1 LA BIOINGENIERIA DE LA PIEL Y EL ESTUDIO DE EFICACIA IN VIVO PARA PRODUCTOS COSMETICOS Documento preparado por: Martha Patricia Oviedo Salazar

Los avances tecnolgicos de la bio-ingeniera cutnea le han permitido a la industria cosmtica desarrollar mtodos experimentales in vivo no invasivos a travs de los cuales se obtiene informacin relevante y resultados confiables acerca de la eficacia de los productos cosmticos. Estos estudios son llevados a cabo con la participacin de voluntarios humanos y anteponiendo siempre el respecto al voluntario y la tica profesional como est establecido en la declaracin de Helsinki y normativas internacionales. Los mtodos in vivo no invasivos para la evaluacin de la eficacia de un producto cosmtico, es una herramienta muy til dentro del proceso de investigacin y desarrollo ya que le permite al formulador encontrar la ruta para desarrollar un producto eficaz para el consumidor, as mismo constituye un soporte para el sustento que la reglamentacin o entidad sanitaria respectiva exige al momento de comunicar un determinado claim o beneficio cosmtico tales como: disminucin atenuacin de arrugas, disminucin de los niveles casuales de sebo, aclaramiento del tono de la piel, fortalecimiento de las uas, efecto rizador, alargador y voluminoso de pestaas, restauracin de la abarrera cutnea entre muchos otros. Todo ello, soportado por la aplicacin del mtodo cientfico lo que nos permite obtener resultados vlidos y confiables. Los mtodos de evaluacin no invasiva abarcan desde la caracterizacin de las propiedades fsicas cutneas, propiedades mecnicas, elctricas, trmicas, pticas y ultrasonogrficas, hasta propiedades fisiolgicas, como la prdida transepidrmica de agua, sudoracin, secrecin de sebo y flujo sanguneo, todas estas propiedades son evaluadas para determinar el estado condicin inicial de la piel y su evolucin con el uso de productos cosmticos; es decir para demostrar la efectividad del producto cosmtico. Este artculo pretende hacer una rpida revisin de algunas propiedades de la piel as como de la tecnologa comercialmente disponible para su evaluacin. Entre las diferentes propiedades y los mtodos instrumentales citaremos algunas de ellas, tales como: HUMECTACION CUTANEA: La Humectacin consiste en la humedad que la epidermis toma del medio exterior a travs del empleo de preparados cosmticos, a que adems suelen integrar en su composicin cierta proporcin de agentes higroscpicos (humectantes). El grado de humedad cutnea y la regulacin del trnsito de agua haca la atmsfera depende de la integridad de la epidermis y ms en concreto del estrato crneo. El estrato corneo ofrece una considerable resistencia a la conduccin de la corriente elctrica, mientras que los queratinositos en diferenciacin y la dermis son buenos conductores. El elemento esencial para que se produzca este fenmeno, es la presencia de agua que ser directamente proporcional a la conductancia elctrica o capacitancia al paso de la electricidad a travs de los materiales e inversa a la resistencia. Se ha establecido que la concentracin de saturacin de agua en el estrato corneo es de 45 mg de agua por mg de SC. En condiciones predeterminadas de humedad, sobre el 60%, el SC plantar solo retiene 0,1 mg/mg, mientras que en otras zonas pueden alcanzar hasta 33 mg/mg, por lo que la H.R y la temperatura influyen notablemente en la determinacin del SC por cuanto es necesario trabajar en un ambiente con condiciones controladas.

2 Entre los mtodos para la determinacin del contenido de hidratacin de la piel estn la conductancia elctrica de la superficie de la piel por medio de una corriente alterna de alta frecuencia, la resistencia a la corriente directa, espectrocopia de infrarojos, mtodo foto-acstico, mtodo de microondas entre otros. Uno de los equipo ms utilizados es el Corneometro CM 825(Courage +Khazaka, Cologne; Germany) entre otros estn Skicon 200 EX (I.B.S CO. Motohama-cho; Japan), Nova DPM900, Moisturemer SC, Moisturemeter D (Delfintech, Kuopio; Finland). CORNEOMETER CM 825, se basa en la medicin de capacitancia en un medio dielctrico. Este equipo mide el cambio de la constante dielctrica debido al contenido de agua en la superficie cutnea cambiando la capacitancia de un condensador de precisin. Esta tcnica puede detectar incluso pequeos cambios en el nivel de hidratacin de la piel. El capacitor consta de dos placas de metal, separadas una de otra mediante un medio aislante (vaco, aire, plstico, vidrio, etc.), el cual acta como un dielctrico. Si un voltaje es aplicado al capacitor ste se carga elctricamente. El capacitor almacena la carga y sta es llamada capacitancia.

