G2070-95126 Understanding Your ChemStation

Agilent Technologies
Agilent ChemStation
Familiarizacin con
ChemStation
Familiarizacin con Agilent ChemStation
Avisos
Agilent Technologies, Inc. 2004,
2005-2009
No se permite la reproduccin de parte
alguna de este manual bajo cualquier
forma ni por cualquier medio (incluyendo su
almacenamiento y recuperacin electrnic-
os y la traduccin a idiomas extranjeros) sin
el consentimiento previo por escrito de Agi-
lent Technologies, Inc. segn lo estipulado
por las leyes de derechos de autor esta-
dounidenses e internacionales.
Nmero de referencia
del manual:
G2070-95126
Edicin
07/09
Impreso en Alemania
Hewlett-Packard-Strasse 8
76337 Waldbronn
Garanta
El material contenido en este docu-
mento se proporciona "tal como es"
y est sujeto a modificaciones, sin
previo aviso, en ediciones futuras.
Adems, hasta el mximo permitido
por la ley aplicable, Agilent rechaza
cualquier garanta, expresa o
implcita, en relacin con este
manual y con cualquier informacin
contenida en el mismo, incluyendo,
pero no limitado a, las garantas
implcitas de comercializacin y
adecuacin a un fin determinado.
En ningn caso Agilent ser respons-
able de los errores o de los daos
incidentales o consecuentes relacio-
nados con el suministro, utilizacin
o uso de este documento o de cual-
quier informacin contenida en el
mismo. En el caso que Agilent y el
usuario tengan un acuerdo escrito
separado con condiciones de garanta
que cubran el material de este docu-
mento y que estn en conflicto con
estas condiciones, prevalecern las
condiciones de garanta del acuerdo
separado.
Licencias sobre la tecnologa
El hardware y/o software descritos
en este documento se suministran
bajo una licencia y pueden utilizarse
o copiarse nicamente de acuerdo
con las condiciones de tal licencia.
Avisos de seguridad
PRECAUCIN
Un aviso de PRECAUCIN indica
un peligro. Llama la atencin
sobre un procedimiento de ope-
racin, una prctica o similar que,
si no se realizan correctamente o
no se ponen en prctica, pueden
provocar daos en el producto
o prdida de datos importantes.
No avance ms all de un aviso
de PRECAUCIN hasta que se
entiendan y se cumplan comple-
tamente las condiciones indica-
das.
ADVERTENCIA
Un aviso de ADVERTENCIA
indica un peligro. Llama la aten-
cin sobre un procedimiento de
operacin, una prctica o simi-
lar que, si no se realizan correc-
tamente o no se ponen en
prctica, pueden provocar
daos personales o la muerte.
No avance ms all de un aviso
de ADVERTENCIA hasta que se
entiendan y se cumplan comple-
tamente las condiciones indica-
das.
Slo para uso en investigacin.
Revisin de software
Esta gua es vlida para las revisiones
B.04.xx del software Agilent ChemStation,
donde xx hace referencia a revisiones
menores del software que no afectan a la
exactitud tcnica de esta gua.
Familiarizacin con Agilent ChemStation 3
En esta gua
En esta gua
Se describen varios conceptos de Agilent ChemStation. El objetivo es ampliar
su comprensin sobre el funcionamiento de ChemStation.
Para obtener ms informacin acerca de cmo utilizar ChemStation, consulte
el sistema de ayuda general y el "Tutorial" de la ayuda en lnea.
1 Caractersticas de Agilent ChemStation
En este captulo se resumen los principales componentes y caractersticas de
Agilent ChemStation.
2 Mtodos
En este captulo se describe el concepto de mtodos y su funcionamiento.
3 Adquisicin de datos
En este captulo se describen los conceptos de adquisicin de datos, ficheros
de datos y libro de registro, entre otros.
4 Integracin
En este captulo se describen los conceptos de integracin de los algoritmos de
integracin de ChemStation. Describe el algoritmo de integracin, la integra-
cin y la integracin manual.
5 Cuantificacin
En este captulo se describe cmo ChemStation lleva a cabo la cuantificacin.
Proporciona detalles sobre los clculos de % de rea y % de altura, el clculo
por estndar externo o ESTD (External Standard), el clculo de % Norm, el cl-
culo por estndar interno o ISTD (Internal Standard) y la cuantificacin de
picos no identificados.
6 Identificacin de picos
En este captulo se describen los conceptos de identificacin de picos.
4 Familiarizacin con Agilent ChemStation
En esta gua
7 Calibracin
En este captulo se describe la calibracin de ChemStation.
8 Automatizacin
En este captulo se describen los conceptos de automatizacin. Se explica
cmo utilizar secuencias en ChemStation, qu ocurre cuando se analiza una
secuencia y cmo personalizar secuencias.
9 Revisin de datos, reprocesamiento y revisin por lotes
Este apartado describe las opciones para revisar datos y cmo reprocesar
datos de secuencia. Asimismo, se detallan los conceptos de Revisin por lotes,
Configuracin de lotes, funciones de revisin e informes de lotes.
10 Utilizacin de los informes de ChemStation
En este captulo se describe qu es un informe. Proporciona detalles de los
resultados de la elaboracin de informes, resultados cuantitativos, estilos de
informe y elaboracin de informes del resumen de secuencias.
11 Evaluacin de la idoneidad del sistema
En este captulo se describe lo que puede hacer ChemStation para evaluar el
rendimiento tanto del instrumento analtico antes utilizado para el anlisis de
muestras como el mtodo analtico antes de que se utilice por rutina y com-
probar el rendimiento de los anlisis antes y durante los anlisis rutinarios.
12 Verificacin del sistema
En este captulo se describen la funcin de verificacin y las funciones de veri-
ficacin GLP de ChemStation.
Contenido
Contenido
1 Caractersticas de Agilent ChemStation 9
Descripcin general 11
Hardware de ChemStation 14
Acerca del software de ChemStation 15
Instrument Control 33
Documentacin 34
Estructura de directorios de ChemStation 36
Panel de navegacin 40
2 Mtodos 43
Definicin de mtodo 45
Partes de un mtodo 46
Estado de los mtodos 49
Creacin de mtodos 51
Edicin de mtodos 52
Estructura de los directorios de mtodos 54
Qu sucede cuando se ejecuta un mtodo? 55
Resumen de la operacin del mtodo 60
3 Adquisicin de datos 63
Definicin de la adquisicin de datos 64
Ficheros de datos 65
Monitores en lnea 67
Libro de registro 68
Informacin del estado 69
4 Integracin 71
Definicin de la integracin 73
Funcin de la integracin 74
Algoritmos de integracin de ChemStation 75
Introduccin 77
Definicin de trminos 82
Contenido
Principio de funcionamiento 84
Reconocimiento de picos 85
Asignacin de la lnea base 95
Medida del rea de pico 108
Eventos de integracin 111
Integracin manual 117
5 Cuantificacin 121
Definicin de la cuantificacin 122
Clculos de cuantificacin 123
Factores de correccin 124
Procedimientos de clculo no calibrados 126
Procedimientos de clculo calibrados 127
Clculo ESTD 128
Clculo de % Norm 131
Clculo ISTD 132
6 Identificacin de picos 137
Definicin de la identificacin de picos 138
Reglas de asignacin de picos 139
Tipos de identificacin de picos 140
Tiempo de retencin o migracin absoluto 142
Tiempos de retencin/migracin corregidos 144
Cualificadores de pico 146
El proceso de identificacin 149
7 Calibracin 151
Tabla de calibracin 153
Curva de calibracin 154
Muestras desconocidas 156
Tipos de calibracin 157
Calibracin de grupo 164
Suma de picos 165
Recalibracin 166
Contenido
8 Automatizacin 171
Definicin de la automatizacin 173
Definicin de una secuencia o plantilla de secuencia 174
Preferencias: ficha Secuencia 175
Parmetros de secuencia 177
Tabla de secuencias 178
Creacin de secuencias(Secuencias y plantillas de secuencias) 179
Uso de secuencias (secuencias y plantillas de secuencias) 181
Archivo de registro de secuencias 184
Qu ocurre cuando se analiza una secuencia? 185
Estructura del fichero de datos de la secuencia (Activar creacin de carpeta
nica) 187
Asignacin de nombres a ficheros de datos en una secuencia 188
Operacin postsecuencia 190
Recalibracin automtica 192
Especificacin de recalibraciones 193
Tipos de secuencia 196
Secuencias de calibracin explcita 197
Secuencias de calibracin cclicas de un nico nivel 198
Secuencias de calibracin cclicas multinivel 199
Calibraciones explcitas y cclicas juntas 203
Secuencias de calibracin cclica con agrupamiento 206
Secuencias de recalibracin cclica con mltiples viales que contienen la misma
dilucin de un estndar 210
9 Revisin de datos, reprocesamiento y revisin por lotes 215
Tabla de navegacin de Anlisis de datos 216
Definicin de la revisin por lotes 221
Habilitacin de la funcin de revisin por lotes con la opcin ChemStation Open-
LAB instalada 222
Configuracin de lotes 223
Funciones de revisin 226
Informes de lotes 227
10 Utilizacin de los informes de ChemStation 229
Definicin de un informe 230
Elaboracin de informes de resultados 231
Contenido
Resultados cuantitativos 233
Informes de valores de campos personalizados 235
Estilos de informe 236
Otros parmetros de estilo del informe 239
Destino del informe 240
Elaboracin de informes de resumen de secuencias 242
11 Evaluacin de la idoneidad del sistema 247
Determinacin del ruido 251
Clculo de la simetra de picos 256
Frmulas y clculos de idoneidad del sistema 258
Definiciones generales 259
Definiciones del test de rendimiento 260
Definiciones de reproducibilidad 266
Acceso al nmero de doble precisin almacenado internamente 271
12 Verificacin del sistema 275
Ventanas de verificacin y diagnstico 276
Registro GLPsave 279
Funcin del test del DAD 281
9
1
Caractersticas de Agilent ChemStation
Descripcin general 11
Mdulos instrumentales adicionales 12
Mdulos de evaluacin de datos adicionales 12
Productos slo de evaluacin de datos 13
Hardware de ChemStation 14
Acerca del software de ChemStation 15
Sistema operativo 15
Mtodos y secuencias 15
Configuracin del sistema 15
Modelo de datos 16
Convenciones de los nombres de ficheros 16
Interfase de usuario de software 18
Adquisicin de datos 19
Anlisis de datos: presentacin 21
Anlisis de datos: integracin 22
Anlisis de datos: cuantificacin 22
Anlisis de datos: revisin de datos, reproceso de datos y revisin por
lotes 22
Anlisis de datos: informes estndar 23
Anlisis de datos: informes especializados 24
Utilidades y compatibilidades 27
Personalizacin 27
Automatizacin 27
Buenas prcticas de laboratorio 29
Instrument Control 33
Trabajo en red 33
Documentacin 34
Estructura de directorios de ChemStation 36
En esta gua
Panel de navegacin 40
Botones de navegacin 40
ChemStation Explorer 40
En este captulo se resumen los principales componentes y caractersticas de
Agilent ChemStation.
Caractersticas de Agilent ChemStation 1
Descripcin general
Descripcin general
ChemStations para los sistemas GC, LC, LC/MSD, CE, CE/MSD y A/D son sis-
temas de control instrumental, adquisicin de datos y evaluacin de datos
para
cromatgrafos de gases Agilent 7890A,
cromatgrafos de gases Agilent 6890N, 6890Plus y 6890A,
cromatgrafos de gases Agilent 6850,
cromatgrafo de gases 5890 Serie II,
mdulos y sistemas Agilent Serie 1100/1200 para LC,
LC/MSD Agilent Serie 1100,
LC/MSD Single Quad Agilent Serie 6100,
sistema de electroforesis capilar de Agilent 1600 (CE),
sistema de electroforesis capilar de Agilent 7100 (CE),
sistema CE/MS Agilent e
interfase analgico/digital de doble canal Agilent 35900E.
El software est diseado para equipos personales compatibles con IBM con
un sistema operativo Microsoft Windows XP Professional.
El software se vende como una ChemStation bsica de un solo instrumento
con cinco versiones. Todas las versiones incluyen adquisicin de datos, control
instrumental, anlisis de datos (integracin, cuantificacin e informes), auto-
matizacin y personalizacin para un instrumento analtico. Un instrumento
est definido como de ejecucin en una sola base de tiempo, pero puede reco-
pilar datos simultneamente de diferentes detectores. Las cinco versiones son:
ChemStation de un solo instrumento para sistemas de cromatografa de
gases (GC), referencia G2070BA
ChemStation de un solo instrumento para sistemas de cromatografa de
lquidos (LC), referencia G2170BA
ChemStation de un solo instrumento para sistemas de electroforesis capilar
(CE), referencia G1601BA
ChemStation de un solo instrumento para sistemas de cromatografa de lq-
uidos/detector selectivo de masas (LC/MSD), referencia G2710BA, y
Descripcin general
ChemStation de un solo instrumento analgico/digital (A/D) para adquisi-
cin de datos analgicos con control externo de eventos, referencia
G2072BA
La funcin de control instrumental del software ChemStation se puede
ampliar adquiriendo mdulos adicionales de adquisicin de datos y de control
instrumental para poder tener configuraciones de varios instrumentos y tcni-
cas mixtas.
Mdulos instrumentales adicionales
Los mdulos instrumentales adicionales son:
mdulo de control instrumental GC y adquisicin de datos, referencia
G2071BA,
mdulo de control instrumental LC y adquisicin de datos, referencia
G2171BA,
mdulo de control instrumental GE y adquisicin de datos, referencia
G2172BA,
mdulo de control instrumental LC/MSD, mdulo de expansin de adquisi-
cin y evaluacin de datos, referencia G2712BA,
mdulo de adquisicin de datos analgico, referencia G2073BA, y
mdulo de expansin MSD para actualizar un sistema LC a LC7MSD, refe-
rencia G2712BA.
Mdulos de evaluacin de datos adicionales
La capacidad de proceso de datos de las ChemStations tambin se puede
ampliar mediante la adquisicin de mdulos adicionales de proceso de datos
para aplicaciones especializadas:
mdulo adicional de evaluacin espectral con detector de diodos (DAD),
referencia G2180BA,
mdulo de base de datos de resultados y organizacin de muestras ChemS-
tore, referencia G2181BA, y
mdulo de evaluacin de datos de bioanlisis y deconvolucin LC/MSD,
referencia G2720BA, slo para su uso con ChemStation LC/MSD.
Descripcin general
Opcin ChemStation OpenLAB, referencia G2189BA, proporciona una
interfase entre ChemStation y el Gestor de contenidos empresariales
(ECM).
En cada ChemStation se pueden configurar hasta cuatro instrumentos de cro-
matografa. Si se configuran instrumentos con detectores de espectroscopia
(detectores de diodo-array para cromatografa de lquidos o electroforesis
capilar), no se soportan ms de dos detectores de diodos en una ChemStation
y el nmero de instrumentos soportados est restringido a tres. Cuando Che-
mStation para LC/MS se utiliza para controlar el mdulo LC/MS Agilent Serie
1100/1200 (opcionalmente con un LC Agilent Serie 1100/1200 o LC 1090 Serie
II), el PC no admite ningn otro instrumento.
Productos slo de evaluacin de datos
Tambin hay disponibles dos productos slo de evaluacin de datos que
podran no tener instrumentos configurados. Estn diseados para evaluacin
de datos en oficinas:
ChemStation para evaluacin de datos LC 3D, referencia G2190BA, incor-
pora las capacidades de anlisis de datos de ChemStation GC, LC y CE, as
como evaluacin de datos espectrales de diodos.
ChemStation para evaluacin de datos LC/MSD, referencia G2730BA,
incluye evaluacin de datos espectrales del diodo-array, evaluacin de
datos espectrales de masa y las funciones de ChemStation bsica para eva-
luacin de datos.
Hardware de ChemStation
Hardware de ChemStation
Para obtener ms detalles sobre el hardware de ChemStation, consulte el
manual Instalacin de ChemStation.
Acerca del software de ChemStation
Sistema operativo
ChemStation requiere el sistema operativo Microsoft Windows XP Professio-
nal SP3 o Windows Vista Business SP1.
Los grficos de control de ChemStation requieren Microsoft Excel.
Mtodos y secuencias
El mtodo analtico describe completamente cmo se realiza una separacin
determinada. Contiene todos los parmetros para el control instrumental y la
adquisicin y evaluacin de datos, incluida la integracin, cuantificacin e
informes. El sistema se puede configurar para que adquiera los datos de varias
muestras con diferentes mtodos. El fichero de control de este tipo de opera-
cin se denomina secuencia, y contiene la informacin de cada muestra, refe-
rencias a los mtodos apropiados y especificaciones de recalibracin
automtica. Para obtener ms informacin sobre mtodos y secuencias, con-
sulte Automatizacin en la pgina 27 y el sistema de ayuda en lnea.
Configuracin del sistema
La configuracin del sistema instrumental se realiza mediante el editor de
configuracin. Permite definir los instrumentos, sus direcciones GPIB o LAN,
los directorios de los datos, las secuencias y mtodos y la definicin de color
del software ChemStation. Para obtener ms informacin, consulte los manua-
les suministrados con los mdulos ChemStation adicionales.
Modelo de datos
El software ChemStation est diseado sobre un modelo de datos basado en
una estructura de memoria denominada registro. Los registros son estructu-
ras multipropsito que pueden contener datos analticos y datos para infor-
macin bidimensional (por ejemplo, tiempo/intensidad) e informacin
tridimensional (por ejemplo, tiempo/intensidad/longitud de onda).
ChemStation proporciona los comandos y funciones para construir, expandir,
extraer y editar registros, siempre que no se alteren los datos primarios. Para
obtener ms informacin, consulte la Gua de programacin de macros dis-
ponible como ayuda en lnea.
Convenciones de los nombres de ficheros
Convenciones de los nombres
Las reglas siguientes permiten que ChemStation genere y procese nombres
vlidos para ficheros y directorios:
No est permitido que los caracteres siguientes formen parte de los nombres
de ficheros y directorios: < > : " / \ | @ % * ? ' & espacios en blanco, etc.
El uso de estos caracteres en nombres de ficheros o de directorios puede pro-
vocar problemas al cargar ficheros en ChemStation. Adems, si se utilizan
estos caracteres en la carpeta de instalacin, la copia de reprocesamiento no
comienza y si se utiliza el carcter % en la carpeta de instalacin, algunos acce-
sos directos de 'Agilent ChemStation ' no funcionan correctamente.
Son asimismo aplicables las siguientes reglas:
Tabla 1 Caracteres restringidos
Parmetro de ChemStation Character
Nombres de ficheros de mtodo: % y . (punto decimal) no permitidos
Nombres de ficheros de datos
(prefijo/contador):
espacios en blanco no permitidos
Subdirectorios de datos y subdirectorios de
secuencias:
[] + = ; , . (punto decimal); espacios en blanco no
permitidos
No se pueden utilizar como nombre de un fichero los siguientes nombres de
dispositivo reservados:
CON, PRN, AUX, NUL
COMx (donde x es un nmero del 1 al 9)
LPT1x (donde x es un nmero del 1 al 9)
Debe evitarse asimismo el uso de estos nombres seguidos de una extensin (p.
ej. Nul.txt).
Longitud mxima de los nombres de ficheros y subdirectorios de
ChemStation
Se enumeran a continuacin las especificaciones de ChemStation Agilent rela-
tivas a nombres de ficheros y subdirectorios:
NOTA
En los tests realizados para validar las convenciones de los nombres de ficheros se utilizan
equipos con sistema operativo en ingls, japons y chino. Agilent no puede garantizar el
soporte de sistemas operativos que no sean en ingls y sus caracteres especiales.
Tabla 2 Longitud mxima de los nombres de ficheros y subdirectorios de ChemStation
Fichero de datos/Subdirectorio/Ruta Longitud
mx. de
entrada
Apndice
automtico
Ejemplo
Nombre de fichero de datos 38 .D Demodad.d
Nombre de fichero de datos utilizando
prefijo/contador
15 .D longname000001.d
Mtodo Secuencia Hipersecuencia
Libreras Plantillas de informes
personalizadas
40 . M
. S
. HYP
. UVL
. FRP
def_lc.m
def_lc.s
def_lc.hyp
demodad.uvl
areapct.frp
Subdirectorio de fichero de datos 40 demo (en informacin de
la muestra)
Subdirectorio de secuencias de datos 40 demo (en parmetros de
secuencia)
Todos los mensajes del sistema de informes de los libros de registro de ChemS-
tation en formato ampliado y las cadenas de informacin se imprimen en
varias lneas. En determinados informes, por ejemplo el informe de secuencia,
los nombres de ficheros pueden aparecer truncados para que encaje toda la
informacin en la plantilla de informe.
Interfase de usuario de software
La interfase de usuario de ChemStation est diseada con ventanas que agru-
pan las funciones del software segn las tareas analticas tpicas. Las siguien-
tes tres ventanas estndar estn presentes en todas las configuraciones del
software:
Mtodo y Control de anlisis para controlar y adquirir datos del instru-
mento
Anlisis de datos para revisar y volver a evaluar los datos adquiridos
Diseo del informe para disear informes especficos
Existen otras ventanas si se piden mdulos de evaluacin de datos adicionales
o para determinadas configuraciones de instrumentos que admiten procedi-
mientos de diagnstico y verificacin de instrumentos. La ventana de gua de
ChemStation est disponible cuando se desea que los operadores de los instru-
mentos analicen muestras a partir de una tabla preconfigurada y fcil de usar.
Nombre de contenedor de datos de
secuencia
40 test_date_time (crear
usando preferencias de
secuencias)
Ruta de datos
Ruta de mtodo
Ruta de secuencia
Ruta de hipersecuencia
Ruta de libreras
Ruta de plantilla de informe
personalizado
100 100 c:\chem32\1\data
c:\chem32\1\methods
c:\chem32\1\sequence
c:\chem32\1\hyper
c:\chem32\speclib
c:\chem32\repstyle
Tabla 2 Longitud mxima de los nombres de ficheros y subdirectorios de ChemStation
Fichero de datos/Subdirectorio/Ruta Longitud
mx. de
entrada
Apndice
automtico
Ejemplo
El panel de navegacin contiene el botn de navegacin que permite cambiar
rpidamente de las ventanas de ChemStation y ChemStation Explorer con
estructura de rbol. El contenido de ChemStation Explorer depende de la ven-
tana y facilita acceso a diferentes elementos de ChemStation.
Cada ventana consta de un conjunto de elementos de usuario estndar, inclui-
dos mens y barras de herramientas. La barra de herramientas estndar
ofrece acceso rpido a informacin comn sobre especificaciones del sistema,
por ejemplo, mtodos y secuencias. La ventana Mtodo y Control de anlisis
incorpora adems una barra de estado del sistema, un rea de informacin de
la muestra, que puede configurarse para un solo anlisis o para anlisis auto-
matizados, y un diagrama esquemtico de la interfase del instrumento para
configuraciones GC, CE y LC. El diagrama esquemtico de la interfase del ins-
trumento utiliza puntos de acceso para el acceso rpido a los parmetros de
los instrumentos y un grfico animado que ofrece una visin general de cada
anlisis segn se realiza. Si no es necesario, el diagrama esquemtico del ins-
trumento se puede desactivar para ahorrar memoria y otros recursos de Win-
dows.
La ventana Anlisis de datos ampla la barra de herramientas estndar para
incluir modos de anlisis de datos especficos, como integracin, calibracin,
informes, anotacin, comparacin de seales y otros modos especializados si
los mdulos estn instalados. Cada uno de los diferentes modos de anlisis de
datos se soportan mediante un conjunto de herramientas especfico de cada
uno de ellos.
La ventana Diseador de informes permite al usuario definir el diseo de un
estilo de informe determinado de una manera grfica orientada a objetos.
Tambin utiliza un conjunto de barras de herramientas especfico de esta
tarea.
Adquisicin de datos
En la pantalla se monitoriza y se actualiza constantemente el estado de los ins-
trumentos, adems del tiempo de anlisis transcurrido, tanto cuando el soft-
ware est en una ventana visible como cuando es un icono. Las transacciones
que se producen durante el anlisis, incluidos los errores y las condiciones del
instrumento al principio y al final del anlisis, se registran en el libro de regis-
tro del sistema y con cada fichero de datos se guarda un extracto del mismo.
Con cada fichero de datos se pueden guardar las condiciones del instrumento,
por ejemplo, flujo, temperatura, presin y composicin del disolvente en el
caso de cromatgrafos de lquidos. Estos parmetros del instrumento se pue-
den mostrar y trazar para confirmar la calidad de cada anlisis. La naturaleza
exacta de los parmetros registrados depende tanto de la tcnica como de la
capacidad del instrumento configurado.
Se puede usar una o varias ventanas para monitorizar en tiempo real los datos
que el instrumento est adquiriendo. Los datos se muestran con unidades de
medida reales como mAU, voltios, grados o bar. Cada ventana puede mostrar
superpuestas varias seales de cromatografa o electroferografa o parmetros
de instrumentos, por ejemplo, la presin. La configuracin predeterminada de
la pantalla se puede ajustar y el sistema la recuerda para que los usuarios pue-
dan establecer su propia configuracin como predeterminada del instru-
mento. La ventana tiene funcin de zoom y se puede usar el cursor para
mostrar la respuesta de una seal determinada en cualquier momento del
tiempo.
Durante un anlisis, se pueden usar todas las funciones de ChemStation
mediante la copia fuera de lnea. Mientras se realiza la adquisicin, la parte de
anlisis de datos de la sesin fuera de lnea de un instrumento no es accesible
y la revisin de los datos hay que realizarla en la copia fuera de lnea.
Los usuarios que desean comenzar el proceso de datos antes de terminar el
anlisis disponen de una funcin de instantnea. La instantnea hay que
tomarla en la copia fuera de lnea de las sesiones del instrumento y se muestra
inmediatamente para su revisin.
El diseo de las ventanas de informacin de seal y estado, incluidos los com-
ponentes del diagrama esquemtico de la interfase del instrumento, se guarda
automticamente.
Para obtener ms informacin sobre adquisicin de datos, consulte Adqui-
sicin de datos en la pgina 63 y el sistema de ayuda en lnea.
Anlisis de datos: presentacin
La ventana Anlisis de datos aade a la barra de herramientas estndar fun-
ciones de anlisis de datos agrupadas por tareas, por ejemplo, integracin,
calibracin, informes, anotacin y comparacin de seales. Se pueden realizar
las siguientes operaciones grficas clave:
seleccin de presentaciones de una o varias seales al cargar el cromato-
grama o electroferograma,
superposicin de los cromatogramas o electroferogramas de diferentes
muestras,
sustraccin de un cromatograma o electroferograma de otro,
alineacin grfica vertical y horizontal de las seales para ayudar a la com-
paracin visual,
inversin o reflejo de las seales para ayudar a la comparacin visual,
funciones de zoom y desplazamiento grfico,
ajuste de los atributos de presentacin, incluida la seleccin de marcas de
sealizacin, lneas base, ejes, tiempos de retencin/migracin y nombres
de los compuestos (el usuario tambin puede seleccionar la fuente de las
etiquetas de los compuestos y RT, ajustar el tamao y la orientacin de la
presentacin, seleccionar la presentacin como superpuesta o separada y
seleccionar los factores de escala)
la presentacin de cromatograma o electroferograma puede incluir super-
posiciones grficas de los parmetros de los instrumentos segn la capaci-
dad del instrumento configurado,
las anotaciones definidas por el usuario se pueden aadir de forma interac-
tiva a la presentacin, pudiendo seleccionar la fuente, el tamao, la rota-
cin del texto y el color (una vez definidas, las anotaciones se pueden
mover, editar y eliminar),
copiar la presentacin al portapapeles de Windows con el formato de meta-
fichero y mapa de bits,
una funcin modo de seleccin para mostrar los valores de puntos de datos
individuales en unidades de detector, y
exportacin de puntos digitalizados de tiempo o intensidad al portapapeles
de Microsoft Windows.
Anlisis de datos: integracin
El algoritmo de integracin de ChemStation es la segunda revisin de una
nueva generacin que pretende mejorar la resistencia, fiabilidad y facilidad de
uso.
Anlisis de datos: cuantificacin
El modo de calibracin de ChemStation de la ventana de anlisis de datos per-
mite la presentacin simultnea de:
las seales que se van a calibrar con una indicacin de la ventana de tiempo
de retencin o migracin del compuesto actual,
la tabla de calibracin cuya presentacin se puede configurar mediante una
amplia seleccin de parmetros de calibracin, y
la curva de calibracin del compuesto que se va a calibrar.
Todas las ventanas del modo de calibracin estn vinculadas de manera que
los cambios en una se reflejan automticamente en todas las dems. Este
modo permite la seleccin y modificacin grfica de los datos de calibracin.
La cuantificacin se basa en los clculos %, % normalizado, patrn externo, %
patrn externo, patrn interno y % patrn interno calculados en cada altura o
rea de pico. Las calibraciones pueden ser multinivel e incluir varias definicio-
nes de patrn interno. Los historiales de calibracin se guardan automtica-
mente y se pueden usar para ponderar los clculos de recalibracin.
Para obtener ms informacin sobre calibracin y cuantificacin, consulte
Calibracin en la pgina 151.
Anlisis de datos: revisin de datos, reproceso de datos y revisin
por lotes
En la ventana Anlisis de datos hay disponibles otros dos conjuntos de herra-
mientas:
Tabla de navegacin
Revisin por lotes
La tabla de navegacin permite varias operaciones grficas clave:
funciones estndar de configuracin de tablas como ordenar, opciones de
arrastrar y colocar, seleccin de columnas, agrupacin de elementos para
especificar una configuracin de navegacin de tablas preferida
funciones con el botn derecho del ratn para cargar una seal, superponer
una seal, exportar datos o imprimir informes
expandir una lnea en la tabla de navegacin para revisar los detalles de las
seales
revisar seales y crear informes de ChemStation con los mtodos cargados
o con el mtodo individual de fichero de datos DA.M, por ejemplo, para revi-
sar los eventos de integracin manual
reprocesar los datos de secuencia (datos de secuencia adquiridos mediante
ChemStation Rev. B.02.01 y posteriores)
En la ventana Revisin por lotes se pueden realizar las siguientes operaciones
grficas:
definir la revisin y el reprocesamiento automtico o manual de ficheros de
datos (calibrados)
recalibrar la tabla de calibracin
revisar las tablas de compuestos de los mtodos calibrados
crear informes por lotes especficos
Anlisis de datos: informes estndar
En la pantalla de especificacin de informes se puede seleccionar un conjunto
estndar de estilos personalizables para informes de muestras. Cada tipo de
informe estndar contiene grupos de informacin estndar y grupos de infor-
macin opcional.
Para obtener ms informacin sobre los estilos de informe disponibles, con-
sulte Utilizacin de los informes de ChemStation en la pgina 229.
Anlisis de datos: informes especializados
ChemStation tambin dispone de funciones de informes avanzadas para las
aplicaciones que requieren un conjunto de informes ms especializado. Algu-
nas son: estadsticas sobre la calidad de separacin, informes que incluyen
anlisis de tendencias entre muestras y diseos de informes personalizables.
Informes de idoneidad del sistema
Los informes de idoneidad del sistema permiten a los usuarios notificar los
parmetros de rendimiento del sistema para anlisis individuales. Hay tres
variaciones o estilos de este tipo de informes.
El Informe estndar del Performance imprime los parmetros para mtodos no
calibrados, que incluyen:
tiempo de retencin/migracin,
factor de capacidad (k)
rea de pico,
altura de pico,
simetra,
anchura real del pico a media altura,
eficacia en nmero de platos,
resolucin y
selectividad.
En los mtodos calibrados, el nombre del compuesto y la cantidad reemplazan
las columnas de rea de pico, altura y selectividad.
La cabecera del informe incluye la cabecera y el pie de pgina estndar, el blo-
que de informacin de la muestra, los parmetros de la columna analtica y,
opcionalmente, un trazado del cromatograma o electroferograma.
El estilo de Performance and Noise aade una evaluacin del ruido de la seal,
en hasta siete rangos de evaluacin definidos por el usuario, a los datos del
estilo de informe de Performance. Los parmetros de ruido se notifican como
relaciones seal/ruido para cada pico o compuesto calibrado y una tabla de
ruidos para cada seal. Cada tabla de ruidos incluye el ruido calculado
mediante seis veces la desviacin estndar, los mtodos pico a pico y ASTM as
como la precesin y la deriva.
El estilo de Extended Performance aade la representacin grfica de cada pico,
mostrando el tiempo inicial y final, media anchura y lnea de base. Este estilo
incluye los siguientes parmetros adems de los incluidos en los informes de
rendimiento estndar:
rea, altura y cantidad,
sesgo,
exceso,
factor de cola usp,
intervalo de tiempo entre los puntos de datos y el nmero de puntos de
datos en el pico,
momentos estadsticos (M0 a M4),
anchura del pico a media altura calculada mediante los mtodos real, cinco
sigma, tangencial y de cola, y
plato/columna y platos/metro calculados mediante los mtodos anchura de
pico a media altura, cinco sigma, tangencial y estadstico.
Los usuarios pueden definir sus propios rangos de evaluacin del ruido y lmi-
tes aceptables para estos criterios de rendimiento. En el informe se indican los
valores situados fuera de los lmites aceptables definidos por el usuario.
Para obtener ms informacin sobre los clculos de idoneidad del sistema,
consulte Evaluacin de la idoneidad del sistema en la pgina 247.
Informes de resumen de secuencias
Los informes de resumen de secuencias se producen al final de una serie de
anlisis automatizados. Su rango de aplicaciones va desde un breve resumen
de las muestras analizadas a un anlisis grfico detallado sobre tendencias y
repetibilidad de los parmetros seleccionados por el usuario entre diferentes
muestras analizadas con el mismo mtodo.
Para obtener ms informacin sobre informes de resumen de secuencias, con-
sulte el sistema de ayuda en lnea y la seccin Elaboracin de informes de
resumen de secuencias en la pgina 242.
Informes personalizados
ChemStation incluye una ventana de diseo de informes personalizados para
aquellos usuarios que desean definir el contenido exacto de sus informes. El
usuario define grficamente un diseo de informe que puede incluir informa-
cin general sobre la muestra, informacin sobre seales, integracin y resul-
tado analtico cuantitativo. Se pueden definir los elementos individuales,
como el texto, las tablas y los grficos, organizarlos en secciones informativas
y ajustar grficamente su posicin relativa y la orientacin de cada elemento
definido. Se pueden aadir, eliminar, reordenar y anidar las secciones indivi-
duales.
El usuario puede definir cabeceras y pies de pgina para que aparezcan en
cada pgina, marcas de hora del informe y numeracin de pgina con el for-
mato page x of y. La informacin incluida en el informe puede ser cualquier
parmetro de ChemStation o definido por el usuario.
Una vez diseado el informe, se puede asociar a un mtodo por defecto para
que sea el formato de informe por defecto para ese tipo por defecto de anlisis.
Los informes personalizados se pueden enviar a la pantalla, a la impresora y a
un fichero. Los informes en pantalla contienen grficos.
Para obtener ms informacin sobre el diseo de informes, consulte el sistema
de ayuda en lnea.
Informes de diagramas de control
El software ChemStation incluye la funcin para Control Chart. Una vez insta-
lada y seleccionada, el usuario puede realizar el seguimiento automtico de un
parmetro determinado de un compuesto cada vez que se ejecuta un mtodo.
Estos parmetros son: cantidad, factor de respuesta, tiempo de reten-
cin/migracin y rea.
Para obtener ms informacin sobre los informes personalizados y de diagra-
mas de control, consulte el sistema de ayuda en lnea.
Utilidades y compatibilidades
General
ChemStation puede importar y exportar ficheros de datos con el formato de
cromatografa andi (Analytical Data Interchange) de la Analytical Instrument
Association (AIA), revisin 1.0, copyright 1992. Se admite la importacin de
datos en el nivel de conformidad uno (informacin de muestra y datos de
seal) y la exportacin de datos en el nivel de conformidad dos (informacin
de muestras, datos de seal y resultados de integracin).
ChemStation incluye comandos y funciones para admitir la norma de inter-
cambio dinmico de datos (DDE) de Microsoft Windows, tanto como cliente
DDE como servidor DDE. Se incluyen comandos para establecer y terminar las
conexiones, transferir informacin en ambas direcciones y ejecutar funciones
remotas.
Personalizacin
ChemStation se puede personalizar mediante un eficaz conjunto de comandos.
Estos comandos se pueden agrupar para ejecutar automticamente una fun-
cin especfica; este grupo se denomina macro. Los usuarios que escriben
macros pueden definir sus propias variables, crear constructos condicionales
o de bucle, realizar E/S fsicas como el tratamiento de ficheros y la interaccin
de usuarios, anidar sus macros y programar e intercambiar datos con otras
aplicaciones de MS-DOS o Microsoft Windows.
Para obtener ms informacin sobre la personalizacin, consulte la Gua de
programacin de macros disponible como ayuda en lnea.
Automatizacin
ChemStation puede ejecutar secuencias multimtodo.
El grupo de parmetros de secuencia puede definirse para utilizar ficheros
generados automticamente o numerados secuencialmente, con un prefijo de
hasta quince caracteres. El usuario puede seleccionar si desea realizar anlisis
completos o reprocesar los datos nicamente de secuencias. Tambin puede
seleccionar, en una serie, un comando de cierre especfico o una macro de cie-
rre definida por el usuario que se ejecuta cuando la secuencia termina, por
error o despus de terminar todos los anlisis.
La tabla de secuencias, o lista de anlisis a realizar, se crea en una interfase de
usuario del tipo hoja de clculo y permite especificar los nmeros de vial y los
nombres de muestra, mtodos de anlisis, parmetros de cuantificacin de
muestras que incluyen la cantidad de muestra, un multiplicador y un factor de
dilucin, especificaciones de calibracin, el parmetro de intercambio de
datos LIMSID y el nmero de inyecciones repetidas. Dependiendo de los ins-
trumentos y mdulos configurados, habr ms campos accesibles; por ejem-
plo, si un sistema LC Agilent 1100/1200 incluye un colector de fracciones, en
la tabla de secuencias aparecer la columna "Inicio fract.". El usuario puede
configurar el aspecto de la tabla de secuencias. El usuario puede desplazarse
por las celdas de la tabla y copiar, cortar o pegar cada celda, filas enteras o
series de filas para crear secuencias de forma eficaz y rpida.
En la tabla de secuencias, las muestras se identifican como desconocidas, cali-
bracin o muestra de control. El tipo de muestra determina el tratamiento
especial de la evaluacin de los datos de la muestra:
las muestras desconocidas se evalan y se informan de acuerdo con la espe-
cificacin del mtodo,
las muestras de calibracin se utilizan para recalibrar el componente de
cuantificacin del mtodo, tal y como se describe ms adelante, y
las muestras de control se evalan segn los lmites de cada componente
definido en el mtodo. Si el resultado est fuera del rango de cualquiera de
los parmetros especificados, la ejecucin de la secuencia se detiene.
Las muestras de calibracin se pueden definir como simples, cclicas o agrupa-
das. En las recalibraciones simples, la recalibracin se produce cada vez que
se define una muestra de calibracin en la secuencia. Las recalibraciones ccli-
cas se producen a intervalos definidos durante el anlisis de una serie de
muestras desconocidas. En la agrupacin de una serie de muestras desconoci-
das, se analizan dos conjuntos de calibracin. Despus, se calculan los infor-
mes cuantitativos de las muestras desconocidas utilizando una tabla de
calibracin promediada con dos conjuntos de calibracin.
La funcin de secuencia parcial permite a los usuarios ver el orden de ejecu-
cin de la secuencia y, adems, seleccionar las muestras individuales para vol-
ver a analizarlas o a evaluarlas. Al volver a evaluar los datos ya adquiridos, los
usuarios pueden especificar si en el reprocesamiento se utilizarn los datos de
cuantificacin de la muestra originales o los nuevos datos introducidos en la
tabla de muestras de la secuencia.
Las secuencias se pueden poner en pausa para analizar muestras prioritarias
de una sola inyeccin con otro mtodo y, despus, se pueden reiniciar sin inte-
rrumpir la automatizacin. Se puede aadir muestras a la tabla de secuencias
durante la ejecucin de la secuencia.
Tanto la secuencia como las tablas de secuencias parciales se pueden impri-
mir.
Para obtener ms informacin sobre secuencias, consulte Automatizacin en
la pgina 171 y el sistema de ayuda en lnea.
Buenas prcticas de laboratorio
ChemStation se ha desarrollado segn normas de desarrollo y diseo interna-
cionalmente reconocidos y dispone de varias funciones especficas para ayu-
dar a los usuarios a trabajar en un entorno regulado. Estas funciones del rea
de especificacin de mtodos completos y verificacin de que los mtodos son
idneos para el uso previsto, se usan para comprobar el funcionamiento del
sistema y asegurar la trazabilidad, originalidad y calidad de los datos.
Proceso de desarrollo
El certificado de validacin entregado con cada paquete de software docu-
menta las fases de desarrollo y pruebas del software realizados como parte del
proceso de desarrollo. El proceso de desarrollo est registrado segn la norma
de calidad ISO 9001. Est documentado, junto con los protocolos de revalida-
cin in situ, en el Cuaderno de validacin de Agilent ChemStation para LC.
Especificacin y uso de mtodos
Mtodos globales: toda la especificacin de los anlisis de datos y del ins-
trumento se guarda en un lugar. Los mtodos incluyen las especificaciones
individuales de los rangos de los compuestos para comprobar que los resul-
tados de cuantificacin no se aplican fuera del rango calibrado.
