Unidad 3: BIOQUMICA METABLICA APLICADA

Captulo 7: Bioqumica de Forrajes Leccin 31. Fotosntesis, Redes alimentarias y flujo de energa Siguiendo la pista a la fuente ltima de energa utilizada por un organismo determinado en su hbitat natural, por ejemplo un zorro en un dominio dado de bosque, encontraramos que existe una jerarqua de organismos, llamada cadena alimentaria, o trfica, que provee al zorro de la energa y de los materiales necesarios para sustentar su vida. Esta cadena alimentaria podra empezar con las clulas fotosintticas de las plantas verdes, que convierten el Gas carbnico (CO2) en material celular nuevo. La planta puede, a su vez, ser consumida por larvas de insectos que, del mismo modo, pueden ser consumidas por sapos o pjaros que, a su vez pueden ser consumidos por el zorro. En una comunidad ecolgica dada de organismos vivos, se interconectan entre s muchas cadenas alimentarias individuales, formando lo que se llama una red alimentaria red trfica. Tal red alimentaria est formada por varias capas de organismos. En primer lugar, tenemos a los productores, aquellas clulas que pueden utilizar las formas ms simples del carbono procedentes del medio ambiente, tales como el (CO2), Despus, tenemos una capa primaria de consumidores, que se alimentan de los productores, seguida de ulteriores capas de consumidores. Finalmente, para completar el ciclo, estn los desintegradores: bacterias y hongos, que provocan la descomposicin y putrefaccin de los consumidores muertos y que, de este modo, devuelven al suelo y a la atmosfera formas simples de carbono. Los organismos vivos se pueden clasificar en dos grandes grupos segn su posicin en la red alimentaria: auttrofos y hetertrofos. Organismos auttrofos (el trmino significa que se autoalimentan) son aquellos que pueden utilizar formas simples de carbono, a partir de los cuales elaboran todos sus componentes celulares. Los productores situados en la base de la red alimentaria son auttrofos; entre ellos estn includas muchas bacterias y algas, as como pantas superiores. Los organismos hetertrofos (que se alimentan por otros ), por otra parte, no pueden utilizar formas simples de carbono, tales como (CO2), y que requieren formas ms complejas: molculas orgnicas como la glucosa(C 6H12O6). Los consumidores y desintegradores de la red alimentaria son hetertrofos y dependen, en ltima instancia, de los auttrofos para generar los complejos nutrientes que necesitan.

Examinemos ahora esta red alimentaria e investiguemos las fuentes de energa para cada capa de organismos. Al hacerlo, encontraremos que la gran mayora de los organismos auttrofos productores obtienen su energa de la luz solar, la cual utilizan para convertir el Gas carbnico en materiales celulares ms complejos mediante la fotosntesis. As, la mayor parte de los productores son auttrofos fotosintticos. Pero cuando examinamos las capas sucesivas de consumidores, encontramos que ninguna de ellas tiene la capacidad de utilizar energa luminosa. Ms bien, la mayor parte de ellos obtienen la energa que necesitan mediante la combustin de molculas orgnicas complejas, tales como la glucosa, obtenidas a partir de los productores que ellos consumen. En este proceso, que requiere Oxgeno y que se llama respiracin, la molcula sencilla y pequea de anhdrido carbnico (CO2), es el producto final. Las clulas heterotrficas, por lo tanto obtienen energa mediante la degradacin de molculas nutrientes complejas a formas ms simples En cada nivel de la red alimentaria se consume energa para realizar diversas clases de trabajo biolgico, tal como la sntesis de material celular nuevo a partir de precursores simples, el movimiento de materiales en contra de gradientes y el trabajo de contraccin o movimiento. Sin embargo, en cada nivel de la red alimentaria encontramos que hay prdidas por degradacin, de tal modo que cada vez que tiene lugar algn proceso fsico o qumico hay una conversin incompleta de energa de una clase en otra. Como resultado, parte de la energa hecha aprovechable para cada capa de organismos es disipada en el medio y, por lo tanto no es utilizable para realizar trabajo. Solamente una pequea fraccin de la energa solar absorbida por los productores en la capa bsica de la red alimentaria alcanza siempre a la capa superior de los ltimos consumidores a medida que estos consumidores ltimos mueren y sus tejidos son degradados a productos orgnicos simples por los desintegradores, la energa de nuevo se pierde y se disipa en el medio. En definitiva, el flujo de energa que parte del sol y que corre a travs de la red alimentaria se dispersa finalmente en el medio, generando la denominada entropa. ENERGIA SOLAR Y FOTOSNTESIS La luz sola visible, fuente de toda la energa biolgica, es una forma de energa electromagntica o radiante que, en la ltima instancia, surge de la energa nuclear. A la temperatura inmensamente elevada del sol, la cual se cree que es de varios millones de grados centgrados, una parte de la enorme energa encerrada en el ncleo de los tomos 2

de hidrgeno es liberada a medida que estos ltimos se convierten en tomos de helio (He) y positrones, mediante fusin termonuclear. En este proceso se libera un cuanto de energa en forma de radiacin gamma. El cuanto se presenta por el termino (h), en el cual h es la constante de planck y es la frecuencia de la radiacin gamma. Despus de una compleja serie de reacciones en las cuales la radiacin gamma es absorbida por los positrones, gran parte de la energa de la radiacin gamma es emitida en forma de fotones o cuantos de energa luminosa. Las reacciones de fusin nuclear que tienen lugar en el sol son, en ltima instancia, la fuente de toda la energa biolgica sobre la tierra. En general, tendemos a asociar el trmino (fotosntesis) con el mundo visible de las plantas superiores: pastos, cultivos herbceos y rboles. Pero esos organismos fotosintticos macroscpicos realmente no constituyen sino una pequea fraccin de todos los organismos conocidos capaces de fotosintetizar. Se ha estimado que un 90 por 100 de las fotosntesis que se lleva a cabo sobre la tierra es realizado en el mar por diversas clases de microorganismos entre los que se incluyen las bacterias, algas, diatomeas y dinoflagelados. Existe otro error comn en torno a la fotosntesis de las plantas superiores, no todas las clulas de las races, los tallos y los frutos de las plantas son capaces de fotosintetizar: son heterotrficas y, por lo tanto, se parecen a las clulas animales. Solamente las clulas que poseen el pigmento verde de la clorofila pueden llevar a cabo dicho proceso. Por otra parte, en la oscuridad, cuando no se dispone de energa solar, incluso estas clulas funcionas como las clulas heterotrficas: deben oxidar parte de su glucosa, a expensas del Oxgeno, para obtener energa en la oscuridad. La fotosntesis consiste en la absorcin de la energa radiante por la clorofila y otros pigmentos, seguida de la conversin de la energa luminosa absorbida en energa qumica, y la utilizacin de esa energa qumica para la reduccin del anhdrido carbnico absorbido de la atmosfera para formar glucosa. En la mayor parte de los organismos fotosintticos, en particular las plantas superiores, el Oxgeno molecular(O2) es el otro producto final importante, pero en otras, tales como las bacterias fotosintticas, no se forma Oxgeno. La forma ms simple de la ecuacin global para la formacin fotosinttica de glucosa y Oxgeno a partir de anhdrido carbnico (Dixido de Carbono) y agua en las plantas superior es:

6CO2 + 6H2O + 686kcal

Radiacin UV

E=h

C6H12O6 + 6O2

Donde 686 Kcal, representa la cantidad mnima de energa til que debe ser proporcionada por la luz solar absorbida para lograr la formacin de un mol de glucosa a partir de un mol de CO2 y otro de H2O en condiciones estndar. En termodinmica qumica la unidad bsica de energa es la calora- gramo y se define como la cantidad de energa requerida, en forma de calor, para elevar la temperatura de 1g de agua a 15C, exactamente en 1C. La gran cantidad de energa necesaria para que tenga lugar la fotosntesis es suministrada por la energa luminosa captada por la clorofila de las hojas. La ecuacin fotosinttica puede volver a escribirse, de modo que indique que la fuente de energa son los cuantos luminosos: nh , como sigue.

6CO2 + 6H2O + nh

Radiacin UV

E=nh

C6H12O6 + 6O2

Esta ecuacin nos da solamente una visin global del proceso fotosinttico; no dice nada acerca del mecanismo o del camino por el cual tiene lugar. Realmente, la fotosntesis en las clulas de las plantas es un proceso mucho ms complejo que lo que esta ecuacin de apariencia sencilla puede sugerir. Existen ms de un centenar de RBE consecutivas en la produccin fotosinttica de glucosa a partir de anhdrido carbnico y agua, cada uno de las cuales est catalizada por una molcula enzimtica especifica, las cuales estn agrupadas en dos etapas claves: Reacciones de Fase lumnica y Reacciones del Ciclo de Calvin La glucosa no es el nico producto de la fotosntesis. Durante dicho proceso se sintetizan tambin otros componentes carbonados de las clulas vegetales, tales como la celulosa, protenas y lpidos. Todas estas sustancias, ricas en energa qumica, son utilizadas posteriormente como fuente de energa por los organismos heterotrficos, es decir, por los consumidores que se alimentan de plantas verdes. Leccin 32. RESPIRACION EN CELULAS HETEROTRFICAS

La fase siguiente en el flujo de la energa biolgica es la utilizacin de la energa de los carbohidratos, grasas y protenas producidas en la fotosntesis por los organismos hetertrofos, que oxidan estos materiales por medio del Oxgeno. Realmente, los organismos hetertrofos necesitan los complejos productos de la fotosntesis por dos razones. En primer lugar, necesitan la energa qumica que pueden obtener por degradacin de las estructuras complejas de alta energa de molculas tales como la glucosa. Pero los hetertrofos necesitan tambin complejos compuestos de carbono, tales como la glucosa, como unidades estructurales para la sntesis de sus propios componentes celulares, ya que son incapaces de utilizar el anhdrido carbnico con este fin. Entre los hetertrofos estn includos todos los organismos del reino animal, muchas bacterias y hongos, as como muchas clulas del reino vegetal. Se estima que ms del 90 por 100 de todo el Oxgeno consumido por todos los hetertrofos es utilizado por microorganismos invisibles del suelo y del mar. La mayor parte de las clulas heterotrficas utilizan el Oxgeno que toman de la atmosfera para oxidar la glucosa y otros nutrientes, dando lugar a los productos finales estables, anhdrido carbnico y agua. Sin embargo, algunos hetertrofos son incapaces de utilizar el Oxgeno; degradan la glucosa en compuestos ms simples, tales como el acido lctico: H3C-CH (OH)-COOH, en ausencia de Oxgeno, en el proceso llamado fermentacin. Los productos de la fermentacin, tales como el acido lctico, son posteriormente oxidados hasta CO2 y H2O por otros organismos heterotrficos, en particular, aquellos que utilizan Oxgeno. En definitiva, las clulas del mundo heterotrfico llevan a cabo la oxidacin completa de los nutrientes orgnicos producidos por los auttrofos hasta convertirlos en el producto final, anhdrido carbnico. En el proceso global, mediante el cual las molculas de alimentos son oxidadas por las clulas heterotrficas a expensas del Oxgeno, recibe el nombre de respiracin. La ecuacin qumica para la oxidacin de la glucosa durante la respiracin es :

C6H12O6 + 6O2

RBE

Mitocondria

6CO2 + 6H2O + 38ATP

Vemos inmediatamente que esta ecuacin es la inversa de la correspondiente a la fotosntesis. Por otra parte, observamos que la combustin completa de un mol de glucosa puede producir un mximo de 38ATP de energa qumica til. 5 Aunque la

ecuacin qumica de la respiracin parece sencilla, no nos dice nada acerca de los mecanismos o del camino seguido por la respiracin en las clulas heterotrficas. Realmente, hay ms de 70 reacciones Bioqumicas enzimticas (RBE) consecutivas en la oxidacin de la glucosa en las clulas heterotrficas, las cuales se desarrollan en los procesos catablicos celulares como: Gluclisis, Betaoxidacin de cidos grasos, desaminacin y transaminacin oxidativa, liplisis, Ciclo de Krebs y Fosforilacin Oxidativa (Adaptado de Lehninger.,1975, por el autor) Leccin 33. Fijacin Biolgica del Nitrgeno (FBN) A pesar de que la atmsfera de la tierra posee un 78% del Nitrgeno gaseoso (N 2), siendo el principal reservorio de este elemento, este se encuentra en cantidades reducidas en los organismos , especialmente en las plantas. Sin embargo, como la mayora de los seres vivos no pueden utilizar dicho nitrgeno atmosfrico para biosintetizar aminocidos,

protenas y otros compuestos nitrogenados, entonces, dependen del nitrgeno presente en los minerales del suelo. En consecuencia, a pesar de esta abundancia de nitrgeno en la atmsfera, la escasez de nitrgeno en el suelo constituye un factor limitante para el crecimiento y desarrollo de las plantas. Es importante anotar que tan slo ciertos

microorganismos son capaces de asimilar nitrgeno molecular transformndolo en biomolculas utilizables para ellas (Bidwell, R., 1989). El proceso a travs del cual circula nitrgeno a travs del mundo orgnico y el mundo fsico se denomina ciclo del nitrgeno. Este ciclo consta de las siguientes etapas: Fijacin biolgica del nitrgeno (FBN):Es un proceso simbitico reductivo dado en bacterias fijadoras como las del gnero Rhizobium, que viven en ndulos de las races de leguminosas y de algunas plantas leosas las cianobacterias que son propias de ambientes acuticos. La FBN , consiste en la conversin del nitrgeno gaseoso (N2) mediante la enzima nitrogenasa que cataliza la ruptura del triple enlace ,hasta producir amonaco (NH3), forma utilizable para los organismos. La ecuacin qumica es la siguiente:

N2 + 8e + 16 Mg ATP + 16 H2O Nitrogenasa

Raices
6

2NH3 + H2 + 16 Mg ADP + 16 Pi + 8

Donde : e- = electrones; Mg= Magnesio ; ATP =Adenosn trifosfato ; ADP =Aenosn Difosfato ; Pi = Fosfato inorgnico Nitrificacin: proceso de oxidacin del amonaco realizado por dos tipos de bacterias: Nitrosomonas y Nitrobacter (comunes en el etapas: A. Nitrosacin: Produccin de Nitrito (NO2-) Las bacterias nitrosomas oxidan el amonaco produciendo nitrito (NO2-) , hidrgenos y agua; los H+ son utilizados en el metabolismo bacteriano para generar molculas energticas de ATP ; La ecuacin qumica del proceso es como sigue: suelo). Dicho proceso ocurre en dos