Representacin grfica del principio de medicin

PERDIDA DE AGUA TRANSEPIDERMICA (TEWL) El agua en forma de vapor se difunde pasivamente a travs del S.C contra una gradiente de concentracin y los corneocitos juegan un papel importante en su retencin, estas clulas cubren la epidermis junto a las estructuras lamelares lpidicas intercorneales. Las investigaciones han demostrado que el agua no esta ligada al S.C. de una manera uniforme; as el 5% esta ntimamente enlazado y se denomina constitutiva, el 40% esta dbilmente enlazado y ser retenido por los humectantes naturales, el resto se encuentra libre. La TEWL es la prdida del agua libre por evaporacin y del agua dbilmente enlazada del S.C y es proporcional a la funcin barrera epidrmica. En la piel hay componentes que mediante mecanismos diversos contribuyen de manera natural a mantener el estado ptimo de hidratacin cutnea. El estado de hidratacin condiciona las cualidades mecnicas y estticas de la piel; siendo estas el reflejo del equilibrio entre los aportes de agua (endgena y exgena) y las prdidas que se producen por evaporacin (sudoracin y transpiracin). De esta forma el concepto de hidratacin cutnea no se puede ser aislado, sino que depende de dos variables: la cantidad de humedad que contiene la epidermis y la perdida de agua transepidermica (TEWL). El SC tiene una configuracin un tanto especial a base de corneocitos unidos por la sustancia lamelar cementante, que hacen difcil el trnsito, salida y entrada de las molculas acuosas. El modelo de lpidos cementantes se base en capas alternantes de agua y lpidos que forman una estructura tipo cristal lquido. Las ceramidas forman el armazn y los

3 lpidos restantes se incorporan en la bicapa lipdica formada por su unin a cidos grasos libres. La presencia de agua en la sustancia cementante es imprescindible para mantener la cohesin, de forma que la estructura de cristal lquido se debe a la presencia de agua en ella. El nivel de descamacin viene determinado por la alteracin de cristal lquido y el desprendimiento de los corneocitos no cementados. La valoracin de la TEWL tiene diferentes aplicaciones desde su determinacin en pieles sanas, pieles enfermas producto de diferentes transtornos patolgicos, salud ocupacional, observacin de recin nacidos y muchos otras aplicaciones. En el campo cosmtico la TEWL es empleado para la valoracin de productos humectantes y recuperadores restauradores de la barrera cutnea que despus del uso de detergentes o tensioactivos deterioran y alteran dicha barrera. Algunos de los mtodos para la cuantificacin de la TEWL estn equipos como el Evaporimeter EP2 (Servomed, Kinna; Sweden); el Tewameter TM310 (Courage +Khazaka, Cologne; Germany), Aquaflux/Vapometer (Delfintech, Kuopio; Finland), entre otros. TEWAMETER TM300: cuenta con una sonda de medicin de cmara abierta el cual consiste en un pequeo tubo, abierto por ambos lados que tiene en su interior dos higrosensores (humedad) unidos a termistores (temperatura) para la medicin de humedad en dos puntos diferentes a lo largo de la sonda. Las seales de flujo de vapor de agua de los detectores son transmitidos a un microprocesador donde se calcula el flujo de vapor de agua de acuerdo a la ley de Fick:

dm dc = DA dt dx
Donde: el flujo de difusin dm/dt indica la masa (g) de agua por m 2 que es transportado en un perodo de tiempo (h), el cual es proporcional al rea A y al cambio de concentracin por distancia dc/dx. D es el coeficiente de vapor de agua en el aire.

TEWAMETER TM310 abierto termisores

Sonda TM310: Cilindro higrosensores y

MELANINA Y HEMOGLOBINA El color normal de la piel est dado por la combinacin de cuatro biocromos: amarillo, rojo, pardo y azul, los cuales son brindados a la piel por pigmentos cutneos: el amarillo, brindado por los carotenoides y por el estrato crneo. El pardo, dado por la melanina. El rojo, cedido por la hemoglobina oxigenada, presente en las arteriolas y los capilares arteriolares drmicos. El azul, proveniente de la hemoglobina reducida de las vnulas y capilares venosos drmicos. Las cantidades variables de melanina en los queratinocitos producen un amplio espectro en coloracin cutnea entre los individuos. El Eritema es una lesin cutnea caracterizada por enrojecimiento de la piel, limitado o extenso, permanente o pasajero, debido a fenmenos vasculares, produciendo as vasodilatacin. Se da por ejemplo por quemaduras causadas por el sol, por procesos irritativos alrgicos.

