FISIOLOGA HUMANA

Activacin Plaquetaria

Artculo de Revisin

FISIOLOGIA 2008
UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMANN

Jefe de Ctedra Mdico Neil Flores Mdico Internista Alumnas:

Palabras clave: Plaquetas; activacin; agregacin plaquetaria; glicoprotenas; calcio; citoesqueleto

Eliana Isabel Ticona Machaca 07-30853

Mariel Tapia Cruz 06-29768 TACNA PER Noviembre 2008 Copyright 2008.

INTRODUCCIN RESUMEN

Las plaquetas circulan normalmente sin adherirse al endotelio vascular imperturbado. Cuando ocurre una lesin en la pared de un vaso, productos subendoteliales, tales como el colgeno, quedan expuestos. Las plaquetas se adhieren a estas sustancias y forman un tapn hemosttico efectivo. Esta interaccin puede ser mediada por el factor de von Willebrand, cuyo receptor plaquetario es el Ib-IX. El reclutamiento de otras cantidades de plaquetas ocurre a travs de una interaccin plaqueta-plaqueta que es mediada principalmente a travs del receptor de fibringeno, GPIIb-IIIa. La adhesin de plaquetas al colgeno, y de unas con otras, puede ocurrir sin contraccin o cambio de forma. La contraccin de las plaquetas durante y despus de la activacin plaquetaria produce cambios en su forma a una esfera puntiaguda y exposicin de componentes de la membrana cargados negativamente. Conduce a la secrecin de contenido granular, convirtiendo grupos de plaquetas libremente asociados en una masa slida. La secrecin del contenido granular ocurre a travs de seales transmitidas por la membrana que provoca una afluencia y liberacin de calcio. Estos sucesos ocurren sin la alteracin de las sustancias qumicas de las plaquetas que podran sugerir daos plaquetarios. El contenido granular en un tapn plaquetario es de alta concentracin y cierra la proximidad a la superficie plaquetaria alterada, lo cual promueve y proporciona la superficie ptima sobre la cual procede la cascada de la coagulacin, mezclndose la formacin de fibrina en la fase de la hemostasia secundaria. Palabras clave: citoesqueleto. Plaquetas; activacin; agregacin plaquetaria;glicoprotenas; calcio;

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Fig. 1. Plaquetas en reposo (izquierda) con forma de disco biconvexo. La hemostasia supone un complejo conjunto de procesos que involucran al vaso lesionado, componentes tisulares, molculas del plasma y elementos formes de la sangre. Por otra parte, tras la detencin de la hemorragia se ponen en marcha mecanismos destinados a reparar la pared vascular y restablecer la circulacin de sangre a sus condiciones previas a la lesin. La hemostasia consta de tres componentes principales, cuyos efectos se superponen parcialmente en el tiempo e interactan entre s: 1. Contraccin sostenida del msculo liso de la pared del vaso lesionado 2. Adhesin y agregacin de plaquetas que origina un tapn inicial 3. Coagulacin localizada de la sangre con formacin de una red insoluble de fibrina La reaccin vascular y plaquetaria produce la hemostasia primaria, que es reforzada y sostenida por el cogulo, cuya formacin se denomina por ello hemostasia secundaria. En conjunto, las plaquetas aglutinadas y el cogulo constituyen un eficaz tapn hemosttico. A su vez, dicho tapn estimula la reparacin vascular. Una vez reparada la pared vascular, el tapn debe disolverse mediante mecanismos fibrinolticos que permiten el restablecimiento de la circulacin de la sangre. I. Caractersticas plaquetas generales de las forma de disco biconvexo (Fig. 1), con un dimetro aprox. de 3 m. Existen normalmente de 140 000 a 400 000 plaquetas/mm3 en sangre perifrica. Se estima que una tercera parte de las plaquetas presentes en la circulacin se encuentra en el bazo. Una vez liberadas desde la mdula sea, las plaquetas tienen una vida media de 7 a 10 das. En condiciones normales, las plaquetas circulantes no se adhieren a la superficie endotelial, ni entre ellas, debido al equilibrio existente entre los mecanismos pro- y antitrombticos. Cuando hay una lesin, se adhieren a estructuras subendoteliales expuestas, son activadas y se agregan unas a otras, constituyendo, as, una parte esencial del tampn hemosttico primario. Diversas sustancias pueden activar las plaquetas originando una o ms de las respuestas caractersticas, ntimamente asociadas en la hemostasia: adhesin, cambio de forma, agregacin y secrecin.

I.1.
4)

Estructura de plaquetas (ver Fig. I.1.1. Membrana plasmtica La membrana plasmtica de la plaqueta, media en las interacciones con el medio externo, ocupando, por eso, un papel central en su fisiologa. Constituye una bicapa lipoproteica con glicoprotenas variable que funcionan como receptores de los agonistas fisiolgicos de las plaquetas (ADP, TXA2, trombina), protenas adhesivas (fibringeno, fibronectina, laminina,

Las plaquetas son pequeas clulas anucleadas, procedentes de los megacariocitos y en condiciones fisiolgicas normales tienen la

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TABLA 1: Componentes de la membrana externa

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trombospondina, vitronectina, factor de von Willebrand [vWF]) y para ligandos fibrosos como el colgeno, adems, posee enzimas importantes para el funcionamiento celular y fosfolpidos. Las glicoprotenas clsicas han sido subclasificadas en distintas familias: integrinas, glicoprotenas ricas en leucina y selectinas. Las glicoprotenas de la membrana plaquetaria actan como receptores (ver Tabla 1 y Fig. 2), mediando, entre otras, en tres importantes funciones: en la adhesin de las plaquetas a componentes de la matriz extracelular de la pared vascular, en la agregacin plaquetaria y en la interaccin de las plaquetas con otras clulas.

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agregacin de las plaquetas inducida por el colgeno. C) GPIc/IIa, GP Ic'/IIa y el receptor de la vitronectina: (= 51, 6 y V,) Son, respectivamente, los receptores para la fibronectina, laminina y vitronectina.

