Cannabis F

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis
Manuel destin aux laboratoires nationaux danalyse des drogues
Crdits photos: Photothque de lUNODC; UNODC/Ioulia Kondratovitch; Alessandro Scotti.
Section scientifique et du laboratoire OFFICE DES NATIONS UNIES CONTRE LA DROGUE ET LE CRIME Vienne

(Texte rvis et mis jour)
MANUEL DESTIN AUX LABORATOIRES NATIONAUX DANALYSE DES DROGUES
NATIONS UNIES New York, 2010
Note Les conditions de mise en uvre et dexprimentation sont reproduites partir des textes de rfrence dorigine, y compris les mthodes non publies, valides et utilises dans une slection de laboratoires nationaux signals dans la liste de rfrences. Certaines conditions alternatives et la substitution de produits commercialiss cits peuvent souvent donner des rsultats comparables mais il importe de faire valider toute modification avant de lintgrer aux procdures de routine des laboratoires. La mention de noms de socits et de produits commercialiss nimplique en aucun cas laval des Nations Unies.
ST/NAR/40
PUBLICATION DES NATIONS UNIES Numro de vente F.09.XI.15 ISBN 978-92-1-248176-0
Cette publication na pas t corrige officiellement. Langue dorigine: anglais
Remerciements
La Section scientifique et du laboratoire de lOffice des Nations Unies contre la Drogue et le Crime (UNODC) tient remercier les experts suivants pour leur contribution au contenu du prsent manuel: Dr Michael Bovens et M. Markus Schlapfer, Service de science mdico-lgale, Police de la ville de Zurich (Suisse) Mme Sue Fiddian, Directrice, Division de botanique, Dpartement des affaires mdico-lgales, Police de Victoria, Australie; et Groupe dexperts conseils en drogues illicites auprs des Directeurs des Laboratoires mdico-lgaux dAustralie et de Nouvelle-Zlande (SMANZFL) M. Andrew Holmes, Conseiller scientifique principal, Service danalyse des drogues, Sant Canada, Toronto (Canada) Dr Henk Huizer, Dpartement des drogues, Institut mdico-lgal des Pays-Bas, La Haye (Pays-Bas) (retrait) M. A. Kader Jackaria, chimiste mdico-lgal et toxicologue, le Maurice Dr Lee Tong Kooi, Directeur de Division, Division des drogues illicites et de la toxicologie, Groupe des sciences appliques, Autorits des Sciences de la sant, Singapour M. Adriano Otavio Maldaner et Mme Daniele Zago Souza, Police criminelle fdrale, Brsil Dr H. Stambouli, Laboratoire de police scientifique, Gendarmerie Royale, Rabat (Maroc) Dr Kalman Szendrei, Professeur mrite, Universit Albert Szent-Gyorgyi, Szeged (Hongrie) La Section scientifique et du laboratoire de lUNODC souhaite aussi remercier le Dr Michael Bowens et Markus Schlapfer pour la rvision et la mise jour du manuscrit original Mthodes recommandes pour lanalyse du cannabis, pour la prparation de la premire version du prsent manuel rvis et mis jour, et pour la finalisation du manuscrit avec les contributions supplmentaires des experts nomms ci-dessus*. Barbara Remberg, coordinatrice de cette publication pour lUNODC, remercie tous les membres du personnel de lUNODC ayant apport leur contribution.
* Le Dr Bovens remercie Mme Lisa Frischknecht pour sa collaboration la prparation du manuscrit. iii
Sommaire
Page
1. INTRODUCTION. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.1 Contexte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1.2 Objectif et utilisation du manuel. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2. PRODUCTION ILLICITE DE PRODUITS DU CANNABIS . . . . . . . . . . 2.1 Le march du cannabis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3. DESCRIPTION DE LA PLANTE DE CANNABIS ET DES PRODUITS ILLICITES DU CANNABIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.1 Nom . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.2 Synonymes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.3 Taxonomie . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.4 Aspect physique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.5 Similitudes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6 Croisements . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6.1 La sinsemilla (sans graines en espagnol) . . . . . . . . . . . . . 3.6.2 Clonage. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6.3 Hermaphrodites provoqus artificiellement . . . . . . . . . . . . . 3.6.4 Production en extrieur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.6.5 Production en intrieur . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.7 Le cannabis industriel . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.8 Floraison . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.9 Rcolte . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.10 Rendement . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.11 Distribution de 9-THC dans les plantes de cannabis et ses produits drivs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.12 Biosynthse. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13 Produits du cannabis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13.1 Lherbe de cannabis. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13.2 La rsine de cannabis (haschisch) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13.2.1 La rsine de cannabis des pays mditerranens 3.13.2.2 La rsine de cannabis dAsie du Sud et du Sud-Ouest . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.13.2.3 La rsine de cannabis provenant de pollinisateurs/ice-o-lateurs . . . . . . . . . . . . . . . 3.13.3 Le cannabis liquide (huile de haschisch) . . . . . . . . . . . . . . 3.13.4 Les graines de cannabis et lhuile de graine de cannabis .
v
1 1 2 5 5 7 7 7 7 7 9 10 11 11 11 11 12 12 12 13 13 14 14 15 15 17 17 17 18 19 20
Page
3.13.5 Lhuile essentielle de cannabis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3.14 Estimation de lge des chantillons de cannabis . . . . . . . . . . . . . . . 3.15 Le cannabis destin la production de drogue ou de fibres. . . . . . . 4. CONSTITUANTS CHIMIQUES DINTRT MDICO-LGAL. . . . . . . 5. ANALYSE QUALITATIVE ET QUANTITATIVE DES PRODUITS DU CANNABIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1 chantillonnage ........................................ 5.1.1 chantillonnage des plantes (cultures intrieures et extrieures) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1.2 chantillonnage des saisies de produits du cannabis . . . . . 5.1.2.1 Lherbe de cannabis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1.2.2 La rsine de cannabis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.1.2.3 Le cannabis liquide (huile) . . . . . . . . . . . . . . . . . Critres minimum didentification positive pour le cannabis . . . . . . Analyse physique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3.1 Caractristiques macroscopiques . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.3.2 Caractristiques microscopiques . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Analyse chimique . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.1 Gnralits . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.2 Prparation des chantillons pour lanalyse chimique. . . . . 5.4.2.1 Prparation de lherbe de cannabis . . . . . . . . . . . 5.4.2.2 Prparation de la rsine de cannabis. . . . . . . . . . 5.4.2.3 Prparation de lhuile de cannabis . . . . . . . . . . . 5.4.3 Tests prsomptifs . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.3.1 Tests colorimtriques . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.3.2 Tests immunologiques . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.4 Spectromtrie de mobilit ionique (IMS) . . . . . . . . . . . . . . 5.4.5 Chromatographie sur couche mince (TLC) . . . . . . . . . . . . . 5.4.6 Chromatographie gazeuse dtection par ionisation de flamme (GC-FID), avec et sans drivatisation. . . . . . . . . . . 5.4.6.1 Technique colonnes capillaires . . . . . . . . . . . . . 5.4.7 Chromatographie gazeuse spectromtrie de masse (GC-MS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5.4.8 Chromatographie en phase liquide haute performance (HPLC) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
20 20 21 23 27 27 27 28 28 29 29 29 29 30 32 35 35 35 35 36 36 36 36 39 39 39 42 42 45 45 49 49 49 50 50 51
5.2 5.3 5.4
6. AUTRES TECHNIQUES ET APPROCHES POUR LANALYSE DES PRODUITS DU CANNABIS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6.1 6.2 6.3 6.4 Profilage GC-FID des saisies de produits du cannabis . . . . . . . . . . . Micro-extraction sur phase solide (SPME) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Rapport des isotopes stables par spectromtrie de masse (IRMS) . Profilage ADN . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
7. RFRENCES . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
vi
1.
Introduction
1.1 Contexte
Les produits du cannabis font lobjet du plus grand trafic de drogue dans le monde puisquils correspondent 65 % des cas de saisies au niveau mondial (1,65 millions de cas) en 2006. En 2006, 5 200 tonnes dherbe et 1 000 tonnes de rsine ont t saisies. Pratiquement aucun pays au monde nchappe au trafic de cannabis. Paralllement, le cannabis demeure galement la drogue la plus utilise dans le monde, le nombre dutilisateurs en 2006 ayant t estim 166 millions, ce qui correspond environ 4 % de la population mondiale ge de 15 64 ans. En mme temps, et ceci surtout depuis la fin du sicle dernier, les mthodes de production sont devenues de plus en plus sophistiques, avec pour rsultat la disponibilit sur les marchs illicites dune grande gamme de produits du cannabis diffrentes teneurs du principal ingrdient psychoactif, le delta-9-ttrahydrocannabinol (THC). Plus rcemment, le dbat concernant laugmentation de la teneur en THC (frquemment appele puissance) dans les produits du cannabis a resurgit de nouveau. Il est donc ncessaire dobtenir des donnes analytiques comparables entre laboratoires et dans le temps. Or, la lgislation de la plupart des pays nexige pas danalyse dtaille de la teneur en THC des diffrents produits et, l o de telles analyses sont pratiques, lutilisation de diffrentes approches et de divers schmas exprimentaux rduit les possibilits de comparaison des rsultats. Par exemple, la conversion de constituants naturels, tels que lacide ttrahydrocannabinolique (THCA) en THC, soit par le fait de fumer, soit sous certaines conditions analytiques, et la manire de reflter cette conversion dans les rapports analytiques, nont pas encore fait lobjet dune standardisation au niveau international. Du point de vue technologique, lanalyse des produits du cannabis est encore plus complexe du fait de la disponibilit relativement limite de matriaux de rfrence adquatement dfinis pour le THC ainsi que dautres cannabinodes*.
* Il est par ailleurs important de noter que le THC na t compltement caractris quau milieu des annes 1960 et na t disponible comme matriau pur de rfrence que vers la fin des annes 1960. Les rsultats obtenus avant cela ne doivent donc pas tre compars aux rsultats daujourdhui et doivent tre considrs comme approximatifs. 1
Le prsent manuel est une version mise jour du manuel sur les Mthodes recommandes pour lanalyse du cannabis (ST/NAR/8), publi en 1987, et comporte dimportantes rvisions. Il a t labor en tenant compte des avances en matire de technologie analytique et des connaissances scientifiques concernant le cannabis, et dans le but de fournir la base analytique permettant une discussion objective sur lvolution de la teneur en THC ainsi que les diffrences entre rgions et produits.
1.2 Objectif et utilisation du manuel

Le prsent manuel fait partie dune srie de publications semblables ayant trait lidentification et lanalyse de divers types de drogues sous contrle international. Ces manuels sont le rsultat dun programme que poursuit lUNODC depuis le dbut des annes 1980, afin dharmoniser et tablir les mthodes danalyse recommandes aux laboratoires nationaux danalyse des drogues. Conformment lobjectif global de cette srie, le prsent manuel propose des approches qui permettront aux analystes de drogues de choisir les mthodes appropries pour le type dchantillon examiner et fournit des donnes utiles pour ce type dexercice tout en laissant une certaine libert dadaptation au niveau de sophistication des diffrents laboratoires et des besoins divers en matire de lgislation. La plupart des mthodes prsentes dans ce manuel ont t valides et utilises pendant plusieurs annes dans des laboratoires reconnus et dans le contexte dtudes interlaboratoires, dexercices de collaboration et de tests de performance. Le lecteur doit cependant tre conscient du fait quil existe un certain nombre dautres mthodes, y compris des mthodes publies dans la littrature scientifique mdico-lgale, galement susceptibles de fournir des rsultats satisfaisants. Toute nouvelle mthode destine tre utilise dans le laboratoire du lecteur devra tre valide et/ou vrifie avant son utilisation en routine. Il existe par ailleurs plusieurs approches plus sophistiques qui ne sont peut-tre pas ncessaires pour des applications oprationnelles de routine. Les mthodes dcrites ici doivent donc tre perues comme offrant une ligne directrice, ce qui veut dire que des modifications dordre mineur en fonction des circonstances locales ne devraient normalement pas changer la validit des rsultats. Le choix de la mthodologie et de lapproche lanalyse ainsi que la dcision quant la ncessit de faire ou non appel des mthodes complmentaires appartiennent lanalyste et peuvent aussi dpendre de la disponibilit dinstruments appropris et du niveau de preuve lgalement acceptable dans la juridiction dans laquelle il/elle travaille. Il est aussi important de noter quil est vital que lanalyste de drogues puisse disposer de matriaux de rfrence et douvrages sur les drogues addictives et les techniques danalyse. Par ailleurs, lanalyste doit ncessairement rester bien inform des nouvelles tendances en termes danalyse des drogues et suivre de manire systmatique la littrature la plus rcente en sciences analytiques et mdico-lgales.
La Section scientifique et du laboratoire de lUNODC apprciera toute observation sur le contenu et lutilit du prsent manuel. Les commentaires et suggestions devront tre adresss : Section scientifique et du laboratoire Office des Nations Unies contre la drogue et le crime Centre international de Vienne B.P. 500 1400 Vienne Autriche Tlcopie: (+43-1) 26060-5967 Courrier lectronique: Lab@unodc.org Toute demande de manuels, de directives et dautres publications scientifiques et techniques doit tre envoye ladresse ci-dessus.
2.
Production illicite de produits du cannabis
2.1 Le march du cannabis

