Caracterizao de Solos de Pernambuco quanto Supressividade a Pectobacterium carotovorum subsp.

carotovorum
Indira del C.M. Alvarado1, Sami J. Michereff 1, Rosa L.R. Mariano1, Adriano M.F. Silva1 & Clstenes W.A. Nascimento2
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rea de Fitossanidade, 2rea de Solos, Departamento de Agronomia, Universidade Federal Rural de Pernambuco, CEP 52171-900, Recife, PE, Brasil, e-mail: rmariano@truenet.com.br

Autor para correspondncia: Rosa L.R. Mariano

ALVARADO, I.C.M., MICHEREFF, S.J., MARIANO, R.L.R., SILVA, A.M.F. & NASCIMENTO, C.W.A. Caracterizao de solos de Pernambuco quanto supressividade a Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum. Fitopatologia Brasileira 32:222-228. 2007. RESUMO A podrido-mole causada por Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) fator limitante para o cultivo de olercolas no estado de Pernambuco. As caractersticas do solo e os fatores ambientais podem influenciar a populao de Pcc e o desenvolvimento da doena. Este trabalho objetivou avaliar a taxa de extino da populao de Pcc em 24 amostras de solos de Pernambuco e analisar as caractersticas fsicas, qumicas e microbiolgicas dos solos associadas com a supressividade ou conducividade ao patgeno. No estudo da influncia dos solos na populao de Pcc, utilizou-se mutante resistente a rifampicina (Pcc127Rif), sendo calculada a taxa de extino relativa da populao (TERP) que variou de 0,0547 a 0,6327 log (UFC)/dia. Seis solos mostraram-se supressivos a Pcc127Rif enquanto cinco evidenciaram conducividade. Os grupos de solos baseados na TERP de Pcc127Rif no apresentaram relao com os municpios de coleta, tipos de coberturas do solo na poca da coleta ou classes texturais dos solos. Considerando-se todos os solos, no foram constatadas correlaes significativas (P0,05) entre a TERP de Pcc127Rif e as caractersticas qumicas, fsicas e microbiolgicas dos solos. Nos seis solos mais supressivos, a TERP de Pcc127Rif se correlacionou significativamente com a densidade aparente do solo (r = 0,76), populaes de bactrias totais (r = 0,82) e Bacillus sp. (r = 0,80). A populao de Bacillus sp. se correlacionou com a densidade aparente, mas no com a populao de bactrias totais. Nos cinco solos que se apresentaram mais conducivos houve correlao entre a TERP de Pcc127Rif e a populao de Bacillus sp. (r = -0,86). Palavras-chave adicionais: podrido-mole, solos supressivos, solos conducivos, ecologia. ABSTRACT Characterization of soils from Pernambuco State related to suppressiveness for Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum The soft-rot caused by P. carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) is a limiting factor for vegetable harvests in Pernambuco State. Soil characteristics and environmental factors may influence Pcc population and development of soft-rot. This work aimed to evaluate the extinction rate of Pcc population in 24 soil samples of Pernambuco and analyze physical, chemical and microbiological soil characteristics associated with suppressiveness or conduciveness for the pathogen. In the study of soil influence on Pcc population a rifampicin-resistant mutant was utilized (Pcc127Rif). The extinction rate of population (TERP) was calculated and ranged from 0.0547 to 0.6327 log (CFU)/d. Six soils showed suppressiveness for Pcc127Rif while five presented conduciveness. The soil groups based on the TERP of Pcc127Rif did not correlate with municipalities, types of vegetation cover at the sampling time or soil textural classes. Considering all soils, there were no significant correlations (P0.05) among TERP of Pcc127Rif and chemical, physical and microbiological characteristics of soils. Considering the six most suppressive soils, the TERP of Pcc127Rif significantly correlated with apparent soil density (r = 0.76), total bacterium population (r = 0.82) and Bacillus sp. (r = 0.80). The Bacillus sp. population correlated with apparent density, but not with total bacterium population. Considering the five most conducive soils there was correlation between TERP of Pcc127Rif and Bacillus sp. population (r = -0.86). Additional keywords: soft rot, suppressive soils, conducive soils, ecology.

