PAULA BRASIL DUARTE

MICRORGANISMOS INDICADORES DE POLUIO FECAL EM RECURSOS HDRICOS

BELO HORIZONTE 2011

PAULA BRASIL DUARTE

MICRORGANISMOS INDICADORES DE POLUIO FECAL EM RECURSOS HDRICOS

Monografia apresentada ao Programa de Ps-Graduao em Microbiologia do Instituto de Cincias Biolgicas da Universidade Federal de Minas Gerais, como pr-requisito para a obteno do Grau de Especialista em Microbiologia.

ORIENTADOR: PROF. DR. CARLOS AUGUSTO ROSA

BELO HORIZONTE 2011

RESUMO A demanda por gua de boa qualidade tem-se acentuado muito nos ltimos anos, devido ao crescimento populacional. Tanto nas bacias hidrogrficas rurais quanto nas urbanas, ocorrem indevidas atividades humanas, que alteram as caractersticas o equilbrio e dinmica dos recursos naturais. A concentrao de microrganismos tem sido usada h dcadas para monitorar e controlar a qualidade da gua, e um procedimento importante na proteo dos ecossistemas aquticos. Os bioindicadores so extremamente teis, principalmente para a avaliao de impactos ambientais decorrentes de descargas pontuais de esgotos domsticos e efluentes industriais. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi apresentar uma anlise dos principais bioindicadores utilizados para avaliao do impacto ambiental em recursos hdricos. Quatro indicadores especficos foram relacionados:

Escherichia coli, Enterococcus, Pseudomonas aeruginosa e Leveduras. Atualmente, a E. coli fornece a melhor indicao de bactrias fecais na contaminao da gua potvel. Outro grupo que so utilizados como indicadores de contaminao so os enterococos. Devido sua resistncia ambiental, os Enterococcus se destacam como um indicador para a classificao das guas salinas, uma vez que apresenta amplo tempo de sobrevivncia e maior resistncia quando comparado com E.coli. A importncia da P. aeruginosa tornou-se maior quando se comprovou sua resistncia e capacidade de inibir as bactrias do grupo coliformes. Sua presena em grande densidade, em guas contaminadas como esgotos humanos, apontada como indicador de contaminao fecal. As leveduras podem ser usadas como indicadoras de contaminao de esgoto e de qualidade das guas de recreio, como um complemento para a contagem de coliformes atualmente utilizados como indicadores de poluio fecal recente. Os indicadores biolgicos so teis devido a sua especificidade a certos tipos de impacto, j que inmeras espcies so comprovadamente sensveis a um tipo de poluente, mas tolerantes a outros. Entretanto nenhum indicador efetivamente perfeito, levando em considerao uma srie de fatores tais como classe dos corpos de gua, caracterstica da gua (gua doce, salina), clima (temperado, tropical) e alm do fator econmico.

Palavras-chave: Escherichia coli, qualidade da gua, ecossistema aqutico, bioindicadores

ABSTRACT

The demand for water quality has improved significantly in recent years due to population growth. Both watersheds rural and urban place undue human activities that change the balance and dynamics of natural resources. The concentration of microorganisms has been used for decades to monitor and control water quality, and is an important tool in the protection of aquatic ecosystems. The bioindicators are extremely useful, especially for assessing environmental impacts of point source discharges of domestic sewage and industrial effluents. Thus, the objective was to present an analysis of key indicator species used for environmental impact assessment on water resources. Four specific indicators were related Escherichia coli, Enterococci, Pseudomonas aeruginosa and yeasts. Currently, E. coli provides the best indication of fecal bacteria contamination of drinking water. Another group that are used as indicators of contamination are the enterococci. Because of its environmental resistance, the enterococci stand out as an indicator for the classification of saline waters, as it features large survival time and increased strength when compared with E.coli. The importance of P. aeruginosa became greater when it has proven its strength and ability to inhibit the bacteria from the coliform group. Their presence in high density in waters contaminated by human sewage as it is identified as an indicator of fecal contamination. The yeast can be used as indicators of sewage contamination and quality of recreational waters, as a complement to the coliform currently used as indicators of recent fecal pollution. The biological indicators are useful because of its specificity to certain types of impact, since many species are demonstrably sensitive to one type of pollutant, but tolerant to others. Nevertheless, no indicator is perfect effectively, taking into account a number of factors such as class of water bodies, characteristic of water (freshwater, saline), climate (temperate, tropical) and also the economic factor.

Keywords: Escherichia coli, water quality, aquatic ecosystem, bioindicators

SUMRIO

1- INTRODUO: ....................................................................................................... 5
1.1QUALIDADE DAS GUAS ..................................................................................... 5

1.2-BIOINDICADORES DE QUALIDADE DE GUA......................................................... 7 1.3-OBJETIVOS: .............................................................................................................. 10 1.3.1-Objetivo geral: ...................................................................................................... 10 1.3.2-Objetivos especficos:............................................................................................. 10

2-REVISO DA LITERATURA: ................................................................................ 10

2.1-MICRORGANISMOS INDICADORES ....................................................................... 10 2.2-ESCHERICHIA COLI ................................................................................................. 11 2.3-ENTEROCOCOS ....................................................................................................... 15 2.4- PSEUDOMONAS AERUGINOSA ............................................................................. 17 2.5- LEVEDURAS ............................................................................................................ 19 2.6-INDICADORES ALTERNATIVOS.............................................................................. 22 2.6.1 - Anaerbios Fecais ........................................................................................... 23 2.6.1.1 - Bacteroides spp........................................................................................... 23 2.6.1.2 - Bifidobacterium spp. .................................................................................... 24 2.6.1.3 - Clostridium perfringens................................................................................ 24 2.6.2 - Indicadores Virais:........................................................................................... 25 2.6.2.1 Bacterifagos ............................................................................................. 26 2.6.2.2 Colifagos .................................................................................................... 26

3 CONCLUSES: .................................................................................................. 27 4- REFERNCIA BIBLIOGRFICA: ........................................................................ 28

1- INTRODUO:

1.1- QUALIDADE DAS GUAS

A gua recurso natural limitado, e constitui bem de domnio pblico. Como tal, necessita de instrumentos de gesto a serem aplicados em sua proteo. Tais instrumentos visam a assegurar s atuais e futuras geraes, gua de qualidade e em quantidade adequada, mediante seu uso racional, prevenindo situaes hidrolgicas crticas. A demanda por gua de boa qualidade tem-se acentuado muito nos ltimos anos, devido ao crescimento da populao. Tanto nas bacias hidrogrficas rurais quanto nas urbanas, ocorrem indevidas atividades humanas, que alteram as caractersticas o equilbrio a dinmica dos recursos naturais. A essas alteraes est associado o aumento na gerao de cargas poluentes que atingem os sistemas hdricos (PINTO et al., 2009). Um fator de influncia sobre os recursos hdricos o processo de urbanizao, que quase sempre resulta na interrupo ou limitao do uso desses recursos, devido aos impactos na qualidade sanitria destes ecossistemas (CARVALHO et al., 2003).

