UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS Instituto de Cincias Agrrias

Campus Regional de Montes Claros Curso de Engenharia de Alimentos Iniciao Pesquisa Prof. Cristina Rodrigues Nascimento

RELATRIO DE INICIAO PESQUISA

Francine Ferreira Martins

Montes Claros MG Julho de 2012

FRANCINE FERREIRA MARTINS

RELATRIO DE INICIAO PESQUISA

Relatrio final apresentado ao Colegiado de Engenharia de Alimentos da Universidade Federal de Minas Gerais como requisito para aprovao na disciplina Iniciao Pesquisa.

Docente: Prof. Cristina Rodrigues Nascimento Orientadora: Prof. Lourdes Silva de Figueiredo

Montes Claros- MG Julho de 2012

PS-COLHEITA DE TRS VARIEDADES DE MANJERICO EM FUNO DA TEMPERATURA E TEMPO DE ARMAZENAMENTO

RESUMO Ocimum basilicum L. uma planta conhecida por seus aspectos medicinais e condimentares, no entanto, possui diversas variedades que carecem de estudos quanto ao seu potencial de uso, bem como, os fatores de conservao ps-colheita das variedades. Assim, objetivou-se avaliar os perodos e temperatura de armazenamento de trs variedades de manjerico (O. basilicum L.), sendo a Greco a Palla, Sweet Italian Large Leaf e a Sweet Italian Large Red Leaf sobre a perda de massa, teor de clorofila e fenis totais. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial (3 x 3 x 2), com trs variedades de manjerico, trs perodos de armazenamento ps-colheita e duas temperatura de armazenamento. Durante o armazenamento, houve maior perda de massa fresca nos tratamentos que permaneceram sob temperatura ambiente, independente da variedade. Os teores de clorofila no apresentaram interao significativa entre os tratamentos temperatura e tempo de armazenamento para as trs variedades de manjerico estudadas. Os fenis totais apresentaram interao significativa para variedade de manjerico e tempo de armazenamento. No dia da colheita, tempo zero de armazenamento, observou-se que as variedades Greco a Palla e a Sweet Italian Large Red Leaf apresentaram os maiores nveis de fenis totais. Dentre as variedades avaliadas a que apresentou um maior teor de fenis mesmo quando armazenada por um maior perodo foi a O. basilicum Sweet Italian Large Red Leaf e a Greco a Palla. Com a exceo O. basilicum Sweet Italian Large Red Leaf, as demais variedades podem ser conservadas por um perodo de at cinco dias sem perdas nas caractersticas avaliadas. Assim, fica evidente que o melhor modo de se conservar o manjerico sob refrigerao, desse modo minimizam-se as perdas ps colheita de compostos como os fenis totais, clorofila e massa fresca independente da variedade estudada, quanto do perodo de armazenamento.

1. INTRODUO O Ocimum basilicum L., popularmente conhecida como manjerico, uma hortalia folhosa utilizada tanto como medicinal, quanto condimento. Sabe-se que o consumo de hortalias frescas tem aumentado bastante, notrio tambm o crescimento da produo brasileira de manjerico por pequenos produtores, estes que muitas vezes desconhecem o modo de conservao desse vegetal, o que ocasiona perdas ps-colheita devido m conservao do produto (Favorito et al., 2011). As hortalias folhosas so perecveis aps a sua colheita devido perda de gua e a rpida deteriorao, o que pode ser intensificado por manejo inadequado da temperatura e da umidade do ar nos locais de armazenamento e comercializao (lvarez et al., 2007). A rpida deteriorao ocorre em funo da senescncia dos tecidos que provem da oxidao de diversos compostos, como protenas, lipdios, clorofila e pelo aumento da atividade das enzimas peroxidases e polifenoloxidases, responsveis pelo escurecimento dos tecidos e acmulo de compostos fenlicos. (Silva et al., 2005). 2. OBJETIVO GERAL Avaliar a influncia dos perodos e temperatura de armazenamento de trs variedades de manjerico (O. basilicum L.), sendo a Greco a Palla, Sweet Italian Large Leaf e a Sweet Italian Large Red Leaf. 2.1. OBJETIVOS ESPECFICOS Avaliar os perodos e temperatura de armazenamento de trs variedades de manjerico (O. basilicum L.), sendo a Greco a Palla, Sweet Italian Large Leaf e a Sweet Italian Large Red Leaf sobre a perda de massa, teor de clorofila e fenis totais. 3. METODOLOGIA 3.1. MATERIAL VEGETAL No experimento foram utilizadas trs variedades de manjerico (Ocimum basilicum L.), sendo a Greco a Palla, Sweet Italian Large Leaf e a Sweet Italian Large Red Leaf. As trs variedades foram cultivadas no Horto de

