UNIVERSIDAD NACIONAL SAN ANTONIO ABAD DEL CUSCO

ESCUELA DE POST GRADO

MAESTRIA EN CIENCIA Y TECNOLOGIA DE ALIMENTOS

ANALISIS SENSORIAL E INSTRUMENTAL

EPA 01ACT

04 TCNICAS PTICAS DE ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR

Dra. Celina Luzar Obregn

TCNICAS PTICAS DE ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR

Fundamentos de espectroscopia
o La espectroscopa est relacionada con las interacciones que la materia experimenta con la radiacin electromagntica. o Existen diversos mtodos para resolver diferentes problemas analticos. o Pueden ser mtodos analticos cuantitativos o cualitativos. o Los mtodos se diferencian en: analito a ser analizado (molecular o atmico), el tipo de interaccin radiacin-materia a ser monitoreado (absorcin, emisin, o difraccin) la regin del espectro electromagntico usado. o Los mtodos ms usados se diferencian en alimentos usan absorcin o emisin de la radiacin ultravioleta (UV), visible (Vis), infrarroja (IR) y radiofrecuencia (RMN).

TCNICAS PTICAS DE ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR

Espectro de la radiacin solar

TCNICAS PTICAS DE ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR

Fundamentos de espectroscopia
Luz
o Propiedades de onda de la radiacin electromagntica: frecuencia (n), longitud de onda (l), amplitud (A). o Tambin se consideran el nmero de onda (n ).

v vl
i

o Donde: Vi = velocidad de propagacin en el medio i; ni = frecuencia de la onda; li = longitud de onda en el medio i.

TCNICAS PTICAS DE ESPECTROSCOPA DE ABSORCIN MOLECULAR

Fundamentos de espectroscopia
Interferencia
o Tren de ondas (wave train), se refiere a una serie de frentes de onda todos los cuales estn en fase, es decir, cada ola individual tendr una amplitud mxima en la misma ubicacin en el espacio

o La interferencia es el trmino utilizado para describir la observacin de que cuando dos o ms trenes de ondas se cruzan entre s, dan lugar a una onda instantnea, en el punto de interseccin, cuya amplitud es la suma algebraica de las amplitudes de las ondas individuales en el punto de interseccin.

Fundamentos de espectroscopia

Espectro electromagntico

Fundamentos de espectroscopia
Spectroscopic Techniques and Chemistry they Probe
UV-vis Atomic Absorption FT-IR Raman FT-NMR UV-vis region bonding electrons atomic transitions (val. eUV-vis region ) IR/Microwav e IR/UV Radio waves vibrations, rotations vibrations nuclear spin states inner electrons, elemental 3-D structure

X-Ray Spectroscopy
X-ray Crystallography

X-rays
X-rays

Fundamentos de espectroscopia
Estados de energa de la materia
o El contenido de energa de la materia est cuantizada. o La energa potencial o interna contenido de un tomo o molcula vara en una serie de pasos discretos. o tomos y molculas, en condiciones normales, existen predominantemente en el estado fundamental, (estado de energa ms bajo). Estos pueden obtener energa, y ser elevados a un estado de energa ms alto (estado excitado). o Existen estados de energa "permitidos" para cada especies atmicas o moleculares. Cada estado permitido es nico para cada especie. o El potencial de separacin de energa entre los niveles permitidos de energa interna es caracterstica de una especie. Por lo tanto, el conjunto de separaciones de energa potencial para especie puede ser utilizado cualitativamente como una huella digital distinta. o La espectroscopia de absorcin y emisin cualitativas usan este fenmeno para determinar las distancias de energa relativa de un compuesto desconocido midiendo las transiciones permitida entre niveles de energa.

Fundamentos de espectroscopia
Niveles de energa electrnicos, rotacionales y vibracionales

Diagrama molecular parcial de niveles de energa que representa tres estados electrnicos.

Fundamentos de espectroscopia
Niveles de energa electrnicos, rotacionales y vibracionales o Cada uno de los estados electrnicos corresponde a un orbital electrnico. Los electrones en orbitales diferentes son de energa potencial diferente. o Transicin electrnica: Cuando un electrn cambia de orbital (absorbe o emite un fotn de energa apropiada) es decir, cambia de nivel de energa. Esto implica un cambio en la energa potencial del electrn.
o Las transiciones electrnicas estn relacionadas con la radiacin UV y Vis.

