Prlogo: En el presente reporte se refieren las actividades efectuadas y los resultados conseguidos durante las Prcticas Profesionales que

comprendieron los meses a partir del 3 de Septiembre al 3 de Enero 2009. Las actividades se realizaron en el Centro de Ecologa, Pesqueras y Oceanografa del Golfo de Mxico (EPOMEX) en el rea de Contaminacin e impacto Ambiental bajo la asesora del Dr. Jaime Rendn von Osten dentro del proyecto Diagnostico y propuestas de accin de la contaminacin de la zona costera del Estado de Campeche a cargo del mismo. En este laboratorio se realiz el anlisis bacteriolgico en muestras de agua con el objetivo de evaluar la contaminacin por bacterias Coliformes ocasionada por actividades antropognicas. Los principales factores de transformacin de las costas son el crecimiento acelerado de las poblaciones costeras y el desarrollo urbano y contaminacin que trae consigo, las pesqueras y maricultura que destruyen los hbitats y las poblaciones animales de las que dependen y el desarrollo de grandes industrias como son la explotacin petrolera y minera y el desarrollo turstico que destruyen los hbitats y contaminan los ambientes marinos y costeros (Mailuf, 2002).

Mxico realiza actividades en su zona costera que representan un gran potencial de desarrollo e importantes fuentes de captacin econmica; sin embargo, es necesario implementar polticas que favorezcan la sustentabilidad. El desarrollo desordenado de la franja litoral y los mltiples problemas asociados, ha mostrado la necesidad de implementar una poltica de manejo de la zona costera mexicana, que permita, la utilizacin ptima de sus recursos y su conservacin (INE, disponible en lnea). La presencia y extensin de contaminacin fecal es un factor importante en la determinacin de la calidad de un cuerpo de agua. Las heces contienen una variedad de microorganismos y formas de resistencia de los mismos, involucrando organismos patgenos, los cuales son un riesgo para la salud pblica al estar en contacto con el ser humano. El examen de muestras de
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agua para determinar la presencia de microorganismos del grupo coliforme que habitan normalmente en el intestino humano y de otros animales de sangre caliente, da una indicacin. Dada la limitada capacidad de algunos miembros del grupo de organismos coliformes para sobrevivir en agua; sus nmeros tambin pueden emplearse para estimar el grado de contaminacin fecal (NMX-AA-042-SCFI-2005). Las bacterias coliformes son un grupo heterogneo compuesto por varios. Existe poca evidencia que indique que estas bacterias coliformes pertenezcan a un solo gnero taxonmico (NOM-112-SSA1-1994). La deteccin y cuantificacin de coliformes totales y E.coli como microorganismos indicadores de contaminacin fecal tiene gran importancia en el control microbiolgico de la calidad sanitaria de las aguas (Annarella, 2003).

Por lo expuesto anteriormente, se analizaron muestras de agua con el fin de estimar por el mtodo de Nmero Mas Probable (NMP) contaminacin de la zona costera del estado de Campeche. el grado de

