5 NOVIEMBRE 2012

GUIN 8: Deteccin de Streptococcus agalactiae por PCR

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

Bacteriologa Experimental
Grupo: 02 INTEGRANTES: Equipo: 04

OBJETIVO Conocer el fundamento de la Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR). Detectar por el mtodo de PCR la presencia del microorganismo de la especie Streptococcus agalactiae en una muestra problema. RESULTADOS

Figura 1. Placa de gel agarosa mostrando las bandas de amplificacin. MUESTRA 10 A 10 B 11 A 11 B 12 A 12 B CR CP PM RESULTADO Positivo Positivo Positivo Negativo Negativo Positivo Negativo Positivo 123 pb

Nota: Positivo= banda de producto amplificado de 123 pb Negativo= sin producto de amplificacin

Tabla 1. Resultados de los productos de amplificacin por PCR.

ANLISIS DE RESULTADOS Se puede observar que las muestras problema rotuladas como 10 A, 10 B, 11 A y 12 B son las que expresan el gen amplificado en la prctica (16s RNA de Streptococcus agalactiae), en otras palabras, estas muestras son las que tienen la presencia de dicho microorganismo. Por lo que sera posible buscar un tratamiento ptimo para combatir enfermedades ocasionadas por estreptococos del grupo B; sin embargo el tratamiento especfico ser determinado por el mdico, el cual tomar en cuenta la historia clnica de la paciente. Por otra parte en las muestras 11B y 12 A no se observa ninguna banda de producto amplificado, lo cual nos indica que no hay presencia del microorganismo buscado en la prctica (Streptococcus agalactiae). En el caso de el Control de Reactivo, se obtuvo lo esperado (sin producto de amplificacin), lo cual nos indica una contaminacin nula en nuestros reactivos. De igual manera se obtuvo lo deseado en el control positivo teniendo una banda de producto amplificado de 123 pares de bases, el cual nos ayud como punto de comparacin para los dems resultados positivos. Si se presta atencin a la figura 1, en los pozos de la primera columna los resultados positivos se aprecian de un tono menos intenso, esto debido a que fueron cargados primero y al no leer de inmediato los resultados, las muestras comenzaron a difundir provocando as bandas ms tenues. Es necesario hacer mencin que debido a la inexperiencia en este mtodo la tcnica no se llev a cabo en las mejores condiciones y es posible que algunas muestras hayan sido etiquetadas errneamente.

CONCLUSIONES

Se logr conocer el fundamento de la Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) y al mismo tiempo se identific una de las mayores ventajas de este mtodo, la cual es obtener una cantidad considerable de muestra para el estudio que se vaya a realizar, a partir de una muestra pequea de ADN. Se detect por PCR la presencia del microorganismo de la especie Streptococcus agalactiae en algunas de las muestras Problema, encontrando como positivas las muestras 10 A, 10 B, 11 A y 12 B.