Introduccin La saliva es un fluido que se origina en las glndulas salivales mayores y menores, el cual se produce de manera constante permitiendo

una accin limpiadora sobre la superficie de los tejidos duros y blandos de la cavidad bucal. Se encuentran, adems en su composicin propiedades antibacterianas que se originan de factores inmunes especficos y no especficos que incrementan su poder anticariogenico. La saliva posee una capacidad amortiguadora y neutralizadora de los acidos producidos por los organismos cariogenicos o ingeridos atraves de la dieta, permitindole mantener un pH relativamente constante. Es tambin una fuente de calcio y fosfato, necesarios para la remineralizacin del esmalte. De ah que los sistemas o tampones ejercen el rol de mantenimiento de la homeostasis de pH en los lquidos biolgicos y de absorber los cambios en la concentracin de iones hidrogenos que se le imponen al sistema, por ejemplo en la samgre y saliva. Debido a su composicin los sistemas formados por un acidos dbil y una sal del mismo acido o por una base dbil y la sal de esta base dbil, pueden hacer frente a los cambios de acidez y basicidad que se le imponen al medio. Un ejemplo de este sistema amortiguador seria el formado por un... CICLO DE PRACTICA IV MEDICIN DE LA CAPACIDAD BUFFER La capacidad bffer de la saliva incluye tres sistemas principales: el bicarbonato (HCO-3), el fosfato, y sistema bffer de protenas. El sistema bffer del bicarbonato es el ms importante y los otros dos tienen una importancia muy menor. La saliva cumple funciones buffer principalmente gracias a la presencia de bicarbonato, si la saliva mantiene un pH alto y constante se favorece el proceso de remineralizacin de los dientes, en presencia de calcio libre en la saliva. De esta manera en pacientes con caries incipientes sin cavitacin el proceso carioso es reversible siempre que haya un pH adecuado y calcio suficiente para ello. La concentracin de bicarbonato aumenta al aumentar el flujo salival, as como tambin su capacidad de neutralizar cidos, por lo tanto la presencia de bicarbonato logra disminuir el nivel cido de los grmenes cariognicos, tambin la capacidad de desmineralizacin de la placa bacteriana ser menor y sus efectos dainos se minimizan. El sistema bicarbonato es bajo en la saliva no estimulada y aumenta a medida que la saliva es estimulada. En la saliva no estimulada, la concentracin del buffer del fosfato inorgnico es ms alto, mientras que el sistema bicarbonato / cido carbnico es baja. La capacidad bffer de la saliva esta dada mayoritariamente por el ion bicarbonato, pero tambin existen otrosmecanismos de menor trascendencia como el de la urea, protenas ricas en arginina las que liberan amonaco (elevando el pH). Existen muchos mtodos que pueden ser usadas para determinar el efecto bffer de la saliva. Mtodo de Ericcson Es el mtodo clsico para determinar la capacidad bffer de la saliva. Para hacerlo se recolecta saliva, puede ser no estimulada por 15 minutos o estimulada por 5 minutos (como fue descrito

en el test para flujo salival). La saliva se mezcla invirtiendo el tubo 2 veces,1 ml de saliva se transfiere a 3 ml de HCl (0.0033 mol por 1 para saliva no estimulada, 0.005 mol por 1 para saliva estimulada). Para prevenir la formacin de espuma, se le agrega 1 gota de 2-octanol. Se mezcla por 20 minutos para remover el CO2, el pH de la saliva se mide electromtricamente. Tabla de valor pH de saliva no estimulada y estimulada y su evaluacin (evaluacin alta significa mayor poder de remineralizacin).