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DATOS GENERALES DEL CENTRO EPOMEX: En 1990 la Universidad Autnoma de Campeche (UAC) toma la decisin de impulsar la investigacin y formacin de recursos humanos, en aspectos prioritarios sobre la proteccin y evaluacin de los ecosistemas costeros y sus recursos biolgicos renovables. Con el apoyo de la Secretara de Educacin Pblica a travs de la Subsecretara de Educacin Superior e Investigacin Cientfica, la UAC anuncia el da 26 de Julio de 1990 la creacin del Programa de Ecologa Pesqueras y Oceanografa del Golfo de Mxico (EPOMEX). Hace ms de una dcada, el Centro Epomex fue creado para contribuir a la generacin del conocimiento, base de la ciencia bsica, para aplicarla a necesidades locales y regionales que realiza a travs de diversos proyectos de investigacin y cuenta con cinco reas de atencin. Cuenta con cinco reas de investigacin: Manejo de Sistemas Costeros, Procesos Costeros, Recursos Costeros Tropicales, Evaluacin de Cuencas Hidrolgicas y Acuacultura (Universia, disponible en lnea). RAZN SOCIAL: UNIVERSIDAD AUTONMA DE CAMPECHE (R.F.C. UAC-891020-U21) LOCALIZACIN: Av. Agustn Melgar s/n entre Juan de la Barrera y calle 20. Colonia Buenavista. C.P. 24030, Campeche, Mxico. TIPO DE EMPRESA: Educativa y de investigacin que forma parte de la Universidad Autnoma de Campeche. SERVICIOS: El centro EPOMEX como grupo tcnico y cientfico ofrece diversos servicios a los sectores pblico y privado a travs de consultoras tcnicas, manifestacin de impacto ambiental (MIA), estudio especializado, diagnsticos ambientales,
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propuestas de ordenamiento ecolgico, evaluacin de pesqueras, evaluacin de contaminantes en el ecosistema, preparacin y ejecucin de cursos de especializacin y diplomados internacionales. ORGANIGRAMA: Con el objetivo y misin de generar y difundir investigacin bsica y aplicada de las zonas costeras y marinas del Golfo de Mxico y Caribe; se desarrollan cuatro reas de investigacin: Manejo de Ecosistemas Costeros; Recursos Pesqueros Tropicales; Contaminacin e Impacto Ambiental; Procesos Costeros y Acuacultura. El departamento de Difusin y Publicaciones produce diferentes productos de difusin cientfica orientados a valorar y proteger el ambiente marino-costero y sus recursos. Las Publicaciones del Centro EPOMEX incluyen: libros, monografas, resultados finales de proyectos, compilacin de trabajos, revisiones interpretativas, resultados de reuniones tcnicas, manuales de investigacin-docencia, mapas temticos; as como el boletn informativo JAINA y diversas bases de datos. De igual manera se encarga del diseo y actualizacin del sitio web. Se brinda apoyo editorial a otras dependencias de la UAC, as como de otras Instituciones educativas de la regin del Golfo de Mxico y el Caribe (http://www.uacam.mx/epomex/paginas/mision.htm). El Centro Ecologa, Pesqueras y Oceanografa del Golfo de Mxico (Epomex) hay 13 investigadores distribuidos en las cinco reas ya mencionadas, cuatro tcnicos acadmicos y docentes. Once de los investigadores son doctores y nueve de ellos estn en el Sistema Nacional de Investigadores.

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M. en C. Guillermo Villalobos Zapata DIRECTOR

Lic.Yolanda Snchez Coj ASISTENTE DE DIRECCIN

REAS

ACUACULTURA

CONTAMINACIN E IMPACTO AMBIENTAL

Dr. Maurilio Lara Flores INVESTIGADOR

Dr. Rodolfo del Ro Rodrguez INVESTIGADOR

Dr. Jorge A. Bentez Torres INVESTIGADOR

Dr. Jaime Rendn von Osten INVESTIGADOR

QFB. Alejandro Ortiz Arana TCNICO POR PROYECTO Biol. Ana Delia C Escamilla TCNICO

QFB. Martn Memije Canepa TCNICO

MANEJO DE ECOSISTEMAS COSTEROS

RECURSOS PESQUEROS TROPICALES

M. en C. Guillermo Villalobos Zapata INVESTIGADOR

Dra. Julia Ramos Miranda INVESTIGADOR

Dra. Evelia Rivera Arriaga INVESTIGADOR Dr. Atahualpa Sosa Lpez INVESTIGADOR Dra. Claudia Agraz Hernndez INVESTIGADOR Dr. Domingo Flores Hernndez INVESTIGADOR Biol. Francisco Gmez Criollo TCNICO DIFUSIN Y PUBLICACIONES