A grande quantidade de gua no mundo causa uma falsa sensao de recurso ilimitado. Quase toda a gua do planeta est concentrada nos oceanos, sendo que 95,1% da gua salgada, imprpria para o consumo humano. Dos 4,9% restantes, 4,7% esto na forma de geleiras ou abaixo da superfcie (gua subterrnea), portanto de difcil acesso. S uma frao muito pequena (cerca de 0,2%) de toda a gua terrestre est diretamente disponvel ao homem e aos outros organismos, na forma de lagos, nascentes e lenis subterrneos (GALLETI, 1981; RAINHO, 1999). Em 29 pases, a gua doce no esta disponvel para toda a populao. Segundo a Organizao das Naes Unidas (MACEDO, 2001), em 2050 cerca de 50 pases no tero quantidade de gua suficiente para toda a populao.

No mundo, 1,1 bilho de pessoas no possuem gua potvel disponvel (ORGANIZAO DAS NAES UNIDAS ONU, 2006). O Brasil tem grandes

reservas de gua superficial, o que representa 53% da gua doce da Amrica do Sul e 12% do total do mundo (REBOUAS; BRAGA; TUDISI, 1999). O problema no Brasil que os servios de guas residuais so menos desenvolvidos do que os servios de abastecimento de gua potvel. Com apenas 48% das populaes urbanas e 3% dos domiclios rurais esto ligado rede pblica de esgotos, parcelas significativas da populao tm acesso precrio gua de boa qualidade (CSILLAG, 2000).

Em pases desenvolvidos, as polticas sanitrias conseguem atender uniformemente as necessidades das populaes, levando gua potvel para todos. A poluio das guas deve-se maneira como a sociedade est organizada para produzir e desfrutar de sua riqueza, progresso material e bem-estar. J em pases da Amrica do Sul, classificados como pases em desenvolvimento social, a poluio resultado da pobreza, ausncia de educao de seus habitantes e o descaso da poltica ambiental do poder pblico (ZAMPIERON; VIEIRA, 2007).

Em relatrio do desenvolvimento humano, do ano de 2006, a ONU, cita que 40% da populao mundial no dispem de condies sanitrias bsicas (ORGANIZAO DAS NAES UNIDAS ONU, 2006). Com falta de saneamento bsico, a populao uma fonte de contaminao dos recursos hdricos, devido ao despejo direto de seus resduos sobre fontes de guas superficiais (ROHDEN, et al, 2009).

Segundo a Organizao Mundial da Sade (OMS), saneamento define-se como o controle de todos os fatores do meio fsico do homem que exercem efeito deletrio sobre seu bem-estar fsico, mental ou social (MOTTA, 1994). indiscutvel, por exemplo, a correlao entre a falta de saneamento bsico e a ocorrncia de diarria e parasitoses intestinais, na populao, sobretudo entre as crianas (EGWARI; ABOABA, 2002). A gua continua a ser a principal fonte de transmisso de patgenos entricos nos pases em desenvolvimento, causando assim doena diarrica por meio da gua contaminada e contribuindo diariamente para a morte de aproximadamente 4.500 crianas no mundo devido a doenas relacionadas com a falta de saneamento (ORGANIZAO MUNDIAL DA SADE, 2007).

A poluio dos corpos hdricos indica que as guas no esto sendo utilizadas corretamente e que h uma indiferena gerencial, quanto aos cuidados necessrios (ZAMPIERON; VIEIRA, 2007). As principais fontes de contaminao que alteram a qualidade das guas so diversas: esgotos domsticos, efluentes industriais, efluentes da agricultura, desmatamento, minerao, resduos slidos, efluentes da suinocultura, poluio difusa em reas urbanas, salinizao, acidentes ambientais, construo de barragens e aqicultura (Agncia Nacional de gua-ANA, 2005).

Os ambientes aquticos so utilizados em todo o mundo com distintas finalidades, entre as quais se destacam o abastecimento de gua, a gerao de energia, a irrigao, a navegao, a aquicultura, a recreao e a harmonia paisagstica (LOPEZ-PIILA et al., 2000; MORAES & JORDO, 2002; LEBARON et al., 2005). As guas utilizadas para fins recreacionais devem estar isentas de contaminao fecal, organismos patognicos e outras condies perigosas como, por exemplo, baixa visibilidade, para proteger a sade e dar segurana aos usurios. necessrio conhecer as condies sanitrias dessas guas quanto balneabilidade e os possveis riscos a sade (CETESB, 1999).

Alguns parmetros so utilizados para a caracterizao da gua, como as caractersticas fsico-qumicas e biolgicas, e indicadores de qualidade da gua, que representam impurezas quando ultrapassam determinados valores estabelecidos. Esses parmetros constam da Portaria 518/2004 do Ministrio da Sade, que estabelece que a gua produzida e distribuda para o consumo humano deve ser controlada. A legislao define, ainda, a quantidade mnima e a freqncia em que as amostras de gua devem ser coletadas, bem como os parmetros e limites permitidos.

1.2-BIOINDICADORES DE QUALIDADE DE GUA

Os bioindicadores so espcies, grupos de espcies ou comunidades biolgicas, nas quais a presena, quantidade e distribuio indicam a gravidade de impactos ambientais em um ecossistema aqutico e sua bacia de drenagem,

permitindo a avaliao integrada dos efeitos ecolgicos causados por mltiplas fontes de poluio (CALLISTO; GONALVES, 2002). Alm disso, o uso dos bioindicadores mais eficiente do que as medidas instantneas de parmetros fsicos e qumicos (p.ex. temperatura, pH, oxignio dissolvido, teores totais e dissolvidos de nutrientes, etc.) utilizados para avaliar a qualidade das guas (CALLISTO; GONALVES; MORENO 2005).

A avaliao de cada tipo de microrganismo exige uma metodologia diferente e a ausncia ou presena de um patgeno no exclui a presena de outros. Para um microrganismo ser considerado um indicador ideal, so necessrias algumas caractersticas, como ser aplicvel a todos os tipos de gua, ter uma populao mais numerosa no ambiente que outros patgenos, sobreviver melhor que os possveis patgenos, possuir resistncia equivalente a dos patognicos aos processos de autodepurao e ser detectado por uma metodologia simples e barata. Ainda no existe um indicador ideal de qualidade sanitria da gua. No entanto, alguns organismos que se aproximam das exigncias referidas (LEITO et al., 1988; CETESB, 1991).

A concentrao de microorganismos tem sido usada h dcadas para monitorar e controlar a qualidade da gua, e um procedimento importante na proteo dos ecossistemas aquticos (MEDEIROS et al., 2009). A utilizao de bioindicadores extremamente til, principalmente para a avaliao de impactos ambientais decorrentes de descargas pontuais de esgotos domsticos e efluentes industriais. possvel monitorar estaes de amostragem a montante, no local de lanamento e a jusante da fonte poluidora, o que permite identificar as conseqncias ambientais para a qualidade da gua e a sade do ecossistema aqutico (CALLISTO; GONALVES; MORENO, 2003).

A presena de microrganismos patognicos na gua geralmente decorrente da poluio por fezes humanas e de animais, provenientes de guas residurias urbanas e rurais (GONZALEZ et al, 1982). Considerando que a maioria dos agentes patognicos de veiculao hdrica tem em comum sua origem nas fezes de indivduos doentes, uma condio para a avaliao da qualidade microbiolgica da gua o exame de indicadores de contaminao fecal (AMARAL et al., 2003).

O Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater (1998) define o grupo coliforme como: todas as bactrias aerbias ou anaerbias facultativas, Gram negativas, no esporuladas e na forma de bastonete, as quais fermentam a lactose com formao de gs dentro de 48h a 35C. Neste grupo incluem-se organismos que diferem nas caractersticas bioqumicas, sorolgicas e quanto ao habitat. As principais bactrias do grupo coliforme pertencem aos gneros Escherichia, Aerobacter, Citrobacter, Klebsiela e outros que quase nunca aparecem em fezes como a Serratia.

Os microrganismos tradicionalmente usados para monitorar a qualidade das guas recreativas ou potveis, consistem em um grupo de bactrias patognicas,no necessariamente , mas comumente encontradas no trato gastrointestinal dos animais de sangue quente. Outras bactrias, como

Pseudomonas aeruginosa e enterococos tm sido isoladas de guas recreacionais e a presena destes microrganismos sugere riscos sade por meio do contato corporal, ingesto ou inalao, e tm sido propostos como indicadores de qualidade para as guas complementares aos coliformes (CLESCERI; GREENBERG; EATON, 1998). Alm destes, algumas espcies de leveduras so propostas para serem usadas como indicadores de contaminao orgnica em guas de recreao (HAGLER, 2006).

O uso de parmetros biolgicos para medir a qualidade da gua se baseia nas respostas dos organismos em relao s alteraes ocorridas no meio onde vivem, sejam estas de origens antrpicas ou naturais. Os distintos nveis de organizao biolgica possibilita o conhecimento sobre o poluente que interage com o organismo, e ao nvel este mais suscetvel ao. A habilidade de proteger os ecossistemas depende da capacidade de distinguir os efeitos das aes humanas das variaes naturais, utilizando indicadores que melhor traduzem a contaminao dos meios hdricos (Cairns Jr. et al., 1993), portanto de fundamental importncia a avaliao da qualidade da gua do ponto de vista microbiolgico, para qualidade da sade do ser humano.

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1.3-OBJETIVOS:

1.3.1-Objetivo geral:

O trabalho tem como objetivo apresentar uma anlise dos principais bioindicadores utilizados para avaliao do impacto ambiental em recursos hdricos.

1.3.2-Objetivos especficos:

Relacionar Escherichia coli, com outros microrganismos indicadores de poluio, e levantar seus pontos positivos e negativos como microrganismos indicadores de potabilidade e balneabilidade.

2-REVISO DA LITERATURA:
2.1-MICRORGANISMOS INDICADORES

A gua essencial para todo o ser vivo, e tambm um importante veculo de doenas aumentando a freqncia de molstias crnicas, principalmente as intestinais (SOARES; MAIA, 1999). A relao da qualidade da gua com as doenas observada desde a Antigidade, porem s foi comprovada, cientificamente em 1854, por John Snove, confirmando que a epidemia de clera em Londres ocorreu por meio de veiculao hdrica (GUILHERME; SILVA; OTTO, 2000).

Os agentes biolgicos continuam sendo os fatores mais importantes de contaminao da gua. A contaminao pode ocorrer na fonte, durante a distribuio ou nos reservatrios. No mbito dos conjuntos populacionais, as causas mais freqentes de contaminao a carncia de hbitos de higiene pessoal e ambiental (GERMANO; GERMANO, 2001). Assim, a gua pode servir como veculo para transmisso de variados microrganismos de forma direta ou indiretamente, principalmente onde as condies de saneamento bsico so precrias (MACDO, 2001; COSTA et al., 2003). A transmisso pode ocorrer por ingesto ou pela utilizao para outros fins, por alimentos e bebidas preparados com gua

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contaminada, ou ainda, durante atividades recreacionais (acidental), ocasionando variada gama de patologias gastrintestinais (GERMANO & GERMANO, 2001; COSTA et al., 2003). A preveno da qualidade das guas uma necessidade universal, que exige maior ateno e investimentos por parte das autoridades governamentais, junto a rgos de saneamento afim de possibilitar exames rotineiros visando avaliao fsico-qumica e biolgica, considerando a pesquisa de microrganismos indicadores de contaminao fecal (TANCREDI et al.,2002).

2.2-ESCHERICHIA COLI

Os coliformes fecais, mais especificamente E. coli, fazem parte da microbiota intestinal do homem e outros animais de sangue quente. Estes microrganismos quando detectados em uma amostra de gua fornecem evidncia direta de contaminao fecal recente, e por sua vez podem indicar a presena de patgenos entricos (POPE et al, 2003). A anlise da gua uma importante ferramenta utilizada por especialistas em sade pblica para a preveno de inmeras doenas transmitidas pela gua (POPE et al, 2003 ). Os coliformes fecais, denominao utilizada durante muitos anos, ou coliformes termotolerantes, so bactrias pertencentes ao grupo dos coliformes totais, caracterizados pela presena da enzima -galactosidase e pela capacidade de fermentar a lactose com produo de gs no prazo de 24 horas a 44,5C. Escherichia coli e algumas linhagens de Klebsiella e Enterobacter apresentam esta caracterstica de termotolerncia, porm, somente E. coli tem como habitat primrio o intestino humano e de animais (CONAMA, 2005). Segundo Cerqueira e Horta (1999), E. coli representa percentuais em torno de 96 a 99% nas fezes humanas e de animais homeotrmicos, sendo o principal representante dos coliformes termotolerantes (fecais) (MASCARENHAS; et al, 2002). Alm de ser o primeiro organismo na lista das infeces urinrias, E. coli tem sido tambm isolada de outros diversos stios do corpo humano, responsvel por patologias como pneumonias, meningites e infeces intestinais. Algumas linhagens patognicas de E. coli, produtoras de endotoxinas potentes, podem causar diarrias moderadas a severas, colite hemorrgica grave, e a sndrome hemoltica urmica (SHU) em todos os

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grupos etrios, levando o indivduo morte, quando o tratamento no for efetuado corretamente e em tempo hbil (ZIESE et al.,1996). A contagem de E. coli tem sido extensivamente utilizadas nos monitoramentos da qualidade das guas, e so considerados indicadores especficos de qualidade de gua destinadas a potabilidade e balneabilidade (LPEZ-PILA & SZEWZYK, 2000; YOUN-JOO AN et al., 2002; ALM et al., 2003; LEBARON et al., 2005). O padro microbiolgico de potabilidade da gua para consumo humano deve ser de total ausncia de E. coli, em 100 ml de amostra da gua tratada (MINISTRIO DA SADE, 2005). As tcnicas de deteco de coliformes e Escherichia coli so prticas e relativamente rpidas e vrios so os mtodos disponveis, dentre eles, tubos mltiplos, contagem em membranas filtrantes e substratos cromognicos (SOUZA; DANIEL, 2008).

Atualmente, E. coli fornece a melhor indicao de bactrias fecais na contaminao da gua potvel. A metodologia utilizada na identificao de E. coli em amostra de gua esta disponivel a preos acessveis, alm de ser rpido, sensvel, especfico e de fcil realizao. A recente identificao da enzima glucuronidase especfica para 94-97% da E. coli tem permitido o desenvolvimento de mtodos de deteco (HUANG et al., 1997). A possibilidade de deteco direta de E. coli levou a um ressurgimento do interesse por estas bactrias como indicadores de poluio fecal. Numerosos estudos tm demonstrado que os mtodos, disponveis para E. coli so mais precisos do que aqueles para coliformes termotolerantes (FENG et al., 1982; MARTINS et al., 1993; HUANG et al., 1997).

