Introduo

Este relatrio referente aula prtica laboratorial que ocorreu no dia 12/04/2012, na qual realizmos uma preparao contendo iogurte, com o objectivo de observar clulas procariticas, as bactrias do iogurte: Lactobacillus Bulgaricus e Streptococcus Termophilus.

Streptococcus Termophilus

Lactobacillus Bulgaricus

Introduo Terica
Bactrias
Clulas procariticas
Os organismos formados por clulas procariticas designam-se por procariontes, agrupam-se no Reino Monera e so conhecidos pela designao geral de bactrias. Foram estes organismos que protagonizaram as primeiras etapas da evoluo dos seres vivos. As suas maiores caractersticas so possuir um nmero muito reduzido de organelos celulares e no possuir um ncleo bem delimitado e individualizado, denominando-se nuclolo, e nele que se encontra inscrito o DNA.

Bactrias
Por vezes chamadas micrbios, as bactrias foram reconhecidas como causa de doenas h mais de 100 anos, mas ainda no se sabe exactamente por que motivo algumas pessoas adoecem enquanto outras permanecem ss quando expostas s mesmas fontes de infeco. Abundantes no ar, no solo e na gua, as bactrias so, na sua maioria, inofensivas para os seres humanos. Algumas so at benficas, por exemplo as que vivem no intestino e ajudam a decompor os alimentos. As bactrias que causam doenas chamam-se patognicas. As bactrias reproduzem-se por diviso em duas clulas que, por sua vez, tambm se dividem, e assim sucessivamente, sendo este processo denominado mitose. Em condies ideais (a temperatura certa e alimento suficiente para todas as clulas), esta diviso pode darse de 20 em 20 minutos, uma velocidade de reproduo extremamente rpida. Num perodo de seis horas, uma s bactria pode multiplicar-se em mais de 250 000. Contudo, isto acontece muito poucas vezes, porque as condies ideais raramente ocorrem, e num indivduo saudvel o sistema imunolgico do corpo destri as bactrias invasoras.

Diferentes tipos de bactrias

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Fermentao
A fermentao um processo de transformao de uma substncia em outra, produzida a partir de microorganismos, tais como fungos, bactrias, ou at o prprio corpo. um processo de obteno de energia utilizado por algumas bactrias e outros organismos. Ocorre com a quebra da glicose (ou outros substratos como o amido) em piruvato, que depois transformado noutro produto, como o lcool etlico e lactato, definindo fermentao alcolica e lctica. Este tipo de obteno de energia no necessita de oxignio como aceptor final de electres, por isso denomina-se respirao anaerbica. Porm, este 18 vezes menos eficiente em termos de energia, gerando apenas 2 ATPs por molcula de glicose.

Iogurte
O iogurte uma forma de leite em que o acar (a lactose) foi transformado em cido lctico, por fermentao bacteriana. um lquido espesso, branco e levemente cido, muito nutritivo. produzido a partir da aco de uma cultura mista de microorganismos Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgaricus. Estas bactrias consomem a lactose para obterem energia e em contrapartida eliminam o cido ltico.

Mtodo do esfregao
Esfregao uma leve camada de matria orgnica sobre uma lmina de vidro, para exame microscpico. Esta tcnica consiste em espalhar uma gota do material biolgico a observar sobre uma lmina de vidro, formando uma fina pelcula para uma melhor observao ao microscpio, que mais tarde pode ser submetida a uma colorao para evidenciar alguns constituintes desse material a ser visualizado.

Corante Azul-de-metileno
Para realizar preparaes utilizam-se corantes vitais, pois podem ser usados em clulas vivas sem as matarem. Esto em concentraes muito baixas (0,01%), a fim de diminuir a toxicidade nas clulas. Os corantes podem ser vitais ou no vitais, conforme permitam colorar clulas vivas e mant-las assim ou no. O mesmo corante pode ser vital ou no, dependendo da concentrao em que se encontra.O azul-de-metileno um exemplo, pode ser um corante vital se estiver em baixa concentrao. frequentemente utilizado quando se deseja evidenciar o ncleo das clulas.

Preparao corada com azul-de-metileno

Mtodo de fixao
Esta etapa essencial pois se o esfregao no est fixado ao vidro da lmina ele vai ser removido durante a fase de colorao. A fixao pelo calor permite preservar a forma do microrganismo, mas alguns componentes celulares podem ser danificados. Na fixao qumica geralmente no h destruio da estrutura das clulas que ficam fixadas lmina. Durante o processo de fixao pelo calor so inactivadas as enzimas que podiam alterar a morfologia celular e endurecidas as estruturas celulares, para que no se alterem durante a colorao e observao, dado que as protenas microbianas coagulam e fixam-se superfcie da lmina. Para que as clulas fiquem aderentes ao vidro segura-se a lmina de um lado e fazem-se 2 a 3 passagens pela chama.

