UNIVERSIDADE CATLICA DE GOIAS UCG DISCIPLINA: BIOQUMICA CURSO: NUTRIO DOCENTE: IVANISE C. S.

. MOTA REAO DE CARACTERIZAO DE PROTENAS REAO DE BIURETO Fonte: rico Meirelles ASPECTOS TERICOS Quando se aquece a uria a 100C, forma-se um produto que recebeu o nome de Biureto e ocorre a liberao de amnia. O Biureto reagem com ons cpricos, em meio alcalino, formando um produto de colorao violceo. Observando a semelhana do Biureto com as protenas(ligaes peptdicas), aplicou-se a tcnica do Biureto para dosagem de protenas. A reao do Biureto devida s ligaes peptdicas, dando positiva para protenas e peptdeos com trs ou mais resduos de aminocidos. A reao tambm positiva para substncias que contm 2 carbonilas (CONH2) ligadas diretamente ou atravs de um nico tomo de carbono ou nitrognio. Dependendo da complexidade da protena ou do peptdeo em questo, a cor do produto de reao a presena do Biureto varia substancialmente: protenas do colorao violeta, peptdios do colorao rosa. A reao do Biureto pode ser utilizada para demonstrar a presena de protenas em materiais biolgicos, como tambm para quantific-las, uma vez que o complexo cobre-protena apresenta uma absoro mxima 545nm; a intensidade da cor depende exclusivamente da concentrao de protena. Para que a reao do Biureto seja positiva h necessidaed da presena de pelo menos duas ligaes peptdicas na molcula, portanto, aminocidos e dipeptdeos no do reao do Biureto positiva. TCNICA REAGENTE TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3 TUBO 4 gua 2,0ml Soluo Glicina 2,0ml Saliva mista 50% 2,0ml Clara de ovo 10% 2,0ml NaOH 2,0ml 2,0ml 2,0ml 2,0ml CuSO4 0,5ml 0,5ml 0,5ml 0,5ml Obs.; CuSO4 0,5% dever ser adicionado gota a gota agitando no intervalo de cada adio at o aparecimentos da cor. Homogeinizar e observar o desenvolvimento da colorao. Hidrxido de Sdio (soda custica) slido ou em soluo aquosa Caracterstica: slido branco, translcido e muito higroscpico. Exemplos de uso: correo de pH, preparo de reagentes, clarificao de tecido vegetal. Riscos; Irritante, contato cutneo, queimaduras. As leses podem correr antes que se perceba o contato; contato com olhos: danos permanentes at cegueira; inalao: irritao das mucosas do sistema respiratrio at pneumonia grave; ingesto; severas queimaduras nas mucosas da boca, esfago e estmago. Pode ser fatal. Em contato com gua ou umidade pode gerar calor suficiente para provocar ignio de materiais combustveis. Medidas de proteo: usar luvas (borracha, PVC ou neoprene de punho longo), avental de borracha, protetor facial. Manusear em local seguro, onde h chuveiro e lavar olhos de emergncia. No preparo de solues, adicionar lentamente a soda custica gua: Arazenamento: Local seco. Descarte: Pia, tratamento anterior ou descarte: neutralizao com cido clordrico ou cido sulfrico diludos at atingir pH entre 5.5 a 8.5. Primeiros Socorros: Contato cutneo: retirar a vestimenta contaminada remover imediatamente o produto com grandes quantidades de gua, pelo menos por 15 minutos (usar o chuveiro de emergncia). Contato com os olhos: lavar com gua corrente em abundncia, pelo menos por 15 minutos. Usar o lava-olhos; inalao: transportar o contaminado para rea no contaminada; ingesto: se a vtima estiver consciente, dar leo de oliva ou outro leo dar pequena quantidade. Somente na impossibilidade de ministrar leo, dar pequenas quantidades de gua. No provocar vmito. Em todos os casos, procurar um mdico.