Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias.

PERMEABILIDAD CELULAR La membrana celular es el lmite externo de la clula. Ayuda a la clula a darle fuerza mecnica y forma, adems de varias otras funciones. En particular, la membrana celular regula el pasaje de molculas dentro y fuera de la clula, de esta forma, es responsable de mantener la homeostasis celular. Estructura y funcin de la membrana celular La membrana celular es una doble capa de fosfolpidos en la cual las molculas de protena estn embebidas parcial o completamente. La doble capa de fosfolpidos tiene una consistencia fluda. Las protenas estn distribuidas por toda la membrana; por lo tanto forman un patrn de mosaico. Esta descripcin de la membrana celular es llamada el modelo de mosaico-fluido de la estructura de membrana. Doble capa de fosfolpidos: Elemento estructural Cada fosfolpido en la membrana tiene una cabeza polar (cargada) y dos colas no polares. Cuando se rodea de agua las molculas de fosfolpidos forman una bicapa en forma natural. Las cabezas, siendo polares, son atradas por el agua, la cual tambin es polar; por lo tanto, las cabezas estn hacia afuera. Las cabezas polares se dice que son hidroflicas. Las colas no polares no son atradas hacia el agua. Se encuentran hacia adentro, lejos del agua, y son hidrofbicas. Algunos de los lpidos en la porcin externa de la membrana celular son glicolpidos, que estn construdos en forma similar a los fosfolpidos pero la cabeza polar es una cadena de carbohidratos. Las membranas animales celulares, en particular, tambin contienen un nmero sustancial de molculas de colesterol. Estas molculas le dan estabilidad a la bicapa lipdica y previene una drstica disminucin de la fluidez a bajas temperaturas. Protenas de la membrana celular: Elementos funcionales La bicapa lipdica determina la estructura bsica de la membrana celular, sin embargo las variadas funciones de la membrana son llevadas a cabo por las protenas. Algunas protenas son glicoprotenas pues tienen adherida una cadena de carbohidratos en el lado externo de la membrana. Otras protenas se localizan en la superficie interna de la membrana, donde son mantenidas en su lugar por filamentos del citoesqueleto. Las protenas de la membrana tienen varias funciones. Existen protenas de reconocimiento

Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias. celular. Son glicoprotenas que son como las huellas digitales de la clula. Otras sirven de canales para transportar iones o molculas. Otras son transportadoras, pues se combinan con sustancias para llevarlas a travs de la membrana. Otras son receptoras, donde la protena posee una forma especfica que permite a una molcula particular adherirse; por ejemplo una hormona, y puede as influenciar el metabolismo celular. Los virus, antes de entrar a una clula deben adherir receptores antes de entrar a una clula. Otras protenas tienen funcin enzimtica para llevar a cabo reacciones metablicas. Cmo cruzan las membranas las molculas. La membrana celular es selectiva, molculas pequeas sin carga, particularmente si son lpidos no tienen dificultad en cruzar las membranas. Las macromolculas no pueden cruzar libremente las membranas, tanto iones como molculas polares tienen dificultad. Existen vas activas y pasivas para ayudar en el paso de molculas a travs de las membranas. Los medios activos utilizan ATP y los pasivos no lo utilizan.Los medios pasivos involucran difusin simple y facilitada. Los medios activos involucran transporte activo, endocitosis y exocitosis. DIFUSION Y OSMOSIS Difusin es el movimiento neto de una sustancia desde una regin de alta concentracin a una regin de baja concentracin, es decir a favor de un gradiente de concentracin. Es un proceso fsico que puede ser observado en cualquier clase de molcula, el cual se detiene cuando alcanza un equilibrio. Por ejemplo, cuando unos cristales de colorante son colocados en agua, el colorante y las molculas de agua se mueven en direcciones variadas, pero su movimiento neto es hacia la regin de concentracin ms baja. Eventualmente, el colorante se disuelve en agua, resultando en una solucin coloreada. Una solucin contiene un soluto y un solvente. En este caso, el soluto son las molculas de colorante y el solvente las molculas de agua. Una vez que el soluto y el solvente estn distribudas igualmente, continan movindose, pero no hay movimiento neto de ninguno de los dos en ninguna direccin. DIFUSION A TRAVES DE LA MEMBRANA Las propiedades qumicas y fsicas de la membrana celular permiten que slo entren o salgan unas pocas molculas por difusin. Las molculas lpido-solubles, tales como los alcoholes, pueden difundir a travs de la membrana debido a que los lpidos son los componentes estructurales principales de la membrana. Los gases tambin pueden difundir a travs de la bicapa lipdica; este es el mecanismo por el cual

Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias. el oxgeno entra a las clulas y el dixido de carbono sale de ellas. Como ejemplo, considere el movimiento del oxgeno desde los alvolos de los pulmones hasta la sangre en los capilares pulmonares. Despus de una inhalacin, la concentracin de oxgeno en los alvolos es ms alta que la concentracin del oxgeno en la sangre; por lo tanto, el oxgeno difunde hacia la sangre. El agua circula dentro y hacia afuera de la clula a travs de canales, con un tamao de poro lo suficientemente grande para permitir el paso del agua y prevenir el paso de otras molculas. El hecho que el agua pueda penetrar una membrana celular tiene consecuencias biolgicas importantes. OSMOSIS: AGUA QUE CRUZA LA MEMBRANA La difusin de agua a travs de una membrana diferencialmente permeable se denomina osmosis. La presin osmtica es evidente cuando existe un aumento de la cantidad de agua en el lado de la membrana que tiene la concentracin de soluto ms alta. La importancia de la osmosis La osmosis ocurre constantemente en organismos vivos. Por ejemplo, debido a la osmosis, el agua es absorbida en el intestino grueso del organismo humano, es retenida en los riones, y luego es absorbida por la sangre. Debido a que las cosas vivientes contienen un porcentaje de agua muy alto, la osmosis es un proceso fsico muy importante que puede afectar la salud. Soluciones isotnicas o isosmticas En el laboratorio, las clulas son normalmente puestas en solucin donde no ganan ni pierdan agua. Tales soluciones son soluciones isotnicas o iso- osmticas; esto significa que las concentraciones de soluto es la misma en ambos lados de la membrana, y por lo tanto no hay ganancia neta de agua. Soluciones hipotnicas o hipoosmticas Son soluciones que causan que la clula se hinche y an reviente, debido a una excesiva internalizacin de agua. Cuando una clula se infla en una solucin hipotnica esto crea presin de turgor. Cuando una clula vegetal es colocada en solucin hipotnica, nosotros observamos expansin del citoplasma debido a que las vacuolas centrales ganan agua y la membrana celular empuja contra la rgida pared celular. La clula vegetal no revienta pues la pared celular se lo impide. La presin de turgor es muy importante para la mantencin de la posicin erecta de la planta.

Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias. Solucin hipertnica o hiperosmtica Las soluciones que causan que la clula se encoja debido a una prdida de agua se dice que son soluciones hipertnicas. Esto causa plasmlisis en la clula, o encogimiento del citoplasma debido a osmosis. La vacuola central pierde agua y la membrana celular se separa de la pared celular. Transporte mediante el uso de transportadores La membrana celular es selectiva pero para dejar pasar ciertas sustancias necesita carriers o transportadores. Los transportadores proteicos son especficos, cada uno slo se puede combinar con cierto tipo de molculas, la cual entonces es transportada a travs de la membrana. El o los mecanismos del carrier se desconocen pero en cuanto contacta una molcula el carrier se transforma o cambia de forma para transportar la molcula a travs de la membrana. Estos transportadores se requieren para difusin facilitada y transporte activo. Difusin facilitada: a favor del gradiente Explica el paso de molculas como glucosa y aminocidos aun cuando no sean solubles en lpidos. El paso de las molculas se hace a travs de carriers. Transporte activo: contra el gradiente Durante este proceso, las molculas e iones se mueven dentro y hacia afuera de la membrana, acumulndose en uno de los dos lados. En este caso se requiere de carriers y de energa. Las protenas involucradas en este proceso se llaman pumps o bombas.

Actividades prcticas Bolsa de dilisis: Spectra/Por molecular porous moleculares de 12.000 a 14.000 Dalton. membrane tubing. Poro para pesos

Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias. 1. Proceda a preparar una membrana semipermeable en forma de tubo, de poro molecular con un volumen conocido (ojal sobre 100 ml)de la solucin desconocida que se le proporcionar en laboratorio. La solucin puede tener uno o ms de los siguientes componentes: protenas, almidn, cloruro de sodio y glucosa. Cierre la bolsa hermticamente con los hilos provistos, corte pedazos de hilo sobrantes. 2. Vierta agua destilada en un vaso precipitado (suficiente para poder sumergir la bolsa semipermeable). 3. Sumerja la bolsa, y espere al menos 30 minutos. 4. Durante ese tiempo prepare 8 tubos de ensayo en una gradilla (4 arriba y 4 abajo), organice su grupo para realizar las 4 determinaciones qumicas que se le piden. 5. Cuando pasen los 30 minutos, saque y retire la bolsa hacia un vaso vaco y lave el exterior de la bolsa con agua destilada sin tocar la bolsa. 6. Luego coloque la bolsa sobre otro vaso limpio y seco (ojal graduado) y rompa la membrana con una tijera de tal forma que todo el contenido se vierta en el vaso. Mida el volumen de agua en el vaso. 7. Ahora usted tiene dos vasos de precipitado: A. uno con el agua de la bolsa, y B. otro con el agua donde la bolsa estuvo sumergida por 30 minutos. 8. En los 4 tubos superiores de la gradilla vierta el contenido del vaso A (volumen similares). Y en los 4 tubos inferiores vierta el contenido del vaso B (volumen similares). 9. Descubra el contenido de la solucin misteriosa (vaso A) y descubra que molculas pasaron a travs de la membrana y cuales no pasaron (vaso B).