A sobrevivncia de bactrias fecais, uma vez liberados no ambiente aqutico, determinada por vrios fatores ambientais, tais como variaes de temperatura, salinidade, nveis de oxignio, deficincias nutricionais, predao e irradiao ultravioleta (MCFETERS e SINGH 1991; DAVIES et al. 1995; HUGHES 2003; CRAIG et al. 2004). Quando as bactrias entricas so lanadas no meio ambiente, seu destino depende de vrios processos, dirigindo-se tanto para seu desaparecimento como para uma alterao em seu estado fisiolgico

(TROUSSELIER et al., 1998). Para a maioria das bactrias entricas, a gua do mar txica e pode funcionar como fator limitante para multiplicao de E. coli (HAGLER

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e MENDONA-HAGLER, 1988). Segundo TROUSSELIER et al. (1998), comparado com o trato digestivo, o ambiente marinho caracteriza-se por baixas temperaturas (a temperatura tima de crescimento para coliformes fecais fica em torno de 37C), altas salinidades (35 a 38%), presena da radiao solar na superfcie das guas (Ultra Violeta (UV)-A, UV-B, luz solar visvel), taxa de oxignio elevada, presena de bactrias autctones competitivas no que se refere a nutrientes, alm da predao por organismos planctnicos tais como nanoplncton, assim a deteco de E.coli implica em despejo contnuo e descarga recente de matria fecal, na rea analisada.

Ultimamente as caractersticas que fazem de E. coli o melhor indicador de contaminao fecal tm sido questionadas. Vrios estudos tm mostrado que a E. coli tem capacidade de persistir e se multiplicar num ambiente externo ao corpo do hospedeiro em habitats secundrios (como corpo de gua) e, na ausncia de contaminao fecal (FUJIOKA et al., 1999; SOLO-GABRIELLE et al., 2000; GORDON, 2001; POWER et al., 2005). Segundo Hazen e Toranzos (1990), os indicadores de contaminao fecal, como os coliformes termotolerantes, podem sobreviver de 92 a 294 horas em guas tropicais. Devido a isso, alguns pesquisadores criticam a utilizao delas como indicador microbiano de poluio fecal em corpos d'gua, principalmente em ecossistemas tropicais (FUJIOKA et al., 1999 ; BYAPPAHALLI; FUJIOKA, 1998; Carrillo et al., 1985). Esta aparente falta de confiabilidade dos tradicionais indicadores de poluio fecal, em condies tropicais, tem levado a sugestes indicadores complementares ao coliformes para detectar poluio orgnica em ambientes aquticos (BYAMUKAMA et al., 2005). Entretanto, estudos realizados por vrios pesquisadores e reportados em documento da Organizao Mundial de Sade (WHO, 2002) tm apresentado falhas quanto ao uso desse grupo, podendo-se citar: a baixa sobrevivncia fora do trato intestinal, particularmente em ambientes marinhos; definio incerta como um grupo e baixa relao com a presena de bactrias patognicas e vrus. Assim, importante considerar outros indicadores na avaliao microbiolgica das guas, os quais podem exibir relao mais estreita com a presena de microrganismos patognicos na gua, particularmente aqueles que podem persistir por mais tempo no ambiente (SOUZA; DANIEL, 2008).

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Existe uma grande diversidade de linhagens de E. coli comensal pertencentes a diferentes sorotipos, e que podem ser isoladas das fezes de indivduos saudveis. Estas linhagens so eliminadas maciamente no ambiente e podem contaminar os alimentos, as superfcies de corpos d`gua e os sedimentos, geralmente sem causar nenhum efeito adverso sade humana. Por exemplo, a linhagem de E. coli K-12 uma variante dentro da espcie e, considerada um habitante normal da microbiota intestinal de humanos e animais (KUHNERT et al. 2000).Os autores relatam que mais de 20% da informao gentica encontrada na maioria das linhagens patognicas de E. coli no esto presentes na linhagem E. coli K-12 que um sorotipo no patognico. MUHLDORFER et al. (1996) mostraram em seus estudos que nenhum gene de virulncia foi detectado em linhagens de E. coli K-12 isoladas das fezes de indivduos saudveis.

E. coli comensal da microbiota intestinal um patgeno oportunista, considerado inofensivo para o hospedeiro, e representa cerca de 95% das bactrias da microflora intestinal (BIER, 1984 apud RIEDEL, 2005). Segundo BERG (1996), a microbiota normal associada ao trato digestivo responsvel por trs funes importantes para a sade do hospedeiro: apresentam resistncia colonizao devido inibio da multiplicao de microrganismos exgenos, imunomodulao que permite uma resposta imune mais rpida e adequada durante uma agresso infecciosa, e contribuio nutricional que fornece vitaminas, substratos energticos e reguladores na forma de cidos graxos volteis. Somente em algumas raras circunstncias as linhagens de E. coli comensais podem se tornar uma ameaa para o indivduo saudvel (KUHNERT et al, 2000). Os microrganismos da microbiota intestinal indgena podem causar doena e se tornar uma ameaa para o indivduo quando ocorre um eventual desequilbrio do ecossistema digestivo ou quando estes microrganismos alcanam stios estreis do corpo. Este desequilbrio pode ser devido a uma imunossupresso do indivduo ou terapias com antimicrobianos (SANTOS et al. 2003). Pacientes com o sistema imune debilitado so incapazes de conter os microrganismos comensais aps o rompimento da barreira natural entre o intestino e outros stios estreis do corpo (KUHNERT et al., 2000). Segundo FINLAY e FALKOW (1997), as linhagens patognicas de E.coli podem ser derivadas de linhagens comensais pela aquisio de operons de virulncia. Desse modo, as

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linhagens de E. coli comensais entricas podem ser consideradas um potencial reservatrio para o surgimento de linhagens patognicas.

Embora a maioria das linhagens E. coli sejam bactrias comensais inofensivas, algumas linhagens podem causar doenas aos humanos, como a E. coli O157: H7, que est entre os sorotipos mais reconhecidos por causar grandes surtos por meio dos alimentos e pela gua (ISHII; SADOWSKY, 2008). Sendo o sorotipo mais grave, o entero hemorrgico (EHEC) que ocorre unicamente como O157:H7, responsvel por 15% das complicaes que levam a sndrome hemoltica urmica (SHU) em idosos e crianas menores de cinco anos. A SHU caracteriza-se pela destruio das clulas vermelhas do sangue e falncia renal que pode ser acompanhada de deteriorao neurolgica e insuficincia renal crnica (ZIESE et al.,1996; KONEMAN et al., 2001).

2.3-ENTEROCOCOS

Outro grupo que so utilizados como indicadores de contaminao so os enterococos. Essas bactrias do grupo dos estreptococos fecais pertencentes ao gnero Enterococcus, caracterizam-se pela alta tolerncia s condies adversas de crescimento, como a capacidade de sobreviverem na presena de 6,5% de cloreto de sdio (halotolerantes), em pH 9,6 e em ampla faixa de temperatura, de 10 a 45C. A maioria das espcies de enterococos so de origem fecal humana, embora possam ser isolados de fezes de animais (CONAMA N 274, 2000; FORSYTHE, 2002; GRIFFO et al., 2006). Devido sua resistncia ambiental, os Enterococcu spp. se destacam por indicarem contaminao no necessariamente recente. Como indicador de contaminao fecal, sua presena evidencia inadequao das prticas sanitrias (FRANCO; LANDGRAF, 1999).