4 En el campo de la dermo-cosmtica se cuenta con equipos no invasivos que permite la cuantificacin de dos de estos biocromos: melanina y hemoglobina. Entre los equipos de Bio-ingeniera citaremos a equipos como el Mexameter MX300 (Courage +Khazaka, Cologne; Germany); DermaSpectrometer (Cortex. Technology, Hadsund, Denmark); Erythemameter (Diastron, United Kingdon). MEXAMETER MX 18, es un equipo de bioingeniera cutnea, no invasivo que permite medir el nivel de melanina y eritema en la piel basado en el principio de absorcin/reflexin. La sonda del Mexameter MX18 emite una luz circular a tres longitudes de onda 568 nm(verde), 660 nm (rojo) y 880 nm (infrarrojo). Un receptor mide la luz reflejada por piel. Las posiciones del emisor y el receptor garantizan que nicamente se mide la luz difusa y dispersa. Al definirse la cantidad de luz emitida, es posible calcular la cantidad de luz absorbida por la piel. La melanina se mide mediante longitudes de onda especficas elegidas para que correspondan a diferentes tasas de absorcin de los pigmentos. Para la medicin del eritema tambin se utilizan longitudes de onda especficas, correspondientes al mximo nivel de absorcin espectral de la hemoglobina y evitando otras influencias de colores (por ejemplo, la bilirrubina). El resultado correspondiente a ambos parmetros los cuales se muestran de forma inmediata en forma de cifras ndice.

Principio de medicin

Mexameter MX18

SEBO: El sebo es una secrecin grasa amarillenta y fluida que se compone de glicridos y cidos grasos, y es sintetizada por las glndulas sebceas holocrinas. El sebo fluye hacia la superficie de la piel por los poros de los folculos pilosos y desempea un papel esencial: junto con el sudor, protege la piel contra la sequedad, formando una pelcula hidrolipdica. Adems, aporta a la epidermis lpidos para reforzar su estructura y darle suavidad y coherencia. La intensidad de produccin de sebo depende de distintos factores: factores genticos constitucionales, edad (aumento en la pubertad con un mximo a los 25 aos, y posterior descenso paulatino), zona corporal (sobre todo en cara, centro del trax y espalda), factores hormonales (estimulacin por andrgenos, inhibicin por estrgenos). Entre las herramientas para el monitoreo de productos cosmticos que mejoran o controlan la apariencia del brillo los niveles casuales de sebo estn las tcnicas fotogrficas como las que se obtienen con diferentes tipos de iluminacin: Luz Visible, Luz Fluorescente y Luz Polarizada cruzada, estos diferentes tipos de iluminacin permitirn imgenes para la evaluacin cualitativa desde la textura de piel, deteccin de la presencia de bacterias P. acnes asociado a la produccin de porfirinas y apariencia de brillo respectivamente. Entre los mtodos biofsicos para la cuantificacin de los niveles casuales de sebo estn el Sebutape (Cuderm; Dallas, USA) y el Sebumeter SM810 (Courage +Khazaka, Cologne; Germany) entre otros. SEBUMETER SM 810, equipo de bioingeniera que permite medir de manera directa los niveles casuales de sebo sobre la superficie de la piel.

5 La medicin de la concentracin de sebo niveles casuales de sebo se realiza por fotometra. Este mtodo esta basado en la posibilidad de incrementar la transparencia de una cinta plstica sinttica mate por la absorcin de sustancias grasas. La variacin en la transparencia es medida a travs del fotmetro dentro del equipo y es dada en g de sebo/cm2. Un cassette dispensador provee la cinta plstica sinttica mate de 0.1 mm de espesor. Esta se coloca sobre la superficie de la piel a evaluar (64 mm2 de piel) durante 30 segundos, tiempo durante el cual el analista debe ejercer una presin de 0.3 N sobre la piel, la misma que permanece constante gracias a un muelle que empuja desde dentro del cassette hacia fuera, durante cada medicin.

