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Protenas

INTRODUCCION

Las protenas son compuestos qumicos muy complejos que se encuentran en todas las clulas vivas: en la sangre, en la leche, en los huevos y en toda clase de semillas y plenes. Hay ciertos elementos qumicos que todas ellas poseen, pero los diversos tipos de protenas los contienen en diferentes cantidades. En todas se encuentran un alto porcentaje de nitrgeno, as como de oxgeno, hidrgeno y carbono. En la mayor parte de ellas existe azufre, y en algunas fsforo y hierro. Las protenas son sustancias complejas, formadas por la unin de ciertas sustancias ms simples llamadas aminocidos, que los vegetales sintetizan a partir de los nitratos y las sales amoniacales del suelo. Los animales herbvoros reciben sus protenas de las plantas; el hombre puede obtenerlas de las plantas o de los animales, pero las protenas de origen animal son de mayor valor nutritivo que las vegetales. Esto se debe a que, de los aminocidos que se conocen, que son veinticuatro, hay nueve que son imprescindibles para la vida, y es en las protenas animales donde stas se encuentran en mayor cantidad.

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UNAC Facultad de Ingeniera Qumica OBJETIVO Reconocer la importancia de las protenas. Reconocer mediante las reacciones, anillos bencnicos Reconocer mediante las reacciones, los grupos fenilicos.

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FUNDAMENTO TEORICO Las protenas son macromolculas formadas por cadenas lineales de aminocidos. Las protenas desempean un papel fundamental en los seres vivos y son las biomolculas ms verstiles y ms diversas. Realizan una enorme cantidad de funciones diferentes, entre las que destacan:

estructural (colgeno y queratina), reguladora (insulina y hormona del crecimiento), transportadora (hemoglobina), defensiva (anticuerpos), enzimtica, contrctil (actina y miosina).

Las protenas de todo ser vivo estn determinadas mayoritariamente por su gentica (con excepcin de algunos pptidos antimicrobianos de sntesis no ribosomal), es decir, la informacin gentica determina en gran medida qu protenas tiene una clula, un tejido y un organismo. Las protenas se sintetizan dependiendo de cmo se encuentren regulados los genes que las codifican. Por lo tanto, son suceptibles a seales o factores externos. El conjunto de las protenas expresadas en una circunstancia determinada es denominado proteoma.

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UNAC Facultad de Ingeniera Qumica CARACTERSTICAS

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Las protenas son macromolculas; son biopolmeros, es decir, estn constituidas por gran nmero de unidades estructurales simples repetitivas (monmeros). Debido a su gran tamao, cuando estas molculas se dispersan en un disolvente adecuado, forman siempre dispersiones coloidales, con caractersticas que las diferencian de las disoluciones de molculas ms pequeas. Por hidrlisis, las molculas de protena se escinden en numerosos compuestos relativamente simples, de masa pequea, que son las unidades fundamentales constituyentes de la macromolcula. Estas unidades son los aminocidos, de los cuales existen veinte especies diferentes y que se unen entre s mediante enlaces peptdicos. Cientos y miles de estos aminocidos pueden participar en la formacin de la gran molcula polimrica de una protena. Todas las protenas tienen carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno y casi todas poseen tambin azufre. Si bien hay ligeras variaciones en diferentes protenas, el contenido de nitrgeno representa, por trmino medio, 16% de la masa total de la molcula; es decir, cada 6,25 g de protena contienen 1 g de N. El factor 6,25 se utiliza para estimar la cantidad de protena existente en una muestra a partir de la medicin de N de la misma. La sntesis proteica es un proceso complejo cumplido por las clulas segn las directrices de la informacin suministrada por los genes. Las protenas son largas cadenas de aminocidos unidas por enlaces peptdicos entre el grupo carboxilo (-COOH) y el grupo amino (-NH 2) de residuos de aminocido adyacentes. La secuencia de aminocidos en una protena est codificada en su gen (una porcin de ADN) mediante el cdigo gentico. Aunque este cdigo gentico especifica los 20 aminocidos "estndar" ms la selenocistena y en ciertos Archaea la pirrolisina, los residuos en una protena sufren a veces modificaciones

