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Electromecnica/ Electrnica.
3. Responsabilidades.
Es responsabilidad de los alumnos inscriptos en la materia, la de cumplimentar en tiempo y forma la entrega del Trabajo Integrador, segn los requerimientos que se detallan en esta presentacin. Es responsabilidad del docente a cargo, proceder en tiempo y forma con la correccin del mismo y brindar durante todo el desarrollo sus conocimientos y experiencia para la concrecin de la tarea por parte de los alumnos.
4. Introduccin.
El vnculo enseanza-aprendizaje de la materia y del desarrollo del presente trabajo prctico se basar en el anlisis de problemas y situaciones reales por parte del alumno. As mismo, se busca proyectar en el alumno, a partir de dichas situaciones, su insercin en el mercado laboral de forma ms natural y que pueda ejercer las competencias profesionales inherentes a sus incumbencias con solvencia y efectividad. Por otra parte, se busca incitar al alumno a la utilizacin del vocabulario tcnico-mdico en el ambiente laboral. El proceso de evaluacin ser continuo durante el perodo de enseanza de la materia, debiendo el alumno defender la base terica adquirida en un examen final, de tipo multiple-choise. Por otra parte, se evaluar el desempeo a la investigacin, conclusiones finales, ideas particulares y criticas pertinentes respecto de los temas explorados durante el tiempo de estudio.
5. Actividades y Acciones.
Responder al siguiente cuestionario con el mayor rigor cientfico y seguir, para su realizacin, el formato del formulario TPI. BLOQUE CONCEPTUAL. A. EL ESPECTRO ELECTROMAGNTICO Se denomina espectro electromagntico a la distribucin energtica del conjunto de las ondas electromagnticas. Referido a un objeto se denomina espectro electromagntico o simplemente espectro a la radiacin electromagntica que emite (espectro de emisin) o absorbe (espectro de absorcin) una sustancia. Dicha radiacin sirve para identificar la sustancia de manera anloga a una huella dactilar. Los espectros se pueden observar mediante espectroscopios que, adems de permitir
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Asignatura: Instrumental de Laboratorio Clnico. Institucin: U.N.C.P.B.A., Faculta de Ingeniera. Carrera/Ao: Tcnico Universitario en Electromedicina/ 2012 Departamento/rea: Dpto. Electromecnica/ Electrnica.
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B. ESPECTROSCOPA Newton, en 1666, observ que cuando un rayo de luz natural (luz blanca) pasa a travs de un prisma ptico se descompone en otros colores ms simples; es decir, el prisma dispersa o separa los colores simples o luces monocromticas-que componen la luz blanca o cualquier otra luz compleja o policromtica-. El fenmeno de la dispersin de la luz se debe a que las distintas radiaciones que componen una luz compleja se propagan con distinta velocidad en los diversos medios transparentes y, en consecuencia, experimentan distinto ngulo de refraccin. Como esta velocidad de propagacin es directamente proporcional a la longitud de la onda de la radiacin e inversamente proporcional al ndice de refraccin del medio, resulta que las radiaciones de menor longitud de onda son las ms desviadas. Hasta la segunda mitad del siglo XX, la estructura de una sustancia era determinada usando informacin obtenida de reacciones qumicas. Esta informacin inclua la identificacin de grupos funcionales con ensayos qumicos, junto con los resultados de experimentos de degradacin en los cuales las sustancias se rompan en otras ms pequeas, o sea, en fragmentos ms fcilmente identificables. Despus de considerar todas las evidencias qumicas disponibles, el qumico propona la estructura candidata ( o estructuras) que estaba de acuerdo con las observaciones. La prueba de la estructura se consegua al convertir la sustancia en un compuesto ya conocido o mediante su sntesis. Los ensayos cualitativos y las degradaciones qumicas como pruebas estructurales han sido suplementadas y en gran medida sustituidas en la qumica orgnica actual por mtodos instrumentales de determinacin de la estructura. Las ms destacadas de estas tcnicas son la espectroscopa de resonancia magntica nuclear (rmn), espectroscopa de infrarrojos (ir), espectroscopa de ultravioletavisible (uv-vis), y la espectroscopa de masas (EM). A pesar de ser distintas, todas ellas estn basadas en la absorcin de energa por una molcula y todas examinan cmo la molcula responde a esa absorcin de energa. El anlisis espectral se basa en detectar la absorcin o emisin de radiacin electromagntica a ciertas longitudes de onda y se relacionan con los niveles de energa implicados en una transicin cuntica.