H + 2 H2O
B. Nitratacin : Produccin de Nitrato (NO3-) Como el nitrito es un in txico para las plantas limitando la mayora de cultivos nitrobacter lo continan oxidando , las

2 NH3 + 3 O2(g)

Nitrosomas

2 NO2 + 2

, hasta generar el in nitrato, el cual es fcilmente

asimilado por las plantas; la ecuacin es la siguiente:

2 NO2 + O2 (g)

Nitrobacter

2 NO3

Lo descrito

anteriormente se puede observar en la figura 4:

Figura 4:Etapas dadas en el ciclo del Nitrgeno (Tomado de: http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/ciclo-del-nitrogeno )

Asimilacin: las races de las plantas absorben el amonaco (NH3) o el nitrato (NO3 -), e incorporan el nitrgeno en protenas, cidos nucleicos y clorofila. Cuando los animales se alimentan de vegetales consumen compuestos nitrogenados vegetales y los transforman en compuestos nitrogenados animales. Amonificacin: consiste en la conversin de compuestos nitrogenados orgnicos en amonaco, se inicia cuando los organismos producen desechos como urea (orina) y cido rico (excreta de las aves), sustancias que son degradadas para liberar como amonaco el nitrgeno en el ambiente abitico. El amonaco queda disponible para los procesos de nitrificacin y asimilacin. El nitrgeno presente en el suelo es el resultado de la descomposicin de materiales orgnicos y se encuentra en forma de compuestos orgnicos complejos, como protenas, aminocidos, cidos nucleicos y nucletidos, que son degradados a compuestos simples por microorganismos - bacterias y hongos - que se encuentran en el suelo. Estos microorganismos usan las protenas y los aminocidos para producir sus propias protenas y liberan el exceso de nitrgeno en forma de amonaco (NH3) o ion amonio (NH4+). Desnitrificacin: es el proceso que realizan algunas bacterias ante la ausencia de oxgeno, degradan nitratos (NO3 -) liberando nitrgeno (N2) a la atmsfera a fin de utilizar el oxgeno para su propia respiracin. Ocurre en suelos mal drenados. 8

A pesar de las prdidas de nitrgeno, el ciclo se mantiene gracias a la actividad de las bacterias fijadoras de nitrgeno, capaces de incorporar el nitrgeno gaseoso del aire a compuestos orgnicos nitrogenados. En los sistemas naturales, el nitrgeno que se pierde por desnitrificacin , lixiviacin, erosin y procesos similares es reemplazado por el proceso de fijacin y otras fuentes de nitrgeno. La interferencia antrpica (humana) en el ciclo del nitrgeno puede, no obstante, hacer que haya menos nitrgeno en el ciclo, o que se produzca una sobrecarga en el sistema. Por ejemplo, los cultivos intensivos, su recogida y la tala de bosques han causado un descenso del contenido de nitrgeno en el suelo (algunas de las prdidas en los territorios agrcolas slo pueden restituirse por medio de fertilizantes nitrogenados artificiales, que suponen un gran gasto energtico). Por otra parte, la lixiviacin del nitrgeno de las tierras de cultivo demasiado fertilizadas, la tala indiscriminada de bosques, los residuos animales y las aguas residuales han aadido demasiado nitrgeno a los ecosistemas acuticos, produciendo un descenso en la calidad del agua y estimulando un crecimiento excesivo de las algas. Lo analizado anteriormente , se resume en la figura 5:

Figura 5 : Resumen esquemtico del ciclo del Nitrgeno (Tomado de : http://roble.pntic.mec.es/~mbedmar/iesao/quimica/ciclodel.htm)

Leccin 34. Forrajes : composicin y anlisis qumico proximal EVALUACIN PROXIMAL DE TRES ESPECIES CON POTENCIAL FORRAJERO Puerto, Luz1 ; Granados, Jairo 2; Barreto, Leonor3 1,2,3 , Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente. ECAPMA-UNAD, 2010.

RESUMEN Se evalu la composicin fitoqumica de dos especies leguminosas y una herbcea, con el fin de conocer diferencias asociadas a la zona lumnica de muestreo (zona alta o fototrpica, zona media y zona baja o geotrpica). Se escogieron las leguminosas Acacia negra (Acacia decurrens), Matarratn (Gliricidia sepium ) y la herbcea Botn de Oro (Tithonia diversifolia), las cuales fueron evaluadas en el laboratorio de nutricin animal de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD) Sede Bogot D.C. Colombia, mediante un diseo totalmente aleatorizado y tres rplicas por zona lumnica de cada especie. Los contenidos que presentaron un nivel significativamente superior al resto fueron para los contenidos de materia seca para Acacia decurrens con 45,60%, cenizas para Tithonia diversifolia con 11,36%, materia orgnica para Acacia decurrens con 95,68%, nitrgeno total para Tithonia diversifolia con 2,58%, y protena cruda fueron mayores en Tithonia diversifolia con (16,15%), seguido de Gliricidia sepium con (13,48%) y Acacia decurrens con (13,47%). Por lo tanto estas especies constituyen buenas alternativas como suplemento en los sistemas de produccin ganadero en el trpico Colombiano.
Palabras clave: Leguminosas, Herbcea, composicin qumica, materia seca, cenizas, materia orgnica, nitrgeno total y protena cruda.

INTRODUCCIN Estas especies son conocidas por los ganaderos pero poco utilizadas, tal vez debido al desconocimiento acerca de sus propiedades proteicas, minerales y vitamnicas, adaptacin, buen rendimiento de biomasa y rpida recuperacin despus del corte, resistencia a la sequia, asociacin con otras especies arbreas, mejoramiento del suelo, y lo mejor siendo fuentes generadoras de oxigeno y de agua; adems del ahorro por concentrado que se tendra en el consumo en grandes y pequeas producciones agropecuarias. Estas especies se encuentran usualmente en los caminos de las carreteras, actan como barreras rompevientos y heladas, cercas vivas, plantas de adorno debido a su belleza, son muy fructferas en poca de verano; pueden ser suministradas en pastoreo o como forraje en hoja verde, en ensilaje, en hoja seca o molida. Es posible su almacenamiento por largos periodos; son un excelente alimento para los animales, dando como resultados aumento en la produccin y calidad de la leche, aumento de fertilidad, calidad en cuanto a pigmentacin de huevos y carne. Es un reto el uso de estas plantas arbreas especialmente en la ganadera colombiana, las cuales al ser incluidas en la dieta animal se generara una reduccin en los costos adems de ofrecer alternativas ecolgicamente razonables y eficientes con el medio ambiente. El propsito del presente trabajo fue evaluar la composicin del anlisis qumico proximal el cual incluye: materia seca cenizas, materia orgnica, nitrgeno total y protena cruda

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de tres especies potencialmente forrajeras como son de clima fro Acacia decurrens y de clima templado Tithonia diversifolia y Gliricidia sepium . MATERIALES Y MTODOS Caractersticas de la zona de muestreo La recoleccin del material vegetal se realizo as: Acacia decurrens (municipio Bojac Cundinamarca, finca Acapulco, con 2598 msnm y temperatura media 14C), Tithonia diversifolia (municipio Silvania Cundinamarca, orilla de la carretera, con 1470 msnm y temperatura media 20C) y Gliricidia sepium (municipio La Mesa Cundinamarca, Finca Orqudeas, con 1198 msnm y temperatura media 20C). Recoleccin y preparacin de las muestras Las muestras de las hojas fueron seleccionadas al azar por cada zona lumnica de la planta como son: alta o fototrpica, media y baja o geotrpica, fueron secadas a temperatura ambiente, colocadas en bolsas de papel y rotuladas de acuerdo a la zona lumnica de muestreo, para su posterior anlisis en el laboratorio de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD). Las muestras fueron recolectadas en los meses de abril, mayo y junio de 2009, en esta poca se observo un verano prolongado. La edad de las plantas no fue determinada, sin embargo se cree que las especies Acacia decurrens y Tithonia diversifolia eran plantas maduras y la especie Gliricidia sepium tenia aproximadamente un ao segn comentario del propietario de la finca donde se recolecto la muestra. RESULTADOS Y DISCUSIN Anlisis Proximal En la tabla 1 se muestran los resultados obtenidos de los anlisis en las especies evaluadas. Tabla 1. Composicin bromatolgica de anlisis proximal Especie MS -----------45,60a 28,43a Cz --------------4,32a 11,36b MO (%) 95,68a 88,64b NT -----------2,15a 2,58a PC ---------------13,47a 16,15a

A. decurrens T. diversifoli a G. sepium EEM

30,37b 0,387

8,25c 0,387

91,75c 0,387

2,16b 0,052

13,48b 0,327

(MS)=Materia seca, (Cz)=Cenizas, (MO)=Materia orgnica, (NT)= Nitrgeno total, (PC)=Protena cruda. Distintas letras en una columna indican diferencias significativas en las medias (P<0.05). EEM: Error estndar de la media.

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Materia Seca (MS). El anlisis de varianza muestra que se presentaron diferencias altamente significativas (P<0,01) entre los promedios de las medias de las especies trabajadas. Los promedios indican que la mayor especie que tuvo materia seca fue Acacia decurrens con 45,60%, seguido de Gliricidia sepium con 30,37% y Tithonia diversifolia con 28,43%, la especie Acacia decurrens tiene mayor porcentaje de materia seca que Gliricidia sepium y Tithonia diversifolia. Acacia decurrens supera a Gliricidia sepium en un 15.23% mientras que la diferencia con Tithonia diversifolia es de 17,17%. Los datos encontrados son similares a los reportados por (Londoo y Velasquez,1999) con 48,72% para Acacia decurrens, (Rosales, 1992) con 23% para Tithonia diversifolia, y (Laredo y Cuesta,1990) con 24,9% para Gliricidia sepium . (Grfica 1). En cuanto a la prueba Duncan se analiz medidas en una columna con diferente letra, indicando diferencia estadstica (P<0,05).

60% 50% 40% 30% 20% 10%

%Materia Seca
48,72% 45,60% 28,43% 23,00% 30,37% 24,90%

0%
-10%

Fototropica

Media

Geotropica

Grfica 1. Promedio comparativo %Materia Seca Cenizas (Cz). El anlisis de varianza muestra que se presentaron diferencias altamente significativas (P<0,01) entre los promedios de las medias de las especies trabajadas. Los promedios muestran que la mayor concentracin de cenizas la tuvo la especie Tithonia diversifolia con 11,36% seguido de Gliricidia sepium con 8,25% y luego Acacia decurrens con 4,32% lo que demuestra que la especie Tithonia diversifolia, contiene un mayor contenido de minerales que Gliricidia sepium y Acacia decurrens. Tithonia diversifolia supera a Gliricidia sepium en un 3,11% mientras que la diferencia con Acacia decurrens es de 7,04%. Los datos encontrados son similares a los reportados por (Carvajal T,1999) con 4,29% para Acacia decurrens; mayores a los reportados (Navarro,1990) con 9,42% para Tithonia diversifolia y similares a los reportados por (Laredo y Cuesta,1990) con 8,90% para Gliricidia sepium . (Grfica 2).

12

15%

%Cenizas
11,36%
9,42% 8,25% 8,90%

10% 4,32% 4,29%

5%

0%

Fototropica

Media

Geotropica

Grfica 2. Promedio comparativo % Cenizas Materia Orgnica (MO). El anlisis de varianza muestra que se presentaron diferencias altamente significativas (P<0,01) entre los promedios de las medias de las especies trabajadas. Los promedios indican que la mayor cantidad de materia orgnica se encontr en la especie Acacia decurrens con 95,68% seguido de Gliricidia sepium con 91,75% y por ltimo de Tithonia diversifolia con 88,64%, lo que demuestra que la especie Acacia decurrens, contiene un mayor contenido de materia orgnica que Gliricidia sepium y Tithonia diversifolia. Acacia decurrens supera a Gliricidia sepium en un 3,93% mientras que la diferencia con Tithonia diversifolia es de 7,04%. Los datos encontrados son similares segn los reportados por (Carvajal, T.) con 95,18% para Acacia decurrens. (Grfica 3).
100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0% 95,68% 95,18% %Materia Orgnica 88,64% 78,59% 91,75%

Fototropica

Media

Geotropica

Grfica 3. Promedio comparativo %Materia Orgnica

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Nitrgeno total (NT). El anlisis de varianza muestra que se presentaron diferencias significativas (P<0,05) entre los promedios de las medias de las especies trabajadas. Los promedios ensean que la mayor concentracin de nitrgeno total se presento en la especie Tithonia diversifolia con 2,58% seguido por Gliricidia sepium con 2,16% y por ltimo Acacia decurrens con 2,15%, lo que demuestra que la especie Tithonia diversifolia, contiene un mayor contenido de nitrgeno total que Gliricidia sepium y Acacia decurrens. Tithonia diversifolia supera a Gliricidia sepium en un 0,42% mientras que la diferencia con Acacia decurrens es de 0,43%. (Grfica 4).
3,00% 2,50% 2,00% 1,50% 1,00% 0,50% 0,00%
Adta Promedio Tdtm Promedio Gstm Promedio

%Nitrgeno Total
2,58% 2,15% 2,16%

Fototropica

Media

Geotropica

Grfica 4. Promedio comparativo %Nitrgeno Total Protena Cruda (PC). El anlisis de varianza muestra que se presentaron diferencias significativas (P<0,05) entre los promedios de las medias de las especies trabajadas. Los promedios indican que la mayor concentracin de protena cruda se presento en la especie Tithonia diversifolia con 16,15% seguido de Gliricidia sepium con 13,48% y luego por Acacia decurrens con 13,47%, lo que demuestra que la especie Tithonia diversifolia, contiene un mayor contenido de protena cruda que Gliricidia sepium y Acacia decurrens. Tithonia diversifolia supera a Gliricidia sepium en un 2,67% mientras que la diferencia con Acacia decurrens es de 2,68%. Los datos encontrados son similares segn los reportados por (Londoo et al.,1999) con 14,86% para Acacia decurrens, (Navarro et al.,1990) con 14,84% para Tithonia diversifolia, y (Rosales et al., 1996) con 14,7% para Gliricidia sepium . (Grfica 5).