Dra. Leticia Alpuche Gual INVESTIGADOR

PROCESOS COSTEROS

Dr. lvaro Gerardo Palacio Aponte INVESTIGADOR

L.D.G.P. Juan Manuel Mat Fierros DISEO GRFICO

M. en Ed. Jorge Gutirrez Lara COORDINADOR

L.A.E. Maria Elizabeth Oballe Alvarado COORDINADOR ADMINISTRATIVO

Dr. Rodolfo del Ro Rodrguez COORDINADOR DE POSGRADO

COORDINADOR ACADMICO

Patricia Angulo Pinto ASISTENTE

Santa Cecilia Sols Castro ASISTENTE

Fig. 1 Organigrama del centro EPOMEX

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DIRECTOR DEL CENTRO: Es quien define el programa de investigacin y docencia en las reas cientficas de EPOMEX en coordinacin con los grupos de investigacin. Adems es de su competencia disear las estrategias de desarrollo precisar objetivos prioritarios y proponer medidas en un plan de accin que incluye una fuerte vinculacin acadmica e internacional. AREAS CIENTFICAS: El rea Manejo de Ecosistemas Costeros se dedica a la investigacin y gestin de los procesos asociados a la planeacin sostenible y gestin de un manejo integrado de la zona costera como son los ordenamientos ecolgicos territoriales, programas de conservacin y manejo de reas naturales protegidas costeras y marinas; de la planeacin sostenible de asentamientos humanos en zonas costeras; atencin integral, junto con otras disciplinas, a los efectos del cambio climtico global sobre estos asentamientos y su infraestructura. Procesos Costeros, es un rea dedicada a evaluacin de riesgos con relacin a la morfologa costera tambin orientada al desarrollo de sistemas de informacin geogrfica, o cartografas, que son usadas en apoyo a otras reas de Epomex en la generacin de mapas usando imgenes de satlite, fotografas areas. El rea de Recursos Pesqueros Tropicales atiende principalmente los recursos bandera para el estado, como son el camarn y recursos pesqueros de escama, y ha contribuido con el sector pesca para evaluar el crustceo, sus tendencias, no slo su situacin actual sino a futuro. Mientras que el rea de Contaminacin e Impacto Ambiental trata de evaluar con estudios especficos de Ecotoxicologa que tiene que ver con el efecto de pesticidas y fertilizantes sobre la vida silvestre y la salud humana. Asimismo, el rea de Acuacultura est particularmente orientada a la investigacin sobre las enfermedades y sobre las posibilidades de desarrollo de
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un laboratorio estatal que pueda ayudar a los productores a mejorar las condiciones de salud de su granja. Tambin realiza investigaciones sobre dietas. LOCALIZACIN PROGRAMA: El prestador de Prcticas Profesionales se ubica en el rea de Contaminacin e Impacto ambiental en colaboracin con el laboratorio de anlisis microbiolgico y molecular a cargo del Dr. Maurilio Lara Flores. El anlisis form parte del proyecto Diagnostico y propuestas de accin de la contaminacin de la zona costera del Estado de Campeche. DEL PRESTADOR DE PRCTICAS DENTRO DEL

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FUNCIONES Y ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL CENTRO EPOMEX: Para el cumplimiento de las prcticas profesionales se sigui el siguiente orden: revisin bibliogrfica (mayo-diciembre), entrenamiento para anlisis de muestra de agua y coliformes (mayo), preparacin de material y procesamiento de muestras despus de la llegada de los muestreos que se efectuaron cada tres o cuatro meses. MATERIALES Y MTODOS: El estudio de anlisis de agua comprendieron las pocas de secas, lluvias y nortes de mayo-08 a enero-09 en la zona costera del Estado de Campeche. Puntos estratgicos de la Cd. de San Francisco de Campeche; as como del municipio de Champotn y la Lguna de Trminos formaron parte en el estudio con el fin de determinar la presencia de bacterias coliformes. Las zonas que fueron examinadas bacteriolgicamente corresponden a la

Costa de Campeche, los desages de la ciudad, la costa del municipio de Champotn, los mrgenes del ro Champotn y la Laguna de Trminos. En cada zona se muestrearon diez puntos considerando varios ncleos poblacionales establecidos y actividades econmicas primarias (Fig. 2-4). Se tomaron muestras de agua para el anlisis de coliformes fecales y totales utilizando bolsas tipo Whirl Pack y se sigui la metodologa de la Norma Mexicana NMX-AA-042-1987 ver Tabla 1. El agua muestreada se tom de la superficie del afluente o tomando en cuenta la profundidad del sitio.

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Fig. 2.- Zona 1, Campeche-costa (puntos del 1-5) y Campeche desages (aeropuerto, cuatro caminos, barcel, desembocadura de la ra).

Fig. 3 Zona 2 que corresponde al municipio de Champotn y comprende Champotn-costa (putos del 1-5) y Champotn-ro (Canasayab, Ulumal, punto 3, punto 4, desembocadura).