La presencia de protenas se determinar con el mtodo de Biuret , almidn se determinar con una solucin de lugol; glucosa con el mtodo de Fehling; NaCl* utilizando nitrato de plata. *todos estos test qumicos son cualitativos. Reaccin de Fehling (para reconocer hidratos de carbono). Esta reaccin se basa en el poder reductor del grupo carbonilo (aldehido o cetona) de un carbohidrato que pasa a cido reduciendo

Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias. las sales cpricas en medio alcalino (reactivo de Fehling) a xido cuproso. El reactivo de fehling es de color azul intenso (debido al complejo cprico) se agrega a la solucin de carbohidrato y se hierve. Si el carbohidrato posee un grupo aldehido o cetona libre, se forma un precipitado de color amarillo de xido cuproso hidratado que pasa a un color rojo de xido cuproso anhidro al continuar la ebullicin. Para detectar hidratos de carbono : Adicione 1 ml de solucin A ( CuSO4 + H2SO4 concentrado + agua destilada) 1 ml de solucin B ( Tartrato de Sodio+ NaOH concentrado+ agua destilada). Agite y caliente durante 10 minutos en bao de agua hirviendo. Si la reaccin es positiva para hidratos de carbono se observa color rojo ladrillo intenso. Reaccin de Biuret (para reconocer protenas). El ensayo de biuret (sulfato cprico en medio alcalino) es positivo para todos los componentes que contengan dos o ms uniones peptdicas. La coloracin prpura se debe a la reaccin entre el Cu+2 y cuatro tomos de nitrgeno que provienen de cadenas peptdicas adyacentes. Para reconocer protenas: En un tubo de ensayo con muestra desconocida agregue reactivo de Biuret (1ml). Caliente el tubo a 37C por dos minutos. La reaccin es positiva cuando el color de la solucin cambia a prpura. Almidn: Vierta unas diez gotas de lugol sobre la solucin, la reaccin es positiva si se torna azul o prpura. NaCl: Vierta unas diez gotas de AgNO3 (nitrato de plata) sobre la solucin. Si la reaccin es positiva se forma un precipitado blanco.

El informe debe ser breve y muy explicativo. Consta de un ttulo, una INTRODUCCION (media pgina, hiptesis de trabajo, conocimientos anteriores sobre membranas naturales versus membranas artificiales) ; RESULTADOS (una a dos pginas, incluye tablas, grficos los cuales deben ser mencionados en el texto); DISCUSION (1 a 2 pginas), incluye explicacin de los resultados, posibles errores de experimentacin si no se cumple lo esperado). Se deben reportar los resultados de cada uno de los subgrupos en el grupo de laboratorio.

Dra. Patricia Arancibia. Depto. de Ciencias Bsicas. Facultad De Ciencias. No se reportan las demostraciones. NOTA: Este informe no lleva la seccin materiales y mtodos. ANOTE EN ESTA TABLA LOS RESULTADOS DE LOS GRUPOS, ANOTE CUALQUIER PROBLEMA QUE LOS GRUPOS HAYAN TENIDO (CONTAMINACIN, EQUIVOCACIONES) volumen inicial bolsa: volumen final bolsa: Grupos 1 2 3 4 5 Preguntas: Protena vaso a vaso b Glucosa vaso a vaso b Cloruro vaso a vaso b Almidn vaso a vaso b

1.En cuanto a patrn de selectividad se refiere cul es la diferencia entre las membranas artificiales y la membrana plasmtica? 2. Escriba sus predicciones para cada componente (protena, glucosa, cloruro, almidn). Es decir indique cul componente usted espera encontrar en el vaso A o B. 3. Explique por qu se denomina Modelo de Mosaico Fluido al modelo de membrana plasmtica actual. 4. En una membrana plasmtica, qu factores influyen en la fluidez de la membrana? 5. En su experimento cules son los posibles factores que influiran en la velocidad de desplazamiento de las molculas entre el vaso A y vaso B?