Mecanismo Moleculares de la resistencia a metales.

La resistencia a metales tal vez se origino de la evolucion de mecanismo geneticos mas basicos que permitian la adquisiscion y exportacion de metales o iones, necesarios para la celula, por ejemplo ciertos iones ejercen un funciones cataliticas, como micronutrientes, cofactores enzimaticos o pueden estabilizar estructuras proteicas, pero a concentraciones superiores ejercen efectos citotoxicos, por lo que la evolucion de mecanismos moleculares que controlen y estabilicen la concentracion requerida responde a la necesidad de la homeostasis celular . Los metales pesados son mutrientes traza para algunas bacterias, sn embargo en concentraciones altas, de micromoles o milimolares pueden generar una ambiente toxico, es por esto que varios tipos de bacterias han generado mecanismos moleculares que les permiten sobrevivir a este tipo de ambiente. [1, 1] La resistencia a metales es un mecanismo molecular que cofiere resistencia a este tipo de ambientes toxicos, existen tres mecanismos conocidos de resistencia a metales [1,2]. 1. disminucin de la acumulacin de determinado ion mediante su transporte activo fuera de la celula. 2. Segregacin de cationes por moleculas que contiene grupos tioles. 3. Reduccion de algunos iones metalicos pesados a un estado de oxidacin menos toxico. Los mecanismos 2 y 3 no pueden funcionar por si solos dentro de la celula, asi el metabolismo de metales pesados es llevado a cabo por un transporte activo fuera de la membraba o por una combinacion de mecanismos. Muchas celulas tienen dos tipos de sistemas captura de iones pesados, un sistema rapido comunmente dependiente de gradientes quimiosmoticos a traves de la membrana celular y otro sistema de captura qeue posee una gran sesibilidad por el sustrato y es dependiente de ATP el cual solo se activa en la celula cuando hay condiciones nutricionales desfavorables o en alguna situacin metabolica especial. Los cationes metalicos Co(II), Ni(II), Zn(II) y Mn(II) se acumulan rapida einespecificamente a traves del sistema de captura de magnesio CorA, el cual es un sistema inorganico de transporte de iones metalicos en las bacterias Gram negativas, Arqueas y Saccharomyces, ademas de sistema de trasnporte especificos como ATPasas tipo P para trasnporte de magensio que son inducibles, transportadores ABC para el Mn(II), el Zn(II) y el Ni(II) y transportadores quimiosmoticos especificos y lentos de la familia HoxN para el Ni(II) y el Co(II)[1]. Estas caracteristicas especiales de algunos organismos hace de interes su estudio ya que estos genes y sus mecanismos moleculares pueden ser aprovechados por la biotecnologia para distintas actividades como, bioremediacin, biomineria y bioconversiones aplicados a procesos industriales que requieran estas caracteristicas, en la bioremediacin se ha propuesto el uso de hongos acidofilos para secuestrar iones de Cr(III) procedente de insdustrias curtidoras [amils et.al.], en biomineria se ha propuesto el uso de la lixivacin microbiana para extraer metales de interes de las rocas que los contiene este proceso es llevado a cabo por comunidades microbianas acidofilas como los generos Acidithiobacillus, Leptospirillum y Acidiphilium[Campos, 2005]. Es por esta razon que el estudio de los mecanismos moleculares implicados, tanto a niveles de genetica, proteomica y metabolomica ayudaria a comprender mejor y eficientar los procesos biotecnologicos.

