Etileno A senescncia dos tecidos e dos rgos vegetais, bem como outros processos de desenvolvimento, so controlados e regulados por

interaes entre vrios hormnios das plantas (p. ex., auxinas, giberelinas, citocinas, etileno e cido abscsico). Os hormnios vegetais so ativos em concentraes muito baixas, sendo importantes reguladores de eventos fisiolgicos em rgos desconectados da planta. Das cinco maiores categorias de hormnios vegetais, o etileno tem recebido a maior ateno de fisiologistas no ps-colheita. A capacidade desse agente de dissipar o amadurecimento de frutas climatricas e de promover, em geral, a senescncia das plantas levaram o seu nome descritivo hormnio do amadurecimento. O etileno tambm induz brotamento em tubrculos de batata, sendo ainda descrito como hormnio de ferida, pois o estresse por dano fsico ou qumico, leses por fungos e irradiao estimulam a produo de etileno. A giberelina, que aumenta a produo de amilase durante a malteao de gros e aumenta o tamanho das uvas de mesa, outro hormnio vegetal usado comercialmente em alimentos de origem vegetal. Auxinas, giberelinas e citocinas so consideradas como retardantes da senescncia, enquanto o etileno e o cido abscsico so associados promoo da senescncia. O etileno um hidrocarboneto gasoso simples (C2H4), sendo produzido essencialmente em todas as partes da planta durante seu desenvolvimento. Essas duas caractersticas diferenciam o etileno de outros hormnios vegetais clssicos, os quais so sintetizados em tecidos ou rgos especficos e transportados a outros locais da planta para exercerem seus efeitos. Embora ocorra o metabolismo do etileno para a formao de etileno glicol e xido de etileno, sua concentrao na planta regulada quase que exclusivamente por suas taxas de sntese e difuso.

O etileno um composto ubquo, sendo produzido de forma natural nas plantas, microrganismos do solo, microrganismos fitopatognicos, gs natural e vegetao em chamas; as fontes de etileno produzidas pelo homem incluem combusto de carvo e leo, queima de refugo, mquinas de combusto interna, fumaa de cigarro, lmpadas fluorescentes e material de borracha exposto a calor ou radiao ultravioleta (UV). O etileno inflamvel quando exposto entre 3,1 e 32% em volume. Biossntese de etileno O etileno necessita ser biossintetisado ou fornecido por fontes externas para que exera seus efeitos. O etileno produzido em todas as plantas superiores a partir da metionina, sendo derivado dos carbonos 3 e 4 deste aminocido. A metionina convertida em etileno pela via de biossntese que compreende dois passos com reaes enzimticas. Na primeira reao, o S-adenosil-metionina (SAM) convertido em cido 1-carboxlico-1-aminociclopropano (ACC) pela ao da enzima ACC sintetase (ACCS). O ACC ento metabolizado pela enzima ACCoxidase (ACCO), por uma reao de oxidao que necessita de O2 e ferro, e que ativada pelo CO2 para produzir etileno. Outra importante reao o chamado ciclo de Yang, que recupera o enxofre (grupo CH3-S) e ressintetiza o SAM. Em alguns casos, o etileno regula sua prpria produo, induzindo a uma nova sntese de ACCS e ACCO. O ACC, precursor imediato do etileno, pode ser convertido ainda em malonil-ACC sob a ao da enzima N- maloniltransferase (NMT) e ento transportado nessa forma para os vacolos.

A sntese do etileno requer oxignio, o que explica o grande efeito benfico da tecnologia de reduo de oxignio por AM e AC sobre a inibio do amadurecimento de frutas. Aplicaes de ACC em frutos imaturos aumenta levemente o teor de etileno, mostrando a importncia da ACC oxidase na maturao de frutos.

Ao do etileno A despeito da diversidade dos efeitos do etileno no desenvolvimento vegetal, o passo inicial da ao do etileno igual para todos os casos: Todos eles envolvem ligao com um receptor, seguido da ativao de uma ou mais vias de transduo de sinal que levam resposta celular. Um dos efeitos primrios do etileno alterar a expresso de vrios genes de fatores de transcrio. Desta forma, aumenta a transcrio de vrios mRNAs, dentre eles, para a celulase, -1,3-glucanase, peroxidase, sntase do calcone (enzima chave da biossntese dos flavonides) e enzimas relacionadas com o amadurecimento de frutos. O etileno liga-se reversivelmente a receptores especficos (ETR1&2, ERS1&2 e EIN4) da membrana plasmtica, que so protenas transmembrana (histidina quinases com cofator cobre). A ligao do etileno a esses receptores reversvel, logo, requer excesso de molculas de etileno para saturar a resposta. Os

