CAT NQ01400

Samente para Usa in Vitro

COLESTEROL
METODa ENZlMA TICO
PRECAUC;:OES kit mio contem derivados de sangue humano, porem, considerar qualquer amostra de paciente como potencial mente infectante. Evitar 0 contato direto com as amostras. Nao pipetar reagentes ou amostras corn a boca . Descartar as sobras das reac;;oesde acordo com as Boas Praticas de laborat6rio em local pr6prio para materiais potencial mente infectantes.

DEFINIC;AO teste e feito no soro para a determinac;;ao do nivel de Iipidio que e produzido no figado. o Colesterol esM presente nos gl6bulos vermelhos e musculos, mas a maioria do Colesterol esta combinado com os acidos graxos no sangue circulante. Existe 0 Coiesterol HDl (bom Colesterol) e 0 lDl (mau Colesterol). As pessoas com altos nlveis de lDl him grande risco de doenc;;asdo corac;;ao.

FISIOPATOlOGIA Colesterol e necessario na digestao das gorduras, forma9ao dos hormonios adrenal, ova ria no e testosterona.

AMOSTRA Soro ou Plasma heparinizado.Outros anticoagulantes interferem no resultado final. Nao usar amostras visivelmenle hemolisadas. As amostras podem ser guardadas refrigeradas antes da dosagem por uma sernana ou por dois meses congeladas. TECNICA Colocar em 3 tubos de ensaios marcados: B (blank), P (padraO) e D (desconhecido)

SIGNIFICADO CLiNICO Valores elevados - tnfarto do miocardio, obstruc;;ao do tracto biliar, nefrose, hipotireoidismo, 32 trimestre de gravidez, dieta rica em Colesterol. Valores baixos - Sindrome de Cushing, Desnutric;;ao, Hipertireoidismo, Infecc;;oes agudas, Anemia e Cirrose. INTERFERENCIA Falso valor alto - Ester6ides, anticoncepcional oral, bromatos, sulfonamidas, fenitoina, aspirina, epinefrina. Falso valor baixo - Ester6ides aspirina, canamicina, neomicina, estr6genos, heparina, colchicina, agentes antidiabeticos. METODO Enzimatico, Colesterol Oxidase, Colorimetrico e de Ponto Final. L1NEARIDADE E ESTABILIDADE DA REAC;:AO A reac;;ao e linear ate 500 mg/dl. Para resultados com val ores superiores, diiuir a soluc;;ao colorida final 1:2 ou 1:4 com 0 Reativo de Trabalho e multiplicar 0 resuitado pelo fator da dilui9ao utilizada. A cor final da reac;;aoe estavel por 120 minutos. COMPOSIC;:AO DO KIT Reativo Padrao CAT N: 01401 Soluc;;aode Colesterol (200 mg/dll Volume = 4 ml Reativo Enzimatico CAT N.o 01402 Lipase 2300 U/ml COD 23 U/ml POD ~ 20 U/ml Volume = 5 ml Reat'vo cie Coo(i i GAT-rU 0;-405 4 aminofenazona 0,025 mol/l Volume = 13 ml Reativo de Cor (2) CAT N.- 01404 Fenol 0,055 mol/l Volume = 13 ml Atenc;;ao:0 reativo (2) e t6xico e irritante. MATERIAL NAO FORNECIDO (NECESSARIO) Agua deionizada. Espectrofotometro ou Colorlmetro. Micropipetas, pipetas e provetas capazes de medir os volumes indicados na tecnica. Tubos de ensaio para 0 aparelho a ser utilizado. Frasco de vidro ambar. Banho-maria 37C. Rel6gio ou cronometro.

fenotiazina tetraciclina,

Padrao 20 ~ll Desconhecido Rvo Trab. Incubar a 37 C por 10 minutos. Retirar do banho-maria e ler em Espectrofotometro a 505 nm ou ern fotocoiorimetro com filtro verde (490-530 nm), zerando 0 aparelho em Absorbancia com B (blank). A cor e estavel por 120 minutos. Nota: Os volumes de amostra e Rvo de Trabalho podem ser modificados proporcionalmente . Ex.: 10 ;ll de amostra + 1 ml de Rvo de Trabalho ou 50 III de amostra + 5 mL de Rvo de Trabalho, etc.

CALCULOS
Colesterol

mg/dL

=0xf
200mg/dL

p
VALORES DE REFERENCIA Desejavel: Inferior a 200 mg/dL Limitrofe: de 200 a 239 mg/dl Elevado: superior a 239 mg/dl INTERFERENCIAS OS deteroentes. metais oesados e os cianetos sao inibidores enzimaticos.. Uma peffeita IimpeZa de vidraria utilizada necessaria. Utilizar agua deionizada ou destilada recente no preparo de Reativo de Trabalho . 0 nlvel de agua no banho-maria deve ser superior ao dos tubos de ensaio que contam as rea90es. A temperatura e 0 tempo de rea9ao nao sao criticos: 3rC 2 e 10 a 20 minutos. A turvac;;aoque pode ser observada na incuba9ao e devida ao tensoativo incorporado, mas, desaparece quando os tubos esfriam.

Caracterlstlcas de desempenho Recupera9ao Foram feitos estudos de recupera9ao, utilizando 20 amostras de concentra90es conhecidas, adicionando quantidades de colesterol determinadas, obleve-se uma recupera9ao entre 98 e 101% para todo nivel de colesterol em estudo. Precisao Intra-ensaio: Foram testadas 5 amostras em 10 replicatas, durante um ensaio, para 0 nivel de colesterol indicado, os resultados obtidos foram os se9uintes: Media em mg/dl = 160 mg/dl Coeficiente de variac;;ao (CV %) = 3,0 % Entre-ensaios Foram testadas replicatas de 5 amostras em 10 ensaios diferentes, para 0 nivel de cole sterol indicado, os resultados obtidos foram os seguintes: Media em mg/dl = 290 mg/dl Coeficiente de variac;;ao(CV%) = 2,7% Estabilidade Os estudos de estabilidade efetuados em um lote durante 0 perlodo desde a fabrica9ao ate a data do vencimento, utitizando padroes com concentra90es conhecidas de colesterol, determinaram que nao houve alterac;;ao dos resultados quando 0 kil e esiocauo em gE:ldJeira. Os resultados variar"am ria faixa de +-2'Y~de. valor esperado. Ap6s 0 vencimento esses valores vao se alterando progressivamente. Portanto, recomenda-se nao utilizar 0 kit ap6s a data de validade especificada nas embalagens do kit.