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qumicas en la modificacin postraduccional: antes de que la protena sea funcional en la clula, o como parte de mecanismos de control. Las protenas tambin pueden trabajar juntas para cumplir una funcin particular, a menudo asocindose para formar complejos proteicos estables. LOS AMINOCIDOS. QUE SON LOS AMINOCIDOS? Son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce. Los aminocidos se caracterizan por poseer un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (-NH2). Los aminocidos son las unidades elementales constitutivas de las molculas denominadas Protenas. Son pues, y en un muy elemental smil, los "ladrillos" con los cuales el organismo reconstituye permanentemente sus protenas especficas

consumidas por la sola accin de vivir. Los alimentos que ingerimos nos proveen protenas. Pero tales protenas no se absorben normalmente en tal constitucin sino que, luego de su desdoblamiento ("hidrlisis" o rotura), causado por el proceso de digestin, atraviesan la pared intestinal en forma de aminocidos y cadenas cortas de ppticos. Esas sustancias se incorporan inicialmente al torrente sanguneo y, desde all, son distribuidas hacia los tejidos que las necesitan para formar las protenas, consumidas durante el ciclo vital. Se sabe que de los 20 aminocidos proteicos conocidos, 8 resultan indispensables (o esenciales) para la vida humana y 2 resultan "semiindispensables". Son estos 10 aminocidos los que requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana alimentacin y, con ms razn, en los momentos en que el organismo ms los necesita: en la disfuncin o enfermedad. Los aminocidos esenciales ms problemticos son el

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triptfano, la lisina y la metionina. Es tpica su carencia en poblaciones en las que los cereales o los tubrculos constituyen la base de la alimentacin. El dficit de aminocidos esenciales afectan mucho ms a los nios que a los adultos. Hay que destacar que, si falta uno solo de ellos (aminocido esencial) no ser posible sintetizar ninguna de las protenas en la que sea requerido dicho aminocido. Esto puede dar lugar a diferentes tipos de desnutricin, segn cual sea el aminocido limitante. En esta imagen puede verse la frmula de los 20 aminocidos ms importantes, en color negro la parte comn, mientras que en color azul puede verse la parte variable, que da a los aminocidos distinto comportamiento.

LOS

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PPTIDOS Y EL ENLACE PEPTDICO. Los ppticos estn formados por la unin de aminocidos mediante un enlace peptdico. Es un enlace covalente que se establece entre el grupo carboxilo de un aminocido y el grupo amino del siguiente, dando lugar al desprendimiento de una molcula de agua. As pues, para formar pptidos los aminocidos se van enlazando entre s formando cadenas de longitud y secuencia variable. Para denominar a estas cadenas se utilizan prefijos convencionales como:

Oligopptidos.- Si el n de aminocidos es menor de 10. Dipptidos.- Si el n de aminocidos es 2. Tripptidos.- Si el n de aminocidos es 3. Tetrapptidos.- Si el n de aminocidos es 4. etc... Poli pptidos o cadenas polipeptdicas.- si el n de aminocidos es mayor de 10. Cada pptido o poli pptido se suele escribir, convencionalmente, de izquierda a derecha, empezando por el extremo N-terminal que posee un grupo amino libre y finalizando por el extremo C-terminal en el que se encuentra un grupo carboxilo libre, de tal manera que el eje o esqueleto del pptido, formado por una unidad de seis tomos (-NH-CH-CO-), es idntico a todos ellos. Lo que vara de unos ppticos a otros, y por extensin, de unas protenas a otras, es el nmero, la naturaleza y el orden o secuencia de sus aminocidos.

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Si la hidrlisis de una protena produce nicamente aminocidos, la protena se denomina simple. Si, en cambio, produce otros compuestos orgnicos o inorgnicos, denominados grupo prosttico, la protena se llama conjugada. ESTRUCTURA

Estructura primaria

La estructura primaria de las protenas viene determinada por la secuencia de aminocidos en la cadena proteica, es decir, el nmero de aminocidos presentes y el orden en que estn enlazados. La conformacin espacial de una protena se analiza en trminos de estructura secundaria (cuando ciertas fuerzas de atraccin causan que la molcula se pliegue) y estructura terciaria (si la molcula se vuelve ms compacta). La asociacin de varias cadenas polipeptdicas origina un nivel superior de organizacin, la llamada estructura cuaternaria. Las cadenas laterales de aminocidos emergen a partir de una cadena principal. Por convencin, el orden de escritura es siempre desde el grupo amino-terminal hasta el carboxilo final. Por qu conocer la estructura primaria de las protenas Conocer la estructura primaria de una protena no solo es importante para entender su funcin (ya que sta depende de la secuencia de aminocidos y de la forma que adopte), sino tambin en el estudio de enfermedades genticas. Es posible que el origen de una enfermedad gentica radique en una secuencia anormal. Esta anomala, si es severa, podra resultar en que la funcin de la protena no se ejecute de manera adecuada o, incluso, en que no se ejecute en lo absoluto.