Material
- lcool Etlico - Iogurte natural - M.O.C. - Lamelas - Lminas - gua destilada - Conta-gotas - Azul-de-metileno - Lamparina - Agulha de dissecao - Mola de madeira

Procedimentos
1- Coloca-se 1 gota de gua destilada numa lmina

2- Sobre a gota coloque uma pequena poro de iogurte

3- Com a ajuda da lamela (lmina) e aplicando a tcnica do esfregao, espalhe a poro suavemente pela lmina

4- Leve a lmina chama branda da lamparina at secar de modo a ocorrer a fixao

5- Coloque sobre a preparao 2 a 4 gotas de lcool para retirar o excesso de gorduras (lpidos)

6- Deixe secar ao ar

7- Core com azul-de-metileno, deixando actuar 5 a 7 minutos

8- Faz correr cuidadosamente um fio de gua destilada sobre a preparao

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9- Deixe secar ao ar 10- Observe e registe o que observar

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Observaes

Lactobacillus Bulgaricus e Streptococcus Termophilus

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Streptococcus Termophilus

Lactobacillus Bulgaricus

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Streptococcus Termophilus

Lactobacillus Bulgaricus

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Discusso de resultados
Com a realizao desta experincia consegui tanto encontrar bactrias Lactobacillus Bulgaricus como Streptococcus Termophilus. A bactria que se encontrava em maiores quantidades era a Streptococcus Termophilus, ocupando quase todo o volume de bactrias presentes na preparao. Pude verificar que ambos os organismos apresentam cadeias de comprimento varivel.
Atendendo forma que apresentam, podemos dividir as bactrias em cocos, bacilos ou bastonetes, vibries, espirilos e espiroquetas. As cocos so esfricas e imveis, podendo apresentar-se isoladas ou agrupadas. Quando se encontram agrupados dois a dois designam-se de diplococos, em cadeia formam estreptococos, em cacho denominam-se por estafilococos e sarcina quando apresentam forma de cubo. Os bacilos ou bastonetes possuem forma alongada e mobilidade prpria. Quando se encontram em cadeia formam os estreptobacilos. Os vibries apresentam forma de vrgula apresentando mobilidade prpria, os espirilos forma de espiral apresentando mobilidade prpria e as espiroquetas tm forma ondulante e apresentam mobilidade prpria. De acordo com esta classificao pude verificar que encontrei diplococos e estreptococos em abundncia. Streptococcus termophilus e Lactobacillus bulgaricus so bactrias e consequentemente seres procariontes, contudo apresentam algumas diferenas morfolgicas. Streptococcus termophilus uma bactria de forma esfrica

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enquanto as clulas dos organismos do tipo Lactobacillus bulgaricus apresentam forma de bastonete. O nico obstculo na realizao desta experincia foi no podermos observar as bactrias com maior detalhe. Consequentemente foi-nos difcil distingui-las, pois estas so de reduzidssimas dimenses.

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Concluso
O objectivo principal da experincia realizada foi a observao das bactrias do iogurte. O iogurte um produto coagulado obtido atravs da fermentao lctica do leite, pela aco das bactrias Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus termophilus. Os organismos do gnero Lactobacillus apresentam clulas em forma de bastonete, enquanto os do gnero streptococcus tm clulas redondas ou ovides, que podem ocorrer aos pares. Ambas as espcies apresentam, frequentemente cadeias longas e desenvolvem-se bem em meios cidos. No incio do fabrico do leite o Streptococcus termophilus desenvolve-se o que assegura o comeo da fermentao lctica a partir da lactose. Este processo favorece o desenvolvimento de Lactobacillus bulgaricus e esta por sua vez liberta aminocidos essenciais ao crescimento de Streptococcus termophilus. A simbiose entre estas duas espcies resulta na produo de uma quantidade de cido lctico superior ao que as duas espcies produzem quando separadas. Estas espcies pertencem ao grupo das bactrias e, consequentemente pertencem ao reino Monera. As bactrias podem apresentar vrias formas: esfricas (cocos), em forma de bastonete (bacilos), espiraladas (espirilos), em forma de cubo (sarcina), ou ainda, em forma de vrgula (vibries). Os cocos podem organizar-se e aglomerar-se em colnias: estreptococos , diplococos ou estafilococos . Os bacilos tambm podem formar colnias - os bacilococos.
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Webgrafia
http://azolla.fc.ul.pt/aulas/fotos_aulas2009_10.htm http://www.tehnologijahrane.com/wpcontent/uploads/2008/01/streptococcus-thermophilus-ilactobacillus-delbrueckii.jpg http://www.e-escola.pt/topico.asp?id=306&ordem=6 http://relatorios123.com.sapo.pt/BG/3/2.htm http://relatorios123.com.sapo.pt/BG/3/1.htm http://www.seleccoes.pt/iogurte_11573 http://pt.wikipedia.org/wiki/Iogurte http://pt.wikipedia.org/wiki/Fermenta%C3%A7%C3%A3o http://lactina-ltd.com/i/st1.png http://jpkc.njau.edu.cn/spwswx/imgbank/tuku/Lactobacillus %20delbrueckii%20subsp.%20bulgaricus%20&%20Streptoco ccus%20thermophilus%20%201.jpg http://www.psmicrographs.co.uk/_assets/uploads/yoghurtbacteria-80014272a-l.jpg http://bioweb.usu.edu/microscopy/lactobacillus%20bulgaricus .jpg http://www.fundacaoitaipu.com.br/box/saude/imagens/bacter ias.jpg http://webcache.googleusercontent.com/search?q=cache:7C UkHMTfmOEJ:www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/tra balhos_grad2005/iogurte/iogurte.ppt+&hl=pt-PT&gl=pt

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