Glucoprotenas leucina (LRG)

ricas

en

Receptores de la familia integrina

Se caracterizan por enlazarse a protenas que tienen la secuencia arginina-glicinaaspartato (RGD): fibringeno, fibronectina, vitronectina, factor de von Willebrand, colgeno. Las integrinas ms estudiadas han sido:

a) GPIIb/IIIa (= IIb3)
Su funcin principal es la de receptor para el fibringeno, mediando la agregacin plaquetaria, tambin acta como receptor para otras protenas de adhesin tales como la fibronectina, el factor de von Willebrand (vWF) y la vitronectina. A travs de uniones con estas protenas adhesivas, interviene en el proceso de adhesin al subendotelio despus de la activacin de la plaqueta donde hay un incremento del nmero de complejos expuestos en la superficie. El reconocimiento de los ligandos por el heterodmero implica la secuencia RGD y requiere Ca2+ y Mg2+. b) GPIa/IIa (= 21) Este receptor funciona en el proceso de adhesin a la matriz extracelular, y tambin est implicado en la

GPIb/IX/V: Es un receptor especfico implicado en la adhesin y agregacin plaquetaria. ste complejo interacta con las estructuras subendoteliales, principalmente con el colgeno, a travs de un ligando adhesivo, el factor de von Willebrand (vWF). El vWF es una protena multimrica constituyente de la Fig. 2: Esquema de la que est presente matriz subendotelial, estructura de las principales glucoproteinasla plaqueta, desde en los grnulos a de y receptores de la membrana es secretado durante lasla plaquetaria. Semuestran donde subunidades que forman las en la sangre activacin, y circula glucoprotenas indicadas. un complejo con el factor VIII formando de la coagulacin (FVIII:c). El receptor GPIb/IX/V tambin funciona como lugar de unin de alta afinidad para la trombina, participando en la propagacin de la respuesta a este importante agonista en la activacin y agregacin plaquetaria. Despus de la GPIIb/IIIa este complejo es el mayoritario en la membrana plaquetaria. Selectinas La ms conocida es la P-selectina (platelet activation-dependent granuleexternal membrane- PADGEM o granule membrane protein- GMP-140) que se encuentra en la cubierta de los grnulos plaquetarios y se expresa en la superficie de las plaquetas una vez activadas y degranuladas. I.1.2. Sistema canalicular abierto Se presenta como una red de vesculas y canales, interconectados, que se ramifican a travs de todo el citoplasma y comunican con la superficie.

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El SCA consiste en invaginaciones de la membrana citoplasmtica de la cual deriva su estructura. Este sistema constituye una va de acceso de sustancias plasmticas a lugares ms internos de la clula, y durante la activacin plaquetaria constituye una reserva de membrana plasmtica que permite el cambio de forma y la emisin de pseudpodos. Funciona adems como conductor hacia el exterior de sustancias liberadas a partir de los grnulos. I.1.3. Sistema tubular denso Se presenta como un conjunto de tubos apretados y cortos que forman una red continua por todo el citoplasma. El STD constituye el principal lugar de almacenamiento del calcio intraplaquetario, siendo por eso comparable al retculo sarcoplsmico de las clulas del msculo estriado, y el SCA puede considerase equivalente a los tbulos transversos de las referidas fibras musculares. El STD acumula Ca2+ debido a la presencia de un transportador Ca2+ ATPasa del tipo SERCA, en sus membranas, que regula la concentracin de Ca2+ citoplasmtico libre43. I.1.4. Citoesqueleto El citoesqueleto consiste en una red de estructuras filamentosas que mantienen la estructura de la plaqueta. Contiene las protenas contrctiles actina y miosina, las protenas implicadas en la formacin de los microtbulos, principalmente la tubulina, y otras asociadas a stas (ver Fig. 3). La actina se encuentra, en las plaquetas no activadas, tanto en la forma polimerizada, actina-F (40-50%), como en la forma monomrica, actina-G. Cuando las plaquetas son activadas, una cantidad adicional de actina se polimeriza y se asocia a otras protenas, tales como, la tropomiosina, la aactinina y la ABP (protena ligadora de actina), lo que determina la organizacin y la formacin de haces, originando los pseudpodos y su

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consecuente cambio de forma. La contraccin de los filamentos perifricos hace que los grnulos dispersos en el citoplasma ocupen una posicin central, y simultneamente liberen sus contenidos va SCA. La fuerza contrctil es generada cuando la miosina es fosforilada e interacta con los filamentos de actina. La actividad ATPsica de la miosina se desencadena por la fosforilacin de las cadenas ligeras, permitiendo la interaccin con la actina. En las plaquetas en reposo, los microtbulos son estructuras tubulares constituidas por subfilamentos de tubulina son responsables del mantenimiento de la forma discoide de las plaquetas en reposo, se deforma durante el proceso de activacin, se fragmenta transitoriamente y se reensambla en una posicin ms central, circundando los grnulos plaquetarios.

Fig. 3: Citoesqeleto de la plaqueta

I.1.5. Grnulos Normalmente son reconocidos cuatro tipos: los grnulos , los grnulos densos, los lisosomas y los microperoxisomas. En la plaqueta activada, estos grnulos son centralizados, a lo que sigue la secrecin de sus contenidos (ver Tabla 2).

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Los grnulos constituyen la gran mayora de estas estructuras (cerca del 85%). Sus membranas contienen GPIIb/IIIa, pequeas cantidades de GPIb, GPIX y P selectina. Participan, sobre todo, en la hemostasia, produciendo un efecto pro-coagulante, estimulando la adhesin y la agregacin, y favoreciendo procesos de reparacin de los vasos lesionados. Las protenas de la matriz de los grnulos a tienen dos orgenes distintos: algunas son sintetizadas por los megacariocitos y empaquetadas en los grnulos por el complejo de Golgi, como por ejemplo el vWF, factor V y la trombospondina. Otras protenas, tales como el fibringeno, que tambin se encuentra en circulacin, son endocitadas a partir del medio externo e incorporadas al interior de los grnulos . Este fenmeno puede ser mediado por receptores de membrana, como es el caso de la incorporacin del fibringeno en que est implicado el complejo GP IIb/IIIa47. Hay tres protenas que se consideran exclusivas de las plaquetas: el factor plaquetario 4 (PF4), la tromboglobulina (-TG) y el factor de crecimiento derivado de la plaqueta (PDGF). El PDGF, posee actividad mitognica para diferentes lneas celulares, incluyendo clulas del msculo liso, endoteliales y de la gla. Este factor est implicado en la reparacin de la pared del vaso lesionado, producindose su liberacin despus de la adhesin de la plaqueta al subendotelio. Los grnulos densos presentan una gran opacidad al microscopio electrnico en la zona central, atribuida a la presencia de Ca2+. Adems de Ca2+, contienen serotonina, ADP, ATP y pirofosfato y pueden captar dopamina a partir del exterior. Los lisosomas se caracterizan por su contenido rico en enzimas hidrolticas, principalmente hidrolasas cidas.

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I.1.6. Otros grnulos plaquetarios La plaqueta presenta, adems de estos grnulos implicados directamente en la funcin hemosttica, otros orgnulos esenciales a su metabolismo, incluyendo mitocondrias, grnulos de glucgeno e inclusiones lipdicas. La plaqueta est adaptada para disponer rpidamente grandes cantidades de energa, principalmente durante los procesos de agregacin, secrecin y retraccin del cogulo.

