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Figura 1-4 Tincin ptima de un frotis de sangre periftrica que demuestra el rea apropiada en la cual realizar la determinacin del recuento diferencial, la morfologa de los leucocitos y la estimacin del nmero de plaquetas. Se muestra slo el
.,
centro del campo; un campo completo contendra entre 200 y 250 eritrocitos
(x1.000).
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para.frotis de sangre periferica o mdula sea. Ambas conrienen eosina y azul de metileno; se denominan tinciones polinmicas. Las clulas se fijan sobre el portaobjetos de vidrio con el meranol de la tincin. Las reacciones de tincin dependen del pH; la tincin real de los componenres celulares sucede cuando se agrega una solucin amortiguador a (pH 6,4) a la tincin. El azul de metileno libre es bsico y tie de azui los componenres celulares cidos como, por ejemplo, el RNA. La eosina libre es -cida y tie de rojo los componenres bsicos, .orrr 1" h.-ogl"Uina o ios grnulos eosinfilos. Los neutr-filos poseen grnulos citoplasmtico, q,r. ,i.rr.n pH neutro y admiten algunas caractesticas de ambas tinciones. Los detalles de los mro-
por lo tanto,
dos especficos de tincin de frotis de sangre periferica o mdula sea, incluidos ios mtodos automatizados, pueden hallarse en un libro de texto de hematologa. Un frotis teido de maneraadecuada (Figura 1-4) tiene las siguieites caracrersricas:
1. Los eitrocitos deben ser de color rosa a salmn. 2. Los ncleos son de color azul oscuro a violeta. 3. Los grnulos citopiasmticos de los neutrfilos son de color lila. 1. !* grnulos citoplasmticos de los basfilos son de color azul oscuro a negro. I' Los grnulos citoplasmticos de los eosinfilos son de colo rojo a anaranjo. 6. El rea enrre las clulas debe estar limpia y libre de precipitados de colorante.
Es necesario contar con un extendido bien teido para lograr una interpretacin exacta de la morfologa celula. Los mejores resultados de la tincin se obtienen a partir de frotis recientemente preparados en un perodo de2 a3 horas de recolectada la sangre. Los fotis deben dejarse secar completamente antes de teirse. Las razones ms frecuentes de una tincin defectuosa de fotis se enumeran en el recuadro 1-1, por 1o que ste puede ser utilizado como gua de solucin de problemas.
un proceso de vaios
frotis, incluida la distribucin anormal de los eritrocitos que sugiere la presencia de rouleaux (o autoaglutinacin) o la de un nmero desproporcion"do . grr.rd., clulas nucleadas (p. ej., monocitos o neutrfilos) en los bores del extendido. "Si .r,o ltimo sucede, debe prepararse otro frotis. Adems, el examen del frotis con objetivo 10x permite la rpida deteccin de grandes clulas anormales, como blastos, linfotos
,.".ti
ro. y parsitos.