Tema 4

cidos nucleicos. Composicin, estructura general, localizacin y funciones biolgicas del

ADN y los distintos tipos de ARNs. El ADN: estructura primaria; estructura secundaria, conformaciones del ADN, desnaturalizacin y renaturalizacin. Organizacin del material gentico en procariotas y eucariotas. Concepto de gen, cromatina y cromosoma. Flujo de informacin biolgica.

ndice
1. CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO. ADN 1.1. Composicin del ADN. 1.2. Estructura del ADN. 1.3. Factores que estabilizan el ADN 1.4. Desnaturalizacin del ADN 2. ORDENAMIENTO DEL MATERIAL GENTICO. 2.1. Cromosomas clulas procariotas. 2.2. Cromosomas clulas eucariotas. 3. CIDO RIBONUCLEICO. ARN 3.1. Composicin y estructura del ARN. 3.2. Tipos de ARN 4. CONCEPTO DE GEN 5. FLUJO DE LA INFORMACIN BIOLGICA

Objetivos
Los objetivos del presenta tema son los de adentrarnos en el estudio de: La composicin, estructura y tipos ADN. El ordenamiento del material gentico en procariotas y eucariotas. La composicin, estructura y tipos ARN. Flujo informacin gentica.

Bibliografa
LEHNINGER, A.L., NELSON, D. K. & COX, M. M. Principios de Bioqumica. Cap 12 y 23. MATHEWS, C. K. & VAN HOLDE, K. E. Bioqumica. Cap. 4, 24 y 26 MCKEE T. y MCKEE J.R. Bioqumica. Cap. 17 y 18 VOET, D. & VOET, J.D. Bioqumica. Cap. 27, 28, 29 y 30

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1. CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO. ADN

Los cidos desoxirribonucleicos (ADN) son polmeros muy largos de nucletidos, que continenen miles de desoxirribonucletidos de cuatro clases diferentes (dAMP -desoxiadenilato, dGMP-desoxiguanilato, dTMP-desoxitimidilato y dCMP-desoxicitidilato) unidos segn una secuencia que es caracterstica para cada organismo. Consta de dos hebras. El cromosoma de las clulas procariotas (nico) es una gran molcula de ADN dispuesta de modo compacto en una zona nuclear o nucleoide. Las clulas eucariotas contienen molculas de ADN, cada una de las cuales es, en general, mucho ms grande que la molcula de ADN de las procariotas. En las eucariotas las molculas de ADN estn combinadas con protenas y se hallan organizadas en fibras de cromatina (este nombre procede de los primeros trabajos realizados por microscopia, en los el ADN nuclear tomaba color cuando se le tea) en el interior del ncleo, el cual est rodeado de un complejo sistema de doble membrana. Las funciones del ADN son: Almacenar informacin gentica (para la sntesis de ARN y protenas) Programar en el tiempo y el espacio la biosntesis ordenada de los componentes de la clula y los tejidos. Determinar las actividades de un organismo a lo largo de su ciclo vital. Definir la individualidad de un organismo dado. Los virus contienen ADN o ARN como material gentico. Los cidos nucleicos virales son pequeos en comparacin con los de las bacterias: codifican protenas vricas y los enzimas necesarios para la replicacin del virus en la clula husped.

1.1. Composicin del ADN

Vamos a empezar estudiando por la estructura primaria del ADN, es decir la estructura covalente del ADN.La composicin qumica del ADN se descubri en los aos 30 por Albrecht Kossel y Phoebus Levene. El ADN es un polmero de nucletidos. Cada nucletido presenta los tres componentes: Un azcar Una base nitrogenada (prica o pirimidnica) Un grupo fosfato Azcar. El azcar es cclico y de cinco tomos de carbono. Este azcar en el caso del ADN es la desoxirribosa.

HO CH2 O
4'

5'

OH
1'

H OH

H H

3'

2'

Desoxirribosa
Base nitrogenada. La base nitrogenada puede ser prica o pirimidnica segn derive de la purina o la pirimidina.

N7 HC
8 9

5 4

H C 6
2 3

H C HC 5 HC
6 4

N
2

N H

CH

N Purina

CH

N
1

Pirimidina

La base nitrogenada se encuentra unida al carbono 1' del azcar mediante un enlace N-glucosdico. Las bases que podemos encontrar en el ADN son la purinas de adenina A y guanina G Y las pirimidinas citosina C y timina T. En el caso del ARN no aparece timina pero si uracilo U.

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NH2 N HC N H N N CH N HC N H N

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O NH NH2

Adenina A

Guanina G

O H3C HC N H Timina T O NH HC HC

O NH N H O
HC HC

NH2 N N H Uracilo U O

Citosina C

Grupo fosfato. El grupo fosfato esta unido al carbono 5' del azcar por un enlace fosfoster. Este grupo fosfato a pH fisiolgico se encuentra cargado, por lo que es el responsable de la fuerte carga negativa de los nucletidos y los cidos nucleicos.Una base unida a un azcar se llama nuclesido, de este modo un nucletido es un nuclesido fosfato.

BASE OH 5' HO P O CH2 O O 1' O 4' H H H H

3' 2'

Enlace N-glucosdico

OH

Estructura de un mononucletido. Los tomos del anillo del azcar se encuentran numerados y se aade un ' para distinguirlos de la numeracin de la base nitrogenada.

Los sucesivos nucletidos estn unidos entre s por enlaces covalentes, a travs de puentes fosfatos. El grupo 5'-hidroxilo de la pentosa de un nucletido est unido al grupo 3'-hidroxilo del nucletido siguiente por un enlace fosfodister.
NH2 N HC N OH 5' HO P O CH2 O O 1' O 4' H H H H
3' 2'

O N HC N OH 5' HO P O CH2 O O 1' O 4' H H H H

3' 2'

N CH N

NH N NH2

OH

OH

2'-desoxiadenosina 5'-monofosfato (desoxiadenilato, dAMP)

2'-desoxiguanasina 5'-monofosfato (desoxiguanilato, dGMP)

NH2 HC HC N OH 5' HO P O CH2 O O 1' O 4' H H H H

3' 2'

O H3C HC N OH 5' HO P O CH2 O O 1' O 4' H H H H

3' 2'

N O

NH O

OH

OH

2'-desoxicitidina 5'-monofosfato (desoxicitidilato, dCMP)

2'-desoxitimidina 5'-monofosfato (desoxitimidilato, dTMP)