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- El primero est formado por una rendija por la que entra la luz procedente de una fuente externa, un conjunto de lentes, un prisma y un ocular. La luz que se quiere analizar pasa por una lente colimadora, que la convierte en un haz de luz estrecho y paralelo, y luego por el prisma. Una nueva lente enfoca las distintas ondas de luz que salen del prisma sobre una pantalla, reflejndose en sta las lneas espectrales, cada una de un color diferente. - En el segundo, la lente de enfoque es sustituida por una cmara fotogrfica. Al llegar las luces a la pelcula se impresionan sobre la misma, y ms tarde se puede calcular su longitud de onda segn sus posiciones en la pelcula. Los espectrgrafos son tiles en casi todas las regiones del espectro, pero como el vidrio no transmite las radiaciones ultravioleta e infrarroja, las lentes a usar deben de ser de otro material, como el cuarzo. - El tercer tipo se usa para medir la intensidad de un espectro determinado en comparacin con la intensidad de luz de una fuente patrn. De esta manera se puede
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Donde h es el factor de proporcionalidad denominado constante de Planck, es la frecuencia, la longitud de onda y c la velocidad de la luz en el vaco. Puesto que al moverse los electrones de un tomo de una rbita a otra producen energa, midiendo la longitud de onda de los fotones emitidos mediante los espectros que producen, es posible deducir gran informacin sobre la estructura y distintos modos de movimiento de los componentes del tomo o molcula. Desde la antigedad, cientficos y filsofos han especulado sobre la naturaleza de la luz. Nuestra comprensin moderna de la luz comenz con el experimento del prisma de Isaac Newton, con el que comprob que cualquier haz incidente de luz blanca, no necesariamente procedente del Sol, se descompone en el espectro del arco iris (del rojo al violeta). Newton tuvo que esforzarse en demostrar que los colores no eran introducidos por el prisma, sino que realmente eran los constituyentes de la luz blanca. Posteriormente, se pudo comprobar que cada color corresponda a un nico intervalo de frecuencias o longitudes de onda. En los siglos XVIII y XIX, el prisma usado para descomponer la luz fue reforzado con rendijas y lentes telescpicas con lo que se consigui as una herramienta ms potente y precisa para examinar la luz procedente de distintas fuentes. Joseph von Fraunhofer utiliz este espectroscopio inicial para descubrir que el espectro de la luz solar estaba dividido por una serie de lneas oscuras, cuyas longitudes de onda se calcularon con extremo cuidado. Por el contrario, la luz generada en laboratorio mediante el calentamiento de gases, metales y sales mostraba una serie de lneas estrechas, coloreadas y brillantes sobre un fondo oscuro. La longitud de onda de cada una de estas bandas era caracterstica del elemento qumico que haba sido calentado. Por entonces, surgi la idea de utilizar estos espectros como huella digital de los elementos observados. A partir de ese momento, se desarroll una verdadera industria dedicada exclusivamente a la realizacin de espectros de todos los elementos y compuestos conocidos. Tambin se descubri que si se calentaba un elemento lo suficientemente (incandescente), produca luz blanca continua, un espectro completo de todos los colores, sin ningn tipo de lnea o banda oscura en su espectro. En poco tiempo lleg el progreso: se pas la luz incadescente de espectro continuo por una fina pelcula de
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C. MTODOS ESPECTROSCPICOS
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D. EL ESPECTRO ATMICO Y MOLECULAR Espectro Atmico: Cada tomo es capaz de emitir o absorber radiacin electromagntica, aunque solamente en algunas frecuencias que son caractersticas propias de cada uno de los diferentes elementos qumicos. Si, mediante suministro de energa calorfica, se estimula un determinado elemento en su fase gaseosa, sus tomos emiten radiacin en ciertas frecuencias del visible, que constituyen su espectro de emisin. Si el mismo elemento, tambin en estado de gas, recibe radiacin electromagntica, absorbe en ciertas frecuencias del visible, precisamente las mismas en las que emite cuando se estimula mediante calor. Este ser su espectro de absorcin.