Ribeiro (2002), avaliando indicadores microbianos de balneabilidade, encontrou uma maior sensibilidade de deteco de contaminao fecal para o enterococos, quando comparado a E. coli e coliformes termotolerantes. Alguns estudos elegem os Enterococcus spp. como um indicador para a classificao das guas salinas, uma vez que apresenta amplo tempo de sobrevivncia e maior resistncia quando comparado com E.coli (DUFOUR, 1994), alm disso, os

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enterococos apresentam uma melhor correlao com doenas gastrointestinais do que os coliformes termotolerantes (FATTAL et al, 1987; FLEISHER, 1991; CABELLI et al, 1982; SHERIDAN, 2003; KINZELMAN, 2003).

O Conselho Nacional do Meio Ambiente, CONAMA, que regulamenta a avaliao da qualidade sanitria das guas para balneabilidade,em sua Resoluo n 274, de 29 de novembro de 2000, prope que a condio de balneabilidade das praias sejam avaliadas por meio da medio das concentraes, de um ou mais organismos indicadores presentes nos dejetos humanos ou de animais de sangue quente. Os resultados quantitativos encontrados, classificaram o meio como prprio ou imprprio para a balneabilidade (CONAMA, 2005). As altas densidades de Enterococcus, em guas marinhas, indicam elevado nvel de contaminao por esgotos, o que pode colocar em risco a sade dos banhistas e apresentar conseqncias imprevisveis, variando com o grau de imunidade dos usurios e com as condies de exposio (CETESB, 2004). A preocupao com os altos ndices de Enterococcus justifica-se do ponto de vista da sade publica, pois estes possuem associao direta com vrios sintomas apresentados pelos banhistas, tais como: febre, rash cutneo, nusea,diarria, dor de estomago, tosse e rinites(PRUSS, 1998).

A fim de determinar o melhor indicador de poluio fecal, Environmental Protection Agency (EPA) nos Estados Unidos, relataram que enterococos e E. coli apresentaram a maior correlao com a incidncia da doena nas praias marinhas e de gua doce, respectivamente. Portanto, a anlise de E. coli foi recomendada como um meio para avaliar a carga de fezes nos sistemas de gua doce e os impactos potenciais sobre a sade (USEPA, 1986).

Enterococos tm uma srie de vantagens como indicadores sobre os coliformes totais e E. coli, salientando que eles geralmente no crescem no ambiente, e tm demonstrado um tempo maior de sobrevivncia na gua (MCFETERS et al., 1974WHO, 1993). Apesar dos enterococos serem menos numerosos do que os coliformes fecais e E. coli em fezes humanas, eles ainda so numerosos o suficiente para serem detectados aps diluio significativa (FEACHAM et al., 1983). A Organizao Mundial de Sade - OMS (1996) tambm

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recomenda o uso de estreptococos fecais (dos quais enterococos so um subgrupo), como um indicador adicional de poluio de guas com fezes. Quando combinada com a medio de E. coli, o resultado apresenta maior confiabilidade em relao a ausncia ou presena de poluio fecal.

Estudando os constantes despejos de esgoto na praia de Cambur , GRIFFO (2006) utilizou-se de amostras de gua para anlise de balneabilidade, comprovando a eficincia das metodologias que se seguem. A metodologia de enterococos em amostras de gua foi realizada pela tcnica de Tubos Mltiplos. No teste presuntivo foi utilizado Caldo Dextrose Azida, todos os tubos de dextrose azida que turvaram aps 24 ou 48hs de incubao, foram submetidos ao teste confirmativo. Cada tubo positivo foi semeado em placa contendo gar Bile Esculina Azida. Para Escherichia coli a tcnica utilizada foi a de tubos mltiplos. Esta anlise foi desenvolvida partir da repicagem de tubos positivos de EC (Coliformes Termotolerantes) para tubos contendo o meio substrato definido. Neste estudo, o autor relatou que a anlise de enterococos pela metodologia utilizada apresentou um custo elevado, alm de ser necessrio mais de uma semana para a realizao da anlise e obteno do resultado. Em contrapartida, a anlise de E. coli apresentou tambm custo elevado, porm em relao a execuo e obteno do resultado, o tempo no superou 18 horas (GRIFFO et al 2006).

2.4- PSEUDOMONAS AERUGINOSA

O gnero Pseudomonas caracterizado por bacilos retos ou curvos, Gram-negativos, mveis por flagelo(s) polares e so aerbios restritos (BIER, 1994), produzem pigmentos fluorescentes e tambm piocianina, embora algumas linhagens sejam apiocianognicas, e crescem em uma temperatura entre 37C e 42C (SILVA et al., 2000). As bactrias desse gnero no fermentam carboidratos, utilizando grande variedade de compostos orgnicos como fonte de carbono (BOURGEOIS et al., 1994; FRANCO; LANDGRAF, 1999). Pseudomonas um microrganismo envolvido em contaminao de gua, cujas espcies esto distribudas no solo, na gua, em matria orgnica em decomposio, podendo ser isoladas da pele, garganta e fezes de pessoas doentes e em indivduos saudveis de 3% a 5% (WAGNER et al., 2003; TOLEDO; TRABULSI, 2002).

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As bactrias Pseudomonas, por produzirem pigmentos hidrossolveis, enzimas proteolticas, lipolticas e pectolticas (em algumas espcies), destacam-se como deteriorantes na contaminao de alimentos e gua (FRANCO; LANDGRAF, 1999). A importncia deste gnero para o homem, alm da presena e deteriorao em alimentos, que estas bacterias podem ser importantes patgenos oportunistas.

A espcie de maior importncia do gnero a Pseudomonas aeruginosa, por ser um patgeno humano em potencial (GUILHERME; SILVA; OTTO, 2000; BIER, 1994), e est intimamente relacionada a quadros de infeco hospitalar, por caractersticas como resistncia natural a diversos antibiticos amplamente usados (BIER, 1994) e pela produo de substncias txicas ao homem (FRANCO; LANDGRAF, 1999). Em pacientes hospitalizados, a taxa de portadores pode ser bastante elevada, uma vez que as infeces por Pseudomonas aeruginosa ocorrem principalmente em pacientes debilitados, sendo tambm responsvais por septicemias fatais (SILVA et al., 2000; STROHL et al., 2004). As vias de transmisso nos hospitais so representadas por desinfetantes, respiradores, alimentos e gua (TOLEDO; TRABULSI, 2002), assim, estudos mostram que Pseudomonas spp. podem desempenhar papel importante em surtos de gastrenterites veiculadas pela gua. Estas bactrias tambm esta associadas a infeces piognicas do trato urinrio, meningite e septicemias em pacientes imunodeprimidos (BIER, 1994). Apesar de estar presente na gua (VASCONCELOS et al., 2006), h relatos de isolamento de P. aeruginosa colonizando a pele e na flora intestinal (HOBBS; ROBERTS, 1993 GUILHERME; SILVA; OTTO 2000).