De este modo, el esqueleto covalente de los cidos nucleicos est constituido por grupos alternativos de fosfato y de pentosa, mientras que las bases caractersticas aparecen como grupos laterales unidos

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al esqueleto a intervalos regulares. Hay que indicar adems que es muy polar ya que los grupos fosfato son cidos, y a pH fisiolgicos se encuentran cargados negativamente. Por otro lado las bases pricas y pirimidnicas son relativamente insolubles en el agua, es decir son hidrofbicas como puede deducirse su estructura.
Extremo 5'

O -O P O O
5' CH 2 4'

BASE
Enlace N-glucosdico

O H H

O
1'

H
3'

H O

2'

Grupo fosfodister -O P O

O
5'

BASE
Enlace N-glucosdico

CH2
4'

O H H

O
1'

H
3'

H OH

2'

Extremo 3'

Estructura de un dinucletido, los enlaces del grupo fosfodister hay libertad de rotacin. El enlace N -glucosdico permite rotar libremente la base.

Extremo 5'

O
N HC N

NH2 N N CH

-O P O O
5' CH 2 4'

O H

O
1'

A
O N NH N NH2

H
3'

H O

2'

OH
HC N

Grupo fosfodister

-O P O O
5'

CH2
4'

O H

O
1'

H
3'

H O

2'

OH O
H3 C HC N NH O

Grupo fosfodister

-O P O O
5'

CH2
4'

O H

O
1'

H
3'

H O

2'

OH NH2
N N O

Grupo fosfodister

-O P O HC O
5'

HC

CH2
4'

O H

O
1'

H
3'

H OH

2'

Extremo 3'

OH

Estructura del esqueleto covalente del ADN, que muestra los puentes fosfodister uniendo sucesivas unidades nucleotdicas.

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Las cadenas de ADN tienen una polaridad o direccin especfica, ya que todos los enlaces fosfodister internucletidos tienen la misma orientacin a lo largo de la cadena. Debido a esta polaridad cada cadena lineal del cido nucleico tiene un extremo 5' terminal y un extremo 3' terminal. La secuencia de nucletidos de los cidos nucleicos pueden representarse esquemticamente, tan como ilustra el segmento de ADN de la figura, que contiene cinco unidades nucleotdicas.

Las bases se simbolizan con sus signos (A, T, C y G), cada desoxirribosa por una lnea vertical, y los grupos P. Los nmeros indican las posiciones en las unidades de desoxirribosa a las que estn unidos los grupos fosfatos.

La estructura del ADN se representa siempre con el extremo 5' terminal a la izquierda y el extremo 3' terminal a la derecha, es decir en direccin 5'3'. Dos representaciones ms sencillas del pentadesoxirribonucletido anterior son:

pApGpCpTpA pAGCTA
1.2. Estructura del ADN.
La estructura secundaria del ADN fue propuesta por Watson y Crick en 1953. Los datos de que partieron Watson y Crick para determinar la estructura del ADN fueron: Composicin del ADN, se sabia que el ADN estaba formado por fosfatos, desoxirribosa y bases pricas y pirimidnicas, unidas por diferentes enlaces que presentan posibles rotaciones. La proporcin de cada uno de estos componentes es 1:1:1 (azcar:ribosa:base). Caractersticas hidrofbicas-hidroflicas de los componentes del ADN. Las base pricas y pirimidnicas son hidrofbicas, mientras que la desoxirribosa y los grupos fosfatos son hidroflicos (en el caso de los grupos fosfato estn cargados a pH fisiolgico). Difraccin de Rayos X. En la figura podis ver el modelo de difraccin por rayos X de un cristal de ADN. Las manchas centrales en forma de cruz son indicativas de una estructura helicoidal. Las bandas densas que aparecen en la parte superior e inferior corresponden a las bases que se van repitiendo peridicamente, y que estn separadas 3,4. De estos estudios realizados por Rosalind Franklin y Maurice Wilkins demostr que la molcula era helicoidal y que las bases de los nucletidos estn . apiladas con los planos separados por una distancia de 3,4A

Fotografa de difraccin de rayos X de una fibra de ADN (forma B).

Anlisis qumico del contenido molar de las bases (conocido como composicin de bases) demostraba que la adenina, timina, guanina y citosina de las molculas del ADN aisladas de muchos organismos

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proporcionaron un dato importante de que [A] = [T] y [G] =[C], y a partir del cual sigui el siguiente corolario [A+G] = [T+C] o lo que es lo mismo [purinas]=[pirimidinas]. Estructura de las bases el estudio detenido de la estructura de las bases nos permite considerar que la A y T pueden interaccionar entre si, mientras que G y C lo hacen entre s. O NH2 NH2 O
N HC N H N N CH N HC N H N NH NH2

H3C HC N H

NH O

HC HC N H

N O

Adenina A

Guanina G

Timina T

Citosina C

El dimetro del interior de la hlice es de 10,85 que ajusta perfectamente a interacciones entre una purina y una pirimidina, y es demasiado pequea para interacciones entre purinas y demasiado grande para interacciones entre pirimidinas. Esta distancia indican que no es probable que se puedan dar interaccionar entre si A y G porque no encajaran en el interior de la doble hlice. Y de una manera similar la T y la C tampoco pueden interaccionar entre si a travs de puentes de hidrgeno porque se encontraran demasiado separados.

Dimensiones de los pares de ADN. Los pares de bases AT y GC tienen casi las mismas dimensiones y, por lo tanto, encajan adecuadamente en el centro de la doble hlice del ADN, Constituida por cadenas antiparaleas de polinucletidos. Entre AT se formas dos enlaces por puente de hidrgeno y entre GC se forman tres enlaces por puentes de hidrgeno.

La A podra entonces interaccionar con C y T, este emparejamiento estar restringido adems por los requerimientos de los puentes de hidrgeno. Los tomos de hidrgeno en las bases pricas y pirimidnicas tienen posiciones muy definidas. Esto determina que la A no puede emparejarse con la C porque habra dos hidrgenos muy prximos en una de las posicin de interaccin y ninguno en la otra. Mientras que con T puede llevar a la formacin de dos enlaces por puentes de hidrgeno. Algo similar ocurre entre la G y la T no se pueden emparejarse, mientras que la G puede llevar a la formacin de tres enlaces por puente de hidrgeno con la C.

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Modelo de un par de bases Adenina-Timina.

