Beruflich Dokumente
Kultur Dokumente
CATEDRA DE MICROBIOLOGIE LP 4
identificarea bacteriilor
testari pentru initierea si monitorizarea terapiei antimicrobiene.
izolatele cu semnificatie clinica, algoritmul si stadiul pana la care conduce identificarea acestora
Mediile de cultura sunt folosite pentru cultivarea bacteriilor. Ele se comercializeaza ca atare, sub forma liofilizata, gelificata sau gata turnate in placi Petri sau pot fi manufacturate in multe laboratoare. Ingredientul de baza al mediilor de cultura este geloza sau agar agar.
agar-agarul (numit i geloz) este un produs organic, hidro - coloidal ce se ntlnete ntr-o serie de alge marine alge rosii (agarofite), din care este extras cu ajutorul apei fierbini.
se prezint sub form de fii semitransparente de culoare cafenieglbuie.
conine: 7080% polizaharide, 1020% ap i 1,54% substane minerale. este format din resturi galactozidice esterificate la C6 cu o grupare sulfonic.
Agarul este folosit la prepararea mediilor de cultura pentru ca asigura suprafata solida pe care cresc bacteriile si fungii.
Cresterea bacteriilor nu distruge structura gelului deoarece cele mai multe bacterii sunt incapabile sa utilizeze agarul pentru metabolism.
Agarul este comercializat sub forma de pulbere, care in amestec cu apa si incalzit la 100 C ramane lichid, iar pe masura ce se raceste la 40 C se gelifica. Mediul cu agar este un mediu relativ inert. Alte ingrediente, nutrienti, factori de crestere, indicatori de pH sunt adaugati in mediul cu agaroza.
MEDII DE CULTURA
MEDII DE IMBOGATIRE: - medii lichide, care prin anumite substante inhibitoare prelungesc faza de lag a bacteriilor de contaminare, fara a intarzia insa intrarea anumitor patogeni in faza exponentiala. Ex.: bulion cu selenit acid de Na.: preincubarea materiilor fecale 18 h. la 37C in acest mediu, favorizeaza izolarea salmonelelor.
INCUBAREA CULTURILOR
- temperatura: 37C majoritatea bacteriilor 20 - 30C unele bacterii (Yersinia enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Listeria monocytogenes) 42C altele: Campylobacter jejuni / coli Se foloseste pentru incubare termostatul.
INCUBAREA CULTURILOR
Atmosfera:
in prezenta O2 bacterii aerobe si facultativ anaerobe in mediu cu 5 10 % CO2 bacterii carboxifile in mediu cu O2 (5 7 %), CO2 (8 10%), N2 (85%) bacterii microaerofile
INCUBAREA CULTURILOR
in mediu anaerob: Procedee chimice: bulioane cu ingrediente reducatoare (acid thioglicolic sau thioglicolat de Na. tehnica OTT: incinta etansa in care O2 este indepartat prin reactia cu pirogalolul in mediu alcalin. Procedee biologice: procedeul Tarozzi: utilizeaza tuburi cu bulion nutritiv in care agent reducator sunt fragmente de organe proaspete de animal prelevate aseptic (ficat, rinichi)
CARACTERE DE CULTURA
Exigente de cultivare Intervalul necesar pentru obtinerea culturii Aspectul si consistenta coloniilor Modificari ale mediului Mirosul degajat de cultura
CARACTERE DE CULTURA
Irizatii ale suprafetei unor colonii: pot fi surprinse anumite unghiuri de iluminare Culoarea coloniilor:
alba galbena aurie neagra,
in functie de varietatea pigmentilor produsi sau a virajului de culoare a unor indicatori introdusi in mediu.
CARACTERE DE CULTURA
Modificari ale mediului din jurul coloniilor: pot fi produse de citotoxine, enzime sau pigmenti difuzibili.
Hemoliza pe agar sange Reactii pe medii diferentiale zaharate Reactii pe mediul cu galbenus de ou Pigmentogeneza