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UNIVERSIDAD DE SUCRE FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD PROGRAMA MEDICINA BIOESTRUCTURA I

LABORATORIO 5: IDENTIFICACIN MICROSCPICA DE LOS TIPOS CELULARES PRESENTES EN SANGRE PERIFRICA.

INTRODUCCIN La sangre es un tejido conectivo especializado formado por diferentes poblaciones celulares, cada una de stas exhibe una morfologa caracterstica y desempean una importante funcin, que incluyen desde el transporte de nutrientes y oxgeno a cada clula del cuerpo hasta las reacciones de la respuesta inmune y la coagulacin. Esto es posible gracias a que el corazn la impulsa de manera rtmica y unidireccional a travs del sistema circulatorio. En condiciones normales de salud cada poblacin celular presenta una densidad y morfologa caracterstica. A partir de las observaciones realizadas en muestras sanguneas de personas afectadas por diversos procesos patolgicos se ha determinado que en stos procesos, la densidad de cada tipo celular se aleja de los valores normales y por lo tanto el conteo de clulas sanguneas y la evaluacin de su morfologa se ha convertido en una herramienta de diagnstico clnico de primera lnea, en este sentido, los exmenes hematolgicos pueden ayudar a diagnosticar la anemia, hemofilia, trastornos de la coagulacin y la leucemia entre otras patologas, por lo tanto, es importante que el estudiante de medicina a lo largo de su formacin profesional sea capaz de diferenciar y comprender tales procesos y para ello, el estudiante debe desarrollar competencia en la identificacin de las diferentes lneas celulares del tejido sanguneo, la morfologa de las cluas que lo componen, su fisiologa, conteos normales y los principales factores que afectan el equilibrio de las poblaciones celulares.

Considerando lo anterior en la presente prctica el estudiante adquirir destrezas en la elaboracin de extendidos de sangre perifrica con el fin de observar las diferentes poblaciones celulares presentes en el tejido sanguneo. Objetivo General: Identificar las principales lneas celulares (hemates, leucocitos y plaquetas) que componen el tejido sanguneo a partir de la observacin microscpica de extendidos extendidos de sangre perifrica. Objetivos Especficos: Desarrollar destrezas en la toma de muestras por puncin con lanceta para la realizacin de extendidos de sangre perifrica. Aplicar el mtodo de tincin diferencial a clulas sanguneas. Identificar y asociar las caractersticas principales de los diferentes tipos celulares presentes en los extendidos de sangre perifrica. MATERIALES

Microscopio Portaobjetos Mechero de alcohol Lanceta estril Cubeta de tincin

Frasco lavador Alcohol absoluto Hematoxilina Eosina

Procedimiento . Con la lanceta estril realice una puncin en pulgar, previamente esterilice la superficie del dedo con algodn y alcohol.

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Presione el dedo y deposite una gota de sangre en la parte central de un portaobjetos, ubique un segundo portaobjeto formando un ngulo de 120, como indica la figura No. 1 y deslcelo cuidadosamente sobre la superficie del portaobjetos de manera que se pueda obtener una fina pelcula de sangre. El porta absorbe la gota y la arrastra, pero sin pasar nunca por encima de ella para no daar los hemates.

Gota de sangre

Figura No. 1. ngulo y desplazamiento de las placas portaobjetos para la realizacin de un extendido de sangre perifrica. . Para colorear el frotis de sangre obtenido, colquelo sobre la cubeta de tincin y aada gotas de alcohol absoluto, espere a que el alcohol se evapore. . Cubra el extendido con unas gotas de hematoxilina y deje actuar durante 15 minutos. Evite la desecacin del colorante agregando ms lquido. . . Lave la preparacin, aada gotas de eosina dejndola actuar 1 minuto. Lavar el exceso de colorante con agua destilada y deje secar al aire libre o bien al calor muy lento de la llama del mechero. Posteriormente observe al microscopio con el objetivo de 100x y realice el reconocimiento de los diferentes tipos celulares presentes en el tejido sanguneo. Identifique: neutrfilos, eosinfilos, basfilos, linfocitos, plaquetas, monocitos.

PREGUNTAS

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1. Explique, porqu las clulas sanguneas toman una coloracin diferencial al ser tratadas con hematoxilina y eosina?. Qu estructuras celulares y tipos de clulas son coloreados con cada uno de estos dos colorantes? 2. Que es un colorante y como acta, de que tipo son los colorantes empleados en la prctica? 3. Qu funcin cumple el alcohol en la preparacin de los extendidos? 4. Cuntos tipos de leucocitos identific en las placas? 5. Describa las caractersticas morfolgicas y morfomtricas de los diferentes tipos celulares observados en el extendido. 6. Consulte cules son los valores normales para cada una de las clulas sanguneas por mm3 y cules seran las principales causas de un aumento y disminucin elevada de los diferentes tipos celulares? 7. Suponga que durante un anlisis rutinario usted encuentra que el tamao de los glbulos rojos de un paciente excede el tamao normal. Cules podran ser las causas de esta anormalidad?, del mismo modo considere el caso contrario y consulte las posibles causas de stas alteraciones de tamao. 8. Consulte, porqu es esencial un hemograma para el diagnstico diferencial de Dengue entre otras enfermedades febriles?. 9. Que tipo de clulas del tejido sanguneo son afectadas por la malaria, la babesiosis, cuales son los sntomas y porque en caso de la malaria los picos febriles son ms peridicos que para el caso de la babesiosis si los parsitos causantes de la enfermedad atacan a las mismas clulas.

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BIBILOGRAFIA

George A. MacDonal. Atlas de Hematologa. 2da edicin. Editorial Panamericana. 269 pp. 1988. IOVINE ENRIQUE, SELVA ALEJANDRO. El laboratorio en la clnica: Mtodo analtico, fisiopatolgico e interpretacin semiolgica. 2da edicin. Editorial Panamericana. Buenos Aires. Cap. 1; pp. 11 -19. 1979.

Docente. Alveiro Prez-Doria. Bilogo con nfasis en Biotecnologa. Magister en Microbiologa Tropical Grupo de Investigaciones Biomdicas. Universidad de Sucre. 2012

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