Modelo de un par de bases Adenina-Citosina.

Modelo de un par de bases Guanina-Citosina

Modelo de un par de bases Guanina-Timina.

Las distancias y orientaciones que se dan en el interior de la doble hlice son ptimas para que se produzca una fuerte interaccin entre las bases.

Modelo de una molcula de doble hlice de ADN indicado tres pares de bases.

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James Watson y Francis Crick combinaron los datos fsicos y qumicos con modelos tericos, y lo que siempre es necesario para un investigador una buena dosis de intuicin y desarrollaron su modelo: 1. Existen dos cadenas helicoidales de polinucletidos enrolladas a lo largo de un eje comn. Las cadenas corren en direcciones opuestas. Lo que estara de acuerdo con los datos obtenidos por difraccin de Rayos X, y en que se pudieran dar interacciones entre las bases nitrogenadas en el interior de la doble hlice. La doble hlice gira de izquierda a derecha.

Modelo esquemtico del ADN en la forma comn B. La estructura se repite a intervalos de 34 que corresponde a diez residuos en cada cadena.

2. Las bases de purina y pirimidina estn en el interior de la hlice, mientras que las unidades de fosfato y desoxirribosa estn en el exterior. Los planos que contienen las bases son perpendiculares al eje de la hlice. Los planos que contienen los azcares estn formando ngulos casi rectos con los de las bases. Lo que esta de acuerdo con los datos de difraccin de Rayos X y las caractersticas hidrofbicas y hidroflicas de los componentes del ADN.

Diagrama de una de las hebras de una doble hlice de ADN, vista por encima del eje de la hlice. Las bases (en este esquema son todas pirimidinas) estn en el interior, mientras que el esqueleto del azcar y fosfato est en el exterior.

3. El dimetro de la hlice es de 20 . Las bases adyacentes se encuentran separadas por 3,4 a lo largo del hlice y desplazadas por una rotacin de 36. Por lo tanto, la estructura helicoidal se repite cada 10 residuos; esto es, a intervalos de 34. Lo que coincide con los datos obtenidos por difraccin de Rayos X y las caractersticas de las bases nitrogenadas. Se pudo tambin deducir de la utilizacin de modelos moleculares. Adems es interesante resaltar que las dos hebras no son iguales en la secuencia de bases ni en su composicin, sino que son complementarias, porque donde en una se encuentra G es la otra se encuentra C, y en donde se encuentra A en la otra se encuentra T.

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Estructura del ADN-B.

4. Las dos cadenas permanecen unidas por puentes de hidrgeno entre los pares de bases. La adenina esta emparejada con la timina. La guanina est emparejada con la citosina. Lo que puede desprenderse del estudio de la estructura de las bases pricas y pirimidnicas. Lo que estara de acuerdo con los datos de Chargaff en los que la [A] = [T] y [C] = [G].

Modelos de los pares de bases de adenina-timina y guanina-citosina.

5. La relacin espacial que existe entre las hebras da lugar a que entre ellas aparezca una estra principal o surco mayor de 12 y una estra secundaria o surco menor de 6, esto es debido a que los enlaces glucosdicos entre los azcares y las bases de un par de bases no se encuentran directamente opuestos entre s (formado ngulos de 180), lo que provoca que existan dos surcos en la doble hlice.

Estos surcos diferentes de la hlice tienen adems un patrn de posibles interacciones diferente, el gran tamao del surco mayor lo hace ms accesible a las interacciones con protenas que reconocen secuencias especficas ADN, que son las responsables de la regulacin de la expresin gnica. 6. La secuencia de bases a lo largo de la cadena del polinucletido no est restringida en modo alguno. La secuencia precisa de bases transporta la informacin gentica . Este ltimo apartado merece un comentario especial, las molculas de ADN son muy largas y contienen secuencias especficas de las cuatro bases principales A, T, G y C que permite de una manera similar a la informacin almacenada en un byte (8 bits) codificar la informacin gentica. Se dice que la secuencia de bases del ADN constituye el patrn para la replicacin del ADN.

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Veremos ms adelante como a partir de cdigos de tres bases podemos almacenar la informacin para la codificacin de la sntesis correcta de protenas.

1.2.1. Diferentes estructuras del ADN

Hasta ahora tan solo hemos hablado de un tipo de estructura del ADN, pero existen otras posibles estructuras tridimensionales del ADN. Dependiendo de la composicin de las bases, el ADN puede adoptar distintas conformaciones bajo diferentes condiciones fsicas. En todas estas conformaciones se verifican las mismas reglas de apareamiento de bases y esos cambios no alteran la informacin contenida en el ADN. No obstante, los cambios de forma del ADN pueden actuar en la regulacin de la expresin gnica, ya que estos cambios conformacionales pueden afectar a la unin a protenas al ADN, y esta unin es esencial para la regulacin. Las conformaciones del ADN se han determinado mediante estudios de difraccin de rayos X de cristales de molculas de ADN de secuencia conocida. Las caractersticas principales de varias conformaciones del ADN se recogen en la siguiente tabla:
Propiedad Giro de la hlice Unidad repetida Rotacin por par de bases Pares de bases por vuelta Inclinacin de un par de bases respecto al eje Avance por par de bases a lo largo del eje de la hlice Paso de hlice Dimetro Conformacin enlace glucosdico A-ADN Dextro 1 par de bases 32,7 11 19 2,3A 24,6A 25,5A Anti B-ADN Dextro 1 par de bases 34,6 10,4 1,2 3,3A 34A 23,7A Anti Z-ADN Levo 2 pares de bases 30 12 9 3,8A 45,6A 18,4A Anti en el C Sin en el G

La conformacin ms comn (y la descubierta por Watson y Crick) es la denominada B-ADN, cuya hlice presenta las siguientes caractersticas:
La hlice completa una vuelta cada 10,4 pares de bases aproximadamente. Una vuelta de hlice cubre una distancia de 34; por tanto, cada par de bases incrementa la longitud de la hlice en 3,4. Los nucletidos adyacentes en cada cadena estn desfasados en 34,6 uno con respecto al otro. El dimetro de la doble hlice es de 23,7.

