Anejos a la Memoria

Anejo X: Inseminacin Artificial

10 INSEMINACIN ARTIFICIAL. 10.1 INTRODUCCIN.

El Larousse Agrcola (1981), define la inseminacin artificial, como una tcnica que consiste en depositar en el aparato genital de una hembra, con la ayuda del instrumental apropiado, el semen de un macho recolectado artificialmente. La inseminacin artificial, se ha impuesto en todo el mundo, como un mtodo de gran inters desde el punto de vista zootcnico y econmico, incrementando los rendimientos productivos a travs de la mejora acelerada y de la uniformidad en la reagrupacin de las poblaciones. La aplicacin por primera vez de forma organizada del mtodo, se llev a cabo en Dinamarca, en los aos 1938-1939, crendose cooperativas de inseminacin con la finalidad de realizar la mejora zootcnica, extendindose posteriormente a los dems pases de Europa, hasta alcanzar su aplicacin en la actualidad. En las cabras, aunque su desarrollo ha sido posterior, los resultados obtenidos son similares a los de las otras especies aunque escasos. Entre los beneficios obtenidos en la aplicacin de esta tecnologa podemos destacar: La mejora gentica en produccin de leche y carne, al obtener semen de alta calidad de animales seleccionados . Mejor distribucin del semen por la dilucin a la que se somete. Mayor cantidad de hembras cubiertas con el semen de un mismo macho.

El xito en la inseminacin artificial est ntimamente relacionada con la correcta realizacin de las diversas etapas que la comprenden. Como mencionamos en el anejo nmero 2 (Planificacin de la explotacin), la cubricin de la mayora del rebao, se har con monta natural controlada, slo dejar cubrir mediante inseminacin artificial, aquellas hembras reproductoras, cuyos niveles de produccin media sean superiores al resto del rebao, de forma que se pueda mejorar genticamente la calidad y capacidad productiva de los animales venideros.

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10.2 PLAN DE INSEMINACIN ARTIFICIAL A REALIZAR. 10.2.1 Eleccin del nmero de machos.
La instalacin para la realizacin de la inseminacin artificial que proyectamos, es la adecuada para cubrir las necesidades del rebao, conformado por un total de 500 hembras reproductoras. Al decidir la consecucin de dos parideras a lo largo del ao, tendremos, pues, dos perodos de inseminacin artificial en el transcurso de dicho ao. Con lo que deberemos contar en nuestras instalaciones con un nmero de machos suficiente para dejar cubiertas aproximadamente a 250 hembras. Para elegir el nmero adecuado de machos mejorantes del que partir, se deben considerar los siguientes parmetros: 1. El semen obtenido para la inseminacin artificial, puede prepararse y conservarse,

bien sea por refrigeracin o por congelacin. En nuestro caso, prepararemos y conservaremos las unidades inseminadoras mediante refrigeracin, con lo que debern utilizarse a lo largo de las 15 horas despus de su elaboracin. 2. Durante la poca de inseminacin, es recomendable que a cada macho, se realice

una extraccin diaria. Al menos, un mes antes del comienzo de la poca de inseminaciones, ser recomendable que se realice una extraccin diaria, a los machos que sern utilizados para tal fin, al objeto de acostumbrarles al uso de la vagina artificial. 3. Cada extraccin de semen, tiene un volumen comprendido entre 0,5 y 1,5 ml y de

ste, se puede conseguir una media de 18 unidades inseminadoras. 4. Para obtener un mayor xito en las cubriciones, practicaremos la doble

inseminacin, que es un procedimiento generalizado en este proceso. Esta doble inseminacin, se har durante las seis u ocho horas posteriores a la primera inseminacin. Necesitaremos pues, para cada hembra dos unidades inseminadoras. 5. La inseminacin, se completar en un solo da si se usan mtodos hormonales.

10.2.2 Descripcin de las etapas a realizar en el plan de inseminacin.

Utilizaremos semen refrigerado, por ser ste el ms recomendable en nuestro caso, y una vez preparadas las dosis de inseminacin, debern enfriarse a 5C, mediante un proceso que requiere, aproximadamente, una hora y media. A esta temperatura, la calidad de la dosis se mantiene durante 24 horas, con lo que dispondremos de ese tiempo para utilizarla. (Antonio Iglesias Becerra).