Plantas Medicinais do Instituto de Cincias Agrrias da Universidade Federal de Minas Gerais (ICA- UFMG), em Montes Claros, localizada no norte de Minas Gerais. 3.2. PREPARO DAS AMOSTRAS A colheita foi realizada no perodo da manh, entre 07h00min e 07h30min horas. Coletaram-se de cada variedade, os ramos terminais das plantas, os quais foram acondicionados em bandejas e levadas ao laboratrio de Plantas Medicinais (ICA-UFMG). No laboratrio, as plantas foram selecionadas, eliminando-se aquelas com danos fsicos e com sinais de ataque de pragas e, ou patgenos. Aps a seleo, foram separadas, amostras que foram pesadas e acondicionadas em sacos plsticos de polietileno. As amostras de cada variedade foram armazenadas por cinco dias nas condies de temperatura ambiente e sob refrigerao. Os dados foram coletados com zero, um, trs e cinco dias aps a colheita. Foram necessrios aproximadamente duas horas da colheita at aplicao dos tratamentos, incluindo a seleo das plantas. 3.3. DELINEAMENTO EXPERIMENTAL O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial (3 x 3 x 2), com trs variedades de manjerico, trs perodos de armazenamento ps-colheita e duas temperatura de armazenamento. As variveis avaliadas foram submetidas s anlises estatsticas por meio do programa estatstico SISVAR (Ferreira, 2008), realizando-se a anlise de varincia e o teste de Tukey a 5% de probabilidade, para as mdias. Para efeito das anlises estatsticas, os dados de porcentagem de perda de massa foram transformados em arcoseno

(x / 100) .

3.4. ANLISE DE PERDA DE MASSA As amostras foram pesadas na hora da colheita e aps os perodos de armazenamento. A perda de matria fresca foi estimada em relao massa fresca inicial das amostras pesadas no dia da colheita e os resultados expressos em porcentagem de perda de massa fresca conforme a expresso:

PMF= [(MFI-MFF) x 100)]/MFI, Em que: PMF = perda de massa fresca (%); MFI = massa fresca inicial (g); e MFF = massa fresca final. 3.5. ANLISE DO TEOR DE CLOROFILA O teor de clorofila das folhas foi avaliado no dia da colheita e durante o perodo de armazenamento. O teor de clorofila foi determinado mediante metodologia convencional com uso de espectrofotmetro, segundo mtodo descrito por Arnon (1949), usando como extrator acetona a 80%, com leitura direta a 645 e 663 nm e os resultados expressos em g. g-1 de folha fresca. No preparo dos extratos utilizou-se a macerao de 500 mg da matria fresca em 30 mL de metanol 80%, temperatura ambiente. O homogenato foi transferido para frascos protegidos da luz e armazenados em ambiente escuro por quatro dias. 3.6. ANLISE DO TEOR DE CLOROFILA A determinao do teor de fenis totais presentes nas amostras do extrato metanlico foi feita por meio de espectroscopia na regio do visvel utilizando o mtodo de FolinCiocalteau com modificaes. O extrato vegetal obtido foi filtrado em papel de filtro. Uma alquota de 100 L do extrato filtrado foi agitada por 1 min com 500 L do reagente de Folin - Ciocalteau e completou o volume para 6 mL com gua destilada; passado este tempo, 2 mL de Na 2CO3 a 15% foram adicionados mistura que foi agitada por 30 s. Finalmente, a soluo teve seu volume acertado para 10 mL com gua destilada. Aps 2 h, a absorbncia das amostras foi medida a 750 nm utilizando-se cubetas de vidro, tendo como branco o metanol a 80% e todos os reagentes, menos o extrato. O teor de fenis totais (FT) foi determinado por interpolao da absorbncia das amostras contra uma curva de calibrao construda com o padro de cido glico (50 a 500 g/mL) e expressa como g de EAG (equivalentes de acido glico) por 0,1 mL de extrato. A Equao da curva de calibrao do cido glico foi C = 0,0017A+0, 0079, onde C a concentrao do cido glico, A a absorbncia a 750 nm e o coeficiente de correlao R = 0,9986. Todas as anlises foram realizadas em triplicata.