INTRODUO Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (Pcc) (Jones) Hauben et al. uma enterobactria que causa podrido-mole em ampla gama de plantas hospedeiras em

Parte da Tese de Doutorado do primeiro autor. Universidade Federal Rural de Pernambuco. Recife PE. 2006.

todo o mundo (Prombelon & Kelman, 1980). A podridomole uma doena de importncia econmica em diversas culturas, incluindo couve-chinesa (Brassica pekinensis L.) (Kikumoto, 1980), alface, beterraba, couve, pimento, repolho e tomate (Prombelon, 2002). Em levantamentos realizados no estado de Pernambuco em 2004, a podridomole teve prevalncia de 100 % em cultivos de couvechinesa e de 45,2 % em cultivos de alface, evidenciando a importncia da doena para essas olercolas (Silva, 2005). Fitopatol. Bras. 32(3), maio - jun 2007

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O controle da podrido-mole muito difcil, uma vez que P. carotovorum subsp. carotovorum sobrevive em restos culturais infectados, na rizosfera de plantas cultivadas ou invasoras, na gua, no solo, como epiftica na filosfera de plantas hospedeiras ou invasoras e em insetos (Kikumoto, 1980; Prombelon & Kelman, 1980). As caractersticas do solo, juntamente com os fatores ambientais, podem influenciar na populao de Pcc, acelerando ou retardando o desenvolvimento da podrido-mole (Prombelon & Kelman, 1980). O fenmeno de alguns solos prevenirem naturalmente o estabelecimento de patgenos ou inibirem as suas atividades patognicas denominado supressividade e estes solos de supressivos, o oposto de solos conducivos. A distino entre supresso doena e supresso ao patgeno deve ser efetuada, sendo esta ltima a habilidade de um solo em reduzir a densidade de inculo do patgeno e sua atividade saproftica, enquanto a primeira a capacidade do solo de reduzir a intensidade da doena, mesmo com alta densidade de inculo e capacidade de sobrevivncia do patgeno (Cook & Baker, 1983). A supressividade de solos uma caracterstica desejvel, pois possibilita o controle de doenas com maior eficincia e menores danos ambientais. Fatores que determinam a supressividade devem ser estudados visando utilizao dessas informaes na induo da supressividade em solos conducivos. Interaes complexas entre fatores abiticos e biticos do solo podem conduzir supressividade, motivo pelo qual, propriedades do solo como textura e tipo de argila, densidade de partculas e densidade aparente, teores de nitrognio (N) total, fsforo (P), potssio (K), carbono (C), alumnio (Al), clcio (Ca), magnsio (Mg), sdio (Na) e matria orgnica (MO), relao C/N, condutividade eltrica e potencial hidrogeninico (pH), assim como densidade, biomassa e atividade microbiana, dentre outras, podem ser usadas como indicadoras da supressividade (Hornby, 1983; Chellemi & Porter, 2001; Bettiol & Ghini, 2005). Como no existem estudos sobre a supressividade de solos a populaes de Pcc em regies tropicais, este trabalho teve como objetivos avaliar a taxa de extino da populao desse patgeno em solos de Pernambuco e analisar as caractersticas fsicas, qumicas e biolgicas dos solos associadas com a supressividade ou conducividade ao patgeno. MATERIAL E MTODOS Coletas das amostras de solo Foram coletadas amostras de solo em 24 reas selecionadas ao acaso, localizadas no Estado de Pernambuco (Tabela 1). As coletas foram efetuadas durante os meses de maio e junho de 2005, sendo que em cada rea foram removidas, aleatoriamente, seis subamostras de 5 kg de solo a uma profundidade de 0-20 cm, totalizando 30 kg de solo/rea. Em cada rea foram obtidas informaes adicionais sobre a cultura plantada e a localizao geogrfica foi referenciada pelo Sistema Fitopatol. Bras. 32(3), maio - jun 2007