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Para la obtencin de las pajuelas que contiene las dosis, se deben realizar los distintos pasos:

RECOLECCIN: Constituye la primera operacin a realizar en la tcnica de la

inseminacin artificial. La forma de recogida, se har mediante la tcnica de la vagina artificial, sta se basa en la utilizacin de un aparato prctico y simple, con el cual se trata de imitar en lo mximo posible al rgano sexual femenino. Consta de un cilindro exterior (15-20 cm, de largo y 3,5-5, cm de dimetro), de caucho endurecido y suficientemente compactado para que sirva de aislante trmico, adems presenta una abertura con tornillo de cierre. Dentro de ese cilindro se introduce otro de ltex delgado y flexible (camisa), reinvirtiendo en sus extremidades para mantenerlo fijo mediante unas cintas de goma, limitada por ambos cilindros queda una cavidad que slo comunica con el exterior por el orificio practicado en la pared del cilindro externo. Una de las extremidades de la vagina permanece abierta y la otra se ajusta a un tubo colector graduado de vidrio en el que se recoge el esperma. Para simular las condiciones naturales dentro de la cmara, se introduce agua caliente a unos 40C (se introduce agua a mayor temperatura porque puede que el macho no salte inmediatamente y la vagina va perdiendo calor a medida que avanza el tiempo y si se enfra mucho el macho no eyacula, la temperatura ptima en el momento de la cubricin, es de 37C), en cantidades suficientes como para crear una presin y temperaturas similares a la de la vagina de la hembra. Para el correcto manejo de la vagina artificial, es imprescindible el entrenamiento de los machos. Se comenzar a entrenar cuando alcanza la madurez sexual a los siete meses y no se utilizar su semen hasta que cumpla por lo menos el ao de vida. Se dejarn de usar los mismos machos a los dos aos de edad para evitar problemas de consanguinidad en el rebao.

EVALUACIN: Una vez obtenido el semen a travs de la vagina artificial, se proceder

a realizar la evaluacin del mismo para determinar su utilizacin o no. Los parmetros de evaluacin son de dos tipos: macroscpicos y microscpicos. Dentro de los macroscpicos incluimos: volumen, color, densidad, ph. stos nos darn una idea aproximada de su calidad. Los microscpicos, nos indicarn el valor real del semen. Suponen cuatro medidas fundamentales: motilidad (nos indica el nivel de espermatozoides en movimiento, se hace con la muestra sin diluir), % de espermatozoides vivos y muertos y % de espermatozoides con defectos (estos se hace con la muestra ya diluida).

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En el caso del macho de raza Murciano-Granadina los rangos aceptables fruto de esta evaluacin sern los siguientes:
PARMETROS Volumen Color Motilidad (sin diluir) % Vivos/ Muertos (diluido) % De anormales (diluido) Total de espermatozoides/ semen (miles de millones/ ml) Ph 1,5- 6 Alrededor de 6,8 RANGO De 0,5 a 1,5 ml Amarillento o blanco 60% A partir de 65- 70% 11

Tabla 10.1 Parmetro y Rangos de evaluacin Fuente: M.J. Navarro Ros

Una segunda valoracin deber realizarse despus de su dilucin.

DILUCIN: La dilucin del semen, tendr como finalidad el aumentar su volumen total
de la masa espermtica. Los objetivos que se persiguen son los siguientes: a) Inseminar al mayor nmero de hembras posibles. b) La creacin de un medio que permita la supervivencia de los espermatozoides durante el mayor tiempo posible. Cada hembra requerir una dosis de 200 millones de espermatozoides, concluimos que por cada extraccin podremos obtener hasta un total de 18 dosis Como diluyentes, se emplear leche descremada y calentada a 95 C durante un perodo de 10 minutos con el fin de inhibir la enzima "lactenina" que es txica, a los espermatozoides. Se preparar a una concentracin del 10 % ( 10 ml de leche descremada + 90 ml de agua destilada). Adems, se aadir glicerol como agente protector en una proporcin del 10 % y antibiticos como Penicilina (5.000 U.I / ml) y Estreptomicina (0,75 g /ml). El azcar utilizado para el diluyente, ser la glucosa, aunque podr ser tambin la lactosa o la rafinosa. Una vez que se ha valorado el semen y se ha preparado el diluyente, se proceder a la dilucin del mismo. Esta dilucin, se realizar en una proporcin de 1/10 y cada dosis deber tener un volumen de 0,5 ml.

