CONOCIMIENTO DE TCNICAS ANALTICAS PARTE I: FUNDAMENTOS DE ESPECTROFOTOMETRA Daz Bez, Jlio Csar. Hernndez Cruz, Jos David. Abstract.

Introduccin. La espectrofotometra se refiere a mtodos cuantitativos de anlisis qumico que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias qumicas. Se conocen como espectrofotometra de adsorcin visible (colorimetra), ultravioleta, infrarroja. La espectrofotometra se basa en principios colorimtricos y comnmente se usa para medir la concentracin de dixido de azufre. En este proceso, los colorantes y productos qumicos se combinan con una solucin que contienen dixido de azufre. El color de la solucin da lugar a diferentes cantidades de luz absorbida. La cantidad de luz absorbida, medida con un espectrofotmetro, indica la cantidad de dixido de azufre. Bourguer, Lambert y Beer establecieron relaciones de la variacin de la intensidad de luz transmitida por una muestra con el espesor o con la concentracin de ella, para materiales translcidos. Estas relaciones se conocen como la ley de Bourguer-Lambert-Beer. O la ley general de la espectrofotometra que permite hallar la concentracin de una especie qumica a partir de la medida de la intensidad de luz adsorbida por la muestra. Esta ley se puede expresar en trminos de potencia de luz o de intensidad de luz, asumiendo luz monocromtica, como It/Io= 10 -abc. It es la intensidad de la luz transmitida, Io es la intensidad de luz que proviene de la fuente, al coeficiente de absortividad molar, b la longitud de trayectoria del haz a travs de la muestra. La relacin It/Io se conoce como transmitancia T, y es la medida primaria que se realiza en los instrumentos para medir la absorcin de luz por parte de una muestra. Normalmente se expresa en forma porcentual y se llama porcentaje de transmitancia. La luz adsorbida sera la diferencia entre la intensidad de luz incidente y la intensidad transmitida despus de pasar a travs de la muestra. Cuando se toma el logaritmo decimal negativo de la relacin It/Io, entonces: -log It/Io = - log T Relacin que representa la cantidad de luz adsorbida por la muestra. Esta relacin recibe el nombre de absorbancia y se designa por A. Obsrvese que a diferencia de la transmitancia, la absorbancia aumenta a medida que aumenta la atenuacin del haz. Metodologa. CALIBRACIN DEL ESPECTROFOT METRO Y BARRIDO DEL ESPECTRO DEABSORCIN. 1.- 15 minutos antes de empezar el experimento se encender el espectrofotmetro para que la lmpara de nuestro espectrofotmetro comience a calentar. 2.- Para calibrar oprimir la tecla MODE, hasta que se encuentren A (absorbancia). 3.- Seleccionar una longitud de onda (nm) Teniendo cuidado en que longitud de onda con la cual se comenzara la medicin debido que probable que a longitudes muy pequeas el espectrofotmetro no tome la medida. 4.- Introducir la celda con el blanco (usar agua destilada, sin llenar completamente) en el porta celda, oprimir la tecla (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros. 5.- y posteriormente se introducir la celda con la disolucin para determinar su absorbancia a esa longitud de onda.

6.- Repetir el procedimiento desde el punto 3 incrementado la longitud de onda y reportando tus datos. CURVA PATRN. 7.- Preparar disoluciones a distintas concentraciones a partir de la solucin dada por el profesor, y preparar una que ser la madre. 8.- Seleccionar una longitud de onda adecuada determinada en la calibracin, en la cual la medicin de la absorbancia de nuestra solucin madre haya sido alrededor de 400nm. 9.- Repetir los pasos 3, 4 y 5, para cada una de las concentraciones y reportaren la tabla. Resultados.
Tabla 1. Absorbancia de la solucin de I2 a diferentes longitudes de onda.

Evento (nm) Absorbancia 1 320 1.845 2 330 3 340 1.878 4 350 1.312 5 360 0.978 6 370 0.725 7 380 0.507 8 390 0.318 9 400 0.213 10 410 0.151 11 420 0.125 Valor de la longitud de onda seleccionada. =360 ALGORITMO DE CLCULO Determinar la concentracin de I2 en las mezclas de la tabla 2. Concentracin de la solucin inicial = 0.0004 M C1V1=C2V2 C2= (C1V1)/C2 C2 = [0.0004 (8)]/10 = 0.00032 C2 = [0.0004 (6)]/10 = 0.00024 C2 = [0.0004 (4)]/10 = 0.00016 C2 = [0.0004 (2)]/10 = 0.00008
TABLA 2. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I2.

Mezcla I2 (0.002 M/ml) H2O/ml 1 10 0 2 8 2 3 6 4 4 4 6 5 2 8

I2 mol/L 0.0004 0.00032 0.00024 0.00016 0.00008

Abs 0.566 0.380 0.306 0.230 0.108