Cuando se deshidratan los cristales de B-ADN, o cuando se disminuye el contenido en sales del cristal, la molcula fina del B-ADN se transforma en una molcula corta y gruesa conocida como A-ADN. A diferencia de B-ADN en los que los pares de bases estn apilados paralelamente, en el A-ADN los pares de bases se encuentran desplazados hacia el saliente mayor de cada par de bases. El surco mayor se hace ms profundo y ms estrecho, mientras que el surco menor se hace superficial y ancho. El paso de hlice disminuye de 34 a 24,6 por vuelta, y el nmero de pares de bases por vuelta aumenta de 10,4 a aproximadamente 11. Sin embargo en condiciones fisiolgicas no se encuentra el A-ADN.

Estructura de A-ADN, B-ADN y Z-ADN.

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Tanto en el A-ADN como en el B-ADN el grupo azcar y la base se encuentran en lados opuestos respecto al enlace glucosdico o en conformacin anti, en la que la repulsin estrica entre dichos grupos es mnima. Sin embargo, en presencia de altas concentraciones de cationes, algunos nucletidos sufren una rotacin y adoptan conformaciones sin en las cuales el azcar y la base se encuentran en el lado del enlace glucosdico. En estas condiciones puede darse una conformacin del ADN sorprendentemente diferente. En una cadena de nucletidos CG alternantes la conformacin del enlace glucosdico ms probable de cada G es sin, mientras que la C es anti. En consecuencia, la cadena recorre en zigzag las conformaciones anti y sin, resultando en el Z-ADN (Z de zig-zag). El Z-ADN es ms largo y ms estrecho que B-ADN, de forma que presenta 12 pares de bases por vuelta y una vuelta de hlice de 45,6 frente a los 34 del B-ADN. El dimetro de la hlice del Z-ADN es de 18,4 mientras que el BADN es de 23,7. El surco mayor del B-ADN pasa a ser el Z-ADN una superficie convexa y no un surco, mientras que el surco menor se convierte en una hendidura profunda que gira alrededor de la estructura.

Conformacin anti y sin de los enlaces glucosdicos del desoxiguanilato y desoxicitidinato.

Z-ADN levgiro. Los enlaces glucosdicos de las guanosinas tienen una conformacin sin, mientras que las citosinas presentan una conformacin anti.

En las clulas la mayor parte del ADN se encuentra en la conformacin B, aunque las regiones ricas en pares de bases GC pueden adoptar la conformacin Z. Ya que la superficie de la regin del ADN en la conformacin B es muy distinta de la correspondiente a la conformacin Z, la actividad de las protenas reguladoras que interaccionan con el ADN puede resultar afectada.

1.3. Factores que estabilizan el ADN

Las fuerzas responsables de las conformaciones nativas de las estructuras complejas celulares, como los cidos nucleicos, las protenas y las membranas, son siempre las mismas. Estas fuerzas son lo suficientemente importantes para mantener la integridad estructural, pero lo suficientemente dbiles para permitir una flexibilidad conformacional. Como ya sabemos esta fuerzas son enlace puentes de hidrgeno, fuerzas hidrofbicas, enlace salinos, fuerzas de Van der Waals, son las que determinan los plegamientos de las estructuras biolgicas. Podemos distinguir cuatro factores principales que contribuyen a la estabilidad del ADN.

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1. Los efectos hidrofbicos estabilizan los apareamientos de las bases. Los anillos hidrofbicos de la purina y pirimidina de las bases son empujados haca el centro de la doble hlice en virtud de la elevada cohesin interna de las molculas de agua, mientras que los sustituyentes hidrofbicos de las bases se encuentran expuestos al disolvente en los surcos. 2. Las bases apiladas forman contactos de Van der Waals. Los partes de bases se encuentran, apilados unos sobre otros, a lo largo del eje central de la doble hlice. La altura por vuelta de la hlice en el B-ADN es igual al espesor de los anillos de purina y pirimidina; por tanto, los anillos forman contactos de Van der Waals. Las fuerzas de Van der Waals entre las bases apiladas son dbiles pero aditivas, de forma que en una molcula que contenga ms de 10.000 pares de bases las fuerzas de Van der Waals suponen una importante fuente de estabilidad. 3. Los pares de bases estn unidos mediante enlaces por puente de hidrgeno. El par de bases GC es ms estable que el par AT por contener un enlace por puente de hidrgeno ms. 4. El esqueleto del ADN interacciona con cationes. El esqueleto del ADN, de tipo fosfodister, tienen carcter cido, y a pH 7,4 presenta una gran carga negativa. La repulsin electroesttica entre los grupos fosfodister negativos es una fuente potencial de inestabilidad de la doble hlice; sin embargo, los cationes celulares, en particular el Mg2+, se unen fuertemente al esqueleto fosfodister del ADN, estabilizando la doble hlice.

1.4. Desnaturalizacin del ADN

La doble hlice del ADN se desenrolla localmente durante procesos tales como la replicacin del ADN, la transcripcin del ARN y la recombinacin gnica. El desenrollamiento completo del ADN puede ocurrir in vitro y se denomina desnaturalizacin. La desnaturalizacin tienen lugar cuando el ADN se somete a pHs extremos o temperaturas superiores a los 80-90C (estas acciones actan sobre las fuerzas dbiles que mantienen la estructura tridimensional del ADN, que son similares a las de las protenas). Este fenmeno se puede seguir por diferentes vas, ya que la prdida de la estructura tridimensional del ADN, se ve acompaada de cambios en las propiedades fsicas del mismo. Una manera de seguirlo es espectroscpicamente midiendo la variacin de la absorcin de la luz ultravioleta por el ADN. El ADN presenta un mximo de absorcin de luz UV a 260 nm. Cuando el ADN se desenrolla las bases desapareadas y no apiladas absorben a 260 nm un 37% ms que cuando se encuentran formando parte de la doble hlice. Si representamos la variacin de la absorcin frente a la temperatura de una muestra de ADN calentada, se denomina curva de fusin del ADN.

1,3

Valor relativo A260

Separacin de las hebras

1,2

1,1

1,0 30 50 70

Tm 90

130

Temperatura C

Curva de desnaturalizacin trmica del ADN. La temperatura a la cual el ADN se encuentra semidesenrollado se denomina temperatura de fusin (Tm) del ADN y viene dada por el punto de inflexin de la curva sigmoidea.