14

20,00%

%Proteina Cruda
14,86% 13,47% 16,15% 14,84%

15,00%
10,00% 5,00% 0,00%

14,70% 13,48%

Fototropica

Media

Geotropica

Grfica 5. Promedio comparativo %Protena Cruda Conclusiones y Recomendaciones Las especies estudiadas constituyen una importante fuente de forraje en la alimentacin animal, especialmente de rumiantes, ya que los contenidos de protena cruda fueron considerables, en donde se presento mayor porcentaje en la especie Tithonia diversifolia con (16,15%), seguido de Gliricidia sepium con (13,48%) y Acacia decurrens con (13,47%). Estadsticamente se observaron diferencias significativas (P<0,05) y altamente significativas (P<0,01) entre especies; con respecto a las zonas no se observaron diferencias estadstica (P>0,05) para los anlisis bromatolgicos. Esto significa que se presentan diferencias entre las especies, pero no se presentan diferencias entre las zonas de cada especie. Se recomienda el uso de estas tres especies en sistemas silvopastoriles, ya que ayudan a favorecer la composicin qumica de los pastos, hay sombra para el pasto y los animales, disminucin de temperatura, disponibilidad de nutrientes y de agua, existiendo as mejoras en la fertilidad del suelo; adems de incrementar significativamente las contribuciones econmicas y sociales, que son fundamentales para el proceso de cambio. Se recomienda disear y evaluar dietas para rumiantes y monogstricos con estas especies arbreas, con el fin de determinar el valor nutritivo, rendimiento y produccin en la alimentacin animal como: gallinas ponedoras, pollo engorde, cerdos, rumiantes y otros. Leccin 35. Bioqumica del ensilaje Anlisis qumico de ensilajes de cogollo de caa, inoculados con dos clases de bacterias cido lcticas
Jairo E. Granados* Jos D. Neva**. Departamento de Qumica, Facultad de Ciencias Agrarias. UNAD, 15 Bogota D.C. Colombia. Calle 14 S N 14-23. *Docente MSc. ECAPMA; Jairoenriquegm@yahoo.com. ** Zootecnista UNAD

PALABRAS CLAVES: Ensilaje, lactobacillus, cido lctico, cogollo de caa

Introduccin: El ensilaje es una tcnica de conservacin de forrajes o productos agrcolas basado en los procesos bioqumicos de fermentacin de carbohidratos solubles (CHOS), presentes en la microflora epiftica del forraje, que produce principalmente cido lctico (Davies et al., 1998). Este mtodo, permite mantener la calidad nutricional que tena el forraje en el momento de corte, lo cual depende de factores como: concentracin y disponibilidad de CHOS, tipo de bacterias cido lcticas epifticas y la cantidad de microorganismos indeseables, como la enterobacteria y el clostridium presentes en el material que se ensila (Davies et al., 1998). En este experimento se evalu la inclusin de dos tipos de bacterias cido lcticas en ensilajes de cogollo de caa y su efecto en la produccin de cidos lctico y actico, lo mismo que en la reduccin del pH, cambios en la cantidad de protena cruda, CHOS, materia seca y porcentaje de cenizas. Metodologa: El experimento se desarroll en dos etapas: 1. Preparacin de 25 ensilados a partir de cogollo de caa tipo panelera fresca tipo Puerto Rico, que present un 8.10% de CHOS, los cuales se distribuyeron en un diseo al azar constituido por cinco tratamientos y cinco rplicas por cada uno. Los componentes utilizados en la preparacin de los ensilajes experimentales que constituyeron cada tratamiento, se muestran en la Tabla 1.
TABLA 1. Tratamientos utilizados en el experimento

Component e Cogollo (Kg) Melaza (Kg) Agua (Kg) Urea (Kg) Inculo A*(g/dL) Inculo B *(g/dL)

T1

T2

T3

T4

T5

100.0 3.0 3.0 0.5 0.0 0.0

100 .0 3.0 3.0 0.5 0.5 0.0

100 .0 3.0 3.0 0.5 1.5 0.0

100. 0 3.0 3.0 0.5 0.0 0.5

100. 0 3.0 3.0 0.5 0.0 1.5

*IA: Lactobacillus plantarum, estreptococus faecium, pediococcus acidolctico + complejo enzimtico: Celulasa, amilasa y pentosana. *IB: Lactobacillus faecium; estreptococcus acidolctico+complejo celulasa-amilasa

Anlisis qumicos en el laboratorio: Al final del experimento (40 das), se tomaron porciones iguales de cada rplica, aproximadamente 500 g del ensilado. Para efectuar anlisis de materia seca (MS); humedad (H); Cenizas (CZ); Nitrgeno (N); pH, carbohidratos solubles (CHOS); cido lctico (AL); y cido actico (AA). Esto se realiz segn tcnicas analticas de la AOAC (1988). Resultados y Discusin

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Los datos provenientes de las variables estudiadas, fueron analizadas por medio del paquete estadstico SPSS para Windows Versin 10.0. Se utiliz el anlisis de varianza (ANAVA) en una sola va, para detectar las diferencias estadsticas entre los tratamientos. Adems, se aplicaron pruebas de comparaciones mltiples de Tukey y 6 contrastes ortogonales. Los resultados, mostraron un incremento de la concentracin de cido lctico en los ensilados T2, T3, T4 y T5 a expensas del descenso en el nivel de carbohidratos solubles de cada tratamiento. Dicha reduccin fue lineal (r 2 = 0.912) y significativa (p<0.05) con respecto a la produccin de cido lctico. Adems, la disminucin del pH fue causada por el incremento altamente significativo (p<0.01) del A.L. En los ensilajes tratados con el inculo A. Este comportamiento se puede explicar por la probable accin conjunta de celulasas amilasas, pentosanas y bacterias cido lcticas, sobre los procesos de hidrlisis y fermentacin anaerbica de los carbohidratos solubles presentes en el material ensilado, hasta producir gran cantidad de cido lctico y en algunos casos cido actico (Mndez, 1989). En general los inculos bacterianos incrementaron la materia seca y el porcentaje de cenizas de los ensilados, lo cual caus una disminucin apreciable de su humedad y un aumento significativo (p<0.05) de la protena cruda. Se concluy que el inculo A, adicionado en el nivel 1.5 g/dL, gener una mayor preservacin y calidad nutricional de los ensilados de cogollo de caa, demostrado en la recuperacin de materia seca, aumento en la protena cruda, notable degradacin de los carbohidratos solubles e incremento significativo del cido lctico y disminucin del pH. Referencias Association of analytical chemists. 1980. oficial methods of anlisis. 12th ed. AOAC. Washington, D.C. Alltech, Inc. 1999. Biotechnology Center. Bacterias y enzimas para conservacin de ensilajes. Nicholasville, K.Y. 40356. Davies, D.R. J. merry, A.P. williams. E.L. Bakewell. D-K- Leemans and J.K.S. Tweed: 1998. Proteolysis during Ensilaje of Forages Varying in soluble sugar content. J. Dairy, SCi, 81: 444-453. Dubois, M.K.A. Guilles, J.K. Harnilton, P.A. Rebers and F. Smith. 1956. Colorimetric method for determination of sugars and related substances anal chem. 28:350-356. Mndez, G. 1989. curso de ensilajes I.C.A. Tibaitat. Bogot D.C. Colombia.

Captulo 8. Metabolismo primario en animales y plantas (Tomado y adaptado de: Aurora Hilda Ramrez-Prez y Silvia E. Buntinx Dios http://amaltea.fmvz.unam.mx/textos/alimenta/MET_CHO_LIP_PRO2.pdf) Introduccin: El metabolismo es el ensamble de las transformaciones moleculares y de transferencia de energia que se desarrollan sin interrupciones dentro de la celula o del organismo. Los procesos son ordenados, interviniendo procesos de degradacin 17

(catabolismo) y de sntesis orgnica (anabolismo). Se puede distinguir el metabolismo basal (durante el sueo) y el metabolismo en actividad (actividad cotidiana).Toda actividad celular y del organismo requiere de energa, pero tambin, de nutrimentos especficos (proteinas, cidos nuclecos, lpidos, minerales, vitaminas), que deben moverse a travs de membranas, con frecuencia contra un gradiente de concentracin, lo que implica un gasto importante de energa. Los niveles de energa y las concentraciones de nutrimentos deben estar disponibles constantemente y debern satisfacer la tasa de actividad y sus variaciones. Los organismos deben regular sus actividades metablicas econmicamente para evitar deficiencias o excesos de productos metablicos. El organismo debe ser flexible para poder alterar su metabolismo ante cambios significativos en su medio (variaciones en las concentraciones o en el tipo de nutrientes). Leccin 36. Metabolismo de carbohidratos: Gluclisis y Va Pentosa Fosfato Los carbohidratos de la racin proporcionan mas del 50% de la energa necesaria para el trabajo metablico, el crecimiento, la reparacin, la secrecin, la absorcin, la excrecin y el trabajo mecnico. El metabolismo de carbohidratos incluye las reacciones que experimentan los de orgen alimentario o los formados a partir de compuestos diferentes a estos La oxidacin de este tipo de glcidos proporciona energia, se almacenan como glucgeno, sirven para la sntesis de aminocidos no esenciales. Gluclisis (Va de Embden-Meyerhof) La gluclisis es un proceso comn a todas las clulas, es la principal va metablica de utilizacin de hexosas, principalmente glucosa pero tambin directamente de la fructosa y de la galactosa. El conjunto de las reacciones permiten oxidar parcialmente la glucosa para formar piruvato con el objeto de liberar energa para sintetizar ATP. Esta va se desarrolla totalmente en el citoplasma celular en condiciones anaerbicas o aerbicas. Pueden considerarse dos fases dentro de esta va. 1. La primera parte o fase preparativa, la glucosa es activada y para ello se emplean dos ATP. Los enzimas hexocinasa y glucosinasa son responsables de la conversin de glucosa a glucosa 6-P. La hexocinasa se encuentra en todos los tejidos, tiene una gran afinidad por la glucosa y otras hexosas, puede llevar a cabo la reaccion aun a bajas concentraciones del enzima y es inhibido por la glucosa 6-P. La enzima glucocinasa se localiza en el hgado y en las celulas del p ncreas, tiene una baja afinidad por la glucosa, por ello es efectiva cuando la glucosa se encuentra a elevadas concentraciones, no es inhibido por el producto y est ausente o sus concentraciones son muy bajas en los rumiantes. La formacin de fructosa 1, 6-bi fosfato se lleva a cabo por la fosfofructocinasa. Esta enzima est presente solo en la gluclisis, as, constituye un sitio de control. La adrenalina, el glucagn, aumento en los cidos grasos libres, el citrato, y el ATP inhiben su actividad. 2. En la segunda parte de la gluclisis o fase productora de energa, se lleva a cabo la generacin de ATP.

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La va colateral de las pentosas (ruta de la pentosa fosfato) Esta via metablica ni requiere, ni produce ATP, se desarrolla en el citoplasma de las clulas de tejidos con elevada actividad lipogentica (hgado, tejido adiposo, glndula mamaria, cerebro en desarrollo). La molcula de glucosa 6-fosfato ser transformada en y una pentosa fosfato. Los carbonos de la pentosa se transferirn en piezas de 2 a 3 carbonos entre molculas. Los productos finales pueden contener de 3 a 7 tomos de carbono que sern utilizadas posteriormente en la gluclisis (triosas fosfato), en la sntesis de aminocidos (eritrosa 4-fosfato), en la sntesis de ac: nucleicos, NAD, FAD, y CoA. En esta va se genera tambin NADPH, esta coenzima se utilizar para la sntesis de cidos grasos de cadena larga, de colesterol, la hidroxilacin de cidos grasos y esteroides, mantenimiento de la glutation reducido (GSSG) en los glbulos rojos. Gluconeognesis Es la produccin de azcares a partir de sustancias diferentes a los carbohidratos (lactato, aminoacidos, propionato y glicerol). Esta va permite tener una fuente alterna de glucosa, remover el lactato (producido por los glbulos rojos y el tejido muscular) de la sangre, remover el glicerol producido por el tejido adiposo. Esta va metablica se activa ante la disminucin de la glucosa sangunea, en el cerdo su activacion es el ayuno: cerdo, 24 h, hombre 8 y en el pollo 2 h. En el rumiante es una va constantemente activa. La gluconeognesis se encuentra bajo control hormonal (insulina, glucagn y adrenalina). Los rumiantes son eficientes para realizar la gluconeognesis y su aparato digestivo se ha adaptado a una falta de azcar y almidn, por lo que la capacidad para el manejo de estos carbohidratos es limitada. Asi, los rumiantes absorben la mayora de su carbono dietario digerido (energa) en forma de cidos grasos voltiles (AGV). Los AGV son producidos por la fermentacin bacteriana de los carbohidratos en el rumen y en menor cantidad en el intestino grueso, pueden contribuir con 70-80% de la energa total que el animal necesita. Leccin 37. Metabolismo de Aminocidos y protenas Las proteinas funcionan como enzimas, para formar estructuras, pero adems los aminocidos pueden utilizarse como fuente de energa o como sustratos para otras rutas biosintticas. En los animales superiores, los aminocidos provienen de la proteina de la dieta o por recambio metablico de protena endgena. El exceso de aminocidos se degrada parcialmente para dejar esqueletos de carbono para biosntesis o se degradan totalmente para producir energa. Los aminocidos son catabolizados a travs de la remocin del nitrgeno (N), a travs de dos rutas principales: la transaminacin y la desaminacin oxidativa. En la transaminacin, un aminocido dona su grupo amino al -cetoglutarato (ciclo de Krebs) se forma un -cetocido y glutamato, el coenzima utilizado es principalmente el piridoxal fosfato. Esta reaccin es reversible y se encuentra ampliamente distribuda en los tejidos, especialmente: cerebro, corazn, rin, hgado. Solo la lisina, treonina, prolina e hidroxiprolina no sufren transaminacin. La regeneracion del -cetoglutarato se consigue 19

mediante la desaminacin oxidativa del glutamato catalizada por la glutamato deshidrogenasa unida al NAD. El amonaco resultante de la desaminacin de, se transforma en urea en el hgado para detoxificarlo. En muchos rganos (cerebro, intestino, msculo esqueltico), la glutamina es el transportador del exceso de N. En el msculo esqueltico existe el ciclo glucosa-alanina (Ciclo de Cori) para transportar el amonaco al hgado bajo la forma de alanina. La formacin de urea involucra una serie de pasos de la ornitina en arginina. La urea se forma a partir de la arginina. El ciclo de la urea utiliza cinco enzimas: argininosuccinato sintasa, arginasa, arginosuccinato liasa (los tres se encuentran en el citosol), ornitina transcarbamoilasa y carbamoil fosfato sintasa (presentes en la mitocondria). El amonio libre formado en la desaminacin oxidativa del glutamato se convierte en carbamoil fosfato, reaccin catalizada por la carbamoil fosfato sintetasa I y que requiere dos ATP. El carbamoil fosfato transfiere su grupo amino a la ornitina y forma citrulina. Esta debe transportarse a travs de la membrana mitocondrial al citosol, donde se formar la urea. En cada vuelta del ciclo de la urea se eliminan dos N, uno que se origina de la desaminacin oxidativa del glutamato y el otro del aspartato. El fumarato es el vinculo entre el ciclo de la urea y el de Krebs. Despus de la desaminacin, el esqueleto de carbono de los aminocidos puede ser utilizado para la produccin de energa. El catabolismo de los aminocidos involucra su conversin a intermediarios en el ciclo de Krebs, su conversion a piruvato o a acetil-CoA. Este ltimo puede oxidarse en el ciclo de Krebs o puede convertirse en acetoacetato y lpidos. Los aminocidos que forman acetoacetato son cetognicos, ya que no pueden convertirse en glucosa. Los aminocidos que forman -cetoglutarato o acidos dicarboxlicos de cuatro carbonos estimulan el funcionamiento del ciclo de Krebs y son considerados glucognicos.