4. RESULTADOS E DISCUSSO Houve interao significativa entre a temperatura de armazenamento, tempo de armazenamento e as variedades de manjerico para a perda de massa fresca, apresentando um aumento da perda de massa fresca ao longo do perodo de armazenamento em temperatura ambiente e refrigerada. Durante o armazenamento, houve uma maior perda de massa fresca nos tratamentos que permaneceram sob temperatura ambiente, independente da variedade (Tabela 1). Tabela 1 - Mdias da perda de massa fresca de trs variedades de manjerico (Ocimum basilicum L.) submetidas a diferentes tempos e temperaturas de armazenamento.
Temperatura Ambiente Variedade 1 dia O. basilicum Greco a Palla O. basilicum Sweet Italian Large Leaf O. basilicum Sweet Italian Large Red 20,95 bA 21,58 bA 3 dias 34,15 bB 36,06 bB 32,38 5 dias 39,89 bB 46,57bB 1 dia 10,84 aA 12,47 aA 3 dias 13,70 aA 14,16 aA 21,12 5 dias 17,37 aA 17,25 aA 22,80 aB Temperatura Refrigerada

bB aAB Leaf Nas linhas, mdias seguidas pela mesma letra minscula, dentro de cada variedade comparando temperatura de armazenamento, e maisculas, dentro de cada tratamento de temperatura de armazenamento comparando tempo de armazenamento, no diferem entre si (Tukey, 5%). (In the lines, medium followed by the same letter, within each variety comparing storage temperature, and uppercase letters, within each treatment of storage temperature comparing storage time, do not differ (Tukey, 5 % ).)

19,25 bA

42,75 bB

12,65 aA

As trs variedades, em temperatura ambiente, apresentaram menor perda de massa fresca quando foram armazenadas por um dia, nos perodos de armazenamento posteriores no apresentaram diferenas significativas (Tabela 1). Sob temperatura refrigerada, a variedade O. basilicum Sweet Italian Large Red Leaf foi a que apresentou diferena significativa nos perodos de armazenamento. Temperaturas mais elevadas reduzem a vida de prateleira por aumentar algumas atividades metablicas prejudiciais s clulas. A perda de massa fresca est relacionada com a taxa de perda de gua, que influenciada pela interao entre fatores do meio interno dos rgos

vegetais, e a taxa de difuso do vapor de gua para o ambiente determinada, em parte pela relao superfcie/volume, natureza da superfcie protetora e integridade fsica. Alm da perda de massa e murchamento, a perda de gua pode promover intensos efeitos fisiolgicos, interferindo na respirao, produo de etileno, degradao de clorofila e induo de alteraes do padro de sntese proteica (FINGER & VIEIRA, 1997). Os teores de clorofila no apresentaram interao significativa entre os tratamentos temperatura e tempo de armazenamento para as trs variedades de manjerico estudadas (Figura 1). No entanto observou-se que as variedades de manjerico apresentaram teores diferenciados, sendo que as variedades Sweet Italian Large Red Leaf e a Greco a Palla apresentaram o maior e menor teor de clorofila, respectivamente.
16

a
14 12

Clorofila(mg.g )

-1

10 8

c
6 4 2 0

Ocimum basilicum "Greco a Palla"

O. basilicum "Sweet Italian Large Red Leaf"

O. basilicum "Sweet Italian Large Leaf"

Mdias seguidas pela mesma letra no diferem entre si (Tukey a 5%). (Averages followed by same letter do not differ (Tukey 5%)).