Les produits du cannabis sont de loin les drogues addictives les plus rpandues sur le march des drogues illicites. Le cannabis peut tre cultiv pratiquement dans nimporte quel pays et, dans les pays techniquement avancs, il est de plus en plus cultiv en intrieur. La production dherbe de cannabis (marie-jeanne) est trs disperse et existe pratiquement dans tous les pays du monde. La rsine de cannabis (haschish) est produite dans quelque 65 pays, les principales sources tant lAfrique du Nord et les pays de lAsie du Sud-Ouest, notamment lAfghanistan et le Pakistan. LAfrique abrite le plus grand producteur mondial de rsine de cannabis cultiv en extrieur, le Maroc, o lon sait que se trouve la plus grande surface cultive de cannabis. La plupart de la rsine de cannabis saisie en Europe continue de provenir du trafic depuis le Maroc. La rsine de ce pays possde des caractristiques communes avec celle dautres pays du sud et de lest de la Mditerrane (voir la rubrique 3.13.2.1). LAfghanistan est le deuxime producteur mondial de rsine produite partir de cannabis cultiv en bordure des champs de pavot opium. La rsine de ce pays partage des caractristiques avec la rsine dautres parties du sous-continent indien (voir la rubrique 3.13.2.2). Le Liban a t lun des plus grands fournisseurs de rsine et pourrait encore ltre si ce ntait pour la poursuite des efforts dradication. En ce qui concerne lherbe de cannabis, le continent amricain comptait pour 55 % de la production mondiale en 2006, suivi de lAfrique (environ 22 %). La plupart de lherbe de cannabis est produite pour les marchs intrieurs et pour lexportation vers des pays voisins, si bien que le trafic international dherbe de cannabis est assez limit. Depuis les annes 1970, les cultivateurs de cannabis en Amrique du Nord et en Europe ont travaill au dveloppement de cannabis plus puissant et le march de sinsemilla trs puissante, produite en intrieur (voir la rubrique 3.6.1) est
5
en expansion dans de nombreux pays consommateurs clefs. La puissance de la sinsemilla a augment de manire spectaculaire au cours des dix dernires annes aux tats-Unis, au Canada et aux Pays-Bas les trois pays lavant-garde de la technologie de croisement et de production du cannabis et il semblerait que sa part de march est en augmentation dans de nombreux pays. Cependant, rien ne prouve que la puissance effective* du cannabis sur le march europen ait augment de manire significative. Ceci est d au fait que, dans la plupart des pays europens, cest le cannabis import (herbe et rsine) qui continue de dominer le march et que la puissance de ces produits imports est reste stable depuis de nombreuses annes, environ 6-8 %. Laugmentation de la puissance du cannabis observe dans certains pays depuis la fin des annes 1990 vient du fait que lherbe de cannabis, obtenue partir de croisements teneur leve en THC et en faisant appel des techniques hydroponiques intensives, est plus disponible quauparavant. La culture de lherbe de cannabis en intrieur est aujourdhui pratique dans la plupart si ce nest lensemble des pays europens. En dpit de cette tendance vers une culture domestique en intrieur en Europe, limportation de produits du cannabis de culture en extrieur, notamment la rsine de cannabis, est nanmoins encore observe, particulirement en Europe centrale [1, 2]. Des sries limites de donnes temporelles sur la puissance du cannabis indiquent que la concentration moyenne de 9-THC dans les saisies dherbe de cannabis domestique est passe denviron 1,5 % dans les annes 1980 environ 4 % vers la fin des annes 1990 et environ 10 % au cours des cinq dernires annes [3, 4]. Selon de rcents rapports de plusieurs pays europens, la concentration moyenne de THC (puissance) va jusqu 15-20 % de certains matriaux herbeux, mme sil existe une variation importante entre les chantillons au cours dune mme anne [5, 6, 7, 8]. Bien que lherbe de cannabis trs puissante issue de culture en intrieur ait une teneur en THC plus leve que la rsine de cannabis du Maroc, cette dernire est toujours vendue en Europe et les utilisateurs de cannabis expriments considrent quelle produit une dfonce satisfaisante. On trouvera un bilan plus rcent et plus dtaill de la production, du trafic et de la consommation de cannabis au niveau mondial dans les Rapports annuels sur la drogue publis par lOffice des Nations Unies contre la drogue et le crime [9].
* Le terme puissance effective fait rfrence la puissance moyenne pondre de tous les produits du cannabis, en tenant compte de leur disponibilit relative.
3.
Description de la plante de cannabis et des produits illicites du cannabis
3.1 Nom
Cannabis sativa L. (Linnaeus)
3.2 Synonymes
Il existe de nombreux noms locaux ou vernaculaires et divers synonymes pour nommer le cannabis, et il nest pas du registre de ce manuel de les fournir tous. Parmi ceux-ci, on retiendra: chanvre, marie-jeanne, beuh, gandia, herbe, chnevis pour nen nommer que quelques-uns [10].
3.3 Taxonomie
Les genres Cannabis et Humulus (houblon) appartiennent la mme famille (les cannabaces, parfois appeles cannabinaces). Le cannabis est gnralement considr comme une plante monospcifique (Cannabis sativa L.), divise en plusieurs sousespces (C. sativa ssp. sativa, C. sativa ssp. indica, C. sativa ssp. ruderalis, C sativa ssp. spontanea, et C. sativa ssp. kafiristanca) [11]. Cependant, les distinctions chimiques et morphologiques selon lesquelles le cannabis a t divis en ces sous-espces ne sont souvent pas trs claires, semblent modifiables en fonction de lenvironnement et varient de manire continue. Dans la plupart des cas, il suffit dappliquer le nom de Cannabis sativa toutes les plantes de cannabis que lon rencontre [12].
3.4 Aspect physique

Le cannabis est une plante annuelle fleurs dioques*. Les plantes tamines (mles) sont gnralement plus grandes mais moins robustes que les plantes pistils (femelles). Les tiges sont droites et peuvent varier entre 0,2 et 6 m de hauteur. Cependant, la plupart des plantes natteignent que 1 3 m. Le degr de ramification, tout comme la hauteur des plantes, dpend de facteurs environnementaux et hrditaires ainsi que de la mthode de culture (voir aussi la rubrique 5.3.1).
* La plupart des plantes sont dioques (les fleurs mles et femelles ne sont pas sur la mme plante) mais on trouve galement des plantes monoques (portant la fois des fleurs mles et femelles). 7
Figure 1.
Aspects morphologiques de Cannabis sativa L. [13]
A B 1 2 3 4 5 6
Inflorescence de la plante mle ( tamines) Plante femelle ( pistil) fructifre Fleur tamines tamine (anthre et filament court) tamine Grains de pollen Fleur pistils avec bracte Fleur pistils sans bracte
7 8 9 10 11 12 13
Fleur pistil mettant en vidence lovaire (section longitudinale) Graine (akne*) avec bracte Graine sans bracte Graine (vue latrale) Graine (coupe transversale) Graine (coupe longitudinale) Graine sans pricarpe (pele)
* La graine est en fait un fruit ou, techniquement, un akne. Il contient une seule graine enveloppe dure.
3.5 Similitudes
Plusieurs espces de plantes ont des caractristiques morphologiques ressemblant plus ou moins celles de Cannabis sativa. Certaines dentre elles sont illustres ci-dessous. Cependant, si lon observe leurs caractristiques macroscopiques et/ou microscopiques plus attentivement, il est difficile de les confondre [12]. En outre, il existe aussi des tests prsomptifs qui permettent de diffrencier Cannabis sativa dautres matriaux vgtaux (voir la rubrique 5.4.3).
Figure 2. Quelques espces de plantes ayant des caractristiques morphologiques semblables celles de Cannabis sativa L.
Hibiscus cannabinus
Acer palmatum
Urtica cannabina
(Image: [14])
Dizygotheca elegantissima
(Image: [15])
10
Figure 2.
Quelques espces de plantes ayant des caractristiques morphologiques semblables celles de Cannabis sativa L. (suite)
Potentilla recta
Datisca cannabina
(Image: [16])
On peut confondre les graines de houblon commun (Humulus lupulus) et de houblon japonais (Humulus japonicus) avec les graines de Cannabis sativa. Cependant, la prsence dun motif rticul caractristique (en caille de tortue) la surface des graines de cannabis permet de les distinguer aisment.
Figure 3. Graines possdant des caractristiques morphologiques semblables celles de Cannabis sativa L.
Cannabis sativa
Humulus lupulus
Humulus japonicus
3.6 Croisements
La plante est surtout adapte une argile bien structure de pH neutre ou alcalin et aux limons ayant une bonne capacit de rtention deau sans engorgement. Parmi les nombreux essais de croisement, celui entre les souches sativa et indica a donn naissance au skunk, un hybride qui serait 75 % sativa et 25 % indica. Il semblerait que cette souche est lune des premires associant la hauteur teneur en THC de C. sativa ssp. sativa au cycle rapide de dveloppement et au rendement
11
de C. sativa ssp. indica. Dans certains pays, le cannabis haute teneur en THC est aujourdhui souvent appel skunk.
3.6.1 La sinsemilla (sans graines en espagnol)

Le terme sinsemilla sapplique une technique de culture plutt qu une souche gntique. Le cannabis ayant la plus haute teneur en THC comporte exclusivement des sommits fleuries (bourgeons) qui restent non fertilises pendant toute leur maturit et ne contiennent par consquent pas de graines. La production de sinsemilla exige que les plantes femelles soient identifies et ne soient pas exposes au pollen.
3.6.2 Clonage
Cest la pratique du clonage qui a fourni llan initial le plus vident pour la production de sinsemilla. Le clonage signifie tout simplement la propagation partir dune plante mre performante. Cette bouture est amene former des racines avant dtre transplante. Il sagit dune copie gntique de la mre et la plante peut donc tre utilise pour produire dautres boutures. Un mtre carr de plantes mres peut produire de nombreux clones par semaine.
3.6.3 Hermaphrodites produits artificiellement

Bien que la gntique prdispose une plante devenir mle ou femelle, les facteurs environnementaux, y compris le cycle de lumire diurne, peuvent modifier le genre (hermaphrodites). Les hermaphrodites naturels possdant les parties mles et femelles sont gnralement striles mais les hermaphrodites produits artificiellement peuvent avoir des organes reproductifs tout fait fonctionnels. Les graines fminises vendues par de nombreux fournisseurs de graines commerciales sont obtenues partir de femelles artificiellement rendues hermaphrodites et ne possdant pas le chromosome mle ou en traitant les graines avec des hormones ou du thiosulfate dargent. Ainsi, il est possible de produire des plantes ne possdant que le pistil (femelles) partir de graines [17,18].
3.6.4 Production en extrieur

La principale production de cannabis dans le monde se fait encore en extrieur et ces plantes sont gnralement mais pas ncessairement cultives partir de graines. La production de sinsemilla en extrieur seffectue en identifiant et en dtruisant les plantes mles avant la pollinisation ou en faisant appel des femelles rendues artificiellement hermaphrodites (voir la rubrique 3.6.3).
12
3.6.5 Production en intrieur

La culture de cannabis partir de graines signifie que la moiti de la rcolte comporte des plantes mles indsirables. Dans le cas dune production en serre avec optimisation des cots, ceci est gnralement vit par le biais ais du clonage. Le clonage et la production en intrieur vont de pair. On rencontre la production en intrieur surtout dans les pays technologie avance, o de grands sous-sols ou des fabriques abandonnes peuvent gnralement tre amnags. Une ou plusieurs pices dune maison ou du domicile sont aussi souvent utilises comme salle de culture, notamment par des techniques hydroponiques, cest--dire en faisant pousser les plantes dans des solutions de nutriments et non pas dans la terre. Dans la terre, le pH optimal pour la plante se situe entre 6,5 et 7,2. Dans le cas dune culture hydroponique, la solution de nutriments est optimale lorsque son pH est de 5,2 5,8, ce qui rend le cannabis bien adapt la culture hydroponique et donc la production en intrieur car cette fentre de pH est hostile la plupart des bactries et des champignons [19]). On trouvera un exemple et un bilan des tendances de culture illicite du cannabis au Royaume-Uni, y compris les implications lgales et mdico-lgales sy rapportant, dans la rfrence [20].
3.7 Le cannabis industriel

