Sie sind auf Seite 1von 11

Determinacin de la

concentracin de glucosa
sangunea (glicemia)

Paloma Carus; Silvana Donoso; Dayane Rivera; Mara Jos Astorga

Fecha: 22 mayo 2012

La glicemia es la medida de la cantidad de glucosa (azcar) en la sangre.


Mediante una tcnica llamada Qumica seca, es posible monitorear
permanentemente la glicemia capilar en pacientes que lo requieran, por
lo cual, mediante indicadores de riesgo tendremos una seal de aviso
muchas veces antes de la manifestacin de una enfermedad.

INTRODUCCIN

Cmo determinar la concentracin de glucosa en la sangre (glicemia)?


Pregunta que se nos plante al comenzar nuestro informe, para esto
realizaremos la tcnica de espectrofotometra la cual consiste en una
determinacin de las concentraciones de un compuesto en solucin, que
en este caso sera la concentracin de glicemia en la sangre, para esto
utilizamos 4 tubos a los cuales se les agregar distintos soluciones, las
cuales abordaremos con mayor profundidad al desarrollar nuestro
informe. Para comenzar es importante saber qu es la glicemia? y qu
funcin cumple en nuestro organismo?
La glicemia se define como el valor de los niveles de azcar presentes en
la sangre (se mide en miligramos por decilitro (mg/dl)); estos azcares son
los que ingerimos en los alimentos y los que son absorbidos por el
organismo. Teniendo un valor normal de sta que flucta entre los 76
110mg/dl. Alteraciones de este rango puede llevar a predecir indicios de
diabetes mellitus.
Con los distintos componentes que tendremos en nuestros tubos
observaremos la glicemia en suero normal y patolgico despus de
cierto tiempo junto con la tcnica de espectrofotometra pudiendo
explicar y determinar lo ocurrido en cada tubo.

MATERIALES Y MTODOS

Para comenzar tenemos que tener en cuenta los materiales que


utilizamos en nuestro trabajo:
Espectrofotmetro ajustado a 510 nm.
Cubetas de plstico de 1,5 ml.
Material volumtrico (micropipetas de 100 ul, tubos de ensayo).
Muestras de suero.
Kit para la determinacin enzimtica de glucosa srica.
Timer o cronmetro.

Cmo fue realizado?


Primero adquirimos los cuatro tubos de ensayo que utilizaramos y los
rotulamos con distintos nmeros para poder as evitar cualquier tipo de
confusiones; se procedi a puncionar con una lanceta la yema de un dedo
para obtener una pequea muestra de sangre la cual se utilizara
colocndola en una tira reactiva la cual indica la cantidad de glucosa que
contiene la sangre y pudiendo llegar as a determinar la concentracin de
glucosa en suero normal y patolgico. Entonces al primer tubo le
agregamos 10l de agua (HO); al segundo tubo 10 l de solucin
estndar; al tercer tubo 10l de suero normal y el cuarto tubo 10l de
suero patolgico. Adems a cada uno de estos tubos luego se les
incorpor 1ml de reactivo. Vale recordar que dicho reactivo es el
denominado complejo enzimtico (GOD-PAP).
Dicho mtodo permite la cuantificacin de la glucosa srica mediante las
siguientes reacciones enzimticas:

Previamente incubamos los tubos 10 minutos a temperatura


ambiente.

Las muestras que poseamos a temperatura ambiente se


procedieron a cargar en cubetas de plstico de 1,5ml para llevarlas al
espectrofotmetro previamente ajustado a 510 nm.

Una vez entregado


el % de absorbancia analizaremos y
discutiremos los resultados obtenidos.

RESULTADOS
1) Preparamos los 4 tubos con las concentraciones respectivas :

Tubo 1

tubo 2

tubo3

tubo4

Tabla 1:
Tubo
blanco
HO
10l
Estndar
glucosa
-------(100mg/dl)
Suero
-------normal
Suero
patolgico
-------Reactivo

1ml

Tubo
estndar
-------10l
--------------1ml

Tubo
suero
normal
--------------10l
-------1ml

Tubo
suero
patolgico
---------------------10l
1ml

2) Incubamos los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente y


introducimos al espectrofotmetro previamente ajustado a 510nm
dando como resultado las siguientes observancias:

Tubo

T%

Absorbancia

82,7

0,083

42,7

0,370

45,3

0,344

46,2

0,336

Clculo de concentracin:
Glicemia (mg/dL) = Absorbancia de la muestra x 100
Absorbancia del Estndar
Donde:

Absorbancia de la muestra: Abs. de cada tubo Abs. tubo blanco


Absorbencia del Estndar: Abs. tubo estndar Abs. tubo blanco

Tubo 1:
Glicemia (mg/dL) = (0)x 100=
0,287

0 mg/dL

Tubo 2:
Glicemia (mg/dL) = (0,287) x 100= 100 mg/dL
0,287

Tubo 3:
Glicemia (mg/dL) = (0,261) x 100= 90,9 mg/dL
0,287

Tubo 4:
Glicemia (mg/dL) = (0,253) x 100= 88,2 mg/dL
0,287

DISCUSIN

-La glicemia se determin por el mtodo de GOD-PAP (prueba


enzimtica colorimtrica por glucosa) a muestras de suero normal y
patolgico; arrojando un valor de 90,9mg/dL y 88,2mg/dL
respectivamente. Lo que demuestra q tanto el suero normal como el
patolgico se encuentran dentro de un rango normal a lo establecido por
los valores de referencia (76-110 mg/dL) previamente informados.
-Mediante el mtodo de qumica seca un alumno integrante del grupo
procedi a realizarse el examen que determinara su glicemia capilar
obteniendo un valor de 91mg/dL, lo cual se considera finalmente como
normal.
-Glicemia es la medida de la cantidad de glucosa (azcar) presente en
la
sangre
en
mg/dL.
Los valores normales para los mtodos descritos en el presente prctico
oscilan entre 70-110 mg/dL.
Entre las patologas relacionadas con la glicemia se encuentran, la
hiperglicemia, la cual se define como un alza de glucosa en la sangre en
ms de 180 mg/dL. La causa principal de hiperglicemia es la Diabetes
mellitus, la cual es un desorden metablico crnico caracterizado por
niveles elevados de glucosa en la sangre, como consecuencia de una
alteracin
y/o
accin
de
la
insulina.
-Respecto al mtodo de anlisis utilizado en este prctico es colorimtrico
enzimtico el experimento realizado, porque no estamos agregando
exteriormente cualquier molcula o parte de una molcula responsable
por el color del material, es decir, un cromforo, el cual le da dicha
propiedad. Ms bien, mediante reacciones enzimticas, molculas que
no poseen la propiedad de absorber luz, logran cumplir la funcin.
-Hay una diferencia claramente destacable entre el mtodo colorimtrico
enzimtico realizado en el prctico anterior mtodo de Biuret, al cual le
aadimos sulfato cprico -CuSO4- (un cromforo) que le da la propiedad
de absorber luz, y en consecuencia, en este prctico mediante reacciones
enzimticas, se obtiene una propiedad de absorbancia en la muestra
obtenida.

-La concentracin de la glucosa (sustrato), en relacin al Km de la enzima


es directamente proporcional al producto final detectado (compuesto
coloreado quinoneimina). As es posible determinar la concentracin del
sustrato, mediante la presencia de absorbancia.
-Con relacin a la velocidad de reacciones enzimticas, descrita por la
cintica de Michaelis-Menten, nos dice concretamente que a mayor
Concentracin de sustrato, se trabaja en la parte superior de la curva, y a
menor concentracin de sustrato, se trabaja en la parte inferior. Por otro
lado, y si la concentracin de sustrato es infinita se trabaja a una Vmx.
Por lo tanto, los sitios activos de la enzima estn saturados con sustrato a
causa de que se est trabajando a un nivel mximo.
-El producto que absorbe a la longitud de onda y que presenta una
mxima absorbancia de 510nm, es el compuesto coloreado quinoneimina.
-El uso de enzimas como herramientas para la determinacin de
sustratos, es con el fin de dar la propiedad de absorber luz a molculas
que se deseen medir, y una de esas formas es mediante reacciones
enzimticas que producen cambios bioqumicos de gran importancia en
las molculas para que presenten una absorbancia debidamente
realizada.
-La base de un clculo en la concentracin de un sustrato (glicemia),
mediante una reaccin colorimtrica enzimtica, utilizando un estndar
de concentracin previamente vista se realiza con el fin de obtener los
valores de la concentracin de glucosa de la muestra (glicemia
(mg/dl)).Con lo cual mediante una relacin de proporcionalidad se debe
obtener primero la absorbancia de la muestra (de cada tubo) y la
absorbancia del tubo estndar de concentracin conocida.

CONCLUSIN

Para concluir es importante recordar que la glicemia se defina como el


valor de los niveles de azcares presentes en la sangre, estos azcares
provienen de los alimentos que ingerimos, particularmente
carbohidratos. Estas concentraciones pueden ser niveladas por diversos
factores como las hormonas. Los hidratos de carbono tambin sern
utilizados por el organismo como una de las principales fuentes de
energa, demostrando la reaccin enzimtica a las cuales fue expuesta
nuestra muestra de sangre, para observar la glicemia tanto en suero
patolgico como normal.
Como resultado de la tcnica de espectrofotometra, la solucin de suero
normal presentaba una concentracin de absorbancia mayor que las otras
soluciones; adems conocemos el mtodo de qumica seca que permite
mediante el mismo proceso de reaccin enzimtica obtener valores de
glicemia.
El dficit de glucosa en el organismo puede causar distintas patologas
como es el caso de la Diabetes mellitus, enfermedad crnica que afecta a
gran parte de la poblacin, la cual, consiste en una incapacidad del
pncreas para producir una hormona llamada insulina. Otra patologa es
la hiperglucemia que es el aumento de glucosa en la sangre,
encontrndose por sobre de los valores normales 70-110mg/dL y llegando
en ayunas a 126 mg/dL. Entre las causas tenemos, enfermedades
cardacas, trastornos de nutricin y digestivos, medicacin, etc; siendo su
contrario la hipoglucemia, que es la disminucin de este azcar en la
sangre. El mtodo comnmente realizado que permite conocer
inmediatamente los posibles valores de glicemia, es la tcnica de
qumica seca.

BIBLIOGRAFA

http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/glicem
ia.htm
Guas de trabajos prcticos BIOQUIMICA, Tecnologa
Mdica 2012
http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=s003498872006000900009&script=sci_arttext
http://www.biologia.edu.ar/macromoleculas/azucar.htm
http://www.bioacademia.com.mx/miembros/tecnologia/00
09.html

Das könnte Ihnen auch gefallen