La forma sigmoidea de la curva indica que las interacciones entre los pares de bases unidos mediante enlaces de hidrgeno y apilados son cooperativos. Estas interacciones cooperativas se distorsionan progresivamente durante la fusin hasta que las dos hebras se separan completamente, y a partir de entonces no se observa ningn cambio ulterior a la absorcin. La temperatura a la cual el ADN se encuentra semidesenrollado se llama temperatura de fusin, Tm del ADN. La temperatura de fusin se encuentra determinada por la composicin de las bases del ADN. Ya que si tenemos que AT forman dos enlaces por puente de hidrgeno, mientras que GC forman tres puentes de hidrgeno, lo que quiere decir que estas ltimas requieren ms energa para separar las bases.

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Una vez separadas las dos hebras se pueden renaturalizar. Si una muestra de ADN fundido se enfra lentamente, la absorcin de la disolucin disminuye indicando que las hebras complementarias de ADN se han apareado de nuevo. El templado tiene lugar a cualquier temperatura por debajo de la temperatura de fusin Tm, pero es caractersticamente ms rpida 20 C por debajo de Tm. El proceso de templado requiere que la muestra de ADN fundida sea enfriada lentamente, si se enfra rpidamente, las cadenas polinucleotdicas se funden en masas enmaraadas y la renaturalizacin es mucho ms lenta.

1,4

Poli(AT)

Valor relativo A 260

1,3

1,2

DNA nativo AT y GC

1,1

1,0 30 50 70 90

Poli(GC)

Temperatura C

Curva de desnaturalizacin trmica del ADN. Diferencias segn la composicin de las bases nitrogenadas.

Etapas en la desnaturalizacin reversible del ADN y en su renaturalizacin.

La renaturalizacin es ms rpida cuanto mayor sea el nmero de pares de bases que persistan unidos entre las dos cadenas. Aun en el caso de una separacin total de las dos hebras puede ocurrir la renaturalizacin, pero este proceso ser ms lento, ya que las hebras debern alinearse previamente de forma adecuada; teniendo en cuenta que slo una de las alineaciones es la correcta, la velocidad inicial de renaturalizacin ser lenta.

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2. ORDENAMIENTO DEL MATERIAL GENTICO.

2.1. Cromosomas clulas procariotas.
Los experimentos genticos y la microscopia electrnica han demostrado que una clula de Escherichia Coli contiene una sola molcula de ADN muy grande, en forma de duplex circular cerrado covalentemente, cuyo peso molecular es de unos 2.600 millones de daltons. Consta aproximadamente de 4 millones de pares de bases y la longitud de su contorno es de unos 1,4 mm, que es 700 veces mayor que la longitud de una clula E. coli que es de 2 m.

El esquema muestra los tamaos relativos de E. coli y de su molcula de ADN, dibujadas en la misma escala excepto para la anchura de la molcula de ADN, que esta aumentada aproximadamente un milln de veces.

Esto pone de manifiesto que la molcula de ADN debe de estar estrechamente plegada o enrollada, ya que se encuentra localiza en la zona nuclear de las clulas de E. coli. El ADN de las clulas bacterianas parece estar unido a uno o ms puntos de la superficie interna de la membrana celular.

Las clulas de E. coli con su ADN unido a un colorante fluorescente.

El ADN se encuentra superenrollado, las molculas de ADN de procariotas y de la mayora de virus son circulares.

Crculo covalentemente cerrado.

La mayor parte de los crculos covalentemente cerrados estn enroscados, como puede observarse en la figura, se dice que estos crculos son superhelicoidales o superenrollados.

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Los extremos de una hlice lineal de ADN se pueden unir de forma que cada una de las hebras sea continua. Si al hacer esto uno de los extremos se gira 360 con respecto al otro para producir algn desenrollamiento de la doble hlice y posteriormente se unen, el crculo covalente que resulta, si los puentes de hidrgeno se vuelven a formar, se enroscar en sentido opuesto con el fin de aligerar la tensin originando un crculo retorcido. Este tipo de molcula tendr forma de 8 (es decir tendr un punto de entrecruzamiento). Si uno de los extremos se gira 720 antes de la unin ala molcula superhelicidal resultante tendra dos puntos de entrecruzamiento. La razn para que se produzca este enrollamiento en la siguiente. Si la hlice se desenrolla 720 se tienen que romper 20 pares de bases (puesto que la molcula lineal posee 10 pares de bases por vuelta de la hlice). Sin embargo, la molcula de ADN es tan propensa a mantener una estructura helicoidal dextrgira (positiva) con 10 pares de bases por vuelta que se deformar as misma de forma que el subenroscado se vuelve a enroscar y se compensa por un enrollamiento negativo del crculo (levgiro). De forma similar, si la rotacin inicial se produce en el sentido de superenrollamiento, el crculo se retorcer en sentido opuesto; esto se conoce como una superhlice positiva.

ADN circular y ADN superenrollado del fago PM2.

Distintos estados de un crculo covalente.

Todas las molculas de ADN superhelicoidales que se encuentran en la naturaleza estn inicialmente subenrolladas formando, por tanto, superhlices negativas. Es ms, el grado de retorcimiento, es decir, la densidad de superenrollamiento es aproximadamente la misma para todas las molculas; se produce una torsin negativa por cada 200 pares de bases o 0,05 torsiones por cada vuelta de hlice.

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En las bacterias el subenroscado del ADN superhelicoidal no se debe a un desenroscado previo a la unin de los extremos sino que se introduce en los crculos preexistentes por un enzima llamado ADN girasa.

Micrografa electrnica del cromosoma de E. coli ligado a dos fragmentos de una sustancia proteica que puede ser la membrana celular. El ADN se encuentra intacto y superenrollado, tal como se puede comprobar en las fotografas muy ampliadas.

Cuando se asla el ADN de E. coli mediante una tcnica que evita tanto la rotura de la molcula como la desnaturalizacin de las protenas, se obtienen una estructura altamente compacta llamada cromosoma bacteriano o nucleide. Esta estructura esta formada por protena y una sola molcula de ADN superenrollado. Se puede encontrar algo de ARN, pero se cree que no es parte del cromosoma bacteriano, y que se produce durante el proceso de aislamiento. En la micrografa electrnica del cromosoma de E. coli, la caracterstica especial de la estructura es que el ADN est en forma de bucles que estn superenrollados y que emergen de una estructura proteica densa, a veces denominada andamio.

Dibujo esquemtico del cromosoma de E. coli superenrollado y altamente plegado mostrado solamente 15 de los 46 bucles unidos al andamio. Micrografa del cromosoma de E. coli.