Todos os reativos vem prontos para uso N.o de prQvas Rvo. 1 Rvo. H2O 0,5 mL 19mL 10-20 38 mL 20 - 40 1 mL 152 mL 4 mL 80 - 160 250 - 500 12,5 mL 475 ml

Rvo. (2) 0,5mL 1 ml 4 ml 12,5 mL

RVQ. Enzimatico

0,2 ml 0,4 ml 1,6 ml 5,0 mL

Reativo de trabalho e estavel por urn mes, quando refrigerado e acondicionado em frasco ambar (colocar 0 r6tulo auto-adesivo com a data de prepara9ao). ESTABILIDADE DO REATIVO DE TRABALHO Leituras de Biank aciffla de O.i60 ern ausorbancia indiGdifr Trabalho. Neste caso despreza-Io. CONCENTRAC;:AO DO REATIVO DE TRABALHO Lipase ~ 6000 U/l COD ~ 60 U/l POD ~ 400 U/l Rvo (1) = 0,00125 mol/l Rvo (2) = 0,00275 mol/L PH =7,40,1 VIDA UTIL E ARMAZENAMENTO o kit e estavel ate seu vencimento indicado na caixa, quando mantido refrigerado. Evitar deixa-Io a temperatura ambiente por period os prolongados, impedindo assim a deteriorac;;ao das enzimas. do Reativo de

uetedCJfar;80

APRESENTACAO
Kit suficiente para rea90es (1 mL) 0 preparo de 500 mL de Reativo de Trabalho

BIBLIOGRAFIA
1 - Abell, L.L.; Levy, B.B.; Brodie, B.B., Kendall, F.E :J. BioI. Chem

195:357 (1952)
2 - Trinder, 3 - Castelli, P . Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969) W.P. - Current Prescribing 6/77: 39 (1977)

REG. M. S N.o 10246810011

LABORLAB Fone: PRODUTOS PARA LABaRATORIOS de Atendimento L TDA. ao Cliente) Estr. do Capao Bonito,

937 07263-010 - Guarulhos

Resp. Tee.: Ugia Monaro

( 11) 6480-1306

( Central

- SP CNPJ da Silva CRBM

REV.O: 72807043/0001-94 1 Regiao N2 2573

CAT NQ 02300

Somente para Uso in Vitro

HDL COLESTEROL
PRECIPIT ANTE
CALCULOS HDL Colesterol mg/dL = D x f

PRINCIPIO As lipoproteinas de alta densidade (HDL), sac separ'adas seletivamente pOl' precipitayao das de baixa e muito baixa densidade (LDL e VLDL) usando-se 0 Sulfato de Dextran em presenya de Ions Mg++ sobrenadante e separado POl' centrifugayao e as HDL nele contido sac quantificadas pelo seu teor de colesterol, utilizando-se 0 kit Colesterol metoda Enzimatico da LABORLAB.

f = 1.2 P

METODO metodo preconizado pela Lipid Research Clinic (Atlanta USA) emprega a precipitayao com heparina/Mn++. Este metodo tem um inconveniente po is nao pode ser adaptado para uso em laboratorios oe pequeno porte. A utilizayao do Sulfato de Dextran/Mg++ emprega um unico reativo estavel temperatura ambiente, e e mais senslvel.

COMPOSlc;AO DO KIT Reativo Dextran CAT N2 02301 Soluyao de Sulfato de Dextran (PM = 500.000), = 5 mL Reativo Magnesio CAT N2 02302 Soluyao de Cloreto de Magnesio, 1,5 mmol/L Volume = 5 mL

HDL Colesterol mg/dL x 0.026 = HDL Colesterol mmol/L 45,7 = 200 mg/dL x VFE..x VRE x ~onde: VA VRp VE VFE volume final do extra to 0,55 mL VA = volume da amostra processada = 0,5 mL VRE = volume de reayao com amostra = 2,1 mL VRp = volume de reayao com padrao = 2,02 mL VP = volume de padrao na reayao = 0, 02 mL liE = volume de extrato na reayaa '" 0,1 mL OBS. Em aparelhos que permitem utilizar menores volumes de reagentes, pOl' exemplo 1 mL usaI' 50 ilL de sobrenadante e 10 ~lL de padrao. Neste caso 0 fator sera 0 mesmo.

0.032 mmol/L Volume

Frasco vazio para a preparayao do reativo Predpitante CAT N' 02303 Volume = 15 mL PREPARAc;AO DO REATIVO PRECIPITANTE Misturar PARTES IGUAIS DOS REATIVOS e colocar a mistura no frasco vazio anotando no rotulo a data de prepara9ao. Nao existe a necessidade de preparar todo 0 reatlvo de uma so vez. 0 reativo assim preparado e estave) pOl' 6 meses temperatura ambiente ou 1 ana refrigerado.

VALORES DE REFERENCIA Segundo a Lipid Research Clinic (Bethesda-USA) Idade HDL Colesterol mg/dL HDL Colesterol mg/dL H M 0-19 ~-M 20-29 30-39 30 - 65 35 - 80 40-49 ~-M ~-~ 50-59 30 - 65 35 - 85

~-ro

~-ro ~-~

Valores de HDL Colesterol em pessoas normais com idades entre 34 e 66 anos (X DP) H (n=63) 52 13mg/dL M (n=68) 65 16mg/dL Fator de risco segundo Castelli risco normal = 1,00 Observou-se que 0 risco para um homem com 25 mg/dL de HDL Colesterol e 0 dobro que para outro com 45 mg/dL e 0 quadruplo para
,..,,,Im c.."'m

IYIATERIAL NAO FORNECIDO (NECESSARIO) Agua deionizada Espectrofotometro ou Colorimetro. Micropipetas e pipetas capazes de mediI' os volumes = --teenie6'~. ---~----_._-~----------Tubos de ensaio. Rel6gio ou cronometro. Kit de Colesterol metodo Enzimatico (CAT N2 01400) VIDA UTIL E ARMAZENAMENTO kit e estavel em temperatura impressa na caixa.

indicados

na

p5

mf1/rll

P::lr::l Q1l1lhereR

4Q m,..,/d..L

rlA...Hnl

(Colp-stArnl IAQJ

risco dobrado sObre 55mg/dL e quadruplicado IN DICE DE RISCO DE ECC ( *) HDL Colesterol H mg/dL slndrome 75 ou mais

sobre 70 mg/dL.

ambiente

ate a data de vencimento

M
de longevidade 0,52 0,64 0,80 1,00 1,25 1,55 1,94

70
PRECAUc;OES kit nao contem derivados de sangue humano, porem, considerar qualquer amostra de paciente como potencial mente Infectante. Evitar 0 contato direto com as amostras. Nao pipetar reagentes ou amostras com a boca . Descartar as sobras das reayoes de acordo com as Boas Praticas de Laborat6rio em local pr6prio para materiais potencialmente infectantes.

65

0,45 0,55 0,67 0,82 1,00 1,25 1,50 1,75 2,00

60
55 50

45 40 35
30
25 ou menos

AMOSTRA SOl'O ou plasma coletado somente com heparina. Manter as amostras refrigeradas e processa-Ias dentro de 24 horas.