Leccin 38. Betaoxidacin de cidos Grasos Los cidos grasos (AG) son los componentes principales de los lpidos complejos (triacilgliceroles, fosfolpidos). Los triacilgliceroles son la forma ms importante de almacenamiento de energa en los animales. Este tipo de almacenamiento presenta sus ventajas, al oxidarse el C de los AG producen ms ATP que cualquier otra forma de C, adems, los lpidos estn menos hidratados que los polisacridos, por lo que ocupan menos espacio. Los AG se incorporan a las membranas celulares. El principal rgano de interconversin y metabolismo de lpidos es el hgado. Oxidacin de los cidos grasos Cuando el aporte de energa de la dieta es insuficiente, el animal responde con la seal hormonal, que se transmite al tejido adiposo por medio de la liberacin de adrenalina, glucagn u otras hormonas. Estas se unen a la membrana de la clula adiposa y estimulan la sntesis. Los trigliceridos se hidrolizan a diglicridos, liberando un cido graso del carbono 1 o 3 del glicerol. Los diglicridos y los monoglicridos son hidrolizados rpidamente para producir cidos grasos y glicerol. El cido graso no esterificado sale a la sangre y se une a la albmina para ser transportado a otros tejidos, y el glicerol 20

ser utilizado por el hgado para la produccin de glucosa. Los AG se oxidan en el carbono , de ah el nombre de -oxidacin y se degradan a cido actico y un cido graso con dos carbonos menos. La -oxidacin inicia con una reaccin de deshidrogenacin (acil-CoA deshidrogenasa), utilizando a FAD como coenzima. El producto de esta reaccin es un enoil-CoA y . El enoil-Coa es hidratado por la enoil-CoA hidrasa, se produce un hidroxiacil-CoA. El grupo hidroxilo de este compuesto es oxidado por y la hidroxiacil-CoA deshidrogenasa, se produce -cetoacil-CoA y NADH. El ltimo paso es catalizado por una tiolasa, produciendo acetil-CoA y un acil-CoA, con dos carbonos menos que el sustrato inicial. Estos pasos se repiten hasta que en la ltima secuencia de reacciones el butiril-CoA es degradado a dos acetil-CoA. En los rumiantes, la oxidacin de AG de cadena impar puede representar tanto como el 25% de sus requerimientos de energa. La oxidacion de un AG de 17 carbonos da por resultado 7 acetil-CoA y un propionil-CoA. El propionil-CoA es tambin un producto de la degradacion de valina e isoleucina. El propionil-CoA es convertido en succinil-CoA y ser utilizado en el ciclo de Krebs. Leccin 39. El ciclo de Krebs (CK) Tambin denominado: ciclo del cido tricarboxlico- CATC o del cido ctrico-CAC La gluclisis y el ciclo de Krebs son consideradas las vas metablicas centrales, participan en la degradacin de casi todos los componentes que la clula es capaz de degradar y proveen el poder reductor y los materiales de construccin. El proceso general es el de metabolismo respiratorio aerbico. En estas condiciones, el es el ltimo aceptor de energa. En este ciclo se pueden mencionar dos procesos separados pero relacionados: 1. El metabolismo oxidativo, hay remocin y flujo de electrones de sustancias orgnicas y transferencia a coenzimas. 2. Hay reoxidacin de las coenzimas a travs de la transferencia de electrones acompaada directamente de la generacion de ATP. En anaerobiosis, la gluclisis es la fase inicial del catabolismo de la glucosa. Los otros componentes del metabolismo de respiracin son el ciclo de Krebs (continuacion de la oxidacin del piruvato), la cadena de transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa de ADP a ATP a travs de un gradiente de protones generado en el transporte de electrones. El proceso completo genera de 36 a 38 molculas de ATP/mol de glucosa, en cada vuelta del ciclo de Krebs entran dos moles de acetil CoA y se liberan 2 carbonos, lo que regenera la molcula de oxaloacetato (OAA).

Leccin 40. Foto-respiracin

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ACTIVIDAD FOTORRESPIRATORIA EN EL FRUTO DE MORA( Rubus glaucus)

Alexandra Ortiz *; Jenny Rincn*Jairo Granados** *Ingenieras Agrnomas; **Docente, MSc; ECAPMA

RESUMEN El fruto de mora de castilla (Rubus glaucus) es un fruto blando por lo que se considera altamente perecedero teniendo una vida til de 3-5 das, en consecuencia se obtienen grandes prdidas en la poscosecha. El principal objetivo de este trabajo fue la caracterizacin fisicoqumica y la evaluacin de las enzimas Peroxidasa (POD) y polifenoloxidasa (PFO) en este fruto las que intervienen en el pardeamiento enzimtico durante la maduracin de los frutos; as como evaluar la efectividad de tres inhibidores el Acido ascrbico, Cloruro de Sodio y Cloruro de Calcio en tres concentraciones 1, 2 y 4%. Los frutos de mora de castilla (Rubus glaucus) fueron muestreados de dos fincas ubicadas en los municipios de San Bernardo y Silvania, los cuales fueron recolectados en dos ndices de madurez 2 y 5 de acuerdo a la tabla de color diseada por ICONTEC conocida como NTC 4106. Se encontr que en la mayora de las variables no hubo diferencias significativas entre las fincas, pero si entre los ndices lo cual es coherente ya que son frutos de dos ndices con madurez fisiolgica diferentes. Como mejor tratamiento en la inhibicin de las estas enzimas evaluadas se encontr la aplicacin del Cloruro de Calcio en las tres concentraciones al 1, 2 y 4% siendo la ltima concentracin la ms efectiva. Palabras claves: Fruto de Mora (Rubus Glaucus), Peroxidasa, inhibidores enzimticos.

INTRODUCCION La mora de Castilla (Rubus glaucus) es originaria de las zonas tropicales de Amrica latina (Castellanos, 2003), en Colombia los principales departamentos productores son, Cundinamarca, Santander, Huila, Antioquia y Caldas donde se concentra el 95% de la produccin (Rojas et al., 2004). El fruto de la mora (Rubus glaucus) est incluido en el grupo de lo que algunos autores denominan frutos blandos ya que sufr e un rpido ablandamiento, igualmente, el pardeamiento de la pulpa se debe a la accin de enzimas como: la polifenoloxidasa (PFO), la cual en presencia de oxgeno cataliza la oxidacin de numerosos compuestos como los fenoles y la peroxidasa (POD) la cual a niveles altos de perxido de hidrogeno H2O2 oxida fenoles a quinonas generando pardeamiento por la reaccin denominada polimerizacin (Candan, 2004). El fenmeno de pardeamiento de frutos y vegetales durante el crecimiento, coleccin, almacenamiento y procesado, es un problema de primera magnitud en la industria alimentaria y se reconoce como una de las principales causas de prdida de calidad y valor comercial. Este pardeamiento produce cambios importantes tanto en la apariencia (colores oscuros) como en las propiedades organolpticas (sabor, textura) de alimentos comestibles (Mayer, 1987, citado por Sells, 2007). La peroxidasa es una hemoproteina monomrica que cataliza la oxidacion de un amplio nmero de sustratos (fenoles, aminas, aromaticas e hidroquinonas) utilizando peroxido de 22

hidrogeno como cofactor a quinonas. Se encuentra en los peroxisomas, cloroplastos, vacuolas y en la pared celular (Narvez, 2002, citado por Hernandez, 2006). Es miembro de un grupo de enzimas llamadas oxido reductoras, la encontrada en plantas superiores, es la ferriprotoporfirina (hematina) en general reportada como EC. 1.11.1.7 (Daoudi, 2004). Hernndez (2006) evalu la actividad de peroxidasa segn la tcnica descrita por Dalisay y Kc (1995), la cual se fundamenta en la determinacin del cambio de Absorbancia por minuto a 436 nm, producido por la oxidacin de un sustrato de la enzima como la o-dianisidina en presencia de perxido de hidrgeno. La PFO cataliza la reaccin dependiente de oxigeno que transforma o-difenoles en o-quinonas, esta transformacin tiene lugar en dos pasos: hidroxilacin de monofenoles en o-difenoles, y oxidacin de estos o-difenoles a o-quinonas, que corresponden a las dos actividades consecutivas realizadas por la polifenoloxidasa (Prez, 2003), esta actividad causa cambios en el color, sabor, en la calidad de los productos procesados y daos nutricionales (Garca, 2004). Esta es la razn fundamental por la que el contenido en fenoles y la actividad PFO se consideran determinantes en la calidad de los frutos y vegetales (Casado, 2004). Se sabe que las enzimas PFO y POD extradas de diferentes tejidos vegetales pueden ser inactivadas por tratamientos trmicos y por ciertos compuestos qumicos usados en la industria de los alimentos, como cloruro de sodio, sulfitos, cido ascrbico, sacarosa, EDTA y cido benzoico (Rivera et al., 2004). El objetivo de este trabajo fue el de evaluar y caracterizar fsica y qumicamente los frutos de mora variedad Castilla ( Rubus glaucus) y la actividad enzimtica de peroxidasa (POD) y polifenoloxidasa (PFO), principales enzimas involucradas en el pardeamiento enzimtico del fruto durante la maduracin y senescencia y a su vez aplicar tratamientos permitidos por la industria alimentaria que inhiban su actividad, a fin de alargar la vida til del fruto reduciendo las prdidas en el manejo de poscosecha manteniendo la calidad comercial de estos frutos.

MATERIALES Y METODOS MATERIAL VEGETAL Las muestras se recolectaron de dos fincas, la primera se encuentra localizada en el municipio de San Bernardo (F1) ubicado en el departamento de Cundinamarca (Colombia) con una temperatura promedio de 20 C, situada a una altura de 2300 m.s.n.m, y la segunda finca est ubicada en la vereda Noruega alta del municipio de Silvania (F2), Cundinamarca, a 1470 m.s.n.m. con temperatura media de 20C, la recoleccin de estas se hizo en dos ndices de madurez 2 y 5 de acuerdo a la escala de color segn la NTC 4106, se seleccionaron los frutos de forma homognea por sus caractersticas fsicas, sin daos mecnicos u ocasionados por plagas o enfermedades, para luego aplicar los respectivos anlisis fisicoqumicos y enzimticos. ANLISIS FSICO-QUMICO Para determinar el pH se realiz por medio de un pHmetro calibrado a temperatura 20C donde se pes 1 gr de fruto picado se le adicion 10 ml de agua destilada, se agit 5 min 23

y luego se procedi a medir el pH, se adicion 40 ml de agua destilada, se agito 5 min y luego se procedi a titular con NaOH 0,1 N hasta alcanzar un pH de 8,5 en la solucin, para la determinacin de ndice de acidez. Los grados Brix se midi por medio de un refractmetro digital, la firmeza se determin mediante un Penetrmetro BERTUZZI midiendo la fuerza (Newtons) necesaria para penetrar la pulpa y las medida de longitud y dimetro se tomaron utilizando un Calibrador Vernier digital. Las anteriores variables se evaluaron en 20 frutos enteros para cada ndice. ACTIVIDAD ENZIMATICA Extraccin de la enzima. En la tcnica que se implement se utiliz los polvos de acetona que permiten que el extracto presente una alta actividad con una mayor estabilidad, porque con la acetona se retiran los fenoles, -carotenos y cidos orgnicos del extracto disminuyendo as la reaccin de las enzimas (Baquero, 2005). Se utiliz 5 g de fruta picada homogenizados con 25 ml de acetona 4C se filtr al vaco, y el retenido (polvos de acetona) fue lavado dos veces con 25 ml de acetona. Los polvos de acetona fueron suspendidos en 25 ml buffer de fosfato pH 7, luego, la suspensin fue centrifugada a 10000 rpm durante 30 min, el slido se desech, el sobrenadante fue mantenido refrigerado. Las medidas de actividad enzimtica fueron desarrolladas a las condiciones de temperatura, en las que se obtuvieron las mximas respuestas, evaluadas en reportes anteriores y en este trabajo. Medida de Actividad de Peroxidasa. La actividad de esta enzima se estim por espectrofotomtria del incremento de la absorbancia a 470 nm cada 15 s durante 300 s, utilizando como sustrato el guayacol. La mezcla con un volumen final de 4 ml, contena 1 ml de Buffer Fosfato pH 7, 2 ml de H 2O2 0.03 M en Buffer Fosfato pH 7, 1 ml de Guayacol y 2 ml de extracto diluido, manteniendo la mezcla a 22C. Para el blanco se utiliz Buffer Fosfato pH 7. Una unidad de actividad (UPOD) se defini como el cambio en una unidad de absorbancia por min. La actividad especfica se expres en unidades de actividad por mg de protena (UPOD/min/mg protena). Medida de Actividad de Polifenoloxidasa. Para medir la actividad de esta enzima se empleo como sustrato el catecol efectuando la lectura de absorbancia a 420 nm cada 15 s durante 300 s. La mezcla de reaccin consisti en 2 ml de Catecol 20 mM en Buffer Fosfato pH 7, 0.8 ml de Buffer Fosfato pH 7 y 0.2 ml de extracto enzimtico. Se incubo la mezcla durante 3 minutos a una temperatura de 20C. El blanco se utiliz el mismo que en POD. La unidad de actividad se manej igual que en la Peroxidasa. INHIBIDORES Se evalu el efecto en los frutos recolectados de dos estados de madurez el Cloruro de calcio (CaCl2), Cloruro de sodio (NaCl) y el cido Ascrbico en tres concentraciones al 1%, 2% y 4% en cada tratamiento sometido a tres repeticiones. La descripcin se presenta en el cuadro 1. El tiempo de inmersin se determin con ensayos previos utilizando 2 tiempos a 10 y 20 min en donde se tom el pH, IA y Brix de los frutos para 24

observar los efectos del tiempo en estas caractersticas, al no arrojar diferencias se determin sumergir el fruto por 10 min para cada tratamiento. Cuadro 1. Descripcin de tratamientos. TRATAMIENTO DESCRIPCION T1 cido Ascrbico 1% T2 cido Ascrbico 2% T3 cido Ascrbico 4% T4 Cloruro de sodio 1% T5 Cloruro de sodio 2% T6 Cloruro de sodio 4% T7 Cloruro de calcio 1% T8 Cloruro de calcio 2% T9 Cloruro de calcio 4% T10 Testigo

ANLISIS ESTADSTICO Para el anlisis de los resultados se utilizaron los elementos de la estadstica descriptiva como promedios, desviacin tpica estndar y coeficiente de variacin. A partir de las medidas de actividad de las diferentes variables se calcularon los valores promedio de las tres repeticiones, se efectu los ANAVA y se evaluaron las diferencias entre tratamientos por la prueba Duncan. Todo este tipo de anlisis estadstico se desarroll con base en el programa SPSS, versin 10 para Windows.