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Fig. 4 La Zona 3 corresponde a la Laguna de Trminos. Tabla 1. Metodologa utilizada en los anlisis bacteriolgicos. Parmetro: NMP= Numero Mas Probable NMP Lmite permisible Cuenta de organismos coliformes. Mtodo: NMX-AA-042-1987 NOM-112-SSA1-1994 NOM-001-ECOL-1996 Nmx-f-254-1977.

MATERIAL Y EQUIPO: Tubos de ensaye con rosca de 15 x160. Matraz 1000ml Vaso pp 500ml Balanza analtica Papel aluminio Placa de calentamiento Esterilizador Pipeta (10ml) Propipeta Tubos durhan de 35x6 mm Micropipetas (25,100,1000l)
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 Puntas para micropipetas Mechero bunsen Estufa de incubacin Utensilios estriles: cuchillos, pinzas, tijeras, cucharas, esptulas.

MEDIOS DE CULTIVO: Medio de cultivo Caldo Lactosado (deteccin y cuenta de NMP de coliformes). Marca DIBICO S.A. DE C.V. PREPARACIN: 1. Colocar la porcin en gramos adecuada tomando en cuenta que 13g se diluyen en 1litro de agua. Seguidamente se vierte la cantidad deseada en un matraz erlenmeyer y se rehidrata. Se calienta para poder disolverse y se agita frecuentemente para disolucin completa. 2. Seguidamente se vierten 10ml del caldo en los tubos de ensaye y se les introducen los tubos Durhan a cada tubo de ensaye (este paso se realiza tambin en el medio de Caldo Verde Brillante Bilis). 3. Seguidamente se esterilizan a 121 C durante 15min. 4. Despus de haber dejado enfriar los tubos a temperatura ambiente se procede a ino 5. Y al paso de 24hrs los tubos positivos se manifiestan por el cambio a color amarillo. Medio de cultivo Caldo Verde Brillante bilis al 2%(deteccin de miembros del grupo coliformes de importancias sanitaria) marca DIBICO S.A. DE C.V. PREPARACIN: 1. Re-hidratar 40g del medio de cultivo en un litro de agua destilada, agitar frecuentemente hasta disolver el producto. 2. Se repiten el paso dos del caldo lactosado. 3. Esterilizar a 121 C durante 15min. 4. Los tubos ya inoculados se incuban por 48-72hrs y el que sean positivos se manifiesta en su turbidez y empalidecimiento del color verde.
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En el laboratorio las muestras de agua se descongelaron y se mantuvieron a temperatura ambiente. Para su sembrado las muestras fueron

homogeneizadas. El mtodo se basa en la inoculacin de alcuotas de la muestra sin diluir en una serie de tubos de medio de cultivo lquido lactosado (Marca DIBICO S.A. DE C.V.). Para cada sitio la inoculacin se hizo por triplicado y los tubos contuvieron alcuotas de 1, 0.1, 0.01 ml de muestra.

Los tubos se examinan a las 24 y 48 horas de incubacin a 35 o 37C pasado este tiempo se determinaba la presencia o ausencia de coliformes, que consiste en ver la turbidez con produccin de gas; estos fueron denominados positivos y se resembraron en un medio confirmativo ms selectivo (mtodo de prueba para la estimacin de la densidad microbiana por la tecnica del numero ms probable (nmp), deteccin de coliformes fecales y Escherichia coli por el nmp) (Nmx-f-254-1977. Cuenta de organismos coliformes. Coliform Organisms count. Normas mexicanas. Direccin general de Normas).

Despus se resembraron los tubos positivos en medios confirmativos (Medio de cultivo Caldo Verde Brillante bilis al 2%) por 48 horas a 35 o 37C para la deteccin de organismos coliformes y a 45C por 48hrs para organismos termotolerantes y E. coli.

Mediante tablas estadsticas se llev acabo l clculo del numero ms probable (NMP) de organismos coliformes, organismos coliformes termotolerantes y E. coli presentes en 100 cm3 de muestra, a partir de los nmeros de los tubos que dan resultados confirmativos positivos.