El registro histrico de cambios en los mtodos permite a los usuarios de
un mtodo validado registrar automticamente cmo y cuando se modific
un mtodo. Opcionalmente, los usuarios pueden aadir al registro histrico
un comentario con el motivo de la modificacin. El registro histrico de
cambios se guarda automticamente como parte del mtodo en formato
binario. Para evitar el acceso no autorizado a los registros, est protegido
por el esquema de acceso de usuarios, que se describe ms adelante. El
registro histrico de cambios se puede ver e imprimir.
En cada mtodo se pueden asignar lmites por compuesto para varios
parmetros de rendimiento cromatogrficos o electroferogrficos y del sis-
tema, como se describe en la seccin de cuantificacin del anlisis de datos.
Los resultados que superan los rangos de estos parmetros se utilizan para
controlar la ejecucin de secuencias automatizadas, tal y como se describe
en la seccin de automatizacin. Se indican en el informe del anlisis
correspondiente.
Los informes de rendimiento o idoneidad del sistema (consulte la seccin
Informes ms arriba) proporcionan un anlisis detallado de la calidad de la
separacin.
ChemStation se puede configurar para restringir el acceso a dos niveles, nivel
de operador y nivel de gerente. El nivel de manager puede estar protegido por
contrasea y permite el acceso a todas las funciones de ChemStation. El nivel
de operador restringe el usuario a las funciones clave y a la ejecucin de mto-
dos analticos definidos. El nivel de operador est previsto para su uso en
laboratorios de rutina y evita especficamente que los usuarios modifiquen y
creen nuevos mtodos.
Solidez de los mtodos
Los informes de resumen de secuencias (consulte Elaboracin de informes de
resumen de secuencias en la pgina 242) permiten probar la solidez de los
mtodos. Los informes de formato extendido para los criterios seleccionados
por el usuario se envan como diagramas de tendencias que se pueden utilizar
para determinar los lmites realistas de operacin. Estos lmites se pueden
incorporar al mtodo para asegurar, mediante el anlisis de muestras de con-
trol, que el mtodo est funcionado segn las especificaciones.
Funcionamiento del sistema
El kit de verificacin de ChemStation, que forma parte del software estndar,
comprueba automticamente si la instalacin es correcta y el funcionamiento
de los componentes de evaluacin de datos del software; para ello, compara
los resultados generados cuando se ejecuta la prueba con los valores conoci-
dos registrados previamente. El kit de verificacin permite a los usuarios defi-
nir sus propios ficheros de datos y mtodos que sern la base de la prueba.
Trazabilidad, originalidad y calidad de los datos
El libro de registro de tiempo de anlisis ofrece un registro de transacciones
de todo el sistema. Tambin registra los eventos inusuales (como errores o
cambios de parmetros realizados durante un anlisis) as como las condicio-
nes del instrumento antes y despus de cada anlisis. Con cada fichero de
datos se guarda un extracto relevante del libro de registro.
Tambin se registran las condiciones reales del instrumento, por ejemplo, pre-
sin, flujo y temperatura, ocurridas durante cada anlisis si el instrumento
configurado admite esta posibilidad. Despus, estos datos se pueden presen-
tar grficamente con el cromatograma o electroferograma para mostrar las
condiciones reales del instrumento durante ese anlisis concreto y tambin se
pueden incluir en el informe.
Los mtodos guardados con el fichero de datos registran el mtodo real en el
momento del anlisis y permite realizar posteriormente una reconstruccin
completa de los datos del informe. El mtodo se guarda cuando terminan
todas las fases del anlisis.
Todos los informes tienen marcas de hora y numeracin de pgina trazable
(estilo de numeracin pgina x de y). El usuario puede seleccionar el nivel de
detalle de cada informe, desde simples informes de resumen a detalles comple-
tos del sistema (consulte la seccin Informes ms arriba).
Los ficheros de registro de GLP Save, especificados como parte de la configu-
racin del mtodo, guardan todos los datos originales, incluida informacin de
la muestra, el mtodo de anlisis de datos, las seales del cromatgrafo o elec-
trofergrafo, las condiciones del instrumento, los resultados de integracin y
cuantificacin, los datos del informe y el libro de registro del anlisis en un
archivo binario protegido por sumas de control. Este formato binario no edita-
ble garantiza la originalidad de los resultados. El archivo incluye un esquema
de revisiones que indica si los datos han sido reprocesados.
En la tabla de secuencias se pueden definir los tipos de muestras de control y
usarse para comprobar automticamente el rendimiento del instrumento
segn los resultados de la muestra de control de calidad cuando el instru-
mento funciona desatendido. Los resultados que estn fuera del rango acepta-
ble definido por el usuario detendrn la ejecucin automtica del
instrumento.
Instrument Control
Instrument Control
La capacidad de control instrumental de ChemStation se puede ampliar
adquiriendo mdulos instrumentales adicionales para tener varias configura-
ciones de instrumentos con tcnicas mixtas. Para obtener ms informacin,
consulte los manuales suministrados con los mdulos ChemStation adiciona-
les.
Trabajo en red
ChemStation dispone del software LanManager de Agilent y se ha probado su
compatibilidad con los productos de Microsoft Windows XP Professional y
Microsoft Windows Vista Business basados en la especificacin IEEE 802.3
CSMA/CD. Debera ser compatible con cualquier software de red compatible
con las normas de programacin de Microsoft Windows.
Estos productos permiten a ChemStation compartir dispositivos fsicos, por
ejemplo, plotters e impresoras con otros ordenadores del laboratorio, adems
de compartir informacin como ficheros de datos y mtodos.
Cliente/Servidor
El software ChemStation se puede instalar en un servidor de red apropiado y
descargarse en los PC cliente cuando sea necesario. La configuracin especfi-
ca de cada cliente garantiza un entorno apropiado para las diferentes tcnicas
y usuarios individuales, mientras que la instalacin centralizada del software
evita tener que gestionar muchas copias de la misma instalacin de ChemSta-
tion en un entorno de trabajo.
Control instrumental mediante LAN
El software ChemStation permite el control instrumental y la adquisicin de
datos mediante LAN para GC Agilent 7890, GC Agilent 6890, el mdulo de con-
trol Agilent 35900E A/D y el sistema LC Agilent Serie 1100/1200. Para contro-
lar y monitorizar fcilmente los instrumentos, conctelos a la red LAN donde
se encuentra el PC de ChemStation. De esta manera el PC de ChemStation se
puede ubicar lejos de los instrumentos que controla.
Documentacin
Documentacin
La documentacin contiene secciones especficas acerca de:
Instalacin y aprendizaje del software ChemStation,
Utilizacin del software ChemStation,
Familiarizacin con los principios de funcionamiento del software, y
Personalizacin de ChemStation.
Instalacin y aprendizaje
Cada producto de software ChemStation se entrega con un manual de instala-
cin que incluye detalles sobre los pasos clave de los requisitos de software y
hardware del PC, la instalacin de la interfase instrumental, instalacin de
ChemStation y cualificacin de la instalacin. El manual de instalacin es
especfico de la configuracin adquirida y puede incluir solucin de proble-
mas, registros del sistema y consejos sobre el mantenimiento del sistema.
Utilizacin del software
Existen dos categoras adicionales de informacin en lnea para el usuario
habitual.
ChemStation incluye un sistema de ayuda completo, contextual, indexado y
con estilo de ventanas. El sistema ofrece explicaciones detalladas acerca de
cada una de las pantallas y el significado de los parmetros de esa pantalla.
Las explicaciones detalladas se amplan con grficos y se pueden copiar al
portapapeles de Windows para incorporarlas a la documentacin del usuario
o para imprimirlas.
El tutorial en lnea incluido en la ayuda en lnea permite aprender el software
mientras trabaja con sus propios mtodos y datos. Ofrece una visin general
de los primeros pasos en la adquisicin y anlisis de datos.
La seccin Cmo... de la ayuda en lnea tambin incluye listas de control para
las tareas de cromatografa comunes y de tcnicas especficas ms complejas
que ayudan a los usuarios menos habituados que desean asegurarse de que el
sistema est correctamente configurado. Estas listas de control estn directa-
mente vinculadas a la informacin detallada de la ayuda en lnea.
Documentacin
Familiarizacin con los principios
El manual Familiarizacin con ChemStation documenta los principios de
funcionamiento del software y los algoritmos utilizados en las manipulaciones
de los datos.
Personalizacin
Los usuarios avanzados que desean personalizar el funcionamiento de ChemS-
tation o que desean incorporar funciones adicionales, pueden hacerlo escri-
biendo macros.
El manual de referencia principal, Gua de programacin de macros, disponi-
ble como ayuda en lnea, contiene un amplio conjunto de ejemplos funcionales
adems de una descripcin completa de los tipos y estructuras de datos inter-
nos.
El fichero de ayuda de comandos, al que se accede directamente desde el
men Ayuda o el cuadro de dilogo Mostrar comando de ChemStation, es la
referencia funcional del programador. Contiene explicaciones sobre la sintaxis
y los parmetros, con macros de ejemplo que ilustran el uso de muchos de sus
comandos. Como estn en lnea, el usuario puede copiar los ejemplos y la sin-
taxis del comando directamente en sus propios ficheros fuente de macros.
Estructura de directorios de ChemStation
El siguiente ejemplo muestra la estructura de directorios de ChemStation.
Comprende directorios genricos compartidos por todos los instrumentos
configurados y directorios especficos de los instrumentos. El programa de
instalacin del software crea un subdirectorio del directorio de ChemStation
(por defecto, CHEM32) para cada instrumento configurado, con el nmero de
instrumento. En este subdirectorio se guardan por defecto los datos, mtodos
y secuencias de este instrumento. Se puede aadir subdirectorios para datos,
mtodos y secuencias mediante Preferencias. Con ChemStation Explorer se
puede ir hasta las ubicaciones recin aadidas para cargar datos, mtodos y
secuencias. Las nuevas ubicaciones tambin estn disponibles en cada cuadro
de seleccin de los elementos de men de ChemStation (por ejemplo, para
configurar la ruta en los parmetros de las secuencias).
Los subdirectorios de ChemStation son los siguientes:
Figura 1 Estructura de directorios de ChemStation
ChFM32 8FFS1YLF
C08F
LC
C
08lvF8S
1
FlC1u8FS
121
8
1FMF
vF8llY
1uulharSuurtlilea
Language
helenu
CF
MS
l01
8
1uulharSuurtlilea
Language
Cl
8aid
0A1A
MF1h00S
SF0uFNCF
0FM0
0FM0
aecliha
Tabla 3 Subdirectorios de ChemStation
Directorio Contents
Chem32 El directorio comprende los programas necesarios para configurar
e iniciar el software ChemStation. Debe formar parte de la variable
PATH. Este directorio se aade automticamente mediante el
programa de instalacin a menos que se indique una alternativa.
REPSTYLE Se utiliza para plantillas de informe definidas mediante el Editor de
plantillas de informe.
CORE Se usa para los componentes principales del software que
comparten todas las configuraciones de instrumentos
cromatogrficos o electroferogrficos. Es el directorio de trabajo de
ChemStation.
PICTURES Comprende grficos necesarios para ChemStation.
Language Se utiliza para el cdigo especfico de idioma de este componente
del software.
1024, 800, ToolbarSupport
Files
Comprenden ficheros de inicializacin para la interfase grfica de
usuario. No debe modificarse.
helpenu Se utiliza para la versin en ingls de EE.UU. de los ficheros de
ayuda para el componente adecuado del software.
BACKUP Se usa para realizar copias de seguridad de los ficheros antiguos
durante la instalacin.
DRIVERS Comprende los controladores de los instrumentos.
1 Se usa para el instrumento configurado (de 1 a 4). Este
subdirectorio comprende cinco subdirectorios adicionales: DATA,
METHODS, SEQUENCE, VERIFY y TEMP.
DATA Comprende los directorios de resultados predeterminados de los
anlisis. Puede incluir ms subdirectorios si se estructura el disco
con ellos mientras se trabaja, definindolos a travs de los cuadros
de dilogo Informacin de muestra o Parmetros de secuencia. Los
directorios de resultados vienen identificados por un nombre con
extensin .D. Para obtener ms informacin sobre la estructura de
los ficheros de datos, consulte Adquisicin de datos en la
pgina 63. Se pueden aadir rutas de datos adicionales a travs de
Preferencias.
METHODS Comprende los directorios de mtodos maestros predeterminados
con extensin .M. Si desea obtener ms informacin sobre el
contenido, consulte Estructura de los directorios de mtodos en
la pgina 54. Se pueden aadir rutas de mtodos adicionales a
travs de Preferencias.
SEQUENCE Comprende la ruta predeterminada para las plantillas de secuencia.
Las plantillas de secuencia de estos directorios tienen una
extensin .S. Se pueden aadir rutas de secuencia adicionales a
travs de Preferencias, consulte Preferencias: ficha
Secuencia en la pgina 175 y Parmetros de secuencia en la
pgina 177.
VERIFY Comprende ficheros de datos, mtodos y los resultados del
proceso de datos almacenado en ficheros (.REG) de registro. Estos
ficheros ejecutan el procedimiento de verificacin de ChemStation
descrito en la ayuda en lnea. Para cada test de verificacin se
utiliza un grupo de ficheros de datos, mtodos y registro.
TEMP El subdirectorio TEMP comprende ficheros de trabajo temporales y
los ficheros del libro de registro. Por ejemplo, para Instrumento 1,
el libro de registro en lnea se llama INSTR1.LOG y el libro de
registro fuera de lnea se llama INSTR1-2.LOG.
LC, GC, CE, MS Cdigo especfico de controlador de instrumentos como ficheros
INI.
IQT Comprende los ficheros necesarios para la creacin de informes
IQT.
speclibs Comprende libreras espectrales.
Tabla 3 Subdirectorios de ChemStation
Directorio Contents
Panel de navegacin
Panel de navegacin
El panel de navegacin, que se encuentra en el lado izquierdo de todas las ven-
tanas de ChemStation, est diseado para agilizar el acceso a los principales
elementos de ChemStation y tambin permite cambiar rpidamente de una
ventana a otra. El panel de navegacin contiene ChemStation Explorer, con
estructura de rbol, y un rea de botones configurables. Tambin dispone de
una funcin de ocultacin automtica para no comprometer el espacio de tra-
bajo de ChemStation y funciones estndar como cambiar el tamao y reorgani-
zar el rea de los botones de navegacin.
Botones de navegacin
Los botones de navegacin permiten cambiar la ventana de ChemStation
haciendo clic en el botn de navegacin especfico. La seccin botn de nave-
gacin se puede minimizar, expandir y reorganizar.
ChemStation Explorer
El contenido del panel de navegacin depende de la ventana. En las ventanas
Mtodo y Control de anlisis, Anlisis de datos y Diseo del informe, ChemS-
tation Explorer permite navegar a los diferentes elementos de ChemStation.
Por defecto, estos elementos de datos, mtodos y secuencias se basan en las
opciones del editor de configuracin. Las ubicaciones de estos elementos se
pueden expandir y se pueden especificar nuevos nodos para mtodos, secuen-
cias y ubicacin de datos mediante la opcin Preferencias del men.
Tabla 4 Elementos del panel de navegacin
Botones de navegacin Elementos de ChemStation Explorer
Mtodo y Control de anlisis Plantillas de secuencias, Mtodos maestros
Anlisis de datos Datos, Mtodos maestros
Diseo del informe Mtodos maestros
Panel de navegacin
Verificacin (LC y LC/MS) Accesos directos especficos de la ventana Verificacin
Diagnosis (LC y LC/MS) Accesos directos especficos de la ventana Diagnosis
Sintonizacin (LC/MS) Accesos directos especficos de la ventana Tune
Tabla 4 Elementos del panel de navegacin
Botones de navegacin Elementos de ChemStation Explorer
Panel de navegacin
43
2
Mtodos
Definicin de mtodo 45
Partes de un mtodo 46
Informacin del mtodo 46
Control instrumental 46
Anlisis de datos 46
Lista de control del anlisis 47
Estado de los mtodos 49
Mtodos almacenados 49
Mtodo actual 50
Creacin de mtodos 51
Edicin de mtodos 52
Partes editables del mtodo 52
Estructura de los directorios de mtodos 54
Qu sucede cuando se ejecuta un mtodo? 55
Operacin del mtodo 55
Macro o comando de ejecucin previa(Lista de control del
anlisis) 56
Adquisicin de datos(Lista de control del anlisis) 56
Anlisis de datos(Lista de control del anlisis) 57
Anlisis personalizado de datos(Lista de control del anlisis) 58
Salvar datos GLP(Lista de control del anlisis) 58
Macro o comando post-anlisis(Lista de control del anlisis) 59
Guardar una copia del mtodo con los datos(Lista de control del
anlisis) 59
Guardar una copia del mtodo como DA.M con los datos (ChemStation
por defecto) 59
Resumen de la operacin del mtodo 60
2 Mtodos
Panel de navegacin
En este captulo se describe el concepto de mtodos y su funcionamiento.
Mtodos 2
Definicin de mtodo
Definicin de mtodo
Un mtodo comprende todos los parmetros para la adquisicin y el anlisis
de datos, adems de tareas previas y posteriores al anlisis, para una muestra
determinada, si son necesarios.
Los ficheros de mtodos disponibles (*.m) se pueden ver en ChemStation
Explorer. Para que la navegacin sea rpida y sencilla, puede aadir ubicacio-
nes adicionales para mtodos al rbol de seleccin de ChemStation Explorer
utilizando la ficha Paths del cuadro de dilogo Preferences.
2 Mtodos
Partes de un mtodo
Partes de un mtodo
Los mtodos se identifican mediante un nombre de hasta cuarenta caracteres
alfanumricos. El nombre del archivo siempre tiene la extensin .M que lo
identifica como mtodo. Los mtodos se guardan como directorios que contie-
nen ficheros individuales relacionados con los componentes del mtodo.
Cada mtodo est compuesto por cuatro componentes:
informacin del mtodo,
control instrumental,
anlisis de datos, y
lista de control del anlisis.
Informacin del mtodo
Esta seccin se utiliza para definir informacin descriptiva acerca del mtodo.
Control instrumental
Define los parmetros que controlan el instrumento o sus componentes. Con
un instrumento LC, los parmetros (composicin de la fase mvil, velocidad
de flujo, volumen de inyeccin, longitud de onda del detector, etc.) controlan
la bomba, el inyector y el detector. Con un instrumento GC, los parmetros
(temperatura del inyector, presin del inyector, ajuste del flujo de la columna
empaquetada, etc.) controlan el instrumento.
Anlisis de datos
Define los parmetros que controlan el procesamiento de los datos.
Mtodos 2
Partes de un mtodo
Detalles de la seal
Define las seales y sus propiedades usadas para evaluacin de datos.
Eventos de integracin
Define los eventos programados que tendrn lugar en momentos de retencin
o migracin especficos en un cromatograma o electroferograma. Estos even-
tos programados se pueden usar para cambiar la manera en que se integra una
seal.
Identificacin de picos
Define los parmetros del proceso de datos asociados a la identificacin de
picos en el cromatograma o electroferograma.
Cuantificacin de picos
Define los parmetros de proceso de datos que afectan a los clculos de cuan-
tificacin que determinan la cantidad o concentracin del componente de la
muestra correspondiente a cada pico.
Calibracin y recalibracin
Define los parmetros de proceso de datos que afectan a la calibracin y la fre-
cuencia con que sta se realiza.
Campos personalizados
Define las propiedades de campos personalizados relacionados de muestra o
compuestos disponibles para el mtodo. Estos campos permiten aadir infor-
macin personalizada a una muestra o compuesto en una muestra.
Informe
Define el formato del informe que se imprime despus de un anlisis.
Lista de control del anlisis
Define qu partes de un mtodo se ejecutan.
2 Mtodos
Partes de un mtodo
La lista de control del anlisis se usa para:
adquirir, guardar y procesar datos para crear un informe,
ejecutar slo una parte del mtodo,
adquirir y guardar datos sin analizarlos,
volver a analizar los ficheros de datos existentes,
utilizar sus propias macros para anlisis de datos, procesamiento previo y
posterior al anlisis, y
guardar el resultado del anlisis en un registro con fines de buenas prcti-
cas de laboratorio.
Mtodos 2
Estado de los mtodos
Un mtodo puede tener dos estados: mtodo almacenado o mtodo cargado
actual.
Mtodos almacenados
Son mtodos almacenados en el disco del equipo. Los mtodos almacenados
tienen un nombre compuesto por hasta cuarenta caracteres alfanumricos
seguidos de la extensin .M. Los mtodos se guardan en tres ubicaciones posi-
bles de ChemStation:
El mtodo maestro se guarda en un subdirectorio de mtodos, disponible en
el nodo Mtodos de ChemStation Explorer, y no est directamente asociado
a ningn contenedor de datos.
Cuando se ejecuta una secuencia (mediante la opcin Unique Folder Creation
ON (consulte Preferencias: ficha Secuencia en la pgina 175), se almace-
nan las copias de todos los mtodos maestros utilizados en el contenedor de
datos de secuencia junto con los ficheros de datos de secuencia. Estos mt-
odos estn directamente vinculados a la secuencia y tambin se usan
cuando se reprocesa la secuencia. Los cambios realizados en estos mtodos
no se propagan a los mtodos maestros. Los cambios se propagan al mtodo
del contenedor de secuencias, as como a los mtodos individuales (DA.M)
cuando se reprocesa la secuencia. Si, a continuacin, desea utilizar el mto-
do del contenedor de secuencias actualizado para la adquisicin de datos,
debe realizar lo siguiente
copiar este mtodo del contenedor de datos de secuencias a una de las
rutas de mtodos definidas, o bien
utilizar la opcin save as para guardar el mtodo actualizado como mt-
odo maestro.
El mtodo nuevo o actualizado estar disponible en ChemStation Explo-
rer, en la ventana de mtodos, como mtodo maestro.
Adems, con los ficheros de datos se guardan dos copias del mtodo utili-
zado para analizar una muestra: los mtodos individuales de ficheros de
datos ACQ.M y DA.M ACQ.M son el mtodo de adquisicin, DA.M es el mt-
2 Mtodos
odo de anlisis de datos. DA.M es el mtodo que se carga con los ficheros de
datos si est seleccionada la casilla de verificacin Load DA method from data
file en la ficha Signal Options del cuadro de dilogo Preferences. Los cambios
de este mtodo (por ejemplo, eventos de integraciones programados) son
especficos del fichero de datos asociado y no se propagan al mtodo de
secuencias ni al mtodo maestro.
La tabla de navegacin proporciona una posibilidad de actualizacin para
mtodos individuales y mtodos de secuencia a su secuencia o mtodo maes-
tro correspondiente haciendo clic en el botn derecho del ratn en el elemento
de lnea del mtodo. Al ejecutar la Update Master Method o la Update Sequence
Method, se copian los parmetros del anlisis de datos del mtodo seleccio-
nado al mtodo maestro o de secuencia correspondiente. La actualizacin
automtica se reflejar en el historial del mtodo objetivo.
Mtodo actual
Cuando se vuelve a llamar a un mtodo almacenado en el disco, se convierte
en el mtodo actual. Siempre hay un mtodo actual en la memoria. Cuando se
inicia ChemStation por primera vez, el mtodo por defecto proporcionado por
Agilent Technologies siempre se carga como parte del proceso de arranque.
Por ejemplo, podra ser uno de los siguientes:
DEF_LC.M para un instrumento LC
DEF_GC.M para un instrumento GC
DEF_CE.M para un instrumento CE
Se coloca en la memoria una copia del mtodo por defecto que se convierte en
el mtodo actual. En cualquier momento se puede cargar un mtodo diferente
que se convierte en el mtodo actual.
Tabla 5 Disponibilidad de la funcin Update .... Method en la tabla de navegacin
Mtodo cargado Opcin de actualizacin disponible
Mtodo de anlisis de datos individual (DA.M) Update Master Method
Update Sequence Method
Mtodo de secuencia Update Master Method
Mtodo maestro ---
Mtodos 2
Creacin de mtodos
Creacin de mtodos
Crear un mtodo nuevo siempre significa modificar el mtodo actual y guardar
las modificaciones con un nombre nuevo. Tenga en cuenta que cuando se
modifica el mtodo actual, la versin del disco permanece sin cambios hasta
que estos se guardan.
Hay varias maneras de crear un mtodo. Se puede crear un mtodo para reali-
zar una o todas las partes de un anlisis. Por ejemplo, puede crear un mtodo
para realizar slo la adquisicin de datos. Cuando est listo para analizar los
datos y generar un informe de bsqueda de libreras, puede modificar el mt-
odo de ejecucin de estas tareas de proceso de datos.
NOTA
Cuando cargue un mtodo para analizar una muestra, utilice siempre un mtodo maestro
de un nodo de mtodos de ChemStation Explorer. Evite utilizar mtodos de secuencias (de
un contenedor de datos de secuencias) o mtodos individuales asociados a ficheros de
datos (ACQ.M o DA.M).
NOTA
No elimine el mtodo predeterminado (DEF_LC.M, DEF_CE.M o DEF_GC.M). Estos ficheros
de mtodos se utilizan como plantillas para crear nuevos mtodos.
2 Mtodos
Edicin de mtodos
Edicin de mtodos
Para editar un mtodo se puede usar la opcin Editar el mtodo entero del
men Mtodo. Se le guiar por todos los cuadros de dilogo del mtodo y, al
final, podr guardarlo. Este proceso se muestra a continuacin:
Figura 2 Edicin de mtodo
Partes editables del mtodo
Cada mtodo est compuesto por cuatro componentes que se pueden editar
por separado.
Algunos de los siguientes apartados hacen referencia a cuadros de dilogo y
otros son descripciones generales.
La Informacin del mtodo contiene:
Metudu en diacu
Cargar uetudu
Fditar uetudu
uardar uetudu [cuuu]
uardar cun nuuhre nuevu
Se crea un uetudu nuevu
en el diacu
Selecciune "Fditar el uetudu enteru" en el uenu Metudu
Fl uetudu ae carga en ueuuria y ae cunvierte en el uetudu actual
Suhreacrihe el uetudu actual
uardar cun nuuhre nuevu
Mtodos 2
Edicin de mtodos
un texto que describe el mtodo.
Instrument Control depende de la configuracin y puede contener, por
ejemplo:
parmetros del horno,
parmetros del inyector, y
parmetros del detector.
El Anlisis de datos contiene:
detalles de las seales,
parmetros de integracin,
parmetros de cuantificacin,
parmetros de calibracin,
parmetros de configuracin de campos personalizados y
parmetros de informes.
La Lista de control del anlisis contiene:
las partes del mtodo que se ejecutarn.
NOTA
Recuerde que los mtodos se pueden guardar en tres ubicaciones de ChemStation.
Asegrese de que est editando el mtodo correcto.
2 Mtodos
Estructura de los directorios de mtodos
Estructura de los directorios de mtodos
Un mtodo est compuesto por un grupo de ficheros almacenados en el direc-
torio de mtodos.
El subdirectorio de mtodos contiene todos aquellos que tienen una extensin
.M. Se pueden aadir subdirectorios de mtodos adicionales con la configura-
cin de preferencias.
Los ficheros de mtodo con la extensin .MTH contienen conjuntos de parm-
etros y tienen el formato UNICODE. El fichero INFO.MTH contiene los parm-
etros de control de mtodos.
Los ficheros de mtodos que contienen parmetros del instrumento tienen el
nombre del mdulo analtico correspondiente. Por ejemplo:
Tabla 6 Ejemplos de ficheros de mtodos
HPCE1.MTH Contiene el mtodo de adquisicin para electroforesis capilar.
ADC1.MTH Contiene el mtodo de adquisicin de Agilent 35900. Si se
configuran dos instrumentos idnticos, los ficheros de mtodo
se denominan ADC1.MTH, ADC2.MTH.
DAMETHOD.REG Para evaluacin de datos.
LALS1.REG Contiene los parmetros para el inyector automtico Agilent
Serie 1100/1200 cuando se configura un sistema LC modular
clsico. Los ficheros de mtodo de los dems mdulos
Agilent Serie 1100/1200 siguen la misma convencin Lxxx1.reg
donde xxx es el acrnimo del mdulo.
AgilentSamplerDriver
1.RapidControl.xxx.x
ml
Contiene los parmetros para el inyector automtico Agilent
Serie 1100/1200 cuando se configura un sistema LC modular.
Existen varios ficheros .xml para las distintas partes de los
parmetros (indicadas por "xxxpart" en el nombre de fichero).
Hay ficheros .xml similares para los otros mdulos.
Mtodos 2
Qu sucede cuando se ejecuta un mtodo?
El cuadro de dilogo Lista de control del anlisis especifica las partes del mt-
odo que se van a ejecutar al iniciar un anlisis.
En Lista de control del anlisis hay ocho partes:
macro o comando de ejecucin previa,
adquisicin de datos,
anlisis de datos estndar,
mtodo de anlisis para una segunda seal (slo GC),
anlisis de datos personalizado,
guardar los datos GLP,
macro o comando post-anlisis, y
guardar una copia del mtodo con los datos (RUN.M).
Cuando se realiza un anlisis, se ejecutan las partes del mtodo especificadas
en el cuadro de dilogo Lista de control del anlisis.
Operacin del mtodo
La figura muestra una visin general del estado de ChemStation durante la
operacin del mtodo, donde se han seleccionado todas las partes de la Lista
de control del anlisis.
NOTA
Tenga en cuenta que en el caso del modo "Desactivar creacin de carpeta nica" no se
generan ACQ.M y DA.M. Para obtener ms informacin, consulte Preferencias: ficha
Secuencia en la pgina 175.
2 Mtodos
Figura 3 Operacin del mtodo
Macro o comando de ejecucin previa(Lista de control del anlisis)
Si se especifica una macro o un comando de ejecucin previa, se ejecuta antes
de iniciar el anlisis. Este componente se utiliza normalmente para personali-
zar el sistema con otros paquetes de software.
Adquisicin de datos(Lista de control del anlisis)
Todos los parmetros se configuran con las condiciones iniciales estableci-
das en el mtodo actual.
Si est especificado, se ejecuta el programa de inyeccin y se realiza la
inyeccin desde el vial actualmente definido.
La pantalla muestra el progreso del anlisis, incluyendo informacin cro-
matogrfica o electroferogrfica, y datos espectrales, si los hubiera.
Los datos se adquieren y se guardan en un fichero de datos.
Fatadu de CheuStatiun
Macru uateriur al analiaia
Fvaluaciun de datua
lnyecciun y funciunauientu del inatruuentu
Macru revia al analiaia
Freviu al analiaia
lnyecciun
Metudu de analiaia iniciadu en el uenu de CheuStatiun
N
i
v
e
l
e
a

d
e

e
a
t
a
d
u
0atua riuariua
ficheru cerradu
uardar 8uN.M (uciunal}
uardar AC0.M (ur defectu} (ur defectu}
uardar 0A.M
1ieuu
Mtodos 2
Cuando se termina la adquisicin de datos, se guarda como ACQ.M una
copia del mtodo ejecutado para el fichero de datos de forma predetermi-
nada.
Anlisis de datos(Lista de control del anlisis)
Cuando se alcanza el momento de parar, el anlisis termina y todos los datos
primarios se guardan en el disco duro del ordenador. El componente de anlis-
is de datos del software comienza cuando se han guardado todos los datos pri-
marios.
Integracin
Los objetos del cromatograma o electroferograma de la seal se integran
segn se indica en el cuadro de dilogo Eventos de integracin.
Se determinan el inicio y el mximo del pico, el tiempo de retencin o
migracin y el final del pico.
Se definen lneas base debajo de cada pico para determinar la altura y el
rea final del pico.
Los resultados de integracin se incluyen en la lista Resultados de integra-
cin.
Identificacin y cuantificacin de los picos
Utilizando los tiempos de retencin o migracin y los cualificadores opcio-
nales de picos, el software identifica los picos mediante referencias cruza-
das con compuestos conocidos, definidos en la tabla de calibracin.
Mediante la altura o el rea de los picos, el software calcula la cantidad de
cada componente detectado usando los parmetros de calibracin especifi-
cados en la tabla de calibracin.
Bsqueda de libreras espectrales (ChemStations slo para sistemas LC
3D, CE, CE/MS y LC/MS)
Para todos los picos que tengan un espectro UV visible, se puede realizar una
bsqueda automatizada de una librera espectral predefinida para identificar
los componentes de la muestra en funcin del espectro UV visible. Para obte-
ner ms detalles, consulte Familiarizacin con el mdulo espectral.
2 Mtodos
Comprobacin de la pureza del pico (ChemStations slo para sistemas LC
3D, CE, CE/MS y LC/MS)
Para un pico con espectro UV visible, se puede calcular el factor de pureza de
dicho pico y guardarlo en un registro. La pureza del pico se puede determinar
automticamente al final de cada anlisis como parte del mtodo, si la casilla
Control de pureza est seleccionada cuando se especifica una bsqueda de
libreras automatizada o al seleccionar un estilo de informe. Para obtener ms
detalles, consulte Familiarizacin con el mdulo espectral.
Imprimir informe
Se genera un informe con la identidad y cantidad de los componentes detecta-
dos en el anlisis.
Anlisis personalizado de datos(Lista de control del anlisis)
Le permiten ejecutar sus propias macros para evaluar los datos analticos.
Salvar datos GLP(Lista de control del anlisis)
Guarda el registro binario GLPSave.Reg junto con el mtodo de anlisis de
datos en el subdirectorio por defecto de los ficheros de datos. Esta caracters-
tica est diseada para ayudar a comprobar la originalidad de los datos y la
calidad de los anlisis individuales.
El fichero binario GLPSave.Reg es un fichero de registro no editable y prote-
gido que contiene la siguiente informacin:
puntos de referencia de instrumentos clave (se puede revisar grficamen-
te),
seales cromatogrficas o electroferogrficas,
resultados de integracin
resultados de cuantificacin,
mtodo de anlisis de datos, y
libro de registro.
Mtodos 2
Estos datos se guardan slo si la funcin Save GLP Data est activada; para
activarla, seleccione la casilla de verificacin en Lista de control del anlisis.
Los datos GLP se pueden revisar, pero no editar, en el men Anlisis de datos
de ChemStation.
Macro o comando post-anlisis(Lista de control del anlisis)
Si se especifica un comando o macro post-anlisis, se ejecuta despus de la
evaluacin de los datos, por ejemplo, al copiar los datos a un disco para una
copia de seguridad.
Guardar una copia del mtodo con los datos(Lista de control del
anlisis)
Se realiza despus de la adquisicin de los datos y slo si la opcin Adquisi-
cin de datos est seleccionada en Lista de control del anlisis. Copia el mt-
odo actual al directorio de datos, denominado RUN.M
Guardar una copia del mtodo como DA.M con los datos
(ChemStation por defecto)
Segn los elementos marcados en la Run Time Checklist, se guarda como DA.M
una copia del mtodo actual ejecutado junto con el fichero de datos. Esto se
realiza con el anlisis del ltimo elemento marcado en la Run Time Checklist,
normalmente despus del Standard Data Analysis.
2 Mtodos
Resumen de la operacin del mtodo
La siguiente lista muestra el flujo del funcionamiento del mtodo cuando se
seleccionan todas las partes en Lista de control del anlisis.
1 Macro del comando previo del anlisis
Realiza una tarea antes de comenzar el anlisis.
Se lleva a cabo el programa del inyector.
Inyecta la muestra.
Se adquieren los datos primarios.
Se guardan los datos.
3 Se guarda una copia del mtodo con los datos (RUN.M) - opcional por la
4 Se guarda una copia del mtodo con los datos (ACQ.M) - ChemStation por
defecto
5 Anlisis de datos (Proceso de datos)
Se carga el fichero de datos.
Se integra el fichero de datos.
Se identifica y cuantifica el pico.
Se busca en la librera espectral, si estuviera disponible.
Se comprueba la pureza del pico, si estuviera disponible.
Se imprime el informe.
6 Anlisis personalizado de datos
Se ejecutan las macros.
7 Salvar datos GLP
Se guarda el registro binario GLPSave.Reg
8 Macro post-anlisis
Realiza una tarea despus de terminar el anlisis, por ejemplo, genera un
informe personalizado.
Mtodos 2
9 Se guarda una copia del mtodo con los datos (DA.M) - ChemStation por
defecto
2 Mtodos
63
3
Adquisicin de datos
Definicin de la adquisicin de datos 64
Ficheros de datos 65
Monitores en lnea 67
Monitor de seales en lnea 67
Monitor de espectros en lnea 67
Libro de registro 68
Informacin del estado 69
Estado de ChemStation 69
Barra de estado 69
Diagrama del sistema 70
En este captulo se describen los conceptos de adquisicin de datos, ficheros
de datos y libro de registro, entre otros.
Definicin de la adquisicin de datos
Definicin de la adquisicin de datos
Durante la adquisicin de datos, todas las seales adquiridas por el instru-
mento se convierten de seales analgicas a seales digitales en el detector. La
seal digital se transmite a ChemStation electrnicamente y se guarda en el
fichero de datos de la seal.
Los ficheros de datos disponibles (*.d) se pueden ver en ChemStation Explo-
rer. Para que la navegacin sea rpida y sencilla, puede aadir ubicaciones
adicionales para ficheros de datos al rbol de seleccin de ChemStation Explo-
rer utilizando la ficha Rutas del cuadro de dilogo Preferencias.
Ficheros de datos
Ficheros de datos
Un fichero de datos comprende un grupo de ficheros guardados por defecto en
el directorio DATA como un subdirectorio, con un nombre de fichero de datos
y una extensin .D. Se puede definir manualmente un nombre de fichero de
datos utilizando 40 caracteres incluida la extensin. Cada fichero del directo-
rio sigue una convencin de nombres. Se pueden aadir directorios de datos
adicionales con las opciones de Preferencias.
Tabla 7 Ficheros de datos
Nombre Description
*.CH Ficheros de datos de seales cromatogrficas o electroferogrficas. Un
nombre de fichero est compuesto por el tipo de mdulo o detector, el
nmero de mdulo y la identificacin de la seal o del canal. Por ejemplo,
ADC1A.CH, donde ADC es el tipo de mdulo, 1 es el nmero de mdulo, A es
el identificador de la seal y .CH es la extensin cromatogrfica.
*.UV Ficheros de datos espectrales UV. El nombre del fichero est compuesto por
el tipo de detector y el nmero de dispositivo (slo con detectores de
diodo-array y de fluorescencia).
REPORT.TXT,
REPORT.PDF
Ficheros de datos de informes para los ficheros de datos de seal
equivalentes.
SAMPLE.MAC Macro de informacin de muestra.
SAMPLE.MAC.BAC Copia de seguridad de la macro de informacin de muestra original. Este
fichero se crea cuando se actualizan los parmetros de muestra originales
(como multiplicadores) durante el reprocesamiento.
RUN.LOG Entradas del libro de registro generadas durante un anlisis. El libro de
registro guarda un registro de los anlisis. Todos los mensajes de error y los
cambios de estado importantes de ChemStation se introducen en el libro de
registro.
LCDIAG.REG Slo para LC. Contiene las curvas de los instrumentos (gradientes,
temperatura, presin, etc.), el volumen de la inyeccin y la descripcin de los
solventes.
ACQRES.REG Contiene informacin sobre las columnas. Para GC, tambin contiene el
volumen de la inyeccin.
Ficheros de datos
El mtodo se puede guardar con los ficheros de resultados (run.m). En estos
casos, el directorio del mtodo se guarda como un subdirectorio del directorio
de ficheros de datos, mediante la opcin Guardar mtodo con datos de Lista
de control del anlisis.
Para los datos adquiridos con ChemStation B.02.01 y posteriores, cada car-
peta de datos (*.D) contiene las dos carpetas de mtodos siguientes
mtodo de adquisicin (ACQ.M) para cada fichero de datos individual
mtodo de anlisis de datos (DA.M) para cada fichero de datos individual
El mtodo de adquisicin individual ACQ.M est destinado a preservar los
parmetros de adquisicin, por lo que se recomienda no cambiar este mtodo
durante las tareas posteriores de revisin de datos. DA.M es el mtodo de
anlisis de datos individual para el fichero de datos especfico. Por ejemplo, en
el caso de las actualizaciones de las tablas de calibracin, los mtodos DA.M
difieren en cada ejecucin. Con ChemStation B.03.01 o una versin posterior,
este comportamiento puede desactivarse mediante la deshabilitacin de la
opcin Creacin de carpeta nica.
GLPSAVE.REG Parte del fichero de datos cuando se especifica Save GLP Data.
M_INTEV.REG Contiene eventos de integracin manuales.
Tabla 7 Ficheros de datos
Nombre Description
Monitores en lnea
Monitores en lnea
Existen dos tipos de monitores en lnea: el monitor de seales en lnea y el
monitor de espectros en lnea.
Monitor de seales en lnea
El monitor de seales en lnea permite monitorizar varias seales y, si el ins-
trumento asociado lo permite, los grficos del rendimiento del instrumento en
la misma ventana. Puede seleccionar las seales que desea ver y ajustar el
tiempo y el eje de absorbancia. Para los detectores que dispongan de esta fun-
cin, hay un botn de balance.
Para mostrar la respuesta absoluta de la seal en la lnea de mensaje, mueva el
cursor en forma de cruz de la pantalla.
Monitor de espectros en lnea
El monitor de espectros en lnea slo est disponible para las ChemStations
que admiten la evaluacin de espectros. Muestra la absorbancia como una fun-
cin de la longitud de onda. Puede ajustar el rango de las longitudes de onda
mostradas y la escala de absorbancia.