DISCUSION Y RESULTADOS PROPIEDADES FISICAS Y QUIMICAS EN FRUTOS DE MORA (Rubus glaucus) Se encontraron en las variables fsicas y qumicas diferencias estadsticas entre los ndices de los 40 frutos evaluados de cada finca, lo cual es coherente ya que un ndice tiene un mayor grado de madurez y adquiere ciertas caractersticas de un fruto ms maduro, como el obtener mayores dimensiones y peso en los frutos del ndice 5, como se puede observar en la tabla 1 en la que se presenta todos los datos obtenidos para los dos ndices; se presenta una menor firmeza en el ndice 5 (Grafico 1) ya que el fruto al estar ms maduro es ms blando a consecuencia de procesos qumicos como la perdida de turgencia, la degradacin de la pectina de la pared celular en las que interviene enzimas como la PME y PGA; el contenido de azcar tambin es mayor en este ndice (Grafico 2) debido a que en las frutas ocurre un comportamiento general en donde el aumento del contenido de azcar es a medida que avanza su madurez en donde el almidn o cidos orgnicos se han hidrolizado en azucares como fructosa, sacarosa y glucosa (Rojas et al., 2004), por tanto se va a tener una mayor concentracin de azucares en los ltimos ndices de madurez lo que se puede deber a una mayor translocacin de fotosintetizados 25

hacia el fruto o a que ciertos polisacridos de reserva que forman parte de las substancias cementantes de las clulas se hidrolicen (Hernndez, 2006).
Tabla 1. Propiedades fsicas y qumicas encontradas en el ndice 2 y 5 en el fruto de mora (Rubus glaucus).

INDICE 2 VARIABLE Longitud (mm) Dimetro (mm) Peso fresco (g) Firmeza (N) pH Grados Brix ndice de Acidez ndice de Madurez
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INDICE 5 DESV ESTAN 2,37 1,15 0,61 15,16 0,06 0,49 0,22 0.22 MIN-MAX 21 - 44 15 - 24,24 5,11 - 11 7 - 27,2 1,86 - 3,29 5 - 10,7 0,77 - 2,33 0.77-6.52 MEDIA 2,57 7,41 1,56 29,88 21,43 7,48 17,36 5.09 4,8 0,34 1,18 0,24 0.24 DESV ESTAN 4,04 1,26 1,36

MIN-MAX 21 - 33 16 - 22 2,86 - 6,55 10 - 82 2,46 - 2,27 4,4 - 8,6 3,26 - 4,9 1-2.19

MEDIA 2,84 6,26 3,97 26,55 18,45 4,8 49,42 1.58

50
FIRMEZA (N) 40 30 20 10 0

49,5

49,34

INDICE 2

GRADOS BRIX

INDICE 5

15,71

19,02

F2 F1 F2 FINCAS FINCAS Grfica 1 y 2. Media de Firmeza y Grados Brix por fincas e ndices del fruto de mora ( Rubus glaucus).

F1

9 8 7 6 5 4 3 2 1 0

8,06 INDICE 2 6,76 5,93 6,6

INDICE 5

ACTIVIDADE ENZIMTICA Peroxidasa (POD). La actividad de Peroxidasa se encontr desde 0,16 a 0,83 UA/min/mg de protena este resultado es acorde a lo encontrado por Baquero (2009), quien encontr una actividad mxima de 0,9 UA/min/mg en tomate de rbol y por Baquero (2005) en pitaya valores de 0,03 hasta 3,1UA/min/mg de protena, a diferencia de lo reportado por estos autores el fruto de mora presenta una baja actividad. Como se aprecia en la grfica 3 existe una mayor actividad de esta enzima en los frutos con una maduracin ms avanzada lo cual es acorde ya que en los ltimos ndices de 26

madurez se empieza a evidenciar el pardeamiento enzimtico por la aparicin de daos en las membranas debido al procesos de senescencia, daos por insectos, aparicin de patgenos (principalmente Botrytis) labores del cultivo (manejo cosecha, poscosecha) lo que hace ms fcil el contacto sustrato-enzima.
UA/min/mg de protena 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 F1 FINCAS F2 0,29 0,23 INDICE 2 INDICE 5

0,44

0,42

Grfica 3. Actividad de Peroxidasa en el furo de mora (Rubus glaucus) sin la aplicacin de tratamientos

Polifenoloxidasa (PFO). La actividad de esta enzima se encontr entre los rangos de 0,03 y 0,24UA/min/mg de protena los cuales son ms bajos que lo reportado por Gasull (2006), encontrando para la pera valores de 1 UA/min/mg de protena y para manzana 0.9 UA/min/mg de protena, lo cual es lgico ya que estas frutas son reportadas como las ms sensibles al pardeamiento enzimtico.
UA/min/mg de proteina 0,1 0,08 0,06 0,04 0,02 0 0,079 0,062 0,044 0,074 INDICE 2 INDICE 5

F1

FINCAS

F2

Grfica 4. Actividad de Polifenoloxidasa en el furo de mora (Rubus glaucus) sin la aplicacin de tratamientos.

En cuanto a la actividad de esta enzima no tuvo un comportamiento similar en los ndices de las dos fincas (Grafico 4), existe gran heterogeneidad en los resultados de las publicaciones referentes a parmetros que afectan a la actividad enzimtica de la polifenoloxidasa (pH ptimo, latencia, especificidad por el sustrato, etc.) entre especies y dentro de la misma especie, entre variedades y diferentes estados de desarrollo (la actividad enzimtica es ms elevada en frutos jvenes que en los maduros) (Robards et al., 1999, citado por Prez, 2003), como tambin se report que la actividad de la PFO es alta en los tejidos en desarrollo y en los tejidos meristemticos, pero disminuye al madurar 27

las clulas (Cary et al., 1992; Shahar et al., 1992 citado por Gooding, 2001) como se observa comparando los dos ndices de la F1.En otra investigacin con frutos de guanbana, determinaron que existe una correlacin positiva entre la actividad de la enzima y los compuestos fenlicos, en la medida que avanza la maduracin de frutos verdes a maduros e igualmente sealan que la concentracin de la enzima en el punto de maduracin ptima del fruto es mnima (Garca, 2004).

Captulo 9. Metabolismo especiales aplicados

Leccin 41. Metabolismo secundario de las plantas

Metabolitos secundarios en las especies Gliricidia sepium y Tithonia diversifolia

Luz Elena Santacoloma Varn 1 y Jairo Enrique Granados2 ; 1,2 Docentes investigadores, ECAPMA, UNAD

Resumen Se recolectaron muestras de 2 especies forrajeras (hoja peciolo) de las especies Gliricidia sepium, y Tithonia diversifolia en diferentes condiciones edficas (departamentos del Valle del Cauca y Cesar) y se evalu su contenido de polifenoles totales, taninos totales, taninos condensados y saponinas. El propsito fu detectar el efecto de las condiciones de conductividad elctrica sobre la concentracin de estas fitobiomolculas secundarias metabolizadas por la clula vegetal. Introduccin El uso de leguminosas y asterceas en sistemas de alimentacin animal es una prctica que se ha venido implementando desde hace varios aos en muchas regiones del trpico; por el alto contenido de protena y minerales que contienen. Entre las leguminosas se destaca la arbrea Gliricidia sepium , especie poco valorada como fuente suplementaria de protena, especialmente en la poca seca, cuando los forrajes son escasos y de mala calidad (Palma et al 1999). Entre las asterceas sobresale la Tithonia diversifoli, planta de gran adaptabilidad a diversos pisos trmicos y con alto contenido de nutrientes para rumiantes y no rumiantes. No obstante a lo anterior, es importante tener en cuenta un factor que en cierta medida puede constituir una limitante en el uso de estas plantas como material forrajero y es la presencia de metabolitos secundarios que pueden afectar la

28

digestibilidad, los cuales no solamente pueden interferir con los procesos de digestin y absorcin de los nutrientes, sino que, previo paso al torrente sanguneo, pueden desencadenar variados efectos sistmicos en los animales (Jackson et al., 1996). El contenido de varios tipos de estos metabolitos secundarios, est influenciado por el genotipo de la planta (la especie y la variedad), las caractersticas ambientales (radiacin solar y disponibilidad de agua), la velocidad de crecimiento, la madurez, la condicin nutricional del suelo, la depredacin y las enfermedades (Waterman y Mole 1995). As mismo, la aparicin de los compuestos secundarios est relacionada con los mecanismos de defensa de la planta y los efectos del suelo y el clima (Harborne, 1993). Kumar 1997 plantea. que los distintos compuestos que puede producir una especie presentan una determinada distribucin dentro de los rganos, tejidos y clulas de una planta, y ello responde frecuentemente a las influencias ambientales. Entre los metabolitos secundarios, se destacan los taninos, por su abundancia en la naturaleza, y particularmente en los forrajes; Posada (2005) los define como un grupo de polifenoles solubles en agua, de relativo alto peso molecular, con presencia en casi todas las plantas, particularmente en las dicotiledneas, de las cuales hacen parte las leguminosas. Leinmller 1991 explica que su distribucin al interior de ellas vara entre especies y a nivel de clula vegetal se encuentran en las vacuolas citoplasmticas o en la pared celular. La sntesis de taninos, por su parte, se presenta a partir de esqueletos de carbono del metabolismo primario, como ocurre con los rebrotes ms jvenes de la planta, que tambin necesitan las reservas de carbono para su crecimiento (Haukioja et al 1985). As mismo, los taninos tienen la capacidad para formar enlaces qumicos ms o menos estables al interactuar con protenas, carbohidratos y otras macromolculas de los alimentos, o con las enzimas digestivas; adems se ha demostrado que los taninos pueden ser txicos para bacterias; en los rumiantes se refleja en cambios de la digestin ruminal de protenas y carbohidratos, y en la produccin de cidos grasos voltiles ( Makkar et al 1988, Reed 1995). Para Norton (1997), los aspectos que inciden en el contenido de taninos en los rboles y que tienen relacin con la planta son; la composicin gentica, la especie, el grado de madurez, el estado de crecimiento y la defoliacin por herbvoros. Segn este mismo autor los factores ambientales que mayor incidencia tienen en el contenido de taninos son; la estacin climtica, la humedad ambiental y luminosidad. Otros aspectos inherentes a la planta que inciden en el contenido de taninos es la parte de sta a la cual pertenece, siendo diferente el contenido de estos metabolitos en el peciolo, que en la hoja. Por su parte, Oncina et al 2000 y Fedoreyev et al., 2000 han demostrado que las partes de la planta, presentan productividades diferentes de metabolitos secundarios y que se acumulan cantidades de metabolitos diferentes de acuerdo a la parte de la planta a la cual corresponde. Los taninos pueden dividirse, segn su estructura qumica, en taninos condensados (proantocianidinas) , y taninos hidrolizables (derivados de los cidos glico y elgico). Al 29

respecto, Romero y Palma 2001 encontraron que factores como el pastoreo provocan una disminucin en el contenido de taninos condensados y de los fenoles totales en G sepium, probablemente, porque se presenta una mayor competicin por reservas para la generacin de hojas, ms que para la produccin de taninos condensados. El efecto de la poca, tambin vari segn la naturaleza del tanino, sin mostrar tendencias consistentes. Los mismos autores reportan que los taninos adheridos a protena representaron alrededor de 70-75% de los taninos condensados totales, siendo ms alto los valores en poca de secas que en la de lluvias. Los taninos condensados pueden llegar a producir efectos depresivos sobre el consumo y la digestibilidad de la materia seca y el nitrgeno, ya que provoca saciedad y limita por lo tanto el consumo de materia seca (Flores et al 1999; Gutirrez et al 2003). Gershenzon 1984 reporta que la disponibilidad de agua contribuye a la produccin de taninos condensados; las plantas al encontrarse en periodo de escasez de agua, cierran sus estomas y restringen el proceso de fotosntesis. De este modo, se esperara una relacin negativa entre el estrs hdrico y la produccin de compuestos fenlicos. Por su parte, la leguminosa G sepium puede ser considerada como una de las leguminosas tropicales con menor contenido de taninos condensados, en comparacin con otras como Flemingia macrophylla con 388 g/kg (Cano et al 1994), Desmodium ovalifolium 238 g/kg, Acacia mangium 100 g/kg, Callyandra sp 194 g/kg (Jackson y Barry 1996). Esta concentracin pudiera explicar el comportamiento de los animales de desarrollar un grado de gustocidad medio para G. sepium (Kaito et al 1996). Por tanto, cconsiderando todos los anlisis qumicos realizados, la hoja de Matarratn es un excelente forraje para dietas tropicales, por que presenta los compuestos nutricionales ms altos, una buena tasa de degradabilidad y los principios txicos ms bajos que los otros forrajes estudiados Respecto a la especie forrajera Tithonia diversifolia, en un anlisis de metabolitos secundarios realizado por Rosales (1992), no se encontraron ni fenoles ni taninos, mientras que Vargas (1994) encontr un bajo contenido de fenoles y ausencia de saponinas. Murgaruline et al (1993) encontraron en esta especie un compuesto citotxico Tagitinin. Dutta et al (1993), citado por Rosales encontraron Hispidulin, adems del compuesto Tagitinin, a los cuales le atribuyen el efecto repelente contra los insectos. Las saponinas son otro tipo de metabolitos secundarios conformados por compuestos que en forma glucosdica (como esteroides reguladores del crecimiento) pueden generar en las plantas alto crecimiento, desarrollo, rpida recuperacin ante la poda y brotes abundantes (Ashok., K.J Vincent R.M y Nessler 2000. Tambin Kumar 1997, en dependencia de las concentraciones y las estructuras qumicas especficas los compuestos saponnicos pueden constituir factores antinutricionales en rumiantes y monogstricos por conferirle a los forrajes un sabor amargo, provocar espumas consistentes, e interferir en la absorcin de los alimentos No obstante tambin puede tener un efecto positivo en el metabolismo digestivo, al generar complejos con otros metabolitos secundarios con caractersticas txicas (Makkar., 1997). 30