Le cannabis industriel (chanvre industriel) comprend un certain nombre de varits de Cannabis sativa L. destines aux besoins agricoles et industriels. Elles sont cultives pour les graines et les fibres. Le cannabis industriel se caractrise par une teneur faible en THC et une concentration leve de cannabidiol (CBD). Dans la plupart des pays europens, la limite suprieure lgale pour les cultures de cannabis est actuellement de 0,2 % de THC (0,3 % au Canada). Le rapport de CBD THC est suprieur un. Dans de nombreux pays, il existe des listes de cultivars approuvs. Les varits pour lesquelles on observe systmatiquement un dpassement de la concentration de THC lgalement acceptable peuvent tre retires de ces listes. La rcolte pour les fibres seffectue la fin de la floraison des plantes femelles et avant la formation des graines.
3.8 Floraison
La floraison dmarre habituellement lorsquil y a plus de onze heures dobscurit par jour. Le cycle de floraison peut durer entre quatre et douze semaines, en fonction
13
de la souche et des conditions environnementales. Le dlai de floraison donn par les compagnies qui vendent des graines est le temps qui scoule jusqu la floraison pour les plantes cultives partir de graines. Les plantes cultives partir de boutures peuvent prendre environ une semaine de plus pour terminer de fleurir.
3.9 Rcolte
Un bon signe de maturit est la couleur des structures qui ressemblent des cheveux (stigmates). Gnralement, lorsquune fleur mrit, elle se fltrit et brunit. Lorsquenviron 75 % des stigmates sont devenus bruns, les plantes sont prtes rcolter.
3.10 Rendement
Les estimations du rendement moyen et/ou minimal sont intressantes du point de vue lgal et mdico-lgal. Cependant, les estimations de rendement sont une affaire dlicate, dpendent fortement du cultivar/de la souche, de la technique de culture, de la nutrition, ainsi que de lintensit, de la dure et du rythme dillumination, entre autres. Des tudes menes en Australie et en Nouvelle-Zlande ont montr que les rendements de plantes cultives en intrieur et en extrieur varient tellement quappliquer une formule donne pour le matriau humide/sec vendable ou en termes de grammes par plante ou par mtre carr na pas beaucoup de sens*. Nanmoins, il existe des tudes empiriques, lesquelles ont t rsumes ci-dessous. Les variations dues aux diffrents facteurs de culture, mentionns ci-dessus, doivent tre pris en compte. Des tudes menes en Allemagne, aux Pays-Bas et par EUROPOL sont rapportes comme suit:
Tableau I. Rendements indicatifs minimum et/ou moyen de sommits fleuries par plante de cannabis cultive en intrieur
Rendement moyen (g/plante) Rfrence
Rendement minimum (g/plante)
22 25 28 40 33,7
21 22 24 25
* Donnes non publies.
14
Tableau II. Rendements indicatifs dherbe de cannabis sche par unit de surface cultive
Culture en extrieur (g/m2) Culture en intrieur (g/m2) Rfrence
75 505 400
23 24 25
La rfrence 23 indique galement quil faut environ 100 kg dherbe de cannabis (kif) pour produire 1 3 kg de rsine.
3.11 Distribution de 9-THC dans les plantes de cannabis et ses produits drivs [26]
La teneur* en THC varie en fonction de la partie de la plante: 10 12 % 12% 0,1 0,3 % < 0,03 % dans les fleurs pistils dans les feuilles dans les tiges dans les racines
La teneur en THC des diffrents produits du cannabis (herbe, rsine et huile) dpend du rapport des diverses parties de la plante utilises pour sa production. Une tude mene en Suisse en 2006 a montr, par exemple, que les deux tiers des saisies dherbe de cannabis avaient une teneur en THC allant de 2 12 %. La teneur en THC des deux tiers des saisies de rsine allait de 4 21 %, selon les conditions de culture et les mthodes de production (voir aussi le chapitre 3.13.2), alors que lextraction partir de rsine et/ou de sommits fleuries peut donner de lhuile de cannabis ayant une concentration de THC allant jusqu 60 % [27]. Pour plus dinformations sur la teneur en THC des produits du cannabis saisis travers le monde, voir aussi les Rapport mondiaux sur la drogue de lUNODC [9].
3.12 Biosynthse
On pensait jusqu rcemment que la formation dacide ttrahydrocannabinolique (THCA, le prcurseur du THC) seffectuait par cyclisation de lacide cannabidiolique (CBDA). Des tudes plus rcentes ont mis en vidence que cet acide est en ralit form par oxydocyclisation de lacide cannabigrolique (CBGA) par lenzyme THCA-synthase [28, 29, 30, 31].
* Les chiffres concernant la teneur en THC concernent la teneur totale (voir la rubrique 5.4.1).
15
CBGA est le prcurseur du THCA ainsi que du CBDA et de lacide cannabichromnique (CBCA). Le THC, le CBD et le cannabichromne (CBC) correspondants sont gnrs par dcarboxylation. Le cannabinol (CBN) est un produit de dgradation du THC, cest--dire quon ne le trouve pas naturellement et quil sagit dun artefact (voir galement le chapitre 3.14).
3.13 Produits du cannabis

La plante de cannabis est cultive pour les fibres textiles depuis des sicles. Les autres produits lgitimes du cannabis comprennent les graines de cannabis, lhuile de graine de cannabis et lhuile essentielle de cannabis. Les produits illicites du cannabis appartiennent trois catgories principales: lherbe de cannabis, la rsine de cannabis et le cannabis liquide (huile de cannabis). Il est utile dinsister sur le fait quaucun des produits illicites du cannabis ne se ressemblent dans leur aspect physique. Produits partir dune varit de produits naturels grce un procd batch susceptible de varier normment, et ultrieurement soumis des procds et des transformations pour leur trafic, les produits du cannabis se prsentent dans les marchs illicites sous une multitude de formes.
3.13.1
Lherbe de cannabis
Suivant les croyances traditionnelles, on pense encore aujourdhui que seules les sommits fruites et fleuries ainsi que les feuilles prs des sommits fleuries contiennent des quantits significatives de constituants psychoactifs (THC); on les appelle les parties riches en drogue, et ce sont gnralement uniquement ces parties de la plante qui sont vendues sur le march illicite (B de fig. 1, page 8). De fait, ce sont ces parties qui contiennent la plus grande quantit de THC. Cependant, lherbe de cannabis consomme de manire illicite comprend aussi des feuilles plus grandes situes plus loin des sommits fleuries. Les feuilles prs des sommits fleuries mles de plantes de cannabis puissantes contiennent galement des quantits consommables de THC. Toutefois, leur teneur en THC est beaucoup plus faible que celle des plantes femelles et ces feuilles ne constituent donc pas un matriau de premier choix. La tige centrale et les principales tiges latrales contiennent peu de THC mais elles peuvent malgr tout tre utilises pour la production dhuile de cannabis. Les feuilles et les fleurs sches de la plante de cannabis sont connues sous le nom de marie-jeanne mais il existe une foule dautres noms rgionaux [10]. On trouve
16
sur le marche illicite de la marie-jeanne non transforme, cest--dire brute, obtenue directement de la plante (aussi appele fleur sche), transforme sous forme de plaques ou de pastilles compresses, ou en matriau moulu. La prsentation des matriaux herbeux sur le march illicite varie normment dune rgion du monde lautre et lintrieur des pays de chacune des rgions. On peut obtenir un produit de haute qualit en tamisant lherbe de cannabis afin dliminer les parties de la plante contenant relativement peu, ou pas, de cannabinodes. Essentiellement, ceci limine les graines et pratiquement tout le matriau des tiges. Lensemble du matriau herbeux qui passe travers le tamis est driv des sommits fruites et fleuries, si bien que lon obtient un enrichissement relatif en THC. Sur le march illicite, ce produit est connu sous le nom de kif. Cest un produit caractristique de lAfrique du Nord. Ce matriau est riche en rsine de cannabis et peut tre compress en tablettes, dont laspect physique ressemble aux tablettes de rsine de cannabis (haschisch). Cependant, si lon examine ces tablettes au microscope, on voit quelles ont encore les caractristiques essentielles de lherbe (voir aussi la rubrique 5.3.2), et sont donc considres comme une forme de marie-jeanne purifie. Une troisime manire de produire de lherbe de cannabis de haute qualit, manire prdominante dans certains pays dEurope, est la production en intrieur. On utilise gnralement des hybrides extrmement puissants tels que le skunk, la veuve blanche, etc. dans des conditions de culture optimises. La propagation est effectue principalement par clonage des plantes mres (voir la rubrique 3.6.2); il est aujourdhui rare de rencontrer des plantes. Les locaux utiliss pour la culture en intrieur sont souvent des sous-sols, danciennes usines, des entrepts ainsi que des parties inutilises de locaux industriels et commerciaux. Ils sont frquemment quips dun systme automatis dalimentation en eau et en nutriments, dun systme de climatisation, de systmes permettant de filtrer et de dsodoriser lair sortant et dun clairage automatique reproduisant les phases diurnes et nocturnes. La combinaison de conditions de culture idales et de cultivars haute teneur en THC permet dobtenir des produits ayant un taux maximal de THC, souvent deux dix fois plus lev que celui que lon pouvait observer la fin des annes 1980. Il nest pas inhabituel aujourdhui de rencontrer de lherbe de cannabis ayant une teneur en THC de plus de 10 %, de la rsine de cannabis contenant 25 % de THC ou de lhuile de cannabis avec un taux de THC de 60 %. Le procd de schage est simple. Soit les parties contenant la drogue sont coupes, soit la plante entire est suspendue lenvers et sche lair libre. Le schage est achev lorsque les feuilles prs des sommits fleuries deviennent cassantes. Selon le degr dhumidit et la temprature ambiante, ce processus peut prendre autour de 24 72 heures. Le taux dhumidit rsiduelle dans le matriau est denviron 8 13 %. Ce matriau est directement utilisable pour fumer un joint et peut se conserver pendant plusieurs mois bien que le THC se dgrade avec le temps lorsquil est expos lair, la lumire et lhumidit.
17
3.13.2
La rsine de cannabis (haschisch)
Les scrtions rsineuses de la plante, produites par les trichomes glandulaires (voir la rubrique 5.3.2) peuvent tre collectes pour obtenir un produit plus forte teneur en THC et ne contenant pratiquement pas de matriau vgtal reconnaissable. En plus des scrtions, ce produit contient un matriau vgtal plus fin et a un aspect de poudre collante, compresse ou non, selon la mthode de production. La production de rsine de cannabis se concentre principalement dans deux rgions du monde. Les pays du sud et de lest de la Mditerrane constituent lune de ces deux rgions, et les pays dAsie du Sud et du Sud-Ouest forment lautre rgion. Divers procds ont t utiliss dans ces deux rgions pour la production de rsine de cannabis. Cependant, en gnral, les pays dune mme rgion utilisent des techniques semblables. Le tamisage est une importante composante du procd dans les deux rgions.
3.13.2.1 La rsine de cannabis des pays mditerranens Dans cette rgion, le matriau herbeux sch est typiquement battu. Le battage, qui est souvent effectu contre un mur, sert sparer les parties productrices de rsine du reste de la plante. Les particules de rsine de cannabis et les fragments de feuilles de cannabis, ainsi que les graines de cannabis, se dtachent des parties plus fibreuses de la plante. Ces dernires sont jetes. Le matriau est alors tamis afin dliminer les graines et les parties fibreuses les plus grosses. Le produit qui en rsulte est enrichi en rsine et donc en THC. ce stade, le matriau na pratiquement plus de caractristiques botaniques macroscopiques mais un certain nombre dentre elles peuvent encore tre observes au microscope. ce stade, son aspect physique est celui dune poudre fine et collante et il est gnralement compress en tablettes. Un logo en relief, qui peut tre utilis des fins de caractrisation et de comparaison, est parfois cachet sur les tablettes. Dans certains pays ( lest de la Mditerrane) le matriau est plac dans des sacs de toile avant la compression, alors quailleurs (en Afrique du Nord) on ajoute un emballage de cellulose avant la compression. Dans la zone mditerranenne du Nord-Est et en Europe centrale, la poudre fine et collante est parfois vendue sans mme avoir t compresse sous forme de tablettes.
3.13.2.2 La rsine de cannabis dAsie du Sud et du Sud-Ouest Une approche diffrente la production de rsine de cannabis est utilise dans les pays dAsie du Sud et du Sud-Ouest. Les sommits fruites et fleuries des plantes de cannabis qui y sont cultives contiennent des taux levs de rsine si bien que ces parties de la plante sont trs collantes au toucher. Lorsque les sommits fructifres et florifres dune plante frache sont frottes entre les paumes des deux mains, la rsine est transfre de la plante vers la paume de la main. Une approche alternative
18
est de frotter ces parties de la plante contre des nappes de caoutchouc ou de marcher dans un champ de plantes de cannabis en portant une toile caoutchoute ou un vtement de cuir. La rsine saccumule la surface du vtement lorsque celui-ci frle les sommits fructifres et florifres de la plante; une fois quune quantit suffisante de matriau a t collecte, on peut racler la toile caoutchoute ou le cuir pour rcuprer le matriau qui est alors compress en tablettes. La technique dcrite ci-dessus peut tre applique la plante non coupe dans les champs. Une autre possibilit consiste collecter les sommits fructifres et florifres de la mme manire que pour la production dherbe de cannabis, de les laisser scher, puis de les briser et de les craser entre les mains pour former une poudre grossire. Cette poudre est alors tamise afin de la rendre aussi fine que celle que lon obtient dans la rgion mditerranenne. La poudre fine, qui est encore verte, est conserve dans des sacs de cuir pendant quatre cinq mois. La poudre est alors expose au soleil pendant une courte priode toutefois suffisamment longue pour permettre la rsine de fondre. Elle est remise dans les sacs de cuir pendant quelques jours, aprs quoi elle est ressortie et bien ptrie avec des rouleaux en bois jusqu ce quune certaine quantit de matriau huileux apparaisse la surface. Le matriau est ptri jusqu ce quil soit apte tre compress sous forme de tablettes. Une mthode fondamentalement diffrente, qui a galement t utilise dans certaines parties dAsie du Sud et du Sud-Ouest, implique limmersion du matriau vgtal, sans les tiges, dans de leau bouillante. Ceci a pour but dliminer la rsine des sommits fructifres et florifres. Le matriau vgtal utilis pour lextraction est jet et une couche de rsine solidifie se forme la surface du liquide dextraction une fois que celui a refroidi. La rsine est collecte et faonne en tablettes ou de la forme dsire. Le problme de cette mthode est quelle introduit de leau dans la rsine, ce qui fait que les tablettes de rsine ainsi obtenues ont tendance moisir au bout dun certain temps. En termes de quantit, peu de rsine de cannabis est obtenue de cette manire plus labore.
3.13.2.3 La rsine de cannabis de pollinisateurs/ice-o-lateurs Avec la culture en intrieur, une mthode efficace de sparation de la rsine a t dveloppe. Un appareil comparable un sche-linge doubl dun filet mailles serres est plac dans une bote double de matire plastique. Cet appareil, appel pollinisateur est partiellement rempli de sommits fructifres et florifres de plantes de cannabis sches et congeles. Lutilisation de basses tempratures rend la rsine moins collante. Pendant la rotation du pollinisateur, les parties des feuilles et des sommits fleuries contenant du THC se cassent et passent travers le filet. Elles collent la paroi et la base plastifies et peuvent ensuite tre collectes sous forme de poudre fine. Ce procd permet un enrichissement en THC dun facteur de 8 par rapport au matriau sec initial.
19
Figure 4.
Pollinisateur et rsine collante en poudre (produit) [32]
Une mthode semblable est utilise pour produire ce que lon appelle le ice hash (hash glace), o le matriau vgtal sch est plac dans une passoire grossire avec des glaons puis agit laide dun agitateur de peinture mcanique. La glace fait geler les boulettes de rsine, qui tombent alors de la plante. Le processus est rpt en srie avec des passoires de plus en plus fines jusqu lobtention dun produit sous forme de poudre.
3.13.3
Le cannabis liquide (huile de haschisch)
Le cannabis liquide est un liquide extrait partir dherbe de cannabis ou de rsine de cannabis. Le cannabis liquide est produit afin de concentrer lingrdient psychoactif, savoir le THC. Ceci peut permettre aux trafiquants dviter linterdiction puisquune plus grande quantit de matriau psychoactif se trouve concentre dans une plus petite quantit de produit. Il est galement intressant pour le trafiquant de pouvoir mettre le cannabis liquide dans nimporte quelle cavit et dutiliser des cachettes qui ne peuvent pas facilement contenir de lherbe de cannabis ou de la rsine de cannabis, ce qui rduit les risques de dtection par la forme ou lodeur du matriau. Lextraction seffectue dans un rcipient appropri contenant un solvant organique (ex. ther de ptrole, thanol, mthanol, actone) temprature ambiante, en remuant, par extraction passive ou au reflux. Lorsquon juge que le lot de cannabis ou de rsine de cannabis a t compltement extrait, la suspension est filtre et le matriau extrait est jet. Si ncessaire, un deuxime lot de cannabis frais peut tre plac dans le rcipient et extrait avec le lot de solvant utilis pour la premire extraction. Ce procd peut tre rpt aussi souvent que ncessaire, en utilisant plusieurs lots de cannabis et de rsine de cannabis pour un seul lot de solvant dextraction. Aprs lextraction du dernier lot, le solvant est vapor pour obtenir la consistance dhuile requise. Dans les laboratoires clandestins,
20
particulirement dans les pays o les solvants organiques sont chers ou difficiles acheter, le solvant en excs peut tre rcupr pour une utilisation ultrieure. En gnral, le cannabis liquide, quil soit prpar partir de cannabis ou de rsine de cannabis, est de couleur marron fonc ou vert fonc et a la consistance dune huile paisse ou dune pte.
3.13.4 Les graines de cannabis et lhuile de graine de cannabis