Libro de registro
Libro de registro
El libro de registro muestra los mensajes que genera el sistema analtico. Estos
mensajes pueden ser de error, del sistema o de eventos de un mdulo. El libro
de registro registra estos eventos aunque no se hayan mostrado. Para obtener
ms informacin acerca de un evento del libro de registro, haga doble clic en la
lnea correspondiente para mostrar un texto de ayuda descriptivo.
Informacin del estado
Estado de ChemStation
La ventana ChemStation Status muestra un resumen del estado del software
ChemStation.
Cuando se ejecuta un solo anlisis:
la primera lnea de la ventana ChemStation Status muestra el anlisis en
curso,
la segunda lnea de la ventana muestra el estado del mtodo actual, y
la tercera lnea muestra el nombre del fichero de datos primarios adems
del tiempo de anlisis en minutos (para los instrumentos GC, tambin se
muestran los ficheros de los inyectores delantero y posterior).
La ventana Instrument Status ofrece informacin sobre el estado de los mdu-
los instrumentales y detectores. Muestra el estado de cada componente y las
condiciones actuales cuando corresponda, por ejemplo, presin, gradiente y
flujo.
Barra de estado
La ventana Mtodo y Control de anlisis de la interfase grfica del usuario del
sistema ChemStation est compuesta por barras de herramientas y barras de
estado. La barra de estado contiene un campo de estado del sistema e informa-
cin sobre el mtodo y la secuencia actualmente cargados. Si se modificaron
despus de cargarlos, aparecen marcados con una rueda dentada amarilla.
Para el mdulo Agilent Serie 1100/1200 para LC, el smbolo EMF amarillo
recuerda al usuario que se han excedido los lmites de utilizacin establecidos
para consumibles (por ejemplo, la lmpara).
Diagrama del sistema
Si los instrumentos analticos configurados lo admiten (por ejemplo, los md-
ulos Agilent Serie 1100/1200 para LC o el GC Agilent Serie 6890), puede mos-
trar un diagrama grfico del sistema ChemStation que le permite comprobar
rpidamente el estado del sistema de un vistazo. Seleccione Diagrama del sis-
tema en el men Ver de la ventana Mtodo y Control de anlisis para activar el
diagrama. Se trata de una representacin grfica del sistema ChemStation
donde cada componente est representado por un icono. Se muestra el estado
actual utilizando el cdigo de color descrito a continuacin.
Adems, puede mostrar la lista de los valores de los parmetros. Adems de la
presentacin del estado, el diagrama permite tener acceso rpido a los cua-
dros de dilogo para configurar los parmetros de cada componente del sis-
tema.
Consulte la parte relativa a instrumentos del sistema de ayuda en lnea para
obtener ms informacin acerca del diagrama del sistema.
Tabla 8 Cdigo de color del diagrama del sistema
Color Status
gris inactivo o desactivado
amarillo no preparado
verde listo
azul en ejecucin
rojo error
71
4
Integracin
Definicin de la integracin 73
Funcin de la integracin 74
Algoritmos de integracin de ChemStation 75
Capacidades del integrador 75
Introduccin 77
Definicin de la lnea base inicial 78
Seguimiento de la lnea base 78
Identificacin de los puntos cardinales de un pico 80
Puntos cardinales 82
Pico de disolvente 82
Hombro (frontal, trasero) 83
Pendiente 83
Principio de funcionamiento 84
Reconocimiento de picos 85
Anchura de pico 85
Filtros de reconocimiento de picos 86
Agrupamiento 88
El algoritmo de reconocimiento de picos 89
Clculos no gaussianos 92
Construccin de la lnea base por defecto 95
Inicio de la lnea base 96
Marcas de sealizacin 96
Final de la lnea base 96
Penetracin de la lnea base 97
4 Integracin
Relacin pico/valle 98
Divisin tangencial 100
Picos no asignados 105
Cdigos de separacin de picos 106
Medida del rea de pico 108
Determinacin del rea 108
Unidades y factores de conversin 110
Eventos de integracin 111
Eventos iniciales 111
Eventos programados 115
Integracin automtica 115
Integracin manual 117
En este captulo se describen los conceptos de integracin de los algoritmos de
integracin de ChemStation. Describe el algoritmo de integracin, la integra-
cin y la integracin manual.
Integracin 4
Definicin de la integracin
Definicin de la integracin
La integracin busca los picos en una seal y calcula su tamao.
La integracin es un paso necesario para:
cuantificacin,
clculo de la pureza del pico (ChemStations slo para sistemas LC 3D, CE,
CE/MS y LC/MS), y
bsqueda de libreras espectrales (ChemStations slo para sistemas LC 3D,
CE, CE/MS y LC/MS).
4 Integracin
Funcin de la integracin
Funcin de la integracin
Cuando se integra una seal, el software:
identifica un momento de inicio y final para cada pico y marca estos puntos
con marcas de sealizacin verticales,
encuentra el mximo de cada pico, es decir, el tiempo de retencin o migra-
cin,
construye una lnea base, y
calcula el rea, la altura y la anchura de cada pico.
Este proceso se controla por medio de parmetros denominados eventos de
integracin.
Integracin 4
Algoritmos de integracin de ChemStation
El algoritmo de integracin de ChemStation es la segunda revisin de una
nueva generacin que pretende mejorar la resistencia, fiabilidad y facilidad de
uso.
Capacidades del integrador
Los algoritmos del integrador incluyen las siguientes capacidades clave:
posibilidad de integracin automtica para configurar los parmetros ini-
ciales del integrador,
la capacidad de definir tablas individuales de eventos de integracin para
cada seal cromatogrfica o electroferogrfica si se usan varias seales o
ms de un detector,
definicin interactiva de eventos de integracin que permite a los usuarios
seleccionar grficamente los tiempos de los eventos,
integracin grfica manual o elstica de cromatogramas o electroferogra-
mas que requieren la interpretacin humana (estos eventos tambin se pue-
den registrar en el mtodo y usarse como parte de la operacin
automatizada),
presentacin e impresin de los resultados de integracin,
capacidad de integracin de al menos 1000 puntos por cromatograma o
electroferograma,
definiciones de parmetros del integrador para fijar o modificar los valores
bsicos de rechazo por rea, rechazo por altura, anchura de pico y sensibili-
dad de pendiente,
parmetros de control de lnea base, como forzar lnea base, mantener lnea
base, lnea base en todos los valles, lnea base en el siguiente valle, ajustar
lnea base hacia atrs, desde el final al pico actual,
control de suma del rea,
reconocimiento de picos negativos,
4 Integracin
procesamiento de divisin tangencial, incluidos comandos de definicin de
picos de disolvente, y
capacidad de definicin de tablas de eventos individuales para clculos de
divisin tangencial frontal/de cola para toda la seal cromatogrfica o elec-
troferogrfica,
parmetros de correccin de la lnea base (independientes de la seal),
comandos de control del integrador que definen los rangos de tiempos de
retencin o migracin para la operacin de integracin,
la asignacin de hombros de pico mediante el uso de la segunda derivada o
clculo del grado de curvatura,
muestreo mejorado de puntos de datos no equidistantes para un mejor
comportamiento con ficheros de datos LC-DAD reconstruidos a partir de
espectros DAD.
Integracin 4
Introduccin
Introduccin
Para integrar un cromatograma o electroferograma, el integrador:
1 define la lnea base inicial,
2 realiza un seguimiento de la lnea base y la actualiza continuamente,
3 identifica el momento de inicio de un pico y seala ese punto con una
marca vertical,
4 localiza el punto mximo de cada pico e imprime el tiempo de retencin o
migracin correspondiente,
5 identifica el momento de finalizacin del pico y seala ese punto con una
marca vertical,
6 construye una lnea base, y
7 calcula el rea, la altura y la anchura de pico correspondientes a cada pico.
Este proceso se controla por medio de eventos de integracin. Los eventos
ms importantes son sensibilidad de pendiente inicial, anchura de pico,
rechazo por rea y rechazo por altura. El software permite al usuario fijar
los valores iniciales de stos y otros eventos. Los valores iniciales tienen vigen-
cia al comienzo del cromatograma. De forma adicional, la funcin de integra-
cin automtica proporciona un conjunto de eventos iniciales que el usuario
puede optimizar posteriormente.
En la mayora de los casos, los eventos iniciales darn buenos resultados de
integracin en todo el cromatograma, si bien habr ocasiones en las que el
usuario prefiera tener un mayor control sobre el progreso de la integracin.
El software permite controlar el modo en que se lleva a cabo una integracin
mediante la programacin de nuevos eventos de integracin en determinados
momentos del cromatograma.
Para obtener ms informacin, consulte Eventos iniciales en la pgina 111.
4 Integracin
Introduccin
Definicin de la lnea base inicial
Puesto que las condiciones de la lnea base pueden variar en funcin de la
aplicacin y el detector, el integrador utiliza parmetros obtenidos de ficheros
tanto de mtodo como de datos para optimizar la lnea base.
Para poder integrar los picos, el integrador debe establecer antes un punto de
lnea base. Al comienzo del anlisis, el integrador establece un nivel de lnea
base inicial tomando el primer punto de datos como punto de lnea base provi-
sional. A continuacin trata de redefinir ese punto de lnea base inicial utili-
zando el promedio de la seal de entrada. Si no obtiene un punto de lnea base
inicial redefinido, mantiene el primer punto de datos como posible punto de
lnea base inicial.
Seguimiento de la lnea base
El integrador muestrea los datos digitales a una velocidad determinada por la
anchura de pico inicial o por la anchura de pico calculada a medida que pro-
gresa el anlisis. Considera cada uno de los puntos de datos como posible
punto de lnea base.
El integrador determina una zona de lnea base a partir de la pendiente de la
lnea base, utilizando un algoritmo de seguimiento de la lnea base en el que la
pendiente viene dada por la primera derivada y la curvatura por la segunda
derivada. La zona de lnea base se puede visualizar como un cono con la punta
situada en el punto de datos actual. Los niveles superior e inferior de acepta-
cin del cono se determinan como sigue:
+ pendiente ascendente + curvatura + desviacin de la lnea base debe dar
un resultado inferior al nivel umbral,
- pendiente ascendente - curvatura + desviacin de la lnea base debe dar un
resultado ms positivo (o menos negativo) que el nivel umbral.
A medida que se van aceptando nuevos puntos de datos, el cono se desplaza
hacia adelante hasta que dejen de cumplirse las condiciones.
Para ser aceptado como punto de lnea base, un punto de datos debe cumplir
las condiciones siguientes:
debe encontrarse dentro de la zona definida como de lnea base,
Integracin 4
Introduccin
la curvatura de la lnea base en el punto de datos (determinada por los fil-
tros basados en derivadas) debe estar por debajo de un valor crtico deter-
minado por el valor actual del parmetro de sensibilidad de la pendiente.
El punto de lnea base inicial establecido al comienzo del anlisis se restablece
as de forma continua, a una velocidad determinada por la anchura de pico,
como el promedio mvil de los puntos de datos que se encuentran dentro de la
zona de lnea base durante un perodo de tiempo determinado por la anchura
de pico. El integrador realiza un seguimiento continuo de la lnea base y la res-
tablece peridicamente para compensar la deriva hasta que detecta la pen-
diente ascendente de un pico.
Asignacin de la lnea base
El integrador asigna durante el anlisis la lnea base cromatogrfica o electro-
ferogrfica con una frecuencia determinada por el valor de anchura de pico.
Cuando ha muestreado un nmero determinado de puntos de datos, resta-
blece la lnea base desde el punto de lnea base inicial al punto de lnea base
actual. El integrador reanuda entonces el seguimiento de la lnea base en el
siguiente conjunto de puntos de datos para restablecer nuevamente la lnea
base. El proceso contina hasta que el integrador identifica el inicio de un
pico.
Figura 4 Lnea base
Al comienzo del anlisis, el valor del parmetro de lnea base se utiliza como
lnea base inicial. Si no hay un valor fijado, se utiliza el primer punto de datos.
El punto de lnea base se restablece entonces peridicamente de acuerdo con
la siguiente frmula:
hura de iniciu
untu actual
21
21
21
21
reatahleciuientu de la l|nea haae
Anchura de icu eaerada
Funtu de datua
4 Integracin
Introduccin
Se suman las reas durante un tiempo T (anchura de pico esperada). Ese
tiempo no puede ser inferior a un punto de datos. El proceso contina mien-
tras exista una condicin de lnea base. Se adquieren asimismo medidas de
pendiente y curvatura. Si tanto la pendiente como la curvatura son inferiores
al umbral, se combinan entre s dos sumas de reas y se comparan con la lnea
base previa. Si el nuevo valor es inferior a la lnea base previa, pasa a reempla-
zar inmediatamente al valor antiguo. Si es superior al valor previo, se graba
como nuevo valor provisional de la lnea base y se confirmar si un valor ms
cumple los criterios de planaridad de la pendiente y la curvatura. Esta ltima
limitacin no tiene efecto cuando se permiten picos negativos. Durante la fase
de lnea base, es preciso realizar asimismo comprobaciones para examinar
disolventes con rpida elevacin de la seal; la elevacin puede ser demasiado
rpida para permitir la deteccin de una pendiente ascendente (para cuando
se confirma la pendiente ascendente, el criterio de disolvente puede no ser ya
vlido). En el momento inicial, el primer punto de datos constituye la lnea
base. Ese valor se reemplaza por el promedio calculado sobre 2T si la seal
est en base. La lnea base se restablece entonces a cada intervalo T (consulte
Figura 4 en la pgina 79).
Identificacin de los puntos cardinales de un pico
El integrador determina que puede estar comenzando a producirse un pico
cuando los posibles puntos de lnea base se encuentran fuera de la zona de ln-
ea base y la curvatura de la lnea base excede un cierto valor determinado por
el parmetro de sensibilidad de la pendiente del integrador. Si esta condicin
contina, el integrador reconoce estar en la pendiente ascendiente de un pico
y ste se procesa.
Inicio
1 Pendiente y curvatura dentro del lmite: prosigue el seguimiento de la lnea
base.
2 Pendiente y curvatura por encima del lmite: posibilidad de un pico.
3 La pendiente permanece por encima del lmite: se reconoce un pico, se
define el punto cardinal correspondiente.
4 La curvatura se hace negativa: punto de inflexin frontal.
Integracin 4
Introduccin
Mximo
1 La pendiente pasa por cero y se hace negativa: mximo del pico, se define el
punto cardinal correspondiente.
2 La curvatura se hace positiva: punto de inflexin trasero.
Final
1 Pendiente y curvatura dentro del lmite: se aproxima el final del pico.
2 La pendiente y la curvatura se mantienen dentro del lmite: final del pico,
se define el punto cardinal correspondiente.
3 El integrador vuelve al modo de seguimiento de la lnea base.
4 Integracin
Definicin de trminos
Puntos cardinales
Figura 5 Puntos cardinales
Los puntos cardinales son los puntos elegidos por el integrador para definir y
cuantificar un pico. Se designan como puntos cardinales y se graban los pun-
tos de lnea base, puntos de valle, mximos de pico y puntos de inflexin. A
cada punto cardinal le corresponde una coordenada horizontal de tiempo
transcurrido y una coordenada vertical de altura desde la lnea base, adems
de otros parmetros tales como tipo de pico, cdigos de separacin, valores de
inicio/final de picos potenciales y las correspondientes lecturas de altura,
rea y pendiente que el integrador utiliza para calcular las reas de pico.
Pico de disolvente
El pico de disolvente, generalmente un pico de gran tamao sin relevancia
analtica, no suele integrarse. No obstante, cuando hay pequeos picos de inte-
rs analtico con elucin cercana al pico de disolvente, por ejemplo en la cola
del mismo, es posible establecer condiciones de integracin especiales para
calcular sus reas corregidas teniendo en cuenta la contribucin de la cola del
pico de disolvente.
uaxiuu del icu
untu de inflexiun untu de inflexiun
untu de l|nea haae
untu de l|nea haae
cuurdenada hurizuntal
de tieuu tranacurridu
cuurdenada vertical de altura
Integracin 4
Hombro (frontal, trasero)
Se producen hombros cuando dos picos eluyen tan cerca el uno del otro que
no llega a haber un valle entre ellos que permita resolverlos. Los hombros pue-
den aparecer en el avance del pico (hombro frontal) o en el rastro del mismo
(hombro trasero). Cuando se detectan hombros, stos pueden integrarse bien
mediante divisin tangencial o mediante lneas de cada verticales.
Pendiente
La pendiente de un pico, que denota el cambio de concentracin del compo-
nente en funcin del tiempo, se utiliza para determinar el inicio, el mximo y
el final del pico.
4 Integracin
Principio de funcionamiento
Principio de funcionamiento
Figura 6 Diagrama de flujo del integrador
rugrauadaa
Farauetrua
icua en tahla de icua
lnicializaciun
Seguiuientu de la l|nea haae
0etecciun del gruu
Fvaluaciun del gruu
ciuientu de la l|nea haae
Seguiuientu y reatahle
Farauetrua inicialea
lniciu del gruu de icua
lin del gruu de icua
0etecciun
akiuuera\xd5
Calcular eatad|aticaa
de icu
ldentificaciun de laa
cuurdenadaa de icu
Aluacenauientu de
0etecciun de la
l|nea haae
Cunatrucciun de
l|neaa haae
0efiniciun de la
l|nea haae inicial
Integracin 4
Reconocimiento de picos
El integrador utiliza varias herramientas para reconocer y caracterizar un
pico:
anchura de pico,
filtros de reconocimiento de picos,
agrupamiento,
algoritmo de reconocimiento de picos,
algoritmo de determinacin del mximo de pico, y
clculos de efectos no gaussianos (por ejemplo colas, picos solapados).
Anchura de pico
Durante la integracin, se calcula la anchura de pico a partir del rea y la
altura del pico:
Anchura = rea/Altura
o, si los puntos de inflexin estn disponibles, a partir de la anchura entre los
puntos de inflexin.
Figura 7 Clculo de la anchura de pico
t1 t2 t3 t1
a1 a2 a3 a1
hr
hf
h
8a la
4 Integracin
En el clculo de la anchura de pico de la figura, el rea total A es la suma de
las reas a1, a2, a3 y a4. Fs es la pendiente frontal en el punto de inflexin, Rs
es la pendiente trasera en el punto de inflexin. En caso de no localizarse
alguno de los puntos de inflexin, la anchura de pico se define como sigue:
Anchura = rea ajustada/Altura ajustada
El parmetro de anchura de pico controla la capacidad del integrador para
distinguir los picos del ruido de la lnea base. Para obtener buenos resultados,
la anchura de pico debe ser cercana a la anchura de los picos cromatogrficos
o electroferogrficos reales.
Hay tres modos de cambiar la anchura de pico:
antes del anlisis, el usuario puede especificar la anchura de pico inicial,
durante el anlisis, el integrador actualiza automticamente la anchura de
pico como corresponda para que coincida con los filtros de reconocimiento
de picos,
durante el anlisis, el usuario puede restablecer o modificar la anchura de
pico utilizando un evento programado en el tiempo.
Para obtener informacin acerca de las definiciones de anchura de pico utili-
zadas en los clculos de idoneidad del sistema, consulte la seccin Anchura
de pico en la pgina 85.
Filtros de reconocimiento de picos
El integrador cuenta con tres filtros de reconocimiento de picos que puede uti-
lizar para reconocer picos mediante la deteccin de cambios en los valores de
pendiente y curvatura dentro de un conjunto de puntos de datos contiguos.
Los filtros contienen la primera derivada (para medir la pendiente) y la
segunda derivada (para medir la curvatura) de los puntos de datos examina-
dos por el integrador. Los filtros de reconocimiento son los siguientes:
Filtro 1 Pendiente (curvatura) de dos (tres) puntos de datos contiguos
Filtro 2 Pendiente de cuatro puntos de datos contiguos y curvatura de tres puntos de
datos no contiguos
Filtro 3 Pendiente de ocho puntos de datos contiguos y curvatura de tres puntos de
datos no contiguos
Integracin 4
El filtro que se utiliza viene determinado por el valor del parmetro de
anchura de pico. Por ejemplo: al comienzo del anlisis puede utilizarse el Fil-
tro 1. Si la anchura de pico aumenta durante el anlisis, se pasar primero al
Filtro 2 y en ltimo trmino al Filtro 3. Para obtener buenos resultados del uso
de los filtros de reconocimiento, los valores fijados para la anchura de pico
deben ser cercanos a la anchura de los picos cromatogrficos o electroferogr-
ficos reales. Durante el anlisis, el integrador actualiza la anchura de pico
como sea necesario para optimizar la integracin.
El integrador calcula la anchura de pico actualizada de distintos modos segn
la configuracin del instrumento:
Para configuraciones LC/CE, el clculo de anchura de pico por defecto utiliza
un clculo compuesto:
0,3 x (punto de inflexin derecho - punto de inflexin izquierdo) + 0,7 x
rea/Altura
Para configuraciones GC, el clculo de anchura de pico por defecto utiliza el
rea/la altura. Este clculo no sobreestima la anchura cuando los picos estn
solapados por encima del punto de media altura.
En determinados tipos de anlisis, por ejemplo anlisis GC isotrmicos y LC
isocrticos, los picos se ensanchan de forma significativa a medida que pro-
gresa el anlisis. Para compensar ese efecto, el integrador actualiza automtic-
amente la anchura de pico a medida que los picos se ensanchan durante el
anlisis. Lo hace de forma automtica salvo que se haya deshabilitado la fun-
cin de actualizacin o se haya fijado la anchura de pico en un valor especfico
por medio de un evento programado.
La actualizacin de la anchura de pico se pondera del modo siguiente:
0,75 x (anchura de pico existente) + 0,25 x (anchura de pico de actual)
Si un evento de integracin programado deshabilita la anchura de pico o la fija
en un valor especfico, se deshabilita el ajuste automtico de la anchura de
pico.
4 Integracin
Agrupamiento
El agrupamiento es el medio que el integrador utiliza para ensanchar conti-
nuamente los picos dentro del rango de efecto de los filtros de reconocimiento
de picos con el fin de mantener una buena selectividad.
Cuando los picos se ensanchan, el integrador no puede continuar aumentando
la anchura de pico de forma indefinida. Llegara un momento en que los picos
fueran tan anchos que no pudieran ser identificados por los filtros de recono-
cimiento. Para superar esa limitacin, el integrador agrupa los puntos de
datos entre s, estrechando en trminos prcticos el pico sin que el rea se vea
alterada.
Cuando se agrupan datos, los puntos de datos se agrupan en dos elevado a la
potencia de agrupamiento, o sea, sin agrupar = x1, agrupamiento realizado
una vez = x2, realizado dos veces = x4, etc.
El agrupamiento se realiza basndose en la velocidad de datos y la anchura de
pico. El integrador utiliza esos parmetros para fijar el factor de agrupa-
miento de modo que se obtenga el nmero de puntos de datos apropiado
Tabla 9 en la pgina 88.
El agrupamiento se realiza en potencias de dos en funcin de la anchura de
pico esperada u obtenida. El algoritmo de agrupamiento se resume a continua-
cin en Tabla 9 en la pgina 88.
Tabla 9 Criterios de agrupamiento
Anchura de pico esperada Filtro(s) utilizado(s) Agrupamiento realizado
0 - 10 puntos de datos Primero Ninguno
8 - 16 puntos de datos Segundo Ninguno
12 - 24 puntos de datos Tercero Ninguno
16 - 32 puntos de datos Segundo Una vez
24 - 48 puntos de datos Tercero Una vez
32 - 96 puntos de datos Tercero, segundo Dos veces
64 - 192 puntos de datos Tercero, segundo Tres veces
Integracin 4
El algoritmo de reconocimiento de picos
El integrador identifica el inicio del pico con un punto de lnea base determi-
nado por el algoritmo de reconocimiento de picos. El algoritmo de reconoci-
miento de picos compara en primer lugar los valores de salida de los filtros de
reconocimiento de picos con el valor de la sensibilidad de pendiente inicial
para aumentar o disminuir el acumulador de pendiente ascendente. El inte-
grador declara el punto en el que el valor del acumulador de pendiente ascen-
dente es 15 como el punto que indica el inicio de un pico.
El algoritmo de reconocimiento de pico se muestra en Figura 8 en la
pgina 89.
Figura 8 Reconocimiento de picos
Arranque
t2
L|nea haae
t3
Fendiente aacendente
t1
Fendiente deacendente
t7
Fxtracciun del icu
t9
t5
t11
t6
t1
t1
t8
Aluacenauientu
del icu
4 Integracin
Los criterios utilizados son los siguientes:
t1 El contador de pendiente ascendente es mayor o igual a 1
t2 El contador de pendiente ascendente es igual a 0
t4 Se ha encontrado la cumbre del pico y se ha encontrado la anchura a medio
pico o
Se ha encontrado la cumbre del pico y el contador de pendiente descen-
dente es mayor o igual a 2
t5 Se ha abortado el pico o
Se ha restablecido la lnea base
t6 Se ha encontrado el valle del pico y el contador de pendiente ascendente es
mayor o igual a 2, o
El valor sigma de la pendiente descendente es ms de dos veces el valor
sigma del final del pico, o
Se ha restablecido la lnea base, o
Se ha restablecido la lnea base en el siguiente valle y se ha encontrado el
valle del pico
t7 Ya no se cumple el criterio de pendiente descendente
t8 Se cumple nuevamente el criterio de pendiente descendente
t9 Se ha encontrado el valle del pico y el contador de pendiente ascendente es
mayor o igual a 2, o
El contador de pendiente descendente es igual a 0, o
El valor sigma de la pendiente descendente es mayor que el valor sigma del
final del pico, o
Se ha restablecido la lnea base, o
Se ha restablecido la lnea base en el siguiente valle
t11 El contador de pendiente ascendente es menor o igual a 1
Integracin 4
Inicio del pico
En Tabla 10 en la pgina 91, la anchura de pico esperada determina qu valo-
res de pendiente y curvatura de filtro se comparan con la sensibilidad de pen-
diente. Por ejemplo, cuando la anchura de pico esperada es reducida, se
aaden los nmeros del Filtro 1 al acumulador de pendiente ascendente. Si la
anchura de pico esperada aumenta, se utilizan entonces los nmeros corres-
pondientes al Filtro 2 y, en ltimo trmino, al Filtro 3.
Cuando el valor del acumulador de pendiente ascendente es 15, el algoritmo
reconoce que se puede estar iniciando un pico.
Fin del pico
En Tabla 11 en la pgina 92, la anchura de pico esperada determina qu valo-
res de pendiente y curvatura de filtro se comparan con la sensibilidad de pen-
diente. Por ejemplo, cuando la anchura de pico esperada es reducida, se
aaden los nmeros del Filtro 1 al acumulador de pendiente descendente. Si la
anchura de pico esperada aumenta, se utilizan entonces los nmeros corres-
pondientes al Filtro 2 y, en ltimo trmino, al Filtro 3.
Cuando el valor del acumulador de pendiente descendente es 15, el algoritmo
reconoce que puede estar finalizando un pico.
Tabla 10 Valores de incremento del acumulador de pendiente ascendente
Valores de salida de filtros de derivadas de 1 a 3 frente
a sensibilidad de pendiente
Filtro 1 Filtro 2 Filtro 3
Pendiente > Sensibilidad de pendiente +8 +5 +3
Curvatura > Sensibilidad de pendiente +0 +2 +1
Pendiente < (-) Sensibilidad de pendiente -8 -5 -3
Pendiente > |Sensibilidad de pendiente| -4 -2 -1
Curvatura < (-) Sensibilidad de pendiente -0 -2 -1
4 Integracin
El algoritmo de determinacin del mximo de pico
El mximo del pico se reconoce como el punto ms alto del cromatograma
mediante la construccin de una curva de ajuste parablica que pase por los
puntos de datos ms altos.
Clculos no gaussianos
Picos solapados
Los picos solapados se producen cuando un pico nuevo comienza antes de
encontrar el final de otro pico. La figura ilustra cmo trata el integrador los
picos solapados.
Figura 9 Picos solapados
Tabla 11 Valores de incremento del acumulador de pendiente descendente
Valores de salida de filtros de derivadas de 1 a 3 frente
a sensibilidad de pendiente
Filtro 1 Filtro 2 Filtro 3
Pendiente > Sensibilidad de pendiente +8 +5 +3
Curvatura > Sensibilidad de pendiente +0 +2 +1
Pendiente < (-) Sensibilidad de pendiente -11 -7 -4
Pendiente > |Sensibilidad de pendiente| -28 -18 -11
Curvatura < (-) Sensibilidad de pendiente -0 -2 -1
Funtu de valle
Integracin 4
El integrador procesa los picos solapados como sigue:
1 suma el rea del primer pico hasta el punto de valle;
2 en el punto de valle, termina la suma del rea correspondiente al primer
pico e inicia la correspondiente al segundo pico;
3 cuando el integrador localiza el final del segundo pico, se detiene la suma
del rea. Este proceso se puede visualizar como la separacin de los picos
solapados trazando una perpendicular desde el punto de valle entre ambos
picos.
Hombros
Los hombros son picos no resueltos ubicados en el avance o el rastro de un
pico ms grande. Cuando hay un hombro presente, no existe un verdadero
valle en el sentido de una pendiente negativa seguida por otra positiva. Un
pico puede tener cualquier nmero de hombros frontales y/o traseros.
Figura 10 Hombros de pico
Los hombros se detectan a partir de la curvatura del pico, que viene dada por
la segunda derivada. Cuando la curvatura cae a cero, el integrador identifica
un punto de inflexin, como los puntos a y b en Figura 10 en la pgina 93.
Existe un posible hombro frontal cuando se detecta un segundo punto de
inflexin antes del mximo del pico. Si se confirma la presencia de un hom-
bro, el punto de inicio del mismo se fija en el punto de mxima curvatura
positiva previo al punto de inflexin.
h
a
15.69
15.55
15.11
4 Integracin
Existe un posible hombro trasero cuando se detecta un segundo punto de
inflexin antes del final o el valle del pico. Si se confirma la presencia de un
hombro, el punto de inicio del mismo se fija en el punto tangente desde el
punto inicial a la curva.
El tiempo de retencin o migracin se determina a partir del punto de mxima
curvatura negativa del hombro. Con un evento de integracin programado, el
integrador puede calcular tambin reas de hombro como picos normales con
lneas de cada verticales en los puntos de inflexin del pico que presenta el
hombro.
El rea del hombro se resta del pico principal.
Los hombros de pico pueden tratarse como picos normales utilizando un
parmetro de integracin programado.
Integracin 4
Una vez completado un grupo de picos y encontrada la lnea base, el integra-
dor solicita al algoritmo de asignacin de la lnea base la asignacin de sta
mediante una tcnica de "jalonamiento". El algoritmo utiliza correcciones de
rea trapezoidal y altura proporcional para normalizar la lnea base y mante-
nerla lo ms baja posible. Entre los valores de entrada al algoritmo de asigna-
cin de la lnea base se incluyen tambin parmetros obtenidos de los ficheros
de mtodo y datos que identifican el detector y la aplicacin y que el integra-
dor utiliza para optimizar los clculos.
Construccin de la lnea base por defecto
En el caso ms sencillo, el integrador construye la lnea base como una serie
de segmentos rectos entre:
el inicio de la lnea base,
las marcas de sealizacin,
el final del pico
Figura 11 Construccin de la lnea base por defecto
Marcaa de aenalizaciun
L|nea haae
4 Integracin
Inicio de la lnea base
Si no se localiza una lnea base al comienzo del anlisis, el inicio de la lnea
base se establece de uno de los modos siguientes:
desde el inicio del anlisis al primer punto de lnea base, si el punto de ini-
cio del anlisis es inferior al primer punto de lnea base,
desde el inicio del anlisis al primer punto de valle, si el punto de inicio del
anlisis es inferior al primer valle,
desde el inicio del anlisis al primer punto de valle, si el primer valle pene-
tra una lnea imaginaria trazada desde el inicio del anlisis a la primera ln-
ea base,
desde el inicio del anlisis a una lnea base horizontal extrapolada al pri-
mer punto de lnea base.
Marcas de sealizacin
Las marcas de sealizacin identifican el inicio y el final de un pico. Sus posi-
ciones vienen determinadas por las horas de inicio y final de pico almacena-
das en la tabla de picos.
Final de la lnea base
El ltimo punto de lnea base vlido se utiliza para designar el final de la lnea
base. En los casos en que un anlisis no termine en la lnea base, el final de la
lnea base se calcula desde el ltimo punto de lnea base vlido a la deriva de
lnea base establecida.
Si un pico termina en lo que parece ser un valle pero el siguiente pico est por
debajo del valor establecido para el rechazo por rea, la lnea base se proyecta
desde el comienzo del pico al siguiente punto de lnea base verdadero. Cuando
un pico comience de modo similar, se aplicar la misma regla.
Integracin 4
Penetracin de la lnea base
Se produce una penetracin cuando la seal cae por debajo de la lnea base
construida (punto a en Figura 12 en la pgina 97). En caso de penetracin, por
lo general se reconstruye esa parte de la lnea base, tal como muestran los
puntos b de Figura 12 en la pgina 97.
Figura 12 Penetracin de la lnea base
El usuario puede utilizar las siguientes opciones de seguimiento para eliminar
todas las penetraciones de la lnea base:
Seguimiento clsico de la lnea base (sin penetraciones)
Cuando se selecciona esta opcin, cada grupo de picos se examina en busca de
posibles penetraciones de la lnea base. Si se encuentran penetraciones, se
desplazan los puntos de inicio y/o final del pico hasta eliminarlas por com-
pleto (comprense las lneas base de Figura 12 en la pgina 97 y Figura 13 en
la pgina 98).
a
h
4 Integracin
Figura 13 Seguimiento estndar de la lnea base y seguimiento de la lnea base (sin
penetraciones)
Seguimiento avanzado de la lnea base
En el modo de seguimiento avanzado de la lnea base, el integrador trata de
optimizar la ubicacin del inicio y el final de los picos, restablece la lnea base
para un grupo de picos y elimina las penetraciones de la lnea base (vase la
seccin Figura 12 en la pgina 97). En muchos casos, con el modo de segui-
miento avanzado se consigue una lnea base ms estable, menos dependiente
de la sensibilidad de pendiente.
Relacin pico/valle
Este parmetro especificado por el usuario forma parte del modo de segui-
miento avanzado de la lnea base. Se utiliza para decidir si dos picos que no
muestran separacin a nivel de la lnea base deben separarse utilizando una
lnea de cada vertical o una lnea base de valle. El integrador calcula la rela-
cin entre la altura corregida por la lnea base del menor de los picos y la
altura corregida por la lnea base del valle. Cuando la relacin pico a valle es
inferior al valor especificado por el usuario, se utiliza una lnea de cada verti-
Seguiuientu eatandar
de la l|nea de haae
Seguiuientu de la l|nea
de haae (ain enetraciunea}
NOTA
El seguimiento de la lnea base (sin penetraciones) no est disponible para los picos de
disolvente con sus hombros y picos secundarios.
Integracin 4
cal; de lo contrario, se traza una lnea base desde la lnea base del inicio del
primer pico al valle y desde el valle a la lnea base del final del segundo pico
(comprese Figura 13 en la pgina 98 con Figura 14 en la pgina 99).
Figura 14 Relacin pico/valle
La relacin pico/valle se calcula por medio de las ecuaciones siguientes:
H1 H2, relacin pico/valle = H2/Hv
y
H1 < H2, relacin pico/valle = H1/Hv
Figura 15 en la pgina 100 muestra cmo el valor especificado por el usuario
de la relacin pico/valle influye en las lneas base.
h2
hv
h1
4 Integracin
Figura 15 Efecto de la relacin pico/valle sobre las lneas base
Divisin tangencial
La divisin tangencial es una forma de lnea base construida para picos que se
encuentran en las pendientes ascendente o descendente de otro pico. Cuando
est habilitada, hay cuatro modelos disponibles para el clculo de las reas de
pico adecuadas:
ajuste a una curva exponencial,
nueva divisin exponencial
divisin mediante lnea recta,
clculos de recta y exponencial combinados para obtener el mejor ajuste
(divisin estndar).
Ajuste a una curva exponencial
Este modelo de divisin traza una curva, utilizando una ecuacin exponencial,
que pasa por los puntos inicial y final del pico secundario (la altura del inicio
del pico secundario se corrige por la pendiente del pico principal). La curva
pasa bajo cada uno de los picos secundarios que siguen al principal; el rea
que queda por debajo de la curva de divisin se resta de los picos secundarios
y se aade al pico principal (vase Figura 17 en la pgina 101).
8elaciun icu/valle
inferiur a
valur eaecificadu ur el uauariu
8elaciun icu/valle
aueriur a
valur eaecificadu ur el uauariu
18.529
19.6
18.529
19.6
Integracin 4
Figura 16 Divisin exponencial
Ajuste de curva exponencial de modo nuevo
Este modelo de punto de contacto traza una curva mediante una ecuacin
exponencial para aproximar los flancos delantero y posterior del pico princi-
pal. La curva pasa por debajo de uno o ms picos que siguen al pico principal
(los picos secundarios). El rea por debajo de la curva de punto de contacto se
resta de los picos secundarios y se suma al pico principal. Puede utilizarse la
tcnica del punto de contacto en ms de un pico secundario mediante el
mismo modelo exponencial; todos los picos posteriores al primer pico secun-
dario se separan con lneas verticales, comenzando al final del primer pico
secundario, y se trazan slo hasta el punto de contacto (consulte Figura 17 en
la pgina 101).
Figura 17 Nuevo modo de divisin exponencial
11.357
11.296
11.111
L|neaa de ca|da verticalea
Ficua aecundariua
Ficu rincial
11.357 11.296
11.111
Curva de diviaiun exunencial
L|nea haae del icu rincial
4 Integracin
Divisin mediante lnea recta
Este modelo de divisin traza una lnea recta a travs de los puntos inicial y
final del pico secundario. La altura del inicio del pico secundario se corrige
por la pendiente del pico principal. El rea que queda bajo la lnea recta se
resta del pico secundario y se aade al pico principal (consulte Figura 18 en la
pgina 102).
Figura 18 Divisin mediante lnea recta
Divisiones estndar
El mtodo de clculo apropiado se elige para cada aplicacin particular; por
defecto, el mtodo elegido es una combinacin de clculos de curva exponen-
cial y lnea recta para obtener el mejor ajuste.
El paso de un clculo exponencial a uno lineal se realiza de modo que no haya
discontinuidades abruptas en las alturas o las reas.
Cuando la seal se encuentra apreciablemente por encima de la lnea base,
el clculo para ajustar la cola es exponencial.
Cuando la seal se encuentra en la zona de lnea base, el clculo para ajus-
tar la cola es una lnea recta.
Los clculos combinados se muestran como divisin exponencial o tangencial.
Criterios de divisin
Dos son los criterios que determinan si se va a utilizar una lnea de divisin
para calcular el rea de un pico secundario que eluye en el rastro de otro prin-
cipal:
relacin de alturas para divisin de cola
11.357 11.296
11.111
Integracin 4
relacin de altura con respecto al valle
Estos criterios no se utilizan si se est aplicando un evento programado para
un clculo exponencial o si el pico principal es en s mismo un pico secundario
de otro. El cdigo de separacin entre el pico principal y el secundario debe
ser de tipo Valley.
La Tail Skim Height Ratio es la relacin de la altura corregida por la lnea base
del pico principal (Hp en Figura 19 en la pgina 103) con la altura corregida
por la lnea base del pico secundario (Hc). Para que se divida el pico secunda-
rio, esta relacin debe ser superior al valor especificado.
Figura 19 Criterios de divisin
El usuario puede deshabilitar la divisin exponencial durante el anlisis
fijando el valor de la relacin de alturas para divisin de cola en un valor alto
o en cero.
La Valley Height Ratio es la relacin de la altura del pico secundario por encima
de la lnea base (Hc en Figura 19 en la pgina 103) con la altura del valle por
encima de la lnea base (Hv en la misma figura). Para que se divida el pico
secundario, esta relacin debe ser inferior al valor especificado.
Clculo de ajuste a curva exponencial empleado en las divisiones
Para calcular una divisin exponencial se utiliza la ecuacin siguiente (con-
sulte Figura 22 en la pgina 105):
Hb = Ho exp (- B (Tr - To)) + A Tr + C
donde
Hb = altura de la divisin exponencial en el momento Tr
Ho = altura (por encima de la lnea base) del inicio de la divisin exponencial
h
hv
hc
4 Integracin
B = factor de decaimiento de la funcin exponencial
To = momento correspondiente al inicio de la divisin exponencial
A = pendiente de la lnea base del pico principal
C = desplazamiento de la lnea base del pico principal
Figura 20 Valores utilizados en el clculo de una divisin exponencial
El modelo exponencial se ajusta en el componente de la cola de pico principal
justo antes del primer pico secundario. Figura 21 en la pgina 104 muestra la
curva corregida de un pico secundario despus de una divisin tangencial.
Figura 21 Pico secundario corregido por la cola
11.357 11.296
11.111
13.931
C
A
1u
hu
hh
Curva de icu aecundariu
curregida
Integracin 4
Divisin de pico frontal
Al igual que para los picos secundarios ubicados en la cola de otro principal, la
presencia de picos en el frente/la pendiente ascendente de otro pico requiere
una integracin especial, vase Figura 22 en la pgina 105.
Figura 22 Divisin de pico frontal
La divisin de picos frontales se trata del mismo modo que la de picos de cola,
utilizando los mismos modelos de divisin.