TECNICA Ern um tuba de ensaio colocar 500 pL (250 pL) de amostra e agregar 50 ~lL (25 ~lL) de Reativo Precipitante. Hornogeneizar agitando, sem inverter 0 tubo, pOl' 20 segundos. Deixar no refrigerador pOI' 30 a _40 minutos ou em banho de agua (4 a 10C) POl' 15 minutos. NAO CONGELAR Centrifugal' POl' 15 minutos 3000 rpm. UsaI' 0 sobrenadante Iimpido como arnostra Em 3 tubos de ensaio, marcados B. P e 0, colocar: B P D Sobrenadante 100 ~lL Padrao 20~lL Rvo trabalho Colesterol 2 mL 2 mL 2 mL Misturar e incubar pOI' 15 minutos a 37C. Ap6s, retirar do banho e esfriar. LeI' 505 nm em espectrofotometro ou em colorlmetro com filtro verde (490-530 nm), zerando a aparelho com tubo B (blank) Vide bula Colesterol metodo Enzimatico A cor da reayao e estavel pOl' 2 horas.

RELAc;AO ENTRE COLESTEROL TOTAL E HDL Col. totallHDL Col. Risco H --3,43 -----0,5 do normal 4,97 NORMAL 9,55 2 x normal 24,00 3 x normai M--3,27 -----0,5 do normal 4,44 NORMAL 7,05 2 x normal 11,04 3 x normal (*) ECC = Enfermidades cardiacas coronarias

COLESTEROL

APRESENTAc;AO Kit suficiente para 0 preparo de 10 mL de Reativo Precipitante processar 200 a 400 amostras)

(Permite

BIBLIOGRAFIA 1 - Castelli, WP.; Levitas, I.M - Current Prescribing 6/77:39 (1977) 2 - Gordon, T., Castelli, W P.; Hjortland, M C: Kannel W B, Dawber T R. - The American Journal of Medicine 62:707 (1977)

REG. M. S . N210246810008 LABORLAB PRODUTOS PARA LABORAT6RIOS LTDA. Fone: (11 )6480-1306 (Central de Atendimento ao Cliente)

REV.01 Estr.do Capao Bonito, 937 07263010 - Guarulhos - SP CNPJ 72807043/0001-94 Resp.Tec.: Ligia Monaro da Silva CRBM 1~ Regiao N22573

Tf!~tline
-~-

R2 - Padrao: Contem Triglicerides 20ll mg/dL ou 2,28 mmol/L. Azida sodica 0,05%. ESTABILIDADE: Os reagentes sao estaveis, mesmo depois de abertos, ate 0 vencimento da data de validade quando armazenado.; entre 2 e 8 C. Entre 20 e 250 C 0 Monoreagente e estavei por 4 semanas .. 0 fabricante garante a qualidade do produto, se este for armazenado como descrito acima e em sua embalagem original. PREPARODO REAGENTE DE USO: o Monoreagente e 0 Padrao estao prol1tos para uso.

METODO: Metodo Enzimatico Colorimetrico com Fator Clareante de Lipides (LCF) FINALIDADE: Metodo enzimatico para a determina,ao de trigliceride:; no soro e plasma. Somente para uso diagnostico IN VITRO. FUNDAMENTO: Os triglicerides sao determinados apos hidrolise enzimatica com lipases. 0 indicador e a quinonimina formada a partir do peroxido de hidrogenio, 4aminoantipirina e 4-c1orofenol sob a influencia catalitii:a da peroxidase.

PRECAU<;:OES: Os cuidados habituais de seguran,a devem ser aplicados l1a manipula,ao do reagente. Todos os reagentes contem azida s6dica como conservante. Nao ingerir ou aspirar. Evitar contato com a pele e mucosa. Os reagentes nao possuem substan('ias contaminantes. Como nao se pode assegurar que arnostras biologlcas e soros controle nao transmitem infec,oes, recomenda-se Inanusea-Ios de acordo comas instru,oes de biosseguran,a. Para descarte segura dos reagentes e materiais blologicos, sugerimos utllizar as regulamenta,oes normativas locais, estaduais ou federais para a preserva,ao ambiental. NOTAS: Para corrigir 0 glicerol livre, subtrair 10 mg/dL (0,11 mmol/L) do valor do trigllcerides calculado. AMOSTRAS BIOLOGICAS: SORO, PLASMA (heparinizado, EDTA) Estabilidade: 3 dias entre 2 e 80 C, 4 roeses a-200 C. Amostras Iipemicas geralmente cau,am turbidez no reagente provocando resultados fa!samente elevados. 0 Tl.:STLlNE Trigllcerldes evita estes falsos resultados por possuir 0 Fator Cla.'eante de Lipides (LeF). 0 LCF tlra totalmente a turbidez causada por amostras lipemicas .

)A amostra = 0,280 )A pad,!o = 0,250

C= C= C= Ou C= C = C=

200 x)A amo"",)A pad,!o (mg/dL) 200 x (0,280/0,250) 224 mg/dL 2,28 x)A amo"",)A pad,!o (mmol/L) 2,28 x (0,280/0,250) 2,6 mmol/L

LINEARIDADE: A rea,ao e linear ate 1000 mg/dL ou 11,4 mmol/L. Amostras com concentra,oes altas devem ser diluidas 1 + 4 com soro fisiologico (0,9%) e testadas nova mente. Multiplicar 0 resultado por 5. INTERFERENCIAS: o teste nao e influenciado por valores de hemoglobina ate 150 mg/dL ou por valores de bilirrubina ate 20 mg/dL. ACido ascorbico pode interferir em concentra,oes superiores a 4 md/dL. AUTOMA<;:AO: Adaptu~ao especial :~cira an.:;lisadorts pode Ser forrlt:cida

Glicerol + ATP Gllcerol-3-fosfato + 02

) Glicerol-3-fosfato + AD GPO ) Fosfato de dihidroxiacetona + H202 POD ) Quinonimina+HCI+H20+ 4-c1orofenol

H202+4-aminoantipirina

quando solicitada.

