BIOLOGA DEANIMALES III PRACTICA DE OVOGNESIS INTRODUCCIN: Se lleva a cabo en la corteza ovrica.

Las fases en que se divide este proceso son:

a. b.

Felculo Primordial (Unilaminar). Constituido por un ovocito redondo, an pequeo, el cual est rodeado por una capa simple de clulas foliculares o de la granulosa. Folculo Multilaminar. Crecimiento acoplado del ovocito y clulas foliculares. Se desarrolla la zona pelcida. Al crecer el folculo se hunde dentro de la corteza, al mismo tiempo las clulas estromticas que le rodean, se diferencian y forman la teca (interna y externa).

c. d. e. f.

Folculo Secundario (Vesicular). Al formarse entre seis y doce capas de clulas foliculares, surgen pequeas lagunas (cuerpos de Call-Exner) llenas de un lquido claro, viscoso y rico en cido hialurnico. Folculo de Graff. Las lagunas al unirse originan este folculo. En esta etapa se constituyen el Cumulus Oophorus y la Corona Radiata. Preovulacin. Concluye la primera divisin meitica, liberndose el primer glbulo polar. El folculo crece notablemente. Ovulacin. Adelgazamiento del estrato granuloso, teca folicular y tnica albuginea (se forma la mcula pelcida). Se expulsa el vulo a la cavidad celomica. De all es conducido al exterior por los conductos genitales (oviductos), que presentan estructuras y glndulas diferentes segn la especie.

OBJETIVOS. 1. Identificar en laminillas histolgicas las fases de la Ovognesis en diferentes modelos biolgicos si es posible. 2. Observar diferentes tipos de huevos de vertebrados. MATERIAL BIOLGICO (Por equipo). 1 Rata hembra. Laminillas con cortes de ovario de: rana, rata. Huevos de: Pez, anfibio Huevos de ave dos comerciales (uno crudo y oro cocido) Huevo frtil de ave (de granja). MATERIAL TCNICO (Por equipo) Charola, pinzas y agujas de diseccin, tijeras y bistur. Microscopio ptico y estereoscpico. Porta y cubreobjetos. Dispositivo para anestesiar a la rata: vaso de precipitados (1000 ml), algodn y ter 2 Cajas de Petri. De 10 cm de dimetro Pipetas Pasteur con bulbo Pipetas Pasteur conectada un trozo de tubo de latex o plstico HORMONAS (Por grupo) Solucin salina fisiolgica Cloruro de sodio 9x1000. 1l Gonadotrofina Cirinica Humana (HCG) [Nombre comercial: GOMAKOR, PREGNIL o GONADOTROPIL C] Hormona Folculo Estimulante (FSH) [Nombre comercial PERGONAL] NOTA: SI NO SE CONSIGUEN LAS DOS HORMONAS LA FOLCULO ESTIMULNTE ES SUFICIENTE Y DA EXCELENTE RESULTADO METODO.

Tcnica para lograr superovulacin en mamferos: A ratas de 30 das de edad se les inyecta por va intravenosa 30 U.I de FSH, o por va intraperitoneal, 20 U.I. de FSH. 56 horas despus se inyecta, por va intravenosa o intraperitoneal, 20 U.I. de HCG Los animales se sacrifican 24 horas ms tarde (durante la sesin del laboratorio). NOTA: SI NO SE CONSIGUEN AMBAS HORMONA UNA SOLA DA BUEN RESULTADO Tcnica para obtener Ovocitos. Sacrificar a la rata tratada con las hormonas usando ter o mediante dislocacin cervical. Realizar una incisin longitudinal de 4 a 5 cm en la regin abdominal, desde la vagina hacia la parte anterior (ceflica) del animal. Retirar el intestino Localizar el tero, seguir su trayectoria hasta las trompas uterinas en cuyo extremo se encuentran los ovarios (en posicin caudal a los riones). Hacer un corte a la altura del oviducto para separar el ovario. Colocar el ovario en una caja de Petri con solucin salina fisiolgica. Con una pipeta Pasteur se procede a la obtencin de folculos maduros, que son los corpusculos rojos de mayor tamao. Para lograrlo proceder de la siguiente manera: Retirar cuidadosamente el exceso de grasa periovrica que recubre los folculos maduros (usando una pinza fina). Colocar la pipeta Pasteur de punta fina encima del folculo maduro para poder succionarlo. Succionar con la boca lentamente a travs del trozo de tubo plstico o ltex conectado a la pipeta Pasteur. Observar los folculos maduros en un microscopio estereoscpico, hacer un esquema. Completar este estudio mediante la observacin de cortes histolgicos de ovario maduro. Estudio de diferentes tipos de huevo. Anlisis de las estructuras de un huevo (ovulo) de ave. Romper el cascarn del huevo cocido, por el extremo redondeado (cmara de aire). Separar cuidadosamente el cascarn. Observando las membranas externa e interna. estructuras de huevo (esquema anexo). Romper cuidadosamente el huevo crudo comprado en el mercado y colocarlo en una caja de Petri Hacer la misma operacin con el huevo de granja Hacer un anlisis comparativo de ambos Analizar las diferencias estructurales de los huevos de peces, aves, reptiles, mamferos, etc. CUESTIONARIO. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. Dibuje y explique sus observaciones de los folculos de mamferos obtenidos durante la prctica. Seale la funcin que desempe cada una de las hormonas empleadas en el proceso de ovognesis Dibuje e identifique las fases de la ovognesis observadas en los cortes de ovario. Caractersticas histolgicas de la teca interna y externa. Diga sus funciones. Con qu tcnica histoqumica se puede determinar la composicin del lquido folicular. En el huevo de ave Qu estructura es el vulo propiamente dicho? Describa dnde y cmo es producida cada componente del huevo de ave y de que manera se ensamblan para formar el huevo como lo conocemos. Haga un cuadro comparativo de las diferencias estructurales (adems del vitelo) que se observaron en los distintos tipos de huevos. Con base en la cantidad y disposicin del vitelo cmo se clasifican los vulos (huevos). Describa las fases de la primera profase meitica e intgrelas al esquema general de la ovognesis. De sus observaciones e investigacin bibliogrfica, diga cules son las principales diferencias entre la Espermatognesis y la Ovognesis. Cortar el huevo cocido longitudinalmente, identifique las diferentes