Valor pH final Bffer para saliva no estimulada Mas de 4,75 4,25 a 4,75 3,50 a 4,24 Menos de 3,50 Mas de 6,50 5,75 a 6,50 4,00 a 5,74

Evaluacin Alto Normal Bajo Muy bajo Alto Normal Bajo

Bffer para saliva estimulada

Valores obtenidos de www.db.od.mah.se/car/data/bufftest.html Sistema de cinta Dentobuff Es un test en el cual se usa un sistema el cual contiene cidos secos e indicadores de color. Cuando se adiciona saliva, los cidos se disuelven y el pH vara. Si la saliva puede amortiguar los cidos, el pH aumentar. Los indicadores muestran el pH final. La saliva se recolecta del mismo modo antes descrito. Usualmente la capacidad bffer se mide al mismo tiempo que el flujo. Se usa una pipeta y una gota de esta saliva estimulada se pone en el sistema para este test que se mide con una cinta. se espera 5 minutos exactos, el color cambiar con el tiempo dada la reaccin entre la saliva y el indicador, compare el color del test con el standard este indicador del color refleja el pH en la cinta. Una carta de color para determinar la capacidad bffer de la saliva: <!--[endif]--> Azul Verde Amarillo Valor de pH final 6 o ms 4,5 5,5 4,0 o menos Capacidad bffer Alto Medio Bajo

Valores obtenidos de www.db.od.mah.se/car/data/bufftest.html Desde un punto de vista cariolgico, es positivo tener una capacidad bffer en el rango azul que indica un buen efecto bffer de la saliva, o sea cuando el pH de la saliva es superior a 6 existen mayores posibilidades de remineralizacin.

Referencias bibliogrficas. 1.- Seif T y cols. Cariologia: Prevencin, Diagnstico y Tratamiento Contemporneo de la caries dental. Actualidades Mdico Odontolgicas Latinoamrica, Bogot. 1997. Cap 8: 231-232. 2.- http://www.db.od.mah.se/car/data/bufftest.html Retroalimentacin 1. Qu componentes de la saliva le dan su capacidad bffer? <!--[endif]--> 2. Qu sistema bffer est presente preferentemente en la saliva estimulada? http://patoral.umayor.cl/caries_saliva/caries_saliva.html http://es.scribd.com/doc/15741693/Capacidad-Buffer http://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-biolmol/pdfs/06%20pH%20AMORTIGUADORES.pdf Los tres sistemas buffer de la sangre son (en orden decreciente de importancia): 1) Sistema CO2 / HCO3- (carbnico / bicarbonato) 2) Sistema HPO4 2- / H2PO4- (fosfato) 3) Sistema Oxihemoglobina/desoxihemoglobina

Captulo 5.1. Transtornos metablicos del equilibrio acidobase

1. FISIOLOGIA DEL ACIDO-BASE:
El equilibrio cido-base requiere la integracin de tres sistemas orgnicos, el hgado, los pulmones y el rin. En resumen, el hgado metaboliza las protenas produciendo iones hidrgeno ( H+ ), el pulmn elimina el dixido de carbono ( CO2 ), y el rin generando nuevo bicarbonato ( H2CO3 ). De acuerdo con el concepto de Brnsted-Lowry, un cido es una sustancia capaz de donar un H+;y una base una sustencia capaz de aceptarlo (1). Por tanto, la acidez de una solucin depende de su concentracin de hidrogeniones [H+]. En el plasma normal la concentracin de [H+] es de 40 nmol/l. Para no utilizar estas unidades tan pequeas, Sorensen propuso el concepto de pH, que es el logaritmo negativo de la concentracin de [H+] expresada en mol/l. Por tanto la acidez se mide como pH. El pH del plasma normal es -log 0.00000004 = 7.3979 (aprox. 7.40). El pH plasmtico se refiere habitualmente a la relacin entre las concentraciones de bicarbonato/cido carbnico.

El CO2, en presencia de anhidrasa carbnica (AC), se hidrata de la siguiente forma:

CO2 + H2O <------> CO3H2 <----------> H+ + HCO3En el plasma donde no existe anhidrasa carbnica, casi todo el cido carbnico est disociado en CO2 y H2O, y la concentracin del cido carbnico es muy escasa ( 0.003 mmol/l). Sin embargo esta pequea cantidad est disociado en CO3H- y H+, lo cual explica el porqu aumenta la acidez cuando aumenta el CO2 en el plasma. La concentracin normal de bicarbonato en el plasma es 24 mmol/l. Si aplicamos la frmula de Henderson - Hasselbach al sistema bicarbonato/cido carbnico: HCO3pH = pK + log -----------H2CO3 el pK a 37C tiene un valor de 3.5, luego: pH = 3.5 + log (24/0.003) = 3.5 + log 8000 = 3.5 + 3.9 = 7.4 que es el pH normal del plasma arterial. Como la concentracin de H2CO3 es tan pequea y es dificil de medir, habitualmente se recurtre a incluir en la frmula el CO2, aprovechando que su concentracin es proporcional a la de H2CO3. Por lo tanto la ecuacin sera: HCO3- (mmol/l) pH = pK + log -----------------------------------CO2 disuelto(mmol/l) + H2CO3 La concentracin real de cido carbnico en el plasma es tan pequea que la podemos ignorar. La concentracin de CO2 disuelto en el plasma es proporcional a su presin parcial por la constante de solubilidad del CO2 en el agua, que a 37C tiene un valor de 0.03, expresndola en mmHg; por tanto: HCO3pH = pK + log -----------------------pCO2 x 0.03 Dado que el valor del pK del sistema bicarbonato/ CO2 a 37C es de 6.1, el bicarbonato normal del plasma arterial es de 24 mmol/l, y la pCO2 arterial normal es de 40 mmHg, el pH de la sangre arterial normal ser: pH = 6.1 + log (24/1.2) = 6.1 + 1.3 = 7.4 En condiciones normales las concentraciones de bicarbonato y el CO2 disuelto estn en proporcin 20/1, y siempre que esta proporcin se mantenga el pH ser 7.4. Si se quiere expresar la acidez de los lquidos corporales en trminos de [H+], en nmol/l nEq/l, a partir del bicarbonato y la pCO2, se emplea la siguiente frmula: pCO2 (mmHg) 24 x 40 [H+] ( nmol/l nEq/l ) = 24 ------------------ = ------------- = 40 HCO3- (mEq/l) 24 La relacin entre el pH y [H+] es la siguiente: pH 6.7 6.8 6.9 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 [H+] 200 160 125 100 80 63 50 40

7.5 32

7.6 26

7.7 7.8 20 16

El medio interno ha de mantener un pH dentro de unos lmites fisiolgicos de 7.35 y 7.45. En el organismo existe una produccin continua de cidos: 1) 50 - 100 mEq/da de cidos fijos, procedentes bsicamente del metabolismo de los aminocidos que contienen sulfuro (metionina, cysteina) y aminocidos catinicos (lisina y arginina). Aunque los hidratos de carbono y las grasas son normalmente metabolizadas a productos finales neutros, en circunstancias anormales (como puede ser la hipoxia, donde la glucosa se metaboliza a H+ y lactato o en el dficit de