de Posicionamento Global (GPS 48 Personal Navigator, Garmin International, Olathe KS, USA). Anlises microbiolgicas dos solos Para as anlises microbiolgicas, as amostras de solo foram processadas dentro de 72 horas aps a coleta. De cada amostra foram retiradas 10 sub-amostras de 10 g e homogeneizadas, sendo efetuadas diluies em srie (1:10) e plaqueamento nos meios BDA (batata-dextrose-gar), com e sem adio de 250 ppm de tetraciclina, para isolamento de fungos totais e bactrias totais, respectivamente; e meio B de King (KB) para isolamento de Pseudomonas sp. fluorescentes. No isolamento de Bacillus sp. as diluies foram submetidas a banho-maria de 80 C por 20 min, com posterior distribuio em meio BDA, sem adio de antibitico. As culturas foram incubadas a 252 C, sob alternncia luminosa (12 h claro/12 h escuro), em incubadoras tipo B.O.D. (Biochemistry Oxigen Demand). As populaes bacterianas foram avaliadas aps 48 h de incubao, enquanto os fungos foram avaliados aps cinco dias. Cada populao resultou do nmero mdio de colnias em seis placas, sendo expressas em unidades formadoras de colnias por grama de solo (UFC/g). Anlises fsicas e qumicas dos solos As amostras de solo para as anlises fsicas e qumicas foram secas em ambiente coberto durante 10 dias e depois peneiradas para retirada de resduos, sendo mantidas em sacos de nylon at o processamento. As amostras foram submetidas s anlises da densidade aparente (g/cm3), densidade da partcula (g/cm3), porcentagem de areia, argila e silte, pH em gua, K, Ca, Mg, Na e Al trocveis (cmolc/dm3), acidez potencial (H+Al) (cmolc/dm3), C orgnico (g/kg), soma de bases (SB), saturao de bases (v) e saturao por alumnio (m) (EMBRAPA, 1997). Influncia dos solos na populao de Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum Foram utilizadas as 24 amostras de solo e um isolado de P. carotovorum subsp. carotovorum (Pcc127Rif), mutante espontneo resistente ao antibitico rifampicina (100 ppm), obtido a partir do isolado selvagem Pcc127, proveniente de planta de couve-chinesa com sintomas tpicos de podridomole. O isolado Pcc127Rif apresentou comportamento similar ao isolado selvagem em relao ao crescimento em meio lquido NYD (caldo nutritivo-extrato de levedura-dextrose) e patogenicidade a plantas de couve-chinesa (cv. Komachi). No preparo do inculo de Pcc127Rif, a partir de cultura com 36-48 h em meio NYDA (gar nutritivo-extrato de levedura-dextrose) foi preparada suspenso bacteriana em gua destilada esterilizada, com concentrao de 1x109 UFC/ mL, ajustada em fotocolormetro (A570 = 0,36) de acordo com equao previamente estabelecida. Os diferentes solos foram colocados em caixas tipo Gerbox (200 g de solo/caixa) e a cada caixa foram adicionados 50 mL de suspenso bacteriana de Pcc127Rif, homogeneizando-se com auxlio de basto de vidro. As caixas foram incubadas em B.O.D. a 252 oC. 223

I.C.M. Alvarado et al. TABELA 1 - Influncia de solos do Estado de Pernambuco na taxa de extino da populao (TERP) de Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum
Cdigo do solo CF-1 SA-1 BG-1 CO-1 GR-1 GR-2 CF-2 AL-1 CG-1 CF-3 BO-1 SJ-1 CF-4 SJ-2 CG-2 CF-5 GR-3 CF-6 AN-1 IG-1 CO-2 CF-7 CF-8 CF-9 C.V. (%)
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Local ( municpio) Camocim de So Flix Sair Barra de Guabiraba Condado Gravat Gravat Camocim de So Flix Abreu e Lima Ch Grande Camocim de So Flix Bonito So Joaquim do Monte Camocim de So Flix So Joaquim do Monte Ch Grande Camocim de So Flix Gravat Camocim de So Flix Aliana Igarassu Condado Camocim de So Flix Camocim de So Flix Camocim de So Flix

Cobertura1 couve -chinesa milho sem plantio cana-de-acar couve -chinesa pimento couve -chinesa cana-de-acar brcoli couve -chinesa mata pimento pimento pimento pimento couve -chinesa couve -chinesa couve -chinesa cana-de-acar inhame cana-de-acar couve -chinesa couve -chinesa couve -chinesa