Los criterios de divisin son los siguientes:
relacin de alturas para divisin frontal
relacin de altura con respecto al valle
La relacin de altura con respecto al valle tiene el mismo valor para divisiones
tanto de picos frontales como de picos de cola (vase la seccin Relacin de
altura con respecto al valle); la relacin de alturas para divisin frontal se cal-
cula del mismo modo que la relacin de alturas para divisin de cola (vase la
seccin Relacin de alturas para divisin de cola) pero puede tener un valor
diferente.
Picos no asignados
Con algunas construcciones de lnea base, hay pequeas reas que quedan por
encima de la lnea base y por debajo de la seal y que no forman parte de nin-
gn pico reconocido. Por lo general, estas reas ni se miden ni se muestran. Si
se habilita la funcin de picos no asignados, dichas reas se miden y se mues-
4 Integracin
tran como picos no asignados. El tiempo de retencin o migracin correspon-
diente a tales reas es el punto medio entre el inicio y el final del rea, tal
como se muestra en Figura 23 en la pgina 106.
Figura 23 Picos no asignados
Cdigos de separacin de picos
En los informes, cada pico lleva asignado un cdigo de dos, tres o cuatro carac-
teres que describe el modo en que se traz la lnea base de la seal.
Caracteres 1 y 2
El primer carcter describe la lnea base al inicio del pico, mientras que el
segundo carcter describe la lnea base al final del pico.
B El pico se inici o se detuvo en la lnea base.
V El pico se inici o se detuvo con una cada vertical en un valle.
P El pico se inici o se detuvo estando la lnea base penetrada.
H El pico se inici o se detuvo en una lnea base horizontal forzada.
F El pico se inici o se detuvo en un punto forzado.
M El pico se integr manualmente.
U El pico no ha sido asignado.
Pueden aadirse asimismo sealizadores adicionales (en orden de prioridad):
.182
.581
.832
Integracin 4
Carcter 3
D El pico estaba distorsionado.
A La integracin fue abortada.
U Se produjo una condicin de "por debajo del rango".
O Se produjo una condicin de "por encima del rango".
Carcter 4
El cuarto carcter describe el tipo de pico:
S El pico es un pico de disolvente.
N El pico es un pico negativo.
+ El pico es un pico de rea sumada.
T Pico con divisin tangencial (divisin estndar).
X Pico con divisin tangencial (divisin con el modo exponencial antiguo).
E Pico con divisin tangencial (divisin con el nuevo modo exponencial).
m Pico definido por una lnea base manual.
n Pico negativo definido por una lnea base manual.
t Pico con divisin tangencial definido por una lnea base manual.
R El pico es un pico de disolvente recalculado.
f Pico definido por una tangente de hombro frontal.
b Pico definido por una tangente de hombro trasero.
F Pico definido por una cada vertical de hombro frontal.
B Pico definido por una cada vertical de hombro trasero.
U Pico no asignado.
4 Integracin
Medida del rea de pico
El paso final de la integracin de picos es determinar el rea final del pico.
Las reas de pico se calculan a partir del contenido del fichero de puntos car-
dinales. Los puntos cardinales son los puntos elegidos por el integrador para
definir y cuantificar un pico (consulte Identificacin de los puntos cardinales
de un pico en la pgina 80). Entre ellos se incluyen los puntos de lnea base,
puntos de valle, mximo de pico y puntos a media altura del pico. Los puntos
cardinales tienen una coordenada horizontal de tiempo transcurrido, una
coordenada vertical de altura desde la lnea base, un rea y otros parmetros
que el integrador utiliza para calcular las reas de pico.
Figura 24 Medida del rea para picos de lnea base a lnea base
En el caso de un simple pico aislado, el rea de pico viene determinada por el
rea acumulada por encima de la lnea base entre el inicio y el final del pico
(identificados por marcas de sealizacin).
Determinacin del rea
El rea que el integrador calcula durante la integracin se determina como
sigue:
para picos de lnea base a lnea base (BB), el rea por encima de la lnea
base entre las marcas de sealizacin, como se muestra en Figura 24 en la
pgina 108,

Integracin 4
para picos de valle a valle (VV), el rea por encima de la lnea base segmen-
tada con lneas de cada verticales trazadas a partir de las marcas de seal-
izacin, como se muestra en Figura 25 en la pgina 109,
Figura 25 Medida del rea para picos de valle a valle
para picos tangenciales (T), el rea por encima de la lnea base restablecida,
para picos de disolvente (S), el rea por encima de la extrapolacin horizon-
tal desde el ltimo punto de lnea base encontrado y por debajo de la lnea
base restablecida asignada a picos tangenciales (T). Es posible que un pico
de disolvente produzca una elevacin de la seal demasiado lenta para el
reconocimiento del pico o que en medio del anlisis aparezca un grupo de
picos que el usuario considere que deben ser tratados como un disolvente
con una serie de picos montados. se suele ser el caso de un grupo de picos
solapados en el que el primer pico es mucho mayor que el resto. El trata-
miento ms simple, el de la lnea de cada vertical, exagerara los picos pos-
teriores al estar stos en realidad sobre la cola del primero. Forzando el
reconocimiento del primer pico como pico de disolvente, es posible dividir
de la cola el resto del grupo,
los picos negativos que se dan bajo la lnea base tienen un rea positiva,
como se muestra en Figura 26 en la pgina 110.
vv
4 Integracin
Figura 26 Medida del rea para picos negativos
Unidades y factores de conversin
Externamente, los datos contienen un conjunto de puntos de datos, que pue-
den ser bien muestreados o integrados. En el caso de datos integrados, cada
punto de datos corresponde a un rea, que se expresa como Altura Tiempo.
En el caso de datos muestreados, cada punto de datos corresponde a una
altura.
Por lo tanto, en el caso de los datos integrados, la altura es una entidad calcu-
lada, obtenida dividiendo el rea por el tiempo transcurrido desde el punto de
datos previo. En el caso de los datos muestreados, el rea se calcula multipli-
cando el dato por el tiempo transcurrido desde el punto de datos previo.
El clculo de integracin hace uso de ambas entidades. Las unidades que el
integrador utiliza internamente son las siguientes: cuentas milisegundos
para el rea y cuentas para la altura. Se hace as con el fin de proporcionar
una base comn para los truncamientos a enteros cuando sea necesario. Las
medidas de tiempo, rea y altura se muestran en unidades fsicas reales, con
independencia de cmo se miden, calculan y almacenan en el software.
rea tutal de la zuna rea ur dehaju de la l|nea haae - rea curregida
Integracin 4
El integrador proporciona al usuario una serie de eventos de integracin tanto
iniciales como programados. Muchos eventos son parejas de tipo activado/des-
activado o iniciar/detener.
Eventos iniciales
Initial peak width establece el valor de anchura de pico que el integrador utiliza
internamente al comienzo del anlisis. Esta anchura de pico inicial se utiliza
para escalar el acumulador que detecta pendientes ascendentes, pendientes
descendentes y colas. El integrador actualiza la anchura de pico como sea
necesario durante el anlisis para optimizar la integracin. El usuario especi-
fica la anchura de pico en unidades de tiempo correspondientes a la anchura a
media altura del primer pico esperado (excluido el pico de disolvente).
Slope sensitivity establece el nivel de sensibilidad para la deteccin de picos. Es
un parmetro que cambia en una escala lineal.
Height reject establece el umbral de rechazo del pico por la altura final. Los
picos con altura inferior al valor fijado como mnimo aceptable no se mues-
tran.
Area reject establece el umbral de rechazo del pico por el rea final. Los picos
con rea inferior al valor fijado como mnimo aceptable no se muestran.
Cuando shoulder detection est habilitada, el integrador detecta los posibles
hombros utilizando la curvatura de pico dada por la segunda derivada.
Cuando la curvatura se hace cero, el integrador identifica ese punto de
inflexin como un posible hombro. Si el integrador identifica otro punto de
inflexin antes del mximo del pico, se ha detectado un hombro.
4 Integracin
Anchura de pico
El parmetro anchura de pico controla la selectividad del integrador para dis-
tinguir los picos del ruido de la lnea base. Para obtener buenos resultados,
debe fijarse un valor cercano a la anchura a media altura de los picos cromato-
grficos o electroferogrficos reales. El integrador actualiza la anchura de pico
como sea necesario durante el anlisis para optimizar la integracin.
Seleccin de la anchura de pico
Debe elegirse el valor que proporcione el nivel de filtro justo y suficiente para
evitar interpretar el ruido como picos pero sin llegar a distorsionar la infor-
macin que porta la seal.
Para seleccionar una anchura de pico inicial adecuada para un determi-
nado pico de inters, utilice como base de referencia la anchura en tiempo
del pico.
Para seleccionar una anchura de pico inicial adecuada cuando hay varios
picos de inters, fije la anchura de pico inicial en un valor igual o inferior a
la anchura del pico ms estrecho con el fin de obtener una selectividad de
pico ptima.
Si la anchura de pico inicial seleccionada es demasiado reducida, puede darse
el caso de que el ruido se interprete como picos. Si hay una mezcla de picos
anchos y estrechos, puede ser conveniente utilizar eventos programados en
funcin del tiempo de anlisis para ajustar la anchura para determinados
picos. En ocasiones, los picos se ensanchan de forma significativa a medida
que el anlisis progresa, como ocurre por ejemplo con los anlisis GC isotrmi-
cos y LC isocrticos. Para compensar ese efecto, el integrador actualiza auto-
mticamente el valor de anchura de pico a medida que los picos se ensanchan
durante el anlisis salvo que se haya deshabilitado la funcin o se haya fijado
el valor de anchura por medio de un evento programado.
La actualizacin de la anchura de pico se pondera del modo siguiente:
0,75 (anchura de pico existente) + 0,25 (anchura de pico de actual)
Si un evento de integracin programado deshabilita la anchura de pico o la fija
en un valor especfico, se deshabilita el ajuste automtico de la anchura de
pico.
Integracin 4
Rechazo por altura y anchura de pico
Ambos parmetros, peak width y height reject son sumamente importantes en el
proceso de integracin. Modificando estos valores se pueden obtener distintos
resultados.
Eleve los valores de ambos parmetros, rechazo por altura y anchura de
pico, cuando deban detectarse y cuantificarse componentes relativamente
dominantes en un entorno de alto ruido. Una mayor anchura de pico mejora
el filtrado del ruido y un mayor rechazo por altura asegura que se ignore el
ruido aleatorio.
Reduzca los valores de los parmetros rechazo por altura y anchura de pico
para detectar y cuantificar componentes traza, cuyas alturas se aproximan
a la del propio ruido. La disminucin de la anchura de pico tiene como
efecto un menor filtrado de la seal, mientras que la disminucin del
rechazo por altura asegura que no se rechacen picos pequeos por no tener
la altura suficiente.
Cuando un anlisis incluya picos de distintas anchuras, fije el valor de la
anchura de pico para los ms estrechos y reduzca el valor del rechazo por
altura para asegurar que no se ignoren los picos anchos debido a su redu-
cida altura.
Refinamiento de la integracin
Con frecuencia resulta til modificar los valores de sensibilidad de pendiente,
anchura de pico, rechazo por altura y rechazo por rea para personalizar as la
integracin.
Figura 27 en la pgina 114 muestra cmo afectan esos parmetros a la integra-
cin de cinco picos de una seal.
4 Integracin
Figura 27 Uso de eventos iniciales
Un pico se integra nicamente si se satisfacen los requisitos de los cuatro
parmetros de integracin. Utilizando la anchura de pico correspondiente al
pico 3, el rechazo por rea y la sensibilidad de pendiente que se muestran en
Figura 27 en la pgina 114, slo los picos 1, 3, 5 y 7 resultan integrados.
Pico 1 se integra puesto que se satisfacen los requisitos de los cuatro parmetros de
integracin.
Pico 2 se rechaza por estar el rea por debajo del valor fijado para el rechazo por
rea.
Pico 3 se integra puesto que se satisfacen los requisitos de los cuatro parmetros de
integracin.
Pico 4 no se integra al estar la altura de pico por debajo del valor fijado para el
rechazo por altura.
Pico 5 se rechaza por estar el rea por debajo del valor fijado para el rechazo por
rea.
Pico 6 no se integra; el filtrado y el agrupamiento hacen el pico indetectable.
Pico 7 se integra.
8echazu ur altura
L|nea haae
Anchura de icu
1
2
3
1
5
6
7
Integracin 4
Eventos programados
El usuario puede utilizar eventos programados para personalizar la construc-
cin de la lnea base de la seal cuando la construccin por defecto no resulte
apropiada. Dichos eventos pueden resultar tiles para sumar reas de pico
finales y para corregir aberraciones a corto y largo plazo de la lnea base. Para
obtener informacin adicional acerca de los parmetros de integracin, con-
sulte la seccin Eventos iniciales en la pgina 111.
Integracin automtica
La funcin Autointegrate proporciona un punto de partida para el estableci-
miento de valores de los eventos iniciales. Eso resulta particularmente til
durante la implantacin de un nuevo mtodo. El usuario parte de una tabla de
eventos de integracin por defecto que no contiene eventos programados y
optimiza entonces los parmetros propuestos para uso general por la funcin
Integracin automtica.
Principios de funcionamiento
La funcin Autointegrate lee los datos cromatogrficos y calcula los valores
ptimos de los parmetros de integracin iniciales para cada seal del croma-
tograma.
El algoritmo examina un 1% al inicio y el final del cromatograma y determina
el ruido y la pendiente de esas zonas. El ruido se determina como 3 veces la
desviacin estndar de la regresin lineal dividida por la raz cuadrada del
Tabla 12 Valores de rechazo por altura y rea
Parmetro de integracin Pico 1 Pico 2 Pico 3 Pico 4 Pico 5 Pico 7
Rechazo por altura Por
encima
Por
encima
Por
encima
Por
debajo
Por
encima
Por
encima
Rechazo por rea Por
encima
Por
debajo
Por
encima
Por
debajo
Por
debajo
Por
encima
Pico integrado S No S No No S
4 Integracin
porcentaje de puntos utilizados en la regresin. Los resultados se utilizan para
asignar valores apropiados de los parmetros de rechazo por altura y sensibili-
dad de pendiente para la integracin. El algoritmo asigna entonces un valor
temporal de anchura de pico dependiendo de la longitud del cromatograma,
utilizando un 0,5% para LC y del 0,3% al 0,2% para GC. Se fija en cero el parm-
etro de rechazo por rea inicial y se lleva a cabo una integracin de prueba. La
prueba se repite varias veces si es necesario, ajustndose en cada intento los
valores de los parmetros hasta conseguir detectar al menos 5 picos o hasta
que la integracin se lleve a cabo con un valor de rechazo por altura inicial de
0. De no cumplirse las condiciones citadas despus de 10 intentos, se da por
terminada la integracin de prueba.
Se examinan los resultados de la integracin y se ajusta la anchura de pico en
funcin de las anchuras de los picos detectados, sesgndose el clculo a favor
de los picos iniciales. Se utiliza la simetra de los picos detectados para incluir
en el clculo de la anchura de pico nicamente aquellos picos con simetra
entre 0,8 y 1,3. Si no se encuentran suficientes picos simtricos, esos lmites se
relajan para permitir una simetra mnima/1,5 y una simetra mxima1,5.
Se examina entonces la lnea base entre los picos para refinar los valores pre-
vios de rechazo por altura y sensibilidad de pendiente. El rechazo por rea se
fija en el 90% del rea mnima del pico ms simtrico de los detectados
durante la integracin de prueba.
El cromatograma se integra nuevamente utilizando esos valores finales de los
parmetros de integracin y los resultados de la integracin se almacenan.
Parmetros de la integracin automtica
La funcin Integracin automtica establece valores para los siguientes
parmetros:
Sensibilidad de pendiente inicial
Altura inicial
Anchura de pico inicial
Rechazo por rea inicial
Integracin 4
Integracin manual
Integracin manual
Integracin manual
Este tipo de integracin permite al usuario integrar determinados picos o gru-
pos de picos. A excepcin del valor de rechazo por rea inicial, los eventos de
integracin del software se ignoran dentro del rango especificado para la inte-
gracin manual. Si uno o varios de los picos resultantes de la integracin
manual estn por debajo del umbral de rechazo por rea, esos picos se des-
echan. Los eventos de integracin manual utilizan valores de tiempo absoluto.
No se ajustan por la deriva de la seal.
La Manual Integration permite al usuario definir los puntos de inicio y final del
pico para despus incluir las reas recalculadas en las rutinas de cuantifica-
cin e informes. Los picos integrados manualmente se etiquetan en los infor-
mes con el cdigo de separacin de picos M.
La Manual Integration ofrece las siguientes funciones:
Draw Baseline especifica dnde se van a trazar las lneas base para un pico o un
conjunto de picos. El usuario puede especificar tambin si se debe producir o
no la separacin automtica en los puntos de valle de los picos incluidos en el
rango dado.
Negative Peaks especifica cundo considerar las reas por debajo de la lnea
base como picos negativos. El usuario puede especificar tambin si se debe
producir o no la separacin automtica en los puntos de valle de los picos
incluidos en el rango dado.
Tangent Skim calcula las reas de picos divididos tangencialmente de un pico
principal. El rea del pico dividido tangencialmente se resta del rea del pico
principal.
Split Peak especifica el punto donde dividir un pico con una lnea de cada ver-
tical.
Delete Peak(s) elimina uno o varios picos de los resultados de integracin.
4 Integracin
Integracin manual
Cdigos de separacin de picos para picos integrados manualmente
Los picos integrados manualmente se etiquetan en los informes de integracin
con el cdigo de picos MM.
Si hay algn otro pico antes del integrado manualmente y el final de ese pico
cambia como consecuencia de la integracin manual, el pico modificado recibe
el cdigo F (forzado).
Un pico de disolvente afectado por la integracin manual, por ejemplo por una
divisin tangencial, se etiqueta como R (disolvente recalculado).
Almacenamiento de eventos de integracin manual
Los eventos de integracin manual, por ejemplo, una lnea de base trazada
manualmente, son todava ms especficos de cada fichero de datos que los
eventos de integracin cronometrados. En el caso de cromatogramas comple-
jos, es muy recomendable poder utilizar estos eventos para el reprocesa-
miento. Por lo tanto, a partir de ChemStation B.04.01, los eventos de
integracin manual pueden almacenarse directamente en el fichero de datos
en lugar del mtodo.
Cada vez que se recibe o reprocesa el fichero de datos, los eventos manuales
del fichero de datos se aplican de forma automtica. Los anlisis que contie-
nen eventos de integracin manual se marcan en la columna correspondiente
de la Navigation Table.
Adems de las herramientas para dibujar una lnea de base y eliminar manual-
mente un pico, existen tres herramientas adicionales disponibles en la inter-
fase de usuario para
Guardar en el fichero de datos eventos manuales de los cromatogramas que
se estn visualizando,
Quitar todos los eventos de los cromatogramas que se estn visualizando,
Deshacer los ltimos eventos de integracin manual (disponibles hasta que
se guarda el evento).
Al continuar con el siguiente fichero de datos durante una revisin en la
Navigation Table, ChemStation realizar una revisin en busca de eventos de
integracin manual sin guardar y preguntar al usuario si desea guardarlos.
Integracin 4
Integracin manual
Los eventos manuales guardados en el fichero de datos durante una revisin
en la Navigation Table no interfieren con los eventos de integracin manual
almacenados durante una revisin en el modo Batch. Estas dos formas de revi-
sin son completamente independientes con respecto a los eventos manuales
de un fichero de datos.
En las revisiones de ChemStation anteriores a B.04.01, los eventos de integra-
cin manual se guardaban en el mtodo en lugar de en cada fichero de datos.
En la revisin B.04.01, todava se puede utilizar este flujo de trabajo. El men
Integration de la vista Data Analysis proporciona los siguientes elementos para
gestionar eventos de integracin manual con el mtodo:
Update Manual Events of Method: Guardar eventos manuales extrados recien-
temente en el mtodo.
Apply Manual Events from Method: Aplicar los eventos manuales guardados
actualmente en el mtodo al fichero de datos cargado en ese momento.
Remove Manual Events from Method: Eliminar los eventos manuales del mt-
odo.
Para convertir eventos manuales almacenados en un mtodo para guardarlos
en el fichero de datos, aplique los eventos del mtodo y guarde los resultados
en el fichero de datos. Si lo desea, quite los eventos del mtodo.
En el caso de que la casilla Manual Events de la Integration Events Table de un mt-
odo est marcada, los eventos manuales del mtodo se aplican siempre al car-
gar un fichero de datos utilizando este mtodo. Si el fichero de datos contiene
eventos manuales adicionales, stos se aplican despus de los eventos del mt-
odo. Cuando la casilla Manual Events est marcada, nunca se le pide al usuario
que guarde los eventos en el fichero de datos.
Para convertir eventos manuales almacenados en un mtodo para guardarlos
en el fichero de datos, aplique los eventos del mtodo y guarde los resultados
en el fichero de datos. Si lo desea, quite ahora los eventos del mtodo.
En el caso de que la casilla Manual Events de la Integration Events Table de un mt-
odo est marcada, los eventos manuales del mtodo se aplican siempre al car-
gar un fichero de datos utilizando este mtodo. Si el fichero de datos contiene
eventos manuales adicionales, stos se aplican despus de los eventos del mt-
odo. Cuando la casilla Manual Events est marcada, nunca se le pide al usuario
que guarde los eventos en el fichero de datos.
4 Integracin
Integracin manual
Conversin de eventos de integracin manual guardados en un mtodo
En las revisiones de ChemStation anteriores a B.04.01, los eventos de integra-
cin manual se guardaban en el mtodo en lugar de en cada fichero de datos. A
fin de guardar los eventos manuales en una forma especfica de fichero de
datos, lo ms cmodo era utilizar el mtodo DA.M independiente de cada
fichero de datos.
El men Integracin en la vista Data Analysis proporciona los siguientes elemen-
tos para convertir eventos de integracin manual del mtodo en eventos alma-
cenados en el fichero de datos, o seguir trabajando con eventos manuales
guardados en el mtodo:
Update Manual Events of Method: Guardar eventos manuales extrados recien-
temente en el mtodo.
Apply Manual Events from Method: Aplicar los eventos manuales guardados
actualmente en el mtodo al fichero de datos cargado en ese momento.
Remove Manual Events from Method: Eliminar los eventos manuales del mt-
odo.
121
5
Cuantificacin
Definicin de la cuantificacin 122
Clculos de cuantificacin 123
Factores de correccin 124
Factor de respuesta absoluta 124
Multiplicador 124
Factor de dilucin 124
Cantidad de muestra 125
Procedimientos de clculo no calibrados 126
% de rea y % de altura 126
Procedimientos de clculo calibrados 127
Clculo ESTD 128
Clculo de % Norm 131
Clculo ISTD 132
Anlisis 1: Calibracin 133
Anlisis 2: Muestra desconocida 134
Clculo ISTD de picos calibrados 134
Clculo ISTD de picos no calibrados 135
En este captulo se describe cmo ChemStation lleva a cabo la cuantificacin.
Proporciona detalles sobre los clculos de % de rea y % de altura, el clculo
por estndar externo o ESTD (External Standard), el clculo de % Norm, el clc-
ulo por estndar interno o ISTD (Internal Standard) y la cuantificacin de picos
no identificados.
5 Cuantificacin
Definicin de la cuantificacin
Definicin de la cuantificacin
Una vez integrados e identificados los picos, el paso siguiente del anlisis es la
cuantificacin. La cuantificacin utiliza el rea o la altura de pico para deter-
minar la concentracin de un compuesto en una muestra.
Un anlisis cuantitativo incluye varios pasos que se resumen a continuacin:
Conocimiento del compuesto que se analiza.
Establecimiento de un mtodo para analizar muestras que contengan este
compuesto.
Anlisis de una o varias muestras que contengan una o varias concentracio-
nes conocidas del compuesto para obtener la respuesta debida a dicha con-
centracin.
Alternativamente, se puede analizar una serie de estas muestras con distin-
tas concentraciones de los compuestos de inters si el detector genera una
respuesta no lineal. Este proceso se conoce como calibracin multinivel.
Anlisis de la muestra que contiene una concentracin desconocida del
compuesto para obtener la respuesta debida a la concentracin descono-
cida.
Comparacin de la respuesta de la concentracin desconocida con la res-
puesta de la concentracin conocida para determinar la cantidad del com-
puesto que est presente.
Para obtener una comparacin vlida para la respuesta de muestra descono-
cida a la de la muestra conocida, se deben adquirir y procesar los datos en
condiciones idnticas.
Cuantificacin 5
Clculos de cuantificacin
Clculos de cuantificacin
ChemStation ofrece los procedimientos de clculo siguientes para determinar
la concentracin de cada componente presente en una mezcla:
Porcentaje
Normalizacin
Estndar externo o ESTD (External Standard)
% de ESTD
Estndar interno o ISTD (Internal Standard)
% de ISTD
Los clculos utilizados para determinar la concentracin de un compuesto en
una muestra desconocida dependen del tipo de cuantificacin. Cada procedi-
miento de clculo utiliza el rea o la altura de pico para el clculo y genera un
tipo de informe distinto.
5 Cuantificacin
Factores de correccin
Los clculos de cuantificacin utilizan cuatro factores de correccin: el factor
de respuesta absoluta, el multiplicador, el factor de dilucin y la cantidad de
muestra. Estos factores se utilizan en los procedimientos de calibracin para
compensar las variaciones de la respuesta del detector a distintos componen-
tes de muestra, concentraciones, diluciones de muestra, cantidades de mues-
tra y para convertir unidades.
Factor de respuesta absoluta
El factor de respuesta absoluto de un componente de muestra representa la
cantidad del componente divida por el rea o la altura medida del pico del
componente en el anlisis de una mezcla de calibracin. El factor de respuesta
absoluto, que se utiliza en cada procedimiento de clculo calibrado, corrige la
respuesta del detector para los componentes individuales de las muestras.
Multiplicador
El multiplicador se utiliza en cada frmula de clculo para multiplicar el resul-
tado de cada componente. El multiplicador se puede utilizar para convertir
unidades en cantidades expresadas.
Factor de dilucin
El factor de dilucin es un nmero por el que se multiplican todos los resulta-
dos calculados antes de imprimir el informe. Se puede utilizar para cambiar la
escala de los resultados o corregir los cambios de una composicin de muestra
durante el trabajo previo al anlisis. Tambin se puede utilizar el factor de
dilucin para cualquier otra finalidad que requiera la utilizacin de un factor
constante.
Cuantificacin 5
Cantidad de muestra
Si se seleccionan los clculos % de ESTD o % de ISTD, los informes de ESTD e
ISTD ofrecen valores relativos en lugar de absolutos, es decir, la cantidad de
cada componente se expresa como un porcentaje de la cantidad de muestra.
La cantidad de muestra se utiliza en los informes de % de ESTD y % de ISTD
para convertir la cantidad absoluta de los componentes analizados en valores
relativos dividiendo por el valor especificado.
5 Cuantificacin
Procedimientos de clculo no calibrados
Procedimientos de clculo no calibrados
Los procedimientos de clculo no calibrados no requieren una tabla de cali-
bracin.
% de rea y % de altura
El procedimiento de clculo de % de rea proporciona el rea de cada pico del
anlisis como un porcentaje del rea total de todos los picos del anlisis. El %
de rea no requiere una calibracin previa y no depende de la cantidad de
muestra inyectada dentro de los lmites del detector. No se utiliza ningn fac-
tor de respuesta. Si todos los componentes responden del mismo modo al
detector y son eluidos, el % de rea ofrecer una aproximacin adecuada de
las cantidades relativas de los componentes.
El % de rea se utiliza por rutina cuando los resultados cualitativos son de
inters y para obtener informacin a fin de crear la tabla de calibracin nece-
saria para otros procedimientos de calibracin.
El procedimiento de clculo de % de altura proporciona la altura de cada pico
del anlisis como un porcentaje de la altura total de todos los picos del anlis-
is.
El multiplicador y el factor de dilucin del cuadro de dilogo Calibration Set-
tings o Sample Information, o bien de Sequence Table no se aplican en el clculo
del % de rea o de altura.
Cuantificacin 5
Procedimientos de clculo calibrados
Procedimientos de clculo calibrados
Los procedimientos de clculo de estndar externo o ESTD (External Stan-
dard), de normalizacin y el clculo de estndar interno o ISTD (Internal Stan-
dard) requieren factores de respuesta y, por lo tanto, una tabla de calibracin.
En la tabla de calibracin se especifica la conversin de respuestas en las uni-
dades seleccionadas mediante el procedimiento seleccionado.
5 Cuantificacin
Clculo ESTD
Clculo ESTD
El procedimiento ESTD es el procedimiento de cuantificacin bsico en el que
se analizan tanto las muestras de calibracin como las desconocidas en las
mismas condiciones. A continuacin, se comparan los resultados de la mues-
tra desconocida con los de la muestra de calibracin para calcular la cantidad
en la desconocida.
En el procedimiento ESTD, a diferencia del procedimiento ISTD, se utilizan
factores de respuesta absolutos. Los factores de respuesta se obtienen a partir
de una calibracin y luego se almacenan. En los anlisis de muestras siguien-
tes, se calculan las cantidades de los componentes aplicando estos factores de
respuesta a las cantidades de muestra medidas. Asegrese de que el tamao
de la inyeccin de muestra se puede reproducir entre anlisis, puesto que no
hay ningn estndar en la muestra para corregir las variaciones del tamao de
la inyeccin o la preparacin de la muestra.
Al preparar un informe ESTD, el clculo de la cantidad de un compuesto
determinado de una muestra desconocida se realiza en dos pasos:
1 Se calcula una ecuacin para la curva que pasa por los puntos de calibra-
cin de este compuesto utilizando el tipo de ajuste especificado en el cua-
dro de dilogo Configuracin de calibracin o Curva de calibracin.
2 La cantidad del compuesto en la muestra desconocida se calcula mediante
la ecuacin que se describe ms abajo. Puede que esta cantidad aparezca en
el informe o que se utilice en otros clculos requeridos por los valores Mul-
tiplicador, Factor de dilucin o Cantidad de muestra antes de que se
informe sobre ellos.
Si se selecciona el ESTD, la ecuacin utilizada para calcular la cantidad abso-
luta del componente x es la siguiente:
donde:
Responsex es la respuesta del pico x
RFx es el factor de respuesta del componente x, que se calcula del modo
siguiente:
Cuantificacin 5
Clculo ESTD
M es el multiplicador.
D es el factor de dilucin.
Figura 28 Factor de respuesta
El multiplicador y el factor de dilucin se obtienen del cuadro de dilogo
Calibration Settings o Sample Information.
Si se selecciona el informe % de ESTD y la cantidad de muestra es distinta de
cero, la cantidad relativa (%) de un componente x se calcular del modo
siguiente:
donde:
La cantidad absoluta de x se calcula tal como se muestra ms arriba en el
clculo de ESTD.
Cantidad
8eaueata
Cantidad x
8eaueata x
(8l}x
5 Cuantificacin
Clculo ESTD
La cantidad de muestra se obtiene del cuadro de dilogo Informacin de
muestra o Configuracin de calibracin para anlisis individuales. Si la canti-
dad de la muestra es cero, se calcular el ESTD.
Cuantificacin 5
Clculo de % Norm
Clculo de % Norm
En el mtodo de normalizacin, se aplican los factores de respuesta a las reas
de picos (o alturas) para compensar los cambios que se producen en la sensibi-
lidad del detector para los distintos componentes de las muestras.
El informe % Norm se calcula del mismo modo que un informe ESTD, con la
diferencia de que hay un paso adicional para calcular las cantidades relativas
de los compuestos en lugar de las absolutas.
El informe % Norm tiene el mismo inconveniente que los informes % de rea y
% de altura. Cualquier cambio que afecte al rea de pico total afectar al clc-
ulo de concentracin de cada pico individual. El informe de normalizacin
slo debe utilizarse si todos los componentes de inters son eluidos e integra-
dos. Si se excluyen determinados picos de un informe de normalizacin, cam-
biarn los resultados del informe de la muestra.
La ecuacin utilizada para calcular el % Norm de un componente x es la
siguiente:
donde:
El multiplicador y el factor de dilucin se obtienen del cuadro de dilogo
Calibration Settings, del cuadro de dilogo Sample Information o de la tabla de
secuencia.
Respuesta
x
es el rea (o la altura) del pico x,
RF
x
es el factor de respuesta,
(Respuesta RF) es el total de todos los productos (Respuesta RF) para todos los
picos, incluido el pico x,
M es el multiplicador,
5 Cuantificacin
Clculo ISTD
Clculo ISTD
El procedimiento ISTD elimina los inconvenientes del mtodo ESTD aadien-
do una cantidad conocida de un componente, que sirve como factor de norma-
lizacin. Este componente, el estndar interno, se aade tanto a las muestras
de calibracin como a las desconocidas.
El software recupera los factores de respuesta apropiados obtenidos de una
calibracin anterior almacenada en el mtodo. El software calcula las concen-
traciones de componentes mediante la concentracin y las reas de pico o
alturas del estndar interno del anlisis.
El compuesto utilizado como estndar interno debe ser similar al compuesto
calibrado, tanto qumicamente como en su tiempo de retencin/migracin,
pero debe ser cromatogrficamente distinguible.
Si se utiliza el procedimiento ISTD para calibraciones con una caracterstica
no lineal, se debe tener cuidado para que los errores resultantes del principio
de clculo no provoquen errores sistemticos. En las calibraciones multinivel,
la cantidad del compuesto ISTD debe mantenerse constante, es decir, la misma
para todos los niveles si la curva de calibracin del compuesto es no lineal.
En el anlisis de estndar interno, la cantidad del componente de inters est
relacionada con la cantidad del componente estndar interno por la relacin
de las respuestas de los dos picos.
Tabla 13 Procedimiento ISTD
Ventajas Inconvenientes
La variacin del tamao de la muestra no es
crtica.
La deriva del instrumento se compensa con el
estndar interno.
Los efectos de las preparaciones de muestra se
minimizan si el comportamiento qumico del
ISTD y la muestra desconocida son similares.
Se debe aadir el estndar interno a todas las
muestras.
Cuantificacin 5
Clculo ISTD
En una calibracin ISTD de dos anlisis, el clculo de la relacin de cantidad
corregida de un determinado compuesto de una muestra desconocida se rea-
liza en las fases siguientes:
Anlisis 1: Calibracin
1 Los puntos de calibracin se crean calculando una relacin de cantidad y
una relacin de respuesta para cada nivel de un pico determinado de la
tabla de calibracin.
La relacin de cantidad es la cantidad del compuesto dividida por la canti-
dad del estndar interno a este nivel.
La relacin de respuesta es el rea del compuesto dividida por el rea o la
altura del estndar interno a este nivel.
2 Una ecuacin para la curva que pasa por los puntos de calibracin se cal-
cula utilizando el tipo de ajuste de curva especificado en el cuadro de dilo-
go Configuracin de calibracin o Curva de calibracin.
Figura 29 Relacin de cantidad
8elaciun de reaueata
8elaciun de cantidad
8lx
5 Cuantificacin
Clculo ISTD
Anlisis 2: Muestra desconocida
1 Se divide la respuesta del compuesto de la muestra desconocida por la res-
puesta del estndar interno de la muestra desconocida a fin de proporcio-
nar una relacin de respuesta para la muestra desconocida.
2 Se calcula una relacin de cantidad para la muestra desconocida utilizando
la ecuacin de ajuste de curva determinada en el paso 2 anterior y la canti-
dad real de ISTD de la muestra.
Clculo ISTD de picos calibrados
Las ecuaciones utilizadas para calcular la cantidad real de un componente
calibrado para una calibracin de un nico nivel son las siguientes:
donde:
RF
x
es el factor de respuesta para el compuesto x.
La cantidad real de ISTD es el valor indicado en el cuadro de dilogo Configu-
racin de calibracin o Informacin de muestra para el estndar interno aa-
dido a la muestra desconocida.
M es el multiplicador.
Si se selecciona el tipo de informe % de ISTD, se utilizar la ecuacin siguiente
para calcular la cantidad relativa (%) del componente x:
Cuantificacin 5
Clculo ISTD
Clculo ISTD de picos no calibrados
Existen dos formas de definir el factor de respuesta que se utiliza para calcu-
lar la cantidad para los picos no identificados.
1 Se puede utilizar el factor de respuesta fija seleccionado en la casilla Con
factor de respuesta del cuadro de dilogo Configuracin de calibracin. Se
puede optar por corregir el factor de respuesta fija especificando una
correccin de ISTD.
RF
x
es el factor de respuesta seleccionado en el cuadro de dilogo
Calibration Settings.
Observar en estas frmulas que las variaciones de la respuesta ISTD se uti-
lizan para corregir la cuantificacin del componente desconocido.
2 Utilice un pico calibrado. De este modo, se asegurar de que se utiliza el
mismo factor de respuesta para la cuantificacin de todos los picos. El fac-
tor de respuesta del compuesto seleccionado y los picos no calibrados se
corrige durante todas las recalibraciones. Si el factor de respuesta del pico
calibrado cambia, el factor de respuesta de los picos no identificados tam-
bin cambiar con la misma cantidad. Si ya se ha creado una tabla de cali-
bracin, se puede seleccionar un compuesto en el cuadro combinado Uso de
compuesto del cuadro de dilogo Configuracin de calibracin.
Las ecuaciones utilizadas para calcular la cantidad real de un pico no cali-
brado x se indican ms arriba.
5 Cuantificacin
Clculo ISTD
137
6
Identificacin de picos
Definicin de la identificacin de picos 138
Reglas de asignacin de picos 139
Tipos de identificacin de picos 140
Tiempo de retencin o migracin corregido 140
Lmites de cantidad 141
Tiempos de retencin/migracin corregidos 144
Picos de referencia sencillos 144
Picos de referencia mltiples 145
Correlacin de la seal 147
Verificacin del cualificador 147
Clculo de la relacin de cualificadores 147
El proceso de identificacin 149
Bsqueda de los picos de referencia 149
Bsqueda de los picos ISTD 149
Bsqueda de los picos calibrados restantes 150
Clasificacin de picos no identificados 150
En este captulo se describen los conceptos de identificacin de picos.
Definicin de la identificacin de picos
Definicin de la identificacin de picos
Esta funcin identifica a los componentes de una muestra desconocida basn-
dose en sus caractersticas cromatogrficas o electroferogrficas, determina-
das por el anlisis de una muestra de calibracin bien definida.
La identificacin de estos componentes es un paso necesario en la cuantifica-
cin si el mtodo analtico la requiere. Las caractersticas de la seal de cada
componente de inters se guardan en la tabla de calibracin del mtodo.
La funcin del proceso de identificacin de picos es comparar cada pico de la
seal con los picos guardados en la tabla de calibracin.
La tabla de calibracin contiene los tiempos de retencin o migracin espera-
dos de los componentes de inters. Un pico que coincida con el tiempo de
retencin o migracin de uno de los picos de la tabla de calibracin recibe los
atributos de ese componente, por ejemplo, el nombre y el factor de respuesta.
Los picos que no coinciden con ninguno de los picos de la tabla de calibracin
se clasifican como desconocidos. El proceso se controla mediante:
el tiempo de retencin o migracin en la tabla de calibracin para los picos
designados como picos de referencia de tiempo,
las ventanas del tiempo de retencin o migracin especificadas para los
picos de referencia,
los tiempos de retencin o migracin en la tabla de calibracin para los
picos calibrados que no son picos de referencia de tiempo,
la ventana del tiempo de retencin o migracin especificada para estos
picos que no son de referencia, y
la presencia de otros picos de cualificacin en la relacin correcta.
Identificacin de picos 6
Reglas de asignacin de picos
Reglas de asignacin de picos
Al proceso de asignacin de picos se aplican las siguientes reglas:
si el pico de la muestra aparece dentro de la ventana de asignacin de picos
de un componente de la tabla de calibracin, al pico se le asignan los atribu-
tos de ese componente,
si dentro de la ventana de asignacin de picos aparece ms de un pico de la
muestra, entonces el pico ms cercano al tiempo de retencin o migracin
esperado es el identificado como ese componente,
si un pico es una referencia de tiempo o un patrn interno, el mayor pico de
la ventana se identifica como ese componente,
si tambin se utilizan cualificadores de picos, se usa la relacin del pico
combinada con la ventana de asignacin de picos para identificar el pico
del componente,
si el pico es un pico cualificador, se identifica el pico medido ms prximo
al pico principal del compuesto, y
si un pico de muestra no aparece en ninguna ventana de asignacin de
picos, se presenta como componente desconocido.
Tipos de identificacin de picos
Se pueden utilizar diferentes tcnicas para asignar picos de muestras a los de
la tabla de calibracin del software ChemStation.
Tiempo de retencin o migracin absoluto
Se compara el tiempo de retencin o migracin del pico de muestra con el
tiempo de retencin o migracin esperado especificado para cada componente
en la tabla de calibracin.
Tiempo de retencin o migracin corregido
Los tiempos de retencin o migracin esperados de los picos de los componen-
tes se corrigen utilizando los valores de tiempo de retencin o migracin rea-
les de uno o varios picos de referencia, y el proceso de asignacin se realiza
utilizando estos tiempos corregidos (relativos). Los picos de referencia deben
estar especificados en la tabla de calibracin.
Cualificadores de pico
Adems de identificar picos por su tiempo de retencin o migracin, pueden
utilizarse cualificadores de picos para obtener resultados ms precisos. Si ms
de un pico aparece en una ventana de tiempo de retencin o migracin, deben
utilizarse los cualificadores para identificar el compuesto correcto.