insulina donde los triglicridos se metabolizan a H+ y beta - hidroxibutirato) pueden servir como carga de cidos; 2) 10000 - 20000 mEq/da de cido voltil en forma de CO2. Estos cidos han de ser eliminados del organismo, pero los procesos de eliminacin de los cidos fijos son lentos; sin embargo el organismo dispone de medios para defenderse de forma rpida de la acidez que actan coordinadamente. La primera lnea de defensa: los buffers; la segunda lnea: la regulacin respiratoria; y la tercera lnea: la regulacin renal. (1, 2) Un BUFFER es un sistema formado por un cido dbil y una sal fuerte de dicho cido, que funciona como base. En los lquidos corporales, tanto extra como intracelulares, existen buffers cuya misin es amortiguar, es decir, disminuir los cambios de acidez de una solucin cuando a sta se le aade un cido o un lcali y conseguir, por lo tanto, que el pH de la solucin cambie lo menos posible; su efecto es prcticamente inmediato. Lo ideal es que un buffer tenga la misma cantidad de sus dos componentes (cido y base), para amortiguar tanto un cido como una base. Los buffers del compartimento extracelular son los siguientes: a) Bicarbonato/CO2, en el plasma y lquido intersticial. b) Hemoglobina, en los hematies. c) Protenas plasmticas. d) Fosfato disdico/fosfato monosdico, en plasma, hematies y lquido intersticial. En condiciones normales, el sistema bicarbonato/CO2 representa el 75% de la capacidad buffer total de la sangre, siendo un buffer excelente, a pesar de estar en relacin 20/1, ya que su componente cido (CO2) es gaseoso y adems muy difusible, lo que permite una modificacin muy rpida de sus niveles mediante la respiracin. Los buffers del compartimento intracelular son cuantitativamente ms importantes, pero no bien conocidos. Aparte del sistema de la hemoglobina, los ms importantes son el del fosfato disdico/fosfato monosdico y el de las proteinas intracelulares (imidazol). Los H+ penetran en las clulas intercambindose por Na+, K+ y lactato, y son neutralizados por ellos; este proceso tarda de 2 a 4 horas. La segunda lnea de defensa acta amortiguando la acidez o alcalinidad a base de eliminar o retener CO2, lo que disminuye o aumenta el cido carbnico, y en consecuencia la [H+]. En condiciones normales todos los cidos voltiles producidos han de ser eliminados por el pulmn en su prctica totalidad. El CO2 es un gas soluble en los lquidos corporales y muy difusible, unas 20 veces ms que el O2, y tiende a moverse muy rpidamente de donde hay ms a donde hay menos: tendencia de escape del CO2. El CO2 tisular, procedente del metabolismo, se mueve hacia el plasma, donde tiene las siguientes posibilidades: a) disolverse fsicamente, de acuerdo con la pCO2 b) hidratarse a bicarbonato, en una mnima cantidad, porque en el plasma no hay apenas anhidrasa carbnica c) en su mayor parte, pasar al hematie, una vez dentro del mismo, una parte se disuelve, otra se hidrata a bicarbonato, ya que en el hematie hay abundante anhidrasa carbnica, y otra parte se une a la Hb formando compuestos carbamino. El CO3H2 formado se disocia en CO3H- y H+; la unin del CO2 a la Hb libera tambin un H+. Estos H+ han de ser neutralizados para evitar el descenso de pH. Tanto los fosfatos intraeritrocticos como sobre todo la hemoglobina pueden aceptar la mayor parte de estos H+. La Hb, al pH normal de la sangre, tiene predominio de cargas negativas, y por lo tanto se comporta como una base y puede aceptar H+ en los grupos imidazol de la histidina; el