Textura Franco arenoso Franco argilo arenoso Franco argilo arenoso Argila Franco arenoso Franco arenoso Franco argilo arenoso Areia franca Franco arenoso Franco argilo arenoso Argila Franco argilo arenoso Franco argilo aren oso Franco arenoso Franco arenoso Franco argilo arenoso Franco argilo arenoso Franco argilo arenoso Franco arenoso Franco arenoso Franco arenoso Franco argilo arenoso Franco arenoso Franco arenoso

TERP 2 0,6327 a3 0,5439 b 0,4011 c 0,3682 c 0,3357 c 0,3145 c 0,2801 d 0,2315 d 0,2301 d 0,2004 d 0,2003 d 0,1992 d 0,1722 d 0,1667 d 0,1519 e 0,1483 e 0,1397 e 0,1238 e 0,1121 e 0,0914 f 0,0806 f 0,0799 f 0,0718 f 0,0547 f 10,34

Tipo de cobertura do solo na poca da coleta. Taxa de extino relativa da populao de P. carotovorum subsp. carotovorum no solo [log (UFC)/dia], calculada conforme Kocks et al. (1998). 3 Mdias de quatro repeties. Mdias seguidas pela mesma letra no diferem significativamente entre si pelo teste de Scott-Knott (P=0,05)

Para avaliao dos nveis populacionais de Pcc127Rif, foram processadas semanalmente amostras de 0,5 g de solo, at que em duas amostragens consecutivas, a bactria no fosse detectada. As amostras foram colocadas em tubos contendo 4,5 mL de gua destilada esterilizada, os quais foram agitados em agitador tipo vrtex, na potncia 10 durante 30 s. Em condies asspticas, foram realizadas diluies at 10-3, plaqueando-se 0,1 mL de cada suspenso em meio NYDA contendo 100 ppm de rifampicina e 250 ppm do fungicida clorotalonil (NYDARif/Clt). O fungicida foi selecionado previamente como inibidor eficiente dos contaminantes fngicos existentes nos solos. As placas foram incubadas por 36 h a 282 C, quando foi realizada a contagem do nmero de colnias, determinando-se o nmero de UFC/g de solo. Em cada amostra de solo, os dados populacionais de Pcc127Rif foram utilizados para o clculo da taxa de extino relativa da populao (TERP), pela expresso TERP = - ((logYf logY0)/(Tf-T0)), onde Y0 a populao aos sete dias aps a infestao do solo, Yf a populao na ltima avaliao antes de zerar, Tf o tempo (em dias) da ltima avaliao sem zerar e T0 o tempo da primeira avaliao (dia = 7) (Kocks et al., 1998). O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, com cinco repeties, sendo cada repetio 224

constituda por uma caixa Gerbox. Os dados foram submetidos anlise de varincia e as mdias comparadas pelo teste de Scott-Knott, ao nvel de 5 % de probabilidade. Caracterizao da supressividade ou conducividade dos solos a Pectobacterium carotovororum subsp. carotovorum Para caracterizar os possveis fatores envolvidos na supressividade ou conducividade dos solos a Pcc127Rif, foram efetuadas comparaes dos valores mdios da TERP com as demais variveis avaliadas em cada solo, pela anlise de correlao de Pearson, ao nvel de 5 % de probabilidade. Essas comparaes foram realizadas em trs etapas: na primeira foram comparados todos os 24 solos, na segunda os seis solos com maiores nveis de supressividade e na terceira os cinco solos com maiores nveis de conducividade, conforme os resultados da anlise de Scott-Knott. Todas as anlises estatsticas foram realizadas com o auxlio do programa SAEG 9.0 (Sistema de Anlises Estatsticas e Genticas, Universidade Federal de Viosa, 2005). RESULTADOS E DISCUSSO As taxas de extino relativa das populaes (TERP) de P. carotovorum subsp. carotovorum (Pcc127Rif) nos solos Fitopatol. Bras. 32(3), maio - jun 2007