Tabla N2. Contenidos de los grnulos plaquetarios

Fig. 4: Estructura de una plaqueta en reposo, con sus principales componentes. Segn Amy Shapiro, World Federation of Hemophilia

I.2.

Origen plaquetas

produccin

de

las

Este fenmeno se produce en mdula sea. Los megacariocitos son las clulas ms grandes de la mdula sea. Derivan de la clula madre pluripotencial que, bajo el influjo de hormonas trombopoyticas o "trombopoyetinas", son inducidas en la lnea megacarioctica El megacariocito es la nica clula de la mdula sea que tiene capacidad de reproducir su DNA sin sufrir divisin celular (endocitosis). Se ha estimado que un megacariocito da lugar a 1.000 plaquetas. La secuencia madurativa dura cuatro a cinco das. La Stem Cell se diferencia en CFU-gemma y CFU-linfo. La primera da una colonia

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llamada CFU-meg que ser la encargada de formar las plaquetas. Luego se reconocen 4 estados enumerados del I al IV (ver Fig. 5). Desde el primero (megacarioblasto de 40 um aprox.) hasta el ltimo (megacariocito maduro) la clula va ganado lobulaciones en su ncleo poliploide, y su citoplasma va pasando de basfilo a acidfilo. A medida que va madurando va emitiendo pseudopodios hacia los sinusoides medulares y se va fragmentando liberando las plaquetas. Los estmulos ms importantes estn dados por: trombopoyetina. (TPO), IL3 y CSFmeg. El estmulo inhibitorio ms importante esta dado por el factor de crecimiento transformante.

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epinefrina, y el tromboxano A2. Estos mediadores amplan y mantienen la respuesta inicial de las plaquetas (Fig. 6), y reclutan a las plaquetas circulantes en la sangre que fluyen para formar un tapn hemosttico. La mayora de los agonistas que activan las plaquetas operan a travs de la protena G acoplado a receptores. La va final para todos los agonistas es la activacin de la glucoprotena plaquetaria integrina IIb / IIIa (IIb3), el principal receptor de adhesin y agregacin. Varios sustratos adhesivos se unen a la glicoprotena IIb/IIIa. El fibringeno desempea un papel importante en el mantenimiento de la estabilidad de un trombo, por ser puente de plaquetas entre las integrinas glicoprotena IIb / IIIa, el factor von Willebrand es necesario para facilitar puentes interplaquetarios a bajas tasas de corte in vitro (Fig. 6). Las plaquetas inactivas contienen pre-ARNm de la molcula denominada factor tisular, que es el principal iniciador de la cascada de coagulacin que conduce a la conversin de protrombina en trombina y fibringeno a fibrina. La seal dependiente de empalme del pre-mRNA del factor tisular permite la sntesis de la proteina bioactiva del factor tisular y por lo tanto, las plaquetas derivadas de factor tisular para la estabilizacin del trombo.

II. Activacin plaquetaria Despus de la adhesin inicial de las plaquetas a la matriz extracelular, el proceso de reparacin requiere una respuesta rpida a mediadores autocrinos y paracrinos, entre ellos la adenosina difosfato (ADP), trombina,
Fig. 5: Esquema de la formacin de plaquetas

El endotelio vascular controla la reactividad de las plaquetas por medio de tres vas: del cido araquidnico, va prostaciclina, la va larginina-xido ntrico, y la va endotelial ecto adenosina difosfatasa (ecto-ADPasa). Las clulas endoteliales convierten el cido araquidnico en la prostaciclina, con la ayuda de la ciclooxigenasa-1 o la ciclooxigenasa-2 (COX-1 o la COX-2) y prostaciclina sinteasa. La COX-2 parece ser importante en la sntesis de prostaciclina, sobre la base de los efectos inhibidores selectivos de la COX-2 sobre la excrecin de metabolitos de prostaciclina. La prostaciclina inhibe la funcin plaquetaria por elevar los niveles de AMP cclico intracelular. El xido ntrico se difunde en las plaquetas, estimula la produccin de guanosina

monofosfato cclico (GMPc), y regula GMP cclico dependiente de protenas cinasas, causando una disminucin secundaria en los flujos intracelulares de Ca2 +. Esta reduccin de Ca2 + intracelular suprime el cambio conformacional en la glicoprotena IIb / IIIa que se requiere para la unin de la integrina al fibringeno, lo que disminuye el nmero y la afinidad de unin de fibringeno en la superficie de las plaquetas. La Ecto-ADPasa, un componente integral de la superficie de la clula endotelial, limita el nivel plasmtico de nucletidos (ATP y ADP) y el sustrato es activado. La actividad de esta enzima anula la crtica fase de reclutamiento plaquetas activas, ya que elimina los nucletidos del entorno fluido.

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Fig. 6. La activacin de las plaquetas es inducida por la interaccin de varios agonistas de los receptores expresados en la membrana de las plaquetas. Paneles A, B y C representan fuera de sealizacin mediada por el tromboxano A2 (TXA2), adenosina difosfato (ADP), y la trombina, respectivamente. TXA2 es sintetizada por la activacin de plaquetas a partir de cido araquidnico (AA) a travs de la va ciclooxigenasa (COX) (Grupo A). Una vez formado, el TXA2 puede difundir a travs de la membrana y activar otras plaquetas. En las plaquetas, hay dos variedades de recptor para el TXA2: TP y TP, que difieren en su cola citoplsmica. TP y TP par a las protenas GQ y G12 o G13, de todos los que activan fosfolipasa C (PLC). Esta enzima degrada los fosfoinostidos de la membrana (como fosfatidilinositol 4,5-bifosfato [PIP2]), el segundo la liberacin de mensajeros inositol trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). DAG intracelular activa la protena quinasa C (PKC), lo que provoca la fosforilacin de protenas. La liberacin de IP3 aumenta los niveles citoslicas de Ca2 +, que se ha liberado del retculo endoplasmtico. ADP se libera de plaquetas y glbulos rojos.Las plaquetas expresan, al menos, dos receptores de ADP, P2Y1 y P2Y12, a la par que GQ y Gi, respectivamente (Grupo B). La activacin de P2Y12 inhibe la adenilato ciclasa, causando una disminucin del AMP cclico (cAMP), y la activacin de P2Y1 provoca un aumento del nivel de Ca2 + intracelular. El receptor P2Y12 es el principal receptor capaz de ampliar y mantener la activacin de las plaquetas en respuesta a ADP. La trombina es rpidamente generada en los sitios de lesin vascular donde circula la protrombina y, adems de mediar en la generacin de fibrina, representa el ms potente activador de plaquetas (Grupo C). Las respuestas de las plaquetas a la trombina son en gran mediada a travs de la protena G ligada a los receptores activados por proteasas (PAR), que se activan despus de la mediacin de trombina por escisin de su dominio N-terminal. Las plaquetas humanas expresan PAR1 y PAR4. El receptor PAR1 acoplado a los miembros de la G12/13, GQ, y a la familia de protenas Gi. Las subunidades de G12 y G13 ligan los factores intercambio de nucletidos Rho-guanina (Rho GEFs), que proporciona respuestas mediadas por Rho que son probablemente involucradas en el cambio de la forma de plaquetas. Los GQ y las vas de sealizacin Gi dan lugar a un aumento intracelular de Ca2 + y la disminucin de cAMP, respectivamente. Grupo D representa la sealizacin dentro - fuera. Los efectos de los agonistas mediado por la disminucin de los niveles de cAMP y el aumento de Ca2 + intracelular dan lugar a la agregacin plaquetaria a travs del cambio en las propiedades del ligando y receptor glicoprotena IIb / IIIa (IIb3), que tiene la capacidad de unirse a las protenas adhesivas solubles tales como el fibringeno y factor von Willebrand.. La liberacin de ADP y TXA2 adems induce la activacin de las plaquetas y agregacin. La pequea secuencia de pptido-arginina-glicina-cido asprtico (RGD), del adhesivo se une a las protenas de la glicoprotena receptor IIb / IIIa.El fibringeno contiene dos secuencias RGD sobre su -cadena, uno en la regin N-terminal y la otra en la regin C-terminal. El estudio de fibringeno-/ - ratones ha demostrado que el factor von Willebrand por s sola no es suficiente para lograr la agregacin plaquetaria estable, el apoyo a la hiptesis de que la unin al factor von Willebrand a la glicoprotena IIb / IIIa y glicoprotena Ib permite el contacto inicial entre las plaquetas , Mientras que el fibringeno es necesaria para una permanente vinculacin activa entre la glicoprotena IIb / IIIa de las plaquetas adyacentes para garantizar la formacin de agregados estables. TXAS denota tromboxano sintasa, PGH2 prostaglandina H2, y PLA2 fosfolipasa A2.