Les graines de cannabis reprsentent une source mal connue mais importante dacides gras -3. Lhuile de graine de cannabis est un liquide jaune transparent. La graine contient environ 29 34 % dhuile en termes de poids [33]. Cent grammes dhuile de graine de cannabis contiennent environ 19 g dacide -linolnique. Le rapport dacides gras -6/-3 de 3:1 fait de lhuile de graine de cannabis un nutriment de haute qualit. Cependant, en raison de sa haute proportion dacides gras non saturs, son huile tend rancir rapidement si elle nest pas conserve dans un endroit sec labri de la lumire. Bien que la graine soit enveloppe dans la bractole, la partie de la plante ayant la plus grande densit de trichomes glandulaires et donc la plus haute teneur en THC, les graines elles-mmes ne contiennent pas de THC. Cependant, elles peuvent tre contamines avec des matriaux de cannabis (ex. des sommits fleuries, des enveloppes ou de la rsine) si bien que lon pourra dtecter des traces de THC. De mme, si lon dtecte du THC dans de lhuile de graine de cannabis, celui-ci provient sans doute dune mauvaise sparation des graines et de la bracte [34].
3.13.5 Lhuile essentielle de cannabis

Lhuile essentielle de cannabis est un liquide lgrement jaune et transparent. Elle est obtenue par distillation la vapeur de plantes de cannabis frachement coupes. Il ny a pas de demande importante pour cette huile essentielle et il semblerait quil sagit plutt dun produit annexe de la production dhuile de graine ou dhuile de haschisch. Lhuile essentielle ne contient pas de THC mais est responsable de lodeur caractristique des produits du cannabis, ce qui permet aux chiens renifleurs de les identifier.
3.14 Estimation de lge des chantillons de cannabis

Il ny a pas de CBN dans le cannabis frachement et prcautionneusement sch. Sil est prsent, cest que lchantillon a commenc se dgrader et ne doit pas
21
tre utilis titre comparatif. Il est possible destimer lge dun chantillon de cannabis donn sur la base de sa teneur en THC et en CBN en supposant quil a t conserv temprature ambiante. Cest pour cette raison que lanalyse des fins comparatives nest gnralement pas effectue plus de trois mois aprs la saisie de lchantillon [35]. Le THC semble se dgrader plus rapidement au cours de la premire anne que durant les annes suivantes. Une tude indique que les chantillons ayant un rapport CBN THC de moins de 0,013 ont moins de six mois alors que ceux qui ont un rapport entre 0,04 et 0,08 ont un deux ans. Cependant, il est important de prendre en compte les variations par rapport aux conditions exprimentales lorsquon fait appel cette mthode pour estimer lge des chantillons de cannabis [36].
3.15 Le cannabis destin la production de drogue ou de fibres

Comme il a t dcrit dans la rubrique 3.7, la concentration totale de THC est utilise pour dfinir le cannabis de type fibres (cf. la limite suprieure lgale actuelle de THC pour le chanvre industriel de 0,2 et 0,3 % pour lEurope et le Canada respectivement). Une autre manire simple de distinguer entre le cannabis type drogue ou type fibres est dutiliser le rapport des principaux cannabinodes, le THC, le CBN et le CBD [37]. Comme il a t dcrit plus haut dans la rubrique 3.12, le CBD et le THC sont tous deux des drivs biosynthtiques du CBGA par le biais des acides CBDA et THCA respectivement. Si le rapport des aires de pic** de [THC+CBN] : [CBD] est <1, la plante de cannabis est considre de type fibres. Si le rapport est >1, elle est considre de type drogue. Comme le THC est partiellement oxyd en CBN une fois que le matriau vgtal a t coup et sch, la somme des aires de pic de THC et de CBN est utilise et divise par laire du pic de CBD.
X=
[THC ] + [CBN ] [CBD]
[THC]
Aire de THC dans le chromatogramme Cannabis de type drogue Cannabis de type fibres
X>1 X<1
* Cest--dire le rapport des aires de pic du chromatogramme gazeux (GC-FID).
4.
Constituants chimiques dintrt mdico-lgal

CAS: Formule empirique: Poids molculaire: Point de fusion pKa log P Solubilits: Eau thanol Chloroforme Hexane 1972-08-3 C21H30O2 314,46 g/mol huile visqueuse 10,6 6,99 (octanol/eau) insoluble (2,8 mg/L 23 C) soluble soluble soluble
(-)-9-trans-ttrahydrocannabinol Ttrahydrocannabinol, THC
CH3
8 9 10 7 10a 6a 6 5
OH
1 4 2 3
H3C H3C
Principales caractristiques pharmacologiques: Euphorisant Anti-inflammatoire Antalgique Antimtique Acide (-)-9-trans-ttrahydrocannabinolique THCA
CH3 OH COOH H3C H3C O
CAS: Formule empirique: Poids molculaire: Point de fusion
23978-85-0 C22H30O4 358 g/mol n/a (dcomposition/ dcarboxylation du THCA en THC environ 125-150 C) insoluble soluble soluble soluble
Principales caractristiques pharmacologiques: Antibactrien Antibiotique
Solubilits: Eau thanol Chloroforme Hexane
23
24
Cannabinol CBN
CH3 OH
CAS: Formule empirique: Poids molculaire: Point de fusion log P Solubilits: Eau thanol Chloroforme Hexane
521-35-7 C21H26O2 310,43 g/mol 76-77 C 6,23 (octanol/eau) insoluble soluble soluble soluble
H3C H3C
Principales caractristiques pharmacologiques: Sdatif Anticonvulsif Antibiotique Anti-inflammatoire Cannabidiol CBD
CH3
2 1
OH
1' 2'
CAS: Formule empirique: Poids molculaire: Point de fusion log P Solubilits: Eau thanol Chloroforme Hexane
13956-29-1 C21H30O2 314,46 g/mol 66-67 C 5,79 (octanol/eau) insoluble soluble soluble soluble
H2C
HO CH3
Principales caractristiques pharmacologiques: Anxiolytique Anti-inflammatoire Antipsychotique Antispasmodique Antalgique Cannabigrol CBG
CAS:
OH
5 4 6 3 2 1 7 8
[25654-31-3] (E); [95001-70-0] (E/Z) Formule empirique: C21H32O2 Poids molculaire: 316,48 g/mol
HO
Principales caractristiques pharmacologiques: Antibiotique Anti-inflammatoire Antifongique Antalgique
25
Cannabivarine CBV
CH3 OH
CAS: 33745-21-0 Formule empirique: C19H22O2 Poids molculaire: 282,38 g/mol
H3C H3C
O
CAS: 20675-51-8 Formule empirique: C21H30O2 Poids molculaire: 314,46 g/mol
Cannabichromne CBC OH
O
Principales caractristiques pharmacologiques: Anti-inflammatoire Antifongique Antibiotique Antalgique
5.
Analyse qualitative et quantitative des produits du cannabis
5.1 chantillonnage
La raison principale dune procdure dchantillonnage est de permettre une analyse chimique prcise et valable. Dans la mesure o la plupart des mthodes qualitatives et quantitatives utilises pour lanalyse de drogues dans les laboratoires de police scientifique ncessitent de trs petites quantits de matriau, il est indispensable que ces petites quantits soient reprsentatives de lensemble partir duquel elles ont t prleves. Lchantillonnage doit tre conforme aux principes de chimie analytique tels quils ont t tablis, par exemple, par les pharmacopes internationales ou les organisations rgionales et internationales [38]. Il peut se prsenter des situations o, pour des raisons lgales, les rgles habituelles dchantillonnage et dhomognisation ne peuvent tre appliques. Ceci peut tre le cas, par exemple, si lanalyste souhaite prserver une partie dune pice conviction comme preuve visuelle au tribunal. Pour les tablettes compresses, il est galement important dtre sr que la barrette entire est compose de cannabis. Ceci peut tre vrifi en rompant la barrette et en examinant le matriau attentivement. Par conomie de temps et de ressources prcieuses, les laboratoires de police scientifique doivent, autant que faire se peut, chercher utiliser un systme dchantillonnage valid afin de rduire le nombre de dterminations quantitatives requises. Afin de faciliter cette dmarche, il est recommand dutiliser les procds ci-dessous. Ceux-ci sont bass sur le procd dchantillonnage recommand par lUnion europenne pour les cultures de cannabis en extrieur pour le chanvre industriel [39] et ont t adapts pour prendre en compte les aspects pratiques et la varit des produits du cannabis du march illicite.
5.1.1 chantillonnage des plantes (cultures intrieures et extrieures)