receptores de etileno so reguladores negativos da ao desse hidrocarboneto gasoso simples. Ou seja, eles agem prevenindo respostas constitutivas do etileno na ausncia deste; a unio do etileno desreprime as vias de resposta. A unio do etileno ao receptor desativa a protena reguladora da resposta (CTR1, uma proteinoquinase). A CTR1 costuma ser um regulador negativo de respostas do etileno via regulao negativa de uma protena transportadora de membrana (EIN2). A inativao de CTR1 aparentemente inicia uma sequncia de fosforilao de protenas, ativando EIN2. A protena EIN2 ativada inicia a sequncia de transcrio por duas famlias de fatores de transcrio (EIN3/EIL ERF1), que ligam-se a promotores especficos no ncleo a fim de iniciar a expresso de genes que conduzem as respostas fisiolgicas do etileno. O receptor de etileno chamado ETR1 um dmero de duas protenas de membrana integrais com atividade histidina quinase e habilidade autofosforilante. A ligao do etileno ao seu receptor induz autofosforilao no resduo de histidina e depois transfere o fosfato para resduos de aspartato. O receptor ativado e inicia uma cascata de sinalizaes para outras protenas efetoras (MAP quinase tipo cascata, com um destino final ao nvel do DNA).

A ligao do etileno ao receptor d como resultado a inativao de um regulador negativo CTR 1 (que estava inibindo a protena transmembrana EIN 2) na atividade da protena cobra EIN 2, funcionando como um canal inico (provavelmente de ons Ca2+), o que resulta na ativao subseqente do fator de transcrio EIN 3, que atua no nvel genmico atravs da induo de expresso gnica de protenas efetoras.

Em nveis crticos, o etileno proporciona trocas associadas ao metabolismo, ocasionando um aumento na taxa de respirao. Os sinais para essas respostas so intermediados por protenas receptoras de etileno, localizadas na membrana celular. Em geral, muitos efeitos do etileno so acompanhados de aumento na sntese de enzimas (aumento nos nveis de mRNA). O tipo de enzima afetada depende do tecido alvo. Por exemplo, as celulases so aumentadas quando o etileno estimula a absciso foliar. Em clulas injuriadas a sntese de fenilalanina amnia liase (PAL) que aumentada. Esta enzima importante para a formao de compostos fenlicos, provavelmente envolvidos na cicatrizao de ferimentos.

Evitando os efeitos do etileno Todos os produtos vegetais respiram, sendo esse processo regulado pela ao cataltica de enzimas sensveis temperatura. A magnitude do aumento na respirao diretamente dependente da concentrao de etileno, pois este estimula a atividade respiratria que vem a ser um processo oxidativo. Atravs da ao direta do etileno, ocorre uma elevao no fluxo glicoltico, bem como um incremento na atividade da fosfofrutoquinase e piruvato quinase. Portanto, o controle da respirao est diretamente relacionado presena desse fitohormnio no tecido vegetal, podendo o processo ser influenciado pela aplicao de inibidores da biossntese ou ao desse fitohormnio. O procedimento mais prtico para evitar os efeitos do etileno quando se manipulam frutas e hortalias a excluso dele do ambiente ps-colheita, a qual pode ser realizada por uso de empilhadeiras eltricas, remoo de material vegetal amadurecido e podre e evitando-se a mistura de produtos que produzem esse hidrocarboneto com os que so sensveis a ele. Como alternativa, o etileno pode ser removido do ambiente por ventilao ou por depuradores de etileno. O depurador qumico de etileno mais comum o permanganato de potssio (KMnO4 alcalino ou pastilhas inertes), que oxida o etileno, enquanto o carvo ativo e brominado o absorve e o oxida. Oznio ou luz UV usada para produo de oznio (O2 + UV O3), tambm so usados para oxid-lo: C2H4 + [O] CO2 + H2O Nesse sistema, a luz UV a 185 nm produz oznio, que oxida o etileno, enquanto UV a 254 nm destri o oznio remanescente, o qual prejudicial aos tecidos vegetais em concentraes muito baixas. Existem sistemas que oxidam cataliticamente o etileno, usando platina ou catalisadores xidos, mas o calor (200300C) e a catlise em menor temperatura (100C) com TiO2 + UV tambm so disponveis. Os sistemas de armazenamento em baixas presses (armazenamento hipobrico) facilitam a remoo de etileno de tecidos de frutas e hortalias pelo aumento do gradiente de difuso. Os compostos que competem com o etileno pela ligao aos receptores de etileno e, portanto, inibem as respostas ao etileno por frutas e hortalias, tm sido de grande interesse terico e prtico entre os fisiologistas de plantas. O on de prata um potente inibidor da ao do etileno, ligando-se irreversivelmente e bloqueando o receptor de etileno. O complexo tiossulfato de prata costuma ser usado para prevenir danos em flores cortadas e plantas ornamentais, mas no pode ser usado em alimentos. Outros inibidores da ao do etileno incluem dixido de carbono, norbornadieno e 1-metilciclopropeno (1-MCP), que so compostos gasosos que, como a prata, inibem a ao do etileno. Os efeitos inibitrios de cada um desses compostos desaparecem dentro de poucos dias a duas semanas, dependendo do composto, da dose usada no tratamento, da temperatura de armazenamento, etc. Apesar da dissociao dos inibidores do receptor, a perda de inibio tem sido associada sntese de novas protenas receptoras. Logo, a reciclagem