PROP.1.Ii:DADES: A metodologia permite obter resuitados em curto espa,o de tempo. 0 teste pode ser realizado a 250C ou 370C. SIGNIFICADO CLINICO: OS triglicerldes formam a maior parte do tecido adiposo, constituindo por isso uma forma de armazenamento de energia. o movimento de acid os graxos no organismo se produz com grande rapidez em resposta a diversos estimulos (dieta, atividade flsica, stress, idade, etc). Por este motivo e de se esperar que os triglicerides, um dos mais importantes veiculos para 0 transporte dos acid os graxos, tenham sua concentra,ao modificada em resposta a estes fatores fisiol6gicos. Os triglicerides sao um dado importante para a classifica,ao das hiperlipoproteinemias e na correla,ao que se obsrrva entre seu nivel aumentado e 0 aumento do risco cardiovascular nas muiheres. o valor dos triglicerides encontra-se aumentado nas hiperlipoproteinemias primaria ou secundaria nos tipos I, lIb, III, IV e v. As hiperlipoproteinemias podem estar associ adas a doen,a cardiovascular e ocorrem comumente no diabetes, alcoolismo, p,lncreatite, sindrome nefrotica, gravidez, usa de anticoncepcionais, mieloma multiplo, doen,a de armazenamento de gllcogenio. IDENTIFICA<;:AO E ARMAZENAMENTO: Conservar entre 2 a 8C. Reagentes: Rl - Monoreagente: Contem Tampao Pipes (pH 7,5) 50 mmol/L, 4-clorofenol 5 mmol/L, 4-aminoantipirina 0,25 mmol/L, ions Magne3104,5 mmol/L, ATP 2 mmol/L, L1pases > 1300 U/L, Peroxidase> 500 U/L, gllcerolquinase > 400 U/L, Glicerol 3-fosfato oxidase> 1500 U/L, Azida s6dica 0,05%.

MATERIAlS NECESsARIOS E NAO FORNECIDOS: Espectrofotometro UV/VIS calibrado Cubetas para amostras e reagentes. Pipetas calibradas. Cronometro. Banho-maria/Termostatizador Tubo de ensaio METODO DE ANALISE: A- Leltura em espectrofotometro: Comprimento de onda: 500 nm, Hg 516 nm Cubeta: 1 em Temperatura: 20 a 250 C ou 37C , Medida: Contra reagente branco (RE!). Somente um reagente branco por serie necessaria.

VALORES DE REFERENCIA PARA RISCO ATEROSCLEROTICO: Suspeito: acima de 150 mg/dL ou 1,71 mmol/L Aumentado: acima de 200 mg/dL ou 2,28 mmol/L CONTROLE DE QUALIDADE: Antes de serem liberadas para consumo as materias primas e os reagentes sao avaliados pelo Departamento de Controle de Qualidade da In Vitro. Para controle e verifica,ao do desempenho do kit sao utiiizados os soros controle de origem roacional fornecidos pel a SBAC e SBPC, e os de origem Internacional referenciados pela General Medical Council of The German Federal Republic. Todo soro controle contendo valores determinados por este metoda pode ser empregado. Recomendamos 0 usa dos soros controle TESTLINE SORO CONTROLE NORMAL (cat. nO T200), TESTLINE SORO CONTROlE PATOLOGICO(cat.no T210). RECUPERA<;:AO EM SOROS CONTROLES: Soros controle comer;:ials dlsponiveis foram usados. Os soros controle foram reconstituidos/preparados de acordo com as instru,oes do fabricante. Cinco determina,oes de cada soro controle foram realizadas. A media dos valores foi calculada e com parada com os valores tabelados. Tambem imprecisoes foram calculadas com 5 determina,oes que foram encontradas em boa concordancia com os estudos de imprecisao.

Pipetar dentro cubetas Amostra/Padrao Monoreaoente

das

Reagent:e Branco (RB)

-----

Amostra ou Padrao 10:L 10001000 :L

1,000 :L

Homogeneizar. Incubar por 10 minutos entre 20-250 C, ou por 5 minutos a 37C. Ler a absorbancia em no maximo 60 minutos contra 0 Reagente Branco.

MEDIA 68,30

CV(%) 0,61

Amostra (pool medio) Amostra (pool alto) REPRODUTIBILIDADE: Amostra (pool baiXO) Amostra (pool medio) Amostra (pool alto)

60 60

170,73 970,80

0,87 3,34

0,51 0,34

Reg. M.S. 10302240342 SIGNIFICADO DOS SiMBOLOS UTILI;~ADOS NOS ROTULOS DO PRODUTO

N 60 60 60

MEDIA 67,64 169,02 963,34

DP 0,73 1,71 7,5!j

CV(%) 1,08 1,01 0,78

SENSIBILIDADE: o limite de detec,ao foi calculado com 20 determina,o~s de uma amostra triglicerides-zero. A media foi - 0,16 mg/dL e 0 desvio oadrao respectivo foi 0,47. Tipicamente 0 limite de detec,ao pode ser expresso como 3 vezes 0 desvio padrao de uma amostra-zero, que significa:

COMPARACAODOS METODOS: o kit TESTLINE Triglicerides foi comparado contra 0 metodo de triglicerides (Boehrin~er Mannheim) disponivel comercialmente. Baseado nos resultados oe 50 amostras clinicas ambos os metod os mostraram uma excelente correla,ao. 0 coeficiente de correla,ao fol: r = 1,tOO e a equa,ao de regressao linear foi: Y = 1,025 X + 1,715. OBSERVACOES: A limpeza da vidraria deve ser feita com detergente neutro. 0 enxague deve ser exaustivo sendo 0 ultimo enxague com agua destilada ou deionizada. Tra,os de amonia nos materia is utilizados interferem decisivamente na rea,ao. A rigorosa observa,ao da temperatura, do tempo de incuba,ao, da limpeza da vidraria, da estabilidade dos reagentes e da pipetagem e de extrema importancia para se obter bons resultados. -- --NOTe---ste---VOiumeReaQen~Monoreagente(Rl ) 1 x 100 mL 100 Padrao (R2) 1 x 3 mL Monoreagente( R1) 2 x 200 mL 400 Padrao (R2) 1 x 3 mL

"-Cat. T160 T170

NO

DEPARTAMENTODE SERVICOS ASSOCIADOS: Para esclarecimentos de duvidas do consumidor quanta ao produto: Telefax (031) 38346400; e-mail: nucleo@invltro.com.llr. No DO LOTE, DATA DE FABRICACAO, DATA DE VALIDADE VIDE ROTULO DO PRODUTO. BIBLIOGRAFIA: 1. Schettler, G., NOssel, E., Arb. Med. Soz. Med. Pray. ned. 10,25 (1975). 2. Jacobs, N. J., VanDemark, P. J., Arch. Blochem. Biophys. 88, 250-255 (1960). 3. Kodistschek, L. K., Umbreit, W. W., J. Bacteriol. 68, 1063-1068 (1969). 4. Trinder, P., Ann. Clin. Biochem. 6, 24-27 (1969).

