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FROTIS DE SANGRE PERIFRICA El Frote Perifrico, es un mtodo de laboratorio que se utiliza para el estudio de las caractersticas citolgicas de las

clulas de la sangre. Se define como FROTE, FROTIS o EXTENDIDO, a la preparacin microscpica delgada y transparente, extendida entre dos cristales, obtenida de un lquido espeso o tejido semilquido o pastoso (sangre, secreciones, exudados, etc.) La ventaja principal de hacer extendidos con sangre anticoagulada con EDTA es que pueden disponerse varios portaobjetos si es necesario y no tienen que prepararse de inmediato luego de extraer la sangre. En el 95% de los casos, el EDTA adems impide la aglutinacin de las plaquetas en el portaobjetos de vidrio, lo que hace que la estimacin de las plaquetas sea ms exacta durante la evaluacin del extendido. No obstante, en alrededor del 5% de los pacientes, la sangre con EDTA sufre un fenmeno in vitro denominado satelitosis plaquetaria que no es ms que la adherencia de las mismas a los neutrfilos, lo que puede generar una pseudo-plaquetopenia cuando se usan mtodos automticos. El frotis de sangre perifrica obtenido por puncin capilar y coloreada con Wrigth o Giemsa, suministra un medio para estudiar la sangre y determinar las variaciones y anormalidades de estructura forma y tamao de los eritrocitos; su contenido de hemoglobina y sus propiedades decoloracin. Es til en el estudio de algunas alteraciones hematolgicas y como indicador de la respuesta y los efectos deletreos (provoca perjuicios, deterioros o daos) de diferentes tratamientos. Permite adems observar agrupaciones de plaquetas y los glbulos blancos, cada uno con su morfologa caracterstica. Razones por las que se realiza el examen Este examen se puede realizar como parte de una evaluacin mdica general para ayudar a diagnosticar muchas enfermedades o el mdico lo puede ordenar si usted tiene signos de un trastorno sanguneo. Otras afecciones bajo las cuales se puede llevar a cabo el examen: Cualquier trastorno sanguneo presunto o conocido Cncer Leucemia de clulas pilosas Hemoglobinopatas Monitoreo de los efectos secundarios de la quimioterapia

DESCRIPCIN DEL EXAMEN DE SANGRE PERIFRICA El examen del extendido de sangre es una parte importante de la evaluacin hematolgica. La tincin que se observa es la de Wright, la cual es una solucin de eosina y una mezcla compleja de tiaminas, que incluyen el azul de metileno, azur B y otros derivados. Las clulas observadas en el frote perifrico y sus caractersticas se mencionan a continuacin.

Materiales y equipo: Aceite de inmersin Microscopio ptico Lminas portaobjetos limpias. Portaobjetos de bordes biselados y esquinas romas (Frotadora) Capilar o pipeta pasteur Sangre con EDTA