de receptores , provavelmente, um componente importante das mudanas de sensibilidade a hormnios, observadas durante o desenvolvimento das plantas.

Inibidores da sntese: Bloqueia a converso de S-adenosilmetionina para ACC: Aminoetoxivinil glicina (AVG); cido aminooxiactico (AOA); Bloqueia a converso de ACC para etileno: Cobalto (Co2+); Anaerobiose. (O2 necessrio para converso de ACC em etileno). Inibidores da ao: ons prata (Ag+), na forma de nitrato e tiossulfato de prata; CO2 a 5-10%; compete pelo mesmo stio de ligao no receptor com o etileno; Metilciclopropeno, MCP (irreversvel); Transcicloocteno (reversvel). Adsorvente de etileno: Permanganato de potssio (usado na conservao de frutos e flores)

Etileno e amadurecimento de frutas

Antes do amadurecimento, ocorre um aumento natural na produo de etileno, que catalisa o climatrio respiratrio, dando o suporte energtico para as rpidas transformaes na aparncia, flavor e textura caractersticas dos frutos prontos para serem consumidos. As quantidades de etileno produzidas por diferentes frutas variam muito. As frutas climatricas produzem grandes quantidades, coincidindo com seu amadurecimento, mas as no climatricas produzem pouco etileno durante o seu desenvolvimento e seu amadurecimento. A produo desse hidrocarboneto pelo amadurecimento das frutas climatricas est fortemente associado (pode, no entanto, ocorrer antes ou depois) ao aumento climatrico da respirao. O amadurecimento de frutas nem sempre acompanhado pelo aumento definido do etileno para nveis-limite. Isso talvez esteja relacionado a mudanas variveis de sensibilidade do tecido ao etileno entre diferentes espcies de frutas, j que a eficcia do etileno exgeno em estimular eventos como o amadurecimento pode depender da receptividade do tecido. Por exemplo, a concentrao de etileno necessria para se iniciar o amadurecimento das frutas diminui conforme elas se aproximam de seu crescimento final. Do mesmo modo, as frutas nas plantas podem apresentar menor sensibilidade ao etileno que as frutas colhidas. Alm disso, alguns cultivos de pra so sensveis apenas depois de a fruta colhida ser armazenada a baixas temperaturas (sem congelamento). Essas observaes Tm sido usadas para dar suporte idia de que os fatores de juventude insensibilizam a fruta ao etileno, podendo, por outro lado, controlar eventos fisiolgicos em frutas e hortalias imaturas. O desenvolvimento de plantas transgnicas que no sintetizam o etileno mostrou inequivocadamente que ele funciona mais como desencadeador do que como um subproduto de amadurecimento de frutas climatricas. O etileno bastante usado para o amadurecimento comercial de abacates, bananas e tomates climatricos, bem como para eliminar o verde de toranjas e laranjas no climatricas. O tratamento com etileno promove um amadurecimento mais rpido e uniforme em frutas climatricas, o que pode significar tempo reduzido entre a colheita e o consumo, implicando, ainda, qualidade e valor nutricional otimizados para o consumidor. De acordo com a sensibilidade ao etileno, durante a maturao os vegetais podem ser considerados climatricos e no-climatricos. Nos climatricos, aps colhidos ocorre um aumento significativo na taxa respiratria e na produo de etileno, o qual tem capacidade de desencadear o processo de amadurecimento do produto imaturo. J nos no-climatricos o etileno pode ser utilizado para promover a pigmentao da epiderme. Este tipo de fruto no amadurece aps colheita. O perodo climatrico acompanhado do aumento dos nveis de etileno. H dois sistemas de produo de etileno: o sistema pr-climatrico e o climatrico. O primeiro ocorre em todos os frutos, mas caracterizado por apresentar pouca atividade da ACC sintase e uma baixa produo de etileno. J o segundo sistema (climatrico) comum apenas aos frutos climatricos, apresentando alta atividade da ACC sintase e como consequncia, alta produo de etileno. O termo amadurecimento de frutos refere-se s mudanas no fruto que o tornam pronto para o consumo. Estas mudanas incluem o amolecimento do fruto devido quebra enzimtica das paredes celulares, hidrlise do amido, ao acmulo de aucares e ao desaparecimento de cidos orgnicos e de compostos fenlicos, incluindo os taninos. As respostas dos frutos ao etileno podem ser desejveis, como a produo de substncias volteis, desverdeamento, promove desenvolvimento da cor (degradao da clorofila) e a reduo da adstringncia e indesejveis, como aumento da atividade de enzimas degradadoras da parede celular, converso do amido em acares, amarelecimento da epiderme, entre outras. Ao mesmo tempo h um aumento de pectinas solveis, e portanto, a reduo da dureza da polpa, despolimerizao de polissacardeos, perda de cidos, taninos e fenis, acumulao de metablitos de estres (isocumarina na cenoura, que provoca amargor; terpenos em batata, pisantina em ervilha). Promove a maturao do fruto pelo aumento dos nveis de enzimas hidrolticas que amaciam o tecido, produzindo a hidrlise de produtos, aumento da taxa de respirao e pigmentao da fruta. O etileno aumenta a expresso gnica de enzimas do amadurecimento, como clorofilase, celulase, poligalacturonase (PG - despolimenrizao das pectinas), pectinametilesterase (PME - desmetila a cadeia de cido galacturnico da pectina), fenilalanina amnio-liase (PAL), ACC sintase, piruvato dehidrogenase. Geralmente, a taxa de produo de etileno aumenta com a maturao, as injrias fsicas, a incidncia de doenas, o aumento da temperatura acima de 30C e o estresse hbrico. As injrias mecnicas, como cortes, abrases, amassamentos e ferimentos, podem causar estresse no fruto. Com isso pode haver um aumento da produo de etileno ou descompartimentao celular e ambos os processos ocasionam o aumento da respirao, aumentando assim a velocidade de deteriorao e, portanto, reduo da vida pscolheita.