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Estructura secundaria estructura secundaria de las protenas es el

La

plegamiento que la cadena polipeptdica adopta gracias a la formacin de enlaces de hidrgeno entre los tomos que forman el enlace peptdico. Los puentes de hidrgeno se establecen entre los estables. Nivel de dominio Nivel de dominio de las protenas, se define como una unidad compacta, de caractersticas globulares, que suele comprender entre 30-150 aminocidos y se considera que esta conformacin est determinada por la secuencia de aminocidos. Es una ordenacin de fragmentos de estructura secundaria en una estructura terciaria y se estabiliza por enlaces de hidrgeno entre cadenas. A partir del nivel de dominio slo las hay globulares

Estructura terciaria

La estructura terciaria de las protenas es el modo en el que la cadena polipeptdica se pliega en el espacio. Es la disposicin de los dominios en el espacio. La estructura terciaria se realiza de manera que los aminocidos apolares se sitan hacia el interior y los polares hacia el exterior. Fuerzas que estabilizan la estructura terciaria La estructura terciaria de las protenas est estabilizada por enlaces covalentes entre Cys, puentes de hidrgeno entre cadenas laterales,

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interacciones inicas entre cadenas laterales, interacciones de van der Waals entre cadenas laterales y el efecto hidrfobo (exclusin de las molculas de agua, evitando su contacto con los residuos hidrfobos, que quedan empaquetados en el interior de la estructura). Estructura cuaternaria En cuanto a los niveles de la estructura de las protenas, la estructura cuaternaria es la disposicin espacial de las distintas cadenas polipeptdicas de una protena multimrica, es decir, compuesta por varios ppticos. Comprende la gama de protenas oligomricas, es decir aquellas protenas que constan con ms de una cadena polipptida, en la cual adems puede existir un comportamiento de alosterismo segn el mtodo concertado de Jacques Monod. La estructura cuaternaria deriva de la conjuncin de varias cadenas peptdicas que, asociadas, conforman un ente, un multmero, que posee propiedades distintas a la de sus monmeros componentes. Dichas sub unidades se asocian entre s mediante interacciones no covalentes, como pueden ser puentes de hidrgeno, interacciones hidrofbicas o puentes salinos. Para el caso de una protena constituida por dos monmeros, un dmero, ste puede ser un homodmero, si los monmeros constituyentes son iguales, o un heterodmero, si no lo son. En cuanto a uniones covalentes, tambin pueden existir uniones tipo puente disulfuro entre residuos de cistena situados en cadenas distintas.

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I.

MATERIALES Y REACTIVOS Reactivos

- Casena - Acido ntrico - Albumina - Reactivo de Fehling - Reactivo de Milln - Hidrxido de amonio - Sulfato de cobre - Nitrato de plata Materiales - Vaso precipitado - Pipeta - Tubos de ensayo - Gradilla

II.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL: a. Partimos un huevo y slo la clara de huevo (albmina) la colocamos en un vaso de precipitado. b. Luego preparamos nuestra muestra problema agregando agua destilada a la clara de huevo que se encuentra en el vaso de precipitado y homogenizamos con una bagueta. c. Hacemos los pasos a y b pero esta vez con la leche (casena).

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1. REACCIN DEL AgNO3 CON:

A. La albmina de huevo: En un tubo de ensayo agregamos una pequea alcuota de la albmina de huevo. Aadimos 2 ml. aproximadamente de solucin de AgNO3. Luego lo llevamos a calentar al bao Mara por unos minutos. Observar lo que sucede.

REACCIN QUMICA:

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Conclusin: observamos la formacin de un precipitado blanquecino. B. La casena de la leche: En un tubo de ensayo agregamos una pequea alcuota de la casena de la leche. Aadimos 2ml. aproximadamente de solucin de AgNO3. Luego lo llevamos a calentar al bao Mara por unos minutos. Observar lo que sucede. REACCIN QUMICA:

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Conclusin: observamos la formacin de un precipitado amarillento. 2. REACCIN DEL CuSO4 :

A. Con la albmina de huevo: En un tubo de ensayo agregamos una pequea alcuota de la albmina de huevo. Aadimos 2 ml. aproximadamente de solucin de CuSO4. Luego lo llevamos a calentar al bao Mara por unos minutos. Observar lo que sucede. REACCIN QUMICA:

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Conclusin: observamos la formacin de un precipitado de color celeste claro D. Con la casena de la leche: En un tubo de ensayo agregamos una pequea alcuota de la casena de la leche. Aadimos 2cc. aproximadamente de solucin de AgNO3. Luego lo llevamos a calentar al bao Mara por unos minutos. Observar lo que sucede. REACCIN QUMICA:

Conclusin: observamos la formacin de un precipitado de color verde claro. 3. REACCION DE BIURET El reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de compuestos con dos o ms enlaces peptdico.