1. ERITROCITOS: 1. Son clulas anucleadas, tienen forma de disco bicncavo con un dimetro de 7.2 micrmetros y un grosor de 2.1 micrmetros cerca de su borde. 2. Por su alta concentracin de hemoglobina se tien de rojo. 3. Son las clulas ms abundantes en el frote perifrico. Anormalidades Morfolgicas De Los Eritrocitos Acantocito: Son clulas rojas que presentan proyecciones espaciadas, bastante irregulares. Estas proyecciones varan en extensin pero usualmente presentan extremos romos. Esta irregularidad puede encontrarse en las lipoproteinemias y en ciertos desrdenes hepticos. Equinocitos (clulas crenadas): Son clulas rojas con muchas espculas despuntadas, resultantes de un secado fallido de la extensin de sangre o debido a exposicin con soluciones hiperosmticas. Las formas patolgicas estn asociadas con la uremia o con desrdenes del bazo. Las proyecciones estn regularmente dispersas sobre la superficie celular, a diferencia de las que se presentan en los acantocitos. Eliptocitos: Son clulas rojas ovales o con forma de cigarrillo. Estas formas pueden encontrarse en varios tipos de anemia, sin embargo, se encuentran en cantidades considerables en la eliptocitosis hereditaria. Esquistocito: Son fragmentos de clulas rojas que resultan de un dao a la membrana ocasionado durante el paso de la clula a travs de los vasos. Patolgicamente se presentan en la anemia hemoltica microangioptica, quemaduras severas, uremia, en las anemias hemolticas causadas por agentes fsicos y en la coagulacin intravascular diseminada. Tambin se les conoce como clulas mordidas. Clula en hoz (drepanocitos): Clulas rojas que han tomado forma de media luna. Cuando una persona con hemoglobinopatas de clulas en hoz es expuesto a deshidratacin, infeccin o baja oxigenacin, sus frgiles clulas rojas forman cristales lquidos, tomando la forma de media luna, lo que ocasiona destruccin celular y espesor en la sangre. Esferocitos: Clulas rojas de forma esfrica que no presentan el halo de luz central caracterstico de los eritrocitos normales. Los esferocitos grandes (macroesferocitos) son encontrados en la anemia hemoltica, mientras que los esferocitos pequeos (microesferocitos) algunas veces aparecen en

casos de quemaduras severas. Una variedad de formas esfricas son observadas en la esferocitosis hereditaria. Estomatocito: Clulas rojas con un rea oval o rectangular en la zona central, algunas veces referido como clulas con boca. Estas clulas han perdido la indentacin en una lado y pueden encontrarse en enfermedad heptica, desbalance electroltico, quemaduras, talasemias, lupus eritematoso sistmico, envenenamiento con plomo y en la estomatocitosis hereditaria. Codocitos (clulas diana): Eritrocitos con un punto coloreado cntrico, dando la forma de un blanco. Estas formas se encuentran en las anemias hemolticas, hemoglobinopata C y talasemias Dacriocitos (clulas en lgrima): Clulas rojas, que como su nombre lo indica, tienen forma de lgrima. Patolgicamente se encuentran en cantidades considerables en la mielofibrosis y otros desrdenes mieloproliferativos, as tambin como en la anemia perniciosa, talasemias, metaplasias mieloides y algunas anemias hemolticas. Cuerpos de Howell-Jolly: Inclusiones esfricas en las clulas rojas que con tincin de Wright aparecen como artefactos definidos de color azul-negro. Se trata de fragmentos nucleares de ADN condensado, de 1dimetro, normalmente removidos por el bazo. Estas estructuras aparecen en anemias hemolticas severas y en pacientes con bazos disfuncionales o despus de someterse a esplenectoma. Grnulos de Schffner: Aparecen en casos de infeccin por Plasmodium vivax. Estos grnulos se presentan como punteados naranjas o rosados sobre los eritrocitos. No son visibles cuando las tinciones (especialmente Giemsa) se efectan en los tiempos habituales, por esto para detectarlos, los frotes deben mantenerse en tincin por tres horas. 2. LEUCOCITOS a) Leucocitos granulosos i. Neutrfilo ii. Eosinfilo iii. Basfilo. b) Leucocitos no granulosos i. Linfocitos ii. Monolitos. 2. LEUCOCITOS A) Leucocitos Granulosos (Polimorfonucleares) i. NEUTROFILOS: 1. Son clulas que tienen un dimetro medio de 12 micrmetros.