En consecuencia, es necesario realizar investigaciones sobre los efectos de los factores ambientales, como son los edficos, en la produccin de metabolitos secundarios, en las interacciones suelo- planta- as como en la determinacin de los factores que inciden en su concentracin. Para ello se parte de una hiptesis fundamental y es que el contenido de metabolitos secundarios de las plantas vara en funcin de las caractersticas del suelo, expresadas en variables como la conductividad elctrica. Metodologa Zona de muestreo La recoleccin del material vegetal y de suelos se realiz en fincas ubicadas en la zona central del Valle, en el municipio de la Paz y de Pueblo Bello en el Cesar con las
condiciones climticas que se presentan en la Tabla 1. Tabla 1. Condiciones climticas de las regiones donde fueron tomadas las muestras de forraje

Condiciones climticas Zonas de muestreo Temperatura Precipitacin promedio (Grados promedio centgrados) lluvia) 1200 1311 (mm Altura (m.s.n.n)

Tulu (Valle del 27 Cauca) San Diego (Csar) 29 Pueblo Bello 21 (Csar)

950 500 1200

Fuente: Plan de desarrollo de los municipios (2011)

Recoleccin de las muestras: La fraccin vegetal (hojas y tallos tiernos) de Gliricidia sepium y Tithonia diversifolia fue colectada a partir de plantas adultas en los tres sitios mencionados durante el mes de agosto de 2011 en el cual predomina tiempo seco en los tres lugares. El material fue llevado al laboratorio de Nutricin Animal de la sede Nacional Jos Celestino Mutis de la UNAD y fue sometido a proceso de secado a temperatura ambiente, en un lugar ventilado durante 72 horas. Posteriormente, las muestras fueron molidas, tamizadas y se extrajeron los extractos para realizarse el anlisis de los metabolitos secundarios. Preparacin y extraccin del material para anlisis fitoqumico Las muestras se secaron a la sombra durante 30 das, posteriormente se molieron hasta menos de 1 mm de tamao de partcula en un molino de martillo para laboratorio. Se prepararon 3 fracciones (etanol, eter dietlico y agua) con 10 g de cada muestra y finalmente se efectu un tamizaje fitoqumico de acuerdo a Cullar (1991). Por ltimo, se cuantificaron las cantidades de polifenoles totales, taninos totales y taninos condensados 31

presentes en las muestras, utilizando etanol como solvente y tomando como base las tcnicas descritas por AOAC (1995). Mtodos analticos para los fitometabolitos estudiados Los mtodos utilizados se describen en el cuadro 1
Cuadro 1. Identificacin de variables analizadas y la tcnica analtica utilizada

Variable Polifenoles Totales (PFT)

Tcnica analtica

Fuente et

Espectrofotometra con Dewanto reactivo de Folin Ciocalteu al. (2002), Terrill et al. Espectrofotometra con n butanol -HCl Folin-Denis Ciocalteu y Folin

Taninos condensados (TC) Taninos Totales

Posada, Et al 2006

Fuente: Laboratorio de Nutricin animal UNAD., (2011)

Para la prueba de las saponinas se tom 1 mL de metanol y se aadieron 9 mL de agua, para luego filtrarse esta solucin. Se tom 1 mL de este filtrado en un tubo de prueba pequeo, se agit vigorosamente por 30 segundos y se dej en reposo durante 15 minutos. La espuma sobrenadante indica la presencia de saponinas en el forraje. La proporcin de saponinas se midi de acuerdo a la altura (h) de la espuma sobrenadante:
Tabla 1.Determinacin de saponinas segn la altura de la espuma

Rango h (mm) 0.0 0.1-5.0 5.1-9.0 9.1-14 Mayor de 14

Indicador Prueba negativa Contenido muy bajo Contenido bajo Contenido moderado Contenido alto
Fuente: Cullar (1991)

Con respecto a los anlisis de pH y conductividad elctrica de las muestras de suelo se utiliz la tcnica descrita en IGAG (2009) Los resultados obtenidos para cada variable se sometieron a un anlisis de varianza en doble va, con el fin de determinar diferencias estadsticas entre zonas muestreadas y especies evaluadas. Adicionalmente, se realiz un anlisis de correlacin mltiple, utilizando el coeficiente de Pearson, con el propsito de detectar las posibles correlaciones entre conductividad elctrica, pH y el contenido de los metabolitos 32

secundarios cuantifcados en las especies muestreadas. Para lo anterior, se utiliz el paquete estadstico SPSS, versin 11.5. Leccin 42: Bioqumica de la Madera La madera es una mezcla de tres polmeros naturales: celulosa, lignina y hemicelulosas, que guardan una relacin aproximada de 50:25:25, segn la especie, las variaciones biolgicas, tales como las diferencias genticas que pueda haber dentro de una especie, y las condiciones de crecimiento. La celulosa y las hemicelulosas son polmeras de hidratos de carbono formados a partir de molculas de monosacridos, y la lignina es un polmero de unidades fenilpropnicas (Browning, 1963). La celulosa es un polmero de la glucosa de cadena larga que nicamente se diferencia del almidn, que es tambin un polmero glucsico, por la configuracin de las molculas glucsicas. El carcter fibroso de las clulas leosas es el resultado de la disposicin lineal, orientada y cristalina de su elemento ms abundante, la celulosa. Las hemicelulosas son polmeras de cadena ms corta o ramificada de sacridos con cinco tomos de carbono (pentosas), tales como la xilosa, o de seis tomos de carbono (hexosas) aparte de la glucosa. Son de naturaleza amorfa y sirven, con la lignina, para formar la matriz en la cual se incrustan las fibrillas de celulosa. Aunque la estructura de la celulosa es la misma en las diferentes especies las hemicelulosas varan considerablemente entre especies, especialmente entre las frondosas y las conferas. Las hemicelulosas de las frondosas son, en general, ms ricas en pentosas mientras que las hemicelulosas de las conferas suelen contener ms hexosas. La lignina, que es el tercer componente de la membrana celular, es un polmero tridimensional que se forma a partir de las unidades fenilpropnicas que se han desarrollado aleatoriamente formando una molcula grande y compleja con muchas diferentes clases de ligamentos entre los bloques estructurales. La estructura de la lignina tambin vara segn se trate de una especie frondosa o confera. Los grupos fenlicos de la lignina de frondosas se sustituyen ms con grupos metxilos que los de la lignina de conferas. Una de las consecuencias de esta diferencia es que las ligninas de frondosas estn menos reticuladas y son ms fciles de disolver durante la conversin a pasta. La lignina acta de cemento entre las fibras leosas y como agente endurecedor entre las fibras en la produccin de pasta de madera qumica. Se disuelve por varios tratamientos qumicos, quedando la celulosa y las hemicelulosas en forma fibrosa. Algunas hemicelulosas se pierden durante este proceso a causa de su menor peso molecular, mayor solubilidad y ms fcil hidrolizacin. Adems de los componentes polimricos del tabique celular que constituyen la fraccin principal de la madera, hay diferentes especies que contienen diversas cantidades y clases de materiales extraos que se llaman, en conjunto, extractivos. En las conferas, se encuentran con frecuencia cantidades considerables de resinas que consisten tanto en 33

cidos grasos como en los llamados cidos resinosos que se derivan de terpenos simples tales como la trementina y el aceite de pino. Los taninos son fenoles polihidroxlicos que se encuentran en el duramen y corteza de muchas especies. El caucho se obtiene de la corteza interior de ciertos rboles, en forma de ltex. Tambin pueden obtenerse de diversas especies aceites aromticos y azcares solubles. El aceite de cedro y el azcar de arce son ejemplos bien conocidos.

43. Productos qumicos derivados de la madera

Tomado de: IRVING S. GOLDSTEIN, profesor del Departament of Wood and Paper Science, de la Universidad del Estado de Carolina del Norte, Estados Unidos.

Adems de la celulosa, que es el polmero ms empleado hoy da y que se utiliza principalmente en su estado natural fibroso despus de extrado, se siguen empleando todava cantidades considerables de los llamados productos silviqumicos (Goheen, 1972) a pesar de la preponderancia de las sustancias qumicas derivadas del petrleo, o productos petroqumicos. Licores de pulpacin. Los fragmentos qumicos de los polmeras del tabique celular que quedan en solucin despus de la fabricacin de la pasta pueden, con frecuencia, aislarse de los licores de la fabricacin de pasta y utilizarse. En general, los licores resultantes de la fabricacin de pasta por medios alcalinos se queman durante la recuperacin de los productos qumicos empleados, pero los licores resultantes de la fabricacin de pasta al sulfito suelen tratarse para obtener subproductos tiles. La lignina sulfonada puede precipitarse en forma de sulfonatos de lignina y utilizarse como productos tnicos, adhesivos, aglutinantes, dispersantes, etc. Los sacridos contenidos en el licor de sulfito agotado se fermentan con levadura para producir alcohol etlico y suplementos de forrajes y piensos. Mediante la oxidacin alcalina suave de los sulfonatos de lignina, se obtiene vainillina para aromatizantes y odorantes. La lignina de lcali obtenido del sulfato o del licor negro kraft se precipita y utiliza como diluente de resinas, para refuerzo del cancho y la estabilizacin de emulsiones. Entre los productos voltiles obtenidos del licor negro kraft figuran el dimetil sulfuro, dimetil sulfxido y dimetil sulfona, que son tiles como disolventes y reactivos qumicos. Talol. La industria de calafateantes navales ha quedado en gran parte desplazada por la recuperacin de los componentes oleorresinosos de la madera resultantes del procedimiento de fabricacin de pasta kraft (Uprichard, 1978; Zinkel, 1975). Algunas esencias voltiles como la trementina se recuperan de los gases de alivio expulsados de los digestores. El licor resultante de la fabricacin de pasta con lcali convierte a los cidos grasos y a los cidos resinosos en sales sdicas que se despuman del licor negro concentrado y se acidifican para producir talol crudo.

34

Hidrlisis de la madera. La hidrlisis de la madera, o sea la conversin de los polmeras de carbohidratos que contiene la madera en monosacridos mediante reaccin qumica con agua en presencia de catalizadores cidos, es un procedimiento que se conoce desde hace 150 aos y que se ha empleado en escala comercial en los Estados Unidos durante la primera guerra mundial, en Alemania durante la segunda guerra mundial, y se utiliza actualmente en la U.R.S.S. El producto principal es la glucosa, que puede convertirse despus en etanol o levadura. Polmeros celulsicos. La celulosa qumica de gran pureza, o pasta soluble, es el material de partida de derivados polimricos de la celulosa tales como el rayn y el celofn (que son ambos celulosas regeneradas); steres celulsicas tales como el acetato y el butirato para la produccin de fibras; pelculas y aplicaciones de moldeo, y teres celulsicas tales como la carboximetilcelulosa, la etilcelulosa, y la hidroxietilcelulosa, que se utilizan como gomas. Extractivos. Todava se sigue obteniendo de los tocones de pino, por destilacin al vapor o por extraccin, cierta cantidad de trementina y colofonia. La arabinogalactana, que es una goma hemicelulsica extrada del alerce, se utiliza como sucedneo de la goma arbica. Los cidos fenlicos extrados de la corteza de varias conferas se emplean como diluentes para adhesivos resinosos sintticos y como aglutinantes y dispersantes. Las ceras que se extraen de la corteza del abeto Douglas pueden utilizarse en las aplicaciones generales de la cera, y el caucho natural sigue siendo un material importante. Productos qumicos que se obtendrn de la madera En el futuro, la utilizacin de la madera para la obtencin de productos qumicos revestir dos categoras principales: por una parte, la extensin y ampliacin de los procedimientos actuales, y por otra, la transformacin de los polmeras de la membrana celular en materias primas qumicas de poco peso molecular. Adems de la ampliacin material de las operaciones actuales, se persigue tambin su extensin a otros aprovechamientos afines en la utilizacin de los productos y extractivos. Los ejemplos que aqu se citan son ilustrativos y no Imitadores. Los extractivos obtenidos de la corteza y el leo tienen un potencial mucho mayor que el que indica su aprovechamiento actual (Hillis, 1978; Laver, 1978). Los polmeras celulsicas podran tener una mayor importancia si se pudieran reducir los costos de energa y mejorar sus propiedades (Allan, 1978; Goldstein, 1977). Se puede estimular la produccin de oleorresina de los pinos aplicando herbicidas (Roberts, 1973). Se pueden obtener polmeros hidrocarbricos con el cultivo comercial de nuevas plantas (Calvin, 1978), y producir fenoles de poco peso molecular a partir de la lignina, subproducto de los licores de la fabricacin de pasta (Goheen, 1971; Benigni y Goldstein, 1971). Es posible recuperar cidos sacarnicos del licor negro kraft (Sarkanen, 1976). El follaje puede producir aceites esenciales, clorofila y protena (Barton, 1978). 35

