-FACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE

CURSO DE FARMCIA 1 SEMESTRE BIOLOGIA GERAL

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EXTRAO DE DNA VEGETAL E TIPAGENS SANGUNEAS

VITRIA DA CONQUISTA- BA 26 de Abril de 2012

FAINOR-FACULDADE INDEPENDENTE DO NORDESTE CURSO DE FARMCIA 1 SEMESTRE

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EXTRAO DE DNA VEGETAL E TIPAGENS SANGUNEAS

VITRIA DA CONQUISTA-BA 26 de Abril de 2012

Resumo

Este relatrio refere-se as aulas prticas de extrao de DNA vegetal, tendo o objetivo de conhecer os princpios bsicos da extrao de material gentico utilizando uma cebola ( Allium cepa ).

1. MATERIAS E REAGENTES 1.1 Materias

Meio copo de cebola picada ( 50g) 1 faca (ou bisturi ) 2 copos de 250 ml 2 copos medidores (ou proveta de 50 ml) 1 basto de vidro 1 esptula Funil de coar caf Banho-maria a 60c

1.2 Reagentes

gua filtrada (ou destilada) Detergente de conzinha transparente Sal de conzinha (ou NaCl ) lcool etlico comercial gelado ( ou etanol 95% ) Gelo

2. PROCEDIMENTO
Colocou-se em um copo 20 ml de gua, 10 ml de detergente, uma pitada de sal (1 colher de caf ) e misturou-se bem. Esta foi uma soluo de lise. Juntou a cebola picada no copo com a soluo de lise e levou ao banho-maria a 60c por exatamente 15 minutos. Resfriou a mistura, colocando o copo no gelo por 5 minutos, mexendo periodicamente no fazendo movimentos muito bruscos.

Filtrou a mistura no filtro de caf, recolhendo o filtrado em um copo limpo. Adicionou bem lentamente e pela borda do copo, cerca de 20 ml de lcool etlico comercial gelado. Esperou alguns minutos. Formaram-se duas fases, uma superior alcolica e uma inferior aquosa. Mergulhou o basto de vidro no copo fazendo movimentos circulares cuidadosos sem mexer bruscamente para no quebrar as molculas de DNA. Os fios esbranquiados e grudentos formados so aglomerados de muitas molculas de DNA e ficaro presos na ponta do basto de vidro.

3. RESULTADOS

O detergente emulsiona as gorduras, ou seja, atua nas membranas das clulas que so formados por fosfolipdios, desnaturando-as. NaCl dissocia em soluo Na+ com Cl-, esses ons interagem com os fosfatos da molcula de DNA tornando-as estabilizadas, menos solveis na gua. A temperatura ajuda degradar a parede celular e lisa a clula, as enzimas so desnaturadas inclusive o DNA ases, em seguida o gelo diminui a frequncia de quebra da molcula. A filtragem retira os restos celulares, contendo apenas o DNA. E por fim o lcool etlico desidrata as molculas de DNA, retirando-as de soluo

4. CONCLUSO

Portanto, a extrao de material gentico foi feita para ser visto como exatamente uma molcula de DNA.