Figura 1- Mdias dos teores de clorofila de trs variedades de manjerico (Ocimum basilicum L. Greco a Palla; Sweet Italian Large Leaf e a Sweet Italian Large Red Leaf). (Average chlorophyll content of three varieties of basil (Ocimum basilicum L. 'Greco by Palla', 'Sweet Italian Large Leaf' and 'Sweet Italian Large Red Leaf').) Resultados semelhantes foram observados por lvares et al. (2007) em folhas de salsa, com ou sem aplicao do hidroresfriamento, onde no se observou variaes no teor de clorofila influenciadas pelo tempo de armazenamento a 5 C. A perda de clorofila e o amarelecimento das folhas

indicam a senescncia foliar, que depende de vrios fatores como cultivar, maturidade fisiolgica das folhas na colheita, temperatura de armazenamento, composio da atmosfera e durao de armazenagem (IMAHORI et al., 2004). Os resultados obtidos na determinao dos fenis totais (FT), expressos como equivalentes de cido glico (EAG) por mL de extrato bruto, so apresentados na Figura 2. Os fenis totais apresentaram interao significativa para variedade de manjerico e tempo de armazenamento. No dia da colheita, tempo zero de armazenamento, observou-se que as variedades Greco a Palla e a Sweet Italian Large Red Leaf apresentaram os maiores teores de fenis totais. Para a variedade Sweet Italian Large Leaf o perodo de armazenamento no influenciou significativamente no teor de fenis totais. Comparando as variedades, observou-se que as variedades Greco a Palla e a Sweet Italian Large Red Leaf apresentaram as maiores quantidades de fenis totais.
60 aA

Fenois totais g de EAG/0,1 mL) (

50

aA

Ocimum basilicum " Grecco a Palla" O. basilicum "Sweet Italian Large Red Leaf" O. basilicum "Sweet Italian Large Leaf"

40 bA 30 aB bA aA 20 bA bAB aB bA

bA aB

10

0 0 DIA 1 DIA 3 DIAS 5 DIAS

DIAS DE ARMAZENAMENTO

*EAG = equivalente de cido glico - Mdias seguidas pela mesma letra minscula, dentro de cada variedade comparando tempo de armazenamento, e maisculas, dentro de cada tempo de armazenamento comparando as variedades de manjerico, no diferem entre si (Tukey, 5%). (EAG * = equivalent of gallic acid - Averages followed by same letter within each storage time comparing variety, and uppercase within each storage time comparing the varieties of basil, do not differ (Tukey, 5%))

Figura 2 - Mdias de fenis totais de trs variedades de manjerico (Ocimum basilicum L. Greco a Palla; Sweet Italian Large Leaf e a Sweet Italian Large Red Leaf) submetidas a diferentes tempos e temperaturas de armazenamento. (Averages total phenols from three varieties of basil (Ocimum basilicum L.