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de Pernambuco variaram de 0,0547 log (UFC)/dia a 0,6327 log (UFC)/dia, sendo formados seis diferentes grupos de solos pelo teste de agrupamento de Scott-Knott (P=0,05) (Tabela 1). As maiores TERP foram observadas nos solos CF-1, SA-1, BG-1, CO-1, GR-1 e GR-2, enquanto as menores taxas foram constatadas nos solos IG-1, CO-2, CF-7, CF-8 e CF-9 (Tabela 1). A diferena na TERP de Pcc127Rif em vrios solos com a mesma densidade inicial de inculo, como verificado no presente estudo, indica a variabilidade do potencial de inculo em diferentes tipos de solo, entendendo-se como potencial de inculo a energia de crescimento do organismo patognico que est disponvel para a infeco do hospedeiro, resultante da densidade de inculo ou nmero de propgulos, da energia exgena e endgena dos propgulos por unidade, da virulncia dos propgulos e dos fatores ambientais, biticos e abiticos, determinantes da atividade do inculo (Lockwood, 1988). Essa variabilidade existente entre os solos permite, segundo Huber & Schneider (1982), classific-los em supressivos ou conducivos. Nesse contexto, os solos CF-1, SA-1, BG-1, CO-1, GR-1 e GR-2 mostraramse supressivos a Pcc127Rif, enquanto IG-1, CO-2, CF-7, CF8 e CF-9 evidenciaram conducividade. A maioria dos solos apresentou comportamento intermedirio em relao a esses extremos. A formao dos grupos de solos baseada na TERP de Pcc127Rif no apresentou relao com os locais (municpios) de coleta das amostras dos solos, tipos de coberturas do solo na poca da coleta ou classes texturais dos solos. A ausncia de associao entre histrico de cultivo e populaes de Pcc127Rif, como constatado no presente estudo, foi previamente relatada por Prombelon & Hyman (1989), baseado em estudo realizado na Esccia no perodo de 1981 a 1983, envolvendo trs campos previamente cultivados com batata. Na maioria das vezes impossvel estabelecer uma relao entre o nvel populacional de Pcc no solo e o incio da podrido-mole em couve-chinesa, tendo em vista a grande influncia da presena de ferimentos no pecolo do hospedeiro, bem como da umidade e da temperatura do solo (Togashi & Sakamoto, 1966). Em geral, a bactria existe no solo em baixos nveis populacionais, menos que 102 UFC/g solo, mas se multiplica rapidamente no solo em contato com o pecolo ou solo rizosfrico do hospedeiro (Togashi, 1972; Mew et al., 1976). Portanto, como Pcc possui um tempo de gerao curto, uma pequena quantidade de inculo primrio sobrevivente no solo pode produzir rapidamente uma epidemia na presena de condies favorveis (Schuster & Coyne, 1974). Na anlise dos possveis indicadores da supressividade ou conducividade dos solos populao de Pcc127Rif, no foram constadas correlaes significativas (P=0,05) entre a TERP e as caractersticas qumicas, fsicas e microbiolgicas quando todos os solos foram considerados (Tabela 2). Esse resultado indica que no possvel destacar uma ou um conjunto de caractersticas responsveis pela supressividade ou conducividade em todos os solos. Portanto, os fatores Fitopatol. Bras. 32(3), maio - jun 2007

responsveis pela supressividade em determinado solo podem no exercer o mesmo papel em outros, confirmando as observaes de Arshad & Martin (2002) sobre a complexidade das interaes entre as diferentes propriedades fsicas, qumicas e microbiolgicas do solo, o que torna difcil a identificao de indicadores de supressividade do solo que possam ser utilizados em diferentes situaes, e reflete, segundo Hper & Alabouvette (1996), na dificuldade freqentemente encontrada para distino entre fatores primrios e secundrios responsveis pela supressividade a doenas e/ou patgenos. Quando considerados somente os seis solos mais supressivos, a TERP de Pcc127Rif se correlacionou significativamente (P0,05) com a densidade aparente do solo (r = 0,76), com as populaes de bactrias totais (r = 0,82) e Bacillus sp. (r = 0,80). A populao de Bacillus sp. se correlacionou com a densidade aparente (r = 0,96), mas no com a populao de bactrias totais (r = 0,71), o que pode ser conseqncia da utilizao do mesmo mtodo (plaqueamento em BDA e incubao a 252 C sob alternncia luminosa, durante 48 horas) para a quantificao das duas populaes. Vieira & Nahas (2000) observaram que as maiores contagens

TABELA 2 - Correlaes entre taxa de extino relativa da populao de Pectobacterium carotovorum subsp. carotovorum (TERP) e variveis fsicas, qumicas e microbiolgicas dos solos de Pernambuco, considerando todos os solos analisados (geral) e somente os classificados como supressivos ou conducivos

Coeficientes de correlao de Pearson seguidos por asterisco so significativos a P0,05.