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RESULTADOS: En la poca de secas se presentaron niveles bajos de coliformes totales y fecales a excepcin del punto tres de Champotn-costa que rebas los lmites segn la NOM-01-ECOL de coliformes totales (Ver tabla 2). En el segundo muestreo correspondiente a la poca de lluvias se presentaron los ndices ms altos de contaminacin por estos patgenos en las zonas de Campeche y de Champotn. La zona que comprendi la Laguna de Trminos present los valores ms bajos de concentracin de coliformes (<21 NMP/100ml) encontrndose dentro de los lmites establecidos por la NOM-ECOL-01(1996).

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Tabla 2. Resultados de los anlisis bacteriolgicos en muestra de agua para organismos Coliformes (fecales y totales) mediante la tcnica del Nmero Ms Probable (NMP).

COLIFORMES (nmero ms probable por 100 ml), (NMP/100ml) MUESTREO 1 Punto Laguna de Trminos Totales Fecales MUESTREO 2 Totales 2 4 4 2 2 4 4 2 9 4 150 21 2 9 9 23 3 43 23 23 240 >2400 >2400 1100 240 460 21 23 120 150 Fecales MUESTREO 3 Totales Fecales

1 2 2 2 21 21 3 2 2 4 2 2 5 2 2 6 2 2 7 2 2 8 2 2 9 2 2 10 2 2 1 4 4 2 3 3 Champotn Ro 3 3 3 4 3 3 5 2 2 1 4 4 2 11 2 Champotn 3 >2400 43 Costa 4 11 7 5 2 2 1 2 2 2 9 4 3 7 2 Campeche Costa 4 2 2 5 2 2 6 2 2 1 2 2 2 11 11 Campeche Desages 3 11 11 4 2 2 NMP= Numero Mas Probable Referencias Analticas: Lmite permisible (NOM-001-ECOL): Cuenta de organismos coliformes.

2 23 23 4 2 2 4 2 2 2 2 2 2 2 2 4 2 2 4 2 2 2 2 2 9 4 4 4 4 4 150 2 2 21 9 4 2 7 7 9 2 2 9 460 15 23 4 4 3 20 7 23 7 7 23 11 4 23 28 28 240 2 2 1100 93 11 1100 43 23 93 2 2 240 2 2 43 2 2 21 20 15 23 >2400 11 39 >2400 11 280 >2400 11 NMX-AA-042-1987 NOM-112-SSA1-1994 1000-2000 NMP de Coliformes Fecales 100ml Nmx-f-254-1977.

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3000

COLIFORMES TOTALES
2500
SECAS LLUVIAS NORTES

NMP/100ml

Fig. 5. Se observan tres picos en el grfico que corresponden a las tres estaciones; en lluvias y secas se presentaron niveles crticos por encima de la NOM-ECOL-01.

500

1000

1500

2000

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1200

1000

COLIFORMES FECALES
SECAS LLUVIAS NORTES

Fig. 6 Muestra los coliformes fecales de las tres estaciones (serie 1-3) y expone que la serie dos (temporada de lluvias) rebasa los lmites permitidos por la NOM-ECOL-01.

DISCUSIN: Los sistemas fluviales, lagunas costeras y playas de la Repblica Mexicana presentan contaminacin debido a descargas de residuos domsticos e industriales, la presencia de coliformes en los acarreos superficiales constituye una contaminacin en regiones costeras de acuerdo a los niveles de bacterias, de la precipitacin y del tipo de suelo (Weibel et al.,1964; Geldreich et al., 1968; Sartor et al.,1974). En la poca de lluvias y nortes los ndices altos presentados en el estudio puede ser debido a los arrastres por las escorrentas y a los fenmenos hidrogrficos que caracterizan la poca. Figueras et al., (2000) plantean que las precipitaciones ejercen una gran influencia en la densidad de estos microorganismos en las aguas marinas, ya que causan un aumento en el caudal de los ros e incrementan los escurrimientos terrgenos provocando un

200

400

NMP/100ml 600 800

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aumento en la densidad de bacterias y contaminantes que llegan a la zona litoral.