carcter bsico de la Hb aumenta cuando se desoxigena, y por lo tanto acepta ms H+ al mismo pH; la desoxigenacin de la Hb ocurre precisamente en los tejidos, donde debe recoger el CO2 y por tanto aceptar H+ (efecto Bohr). Este efecto es recproco: a medida que aumenta la concentracin de H+ dentro del hemate, la Hb suelta ms facilmente su oxgeno. Por otra parte, la Hb desoxigenada acepta CO2 en sus grupos NH2 formando compuestos carbamino (efecto Haldane ); esta unin libera un H+, que es aceptado por los grupos imidazol. Este efecto es tambin recproco, cuando aumenta la pCO2 dentro del hemate la Hb suelta tambin ms facilmente el O2. Cuando la Hb se desoxigena, cada gramo puede aceptar 0.043 mmol de H+, y por cada mmol de Hb que se desoxigena se cede a los tejidos 1 mmol de O2. Como el cociente respiratorio normal es de 0.8, se genera metablicamente 0.8 mmol de CO2, que al hidratarse dentro del hemate mediante la anhidrasa carbnica, producen 0.8 mmol de CO3H- y 0.8 mmol de H+; como se ha comentado, cuando 1 mmol de Hb (16.1 g) se desoxigena, puede aceptar 0.053 x 16.1 = 0.7 mmol de H+ sin que cambie el pH. Es decir que 0.7 mmol de los H+ producidos al hidratarse el CO2 dentro del hemate pueden ser aceptados por la Hb desoxigenada y solo 0.1 mmol de H+ por cada mmol de Hb (alrededor de 4 mmol/l ) deben ser amortiguados por los otros buffers. Por esta razn, la sangre venosa es solo ligeramente ms cida (0.04 U pH en condiciones normales) que la arterial. La produccin contnua de bicarbonato dentro del hemate hace que su concentracin aumente progresivamente; al alcanzar cierto nivel sale al plasma, intercambindose por el Cl- y agua (efecto Hamburger), por lo tanto parte del CO2 se transporta en la sangre venosa en forma de bicarbonato plasmtico, por esta razn el bicarbonato de la sangre venosa es ligeramente ms alto (alrededor de 1 mEq/l) que el de la sangre arterial. En el pulmn aumenta la PCO2 del eritrocito, difunde CO2 hacia el plasma, aumentando la pCO2 , debido a su gran capacidad de difusin, el CO2 atraviesa la membrana alvolo - capilar y se elimina con el aire espirado. La ventilacin alveolar est exctamente regulada para que la pCO2 alveolar y en consecuencia la arterial, para que se mantenga en unos 40 mmHg; si la pCO2 arterial aumenta de esta cifra aumenta la ventilacin alveolar y por lo tanto la eliminacin de CO2, y al contrario. Cuendo la produccin de CO2 aumenta, aumenta en consecuencia la ventilacin alveolar si el pulmn puede responder adecuadamente, con lo que no se desarrolla hipercapnia ni acidosis respiratoria. Si el pulmn no responde, o si disminuye la ventilacin alveolar por otras causas con una produccin normal de CO2, el CO2 se va acumulando, y cuando se saturan los mecanismos buffer, aumenta la pCO2 y el cido carbnico produciendose la acidosis respiratoria (2). La tercera lnea, la regulacin renal: Normalmente se producen H+ entre 50 y 100 mEq/da, aunque en condiciones patolgicas pueden producirse hasta 500 mEq/da, que se neutralizan con los buffers extra e intracelulares, pero han de ser eliminados por el rin, ya que el pulmn no excreta H+ (3). El rin contribuye al balance cido-base regulando la excrecin de H+ en tanto que la concentracin de CO3H- permanezca dentro de lmites apropiados. Esto involucra dos pasos bsicos: A) La reabsorcin tubular del bicarbonato filtrado en el glomrulo: Todo el bicarbonato plasmtico (4.500 - 5.000 mEq/da) se filtra en el glomrulo. Si el pH de la orina es < 6.2, no hay nada de bicarbonato en la orina, lo que indica que se ha reabsorbido todo en el tbulo. Cuando el pH urinario es > 6.2 aparece el bicarbonato en la orina. La reabsorcin tubular de bicarbonato aproximadamente el 90% se realiza en el tbulo proximal, en los primeros milimetros de este segmento. Parece estar mediada por el incremento en el nmero de cotransportadores Na+/ H+ (4), el restante 10% restante se reabsorbe en segmentos ms distales,

