DETECO, IDENTIFICAO E QUANTIFICAO DE VRUS

Mtodos de deteco e identificao de vrus

1.Deteco de propriedades biolgicas dos vrus

1.1 Hemaglutinao (HA)

VRUS COM ATIVIDADE HEMAGLUTINANTE SOBRE ERITRCITOS ANIMAIS

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Limitaes (HA ): Baixa sensibilidade. Restrio a algumas famlias virais.

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1.2 Inibio da Hemaglutinao Deteco - anticorpos/vrus hemaglutinante

DETECO, IDENTIFICAO E QUANTIFICAO DE VRUS 2. Deteco de antgenos virais 2.1 - Imunofluorescncia (IFA)

AC especficos conjugados a fluorescena x AG no material suspeito

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2.1 Imunofluorescncia (IFA) Limitaes: Necessidade de um microscpio de luz U.V Reaes inespecficas

Human cytomegalovirus infected human endothelial cells. Multicolor Immunofluorescence (IF). Blue: DAPI = cellular DNA. Green = GFP (green fluorescence protein). Red + Magenta = two different viral proteins.

DETECO, IDENTIFICAO E QUANTIFICAO DE VRUS 2. Deteco de antgenos virais

2.2 Imunoperoxidase (IPX) AC especficos conjugados HRPO/AF x AG no material suspeito HRPO - horseradish peroxidase / AF - Fosfatase alcalina Reao com substratos cromognicos: Variaes: Imunocitoqumica ou Imunoistoqumica

DETECO, IDENTIFICAO E QUANTIFICAO DE VRUS 2. Deteco de antgenos virais 2.3 Ensaio Imunoenzimtico (ELISA) Reao AG-AC em placas de poliestireno seguida de reao colorimtrica Boa sensibilidade e especificidade baixo custo reprodutibilidade versatilidade diagnstico em grande escala

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ELISA DIRETO

Conjugado + substrato (HRPO ou AP)

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