Pour chaque champ de cannabis considr visuellement comme tant cultiv dune seule et mme espce 30 sommits fructifres ou florifres dune longueur
27
28
denviron 20 cm, raison dune par plante, choisies de manire alatoire et non en bordure du champ, sont coupes et conserves dans un sac en papier. Pour lidentification (analyse qualitative), lchantillonnage dune plante reprsentative de la manire dcrite est habituellement considr suffisant*.
Figure 5. chantillonnage des sommits fructifres de la plante
Dans la mesure du possible, lchantillon doit tre sch avant de lenvoyer au laboratoire. Sil doit tre conserv pour quelque raison que ce soit avant de pouvoir tre analys, il devra tre conserv au froid et labri de la lumire. Une fois lchantillon sch, la dgradation des principaux cannabinodes est stoppe. Cependant, ce stade, le THC demeure sensible lair (oxygne) et aux rayons UV qui oxydent le THC en CBN. Les conditions de conservation les plus favorables sont donc au froid en labsence de lumire.
5.1.2 chantillonnage des saisies de produits du cannabis

En ce qui concerne les conditions gnrales dchantillonnage qualitatif multi-units, on pourra consulter la rfrence 38. Pour les matriaux prsentant des caractristiques externes videntes, cest--dire tout matriau reconnaissable comme tant du cannabis, une mthode dchantillonnage base sur le modle de Bayes peut tre privilgie par rapport lapproche hypergomtrique. 5.1.2.1 Lherbe de cannabis On trouve sur le march illgal une grande varit de produits base dherbe de cannabis, y compris des matriaux vgtaux en vrac ou sous forme de fleurs sches, de sachets ou de tisanes. Comme il a t dcrit dans la rubrique
*Voir lexemple dun champ de chanvre dans la rfrence 38 concernant la comparaison des approches hypergomtrique et baysienne.
29
prcdente, un chantillon doit comporter 30 pices considres comme appartenant au mme phnotype. Sil y a moins de matriau, tout est collect. Le matriau grossier des tiges nest pas inclus. Les graines des sommits fructifres, elles, restent dans la pice conviction. Les matriaux humides doivent tre emballs dans des sacs en papier. Les matriaux secs peuvent en revanche tre placs dans des sacs en matire plastique. 5.1.2.2 La rsine de cannabis La rsine de cannabis peut tre collecte telle quelle. La quantit requise par chantillon (voir la rubrique 5.4) peut tre collecte laide dune rpe plusieurs endroits de la tablette. Cependant, puisque les surfaces de la tablette sont gnralement oxydes, les chantillons doivent tre pris de la surface interne dune fracture frache de la tablette. 5.1.2.3 Le cannabis liquide (huile) La quantit requise dhuile de cannabis (voir la rubrique 5.4) peut tre prise telle quelle.
5.2 Critres minimum didentification positive pour le cannabis

Les rubriques suivantes dcrivent plusieurs mthodes permettant dexaminer et danalyser les produits du cannabis. Le choix de la mthodologie et de lapproche lanalyse ainsi que la dcision quant la ncessit de faire ou non appel des mthodes complmentaires appartiennent lanalyste et dpendront aussi de la disponibilit dinstruments appropris et du niveau de preuve lgalement acceptable dans la juridiction dans laquelle il/elle travaille. Pour les produits du cannabis prsentant des caractristiques vgtales typiques, on considre que la combinaison dun test colorimtrique, dune chromatographie sur couche mince et dun examen physique (macroscopique et microscopique) constitue lapproche analytique minimum pour une identification positive. Des rgles gnrales portant sur la slection des mthodes ont t formules par le Groupe de travail scientifique sur les drogues (SWGDRUG) [40].
5.3 Analyse physique

Les mthodes utilises pour identifier les produits du cannabis dpendront de la nature du produit. Les matriaux herbeux peuvent tre identifis daprs leurs caractristiques morphologiques uniquement condition que les caractristiques requises soient prsentes.
30
En labsence de caractristiques morphologiques, comme dans le cas de la rsine et de lhuile de haschisch, lidentification est base sur une analyse chimique qui dmontrera la prsence de cannabinodes tels que le ttrahydrocannabinol (THC) et son/ses produit(s) de dgradation, le cannabinol (CBN) et/ou le cannabidiol (CBD).
5.3.1 Caractristiques macroscopiques

Les caractristiques morphologiques et les variations de couleur des plantes de cannabis sont influences par la souche de graines ainsi que par les facteurs environnementaux tels que la lumire, leau, les nutriments et lespace. tant dioques, les fleurs des plantes individuelles sont unisexues mais il existe souvent des fleurs en transition et des fleurs du sexe oppos qui se dveloppent ultrieurement. Les plantes mles sont gnralement plus grandes mais moins robustes que les plantes femelles. Les tiges sont vertes, dresses, creuses et canneles (fig. 6). Elles peuvent varier en hauteur de 0,2 6 m mais la plupart des plantes atteignent 1 3 m de haut. Le degr de ramification, tout comme la hauteur de la plante, dpend de lenvironnement et des facteurs hrditaires ainsi que de la mthode de culture. Les ramifications latrales varient dune position oppose alterne sur lensemble de la tige principale. Larrangement dcuss (oppos) des feuilles devient altern aux extrmits de la plante. Les tiges des feuilles (ptioles) font 2 7 cm de long et prsentent un troit sillon le long de la face suprieure. La feuille est palme et comprend 3 9 lames foliolaires linaires et lancoles de 3-15 x 0,2-1,7 cm. Les bords sont grossirement dents, les dents pointant vers les extrmits; les veines courent en oblique de la nervure centrale vers lextrmit des dents. Les faces foliaires infrieures (abaxiales) sont de couleur vert ple et comportent des glandes rsineuses disperses de couleur blanche jaune-brun (fig. 7).
Figure 6. Tige cannele de Cannabis sativa
Police criminelle fdrale, Brsil
31
Figure 7.
Surface abaxiale ( gauche) et surface adaxiale ( droite) de feuilles de Cannabis sativa
Chaque fleur tamines (mle) comprend cinq spales pubescents dun vert blanchtre et denviron 2,5 4 mm de long et de cinq tamines tombantes composes de fins filaments et danthres.
Figure 8.
Caractristiques morphologiques des fleurs mles
Spale Filament tamine Anthre
Les fleurs pistils (femelles) sont plus ou moins sessiles et se prsentent par paires. Chaque fleur possde une petite bracte verte enveloppant lovaire et deux longs et fins stigmates qui se projettent bien au-dessus de la bracte.
32
Figure 9.
Caractristiques morphologiques des fleurs et des fruits femelles
Stigmate
Bracte en forme de bec
Graine (Akne)
Le fruit, un akne, contient une graine unique enveloppe dure recouverte de prs par la paroi mince de lovaire, ellipsode, lgrement compresse, lisse, denviron 2 5 mm de long et gnralement bruntre et tachete. Le fruit est gnralement considr comme tant une graine.
5.3.2 Caractristiques microscopiques

Cannabis sativa peut tre identifi par des structures microscopiques la surface de la plante, telles que les trichomes (cest--dire des projections de cellules pidermiques vgtales semblables des cheveux). Il existe deux types de trichomes que lon peut observer au microscope binoculaire de grossissement 40, comme le montrent les figures 10 et 11: a) Les trichomes non glandulaires sont des poils incurvs unicellulaires, rigides et nombreux dont le sommet est mince et pointu: " Les trichomes cystolithiques que lon trouve sur la face suprieure des feuilles de cannabis ont une forme caractristique de griffe dours et leur base peut prsenter des dpts de cristaux de carbonate de calcium (cystolithes). Le trichome est souvent rompu, librant ainsi le cystolithe; " Les trichomes non cystolithiques se situent principalement sur la face infrieure des feuilles, des bractes et des bractoles et ne prsentent pas dlargissement de leur base; " La prsence simultane de ces trichomes en forme de griffe dours sur la face suprieure des feuilles et des fins trichomes non cystolithiques sur leur face infrieure est une caractristique du cannabis.
33
Figure 10. Vue microscopique de trichomes non glandulaires [41]
Trichomes cystolithiques
Trichomes non cystolithiques
b)
Trichomes glandulaires. Ils existent sous forme de: " Glandes sessiles, cest--dire des trichomes sans tige, que lon trouve gnralement sur lpiderme infrieur; " Petits trichomes glandulaires bulbeux tige unicellulaire; " Longues tiges multicellulaires sur les bractoles entourant les fleurs femelles (trichomes glandulaires tige multicellulaire).
Figure 11. Vue microscopique de trichomes glandulaires [41]
Glandes sessiles
Trichomes glandulaires ptiols
34
Figure 12.
Coupe transversale dune bracte de plante fructifre [42]
a: trichome cystolithique; b: grand trichome glandulaire possdant plusieurs cellules dans la tte et la tige; c: tte de lun des grands trichomes cellulaires; d: petit trichome glandulaire tte bicellulaire et tige unicellulaire; e: trichomes conique paroi paisse; f: grand trichome glandulaire en cours de dveloppement; g: tige dune grand trichome glandulaire; h: cellule palissadique; i: cristal dun agrgat; j: cellule parenchymale; k: stomates
Les trichomes glandulaires sont les structures o la rsine de cannabis est la fois produite et stocke. Elles sont principalement associes aux structures de la fleur (les plantes pistils tant particulirement riches en structures de ce type) mais on les trouve aussi sur la face infrieure des feuilles et parfois sur les tiges de jeunes plantes. Certaines plantes possdent des trichomes susceptibles dtre confondus avec ceux de Cannabis sativa et la prudence simpose pour conclure une identification certaine. Cependant, la combinaison de poils cystolithiques sur la face suprieure de la feuille et de trichomes plus longs et de glandes sessiles sur la face infrieure, qui est unique au Cannabis sativa, permet une identification positive mme dans le cas de matriaux fragmentaires. Il convient toutefois de noter que les pousses trs immatures et les tiges dnues de feuilles ne peuvent tre identifies de manire concluante comme tant Cannabis sativa par un simple examen botanique. Pour plus dinformation sur lidentification du cannabis et des techniques de microscopie plus sophistiques, on pourra consulter la littrature de rfrence [43, 44, 45, 46].
35
5.4 Analyse chimique

5.4.1 Gnralits
Le THC est gnralement prsent concentration relativement faible dans le matriau vgtal et lon considre quil est driv artificiellement du THCA par dcarboxylation non enzymatique lors de sa conservation et de sa consommation (ex. en fumant) [47]. En termes dapproche analytique, il sagit de choisir entre mesurer le THCA et le THC sparment ou le THC total (cest--dire la quantit combine de THC et de THCA). Ce choix relve parfois de la lgislation nationale. Sil ny a pas dexigence lgale relative lune ou lautre de ces approches, on mesure habituellement le THC total puisque cest ce qui est le plus reprsentatif de lactivit pharmacologique du matriau. Le THC total peut tre obtenu par dcarboxylation du THCA en THC, ce qui peut se faire avant ou pendant lanalyse. Pour des raisons pratiques, il est recommand de le faire avant. Lextrait dchantillon peut tre plac dans un bloc de chauffage 150 C dans un flacon de verre ouvert. Aprs vaporation du solvant, la dcarboxylation est complte au bout de cinq minutes. Cependant, il est recommand que cette tape soit valide dans chaque laboratoire de police scientifique. La dcarboxylation complte du THCA peut se faire lors de linjection dans certains systmes dinjection de chromatographie gazeuse alors que dautres systmes dinjection ne donnent quune faible dcarboxylation la mme temprature. Ceci est sans doute d aux diffrences de gomtrie des injecteurs. Une temprature dinjection plus leve peut aussi provoquer la dcomposition du THC dans la doublure. Par consquent, si la dcarboxylation nest pas effectue avant lanalyse, le systme spcifique de chromatographie gazeuse et les conditions danalyse doivent tre valids afin de sassurer quils donnent lieu une dcarboxylation complte du THCA et ne provoquent pas de dcomposition du THC [48].
5.4.2 Prparation des chantillons pour lanalyse chimique

5.4.2.1 Prparation de lherbe de cannabis Le matriau vgtal frais (humide) est soit sch lair libre temprature ambiante pendant plusieurs jours, soit sch 70 C jusqu ce que les feuilles deviennent cassantes. ce stade, lhumidit du matriau vgtal est typiquement de lordre de 8 13 %.
36
Le matriau sch est ensuite tri de manire approximative (seules les fleurs et les feuilles sont utilises), rduit en poudre (de prfrence avec un broyeur couteau haute vitesse, cest--dire 100 tr/s), puis tamis (mailles de 1 mm)*.
5.4.2.2
Prparation de la rsine de cannabis
La rsine de cannabis est rduite en petits morceaux laide dune rpe. Dans le cas dun matriau collant, lchantillon peut aussi tre refroidi avec de lazote liquide et immdiatement rduit en poudre tel quil est dcrit plus haut.
5.4.2.3
Prparation de lhuile de cannabis
Lhuile de cannabis peut tre utilise telle quelle pour lanalyse.
5.4.3 Tests prsomptifs