Conversin de los polmeros de la membrana celular. La porcin principal de la madera consiste en los componentes del tabique celular. En cuanto a volumen, esta fuente de materia prima supera con mucho a los elementos extractivos o subproductos qumicos y representa un recurso potencial para satisfacer todas las necesidades qumicas en sustitucin de los productos petroqumicos. Se puede lograr una produccin en gran escala de sustancias qumicas, importantes desde el punto de vista industrial, derivadas de la lignocelulosa, siguiendo diversos procedimientos (Goldstein, 1976a). Estas cantidades industriales pueden proveer los bloques estructurales qumicos fundamentales para la conversin en polmeros sintticos (Goldstein, 1975a). Madera total. Los polmeros del tabique celular en su estado natural mixto pueden descomponerse en preparados ms simples mediante tratamientos rigurosos que implican temperaturas altas y tambin, en algunos casos, presiones elevadas. Estos procedimientos no son de por si selectivos y son idnticos a los que se emplean con buenos resultados para la transformacin en productos qumicos de los desperdicios slidos orgnicos o del carbn. En la gasificacin, la madera se calienta a temperaturas de hasta 1000C para formar una mezcla de monxido de carbono y de hidrgeno como principales productos (Prahacs et al., 1971). Como subproductos se obtienen pequeas cantidades de etileno, acetileno, propileno, benceno y tolueno. El monxido de carbono y el hidrgeno que se forman de igual manera que en la gasificacin del carbn se pueden: ( a) tratar ms an para obtener hidrgeno con vistas a la produccin de amoniaco; ( b) convertir por catlisis en metanol; (c) enriquecer con hidrgeno y someter a reaccin para formar metano, o (d) convertir por catalizacin en una mezcla de hidrocarburos alifticos por el procedimiento FisherTropsch. La madera se lica por reaccin con monxido de carbono y agua a una temperatura de 350-400C y a una presin de 4000 libras por pulgada cuadrada (280 kg/cm 2), en presencia de varios catalizadores (Appell, 1971). Se produce un aceite viscoso (rendimiento: 40-50%) que puede tratarse ulteriormente para convertirlo en productos qumicos de la misma forma en que los productos petroqumicos se derivan del petrleo. La pirolisis, o degradacin trmica de la madera en ausencia de aire u oxigeno, transforma la madera en carbn de lea, gas y aceite (Saltes, 1978; Wender, 1974). El rendimiento relativo de cada producto depender de las condiciones de la pirolisis y de la composicin del substrato, pero a una temperatura de 900C las cifras tpicas seran 2535% de carbn de lea, 3045% de gas y hasta 8% de alquitrn y aceite. El gas consiste principalmente en hidrgeno, monxido de carbono y metano, mientras que el alquitrn y el aceite contienen elementos aceitosos ligeros como el benceno y el tolueno, as como preparados mixtos de temperatura de ebullicin ms elevada. Celulosa. La transformacin selectiva de la celulosa de polmero glucsico en glucosa monomrica puede lograrse por diversos medios. La hidrlisis, para obtener glucosa, puede catalizarse bien sea por cidos o enzimas, pero ningn procedimiento resulta tan 36

fcil como la hidrlisis del almidn debido al carcter cristalino de la celulosa. El contenido de lignina no impide la hidrlisis cida, pero una celulosa que contenga mucha lignina ser resistente a la hidrlisis enzimtica, por lo cual habr que delignificar en parte la madera o molerla fina para someterla a la hidrlisis por enzimas. La hidrlisis cida con cido diluido a elevadas temperaturas produce la descomposicin de parte de la glucosa formada, que se convierte en hidroximetilfurfurol (Harris, 1975), lo que limita al 50% aproximadamente el rendimiento neto de azcar. La hidrlisis cida fuerte a temperaturas ms bajas puede dar rendimientos casi cuantitativos de glucosa (Kusama, 1960). Shafizadeh (1978) ha demostrado que la destilacin en seco de la celulosa a 400-500C rinde casi 80% de un alquitrn que contiene principalmente levoglucosana que puede convertirse en glucosa con un rendimiento del 50% basado en celulosa. Para evitar toda contaminacin y reaccin con otros productos de descomposicin, se necesitara celulosa limpia de otros elementos del tabique celular. La transformacin de la celulosa en glucosa es el primer paso en la utilizacin qumica en gran escala de la celulosa. La fermentacin de la glucosa para obtener etanol mediante tcnicas industriales acreditadas de alto rendimiento ofrece grandes perspectivas. El etanol es un importante producto qumico industrial que se produce actualmente por hidratacin del etileno. Puede tambin tener una amplia aplicacin como combustible para motores de combustin interna. En la deshidratacin del etanol para obtener etileno, o sea la reaccin inversa a la actual formacin de etanol a partir de etileno del petrleo, tambin el rendimiento es elevado. De igual forma, del etanol se obtiene fcilmente butadieno por procedimientos industrialmente acreditados, pero que, debido a la baratura del petrleo, han quedado anticuados. La transformacin de la glucosa va etanol en etileno y butadieno representa la principal utilizacin potencial de la celulosa para obtener productos qumicos, debido a la importancia del etileno, tanto como producto qumico orgnico de mayor volumen que como bloque estructural para la obtencin de productos petroqumicos y plsticos, y el butadieno como agente para la produccin de caucho sinttico. La glucosa se transforma asimismo en productos qumicos que actualmente carecen de importancia desde el punto de vista industrial, pero que pueden tenerla en condiciones econmicas apropiadas. Uno de estos procedimientos es la produccin de hidroximetilfurfurol y su ulterior conversin en cido levulnico mediante la accin de cidos minerales calientes sobre la glucosa (Harris, 1975). El empleo de la glucosa como substrato de fermentacin general permitira la produccin, a partir de la madera, de un amplio surtido de antibiticos, productos qumicos, vitaminas y enzimas (Seeley, 1976). Por ejemplo, el cido lctico podra transformarse en cido acrlico y en acrilatos. 44. Ciclo del Carbono en sistemas agroforestales

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El carbono es un bioelemento que da estructura y soporte a los organismos vivos.. Biomolculas como: protenas, cidos nucleicos, carbohidratos, lpidos, enzimas ,

hormonas y aminocidos , tan esenciales para la vida ,contienen carbono. Se encuentra como dixido de carbono (CO2) gas carbnico, en atmsfera, ocanos y en los

combustibles fsiles almacenados bajo la superficie de la Tierra. El movimiento global del carbono entre el ambiente abitico y los organismos se denomina ciclo del carbono. El ciclo bsico comienza cuando las plantas, a travs de la fotosntesis, hacen uso del dixido de carbono (CO2) presente en la atmsfera o disuelto en el agua. El carbono (del CO2) pasa a formar parte de los tejidos vegetales en forma de carbohidratos , grasas y protenas, y el oxgeno es devuelto a la atmsfera o al agua mediante la respiracin. As, el carbono pasa a los herbvoros que consumen las plantas y de ese modo utilizan, reorganizan y degradan los compuestos carbonados mediante las RBE de la respiracin celular. Estas reacciones metablicas producen CO2, H2O , ATP ; tambin se libera gas carbnico como producto secundario del metabolismo, pero parte se almacena en los tejidos animales y pasa a los carnvoros, que se alimentan de los herbvoros. En ltima instancia, todos los compuestos del carbono se degradan por descomposicin, y el carbono que es liberado en forma de CO 2 a la atmsfera, es utilizado de nuevo por las plantas en su proceso fotosinttico,la figura 2, integra la secuencia de las etapas del ciclo.

Figura 2.Secuencia de reacciones en el ciclo del carbono (Tomado de: http://www.windows2universe.org/earth/Water/co2_cycle.html&lang=sp )

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En resumen, las reacciones ms importantes que ocurren en el ciclo del carbono son las siguientes: 1. Fotosntesis : El dixido de carbono de la atmsfera es fijado por las plantas en el ciclo de Calvin y ecuacin qumica: convertido en glucosa (azcar aldohexosa , C6) segn la

6CO2 + 6H2O + 686kcal

Radiacin UV

E=h

C6H12O6 + 6O2

2. Respiracin celular :Los animales consumen los vegetales y a travs de sus procesos digestivos , absortivos y metablicos , oxidan carbohidratos como la glucosa a travs de las RBE dadas en : gluclisis ,Ciclo de Krebs y Fosforilacin Oxidativa ,hasta producir gas carbnico , agua y energa , segn la ecuacin qumica :

C6H12O6 + 6O2

RBE
Mitocondria

6CO2 + 6H2O + 38ATP

plantas muertas y la

3. Descomposicin : Bacterias y hongos descomponen materia animal, devolviendo carbono al medio ambiente.

4. Fosilizacin: En algunos casos el carbono presente en las molculas biolgicas no regresa inmediatamente al ambiente abitico, por ejemplo el carbono presente en la madera de los rboles el que form parte de los depsitos de hulla a partir de restos de rboles antiguos que quedaron sepultados en condiciones

anaerobias antes de descomponerse. Hulla, petrleo y gas natural son llamados combustibles fsiles porque se formaron a partir de restos de organismos antiguos y contienen grandes cantidades de compuestos carbonados como resultado de la fotosntesis ocurrida hace millones de aos.

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45. Captura de Carbono en sistemas Agroforestales CUANTIFICACIN DEL ALMACENAMIENTO DE CARBONO EN SISTEMAS SILVOPASTORILES EN ZONAS PRODUCTORAS DE LECHE EN CUNDINAMARCA
ngel Alberto Terreros Riveros3, Sandra Castiblanco Guzmn4, Jenny Bustos Garca5, Jairo 6 7 8 Enrique Granados Moreno , Leonor Barreto de Escovar , Luz Mery Bernal .

RESUMEN Las prcticas productivas ganaderas deben encaminarse en acciones conservacionistas, mitigando el impacto que ejercen sobre los ecosistemas y el calentamiento global. Se cuantifico el almacenamiento de carbono en ganadera tradicional y sistemas silvopastoriles conformados por Alnus acuminata, Sambucus nigra, Acacia decurrens, Acacia melanoxylon, en asocio con pasturas compuestas por Pennisetum clandestinum , Holcus lanatus, Lolium spp, Trifolium pratense, Trifolium repens, en tres fincas ganaderas, determinando la lnea base para la cuantificacin de carbono. Se utilizo mtodo alomtrico para determinar la biomasa arriba del suelo del componente forestal, el valor para la relacin de raz es de 0,27 y el factor de proporcin de carbono equivalente a 0,5 por unidad de materia seca para el material vegetal, segn IPCC 2002. El porcentaje de carbono orgnico en suelos se determino por el mtodo Walkley Black, y la lectura se realizo por espectrofotometra; El carbono contenido en el suelo (t C/ha) se calculo a partir de los valores de porcentaje de carbono y densidad aparente. En la evaluacin se propuso un diseo en bloques al azar con arreglo factorial 3 x 4, donde el factor A = Finca, el factor B = Sistema (Un sistema de ganadera tradicional y tres tipos de arreglos de sistemas silvopastoriles). El anlisis de varianza demostr diferencias altamente significativas (p < 0,01) en el total de carbono almacenado entre fincas, entre sistemas y en la interaccin de finca*sistema, demostrando la gran capacidad de almacenamiento de carbono de los sistemas silvopastoriles frente a los sistemas de ganadera tradicional. Palabras Claves: Captura de Carbono, Componente Forestal, Biomasa Arriba del Suelo, Modelos Alomtricos, Carbono Orgnico en Suelo. INTRODUCCIN El impacto de las actividades agropecuarias en los diferentes ecosistemas es considerado de suma importancia por las agencias de desarrollo e institutos de investigacin; cuyos efectos en definitiva se traducen en baja fertilidad, baja capacidad de retencin de humedad, alta susceptibilidad a la erosin, perdida de la cobertura vegetal, problemas de compactacin, deforestacin, sistemas de manejo de praderas extractivos que

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Zootecnista. angelterreros@hotmail.com. UNAD. Bogot. Estudiante Tesista de Zootecnia. sandralcastiblanco@gmail.com. UNAD. Bogot. 5 Estudiante Tesista de Zootecnia. jennysu2203@hotmail.com. UNAD. Bogot. 6 Qumico. Ph.D. (c). M.Sc. Investigador. jairo.granados@unad.edu.co. UNAD. Bogot. 7 Zootecnista. M.Sc. (c). Espec. Nutricin Animal Sostenible. Investigador. leonor.barreto@unad.edu.co. UNAD. Bogot. 8 Biloga. Ph.D. Investigadora. lmbernalp@gmail.com. UNAD. Bogot.