Se ha podido deducir de estudios en los que se tratan las muestra con detergentes que rompan interacciones protena-protena o agentes que degraden las protenas, que el cromosoma se encuentra en esta forma tan compacta gracias a que se producen diversas uniones de las regiones del ADN al andamio. Se ha podido deducir que el nmero de uniones entre el ADN y el andamio es de 4510 y que cada una de ellas evita la rotacin libre. Por lo que habra alrededor de 45 bucles superenrollados.

2.2. Cromosomas clulas eucariotas.

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El ADN de todos los organismos eucariotas est organizado en unidades morfolgicamente diferentes llamadas cromosomas.

Cromosomas humanos de una clula en estado de metafase. Cada cromosoma se separa parcialmente a lo largo de su eje mayor antes de la separacin de los dos cromosomas hijos. El estrechamiento es el lugar de unin del huso mitnico.

Cada uno de los cromosomas contiene una molcula enorme de ADN. Por ejemplo, la molcula de ADN de un solo cromosoma de la mosca del vinagre, Drosophila, tienen un peso molecular superior a 1010 y una longitud de 1,2 cm. Un cromosoma es mucho ms compacto que una molcula de ADN, de hecho, una molcula de ADN no puede plegarse espontneamente para formar una estructura tan compacta porque la molcula tendra una gran tensin. Esta estructura tan compacta se forma mediante una serie de plegamientos distintos en los que participan una o ms molculas proteicas. El ADN de un cromosoma de eucariotas est unido a unas protenas bsicas llamadas histonas. El complejo formado por el ADN y las histonas se conoce como cromatina. Existen cinco tipos mayoritarios de histonas , H1, H2A, H2B, H3 y H4- cuyas propiedades estn relacionadas en la tabla: Tipo H1 H2A H2B H3 H4 Razn Lys/Arg 20,0 1,25 2,5 0,72 0,79 Localizacin Espaciador Partcula ncleo Partcula ncleo Partcula ncleo Partcula ncleo

Las histonas presentan una composicin de aminocidos poco frecuente en cuanto que son muy ricas en aminocidos cargados positivamente, lisina y arginina. La relacin entre Lys/Arg vara en los diferentes tipos de histonas. Esta carga positiva de las histonas les permite unirse a los grupos fosfato del ADN cargados negativamente, a travs de enlaces salino. Las histonas de diferentes organismos son muy similares con excepcin de H1. La estructura de la cromatina cambia durante el ciclo de crecimiento celular. En una clula en reposo la cromatina esta dispersa y ocupa totalmente el ncleo. Despus de tener lugar la replicacin del ADN, la cromatina se condensa unas 100 veces formando los cromosomas. Los cromosomas se han aislado, disociado gradualmente y se han observado por microscopia electrnica los diferentes grados de disociacin. La unidad estructural ms elemental consiste en una fibra de 10 nm de ancho que se parece a un collar de cuentas.

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Fotografa al microscopio electrnico de la cromatina. Las partculas se asemejan a las cuentas de un collar tienen un dimetro de 100

En la siguiente figura podemos observar la jerarqua estructural de un cromosoma deducida a partir de diferentes estudios. A pesar que se dispone de informacin sobre las cuentas, cada una de las cuales es un agregado de ADN e histonas, la estructura de los cromosomas es todava algo especulativa.

Diferentes estado de conformacin e ADNLas partculas que estn formando cuentas se conocen con el nombre de nucleosomas. Cada nucleosoma consta de una molcula de histonas H1, de dos molculas de cada una de las histonas H2A, H2B, H3 y H4 y de un fragmento de ADN. La estructura de estos nucleosomas esta formada por una partcula ncleo que contiene un disco proteico octamrico que consta de dos copias de cada una de las histonas H2A, H2B, H3 y H4 , y alrededor del cual se enrolla como una cinta el segmento de 140 pares de b ases; luego un segmento de 60 bases se enlaza a las partculas del ncleo adyacente (este segmento se conoce con el nombre de ADN de conexin) y una molcula de H1. La H1 se une al octmero de histonas y al ADN de conexin, haciendo que el ADN se extienda hacia ambos lados de la partcula ncleo se cruce y acerque al octmero, aunque parte del ADN de conexin no llegue a estar en contacto con ninguna de las histonas.

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Diagrama de la partcula ncleo de un cromosoma. La molcula del ADN esta enrollada una vuelta y 3/4 alrededor del octmero de histonas (2 molculas de cada una de las histonas H2A, H2B, H3 y H4)

La unin del ADN e histonas constituye el primer paso para el acortamiento de la cadena de ADN de un cromosoma, es decir la reduccin de unas siete veces la longitud del ADN y la formacin de una fibra de cuentas flexible de 110, unas cinco veces la anchura del ADN libre. Se ha estudiado la unin del ADN a las histonas. Alrededor del 80% de los aminocidos componentes de las histonas se encuentran en regiones de la hlice estable gracias a la atraccin electrosttica que se produce entre las cargas positivas de las lisinas y argininas de las histonas y las cargas negativas de los grupos fosfato del ADN. El contenido de ADN de los nucleosomas vara de un organismo a otro oscilando entre 150 y 240 pares de bases por unidad. Las partculas ncleo de todos los organismos tienen el mismo contenido en ADN (140 pares de bases por unidad), de forma que la variacin observada se debe a los diferentes tamaos del ADN que conecta los nucleosomas (entre 10 y 140 pares de nucletidos). Se conoce muy poco acerca del la estructura del ADN de conexin, y sobre si tiene una funcin especial, as mismo se desconoce la causa de la variacin de su longitud. Para formar un cromosoma compacto la molcula de ADN se pliega y repliega de varias formas. El segundo nivel de plegamiento consiste en el acotamiento de la fibra de 110 para formar una super espiral selenoidal con seis nucleosomas por vuelta, conocida como fibra de 30 nm.

Modelo selenoidal de la cromatina. Una vuelta de la hlice est formada por 6 nucleosomas. La doble hlice de ADN est enrollada alrededor de cada nucleosoma.

Esta estructura ha sido aislada y bien caracterizada. Los restantes niveles de organizacinplegamiento de la fibra de 30 nm y posterior plegamiento de la fibra plegada no se conocen tan bien. Las micrografas electrnicas de cromosomas aislados durante la metafase, de los que se han eliminado las histonas, indican que el ADN parcialmente desplegado presenta un gran nmero de bucles que parece se extienden a partir de un ncleo central o andamiaje compuesto por protenas cromosomales diferentes de las histonas como vimos en el cromosoma de E. coli.