Principio de medicin

Sebumeter 810

Medicin de los Niveles Casuales de sebo

6 PROPIEDADES BIOMECANICAS DE LA PIEL Las propiedades mecnicas de la piel siempre han tenido una gran importancia en el campo dermatolgico, cosmtico y biofsico. Los parmetros biomecnicos de la piel tales como la elasticidad y firmeza difieren segn la zona anatmica bien sea por su fisioanatoma como por el efecto de diversas condiciones cutneas. A su vez la prdida de firmeza y de elasticidad de la piel es considerada como sntoma de envejecimiento, sin embargo su manifestacin no est asociada nicamente al paso del tiempo, es el resultado de la interaccin de varios factores que cuentan entre ellos desde los factores genticos hasta los hbitos de cuidado, exposicin al sol y alimentacin. La tecnologa cosmtica ha provisto no solo de principios activos que acta en diferentes niveles para mejorar o ampliar el tiempo de aparicin de este sntoma sino que adems se ha acompaado de las metodologas de bioingeniera no invasivas que permiten cuantificar la variacin en el tiempo de estas propiedades. Las tcnicas desarrolladas para la valoracin de las propiedades biomecnicas de la piel se clasifican en funcin a las fuerzas ejercidas sobre la piel entre ellas estn las que usan fuerzas paralelas y fuerzas perpendiculares; en un primer grupo podemos mencionar mtodos como propagacin de ondas, de fuerza torsional, dinammetro y de extensin, bajo el segundo principio estn los mtodos de indentacin, de elevacin, de impacto y de succin; a seguir algunos nombres comerciales como es el Cutometer SEM 575 (Courage +Khazaka, Cologne; Germany) y el Dermal Torque Meter (Dia-Stron; Hampshire, UK). CUTOMETER MPA 580, El principio de medicin se basa en el mtodo de succin. El aparato genera presin negativa y la piel es arrastrada hacia el interior de la sonda. La profundidad de penetracin es medida mediante un sistema ptico. Este consiste en una fuente de luz y un receptor de luz, as como en dos prismas situados uno junto al otro, que proyectan la luz desde el emisor hasta el receptor. La intensidad de la luz vara debido a la profundidad de penetracin en la piel(*). La resistencia de la piel a la deformacin mecnica (firmeza) y su capacidad de volver a su posicin original (elasticidad) se muestra en forma de curvas al final de cada medicin.

CUTOMETER SEM 575

(*)Succin al vaci sobre la piel

MICRORELIEVE DE LA PIEL El envejecimiento cutneo est considerado como una serie de cambios histolgicos y clnicos que hacen que su prevencin o al menos la modulacin de sus efectos, mejore ostensiblemente de la calidad de vida. El envejecimiento cutneo viene determinado por factores intrnsecos y factores extrnsecos. El envejecimiento intrnseco o cronolgico es un conjunto de cambios clnicos, histolgicos y fisiolgicos que acontecen con la edad y que afectan el recambio celular epidrmico, al aclaramiento de varias sustancias de la dermis, al grosor y a celularidad de la propia dermis, a la capacidad de termorregulacin y de cicatrizacin, a la respuesta inmunolgica, a la percepcin sensorial, a la produccin de las glndulas sebceas y sudorparas y a la sntesis de vitamina D. Existen tambin factores extrnsecos que no solo afectan al envejecimiento cutnea acelerado y exagerando los procesos cronolgicos sino