A importncia da P. aeruginosa tornou-se maior quando se comprovou sua resistncia e capacidade de inibir as bactrias do grupo coliformes (GUILHERME; SILVA; OTTO, 2000). A presena na gua destas bactrias em nmeros elevados est associada poluio por matria orgnica (CALAZANS et al., 2004). A presena de P. aeruginosa em grande densidade, em guas contaminadas como esgotos humanos, apontada por DAguila (1996) como indicador de contaminao fecal, estando estas bacterias includas na legislao de alguns pases da Europa para o monitoramento dos corpos hdricos. No Brasil, P. aeruginosa tem aparecido com relativa frequncia em exames bacteriolgicos de guas cloradas, no-cloradas e at minerais naturais (COELHO et al., 2010). A

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Organizao Mundial da Sade estabelece que as guas envasadas devem ser livres de P. aeruginosa (WHO, 2003 apud GUERRA et al., 2006). Na legislao vigente para padro microbiolgico de guas envasadas, o valor mximo permitido de P. aeruginosa <1,1NMP/100ml, porm esta bactria destaca-se pela capacidade de multiplicar em gua com baixos nveis de slidos dissolvidos e compostos orgnicos, sendo encontrada at em gua destilada (GUERRA et al., 2006).

Levando-se em conta o fato de que este microrganismo inibe o crescimento dos coliformes, temos que estar alerta quanto a sua presena em guas de consumo humano (GUILHERME; SILVA; OTTO, 2000). P. aeruginosa produz uma substncia denominada Pseudocin (PLS), que causa um efeito bacteriosttico sobre o crescimento de E. coli, Aerobacter aerogenes, Citrobacter freundii e Klebsiella sp., dificultando o isolamento destes e alterando os resultados laboratoriais (COELHO et al., 2010). O pigmento antibitico denominado piocianina tambm produzido pela P. aeruginosa, inibe o desenvolvimento de bactrias do grupo dos coliformes. As amostras igualmente contaminadas por P. aeruginosa e coliformes, so passivas de apresentarem resultados falso-negativos para as bactrias deste grupo. VASCONCELOS et al. (2006) observaram o fenmeno deste antagonismo por meio da ao de linhagens de P. aeruginosa produtoras de piocianina sobre linhagens de E. coli e Enterobacter aerogenes (todas previamente isoladas de gua de consumo), em meio de cultura em condies de laboratrio.

2.5- LEVEDURAS

So microrganismos predominantemente unicelulares, no mveis, na sua maioria saprfitos e alguns parasitas oportunistas (LACHANCE; STARMER, 1998). Normalmente, as leveduras esto associadas a processos fermentativos que contenham aucares. Possuem as leveduras habilidade em assimilar grande nmero de compostos orgnicos, expandindo a sua capacidade de disperso e de ocupao dos nichos ecolgicos (PHAFF; STARMER, 1987). As leveduras so comuns em ambientes subtropicais, gua do mar, esturios e gua doce. Vrios trabalhos tm sido desenvolvidos visando caracterizar as leveduras presentes em ecossistemas

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aquticos (HAGLER; MENDONA-HAGLER 1981; ROSA et al., 1990, 1995; MORAIS et al., 1996; PEANHA, 1996). As pesquisas envolvendo leveduras de ambientes tropicais so realizadas com maior freqncia, entretanto existem poucos dados sobre a ocorrncia desses microrganismos em lagos e rios em regies tropicais (HAGLER; MENDONA HAGLER, 1981, 1988; HAGLER et al., 1986; ROSA et. al., 1995; VIANA, 1995; MORAIS et al., 1996; PEANHA et al., 1996; SOARES et al., 1997; TORRES, 1999; MEDEIROS, 2002).

O crescimento e distribuio de leveduras, ocorre na presena de poluio ou de algas e podem alcanar mais de mil clulas por litro (HAGLER & MENDONA-HAGLER, 1981). Em todos os estgios de tratamento de esgoto, observou-se a existncia de uma grande diversidade de leveduras, e estas ocorreram em altas densidades de guas naturais que recebiam efluentes de esgotos domsticos COOKE (1965). QUINN (1984) sugere que a presena do elevado nmero de leveduras poderia ser utilizado como um bom indicador de enriquecimento orgnico peridico e localizado em ambientes aquticos. Segundo HAGLER e AHEARN (1987), nos lagos no poludos, so encontradas contagens geralmente abaixo de 10 unidades formadoras de colnia (UFC) de leveduras por 100 ml. Lagos mesotrficos possuem contagens entre 10 e 50 UFC/100 ml. guas que j esto recebendo descargas de poluentes, mas que ainda so seguras para uso recreacional, possuem contagens entre 50 e 100 UFC por 100 ml e as guas eutrofizadas apresentam contagens acima de 100 UFC/100ml. A diversidade e distribuio de leveduras em ambientes aquticos, indicam que habitats diferentes possuem comunidades de leveduras caractersticas, revelando variados bitipos que provavelmente representam novas espcies. Uma grande variedade de populaes de leveduras tem sido encontradas em ambientes aquticos, porm estas parecem originar de ambientes terrestres incluindo esgotos (HAGLER et al., 1995). Hagler e Medona- Hagler (1981) relataram Candida, Rhodotura, Torulopsis e Trichosporon como gneros de leveduras mais frequentemente isolados de gua de esturio poludo do Rio de Janeiro, e concluram que a exigncia de vitaminas como fator essencial de crescimento pode ser importante para o estabelecimento da poluio de guas marinhas.

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Comunidades de leveduras em ambientes aquticos so altamente diversas e muitas espcies podem comportar-se como patgenos oportunistas (HAGLER; AHEARN 1987). Leveduras como Candida tropicalis, C. parapsilosis, C. krusei, C. guilliermondii e C. glabrata, muitas vezes isoladas de ambientes aquticos, tm sido frequentemente relatados como agente etiolgicos da candidase (PFALLER et al. 2003). Pesquisas sobre leveduras de gua doce tm sido mais direcionados na aplicao desses microrganismos como indicadores de poluio orgnica (HAGLER 2006; NAGAHAMA 2006). Alguns estudos tm demonstrado uma correlao entre a ocorrncia de leveduras em ambientes aquticos com a presena de indicadores de poluio fecal (ARVANITIDOU et al. 2002, 2005; HAGLER 2006; MEDEIROS et al. 2008). As leveduras podem ser usadas como indicadoras de contaminao de esgoto e de qualidade das guas de recreio, como um complemento para a contagem de coliformes atualmente utilizados como indicadores de poluio fecal recente (HAGLER 2006). Estes microrganismos apresentam elevada capacidade de sobrevivncia nestes ambientes e podem fornecer evidncias de eutrofizao devido descarga de matria orgnica de qualquer natureza. (SIMARD, 1971; SIMARD & BLACKWOOD 1971 a e b; HAGLER et al., 1986; FUJITA et al., 1987; GREENBERG et al., 1998). A maioria dos estudos sobre leveduras aquticas foram feitas em guas poludas com uma alta incidncia de contaminao por esgotos. O baixo nvel de oxignio acarreta alta proporo de leveduras fermentativas em guas poludas por esgotos domsticos. As leveduras fermentativas (principalmente, Candida krusei, C. tropicalis, C. parapsilosis e C. guilliermondii) podem ser bons indicadores de poluio domstica e contaminao fecal principalmente (WOOLLET;

HENDRICK, 1970).