CONCLUSIN: Para coliformes totales se exponen niveles crticos por encima de la NOMECOL-01 en las tres zonas climticas (punto 3 de Champotn-costa; en los puntos 2-4 de Campeche-costa; as como los puntos 2-4 de Campechedesages). En coliformes fecales se obtuvieron dos zonas que rebasaron los lmites permisibles por la NOM-01-ECOL (Campeche-costa y Campeche-desages)En ambos anlisis las pocas de lluvias y nortes fueron las que presentaron mayores ndices de stos patgenos; esto se atribuye a las precipitaciones que ejercen gran influencia en la densidad de estos microorganismos provocando que los escurrimientos aumenten la densidad de stos patgenos. APROVECHAMIENTO: El desempeo empleado en estos cuatro meses tuvo como base el conocimiento terico de las asignaturas cursadas en la carrera de biologa. Para tal fin, las disciplinas que formaron parte del aprovechamiento, aplicacin y ejecucin de las prcticas profesionales son metodologa de la investigacin, biologa, estadstica I y II; microbiologa, bioqumica y zoologa III. Sin embargo, el saber multifactico forma un papel fundamental si de aplicar el conocimiento se trata. Ya que materias integradoras como Conservacin de recursos naturales, as como ecologa I y II, forman parte importante en el cumplimiento de las prcticas profesionales. Tampoco desdeo las materias bsicas y de formacin acadmica que no menciono; ya que en un futuro podrn ser la plataforma de otras aplicaciones a este quehacer cientfico. No por algo la ciencia es multidisciplinaria. Por tal, el desarrollo como futuro profesionista contendr bases tericas y prcticas aprendidas en la formacin acadmica y en el centro EPOMEX.
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Referencias: 1. Annarella Rodrguez Isaac. Mara del Carmen Novoa Deao. Mara Antonieta Mieres Villa. 2003. Determinacin de coliformes totales y E.coli en aguas utilizando el Fluorocult LMX (MERCK) I: Comparacin con los medios de cultivo tradicionales. INGENIERA HIDRULICA Y

AMBIENTAL, VOL. XXIV, No. 3, 24:3

2. Botello. A. V. 1996. Caractersticas, composicin y propiedades fisicoqumicas del petrleo. 203-210 pg. In: AV Botello. JL RojasGalaviz, JA Benitez y D Zrate-Lomel (Eds.) Golfo de Mxico, Contaminacin e impacto Ambiental: Diagnstico y tendencias Serie cientfica 5 Epomex, Universidad Autnoma de Campeche, Campeche, Mxico. 666 pg.

3. Google Earth 5.0 (beta). 2007.

4. INE. La calidad del agua en los ecosistemas costeros de Mxico. 1 (ed.) Mxico. 407 pg. Disponible en lnea: http://www.ine.gob.mx/pub licaciones/new. consultaPublicacion.php

5. Majluf Patricia. 2002. LOS ECOSISTEMAS MARINOS Y COSTEROS. en Proyecto Estrategia Regional de Biodiversidad para los Pases del Trpico Andino. Lima Per. 121 pg.

6. METODO DE PRUEBA PARA LA ESTIMACION DE LA DENSIDAD MICROBIANA POR LA TECNICA DEL NUMERO MS PROBABLE

(NMP), DETECCION DE COLIFORMES FECALES Y Escherichia coli POR EL NMP

7. Norma Mexicana NMX-AA-042-1987 Calidad del Agua - Determinacin del Nmero ms Probable (NMP) de Coliformes Totales, Coliformes Fecales (Termotolerantes) y Escherichia coli Presuntiva Water Quality 18 | P g i n a

Determination of the Most Probable Number (NMP) of Total Coliforms, Fecal Coliforms (Thermal Tolerants), and Escherichia coli Presumptive.

8. NORMA

OFICIAL

MEXICANA

NOM-112-SSA1-1994, DE BACTERIAS

BIENES

SERVICIOS.

DETERMINACIN

COLIFORMES.

TCNICA DEL NMERO MS PROBABLE. 9. Universia Mxico. 2008. EPOMEX, generador de conocimientos para necesidades locales y regionales. Disponible en lnea: http://www. universia.net.mx/index.php 049/Contactanos /news_user/content /view/full/54

10. Weibel, S.R., Anderson, J.R. y R.L. 1974. Woodwards J. Wat. pollut. cont. fed. urban and runnof as a factor in stream pollution..914-924.

11. Geldreich, E.E. 1975. Ocean management microbiological criteria concepts for coastal bathing waters.225-248.

12. Sartor, J.D., Body, G.B. Y F.J. Agardy J. 1974. Wat. pollut. cont. fec. water pollution aspects of street surface contaminants. 458-467. 13.

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