TCNICAS DE CITOLOGIA

Silene Gomes Correa

Preparo de Amostras Citolgicas

1 2 3

4 5

Descrever colorao, viscosidade e volume

 Centrifugar em 2100 RPM por 10

 Decantar Cito-centrifugar o sedimento Amostras de urina utilizar lminas silanizadas ou com carga

Citrino (transparente) 5 gotas Ligeiramente turvo 4 gotas Turvo 3 gotas Amarelo escuro e opaco 3 gotas Avermelhado e opaco diluir 3 gotas da amostra em 1 gota de gua destilada

Quantidade de Filtros: 5 gotas = 2 filtros 4 ou 3 gotas = 1 filtro

Utilizar dois cartes citolgicos

Cito-centrifugar por 5 em 900 RPM

Tcnicas de extenso (amostras espessas)

1. Tcnica do esfregao

2. Tcnica do deslizamento das lminas:

3. Tcnica do esmagamento:

Esfregaos recebidos prontos Espessos

Motivo de bolhas Antes da colorao deslizar uma lmina limpa sobre o esfregao distribuindo o material em duas lminas

Tcnicas de colorao para exame citolgico

Coloraes tipo Romanowsky

Pantico; May-Grumwald-Giemsa (MGG)
baratas, fceis de preparar, guardar e usar Coram bem microorganismos e o citoplasma. Coram mal os ncleos, mas o suficiente para avaliar critrios de malignidade.

PROCEDIMENTO TCNICO Preparar as extenses e deixar secar em temperatura ambiente Preencher 3 recipientes com as solues no 1, 2 e 3 respectivamente; Submergir as lminas nas solues: 1 por 1 minuto 2 por 1 minuto 3 por 1 minuto Lavar com gua deionizada, secar ao ar na posio vertical e com o final da extenso voltado para cima.

Pantico

(MGG)
DESCRIO DO PROCESSO TCNICO Colocar a lmina no suporte de colorao Recobrir o esfregao com 20 gotas do corante MayGrnwald. Deixar atuar por trs minutos. Acrescentar 20 gotas de gua de torneira. Esperar dois minutos. Desprezar a mistura e, sem lavar, cobri-la com 20 gotas da soluo de Giemsa. Esperar de 12 a 15 minutos. Desprezar o corante, lavar a lmina em gua corrente. Deixar secar em posio vertical.

(MGG)

Colorao de Papanicolaou
Hematoxilina, cora o ncleo (DNA) Orange G, cora o citoplasma das clulas superficiais EA 36, cora o citoplasma das clulas intermedirias, parabasais e basais

Clulas Superficiais

Clulas Intermedirias e Parabasais

Emblocado em Agarose

Centrifugar por 10 em 2100 RPM

Retirar sobrenadante

Citologia Convencional
O PROBLEMA
Esfregao no representativo sobre a lmina

Amostra cervical

Amostra no-representativa

Mais de 80% da amostra coletada descartada

Perda de clulas importantes Sobreposio, etc. Fixador

Citologia em Meio Lquido

A SOLUO

Sistema de Coleta BD SurePath

BD SurePath Enriquecimento Celular

Os possveis interferentes so retirados da amostra e um pellet de clulas de interesse diagnstico formado

Caracterstica
Artefatos por dessecamento, sangue, clulas inflamatrias, sobreposio celular, muco, etc... so eliminados. O nmero de leuccitos significativamente reduzido

Benefcio
Reduo significativa de casos insatisfatrios.

Melhor visualizao das clulas de relevncia diagnostica e dos microorganismos.

Aumento de 64.4% na deteco de HSIL em lminas BD SurePath.

BD SurePath Citologia em Meio Lquido

Transferncia da Transfer amostra

PrepMate

TM

12 amostras - 3 min 48 amostras 12 min

1a Centrifugao 2 Minutes @ 200 x g

Aspirao

2a Centrifugao 10 Min @ 800 x g

Decantar

Gradiente de Densidade

Converte uma suspenso de clulas em meio lquido

A tampa do frasco perfurada e a amostra homogeneizada 8 vezes

em uma fina camada corada de clulas (13mm dimetro).

8 ml da amostra e transferido para um tubo de centrifugao contendo 4 ml de gradiente de densidade Transferncia da amostra concluda

Processa 48 amostras simultaneamente Preparo e colorao 48 amostras aproximadamente 58 minutos. Somente preparo 96 amostras por hora.

Citologia em Meio Lquido

Vantagens
100% da amostra coletada enviada para laboratrio Remoo de Sangue & Debris Reduo significante de amostras insatisfatrias1

Vantagens
Possibilidade de testes adicionais a partir da mesma coleta (biologia molecular / coloraes especficas) Aumento na deteco de HSIL comparando com mtodo convencional1
1Compared to conventional Pap smear. See PrepStain product insert. Direct-to-vial study population, Table 26; Table 15. Note: Site to site variations in performance are expected. Each laboratory must carefully monitor the quality of its work.

OBRIGADA!
Silene Gomes Correa silenegc@einstein.br