TORRES (1999), ao estudar o ambiente aqutico da lagoa da Pampulha, Belo Horizonte, MG-Brasil, verificou que as maiores densidades de leveduras foram obtidas nos crregos que recebem maior carga de esgoto (domstico e industrial). MEDEIROS (2002), estudando lagos e rios do trecho mdio da bacia do rio Doce, encontrou as maiores contagens de leveduras nas reas que recebiam grande carga de esgoto.

Populaes de leveduras respondem rapidamente a contaminao orgnica, e algumas espcies podem ser usadas como indicadores do

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enriquecimento de nutrientes em ambientes aquticos. ALMEIDA et al (2007) encontraram a C. parapsilosis como uma das espcies de leveduras mais freqentes, quando a poluio fecal foi abundante. As leveduras sobrevivem mais tempo na gua e apresentam maior resistncia a condies de estresse do que E. coli. A luz do sol, predao por protozorios e lise de bacterifagos so as maiores ameaas sobrevivncia de E.coli nos ambientes aquticos (CHANDRAN; HATHA, 2005). As leveduras podem ser mais resistentes a fatores abiticos e biticos em gua doce em relao a E. coli, usadas para indicar a qualidade ambiental dos ambientes aquticos.Candida krusei, C. guilliermondii, Kloeckera apis e C. tropicalis foram as espcies de leveduras isoladas com maior freqncia. Estas espcies so freqentemente relatadas em guas com elevados nveis de matria orgnica de origem industrial e domstica. (HAGLER 2006; HAGAHAMA 2006; VOGEL et al. 2007; MEDEIROS et al. 2008). Exceto para K. apis, estas leveduras tm sido tradicionalmente associada com o trato intestinal de animais de sangue quente, e foi sugerido que possam ser utilizados como indicadores de poluio fecal (HAGLER 2006).

Muitas espcies de leveduras oportunistas de ambientes aquticos, so resistentes a uma grande variedade de drogas antifngicas. Medeiros et al. isolaram patgenos oportunistas, como a levedura C. krusei, C. tropicalis, C. guilliermondii e C. parapsilosis de rios e lagos com diferente nveis de contaminao orgnica no sudeste do Brasil. Estes autores relataram que entre 68 isolados de leveduras capazes de crescer a 37C, cinquenta por cento eram resistentes ao itraconazol. Estes lagos e rios recebem esgoto de muitas cidades e tambm tm a maior contagem de microrganismos indicadores sanitrios. A ocorrncia de cepas de leveduras resistentes a drogas antifngicas podem indicar riscos potenciais sade para de pessoas que utilizam as guas contaminadas para a recreao (BRANDO et al 2010).

2.6- INDICADORES ALTERNATIVOS

importante considerar outros indicadores na avaliao microbiolgica das guas, os quais podem exibir relao mais estreita com a presena de patognicos na gua, particularmente aqueles que podem persistir por mais tempo

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no ambiente. Em relao aos microrganismos indicadores, estes so usados para sugerir a ocorrncia de contaminao fecal, verificar a eficincia de processos de tratamento de gua, esgoto e possvel deteriorao ou ps-contaminao da gua no sistema de distribuio. Tradicionalmente os indicadores so usados por limitaes de ordem prtica, tcnica e econmica, uma vez que se torna impossvel examinar todos os potenciais organismos patognicos presentes na gua (SOUZA; DANIEL, 2008).

2.6.1 - Anaerbios Fecais

Anaerbios fecais so apontados, por Bower et al. (2005), como alternativa ao grupo coliforme. Bacteroides e Bifidobacterium podem ser organismos indicadores de contaminao fecal, podendo estar presentes em altas densidades populacionais no trato gastrointestinal de humanos. Ferramentas genmicas tm facilitado a deteco destes microrganismos em guas contaminadas e, assim expandido os conhecimentos na rea (RECHE et al., 2010). Outra espcie de microrganismos sugeridos e utilizados como indicador de poluio fecal so os Clostridium perfringens, normalmente esto presentes nas fezes (13 a 35%) embora em menor nmero do que a E. coli (SOUZA; DANIEL, 2008).
2.6.1.1 - Bacteroides spp.

Os membros do gnero Bacteroides so Gram-negativos, bacilos ou coco-bacilos anaerbios obrigatrios so normalmente comensais, encontrados no trato intestinal de humanos e outros animais. As espcies de Bacteroides correspondem s bactrias numericamente dominantes no intestino grosso de humanos, compreende uma parte importante da microbiota normal humana e contabilizam aproximadamente 30% de todos os isolados das fezes. As espcies mais numerosas de Bacteroides do clon so B. vulgatus, B. distasonis e B. thetaiotaomicron. Outras espcies, tais como B. fragilis, B. ovatus, B. eggerthii e B. uniformis so menos numerosas, mas tambm esto presentes em altas concentraes (SOUZA; SCARELLI, 2000). Bacteroides so numerosos nas fezes, porm no tm sido considerados como um conveniente indicador de poluio fecal porque tem um decaimento na gua muito mais rpido do que a bactria coliforme e

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seus mtodos de exames ainda no so confiveis e no foram padronizados (FERREIRA JR, 2002).

2.6.1.2 - Bifidobacterium spp.

Bifidobacterium spp. so Gram-positivas, no esporuladas e bastonetes curvos (HOLT, 1994; BARBOSA et al; 2001). So habitantes naturais do trato intestinal humano, representando 3 -10% da microbiota do clon em adultos e at 91% em bebes lactantes (SGHIR et al., 2000). Devido a esta caracterstica, tem sido proposto que Bifidobacterium pode ser usado como um indicador de contaminao fecal (EVISON; JAMES, 1974; MOSSEL, 1958).

Todas as espcies de Bifidobacterium so exclusivamente de origem fecal, e ocorrem em fezes humanas em propores superiores aos de E. coli (DAVIES, 1993; ELOY, 1976; LEVIN, 1977; LIM et al., 1995). Alm disso, como Bifidobacterium spp. so anaerbios estritos com necessidades complexas de crescimento, pouco provvel que este gnero de organismos encontrem condies adequadas para crescer em gua (NEBRA; BLANCH, 1999). Apesar de algumas vantagens a favor para atuar como indicadores de poluio fecal na gua Bacteroides spp. no possuem um meio seletivo para isolamento, a maioria deles tem composies complexas que incluem antibiticos como inibidores do crescimento e necessitam de tempos de incubao longo. Esses fatores dificultam seu uso rotineiro de acompanhamento quando Bifidobacterium usado como um indicador fecal (NEBRA; BLANCH, 1999).

2.6.1.3 - Clostridium perfringens

Clostridium perfringens so bactrias anaerbias obrigatrias, Gram positivas, sulfato redutores, esporognica, amplamente distribuda pela natureza e considerada como parte da microbiota intestinal normal do homem e de animais, ou seja no so exclusivamente de origem fecal (HATHEWAY et al, 1980). As clulas vegetativas de C. perfringens encontram no intestino condies adequadas para sua esporulao (LABBE, 1980). Os esporos so eliminados nas fezes e dessa forma

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chegam ao meio aqutico onde apresentam longevidade em funo da grande resistncia a condies ambientais desfavorveis. Por esse motivo, so teis na deteco de contaminao fecal remota, em situaes nas quais outros indicadores, como Escheria coli e estreptococos fecais, j no se encontrariam presentes. O uso de C. perfringens como um indicador da qualidade de gua tem sido objetivo de vrios estudos (BISSON & CABELLI, 1979; HIRATA et al., 1991; PAYMENT & FRANCO, 1993; MEDEMA et al., 1997). De acordo com MEDEMA et al. 1997, os esporos de C. perfringens sobrevivem mais tempo nas guas fluviais que os oocistos do protozorio Cryptosporidium parvum, podendo dessa forma ser considerado um indicador til da presena deste parasita responsvel por inmeros surtos de doenas intestinais de origem hdrica e resistente ao tratamento convencional da gua.