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de bactrias totais e de Bacillus sp. provenientes de solos foram obtidas em diferentes meios de cultura, temperaturas e perodos de incubao. Uma maior populao de bactrias totais no solo, no significa necessariamente maior ou menor nmero de Bacillus sp., pois existem vrias populaes de outros microrganismos que podem impedir uma correlao. Nahas et al. (1997) estudando a atividade microbiana em solo aps aplicao de gesso agrcola tambm no observaram correlao entre aumento de nmero de bactrias totais e de Bacillus sp. Nos cinco solos mais conducivos, houve correlao negativa entre a TERP de Pcc127Rif e a populao de Bacillus sp. (r = -0,86). Por outro lado, as caractersticas qumicas do solo no se correlacionaram com a TERP nas diferentes combinaes de solos (Tabela 2). A densidade populacional e a sobrevivncia de microrganismos no solo dependem de vrios fatores, destacando-se a capacidade de produzir estruturas de sobrevivncia, os fatores que controlam ou afetam a produo destas estruturas, as condies que afetam a sobrevivncia destas estruturas, a diversidade fisiolgica, a eficincia na utilizao de substratos, os nmeros de hospedeiros principais e alternativos, a competitividade e capacidade de saprofitismo, as estratgias de sobrevivncia e a suscetibilidade microbiostase e antibiticos presentes no solo (Siqueira & Franco, 1988). A disponibilidade de nutrientes e os nveis de pH no solo parecem no ter afetado as populaes de Pcc127Rif nesse estudo. No entanto, j foi constatado que valores elevados de pH, P, Ca e Mg propiciam aumentos significativos nos nveis populacionais desta bactria no solo (Kikumoto, 1980; Prombelon & Hyman, 1989; Armon et al., 1995). Por outro lado, a podrido-mole em couve-chinesa foi eficientemente controlada em campo pela fertilizao do solo com hidrxido de clcio (Kim & Yeoung, 2004). A importncia das propriedades fsicas do solo na supressividade de fungos fitopatognicos habitantes desse ambiente foi destacada por Hper & Alabouvette (1996). A densidade aparente do solo determinada pela quantidade de espaos porosos e slidos do solo, sendo que solos com elevada proporo de espaos porosos em relao aos slidos tm densidades menores do que outros mais compactos e com menos espaos porosos (Brady, 1989). Como o nvel de porosidade pode exercer efeito seletivo sobre a capacidade de colonizao por determinados microrganismos (Siqueira & Franco, 1988), a correlao positiva entre densidade aparente do solo e TERP de Pcc127Rif pode ser conseqncia do nvel de porosidade, uma vez que as populaes de bactrias so geralmente desfavorecidas pela reduzida porosidade do solo e, consequentemente, elevada densidade aparente. Os solos constituem um sistema dinmico, onde complexas interaes entre as propriedades fsicas, qumicas e biolgicas, se integram continuamente, influenciando e diversificando a microbiota (Siqueira & Franco, 1988). A elevada correlao observada entre supressividade do solo a Pcc127Rif e as populaes de bactrias totais era esperada, pois as populaes de pectobactrias declinam 226