Senescncia x Resposta hormonal

Etileno e outros processos fisiolgicos ps-colheita O etileno acelera o amadurecimento e o amolecimento de frutas, alm de acelerar a senescncia e a perda de cor verde de vegetais folhosos e algumas frutas imaturas (p. ex., pepinos, abobrinha). Ele causa a degradao da clorofila por estmulo da expresso do gene da clorofilase, embora nenhum deles seja requisito universal para que a degradao da clorofila ocorra. A atmosfera controlada ajuda a reter a cor verde dos vegetais, mais provvel por meio da inibio competitiva da ao do etileno pela elevada concentrao de dixido de carbono e inibio do metabolismo geral e, especificamente, da sntese do etileno pela concentrao reduzida de oxignio. Existem poucas evidncias de que o etileno afete de maneira direta outros pigmentos alm da clorofila. O etileno ainda estimula absciso de folhas em alguns vegetais (p. ex., couve-flor, repolho), formao de isocumarinas de sabor amargo em cenouras, lignificao em espcies de Brassica e aspargos, produo de fitoalexinas em culturas enfermas, produo de metablitos de estresse em batatas-doces e batatas comuns, aparecimento de ncleo endurecido em batatas-doces. Ele tambm reduz a incidncia de dano por frio em meles almiscarados e outros produtos, se aplicado antes do armazenamento em baixas temperaturas, por adiantar o amadurecimento ou a senescncia, o que reduz a sensibilidade ao resfriamento. Em repolhos, o etileno acelera perdas de massa e acares e promove alteraes nos cidos orgnicos. Mtodos de tratamento com etileno Os mtodos disponveis para tratamento de frutas com etileno so a adio de etileno em cmara (azetil, etil-5), adio de geradores de etileno (Alax, Frutalax), liberadores de etileno (ethephon cido 2cloroetilfosfnico).

O ethephon convertido em etileno aps ser absorvido pelas clulas e a resposta dos frutos ao tratamento depende da sensibilidade do tecido, concentrao utilizada, composio da atmosfera, tempo de exposio, temperatura e sensibilidade da espcie/cultivar.