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E=Eelectrnica+Evibracional+Erotacional
Existen tres casos de interaccin con la materia: 1. Choque elstico: Se denomina a una colisin entre dos o ms cuerpos en la que stos no sufren deformaciones permanentes durante el impacto. En una colisin elstica se conservan tanto el momento lineal como la energa cintica del sistema, y no hay intercambio de masa entre los cuerpos, que se separan despus del choque.Existe slo un cambio en el impulso de los fotones. Ejemplos son los rayos X, la difraccin de electrones y la difraccin de neutrones. 2. Choque inelstico: Es un tipo de choque en el que la energa cintica no se conserva. Como consecuencia, los cuerpos que colisionan pueden sufrir deformaciones
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P log 0 = * b * c P
Donde es una constante de proporcionalidad, b la longitud de paso ptico y c la concentracin. La cantidad log(Po/P) se define como absorbancia y se representa por el smbolo A. b
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Las desviaciones instrumentales provienen en primer lugar de los filtros de bandas o monocromadores. Se observa una adhesin estricta a la Ley de Beer solamente cuando la radiacin es monocromtica verdadera; esta observacin es otra informacin del carcter limitante de la ley. El uso de radiacin que est restringida a una longitud de onda simple es raro porque los elementos que aislan porciones de la salida de una fuente continua producen una banda ms o menos simtrica de longitudes de onda alrededor de la deseada. TRANSMITANCIA: La misma expresa como porcentaje o como
%T =
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P x100% P0
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P0 A = log10 (T ) = log P
Al contrario que con la Transmitancia, la Absorbancia de un medio aumenta cuando la atenuacin del haz se hace mayor. La transmitancia y la absorbancia se miden en un instrumento llamado espectrofotmetro, la solucin del analito se debe contener en algn recipiente transparente, tubo o celda.
BLOQUE INSTRUMENTAL F. EL ESPECTROFOTMETRO Un espectrofotmetro es un instrumento usado en el anlisis qumico que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentracin o reacciones qumicas que se miden en una muestra. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos. Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o espectrofotmetro de masa y visuales. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones: 1. Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra. 2. Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra. Los componentes caractersticos de este tipo de equipos son: 1. Fuente de luz: Proporciona energa radiante en forma de luz visible o no visible. Tipos de lmparas: A. Lmparas de filamento de tungsteno: se utilizan para longitudes de onda del espectro visible y el ultravioleta prximo. Son fuentes de un espectro continuo de energa radiante entre 360-950 nm. B. Lmparas de filamentos de haluros de tungsteno: son de mayor duracin y emiten energa radiante de mayor intensidad. C. Lmparas de Hidrgeno y Deuterio: producen un espectro continuo en la regin ultravioleta entre 220-360 nm.