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Est hecho de hidrxido sdico (NaOH) y sulfato cprico (CuSO4), junto con tartrato de sodio y potasio (KNaC4O64H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de protenas. A. Con la albmina de huevo En un tubo de ensayo agregar aprox. 2 ml. de albumina (clara de huevo). Agregar 2ml de reactivo de fehling. Reaccin con albmina:

Observacin: La clara de huevo (incolora) ms el reactivo de fehling (azul), cambian a una coloracin violeta, lo que determina la presencia de protenas. B. Con la casena de la leche:

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UNAC Facultad de Ingeniera Qumica huevo). Agregar 2ml de reactivo de fehling

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En un tubo de ensayo agregar aprox. 2 ml. de casena (clara de

Reaccin con casena:

Observacin: La leche (blanca) ms el reactivo de fehling (azul), cambian a una coloracin violeta, lo que determina la presencia de protenas.

3. REACCION XANTOPROTEICA: Es un mtodo que se puede utilizar para determinar la cantidad de protena soluble en una solucin, empleando cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos aromticos, especialmente en presencia de tirosina. Laboratorio de orgnica II

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Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali, se torna color amarillo oscuro. Segn las guas qumicas es una reaccin cualitativa, ms no cuantitativa. Por ende determina la presencia o no de protenas. Para cuantificar se usa otra reaccin, como la de Biuret, y se hace un anlisis espectro fotomtrico. A. Con la albmina de huevo Colocar en dos tubos de ensayo 2 ml de clara de huevo. Aadir a ambos tubos 1 ml de HNO3. A continuacion aadir 1 ml de NaOH Llevar a calentar a bao Mara por unos minutos.

Reaccin con albmina:

Conclusin: Albmina produce una coloracin amarilla en el precipitado.

B. Con la casena de la leche Colocar en dos tubos de ensayo 2 ml una alcuota de leche. Aadir a ambos tubos 1 ml de HNO3. A continuacion aadir 1 ml de NaOH Llevar a calentar a bao Mara por unos minutos.

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UNAC Facultad de Ingeniera Qumica Reaccin con casena:

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Conclusin: Casena da como producto una coloracin amarilla al precipitado 4. REACCION DE MILLON: Reconoce residuos fenlicos, o sea aquellas protenas que contengan tirosina. Las protenas se precipitan por accin de los cidos inorgnicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente rojo al calentar. A. Con la albmina de huevo En dos tubos de ensayo colocar 2 ml de clara de huevo(albmina) Aadir en cada tubo respectivamente 1 ml del reactivo de Millon Llevar a calentar por medio del bao Maria.

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Conclusin: Casena aparece un ppdo rosado en una solucin amarilla claro, lo cual indica presencia de grupos fenolicos. B. Con la casena de la leche En dos tubos de ensayo colocar 2 ml una alcuota de leche. Aadir en cada tubo respectivamente 1 ml del reactivo de Milln Llevar a calentar por medio del bao Maria.

Reaccin con casena:

Conclusin: Albmina se observa una solucin amarilla, el cual indica que no hay presencia de grupos fenolitos.

III.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Conclusiones Al tener las respectivas soluciones de albumina y casena, se puede observar que las protenas no forman soluciones verdaderas, sino soluciones coloidales. No dializan, presentan el fenmeno de Tyndall.

