua en el solvente de elusin ni en el de la muestra.

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Utilizando una pipeta, transfiera cuidadosamente los 10 mL de muestra, resbalando por la pared interna de la columna de modo que quede como una capa uniforme. Una vez alcanzada esa condicin, proceda a efectuar el desarrollo cromatogrfico empleando ter de petrleo, aadindolo cuidadosamente mediante un vaso de precipitados sin alterar las condiciones de la capa de adsorbente, ni dejar secar la columna lo que se logra vigilando la existencia de los 5 mL por encima de la superficie. La llave se debe abrir para dejar salir dos gotas por segundo. En la medida que va ocurriendo la separacin, observe que se separan dos fases coloreadas una verde que queda al inicio de la columna y luego baja lentamente y otra de color amarillo a rojo que va descendiendo un poco ms rpido y que se supone contiene a los carotenoides. Puede efectuar recolecciones parciales del solvente que emerge de la columna, digamos cada 10 mL, guardndolas en tubos de ensayo marcados como fraccin 1, fraccin 2, fraccin 3, que va dejando en la gradilla tapados. Posteriormente, puede efectuar un control cromatogrfico de las mismas utilizando cromatografa de placa sobre vidrios portaobjetos para verificar cuntas manchas se tienen utilizando otro solvente y revelando con vapores de yodo. Para ello, toma prepara una suspensin de slica gel en cloroformo en un frasco tipo mermelada, sumerge los dos portaobjetos, los extrae dejndolos secar al aire, separa y en uno de ellos siembra la muestra de cada fraccin, deja desarrollar en otro frasco tipo mermelada hasta que el frente del solvente alcance una longitud determinada sin que llegue al borde superior, extrae, deja secar y luego lo introduce en otro frasco tipo mermelada al que le ha adicionado cristales de yodo. Deja revelar, extrae y verifica el nmero de manchas que tiene. As puede ir agrupando fracciones comunes siempre que tengan el mismo Rf en el sistema cromatogrfico que ha seleccionado. 1.3 Espectro de absorcin de los carotenoides.

Una vez ha separado los carotenoides, ya sea porque ha eluido la banda de color amarillo o rojo y en el control de pureza cromatogrfica que ha efectuado con las diferentes fracciones, concentre cuidadosamente hasta obtener un volumen de 5 mL para cada una de ellas. Posteriormente, deposite cada fraccin dentro de la celda del espectrofotmetro y comience a correr el espectro de absorcin comenzando en 400 nm y finalizando en 500 nm efectuando medida cada 10 nm y en la regin de mxima absorbancia efecte la medida cada 5 nm. Registre los valores encontrados en su cuaderno de laboratorio. 1.4 Cuantificacin de los carotenoides como caroteno.

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Si en el laboratorio se encuentra un patrn de caroteno, proceda a elaborar una curva de calibracin, ajstela por mnimos cuadrados y interpole el valor de absorbancia encontrado para los carotenoides de la muestra. Reporte como Unidades Internacionales de vitamina A. 2. Informe Elabore un documento donde reporte sus resultados, las grficas de los espectros de absorcin y de la curva de calibracin (si alcanz a desarrollar toda la prctica), siguiendo los lineamientos de la Gua para la elaboracin de informes de laboratorio y entrguela a su tutor para revisin, informacin de retorno y calificacin.

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ACTIVIDAD DE PROFUNDIZACIN Y TRANSFERENCIA

Se ha finalizado el curso, por lo que es conveniente revisar los conocimientos adquiridos, las habilidades desarrolladas en el trabajo experimental y comprobar las proposiciones de aprendizaje, metas y objetivos de cada unidad. El estudiante y su tutor ya deben tener una idea clara de los resultados esperados, mediante la comprobacin del Portafolio de Desarrollo Personal, los trabajos realizados en los Grupos de Aprendizaje Colaborativo de los cuales forma parte, lo mismo que en el Grupo de Curso. Esta actividad tiene como propsito verificar esos resultados, mediante la realizacin de un taller, que tiene las siguientes etapas: 1) Construccin colectiva del mapa conceptual del curso de Qumica analtica Instrumental. 2) Simulacin del trabajo analtico con un alimento vegetal y uno animal para determinar sus propiedades qumicas ms importantes (debe seleccionarse el alimento o materia prima y recurrir a las normas ICONTEC para establecer las propiedades qumicas que se deben analizar). Se debe elaborar un diagrama de flujo que contenga todas las etapas necesarias de realizacin de esos anlisis. 3) Revisin final del Portafolio de Desarrollo Personal. 4) Valoracin del desarrollo acadmico del curso (materiales, tutora, prcticas de laboratorio, resultados obtenidos).

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5) El tutor elaborar un informe escrito que enviar a la Facultad y al autor para mejoramiento del curso. (Es recomendable que lo haga por correo electrnico).

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