Produzldo e Dlstrlbuido por Nucleo Olagnostico ProdutClsEspecializados Ltda - Rua Sao Paulo NO377 - Salas 06 a 09 - Bairro Amazonas - Itabira - MG CEP: 35900-373 - Telefax: (31) 3834-6400 E-mail: nucleo@invitro.com.br - CNPJ: 00.560.477/0001-21 Farm. Resp.: Geraldo Celio Fontes Lopes - CRF-MG: 4225

INSTRUC;OES DE

usa

ALBUMINA
(Verde de Bromocresol) - Metodo colorimetrico para a determina(fao da Albumina.
FINAL/DADE e um sistema que se destina a determinar;;ao da albumina no soro sanguineo,

o conjunto

PRINCiPIO DE AC;Ao A albumina forma um complexo com 0 verde de bromocresol em pH acido modificando a absorr;;ao espectral deste corante. E 0 princfpio do "erro proteico dos indicadores", A absorr;;ao em 630 nm do complexo e proporcional a concentrar;;ao de albumina na amostra. 0 metodo proposto e facilmente automatizavel, adaptando-se a todos os analisadores automaticos disponiveis. REAGENTES CODIGO 02B Conjunto para 250 determinar;;6es de albumina, contendo: 1.Reagente de Cor-Estoque: 01 frasco com 50 mL de solur;;ao tamponada em pH 3,80, 10x concentrada, contendo verde de bromocresol 1,7 mmol/L e azida sodica 8,5 mmollL. 2. Padrao: 01 frasco com 2,0 mL de solur;;ao aquosa de albumina bovina 3,8 g/dL, con tendo azida sodica 8,5 mmol/L, MATERIAlS NECESsARIOS Espectrofot6metro Centrifuga Banho-maria Cron6metro Vidraria
F'lpela5 Illalloal5

Padrao (2) e fornecido em concentrar;;ao usual fixa 0 desempenho do ensaio pode ser afetado se este reagente for modificado ou nao for armazenado nas condir;;6es recomendadas, Ver cuidados no armazenamento e trans porte dos reagentes. Usar luvas descartaveis quando manusear reagentes, Nao comer, beber, fumar, armazenar ou preparar alimentos, ou aplicar cosmeticos dentro da area de trabalho onde reagentes e amostras estiverem sendo manuseados.

Soro. Sob refrigerar;;ao, a albumina no soro e estavel por tres dias, Em virtude de sua sensibilidade, 0 metodo propos to nao e adequado para a dosagem de albumina em outros liquidos biologicos, Todo 0 material biologico deve ser processado como sendo potencial mente contaminante, Usar luvas descartaveis durante a manipular;;ao, As amostras devem ser descartadas, apos 0 use, em recipientes especfficos. Nao dispensar em coletores de lixo comuns ou nas redes de agua e esgoto, Lavar sempre as maos apos trabalhar com material potencial mente infeccioso,

NAG FORNECIDOS

Ler cuidadosamente

as instrur;;6es desta bula.

OU aUlolllaticas

Agua destilada ou deionizada CUIDADOS NO ARMAZENAMENTO E TRANS PORTE DOS REAGENTES As datas de fabricar;;ao e validade aparecem no rotulo da embalagem, Nao usar reagentes cuja data de validade tenha expirado. Todos os reagentes devem ser mantidos sob refrigerar;;ao, na faixa de 2 a 8C. Nao congelar. Manter ao abrigo da luz, Antes de serem abertos, os reagentes podem ser transportados na faixa de temperaturas entre 10 e 18C, ate um limite de 4 dias.

Preparo do Reagente de Cor de Uso: Transferir 0 conteudo do frasco Reagente de Cor-Estoque llilJara um balao volumetrico de 500 ml e completar 0 volume com agua destilada ou deionizada, Armazenar em frasco de vidro ambar. Este reagente e estavel 6 (seis) meses entre 2 e 8C. Dosagem (soro): Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: Branco Amostra Padrao Reaq. Cor de Uso

,- ... -

Amostra 0,01 mL 2,0 mL

Padrao

.
0,01 mL 2,0 mL

2,0 mL'"

Somente para usa diagnostico "in vitro".

o uso de agua deionizada na diluir;;ao do Reagente de Cor-Estoque (1) oriunda de colunas saturadas, pode provocar a contaminar;;ao irreversivel do reagente, Evitar contaminar;;ao com ions metalicos ou agentes oxidantes, espectrofot6metro ou mesmo equipamentos automatizados devem ficar livres de contaminar;;ao microbian a, serem calibrados corretamente e receberem manutenr;;ao de acordo com as instrur;;6es do fabricante. Nao misturar ou trocar diferentes lotes de reagentes, Evitar contaminar;;ao microbiana dos reagentes e nao utilizar reagentes q'ce ten ham sinais de contaminar;;ao ou precipitar;;ao. Usar pipetas de vidro e ponteiras descartaveis separadas para cada amostra, controle (se utilizado) e reagente, e nao trocar as tampas dos frascos dos reagentes, a fim de evitar contaminar;;ao cruzada, 0 que poderia causar resultados err6neos. Nao dispensar os reagentes em tubular;;ao contendo ferro galvanizado. Os reagentes 1 e 2 contem azida sodica, irritante para pele e mucosas. Caso haja contato com esses reagentes, lavar imediatamente a area afetada com agua em profusao Em caso de ingestao acidental, procurar auxilio medico imediato.

Homogeneizar bem e aguardar 15 minutos na temperatura ambiente, Determinar as absorbancias do teste e do padrao em 630 nm, acertando o zero com 0 branco, A cor formada e estavel 3 horas. CALCULOS - Albumina(g/dL) = (Absorbancia da amostra 7 Absorbancia do Padrao) x-3,8 - Fator de calibrar;;ao = 3,87 absorbancia do padrao - Albumina (g/dL) = Absorbancia da amostra x Fator - Albumina (mmoI/L) = g/dL x 0,145 Exemplo: - Absorbancfa do teste = 0,280 Absorbancia do padrao = 0,250 - Albumina (g/dL) = (0,280 7 0,250) x 3,8 = 4,26 g/dL - Fator de calibrar;;ao = 3,8 7 0,250 = 15,2 - Albumina (g/dL) = 15,2 x 0,280 = 4,26 g/dL L/NEARIDADE A rear;;ao e linear entre 0,5 e 6,0 g/dL. Para valores acima de 6,0 g/dL, diluir a amostra 1:2 com solur;;ao de NaCI 0,85% e repetir a dosagem, Multiplicar 0 resultado obtido por 2,

CONTROlE

DE QUALIDADE

deve ter como pratica de rotina 0 usa de soros controle comerciais, Preferivelmente deve participar de programas de controle externo de qualidade, a exemplo daqueles oferecidos pela SBAC e SBPC, VAlORES DE REFERENCIA Soro: 3,5 a 5,5 g/dL,

o laborat6rio

ASSESSORIA TECNICA Para eselareeimentos de duvidas e assessoria teeniea quanta ao produto, ligue para 0 Servi<;o de Atendimento ao Cliente (SAC) :

(Oxx11) 5183 27 22 e-mail: comercial@interteck.com.br

Produ<;ao/Distribui<;ao: Katal Bioteenol6giea Ind, Com, Ltda, Av. Jose Candido da Silveira, 2100 - CEP 31170 - 000 Belo Horizonte - MG - Brasil- CNPJ: 71.437.917/0001-04 Responsavel Teenieo: Leonides Rezende Jr. -CRMMG 7382 Registro ANVISA 10377390077 Edi93a desta InstrU93a de Usa Fevereiro/05