HIRATA et al. (1993), PAYMENT & FRANCO (1993), FERGUSON et al. (1996) entre outros pesquisadores preconizam que o monitoramento de C. Perfringens em gua tratada pode fornecer benefcios para se avaliar a eficincia na remoo de organismos patognicos resistentes, tais como oocisto de

Cryptosporidium e cisto de Giardia em sistemas de tratamento de gua. A aplicao mais adequada para esta bactria tem sido indicar poluio fecal em guas cloradas, sedimentos e efluentes industriais com altas concentraes de produtos txicos que podem afetar outros indicadores, mas no afetam os esporos destas bactrias (DE OLIVEIRA, 1990). Apresentam um interessante para pesquisa, porm no so recomendados para a rotina de monitoramento de sistemas de distribuio, devido a sua capacidade de sobreviver, pois podem ser detectados muito tempo depois da poluio e dar falsos sinais (CERQUEIRA, HORTA, 1999).

2.6.2 - Indicadores Virais:

Atualmente o padro de qualidade microbiolgico para gua residuria no Brasil inclui somente bactrias indicadoras de contaminao fecal. A determinao deste parmetro no avalia de maneira eficiente presena ou ausncia de vrus na gua. Para complementar os indicadores bacterianos freqentemente utilizados, os bacterifagos tm sido proposto como possveis tipos de vrus para a avaliao da qualidade da gua (IAWPRC, 1991).

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2.6.2.1 Bacterifagos

Nos ambientes de gua doce tambm tem a presena de microrganismos parasitas intracelulares obrigatrios, como os bacterifagos, que so vrus e, portanto requerem a presena de bactrias hospedeiras viveis para sua replicao. (FARRAH, 1987). Atualmente, a deteco de nveis de bacterifagos em guas poludas por esgotos tem sido proposta como forma de avaliar o nvel de contaminao dessa gua. A descrio de uma correlao entre nveis de colfagos e coliformes tem estabelecido a importncia do bacterifago como um indicador de contaminao fecal. Apesar do ndice de coliforme ser o critrio microbiolgico utilizado para avaliar a qualidade da gua e o risco de presena de bactrias patognicas, questiona-se a sua utilidade para indicar a presena de vrus entricos. A deteco de nveis de bacterifagos na gua tem sido ento proposta como alternativa avaliao da contaminao de diferentes tipos de gua tanto por bactrias quanto por vrus enteropatognicos (PEDROSO et al., 2003).

So trs os grupos de bacterifagos considerados como provveis indicadores da presena de vrus: os colifagos somticos, os bacterifagos Fespecificos e fagos que infectam a bactria anaerbia Bacteroides fragilis (IAWPRC,1991). A quantificao de microrganismos indicadores de contaminao fecal ferramenta essencial para avaliar o desempenho do sistema de tratamento na remoo de microrganismos patognicos. Os estudos sobre colifagos somticos importante para avaliar a contaminao fecal com menor tempo de deteco, demora apenas 6 horas, sendo mais rpido que a determinao de coliformes termotolerantes que precisam de 24 horas para sua quantificao (MEDEIROS, BRITO, 2006).
2.6.2.2 Colifagos

Os colifagos so bacterifagos especficos de E. coli e foram considerados indicadores microbiolgicos potenciais de qualidade da gua por estarem presentes em guas que contm E. coli. No esgoto so presentes em nmero maior que nas fezes humanas e desenvolvem maior resistncia ambiental

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que as bactrias (BITTON, 1987). Seu significado sanitrio como indicador de contaminao por esgoto e, devido a sua grande persistncia comparada com outras bactria indicadora, pode ser utilizado como indicador adicional da eficincia do tratamento de gua ou proteo de guas subterrneas (OPAS,1996).

O uso dos colifagos como indicador tem como vantagens sua facilidade de enumerao, incluindo o tempo reduzido para o resultado final (4 a 6 horas), alm do que, as taxas de inativao de colifagos so similares quelas reportadas para muitos patognicos. Entretanto, para muitos pesquisadores, a maior dificuldade do uso desse indicador refere-se ao fato de que sua enumerao requer manuteno de cepa de bactria hospedeira de boa qualidade, cuja condio pode ser limitante para muitos laboratrios (PAYMENT; FRANCO, 1993).

A qualidade de guas tratadas nem sempre garantida em termos de segurana virolgica, pois os atuais indicadores do grupo coliforme determinam somente a segurana bacteriolgica da gua. Os vrus so mais difceis de serem detectados que as bactrias em amostras ambientais, especialmente em guas, nas quais estes microrganismos normalmente so encontrados em menor nmero. Sendo parasitas intracelulares obrigatrios, no se multiplicam; tornam-se necessrias, ento, a anlise de amostras de gua volumosas e a escolha de mtodos de concentrao com grande eficincia de recuperao para as partculas virais (TAVARES et al. 2005). 3 CONCLUSES: Os indicadores biolgicos so teis devido a sua especificidade a certos tipos de impacto, j que inmeras espcies so comprovadamente sensveis a um tipo de poluente, mas tolerantes a outros. Entretanto nenhum indicador efetivamente perfeito, levando em considerao uma srie de fatores tais como classe dos corpos de gua, caracterstica da gua (gua doce, salina), clima (temperado, tropical) e alm do fator econmico. Tradicionalmente os indicadores so usados por limitaes de ordem prtica, tcnica e econmica, uma vez que torna-se impossvel examinar todos os potenciais organismos patognicos presentes na gua.

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Vrias crticas e algumas desvantagens so apontadas sobre o uso geral de E. coli, como indicadores de poluio fecal em ambientes hdricos, devido ao fato de sua pouca tolerncia toxicidade da gua salgada, alm de no funcionarem adequadamente como indicadores de poluio local, visto a existncia de outras origens. Os coliformes e outros indicadores fecais devem ser suplementados com indicadores adicionais, que compensem a intolerncia deste na monitorao do meio hdrico.

Os quatro grupos de microrganismos descritos, como indicadores da qualidade da gua so importantes, necessrios critrios para us-los, como ferramenta eficiente no controle dos recursos hdricos.

Assim sendo, esses organismos no so to conhecidos pelo pblico em geral, mas so grandes aliados em vrios tipos de pesquisas com os mais variados focos. Dessa forma, a tendncia uma utilizao cada vez maior desses bioindicadores, em razo dos excelentes resultados alcanados no controle e pesquisas.

de suma importncia que haja vontade poltica dos dirigentes governamentais na criao de programas sanitrios com alocao de recursos e execuo da coleta e tratamento de resduos industriais e esgoto domstico. Tambm se faz necessrio a conscientizao da populao no sentido de preservao deste bem natural to escasso e finito. A falta de informao, e a m utilizao da gua leva cada vez mais, a uma maior complexidade na utilizao dos indicadores de poluio e seu monitoramento.

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