en los tbulos colectores medulares ms externos. La reabsorcin de bicarbonato por el tbulo depende de varios factores: 1. De la cantidad de bicarbonato presente en el tbulo que es practicamente lineal hasta un nivel de 24-25 mEq/l, si es inferior a este nivel el bicarbonato plasmtico todo se reabsorbe en el tbulo. A partir de dicho nivel, el que se reabsorba ms o menos depende de los siguientes factores. 2. Nivel de pCO2, si aumenta en el plasma, y en consecuencia en la clula tubular, aumenta la concentracin de H+ aumentando su eliminacin por los mecanismos que se describirn posteriormente y en consecuencia se reabsorbe ms bicarbonato; y si disminuye, se reabsorbe menos. 3. Grado de replecin del volumen extracelular, su expansin disminuye la reabsorcin proximal de bicarbonato y su contraccin aumenta la reabsorcin de bicarbonato. 4. Nivel de mineralcorticoides ( y en menor medida de glucocorticoides); si est aumentado, aumenta la reabsorcin de bicarbonato; y si est disminuido, disminuye. 5. Nivel de K+ plasmtico, si eat bajo, aumenta ligeramente la reabsorcin de bicarbonato problamente por estmulo de la produccin de renina - aldosterona. La hipopotasemia genera per se alcalosis metablica. B) La regeneracin del bicarbonato gastado en la neutralizacin del cido fijo, mediante la eliminacin de H+: 1. Se alcanza mediante la secrecin de H+, con dos mecanismos diferentes, en el tbulo proximal cotransporte Na-H+, y en los tubulos colectores por un mecanismo de transporte activo primario, con un transportador especifico denominado adenosintrifosfatasa transportadora de iones hidrgeno (H+-ATPasa), manteniendo la electroneutralidad por la secrecin concurrente de Cl- (5)(Grfico 1 ). Este ltimo mecanismo puede aumentar la concentracin de de hidrgeno en la luz tubular hasta 900 veces, que puede disminuir el pH del lquido tubular hasta 4.5, que es lmite inferior de pH que se mide en la orina, en contraste con el incremento de tres a cuatro veces que puede ser obtenido en los tbulos proximales. En condiciones normales, la velocidad de secrecin de hidrogeniones es del orden de 3.5 mmol/min y la velocidad de filtracin de bicarbonato es de 3.46 mmol/min, es decir la cantidad de ambos iones es practicamente la misma, neutralizandose en la luz tubular. Por tanto la excrecin directa de H+ libres, es mnima de 0.1 mEq/da como mximo. 2. As pues, para eliminar el exceso de hidrogeniones por la orina, se debe combinar este in hidrgeno con tampones intratubulares: I. Como acidez titulable (Grfica 2): a) en forma de fosfato: HPO4= + H+ = H2PO4-; este sistema tiene un pK de 6.8, y por tanto es activo entre 7.3 y 6.3 de pH. b) en forma de creatinina: es cuantitativamente poco importante, su inters es por tener un pK de 4.8, y poder actuar en los rangos bajos del pH urinario(6). II. Como amonio: El tbulo renal sintetiza amoniaco a partir de la glutamina a partir de una de las siguientes vas: (7, 8) glutamina: 3CO2 + 2NH4+ + 2HCO3 - ; glutamina: glucosa + 2NH4+ + 2HCO3 Una vez formado, el bicarbonato vuelve a la circulacin sistmica a travs de la vena renal (Grfica 3). Si el amonio no se excreta a la orina y retorna a la circulacin sistmica, se metaboliza en el hgado donde se metaboliza a urea consumiendo bicarbonato. Por tanto, dos mecanismos regulan la produccin de bicarbonato renal de la amoniogenesis renal: 1) el balance de distribucin del amonio entre la circulacin sistmica y la orina; y 2) la velocidad de produccin de amonio renal. La produccin de amonio puede estar influida por factores al margen del estado cido-base, como son la masa renal reducida, cambios en el volumen

circulante, alteraciones en el potasio y calcio (1). El amoniaco es un gas, que difunde con facilidad hacia la luz del tbulo, dnde se combina con los H+ procedentes del H2CO3, que se han intercambiado previamente por Na+, formando amonio: NH3 + H+ = NH4+, que es un catin, muy poco difusible a travs de la membrana de la clula tubular (no existe transporte activo de amonio), por lo que queda atrapado en la luz tubular, eliminndose con la orina. De esta forma se eliminan normalmente 20 a 40 mEq/da de H+, pudiendo incrementarse hasta 250 mEq/da ms en las acidosis metablicas severas (8). Este mecanismo es fundamental en los nios pequeos, en los que el mecanismo de acidez titulable est poco desarrollado. Mediante estos mecanismos, por cada H+ que se elimina por la orina, se retiene, y se reabsorbe, un bicarbonato. En la acidosis se excretan H+ por el rin, tanto los procedentes de cidos fijos como del cido carbnico, es decir, tanto de la acidosis metablica como respiratoria. En el caso de que el bicarbonato se hubiera gastado previamente en la neutralizacin del cido fijo, esto supone regenerar el bicarbonato gastado; en el caso de la eliminacin de H+ procedente del cido carbnico, la reabsorcin secundaria de bicarbonato supone elevar el bicarbonato plasmtico por encima de sus niveles normales, que es lo que ocurre en la compensacin metablica de la acidosis respiratoria crnica. En la alcalosis , tanto metablica como respiratoria, se retienen H+al mismo tiempo que se excreta el bicarbonato, que desciende en el plasma. La cantidad neta de H+ excretados en orina es igual a la cantidad de H+ excretados como acidez titulable y NH4+ menos cualquier H+ aadido por la prdida de CO3H- urinario.