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CONSERVACIN: Las dosis se prepararn a ltima hora de la maana y se

conservarn mediante refrigeracin a 5 C. Al da siguiente, deber realizarse la inseminacin. Como hemos mencionado anteriormente, el semen refrigerado mantiene su calidad a lo largo de las 24 horas posteriores a su obtencin, por lo que es durante ese perodo de tiempo cuando debe administrrselo mejor es hacer la inseminacin el mismo da con semen fresco e inmediatamente despus de la extraccin, los resultados son ms elevados que con semen refrigerado y no hay ninguna razn para no hacerlo as, ya que los machos y las hembras pertenecen a la misma granja. El semen fresco, puede reducirse un poco su temperatura para disminuir su actividad y que no se agote y usarlo durante las cuatro horas posteriores a su extraccin).

APLICACIN. Primero deber sujetarse el animal de forma que se le impida el

movimiento. Para ello, se sostendr de los miembros posteriores firmemente y se prensar con las piernas. Una vez sujeta por el operario, el tcnico limpiar la vulva y sus alrededores con un cepillo e introducir el vaginoscopio o especulo debidamente lubricado. El siguiente paso, ser localizar la entrada del cervix y posteriormente introducir el catter con la pajuela cargada de semen.

CONTROL: Cuando se plantea un programa de inseminacin artificial, se debe

considerar que el mtodo se integre en un programa de mejora. Se debe tener completa seguridad de que el macho es me]orador, desde el punto de vista gentico. Adems, se controlara con exactitud la identificacin de los machos utilizados y de las hembras inseminadas con el fin de conocer sin lugar a dudas tanto la maternidad como la paternidad de la descendencia. Se llevar un libro donde se anotarn dichos aspectos y de esa forma dispondremos de datos suficientes para un adecuado control y una correcta seleccin. A la hora de inseminar se proceder hacer, tambin, un control que refleje el xito en el momento de la aplicacin del semen, de tal forma que se anotar un signo (+) si se tiene la seguridad de haber implantado el semen en el tero, un signo (-) si se cree que el semen ha sido depositado fuera del mismo y en el caso de duda se anotarn ambos signos.

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10.2.3 Manejo de los machos.

Los mejores machos detectados en la granja, sern los elegidos para la inseminacin artificial y estarn alojados en las dependencias diseadas para ellos. En nuestro plan, existirn a lo largo del ao, dos perodos de inseminacin, con el fin de conseguir las dos parideras propuestas (Verano y Navidad), con lo que las inseminaciones debern plantearse para las siguientes fechas: Pandera de Verano Inseminaciones: ltima semana de Enero. Pandera de Otoo-invierno Inseminaciones: ltima semana de Mayo La edad productiva de los machos comienza a partir del primer ao de vida, y finaliza a los cinco o seis aos, cuando su vigor y la calidad del esperma producido disminuye hasta unos niveles que recomiendan su retirada y sustitucin por otro macho ms joven. No obstante, no utilizaremos en nuestra explotacin a machos durante ms de dos aos, para evitar problemas de consanguinidad, como se ha mencionado anteriormente. El entrenamiento de los machos con la vagina artificial comenzar a los siete meses, cuando el animal alcanza la madurez sexual y consistir en hacer que ste se acostumbre a realizar la monta aceptando durante la misma la intromisin en la vagina artificial. Para las extracciones seminales, se utilizar como estmulo una hembra que se sujetar adecuadamente para que permanezca quieta. A continuacin se llevar el macho a la hembra para que realice la monta. Durante ese momento el operario aguardar con la vagina artificial preparada y la colocar en el pene del macho en el mismo instante en que ste monte a la hembra. Se har una extraccin mnima diaria, por cada macho, durante los cinco das que dura cada etapa de inseminacin (un mes antes). Despus se trasladarn a las distintas dependencias para unirlos al lote de hembras inseminadas, con el objetivo de que cubran a aquellas que no quedaron preadas. Con semen refrigerado el xito de cubriciones ronda el 8090%. El resto del ao, los machos permanecern estabulados y separados a la espera de ser utilizados en cada una de las dos etapas de inseminacin artificial.