Recupera~ao : 101,7%, Coeficiente de varia~ao intra-ensaio (repetitividade): A realiza9ao de 20 determina90es de uma mesma amostra com valor dentro da faixa de refereRcia, mostrou um coeficlen.te de variE9~o ig~al a 2,01%, Coeficiente de varia~ao inter-ensaio (reprodutibilidade): A realiza9ao de 20 determina90es de uma mesma amostra com valor dentro da faixa de referencia, mostrou um coeficiente de varia9ao igual a 2,41%, Especificidade analitica: A compara9ao com metoda similar validado (que tambem utiliza a metodologia do verde de bromocresol) demonstrou um coeficiente de correla9ao, r, igual a 0,991 a partir da analise de amostras aleatorias oriundas de pacientes de ambulatorio, A equa9ao de regressao obtida foi : y = 0,95x + 0,16 Sensibilidade analitica: 0 metodo apresenta uma varia9ao de absorbancia em 630 nm igual a 0,076 em cada acrescimo de 1 9 /dL na concentra9ao de albumina, 0 limite de detec9ao do metodo e igual a 0,5 g/dL, INTERFERENTES Acido ascorbico, mesmo em concentra90es elevadas (acima de 20 mg/dl), hemoglobina ate 200 mg/dl , hiperlipemia e bilirrubina ate 20 mg/dl nao interferem, REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Doumas,B,T"Watson,WA & Biggs, H,G, Clin,Chim, Acta 31:87,1971 2. Gasbarro, et.a!. Clin, Chim. Acta 36:255,1972 3. Bartholomew, RJ. & Delaney A,M, Proc, Austral Assoc, Clin, Biochem,1:,214,1966 4. Katal: Dados de arquivo

Codigo 02B

N de testes 250

Volume / teste 2,0 mL

CONDIr;OES DE GARANTIA DA QUALIDADE DO PRODUTO

o desempenho deste sistema diagnostico, medido pelas propriedades descritas nesta Instru9ao de Usa, esta garantido ate a sua data de vencimento, desde que obedecidas as seguintes condi90es:
1. 2. 3. A adesao estrita, pelo usuario, ao quadro de procedimento tecnico, As condi90es de armazenamento estarem de acordo com 0 recomendado nesta Instru9ao de Uso, Os materiais necessarios e nao fornecidos com 0 produto, estarem em boas condi90es de usa,

AUTOMAr;Ao Aplica90es solicitadas, para analisadores automaticos estao disponiveis, se

Tf!~t'
.

STD - Padrao sadica 0,1%

de Acido

Urico:

Acido Urico 8 mg/dL ou 476 ilmol/L;

Azida

Homogeneizar, incllbar por 10 minutos a 20 - 250C ou por 5 minutos a 370C. Medir a absorbancia da amostra/STD contra 0 reagente branco em no maximo 15 minutos I\A CALCULO DA CONCENTRAC;AO DE DO ACIDO URICO: Aamostra = absorbancia da amostra ASTO = absorbancia do padrao 8 = concentra<;ao do padrao (mg/dL)

ESTABILIDADE: Os reagentes sao estaveis ate a data de validade impressa no rotulo, quando armazenado de 2 - BOC. Se aberto, evitar contamina<;ao. 0 RGT e estavel por 2 semanas a 15-250C, protegido da luz. o fabricante garante a qualidade do produto, se este for armazenado como descrito acima e em sua embalagem original.

SORO, PLASMA METODO: Teste Enzimatico-Colorimetrico C=8x com Fator Clareante de Upedes (LCF). PRECAUC;OES: Os reagentes nao necessitam ser tracados como amostras contaminantes, Os cuidados habltuais de seguran<;a devem ser aplicados na manipula<;ao do reagente, 0 padrao contem azida sodica como conservante. Nao ingerir au aspirar, Evitar cantata com a pele E: mucosa; Como nao se pode assegurar que amostras biologicas e soros controle nao transmitem infec<;5es, recomenda-se manusea-Ias de acordo com as instru<;6es de biosseguran<;a; Para 0 descarte segura dos reagentes e materiais biologicos, sugerimos utilizar as regulamenta<;6es normativas locais, estaduais ou federais para a preserva<;ao ambiental. AMOSTRA BIOLOGICA: Soro, Plasma (heparina, EDTA), urina. 0 transporte da amostra biologica, ouando necessario, deve ser feito pel a rota mais direta e evitando sua chegada nos finals de semana e ferlados no local de destino. A amostra biologica deve ser acondicionada em recipiente hermeticamente fechado, em segllida embalada de forma a mante-Ia em temperatura recomendada (2 a 80C) desde 0 remetente ate a entrega ao destlnatario, Esta amostra deve ser identificada com 0 simbolo de amostra biologica. INTERFERENCIAS: I Amostras lipemicas geralmenl1e geram turbidez na mistura amostra/reagente levando a resultados falsamente elevados. 0 Uric Acid liquicolor evita favoravelmente estes resultados atraves do fator clareante de lipedes (LCF), 0 LCF clareia totalmente a turbidez causada par amostras Iipemlcas (ate 1000 mg/dL). 0 teste nao e influenciado por hemoglobina ate 100 mg/dL ou por trlglicerides ate 2500 mg/dL. Soros ictericos e de pacientes em terapia com vitamina C nao devem ser usados no teste. MATERIAlS NECESsARIOS Fot6metro UV/VIS, Pipetas Tubos de ensaio E NAO FORNECIDOS:
Aamostra ASTD

[rng/dL]

ou

FINALIDADE: Reagentes para a determina<;ao quantitativa soro, plasma e urina humana. Somente para uso diagnostico IN VITRO.

C = 476 x

8.amostra

[~mol/L]

do acido crico presente no

ASTO URINA C = 88 x
~amostra

FUNDAMENTO: Determina<;ao do acido crico pela rea<;ao com a uricase. 0 H,O, formado reage sob a catalise de peroxidase com 3,5-dicloro-2hidroxibenzenosulfonico acido (DCHBC) e 4-aminofenazona (PAP) para dar uma cor vermelho violeta, quinonimina como indicador.