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II.1.Tras la activacin lapor algunos Mecanismos de activacin: agonistas, la fosfolipasa Cseal sobre Vias de transduccin de acta el fosfatidil inositol 4,5 difosfato. La degradacin del fosfoinostido genera el 1,2 diacilglicerol (DG) y el inositol 1,4,5 trifosfato, (IP3). El DG activa a la protena quinasa C (PKC) requiriendo dicha activacin la presencia de calcio y fosfolpidos (fosfatidilserina y etanolamina). La PKC activa a una protena de 47 kilodaltons, la cual es de gran importancia en el proceso de contraccin del citoesqueleto plaquetario. El IP3 se une a receptores especficos en el sistema tubular denso y libera al citosol hasta el 40 % del calcio almacenado. A su vez el DG es degradado por la diglicrido lipasa y se genera el 1-monoacilglicerol y cido araquidnico (AA), pero esta no constituye la nica fuente de AA en la plaqueta, tambin la activacin de la fosfolipasa A2 promueve la liberacin de AA de los fosfolpidos de membrana (fosfatidilcolina y fosfatidiletanolamina). El AA es metabolizado a travs de 2 mecanismos oxidativos: el de la ciclooxigenasa y de la lipooxigenasa. La va de la ciclooxigenasa da lugar a la formacin, primeramente, de los endoperxidos cclicos PGG2/PGH2 productos inestables y de capacidad agregante al actuar sobre receptores plaquetarios del tromboxano. Se metabolizan hacia productos estables finales las prostaglandinas: PGD2, PGE2 y PGF2 a y a productos intermedios inestables. Por efecto de la tromboxano sintetasa se forma un potente agente agregante plaquetario, vasoconstrictor, broncoconstrictor y que tambin aumenta la permeabilidad de las membranas, cuya vida media es de aproximadamente 30 segundos: el tromboxano (Tx A2). La plaqueta no tiene equipo enzimtico capaz de producir prostaciclina, por lo que constituye una estructura con capacidad exclusivamente agregante. El

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Tx A2 tambin promueve la liberacin de calcio por el sistema tubular denso. La activacin de los mecanismos enzimticos antes descritos promueve la liberacin de calcio por el sistema de tbulos denso hacia el citosol plaquetario. Las plaquetas en estado de reposo disponen en el citosol de 0,09-0,1 mM de calcio y despus de la activacin, en dependencia del agonista, se alcanzan valores de 0,2 mM con activadores dbiles como serotonina y hasta incluso 3 mM con trombina. Este incremento se debe principalmente a la entrada de calcio extracelular tras la apertura de los correspondientes canales celulares. El calcio procedente del lquido extracelular junto al liberado del retculo

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endoplsmico al citosol acta como mensajero promoviendo seales elctricas que inician la secuencia de las acciones trombocticas:

Cambio de forma. Agregacin plaquetaria. Contraccin del citoesqueleto. Secrecin

Fig. 7: Mecanismo de la Activacin plaquetaria

II.2. Respuestas funcionales Las plaquetas pueden ser activadas por un gran nmero de sustancias, a las cuales

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reaccionan en pocos segundos. Cuando son expuestas a estos agonistas, las plaquetas presentan diferentes respuestas, que se encuentran ntimamente asociadas in vivo, pero que, in vitro, pueden ser estudiadas separadamente: adhesin y cambio de forma, agregacin, secrecin y expresin de actividad procoagulante. II.2.1. Adhesin: La primera respuesta hemosttica plaquetaria consiste en la adhesin de las plaquetas a la matriz subendotelial, que normalmente se expone despus de una lesin vascular, en que hay descamacin y/o ruptura del endotelio (Fig.8). En regiones en que la circulacin ocurre con bajo coeficiente de cizallamiento las plaquetas se adhieren al colgeno, fibronectina, laminina, vitronectina y trombospondina del subendotelio. Este proceso es mediado por receptores especficos de membrana, ya mencionados. Bajo condiciones de alto coeficiente de cizallamiento, como se verifican en la mayor parte del territorio arterial y en la microcirculacin, la interaccin de las plaquetas con las sustancias de la matriz subendotelial, anteriormente mencionadas, requiere un cofactor adicional, el factor de vWF. El complejo GP Ib/IX/V es el principal receptor implicado en la adhesin en estas condiciones de flujo.

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unin resulta en la activacin celular y esa adhesin es favorecida sobre todo por la consiguiente expansin de la plaqueta. II.2.2 Cambio de forma A la adhesin de las plaquetas le siguen diversas modificaciones de su forma, primero pasando de discoides a esferoides, siguindose la expansin con emisin de pseudpodos, como resultado de la reorganizacin del citoesqueleto (Fig. 9). Esto facilita, no solamente el proceso de adhesin de las plaquetas al subendotelio, sino tambin la interaccin con otras plaquetas.