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3. CIDO RIBONUCLEICO. ARN

Los cidos ribonucleicos son polmeros lineales de ribonucletidos de cadena sencilla (pesos moleculares menores). Son mucho ms cortos que los DNAs, pero tambin mucho ms abundantes (de un mismo ARN se pueden encontrar muchas copias).

3.1. Composicin y estructura del ARN.

El esqueleto covalente del ARN consiste en un polmero lineal de unidades de ribonucletidos unidos mediante enlaces fosfodister 5'3'. En este aspecto es idntico al ADN, pero el ARN se diferencia estructuralmente del ADN en tres pntos importantes: 1. El azcar del ARN es la ribosa y no la 2'-desoxiribosa.

HO CH2 O
4'

5'

OH
1'

HO CH2 O
4'

5'

OH
1'

H OH

H H

H OH

3'

2'

3'

2'

OH

Desoxirribosa

Ribosa

2. La timina se sustituye por uracilo en lo referente a las bases nitrogenadas. La timina posee un grupo metilo en el C-5, mientras que en el uracilo se sustituye por un H. Las otras bases son comunes al ADN, adenina, guanina y citosina.

NH2 N HC N H N N CH N HC N H

O NH N NH2

Adenina A O HC HC N H Uracilo U O NH

Guanina G NH2 HC HC N H Citosina C N O

3. Las molculas de ARN son generalmente monocatenarias . Sin embargo, en la nica cadena de ARN el apareamiento de bases de Watson-Crick puede ocurrir entre la adenina y el uracilo y entre la guanina y la citosina, y resultar en toda clase de estructuras secundarias, entre las que cabe citar las estructuras de bucle y en horquilla que participan en el reconocimiento del ARN por protenas.

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O -O P O O
5' CH 4' 2

NH2 N HC N N N CH

O H

O
1'

A
O N NH N NH2

H
3'

H O

2'

OH
HC N

-O P O O
5'

CH2
4'

O H

O
1'

H
3'

H O

2'

OH O
NH N O HC

-O P O HC O
5'

CH2
4'

O H

O
1'

H
3'

H O

U
N N O

2'

OH NH2

-O P O HC O
5'

HC

CH2
4'

O H

O
1'

H
3'

H OH

2'

OH

Estructura covalente de una cadena ARN.

Algunas molculas de ARN son bicatenarias y su conformacin es anloga a la del A-ADN. En este sentido, la doble hlice de ARN completa una vuelta cada 11 pares de bases; los pares de bases se encuentran inclinados lejos del eje central de la hlice, de forma que permite la solvatacin de los grupos hidroxilos de C-2' de los azcares. La existencia de una hlice doble de ARN similar al B-ADN no es posible debido a que los grupos 2'-hidroxilo no se encontraran solvatos. Estructuras helicoidales bicatenarias en las que una cadena es ADN y la otra ARN existen en las clulas en varios momentos. Por ejemplo, en la transcripcin se forma una molcula de ARN, copia de una cadena de ADN en una reaccin catalizada por la ARN polimerasa, de forma que la molcula de ARN sintetizada es complementaria a la de ADN y, por tanto, durante el proceso de elongacin se forma un pequeo hbrido gracias al apareamiento entre dA y U, la dT y la A, la dC y la G y la dC y la C. Durante el estudio mediante difraccin con rayos X de hbridos sintticos grandes de ARN y ADN se observ que adoptaban la conformacin comn al ARN y al ADN, es decir conformacin conocida como A.

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Estructura molecular del tARN. Las molculas de tARN contienen zonas bicatenarias en las que se producen por apareamientos intramoleculares de bases de acuerdo con las normas de Watson-Crick.

El cambio de 2'desoxirribosa en el ADN por la ribosa en el ARN pude parecer insignificante y, sin embargo, afecta en gran medida a las propiedades del ARN. El grupo 2'-hidroxilo: 1. Impide a las molculas de ARN la adopcin de la conformacin B. 2. Permite que en las molculas de ARN ocurra un nmero mayor de interaccione terciarias. 3. Promueve la reactividad qumica. De hecho, las molculas de ARN son componentes imprescindibles en muchos procesos enzimticos. Aunque en la mayora de estas reacciones el ARN tiene una funcin estructural. Un ejemplo que ilustra la importacia del grupo 2'-hidroxilo es el comportamiento del ARN frente a las disoluciones alcalinas. En este sentido, el tratamiento del ARN con un lcali 0,1M a 25C produce, al cabo de pocas horas una mezcla de nuclesidos 2' y 3' monofosfato. Sin embargo, el ADN bajo estas mismas condiciones es bastante estable.

3.2. Tipos de ARN

Tanto en las clulas procariotas como eucariotas existen tres tipos principales de ARN, que difieren tanto en la localizacin celular como en la funcin (todos se sintetizan en el ncleo no obstante). ARNs mensajeros - mARN. Actan como mtriz utilizada por los ribosomas para la sntesis de protenas. El mARN transporta la informacin gentica del ADN a los ribosomas, donde se utiliza de molde para la sntesis de protenas. La secuencia de ribonucletidos del mARN es complementaria al mensaje gentico contenido en un segmento X de ADN. En una clula eucariota pueden existir ms de 10.000 molculas de mARN distintas, cada una de las cuales codifica una protena (cadena polipeptdica). ARNs ribosmicos - sARN. Son una parte constitutiva de los ribosomas. Constituyen aproximadamente el 75% del ARN celular total. En los ribosomas de procariotas hay tres clases distintas de sARN, mientras que en los ribosomas de eucariotas existen cuatro clases distintas de sARN. ARNs de transferencia - tARN. Son molculas de ARN relativamente pequeas y contienen entre 70 y 95 ribonucletidos y su peso molecular oscila entre 23.000 y 30.000 daltons. Su actuacin es citoslica y su funcin es la de transportar los residuos de aminocidos al ribosoma y colocarlos de alguna manera en su lugar durante el proceso de sntesis de protenas. Cada uno de los aminocidos presentes en la protenas tienen uno o ms tARNs especficos. En las clulas eucariotas (en el ncleo) hay dos clase adicionales de ARNs. ARNs nucleares heterogneos - hnARNs. Son hnARNs son molculas grandes de ARN que se hallan en el ncleo y son las precursoras de los mARN. ARNs nucelares pequeos - snARN. Loa snARN se encuentran tambin en el ncleo, y juegan un papel importante en la sntesis y elaboracin del mARN.