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Al calentar las muestras dadas con el reactivo de Fehling se forma una coloracin morada, en este caso esta coloracin nos muestra la presencia de protenas, este reactivo es empleado para la identificacin o reconocimiento de protenas. Al tratar la protena dada con HNO3, se forma una coloracin amarilla que por accin del calor y del NH4, pasa a naranja, esto nos demuestra la presencia de anillos bencnicos en la protena. Al tratar la protena dada con el reactivo de milln, se forma un precipitado blanco, que por accin del calor toma un color rojo, flor de durazno, de aspecto esponjoso y ms liviano que la solucin; esto nos demuestra la presencia de grupos fenlicos en la protena. La precipitacin de la protena ha tenido por resultado efectuar un cambio en estado fsico de la protena, es una reaccin reversible, esto se observa cuando se agrega agua al precipitado formado, este se disuelve dando una solucin que presenta las mismas propiedades que la solucin de protena dada En la coagulacin se ha producido un cambio en el estado fsico y en la constitucin qumica, es por esto que la reaccin es irreversible, esto se observa al hacer calentar la solucin de protena, se forma un precipitado que por accin del H2O no se disuelve, el calor coagulo la protena.

Recomendaciones Lavar y secar bien los tubos de ensayo con los cuales se trabajara pasa evitar cualquier impureza que pueda afectar el anlisis. Cuidar los materiales de laboratorio, evitar romperlos o deteriorarlos.

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Manipular con cuidado los reactivos correspondientes en cada mtodo de reconocimiento, usar las respectivas pipetas y no confundirlas porque se contaminaran los reactivos. Cuidar y repartir la muestra adecuadamente para realizar todos los ensayos correspondientes. Al momento de calentar los tubos de ensayo, es preferible que estos sean prex, de lo contrario, tener mucho cuidado puesto que podra ocurrir una explosin. Finalmente dejar el rea de trabajo limpia y entregar los materiales utilizados al encargado del laboratorio.

ANEXO: DESNATURALIZACIN DE UNA PROTENA Desnaturalizacin irreversible de la protena de la clara de huevo y prdida de solubilidad, causadas por la alta temperatura (mientras se la fre). Las protenas se desnaturalizan cuando pierden su estructura tridimensional (conformacin qumica) y as el caracterstico plegamiento de su estructura. Cmo la desnaturalizacin afecta a los distintos niveles En la desnaturalizacin de la estructura cuaternaria, las sub unidades de protenas se separan o su posicin espacial se corrompen. La desnaturalizacin de la estructura terciaria implica la interrupcin de: Enlaces covalentes entre las cadenas laterales de los aminocidos (como los puentes disulfuros entre las cistenas). Enlaces no covalentes dipolo-dipolo entre cadenas laterales polares de aminocidos.

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Enlaces dipolo inducidos por fuerzas de Van Der Waals entre cadenas laterales no polares de aminocidos. En la desnaturalizacin de la estructura secundaria las protenas pierden todos los patrones de repeticin regulares como las hlices alfa y adoptan formas aleatorias.

La estructura primaria, la secuencia de aminocidos ligados por enlaces peptdicos, no es interrumpida por la desnaturalizacin.

Prdida de funcin La mayora de las protenas pierden su funcin biolgica cuando estn desnaturalizadas, por ejemplo, las enzimas pierden su actividad cataltica, porque los sustratos no pueden unirse ms al centro activo, y porque los residuos del aminocido implicados en la estabilizacin de los sustratos no estn posicionados para hacerlo. Reversibilidad e irreversibilidad En muchas protenas la desnaturalizacion no es reversible; esto depende del grado de modificacin de las estructuras de la protena.Aunque se ha podido revertir procesos de desnaturalizacin quitando el agente desnaturalizante, en un proceso que puede tardar varias horas incluso das; esto se debe a que el proceso de reestructuracin de la protena es tentativo, es decir, no asume su forma original inmediatamente, as muchas veces se obtienen protenas distintas a la inicial, adems con otras caractersticas como insolubilidad (debido a los agregados polares que puedan unirsele). Recientemente se ha descubierto que, para una correcta renaturalizacin, es necesario agregar trazas del agente desnaturalizante. Esto fue importante histricamente, porque condujo a la nocin de que toda la informacin necesaria para que la protena adopte su forma nativa se encuentra en la estructura primaria de la protena, y por lo tanto en el ADN que la codifica.