[mg/dL]

ou

ASTO C = 5235 x
Aamostra ASTD

[~mol/L]

Utllizando 0 fator de calibra<;ao (Fc): Fc = 8 : ASTO Acido crico (mg/dL) = Aa x Fc Exemplo: = 0,118 ASTD= 0,157
Aamostra

SIGNIFICADO CLINICO: Numerosas doen<;as, condi<;6es fisiologicas, mudan<;as bioquimicas e mesmo fatores sociais e comportamentais estao associ ados com as alterac;5es na (oncentra<;ao plasmiitica do urato. 0 aumento e mais frequente do que 0 decrescimo. Entre as etiologias mais comuns da hiperuricemia est a a fah'!ncia renal, a cetoacidose, 0 excesso de lactato e 0 uso de diureticos. A hiperuricemia tambem tem uma rela<;ao positiva com a hiperglicemia, obesidade, aterosclerose, diabetes mellitus, hipertensao, cia sse social, exerdcio. A gota e uma desordern do metabolismo das purinas ou da excre<;ao renal do acido crico caracterizada por hiperuricemia, precipita<;ao do urato monossodico como um deposito prlncipalmente nas juntas e cartilagem periarticular, ossos, bursa e tecidos subcutaneos; ataques clinicos recorrentes de artrite; nefropatia e frequentemente nefrolitiase. A gota e frequentemente dividida como prima ria, secllndaria ou idiopatica com base se a doen<;a for decorrente de um erro inato do metabolismo diretamente envolvido com a sintese de excre<;ao de acido crico ou se esta associ ado com hiperuricemia decorrente de alguma das outras numerosas etiologias. Os homens constituem mais de 90% de todos os casos de gota. A gota e rara nas mulheres antes da menopausa. As causas de hipouricemia sao relativamente pOllcas, ocorrendo na sindrome de Falconi, doen<;a de Wilson, doen<;a de HodgKin, mieloma mcltiplo e carcinoma broncogenico. IDENTIFICAl;AO Conservar entre Reagentes: E ARMAZENAMENTO: 2 a saC

AUTOMAC;AO: Adapta~ao especial para analisadores consumidor quando solicitada.

esta disponivel

e sera enviada

ao

LINEARIDADE: teste e linear na concentra<;ao de 20 mg/dL au 1190 ~mol/L, Dlluir amostras com uma concentra<;ao alta 1 + 1 com salina fisiologica (0,9%), Multlplicar 0 resultado por 2, VALORES DE REFERENCIA: HOMEM: 3,4 - 7,0 mg/dL ou 200 - 420 ~mol/l MULHER: URINA: 2,4 - 5,7 mg/dL ou 140 - 340 ~mol/L 250 - 750 mg/24h 1,5 - 4,5 mmol/24h,

Leitura em espectrofotometro: Comprimento de onda: 520 nm, Hg 546 nm Cubeta: 1 cm Temperatura: 20-250C ou 370C Medida: Contra reagente branco. Somente um reagente necessario.

CONTROLE DE QUALIDADE: Todo soro controle contendo valores determinados para 0 Acldo Urico, pelo metodo enzlmatico-colorimetrico, pode ser empregado. Recomendamos 0 usa de nossos soros controle HUMATROL e SERODOS. branco por serie e RECUPERACAO EM SOROS CONTROLES: Vr. Alvo Faixa Resultado mg/dL mq/dL mq/dL 384 2,83 - 4 85 400 103 845-122 10,29 424 4,24 348 - 50 Desvio (%) 422 -006 0,00

RGT - Reagente Enzimatico: Aminofenazona 0,3 mmol/L; Peroxidase> 1000 U/L.

Tampao fosfato 50 rnmol/L DCHBS 4 mmol/L; Uricase

(pH 7,0); 4> 200 U/L;

Pi etar nas cubetas Amostra/STD RGT

N 6 6 6

Media (ma/dU 248 822 2189

DP (ma/dU 0,062 0112 0164

% CV 2,49 1 37 075

SIGNIFICADO PRODUTO

DOS

SIMBOLOS

UTILIZADOS

NOS

ROTULOS

DO

N 6 6 6

Media (ma/dU 248 822 21,89

DP (ma/dU 0116 0292 0,487

% CV 469 3 56 2,23

COMPARAl;AO DOS METODOS: o kit TESTLINE Acida Urico Enzirmitico foi comparado contra um metoda
ckido urico enzimatico disponivel comercialmente. Soras contrale bem como

amostras de pacientes foram empregadas na camparaC;aa. Os resultadas faram avaliados pelos metodos. A regressao linear obtida foi a seguinte:
N

55

R = 0,998 Y = 0,968*x + 0,120 Xmedia = 6,02 mg/dL Y media = 5,94 mg/dL Os metadas foram camparadas empregando 1+10). Os parametras estatisticas faram as seguintes:
N

amostra

de urina

(diluida

R = 0,999 Y = 1,039*x - 2,532 Xmedia = 43,11 mg/OL Y media = 42,25 mg/dL Ambos as metodos mostraram uma boa concordancia e naa se observau nehum desvia significativo com as amostras especificas. APRESENTACAO NOCAT T010 T020 DO KIT: REAGENTE RGT STD RGT STD

54

VOLUME 1 x 100 mL 1 x 2 mL 2 x 125 mL 1 x 3 mL

NOTESTES 100 250

BIBLIOGRAFIA: 1. Barham, D., Trinder, P., Analyst, 97,142 (1972) 2. Fossati, P. et aI., Clin. Chem. 26/2, 227 (1980) 3. Thefeld, L., et ai, Dtsch. Med. Wschr., 98, 380-384 (1973) DEPARTAMENTO DE SERVIl;OS ASSOCIADOS: Para esclarecimentos de duvidas da consumidor quanta ao praduto: Telefax (31) 3067-6400 E-mail: nuclea@invitro.com.br N.D DO LOTE, DATA DE FABRICA<;;AO, DATA DE VALIDADE VIDE ROTULO DO PRODUTO.
Produzido

e Distribuido por Nuclea Diagn6stica Pradutos Especializados Ltda - Rua Sao Paulo N 377 - Salas 06 a 09 - Bairra Amazanas - Itabira MG - CEP: 35900-373 - Telefax: (31) 3067-6400 E-mail: nuclea@invitro.com.br - CNPJ: 00.560.477/0001-21 Farm. Resp.: Geraldo Celio Fontes Lapes - CRF-MG: 4225 Reg. M.S. 10302240360

CAT NQ01600

Samente para Usa in Vitro

CREATININA
METODO CINETICO OU DlRETO SEM DESPROTEINIZACAO
0

o teste

DEFINI<;:AO e feito para determinar

produto final do catabolismo

muscular.