muito rapidamente em solos, no campo, dependendo da populao bacteriana no mesmo, alm de outros fatores (Mew et al., 1976; Prombelon & Kelman, 1980). A reduo da populao de Pcc127Rif no solo pode ser atribuda competio com bactrias nativas que utilizam os nutrientes mais eficientemente, a exemplo do constatado por Armon et al. (1995), mas o mecanismo de antibiose tambm pode estar envolvido, pois Kikumoto (2000) destacou que a diferena na habilidade de isolados desta bactria sobreviverem no solo estava relacionada sensibilidade a bacteriocinas. Este autor demonstrou o potencial do controle biolgico da podridomole em couve-chinesa, baseado na utilizao de isolados avirulentos de Pcc produtores de bacteriocinas. Entretanto nenhum mtodo efetivo de controle foi estabelecido. Os gneros de bactrias mais comumente encontrados nos solos com capacidade antagonstica a fitopatgenos so Pseudomonas sp. e Bacillus sp. (Weller et al., 2002; Bettiol & Ghini, 2005). Nesse estudo, as populaes de Pseudomonas fluorescentes no se correlacionaram com a TERP de Pcc127Rif em nenhuma das situaes analisadas, embora Mew et al. (1976) tenham observado que a presena de Pseudomonas fluorescentes no solo influenciou significativamente na reduo da severidade da podridomole em couve-chinesa. Por outro lado, a influncia das populaes de Bacillus sp. na supressividade a Pcc127Rif verificada no presente estudo constitui um aspecto relevante, pois segundo Mazzola (2004), a implementao efetiva de estratgias de manejo ou estmulo comunidade microbiana antagonista do solo para a supresso de fitopatgenos habitantes desse ambiente requer inicialmente a identificao dos componentes biolgicos envolvidos na supressividade e depois o monitoramento do impacto das prticas de manejo na abundncia e atividade dessa populao microbiana benfica. A influncia de bactrias formadoras de endosporos na sobrevivncia de P. carotovorum foi estudada por Kikumoto (1980), que verificou o decrscimo rpido na populao do patgeno com o aumento das populaes de bactrias formadoras de endosporos. Espcies de Bacillus, incluindo B. thuringiensis Berliner, B. subtilis (Ehrenberg) Cohn e B. cereus Frankland & Frankland destacaram-se como importantes agentes de biocontrole de fitopatgenos habitantes do solo (Emmert & Handelsman, 1999). Essas bactrias so produtoras de antibiticos, alm de enzimas que degradam molculas envolvidas no sinal de quorum sensing de muitas bactrias (Garbeva et al., 2004), a exemplo de B. thuringiensis no biocontrole de P. carotovorum (Dong et al., 2004). Mesmo considerando todos esses aspectos, um entendimento completo dos fatores biolgicos responsveis pela supressividade de um solo a um determinado patgeno ou doena requer um conhecimento aprofundado da identidade, freqncia relativa e atividade biolgica das diversas populaes microbianas que habitam a rizosfera. Alm disso, o balano microbiano e a eficincia de um antagonista so dependentes das caractersticas fsico-qumicas do solo, sendo difcil separar os fatores Fitopatol. Bras. 32(3), maio - jun 2007

Caracterizao de solos de Pernambuco quanto supressividade...

envolvidos na supressividade (Weller et al., 2002), o que ficou evidente no presente estudo com a constatao de correlao significativa entre a populao de Bacillus sp. e a densidade aparente do solo. Um aspecto a ser considerado na dificuldade da caracterizao dos possveis mecanismos envolvidos na supressividade dos solos de Pernambuco populao de Pcc127Rif a metodologia empregada, uma vez que foram utilizados indicadores tradicionais de supressividade (Hornby, 1983; Chellemi & Porter, 2001). De acordo com Van Bruggen & Semenov (1999), os resultados obtidos utilizando indicadores tradicionais so muito difceis de interpretar, motivo pelo qual sugeriram um procedimento alternativo, baseado na mensurao de respostas biolgicas a distrbios ou estresse, assumindo que um solo sadio um solo estvel com resistncia ao estresse. A resposta ao estresse em termos de amplitude e resistncia da comunidade microbiana poderia ser um melhor indicador universal para supresso doena que qualquer outro fator fsico, qumico ou biolgico, mensurado somente uma vez a longos intervalos de tempo. Portanto, novos estudos devem ser realizados para a caracterizao dos mecanismos de supressividade ou conducividade dos solos de Pernambuco a Pcc, visando contribuir efetivamente para o manejo integrado da podrido-mole em couve-chinesa. AGRADECIMENTOS O primeiro autor agradece concesso de bolsa de estudos oferecida pela CAPES. Os autores agradecem ao CNPq pela concesso de auxlio financeiro (Proc. 479.622/2004-3) e bolsa de produtividade a S.J. Michereff, R.L.R. Mariano e C.W.A. Nascimento.

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