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10.2.4 Manejo de las hembras.

Las hembras que se vayan a inseminar con esta tcnica (slo las mejores productoras) se sometern a un tratamiento de sincronizacin de celos que nos permitir obtener parideras concentradas en los perodos deseados. El tratamiento de sincronizacin de celos tiene una duracin de 11 das y consistir en lo siguiente:

DAS

0 Colocacin Esponjas

10 FSH y PMSG

11 Retirada esponjas

14 Fin del celo a las 48 horas Inseminacin a 52 horas.

MODO DE ACCIN: Se pretende inducir la ovulacin y la sincronizacin del celo de

las hembras, mediante la aplicacin de unas esponjas intra vaginales, que una vez implantadas producen una liberacin continuada de progesterona (acetato de medroxiprogesterona) que es absorbida por la mucosa vaginal. Los niveles de progesterona en sangre bloquean la actividad hipotlamo-hipfisis, produciendo una descarga de gonadotropinas, con aparicin del celo y ovulacin a partir de la retirada de la esponja. Cada esponja contiene 60 mg de acetato de medroxiprogesterona. Previo a la retirada de las esponjas, 24 horas antes, se aplica 1.25 ml de FSH y 350 U.I de PMSG (gonadotropina srica de yegua gestante liofilizada). Con esto se consigue estimular el crecimiento folicular, actuando tanto a nivel de los folculos del "pool" de reserva como aquellos en desarrollo y de los cercanos a la fase de atresia.

METODOLOGA: Con el aplicador y el mbolo se har llegar la esponja al fondo de la

vagina quedando los hilos fuera para permitir posteriormente su retirada. Despus de cada uso el aplicador se ha de pasar por una solucin antisptica ( 0,5 % de amonio cuaternario). A los 11 das de la colocacin de las esponjas, se extraern gracias a los hilos que quedaron fuera durante su aplicacin. El operario deber asegurarse de que ninguna cabra haya quedado con la esponja puesta.

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A las 48 horas de la retirada de las esponjas, comenzarn los primeros sntomas de celo y se proceder a realizar la inseminacin a las 52 lloras que es cuando se produce la mxima concentracin de los mismos. La reinseminacin se har a las 6 horas despus de haberse realizado la primera inseminacin.

CALENDARIO: El plan y calendario de actuaciones que a continuacin se describe se

aplicar en cada una de las dos parideras y de los dos perodos de inseminacin previstos a lo largo del ao.

Parideras de verano:

Sincronizacin de celos E F Extracciones e inseminaciones M

Comprobacin de gestacin A M J JL A S O N D

Partos Destete

Paridera de otoo-invierno :

Sincronizacin de celos, E F M A My Jn Comprobacin gestacin Jl A S O N D

Extracciones e inseminacin.

Partos Destete

(*) El plan de inseminacin y de sincronizacin de celos, se realiza de la misma forma que el indicado para la paridera de verano.

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A los 40 das de haber terminado la inseminacin artificial, se llevar a cabo la comprobacin de las gestaciones. En el caso de detectar seudo gestaciones se tratar al animal con Prostaglandina F2, que provocar l retomo al celo y se echar al macho para la cubricin.

10.2.5 Manejo durante la inseminacin.

Para llevar a cabo la inseminacin en las cabras, sern necesarios los siguientes instrumentos: Especulo de metal o plstico con fuente de luz. Jeringa. Pajuelas. Catter de vidrio o plstico.