Fig.9. Respuestas funcionales de la plaqueta: Esquema de las interacciones implicadas en el cambio de la forma inducido por la activacin. . GP: glicoproteinas; vWF: Factor de Von Willebrand.

Fig.8. Respuestas funcionales de la palqueta. Esquema de las interacciones implicadas en la adhesin. GP: glicoproteinas; vWF: Factor de Von Willebrand.

Durante la activacin plaquetaria, mientras se dan los cambios de forma, ocurre la despolimerizacin reversible de los microtbulos y su desplazamiento de la periferia a una posicin ms central. Simultneamente, se incrementa el contenido en actina filamentosa, proceso regulado por el incremento de la concentracin de Ca2+ y por la interaccin de protenas reguladoras de la actina con lpidos de la membrana. Por ejemplo, el PIP2 se une a la profilina y evita su interaccin con la actina. Despus de la hidrlisis del PIP2 por la PLC, la profilina es liberada de la membrana, interacta con la actina G y sta cambia ADP por ATP (actina GATP). La actina G-ATP tiene mayor afinidad para la extremidad del filamento, resultando en un aumento de la polimerizacin. La fosforilacin de la miosina lleva a su incorporacin en el citoesqueleto y formacin

La adhesin inicial de las plaquetas a un vaso lesionado es un proceso pasivo, pero esta

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de un gel contrctil que contribuye al cambio de forma y permite la centralizacin de los grnulos. La asociacin de la actina polimerizada con la miosina es capaz de generar una fuerza que puede ser convertida en movimiento externo (extensin) o movimiento interno (contraccin). Paralelamente, en los pseudpodos la actina polimerizada forma haces. Adicionalmente, los filamentos de actina originan contactos focales con la membrana y se desarrollan los sitios de adhesin focal. Los sitios de adhesin focal son dominios especializados de la membrana, donde la actina del citoesqueleto est anclada a integrinas, tales como la IIb3, a travs de interacciones que implican a -actinina, viNculina y talina. Estas estructuras envuelven adems, el ensamblaje de complejos de molculas sealizadoras, incluyendo la tirosina kinasa p125FAK, y son reguladas por una protena de la familia Ras. La protena Rho activada estabiliza la adhesin focal, mientras que su inactivacin lleva a la disrupcin de las adhesiones focales. Las adhesiones focales suministran fuerza contrctil a travs de la membrana y contribuyen al cambio de forma. Aunque la mayora de los agentes agregantes induzca las dos fases del cambio de forma, la adrenalina induce slo la formacin de pseudpodos y la plaqueta mantiene su forma discoide. Este hecho sugiere, por un lado, que los dos procesos son independientes y, por otro lado, que el cambio de discoide a esferoide no es esencial para la agregacin. En condiciones fisiolgicas, el cambio de forma precede a la agregacin y a la secrecin. La agregacin requiere la emisin de pseudpodos y la centralizacin de los grnulos, lo que ocurre durante la esferizacin de la plaqueta y que puede ser un prerrequisito para la secrecin. II.2.3 Agregacin La agregacin consiste en la unin de las plaquetas activadas unas a las otras. La activacin, que ocurre despus del contacto con el subendotelio, con agonistas liberados por otras plaquetas activadas o con trombina, inicia una serie de alteraciones que llevan a la expresin de receptores funcionales de la membrana, los cuales determinan la interaccin plaquetaplaqueta (Fig. 10).

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Fig.10 .Respuestas funcionales: Esquema de las interacciones implicadas en los fenmenos de agregacin, secrecion y expresin de actividad procoagulante inducidos por la activacion. GP: glicoprotena; vWF: factor de Von Willebrand.

Este proceso es dependiente de Ca2+ extracelular y del fibringeno, que forma un puente entre las plaquetas. En la fase inicial de la agregacin la unin del fibringeno a su receptor, el complejo GP IIb/IIIa (IIb3 ) es reversible, pero enseguida se convierte en irreversible. Esta irreversibilidad se debe a la estabilizacin de los puentes de fibringeno por varios factores: alteraciones intrnsecas del receptor inducidas por el ligando; aglomeracin de complejos; internalizacin del receptor; y la unin al fibringeno y/o IIb3 de la trombospondina u otras protenas adhesivas liberadas por los grnulos . Otras protenas adhesivas que contienen la secuencia clsica de reconocimiento de integrinas Arg-Gly-Asp, pueden interactuar con IIb3, pero el ligando preferencial en la agregacin es el fibringeno. Sin embargo, si hubiera una deficiencia en este factor, el vWF puede formar los puentes entre las plaquetas, y en condiciones en que las fuerzas de cizallamiento son muy elevadas el factor de vWF parece ser el principal cofactor de la agregacin. De las numerosas sustancias capaces de inducir la agregacin plaquetaria in vitro podemos distinguir: 1) agentes agregantes primarios: aquellos que llevan directamente a la agregacin por mecanismos no mediados por la sntesis de prostanoides o por la liberacin del contenido plaquetario de ADP, o sea, exponen

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directamente los sitios receptores del fibringeno, de los que son ejemplo la trombina y el ADP. 2) agentes agregantes secundarios: sustancias que promueven la agregacin plaquetaria al estimular la liberacin de ADP y/o produccin de endoperxidos y TXA2. En cualquier caso la interaccin de las plaquetas como consecuencia de la agregacin induce reaccin de liberacin. Por este motivo, la agregacin llevada a cabo por los agentes agregantes primarios en ciertas circunstancias es bifsica, o sea, una agregacin inicial directa y una agregacin subsiguiente, asociadas a la reaccin de liberacin, pero no necesariamente consecuencia de sta. En el proceso de agregacin aparecen por lo menos dos mecanismos de amplificacin por retroalimentacin positiva, la liberacin de ADP, y la sntesis de prostanoides, particularmente TXA2, PGG2 y PGH2 que, al unirse a receptores de la membrana plaquetaria, estimulan la hidrlisis de fosfatidilinositol, la movilizacin de Ca2+ y fosforilacin de protenas, y la exposicin de receptores del fibringeno. Ante la presencia de estmulos fuertes, tales como el colgeno y la trombina, puede haber un tercer factor amplificador, que consiste en la sntesis y liberacin de PAF. Este factor tambin se une a un receptor especfico de la membrana, activa el ciclo del fosfatidilinositol y lleva a la exposicin de lugares de unin del fibringeno. La agregacin determina transmisin de seales al interior a travs de IIb3 implicados en la estabilizacin de grandes agregados, expansin de las plaquetas, secrecin de los grnulos, retraccin del cogulo y, posiblemente, en la expresin de actividad procoagulante. II.2.4 Secrecin Cuando las plaquetas son activadas se produce la secrecin de numerosas sustancias contenidas en sus grnulos. Los grnulos densos segregan, entre otras sustancias, ADP y serotonina que van a activar otras plaquetas, que se encuentren en las proximidades; los grnulos a liberan protenas adhesivas tales como vWF, trombospondina, fibronectina y fibringeno, que se concentran en la superficie de la plaqueta, adems de protenas especficas de la plaqueta, como es el caso del