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Figura 8: Diagrama de Bloques de un Espectrofotmetro G. FUENTES DE LUZ DE UN ESPECTROFOTMETRO Fuentes de radiacin deben tener las siguientes condiciones:
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Rendija de entrada: Sirve como una fuente para el monocromador. Es un rectngulo largo y estrecho que proporciona una mayor resolucin de la longitud de onda de la energa dispersada, y su longitud permite tener suficiente energa en el sistema como para producir una seal manejable posteriormente. Rendija de salida: Determina la banda de paso en trminos de la longitud de onda de la energa que alcanza el detector de la muestra. Colimador: Permite dirigir los rayos que emanan de la rendija de entrada de forma que los rayos provenientes de todas las posiciones de la rendija llegan al elemento de dispersin con el mismo ngulo. El segundo colimador forma una imagen de la rendija de entrada, despus de que ha sido dispersada como funcin de la longitud de onda, en la rendija de salida. Elemento de dispersin: Es la parte ms importante del monocromador. En los monocromadores convencionales se utiliza el retculo (rejilla) o el prisma como elemento de dispersin de la luz y se selecciona la longitud de onda deseada a travs de una rendija estrecha. En un diseo tpico de tipo Czerny-Turner, la fuente luminosa de amplio espectro (A) es disparada contra una ranura de entrada (B). La potencia de luz empleable depende de la intensidad que es capaz de entregar la fuente en el rea definida por la ranura de ingreso (amplitud*longitud) y el ngulo de aceptacin del sistema ptico. La ranura se encuentra en el foco efectivo de un espejo curvo (el espejo colimador C), de forma tal que la luz reflejada por el colimador se encuentra colimada (tiene una longitud focal infinita). La luz colimada es luego refractada por un prisma o difractada por una red de difraccin (D) y luego recogida por otro espejo (E) que se encarga de reenfocar la luz obtenida que ahora es de nuevo divergente, sobre la ranura de salida (F).
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2. FILTROS: La misin de los filtros y de los monocromadores es seleccionar un haz de radiacin "monocromtica"*. Los filtros de absorcin se utilizan en la regin visible y se basan en la absorcin selectiva de ciertas longitudes de onda. Normalmente consisten en un vidrio coloreado o una suspensin de un colorante en gelatina que se coloca entre dos placas de vidrio. Los filtros de banda se caracterizan por su anchura de banda (anchura a la mitad de la altura) que puede oscilar entre 30 y 250 nm.
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Los filtros de interferencia consisten en un dielctrico transparente (frecuentemente, fluoruro clcico o magnsico) recubierto en ambos lados con dos finas capas de plata semirreflectante (Figura 16). Cuando un haz de radiacin incide sobre este dispositivo, una fraccin atraviesa la primera capa metlica, mientras que la restante se refleja. La parte que ha pasado
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Cuando un haz de radiacin incide sobre una red de reflexin con un ngulo i se refleja segn un ngulo , diferente del incidente. En la Figura 18 se muestran los haces paralelos 1 y 2. La mxima interferencia constructiva entre ambos se produce cuando la diferencia de caminos recorridos por ellos sea un mltiplo entero de la longitud de onda, y esta diferencia es AB CD. Los segmentos AB y CD pueden expresarse en funcin de d y de los ngulos i y .
AB = d * sin(i )
CD = d * sin( )
Por lo cual:
n * = d * (sin (i ) + sin ( ))
Donde n, nmero entero, se denomina orden de difraccin. Segn la ecuacin anterior, existen distintos valores de para unos determinados ngulos i y , por lo que junto con la lnea de primer orden (n=1) aparecen lneas de
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Sin embargo, no existe el detector ideal, por lo que en la prctica, se evalan todos los factores anteriores y se selecciona algn detector que resulte adecuado al caso. Los ms utilizados son: clulas fotovoltaicas, fototubos y tubos fotomultiplicadores. 1) Clulas fotovoltaicas: Consisten en una placa de hierro, que acta de electrodo positivo, sobre la que se deposita una fina capa de un material semiconductor, como selenio, y ste se recubre de una capa muy fina de oro o plata, que acta como segundo electrodo o electrodo colector (Figura 21)
Cuando la radiacin electromagntica incide sobre el selenio, se promocionan electrones a las bandas de conduccin, haciendo que pasen electrones desde la superficie del selenio hasta el electrodo colector de plata, producindose un aumento de la conductividad proporcional al nmero de fotones que inciden sobre la superficie del semiconductor. Las clulas fotovoltaicas presentan las siguientes caractersticas: son sencillas de construir, relativamente baratas y no requieren una fuente de energa externa, por lo que pueden conectarse directamente a un galvanmetro o un ampermetro. En cuanto a los inconvenientes, su uso limitado a la regin visible (su mxima sensibilidad se presenta hacia los 550 mn, mientras que la respuesta a 350 y a 750 nm disminuye hasta un 10 % de la mxima), presentan dificultades para la amplificacin, y fenmenos de fatiga, de forma que la corriente de salida disminuye gradualmente con el tiempo.