1. INTRODUO

Um tipo sanguneo, tambm chamado de grupo sanguneo, a caracterizao do sangue baseada na presena ou ausncia de substncias antignicas herdveis presentes na membrana das clulas vermelhas. Estes antgenos da membrana das hemcias podem ser protenas, carboidratos, glicoprotenas e alguns desses antgenos de membrana formam, coletivamente, o que chamamos de sistema de grupo sanguneo. O sistema ABO, descoberto no incio do sculo xx, o mais importante sistema de tipagem sangunea e rege as transfuses de sangue at os dias atuais. Os antgenos do sistema ABO so produtos dos genes ABO localizados no cromossomo 9 de humanos. Sua descoberta ocorreu quando cientistas observaram a ocorrncia de aglutinao de hemcias devido a fixao de anticorpos e antgenos especficos presentes na membrana dessas clulas. A reao de aglutinao causada pelos anticorpos contra esses antgenos chamada hemaglutinao. Os antgenos de grupo sanguneo esto organizados em mltiplas cpias na superfcie da hemcia, permitindo que as clulas se aglutinem quando sofrem reao cruzada com anticorpos. Assim, indivduos do tipo A expressam somente antgenos A na superfcie das sua hemcias, enquanto os do tipo B expressam somente antgenos B. J os do grupo AB expressam ambos os antgenos na superfcie das hemcias e os do grupo O no expressam nenhum dos dois. Bactrias do trato gastrintestinal possui em suas membranas antgenos similares ou idnticos aqueles do sistema ABO. Essas bactrias estimulam a formao de anticorpos contra clulas. Por exemplo, indivduos do grupo AB que possui antgenos A e B nas suas hemcias no desenvolvem anticorpos anti-A ou anti-B. J os indivduos do grupo O que no apresentam antgenos na superfcie das hemcias desenvolvem anticorpos anti-A e antiB Quando um indivduo recebe sangue de um grupo diferente do seu isso pode desencadear respostas imunolgicas que podem levar a destruio das clulas vermelhas do sangue. Por exemplo, se um indivduo do grupo A (receptor) recebe sangue do grupo B (doador), os anticorpos anti-A presentes no sangue do doador reagem contra os antgenos da superfcie da clula vermelha do receptor provocando hemaglutinao, formao de cogulos e destruio em massa das hemcias do receptor levando morte. Portanto fundamental a caracterizao dos grupos sanguneos artes dos procedimentos de transfuso.

2. PROCEDIMENTOS
2.1 Coloca-se numa lmina de microscopia, lado a lado, uma gota de soro anti-A e outra de soro anti-B. 2.2 Sobre cada gota de soro coloca-se uma gota do sangue a ser identificado. Observando-se o resultado, temos: a) Se no houver aglutinao em nenhum dos lados, o sangue em exame do grupo O. b) Se houver aglutinao nos dois lados, o sangue do grupo AB. c) Se houver aglutinao somente com o soro anti-A, o sangue do grupo A. d) Se aglutinar somente com o grupo B, o sangue do grupo B.

Fator Rh (Rhesus) ou Fator D 85% das pessoas possuem nas hemcias um antgeno chamado fator Rh. Essas pessoas so Rh+ (positivas). 15% das pessoas no possuem nas hemcias o fator Rh e so Rh- (negativas). Mecanismo gentico - O fator Rh determinado por um par de alelos, R e r: R determinando a formao do fator Rh e r determinando a sua no formao, sendo R dominante sobre r. GENTIPOS RR Rr rr FENTIPOS Rh+ Rh+ Rh-

Transfuses O nico caso em que h problemas ocorre quando o doador Rh+ e o receptor Rh-, tendo o ltimo j recebido anteriormente uma transfuso de sangue Rh+ , estando por isso sensibilizado.

3. CONCLUSO

Portanto, conclumos que o sistema Rhesus o segundo mais importante sistema de tipagem e classificao sangunea. Foi descoberto na dcada de 40 cientistas perceberam que ao ejetar-se sangue do macaco do gnero Rhesus em cobaias, havia a produo de anticorpos para combater as hemcias introduzidas. Dessa constatao os cientistas concluram que na membrana das hemcias do macaco do Rhesus havia um antgeno de membrana que foi denominado fator Rh (de Rhesus ). Testando sangue humano com anticorpos anti-Rh cientistas verificaram que em 85% do sangue humano testado ocorria aglutinao (Figura 1) , ou seja , os anticorpos anti-Rh reconheciam o antgeno Rh na superfcie das hemcias humanas. Foram descritos cinto antgenos Rh diferentes (C, c, D, E, e) sendo o antgeno Rh D o mais imunognico. Portanto, o termo fator Rh refere-se somente ao antgeno Rh D. Indivduos que apresentam o antgeno Rh D na superfcie das suas hemcias so denominadas de Rh positivos (Rh+) e os que no possuem o antgeno Rh D so chamados de Rh negativos (Rh-).

RESUMO

Este relatrio refere-se as aulas prticas de tipagens sanguneas, este sendo como um processo de manuseio onde podemos conhecer os grupos sanguneos atravs da hemaglutinao, sendo uma reao causada pelos anticorpos.