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acrecientan la perdida de la capacidad productiva de estos y en fuentes de emisin de Gases de Efecto Invernadero (GEI). As mismo, es comn en los ltimos tiempos hablar de cambio climtico y de sus efectos negativos en el medio, tanto que las investigaciones cientficas sobre las emisiones de gases de efecto invernadero durante los ltimos 10 aos predicen que el cambio climtico tendr impactos negativos ambientales, sociales y econmicos a nivel global. Los impactos pueden incluir aumento del nivel de los mares, erosin costera, cambios dramticos en patrones climticos, aumento de enfermedades tropicales, la prdida acelerada de biodiversidad, y la desertificacin (Stuart y Moura Costa, 1998). Numerosas modelaciones del cambio climtico global sugieren que se puede contribuir sustancialmente al control de los niveles de CO 2 en la atmsfera mediante la calidad del manejo forestal, la conservacin del bosque en peligro de deforestacin, la rehabilitacin de bosques, forestacin, reforestacin9 o promocin de la agroforestera. Debido a que el suelo almacena cantidades considerables de carbono, las prcticas que promueven un aumento en el carbono orgnico del suelo tambin pueden tener un efecto positivo en la fijacin (Stuart, M.D. y Moura Costa, P. 1998). De hecho la Decisin 19/COP-9 10 ha definido como reservorios de carbono a la biomasa superficial, la biomasa subterrnea, los detritos, la madera muerta y el carbono orgnico del suelo. Los Sistemas Agroforestales y entre ellos los Silvopastoriles 11 pueden mantener y hasta aumentar las reservas de carbono en la vegetacin y los suelos; fomentando a su vez prcticas sostenibles con bajos insumos, debido al ciclaje de nutrientes y la estratificacin de la vegetacin perenne con lo que se disminuye la presin sobre los recursos naturales.Para efectos de homogenizar los conceptos y de acuerdo a la Decisin 17/COP 7 12 de la Convencin Marco Sobre el Cambio Climtico (CMCC) del Panel Intergubernamental Sobre Cambio Climtico (IPCC); se acord que el almacenamiento o stock de carbono hace referencia a la capacidad de un ecosistema de mantener una determinada cantidad promedio de carbono por ha, expresndose en toneladas de carbono por ha (t C ha-1). El carbono fijado se refiere a la capacidad de una unidad de rea cubierta por vegetacin para fijar carbono en un perodo determinado, adicional a la cantidad almacenada en el momento actual (Segura, 1997), expresndose en t C ha-1 ao-1. El carcter de adicional es considerado, segn la Decisin 19/COP 9 de la CMCC, si la absorcin neta efectiva de GEI por los sumideros supera la suma de las variaciones del carbono almacenado que se habran producido de no realizarse la actividad del proyecto de forestacin o
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Forestacin: Conversin, por actividad humana directa de tierras que carecieron de bosque durante un periodo mnimo de 50 aos, en tierras forestales mediante plantacin, siembra o fomento antropgeno de semilleros naturales. Reforestacin: Conversin por actividad humana directa de tierras no boscosas en tierras forestales mediante plantacin, siembra o fomento antropgeno de semilleros naturales en terrenos donde antiguamente hubo bosques, pero que actualmente estn deforestados. 10 Novena Reunin de la Conferencia de las partes en el Convenio sobre la Diversidad Biolgica. 11 Sistema de produccin del suelo que implica el asocio espacial y simultneo de praderas (que sustentan la alimentacin animal) y leosas perennes multipropsito. 12 Sptima Reunin de la Conferencia de las partes en el Convenio sobre la Diversidad Biolgica.

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reforestacin del Mecanismo de Desarrollo Limpio registrado, en el marco del Protocolo de Kyoto. Se est reconociendo el papel de las pasturas en el ciclo del carbono, por cuanto las gramneas seleccionadas con altos rendimientos de biomasa y bien adaptadas cumplen un papel importante en la reduccin de la emisin de carbono a la atmsfera debido a la produccin de biomasa area y races y deposicin de materia orgnica en el suelo. Se han reportado tasas de fijacin de carbono del orden de 0,1 a 4,3 t C ha-1 ao-1 para Sistemas Agroforestales y Silvopastoriles en Centroamrica (Kursten. 1993, Pomareda. 1999). Un estudio realizado en la Zona Norte de Costa Rica reporto niveles de almacenamiento de hasta 233 t C ha-1 mientras que el suelo de un sistema silvopastoril con regeneracin natural de laurel (Cordia alliodora) almacen de 180 200 t C ha-1. En Gupiles, Costa Rica, Andrade (1999) estim el almacenamiento de carbono sobre el suelo en sistemas silvopastoriles con Acacia mangium y Eucalyptus deglupta en combinacin con pasturas B. brizantha, B. decumbens, y P. maximum obtenindose valores que oscilan de 3,7 t C ha-1 a 4,7 t C ha-1 donde el componente arbreo aporta un promedio de 76 a 94% del carbono total. Arias (2001) reporta para un sistema silvopastoril en Venezuela con la especie Gliricidia sepium , un almacenamiento de 309 Kg. C ha -1 y una tasa de fijacin de 124 Kg C ha -1 ao-1; mientras que en el sistema de cultivos en callejones el almacenamiento fue de 654 Kg. C ha-1 y la tasa de fijacin de 327 Kg C ha-1 ao-1. MATERIALES Y MTODOS Localizacin El presente estudio se realizo en la finca San Pedro, localizada en el municipio de Mosquera, Cundinamarca, Colombia. El municipio presenta una temperatura promedio de 12,8 C, una humedad del 82% y una precipitacin anual de 600 700 mm.; En la finca Villa Nataly y El Ciprs, localizadas en Usme (Localidad Quinta de Bogot), Colombia. La regin presenta una temperatura promedio de 8 C, y una precipitacin anual de 1000 a 1500 mm. En el trabajo de investigacin se analizaron los siguientes sistemas y arreglos silvopastoriles dentro de las fincas seleccionadas de la siguiente forma: 1) Finca San Pedro: Sistema de ganadera tradicional (SGT) conformado por Kikuyo (P. clandestinum) 90%, Trbol Rojo (T. pratense) 5% y Raigrs (Lolium spp) 5%; Cerca Viva compuesta por Aliso (A. acuminata), Acacia negra (A. decurrens) y Acacia japnica (A. melanoxylon); Banco de Protena compuesto por Sauco (S. nigra), y como componente forrajero Kikuyo (P. clandestinum) en un 90%. Estos arreglos silvopastoriles llevan establecidos hace 4 aos aproximadamente. 2) Finca Villa Nataly: SGT conformado por Kikuyo (P. clandestinum) 40,5%, Raigrs (Lolium spp) 10,8%, Falsa poa (H. lanatus) 21%, Trbol rojo (T. pratense) 7,8% y Trbol blanco (T. repens) 1,1% y el 18% restante est representado por arvenses y malezas; Cerca Viva compuestos por Aliso (A. acuminata); Arreglo de Sombra y Ramoneo, compuesto por Aliso (A. acuminata); Banco de Protena compuesto principalmente por Acacia negra (A. decurrens), y otras especies presentes en 42

ms baja densidad como Acacia japnica ( A. melanoxylon) y Aliso (A. acuminata). Estos arreglos silvopastoriles tiene 5 aos de establecidos aproximadamente. 3) Finca El Ciprs: SGT conformado por Kikuyo (P. clandestinum ) 80%, Falsa poa (H. lanatus) 10%, y Trbol rojo (T. pratense) 10%; Viva compuesto por Aliso (A. acuminata). Este arreglo est establecido aproximadamente hace 2 aos. Para el anlisis de los datos se empleo un diseo experimental en bloques al azar, con tres repeticiones y arreglo factorial 3 x 4, donde el factor A = Finca (Tres fincas evaluadas) y el factor B = Cuatro sistemas (Un sistema de ganadera tradicional y tres tipos de arreglos de sistemas silvopastoriles), evaluando el efecto de la finca, el efecto del sistema y la interaccin de finca*sistema. Se utilizo tambin la prueba de Duncan para la determinacin de diferencias estadsticas de las medias entre las tres fincas y entre los cuatro sistemas evaluados. Unidades de Muestreo En cada sistema se estableci una unidad de muestreo denominada parcela permanente de muestreo (PPM), donde la forma y el tamao fueron determinados por el tipo de arreglo teniendo en cuenta la densidad de siembra y el tiempo de establecimiento (Tabla 1).
Tabla 1. Parcelas permanentes de Muestreo (PPM) Establecidas Finca Arreglo Silvopastoril Siglas Forma PPM Tamao PPM Coordenadas*

San Pedro

Cerca Viva de Aliso Acacias Banco de Protena de Sauco Cerca Viva de Aliso

CV-AA

Lineal

40 m

BP-S

Circular

1.257 m2

Latitud: 441'17.14" N Longitud: 7413'12.41" O Latitud: 441'38.17" N Longitud: 7412'55.75" O Latitud: 425'47.25" N Longitud: 74 7'58.66" O Latitud: 425'47.97" N Longitud: 74 7'59.33" O

CV-A

Lineal

46 m

Villa Nataly

Banco de Protena de Aliso y Acacias Sombra y Ramoneo de Aliso

BP-AA

Circular

314 m2

SR-A

Circular

1.257 m

Latitud: 425'49.78" N Longitud: 74 8'1.79" O Latitud: 423'37.27" N Longitud: 7410'20.15" O

El Ciprs

Cerca Viva de Aliso

CV-A

Rectangular

293 m2

* Datos obtenidos con GPS Garmin Colorado 300 (Autores., 2009).

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Se realiz un mapeo de los sistemas evaluados y de las PPM, con Geoposicionador (Garmin Colorado 300), la medicin del Dimetro a la Altura del Pecho (DAP) a 1,30 m de la base del rbol, la determinacin de la altura comercial de cada rbol por medio de clinmetro marca Suunto, el muestreo de forraje y hojarasca, y el muestreo de suelo a 30 cm de profundidad para hallar densidad aparente y porcentaje de carbono orgnico en el Laboratorio de Nutricin Animal de la Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD), sede Jos Celestino Mutis (Calle 14 Sur No. 14 23). Depsitos de Carbono en los Sistemas Evaluados Se definieron como depsitos de carbono para la cuantificacin del almacenamiento de carbono los siguientes estratos: Biomasa Arriba del Suelo: Comprende rboles en pie de Aliso (A. acuminata), Sauco (S. nigra), Acacia Negra (A. decurrens), Acacia Japnica (A. melanoxylon); y pastos Kikuyo (P. clandestinum ), Falsa Poa (H. lanatus), Raigrs (Lolium spp) Trbol Rojo (T. pratense) y Trbol Blanco (T. repens). Para la determinacin de la biomasa arriba del suelo del componente forestal se utilizo algunos modelos y ecuaciones alomtricas seleccionados teniendo en cuenta la zona climtica (Tabla 2), basndose en las medidas tomadas en las PPM (DAP y altura total).
Tabla 2. Ecuaciones Alomtricas para Determinar la Biomasa de Arboles Zona Climtica <900 mm <900 mm <1500 mm Rango DAP 3-30 3-30 5-40 Ecuacin Y = Log^ {-0,535 + log10 (BA)} Y = 0,299 * (DAP)2 Y = exp {-1,996 + 2,32*ln(DAP)} R2 0,94 0,94 0,89 Autor Martnez - Yrizar et al. (1992). Martnez - Yrizar et al. (1992). Brown et al. (1989). N (1) (2) (3)

Fuente: Martnez Yrizar et al. (1992). Brown et al. (1989). Fundacin Solar. (2000). Donde: Y = Biomasa arriba del suelo en kilogramos; DAP = Dimetro a la altura del pecho en centmetros; BA 2 2 = rea basal en cm (BA = PI * r ); r = radio.

El valor obtenido de biomasa expresada en kg, se dividi en 1000 para pasar a toneladas; este valor se multiplic por 0.5 (Proporcin de carbono por unidad de materia seca segn IPCC 2002) lo que da toneladas de carbono almacenado, luego se dividi en el rea de la PPM donde se obtuvo el dato de cada rbol expresado en m2, obteniendo toneladas de carbono por m2 (t C/m2); este valor se multiplico por 10000 para convertirlo a toneladas de carbono por hectrea (t C/ha). Por ltimo se realizo la sumatoria de los valores obtenidos de cada rbol medido en la PPM y as se obtuvo el total de t C/ha de este componente del sistema evaluado. La biomasa de la hojarasca y los forrajes se incluyeron en los clculos para biomasa arriba del suelo, ya que se muestrearon y pesaron conjuntamente en un marco de 50 x 50 44

cm (3 muestras por sistema silvopastoril y 5 muestras para sistema de ganadera tradicional). Para el clculo de la biomasa en estas fuentes se obtuvo el valor del contenido de humedad, determinando la materia seca de sub-muestras recolectadas de 200 g extrada de la mezcla de las muestras pesadas, por medio del secado en mufla a 100 C durante 4 horas. Este valor se clculo de la siguiente manera (Fundacin Solar., 2000): CH = (Phs - Pss) / Phs; Donde: CH = Contenido de humedad; Phs = Peso hmedo sub-muestra (g); y Pss = Peso seco sub-muestra (g). Con el valor de contenido de humedad se procedi a calcular la proporcin del peso hmedo que corresponde a biomasa: Y = Pht - (Pht * CH); Donde: Y = Biomasa en gramos; Pht = Peso hmedo total de la muestra (g); y CH = Contenido de humedad. El valor obtenido se dividi en 1000000 para obtener toneladas, luego se multiplico por 0.5 (Proporcin de carbono por unidad de materia seca segn IPCC 2002) quedando toneladas de carbono almacenado, por ltimo se dividi en el total de metros muestreados, dando como resultado t C/m2 y al multiplicarlo por 10000 m 2 se obtuvo t C/ha. Biomasa Abajo del Suelo: Hace referencia a las races de la vegetacin del ecosistema estudiado. El clculo de este componente se realizo con el valor para R (Relacin de raz) para el bosque seco tropical que es de 0.27 segn el cuadro 3A.1.8. de IPCC (2002), de la biomasa calculada arriba del suelo, expresada en t MS/ha. Para hallar el contenido de carbono en este componente se multiplico por 0.5 (Proporcin de carbono por unidad de materia seca segn IPCC 2002) obteniendo el valor en t C/ha. Para las especies forrajeras y herbceas, se descont el 5% que representa la proporcin de hojarasca del total de biomasa calculada arriba del suelo. Hojarasca: Comprende residuos orgnicos de hojas, ramas, frutos y semillas que se encuentran en la superficie del suelo. El clculo de este componente fue incluido en los clculos de biomasa y contenido de carbono arriba del suelo conjuntamente con los forrajes. Suelo: Se cuantifico el contenido de carbono en los primeros 30 cm de profundidad del suelo; utilizando una muestra obtenida a 20 cm de profundidad para determinar la densidad aparente por el mtodo del cilindro de volumen conocido descrito en MacDicken (1997) y otra de aproximadamente 200 g obtenida a 30 cm de profundidad, para determinar el porcentaje de carbono orgnico en laboratorio por el mtodo WalkleyBlack, en el cual el suelo se oxida con una solucin de Dicromato de potasio estandarizada, utilizando el calor producido por la dilucin de cido sulfrico concentrado, en la solucin crmica. El porcentaje de carbono orgnico se determin por colorimetra (espectrofotometra), cuantificando el color verde del cido crmico reducido a una Absorbancia mxima (max) de 590 nanmetros (nm), la cual es proporcional a la materia orgnica que reacciona. Adems, se realiz la respectiva curva de calibracin con patrones de Sacarosa (Adaptado de Garca, G. Ballesteros, G). Para hallar el contenido de carbono en el suelo, se utilizo el siguiente clculo: COS = CO * DA * P; Donde: COS = C almacenado (t C ha-1), P = Profundidad de muestreo (cm); DA = Densidad aparente del

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suelo (g/cm-3), y CO = Contenido de carbono (%) determinado por mtodo de WalkleyBlack.

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