2. El ncleo es lobulado, se tie intensamente, es irregular y muchas veces asume formas comparables a letras como E, Z y S. Los lbulos son segmentos de material nuclear conectados por delicados filamentos de cromatina: a) Neutrfilo Segmentado: Tiene por lo menos dos de sus lbulos separados por el filamento de cromatina. b) Neutrfilo en Banda: Tiene una banda de material nuclear ms gruesa que un filamento de cromatina, que conecta los lbulos y presenta un ncleo en forma de U, de es- pesor uniforme. 3. El citoplasma en s mismo es incoloro, est totalmente lleno de grnulos de 0.2 a 0.3 micrmetros, que adoptan un color entre marrn y rosado con la tincin de Wright. Aproximadamente las dos terceras partes de stos son grnulos especficos y una tercera parte son grnulos azurfilos. Alteraciones cualitativas de los neutrfilos Granulaciones txicas: Son grnulos basfilos ms oscuros que lo normal y se observan durante el transcurso de infecciones severas y estadios txicos. Vacuolas txicas: Se observan en el citoplasma de los neutrfilos durante infecciones severas y estados txicos. Cuerpos de Dohle: Son reas teidas de azul en el citoplasma de los polimorfonucleares neutrfilos y se encuentra en infecciones, especialmente en neumonas. Palillo de tambor: Es un pequeo apndice (cromatina sexual) que permite conocer el sexo del individuo mediante una simple observacin en un frotis de sangre perifrica en los neutrfilos. Se presenta en las mujeres. Polisegmentacin: Son neutrfilos con 5 o ms lobulaciones. Se observa en las anemias por deficiencia de vitamina B-12 y cido flico, Sndrome de Down y otras anomalas. ii. EOSINFILOS. 1. Tienen un dimetro medio de 13 micrmetros. 2. Su citoplasma contiene grnulos de mayores tamaos que los del Neutrfilo, grandes, redondos, que se tien de color rojo brillante. 3. El ncleo tiene dos segmentos conectados, rara vez son ms de tres. iii. BASFILOS. 1. Miden de 10 a 12 micrmetros de dimetro. 2. El ncleo ocupa la mitad de la clula, son forma segmentada o irregular.

3. El ncleo es plido y suele estar oculto por grnulos grandes, oscuros de color azul, que se encuentran en el citoplasma. B) Leucocitos no granulosos (Mononucleares) i. LINFOCITOS: 1. Son clulas mononucleadas que carecen de grnulos citoplasmticos especficos. 2. Son las clulas ms pequeas midiendo entre 6 a 10 micrmetros. 3. Presentan un ncleo nico, redondo, bien definido, pudiendo tener indentaciones. Contiene grumos de cromatina, teidos de color oscuro. En la periferia del ncleo la cromatina se condensa. 4. El citoplasma se tie de color azul, exceptuando una zona perinuclear clara. Patologa de los linfocitos Linfocitos atpicos: Llamados tambin virus linfocitos, clulas linfomonocitoides, clulas activadas de Turk, clulas de Turk, virocitos, inmunoblastos, etc. Miden de 15m a 30m, ncleo irregular, indentado, excntrico y puede observarse nucleolos. El citoplasma es amplio, color azul tenue, y puede presentar grnulos azurfilos y vacuolas. Estas clulas pueden observarse en mononucleosis infecciosa, hepatitis viral, herpes zoster, enfermedades autoinmunes y normalmente pueden hallarse hasta en 5%. Linfocitos con mitosis o binucleados: Pueden encontrarse en enfermedades virales. Linfocitos vacuolados: En caso de linfocitos que reaccionan por efecto de la radiacin ultravioleta o respuesta a tratamientos de quimioterapia. ii. MONOCITOS: 1. Es la clula de mayor tamao en la sangre normal, midiendo entre 14 a 20 micrmetros. 2. Contiene un nico ncleo parcialmente lobulado y fuertemente indentado o en forma de herradura o reniforme. 3. El citoplasma es abundante, de color azul grisceo y presenta un aspecto de vidrio esmerilado. 3. PLAQUETAS Son fragmentos citoplasmticos anucleados de clulas gigantes llamadas megacariocitos, originados en la mdula sea. Se observan en el frotis de sangre perifrica como agregados basoflicos. Su principal funcin es la creacin y propagacin del cogulo.