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UNAC Facultad de Ingeniera Qumica Algunos ejemplos comunes Cuando se cocina el alimento, algunas de sus

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protenas

se

desnaturalizan. Esta es la razn por la cual los huevos hervidos llegan a ser duros y la carne cocinada llega a ser firme. Un ejemplo clsico de desnaturalizacin de protenas se da en la clara de los huevos, que son en gran parte albminas en agua. En los huevos frescos, la clara es transparente y lquida; pero al cocinarse se torna opaca y blanca, formando una masa slida intercomunicada. Esa misma desnaturalizacin puede producirse a travs de una desnaturalizacin qumica, por ejemplo volcndola en un recipiente con acetona. Otro ejemplo es la nata (nombre que proviene de la desnaturalizacin), que se produce por calentamiento de la lactoalbmina de la leche (y que no tiene nada que ver con la crema) La protena de la leche se llama casena y se desnaturaliza cuando el pH de la leche se modifica. Esto se le conoce en lo cotidiano Se corto la leche. La casena se desnaturaliza cuando le agregas a un vaso con leche suficiente jugo de limn para modificar el pH de la leche. Desnaturalizacin de cidos nucleicos La desnaturalizacin de cidos nucleicos como el ADN por altas temperaturas produce una separacin de la doble hlice, que ocurre porque los enlaces o puentes de hidrgeno se rompen. Esto puede ocurrir durante la reaccin en cadena de la polimerasa; las cadenas del cido nucleico vuelven a unirse (renaturalizarse) una vez que las condiciones "normales" se restauran. Si las condiciones son restauradas rpidamente, las cadenas pueden no alinearse correctamente. Factores desnaturalizantes Los agentes que provocan la desnaturalizacin de una protena se llaman agentes desnaturalizantes. Se distinguen agentes fsicos (calor) y qumicos (detergentes, disolventes orgnicos, pH, fuerza inica). Como en

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algunos casos el fenmeno de la desnaturalizacin es reversible, es posible precipitar protenas de manera selectiva mediante cambios en: 1. 2. 3. 4. la polaridad del disolvente, la fuerza inica, el pH, la temperatura.

Efecto de la polaridad del disolvente sobre la estructura de las protenas La polaridad del disolvente disminuye cuando se le aaden sustancias menos polares que el agua como el etanol o la acetona. Con ello disminuye el grado de hidratacin de los grupos inicos superficiales de la molcula proteica, provocando la agregacin y precipitacin. Los disolventes orgnicos interaccionan con el interior hidrfobo de las protenas y desorganizan la estructura terciaria, provocando su desnaturalizacin y precipitacin. La accin de los detergentes es similar a la de los disolventes orgnicos. Efecto del pH sobre la estructura de las protenas Los iones H+ y OH- del agua provocan efectos parecidos, pero adems de afectar a la envoltura acuosa de las protenas tambin afectan a la carga elctrica de los grupos cidos y bsicos de las cadenas laterales de los aminocidos. Esta alteracin de la carga superficial de las protenas elimina las interacciones electrostticas que estabilizan la estructura terciaria y a menudo provoca su precipitacin. La solubilidad de una protena es mnima en su punto isoelctrico, ya que su carga neta es cero y desaparece cualquier fuerza de repulsin electrosttica que pudiera dificultar la formacin de agregados. Efecto de la temperatura sobre la estructura de las protenas Cuando la temperatura es elevada aumenta la energa cintica de las molculas con lo que se desorganiza la envoltura acuosa de las protenas,

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y se desnaturalizan. Asimismo, un aumento de la temperatura destruye las interacciones dbiles y desorganiza la estructura de la protena, de forma que el interior hidrfobo interacciona con el medio acuoso y se produce la agregacin y precipitacin de la protena desnaturalizada. Reacciones de reconocimiento Reaccin de Biuret El reactivo de Biuret est formado por una disolucin de sulfato de cobre en medio alcalino, este reconoce el enlace peptdico de las protenas mediante la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos, lo que produce una coloracin rojovioleta.

Reaccin de Millon

Reconoce residuos fenlicos, o sea aquellas protenas que contengan tirosina. Las protenas se precipitan por accin de los cidos inorgnicos fuertes del reactivo, dando un precipitado blanco que se vuelve gradualmente rojo al calentar.

Reaccin xantoproteica

La reaccin xantoproteica es un mtodo que se puede utilizar para determinar la cantidad de protena soluble en una solucin, empleando cido ntrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas protenas con aminocidos portadores de grupos aromticos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un lcali, se torna color amarillo oscuro. Segn las guas qumicas es una reaccin cualitativa, ms no cuantitativa. Por ende determina la presencia o no de protenas. Para cuantificar se usa otra reacccin, como la de Biuret, y se hace un anlisis espectro fotomtrico.

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IV.

BIBLIOGRAFIA

Rakoff, H; Rose N, C. Qumica Orgnica fundamental. Mxico 1980. Wingrove A.S.; R.E. Caret. Qumica Orgnica Mxico 1984 Qumica Orgnica G. Devore, Muoz MENA Qumica Orgnica Morrison y Boyd lo vi

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