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PF4 y de la -TG. Los lisosomas liberan principalmente hidrolasas cidas. La secrecin de los grnulos densos y de los grnulos , ocurre despus de la estimulacin con todos los agonistas, aunque la liberacin de los grnulos se observe a concentraciones de agonista relativamente superiores. La secrecin de los lisosomas requiere estmulos muy fuertes, y se observa despus de la estimulacin con altas concentraciones de trombina y colgeno. Adems, la secrecin de los lisosomas es lenta e incompleta, hasta un mximo de 60% de los grnulos, mientras que los grnulos densos y a segregan aproximadamente 100% de sus contenidos entre 1 y 2 minutos. La secrecin est determinada por los segundos mensajeros sintetizados en respuesta a la activacin plaquetaria. Los agonistas fuertes tales como el colgeno y la trombina pueden inducir secrecin sin agregacin concomitante. El ensamblaje y contraccin del sistema actinamiosina es responsable de la centralizacin y la secrecin activa del contenido granular. Una vez centralizados se establece una comunicacin entre los grnulos y el sistema canalicular abierto. Durante el proceso de secrecin, las membranas de los grnulos se funden con las del sistema canalicular abierto y de esta forma, protenas de las membranas de los grnulos quedan expuestas en la membrana plasmtica. Los grnulos contribuyen con la expresin de dos glicoprotenas especficas, la GMP140 (Granule Membrane Protein), tambin conocida por P-selectina o PADGEM (Platelet ActivationDependent Granule-External Membrane), y la GMP-33, e incluso con una cantidad adicional de complejo GP IIb/IIIa y de GP IV. La presencia de GP IIb/IIIa en este local especfico parece sugerir que este receptor facilita la expresin de las protenas adhesivas de los grnulos a que aparecen unidas a la superficie durante la activacin de la plaqueta. La presencia de GMP140 en la superficie de la membrana cambia las propiedades funcionales de la plaqueta, mediando la interaccin de las plaquetas activadas con neutrofilos, monocitos, y algunos subtipos de clulas T, un proceso que puede ser importante en la inflamacin y la trombosis.

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Otras protenas, cuya funcin no est todava esclarecida, se expresan en la membrana plasmtica despus de la activacin. Es el caso de una protena de los grnulos densos, de peso molecular 40.000, y de las glicoprotenas de la membrana lisosomal GP53 o LIMP-CD63 (Lisosomal Integral Membrane Protein), LAMP1 y LAMP-2. II.2.5 Expresin de actividad procoagulante y formacin de micropartculas Adems de constituir los elementos bsicos del trombo hemosttico, las plaquetas activadas proporcionan una superficie que permite la asociacin de complejos enzimticos responsables de la generacin de trombina. El complejo enzimtico que convierte la protrombina en trombina, designado como protrombinasa, est compuesto por el factor V activado (Va), factor X activado (Xa), iones Ca2+ y protrombina y estos agentes interactan en la superficie de vesculas lipdicas que contienen fosfolpidos aninicos. La actividad procoagulante de las plaquetas activadas, inicialmente designada factor plaquetario 3 (PF3), es debida a la exposicin de fosfolpidos aninicos en la capa externa de la membrana, especialmente la fosfatidilserina, permitiendo la asociacin de los componentes del complejo protrombinasa. Adicionalmente, las plaquetas contribuyen a la formacin del complejo protrombinasa, liberando el acervo de factor V que se encuentra en los grnulos y que corresponde aproximadamente al 20% del factor V existente en la sangre. El factor Xa forma un complejo equimolar con el factor V unido a la plaqueta, y tambin se une a los fosfolpidos de la membrana, a travs de resduos aminoterminales de cido -carboxilglutmico e iones Ca2+. De modo similar, la reaccin que genera Xa a partir de X, que implica el factor IX activado (IXa) y el factor VIII, puede ocurrir en la superficie de la plaqueta, lo que hace de la membrana plaquetaria activada una superficie altamente trombognica. En la membrana de la plaqueta en reposo la distribucin de los fosfolpidos es asimtrica, estando la fosfatidilserina y la fosfatidilcolina concentradas en la capa interna. La estimulacin de las plaquetas por agonistas fisiolgicos, como el colgeno o la trombina,

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determina la prdida de esta asimetra y la exposicin de fosfatidilserina (PS) en la capa externa, proceso que es acompaado por el desprendimiento de microvesculas membranales de la superficie (Fig. 10). La asimetra de los fosfolpidos est regulada por las actividades cooperativas de tres transportadores: a) la translocasa de aminofosfolpidos dependiente de ATP, la cual rpidamente transporta PS y PE de la capa externa hacia la capa interna. b) la flopasa lipdica inespecifica dependiente de ATP, la cual transporta lpidos de la capa interna a la capa externa. c) la scramblasa lipdica no especfica, dependiente de Ca2+, la cual permite que los lpidos se muevan al azar entre las dos capas. A [Ca2+]i fisiolgicas, se promueve la asimetra de PS porque la translocasa y la flopasa son activas, pero la scramblasa es inactiva. Tras la activacin celular, el incremento de [Ca2+]i induce una distribucin al azar de los PL en la membrana, ya que inhibe la translocasa y estimula la actividad scramblasa. La [Ca2+]i aumentada puede tambin resultar en la activacin de la calpana, la cual facilita el burbujeo (blebbing) de la membrana y la liberacin de microvesculas que expresan PS. El desprendimiento de las microvesculas est relacionado con la disrupcin del citoesqueleto de la membrana plaquetaria, especialmente la hidrlisis de la ABP mediada por la calpana y la disrupcin de la asociacin de los filamentos de actina con la superficie de la membrana. Estas microvesculas, o micropartculas, contienen la mayor parte de la actividad atribuida a las plaquetas. II.3. Agonistas receptores plaquetarios y sus

Los agonistas fisiolgicos que pueden activar las plaquetas son muy variados e incluyen trombina, TXA2, PAF, ADP y adrenalina. Todos los receptores de agonistas que interactan con protenas G, identificados hasta al momento, consisten tpicamente en una cadena polipeptdica con una porcin N-