Lmites de cantidad
Los lmites de cantidad que se definen en el cuadro de dilogo Detalles de
compuesto se utilizan para cualificar la identificacin de los picos. Si la canti-
dad del compuesto identificado est dentro de los lmites, la identificacin del
pico se indica en el informe.
En el proceso de asignacin de picos se utiliza una ventana de tiempo de
retencin o migracin. La ventana de tiempo de retencin o migracin est
centrada en el tiempo de retencin o migracin de un pico esperado. Cual-
quier pico de muestra que aparezca en esta ventana se puede considerar can-
didato para la identificacin del componente.
Figura 30 en la pgina 142 muestra una ventana de tiempo de retencin o
migracin para el pico 2 que est entre 1,809 y 2,631 minutos, cuando el
tiempo de retencin o migracin esperado es de 2,22 minutos. Hay dos posibi-
lidades para el pico 2. Uno es en 1,85 minutos y otro en 2,33 minutos. Si el pico
esperado no es de referencia, se selecciona el pico ms cercano al tiempo de
retencin o migracin esperado de 2,22 minutos.
Si el pico esperado es una referencia de tiempo o un patrn interno, se selec-
ciona el mayor pico de la ventana.
En ambos casos, ChemStation selecciona el pico en 2,33 minutos. Si los dos
picos tuvieran el mismo tamao, se elige el pico ms prximo al centro de la
ventana.
Figura 30 Ventanas de tiempo de retencin o migracin
Para tratar de localizar picos se utilizan tres tipos de ventanas.
ventanas de picos de referencia, que se aplican slo a los picos de referen-
cia,
Ficu 2 Ficu 3 Ficu 1
ventana ara icu 2
Ficu 1
ventana de picos que no son de referencia, que se aplican a todos los dems
picos calibrados, y
valores de ventana especficos para componentes individuales que se esta-
blecen en el cuadro de dilogo Compound Details.
Los valores por defecto de estas ventanas se introducen en el cuadro de dil-
ogo Configuracin de calibracin. La anchura a ambos lados del tiempo de
retencin o migracin que define la ventana de asignacin de picos es la suma
de las ventanas absoluta y porcentaje.
Una ventana del 5% significa que el pico debe tener un tiempo de retencin o
migracin por debajo del 2,5% y por encima del 2,5% del tiempo de retencin
calibrado para ese pico. Por ejemplo, un pico con un tiempo de retencin o
migracin de 2,00 en el anlisis de calibracin debe aparecer entre 1,95 y 2,05
minutos en los anlisis siguientes.
Por ejemplo, una ventana absoluta de 0,20 minutos y una relativa del 10% pro-
ducen una ventana de tiempo de retencin o migracin de entre 1,80 y 2,20
minutos.
1,80 min = 2,00 min - 0,10 min (0,20 min/2) - 0,10 min (10% de 2,00 min).
2,20 min = 200 min + 0,10 min (0,20 min/2) + 0,10 min (10% de 2,00 min).
Tiempos de retencin/migracin corregidos
La asignacin de picos por sus tiempos de retencin/migracin absolutos
puede ser sencilla, pero no siempre es fiable. Cada tiempo de retencin/migra-
cin puede variar ligeramente debido a pequeos cambios en las condiciones o
en la tcnica. Como resultado, los picos pueden darse fuera de la ventana de
asignacin de picos y, por tanto, no identificarse.
Una tcnica para intentar resolver las inevitables fluctuaciones que ocurren
cuando se utilizan los tiempos de retencin/migracin absolutos, es expresar
los tiempos de retencin/migracin de los componentes en relacin a uno o
varios picos de referencia.
Los picos de referencia se identifican en la tabla de calibracin con una
entrada en la columna de referencia de ese pico. La tcnica de asignacin rela-
tiva de picos utiliza el pico o los picos de referencia para modificar la posicin
de las ventanas de asignacin de picos y poder compensar las derivas en los
tiempos de retencin/migracin de los picos de la muestra.
Si no se definen picos de referencia en el mtodo o ChemStation no se puede
identificar al menos un pico de referencia durante el anlisis, el software utili-
zar los tiempos de retencin/migracin absolutos para la identificacin.
Picos de referencia sencillos
Se crea una ventana de tiempo de retencin o migracin para el pico de refe-
rencia en torno a su tiempo de retencin o migracin. El pico mayor que apa-
rece en esta ventana se identifica como el pico de referencia. Se corrigen los
tiempos de retencin o migracin esperados del resto de los picos en la tabla
de calibracin, en proporcin a la relacin del tiempo de retencin o migra-
cin esperado con el tiempo de retencin o migracin real del pico de referen-
cia.
Picos de referencia mltiples
La correccin de los tiempos de retencin o migracin con un solo pico de
referencia se basa en la suposicin de que la desviacin del tiempo de reten-
cin o migracin real respecto a los tiempos de retencin o migracin espera-
dos cambia de un modo uniforme y lineal segn progresa el anlisis. A
menudo, durante un anlisis largo, el tiempo de retencin o migracin no cam-
bia de manera uniforme. En estos casos se obtienen mejores resultados
usando mltiples picos de referencia a intervalos durante el anlisis. De esta
manera la seal se divide en zonas separadas. Dentro de cada zona se supone
que la desviacin entre los tiempos de retencin o migracin cambia lineal-
mente, pero la velocidad del cambio se determina independientemente para
cada zona.
NOTA
El algoritmo de correccin del tiempo puede fallar si los tiempos de retencin de varios
picos de referencia estn demasiado prximos entre s y no se distribuyen en el tiempo
total del anlisis.
Puede detectarse un componente con ms de una seal. Aunque sea aplicable
a todos los formularios de cromatografa con detectores mltiples o detectores
capaces de producir seales mltiples, la deteccin multiseal se utiliza prin-
cipalmente en cromatografa de lquidos con varios detectores de longitud de
onda y diodo-array. Estos detectores se configuran normalmente de forma que
la longitud de onda ms prxima al rea de absorcin mayor se utiliza para
definir el pico principal en la tabla de calibracin. En Figura 31 en la
pgina 146 es lambda
1
.
Las otras dos longitudes de onda adquiridas como seales pueden utilizarse
como cualificadores de pico. En la figura, son lambda
2
y lambda
3
.
Figura 31 Cualificadores de pico
Los picos de un compuesto tienen una relacin de respuesta constante sobre
longitudes de onda diferentes.
La respuesta del pico del cualificador es un porcentaje determinado de la res-
puesta del pico principal. Los lmites que determinan el rango aceptable de la
respuesta esperada se configuran en la tabla de calibracin al seleccionar la
8eaueata
Lungitud de unda
Lungitud de unda del icu rincial
Lungitud de unda de
icu cualificadur
opcin Detalles de identificacin. Si la relacin entre el cualificador del pico
principal lambda
1
y el pico del cualificador, por ejemplo, lambda
3
se encuen-
tra entre los lmites permitidos, entonces se puede confirmar la identidad del
compuesto.
Correlacin de la seal
Correlacin de la seal significa que dos picos medidos en seales de detector
diferentes en una ventana de tiempo definido estn asignados al mismo com-
puesto. La ventana de correlacin de la seal se puede controlar con el parm-
etro SignalCorrWin en la tabla QuantParm del registro _DaMethod. La correlacin
de seales se desactiva cuando se ajusta la ventana de correlacin a 0,0 minu-
tos (consulte la Gua de Programacin de Macros para ms informacin).
Cuando est desactivada la correlacin de la seal, los picos que eluyen al
mismo tiempo de retencin/migracin se tratan como componentes diferen-
tes.
La ventana de correlacin de la seal por defecto para datos LC, CE, CE/MS y
LC/MS es 0,03 minutos y para datos GC es 0,0 minutos.
Verificacin del cualificador
Si se habilita la correlacin de la seal, la verificacin del cualificador est
activa por defecto para todos los tipos de fichero de datos. Puede deshabili-
tarse fijando el sealizador UseQualifiers en la tabla Quantification Parameters del
mtodo (consulte la gua de programacin de macros para ver ms detalles).
La verificacin del cualificador tambin se deshabilita al desactivar la correla-
cin de la seal.
Clculo de la relacin de cualificadores
Cuando se habilita la verificacin de cualificadores de un compuesto, la rela-
cin del tamao del cualificador y del tamao del pico principal se verifica en
relacin a los lmites calibrados. El tamao puede ser la altura o el rea en
funcin de los ajustes de la base de clculo del Informe especfico.
Los picos del cualificador pueden calibrarse del mismo modo que los com-
puestos objetivo. El usuario no necesita especificar la relacin de cualificador
esperada. La relacin de cualificador esperada se calcula de forma automt-
ica:
ambos se miden en el tiempo de retencin del compuesto.
El parmetro QualTolerance define el rango aceptable de la relacin del cuali-
ficador, por ejemplo, 20%.
La tolerancia es un porcentaje absoluto y puede ajustarse en la interfase de
usuario de la tabla de calibracin (Detalles de identificacin).
Para calibraciones multinivel, ChemStation calcula una tolerancia de cualifi-
cador mnima basada en las relaciones del cualificador medidas en cada nivel
de calibracin. La tolerancia mnima del cualificador se calcula con la ecua-
cin siguiente:
donde q
i
es la relacin del cualificador medido en el nivel i.
El proceso de identificacin
Cuando intentamos identificar picos, el software realiza tres pasos a travs de
los datos de integracin.
Bsqueda de los picos de referencia
El primer paso identifica los picos de referencia del tiempo. El software busca,
en los tiempos de retencin/migracin de picos del anlisis, correspondencias
en las ventanas de retencin/migracin de los picos de referencia de la tabla
de calibracin. Un pico del anlisis se identifica como pico de referencia en la
tabla de calibracin si el tiempo de retencin/migracin del pico del anlisis
est dentro de la ventana construida para el pico de la tabla de calibracin.
Si se encuentra ms de un pico en una ventana, el pico con mayor rea o altura
seguido de una asignacin de cualificador de la seal positiva, si se configura,
se elige como pico de referencia.
Despus de encontrar un pico de referencia, la diferencia entre su tiempo de
retencin/migracin y el proporcionado en la tabla de calibracin se utiliza
para ajustar los tiempos de retencin/migracin esperados del resto de los
picos de la tabla de calibracin.
Bsqueda de los picos ISTD
El segundo paso identifica los picos estndar internos definidos. Si un pico no
ha sido ya identificado como ISTD, puede serlo como pico de referencia de
tiempo. Los picos ISTD son identificados por ventanas de tiempo de reten-
cin/migracin y cualificadores de picos. Si se encuentra ms de un pico en la
misma ventana ISTD, se escoge el pico ms grande.
Bsqueda de los picos calibrados restantes
El tercer paso identifica todos los picos restantes enumerados en la tabla de
calibracin. Los picos de no referencia de la tabla de calibracin se asignan a
los picos de anlisis restantes utilizando la ventana RT.
Cada pico calibrado que no sea de referencia tiene su propio tiempo de reten-
cin/migracin en la tabla de calibracin que se ajusta para el anlisis con-
creto en funcin de la preidentificacin de los picos de referencia de tiempo.
La ventana de tiempo de retencin/migracin del pico calibrado se ajusta en
funcin del tiempo de retencin/migracin corregido del pico calibrado.
Si en la misma ventana se encuentra ms de un pico, se escoge aquel con el
tiempo de retencin/migracin ms cercano al esperado y que adems cumpla
las especificaciones del cualificador opcional.
Clasificacin de picos no identificados
Si quedan picos sin identificar, hay que clasificarlos como desconocidos. Che-
mStation intenta agrupar los picos desconocidos que pertenecen a un mismo
compuesto. Si se ha detectado un pico en ms de una seal, los picos que ten-
gan el mismo tiempo de retencin/migracin en todas las seales se agrupan
en un compuesto.
Se informa sobre los picos desconocidos si se ha realizado la seleccin corres-
pondiente en el cuadro de dilogo Configuracin de calibracin.
151
7
Calibracin
Tabla de calibracin 153
Curva de calibracin 154
Muestras desconocidas 156
Tipos de calibracin 157
Calibracin de un nico nivel 157
Calibracin multinivel 158
Rangos de calibracin 160
Ajustes de la curva de calibracin 160
Tratamiento del origen 160
Calibracin de grupo 164
Suma de picos 165
Recalibracin 166
Definicin de la recalibracin 166
Por qu recalibrar? 166
Recalibracin manual 166
Recalibraciones con suma de picos 167
Opciones de recalibracin 167
Formas de recalibrar 168
Recalibracin de picos no identificados 168
En este captulo se describe la calibracin de ChemStation.
7 Calibracin
Calibracin La calibracin es el proceso de determinar los factores de respuesta que se uti-
lizan para calcular las concentraciones absolutas de componentes mediante la
inyeccin de estndares de calibracin especialmente preparados. La tabla de
calibracin se utiliza tambin para la identificacin. Consulte Identificacin
de picos en la pgina 137.
Compuesto Un compuesto qumico incorpora varios picos en una calibracin de mltiples
seales, normalmente, uno por seal. En calibraciones de una sola seal, un
compuesto se refiere a un pico.
Nivel de calibra-
cin
El nivel de calibracin comprende los puntos de calibracin de una concentra-
cin de muestras de calibracin. En una calibracin multiseal, los puntos de
calibracin pueden distribuirse entre varias seales.
Punto de calibra-
cin
Un punto de calibracin corresponde a una relacin cantidad/respuesta de un
pico en la curva de calibracin.
Muestra de cali-
bracin
Una muestra de calibracin, tambin llamada estndar de calibracin o mezcla
estndar, es una muestra que contiene una cantidad conocida del compuesto
que se va a cuantificar. En el software, se hace referencia a la muestra de cali-
bracin como una inyeccin desde el vial de la muestra.
Las muestras de calibracin pueden comprarse a distribuidores de productos
qumicos o pueden prepararse con una cantidad exactamente medida de un
compuesto puro. La cantidad de compuesto en la muestra de calibracin se
expresa normalmente como una concentracin, es decir, en unidades ng/l.
Calibracin 7
Tabla de calibracin
Tabla de calibracin
La tabla de calibracin especifica las conversiones de las reas o alturas de
picos en las unidades elegidas, de acuerdo con el procedimiento de clculo
seleccionado. Contiene una lista de tiempos de retencin/migracin de un
anlisis de calibracin. Estos tiempos de retencin/migracin se comparan
con los de los picos en un anlisis de muestra. Donde se produce una coinci-
dencia, se supone que el pico de la muestra representa el mismo componente
que aquel de la tabla de calibracin, consulte el Identificacin de picos en la
pgina 137. Durante un anlisis o mientras se genera un informe, las cantida-
des que se introducen para cada pico se utilizan para calcular las cantidades
del procedimiento de clculo seleccionado para el informe. El tipo y la canti-
dad de informacin requerida para crear una tabla de calibracin varan en
funcin del tipo de procedimiento de clculo seleccionado.
Para crear una tabla de calibracin, se necesita la siguiente informacin:
el tiempo de retencin/migracin para el pico de cada componente de una
mezcla de calibracin, y
la cantidad de cada componente utilizada para hacer la mezcla de calibra-
cin, expresada en unidades coherentes.
7 Calibracin
Curva de calibracin
Curva de calibracin
Una curva de calibracin es una presentacin grfica de los datos de cantidad
y respuesta de un compuesto obtenidos de una o varias muestras de calibra-
cin.
Normalmente se inyecta una porcin alcuota de la muestra de calibracin, se
obtiene una seal y la respuesta se determina calculando el rea o la altura del
pico, similar a Figura 32 en la pgina 154.
Figura 32 Seal de la muestra de calibracin (10 ng/l) y curva de calibracin
El coeficiente de correlacin se muestra con el grfico de la curva de calibra-
cin. El coeficiente de correlacin es la raz cuadrada del coeficiente de regre-
sin y proporciona la medida del ajuste de la curva de calibracin entre los
puntos de datos. El valor del coeficiente se da a tres cifras decimales en el
rango:
0,000 a 1,000
donde:
0,000 = no hay ajuste
1,000 = ajuste perfecto
8eaueata
1ieuu (uin}
8eaueata
Cantidad ng/l
Calibracin 7
Curva de calibracin
Para cada nivel de calibracin, se muestra el resto relativo. que se calcula con
la siguiente frmula:
donde:
relRES = porcentaje de resto relativo
La respuesta calculada representa el punto de la curva de calibracin.
La desviacin estndar residual, que se imprime en algunos informes y
cuando se calculan las curvas y tabla de calibracin de la impresin utiliza la
siguiente frmula:
donde:
rResSTD = desviacin estndar residual
Respcalibratedi = respuesta calibrada del punto i
Respcalculatedi = respuesta calculada del punto i
n = nmero de puntos de calibracin
7 Calibracin
Muestras desconocidas
Muestras desconocidas
Una muestra desconocida es una muestra que contiene una cantidad descono-
cida de un compuesto para cuantificar.
Para descubrir qu cantidad de compuesto hay en la muestra desconocida, es
necesario:
crear una curva de calibracin para el compuesto,
inyectar una porcin alcuota de la muestra desconocida y analizarla del
mismo modo que la muestra de calibracin,
determinar la respuesta a partir de la seal, es decir, el rea o la altura del
pico causada por la cantidad desconocida de compuesto y
utilizar la curva de calibracin para calcular la cantidad de compuesto exis-
tente en la muestra desconocida.
Por ejemplo, si el rea del pico de la muestra desconocida es 500, se puede
determinar que la cantidad es 5 ng/l utilizando la curva de calibracin que se
muestra en Figura 33 en la pgina 156.
Figura 33 Seal de muestra desconocida y curva de calibracin
8eaueata
rea - 5
8eaueata
1ieuu (uin} Cantidad (ng/l}
8eaueata de
deacunucidu
- 5
Cantidad de
deacunucidu
- ng/l
Calibracin 7
Tipos de calibracin
Tipos de calibracin
ChemStation ofrece dos tipos de calibraciones, calibraciones de un nico nivel
y calibraciones multinivel.
Calibracin de un nico nivel
La curva de calibracin que se muestra en Figura 34 en la pgina 157 contiene
un punto, es decir, un nivel. Para la curva de calibracin de un nico nivel, se
asume que la respuesta del detector es lineal sobre el rango de trabajo de con-
centraciones para las muestras de inters. El factor de respuesta del pico de
un componente dado se obtiene de la inversa de la pendiente de la lnea de la
curva de calibracin entre el punto y el origen. Una desventaja de la calibra-
cin de un nico nivel es que la respuesta del detector a la concentracin de
muestra es lineal y pasa a travs del origen en un grfico de concentracin
frente a respuesta. Esto no siempre es verdad y puede conducir a resultados
imprecisos.
Figura 34 Curva de calibracin de un nico nivel
1
Cuncentraciun [ng/l]
8eaueata
1 Curva de calihraciun
7 Calibracin
Tipos de calibracin
Para obtener resultados cuantitativos precisos, la curva de calibracin debe
tener al menos dos niveles. Estos niveles tendran que agrupar las cantidades
que se esperan encontrar en las muestras desconocidas.
Figura 35 Curva de calibracin de dos niveles
Por ejemplo, si desea cuantificar un compuesto y las muestras desconocidas se
estiman en un rango de 1 a 10 ng/l, entonces la curva de calibracin tendra
que tener al menos dos niveles tal y como se muestra en Figura 35 en la
pgina 158.
Lmites de cantidad
ChemStation le permite definir los rangos de cuantificacin vlidos en trmi-
nos de cantidades absolutas de cada compuesto.
Calibracin multinivel
Se puede utilizar la calibracin multinivel cuando no sea lo suficientemente
exacta como para asumir que un componente tiene una respuesta lineal o con-
firmar la linealidad del rango de calibracin. Cada nivel de calibracin corres-
ponde a una muestra de calibracin con una concentracin particular de
componentes. Las muestras de calibracin se prepararn de forma que la con-
centracin de cada componente vare dentro del rango de concentraciones
1
8eaueata
1 Curva de calihraciun
1
1
Calibracin 7
Tipos de calibracin
esperadas en los ejemplos desconocidos. De este modo es posible permitir un
cambio en la respuesta del detector con concentracin y calcular los factores
de respuesta en consecuencia.
La curva de calibracin multinivel tiene tres niveles y muestra un ajuste lineal
desde el origen. Este mtodo de ajuste lineal desde el origen es similar a la
calibracin del mtodo de un nico punto. Se asume que la respuesta del
detector a la concentracin es lineal. La diferencia entre los dos tipos de cali-
bracin es que, con el ajuste lineal la pendiente de la respuesta del detector
puede determinarse con un mejor ajuste a travs de un nmero de puntos, uno
para cada nivel.
Figura 36 Curva de calibracin multinivel con tres niveles
La tabla de calibracin correspondiente, que es la tabulacin de la informa-
cin utilizada para generar esta curva, puede parecer similar a la mostrada en
Tabla 14 en la pgina 159.
En este ejemplo, las muestras de calibracin utilizadas para generar los tres
niveles se han identificado como 1, 2 y 3.
Tabla 14 Tabla de calibracin
Nivel Cantidad (ng/l) Respuesta (cuentas de rea)
1 1 100
2 5 500
3 10 1000
1
8eaueata
1
Curva de calihraciun
1
1 5
5
7 Calibracin
Tipos de calibracin
Rangos de calibracin
Cada calibracin multinivel es vlida para el rango de concentraciones utiliza-
das en las muestras de calibracin. La mejor aproximacin es la extrapolacin
de una curva de calibracin, especialmente si no es lineal. El rango de calibra-
cin de cada componente puede definirse en el cuadro de dilogo Detalles de
compuesto. Cada entrada de ese compuesto puede expresarse como lmites
inferiores y superiores. Si se exceden estos lmites, se anota en el informe.
Ajustes de la curva de calibracin
Hay varios clculos de ajuste de curva disponibles para usar en calibraciones
multinivel.
Lineal de trazos
Lineal
Registro
Alimentacin de corriente
Exponente
Cuadrtico
Cbico
Promedio (respuesta/cantidad)
Ajuste no lineal
En algunos casos, la respuesta del detector a los cambios en la concentracin
de muestra no es lineal. Para estos tipos de anlisis, no es apropiado el mtodo
de calibracin de regresin lineal y habra que utilizar un clculo de la calibra-
cin multinivel.
Tratamiento del origen
Existen cuatro formas de tratar el origen cuando se representa grficamente
la curva de respuesta:
ignorar el origen,
Calibracin 7
Tipos de calibracin
incluir el origen,
forzar el origen, o
conectar el origen.
Para forzar la inclusin del origen en la curva de calibracin, los puntos de
calibracin se reflejan sobre el origen desde el primer cuadrante hasta el ter-
cero. La utilizacin de todos los puntos para el clculo de la regresin asegura
que la curva de calibracin resultante pase por el origen. Esto tambin se des-
cribe en Figura 37 en la pgina 161.
Figura 37 Forzar el origen para incluirlo
Para obtener ms informacin sobre los ajustes de la curva de calibracin y
tratamiento del origen, consulte el fichero de ayuda en lnea.
Ponderacin del punto de calibracin
Cuando se configura la curva de calibracin predeterminada, puede especifi-
carse la ponderacin relativa (o importancia) de varios puntos de calibracin
utilizados para generar la curva.
8eaueata
Curva de calihraciun
Cantidad (ng/l}
(}
(}
(}
7 Calibracin
Tipos de calibracin
Se pueden seleccionar las siguientes opciones de ponderacin:
Peso Descripcin
Igual Todos los puntos de calibracin tienen el mismo peso en la curva.
Lineal (Ctd.) Un punto de calibracin con la cantidad x tiene una ponderacin 1/x
normalizada a la cantidad ms pequea, de forma que el factor de peso mayor
es 1. La normalizacin se calcula multiplicando el peso por la cantidad ms
pequea. Por ejemplo, el peso de un punto de calibracin con la cantidad x es
(1/x) a donde a es la cantidad menor del compuesto calibrado preparado en
los estndares de calibracin.
Si se incluye el origen se asigna la media de las ponderaciones de otros puntos
de calibracin.
Lineal (Rpta.) Un punto de calibracin con la respuesta x tiene una ponderacin 1/y
normalizada a la respuesta ms pequea, de forma que el factor de peso mayor
es 1. La normalizacin se calcula multiplicando el peso por la respuesta ms
pequea. Por ejemplo, el peso de un punto de calibracin con la cantidad y es
(1/y) b donde b es la respuesta correspondiente a la cantidad menor del
compuesto calibrado preparado en los estndares de calibracin.
Si se incluye el origen se asigna la media de las ponderaciones de otros puntos
de calibracin.
Cuadrtico (Ctd.)
Un punto de calibracin con la cantidad x tiene una ponderacin 1/x
2
normalizada a la cantidad ms pequea de forma que el factor de peso mayor
es 1. La normalizacin se calcula multiplicando el peso con la cantidad ms
pequea. Por ejemplo, el peso de un punto de calibracin con la cantidad x es
(1/x) a donde a es la cantidad menor del compuesto calibrado preparado
en los estndares de calibracin.
Cuadrtico (Rpta.)
Un punto de calibracin con la respuesta x tiene una ponderacin 1/y
2
normalizada a la respuesta ms pequea de forma que el factor de peso mayor
es 1. La normalizacin se calcula multiplicando el peso con la respuesta ms
pequea. Por ejemplo, el peso de un punto de calibracin con la respuesta y es
(1/y) b donde b es la respuesta correspondiente a la cantidad menor del
compuesto calibrado preparado en los estndares de calibracin.
N Calibraciones Un punto de calibracin se pondera segn el nmero de recalibraciones del
punto. No se efecta ninguna normalizacin
Calibracin 7
Tipos de calibracin
Las ponderaciones cuadrticas del punto de calibracin pueden utilizarse, por
ejemplo, para ajustar la dispersin de los puntos de calibracin. De esta
forma, se asegura que los puntos de calibracin ms cercanos al origen, que
pueden normalmente medirse con ms exactitud, tengan mayor peso que los
puntos de calibracin alejados del origen, que pueden dispersarse.
La decisin de qu tipo de ponderacin del punto de calibracin utilizar, debe-
ra basarse en los requisitos del mtodo.
7 Calibracin
Calibracin de grupo
Calibracin de grupo
La calibracin de grupo puede aplicarse a compuestos en los que no se cono-
cen las concentraciones de forma individual, sino que se conoce la suma de
concentraciones del grupo de compuestos. Un ejemplo son los ismeros para
los que se calibran los grupos completos de compuestos. Para ello, se utilizan
las siguientes frmulas:
Calibracin
donde:
ConcAB es la concentracin del grupo de compuestos formada por un com-
puesto A y uno B
Respuesta
A
es el rea o altura de un compuesto A
RF
A
es el factor de respuesta
Para compuestos pertenecientes a un grupo de compuestos se asumen facto-
res de respuesta iguales:
Por tanto, la concentracin de un compuesto perteneciente a un grupo se cal-
cula del siguiente modo:
Calibracin 7
Suma de picos
Suma de picos
La tabla de suma de picos se proporciona para ciertas aplicaciones de las
industrias petroqumica y farmacutica que pueden realizarse de manera ms
eficaz con las siguientes funciones:
Suma de las reas de picos que se encuentran en un rango especificado por
el usuario.
Suma de las reas de un rango de picos y clculos con un solo multiplica-
dor.
Suma de las reas de todos los picos con el mismo nombre.
La tabla de suma de picos es similar, con ciertas diferencias, a la tabla de cali-
bracin estndar. Como la tabla de calibracin, se asocia con el mtodo actual.
NOTA
Es necesario crear una tabla de calibracin para un anlisis antes de crear la tabla de suma
de picos.
7 Calibracin
Recalibracin
Recalibracin
Definicin de la recalibracin
La recalibracin es el proceso utilizado para actualizar un nivel de una curva
de calibracin. Cuando se recalibra se analiza otra muestra que contiene los
mismos compuestos de calibracin que la original y, lo ms importante, la
misma cantidad de stos. Cuando se analiza la muestra de calibracin, se
obtienen los factores de respuesta y los tiempos de retencin/migracin actua-
lizados. Puede elegirse realizar la media de los factores de respuesta de un
nmero determinado de anlisis de calibracin de forma que los factores de
respuesta se ponderen por igual.
Por qu recalibrar?
La mayora de las calibraciones tienen una vida limitada debido a los cambios
en la cromatografa. La recalibracin es necesaria para mantener la exactitud
de los anlisis. Por ejemplo, se ha creado una tabla de calibracin para el com-
puesto cafena que se usa cuando es necesario cuantificar muestras que con-
tienen cafena. En algn momento ser necesario reemplazar la
columna/capilar. Aunque la columna/capilar se reemplace con una exacta-
mente del mismo tipo, no se comportar exactamente de la misma manera que
la columna/capilar anterior cuando se cre por primera vez la tabla de calibra-
cin para la cafena. Por tanto, para asegurar la coherencia, se deben recali-
brar los niveles de la tabla de calibracin antes de utilizar la nueva
columna/capilar para analizar las muestras que contengan cantidades desco-
nocidas de cafena. De este modo se cuantifican muestras analizadas bajo las
mismas condiciones de sistema.
Recalibracin manual
Puede introducir manualmente la informacin de calibracin del pico y nor-
malizar la tabla de calibracin con la opcin Configuracin manual del cuadro
de dilogo Nueva tabla de calibracin. Generalmente, se produce un nuevo
Calibracin 7
Recalibracin
mtodo de calibracin analizando una mezcla de calibracin estndar,
creando una tabla de calibracin e introduciendo los picos calibrados para
obtener factores de respuesta. Este enfoque no es eficaz para algunas aplica-
ciones, como en la industria petroqumica, donde se han analizado los mismos
compuestos durante muchos aos y los factores de respuesta de varios com-
puestos y detectores estn ya disponibles.
Puede crear una tabla de calibracin de forma manual introduciendo los picos
y los factores de respuesta en la tabla de calibracin, recalibrando el mtodo
con un estndar que contenga al menos un pico de respuesta de referencia y
seleccionando la actualizacin %Delta.
Recalibraciones con suma de picos
Cuando se realiza una recalibracin, los rangos de tiempo de retencin/migra-
cin en la tabla de suma de picos del mtodo se actualizarn antes de que se
proceda con la recalibracin real. Las recalibraciones de la suma de picos se
realizan de este modo para asegurar que se incorpora el delta en los clculos
de tiempo.
Opciones de recalibracin
Existen diferentes formas de actualizar las respuestas en la tabla de calibra-
cin con los nuevos datos de calibracin.
Promedio
El promedio de los anlisis de calibracin se calcula con la siguiente frmula:
Promedio flotante
Se calcula la media ponderada de los anlisis de calibracin. El peso actuali-
zado se fija en el cuadro de dilogo Configuracin de recalibracin.
7 Calibracin
Recalibracin
Sustituir
Los nuevos valores de respuesta reemplazan a los anteriores.
Formas de recalibrar
La recalibracin se puede efectuar de dos formas con el software ChemSta-
tion. Puede recalibrar de forma interactiva o automtica durante una secuen-
cia de anlisis automatizados. En la recalibracin interactiva el proceso de
recalibracin se realiza utilizando el software ChemStation despus de inyec-
tar una o varias muestras de calibracin. En la recalibracin con secuencia se
debe especificar cundo se llevar a cabo el proceso, pero la recalibracin en
s la sigue realizando el software de automatizacin. Para obtener ms infor-
macin, consulte Recalibracin automtica en la pgina 192.
Si desea informacin sobre cmo realizar la recalibracin con el software, con-
sulte el apartado Cmo... de la ayuda.
Recalibracin de picos no identificados
Hay tres formas de recalibrar picos no identificados.
Sin recalibracin
Si un pico de la tabla de calibracin no se puede identificar en los resultados
de integracin, se aborta la calibracin. Si esto sucede en una secuencia, tam-
bin se aborta la secuencia.
Recalibracin parcial
Esta funcin permite la recalibracin slo de los picos identificados. Si faltan
picos, no se aborta la calibracin pero se anota en el informe que faltan picos.
Calibracin 7
Recalibracin
Recalibracin de todos los tiempos de retencin/migracin
Esta funcin permite la recalibracin del tiempo de retencin/migracin de
todos los picos identificados y no identificados. Para ello se utilizan los tiem-
pos de retencin/migracin de los picos identificados. Los factores de res-
puesta de los picos no identificados no se actualizan.
7 Calibracin
Recalibracin
171
8
Automatizacin
Definicin de la automatizacin 173
Definicin de una secuencia o plantilla de secuencia 174
Preferencias: ficha Secuencia 175
Parmetros de secuencia 177
Tabla de secuencias 178
Creacin de secuencias(Secuencias y plantillas de secuencias) 179
Utilizacin del editor de tablas de secuencias 179
Utilizacin del botn de insercin de rango de viales 179
Utilizacin del botn de adicin de lneas 179
Utilizacin del botn de campos personalizados 180
Uso de secuencias (secuencias y plantillas de secuencias) 181
Muestras prioritarias 181
Secuenciacin con muestras de control 181
Interrupcin de una secuencia 181
Cancelacin de una secuencia 182
Pausa de una secuencia 182
Anlisis de una secuencia parcial 182
Archivo de registro de secuencias 184
Qu ocurre cuando se analiza una secuencia? 185
Estructura del fichero de datos de la secuencia (Activar creacin de car-
peta nica) 187
Asignacin de nombres a ficheros de datos en una secuencia 188
Asignacin automtica de nombre al fichero de datos durante una
secuencia 188
Introduccin manual de nombres de ficheros de datos 189
Operacin postsecuencia 190
Tiempo de espera para instrumento no listo (slo LC y CE) 190
8 Automatizacin
Recalibracin
Tiempo de espera (slo LC y CE) 191
Recalibracin automtica 192
Especificacin de recalibraciones 193
Parmetros de recalibracin de la tabla de secuencia 193
Tipos de secuencia 196
Secuencias de calibracin explcita 197
Secuencias de calibracin cclicas de un nico nivel 198
Secuencias de calibracin cclicas multinivel 199
Orden de anlisis del mtodo A 200
Orden de anlisis del mtodo B 201
Calibraciones explcitas y cclicas juntas 203
Ejemplo 203
Orden de anlisis SimpReg 204
Secuencias de calibracin cclica con agrupamiento 206
Ejemplo 206
Operacin de secuencia agrupada 207
Ejemplo 207
Secuencias de recalibracin cclica con mltiples viales que contienen la
misma dilucin de un estndar 210
Secuencia de recalibracin cclica con uso del vial de calibracin
"Round-Robin" 210
Recalibraciones cclicas en las que cada calibracin utiliza un vial
diferente 212
Secuencia de agrupamiento que utiliza viales diferentes para grupo de
apertura y cierre 212
En este captulo se describen los conceptos de automatizacin. Se explica
cmo utilizar secuencias en ChemStation, qu ocurre cuando se analiza una
secuencia y cmo personalizar secuencias.
Automatizacin 8
Definicin de la automatizacin
Definicin de la automatizacin
La automatizacin es el anlisis desatendido de ms de una inyeccin.
La parte de secuencias del software ChemStation le permite automatizar la
adquisicin, evaluar datos y generar informes.
8 Automatizacin
Definicin de una secuencia o plantilla de secuencia
Definicin de una secuencia o plantilla de secuencia
Una secuencia es una serie de instrucciones que automatizan el anlisis de
muestras.
Una secuencia puede utilizarse para inyectar automticamente cada muestra,
obtener los datos y analizarlos segn el mtodo especificado para esa muestra.
Cada vial de muestra de una secuencia puede analizarse con un mtodo anal-
tico diferente y, por lo tanto, utilizar diferentes conjuntos de condiciones cro-
matogrficas/electroferogrficas y parmetros de evaluacin.
ChemStation introduce dos modos de almacenamiento de datos que le permi-
ten elegir el modelo de almacenamiento de datos que corresponda a su flujo
de trabajo. Estos modos influyen en el uso de la secuencia:
Activar creacin de carpeta nica
Desactivar creacin de carpeta nica
La activacin de la creacin de carpeta nica para la coherencia de datos de
muestra utiliza secuencias como plantillas de secuencia que se pueden utili-
zar para ejecutar la adquisicin varias veces; sin embargo, no se utilizan para
reprocesar en Mtodo y Control de anlisis. Cuando la plantilla de secuencia
est activa, se crea un contenedor de datos de secuencia que contiene todos
los ficheros relacionados. Si se reutiliza la plantilla de secuencia, se crea un
nuevo contenedor de datos de secuencias para cada reutilizacin.
La desactivacin de la creacin de carpeta nica almacena todos los datos en
un directorio. Los ficheros de secuencia *.s no se utilizan como plantillas de
secuencia, con lo que volver a ejecutar la secuencia puede sobrescribir los
datos si no se modifica el directorio de datos desde el usuario.
Las secuencias y plantillas de secuencia disponibles (*.s) estn visibles en
ChemStation Explorer. Para navegar fcil y rpidamente, puede aadir ubica-
ciones de secuencia o de plantilla de secuencia adicionales al rbol de selec-
cin de ChemStation Explorer utilizando la ficha Rutas del cuadro de dilogo
Preferencias.
Automatizacin 8
Preferencias: ficha Secuencia
En la ficha Secuencia, el usuario puede escoger dos modelos de almacena-
miento de datos diferentes. Estos modos definen la forma en que los datos de
la secuencia se almacenan en ChemStation.
En este modo de almacenamiento de datos, existe un vnculo fuerte y perma-
nente entre los datos primarios y el mtodo. Cada fichero de datos, ya se
adquiera en una secuencia o en un anlisis nico, tiene vnculos a, al menos,
dos mtodos: el mtodo utilizado para adquirir los datos y el utilizado para el
anlisis de los datos.
Los datos de secuencias se almacenan en un contenedor de datos con un nom-
bre de contenedor de secuencia definido. Puede especificar las convenciones
de nomenclatura para los contenedores de secuencias en la ficha Secuencia
del cuadro de dilogo Preferencias. Si no se especifica ninguna estructura de
nombre, se utiliza una estructura de nombre de secuencia predeterminada. La
ficha Secuencia se utiliza slo para la adquisicin de datos y, por tanto, est
presente slo en los sistemas en lnea.
La estructura del nombre de secuencia puede contener varias secciones. El
sistema crea un nombre para el contenedor de la secuencia de datos determi-
nado por las secciones de estructura del nombre de secuencia que elija. Todos
los ficheros de datos, mtodos, el libro de registro de secuencias, el archivo
nombre_secuencia.s y el archivo nombre_secuencia.b de la secuencia se alma-
cenan en el contenedor de datos de secuencias. El contenedor de datos de
secuencias se crea cuando se inicia la secuencia.
Los archivos de secuencias (.s) se utilizan como plantillas de secuencia, con-
cepto que permite ejecutar cualquier secuencia.s varias veces sin sobrescribir
los datos existentes y sin cambiar los parmetros de las secuencias. Si no se
utiliza ni contador ni tiempo en la estructura del nombre de la secuencia, el
sistema introduce un contador de forma automtica para evitar que los datos
se sobrescriban. A la segunda, tercera y siguientes secuencias que usen la
misma plantilla se les aadir un contador al nombre del contenedor de
secuencias.
8 Automatizacin
En este modo de almacenamiento de datos, el nombre del mtodo es el nico
vnculo que existe entre el fichero de datos y el mtodo utilizado para adqui-
rirlo y procesarlo. No se guardan copias del mtodo con la secuencia o el
fichero de datos; si se modifica el mtodo o se crea otro con el mismo nombre,
no se puede reproducir la secuencia con exactitud. Los ficheros de datos de la
secuencia se almacenan segn los parmetros especificados en el grupo
Fichero de datos del cuadro de dilogo Parmetros de la secuencia; en este
modo se desactiva la funcin de asignacin de nombres de secuencia de la
ficha Secuencia del cuadro de dilogo Preferencias. Este modo de almacena-
miento de datos es idntico a las revisiones de ChemStation anteriores a
B.02.01, por lo que no puede beneficiarse completamente de las ltimas fun-
ciones de revisin y reprocesamiento de datos de la ventana Anlisis de datos
de ChemStation.
NOTA
Los datos de la secuencia adquiridos mediante la opcin "Desactivar creacin de carpeta
nica" deben reprocesarse con la opcin de reproceso de la ventana Mtodo y Control de
anlisis.
NOTA
Los mdulos de expansin G2189BA opcin ChemStation OpenLAB y G2181BA ChemStore
requieren el modo de preferencia Activar creacin de carpeta nica. En cuanto se instala
el mdulo de expansin en ChemStation, se desactiva la opcin "Desactivar creacin de
carpeta nica".
Automatizacin 8
Parmetros de secuencia
El cuadro de dilogo Sequence Parameters contiene informacin comn a todos
los viales de muestra en una secuencia. Utilice este cuadro de dilogo para:
seleccionar el directorio de datos del cuadro combinado Path e introducir la
informacin del nombre del operador (se muestra el nombre del operador
en el cuadro de dilogo del access level), y
especificar cmo debera realizarse el proceso de secuencias escogiendo
parmetros especficos de parte de los mtodos que analizar.
Por ejemplo, puede elegir entre:
ejecutar la lista de control del anlisis,
adquirir slo, o bien
realizar slo el reprocesamiento - para datos adquiridos hasta la Rev.
