Estructuras de adhesin y locomocin

Fimbrias

Polisacridos capsulares
Flagelos

Fimbrias

Apndices de adherencia formados de protenas (pilina) anclado en la membrana externa

Fimbrias en bacterias Gram negativas

Enterobacterias y otras bacterias patgenas
Tipo
I

Genes
fimA-fimH

Biognesis
Chaperoneusher pathway

Caractersticas
Tienen la habilidad de aglutinar eritrocitos. Algunas son inhibidas por la adicin de D-manosa MSHA (hemaglutinacin manosa sensible).
Otras son MRHA (hemaglutinacin manosa resistente)

Microorganismos
E. coli, Klebsiella, Samonella, Vibrio y otras enterobacterias

II

Chaperoneusher pathway

No hemaglutinantes, variantes antignicas de las fimbrias tipo I.

Escherichia y Salmonella

Chaperone-usher pathway
La chaperona periplasmtica FimC forma complejos con las subunidades de la fimbria recin translocadas (FimA, FimG, FimF, FimH).

El complejo FimCsubunidad se dirigen a la plataforma de ensamblaje (usher) FimD, la cual reconoce especficamente al complejo.
FimC es devuelta al periplasma y la subunidad es translocada por el poro de FimD. La fimbria est compuesta de diferentes subunidades en forma de hlice en la superficie de la clula.

The EMBO Journal (2005) 24, 20752086.

Mecanismo de fimbrias tipo I

E. coli patgena emplea el fimbrias tipo I para unirse a las protenas de la superficie de las clulas de la vejiga.
Los pilicidas (piridona) inhiben la biognesis de las fimbrias al destruir las interacciones de las protenas del sistema de secrecin.
Nature Reviews Microbiology 6, 17-27 (January 2008)

Fimbrias en bacterias Gram negativas

Tipo
III

Genes
mrkA-mrkF K. pneumoniae

Biognesis

Caractersticas

Microorganismos
Klebsiella, Salmonella, Yersinia, Proteus y Providencia Neisseria gonorrhoreae

Chaperone MRHA en usher pathway eritrocitos pretratados con cido tnico. SSTII Asociadas con el movimiento no flagelar.

IV

pil

Nature Reviews Microbiology 4, 11-22 (January 2006)

Sistema de secrecin tipo II

SSTII Fimbria Tipo IV

http://www.genome.ad.jp/dbget-bin/get_pathway?org_name=bsu&mapno=03090

Twiching
Una clase de fimbrias son las tipo IV que estn involucradas en un tipo de movilidad llamado (Twitching), que ocurre en superficies slidas a travs de una rpida y reversible extensin y retraccin de la fimbria.
Modelo de motilidad para Neisseria gonorrhoeae. Esta bacteria puede seguir adelante en superficies por un ciclo de extensin, adherencia y retractacin.

Fimbrias en bacterias Gram negativas

Tipo
P

Genes
Opern Pap (papApap K)

Biognesis
Chaperone usher pathway

Caractersticas
Pili P o E. coli uropatgena (UPEC) o asociada a pielonefritis

Microorganismos
Escherichia coli

Fimbria P y fimbria tipo I

Figure 1 | P and type I pili. A schematic of P (part a) and type 1 (part b) pili, represented by the Pap and Fim systems, respectively. Numbers indicate the number of copies of each subunit in the pilus. The chaperones attached to the last subunit to be incorporated into each pilus are shown in yellow. P pili are terminated at the outer membrane (OM) by the termination subunit, PapH. No such subunit is known in the Fim system. The usher dimers are indicated in purple and blue. E, extracellular space; P, periplasm. Figure is modified, with permission, from REF. 35 (2008) Elsevier.

Nature Reviews Microbiology 7, 765-774, 2009

E. coli uropatgena (UPEC)

Nature Reviews Microbiology 6, 17-27 (January 2008)

Fimbrias en bacterias Gram positivas

Tipo
Fibras Fimbrias

Biognesis
ND Sortasas (algunas)

Caractersticas
Cortas, finas y cilndricas. Alargadas y flexibles.

Microorganismos
Estreptococos de la cavidad oral. Corynebacterium spp y Streptococcus spp.

