Reconocimiento de Carbohidratos

Objetivos: 1. Identificacin de carbohidratos 2. Hidrlisis del enlace de un disacrido Materiales: - Muestras de carbohidratos: glucosa, maltosa, lactosa, sacarosa, almidn. - Tubos de ensayo, gradilla, vaso para calentar, mechero. - Reactivo de Fehling A y Fehling B. - Lugol. - HCl diluido y bicarbonato.

Reacciones que van a realizarse: 1. Reaccin de Fehling: - Tomar la muestra que se quiera analizar (normalmente una cantidad de 3ml). - Aadir 1ml de Fehling A y 1ml de Fehling B. El lquido del tubo de ensayo adquirir un fuerte color azul. - Calentar el tubo al bao Mara o directamente en un mechero de Laboratorio. - La reaccin ser positiva si la muestra se vuelve de color rojo-ladrillo.

- La reaccin ser negativa si la muestra queda azul, o cambia a un tono azul-verdoso.

Fundamento: Se basa en el carcter reductor de los monosacridos y de la mayora de los disacridos (excepto la sacarosa). Si el carbohidrato que se investiga es reductor, se oxidar dando lugar a la reduccin del sulfato de cobre (II), de color azul, a xido de cobre (I), de color rojoanaranjado. 2. Reaccin del Lugol: Este mtodo se usa para identificar polisacridos. El almidn en contacto con unas gotas de Reactivo de Lugol (disolucin de yodo y yoduro potsico) toma un color azulvioleta caracterstico. - Poner en un tubo de ensayo unos 3ml del carbohidrato a investigar. - Aadir unas gotas de lugol. - Si la disolucin del tubo de ensayo se torna de color azul-violeta, la reaccin es positiva.

Fundamento: La coloracin producida por el Lugol se debe a que el yodo se introduce entre las espiras de la molcula de almidn. No es por tanto, una verdadera reaccin qumica, sino que se forma un compuesto de inclusin que modifica las propiedades fsicas de esta molcula, apareciendo la coloracin azul violeta.

Investigacin con azucares reductores: - Poner las muestras de carbohidratos en los tubos de ensayo. Pueden prepararse soluciones al 1% aproximadamente. - Realizar la Prueba de Fehling como se indica al principio de pgina. - Despus de calentar observar los resultados. - Estos resultados nos indican que los azcares: glucosa, maltosa y lactosa tienen carcter reductor.

Investigacin de azucares no reductores: Como se vea en la experiencia 1 la sacarosa daba la reaccin de Fehling negativa, por no presentar grupos hemiacetlicos libres. Ahora bien, en presencia del cido clorhdrico (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza descomponindose en los dos monosacridos que la forman (glucosa y fructosa). Tcnica: Tomar una muestra de sacarosa y aadir unas 10 gotas de cido clorhdrico al 10%. Calentar a la llama del mechero durante un par de minutos. Dejar enfriar y realizar la Prueba de Fehling. Observa el resultado. La reaccin positiva nos dice que hemos conseguido romper el enlace O-glucosdico de la sacarosa. (Se recomienda antes de aplicar la reaccin de Fehling, neutralizar con bicarbonato, Fehling sale mejor en un medio que no sea cido).

Investigacin de Polisacridos (almidn): Tcnica: - Colocar en una gradilla muestras de distintos carbohidratos. - Aadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo. - Observar los resultados. - Con este mtodo puede identificarse el almidn.