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terminal extracelular, una porcin C-terminal intracelular y siete dominios transmembrana. 2.3.1 Trombina La trombina es una proteasa de serina, presente en el plasma en forma del precursor inactivo protrombina, que desempea un papel central en el mecanismo de la coagulacin al convertir el fibringeno soluble en monmeros de fibrina que polimerizan espontneamente formando fibras. Adicionalmente, la trombina es un agonista fuerte e importante activador de las plaquetas in vivo. Cuando se aade a las plaqueta in vitro, la trombina causa cambio de forma, agregacin y secrecin de los grnulos densos, grnulos y lisosomas. Las plaquetas contienen aproximadamente 2.000 copias del receptor especfico de la trombina, y ste se parece a otros que interactan con protenas G. La trombina hidroliza el receptor entre los residuos Arg-41 y Ser-42, y se expone un peptido ligando con la secuencia SFLLR, el cual se une a una porcin especfica del receptor, activndolo. Todas las respuestas de la plaqueta requieren la trombina proteolticamente activa. Los pptidos sintticos cuya secuencia comience por SFLLR, son capaces de mimetizar los efectos de la trombina en la plaqueta y son conocidos por TRAPs (Trombin-Receptor-ActivantingPeptides). Dependiendo de la concentracin, la trombina activa mltiples vas de transduccin de la seal incluyendo: a) activacin de diversas formas de PLC, con la resultante formacin de IP3 y DG. b) inhibicin de la adenilciclasa. c) activacin de tirosina kinasas y protenas Ras. d) activacin de PLA2. Estas respuestas pueden ser detectadas a concentraciones tan bajas como 0,1 nM. La activacin plaquetaria inducida por la trombina no es dependiente de la formacin del TXA2, aunque este metabolito contribuya a las respuestas observadas. El receptor GP Ib/IX/V tambin funciona como lugar de unin de alta afinidad para la trombina, participando en la propagacin de la respuesta a este agonista en la activacin y agregacin plaquetaria.

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2.3.2 ADP El ADP se encuentra almacenado en los grnulos densos de las plaquetas, de los cuales se libera tras la activacin plaquetaria. La exposicin de las plaquetas al ADP produce un incremento de [Ca2+]i, rpido influjo de Ca2+, activacin (dbil) de la PLC e inhibicin de la adenilciclasa. El ADP causa cambio de forma, activacin del receptor del fibringeno, agregacin y secrecin. Se produce, tambin TXA2 que convierte la agregacin reversible en agregacin irreversible, la cual es referida como la segunda onda de agregacin. Las respuestas plaquetarias inducidas por el ADP fueron inicialmente atribuidas a un nico receptor del tipo purinrgico P2T 146. Sin embargo, estudios ms recientes pusieron de manifiesto la posibilidad de que los efectos del ADP en las plaquetas sean mediados por 3 subtipos de receptores P2. Segn Kunapuli y Daniel, un receptor est acoplado por Gi a la inhibicin de la adenilciclasa (P2TAC), otro acoplado por Gq a la activacin de PLC (P2Y1) y el tercero, es un receptor ionotrpico P2X1 mediador del influjo rpido de Ca2+. El receptor P2Y1 media en el cambio de forma inducido por el ADP, mientras que el receptor P2TAC es esencial para la agregacin, aunque esta respuesta resulte de la sealizacin a travs de P2TAC y P2Y1. Se conocen ya la estructuras moleculares de P2X1 y P2Y1, pero el receptor P2TAC no ha sido clonado todava. Las tienopiridinas, ticlopidina y clopidogrel, cuando se administran in vivo, son supuestamente convertidas en el metabolito activo, el cual anula la inhibicin de la adenilciclasa inducida por el ADP. 2.3.3 Tromboxano A2 y endoperxidos PGG2 y PGH2 La plaqueta activada metaboliza el cido araquidnico a TXA2 va endoperxidos de prostaglandinas PGH2 y PGG2. El TXA2 es un potente agonista plaquetario que amplifica las seales de activacin. Cuando se adicionan a las plaquetas, los agonistas TXA2/endoperxidos causan cambio de forma, agregacin y secrecin. El TXA2 se considera un agonista fuerte porque estimula directamente la PLC. Los receptores para el TXA2/PGH2 estn acoplados a la activacin de PLC por la

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protena Gq, mediando la hidrlisis de fosfoinositidos, el incremento de Ca2+ y fosforilacin de protenas. Estos agonistas no provocan la inhibicin de la adenilciclasa. 2.3.4 PAF El factor activador de las plaquetas (PAF) es una molcula generada por diversas clulas circulantes activadas, incluyendo las plaquetas y los leucocitos. Es un lpido complejo (1-O-alquil-2-Oacetil-snglicerol-3-fosforilcolina) formado, a partir de un fosfolpido membranar, por la accin consecutiva de la PLA2 y una acil transferasa. Esta molcula es un potente activador de neutrfilos y un agonista fuerte de la activacin plaquetaria, produciendo cambio de forma, agregacin y secrecin de las plaquetas. El PAF acta mediante receptores especificos acoplados a la PLC, induciendo por eso el metabolismo de fosfoinositidos y movilizacin del Ca2+. Tal como el TXA2, PAF no inhibe la adenilciclasa. La importancia fisiolgica de este agonista en la formacin de trombos plaquetarios no est perfectamente esclarecida. 2.3.5 Adrenalina Las catecolaminas, liberadas a consecuencia de la activacin fisiolgica o patolgica del sistema simpticoadrenal, son importantes agonistas plaquetarios, especialmente la adrenalina. Esta hormona (o neurotransmisor) potencia el efecto de otros agonistas plaquetarios y, a concentraciones elevadas, inicia respuestas plaquetarias incluyendo agregacin, produccin de TXA2 y secrecin. Las plaquetas humanas poseen receptores adrenrgicos 2 y 2, predominando los adrenrgicos 2 (presentes 200-300 lugares de unin/plaqueta). Las respuestas de activacin plaquetarias son mediadas por los receptores adrenrgicos 2, mientras que los 2 inducen inhibicin y estn acoplados a la estimulacin de la adeniciclasa. La estimulacin de receptores adrenrgicos 2 determina la inhibicin de la adenilciclasa va protena Gi, pero la transmisin de la seal por esta va no es suficiente para provocar agregacin. Este hecho llev a proponer la existencia de dos receptores 2, uno inhibidor de la AC y otro implicado en la agregacin.