5.4.3.1 Tests colorimtriques Les tests colorimtriques pour le cannabis font partie des tests colorimtriques disponibles les plus spcifiques (seules quelques plantes telles que le henn, la noix de muscade, le macis et laigremoine donnent de faux positifs) [49]. Cependant, un rsultat positif par test colorimtrique ne donne quune indication de la prsence possible de matriau contenant du cannabis et ne permet pas lidentification concluante de cannabis. Il est donc obligatoire pour lanalyste de confirmer ce type de rsultat laide de techniques additionnelles, typiquement plus discriminantes. Par exemple, un laboratoire peut permettre lassociation dun test colorimtrique, de chromatographie sur couche mince (TLC) et de microscopie pour lidentification positive dun matriau vgtal de cannabis condition que trois cannabinodes diffrents soient identifis par TLC [50]. Lanalyste est aussi fortement incit analyser en parallle un chantillon tmoin de cannabis (ex. un matriau de rfrence contenant un mlange de cannabinodes de rfrence) et un chantillon en aveugle afin de vrifier les rsultats des tests ainsi que la fonctionnalit et la fiabilit de tous les ractifs utiliss.
* Il est bon de noter que le schage ainsi que le tamisage font partie des mthodes valides dcrites dans ce manuel. Le tamisage assure lhomognit des chantillons. Si le procd de tamisage nest pas utilis, le laboratoire devra dmontrer que lhomognit reste dans les limites acceptables.
37
5.4.3.1.1 Test base de sel Fast Corinth V Sur un papier-filtre Ractif A: Ractif B: Ractif C: Mthode Plier deux papiers-filtres superposs en quatre puis les ouvrir partiellement afin de former un entonnoir et placer une petite quantit dchantillon en poudre au centre du papier-filtre suprieur. Ajouter deux gouttes de ractif A et laisser le liquide pntrer jusquau papier-filtre infrieur. Jeter le papier-filtre suprieur et laisser scher le papier-filtre infrieur. Ajouter une trs petite quantit de ractif B au centre du papier-filtre, puis deux gouttes de ractif C. Rsultats Une tache de couleur rouge violac au centre du papier-filtre indique la prsence de cannabis dans le produit analys. Le THC, le CBN et le CBD donnent la mme teinte. Ceci reprsente un avantage pour un ractif de test de terrain qui sapplique des chantillons dges divers et dorigines diffrentes.
*Sel Fast Corinth V = = = Dichlorozinc; 2-mthoxy-5-mthyl-4-(4-mthyl-2-nitrophnyl) diaznylbenznediazonium; dichlorure Composant diazoque 39 C5H14N5O3 0,5 ZnCl4
ther de ptrole Sel Fast Corinth V* Bicarbonate de sodium 1 % p/p dans du sulfate de sodium anhydre 1 % p/p en solution aqueuse
5.4.3.1.2 Test base de sel Fast Blue B Sur un papier-filtre Ractif A: Ractif B: Ractif C: Mthode Mme procd quavec le sel Fast Corinth V. ther de ptrole Sel Fast Blue B** Bicarbonate de sodium 1 % p/p dilu avec du sulfate de sodium anhydre 10 % p/p en solution aqueuse
38
Rsultats Une tache de couleur rouge violac au centre du papier-filtre indique la prsence de cannabis dans le produit analys. Cette couleur est la combinaison des couleurs produites par les divers principaux composants cannabinodiques du cannabis: THC = rouge, CBN = violet, CBD = orange. Note Le sel Fast Blue B se conserve trs bien au rfrigrateur mais a tendance saltrer avec le temps temprature ambiante, quand la poudre se solidifie comme une roche (surtout dans les rgions chaudes).
** Sel Fast Blue B = Chlorure de di-o-anisidinettrazolium
5.4.3.1.3 Test rapide de Duquenois (Test Duquenois-Levine) Dans un tube essai Ractif A: Actaldhyde (A1) Vanilline (A2) 0,5 ml (A1) et 0,4 g (A2) dans 20 ml dthanol La solution doit tre conserve au frais labri de la lumire et devra tre jete si elle devient jaune fonc.
Ractif B: Ractif C: Mthode
Acide chlorhydrique concentr Chloroforme
Placer une petite quantit de matriau suspect dans un tube essai et agiter avec 2 ml de ractif A pendant une minute. Ajouter 2 ml de ractif B et agiter le mlange. Laisser reposer pendant dix minutes. Si une couleur apparat, ajouter 2 ml de ractif C, puis mlanger doucement. Rsultats Si la couche infrieure (chloroforme) devient violette, ceci indique la prsence dun produit du cannabis. Note Ce test nest pas aussi sensible que les tests deux papiers-filtres dcrits plus haut.
39
5.4.3.2 Tests immunologiques Les tests immunologiques peuvent tre effectus non seulement sur des chantillons biologiques mais aussi sur des traces infimes de la drogue en question. Cependant, tant donn que ces analyses sont onreuses et najoutent pas beaucoup de poids lensemble des preuves, elles sont rarement utilises dans le cadre dune identification prsomptive.
5.4.4 Spectromtrie de mobilit ionique (IMS)

Le dpistage du THC peut seffectuer laide dun spectromtre de mobilit ionique. Des problmes de sparation des signaux dhrone et dhumidit ont t rapports [51]. Ce nest donc pas la mthode privilgier.
5.4.5 Chromatographie sur couche mince (TLC)

Il existe plusieurs mthodes de TLC pour lanalyse qualitative et semi-quantitative du cannabis, utilisant diverses phases stationnaires (plaques TLC) et systmes de solvants, ainsi que des variations de techniques de prparation des chantillons et de visualisation des taches. Un grand nombre de ces mthodes produisent des rsultats acceptables mais chaque mthode nouvellement introduite devra tre valide et/ ou vrifie avant dtre utilise en routine. La mthode suivante a t teste sur le terrain et est considre comme adapte aux fins vises. Plaque: Gel de silice HPTLC, 10 x 10 cm Systme A: Systme B: ther de ptrole 60/90 ther dithylique Cyclohexane ther diisopropylique Dithylamine n-Hexane Dioxane Mthanol 80 % v/v 20 % v/v 52 % v/v 40 % v/v 8 % v/v 70 % v/v 20 % v/v 10 % v/v
Systme C: (pour les acides cannabinodiques)
Conditionnement du bac: 30 min. avec un papier-filtre sur lun des cts. Prparation de lchantillon Si lanalyse de THC est uniquement effectue des fins qualitatives (cest--dire pour confirmer les preuves micro- et macroscopiques indiquant que le matriau suspect est bien du cannabis), il nest pas ncessaire dhomogniser le matriau herbeux (voir la rubrique 5.4.2 pour plus dinformations sur la prparation des
40
chantillons pour lanalyse chimique). Ce sont les parties de la plante de cannabis ayant la plus haute teneur en cannabinodes (cest--dire les sommits fleuries et les feuilles du haut de la plante) que lon devra choisir pour lextraction. Les quantits appropries pour lextraction sont denviron 500 mg dherbe de cannabis, 100 mg de rsine de cannabis et 50 mg de cannabis liquide (huile de cannabis). Le protocole dextraction doit tre conu de manire produire des solutions finales ayant une concentration denviron 0,5 mg/ml. Les concentrations typiques de THC pour les matriaux de cannabis sont indiques dans la rubrique 3.11. Lchantillon est extrait avec 10 ml de solvant pendant 15 minutes temprature ambiante par agitation ou dans un bain ultrasons. Lextrait est filtr, aprs quoi il est prt pour la chromatographie*. Puisque les cannabinodes sont facilement solubiliss dans la plupart des solvants organiques, le mthanol, lther de ptrole, le n-hexane, le tolune, le chloroforme ainsi que des combinaisons de solvants telles que le mthanol: chloroforme (9:1) sont aussi adapts les uns que les autres son extraction. Il faut cependant noter que les solvants non polaires tels que le n-hexane et lther de ptrole donnent un extrait relativement propre mais ne pourront extraire quantitativement que les cannabinodes neutres/libres, alors que les autres solvants et leurs combinaisons donnent aussi des extractions quantitatives des acides cannabinnodiques. Pour une identification, lextraction propre la plus simple lther de ptrole suffit, alors qu des fins quantitatives et pour la dtermination de la quantit totale de THC, il convient dutiliser dautres solvants. Solutions de rfrence Les solutions de rfrence doivent tre prpares une concentration denviron 0,5 mg de cannabinode par ml dans du mthanol et conserves au frais labri de la lumire. Visualisation Les plaques doivent tre sches avant la visualisation. Ceci peut tre effectu temprature ambiante ou laide dune bote de schage, dun four ou dair chaud. Dans le cas des dernires options, il convient de veiller ce quaucun des composs viss ne soit dcompos.
* Il convient de noter que la mthode dcrite fait partie dun procd qui a t test sur le terrain et jug appropri. On peut galement faire appel une extraction passive, o le mlange chantillon/ solvant est simplement laiss en contact. On peut procder une filtration mais celle-ci nest pas ncessaire; lutilisation du liquide surnageant devrait pouvoir produire des rsultats fiables. des fins didentification, de plus petites quantits de solvant et dchantillon peuvent suffire. Toute modification de la mthode dcrite doit tre value dans le laboratoire de lanalyste.
41
Ractif de pulvrisation: (doit tre frachement prpar avant lutilisation, de prfrence une fois par jour)* Mthode 1: Mthode 2: Note Afin que la couleur se dveloppe bien, il est important que la plaque TLC soit rendue alcaline. Ceci peut se faire entre autres par la mthode 1 de visualisation. Alternativement, on peut pulvriser de la dithylamine sur la plaque TLC avant la solution de Fast Blue B. Dans tous les cas, les plaques ne doivent pas tre trop mouilles sous peine de voir les taches diffuser. Fixation Afin den garder une trace permanente, les rsultats de lanalyse doivent tre prservs. La meilleure manire dassurer leur prservation est de procder des pulvrisations successives. Ainsi, la squence de pulvrisation sera: Dithylamine Solution de Fast Blue B Dithylamine Les plaques sont ensuite sches lair chaud ou temprature ambiante pendant une nuit. Pour la conservation, les plaques sont scelles dans des sacs en matire plastique transparents. Ces plaques ont une dure de vie importante et nont pas tendance foncer. Alternativement, les plaques peuvent tre scannes ou photographies afin de garder une trace permanente des rsultats de lanalyse. Note Puisque le Fast Blue B est dclar tre un puissant cancrigne, il convient de prendre les prcautions adquates avec ce ractif. Rsultats Les valeurs Rf x 100 sont susceptibles de varier en fonction des conditions des divers laboratoires (temprature, humidit, etc.) ainsi que dautres paramtres (ex. ge et qualit des matriaux de cannabis utiliss). Une bonne pratique consiste donc faire courir des chantillons de cannabinodes de rfrence en parallle avec lchantillon analys sur la mme plaque TLC. Sel Fast Blue B Sel Fast Blue B 50 mg dans 20 ml de NaOH (0,1 N) 50 mg dans 1 ml deau avant dajouter 20 ml de mthanol.
* La prparation journalire du ractif de pulvrisation peut ne pas tre ncessaire lorsque le Fast Blue BB ou le Fast Blue RR sont utiliss (solution 0,2 % p/v de Fast Blue BB ou de Fast Blue RR dans du mthanol ou un mlange mthanol/eau 1:1).
42
Compos CBN THC CBD THCA
Systme de dveloppement, valeurs Rf x 100* A 33 37 42 6 B 26 38 42 C** 47 49 47 36
* Les rsultats se rfrent lutilisation dune mthode utilisant des plaques HPTLC, dcrite dans cette rubrique. Les plaques traditionnelles de 20 x 20 cm avec une couche paisse de 0,25 mm de gel de silice permettent dobtenir des sparations comparables, mais les valeurs Rf correspondantes devront tre dfinies. ** Le systme C nest recommand que pour la sparation et lidentification des acides cannabinodiques. Il ne permet pas une sparation adquate du CBN, du THC et du CBD.
5.4.6 Chromatographie gazeuse-dtection par ionisation de flamme (GC-FID), avec et sans drivatisation
La drivatisation est ncessaire ou non selon le but de lanalyse. Sans drivatisation pralable (cest--dire silylation) du THC et du THCA, lanalyse GC provoquera la dcarboxylation de ces derniers et donnera la teneur totale en THC de lchantillon de cannabis, cest--dire la somme du THC libre et du THC produit partir du THCA. Comme la teneur totale en THC reprsente la puissance maximale du cannabis habituellement fum (et donc aussi dcarboxyl), la plupart des lgislations considrent que la teneur totale en THC est le paramtre pertinent. Cependant, si les deux concentrations doivent tre rapportes, une drivatisation pralable est ncessaire (voir aussi la rubrique 5.4.1).
5.4.6.1 Technique colonnes capillaires* La mthode ci-dessous est une mthode valide [52]. La validation comprend lensemble du procd depuis la prparation de lchantillon jusqu lanalyse GC. Dautres mthodes peuvent aussi produire des rsultats acceptables mais doivent tre valides et/ou vrifies avant toute utilisation de routine.
* La technique colonnes remplies nest plus dcrite dans ce manuel dans la mesure o les systmes GC sont aujourdhui habituellement quips de colonnes capillaires (colonnes troites ou grand diamtre interne). Les laboratoires qui utilisent des systmes GC colonnes remplies sont encourags continuer dutiliser leurs mthodes tablies et donc valides. On pourra obtenir plus dinformations sur les techniques de colonnes remplies sur demande ladresse lab@unodc.org.
43
Colonne: Phase: Porteur: Injecteur: Rapport de split: Four: Dtecteur: talon interne: Injection: Ordre dlution:
15 m x 0,25 mm, 0,25 m; 5 % Diphnyl 95 % Dimthylpolysiloxane Hydrogne, 1,1 ml/min, flux constant Split/splitless, 280 C 20:1 2 min 200 C, 10C/min 200-240 C, 2 min 240 C FID 300 C, H2 35 ml/min, Air 350 ml/min Tribenzylamine (TBA) dans de lthanol (0,5 mg/ml) 1,5 l, Split CBD, THC, CBN
Prparation de lchantillon Deux cents mg dherbe de cannabis sche et homognise (voir la rubrique 5.4.2) sont extraits avec 20 ml de solution dtalon interne (ISTD) (voir ci-dessous) pendant 15 minutes dans un bain ultrasons. En raison de la plus haute teneur en THC de la rsine de cannabis, seuls 100 mg de rsine sont ncessaires. Si lchantillon est du cannabis liquide (huile de cannabis), un aliquote de 50 mg suffit. Comme il na pas t dtermin, en fonction du systme GC, si la dcarboxylation du THCA dans la doublure GC est quantitative, il est fortement recommand de passer par une tape de dcarboxylation avant lanalyse GC*. Pour ce faire, 500 l de la solution sont transfrs dans un flacon GC de 2 ml. Le flacon est plac dans un appareil chauffant (150 C) pendant 12 minutes, ce qui permet au solvant de svaporer et au THCA dtre dcarboxyl. Le rsidu est dissout dans 1,5 ml dthanol, le flacon est bien agit et la solution qui en rsulte est analyse par GC. Calibrage Comme le matriau THC de rfrence se dgrade rapidement et quune qualit acceptable de ce matriau nest pas facilement disponible, lanalyse quantitative peut se faire avec un matriau CBN de rfrence. Le calibrage avec le CBN plutt quavec le THC est bien connu et gnralement accept. En thorie, le facteur de corrlation est de 1,00 [53]. des fins de validation, pour montrer la validit du facteur thorique dans le chromatographe gazeux en question, il convient de mesurer et dobserver le rapport CBN avec un compos semblable tel que le CBD.
* Si la dcarboxylation nest pas effectue avant lanalyse, le systme spcifique de chromatographie gazeuse et les conditions danalyse doivent tre valids afin de sassurer quils donnent lieu une dcarboxylation complte du THCA et ne provoquent pas la dcomposition du THC.
44
Solutions de calibrage Les solutions talon de CBN sont prpares dans des flacons GC de 2 ml selon le tableau ci-dessous: Solution stock (SS): Dilution intermdiaire (ID): Solution dtalon interne: (ISTD): 1 mg CBN/ml thanol 100 l solution stock + 900 l thanol 0,5 mg tribenzylamine/ml thanol
Std 1 Std 2 Std 3 Std 4 Std 5 Std 6 Std 7
50 l ID 250 l ID 50 l SS 150 l SS 250 l SS 500 l SS 800 l SS
+ 500 l solution ISTD + 500 l solution ISTD + 500 l solution ISTD + 500 l solution ISTD + 500 l solution ISTD + 500 l solution ISTD + 500 l solution ISTD
+ ~ 950 l thanol + ~ 750 l thanol + ~ 950 l thanol + ~ 850 l thanol + ~ 750 l thanol + ~ 500 l thanol + ~ 200 l thanol
0,1 % 0,5 % 1% 3% 5% 10 % 16 %
Les solutions talon doivent tre conserves au frais labri de la lumire pendant un maximum de quatre mois. Silylation Si le THCA a t analys sparment, cest--dire sans dcarboxylation, des aliquotes de 1,5 ml de lextrait ci-dessus (non dcarboxyl thermiquement) doivent tre drivatiss avant lanalyse GC. Les agents de drivatisation communment utiliss sont: Le MSTFA: N-mthyl-N-trimthylsilyltrifluoroactamide Le BSTFA/TMCS: N,O-bis(trimthylsilyl)trifluoroactamide/Trimthylchlorosilane (1%) Les solvants silylables tels que lthanol doivent tre limins, gnralement avec un lger jet dazote. Le rsidu est dissout dans 1,5 ml de chloroforme. 100 l de MSTFA sont ajouts et chauffs pendant 30 min 70 C. La solution obtenue peut tre analyse directement.
45
5.4.7 Chromatographie gazeuse-spectromtrie de masse (GC-MS)