El punto isoelctrico es el pH al que una sustancia anftera tiene carga neta cero. El concepto es particularmente interesante en los aminocidos y tambin en las protenas. A este valor de pH la solubilidad de la sustancia es casi nula. Para calcularlo se deben utilizar los pKa.

(Los pKa a considerar para esta ecuacin,en una tabla de pH, son los que contienen a la especie qumica con carga igual a cero, cuando tienen ms de un pKa). Las molculas complejas, tales como las protenas, se combinan con los iones hidrgeno y con otros iones presentes en la disolucin, dando lugar a la carga neta de la molcula. A la concentracin de iones hidrgeno, o al pH, para el cual la concentracin del ion hbrido de una protena es mxima y el movimiento neto de las molculas de soluto en un campo elctrico es prcticamente nulo, se le denomina punto isoelctrico. Los aminocidos pueden existir como sal interna, llamada zwitterin. Esto ocurre porque un electron del oxigeno del grupo carboxilo es atrado por el grupo amino NH2 (ya que a al nitrogeno le sobraban dos electrones de valencia) que est en posicin alfa y quedando este como grupo amonaco NH3+.

http://www.slideshare.net/mensajerodelcielo/soluciones-buffer

Aminocidos - Punto Isoelctrico

La presencia de grupos acido (-COOH) y bsico (-NH2) otorga a los aminocidos unas propiedades cido base caractersticas. En medios cidos fuertes, tanto el grupo amino como el grupo cido se encuentran protonados y el aminocido tiene la siguiente forma: Al subir el pH se desprotona el grupo ms cido, H de menor pKa, formndose una especie neutra llamada Zwitterin.

Cuando el aminocido se encuentra en medios bsicos pierde el protn del grupo amino, dando lugar a la especie desprotonada.

Se llama pH isoelctrico o punto isoelectrico al pH en el que la concentracin de Zwitterin es mxima (el aminocido no presenta carga neta). Otra definicin de punto isoelectrico es: pH al que la concentracin de especies protonadas y desprotonadas se iguala.

El pH isoelectrico se calcula como media de pKa,1 y pKa,2, es decir, la media de los pKas de las etapas que forman y descomponen el Zwitterin.

2. CMO SE HALLA EXPERIMENTALMENTE EL PUNTO ISOELTRICO? Para hallar experimentalmente el punto isoeltrico de un aminocido hay que realizar una valoracin con una especie bsica, como el hidrxico sdico (NaOH).

En un vaso de precipitados colocamos un pHmetro con un agitador magntico, aadimos el aminocido a valorar y con una bureta vamos aadiendo pequeas cantidades de sosa (Hidrxido sdico) hasta la valoracin completa del aminocido. Por cada adicin de sosa debemos registrar el pH del vaso de precipitados. Cuando acabemos la valoracin, hay que representar grficamente el pH frente a la cantidad de Hidrxico sdico aadido y nos resultar una grfica similar a la siguiente:

Figura 1. Valoracin de un aminocido. Punto isoeltrico

Si os fijis, el punto isoeltrico es justo el valor medio entre los dos pKa.

3. PUNTO ISOELTRICO DE LOS 20 AMINOCIDOS ESTNDAR En la tabla que se presenta a continuacin se puede comprobar que la mayora de aminocidos naturales tienen un punto isoeltrico entre (5,07 y 6,02), excepto los aminocidos cidos (cido Asprtico y cido Glutmico) y los bsicos (Histidina, Lisina y Arginina). Tener este hecho en cuenta simplifica y facilita en gran medida el aprendizaje. Espero que os sea til.

AMINOCIDO

PUNTO ISOELTRICO

Glicina Alanina Valina Leucina Isoleucina Fenialanina Tirosina Triptfano Serina Treonina Cistena Metionina cido Asprtico cido Glutmico Histidina Lisina Arginina Asparginina Glutamina Prolina

5,97 6,07 5,97 5,98 6,02 5,48 5,66 5,89 5,68 5,87 5,07 5,74 2,77 3,22 7,59 9,74 10,76 5,41 5,65 6,48