'Greco a Palla', 'Sweet Italian Large Leaf' and 'Sweet Italian Large Red Leaf') submitted to different storage times and temperatures.) Os compostos fenlicos apresentam, em sua estrutura, vrios grupos benznicos caractersticos, tendo como substituintes grupamentos hidroxilas (Hernndez & Prieto Gonzles, 1999). Esta classe de compostos apresenta uma grande diversidade e divide-se em flavonoides (polifenois) e no flavonoides (fenis simples ou cidos). Os flavonoides compreendem um grupo de compostos fenlicos amplamente distribudos nas frutas e nos vegetais, apresentando-se sob muitas variaes como flavonis, flavonas, flavanonas, catequinas, antocianinas, isoflavonas e chalconas. Na classe dos noflavonides esto os derivados dos cidos hidroxicinmico e hidroxibenzoico (SILVA et al., 2010). A variedade Sweet Italian Large Red Leaf rica em antocianinas que conferem cor avermelhada s folhas. Assim, as maiores concentraes de fenis totais podem estar relacionadas com a alta quantidade desses flavonoides. Vrios estudos tm mostrado que o manjerico (O. basilicum L.) apresenta uma alta atividade antioxidativa. A atividade antioxidante dessas especiarias e de seus extratos atribuda aos compostos fenlicos presentes que desempenham um papel importante na neutralizao ou sequestro de radicais livres e quelao de metais de transio, agindo tanto na etapa de iniciao como na propagao do processo oxidativo (ZCARI, 2008; STIEVEN et al., 2009). CONCLUSO Pode-se concluir que dentre as variedades avaliadas a que apresentou um maior teor de fenis mesmo quando armazenada por um maior perodo foi a O. basilicum Sweet Italian Large Red Leaf e a Greco a Palla. Com a exceo O. basilicum Sweet Italian Large Red Leaf, as demais variedades podem ser conservadas por um perodo de at cinco dias sem perdas nas caractersticas avaliadas. Assim, fica evidente que o melhor modo de se conservar o manjerico sob refrigerao, desse modo minimizam-se as perdas ps colheita de compostos como os fenis totais, clorofila e massa

fresca

independente

da

variedade

estudada,

quanto

do

perodo

de

armazenamento. REFERNCIAS LVARES, V.S.; FINGER, F.L.; SANTOS, R.C.A., SILVA, J.R.; CASALI, V.W.D. 2007. Effect of pre-cooling on the postharvest of parsley leaves. Journal of Food, Agriculture & Environment. 5, n. 2: 31-34. ARNON, D.I.1949. Copper enzymes in isolated chloroplasts: polyphenoloxydase in Beta vulgaris. Plant Physiology, 24, n.1:1-15. FAVORITO, P.A.I; ECHER, M.M.II,*; OFFEMANN, L.C.I; SCHLINDWEIN, M.D.I;COLOMBARE, L.F.I; SCHINEIDER, R.P.I; HACHMANN, T.L.2011. Caractersticas produtivas do manjerico (Ocimum basilicum L.) em funo do espaamento entre plantas e entre linhas. Revista Brasileira de plantas Medicinais. 13:582-586. FERREIRA, D.F. 2008. SISVAR: um programa para anlises e ensino de estatstica. Revista Cientfica Symposium, 6, n. 2: 36-41. FINGER, F.L.; VIEIRA, G. 1997.Controle da perda ps-colheita de gua em produtos hortalias. Viosa: UFV, 29p. (Caderno didtico, 19). IMAHORI, Y.; SUZUKI, Y.; UEMURA,K.; KISHIOKA, I.; FUJIWARA, H.; UEDA, Y.; CHACHIN,K.2004. Physiological and quality responses of chinese chive leaves to low atmosphere. Postharvest biology and Technology. 31: 295303. SILVA, M.L.C.; COSTA, R.S.; SANTANA, A.S. KOBLITZ, M.G.B.2010. Compostos fenlicos, carotenoides e atividade antioxidante em produtos vegetais. Semina: Cincias Agrrias, 31, n. 3 : 669-682. SILVA, F.; SANTOS, R. H. S.; BARBOSA, L. C. ; RIBEIRO, R. R ; PASSARINHO, R. V.2005 . Basil conservation affected by cropping season, harvest time and storage period. Pesquisa Agropecuria Brasileira, Braslia, 40, n. 4: 323-328. STIEVEN, A. C.; MOREIRA, J. J. S.; SILVA, C. F.2009. leos essenciais de uvaia (Eugenia pyriformis Cambess): avaliao das atividades microbiana e antioxidante. Ecltica Qumica,34, n.3:07-13. ZCARI, C. Z. Estabilidade oxidativa de leo extra-virgem de castanha do Par com ervas aromticas antioxidantes. 2008. Dissertao (Mestrado em Cincia e Tecnologia de Alimentos) - Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz, Universidade de So Paulo, Piracicaba.