Sortasas y ensamblaje
Transpeptidasa que une unidades de pptido en diferentes cadenas de peptidoglucano. Especficamente une el residuo de Treonina (T) de la secuencia LPXTG a la pared celular por una reaccin de transpeptidacin.

Modelo de S. penumoniae.

Sortasas y ensamblaje

Las protenas son secretadas por Sec. a| rompimiento entre treonina y la glicina b| formacin de un intermediario entre la cistena de la sortasa y la treonina de la protena c| oligomerizacin Lisina y cistena.

Nature Reviews Microbiology 4, 509-519 (July 2006)

Sortasas y ensamblaje
d| la unin entre la sortasa con la subunidad de pilina es atacada por el pentapptido del lpido II. e| unin covalente con el precursor de peptidoglucano.

Nature Reviews Microbiology 4, 509-519 (July 2006)

Organizacin
Los modelos propuestos involucran la presencia (verdes) de protenas auxiliares que participan junto con las unidades de pilina en el anclaje de la bacteria a la clula hospedera

Modelo de adherencia de Streptococcus

Nature Reviews Microbiology 4, 509-519 (July 2006)

Polisacridos capsulares
Glucoclix: material extracelular que rodea a la clula, compuesto por polisacridos, protenas o ambos. Exopolisacrido (EPS): glucoclix hecho con azcares (homopolimrico o heteropolimrico).
Cpsula: sustancia organizada, grande y asociada a la pared celular. En bacterias Gram negativas anclada a una porcin lipdica de la membrana externa.

Capa mucoide o mucilaginosa: sustancia amorfa, esparcida o soluble que rodea a la clula.

Cpsula y capa mucoide

E. coli. Antgeno K de cpsula Acido colnico (antgeno M) capa mucoide

Precursores de cpsula

Glucosa 1-P Nuclesido 5-difosfato

Nature Reviews Microbiology 8, 578-592, 2010

Biognesis de cpsula
La biosntesis y secrecin de polmeros bacterianos requieren del ensamblaje de complejos multiprotecos. Modelo de la biosntesis del polisacrido capsular K30 de Escherichia coli. Organizacin gentica.

Nature Reviews Microbiology 8, 578-592, 2010

Biognesis de cpsula
Ruta de sntesis de poli-gglutamato (PGA) en Bacillus spp. A, B, C, y E representan cada uno a CapA, CapB, CapC y CapE de la sntesis de PGA capsular en Bacillus anthracis o PgsA (PgsAA y CapA), PgsB (CapB), PgsC (CapC) y PgsE de la sntesis de PGA extracelular en Bacillus licheniformis y Bacillus subtilis.
Nature Reviews Microbiology 8, 578-592, 2010

Especificidad inmunolgica
Antgeno K (del alemn Kapselantigene) En Eschechichia coli se han encontrado ms de 80 tipos que difieren en su antigenicidad y composicin. En S. pneumoniae se han descrito ms de 90 serotipos capsulares.

Para Cryptococcus neoformans se han reportado al menos 6 estructuras capsulares diferentes.

Evasin del sistema inmune

El polisacrido capsular previene la deteccin por el sistema inmune del hospedero.

Formacin de biopelculas.
Adherencia.

Biofilms o biopelculas
Un biofilm puede contener aproximadamente un 15% de clulas y un 85% de matriz extracelular, generalmente polisacridos, que forman canales por donde circulan agua, enzimas, nutrientes, residuos; all los individuos establecen relaciones, dependencias, viven, cooperan, y se comunican a travs de seales qumicas, quorum sensing, que regula la expresin de genes de manera diferente en las distintas partes de la comunidad, como un tejido en un organismo multicelular.

Biofilms o biopelculas
Superficies abiticas Superficies biticas

Ventajas de las biopelculas.

Disponibilidad de nutrientes. Redes de alimentos. Biopelculas mixtas. -Superficie aerbica -Base anaerbica Biopelculas anaerbicas. -Bacterias fermentadoras -Bacterias acetognicas obligadas -Bacterias metanognicas -Bacterias sulfato reductoras Biopelculas aerbicas. -Bacterias quimiolittrofas

Sludge granules

Ventajas de las biopelculas.