FISIOPATOLOGIA Os rins filtram a creatlnina e ela e excretada pela urina. Essa excre'Yao e usuaimente proporcional a massa muscuiar do individuo. Este teste e considerado confiavel em doen'Yas renais, ja que, a Creatinina e filtrada no glomerulo e seu aumento e observado posteriormente ao aumento do nitrogElnio ureico sanguineo (BUN). A creatinina e BUN frequentemente sac usados em conjunto no diagnostico de problemas renais. SIGNIFICADO CLiNICO Valores elevados - deficiencia renal aguda ou cronica, lupus' eritematoso, gigantismo, acromegalia, choque, cancer gastrointestinal, cancer de bexig<>, leucemia, doen'Ya de Hodgking's, hipertensao, infarto agudo do miocardio, nefropatia diabetica, etc. Val ores baixos - gravidez, distrofia muscular, eclampsia, etc. INTERFERENCIAS Falsos valores elevados - grande consumo de carne, anfotericina B, cefalozina, cefalotina, c1oranfenicol, dextran, furosemida, gentamicina, kanamicina, meticilina, vitamina C, barbituratos, litlo, mitramicina, metildopa, trlanterene, glicose, proteina, corpos cetonicos. METODO Cinetico ou Colorimetrico

TECNICA METODO DIRETO (PONTO FINAL) Em 3 tubos de ensaio marcados, B (Blank), P (Padrao) colocar: B P 0 Agua oeionizada 100 pL Padrao 100 ~IL Amostra 100 pL Rvo. Trabalho 1 mL 1 mL 1 mL

e 0 (desconhecido),

Misturar e incubar por 10 minutos em banho-maria a 37C. 0 nlvel da agua do banho deve ser superior ao do Iiquido dos tubos de ensaio. Retirar. Esfriar a temperatura ambiente e antes de 15 minutos, ler 0 P (padrao) e 0 (desconhecido) em Espectrofotometro a 510 nm ou em colorimetro com filtro verde (500-520 nm), zerando 0 aparelho em absorbancia com B (blank). Adicionar: Rvo. Acidificante 50 pL no B 50 ~IL no 0 Misturar. oeixar os tubos por 5 minutos temperatura ambiente e voltar a ler 0 O2 ' zerando 0 aparelho com B. A cor final da rea'Yao e estavel por 6 horas.

CALCULOS 1jCreatinina

no soro mg/dL

=f

(01 - 02) 2 rngidL

direto sem desproteiniza'Yao. 2) Creatinina na urina g/24 horas

L1NEARIDADE Na tecnica direta a rea'Yao e linear ate 10 mg/dL. Na tecnica cinetica a rea'Yao e linear ate 6 mg/dL. Para valores superiores, diluir a amostra 1:2 ou 1:4 com agua deionizada e repetir a rea'Yao. Corrigir os calculos multiplicando 0 resultado pelo fator de dilui'Yao usado. COMPOSI<;:AO DO KIT Reativo Padrao CAT NQ01501/01601 Solu'Yao de Creatinina (2 mg IdL) Volume =,30 mL Reativo Acido Picrico CAT NQ01602 Solu'Yao de Acido Picrico 41,4 mmol/L Volume = 120 mL Reativo Tampao CAT NQ01603 So!uyao de Clielna - ~bm~1 mal/l Volume = 120 mL Reativo Aeidifieante CAT NQ01604 Solu'Yao Acida Volume = 15 mL PREPARACAO DO REATIVO DE TRABA!-HO Misturar partes iquais do Reativo Aeido aeondieionar a mistura em fraseo plastico. prepara"ao.

--P-

01

02

V = Volume da diurese em Iitrosl 24 horas

0,020 g/L = concentra'Yao do Padrao 50 = fator de dilui'Yao TECNICA METODO CINETICO Equilibrar 0 Reativo de Trabalho temperatura da rea'Yao (25C) antes de agregar a amostra, zerar 0 aparelho em absorbancia com agua deionizada Em 2 tubos de ensaio mareados P (padriio) e 0 (oesconhecido), colocar: P 0 Rvo. de Tnlbalho 1 ml _1 [Ill. Padrao 100 ~IL Amostra 100 ~IL Misturar imediatamente, disparando ao mesmo tempo 0 cronometro e colocar novamente os tubos no banho. AOS 30 SEGUNDOS EXATOS, medir a Absorbancia (P1 e 01) e continuar a incuba'Yao. Medir novamente as Absorbancias (P2 e 02) aos 5 minutos. (EXATAMENTE 4 MINUTOS E 30 SEGUNDOS APOS A PRIMEIRA LEITURA).

Pierieo Anotar

e Reativo Tampao, no fraseo a data de

CALCULOS 1) Creatinina

ryJATERIAL NAO FORNECIDO (NECESSARIO) Agua deionizada ou destilada reeente. Espeetrofotometro ou eoiorimetro. Mieropipetas, pipetas e provetas eapazes de medir os volumes tecnicas. Frasco piastico. Tubos de ensaio para 0 aparelho a ser utilizado. Banho-maria a 37C. Relogio ou cron6metro

no soro Creatinina

mq/dL = (02 - 01)

x f 2 rngidL

indicados

nas

2) Creatinina na urina Creatinina g/24 horas 3) oepura'Yao de Creatinina

VIDA UTIL E ARMAZENAMENTO kit e estavel a temperatura ambiente ate a data do seu vencimento impressa na caixa. Reativo de Trabalho a temperatura ambiente e ao abrigo da luz e estavel por 10 dias a partir da data da sua prepara'Yao.

02 - 01 x V P2 - P1 endogena (AMBOS METODOS) g/24 horas mg/dL x 10 g/24 horas mg/dL x 10 x 694 mUmin

o o

PRECAU<;:OES kit nao contem derivados de sangue humano, porem, considerar qualquer amostra de paciente como potencialmente infectante. Evitar 0 contato direto com as amostras. Nao pipetar reagentes ou amostras com a boca . oescartar as sobras das rea'Yoes de acordo com as Boas Praticas de Laboratorio em local proprio para materiais potencialmente infectantes.

oCE mUmin = Creatinina na urina Creatinina no soro onde: oCE mUmin = Creatinina na urina Creatinina no soro = Creat. Urlna Creat. Soro x

x 1000 mL x 1000 mg/g 1440 min/24 horas

1.000.000 14400

AMOSTRA Sora - obtido da maneira usual. Pode ser conservado ate 24 horas apos a coleta, refrigerado. Urina - obter urina de 2 ou 24 horas, empregando um recipiente perfeitamente limpo e mantido no refrigerador durante a coleta. Medir 0 volume final (diurese), dlluir uma aliquota a 1:50. No caso de diurese de 2 horas, multiplicar 0 volume medido por 12 para calcular a Creatinina de 24 horas. As urinas podem ser mantidas ate 4 dias no refrigerador, sem uso de conservante.

VALORES DE soro = 0,6 a 1,4 urina = 0,9 a 1,5 oCE = 80 a 140

REFERENCIA mg/dL g/24 horas mUminuto (media 125 mUminuto)

para adultos ate 60 anos.

APRESENTA<;:AO Kit suficiente para 240 rea'Yoes BIBLIOGRAFIA 1. Biggs, H. G. & Cooper, J.M. - Clin. Chem. 7/6 : 655 (1961) 2. Martinek, RG. - Amer. Med. Technol. 32/6 : 700 (1970)

REG. M. S NQ 10246810009 LABORLAB PRODUTOS PARA LABORATORIOS LTDA. Fone: ( 11) 6480-1306 ( Central de Atendimento ao Cliente)

REV. 01 Estr. do Capao Bonito, 937 07263-010Guarulhos - SP CNPJ 72807043/0001-94 Resp. Tee.: Ugia Monaro da Silva CRBM 1!! Regiao NQ2573