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Recientemente, se ha demostrado que el receptor adrenrgico 2A activa la PKC a travs de una va independiente de la PLC y de la formacin de DAG. Esta estimulacin resulta en la activacin del intercambiador de Na+/H+, la exposicin de lugares de unin para el fibringeno en el complejo GPIIbIIIa y la agregacin. La activacin de PLC, cuando ocurre, es dependiente de la formacin de TXA2. Despus de la ocupacin prolongada de los receptores 2 por la adrenalina, se observa una disminucin de las respuestas subsiguientes de agregacin a la adrenalina, no estando an claros los mecanismos que subyacen a esta insensibilizacin. Los efectos potenciadores de la adrenalina en la activacin plaquetaria son un fenmeno extremamente relevante: se demostr que las concentraciones de adrenalina alcanzadas in vivo, tanto en condiciones fisiolgicas como patolgicas, an siendo subagregantes per se, pueden inducir activacin plaquetaria, interactuando con otros agonistas fisiolgicos. Por otra parte, la adrenalina inhibe o revierte el efecto inhibidor de agentes antiagregantes, como la PGI2 o incluso la aspirina. III. Implicaciones de la activacin plaquetaria en procesos patolgicos III.1 Especies Reactivas de Oxigeno La intensa liberacin de especies reactivas de oxigeno desde las paredes de los vasos indirectamente afecta la activacion de plaquetas porque estas especies recogen Oxido nitrico. Las plaquetas activadas tambien generan especies reactivas de oxigeno(Fig11). El metabolismo del acido araquidonico por la via del COX-1 contribuye a la produccin de estas especies. Los agonistas que inducen la activacion plaquetaria tambien activan la isoforma de NADH oxidasa de la plaqueta. La produccin de O2- por estas vias depende de que oxidasas incrementen el reclutamiento de la intensidad de las plaquetas. O2- es un un importante scavenger(recogedor) de oxido nitrico. El recojo de NO por als especies reactivas de

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oxigeno previene su participacin en la desaglutinacion del trombo.

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microambiente, alterando las propiedades adhesivas y quimiotacticas de las clulas endoteliales. Estas inducen alteracin en la quimiotaxis, adhesin y transmigracion de monolitos al sitio de inflamacin (Fig.12) El ligando CD40 liberado de las plaquetas inducen respuestas inflamatorias en el endotelio. sta es una proteina transmembrana de la familia del Factor de Necrosis Tumoral. El CD40 derivado de las plalquetas inducen a las celulas endoteliales a producir especies reactivas, molculas de adhesin, quimiocinas, y factor tisular, todas de las cuales forman parte de una respuesta inflamatoria. Las plaquetas activadas pueden generar quimiocinas que pueden gatillar el reclutamiento de monolitos o promover su diferenciacin en macrfagos. El factor plaquetario 4, una quimiocina especfica de la plaqueta luego de su activacin induce la expresin de E- selectina por las celulas endoteliales

Fig.11. Papel de especies reactivas de oxgeno en la activacin de las plaquetas. La produccin de especies reactivas de oxgeno se promueve en clulas vasculares endoteliales y clulas del msculo liso en respuesta a la lesin a travs de varias vas enzimticas y por la expresin de enzimas por plaquetas activadas. La produccin de O2-por las plaquetas que es dependiente de NADPH OXI-dasas aumenta el reclutamiento de las plaquetas a un creciente trombo, muy probablemente por inactivar una ectonucleotidasa de plaquetas, de ese modo aumentando la biodisponibilidad de adenosina difosfato (ADP). Adems, O2-puede recoger el xido ntrico (NO) para formar peroxinitrato (NO3-), de ese modo afectando la anti-actividad plaquetaria del NO.O2-se pueden convertir en H2O2 por la superxido-dismutasa (SOD); SOD y NO son competidores en el recogimiento de O2-. H2O2 tambin sirve como un sustrato para la produccin en detrimento de otros especies reactivas de oxigeno, como el cido Hipocloroso (HOCl), generados por la conversin enzimtica de neutrfilos por myeloperoxidase. Adems, H2O2 reacciona con el hierro ferroso (Fe2 +) para generar hierro frrico (Fe3 +) y el radical hidroxilo (OH-). En presencia de catalasa, H2O2 se degrada con el agua y el oxgeno, y glutatin peroxidasa (GPX) tambin ejerce una III.2 Mediadores de la inflamacin

funcin antioxidante enzimtica, ya derivados de las plaquetas.

Las plaquetas activadas liberan mediadores inflamatorios dentro del ambiente

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Fig.12 Mediadores de la respuesta inflamatoria derivados de las plaquetas Plaquetas activadas liberan inflamatorias y mitognicas sustancias en el microambiente, principalmente alterando la quimiotaxis, adhesin, y propiedades proteolticas del endotelio. Ligando CD40 se almacena en el citoplasma de plaquetas en reposo y se presenta rpidamente en la superficie despus de la activacin de las plaquetas. Despus de escisin, a fin de generar un soluble, funcional fragmento (ligando CD40 soluble), el mediador es liberado en el medio ambiente extracelular, induciendo respuestas inflamatorias en el endotelio vinculante por CD40 en las clulas endoteliales. P-selectina se libera de grnulos de las plaquetas y se unen al ligando de la glucoprotena de la selectina-P-1 (PSGL-1) sobre los receptores de los monocitos, el aumento de la Molcula de adhesin endotelial (VCAM)-1 y las otras adhesinas expresadas sobre las clulas endoteliales activadas y la induccin de la produccin de factor tisular de los monocitos. La plaqueta activada permite tambin la liberacin quimiocinas que activan el reclutamiento de monocitos (por ejemplo, regulado en la activacin normal de clulas T expresadas y secreta-ed [RANTES]) o promover la diferenciacin de los monocitos a macrfagos (por ejemplo, el factor plaquetario 4), as como enzimas de degradacin de la matriz como metaloproteinasa matriz (MMP) 2 o 9. Interleucina-1 es un importante mediador de plaquetario inducida por la activacin de clulas endoteliales, causando una mayor liberacin y quimiocinas sobre regulacin de molculas de adhesin endoteliales para promover la adhesin de los neutrfilos y monocitos al endotelio. ICAM denota molcula de adhesin intracelular, ARNm ARN mensajero, MCP-1 protena quimiotactica de monocitos -1, y -OH el radical hidroxilo.

BIBLIOGRAFIA

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M.C. Monteiro, J.E. OConnor, M. Martnez. La Citometra de Flujo en el Anlisis de las

Plaquetas. (I) Aspectos Estructurales y Funcionales de las Plaquetas. Rev Diagn Biol v.50 n.3 Madrid jul.-set. 2001

Yuniesky Andrade Talavera, Ivonne Martn Hernndez, Carlos Vias Portilla. Activacin
Plaquetaria: Aspectos bsicos, participacin en la Enfermedad Cerebrovascular y Proyecciones Teraputicas. http://www.medicosecuador.com/revecuatneurol/vol16_n2_2007/articulos_revision/activacio n_plaquetaria.htm
Dr. Andrs O. Prez Ruz, Dr. Jos A. Castillo Herrera, Dra. Teresa Gortazar Gonzlez, Dr. Miguel

Alvarez Fornari, Dr. Roberto Douglas Pedroso y Dra. Belsys Daz Rondn. Participacin plaquetaria en la hemostasia primaria. Rev Cubana Invest Biomd v.16 n.2 Ciudad de la Habana jul.-dic. 1997.

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