7 introduciendo cambios cualitativos. Entre los factores extrnsecos tenemos exposicin a la radiacin ultravioleta (UV). Otros factores bien definidos son el tabaco y la contaminacin. Dichos factores actan sobre la piel provocando alteraciones morfolgicas visibles y otras que se hacen patentes a nivel funcional. En la actualidad existen sectores de la industria que proporciona, de acuerdo a su alcance, muchas alternativas para la prevencin y tratamiento del envejecimiento cutneo; entre ellas tenemos al sector dermatolgico, quirrgico y cosmtico. Este ltimo puede considerarse de fcil acceso para los consumidores. Existen muchos productos en el mercado, los mismos que pueden ser comprobados a travs de estudios de eficacia con usuarios, utilizando mtodos y tecnologas no invasivas. MORFOLOGIA DE LA PIEL La morfologa del cuerpo humano vara en gran manera entre las distintas personas. Dependiendo de factores tales como la edad, la gentica, la actividad que realizamos, la alimentacin, pudiendo encontrar variantes que se toman en cuenta a la hora del estudio. Dentro de los mtodos de investigacin cosmtica utilizados para estudiar la morfologa humana, tenemos las tcnicas a travs de la captura de imgenes en 3D, que aportan el sustento para el beneficio de los productos cosmticos. PRIMOS COMPACT 3D (Phaseshift Rapid In vivo Measurement Of Skin), La tcnica se fundamenta en la proyeccin digital de franjas o lneas paralelas con el uso de Dispositivos Digitales de Microespejos (DMDTM) como proyectores de luz digital. Una cmara graba la imagen a travs de un sensor ptico. Los datos son transmitidos al ordenador donde ha sido instalado el programa PRIMOS. As, la piel puede ser monitoreada en sus tres dimensiones debido a las desviaciones en la proyeccin de las lneas que produce el relieve de la piel, y la representacin grfica se obtiene a travs del proceso de digitalizacin de imagen, que se logra bajo iluminacin de una fuente de luz fra (KL1500 LCD) y por procesamiento electrnico. La evaluacin de la imagen se realiza de acuerdo a parmetros que evalan el microrrelieve de la piel, en trminos de rugosidad (inversa a la suavidad), y con base en las normas DIN (Deustcher Industrie Normen).

Rq: (m) Dimensin vertical; promedia la raz cuadrada de las alturas dentro de
un rea en evaluacin, cuantificadas desde la lnea media. Su disminucin evidencia una mejora en el relieve de la superficie de la piel (smoothness effect).

Rz: (m) Promedio de las profundidades mxima de

cinco tramos colindantes. Su disminucin indica un efecto atenuante de arrugas .

Primos 3D Cosmtico

Antes de un Tto cosmtico

Despus de un Tto

8 PRIMOS BODY; a diferencia del PRIMO 3D cuya rea de trabajo es a nivel de microrelieve, el Primos Body permite la medicin macro en diferentes partes de cuerpo y rostro humano, mediante la tecnologa de medicin basada en la proyeccin digital de franjas con micro-espejos; la reconstruccin de la imagen en 3D se logra por las mnimas desviaciones de la proyeccin de cada una de las franjas. La medicin se realiza in vivo, de manera rpida, sin hacer contacto directo con la piel con lo que se logra una medida precisa con alta resolucin y eficiencia. Luego de la tomas de las imgenes de cada uno de los controles, se realiza un match del control basal con cada uno de los tiempos de control. El software PrimosBody superpone las dos imgenes y las compara para realizar la estimacin de los cambios.

PRIMOS BODY

Proyeccin Digital de Franjas

Evaluacin objetiva de la remocin de callos

Evaluacin objetiva del aumento del volumen en labios

10 Conclusiones: La Bioingeniera de la piel hoy para la industria cosmtica mundial, est creciendo y establecindose como uno de los polos con gran desarrollo que le aporta principalmente al rea de I&D para asegurar productos cosmticos eficaces y constituyndose como una herramienta de gran importancia para las reas de mercadeo y asuntos regulatorios. Los parmetros y tcnicas mostradas en esta revisin terminan siendo reducidas frente a la explosin tecnolgica que ha aportado esta ciencia en los ltimos diez aos, no obstante, an son muchos los profesionales que desconocen esta ciencia, su tecnologa y su aplicabilidad en la industria cosmtica. A esto le debemos sumar todas las aristas que quedan pendientes por responder desde: que normatividad es la que rige este tipo de estudios es sus aspectos regulatorios y ticos?, que parmetros y equipos son los adecuados para un claim beneficio cosmtico especifico?, que aspectos ambientales, muestrales deben ser tenidos en cuenta?, como desarrollar las mediciones en la prctica?, que herramientas estadsticas deben ser consideradas para la formulacin e interpretacin de hiptesis y resultados?, etc, es decir en lnea general: Cmo disear y desarrollar protocolos cientficamente vlidos cuyos resultados sean aceptados en los diferentes medios donde el producto vaya a ser comercializado?... Aun cuando hay mucho por conocer alrededor de esta ciencia y su aplicacin en la industria cosmtica; estas preguntas no debemos dejar de responderlas si queremos elevar el nivel de innovacin de nuestra industria cosmtica local y asegurar productos eficaces que logren incursionar en el mercado internacional.

11 Bibliografa:
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