Se coloca la pajuela en la armadura metlica de la jeringa y se le adosa el catter que se introduce en el crvix. Un aspecto muy importante en el proceso es la higiene. El vaginoscopio o especulo se desinfectar entre cada inseminacin con el fin de evitar infecciones como la brcela o toxoplasmosis. Adems, se hervir diariamente l especulo as como todo el material de vidrio usado. Tambin se desinfectar la goma de la vagina artificial usando alcohol y lavndola bien con detergentes neutros. La cabra inseminada se deber identificar mediante nmeros en el cuerpo de acuerdo a los das correlativos del trabajo. Una vez inseminada, la cabra se dejar reposar unas horas y despus se juntar al grupo de cabras ya inseminadas. Todo el trabajo, deber llevar un control estricto, basndose en plantillas en las que figuren: la fecha de inseminacin de cada cabra, la identificacin de cada animal inseminado, el nmero total de cabras inseminadas en el da, la calidad del semen, los distintos anlisis y el nmero de extracciones.

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10.3 ELEMENTOS NECESARIOS EN LA INSEMINACIN ARTIFICIAL.

Para poder realizar correctamente el trabajo ser necesario poseer un laboratorio adecuadamente equipado que dispondr de: 1 Frigorfico porttil a 5 C. 1 Estufa ( para mantener la vagina caliente a 37 C). 10 Vaginas ( una para cada macho). 1 Microscopio. 1 Bao Mara. 1 Especulo. Pajuelas. 1 Catter. Otros elementos: (tubos de vidrio, botellas de agua destilada, cubres, portas, etc.).

10.4 RESUMEN DE LOS DISTINTOS PASOS A SEGUIR Y DE LAS TAREAS DIARIAS DURANTE LA INSEMINACIN ARTIFICIAL.
De forma esquemtica, a continuacin, se describen las labores rutinarias que deben seguirse: 1. Usar pajuelas para inseminar limpias, estriles y secas. Evitar el uso de pajuelas con puntas agudas. 2. Conectar las pajuelas a la jeringa de capacidad calibrada de 1 ml. 3. Revisar, si la jeringa trabaja correctamente; lubricar ligeramente el pistn de la misma y si es necesario mejorar la eficiencia de succin o expulsin. 4. Preparar piezas de algodn para limpiar las pipetas, la vlvula del animal y l especulo. 5. Fijar la batera y revisar la luz y focos del vaginoscopio. 6. Succionar la cantidad requerida de semen (dosis de inseminacin) en la pipeta o pajuela. 7. Limpiar la vulva de la hembra con una toalla de algodn. 8. Introducir cuidadosamente l especulo en la vagina y localizar el crvix.

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9. Observar el tipo y cantidad de moco vaginal en la parte anterior de la vagina y drenarlo si es necesario. 10. Despus de localizar el crvix, introducir la punta de la pajuela en la entrada cervical (no forzar la pajuela). 11. Empujar l especulo ligeramente hacia atrs y presionar el pistn de la jeringa para expulsar el semen. 12. Despus de depositar el semen en la entrada del crvix, retirar l especulo y pajuela de la vagina. 13. Desinfectar l especulo con alcohol y asegurarse que est bien seco antes de volver a utilizarlo. 14. Dejar reposar las cabras recin inseminadas, al menos durante dos o tres horas. Resumen de las tareas diarias: Las dosis inseminadoras se prepararn en el laboratorio a ltima hora de la maana y se aplicarn al da siguiente en los respectivos corrales. 1. Separar las cabras en estro. 2. Preparar los diluyentes a utilizar. 3. Preparar el microscopio. 4. Calentar el agua para la vagina artificial. 5. Preparar el bao Mara. 6. Revisar y preparar el equipo de inseminacin artificial. 7. Preparar la vagina artificial para la recoleccin del semen. 8. Recoger el semen. 9. Valorar y diluir el eyaculado. 10. Introducir el vaginoscopio y l especulo. 11. Inseminar.

12. Limpiar el equipo y guardarlo.

Murcia, Enero de 2002 El Alumno

Lino Sala Pascual

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