B.01.03 de ChemStation - para datos adquiridos con la opcin Unique Folder
Creation OFF
Si se selecciona la opcin de reprocess (puede utilizar los datos de la muestra
definidos en el anlisis original) o se activa la casilla de verificacin Use
Sequence Table information, puede utilizar los datos de muestra actualizados
introduciendo nuevos datos en la tabla de secuencia:
especifique qu ocurre cuando se finaliza la secuencia con los parmetros
de shutdown y
especifique si hay que utilizar cdigos de barras en las secuencias y cmo
actuar frente a un error en el cdigo de barras (partiendo de que haya un
sistema de cdigo de barras instalado en el sistema).
NOTA
Los datos de secuencia adquiridos en las revisiones de ChemStation hasta la B.01.03, o
bien adquiridos mediante la opcin Unique folder Creation OFF, deben ser reprocesados
con la opcin de reprocess de la ventana Method and Run Control.
Los datos de secuencia adquiridos con las revisiones de ChemStation B.02.01 o posteriores
deben ser reprocesados con la opcin de reprocess en la tabla Data Analysis Navigation
table.
8 Automatizacin
Tabla de secuencias
Tabla de secuencias
La tabla de secuencias determina los mtodos que se utilizan para analizar los
viales de muestra y el orden en el que se analizan. Esta tabla tambin contiene
informacin de cada muestra, incluyendo el nombre, los parmetros de cuanti-
ficacin y los parmetros de recalibracin.
El cuadro del grupo de inyectores se muestra en los instrumentos que admiten
muestreo doble (GC). Si selecciona Delante o Atrs se muestran las lneas de la
tabla de secuencia y el estado del inyector en ese momento.
Para describir las columnas de la tabla y el modo en que interactan con la
informacin almacenada con el mtodo, consulte la ayuda en lnea.
Automatizacin 8
Creacin de secuencias(Secuencias y plantillas de secuencias)
Utilice la tabla de secuencia para especificar las muestras, mtodos y viales
que analizar en la secuencia. La tabla de secuencia recoge cada muestra de la
secuencia en el orden en que se analizarn y contiene la informacin de viales,
mtodos y calibracin necesaria para cada muestra.
Utilizacin del editor de tablas de secuencias
Si desea modificar la visualizacin y el contenido de su tabla de secuencias,
puede abrir el editor de tablas de secuencias pulsando sobre el smbolo de
lista que aparece en la esquina inferior derecha de la tabla de secuencias. Una
vez abierto, el editor le permitir especificar si una determinada columna
debe aparecer o no en la tabla de secuencias. Tambin permite definir las
anchuras correspondientes a cada una de las columnas de la tabla. Depen-
diendo de las opciones de software instaladas se aadirn campos de columna
adicionales, como el campo Masa de destino cuando haya un mdulo LC/MS
instalado o el campo "Estudio" para la instalacin adicional de ChemStore.
Utilizacin del botn de insercin de rango de viales
Si tiene muchas muestras que utilizan el mismo mtodo, puede introducir rp-
idamente esas muestras en la tabla de secuencias con la funcin Insertar
rango de viales. Esta funcin copia el nombre del mtodo, el rango de viales, el
nmero de inyecciones por vial y, si especifica la cantidad de muestras, la can-
tidad ISTD, el multiplicador y la dilucin. El sistema introduce entonces la
informacin de cada vial en el rango de la tabla de secuencia.
Utilizacin del botn de adicin de lneas
Para aadir una lnea en blanco nueva al final de la tabla de secuencia, pulse
el botn Agregar lnea.
8 Automatizacin
Utilizacin del botn de campos personalizados
Si se han configurado campos personalizados en los mtodos utilizados en la
tabla de secuencias, seleccione Campos personalizados para editar los valores
de estos campos para cada muestra (campos personalizados relacionados de
muestras) o para cada compuesto en el mtodo de una muestra (campos per-
sonalizados relacionados de compuestos).
Automatizacin 8
Uso de secuencias (secuencias y plantillas de secuencias)
Desde el men Secuencia se pueden crear secuencias y acceder a secuencias (y
a plantillas de secuencias). Las secuencias pueden crearse y guardarse del
mismo modo que los mtodos. Al guardar una secuencia, se crea un fichero
con extensin .S. Si desea editar o utilizar una secuencia de nuevo, puede
acceder a sta, por ejemplo, con la opcin Cargar secuencia del men Secuen-
cia.
Muestras prioritarias
Se puede pausar una secuencia que est siendo analizada cuando se haya fina-
lizado el mtodo actual para permitir el anlisis de una muestra prioritaria
por el mismo o por otro mtodo. Despus, la secuencia se puede reanudar y
contina con la muestra en la que se paus.
Secuenciacin con muestras de control
Las muestras de control se pueden especificar en el campo Tipo de muestra de
la tabla de secuencia. El mtodo que se utiliza para analizar las muestras de
control debe contener una tabla de calibracin donde estn especificados los
lmites de muestras de control de uno de los compuestos. Si se exceden estos
lmites especificados, la secuencia se interrumpe y se escribe un mensaje en el
libro de registros. Si usa uno de los estilos de informe ChemStation, los lmites
de muestras de control tambin se imprimen en los informes generados para
estos anlisis. Para obtener ms informacin sobre cmo definir una secuen-
cia con muestras de control, consulte la seccin Cmo... de la ayuda en lnea.
Interrupcin de una secuencia
El anlisis activo se completar antes de que se interrumpa la secuencia.
Nunca se puede reanudar una secuencia interrumpida.
8 Automatizacin
Cancelacin de una secuencia
Con la funcin de cancelacin finaliza de forma inmediata una secuencia
activa.
Pausa de una secuencia
Durante la pausa de una secuencia, no se puede cambiar el nombre del archivo
de la tabla de secuencia ni el nombre del fichero de datos. Slo es posible cam-
biar en la tabla de secuencia las lneas de secuencia que no se hayan ejecutado
y el nmero de viales en la lnea de secuencia actual. Puede aadir, borrar o
cambiar las lneas de secuencia para anlisis futuros.
Por ejemplo, ser necesario editar una secuencia activa para aadir un nuevo
lote de muestras. Puede editar la secuencia de modo que los viales sean la
siguiente muestra que procese ChemStation despus de las muestras de la ln-
ea de secuencia que se est analizando en el momento.
Anlisis de una secuencia parcial
Una tabla de secuencia ya configurada puede ejecutarse parcialmente selec-
cionando Partial Sequence en el men Sequence. El sistema abre el cuadro de
dilogo Partial Sequence y le permite seleccionar muestras individuales de la
tabla para analizarlas.
En cada lnea del cuadro de dilogo Partial Sequence se muestra un solo anlis-
is. En cada anlisis se proporciona el nombre del vial, del mtodo y del fichero
de datos. Adems, se muestra la informacin codificada de la tabla de secuen-
cia y las muestras de calibracin en las columnas Tabla de secuencia y
Calib:RF:RT respectivamente. Consulte la ayuda en lnea para ver una explica-
cin de estos cdigos.
Puede obtener una copia en papel de la secuencia parcial seleccionando el
botn Print.
El siguiente cuadro de dilogo Partial Sequence es el que resulta cuando el
mtodo SimpReg y la tabla de frecuencia que se muestran posteriormente en
la Tabla 20 en la pgina 203 y la Tabla 21 en la pgina 204, estn activos. Se
marcan las muestras 1, 2, 4, 5 y 8 para procesarlas.
Automatizacin 8
Figura 38 Cuadro de dilogo Secuencia parcial
Secuencia parcial en el modo de preferencia Activar creacin de carpeta
nica
Los datos de secuencias se almacenan en un contenedor de datos con un nom-
bre de contenedor de secuencia definido. Si analiza una secuencia parcial, el
sistema crear un nuevo contenedor de datos de secuencias basado en la con-
figuracin de Preference cada vez que se analice una parte de esa secuencia. De
modo que es posible crear, por ejemplo, tres contenedores de datos de la
misma secuencia analizando tres veces una secuencia parcial basada en una
secuencia.
Secuencia parcial en el modo de preferencia Desactivar creacin de
carpeta nica
Los ficheros de datos de secuencia se almacenan segn los parmetros especi-
ficados en el grupo de Data File del cuadro de dilogo Sequence Parameters. Aun-
que la secuencia se analice parcialmente, todos los ficheros de datos se
almacenarn en el mismo subdirectorio.
8 Automatizacin
Archivo de registro de secuencias
Archivo de registro de secuencias
Un archivo de registro de secuencias indica qu ha sucedido durante el anlis-
is de secuencias. Resulta til para identificar cuando se producen errores si la
secuencia se analiza de forma desatendida o por la noche. El nombre del
archivo de registro tiene siempre extensin .log. El archivo de registro se
encuentra en el directorio en el que se almacenan los datos de la secuencia.
Automatizacin 8
Qu ocurre cuando se analiza una secuencia?
Inicio de una secuencia mediante "Activar creacin de carpeta nica",
el sistema crea un contenedor de datos de secuencia basado en la definicin
de la ruta de los parmetros y en la configuracin de preferencias de la
secuencia. La plantilla de secuencia *s. y todos los mtodos definidos en la
tabla de secuencias que pertenecen a esta secuencia especfica se copian al
contenedor de datos. El sistema contina utilizando estos archivos durante la
adquisicin. Al iniciar la secuencia se carga el mtodo de la lnea de secuencia
correspondiente en ChemSation desde este contenedor de datos.
Inicio de una secuencia mediante "Desactivar creacin de carpeta nica"
Al iniciar una secuencia, el sistema carga y se basa en el fichero de secuencia
*.s, el mtodo correspondiente de la lnea de secuencia de ChemStation se
carga en la entrada, en la tabla de secuencias. A diferencia del segundo modo
de almacenamiento de datos Activar creacin de carpeta nica", no se crea un
contenedor de datos. La secuencia y los mtodos permanecern en su directo-
rio maestro.
Otros pasos ejecutados durante el anlisis de la secuencia:
Los pasos siguientes se repetirn para cada lnea de secuencia analizada:
Si dispone de inyector automtico, el software ChemStation busca en pri-
mer lugar la muestra en el inyector automtico de acuerdo con el nmero
introducido en la columna de viales
El instrumento se carga con los parmetros del mtodo.
Se ejecuta la macro de preanlisis.
Se inyecta la muestra en el instrumento (manual o automticamente).
Se procede con la evaluacin de datos del mtodo. Integracin, cuantifica-
cin y generacin de informe, incluyendo cualquier macro especfica del
usuario. En el caso de que se utilice el modo Activar creacin de carpeta
nica, el sistema almacena dos mtodos adicionales, ACQ.M y DA.M
durante el anlisis.
Se ejecuta la macro de post-anlisis.
8 Automatizacin
Durante todo el proceso, ChemStation realiza el seguimiento del progreso
de la secuencia en tiempo real y produce un fichero de registro de la
secuencia.
Figura 39 Estado de la secuencia
lnyecciun
Fatadu
nivelea
Macru uateriur al analiaia
Fvaluaciun de datua
lnyecciun y
funciunauientu del inatruuentu
Macru revia al analiaia
Cargar uetudu
lniciar aecuencia
XZggVYd
;^X]ZgdYZYVidhh^cegdXZhVg
:hiVYdYZ8]ZbHiVi^dc
Automatizacin 8
Estructura del fichero de datos de la secuencia (Activar creacin de carpeta nica)
Estructura del fichero de datos de la secuencia (Activar creacin
de carpeta nica)
En la revisin B.02.01 de ChemStation y posteriores, se ha reforzado el enlace
entre los datos no procesados y el mtodo, tal y como se muestra en la figura
Estructura del fichero de datos de la secuencia Activar creacin de carpeta
nica.
Figura 40 Estructura del fichero de datos de la secuencia
Metudua utilizadua en
la aecuencia
Metudu de adquiaiciun
Metudu de analiaia de datua
Cuntenedur de datua de aecuencia
licheru de lutea
8egiatru de aecuencia
Flantilla de aecuencia
8 Automatizacin
Asignacin de nombres a ficheros de datos en una secuencia
Se puede asignar nombres a ficheros de datos en una secuencia de las siguien-
tes formas:
automtica,
manual o
prefijo/contador.
Asignacin automtica de nombre al fichero de datos durante una
secuencia
Viales de ejemplo
Por ejemplo 017-0103.D
donde:
Los tres primeros dgitos son el nmero del vial, por ejemplo, 017.
El cuarto dgito en cromatografa de lquidos y electroforesis capilar es un
guin de separacin (-); en un cromatgrafo de gases, puede ser una (F)
para delante o una (B) para atrs.
Los dgitos quinto y sexto son la lnea de secuencia que define el mtodo
utilizado, por ejemplo 01 para la primera lnea de la secuencia.
Los dgitos sptimo y octavo son el nmero de inyeccin del vial para el
mtodo, por ejemplo, 03 para la inyeccin tercera.
Anlisis en blanco
Por ejemplo NV--0499.D
donde:
NV no se refiere a ningn vial.
- es un guin de separacin.
0499 es el anlisis en blanco 99 de la lnea 4 de la secuencia.
Automatizacin 8
Introduccin manual de nombres de ficheros de datos
Una de las columnas de la tabla de secuencia se denomina Fichero de datos.
Cuando no contiene entradas, se utiliza el esquema de denominacin del
fichero de datos especificado (automtico o contador de prefijos) para crear el
nombre del fichero de datos. Si se introduce un texto en la columna Fichero de
datos, ChemStation utiliza este texto como el nombre del fichero de datos para
el anlisis.
Si se especifica ms de una inyeccin por vial en una lnea con nombre del
fichero de datos introducido de forma manual, ChemStation automticamente
trunca los caracteres desde el final del nombre introducido por el usuario y
aade el nmero de inyeccin. De este modo se evita la reutilizacin del
mismo nombre del fichero de datos en varias inyecciones.
Utilizacin de un prefijo/contador para asignar nombre a ficheros de
datos
Si utiliza un prefijo/contador para asignar nombre a ficheros de datos, ChemS-
tation genera un nombre para cada anlisis. Para un instrumento que soporta
anlisis de doble seal como GC, ChemStation genera un nombre para cada
seal.
La configuracin de las secuencias permite el uso de nombres de fichero lar-
gos para el prefijo/contador. El nombre de fichero de datos definido mediante
prefijo/contador puede tener hasta quince caracteres ms la extensin .d, lo
que hace un total de diecisiete caracteres.
El campo de prefijo/contador est sujeto a las reglas siguientes:
el contador en s puede tener un mximo de 6 caracteres
si un prefijo contiene menos de nueve caracteres, el contador se ampla
automticamente a 6 dgitos
el nmero que se da al contador es el nmero de partida incrementado
Tabla 15
Prefijo Contador Nombre de fichero resultante
long 000001 long000001
longname 000001 longname000001
testwithalongna 1 testwithalongna1
8 Automatizacin
Operacin postsecuencia
Es posible especificar qu ocurre cuando se finaliza una secuencia en una eje-
cucin normal o cuando se produce un error en ChemStation durante la ope-
racin de la secuencia. Para la operacin LC, esto se realiza activando la
casilla de verificacin Cmd/Macro postsecuencial de los parmetros de la
secuencia, donde puede elegir entre:
Configurar el sistema en estado STANDBY, en el que la bomba y la lmpara
estn desactivadas.
Configurar el sistema en estado LAMPOFF, en el que todas las lmparas
estn apagadas (slo LC y CE).
Configurar el sistema en estado PUMPOFF en el que todas las bombas estn
apagadas (slo LC y CE).
Utilizar la macro SHUTDOWN o modificar SHUTDOWN.MAC para determi-
nar una operacin concreta.
Por ejemplo, si desea apagar el sistema antes de finalizar una secuencia. La
macro SHUTDOWN podra utilizarse tambin para configurar el flujo a cero
o reducirlo lentamente.
En los parmetros de la secuencia puede especificar la macro personalizada
que desea ejecutar incluyendo su nombre en el campo Cmd/Macro postsecuen-
cial y marcando la casilla.
Tiempo de espera para instrumento no listo (slo LC y CE)
Esta opcin de los parmetros de la secuencia es el tiempo que el sistema
esperar hasta que un instrumento est listo; pasado este tiempo, el sistema se
apagar.
Automatizacin 8
Tiempo de espera (slo LC y CE)
Es posible especificar un tiempo de espera que se ejecuta despus de cargar el
mtodo y antes de inyectar con ese mtodo. Esto puede resultar de utilidad
para que la columna/capilar se reequilibre si se utilizan nuevas condiciones de
anlisis.
8 Automatizacin
Recalibracin automtica
Recalibracin automtica
La calibracin se hace normalmente despus de producirse un cambio en las
condiciones de funcionamiento, por ejemplo, despus de cambiar una
columna o capilar. La recalibracin automtica se hace normalmente al inicio
de una secuencia de anlisis o a intervalos regulares durante una secuencia
como parte del programa para compensar los factores que afectan el rendi-
miento analtico.
Existen dos formas para especificar la recalibracin automtica de secuencias:
secuencias de calibracin explcita o
secuencias de calibracin cclica.
Recalibracin mediante el modo de preferencia "Activar creacin de
carpeta nica"
Mientras se realiza una recalibracin, la tabla de recalibracin del mtodo uti-
lizado se actualiza de acuerdo con la configuracin del mtodo definido. Al uti-
lizar el modo de almacenamiento de datos Activar creacin de carpeta nica",
los mtodos recalibrados estn disponibles en el contenedor de datos. La tabla
de calibracin del mtodo de secuencia se actualiza durante el proceso. Ade-
ms, el mtodo DA.M de los ficheros de datos individuales contiene la calibra-
cin actualizada utilizada para la creacin de resultados.
Recalibracin mediante el modo de preferencia "Desactivar creacin de
carpeta nica"
Mientras se realiza una recalibracin, la tabla de recalibracin del mtodo uti-
lizado se actualiza segn la configuracin del mtodo definido. Al utilizar el
modo de almacenamiento de datos Desactivar creacin de carpeta nica", la
tabla de calibracin del mtodo maestro se actualiza durante la recalibracin.
Automatizacin 8
Especificacin de recalibraciones
Los parmetros de recalibracin de la secuencia se introducen directamente
en la tabla de secuencia. Estos parmetros definen cmo se recalibra el mt-
odo durante una secuencia.
Parmetros de recalibracin de la tabla de secuencia
El factor de respuesta y los tiempos de retencin/migracin pueden actuali-
zarse de varias formas. Las instrucciones utilizadas en el anlisis de datos al
recalibrar la tabla de calibracin son el nivel de calibracin, actualizar el fac-
tor de respuesta y actualizar los tiempos de retencin/calibracin.
Cuando se introduce la calibracin en la columna Tipo de muestra de la tabla
de muestras, se activan y pueden editarse las siguientes columnas:
Nivel calibr.
Actualizar RT
Actualizar RF
Intervalo
Los posibles valores de cada una de estas columnas se muestran en la tabla.
Tabla 16 Parmetros de recalibracin de la tabla de secuencia
Nivel calibracin Actualizar RT Actualizar RF Intervalo
Nivel de la tabla de
calibracin n (1-999)
No actualizar No actualizar Intervalo de recalibracin
cclica n (1-999)
Promedio Promedio En blanco
Sustituir Sustituir
Agrupar
% Delta
8 Automatizacin
La tabla muestra las columnas de la tabla de secuencia que contienen los
parmetros de recalibracin y los valores que pueden introducirse.
No actualizar
No cambia el factor de respuesta ni el tiempo de retencin/migracin.
Sustituir
Sustituye los tiempos de retencin/migracin y la respuesta previos (reas o
alturas) por aqullos slo del anlisis actual. No se cambia la respuesta de
picos que no se hayan encontrado en el anlisis de recalibracin.
Promedio
Promedia los tiempos de retencin/migracin y las respuestas (reas o altu-
ras) para cada pico, basndose en el anlisis de calibracin original y todas las
recalibraciones promediadas desde entonces. Si falta un pico de una de las
recalibraciones, la respuesta promedio del pico no se ver afectada.
Agrupar
Las muestras se agrupan en calibraciones previas y posteriores a la muestra.
La evaluacin se efecta cuando la ltima muestra de calibracin del grupo de
cierre se ha analizado. Los datos de calibracin existentes se reemplazan por
los datos del resultado del anlisis de calibracin del grupo de apertura. Las
calibraciones del grupo de cierre se promedian en la tabla de calibracin.
Intervalo
El intervalo determina la frecuencia con la que se realiza una calibracin
durante una secuencia. La frecuencia de calibracin corresponde al nmero
de inyecciones de muestras que se realizan antes de proceder con el siguiente
grupo de calibracin. Al inicio del anlisis, se realiza una calibracin y los
resultados (factores de respuesta) se introducen en la tabla de calibracin.
Estos resultados se utilizan en clculos cuantitativos siguientes. Despus de
haberse aplicado el nmero de inyecciones especificado, se realiza otra cali-
bracin y los resultados se introducen en la tabla de calibracin sobrescri-
biendo los resultados de los anlisis de calibracin anteriores.
Automatizacin 8
% Delta
El clculo % delta permite comparar los factores de respuesta de un anlisis
con los factores de respuesta que se introducen de forma manual en la tabla
de calibracin. El % delta se aplica entonces a todos los picos calibrados de la
tabla. Puede identificar varios estndares internos, y las mediciones de sus
factores de respuesta se utilizarn para calcular los nuevos factores de res-
puesta de otros picos. Identifique qu estndar interno va a utilizarse para el
clculo de % delta de cada pico en la tabla de calibracin.
8 Automatizacin
Tipos de secuencia
Tipos de secuencia
Existen los siguientes tipos de secuencia:
secuencias de calibracin explcita,
secuencias de calibracin explcita de un nico nivel,
secuencias de calibracin cclica multinivel,
calibraciones explcitas y cclicas juntas en una secuencia y
secuencias de calibracin cclica con calibraciones agrupadas.
Automatizacin 8
Secuencias de calibracin explcita
Secuencias de calibracin explcita
Este tipo de secuencia recalibra a intervalos definidos especificados por el
usuario en la tabla de secuencia.
Para secuencias de calibracin explcita, se introducen las muestras de cali-
bracin en la secuencia sin una entrada de intervalo en la tabla de secuencia.
Se realiza una recalibracin una vez para cada entrada de muestra de calibra-
cin de la tabla de secuencia.
8 Automatizacin
Secuencias de calibracin cclicas de un nico nivel
Secuencias de calibracin cclicas de un nico nivel
Este tipo de secuencia utiliza el mismo vial, es decir, la muestra de calibracin
a intervalos regulares de la secuencia.
La entrada de intervalos de la tabla de secuencias determina cmo se va a rea-
lizar la recalibracin. Por ejemplo, un valor 2 de intervalo recalibrar cada dos
viales de muestra en la secuencia.
Automatizacin 8
Secuencias de calibracin cclicas multinivel
Este tipo de secuencia utiliza muestras de calibracin diferentes para recali-
brar un mtodo calibrado multinivel.
El ejemplo siguiente describe una secuencia de dos mtodos, que comprende
el mtodo A y el mtodo B, para analizar dos grupos de muestras. Los dos mt-
odos son de calibracin multinivel que se recalibrarn automticamente en los
intervalos definidos.
Para cada mtodo la tabla de secuencia tiene tres entradas:
Dos niveles de calibracin:
Lneas de secuencia 1 y 2 en el mtodo A.
Lneas de secuencia 8 y 9 en el mtodo B.
Cinco entradas para las muestras:
Lneas de secuencia 3 a 7 en el mtodo A.
Lneas de secuencia 10 a 14 en el mtodo B.
Las calibraciones se especifican a intervalos regulares con la entrada del inter-
valo de recalibracin de la tabla Recalibracin de secuencias.
El mtodo A recalibrar cada dos muestras.
El mtodo B recalibrar cada tres muestras.
La siguiente tabla de secuencia se ha truncado para simplificar el ejemplo.
Tabla 17 Tabla de secuencia para el mtodo A y el mtodo B
Lnea Vial Nombre
del
mtodo
Iny./Vial Tipo de
muestra
Nivel
calibr.
Actuali
zar RF
Actual
izar RT
Interval
o
1 1 Mtodo A 1 Calibraci
n
1 Promed
io
No
actuali
zar
2
2 2 Mtodo A 1 Calibraci
n
2 Promed
io
No
actuali
zar
2
8 Automatizacin
Orden de anlisis del mtodo A
En esta seccin se describe el orden de anlisis del mtodo A, la primera parte
de la secuencia de dos mtodos.
3 10 Mtodo A 1
4 11 Mtodo A 1
5 12 Mtodo A 1
6 13 Mtodo A 1
7 14 Mtodo A 1
8 3 Mtodo B 1 Calibraci
n
1 Promed
io
No
actuali
zar
3
9 5 Mtodo B 2 Calibraci
n
2 Promed
io
No
actuali
zar
3
10 20 Mtodo B 1
11 21 Mtodo B 1
12 22 Mtodo B 1
13 23 Mtodo B 1
14 24 Mtodo B 1
Tabla 17 Tabla de secuencia para el mtodo A y el mtodo B
Lnea Vial Nombre
del
mtodo
Iny./Vial Tipo de
muestra
Nivel
calibr.
Actuali
zar RF
Actual
izar RT
Interval
o
Tabla 18 Orden de anlisis del mtodo A
N iny. Mtodo Vial Operacin
1 Mtodo A 1 Nivel de calibracin 1 e informe
Automatizacin 8
Orden de anlisis del mtodo B
En esta seccin se describe el orden de anlisis del mtodo B, la segunda parte
de la secuencia de dos mtodos.
El mtodo B tiene las siguientes diferencias comparado con el Mtodo A:
Hay dos inyecciones por vial para el nivel de calibracin 2. La entrada de
intervalo est en 3.
3 Mtodo A 10 Anlisis de muestras e informe
Tabla 18 Orden de anlisis del mtodo A
Tabla 19 Orden de anlisis del mtodo B
N iny. Mtodo Vial Operacin
12 Mtodo B 3 Nivel de calibracin 1 e informe
15 Mtodo B 20 Anlisis de muestras e informe
8 Automatizacin
Tenga en cuenta que los resultados que se muestran en la Tabla 18 en la
pgina 200 y en la Tabla 19 en la pgina 201 pueden obtenerse con la opcin
Secuencia parcial para previsualizar el orden de anlisis antes de configurar
la tabla de secuencia.
Tabla 19 Orden de anlisis del mtodo B
Automatizacin 8
Calibraciones explcitas y cclicas juntas
Este tipo de secuencia comprende las calibraciones explcitas y cclicas en la
misma secuencia.
Esta funcin permite recalibrar el mtodo completamente al principio de una
secuencia (recalibracin explcita) y actualizar entonces la calibracin (reca-
libracin cclica) durante la secuencia.
Hay que especificar dos lneas de calibracin para cada nivel de calibra-
cin en la tabla de secuencia. Una lnea de calibracin es para la entrada
de recalibracin explcita y la otra es para la entrada de recalibracin ccli-
ca.
La tabla de secuencia debe tener entradas para cada lnea de calibracin y
todos los viales de recalibracin cclica deben aparecer antes de la recali-
bracin explcita y las entradas de muestra.
Ejemplo
La siguiente tabla de secuencia ilustra un mtodo calibrado de un nico nivel
denominado SimpReg. La tabla est truncada para simplificar el ejemplo.
Tabla 20 Tabla de secuencia para SIMPREG
1 1 SimpRe
g
1 Calibraci
n
1 Promedi
o
Promedi
o
3
2 1 SimpRe
g
1 Calibraci
n
1 Sustituir Sustituir
3 2 SimpRe
g
1
4 3 SimpRe
g
1
5 4 SimpRe
g
1
8 Automatizacin
Hay dos entradas en un nico nivel de calibracin.
La primera lnea de calibracin es para mismo nivel aunque promedia los
parmetros de calibracin. La entrada del intervalo especifica que la cali-
bracin se realiza cada tres muestras.
La segunda entrada sustituye todos los parmetros de recalibracin, es
decir, se realiza una recalibracin completa. No hay intervalo de recalibra-
cin.
Tabla de secuencia
La tabla de secuencia contiene siete lneas. La primera lnea especifica la
muestra de recalibracin cclica. La segunda lnea especifica la recalibracin
explcita que se realiza slo una vez al principio de la secuencia. Las lneas de
la tercera a la sptima especifican las muestras que hay que analizar.
El orden de las entradas en la tabla de secuencia es muy importante. Las
entradas del vial de recalibracin cclica que especifican la recalibracin cc-
lica deben aparecer antes que las entradas de muestras o de recalibraciones
explcitas para el mtodo.
Orden de anlisis SimpReg
En esta seccin se describe el orden de anlisis del mtodo SimpReg.
6 5 SimpRe
g
1
7 6 SimpRe
g
1
Tabla 20 Tabla de secuencia para SIMPREG
Tabla 21 Orden de anlisis SimpReg
Lnea sec. N iny. Mtodo Vial Operacin
2 1 SimpReg 1 Calibracin simple
1 2 SimpReg 1 Calibracin regular
3 3 SimpReg 2 Anlisis de muestras
Automatizacin 8
5 6 SimpReg 1 Calibracin regular
Tabla 21 Orden de anlisis SimpReg
8 Automatizacin
Secuencias de calibracin cclica con agrupamiento
En una secuencia calibrada cclica con agrupamiento, la tabla de calibracin
utilizada para calcular resultados cuantitativos desconocidos se genera
haciendo el promedio de resultados calibrados ahora con los de la calibracin
anterior. La tabla de calibracin nueva es una representacin ms exacta de la
respuesta del instrumento en el momento de analizar la muestra.
Ejemplo
Considere la situacin siguiente:
La respuesta del instrumento deriva.
Se especifican tres inyecciones con idntica mezcla de dos componentes.
Dos inyecciones estn especificadas como muestras de calibracin, y la ter-
cera como una muestra.
La primera y la tercera son ejemplos de calibracin.
La segunda inyeccin es una muestra.
Para obtener un resultado cuantitativo preciso para la inyeccin dos (la mues-
tra), deben interpolarse las dos muestras de calibracin (consulte la figura). El
proceso se conoce como agrupamiento.
Automatizacin 8
Figura 41 Agrupamiento
Operacin de secuencia agrupada
Se analizan los viales de la primera calibracin.
Se analizan los viales de muestra.
Se analizan los viales de la siguiente calibracin.
Se crea la tabla de calibracin reemplazando los factores de la respuesta
existente por otros nuevos y realizando el promedio de los anlisis de cali-
bracin siguientes en una tabla de calibracin nueva.
Se evalan los ficheros de datos del vial de la muestra y se generan infor-
mes.
Si hay ms viales de muestras que analizar, la secuencia vuelve al paso 2.
Ejemplo
En esta seccin se explica un ejemplo de agrupamiento de secuencia que com-
prende un mtodo llamado Brack.M. El mtodo Brack.M es un mtodo estn-
dar interno de dos niveles que utiliza calibracin cclica.
1ieuu
Calihraciun 1 Calihraciun 2 Mueatra
0eriva del
inatruuentu
8 Automatizacin
Tabla de secuencia
La tabla de secuencia de Brack.M (pgina siguiente) se ha truncado para sim-
plificar el ejemplo. Consta de siete lneas. Las dos primeras lneas definen las
condiciones de recalibracin de cada nivel. Las lneas restantes corresponden
a las muestras que hay que analizar.
Ms concretamente, la tabla de secuencia del mtodo Brack.M tiene:
Una entrada Agrupamiento en la columna Actualizar factor de respuesta
que especifica el agrupamiento de muestras con las muestras de calibra-
cin.
Una entrada Sustituir en la columna Actualizar tiempos de reten-
cin/migracin que especifica una sustitucin de los tiempos de retencin.
Una entrada de 3 en la columna Recalibrar intervalo que especifica la reca-
libracin cada tres muestras.
Tabla 22 Tabla de secuencia para BRACK-M
1 1 BRACK-M 2 Calibracin 1 Agrupar Sustituir 3
2 2 BRACK-M 2 Calibracin 2 Agrupar Sustituir 3
3 10 BRACK-M 1
4 11 BRACK-M 1
5 12 BRACK-M 1
6 13 BRACK-M 1
7 14 BRACK-M 1
Automatizacin 8
Orden del anlisis de la secuencia agrupada
8 Automatizacin
Secuencias de recalibracin cclica con mltiples viales que contienen la misma dilucin de un estndar
Secuencias de recalibracin cclica con mltiples viales que
contienen la misma dilucin de un estndar
Secuencia de recalibracin cclica con uso del vial de calibracin
"Round-Robin"
Cuando analiza una secuencia larga que realiza recalibraciones cclicas, es
decir, realiza una recalibracin automtica cada cierto nmero fijado de inyec-
ciones de muestra, existe el riesgo potencial de vaciar el volumen del vial de
calibracin durante el proceso de la secuencia. La tabla de secuencia de Che-
mStation proporciona una manera de utilizar una serie de viales que contie-
nen la misma dilucin de un estndar que debe utilizarse en un modelo
"round-robin".
Con esta funcionalidad, pueden definirse secuencias largas con calibraciones
automticas a intervalos fijos utilizando mltiples viales de calibracin para
cada nivel y consumiendo de cada vial de calibracin la misma proporcin.
Si se define un nmero apropiado de viales de calibracin; es posible incluso
garantizar que cada vial de calibracin se utilice una sola vez. Esto es impor-
tante en aquellos casos en los que se requiere un vial de calibracin fresco
para cada recalibracin, por ejemplo, porque el analito se evapora cuando se
pincha el septum o comienza a degradarse cuando entra en contacto con la
aguja de acero. En la seccin siguiente se describe cmo debe definirse la tabla
de secuencia de ChemStation para cumplir estos requisitos.
Determine el nmero total de viales de calibracin para cada nivel basndose
en el uso estimado de calibrante a lo largo de toda la secuencia.
Configure una lnea de recalibracin cclica distinta para cada vial de calibra-
cin. Las lneas definidas en el mismo nivel de calibracin deben estar en
lneas de secuencia adyacentes, y las posiciones de los viales definidas deben
ser tambin adyacentes. Seleccione el mismo intervalo de recalibracin para
todas las lneas de calibracin. Por ejemplo, si tiene que recalibrar la secuen-
cia cada seis inyecciones de muestras, configure el intervalo de recalibracin a
6.
Automatizacin 8
El orden de ejecucin es:
Vial 1 (Cal1a)
Vial 5 (Cal2a)
6 inyecciones del vial 10 (Muestra10)
Vial 2 (Cal1b)
Vial 6 (Cal2b)
Vial 3 (Cal1c)
Vial 7 (Cal2c)
Vial 1 (Cal1a)
Vial 5 (Cal2a)
Vial 2 (Cal1b)
Tabla 23 Secuencia de recalibracin cclica con 3 viales definidos para cada nivel
Vial n Nombre de la
muestra
Tipo de
muestra
Nombre del
mtodo
N de iny. Nvl Act. RT Act. RF Intervalo
1 Cal1a Calib. Mtodo A 1 1 Prom. Prom. 6
2 Cal1b Calib. Mtodo A 1 1 Prom. Prom. 6
3 Cal1c Calib. Mtodo A 1 1 Prom. Prom. 6
5 Cal2a Calib. Mtodo A 1 2 Prom. Prom. 6
6 Cal2b Calib. Mtodo A 1 2 Prom. Prom. 6
7 Cal2c Calib. Mtodo A 1 2 Prom. Prom. 6
10 Muestra10 Muestra Mtodo A 6
8 Automatizacin
Vial 6 (Cal2b)
etc.
Recalibraciones cclicas en las que cada calibracin utiliza un vial
diferente
Para garantizar que cada vial de calibracin se inyecta una sola vez, la secuen-
cia debe definir un nmero suficiente de viales de calibracin diferentes, de
forma que el orden "round-robin" descrito en el ejemplo anterior no se apli-
que. Por ejemplo, si la secuencia procesa 80 viales de muestra con recalibra-
ciones requeridas cada 10 muestras, la tabla de secuencia debe contener
80/10 + 1= 9 lneas de calibracin en cada nivel.
Como en el ejemplo anterior, las lneas de calibracin deben ser lneas de
secuencia adyacentes que informan de posiciones de viales adyacentes.
Secuencia de agrupamiento que utiliza viales diferentes para grupo
de apertura y cierre
La misma funcionalidad est disponible para las secuencias de agrupamiento.
Al definir el rango de viales de calibracin aproximado, puede definirse una
secuencia de agrupamiento de forma que los distintos viales de calibracin se
utilicen para los grupos de apertura y cierre. En este caso tambin las lneas
de calibracin en la secuencia deben ser adyacentes como las posiciones de los
viales de calibracin.
La utilizacin del agrupamiento de viales de calibracin en modo
"round-robin" o para una sola inyeccin slo depende del nmero total de via-
les de calibracin para cada nivel y el nmero de recalibraciones necesarias
para la secuencia.
El siguiente ejemplo define 3 inyecciones de muestra que se agrupan por cali-
bracin. El grupo de apertura utiliza un vial de calibracin diferente que el
grupo de cierre. Se requieren recalibraciones tras cada inyeccin de muestra,
de forma que el intervalo de recalibracin sea 1. El nmero de lneas de cali-
bracin por nivel es el nmero de muestras ms una.
Automatizacin 8
El orden de ejecucin de esta secuencia es:
Vial 1 (Cal1a), grupo de apertura 1
Vial 10 (Sample10)
Vial 2 (Cal1b), grupo de cierre 1 y grupo de apertura 2
Vial 11 (Muestra11)
Vial 3 (Cal1c), grupo de cierre 2 y grupo de apertura 3
Vial 12 (Muestra12)
Vial 4 (Cal1d), grupo de apertura 3
Tabla 24 Viales diferentes para los grupos de apertura y cierre
Vial n Nombre de la
muestra
Tipo de
muestra
Nombre del
mtodo
N de iny. Nvl Act. RT Act. RF Intervalo
1 Cal1a Calib. Mtodo A 1 1 Grp Grp 1
2 Cal1b Calib. Mtodo A 1 1 Grp Grp 1
3 Cal1c Calib. Mtodo A 1 1 Grp Grp 1
4 Cal1d Calib. Mtodo A 1 1 Grp Grp 1
8 Automatizacin
215
9
Revisin de datos, reprocesamiento y
revisin por lotes
Tabla de navegacin de Anlisis de datos 216
Configuracin de la tabla de navegacin 216
Barra de herramientas de la tabla de navegacin 217
Revisin de datos con la tabla de navegacin 218
Reprocesamiento de secuencias con la tabla de navegacin 219
Definicin de la revisin por lotes 221
Habilitacin de la funcin de revisin por lotes con la opcin ChemStation
OpenLAB instalada 222
Configuracin de lotes 223
Tabla de lotes 223
Tabla de compuestos 224
Informe de lotes 224
Interfase de usuario 224
Funciones de revisin 226
Calibracin en la revisin por lotes 226
Informes de lotes 227
Historial de lotes 227
Este apartado describe las opciones para revisar datos y cmo reprocesar datos
de secuencia. Asimismo, se detallan los conceptos de Revisin por lotes, Confi-
guracin de lotes, funciones de revisin e informes de lotes.
Tabla de navegacin de Anlisis de datos
La ventana Anlisis de datos incluye una tabla de navegacin diseada para
facilitar la navegacin por los ficheros de datos. La tabla de navegacin mues-
tra los anlisis de un subdirectorio de datos seleccionados o de datos de
secuencia. Puede utilizar la tabla de navegacin para cargar ejecuciones indi-
viduales de acceso o para desplazarse automticamente a travs de las seales
cargadas. Para obtener ms detalles, consulte el manual "Getting Started With
New ChemStation Workflow" (Primeros pasos con el nuevo flujo de trabajo de
ChemStation).
Configuracin de la tabla de navegacin
La tabla de navegacin muestra la informacin del fichero de datos en funcin
de los conjuntos de datos disponibles. La tabla de navegacin es de solo lec-
tura y no se pueden sobrescribir los valores que contiene.
Tabla 25 Columnas de la tabla de navegacin
Columnas de anlisis individuales Columnas de anlisis de secuencias
Superposicin Superposicin
Fecha/hora Lnea
Operador Iny. (inyeccin)
Vial Vial
Fichero de datos Nombre de la muestra
Nombre de la muestra Nombre del mtodo
Nombre del mtodo Tipo de muestra
Eventos manuales Eventos manuales
Informacin de muestra Nivel Calib. (nivel de calibracin)
Cantidad de muestra Informacin de muestra
Cantidad ISTD Cantidad de muestra
Revisin de datos, reprocesamiento y revisin por lotes 9
La tabla de navegacin incluye funciones estndar de configuracin de tablas,
como clasificacin y seleccin y arrastre para mover columnas a lugares dife-
rentes. Tambin es posible seleccionar las columnas que se muestran en la
tabla de navegacin.
Adems, la agrupacin especfica por columnas es posible; por ejemplo, los
anlisis individuales de un operador concreto pueden mostrarse agrupando
los ficheros cargados por el "operador" columna.
En la tabla de navegacin, haciendo clic con el botn derecho del ratn, estn
disponibles las funciones de carga de una seal, superposicin de una seal,
exportacin de datos, impresin de informes, visualizacin de los parmetros
del mtodo de adquisicin, etc. Cada lnea de la tabla se puede expandir
haciendo clic en el signo ms (+) situado a la izquierda de la lnea para confi-
gurar las opciones especficas de seales:
Seal: enumera las seales adquiridas y permite especificar las seales
para cargar. La seleccin de la seal se aplica a los anlisis de forma indivi-
dual.
Informacin general: muestra los detalles del ttulo del anlisis.
Curvas de instrumentos: permite seleccionar las curvas de datos de instru-
mentos que mostrar junto con el cromatograma/electroferograma y en la
impresin.