El inters en los biofilms tiene que ver con la implicacin que tienen en la resistencia antibitica y a desinfectantes, ya que por ser una estructura ms fuerte y menos accesible que una colonia son una herramienta de supervivencia importante en bacterias. Los antibiticos y desinfectantes solo alcanzan a las clulas ms expuestas de la superficie, aunque algunas veces pueden difundir al interior del biofilm su concentracin no es suficiente y/o bacterias que estn la base son resistentes, lo que evita su destruccin.

Comunidades en las biopelculas

Microcolonias. Estn formados por agrupaciones de bacterias de un mismo tipo o bien de diversos tipos. Matriz. Exopolisacrido que comprende entre el 50 y el 90% de la biopelcula. Imagen. Microcolonias bacterianas (biofilm) dentro de una cripta de amgdala extirpada a un paciente con infecciones recurrentes. Recuadro: se observan al menos dos tipos de colonias bacterianas.

Comunidades en las biopelculas

Canales entre las microcolonias. Permiten el paso de agua, nutrientes y productos de desecho entre las microcolonias.

Modelo de una biopelcula oral

Nature Reviews Microbiology 2, 552-568 (July 2004)

Formacin de la biopelcula

Stage 1, initial attachment; stage 2, irreversible attachment; stage 3, maturation I; stage 4, maturation II; stage 5, dispersion.

Formacin de la biopelcula
1. Anclaje inicial (reversible). Flagelo Fimbrias Adhesinas no fimbriales 2. Formacin de la monocapa (irreversible). Twitching motility Sntesis de exopolisacrido

3. Maduracin fase I. Crecimiento de la matriz No hay movilidad Formacin de microcolonias

Formacin de la biopelcula
4. Maduracin fase II. Crecimiento de la matriz Formacin de canales de agua Crecimiento de las microcolonias 5. Dispersin. Baja concentracin de nutrientes Migracin por canales de agua Formacin de nuevas biopelculas

Formacin de la biopelcula

Expresin de genes
Cuando la bacteria forma una biopelcula la expresin de genes cambia como respuesta a los requerimientos de la clula. En E.coli y P. aeruginosa, se reduce la produccin de flagelina e incrementa la expresin de los genes para producir cido colnico y alginatos respectivamente.

Quorum sensing. Ruta de seales que emplea la bacteria para si misma o en una poblacin. La seales dan como resultado la expresin o regulacin de genes en respuesta a un estmulo.

Flagelo
Filamento helicoidal o propela, que es impulsado por un motor rotatorio embebido en la superficie celular. Filamento. Componente propulsor. Codo o gancho. Estructura de acoplamiento entre el filamento y la superficie celular. Cuerpo basal. Componente multiproteco que contiene el motor flagelar. -Ancla el flagelo a la clula. -Suministra el mecanismo del movimiento (un motor rotatorio que puede girar en ambos sentidos). -Alberga la maquinaria de exportacin para el ensamblaje del flagelo.

Nature Reviews Molecular Cell Biology 5, 1024-1037, 2004

Biognesis
Sistema de secrecin tipo III

El aparato de exportacin flagelar en S. enterica es el encargado de reconocer las protenas a ser exportadas. 6 protenas membranales (FlhA, FlhB, FliO, FliP, FliQ y FliR). Componentes solubles (FliI, FliH, la chaperona general FliJ y las chaperonas especficas FlgN, FliS y FliT).

Protenas flagelares

Nature Reviews Microbiology 4, 784-790, 2006

Protenas flagelares

Biognesis

Flil ATPasa FliH regula a FliI. Regula para acoplar la actividad a la translocacin. 1. El anillo MS se inserta en la MI y forma el ncleo sobre el que se acoplarn todos los dems componentes. 2. Posteriormente se forma el anillo C que se localiza en el citoplasma y est formado por las protenas FliG, FliM y FliN, que participan en el cambio de direccin de la rotacin flagelar y generacin de la torca (o fuerza de rotacin). 3. Se incorpora el aparato de exportacin responsable de secretar a los componentes que no presentan un pptido seal y que por lo tanto, se exportan a travs de la va especfica tipo III.

Biognesis

4. Las subunidades del eje, del gancho y la flagelina (que forma el filamento), viajan por el interior de la estructura, a travs de un canal central de 30 D. 5. Las subunidades que forman los anillos P y L son las nicas protenas del sistema que presentan secuencia seal y utilizan la va Sec. 6. Se exportan las subunidades del gancho, el cual se alarga hasta una longitud determinada. 7. Regulacin: cuando el gancho adquiere su tamao final, se exporta el factor antisigma FlgM, liberando de esta forma en el citosol al factor sigma FliA, que es el responsable de la transcripcin de los genes que formarn las estructuras tardas, como el de la flagelina.