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4. CONCEPTO DE GEN
Los genes son segmentos de ADN que codifican cadenas de ARN y protenas. Pero la definicin inicial de gen fue:
Un gen es aquella parte de un cromosoma que determina o afecta a un solo carcter o fenotipo (propiedad visible), como por ejemplo el color de los ojos

En los aos 40 se modifica esta definicin:

Gen es un segmento de material gentico que determina o codifica para un enzima: se establece la hiptesis de un gen-un enzima.

Ms tarde se amplia este concepto refirindose un gen-un protena. La definicin actual de gen es ms precisa:
Los genes son segmentos de ADN que codifican cadenas polipeptdicas y ARN.

As las secuencias de ADN contienen la informacin para codificar las diferentes cadenas polipeptdicas de las protenas (recordar que hay protenas con ms de una cadena polipeptdica hemoglobina). Adems el ADN contiene la informacin para la sntesis de de diferentes clases de ARN, como tARN y rARN, los genes que codifican para polipptidos o ARN se conocen como genes estructurales. Pero en la secuencia de ADN tambin encontramos otros segmentos o secuencias que tienen una funcin puramente reguladora, a estas secuencias de las conoce como secuencias reguladoras. Las secuencias reguladoras contienen seales que permiten identificar el principio y el final de los genes estructurales, participar en la activacin o desactivacin de la trascripcin de los genes estructurales o funcionar como puntos de inicio de la replicacin o de la recombinacin.

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5. FLUJO DE LA INFORMACIN BIOLGICA

La expresin gentica se logra mediante la transferencia de la informacin gentica del ADN a molculas de ARN, proceso conocido como transcripcin, y posteriormente desde el ARN a molculas de protenas, proceso llamado traduccin. Las molculas de ARN se sintetizan utilizando como molde la secuencia de bases de una de las hebras del ADN en una reaccin de polimerizacin catalizada por enzimas llamadas ARN polimerasas dependientes de ADN o simplemente ARN polimerasas. El proceso por el que se inicia, alarga y termina la sntesis de molculas el ARN se llama transcripcin.
PRODUCTO DNA
Secuencia Exn 1 Intrn Exn 2 Intrn Exn 3 regulatoria

PROCESO Transcripcin

RNA primario RNA mensajero Protena Protena madura

AUG Parada

Procesamiento RNA Traduccin

N CHO N P CHO

C C

Procesamiento protena

Debemos entonces que tener en cuenta dos aspectos: el problema de la informacin o codificador y el problema qumico. El problema de la informacin es el mecanismo por el cual una secuencia de bases de una molcula de ADN se traduce en una secuencia de aminocidos de una cadena polipeptdica. El problema qumico se refiere al proceso efectivo de la sntesis de la protena, el proceso de iniciacin de la sntesis, la unin de los aminocidos en el orden correcto, la terminacin de la cadena, la liberacin de la cadena y, a menudo, las modificaciones que tienen lugar posteriormente sobre las cadenas recin sintetizadas. El proceso completo se denomina traduccin. La sntesis de protenas se realiza en unos orgnulos intracelulares llamados ribosomas. Estos orgnulos, que en procariotas constan de tres molculas de ARN y unas 55 protenas diferentes, comprende la maquinaria necesaria para formar un enlace peptdico entre aminocidos, un lugar de unin del mARN y lugares para la entrada y almacenamiento de los aminocidos en preparacin para su ensamblaje en las cadenas polipeptdicas terminadas.

En la figura se muestra un esquema de las acciones que tienen lugar en el ribosoma. Este esquema se puede aplicar por igual a procariotas y a eucariotas, con una sola excepcin. En eucariotas, como la transcripcin se produce en el ncleo y la sntesis de protenas en el citoplasma, el mARN no est unido al ADN durante la sntesis de protenas, en contraste con lo que se muestra en la figura.

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Los aminocidos por s mismos son incapaces de interaccionar con los ribosomas y no pueden reconocer las bases del mARN. Para esto existen el conjunto de molculas transportadoras menciandas anteriormente, los ARN de transferencia (tARN). Estas molculas poseen un lugar para la unin de los aminocidos y una regin llamada anticodn que reconoce una secuencia de bases apropiada, el codn, en el mARN. Por tanto, la seleccin de las molculas de tARN, a su vez est determinada por la unin mediante puentes de hidrgeno entre el anticodn de cada una de las molculas de tARN y el codn correspondiente del mARN.

Es claro que deben existir muchas molculas de tARN diferentes porque cada aminocido tienen que entrar en el ribosoma de forma que se asegure su correspondencia con la secuencia de bases de mARN. Por tanto, cada aminocido tiene sus correspondientes molculas de tARN especficas. Es ms, la unin de cada aminocido a su molcula de tARN est catalizada por un enzima especfico que asegura la unin del aminocido apropiado con la molcula de tARN correcta. La secuencia de cada uno de los codones se determin a partir de experimentos de sntesis de protenas in vitro en las que se usaron mARN sintticos de secuencias conocidas; por ejemplo, cuando se utiliz cido poliuridlico como mARN, se sintetiz una polifenilalanina, indicando que el triplete UUU es el codn para la fenilalanina. La utilizacin de una cadena de poli(U) terminada en guanina en el extremo 3' produjo polifenilalanina con una leucina en el extremo carboxilico, por lo que UUG corresponde a un codn de leucina. Con stos y otros experimentos se identificaron todos los codones.

La cantidad de protenas que produce un gen activo por unidad de tiempo vara de un gen a otro para poder satisfacer las necesidades de la clula y algunas veces para evitar tambin la sntesis excesiva. La velocidad de sntesis depende principalmente de la eficiencia en el reconocimiento de un promotor por la ARN polimerasa o de la iniciacin de la traduccin . Sin embargo, tambin existen otros mecanismos de regulacin del flujo. Por ejemplo, muchos de los productos gnicos son slo necesarios ocasionalmente, por lo que existen mecanismos de regulacin del tipo conexin-desconexin que hacen que dichos productos slo estn presentes cuando son requeridos por las condiciones externas. Unos sistemas de regulacin ms sofisticados pueden ajustar la concentracin intracelular de una protena determinada como repuesta a las necesidades impuestas por el medio ambiente. En general, la sntesis de determinados productos genticos est controlada por mecanismos que en conjunto se llaman regulacin gentica.

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