Barra de herramientas de la tabla de navegacin
La Navigation Table incluye dos conjuntos de herramientas que le permiten revi-
sar un solo anlisis, los datos de una secuencia o reprocesar estos datos.
Multiplicador Cantidad ISTD
Dilucin Multiplicador
--- Dilucin
--- Fichero de datos
Tabla 25 Columnas de la tabla de navegacin
Columnas de anlisis individuales Columnas de anlisis de secuencias
Conjunto de herramientas de revisin de datos
La funcin de revisin de la tabla de navegacin le permite revisar de forma
automtica o manual las seales cargadas. En funcin de la seleccin especifi-
cada en Opciones de Preferences / Signal/Review, el sistema puede integrar de
forma automtica la seal e imprimir un informe de cada fichero conforme se
carga. El mtodo que se aplica al fichero de datos se muestra en el men supe-
rior.
Conjunto de herramientas de reprocesamiento de secuencias
El conjunto de herramientas de reprocesamiento de secuencias slo est dis-
ponible cuando se carga una secuencia adquirida con ChemStation B.02.01 o
con una versin posterior adquirida con la opcin Unique Folder Creation habili-
tada. Es posible iniciar, detener y poner en pausa el reprocesamiento de la
secuencia. Adems, con la barra de herramientas puede acceder a los cuadros
de dilogo para cambiar el parmetro de reprocesamiento de secuencias e
impresin:
Sequence Table (copia de la plantilla original *.s ubicada en el contenedor de
datos de secuencia)
Cuadro de dilogo Sequence Parameters
Cuadro de dilogo Sequence Output
Cuadro de dilogo Sequence Summary Parameters
Cuadro de dilogo Extended Statistic Parameters
Save Current Sequence
Print Current Sequence
Revisin de datos con la tabla de navegacin
En funcin del volumen de trabajo que tenga, puede revisar los datos de tres
formas:
1 Revise los datos de la secuencia utilizando el mtodo individual de cada
fichero de datos (datos de secuencia B.02.01 o posterior). Utilice la opcin
Individual Method from Data File (DA.M) en Preferences / Signal/Review Options
para que el sistema cargue el mtodo de anlisis de datos individual (DA.M)
almacenado con el fichero de datos antes de cargar los datos de la secuen-
cia. Puesto que durante el proceso de revisin de datos se accede a cada ln-
ea de la tabla de navegacin, el DA.M vinculado al fichero de datos
seleccionado se carga y se utiliza para revisar y generar el informe. El nom-
bre del mtodo est visible en la barra de estado; el sistema aade datos del
fichero de datos entre parntesis para indicar que el mtodo cargado es el
mtodo individual del fichero de datos.
2 Revise los datos utilizando el mtodo de secuencia. Utilice la opcin
Sequence Method en Preferences / Signal/Review Options para que el sistema
cargue el mtodo de secuencia correspondiente a la lnea actual de la tabla
de navegacin. Este mtodo se carga siempre que se cargue un fichero de
datos y se utilice para revisar y generar el informe. El nombre del mtodo
est visible en la barra de estado; el sistema aade la secuencia entre parn-
tesis (secuencia) para indicar que el mtodo cargado es el mtodo de
secuencia correspondiente a la lnea actual de la tabla de navegacin.
3 Revise los datos utilizando un mtodo diferente. Si desea utilizar un mtodo
diferente del mtodo de anlisis de datos individual (DA.M) almacenado
con el fichero de datos o el mtodo de secuencia para revisar los datos,
deber estar seleccionada la opcin de current method en Preferences / Sig-
nal/Review Option. En este caso, el sistema utiliza el mtodo cargado en el
momento para revisar y generar el informe. El nombre del mtodo est visi-
ble en la barra de estado.
Reprocesamiento de secuencias con la tabla de navegacin
NOTA
Para sistemas LC, CE, LC/MS y CE/MS, la opcin Individual Method from Data File
(DA.M) est seleccionada por defecto.
Para sistemas GC, la opcin Current Method est seleccionada por defecto.
NOTA
Los datos de secuencia adquiridos en las revisiones hasta la B.01.03 deben volver a
procesarse con la opcin de reprocess de la ventana Method and Run Control. Lo mismo
sucede con los datos adquiridos en B.03.01 cuando la creacin de carpeta nica est
desactivada.
Los datos de secuencia adquiridos con las revisiones de ChemStation B.02.01 o posteriores
deben ser reprocesados con el conjunto de herramientas de reprocesamiento de la tabla
Navegacin de Data Analysis.
Para reprocesar con la tabla de navegacin de Data Analysis, todos los ficheros
necesarios estn en el contenedor de datos de la secuencia:
ficheros de datos de secuencia (*.d)
todos los ficheros de mtodos (*.m) que se utilizan en la secuencia
copia de la plantilla de secuencias original (*.s)
fichero de lotes relacionados con la secuencia (*.b)
fichero de libro de registro relacionado con la secuencia (*.log)
Durante el reprocesamiento, se actualizan los mtodos individuales DA.M de
los ficheros de datos, as como el fichero de lotes (*.b).
Con las funciones de reprocesamiento de Data Analysis es posible modificar la
plantilla de secuencias (*.s) del contenedor de datos para cambiar el multipli-
cador, la dilucin, etc. o utilizar un mtodo de reprocesamiento diferente. Por
defecto, el parmetro de secuencia de reprocesamiento de anlisis de datos
parts of method to run est fijado en Reprocessing only y la opcin Use Sequence
Table Information est activada. Los valores predefinidos por defecto le permi-
ten cambiar los parmetros de la plantilla de secuencia y ejecutar un repro-
ceso sin necesidad de volver a editar los parmetros de la secuencia de Data
Analysis.
Si no ha cambiado explcitamente el mtodo en la plantilla de secuencias, el
sistema utiliza los mtodos de secuencias almacenados en el contenedor de
datos de secuencias para reprocesar la secuencia. Estos mtodos son los origi-
nales utilizados durante la adquisicin de datos. Tenga en cuenta que, incluso
si se selecciona la opcin load DA method from data file en las Preferences / Sig-
nal/Review Options, el sistema utiliza el mtodo del contenedor de secuencias
para reprocesar y no el mtodo DA.M de los distintos ficheros de datos.
Si es necesario cambiar los parmetros de un mtodo concreto (por ejemplo,
especificar la impresin en un fichero *.xls), hay que modificar y guardar los
mtodos del contenedor de secuencias. Este cambio general se aplica a todos
los ficheros de datos durante el reprocesamiento.
Si desea utilizar el mtodo del contenedor de secuencias actualizado para la
adquisicin de ms datos, es necesario copiar este mtodo del contenedor de
datos de secuencias a una de las rutas de mtodos definidas. El mtodo nuevo
o actualizado estar disponible en ChemStation Explorer, en la ventana de
mtodos, como mtodo maestro.
Definicin de la revisin por lotes
Definicin de la revisin por lotes
La revisin por lotes es una funcionalidad del anlisis de datos diseada para
ayudar a un analista a realizar rpida y fcilmente la primera revisin de los
resultados de una secuencia o una seleccin de anlisis. Esta funcionalidad le
permitir ahorrar tiempo, especialmente con el reprocesamiento de grandes
cantidades de muestras. Cuando se analiza una secuencia, se genera de forma
automtica un archivo de lotes (con extensin.b) y se coloca en el directorio de
datos junto con los ficheros de datos. Este fichero de datos contiene indicado-
res de los ficheros de datos de la revisin del lote. Cuando se carga un lote, el
analista slo tiene que seleccionar el mtodo que vaya a utilizar con el lote y
despus seleccionar uno por uno los ficheros de datos que quiere analizar en
el lote. Antes de aprobar los resultados, es posible comprobar la exactitud de
la calibracin, el rendimiento del instrumento y las diferentes integraciones
Cualquier parmetro de integracin especfico del cromatograma que se modi-
fique, puede almacenarse con el fichero de datos para la trazabilidad de datos.
Este entorno interactivo permite tambin acceder a todas las funciones de
anlisis de datos como pureza del pico, bsqueda de libreras, etc.
La revisin por lotes utiliza los mismos registros de anlisis de datos
(ChromReg y ChromRes) que los anlisis de datos estndares y no debera uti-
lizarse en sesiones en lnea que estn analizando en ese momento.
Habilitacin de la funcin de revisin por lotes con la opcin ChemStation OpenLAB instalada
Habilitacin de la funcin de revisin por lotes con la opcin
ChemStation OpenLAB instalada
Cuando la opcin ChemStation OpenLAB est instalada, la funcin Revisin
por lotes no estar disponible por defecto. Para poder utilizar la revisin por
lotes, se deber habilitar dicha funcin mediante una entrada en la seccin
[PCS] del fichero ChemStation.ini. El fichero se ubica en el directorio de Win-
dows c:\ WINDOWS.
[PCS] _BatchReview=1
La entrada por defecto, _BatchReview=0, desactiva la funcin.
Configuracin de lotes
Un lote es una serie de ficheros de datos que ha seleccionado el usuario y que
se procesa segn el mtodo definido tambin por el usuario. Todos los ficheros
de datos del lote se procesan con el mismo mtodo. Los pasos de proceso que
se realizan cada vez que se carga una nueva muestra para revisar se pueden
seleccionar (integracin, identificacin/cuantificacin e informe).
Todos los anlisis de calibracin del lote se utilizan para generar una sola
tabla de calibracin con factores de respuesta promediados que se utiliza des-
pus para la cuantificacin.
Tabla de lotes
Los anlisis se muestran en una tabla de lotes que el usuario puede configu-
rar:
puede especificarse el nmero y el contenido de las columnas de la tabla;
los anlisis pueden clasificarse por
ndice de anlisis (el orden en el que se adquieren los anlisis) indepen-
dientemente de otros criterios,
tipo de muestra (muestras de control primero, luego muestras de calibra-
cin, despus muestras normales) y por ndice de anlisis dentro de cada
tipo,
mtodo (si se utiliz ms de un mtodo para adquirir los anlisis) y por
ndice de anlisis dentro de cada mtodo,
muestras, muestras de calibracin y muestras de control que se visualizan
en la tabla o estn ocultas.
Cada anlisis seleccionado ocupa una lnea en la tabla de lotes. Puede excluir
un anlisis en la tabla de lotes (por ejemplo, desde la calibracin) cambiando
el tipo de muestra a Retirada.
Tabla de compuestos
Los resultados de compuestos se muestran en la tabla de compuestos, que el
usuario puede configurar, aunque su contenido depende del tipo de muestras
de la tabla de lotes:
La lista de compuestos contiene todos los compuestos del mtodo cargado
para la revisin por lotes.
Si en la tabla de lotes slo se visualizan las muestras de calibracin (se ocul-
tan las muestras y las muestras de control), la tabla de compuestos muestra
columnas adicionales con informacin relacionada con la calibracin (can-
tidad esperada, error relativo y error absoluto).
Si en la tabla de lotes slo se muestran los anlisis de control (se ocultan las
muestras y las muestras de calibracin), la tabla de compuestos muestra
columnas adicionales de los lmites de control definidos).
Para las columnas que contengan informacin especfica del compuesto, es
posible incluir el nombre del compuesto en el ttulo de la tabla aadiendo %s a
las especificaciones de la columna.
Informe de lotes
El informe de lotes contiene dos tablas generalmente anlogas a la tabla de
lotes y a la de compuestos; el usuario puede configurar estas tablas.
Para las columnas que contengan informacin especfica del compuesto, es
posible incluir el nombre del compuesto en el ttulo de la tabla aadiendo %s a
las especificaciones de la columna. Se permiten ttulos multilnea; inserte el
carcter | para introducir un salto de lnea.
Interfase de usuario
La revisin por lotes le permite elegir entre dos interfaces de usuario:
la interfase estndar incluye una barra con los botones que representan la
mayora de las opciones del men Lote, junto con las tablas de lotes y com-
puestos.
una interfase mnima con una barra de botones similar a la interfase
estndar, que reemplaza la tabla de lotes y compuestos con un cuadro com-
binado que contiene slo la informacin especificada en la tabla de lotes. La
barra de botones de esta interfase mnima no contiene los botones relacio-
nados con la tabla de lotes ni con la tabla de compuestos.
Funciones de revisin
Funciones de revisin
Los ficheros de datos se pueden mostrar de dos formas:
manualmente, seleccionando un anlisis de la tabla para mostrar,
automticamente, con un intervalo predefinido entre cada fichero de datos.
Durante la visualizacin automtica, slo aparecen los tipos de muestras
visualizados en la tabla; los anlisis se muestran en el orden en el que apa-
recen en la tabla. La revisin automtica puede pausarse y reanudarse des-
pus, o detenerse.
Las funciones estndar de ChemStation estn disponibles con la revisin por
lotes. Esto incluye la calibracin, la manipulacin manual de cromatogramas,
por ejemplo con el suavizado o la integracin manual. Los cambios realizados
en un fichero de datos se pueden marcar y guardar con el fichero de lotes. Los
cromatogramas que se han revisado se marcan con un asterisco en la tabla de
lotes. Tambin es posible descartar los cambios que se han realizado slo al
cromatograma actual o todos los cambios realizados a todos los cromatogra-
mas del lote.
Cuando se carga un anlisis, las opciones de proceso seleccionadas se ejecu-
tan; si ya se ha procesado el anlisis y se han guardado los cambios, se carga el
anlisis procesado. Este proceso es ms rpido que cargar un anlisis sin pro-
cesar, porque no hay que procesar nada.
Calibracin en la revisin por lotes
La calibracin en las revisiones por lotes trabaja de forma independiente de la
configuracin de recalibracin de la tabla de secuencia. El primer paso en la
calibracin de lotes siempre sustituye las entradas de los tiempos de respuesta
y retencin de la tabla de calibracin. En los siguientes estndares de calibra-
cin, tanto los valores de respuesta como de retencin se promedian.
Informes de lotes
Informes de lotes
La Tabla de lotes en la pgina 223, que puede configurar el usuario, puede
imprimirse directamente por impresora, mostrarse en pantalla o imprimirse
en un fichero con el prefijo que el usuario especifique en uno de los siguientes
formatos:
Archivo de texto UNICODE con extensin .TXT.
Formato de intercambio de datos con extensin .DIF.
Valores separados por comas con extensin .CSV.
Formato de Microsoft Excel con extensin .XLS.
Las opciones de generacin de informes tambin ofrecen la posibilidad de
ordenar las muestras (por ndice de anlisis, tipo de muestra o mtodo) inde-
pendientemente del mtodo de clasificacin de la tabla de lotes. Las priorida-
des de clasificacin son las mismas que las de Tabla de lotes en la
pgina 223.
Historial de lotes
La revisin por lotes mantiene un registro de todas las acciones relacionadas
con el lote actual. Cualquier accin que cambie el lote (como por ejemplo, cam-
biar el cromatograma de la pantalla, el tipo de muestra o cargar y guardar el
lote) aade una lnea al historial de lotes con el nombre y la fecha, el nombre
del operador y una descripcin de la accin.
Tambin puede aadir sus propios comentarios al historial de lotes. No se
pueden editar las entradas del historial de lotes existentes y no se puede acce-
der a la lista del historial excepto a travs de la opcin de men Historial de
lotes.
Informes de lotes
229
10
Utilizacin de los informes de
ChemStation
Definicin de un informe 230
Elaboracin de informes de resultados 231
Informes no calibrados 231
Informes calibrados 231
Informe estndar externo 231
Informe estndar interno 232
Informe de los grficos de control 232
Resultados cuantitativos 233
Informes de valores de campos personalizados 235
Estilos de informe 236
Adicin de un informe personalizado a los estilos de informe 238
Otros parmetros de estilo del informe 239
Tabla de picos sumados 239
Diseo del informe de picos no calibrados 239
Destino del informe 240
Formatos del fichero de informes 240
Elaboracin de informes de resumen de secuencias 242
Introduccin 242
Configuracin de un informe de resumen de secuencias 242
En este captulo se describe qu es un informe. Proporciona detalles de los
resultados de la elaboracin de informes, resultados cuantitativos, estilos de
informe y elaboracin de informes del resumen de secuencias.
Definicin de un informe
Definicin de un informe
Un informe puede incluir informacin cuantitativa y cualitativa de las mues-
tras que se analizan. El informe puede ser una copia impresa, informacin en
pantalla o un archivo electrnico. El informe puede incluir detalles de los
picos detectados durante el anlisis y grficos de las seales adquiridas.
Utilizacin de los informes de ChemStation 10
Elaboracin de informes de resultados
Existen dos tipos de informes disponibles:
Un informe no calibrado que no corrige la respuesta del detector, y
Un informe calibrado que muestra los resultados corregidos de la diferencia
en la respuesta del detector a varios compuestos de la muestra.
Informes no calibrados
Entre los informes no calibrados se incluyen informes de Area% y Height%.
Estos informes se utilizan principalmente para preparar informes calibrados.
Pueden resultar de utilidad como informe final si las cantidades de compuesto
necesarias para generar el rea de una unidad o la respuesta de altura de los
compuestos de inters son similares.
Informes calibrados
Los informes calibrados corrigen la diferencia en la respuesta del detector a
los compuestos informados. Una o varias muestras de calibracin que conten-
gan cantidades conocidas de los compuestos informados deben analizarse en
las mismas condiciones que la muestra desconocida. Los datos de integracin
de estas muestras de calibracin se utilizan para preparar una tabla de cali-
bracin. sta no es ms que una lista de los tiempos de retencin/migracin,
cantidades y respuestas que se utilizan en la generacin del informe. Los infor-
mes calibrados se basan en dos procedimientos de calibracin llamados
estndar interno y estndar externo.
Informe estndar externo
El informe ESTD (estndar externo) enumera los resultados con las unidades
seleccionadas o con cada compuesto como porcentaje de los compuestos pre-
sentes. El procedimiento estndar externo requiere que se conozca con exacti-
tud el volumen relativo inyectado de las muestras de calibracin y las
muestras desconocidas. La fiabilidad del informe estndar externo est limi-
tada por la reproducibilidad de la inyeccin y otros factores que pueden variar
de una muestra a otra.
Informe estndar interno
Las limitaciones del procedimiento estndar externo se pueden superar con el
mtodo del estndar interno. Se aade una cantidad exacta conocida de un
estndar interno (no necesariamente la misma cantidad), a las muestras de
calibracin y a la muestra desconocida. La respuesta de cada compuesto de
inters se divide por la respuesta de un estndar interno para proporcionar
una relacin de respuesta. Las curvas de calibracin son un grfico de la rela-
cin de respuesta frente a relacin de cantidad y esta informacin se utiliza en
el clculo de los resultados informados. De este modo se anulan los errores
inadvertidos en el volumen de la inyeccin o los cambios ligeros en el sistema
cromatogrfico/electroferogrfico que afectan a los compuestos similares. El
informe ISTD enumera los resultados de las unidades seleccionadas.
Informe de los grficos de control
El Informe de los grficos de control realiza el seguimiento de un solo resul-
tado a partir de los diferentes anlisis de un compuesto calibrado especfico.
La opcin Control Chart se instala una vez que ChemStation est en funciona-
miento. Los mtodos que utilizan esta caracterstica pasan el resultado a una
hoja de clculo de Microsoft Excel tras cada anlisis. Una vez hecho esto, se
utiliza Excel para imprimir.
Resultados cuantitativos
El tipo de informe se identifica por el nombre del mtodo de clculo utilizado
para prepararlo, por ejemplo, un informe ISTD. Ms adelante se facilita una
breve descripcin de cada tipo. Los clculos de cada informe se expresan
como Resultados cuantitativos en la pgina 233.
El Area% genera un informe ms sencillo y no requiere datos de calibracin
puesto que no se realiza la correccin de la diferencia en la respuesta del
detector de los componentes de las muestras. El informe % rea es particular-
mente til para desarrollar la tabla de calibracin que va a utilizarse con otras
opciones de los informes. El informe es adecuado para anlisis en los que la
diferencia en la respuesta del detector de los componentes no es importante.
El informe Height% es similar al informe % rea excepto en que se utiliza la
altura del pico para los clculos en vez del rea de picos.
En el informe Norm% cada componente se indica como un porcentaje de todos
los componentes presentes. Los picos de la respuesta del detector se corrigen
antes del clculo del porcentaje de cada uno de ellos.
El informe ESTD presenta la cantidad real de cada sustancia presente en las
unidades seleccionadas. Las cantidades se calculan con la tabla de calibracin
previamente establecida. El uso de un estndar externo requiere que se
conozca el volumen inyectado de la mezcla de calibracin.
El informe ESTD% presenta la cantidad relativa de cada sustancia como por-
centaje de la muestra inyectada. Las cantidades se calculan con la tabla de
calibracin previamente establecida. El uso de un estndar externo requiere
que se conozca el volumen inyectado de la mezcla de calibracin.
El informe ISTD presenta la cantidad real de cada sustancia. Las cantidades se
calculan con la curva de calibracin previamente establecida. El uso de un
estndar interno tanto en la muestra como en la mezcla de calibracin elimina
la necesidad de conocer y controlar el volumen de muestra inyectada. De este
modo, tambin se corrige cualquier variacin del rendimiento del instrumento
entre los anlisis.
El informe ISTD% presenta la cantidad relativa de cada sustancia como por-
centaje de muestra inyectada. El uso de un estndar interno tanto en la mues-
tra como en la mezcla de calibracin elimina la necesidad de conocer y
controlar el volumen de muestra inyectada. De este modo, tambin se corrige
cualquier variacin del rendimiento del instrumento entre los anlisis.
Informes de valores de campos personalizados
Informes de valores de campos personalizados
Se pueden aadir al informe los valores de los campos personalizados adjun-
tos a una muestra determinada de acuerdo con su mtodo de adquisicin. Los
campos personalizados de muestra se enumeran al final de la cabecera del
informe que contiene la informacin general de la muestra. Los campos perso-
nalizados de compuesto aparecen al final del informe.
Estilos de informe
Estilos de informe
Estn disponibles los siguientes estilos de informe:
Para aadir una seal a cualquier estilo de informe, marque la casilla corres-
pondiente en el cuadro de dilogo Especificar informe.
None: no se incluir ningn texto. Se informar del cromatograma slo si se
selecciona la opcin Agregar salida de cromatograma.
Short: contiene resultados de texto cuantitativos de todas las seales inte-
gradas configuradas en el cuadro de dilogo Detalles de la seal (slo LC) o
Seal (slo GC). La anchura de pico del informe breve se calcula con la fr-
mula ms compleja utilizada por el integrador: PW = 0,3 (IPRight - IPLeft) +
0,7 (rea/Altura) donde IPRight y IPLeft son los puntos de inflexin.
Detail: consta de cabecera, resultados cuantitativos y curvas de calibracin.
La cabecera se almacena en un fichero llamado RPTHEAD.TXT en el direc-
torio del mtodo. Puede cambiar la cabecera con un editor de texto para
incluir un texto especfico de mtodo.
Header + Short: contiene el fichero de cabecera y los resultados de texto
cuantitativos. La cabecera se almacena en un fichero llamado
RPTHEAD.TXT en el directorio del mtodo. Puede cambiar la cabecera con
un editor de texto para incluir un texto especfico de mtodo.
GLP + Short: contiene cabecera, informacin de la muestra, condiciones del
instrumento, libro de registro, seal y resultados cuantitativos. La cabecera
se almacena en un fichero llamado RPTHEAD.TXT en el directorio del mt-
odo. Puede cambiar la cabecera con un editor de texto para incluir un texto
especfico de mtodo.
GLP + Detail: contiene cabecera, informacin de la muestra, condiciones del
instrumento, libro de registro, seal, resultados cuantitativos y curvas de
calibracin. La cabecera se almacena en un fichero llamado RPTHEAD.TXT
en el directorio del mtodo. Puede cambiar la cabecera con un editor de
texto para incluir un texto especfico de mtodo.
Full: contiene cabecera, informacin de la muestra, condiciones del instru-
mento, libro de registro, seales y resultados cuantitativos. La cabecera se
almacena en un fichero llamado RPTHEAD.TXT en el directorio del mtodo.
Puede cambiar la cabecera con un editor de texto para incluir un texto
especfico de mtodo.
Estilos de informe
Performance: genera un informe de acuerdo con los lmites especificados en
el cuadro de dilogo Editar lmites de rendimiento del men Idoneidad del
sistema.
Para mtodos no calibrados, los parmetros del informe incluyen el nmero
del pico, el tiempo de retencin/migracin, el rea del pico, la altura del
pico, la descripcin de la seal, la anchura de pico a media altura (consulte
tambin Achura verdadera de pico Wx [min] en la pgina 262), la sime-
tra, k, la eficacia (platos) y la resolucin de cada pico.
Para mtodos calibrados, los parmetros incluyen el nmero del pico, el
tiempo de retencin/migracin, el nombre del compuesto, la cantidad, la
descripcin de la seal, la anchura verdadera del pico a media altura, la
simetra, k, la eficacia (platos) y la resolucin para cada pico.
La frmula de anchura del pico ms compleja que usa el integrador no es la
misma para el clculo del pico a media altura. Los valores de eficacia y
resolucin se basan en la anchura del pico calculada. La cabecera del
informe comprende toda la informacin relevante del mtodo, incluyendo
instrumentos, columna/capilar, muestra y parmetros de adquisicin. La
seal se representa tambin grficamente.
Performance + Noise: combina el estilo del informe de rendimiento con los
clculos de rangos de ruido definidos en el cuadro de dilogo Editar rango
de ruido del men Idoneidad del sistema. Adems, el ruido se da como seis
veces la desviacin estndar, pico a pico y como ruido ASTM; tambin se
determinan la deriva y la desviacin.
Performance + Extended: genera un informe ampliado con todos los parmet-
ros desde los clculos de rendimiento de pico y los grficos individuales de
cada pico. Los grficos incluyen la lnea base, las tangentes y las anchuras
del pico en las alturas definidas. Este tipo de informe incluye slo picos
calibrados.
Adems de los parmetros impresos para el estilo del informe de rendi-
miento, se determinan ms parmetros de rendimiento del pico: se impri-
men las horas de inicio y fin del pico, sesgo, exceso, anchura del pico, factor
de cola USP, intervalo de tiempo entre los puntos de datos, nmero de pun-
tos de datos, momentos estadsticos, platos, platos por metro, selectividad y
resolucin de cada pico. Se calculan la anchura de pico, los platos, los pla-
tos por metro, la selectividad y la resolucin por la anchura media verda-
dera, 5 sigma, la tangente y los mtodos de colas (si desea ms informacin
consulte Definiciones del test de rendimiento en la pgina 260).
Estilos de informe
La cabecera comprende toda la informacin relevante del mtodo, como
instrumento, columna/capilar, muestra y parmetros de adquisicin y un
grfico de la seal. Para ver una lista completa de los algoritmos del parm-
etro de rendimiento del pico, consulte Definiciones del test de
rendimiento en la pgina 260.
Los estilos de informes espectrales (Short + Spectrum, Detail + Spectrum,
Performance + Library Search) se describen en el manual de Familiarizacin con
el mdulo de espectros.
Adicin de un informe personalizado a los estilos de informe
Es posible aadir una plantilla de informe personalizada creada en la ventana
Diseo del informe de ChemStation a la lista de estilos de informe disponibles.
NOTA
Todos los informes, excepto los de rendimiento, enumeran las anchuras de picos
calculadas con una frmula ms compleja por el integrador (para obtener ms detalles
sobre el clculo de la anchura del pico, consulte Anchura de pico en la pgina 85).
Otros parmetros de estilo del informe
Otros parmetros de estilo del informe
Tabla de picos sumados
La tabla de suma de picos se proporciona para ciertas aplicaciones de las
industrias petroqumica y farmacutica que pueden realizarse de manera ms
eficaz con las siguientes funciones:
Suma de las reas de picos que se encuentran en un rango especificado por
el usuario.
Suma de las reas de un rango de picos y clculos con un solo multiplica-
dor.
Suma de las reas de todos los picos con el mismo nombre.
Cuando se genera el informe, ChemStation utiliza la tabla de sumas de picos
para generar un informe que se imprime tras los clculos del informe estndar
a excepcin de % Norm, que se reemplaza por el informe de suma de picos.
Diseo del informe de picos no calibrados
Para cambiar el diseo del informe de picos no calibrados elija una opcin de
las siguientes en el cuadro de dilogo Especificar informe.
Informar por separado de los picos no calibrados en una tabla diferente si
se selecciona la clasificacin por retencin/migracin, o tablas separadas si
se selecciona la clasificacin por seal.
Con la opcin Picos calibrados puede informar de los picos no calibrados
junto con los picos calibrados.
Utilice Sin informe para eliminar del informe los picos no calibrados.
Destino del informe
Destino del informe
El informe se puede enviar a:
Pantalla
El informe, incluido el texto y los grficos, se muestra en pantalla en la ven-
tana de previsualizacin del informe desde la que se puede imprimir.
Impresora
El informe con el texto y los grficos se imprime en la impresora seleccio-
nada.
Fichero
El informe se graba en un fichero. Si los datos se graban en un fichero, es
posible volver a procesarlos con otro programa, por ejemplo, Microsoft Win-
dows EXCEL.
Formatos del fichero de informes
Un informe se puede guardar en diferentes formatos. Cada uno de estos forma-
tos tiene una extensin concreta. Es posible seleccionar ms de un formato
para un informe.
.TXT El texto del informe se imprime como un fichero de texto UNICODE.
.EMF Cada grfico del informe (curva de seales o de calibracin) se guarda en un
metafichero de Microsoft Windows (WMF). Puede haber ms de un fichero
.WMF para un informe. El formato del fichero generado es el formato estndar
de metaficheros de Microsoft segn se define en la documentacin de desarro-
llo de software de Windows. Estos ficheros son compatibles con el formato
APM (Aldus Placeable Metafile) que utilizan muchos paquetes de software
propietario.
.DIF Los datos del informe tabulado se guardan en el formato de intercambio de
datos (DIF). Los programas de hojas de clculo utilizan este formato como, por
ejemplo, Microsoft Windows EXCEL. Independientemente del estilo de
informe que seleccione, slo se guardar la informacin contenida en el
informe tipo Breve.
Destino del informe
.CSV El informe en formato de valores separados con comas (CSV). Es un formato
muy sencillo para datos tabulados que muchos programas de hojas de clculo
y bases de datos aceptan. Independientemente del estilo de informe que selec-
cione, slo se guardar la informacin contenida en el informe de tipo Breve.
Pueden existir varios ficheros .DIF y .CSV para un nico informe. Para cada
bloque de informes, el primer fichero, por ejemplo REPORT00.CSV, contiene
informacin de la cabecera del informe. Los ficheros siguientes contienen los
resultados tabulados.
Si los resultados se clasifican por el tiempo de retencin/migracin, slo se
requiere un fichero para la tabla completa, por ejemplo, REPORT01.CSV.
Si se clasifican los resultados por seal, se requiere una tabla diferente para
cada seal. En este caso, los nombres asignados a los ficheros son
Report01.CSV hasta ReportNN.CSV, donde NN es el nmero de la seal.
.XLS El informe se transfiere a una hoja de clculo de Microsoft Excel en formato
XLS. Los datos, por lo general, requieren procesamiento adicional.
.PDF El informe se imprime en un fichero .pdf. La instalacin de ChemStation ins-
tala una impresora PDF, llamada "PDF-XChange 4.0". Esta impresora slo ser
visible en el men Inicio/Configuracin/Impresoras y faxes hasta que se reinicie el
equipo. Al iniciar ChemStation, se crea otra impresora temporal llamada "Che-
mStation PDF" basada en la impresora PDF-XChange. Mientras que haya una
sesin de ChemStation activa, ChemStation PDF aparecer en el men
Inicio/Configuracin/Impresoras y faxes. La opcin Unique pdf file name permite
almacenar los informes .pdf de forma independiente a los informes, con los
nombres de fichero
<nombre_contenedor_secuencia>_<nombre_fichero_datos>.pdf
Elaboracin de informes de resumen de secuencias
Introduccin
ChemStation puede imprimir una variedad de informes estndar para el anl-
isis de muestras individuales. La elaboracin de informes de resumen de
secuencias es una forma adicional de elaborar informes que le permite calcu-
lar e informar de los parmetros de un nmero de anlisis diferentes. Es til,
por ejemplo, comprobar la estabilidad de un instrumento y la robustez de un
mtodo nuevo.
Un informe de resumen de secuencias incluye:
Una pgina de ttulo
La configuracin del instrumento, incluyendo los nmeros de revisin del
instrumento y detalles acerca de la columna/capilar empleada
Las listas de la tabla de secuencia que describen lo que hara una secuencia
automatizada de anlisis
Descripciones del libro de registros de lo que hizo la secuencia y de los
resultados inesperados que ocurrieron en la secuencia
Listas de mtodos
Informes individuales de cada ejemplo
Estadsticas de los anlisis basadas en los criterios seleccionados (slo se
calculan las estadsticas de los compuestos calibrados) y
Un ndice general con las referencias del nmero de pginas de las seccio-
nes detalladas del informe.
Configuracin de un informe de resumen de secuencias
Cuando se configura un informe de resumen de secuencias, es posible selec-
cionar una combinacin de las nueve categoras siguientes activando las casi-
llas de verificacin correspondientes y, si lo cree conveniente, seleccionando
un estilo para el informe de las plantillas existentes. Cada plantilla tiene unos
contenidos y diseo diferentes de las distintas secciones del informe de resu-
men de secuencias entero.
Puede elegir cualquiera de los estilos del informe de resumen de secuencias
siguientes:
One Page Header
La plantilla GLP imprime GLP en letras grandes como una pgina de ttulo
para el informe siguiente. Se incluye la fecha y se destina un lugar para la
firma.
Configuration
Seleccione Configuration si desea incluir la configuracin del instrumento y las
especificaciones de la columna/capilar en el informe.
Sequence Table
Seleccione Sequence Table para incluir una lista de las secuencias, parmetros
de cuantificacin de muestras y nombres de los mtodos en el informe. La lista
muestra los anlisis efectuados por el sistema.
Logbook
Seleccione Logbook para obtener una lista de los anlisis que ha realizado el
sistema, incluyendo las condiciones del instrumento y los hechos inusuales
que ocurrieron mientras se analizaban las muestras.
Methods
Seleccione Methods para realizar una lista de los mtodos analticos que se uti-
lizaron en la serie de anlisis automatizados.
Analysis Reports
Seleccione Analysis Reports para realizar informes de los diferentes anlisis con
el estilo de informe que configur para el mtodo.
Los informes de anlisis individuales pueden imprimirse despus de cada
anlisis segn el estilo de informe que especific para el mtodo en cuestin y
las secciones de informe especificadas en Sequence Summary Reporting. Con-
sulte "Salida de secuencias" a continuacin.
SUILabel Type = Application > Statistics for Calibrated and Sample Runs
Si selecciona Anlisis estadsticos de calibracin se realizarn anlisis de ten-
dencias estadsticas de las muestras de calibracin. Si selecciona Anlisis
Statistics de muestras, se realizarn anlisis de tendencias estadsticas de los
anlisis de muestras (desconocidas). Para estas selecciones estn disponibles
los estilos de plantilla Estadstica estndar y Estadstica ampliada. Extended
Statistics imprime las estadsticas de los anlisis como grficos, mientras que
si selecciona Standard Statistics se imprime slo el texto. Las selecciones que
realice en los cuadros de dilogo Items and Limits for Extended Statistics se utili-
zan slo cuando elija la opcin Extended Statistic en el cuadro de dilogo
Sequence Summary Parameters.
Si selecciona la opcin Standard Statistic en el cuadro de dilogo Sequence Sum-
mary Parameters, las estadsticas de las que se informa son:
tiempo de retencin/migracin,
rea,
altura,
cantidad,
anchura de pico (basada en el estilo del informe; consulte Estilos de
informe en la pgina 236)
y simetra.
El clculo de estadsticas no distingue entre niveles de calibracin diferentes
en una secuencia que utiliza mtodos de calibracin multinivel. Esto significa
que las opciones dependientes de la concentracin como, por ejemplo, el rea,
la altura o la cantidad (consulte el cuadro de dilogo Elementos y Lmites de
estadstica ampliada) se anan, independientemente del nivel de calibracin.
Los valores de las Statistics for Calibration Runs no son tiles para los mtodos
de calibracin multinivel en secuencias.
Resumen
La seleccin Summary imprimir una introduccin de la serie de muestras ana-
lizada y de los mtodos utilizados. Si se selecciona la opcin Resumen junto
con otras selecciones de resumen de secuencias, se incluyen los nmeros de
pgina con informacin de otras partes del informe de resumen de secuencias.
Existen dos estilos de resumen disponibles:
Los detalles tabulados del Sample Summary de los anlisis de muestras de la
secuencia con alguna informacin de las muestras como el nombre de la mues-
tra, el nombre del fichero de datos, el mtodo y el nmero de vial.
La informacin de Compound Summary tabula los anlisis de muestras con los
resultados de cuantificacin bsicos de cada compuesto calibrado o de cada
pico, dependiendo del tipo de informe que se especifique en el mtodo.
Salida de secuencias
Puede definir tambin en el cuadro de dilogo Sequence Output donde va a
imprimir el informe de resumen.
Seleccione Report to file e introduzca en nombre del fichero para imprimir el
informe en el fichero seleccionado. Viene configurado por defecto que los
datos se guarden en el fichero GLPrprt.txt. En sistemas GC con inyeccin dual
los datos se guardan en GLPrptF.txt y GLPrptB.txt, para el inyector delantero
y el inyector trasero respectivamente.
Seleccione Report to PDF para guardar el informe como un documento PDF. El
informe se guarda en la carpeta de secuencias con el nombre CLPrprt.PDF
Seleccione Report to HTM para imprimir el informe en formato HTML. El
informe se guarda en un directorio HTM en el directorio de datos especificado
en Sequence Parameters. El informe HTM se compone de un fichero de ndice
(index.htm) y, al menos, dos otros ficheros, un fichero de contenido (con-
tents.htm) y un fichero GIF (Graphics Interchange Format) para cada pgina
del informe (p. ej. page1.gif). Para ver el informe html, abra el fichero de ndice
con el navegador.
Si selecciona Report to printer, el informe se imprime en la impresora del sis-
tema. Si imprime uno por uno los informes de los anlisis se activa tambin la
impresin de los informes de muestras de cada anlisis. Estos informes se
imprimen junto con los especificados en el informe de resumen de secuencias
que se crean al final de la secuencia entera. Puede especificar un destino
nuevo para esos informes en el cuadro de dilogo Sequence Output o utilizar el
destino especificado en los mtodos.
247
11
Evaluacin de la idoneidad del sistema
Determinacin del ruido 251
Clculo del ruido utilizando seis veces la desviacin estndar 251
Clculo del ruido con la frmula pico a pico 252
Clculo del ruido con el mtodo ASTM 253
Clculo seal-ruido 255
Deriva y desviacin 255
Clculo de la simetra de picos 256
Frmulas y clculos de idoneidad del sistema 258
Definiciones generales 259
Volumen nulo 259
Tiempo de retencin del compuesto no retenido t (m) [minutos] 259
Definiciones del test de rendimiento 260
Momentos estadsticos 260
Momentos estadsticos, sesgo y exceso 261
Achura verdadera de pico Wx [min] 262
Factor de capacidad (USP), ndice de capacidad (ASTM) k' 262
Factor de cola USP (USP) t 262
Nmero de platos tericos por columna (USP, ASTM) n 263
Nmero de platos tericos por metro N [1/m] 264
Retencin relativa (USP, ASTM), selectividad alpha 264
Resolucin (USP, ASTM) R 265
Definiciones de reproducibilidad 266
Media de muestra M 266
Desviacin estndar de la muestra S 266
Desviacin estndar relativa RSD[%] (USP) 267
Desviacin estndar de la media SM 267
Intervalo de confianza CI 268
Anlisis de regresin 269
Coeficiente de regresin 269
Desviacin estndar (S) 270
Acceso al nmero de doble precisin almacenado internamente 271
En este captulo se describe lo que puede hacer ChemStation para evaluar el
rendimiento tanto del instrumento analtico antes utilizado para el anlisis de
muestras como el mtodo analtico antes de que se utilice por rutina y compro-
bar el rendimiento de los anlisis antes y durante los anlisis rutinarios.
La evaluacin del rendimiento tanto del instrumento analtico antes de su uso
en anlisis de muestras como del mtodo antes de su uso diario, es una buena
prctica analtica. Tambin es recomendable comprobar el rendimiento de los
sistemas de anlisis antes y durante los anlisis rutinarios. El software Che-
mStation proporciona las herramientas para realizar los tres tipos de tests de
forma automtica. La comprobacin del instrumento incluye la sensibilidad
del detector, la precisin de los tiempos de retencin y migracin y la preci-
sin de las reas de picos. Un test de mtodos incluye la precisin de los tiem-
pos y cantidades de retencin y migracin, la selectividad y la robustez del
mtodo en las variaciones da a da mientras est en funcionamiento. La com-
probacin del sistema afecta a la precisin de la cantidad, la resolucin entre
dos picos especficos y las colas de picos.
Los laboratorios tienen que cumplir:
la Normativa de Buenas Prcticas de Laboratorio (GLP, Good Laboratory
Practice regulations),
la Normativa de Buenas Prcticas de Fabricacin (GMP, good Manufactu-
ring Practice regulations) y la Normativa actual de Buenas Prcticas de
Fabricacin (cGMP) y
la de Buenas Prcticas Automatizadas de Laboratorio (GALP, good Automa-
ted Laboratory Practice).
Se aconseja que los laboratorios realicen estas pruebas y documenten los
resultados exhaustivamente. Los laboratorios que formen parte de un sistema
de control de la calidad, por ejemplo para cumplir con la ISO9000, tendrn que
demostrar el buen funcionamiento de sus instrumentos.