Diagrama de absorcin multifotnica del triptfano

Fundamentos de espectroscopia
Niveles de energa electrnicos, rotacionales y vibracionales o Transicin vibracional: Es el cambio de niveles de energa vibracional. Los tomos que forman una molcula estn en constante movimiento y vibracin muy diversa. Cada estado de vibracin implica un nivel de energa de la molcula. o Las diferencias de energa entre estos niveles es muy pequeo. o Las diferencias de energa entre los niveles vibratorios de energa permitidos son de la misma magnitud que los fotones asociados con la radiacin en la regin IR.

Vibracional

Fundamentos de espectroscopia
Niveles de energa electrnicos, rotacionales y vibracionales o Transicin rotacional: Es el cambio de niveles de energa rotacional de una molcula. o Las diferencias de energa entre los niveles rotacionales de energa permitidos son de la misma magnitud que los fotones asociados con la radiacin en la regin de las microondas. o Espectroscopia de microondas no es muy usada en los laboratorios de anlisis de alimentos. o Resumen: La energa interna de un tomo se describe en trminos de sus niveles de energa electrnica. o La energa interna de una molcula es dependiente en sus energas electrnicas, vibracional, y rotacional:

Rotacional

Fundamentos de espectroscopia
Niveles de energa nuclear sometidos a campos magnticos

o Los niveles de energa importantes en Espectroscopia de Resonancia Magntica Nuclear (RMN) se muestran solo bajo la presencia de un campo magntico externo. o Se considera a los tomos como pequeas barras magnticas , con un momento magntico definido. o La diferencia de energa entre las orientaciones permitidas depende de la fuerza efectiva del campo magntico que experimenta el ncleo. Esta ltima depende de la magnitud del campo externo aplicado y de la naturaleza qumica del entorno del ncleo que se observa. o La diferencia de energa de los niveles permitidos est asociada con la radiacin en el rango de las radiofrecuencias.

Fundamentos de espectroscopia
Absorcin y emisin de energa o La absorcin de radiacin por un tomo o una molcula es que el
proceso en el que la energa de un fotn de radiacin electromagntica radiacin se transfiere a la especie absorbente. o Si se dibuja la energa fotnica vs absorbancia relativa de la radiacin compuesta solo de fotones, se observa un espectro de absorcin caracterstico. La forma est determinada por la capacidad de absorcin de fotones de energa relativa diferente.

Fundamentos de espectroscopia
Absorcin y emisin de energa
o La capacidad de absorcin de un compuesto es una constante que dependiente de la longitud de onda y la concentracin de la especie absorbente.

Fundamentos de espectroscopia
Absorcin y emisin de energa

Espectro de absorcin

Espectro de emisin

Fundamentos de espectroscopia
INTERACCIN ENTRE LA RADIACIN Y LA MATERIA

Fundamentos de espectroscopia
INTERACCIN ENTRE LA RADIACIN Y LA MATERIA

Fundamentos de espectroscopia
Absorcin y emisin de energa o La emisin ocurre cuando la energa de un tomo o molcula es
o liberada en forma de un fotn de radiacin Una molcula permanece en el estado excitado por un perodo corto antes de relajarse de nuevo al estado fundamental. Existen varios procesos de relajacin a travs del cual una molcula excitada puede disipar energa. El proceso de relajacin ms comn implica la disipacin de su energa a travs de una serie de pequeas colisiones con otras molculas y conversin en energa cintica y calor. En condiciones normales, el calor disipado no es suficiente para afectar apreciablemente el sistema. En algunos casos, molculas excitadas por la absorcin de luz UV o VIS perder una parte de su exceso de energa a travs de la emisin de un fotn. Este proceso de emisin puede ser como fluorescencia o fosforescencia, dependiendo de la naturaleza del estado excitado.

Reflexion, refraccion y difraccion de la luz

Fundamentos de espectroscopia
Absorcin y emisin de energa o Espectroscopa de fluorescencia: la
especie excitada sufre relajacin vibracional hasta el ms bajo nivel de energa vibracin (en el estado electrnico excitado), despus, experimenta una transicin al estado fundamental electrnico a travs de la emisin de un fotn.

Fundamentos de espectroscopia
Fluorescencia y fosforescencia