Biognesis

8. Por ltimo, se exportan las llamadas protenas tardas HAP1 y HAP3 (que forman una zona de amortiguamiento entre el gancho y el filamento), la protena HAP2 (que acompaa la formacin del filamento ayudando a que las subunidades se ensamblen correctamente), y la flagelina.

Rotacin del flagelo

FliG, FliM, FliN Componentes del interruptor flagelar para la rotacin y determinan la direccin (CWW y CW)

Taxis (Taxias)
Aerotaxia. Migracin ante un gradiente de O2: - Bacterias anaerobias: aerotaxia negativa - Bacterias microaerfilas: atradas hacia tensiones de O2 menores que la atmosfrica - Bacterias aerobias y facultativas: aerotaxia positiva Fototaxia: migracin en funcin de la luz. Quimiotaxia: migracin ante un gradiente espacial de una sustancia qumica.

El movimiento bacteriano en ausencia de gradiente qumico se describe como movimiento catico, con muchos tumbos o volteretas.

El movimiento bacteriano en presencia de un gradiente qumico reduce la frecuencia de los tumbos y tiene una mayor direccin.

Quimiotaxia
Efector: seal qumica externa que pone en marcha el mecanismo celular de la taxia. Receptor de membrana: recibe al efector y pone en marcha un sistema de transduccin intracelular de la seal, que llegar hasta el conmutador en la base del flagelo.

La bacteria siente el gradiente espacial como si fuera un gradiente temporal.

Al cabo de cierto tiempo, la bacteria vuelve al patrn aleatorio de natacin (adaptacin al estmulo), debido a una modificacin covalente de los receptores de membrana.

Protenas quimiotcticas aceptoras de metilo (MCP)

Son receptoras del estmulo qumico y transductoras de la seal al interior de la clula. Son agrupaciones de trmeros de los homodmeros de MCP, asociados a protenas de la quimiotaxis (CheA y CheW). Se localizan en los polos de la clula.
Nature Reviews Molecular Cell Biology 5, 1024-1037 (December 2004)

Protenas quimiotcticas aceptoras de metilo (MCP)

Protenas transmembranales, con dos dominios principales:

Dominio periplsmico: contiene el sitio de unin para el quimioefector.

Dominio citoplsmico con 2 zonas: -Regin transductora: seal hacia el motor. -Regin metilable: con 4-6 glutmicos susceptibles de ser metilados (papel en la adaptacin al estmulo).

La transduccin de seales requiere varias protenas

CheA: protencinasa que se auto-fosforila en cierta His. A su vez puede fosforilar a CheY y a CheB CheW: acopla CheA a la MCP. CheY: en su forma fosforilada interacciona con el anillo C CheZ: cataliza la desfosforilacin de CheY-P
Trends in Microbiology Volume 12, Issue 12, December 2004, Pages 569-576

Protenas implicadas en la adaptacin

CheR: metiltransferasa. Metila los glutmicos de MCP - Si hay atrayente los glutmicos de MCP son ms accesibles a metilacin. - Si hay repelente los glutmicos son menos accesibles a la metilacin. CheB, tiene dos dominios, uno de los cuales funciona como metilesterasa y controla la adaptacin de las MCPs. En su forma fosforilada (CheB-P) elimina metilos de la MCP.
Nature Reviews Molecular Cell Biology 5, 1024-1037 (December 2004)

Genes involucrados en la Quimiotaxis

Nature Reviews Microbiology 3, 611-620 (August 2005)

Ciclo excitacin-adaptacin (resumen)

Aadimos atrayente se une a MCP cambio conformacional inhibicin del nivel basal de fosforilacin de CheA aumenta la probabilidad de rotacin CAR mayor tiempo de corridas. Simultneamente el MCP estimulado expone sus Glu metilacin por CheR adaptacin lenta al estmulo. La adaptacin se facilita tambin por la baja actividad metilesterasa (poca CheB-P).
TRENDS in Biochemical Sciences Vol.33 No.1