ChemStation coteja los resultados de diferentes anlisis y los evala de forma
estadstica en el informe de resmenes de secuencias.
Evaluacin de la idoneidad del sistema 11
Los tests se documentan en un formato aceptado generalmente por las autori-
dades apropiadas y por auditores independientes. Las estadsticas incluyen:
tiempo de retencin/migracin del pico,
rea de pico,
cantidad,
altura de pico
Anchura de pico a media altura
Simetra de pico
Cola de pico
Factor de capacidad (k)
Nmeros de placa
Resolucin entre picos
Selectividad relativa al pico anterior
Sesgo y
Exceso
Se calcula el valor medio, la desviacin estndar, la desviacin estndar rela-
tiva y el intervalo de confianza. Puede configurar los lmites para la desviacin
estndar, la desviacin estndar relativa o el intervalo de confianza de estos
parmetros. Si los valores superan los lmites, el informe le indica que les
preste atencin.
La calidad de los datos analticos se sostiene manteniendo los registros de las
condiciones reales en el momentos en el que las mediciones se realizaron. Los
libros de registro de ChemStation recogen las condiciones del instrumento
antes y despus de los anlisis. La informacin se almacena con los datos e
incluye los datos de muestras. Las curvas de rendimiento del instrumento se
registran durante el anlisis entero como seales y se almacenan en el fichero
de datos. Si el instrumento lo admite, estos registros, superpuestos en el cro-
matograma, pueden recuperarse cuando se desee, por ejemplo durante una
auditora.
El ruido y la deriva de la lnea de base se pueden medir de forma automtica.
Un nivel mnimo detectable puede calcularse con los datos de altura de pico
para cada componente calibrado en el mtodo.
Finalmente, puede incluirse la configuracin del instrumento, los nmeros de
serie del instrumento, la identificacin de columnas/capilares y sus propios
comentarios en el informe impreso.
Los resultados de rendimiento ampliados se calculan slo para los componen-
tes calibrados en el mtodo, asegurando la caracterizacin en las horas de
retencin/migracin y los nombres de los componentes.
Un informe tpico de comprobacin del rendimiento del sistema contiene los
siguientes resultados de rendimiento:
Detalles del instrumento
Detalles de la columna/capilar
Mtodo analtico
Informacin de muestras
Informacin de adquisicin
Descripcin de la seal y determinacin del ruido de la lnea de base y
Seal etiquetada con tiempos de retencin/migracin o nombres de com-
puestos
Adems, se genera la siguiente informacin para cada compuesto calibrado en
el cromatograma:
tiempo de retencin/migracin
k,
simetra
Anchura de pico
Nmero de placa
Resolucin
Relacin seal-ruido, y
Nombre del compuesto
Determinacin del ruido
El ruido puede determinarse a partir de los valores de los puntos de datos de
un rango de tiempo seleccionado de una seal. El ruido se trata de tres formas
diferentes:
Como seis veces la desviacin estndar (sd) de la regresin lineal de la
deriva,
Como pico a pico (deriva corregida) y
Como determina el mtodo ASTM (ASTM E 685-93).
El ruido puede calcularse para un mximo de siete rangos de seal; los rangos
se especifican como parte de la configuracin de idoneidad del sistema en los
parmetros de informacin.
Clculo del ruido utilizando seis veces la desviacin estndar
Figura 42 Clculo del ruido utilizando seis veces la desviacin estndar
Se calcula la regresin lineal con todos los puntos de datos en el rango de
tiempo indicado (vase Anlisis de regresin en la pgina 269). El ruido se
calcula con la frmula:
N = 6 Std
ruidu -
6x Sd
lineal
endiente - deriva
Sd - 0eaviaciun eatandar
hura
8egreaiun
donde
N es el ruido segn el mtodo de desviacin estndar por seis y
Std es la desviacin estndar de la regresin lineal de todos los puntos de
datos en el rango de tiempo.
Clculo del ruido con la frmula pico a pico
Figura 43 El ruido va del pico mximo al pico mnimo (distancia)
Se calcula la deriva en primer lugar determinando la regresin lineal con
todos los puntos de datos en el rango de tiempo (vase Anlisis de
regresin en la pgina 269). Se resta la lnea de regresin lineal de todos los
puntos de datos en el rango de tiempo para proporcionar la seal de deriva
corregida. Entonces se calcula el ruido pico a pico con la frmula:
N = I
max
- I
min
donde
N es el ruido pico a pico,
I
max
es el pico de intensidad ms alta (mxima) y
I
min
es el pico de menos intensidad (mnima) en el rango de tiempo.
hura
{
ruidu -
icu uax.
uenua icu
u|n.
Clculo del ruido con el mtodo ASTM
Figura 44 Ruido determinado con el mtodo ASTM
El clculo del ruido ASTM (ASTM E 685-93) se basa en una prctica estndar
para comprobar los detectores fotomtricos de la longitud de onda variable
que se utilizan en cromatografa de lquidos, segn define la Sociedad Ameri-
cana para Ensayos y Materiales (American Society for Testing and Materials).
Se pueden distinguir tres tipos diferentes de ruido en funcin del tamao del
rango de tiempo. La determinacin del ruido se basa en las mediciones pico a
pico en los rangos de tiempo definidos.
Tiempo del ciclo, t
Ruido a largo plazo, la amplitud mxima de las variaciones aleatorias de la
seal del detector de frecuencias entre 6 y 60 ciclos por hora. El ruido a largo
plazo se determina cuando el rango de tiempo seleccionado se supera en una
hora. El rango de tiempo de cada ciclo (dt) se define en 10 minutos que sern
al menos seis ciclos en el rango de tiempo seleccionado.
Ruido a corto plazo, la amplitud mxima de las variaciones aleatorias de la
seal del detector de una frecuencia superior a un ciclo por minuto. El ruido a
corto plazo se determina para un rango de tiempo seleccionado entre 10 y 60
minutos. El rango de tiempo de cada ciclo (dt) se establece en un minuto que
tendr al menos 10 ciclos en el rango de tiempo seleccionado.
Ruido a muy corto plazo (no lo trata la ASTM E 685-93), este trmino se
introduce para describir la amplitud mxima de todas las variaciones aleato-
rias de la seal del detector de una frecuencia superior a un ciclo por 0,1
minutos.
deaviaciun
hura
dt
ruidu -
icu uax.
uenua u|n.
El ruido a muy corto plazo se determina para un rango de tiempo seleccionado
entre 1 y 10 minutos. El rango de tiempo de cada ciclo (dt) se establece en 0,1
minuto que ser al menos 10 ciclos en el rango de tiempo seleccionado.
Determinacin del nmero de ciclos, n
donde t es el tiempo de ciclo y t
tot
es el tiempo total sobre el que se calcula el
ruido.
Clculo del ruido pico a pico en cada ciclo
Se calcula la deriva en primer lugar determinando la regresin lineal con
todos los puntos de datos en el rango de tiempo (vase Anlisis de
regresin en la pgina 269). Se resta la lnea de regresin lineal de todos los
puntos de datos en el rango de tiempo para proporcionar la seal de deriva
corregida. Entonces se calcula el ruido pico a pico con la frmula:
donde N es el ruido pico a pico, I
max
es el pico de intensidad ms alta (mxi-
ma) y I
min
es el pico de menos intensidad (mnima) en el rango de tiempo.
Clculo del ruido ASTM
donde N
ASTM
es el ruido basado en el mtodo ASTM.
El clculo del ruido ASTM no se realiza si el rango de tiempo seleccionado es
inferior a un minuto. En funcin del rango, si el rango de tiempo seleccionado
es mayor o igual a un minuto, el ruido se determina con uno de los mtodos
ASTM descritos con anterioridad. Al menos se calculan siete puntos de datos
por ciclo. Los ciclos de clculo automtico del ruido se solapan en un 10%.
Clculo seal-ruido
Para el clculo seal-ruido, ChemStation utiliza seis veces la desviacin
estndar (sd) de la regresin lineal de la deriva para calcular el ruido. El rango
ms cercano al pico se selecciona de los rangos que se especifican en la confi-
guracin de idoneidad del sistema. El clculo seal-ruido se realiza con la
frmula:
El clculo seal-ruido se realiza para cado pico de la seal. Si ChemStation no
encuentra el valor del ruido, seal-ruido se representa con un "-".
Deriva y desviacin
La deriva se calcula por la pendiente de la regresin lineal (consulte la figura
Clculo del ruido utilizando seis veces la desviacin estndar) y la desviacin
se determina por el ruido pico a pico y los valores de los datos medios en los
ciclos de ruido ASTM (consulte Ruido determinado con el mtodo ASTM).
Clculo de la simetra de picos
ChemStation no determina la relacin de asimetra de un pico, normalmente
obtenida comparando las anchuras medias de picos al 10% de la altura del pico
o al 5% segn recomienda la FDA.
La simetra de picos se calcula como un pseudomomento por el integrado utili-
zando las siguientes ecuaciones de momentos:
Si no se encuentran puntos de inflexin o slo se informa de un punto de
inflexin, entonces la simetra del pico se calcula del siguiente modo:
Figura 45 Clculo del factor de simetra del pico
donde:
a
i
= rea de corte
t
i
= tiempo de corte
H
f
= altura del punto de inflexin delantero
H
r
= altura del punto de inflexin trasero
H = altura en el punto mximo
h
h
f
h
r
a
1
a a a
2 3 1
t
1
t t t
2 3 1
iniciu de
icu icu
finalizaciun de
1ieuu
L|nea haae
Frmulas y clculos de idoneidad del sistema
Frmulas y clculos de idoneidad del sistema
ChemStation utiliza las frmulas siguientes para obtener los resultados de
varios tests de idoneidad del sistema. Se informa de los resultados con los esti-
los de informe Rendimiento, Rendimiento + Ruido y rendimiento + Ampliado.
Cuando se especifica ASTM o USP para una definicin dada, la definicin
cumple las facilitadas en la referencia correspondiente. Sin embargo, los sm-
bolos que aqu se utilizan no son los mismos que los utilizados en la referencia.
Las dos referencias que se utilizan en este contexto son:
ASTM: Seccin E 682 - 93, Annual Book of ASTM Standards, vol. 14.01
USP: The United States Pharmacopeia, XX. Revision, pp. 943 - 946
Definiciones generales
Definiciones generales
Volumen nulo
donde:
d = dimetro de columna [cm]
= constante, relacin de circunferencia al dimetro de un crculo.
l = longitud de columna [cm]
f = fraccin del volumen de la columna que no ocupa la fase estacionaria pero
que estn disponibles para la fase mvil; valor por defecto de f = 0,68 (para
Hypersil)
Tiempo de retencin del compuesto no retenido t (m) [minutos]
(Tambin denominado tiempo muerto o tiempo nulo)
donde:
F = velocidad de flujo de LC [ml/min]
Definiciones del test de rendimiento
Momentos estadsticos
donde:
N Nmero de cortes de rea
A
i
Valor del corte del rea indexado por i
d
t
Intervalo de tiempo entre los cortes de rea adyacentes
t
0
Tiempo del primer corte de rea
Suma del ndice de inicio 1 al ndice final N para observaciones
discretas
Momentos estadsticos, sesgo y exceso
Los momentos estadsticos se calculan como una alternativa para describir
figuras de picos asimtricas. Hay un nmero de momentos de picos infinito,
pero slo se utilizan los cinco primeros en conexin con los picos cromatogrf-
icos. A stos se les denomina momento 0, momento 1... momento 4.
El momento 0 representa el rea de pico.
El momento 1 es el tiempo medio de retencin o el tiempo de retencin
medido en el centro de gravedad del pico. Es diferente del tiempo de retencin
cromatogrfico medido en el mximo del pico, a menos que el pico sea simtri-
co.
El momento 2 es la varianza del pico, una medida de la dispersin lateral. Es
la suma de la varianza contribuida por partes diferentes del sistema de instru-
mentos.
El momento 3 describe la simetra vertical o sesgo. Es la medida del inicio del
pico a partir del estndar gaussiano. El sesgo que se produce de forma adicio-
nal en el informe Rendimiento y ampliado no tiene dimensiones. Un pico
simtrico tiene un sesgo cero. Los picos con cola tienen sesgo positivo y el
momento 1 es mayor que el tiempo de retencin. Los picos con frente tienen
sesgo negativo y el momento 1 es menor que el tiempo de retencin.
El momento 4 o exceso es la medicin de la compresin o estrechamiento del
pico en el eje vertical y cmo se compara a un estndar gaussiano para el que
el momento 4 es cero. Se puede visualizar moviendo o apartando los lados del
pico gaussiano en un rea constante. Si se comprime o aplasta el pico en la
comparacin, el exceso es negativo. Si es ms alto, el exceso es positivo. Ade-
ms el exceso se indica en el informe Rendimiento y ampliado en su forma sin
dimensiones.
Achura verdadera de pico W
x
[min]
Factor de capacidad (USP), ndice de capacidad (ASTM) k'
donde:
T
R
= tiempo de retencin del pico [min]
T
0
= tiempo nulo [min]
Factor de cola USP (USP) t
donde:
t
w
= distancia en minutos entre el frente del pico y TR, medida al 5% de la
altura de pico
W
5.0
= anchura del pico al 5% de la altura del pico [min]
W
B
anchura de la base, 4 sigma, obtenida insertando tangentes en los puntos de
inflexin con la lnea base (anchura del pico tangente)
W
4,4
anchura a 4,4% de altura (anchura 5 sigma)
W
5,0
anchura al 5% de altura (anchura de pico con cola), para el factor de cola USP
W
50,0
anchura al 50% de altura (anchura de pico a media altura verdadera o sigma 2,35).
Figura 46 Parmetros de rendimiento
Nmero de platos tericos por columna (USP, ASTM) n
Mtodo tangente (USP, ASTM):
donde:
W
B
= anchura de base [min]
Mtodo de media anchura (ASTM):
donde:
W
50
= anchura de pico a media altura [min]
h
W
t
W
W
T
5% H
hora
|inea base |n|c|a|
R
v
5.0
B
50
Mtodo 5 sigma:
donde:
W
4.4
= anchura del pico al 4,4% de la altura del pico [min]
Mtodo de varianza:
donde:
Mx = x
o
momento estadstico (consulte tambin Momentos estadsticos en la
pgina 260)
Nmero de platos tericos por metro N [1/m]
donde:
n = nmero de platos tericos
l = longitud de columna [cm]
Retencin relativa (USP, ASTM), selectividad alpha
(Perteneciente a los picos a y b, T
R
del pico a < T
R
del pico b)
donde:
k'
(x)
= factor de capacidad del pico x
Resolucin (USP, ASTM) R
(Perteneciente a los picos a y b, T
R
del pico a < T
R
del pico b; T
R
en minutos)
Mtodo tangente (USP, ASTM):
Mtodo 5 sigma:
Mtodo de media anchura (resolucin en el informe de rendimiento):
Mtodo estadstico:
donde:
M1
(x)
= tiempo de retencin medio del pico x (momento estadstico 1) [min]
W
B(x)
= anchura de la base del pico x [min]
W
4,4(x)
= anchura al 4,4% de altura del pico x [min]
W
50(x)
= anchura al 50% de altura del pico x [min]
W
S
(x) = anchura derivada de momentos estadsticos = para el pico x
[min] (consulte tambin Momentos estadsticos en la pgina 260)
Definiciones de reproducibilidad
Para la revisin estadstica de los datos analticos en cuando a la reproducibi-
lidad, se considera una secuencia como una muestra aleatoria pequea extra-
da de un nmero infinito de resultados experimentales posibles. Para lograr
un conjunto de resultados completos, se requiere una cantidad sin lmite de
material de muestras as como tiempo. Estrictamente los datos estadsticos no
slo se aplican a un conjunto completo autocontenido o poblacin de datos.
Por consiguiente constituye un requisito previo para este tratamiento que la
muestra seleccionada sea representantiva de todos los datos.
Media de muestra M
El valor medio M de una muestra aleatoria consistente en N medidas, se cal-
cula a partir de un nmero limitado de valores X
i
nicos observados de N
indexados con un contador consecutivo y segn la frmula:
donde:
N = nmero de observaciones discretas
X
i
= valor de observaciones discretas indexadas por i
Desviacin estndar de la muestra S
Considere una muestra aleatoria de tamao N. La desviacin estndar S de la
muestra para la muestra finita seleccionada de una gran cantidad de datos se
determina por
La desviacin estndar S de la muestra difiere en dos puntos de la desviacin
estndar s del resto de datos:
En vez del valor medio real slo el valor medio de la muestra M se utiliza
divisin por N-1 en vez de N.
Desviacin estndar relativa RSD[%] (USP)
La desviacin estndar relativa se define como
Desviacin estndar de la media S
M
M es la media de la muestra y S la desviacin estndar [o (N-1)] de la muestra.
La desviacin estndar S
M
de la media de la muestra M se determina por
Se puede ilustrar adems con un ejemplo:
Mientras que el tiempo de retencin de un componente dado puede desviarse
ligeramente del valor medio calculado en una secuencia, los datos de otra
secuencia pueden diferir mucho ms por, como ejemplo, cambios de tempera-
tura ambiental, degradacin del material de la columna con el tiempo, etc.
Para determinar esta desviacin, la desviacin estndar de la media de la
muestra S
M
se calcula con la frmula anterior.
Intervalo de confianza CI
El intervalo de confianza se calcula para proporcionar informacin sobre si es
bueno el valor medio de clculo, cuando se aplica a todos los datos y no slo a
la muestra.
El intervalo de confianza en 100 (1 -) % para la media global se calcula con
donde:
el punto de porcentaje de la tabla de distribucin t con una probabilidad de
riesgo de)
Para las estadsticas extendidas en el informe de resmenes de secuencias
puede utilizarse el 95% del intervalo de confianza ( = 0,05).
Conviene utilizar la distribucin t (o "distribucin del estudiante") para vol-
menes de muestras pequeos. En caso de grandes volmenes de muestras, los
resultados de la distribucin t y la distribucin normal (gaussiana) no difieren
en nada. Por tanto, para 30 o ms muestras, puede utilizarse la distribucin
normal (sera muy difcil calcular la distribucin t para grandes nmeros; la
distribucin normal es la mejor forma de aproximacin).
Intervalo de confianza del 95% para 6 muestras:
1 - = 0,95
N = 6
El valor correcto de t se extrae de la tabla de distribucin t con 5 (N-1) grados
de libertad y con el valor /2, siendo 0,025. Se da la siguiente frmula de clc-
ulo de CI:
Anlisis de regresin
Dada
Funcin lineal:
Coeficientes:
donde:
Coeficiente de regresin
donde:
Desviacin estndar (S)
Acceso al nmero de doble precisin almacenado internamente
Para propsitos de validacin, sera necesario calcular manualmente los resul-
tados de ChemStation como curvas de calibracin, coeficientes de correlacin,
platos tericos, etc. Al realizar esta operacin, hay que tener en cuenta el for-
mato de nmeros que utiliza ChemStation.
Para todos los nmeros que ChemStation almacene internamente se utiliza el
tipo de datos "C" DOBLE. Esto quiere decir que se almacenan 14 dgitos para
cada nmero. La puesta en prctica de este tipo de datos se adhiere a la de
Microsoft de la normativa IEEE para datos de tipo C y las reglas que implican
(consulte los documentos de Microsoft Q42980, Q145889 y Q125056).
Debido al nmero ilimitado de parmetros que se utilizan en el clculo de la
tabla de calibracin, no es posible calcular el error exacto que posiblemente se
introduzca por la propagacin y acumulacin de errores relacionados. Los
tests exhaustivos con las distintas construcciones de las curvas de calibracin
muestran, en cambio, que se puede garantizar la exactitud hasta 10 dgitos.
Mientras que en la repeticin del rea, de la altura y del tiempo de retencin
de anlisis cromatogrficos tiene normalmente tres dgitos, son suficientes 10
dgitos importantes de los clculos. Por esta razn, la calibracin, y otras
tablas, muestran un mximo de 10 dgitos importantes.
Si se requiere un clculo externo (manual) para validacin, se recomienda que
se utilicen todos los dgitos para los clculos internos. Con los datos mostra-
dos o relacionados de los clculos externos puede obtenerse resultados que
difieran de ChemStation por errores de redondeo.
En el prrafo siguiente se describe cmo acceder a los dgitos almacenados
internos para nmeros que normalmente se requieren para clculos manuales.
En todos los casos, es preciso cargar e informar sobre el fichero de datos con
el estilo de informe apropiado antes de ejecutar el comando de la lista. Todos
los comandos se introducen en la lnea de comandos de ChemStation, disponi-
ble en el men de visualizacin. La informacin del fichero C:\CHEM32\
TEMP.TXT puede visualizarse en el Bloc de notas o en un editor de texto
apropiado.
Informacin del pico sin procesar:
Tiempo de retencin
rea
Altura
Anchura (integrador)
Simetra
Tiempo de inicio del pico
Tiempo de fin del pico
Utilice la entrada de la lnea de comandos:
DUMPTABLE CHROMREG, INTRESULTS,C:\CHEM32\1\TEMP\
INTRES.TXT
Informacin del pico procesada:
Tiempo de retencin calculado
Tiempo de retencin esperado
rea
Altura
Anchura (integrador)
Simetra
Anchura media - Altura pico medio (Rendimiento y Rendimiento ampliado)
Factor de cola (Rendimiento y Rendimiento ampliado)
Selectividad (Rendimiento y Rendimiento ampliado)
K` (Rendimiento ampliado)
Anchura del pico tangente (Rendimiento ampliado)
Sesgo (Rendimiento ampliado)
Platos tericos - Anchura media (Rendimiento y Rendimiento ampliado)
Platos tericos - Tangente (Rendimiento ampliado)
Platos tericos - Sigma 5 (Rendimiento ampliado)
Platos tericos - Estadstica (Rendimiento ampliado)
Resolucin - Anchura media (Rendimiento y Rendimiento ampliado)
Resolucin - Tangente (Rendimiento ampliado)
Resolucin - Sigma 5 (Rendimiento ampliado)
Resolucin - Estadstica (Rendimiento ampliado)
DUMPTABLE CHROMRES, PEAK,C:\CHEM32\1\TEMP\PEAK.TXT
Informacin del componente procesado:
Cantidad calculada
DUMPTABLE CHROMRES, COMPOUND,C:\CHEM32\1\TEMP\COM-
POUND.TXT
Informacin de la tabla de calibracin:
Nmero del nivel
Cantidad
rea
Altura
DUMPTABLE _DAMETHOD, CALPOINT,C:\CHEM32\1\TEMP\CALIB.TXT
Informacin de regresin lineal:
Interceptacin Y (CurveParm1)
Pendiente (CurveParm2)
Coeficiente de correlacin
DUMPTABLE _DAMETHOD, PEAK,C:\CHEM32\1\TEMP\REGRESS.TXT
275
12
Verificacin del sistema
Ventanas de verificacin y diagnstico 276
Verificacin del sistema 276
Registro GLPsave 279
Funcin del test del DAD 281
Funcin de revisin del test del DAD 281
En este captulo se describen la funcin de verificacin y las funciones de veri-
ficacin GLP de ChemStation.
Ventanas de verificacin y diagnstico
Si el instrumento configurado las admite, por ejemplo, los mdulos LC de la
Agilent Serie 1100/1200, ChemStation contiene dos ventanas adicionales para
la verificacin de los instrumentos y las tareas de diagnstico. Para obtener
ms informacin, consulte el sistema de ayuda en lnea.
Verificacin del sistema
La verificacin del sistema es un componente clave en la utilizacin diaria de
instrumento analtico en un laboratorio regulado. Las opciones de verificacin
GLP estn diseadas para ayudarle a probar que el software o componentes
importantes de ste funcionan correctamente o funcionaban correctamente
cuando se realiz un anlisis concreto.
La funcin de verificacin de secuencias de ChemStation le permite verificar
el funcionamiento correcto del software ChemStation. Puede hacerlo reproce-
sando ficheros de datos segn los mtodos especficos y comparando los resul-
tados con un estndar predefinido. La funcin de verificacin es
particularmente importante para probar la integridad de los resultados de
integracin y cuantificacin.
Puede utilizar el test de verificacin estndar o definir sus propios tests con
su propio mtodo y ficheros de datos para comprobar las combinaciones de
software algortmicas utilizadas en los mtodos de anlisis. El test de verifica-
cin es un archivo protegido que no puede cambiarse ni borrarse.
La opcin Verificacin en la ventana Anlisis de datos le permite escoger cual-
quiera de las siguientes opciones:
realizar un test de verificacin en la base de datos,
definir un nuevo test de verificacin y aadirlo a la base de datos y
borrar un test de verificacin de la base de datos.
La seccin Cmo... del sistema de ayuda en lnea describe cmo realizar estas
tareas. Cuando ejecuta un test de verificacin, puede seleccionar entre reali-
zar todo el test o seleccionar una combinacin de partes.
Los resultados del test de verificacin se guardan en formato binario en el sub-
directorio predeterminado: c:\CHEM32\1\Verify, junto con los archivos del
mtodo y de datos. El subdirectorio Verify est al mismo nivel que la secuen-
cia, mtodos y subdirectorios de datos. Puede enviar los resultados a una
impresora o a un archivo. Los resultados del test, incluyendo el resultado de
un test de verificacin combinado, se consideran como aprobados o suspen-
sos.
Los siguientes componentes del test de verificacin estn disponibles:
Electrnica digital (slo DAD Agilent Serie 1100/1200)
Un cromatograma de comprobacin se almacena en el detector de diodo-array.
Este cromatograma se enva a ChemStation despus de que haya superado los
mismos pasos de preprocesamiento como datos primarios normales de los
fotodiodos. Los datos resultantes se comparan con los datos del resultado ori-
ginal almacenados en ChemStation para el cromatograma del test. Si no coin-
ciden, el test fracasa. Este test asegura que la electrnica del DAD, que se
encarga del preprocesamiento de los datos, funciona todava correctamente.
Se utiliza un cromatograma del test guardado; la lmpara y el diodo-array no
forman parte de este test. Se pueden comprobar con la Funcin del test del
DAD en la pgina 281.
Integracin del pico
Se integra de nuevo el fichero de datos con un mtodo original. Se comparan
los resultados con los resultados de integracin originales que se guardan en
el registro de verificacin. Si no coinciden, el test fracasa.
Cuantificacin de compuestos
Se cuantifican de nuevo los compuestos del fichero de datos. Se comparan los
resultados con los resultados de cuantificacin originales que se guardan en el
registro de verificacin. Si no coinciden, el test fracasa.
Impresin de informes
Se imprime de nuevo el informe original.
En la pgina siguiente se muestra un ejemplo del test de verificacin comple-
tado con xito.
Registro GLPsave
Registro GLPsave
El registro GLPsave se guarda al final de cada anlisis cuando se selecciona la
lista de control del anlisis. Contiene la siguiente informacin:
seales,
libro de registro,
tabla de resultados de integracin,
tabla de resultados de cuantificacin,
datos de rendimiento del instrumento y
mtodo de anlisis de datos.
Es un registro protegido completo, generado en el momento del anlisis. Puede
consultarlo en cualquier momento del futuro como prueba de los mtodos ana-
lticos.
La opcin Registro GLPsave en la ventana Anlisis de datos le permite revisar
el fichero de registro GLPsave en cualquier momento. El fichero est protegido
por una clave y se codifica en binario para asegurar que no se cambia.
En el cuadro de dilogo que utiliz para seleccionar el registro GLPsave para
revisin, puede seleccionar una de las opciones de revisin de las siguientes:
cargar el mtodo original,
cargar las seales originales,
cargar los datos de rendimiento del instrumento,
imprimir el mtodo original,
imprimir los resultados de integracin originales,
imprimir los resultados de cuantificacin originales y
generar un informe original del mtodo y las seales originales.
Puede utilizar la funcin de revisin GLP para mostrar que los datos cromato-
grficos son originales, probar la calidad del anlisis de los datos de rendi-
miento del instrumento y demostrar la autenticidad de la interpretacin de los
datos.
Por ejemplo puede:
Registro GLPsave
volver a cargar e imprimir el anlisis de datos con parte del mtodo utili-
zado en el momento de anlisis de la muestra para probar que la evaluacin
de datos, presentada como resultados de los anlisis, no se ha modificado
de ninguna forma y
revisar sin volver a calcular los resultados de integracin y cuantificacin
para probar la autenticidad del informe.
Funcin del test del DAD
Funcin del test del DAD
Se pueden utilizar los test del detector como un paso en la validacin del sis-
tema rutinario de un instrumento analtico en un laboratorio regulado.
El test del DAD evala el rendimiento del detector de diodo-array. Cuando
selecciona el test del DAD del men Instrument (slo para LC3D y CE) se com-
prueba la intensidad y calibracin de la longitud de onda del instrumento. Si
presiona Save, los resultados del test se guardan de forma automtica en la
base de datos DADTest, en un fichero de registro llamado DADTest.Reg en el
directorio de instrumentos predeterminados.
Funcin de revisin del test del DAD
La funcin Review DAD Test del men View de Anlisis de datos le permite revi-
sar el fichero DADTest.Reg en cualquier momento. El fichero est protegido por
una clave y se codifica en binario para asegurar que no se cambia.
Puede seleccionar cualquiera de las siguientes partes del test del DAD para
revisar:
Show Holmium
Spectra
Se expresan en grficos los espectros del holmio que se enumeran en la tabla
de revisin del test del DAD. Se etiqueta el espectro activo.
Show Intensity
Spectra
Se expresan en grficos los espectros de intensidad que se enumeran en la
tabla de revisin del test del DAD. Se etiqueta el espectro activo.
Save as New
Database
Si cambia la lmpara del DAD puede reiniciar el DADTest borrando los resulta-
dos del test no deseados de la tabla y utilizando la funcin Save as New Data-
base (Guardar como nueva base de datos).
Show Selected
Spectra
Muestra los espectros seleccionados en la tabla.
Show Intensity
Graph
(Mostrar el grfico de intensidad)Puede representar un grfico de intensidad
para dar indicaciones de la vida de la lmpara en el detector de diodo-array.
El grfico proporciona la funcin de intensidad mxima de la lmpara frente
al tiempo.
Glosario UI
Glosario UI
A
access level
nivel de acceso
Analysis Reports
Informes de anlisis
Apply Manual Events from Method
Aplicar eventos manuales del mtodo
Area reject
Rechazo por rea
Area%
% de rea
Autointegrate
Integracin automtica
B
Batch
Lote
C
Calibration Settings
Configuracin de calibracin
Character
Carcter
Compound Details
Detalles de compuesto
Compound Summary
Resumen compuesto
Configuration
Configuracin
Contents
Contenido
Control Chart
diagramas de control
current method
mtodo actual
Current Method
Mtodo actual
D
Data Analysis
Anlisis de datos
Data Analysis Navigation table
Navegacin de anlisis de datos
Data File
Fichero de datos
Delete Peak(s)
Eliminar pico(s)
Description
Descripcin
Detail
Detalle
Draw Baseline
Dibujar lnea base
E
ESTD%
% ESTD
Extended
Ampliado
Extended Performance
rendimiento ampliado
Extended Statistic
Estadstica ampliada
Extended Statistic Parameters
Parmetros de estadstica ampliada
Extended Statistics
Estadstica ampliada
F
Full
Completo
H
Header
Cabecera
height reject
Rechazo por altura
Height reject
Rechazo por altura
Height%
% de altura
I
Individual Method from Data File (DA.M)
Mtodo individual de fichero de datos
(DA.M)
Initial peak width
Anchura de pico inicial
Integration
Integracin
Integration Events Table
tabla Eventos de integracin
ISTD%
% ISTD
Items and Limits for Extended Statistics
Elementos y Lmites de estadstica
ampliada
L
Library Search
Bsqueda en bibliotecas
Glosario UI
load DA method from data file
Cargar mtodo DA desde fichero de
datos
Load DA method from data file
Cargar mtodo DA de fichero de datos
Logbook
Libro de registro
M
Manual Events
Eventos manuales
Manual Integration
integracin manual
Method and Run Control
Mtodo y Control de anlisis
Methods
Mtodos
N
Navigation Table
tabla de navegacin
Negative Peaks
Picos negativos
Noise
Ruido
None
Ninguno
Norm%
% Norm
O
One Page Header
Una pgina de cabecera
P
page x of y
pgina x de y
Partial Sequence
Secuencia parcial
parts of method to run
parte del mtodo que analizar
Path
Ruta
Paths
Rutas
peak width
Anchura de pico
Performance
rendimiento
Performance and Noise
rendimiento y ruido
Preference
preferencias
Preferences
Preferencias
Preferences / Signal/Review
preferencias/seal/revisin
Preferences / Signal/Review Option
Opciones de preferencias/seal/revi-
sin
Preferences / Signal/Review Options
Opciones de preferencias/seal/revi-
sin
Print
Imprimir
Print Current Sequence
Imprimir secuencia actual
Q
Quantification Parameters
Parmetros de cuantificacin
R
Remove Manual Events from Method
Quitar eventos manuales del mtodo
Report to file
Informe en fichero
Report to HTM
Informe en HTM
Report to PDF
Informe en PDF
Report to printer
Informe a impresora
reprocess
reproceso
Reprocessing only
Slo reprocesar
Review DAD Test
Revisar test del DAD
Run Time Checklist
S
Sample Information
Informacin de muestra
Sample Summary
Resumen de muestra
save as
Guardar como
Save as New Database
Guardar como nueva base de datos
Save Current Sequence
Guardar secuencia actual
Sequence
Secuencia
Sequence Method
Mtodo de secuencia
Sequence Output
Salida de secuencias
Sequence Parameters
Sequence Summary Parameters
Parmetros de resumen de secuencias
Sequence Summary Reporting
Informes de resumen de secuencias
Glosario UI
Sequence Table
Tabla de secuencia
Short
Breve
shoulder detection
Deteccin de hombros
shutdown
desconexin
Signal Options
Opciones de seal
Slope sensitivity
Sensibilidad de pendiente
Spectrum
Espectro
Split Peak
Divisin de pico
Standard Data Analysis
Anlisis de datos estndar
Standard Statistic
Estadstica estndar
Standard Statistics
Estadstica estndar
Statistics
estadsticos
Statistics for Calibration Runs
estadsticas de anlisis de calibracin
Status
Estado
SUILabel Type = Application > Statistics for
Calibrated and Sample Runs
SUILabel Type = Application > Estads-
ticas de anlisis calibrados y de mues-
tras
Summary
Resumen
T
Tail Skim Height Ratio
Relacin de alturas para divisin de
cola
Tangent Skim
Divisin tangencial
U
Unique Folder Creation
Creacin de carpeta nica
Unique folder Creation OFF
Unique Folder Creation OFF
Unique Folder Creation ON
Unique pdf file name
Nombre de fichero pdf nico
Update .... Method
Actualizar mtodo...
Update Manual Events of Method
Actualizar eventos manuales del mt-
odo
Update Master Method
actualizacin del mtodo maestro
Update Sequence Method
actualizacin de la secuencia
Use Sequence Table information
Informacin de la tabla de secuencia
de uso
Use Sequence Table Information
Informacin de la tabla de secuencia
de uso
V
Valley
Valle
Valley Height Ratio
Relacin de altura con respecto al valle
View
Ver
ndice
ndice
%
% de altura
clculo 126
% de rea
clculo 126
% Norm
clculo 131
informe 131
A
adquisicin de datos
definicin 64
agrupamiento
calibracin cclica 206
ajustes de curva de
calibracin 161
ajustes de
curva de calibracin 161
curva 161, 161
anlisis de datos 46
informes especializados 24
anchura de pico inicial 111
anchura de pico
a altura x% 262
tangencial 262
rea de pico 108

A
asignacin de la lnea base 79, 95
automatizacin 171
B
buenas prcticas de laboratorio 29
C
clculo de porcentaje 126
clculo
% Norm 131
ESTD 128, 128
simetra de picos 256
calibracin cclica
agrupamiento 206
calibracin multinivel 158
calibracin
cclica multinivel 199
multinivel 158, 158
ChemStation
descripcin general 11
CI 268
compuesto de
calibracin 152
compuesto 152
conectar el
origen 161
configuracin de
calibracin 135
tabla de lotes 223
configuracin 15
construccin de la lnea base 95
control instrumental 46
trabajo en red 33
cualificadores de
picos 146
cualificadores 146
cuantificacin de
picos 122
cuantificacin
definicin 122
procedimiento de ESTD 128
curva de calibracin
definicin 154
descripcin de 154
forzada a travs de cero
(origen) 161
multinivel 158
ponderacin del punto de
calibracin 161
nico nivel 157
curva de
calibracin 154
curva
calibracin 154
D
Da.M 59
derivada 86
desviacin estndar
de media 267
muestra 266
relativa 267
residual 155
desviacin 261
deteccin de hombros 111
Determinacin de ruido ASTM 253
determinacin de ruido 253
directorio
mtodo 54
distribucin t 268
divisin tangencial 100
ndice
E
estndar externo 128
estndar
externo 128
estructura de
directorios 36
eventos de integracin 77, 111
F
factor de capacidad 262
factor de cola USP 262
factor de cola 262
factor de dilucin 129
fichero de mtodo
parmetros de instrumentos 54
fichero
mtodo 54
filtro de
reconocimiento de picos 86, 86
fin del pico 91
formatos de ficheros
informe de lotes 227
informe de resultados 240
frmulas de idoneidad del sistema
anchura de pico 262
desviacin estndar 266
factor de capacidad 262
factor de cola USP 262
media 266
nmero de platos 263
resolucin 265
retencin relativa 264
RSD 267
volumen nulo 259
frmulas
definiciones del test de
rendimiento 260
definiciones generales 259
fuerza del
origen 161
G
guardar con datos
copia del mtodo 59
H
hombro 93
hora de inicio 77
I
idoneidad del sistema
estadsticas incluidas 248
lmites 249
ignorar el
origen 161
incluir el
origen 161
informacin del mtodo 46
informe de idoneidad del sistema
estilo de rendimiento y ruido 24
informe de rendimiento 24
rendimiento ampliado 25
informe de resumen de secuencias
configuracin 243
especificacin de la salida 245
estadsticas 244
informes de anlisis 243
libro de registro 243
mtodos 243
pgina de resumen 244
tabla de muestras 243
tabla de secuencia 243
informe de resmenes de secuencias
cabecera 243
informe
diagrama de control 26
estilo 236
formatos de ficheros 240
no calibrado 231
personalizado 26
resumen de secuencias 25
informes de diagramas de control 26
informes de idoneidad del sistema 24
informes de lotes
formatos de salida 227
informes
idoneidad del sistema 24
personalizados 26
inicio del pico 91
integracin manual 117
intervalo de confianza 268
L
lmites de cantidad 158
lnea base inicial 77, 78
lista de control del anlisis 47
M
marcas de sealizacin de
integracin 74
marcas de sealizacin 74
mximo del pico 92
mtodo
directorio 54
editar 52
Mtodos
almacenados 49
mdulos de evaluacin de datos 12
mdulos instrumentales 12
momento de finalizacin 77
momentos estadsticos 261
muestra de
calibracin 152
muestra desconocida 156
muestra
calibracin 152
desconocida 156
ndice
multinivel
secuencias cclicas 199
multiplicador 129
N
nivel de
calibracin 152
nmero de platos 263
O
operacin del
mtodo 55
P
penetracin de la lnea base 97
Personalizacin de
ChemStation 27
peso
cuadrtico 161
igual 161
lineal 161
puntos de calibracin 161
pico de disolvente 109
pico negativo 80
pico
altura 126
picos de referencia
mltiples 146, 146
picos no asignados 105
pico
simetra 256
plantilla de secuencia 174
precisin de
anlisis 168
precisin
anlisis 168
formato del nmero 271
Preferencias 36
procedimiento de
ESTD 128
punto de
calibracin 152
punto mximo 77
R
recalibracin
definicin 168
por qu 168
rechazo por altura 111, 113
rechazo por rea 111
reconocimiento de picos 89
refinamiento de la integracin 113
relacin de capacidad 262
relacin de
respuesta 146
rendimiento
definiciones del test 260
resolucin 265
respuesta del detector 157
respuesta de
picos 146
respuesta
detector 157
resto
relativo 155
retencin relativa 264
S
secuencia
calibracin cclica 199
crear 181
editar 181
guardar 181
seal analgica 64
seal digital 64
seal
analgica 64
detalles 47
digital 64
sensibilidad de pendiente 111
T
tabla de calibracin
qu es? 153
tabla de lotes
informes 227
tipo de muestra eliminado 223
tiempo de retencin
absoluto 142
tratamiento del
origen 161
V
ventana de tiempo de retencin de
pico 143
ventana de referencia 143
ventana de tiempo
retencin/migracin 142
ventanas de tiempo de retencin 143
visin general del software
configuracin del sistema 15
mtodos y secuencias 15
sistema operativo 15
volumen nulo 259
Agilent Technologies 2004, 2005-2009
Printed in Germany
07/09
*G2070-95126*
*G2070-95126*
G2070-95126
www.agilent.com
En este manual
Se describen varios conceptos de Agilent Che-
mStation. El objetivo es ampliar su compren-
sin sobre el funcionamiento de ChemStation.
Para obtener ms informacin acerca de cmo
utilizar ChemStation, consulte el sistema de
ayuda general y el "Tutorial" de la ayuda en ln-
ea.

G2070-95126 Understanding Your ChemStation

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Familiarizacin con Agilent ChemStation 109

rea de pico 108

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