Lanalyse GC-MS peut tre effectue de manire similaire lanalyse GC-FID. Les spectres de rfrence des cannabinodes les plus courants, drivatiss ou non, sont communment disponibles dans les bases de donnes commerciales de MS.
5.4.8 Chromatographie en phase liquide haute performance (HPLC)

La mthode ci-dessous est une mthode valide pour lanalyse de la teneur totale en THC (THC + THCOOH) de lherbe de cannabis aprs extraction avec un mlange mthanol/chloroforme puis dcarboxylation [54, 55]. La validation comprend lensemble du procd depuis la prparation de lchantillon jusqu lanalyse HPLC. Dautres mthodes peuvent aussi produire des rsultats acceptables mais doivent tre valides et/ou vrifies avant toute utilisation de routine. Aprs vrification en bonne et due forme, la mme mthode peut aussi tre applique dautres produits du cannabis.
Type de colonne: Temprature de la colonne: Phase mobile: Dbit: Dtection: Injection: Ordre dlution:
250 x 4 mm RP-8 (5 m); pr-colonne 4 x 4 mm RP-8 (5 m) 30 C Actonitrile: eau (8:2 v/v), isocratique, arrt au bout de 8 min. 1 ml/min Barrette de photodiode (PDA), 220 nm et 240 nm 10 l CBD, CBN, THC, THCA (si la dcarboxylation na as t faite ou demeure incomplte)
Prparation de lchantillon 500 mg dherbe de cannabis sche et homognise (voir la rubrique 5.4.2) sont extraits avec 5 ml de mthanol: chloroforme (9:1 v/v) en utilisant la mme mthode: 10 secondes sur un vortex, 15 minutes dans un bain ultrasons puis agitation sur vortex au bout de 5, 10 et 15 minutes, puis centrifugation.
46
Dcarboxylation 200 l de lextrait ci-dessus sont transfrs dans un flacon de drivatisation. Le solvant est totalement vapor sous un jet dazote. Lchantillon est dcarboxyl pendant 15 minutes 210 C. Le rsidu est dissout dans 200 l de mthanol: chloroforme (9:1 v/v). Prparation de la solution finale La solution de dcarboxylation ci-dessus est dilue dun facteur de 100 avec du mthanol (en deux tapes, de chacune 100 l + 900 l) avant dtre utilise pour lanalyse. Pour les teneurs en THC plus faibles (< 0,5 %), un facteur de dilution de 10 au lieu de 100 suffit. Calibrage Solution stock: Solution talon de 1 mg (-)-9-THC/ml mthanol Dilution 1: Dilution 2: 100 l (solution stock) + 900 l mthanol = 0,1 mg THC/ml mthanol 100 l (dilution 1) + 900 l mthanol = 0,01 mg THC/ml mthanol
N 1 2 3 4 5
Concentration (mg/ml) 0,001 0,005 0,01 0,05 0,1
STD (vol. de la solution talon) 10 l 0,01 mg/ml 50 l 0,01 mg/ml 10 l 0,1 mg/ml 50 l 0,1 mg/ml 100 l 0,1 mg/ml
Mthanol (vol. de mthanol) 90 l 50 l 90 l 50 l 0 l
Les solutions talon doivent tre conserves au frais labri de la lumire pendant un maximum de quatre mois. Rsultats Pour une identification qualitative, le temps de rtention ainsi que le spectre DAD du cannabinode doivent correspondre.
47
Substance Cannabidiol Cannabinol (-)-9-THC Acide de (-)-9THC
Temps de rtention (min)* 4,9 6,0 7,1 7,4
Temps relatif de rtention* 0,69 0,85 1,00 1,04
*Effectu sur 250-4 mm LiChrospher 60 RP-select B (5 m) avec une pr-colonne 4-4 LiChrospher 60 RP-select B (5 m)
Le calcul des rsultats quantitatifs est effectu des longueurs donde de 220 et 240 nm.
6.
Autres techniques et approches pour lanalyse des produits du cannabis
Cette rubrique donne un bref aperu de quelques techniques supplmentaires et dmarches pouvant sappliquer lanalyse des produits du cannabis.
6.1 Profilage GC-FID des saisies de produits du cannabis

Des profils GC standardiss sont utiliss pour la classification chimiomtrique. Lanalyse peut seffectuer sur une colonne standard. Pour lanalyse des agrgats, cest la plage des terpnodes, comprenant principalement des sesquiterpnes, qui est utilise. Les profils GC des chantillons de cannabis dune mme origine prsentent un mme schma de pics, ce qui permet de relier entre eux les chantillons. Les tudes de corrlation indiquent que lon pourrait ventuellement dterminer lorigine gographique dun chantillon de cannabis partir de sa signature chimique [56]. Cependant, en raison de la grande variabilit naturelle du cannabis, la ncessit davoir des matriaux de cannabis de rfrence authentiques (cest--dire dorigine connue) et lutilisation de rapports de probabilit pour dcrire les rgions dorigine, la valeur des profils GC pour dfinir lorigine des chantillons risque dtre limite du point de vue mdico-lgal. En revanche, cette approche pourrait tre utilise pour les analyses dun lot lautre. Ceci fournirait lopportunit de relier des chantillons du mme ge, du mme phnotype ou du mme site de production. La faisabilit devra tre prouve sur la base dun ensemble important de donnes.
6.2 Micro-extraction sur phase solide (SPME)

La SPME est une technique de prparation des chantillons sans solvant, pouvant tre utilise pour lchantillonnage et lanalyse de marqueurs chimiques volatiles
49
50
dans lespace de tte au-dessus des solutions, directement au-dessus du matriau suspect, ou pour lanalyse de solutions aqueuses contenant les analytes cibles. Pour les produits du cannabis, des analyses SPME de constituants volatiles et de cannabinodes ont t rapportes [57, 58]. La SPME en espace de tte a aussi t applique des aliments base de chanvre en utilisant lhydrolyse alcaline (NaOH) et la drivatisation sur fibre (MSTFA) suivie dune dtection par chromatographie gazeuse-spectromtrie de masse (GC-MS). laide dtalons au deutrium, la mthode sest rvle la fois puissante pour lanalyse des principaux cannabinodes, THC, CBN et CBD, et plus rapide que lextraction liquide-liquide [59].
6.3 Rapport des isotopes stables par spectromtrie de masse (IRMS)

La variation des rapports des isotopes stables du carbone et de lazote est particulirement utile pour localiser lorigine gographique des matriaux vgtaux. Contrairement dautres drogues telles que lhrone et la cocane, le cannabis nest pas transform chimiquement pour obtenir un produit illicite et donc garde ses profils lmentaires et isotopiques dorigine. Ces paramtres peuvent ainsi tre utiliss comme indication de son origine gographique [60]. Cependant, des conditions diffrentes de culture (ex. le degr darrosage, la culture avec ou sans terre, en intrieur ou en extrieur, le type de terre et de fertilisant, etc.) peuvent affecter la composition isotopique des plantes et donc limiter leur diffrentiation [61]. De plus, des rsultats valables ne peuvent tre obtenus que si un matriau de cannabis de rfrence (dorigine connue) est disponible.
6.4 Profilage ADN