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Cuando la radiacin incide sobre el ctodo, se produce una emisin de fotoelectrones que se dirigen al nodo, originndose una corriente que posteriormente se amplifica. La emisin de electrones depende de la naturaleza de la superficie del ctodo y de la frecuencia de la radiacin. En el comercio existen fototubos que difieren en el material con el que est construida la superficie del ctodo, siendo, por tanto, diferente su respuesta a la radiacin de diversas frecuencias. Muchos espectrofotmetros estn provistos de detectores intercambiables que permiten mantener una buena respuesta en un amplio margen de longitudes de onda. En general, puede concluirse que los fototubos son ms sensibles que las clulas fotovoltaicas, por la posibilidad de poder amplificar la corriente inicialmente generada. 3) Tubos fotomultiplicadores: Este tipo de detector consiste en un ctodo fotosensible y una serie de electrodos (dnodos), cada uno a un potencial menos negativo que el que le precede (Figura 22).
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La radiacin que llega al fotoctodo provoca la emisin de electrones primarios, que son acelerados hasta el primer dnodo. Al incidir en l, cada fotoelectrn origina la emisin de varios electrones adicionales; stos, a su vez, son acelerados hasta el dnodo 2, y as sucesivamente, hasta que al final, la corriente as producida se recoge en el nodo, se amplifica electrnicamente y se mide. Normalmente, los tubos fotomultiplicadores contienen 9 10 dnodos, los cuales originan de 106 a 107 electrones por cada fotn. Este sistema de deteccin se caracteriza por su respuesta rpida y elevada sensibilidad. El lmite de deteccin viene condicionado por el ruido de fondo que se origina como consecuencia de la emisin termoinica, la cual puede reducirse enfriando. De hecho, estas corrientes pueden eliminarse virtualmente enfriando el detector a 30 C, si bien esto no se lleva a cabo en el trabajo espectrofotomtrico ordinario. Las caractersticas ms importantes de los detectores son: Eficiencia Cuntica:
Intervalo espectral cubierto. Linealidad: Detectores Lineales: tubo fotomultiplicador, etc. Detectores No Lineales: placas fotogrficas.
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J. INSTRUMENTOS DE SIMPLE Y DOBLE HAZ Las medidas de absorcin de radiacin ultravioleta y visible son, por su propia naturaleza, de carcter relativo; debe de compararse, continuamente, la absorcin de la muestra, conteniendo el analito, con la de una referencia o blanco conteniendo las mismas especies que la muestra, excepto el analito. En los instrumentos de haz sencillo hay solamente un haz de radiacin que, despus de pasar a travs de la muestra llega al detector. De esta forma, para comparar la absorcin del blanco, debe sustituir ste a la muestra en cada lectura, lo cual implica varios segundos entre cada medida. Alternativamente, la muestra y la referencia pueden compararse varias veces por segundo usando un instrumento de doble haz. En l, (Figura 23) la radiacin pasa alternativamente a travs de la muestra y de la referencia, lo cual se lleva a cabo mediante un motor que hace girar un espejo ("chopper") dentro y fuera de la trayectoria de la radiacin. Cuando el espejo obturador intermitente no desva el haz, ste pasa a travs de la muestra y el detector mide la potencia radiante P. Cuando dicho espejo desva el haz a travs de la celda de referencia, el detector mide Po. De esta forma la radiacin es desviada varias veces por segundo, y el circuito compara automticamente P y Po para obtener la absorbancia. La operacin con el sistema de doble haz presenta, fundamentalmente, las dos ventajas siguientes: la comparacin muy rpida de muestra y referencia ayuda a eliminar errores debidos a fluctuaciones en la intensidad de la fuente y del detector, inestabilidad electrnica y cambios en el sistema ptico. Por otra parte, se facilita la posible automatizacin.
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