En el estudio de la genetica de resistencia a metales pesados, ya se han identificado genes de resistencia a metales pesados en Bacterias, Ecuariotas y Arqueas, especialmente en bacterias y organismos extremofilos que viven en ambientes con altas concentraciones de matales y condiciones extremas. Un ejemplo de la variedad de genes encontrados que codifican para estos mecanismos Acinobacter baumanii ATCC 17978 posee 74 genes de resistencia potenciales, incluyendo 32 genes que codifican para bombas de eflujo o expulsin, 11 genes para permeasas y 26 genes que codifican para protenas de resistencia a metales pesados [Rodrguez , 2010], en este caso los autores utilizaron mutagenesis dirigida para identificar los genes de interes modificando el genoma de A. baumanii en sitios especififcos, en otros casos se ha identificado que en bacterias por lo regular los genes que codifican para la resistencia a metales se encuentran en plasmidos, transposones o en ambos, hasta el momento se han descrito genes de resitencia a plata, arsenico, cadmio, cromo, cobre, mercurio, niquel, plomo, antimonio y cinc, localizados en plasmidos [Marrero-Coto, 2009], estos allasgos son importantes ya que los plasmidos confieren resistencia a elevadas concentraciones de metales y pueden moverse facielmente de una celula a otra por medio de transmision horizontal, lo cual contribuye a la adaptacin de las comunidades bacterianas ante ambientes contaminados, algunos de los genes identificados como procedentes de plasmidos y transposones los cita Marrero-Coto et. al. En Mecanismos moleculares de la resistencia a metales pesados en las bacterias y sus aplicaciones en biorremediacin [anexo 1], en esta tabla se pueden observar la ubiacion del gen, la cepa bacteriana, el metal al que confiere resistecia asi como el determinante genetico, devido a la importancia de estos genes se han creado librerias genomicas para su consrvacin, L. Callahan et. al. Utilizo extrajo un fragmento de 3kb de un gen de levadura de una biblioteca genomica contenida en el plasmido YEp351 que posteriormente se utilizo para conferir resitencia a cadmio a la cepa de Saccharomyces cerevisiae MW3070-8B. Ademas de las aplicaciones utilizadas en bacterias se han utilizado estos genes de resistencia para conferir estos rasgos a plantas, el pricipal interes en conferir estas caracteristcas es la fitoremediacion de zonas contaminadas, ya que es mas facil y viable el uso de plantas superiores para su uso en bioremediacin, por ejemplo el uso de Agrobacterium para la modificacin genetica por medio de la insercin de plasmidos de resistencia a metales fue utilizada para conferir resistencia de cromo a Arabidopsis taboedae por medio de la insercion del gen de ineteres Atcys-3A en el plasmido pBI121 con el uso del virus del mosaico de la coliflor CaMV y su posterior insercion en Agrobacterium, la sobrexpresin del gen se obtuvo de la expresion del promotor 35S del CaMV de forma constitutiva en las hojas de las plantas [Domnguez Solis, 2001]. Sin embargo en la practica resulta mas complicado el manejo de los organismos incluzo asegurar su comportamiento o superviviencia devido a que en ambientes con concentraciones altas de metales es comun encontrar mas un metal presente, lo que ocasiona efectos de estres antagonicos sinergicos, devido a esto se necesita mas informacion sobre la interaccion funcional de componentes celulares, mediante la combinacion de esudios de transcriptoma, proteomicos y de metabolomica, posilita la obtencion de una panoramica de las respuestas celulares a nivel organismo completo [Gutirrez , 2008]. Derivado de lo anterior puede hacerse una seleccion y manipulacion adecuada de genes de interes para mejorar caracteristicas particulares de los microorganismos, con fines biotecnologicos, por ejemplo la modificacion y sobreexprecion homologa de o heterologa, de genes de reductasas de Cr(VI) o de proteinas atrapadoras del ion, para mejorar la efciencia de absorbcion del ion y de la biosorcion , tambien la sobrexprecion de genes codificantes de proteinas antioxidantes puede mejorar la sobreviviencia al estres oxidativo al Cr(VI), incrementando la resistencia a este ion [Gutirrez , 2008], esta,s caracteristicas se pudieron implementar gracias a los estudios de transcriptoma,

proteomicos y de metabolomica llevados por el autor. En este contexto, la posibilidad de transferir genes de una especie a otra y patentar organismos vivos genticamente modificados con utilidad industrial ha posibilitado el crecimiento enorme de la biotecnologa y generado intereses comerciales con un amplio poder de empresas biotecnolgicas. Se define un organismo genticamente modificado o transgnico (OGM) como un organismo cuyo material gentico ha sido modificado de una manera que no se produce naturalmente en el apareamiento ni en la recombinacin naturala. Si por una parte las patentes de organismos genticamente modificados constituyen un incentivo para la investigacin e innovacin de formas de vida con propiedades nuevas, por otra genera el que se busque fundamentalmente intereses comerciales, sin darle la debida importancia a temas de sostenibilidad en agricultura y ganadera. En la reflexin biotica existe una considerable controversia en cuanto al valor de los transgnicos y en lo que pueden afectar al equilibrio ecolgico y a la biodiversidad. Tambin se cuestiona el que el valor intrnseco que tiene un ser vivo puede quedar afectado al ser sujeto de modificacin gentica. La aplicacin de los principios bioticos puede ayudar a tomar medidas sobre la racionalidad del uso de transgnicos y la necesidad de regulaciones que controlen su produccin en los pases []. De acuerdo al principio de no maleficencia el agente moral tiene el deber de no causar dao a terceros. Este principio se relaciona con el imperativo de respetar a todo ser vivo, incluido el ser humano, que pueda resultar daado por las acciones humanas. Es importante analizar los posibles riesgos de organismos genticamente modificados antes de ser liberados para uso comercial, como la valoracin de toxicidad o alergenicidad [Rodriguez Yunta, 2011].