Cette technique fournit la possibilit de relier des produits sur la base de leur profil gntique, ce qui peut tre utile en termes dinvestigation, par exemple pour relier des producteurs, des trafiquants et des consommateurs. Cependant, contrairement lADN humain, une telle empreinte peut ne pas tre ncessairement unique puisque le clonage de souches de cannabis est trs rpandu. La correspondance des profils ADN de deux chantillons ne prouve donc pas en soi quils proviennent de la mme plante, ou du mme cultivateur. Du fait que les cultivateurs vendent aussi leurs boutures, la valeur mdico-lgale dune correspondance obtenue par cette technique assez onreuse est parfois remettre en question. Pour une vue densemble et une description des diffrents types de tests ADN, voir la rfrence 62.
7.
1. 2.
Rfrences
Observatoire europen des drogues et des toxicomanies (EMCDDA), Communiqu de presse, 26 juin 2004. EMCDDA (2004), An overview of cannabis potency in Europe, ISBN 92-9168184-9 (voir aussi http://www.emcdda.europa.eu/html.cfm/index33984EN.html; rcupr en janvier 2009). ElSohly M. A. (2007). Marihuana and the Cannabinoids, Human Press, ISBN 1-59745-947-8. THC Statistics, Office fdral helvtique de la sant publique (voir aussi www. sgrm.ch/getdate.php?datei_id=404; en allemand; rcupr en janvier 2009). Niesink R. J. M. et al. (2007), THC concentrations in marihuana, nederwiet and hash in Nederlands coffeshops (2006-2007), Utrecht, Institut Trimbos, ISBN 978-90-5253-593-7 (en nerlandais avec rsum en anglais; voir aussi www.trimbos.nl/Downloads/Producten/DefinitiefTHC%202007%20definitief%20sept%20RNI.pdf; rcupr en janvier 2009). Hardwick S. et King, L. (2008), Home Office Cannabis Potency Study 2008, ISBN 978-1-84726-662-0 (voir aussi http://scienceandresearch.homeoffice. gov.uk/hosdb/publications/drug-detection-publications/31-08_-_Home_Office_ Cannabi1.pdf?view=Binary; rcupr en janvier 2009). McLaren J., et al. (2008), Cannabis potency and contamination: a review of the literature, Addiction, 103 (7), 1100-1109. Potter D. J. et al. (2008), Potency of 9-THC and other cannabinoids in Cannabis in England in 2005: Implications for psychoactivity and pharmacology, J. Forensic Sci., 53 (1), 90-94. Office des Nations Unies contre la drogue et le crime (UNODC), Rapport mondial sur la drogue, annuel (voir www.unodc.org/unodc/en/data-andanalysis/WDR.html; rcupr en janvier 2009). UNODC, Dictionnaire multilingue sur les stupfiants et les substances psychotropes sous contrle international, 2007 (voir www.unodc.org/unodc/en/scientists/ multilingual-dictionary-of-narcotic-drugs-and-psychotropic-substances-underinternational-control.html.html; rcupr en janvier 2009). Hill R. J. (1983), Marijuana, Cannabis sativa L., Regulatory Horticulture, Weed Circular No. 5, 9 (1-2), 57-66.
51
3. 4. 5.
6.
7. 8.
9.
10.
11.
52
12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20.
Flora of North America, www.efloras.org (rcupr en janvier 2009). www.illustratedgarden.org (rcupr en janvier 2009). www.ab.ru/~slava/flora/f181.htm (rcupr en janvier 2009). www.fredicampo.com (rcupr en novembre 2007). Wolf D. (2007), Jardin botanique, Ble, communication personnelle. encycl.opentopia.com/term/Cannabis_sativa (rcupr en janvier 2009). Wolke W. (1995), ISBN 3-88631-220-5. Cannabis Handbuch, Raymond Martin Verlag,
www.answers.com/topic/cannabis (rcupr en janvier 2009). Bone C., Waldron S.J. (1999), New trends in illicit cannabis cultivation in the United Kingdom of Great Britain and Northern Ireland, Bulletin on Narcotics, vol. XLIX et L, 117-128. Europol Drugs Information Bulletin n 3/2001, 7. Mahler H. (2007), Proceedings XV. GTFCh Symposium 2007, Mosbach, ISBN 978-3-00-023794-2 (en allemand; voir aussi www.gtfch.org/cms/images/ stories/media/tb/tb2007/s451-464.pdf; rcupr en janvier 2009). Stambouli H. et al. (2007), Cultivation of Cannabis sativa L. in northern Morocco, Bulletin on Narcotics, vol. LVII, nos 1 et 2, 79-118. Toonen M., Ribot S. et Thissen J. (2006), Yield of indoor Cannabis cultivation in The Netherlands, J. Forensic Sci., 51, 1050-1054. Bureau Ontnemingswetgeving Openbaar Ministerie (BOOM) (2005), Wederrechtelijk verkregen voordeel hennepkwekrij bij binnenteelt onder kunstlicht: Standaardberekeningen en normen. Fritschi G., Klein B. et Szilluweit W. (2006), Verteilung der THC-Gehalte in Marihuanapflanzen: Bestimmung der Gehalte in Wurzeln, Stngeln, Blttern und Blten, Toxichem+Krimtech, 73(2), 54-56. (en allemand; voir aussi www.gtfch.org/tk/tk73_2/Fritschi1.pdf; rcupr en janvier 2009). THC Statistics, Bureau fdral helvtique de sant publique (voir aussi www.sgrm.ch/content.php?setsprache=d&action=sellang&alternative=, > Chemie > ForensischeChemie > THC Gehaltstatistik 2006_2; rcupr en janvier 2009). Raharjo T. J. et al. (2004), Cloning and overexpression of a cDNA encoding a polyketide synthase (PKS) from Cannabis sativa L., Plant Physiol. Biochem., 42, 291-297. Futoshi T. et al. (1995), J. Am. Chem. Soc. 117, 9766-9767. Futoshi T. et al. (1996), J. Biol. Chem. 271, 17411-17416.
21. 22.
23. 24. 25.
26.
27.
28.
29. 30.
53
31.
Fellermeier M. et al. (2001), Biosynthesis of cannabinoids, Incorporation experiments with 13C-labeled glucoses, European Journal of Biochemistry, 268 (6), 1596-1604. Avec la permission de la Police cantonale de Zurich, KTA-KF. Industrial Hemp in the United States, www.ers.usda.gov/publications/ages001E/ ages001Eh.pdf (rcupr en janvier 2009). King L. A. (2003), The Misuse of Drugs Act A Guide for forensic scientists, RSC publication (p. 82). Cole M. D. (2003), The analysis of controlled substances, John Wiley & Sons, ISBN 0-471-49252-3 (HB). Ross S. A. et Elsohly M. A. (1997), CBN and 9-THC concentration ratio as an indicator of the age of stored marijuana samples, Bulletin on Narcotics, vol. XLIX et L, 139-147. De Meijer E. P. M. et al. (1992), Characterization of Cannabis accessions with regard to cannabinoid content in relation to other plant characteristics, Euphytica, 62, 187-200. Groupe de travail sur les drogues du Rseau europen des instituts de police scientifique (ENFSI) et UNODC (2009), Guidelines for representative drug sampling (voir www.unodc.org/unodc/en/scientists/guidelines-on-representativedrug-sampling.html). Journal officiel de la Communaut europenne du 28 dcembre 2000 (L 332/63), Rglementation de la Commission (CE) n 2860/2000 du 27 dcembre 2000 (voir http://eur-lex.europa.eu/LexUriServ/site/en/oj/2000/ l_332/l_33220001228en00630075.pdf; rcupr en janvier 2009). www.SWGDRUG.org (rcupr en janvier 2009). Wissenschaftlicher Dienst, avec la permission de la Police de la ville de Zurich (Suisse), 2007. Joyce et Curry (1970), The botany and chemistry of Cannabis. Jackson B. P. et Snowdon D. W. (1968), Powdered Vegetable Drugs, J&A Churchill Ltd., Londres. Dayanandan P. et Kaufman P. B. (1976), Trichomes of Cannabis sativa L. (Cannabaceae), Amer. J. Bot. 63(5), 578-591. Hammond C. T. et Mahlberg P.G. (1973), Morphology of glandular hairs of Cannabis sativa from scanning electron microscopy, Amer J. Bot., 60(6) 524-528. Segelman A. B. et al. (1973), J. Pharm. Sci., vol. 62, Issue 3, 515-516. Sirikantaramas S. et al. (2004), The gene controlling marijuana psychoactivity: Molecular cloning and heterologous expression of 1-tetrahydrocannabinolic acid synthase from Cannabis sativa L., J. Biol. Chem., 279 (38), 3976739774.
32. 33. 34. 35. 36.
37.
38.
39.
40. 41. 42. 43. 44. 45.
46. 47.
54
48. 50. 51. 52. 53. 54. 55. 56.
Dussy F. E. et al. (2005), Forensic Sci. Int. 149, 3-10. Andrew Holmes (2007), communication personnelle. Fuche Chr. et al. (2001), The use of IMS and GC/IMS, IJIMS 4, 1, 20-25, p. 23. Wissenschaftlicher Dienst, avec la permission de la Police de la ville de Zurich (Suisse), mthode valide (2007). Poortman-van der Meer A. J. et Huizer H. (1999), A contribution to the improvement of accuracy in the quantitation of THC, Forensic Sci. Int., 101, 1-8. Avec la permission de lInstitut mdico-lgal, St-Gall (Suisse), mthode valide (2005). Brenneisen R. (1984), Psychotrope Drogen, Pharm. Acta Helv., 59, 9-10, 247-259. Brenneisen R. et ElSohly M.A. (1988), Chromatographic and spectroscopic profiles of Cannabis of different origins: Part I, J. Forensic Sci., 33, 13851404. Lai H. et al. (2008), Headspace sampling and detection of cocaine, MDMA, and marijuana via volatile markers in the presence of potential interferences by solid phase microextraction-ion mobility spectrometry (SPME-IMS), Anal Bioanal Chem., 392 (1-2), 105-113. Ilias Y. et al. (2005), Extraction and analysis of different Cannabis samples by headspace solid-phase microextraction combined with gas chromatographymass spectrometry, Journal of Separation Science, 28 (17), 2293-2300. Lachenmeier D. W. et al. (2004), Determination of cannabinoids in hemp food products by use of headspace solid-phase microextraction and gas chromatographymass spectrometry, Anal. A. Bioanal. Chem., 378 (1), 183-189. Shibuya E. et al. (2006), Sourcing Brazilian marijuana by applying IRMS analysis to seized samples, Forensic Sci. Int., 160 (1), 35-43. Benson S. et al. (2006), Forensic applications of isotope ratio mass spectrometry A review, Forensic Sci. Int., 157 (1), 1-22. Miller Coyle H. et al. (2003), An overview of DNA methods for the identification and individualization of marijuana, Croat. Med. J., 44 (3), 315-321.
57.
58.
59.
60. 61. 62.
Centre international de Vienne, Bote postale 500, 1400 Vienne (Autriche) Tlphone: (+43-1) 26060-0, Tlcopie: (+43-1) 26060-5866, www.unodc.org
Publication des Nations Unies Imprim en Autriche Numro de vente: F.09.XI.15 ST/NAR/40
15 USD ISBN 978-92-1-248176-0
*0989096* V.09-89096 Avril 2010 235

Cannabis F

Hochgeladen von

Dokumentinformationen

Copyright

Verfügbare Formate

Dieses Dokument teilen

Dokument teilen oder einbetten

Freigabeoptionen

Stufen Sie dieses Dokument als nützlich ein?

Sind diese Inhalte unangemessen?

Copyright:

Verfügbare Formate

Cannabis F

Hochgeladen von

Copyright:

Verfügbare Formate

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Manuel destin aux laboratoires nationaux danalyse des drogues

Crdits photos: Photothque de lUNODC; UNODC/Ioulia Kondratovitch; Alessandro Scotti.

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

NATIONS UNIES New York, 2010

PUBLICATION DES NATIONS UNIES Numro de vente F.09.XI.15 ISBN 978-92-1-248176-0

Cette publication na pas t corrige officiellement. Langue dorigine: anglais

5.2 5.3 5.4

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

1.2 Objectif et utilisation du manuel

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Production illicite de produits du cannabis

2.1 Le march du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Description de la plante de cannabis et des produits illicites du cannabis

3.4 Aspect physique

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Aspects morphologiques de Cannabis sativa L. [13]

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

3.6.1 La sinsemilla (sans graines en espagnol)

3.6.3 Hermaphrodites produits artificiellement

3.6.4 Production en extrieur

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

3.6.5 Production en intrieur

3.7 Le cannabis industriel

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Rendement minimum (g/plante)

* Donnes non publies.

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

3.13 Produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

La rsine de cannabis (haschisch)

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Pollinisateur et rsine collante en poudre (produit) [32]

Le cannabis liquide (huile de haschisch)

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

3.13.4 Les graines de cannabis et lhuile de graine de cannabis

3.13.5 Lhuile essentielle de cannabis

3.14 Estimation de lge des chantillons de cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

3.15 Le cannabis destin la production de drogue ou de fibres

[THC ] + [CBN ] [CBD]

* Cest--dire le rapport des aires de pic du chromatogramme gazeux (GC-FID).

Constituants chimiques dintrt mdico-lgal

(-)-9-trans-ttrahydrocannabinol Ttrahydrocannabinol, THC

CH3 OH COOH H3C H3C O

CAS: Formule empirique: Poids molculaire: Point de fusion

Principales caractristiques pharmacologiques: Antibactrien Antibiotique

Solubilits: Eau thanol Chloroforme Hexane

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

Principales caractristiques pharmacologiques: Sdatif Anticonvulsif Antibiotique Anti-inflammatoire Cannabidiol CBD

Principales caractristiques pharmacologiques: Antibiotique Anti-inflammatoire Antifongique Antalgique

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

CAS: 33745-21-0 Formule empirique: C19H22O2 Poids molculaire: 282,38 g/mol

Analyse qualitative et quantitative des produits du cannabis

5.1.1 chantillonnage des plantes (cultures intrieures et extrieures)

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis

5.1.2 chantillonnage des saisies de produits du cannabis

Mthodes recommandes pour lidentification et lanalyse du cannabis et des produits du cannabis